JP3504963B2

JP3504963B2 - 抗ヒト高親和性ＩｇＥ受容体モノクローナル抗体に係るアミノ酸配列をコードするＤＮＡ断片

Info

Publication number: JP3504963B2
Application number: JP26479293A
Authority: JP
Inventors: 智靖羅; 康奥村; 敏朗高井; 恵士佐藤; 一郎渋谷
Original assignee: Asahi Breweries Ltd; Nikka Whiskey Distilling Co Ltd; Torii Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Asahi Breweries Ltd; Nikka Whiskey Distilling Co Ltd; Torii Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 1993-10-22
Filing date: 1993-10-22
Publication date: 2004-03-08
Anticipated expiration: 2019-03-08
Also published as: JPH07165799A

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、ヒトの高親和性ＩｇＥ
受容体（以下ＦｃεＲＩと称することもある）を特異的
に認識することができるアミノ酸配列を有するポリペプ
チド及びこれをコードする塩基配列を有するＤＮＡ断片
に関する。

【０００２】

【従来の技術、及び発明が解決しようとする課題】従
来、Ｉ型アレルギーの治療には、ステロイドをはじめと
した抗炎症剤が広く用いられているが、その非特異性故
に副作用の問題があり、そのため、Ｉ型アレルギーの特
異的な治療法が検討されている。

【０００３】ここで、肥満細胞、好塩基球の細胞膜上に
発現する高親和性ＩｇＥ受容体（ＦｃεＲＩ）は、Ｉ型
アレルギー反応効果相においてこれらの細胞の活性化の
生化学的過程を始動させる鍵を握る糖蛋白分子である。
ＦｃεＲＩに結合した抗原特異的ＩｇＥが、対応する多
価抗原（例えばスギ花粉症の患者ではスギ花粉、ダニア
レルギー患者ではダニ抗原）によって架橋されると、こ
のレセプター（ＦｃεＲＩ）は凝集し、シグナル伝達機
構が作動し、肥満細胞は初めて活性化される。その結
果、アレルギー性炎症を惹起する種々の化学伝達物資、
すなわち予め細胞内顆粒に貯えられていたヒスタミンの
放出をはじめとして、細胞膜代謝産物であるロイコトリ
エン、プロスタグランジンなどの新たな合成、放出が爆
発的に誘導される。また、ＦｃεＲＩからのシグナルは
一方で核を経由して、アレルギー性炎症に直接、間接に
関与するサイトカインの合成を誘導する。

【０００４】従って、ＩｇＥによって媒介されるＩ型ア
レルギーの特異的な治療を考えるとき、Ｉ型アレルギー
反応効果相を特異的に支配するＦｃεＲＩを標的にし
て、その反応の根幹を遮断するために、ＩｇＥ−Ｆｃε
ＲＩ結合を特異的に阻害する戦略はきわめて有望であ
る。かかる見地から、ＩｇＥ結合阻害剤の候補として、
可溶化ヒトＦｃεＲＩ、抗ヒトＦｃεＲＩ抗体Ｆａｂ断
片、ヒトＩｇＥ定常領域（Ｆｃε）、抗ヒトＦｃε抗体
などが考慮され、それぞれ研究が進められている。

【０００５】前述のように、抗ヒトＦｃεＲＩモノクロ
ーナル抗体は、Ｉ型アレルギーの特異的な治療薬として
期待される。またそれだけでなく、診断薬、さらにはＦ
ｃεＲＩ発現細胞を標的としたミサイル療法など様々な
応用が期待される。そこで、後述するように、まず本発
明者らは、抗ヒトＦｃεＲＩモノクローナル抗体を産生
するマウス・ハイブリドーマを樹立した。しかし、マウ
ス等の異種抗体はヒトにとっては異物であり、ヒトに頻
回投与することは投与抗体に対する免疫反応を惹起し、
その結果、副作用並びに抗体の治療または予防効果の低
下を引き起こす。以上の点から、実際に抗体をヒトに投
与する臨床分野を考えると、ヒト型の抗体を用いること
が望ましい。

【０００６】ここで、抗体の特異性が可変領域の中でも
ＣＤＲという特定の領域に限定されることは当分野では
よく知られていることで、ヒト型の抗体を作製する目的
で、マウス等の異種抗体のＣＤＲのアミノ酸配列を抗体
遺伝子のクローニングにより明らかにした後、ヒト抗体
の可変領域へ移植することが行われている。更に、この
ような抗体工学と呼ばれる研究分野ではこの他に、二種
の異なった抗原特異性を有する双特異キメラ抗体、一本
鎖抗体、及び抗体活性を持つ単一ＣＤＲに相当するオリ
ゴペプチドなどの開発がなされつつある。

【０００７】また、モノクローナル抗体産生細胞株は、
一般に継代と共にその抗体産生能の低下することが知ら
れており、この問題を解決するために抗体遺伝子をクロ
ーニングした後、遺伝子導入することによって大量発現
させることなどが行われている。このように、遺伝子工
学的手法による抗体の産生、更に、改良抗体の開発にお
いては、その遺伝子の分離、更にアミノ酸配列を含めた
構造の解明は重要であり、特に、ＣＤＲのＤＮＡ塩基、
アミノ酸配列及びＣＤＲをコードするＤＮＡ塩基配列の
解明は極めて重要である。

【０００８】本発明は、このような技術背景の下になさ
れたものであり、その目的とするところは、抗ヒトＦｃ
εＲＩモノクローナル抗体の抗原認識領域、特にそのＣ
ＤＲのアミノ酸配列及びこれをコードするＤＮＡ塩基配
列を解明し、治療や診断において有用な、ヒトＦｃεＲ
Ｉを特異的に認識することのできるアミノ酸配列を有す
るポリぺプチド、及びこれをコードする塩基配列を有す
るＤＮＡ断片を提供することにある。

【０００９】

【課題を解決するための手段】本発明者らは、抗ヒトＦ
ｃεＲＩモノクローナル抗体生産株について種々検討し
た結果、５株の抗ヒトＦｃεＲＩモノクローナル抗体生
産株を得、更に該抗体のＣＤＲを含む可変領域をコード
するｃＤＮＡを分離し該ＤＮＡ塩基配列を解明し、特に
ＣＤＲ領域のアミノ酸配列を特定することにより、上記
目的が達成できることを見出し、本発明を完成するに至
った。

【００１０】従って、本発明のポリペプチドは、それぞ
れ、下記一般式（１）と（２）、（３）と（４）、
（５）と（６）、（７）と（８）、及び（９）と（１
０）との組み合わせより選択され、ヒトの高親和性Ｉｇ
Ｅ受容体を特異的に認識することができるものであるこ
とを特徴とする。ＦＲ１−ＣＤＲ１Ｈ−ＦＲ２−ＣＤＲ２Ｈ−ＦＲ３−Ｃ
ＤＲ３Ｈ−ＦＲ４…（１）（上式中のＦＲ１は２９〜３６個の、ＦＲ２は１０〜１
６個の、ＦＲ３は３２〜３５個の、ＦＲ４は１２〜１４
個のそれぞれアミノ酸から構成されるポリペプチド残基
であり、ＣＤＲ１Ｈは配列表の配列番号１で、ＣＤＲ２
Ｈは配列表の配列番号２で、ＣＤＲ３Ｈは配列表の配列
番号３でそれぞれ表され、ここでアミノ酸Ｃｙｓは酸化
状態において架橋を形成していることがある。）ＦＲ５−ＣＤＲ１Ｌ−ＦＲ６−ＣＤＲ２Ｌ−ＦＲ７−Ｃ
ＤＲ３Ｌ−ＦＲ８…（２）（上式中のＦＲ５は２３〜２８個の、ＦＲ６は１４〜１
６個の、ＦＲ７は３０〜３４個の、ＦＲ８は９〜１１個
のそれぞれアミノ酸から構成されるポリペプチド残基で
あり、ＣＤＲ１Ｌは配列表の配列番号４で、ＣＤＲ２Ｌ
は配列表の配列番号５で、ＣＤＲ３Ｌは配列表の配列番
号６でそれぞれ表され、ここでアミノ酸Ｃｙｓは酸化状
態において架橋を形成していることがある。）

【００１１】ＦＲ１−ＣＤＲ１Ｈ−ＦＲ２−ＣＤＲ２Ｈ
−ＦＲ３−ＣＤＲ３Ｈ−ＦＲ４…（３）（上式中のＦＲ１〜ＦＲ４は上記と同じものであり、Ｃ
ＤＲ１Ｈは配列表の配列番号７で、ＣＤＲ２Ｈは配列表
の配列番号８で、ＣＤＲ３Ｈは配列表の配列番号９でそ
れぞれ表され、ここでアミノ酸Ｃｙｓは酸化状態におい
て架橋を形成していることがある。）ＦＲ５−ＣＤＲ１Ｌ−ＦＲ６−ＣＤＲ２Ｌ−ＦＲ７−Ｃ
ＤＲ３Ｌ−ＦＲ８…（４）（上式中のＦＲ５〜ＦＲ８は上記と同じものであり、Ｃ
ＤＲ１Ｌは配列表の配列番号１０で、ＣＤＲ２Ｌは配列
表の配列番号１１で、ＣＤＲ３Ｌは配列表の配列番号１
２でそれぞれ表され、ここでアミノ酸Ｃｙｓは酸化状態
において架橋を形成していることがある。）

【００１２】ＦＲ１−ＣＤＲ１Ｈ−ＦＲ２−ＣＤＲ２Ｈ
−ＦＲ３−ＣＤＲ３Ｈ−ＦＲ４…（５）（上式中のＦＲ１〜ＦＲ４は上記と同じものであり、Ｃ
ＤＲ１Ｈは配列表の配列番号１３で、ＣＤＲ２Ｈは配列
表の配列番号１４で、ＣＤＲ３Ｈは配列表の配列番号１
５でそれぞれ表され、ここでアミノ酸Ｃｙｓは酸化状態
において架橋を形成していることがある。）ＦＲ５−ＣＤＲ１Ｌ−ＦＲ６−ＣＤＲ２Ｌ−ＦＲ７−Ｃ
ＤＲ３Ｌ−ＦＲ８…（６）（上式中のＦＲ５〜ＦＲ８は上記と同じものであり、Ｃ
ＤＲ１Ｌは配列表の配列番号１６で、ＣＤＲ２Ｌは配列
表の配列番号１７で、ＣＤＲ３Ｌは配列表の配列番号１
８でそれぞれ表され、ここでアミノ酸Ｃｙｓは酸化状態
において架橋を形成していることがある。）

【００１３】ＦＲ１−ＣＤＲ１Ｈ−ＦＲ２−ＣＤＲ２Ｈ
−ＦＲ３−ＣＤＲ３Ｈ−ＦＲ４…（７）（上式中のＦＲ１〜ＦＲ４は上記と同じものであり、Ｃ
ＤＲ１Ｈは配列表の配列番号１９で、ＣＤＲ２Ｈは配列
表の配列番号２０で、ＣＤＲ３Ｈは配列表の配列番号２
１でそれぞれ表され、ここでアミノ酸Ｃｙｓは酸化状態
において架橋を形成していることがある。）ＦＲ５−ＣＤＲ１Ｌ−ＦＲ６−ＣＤＲ２Ｌ−ＦＲ７−Ｃ
ＤＲ３Ｌ−ＦＲ８…（８）（上式中のＦＲ５〜ＦＲ８は上記と同じものであり、Ｃ
ＤＲ１Ｌは配列表の配列番号２２で、ＣＤＲ２Ｌは配列
表の配列番号２３で、ＣＤＲ３Ｌは配列表の配列番号２
４でそれぞれ表され、ここでアミノ酸Ｃｙｓは酸化状態
において架橋を形成していることがある。）

【００１４】ＦＲ１−ＣＤＲ１Ｈ−ＦＲ２−ＣＤＲ２Ｈ
−ＦＲ３−ＣＤＲ３Ｈ−ＦＲ４…（９）（上式中のＦＲ１〜ＦＲ４は上記と同じものであり、Ｃ
ＤＲ１Ｈは配列表の配列番号２５で、ＣＤＲ２Ｈは配列
表の配列番号２６で、ＣＤＲ３Ｈは配列表の配列番号２
７でそれぞれ表され、ここでアミノ酸Ｃｙｓは酸化状態
において架橋を形成していることがある。）ＦＲ５−ＣＤＲ１Ｌ−ＦＲ６−ＣＤＲ２Ｌ−ＦＲ７−Ｃ
ＤＲ３Ｌ−ＦＲ８…（１０）（上式中のＦＲ５〜ＦＲ８は上記と同じものであり、Ｃ
ＤＲ１Ｌは配列表の配列番号２８で、ＣＤＲ２Ｌは配列
表の配列番号２９で、ＣＤＲ３Ｌは配列表の配列番号３
０でそれぞれ表され、ここでアミノ酸Ｃｙｓは酸化状態
において架橋を形成していることがある。）

【００１５】また、本発明のＤＮＡ断片は、上記各ポリ
ペプチドをコードする塩基配列を有することを特徴とす
る。

【００１６】以下、本発明を詳細に説明する。本発明の
ポリペプチド及びＤＮＡ断片、並びにこれらと関連する
抗ヒトＦｃεＲＩモノクローナル抗体生産株及びモノク
ローナル抗体は、下記の方法により得ることができる。
即ち、まず、例えば、羅らの報告した方法（インターナ
ショナル・イムノロジー (International Immunology)
、第５巻、第４７−５４頁（１９９３））により調製
した可溶化ヒトＦｃεＲＩα鎖を抗原として、抗ヒトＦ
ｃεＲＩモノクローナル抗体生産株（ミエローマ細胞及
び脾細胞より得られるハイブリドーマ）を得る。この生
産株から、例えばバイオテクニックス (Bio Technique
s) 、第６巻、第１１４−１１６頁（１９８８）に記載
の方法で、ｍＲＮＡを調製することができる。

【００１７】次いで、得られたｍＲＮＡを逆転写するこ
とによりｃＤＮＡを調製し、マウス抗体重（Ｈ）鎖可変
領域あるいは軽（Ｌ）鎖可変領域のＮ末端をコードする
プライマー及びＣ末端をコードするプライマーを用い
て、ＰＣＲ法（Ｓ．サイキ（Ｓ．Ｓａｉｋｉ）ら、サイ
エンス（Ｓｃｉｅｎｃｅ）、第２３０巻、第１３５０−
１３５４頁（１９８５））によりマウス抗体Ｈ鎖可変領
域あるいはＬ鎖可変領域のｃＤＮＡを特異的に増幅する
ことができる。例えば、ファルマシア社のｓｃＦｖｍ
ｏｄｕｌｅキット等を利用してｃＤＮＡの合成及びＰＣ
Ｒ法によるマウス抗体Ｈ鎖可変領域遺伝子及びＬ鎖可変
領域遺伝子の増幅を行うことができる。

【００１８】しかる後、増幅されたＤＮＡを、例えばア
ガロースゲル電気泳動した後、ゲルから切り出し、精製
後、ブランティングキット（宝酒造社）を用いて末端を
平滑化し、例えばプラスミドベクターｐＵＣ１１９のＳ
ｍａｌサイトにサブクローニングし、ジデオキシ法によ
りシーケンシングすることによりその塩基配列を決定す
ることができる。その塩基配列よりマウス抗体Ｈ鎖可変
領域及びＬ鎖可変領域のアミノ酸配列を決定し、さらに
ＣＤＲ領域のアミノ酸配列を特定することができる。

【００１９】本発明は、上述のようにして明らかにした
下記〜に示す５種類のマウス抗ヒトＦｃεＲＩモノ
クローナル抗体のＨ鎖可変領域のＣＤＲ及びＬ鎖可変領
域のＣＤＲを含むポリペプチド、及び〜に示すポリ
ペプチドをコードするＤＮＡ塩基配列に関するものであ
る。ここで、に示したポリペプチドは、ＣＲＡ１と命
名されたハイブリドーマ細胞が産生するマウス抗ヒトＦ
ｃεＲＩモノクローナル抗体のＨ鎖可変領域のＣＤＲ及
びＬ鎖可変領域のＣＤＲを含むポリペプチドである。同
様に、〜に示したポリペプチドは、それぞれ、ＣＲ
Ａ２〜ＣＲＡ５と命名されたハイブリドーマ細胞が産生
するマウス抗ヒトＦｃεＲＩモノクローナル抗体のＨ鎖
可変領域のＣＤＲ及びＬ鎖可変領域のＣＤＲを含むポリ
ペプチドである。

【００２０】下記一般式（１）及び一般式（２）よ
り選択され、ヒトの抗親和性ＩｇＥ受容体を特異的に認
識することができるものであることを特徴とするポリペ
プチド。ＦＲ１−ＣＤＲ１Ｈ−ＦＲ２−ＣＤＲ２Ｈ−ＦＲ３−Ｃ
ＤＲ３Ｈ−ＦＲ４・・・（１）上式中において、ＦＲ１は２９〜３６個の、ＦＲ２は１
０〜１６個の、ＦＲ３は３２〜３５個の、ＦＲ４は１２
−１４個のそれぞれアミノ酸から構成されるポリペプチ
ド残基であり、ＣＤＲ１Ｈは配列表の配列番号１で、Ｃ
ＤＲ２Ｈは配列表の配列番号２で、ＣＤＲ３Ｈは配列表
の配列番号３でそれぞれ表される。また、この場合、ア
ミノ酸Ｃｙｓは酸化状態において架橋を形成しているこ
とがある。そして、ＦＲはフレームワークであり各ＦＲ
は天然に存在するアミノ酸及び修飾されたアミノ酸で構
成されていればよいが、一般式（１）により選択される
ポリペプチドとしては、配列表の配列番号３１で示され
るポリペプチドが最も好ましい。ＦＲ５−ＣＤＲ１Ｌ−ＦＲ６−ＣＤＲ２Ｌ−ＦＲ７−Ｃ
ＤＲ３Ｌ−ＦＲ８・・・（２）上式中において、ＦＲ５は２３〜２８個の、ＦＲ６は１
４〜１６個の、ＦＲ７は３０〜３４個の、ＦＲ８は９〜
１１個のそれぞれアミノ酸から構成されるポリペプチド
残基であり、ＣＤＲ１Ｌは配列表の配列番号４で、ＣＤ
Ｒ２Ｌは配列表の配列番号５で、ＣＤＲ３Ｌは配列表の
配列番号６でそれぞれ表され、アミノ酸Ｃｙｓは酸化状
態において架橋を形成していることがある。ＦＲはフレ
ームワークであり各ＦＲは天然に存在するアミノ酸及び
修飾されたアミノ酸で構成されていればよいが、一般式
（２）により選択されるポリペプチドとしては、配列表
の配列番号３２で示されるポリペプチドが最も好まし
い。

【００２１】下記一般式（３）及び一般式（４）よ
り選択され、ヒトの高親和性ＩｇＥ受容体を特異的に認
識することができるものであることを特徴とするポリペ
プチド。ＦＲ１−ＣＤＲ１Ｈ−ＦＲ２−ＣＤＲ２Ｈ−ＦＲ３−Ｃ
ＤＲ３Ｈ−ＦＲ４・・・（３）上式中、ＦＲ１〜ＦＲ４は上記と同じものであり、ＣＤ
Ｒ１Ｈは配列表の配列番号７で、ＣＤＲ２Ｈは配列表の
配列番号８で、ＣＤＲ３Ｈは配列表の配列番号９でそれ
ぞれ表され、ここでアミノ酸Ｃｙｓは酸化状態において
架橋を形成していることがある。ＦＲは上記の場合と同
様であるが、一般式（３）により選択されるポリペプチ
ドのうち最も好ましいのは、配列表の配列番号３３で示
されるポリペプチドである。ＦＲ５−ＣＤＲ１Ｌ−ＦＲ６−ＣＤＲ２Ｌ−ＦＲ７−Ｃ
ＤＲ３Ｌ−ＦＲ８・・・（４）上式中、ＦＲ５〜ＦＲ８は上記と同じものであり、ＣＤ
Ｒ１Ｌは配列表の配列番号１０で、ＣＤＲ２Ｌは配列表
の配列番号１１で、ＣＤＲ３Ｌは配列表の配列番号１２
でそれぞれ表され、ここでアミノ酸Ｃｙｓは酸化状態に
おいて架橋を形成していることがある。ＦＲは上記と同
様であり、最も好ましい一般式（４）により選択される
ポリペプチドは、配列表の配列番号３４で示されるポリ
ペプチドである。

【００２２】下記一般式（５）及び一般式（６）よ
り選択され、ヒトの高親和性ＩｇＥ受容体を特異的に認
識することができるものであることを特徴とするポリペ
プチド。ＦＲ１−ＣＤＲ１Ｈ−ＦＲ２−ＣＤＲ２Ｈ−ＦＲ３−Ｃ
ＤＲ３Ｈ−ＦＲ４・・・（５）上式中、ＦＲ１〜ＦＲ４は上記と同じものであり、ＣＤ
Ｒ１Ｈは配列表の配列番号１３で、ＣＤＲ２Ｈは配列表
の配列番号１４で、ＣＤＲ３Ｈは配列表の配列番号１５
でそれぞれ表され、ここでアミノ酸Ｃｙｓは酸化状態に
おいて架橋を形成していることがある。ＦＲは上記と同
様であり、最も好ましい一般式（５）により選択される
ポリペプチドは、配列表の配列番号３５で示されるポリ
ペプチドである。ＦＲ５−ＣＤＲ１Ｌ−ＦＲ６−ＣＤＲ２Ｌ−ＦＲ７−Ｃ
ＤＲ３Ｌ−ＦＲ８・・・（６）上式中、ＦＲ５〜ＦＲ８は上記と同じものであり、ＣＤ
Ｒ１Ｌは配列表の配列番号１６で、ＣＤＲ２Ｌは配列表
の配列番号１７で、ＣＤＲ３Ｌは配列表の配列番号１８
でそれぞれ表され、ここでアミノ酸Ｃｙｓは酸化状態に
おいて架橋を形成していることがある。ＦＲは上記と同
様であり、最も好ましい一般式（６）により選択される
ポリペプチドは、配列表の配列番号３６で示されるポリ
ペプチドである。

【００２３】下記一般式（７）及び一般式（８）よ
り選択され、ヒトの高親和性ＩｇＥ受容体を特異的に認
識することができるものであることを特徴とするポリペ
プチド。ＦＲ１−ＣＤＲ１Ｈ−ＦＲ２−ＣＤＲ２Ｈ−ＦＲ３−Ｃ
ＤＲ３Ｈ−ＦＲ４・・・（７）上式中、ＦＲ１〜ＦＲ４は上記と同じものであり、ＣＤ
Ｒ１Ｈは配列表の配列番号１９で、ＣＤＲ２Ｈは配列表
の配列番号２０で、ＣＤＲ３Ｈは配列表の配列番号２１
でそれぞれ表され、ここでアミノ酸Ｃｙｓは酸化状態に
おいて架橋を形成していることがある。ＦＲは上記と同
様で、最も好ましい一般式（７）により選択されるポリ
ペプチドは配列表の配列番号３７で示されるポリペプチ
ドである。ＦＲ５−ＣＤＲ１Ｌ−ＦＲ６−ＣＤＲ２Ｌ−ＦＲ７−Ｃ
ＤＲ３Ｌ−ＦＲ８・・・（８）上式中、ＦＲ５〜ＦＲ８は上記と同じものであり、ＣＤ
Ｒ１Ｌは配列表の配列番号２２で、ＣＤＲ２Ｌは配列表
の配列番号２３で、ＣＤＲ３Ｌは配列表の配列番号２４
でそれぞれ表され、ここでアミノ酸Ｃｙｓは酸化状態に
おいて架橋を形成していることがある。ＦＲは上記度同
様で、最も好ましい一般式（８）により選択されるポリ
ペプチドは配列表の配列番号３８で示されるポリペプチ
ドである。

【００２４】下記一般式（９）及び一般式（１０）
より選択され、ヒトの高親和性ＩｇＥ受容体を特異的に
認識することができるものであることを特徴とするポリ
ペプチド。ＦＲ１−ＣＤＲ１Ｈ−ＦＲ２−ＣＤＲ２Ｈ−ＦＲ３−Ｃ
ＤＲ３Ｈ−ＦＲ４・・・（９）上式中、ＦＲ１〜ＦＲ４は上記と同じものであり、ＣＤ
Ｒ１Ｈは配列表の配列番号２５で、ＣＤＲ２Ｈは配列表
の配列番号２６で、ＣＤＲ３Ｈは配列表の配列番号２７
でそれぞれ表され、ここでアミノ酸Ｃｙｓは酸化状態に
おいて架橋を形成していることがある。ＦＲは上記と同
様であり、最も好ましい一般式（９）により選択される
ポリペプチドは、配列表の配列番号３９で示されるポリ
ペプチドである。ＦＲ５−ＣＤＲ１Ｌ−ＦＲ６−ＣＤＲ２Ｌ−ＦＲ７−Ｃ
ＤＲ３Ｌ−ＦＲ８・・・（１０）上式中、ＦＲ５〜ＦＲ８は上記と同じものであり、ＣＤ
Ｒ１Ｌは配列表の配列番号２８で、ＣＤＲ２Ｌは配列表
の配列番号２９で、ＣＤＲ３Ｌは配列表の配列番号３０
でそれぞれ表され、ここでアミノ酸Ｃｙｓは酸化状態に
おいて架橋を形成していることがある。ＦＲは上記と同
様で、最も好ましい一般式（１０）により選択されるポ
リペプチドは、配列表の配列番号４０で示されるポリペ
プチドである。

【００２５】次に、本発明のポリペプチドをコードす
る塩基配列を有するＤＮＡ断片としては、本発明のポリ
ペプチドをコードするＤＮＡ塩基配列を有するものであ
ればどのような塩基配列でもよい。ここで、上記一般式
（１）で表されるポリペプチドをコードする一例の塩基
配列を、配列表の配列番号４１に示す。同様に、上記一
般式（２）〜（１０）で表されるポリペプチドをコード
する一例の塩基配列を、それぞれ配列表の配列番号４２
〜５０に示す。中でも、配列表の配列番号４３と４４、
および４７と４８で示されるものが、段落００３５の表
１に示すデータから明らかな通り、上記のポリペプチド
をコードするＤＮＡ断片として、本発明において好適に
使用される。

【００２６】本発明のポリペプチドをコードするＤＮＡ
あるいは例えば部位特異的変異導入法等で改変した変異
体ＤＮＡは、これに遺伝子工学的な手法を施すことによ
り、ベクター例えばｐＳＶ２型ベクターに組み込むこと
ができ、次いで、発現細胞、例えばＣＨＯ細胞を形質転
換し、該ポリペプチド誘導体を得ることができる。ま
た、同様な手法で全遺伝子を決定し、本発明のポリペプ
チドを含む抗体を生産することもできる。

【００２７】更に、本発明に係るポリペプチドの誘導体
としては、ヒトＦｃεＲＩへの認識特異性を保有してい
る断片、例えば、一価のＦａｂ断片、及び二価の（Ｆａ
ｂ’）２断片、マウス−ヒトキメラモノクローナル抗
体、ヒト化抗体（ＣＤＲ移植抗体）、一本鎖抗体、酵
素、蛍光マーカー、金属キレート、細胞増殖抑制物質ま
たは細胞毒性物質、アビジン、ビオチン、抗炎症剤、抗
アレルギー剤、免疫抑制剤等との接合体、並びに放射能
ラベル化抗体等を例示でき、これらは、それぞれ公知の
方法で調製し、目的に応じて使用することができる。

【００２８】

【実施例】以下、本発明を実施例により、更に詳細かつ
具体的に説明するが、本発明はこれら実施例になんら限
定されるものではない。（実施例１）抗ヒトＦｃεＲＩモノクローナル抗体生産
株の取得１）培地ＲＰＭＩ１６４０倍地に、リラシリン１００μｇ／ｍ
ｌ、ストレプトマイシン１００μｇ／ｍｌ、グルタミン
２ｍＭ、炭酸水素ナトリウム１．６ｇ／ｍｌを加えた
後、二酸化炭素を吹き込み、ｐＨ７．２前後とし牛胎児
血清（ＦＣＳ）を１０％になるように加えて使用した。

【００２９】２）ミエローマ細胞株Ｂａｌｂ／ｃマウス由来の骨髄細胞ＭＯＰ−ＰＣ−２１
の株化細胞δアザグアニン耐性のＰ３−Ｘ６３−Ａｇ−
δＵ／（Ｐ３Ｕ１）を用いた。

【００３０】３）抗原感作羅らの報告した方法（インターナショナル・イムノロジ
ー(International Immunology)、第５巻、第４７−５４
頁（１９９３）により調製した可溶化ヒトＦｃεＲＩα
鎖を、フロイント完全アジュバンドと混合した抗原をＢ
ａｌｂ／ｃマウスに一匹あたり０．２５ｍｇ／０．５ｍ
ｌずつ腹腔に接種し、一次感作した。５週間後、更に上
記抗原を０．５ｍｇ／０．５ｍｌずつ尾静脈に接種し、
二次感作した。その４日後の脾臓細胞を上記ミエローマ
細胞株と下記４）のようにして細胞融合させた。

【００３１】４）細胞融合法ミエローマ細胞、脾細胞共に食塩リン酸緩衝液（ＰＢ
Ｓ：１０ｍＭリン酸緩衝液ｐＨ７．５、０．９％食塩）
で３回洗浄後、ＲＰＭＩ１６４０、１０％ＦＣＳに浮遊
し細胞数を算定した。１×１０⁶個のＰ３Ｕ１に対して
７．５〜１０×１０⁸個の脾細胞を２〜３週間培養し
た。次に、ＲＰＭＩ１６４０で遠心洗浄してＦＣＳを除
き、ガラススピッツ遠心管に細胞を集める。上清を完全
に取り去った後、ペレット状の細胞をほぐし、予め３７
℃に温めておいたポリエチレングリコール液（ＰＥＧ）
を０．５ｍｌ加え、室温で１分間反応させた後、３７℃
のＲＰＭＩ１６４０（１ｍｌ）を３０秒毎に１０回加え
た。その間、試験官をゆっくり回転し続ける。こうして
細胞融合した細胞を遠心洗浄し、Ｐ３Ｕ１細胞数が、５
〜１０×１０⁵個／ｍｌになるようにＲＰＭＩ１６４
０、１０％ＦＣＳを加える。その０．２ｍｌをマイクロ
タイタープレートに分注した。２４時間培養して上清を
半量捨て、ＨＡＴ（ヒポキサンチン、アミノプテリン及
びチミジンを含有）倍地を加える。以後、この操作を
４８時間毎に２週間繰り返す。ミエローマ細胞及び脾細
胞共にＨＡＴ倍地中では増殖できないので、増殖してく
る細胞はハイブリドーマと考えられる。従って、１０〜
１４日後、増殖してきたハイブリドーマの認められる培
養液について抗体活性を調べた。

【００３２】５）抗体活性のスクリーニング抗体活性のスクリーニングは次に示すようなエンザイム
イムノアッセイによった。ＰＢＳに溶解した抗原（１ｍｇ／ｍｌ）を５０μ１
とり、マイクロタイタープレート（９６穴、Ｆａｌｃｏ
ｎ３１２９）に吸着させた（４℃、一晩）。抗原溶液を除き、０．０５％Ｔｗｅｅｎ２０を含ん
だＰＢＳ（ＰＢＳＴ）により４回洗浄した後、５％牛ア
ルブミン（ＢＳＡ）を含んだＰＢＳを１００μｌ加え３
７℃１時間放置した。ＢＳＡ溶液を除いた後、ＰＢＳＴにより４回洗浄す
る。次に、ハイブリドーマの培養上清を５０μ１加え、
２時間反応させた。ＰＢＳＴで４回洗浄した後、１％ＢＳＡを含むＰＢ
Ｓで１０００倍に希釈したペルオキシダーゼ結合抗マウ
スＩｇＧ抗体を５０μｌ加え、３７℃で２時間反応させ
た。ＰＢＳＴにより４回洗浄した後、０．５Ｍクエン酸
１．２２ｍｌ、０．５Ｍリン酸二ナトリウム２．５６ｍ
ｌ、オルトフェニレンジアミン１０ｍｇ、３０％過酸化
水素水１０μｌ／２５ｍｌを５０μｌ加え発色させた。
十分発色させた後、２Ｍ硫酸を５０μｌ加え発色を停止
させる。発色はイムノリーダーにより光学的に測定した。抗原に特異的な抗体を産生している細胞のうち５株
を分離し、クローニング操作を重ね、抗ヒトＦｃεＲＩ
モノクローナル抗体を産生するハイブリドーマ細胞株５
株を樹立した。それぞれＣＲＡ１、ＣＲＡ２、ＣＲＡ
３、ＣＲＡ４、そしてＣＲＡ５と命名した。

【００３３】６）ヒトＩｇＥ結合阻害実験樹立したハイブリドーマ細胞株５株が産生する抗ヒトＦ
ｃεＲＩモノクローナル抗体が、ヒトＩｇＥのヒトＦｃ
εＲＩへの結合を阻害するかどうかを競争阻害実験によ
り確認した。ヒトＦｃεＲＩα鎖をマイクロタイタープ
レートに吸着させておき、そこにヨウ素１２５で標識し
たヒトＩｇＥと、標識していないモノクローナル抗体あ
るいはヒトＩｇＥを同時に加えた。反応後、洗浄し、マ
イクロタイタープレートに固定化したヒトＦｃεＲＩα
鎖に結合したヨウ素１２５標識ヒトＩｇＥの放射能をシ
ンチレイションカウンターで測定した。ここで、標識し
ていないモノクローナル抗体あるいはヒトＩｇＥの量は
変化させてあり、放射能がヨウ素１２５で標識したヒト
ＩｇＥのみを反応させた際の５０％になるときの、標識
していないモノクローナル抗体あるいはヒトＩｇＥの量
を、ＩＣ₅₀とした。得られた結果を表１に示した。

【００３４】ＣＲＡ２、ＣＲＡ３、及びＣＲＡ４由来の
モノクローナル抗体は、そのＩＣ₅₀の値がヒトＩｇＥで
阻害したときよりも小さく、それぞれのＩｇＥ結合阻害
剤としての有効性が確認された。一方、ＩＣ₅₀の値の大
きいＣＲＡ１及びＣＲＡ５はＩｇＥ結合阻害剤としては
有効ではないと推定することもできるが、ヒトＦｃεＲ
Ｉへの特異的な結合能を有する故、ＣＲＡ２、ＣＲＡ
３、及びＣＲＡ４と同様、診断及びミサイル療法などＩ
ｇＥ結合阻害が必ずしも要求されない場合に十分有効で
ある。

【００３５】

【表１】

【００３６】（実施例２）抗ヒトＦｃεＲＩモノクロ
ナール抗体遺伝子の取得及び解折１）ｍＲＮＡの調製上記ハイブリドーマ細胞約５×１０⁷個の細胞より、
Ｊ．Ｅ．バッドレイ（J.E.Badley)らの方法（バイオテ
クニックス(Bio Techniques)、第６巻、第１１４−１１
６頁（１９８８）に従い、ポリＡを有するＲＮＡを下記
の如く精製した。該ハイブリドーマ細胞をＰＢＳ３０ｍ
ｌで遠心洗浄し、１０ｍｌのリシス・バッファ（２００
ｍＭＮａＣ１、２００ｍＭＴｒｉｓＣｌｐＨ７．
５、０．１５ｍＭＭｇＣ１２、２％ＳＤＳ、０．２
ｍｇ／ｍｌプロテイネースＫ）に懸濁させた。この懸
濁液を１８Ｇの注射針に５回、２１Ｇの注射針に１回通
して細胞を破砕した後、４５℃の水浴上で緩徐に揺動さ
せながら２時間放置した。この間にオリゴｄＴセルロー
ス担体（コラボレイティブ・リサーチ社）０．１ｇを１
０ｍｌのエルーション・バッファ（１０ｍＭＴｒｉｓ
ＣｌｐＨ７．５）で一回、１０ｍｌのバインディング
・バッファ（１０ｍＭＴｒｉｓＣｌｐＨ７．５、５
００ｍＭＮａＣｌ）で３回、遠心洗浄した。このオリ
ゴｄＴセルロース担体に先の細胞抽出液及び６００μｌ
の５Ｍ−ＮａＣｌを加え、室温で２０分間穏やかに撹拌
した。続いて１０ｍｌのバインディング・バッファで５
回、遠心洗浄した後、カラムに充填した。カラムに計３
ｍｌのエルーション・バッファを少量づつ加え、溶出液
を１０滴づつ分画した。各画分の一部をとり、エチジウ
ム・ブロマイドを添加後、ＵＶ照射し、よく光る画分を
回収した。回収画分をエタノール沈澱し、２５μｌの滅
菌水に再溶解させた。

【００３７】２）相補鎖ＤＮＡ（ｃＤＮＡ）の合成及び
ＰＣＲ法によるクローニング１）で精製したｍＲＮＡを鋳型として、ファルマシア社
のｓｃＦｖｍｏｄｕｌｅキットを利用してｃＤＮＡの合
成及びＰＣＲ法によりマウス抗体Ｈ鎖可変領域あるいは
Ｌ鎖可変領域のｃＤＮＡを特異的に増幅した。アガロー
スゲル電気永動により、約３５０塩基対のＨ鎖可変領域
のｃＤＮＡ、あるいは約３２５塩基対のＬ鎖可変領域の
ｃＤＮＡが特異的に増幅していることを確認した。

【００３８】３）塩基配列の決定増幅されたＤＮＡを１％アガロースゲル電気永動後、ゲ
ルから切り出し、マーメイド（ＢＩＯ１０１社）を用い
て精製した後、ブランティングキット（宝酒造社）を用
いて末端を平滑化した。このＤＮＡ断片をプラスミドベ
クターｐＵＣ１１９のＳｍａＩサイトにサブクローニン
グし、ジデオキシ法によりシーケンシングすることによ
りその塩基配列を決定した。このようにして配列表の配
列番号４１〜５０で示した塩基配列を決定した。配列表
の配列番号４１、４３、４５、４７及び４９に、それぞ
れハイブリドーマ細胞株ＣＲＡ１，ＣＲＡ２，ＣＲＡ
３，ＣＲＡ４及びＣＲＡ５からクローニングしたＨ鎖可
変領域のｃＤＮＡの塩基配列を示した。配列表の配列番
号４２、４４、４６、４８及び５０に、それぞれハイブ
リドーマ細胞株ＣＲＡ１，ＣＲＡ２，ＣＲＡ３，ＣＲＡ
４及びＣＲＡ５からクローニングしたＬ鎖可変領域のｃ
ＤＮＡの塩基配列を示した。

【００３９】４）超可変領域の決定３）で決定した塩基配列よりマウス抗体Ｈ鎖可変領域及
びＬ鎖可変領域のアミノ酸配列を決定し、更にＣＤＲ領
域のアミノ酸配列を特定した。配列表の配列番号３１、
３３、３５、３７、及び３９に、それぞれハイブリドー
マ細胞株ＣＲＡ１，ＣＲＡ２，ＣＲＡ３，ＣＲＡ４及び
ＣＲＡ５からクローニングしたＨ鎖可変領域のｃＤＮＡ
の塩基配列より決定したアミノ酸配列を示した。配列表
の配列番号３２、３４、３６、３８、及び４０に、それ
ぞれハイブリドーマ細胞株ＣＲＡ１，ＣＲＡ２，ＣＲＡ
３，ＣＲＡ４及びＣＲＡ５からクローニングしたＬ鎖可
変領域のｃＤＮＡの塩基配列より決定したアミノ酸配列
を示した。なお、ＣＤＲ領域のアミノ酸配列を、それぞ
れ配列表に説明した。

【００４０】

【発明の効果】以上説明したように、本発明によれば、
抗ヒトＦｃεＲＩモノクローナル抗体の抗原認識領域、
特にそのＣＤＲを解明し、治療や診断において有用な、
ヒトＦｃεＲＩを特異的に認識することのできるアミノ
酸配列を有するポリぺプチド、及びこれをコードする塩
基配列を有するＤＮＡ断片を提供することができる。即
ち、本発明により、ヒトＦｅεＲＩを認識するモノクロ
ーナル抗体の抗原認識部位が特定され、該認識部位を含
有するポリペプチドの遺伝子工学的製造手段が提供され
た。

【００４１】

【配列表】配列番号：１配列の長さ：５配列の型：アミノ酸鎖の数：一本鎖トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチド起源細胞の種類：マウスハイブリドーマ細胞ＣＲＡ１

【００４２】配列番号：２配列の長さ：１７配列の型：アミノ酸鎖の数：一本鎖トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチド起源細胞の種類：マウスハイブリドーマ細胞ＣＲＡ１配列 Thr Ile Ser Gly Asp Gly Ser Tyr Thr Phe Tyr Pro Asp Ser Val 1 5 10 15 Lys Gly

【００４３】配列番号：３配列の長さ：９配列の型：アミノ酸鎖の数：一本鎖トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチド起源細胞の種類：マウスハイブリドーマ細胞ＣＲＡ１

【００４４】配列番号：４配列の長さ：１１配列の型：アミノ酸鎖の数：一本鎖トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチド起源細胞の種類：マウスハイブリドーマ細胞ＣＲＡ１

【００４５】配列番号：５配列の長さ：７配列の型：アミノ酸鎖の数：一本鎖トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチド起源細胞の種類：マウスハイブリドーマ細胞ＣＲＡ１

【００４６】配列番号：６配列の長さ：９配列の型：アミノ酸鎖の数：一本鎖トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチド起源細胞の種類：マウスハイブリドーマ細胞ＣＲＡ１

【００４７】配列番号：７配列の長さ：５配列の型：アミノ酸鎖の数：一本鎖トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチド起源細胞の種類：マウスハイブリドーマ細胞ＣＲＡ２

【００４８】配列番号：８配列の長さ：１７配列の型：アミノ酸鎖の数：一本鎖トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチド起源細胞の種類：マウスハイブリドーマ細胞ＣＲＡ２配列 Phe Ile Ser Asn Arg Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Pro Asp Thr Val 1 5 10 15 Lys Gly

【００４９】配列番号：９配列の長さ：８配列の型：アミノ酸鎖の数：一本鎖トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチド起源細胞の種類：マウスハイブリドーマ細胞ＣＲＡ２

【００５０】配列番号：１０配列の長さ：１５配列の型：アミノ酸鎖の数：一本鎖トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチド起源細胞の種類：マウスハイブリドーマ細胞ＣＲＡ２配列 Arg Ala Ser Glu Ser Val Asp Ser Tyr Gly Asn Ser Phe Met His 1 5 10 15

【００５１】配列番号：１１配列の長さ：７配列の型：アミノ酸鎖の数：一本鎖トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチド起源細胞の種類：マウスハイブリドーマ細胞ＣＲＡ２

【００５２】配列番号：１２配列の長さ：９配列の型：アミノ酸鎖の数：一本鎖トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチド起源細胞の種類：マウスハイブリドーマ細胞ＣＲＡ２

【００５３】配列番号：１３配列の長さ：５配列の型：アミノ酸鎖の数：一本鎖トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチド起源細胞の種類：マウスハイブリドーマ細胞ＣＲＡ２

【００５４】配列番号：１４配列の長さ：１７配列の型：アミノ酸鎖の数：一本鎖トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチド起源細胞の種類：マウスハイブリドーマ細胞ＣＲＡ３配列 Tyr Ile Ser Asn Arg Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Pro Asp Thr Ile 1 5 10 15 Met Gly

【００５５】配列番号：１５配列の長さ：８配列の型：アミノ酸鎖の数：一本鎖トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチド起源細胞の種類：マウスハイブリドーマ細胞ＣＲＡ３

【００５６】配列番号：１６配列の長さ：１５配列の型：アミノ酸鎖の数：一本鎖トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチド起源細胞の種類：マウスハイブリドーマ細胞ＣＲＡ３配列 Arg Ala Ser Glu Ser Val Asp Ser Tyr Gly Asn Ser Phe Met His 1 5 10 15

【００５７】配列番号：１７配列の長さ：７配列の型：アミノ酸鎖の数：一本鎖トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチド起源細胞の種類：マウスハイブリドーマ細胞ＣＲＡ３

【００５８】配列番号：１８配列の長さ：９配列の型：アミノ酸鎖の数：一本鎖トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチド起源細胞の種類：マウスハイブリドーマ細胞ＣＲＡ３

【００５９】配列番号：１９配列の長さ：５配列の型：アミノ酸鎖の数：一本鎖トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチド起源細胞の種類：マウスハイブリドーマ細胞ＣＲＡ４

【００６０】配列番号：２０配列の長さ：１７配列の型：アミノ酸鎖の数：一本鎖トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチド起源細胞の種類：マウスハイブリドーマ細胞ＣＲＡ４配列 Trp Ile Tyr Pro Lys Asn Val Asn Thr Lys Tyr Asn Glu Arg Phe 1 5 10 15 Lys Gly

【００６１】配列番号：２１配列の長さ：９配列の型：アミノ酸鎖の数：一本鎖トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチド起源細胞の種類：マウスハイブリドーマ細胞ＣＲＡ４

【００６２】配列番号：２２配列の長さ：１１配列の型：アミノ酸鎖の数：一本鎖トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチド起源細胞の種類：マウスハイブリドーマ細胞ＣＲＡ４

【００６３】配列番号：２３配列の長さ：７配列の型：アミノ酸鎖の数：一本鎖トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチド起源細胞の種類：マウスハイブリドーマ細胞ＣＲＡ４

【００６４】配列番号：２４配列の長さ：９配列の型：アミノ酸鎖の数：一本鎖トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチド起源細胞の種類：マウスハイブリドーマ細胞ＣＲＡ４

【００６５】配列番号：２５配列の長さ：５配列の型：アミノ酸鎖の数：一本鎖トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチド起源細胞の種類：マウスハイブリドーマ細胞ＣＲＡ５

【００６６】配列番号：２６配列の長さ：１７配列の型：アミノ酸鎖の数：一本鎖トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチド起源細胞の種類：マウスハイブリドーマ細胞ＣＲＡ５配列 Tyr Ile Ser Asp Gly Asp Ile Ser Thr Tyr Tyr Pro Asp Thr Val 1 5 10 15 Lys Gly

【００６７】配列番号：２７配列の長さ：１１配列の型：アミノ酸鎖の数：一本鎖トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチド起源細胞の種類：マウスハイブリドーマ細胞ＣＲＡ５

【００６８】配列番号：２８配列の長さ：１２配列の型：アミノ酸鎖の数：一本鎖トポロジー：直鎖配列の種類：ペプチド起源細胞の種類：マウスハイブリドーマ細胞ＣＲＡ５

【００６９】配列番号：２９配列の長さ：７配列の型：アミノ酸鎖の数：一本鎖トポロジー：直鎖配列の種類：ペプチド起源細胞の種類：マウスハイブリドーマ細胞ＣＲＡ５

【００７０】配列番号：３０配列の長さ：９配列の型：アミノ酸鎖の数：一本鎖トポロジー：直鎖配列の種類：ペプチド起源細胞の種類：マウスハイブリドーマ細胞ＣＲＡ５

【００７１】配列番号：３１配列の長さ：１１８配列の型：アミノ酸鎖の数：一本鎖トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチド起源細胞の種類：マウスハイブリドーマ細胞ＣＲＡ１配列の特徴３１−３５ＳＣＤＲ領域５０−６６ＳＣＤＲ領域９９−１０７ＳＣＤＲ領域配列 Gln Val Lys Leu Gln Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly 1 5 10 15 Gly Ser Leu Lys Leu Ser Cys Val Ala Ser Glu Phe Thr Phe Ser 20 25 30 Asn Tyr Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Thr Pro Glu Lys Arg Leu 35 40 45 Glu Trp Val Ala Thr Ile Ser Gly Asp Gly Ser Tyr Thr Phe Tyr 50 55 60 Pro Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala 65 70 75 Lys Asn Asn Leu Tyr Leu Gln Met Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp 80 85 90 Thr Ala Leu Tyr Phe Cys Ile Ser Leu Phe Tyr Arg Ser Ser Phe 95 100 105 Pro Phe Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 110 115

【００７２】配列番号：３２配列の長さ：１０４配列の型：アミノ酸鎖の数：一本鎖トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチド起源細胞の種類：マウスハイブリドーマ細胞ＣＲＡ１配列の特徴２１−３１ＳＣＤＲ領域４７−５３ＳＣＤＲ領域８６−９４ＳＣＤＲ領域配列 Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Met Tyr Ala Ser Leu Gly Glu Arg 1 5 10 15 Val Thr Ile Thr Cys Lys Ala Ser Gln Asp Ile Asn Ser Tyr Leu 20 25 30 Ser Trp Phe His Gln Lys Pro Gly Lys Ser Pro Lys Thr Leu Ile 35 40 45 Tyr Arg Ala Lys Arg Leu Val Asp Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser 50 55 60 Gly Ser Gly Ser Gly Gln Asp Tyr Ser Leu Thr Ile Ser Ser Leu 65 70 75 Glu Tyr Glu Asp Met Gly Ile Tyr Tyr Cys Leu Gln Tyr Asp Glu 80 85 90 Phe Pro Leu Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 95 100

【００７３】配列番号：３３配列の長さ：１１７配列の型：アミノ酸鎖の数：一本鎖トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチド起源細胞の種類：マウスハイブリドーマ細胞ＣＲＡ２配列の特徴３１−３５ＳＣＤＲ領域５０−６６ＳＣＤＲ領域９８−１０６ＳＣＤＲ領域配列 Gln Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly 1 5 10 15 Gly Ser Leu Lys Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser 20 25 30 Thr Tyr Pro Met Ser Trp Val Arg Gln Thr Pro Glu Lys Arg Leu 35 40 45 Glu Trp Val Ala Phe Ile Ser Asn Arg Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr 50 55 60 Pro Asp Thr Val Lys Gly Arg Phe Thr Val Ser Arg Asp Asn Ala 65 70 75 Lys Asn Ile Leu Tyr Leu Gln Met Thr Ser Leu Lys Ser Glu Asp 80 85 90 Thr Ala Met Tyr Tyr Cys Ala Arg His Asn Tyr Gly Gly Met Asp 95 100 105 Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 110 115

【００７４】配列番号：３４配列の長さ：１１２配列の型：アミノ酸鎖の数：一本鎖トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチド起源細胞の種類：マウスハイブリドーマ細胞ＣＲＡ２配列の特徴２４−３８ＳＣＤＲ領域５４−６０ＳＣＤＲ領域９２−１０１ＳＣＤＲ領域配列 Asp Ile Gln Met Pro Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ala Val Ser Leu 1 5 10 15 Gly Gln Arg Ala Thr Ile Ser Cys Arg Ala Ser Glu Ser Val Asp 20 25 30 Ser Tyr Gly Asn Ser Phe Met His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly 35 40 45 Gln Ser Pro Lys Leu Leu Met Tyr Leu Ala Ser Asn Leu Glu Ser 50 55 60 Gly Val Pro Ala Arg Phe Thr Gly Ser Gly Ser Arg Thr Asp Phe 65 70 75 Thr Leu Thr Ile Asp Pro Val Glu Ala Asp Asp Ala Ala Thr Tyr 80 85 90 Tyr Cys Gln Gln Asn Asn Glu Asp Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly 95 100 105 Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg 110

【００７５】配列番号：３５配列の長さ：１１７配列の型：アミノ酸鎖の数：一本鎖トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチド起源細胞の種類：マウスハイブリドーマ細胞ＣＲＡ３配列の特徴３１−３５ＳＣＤＲ領域５０−６６ＳＣＤＲ領域９９−１０６ＳＣＤＲ領域配列 Gln Val Lys Leu Gln Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly 1 5 10 15 Gly Ser Leu Lys Val Ser Cys Thr Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser 20 25 30 Thr Tyr Pro Met Ser Trp Val Arg Gln Thr Pro Glu Lys Arg Leu 35 40 45 Glu Trp Val Ala Tyr Ile Ser Asn Arg Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr 50 55 60 Pro Asp Thr Ile Met Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala 65 70 75 Lys Asn Thr Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Ser Glu Asp 80 85 90 Thr Ala Met Tyr Tyr Cys Ala Arg His Asn Tyr Gly Gly Met Asp 95 100 105 Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 110 115

【００７６】配列番号：３６配列の長さ：１１２鎖の数：一本鎖トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチド起源細胞の種類：マウスハイブリドーマ細胞ＣＲＡ３配列の特徴２４−３８ＳＣＤＲ領域５４−６０ＳＣＤＲ領域９３−１０１ＳＣＤＲ領域配列 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ala Val Ser Leu 1 5 10 15 Gly Gln Arg Ala Thr Ile Ser Cys Arg Ala Ser Glu Ser Val Asp 20 25 30 Ser Tyr Gly Asn Ser Phe Met His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly 35 40 45 Gln Pro Pro Lys Leu Leu Met Tyr Leu Ala Ser Asn Leu Glu Ser 50 55 60 Gly Val Pro Ala Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Arg Thr His Phe 65 70 75 Thr Leu Thr Ile Asp Pro Val Glu Ala Asp Asp Ala Ala Thr Tyr 80 85 90 Tyr Cys Gln Gln Asn Asn Glu Asp Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly 95 100 105 Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg 110

【００７７】配列番号：３７配列の長さ：１１８鎖の数：一本鎖トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチド起源細胞の種類：マウスハイブリドーマ細胞ＣＲＡ４配列の特徴３１−３５ＳＣＤＲ領域５０−６６ＳＣＤＲ領域９９−１０７ＳＣＤＲ領域配列 Gln Val Lys Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Leu Val Lys Pro Gly 1 5 10 15 Ala Ser Val Arg Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr 20 25 30 Ser Tyr Tyr Ile His Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu 35 40 45 Glu Trp Ile Gly Trp Ile Tyr Pro Lys Asn Val Asn Thr Lys Tyr 50 55 60 Asn Glu Arg Phe Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Thr Asp Lys Ser 65 70 75 Ser Ser Thr Ala Tyr Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp 80 85 90 Ser Ala Val Tyr Phe Cys Ala Leu Thr Ala Arg Ala Thr Ala Met 95 100 105 Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 110 115

【００７８】配列番号：３８配列の長さ：１０８鎖の数：一本鎖トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチド起源細胞の種類：マウスハイブリドーマ細胞ＣＲＡ４配列の特徴２４−３４ＳＣＤＲ領域５０−５６ＳＣＤＲ領域８９−９７ＳＣＤＲ領域配列 Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ser Val Ser Val 1 5 10 15 Gly Glu Thr Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Glu Asn Ile Tyr 20 25 30 Ser Asn Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Gln Gly Lys Ser Pro Gln 35 40 45 Leu Leu Val Tyr Ala Ala Thr Asn Leu Ala Asp Gly Val Pro Ser 50 55 60 Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Gln Tyr Ser Leu Lys Ile 65 70 75 Asn Ser Leu Gln Ser Glu Asp Phe Gly Ser Tyr Tyr Cys Gln His 80 85 90 Phe Trp Gly Thr Pro Trp Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu 95 100 105 Ile Lys Arg

【００７９】配列番号：３９配列の長さ：１１８鎖の数：一本鎖トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチド起源細胞の種類：マウスハイブリドーマ細胞ＣＲＡ５配列の特徴２９−３３ＳＣＤＲ領域４８−６４ＳＣＤＲ領域９７−１０７ＳＣＤＲ領域配列 Gln Val Lys Leu Gln Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly 1 5 10 15 Gly Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Thr Ser Gly Phe Thr Asp Tyr 20 25 30 Tyr Met Phe Trp Val Arg Gln Thr Pro Glu Lys Lys Leu Glu Trp 35 40 45 Val Ala Tyr Ile Ser Asp Gly Asp Ile Ser Thr Tyr Tyr Pro Asp 50 55 60 Thr Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn 65 70 75 Thr Leu Tyr Leu Gln Met Ser Arg Leu Lys Ser Glu Asp Thr Ala 80 85 90 Met Tyr Tyr Cys Ala Arg Gly Asn Tyr Arg Tyr Gly Tyr Ala Val 95 100 105 Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser Ser 110 115

【００８０】配列番号：４０配列の長さ：１０９鎖の数：一本鎖トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチド起源細胞の種類：マウスハイブリドーマ細胞ＣＲＡ５配列の特徴２４−３５ＳＣＤＲ領域５１−５７ＳＣＤＲ領域９０−９８ＳＣＤＲ領域配列ＡｓｐＩｌｅＧｌｎＭｅｔＴｈｒＧｌｎＳｅｒＰｒｏＴｈｒ
ＴｈｒＭｅｔＡｌａＡｌａＳｅｒＰｒｏ１５
１０１５ＧｌｙＧｌｕＬｙｓＩｌｅＴｈｒＩｌｅＴｈｒＣｙｓＳｅｒ
ＡｌａＳｅｒＳｅｒＳｅｒＩｌｅＳｅｒ２０
２５３０ＳｅｒＡｓｎＴｙｒＬｅｕＨｉｓＴｒｐＴｙｒＧｌｎＧｌｎ
ＬｙｓＰｒｏＧｌｙＰｈｅＳｅｒＰｒｏ３５
４０４５ＬｙｓＬｅｕＬｅｕＩｌｅＴｙｒＡｒｇＴｈｒＳｅｒＡｓｎ
ＬｅｕＡｌａＳｅｒＧｌｙＶａｌＰｒｏ５０
５５６０ＡｌａＡｒｇＰｈｅＳｅｒＧｌｙＳｅｒＧｌｙＳｅｒＧｌｙ
ＴｈｒＳｅｒＴｙｒＳｅｒＬｅｕＴｈｒ６５
７０７５ＩｌｅＧｌｙＴｈｒＭｅｔＧｌｕＡｌａＧｌｕＡｓｐＶａｌ
ＡｌａＴｈｒＴｙｒＴｙｒＣｙｓＧｌｎ８０
８５９０ＧｌｎＧｌｙＳｅｒＳｅｒＩｌｅＰｒｏＬｅｕＴｈｒＰｈｅ
ＧｌｙＡｌａＧｌｙＴｈｒＬｙｓＬｅｕ９５
１００１０５ＧｌｕＬｅｕＬｙｓＡｒｇ

【００８１】配列番号：４１配列の長さ：３５４配列の型：核酸鎖の数：二本鎖トポロジー：直鎖状配列の種類：ｃＤＮＡｔｏｍＲＮＡ起源細胞の種類：マウスハイブリドーマ細胞ＣＲＡ１配列 CAG GTG AAG CTG CAG GAG TCT GGG GGA GGC TTG GTG AAG CCT GGA 45 GGG TCC CTA AAA CTC TCC TGT GTA GCC TCT GAA TTC ACT TTC AGT 90 AAT TAT GGC ATG TCT TGG GTT CGC CAG ACT CCG GAG AAG AGG CTG 135 GAG TGG GTC GCC ACC ATT AGT GGT GAT GGT AGT TAC ACC TTT TAT 180 CCA GAC AGT GTG AAG GGG CGA TTC ACC ATC TCC AGA GAC AAT GCC 225 AAG AAC AAC CTG TAC CTG CAA ATG AGC AGT CTG AGG TCT GAG GAC 270 ACG GCC TTG TAT TTT TGT ATA AGC CTC TTC TAT AGG TCC TCG TTT 315 CCT TTC TGG GGC CAA GGG ACC ACG GTC ACC GTC TCC TCA 354

【００８２】配列番号：４２配列の長さ：３１２配列の型：核酸鎖の数：二本鎖トポロジー：直鎖状配列の種類：ｃＤＮＡｔｏｍＲＮＡ起源細胞の種類：マウスハイブリドーマ細胞ＣＲＡ１配列 ATG ACG CAG TCT CCA TCT TCC ATG TAT GCA TCT CTA GGA GAG AGA 45 GTC ACT ATC ACT TGC AAG GCG AGT CAG GAC ATT AAT AGC TAT TTA 90 AGT TGG TTC CAC CAG AAA CCA GGG AAA TCT CCT AAG ACC CTG ATC 135 TAT CGT GCA AAG AGA TTG GTA GAT GGG GTC CCA TCA AGG TTC AGT 180 GGC AGT GGA TCT GGG CAA GAT TAT TCT CTC ACC ATC AGC AGC CTG 225 GAA TAT GAA GAT ATG GGA ATT TAT TAT TGT CTA CAG TAT GAT GAA 270 TTT CCG CTC ACG TTC GGT GCT GGG ACC AAG CTG GAA ATA AAA 312

【００８３】配列番号：４３配列の長さ：３５１配列の型：核酸鎖の数：二本鎖トポロジー：直鎖状配列の種類：ｃＤＮＡｔｏｍＲＮＡ起源細胞の種類：マウスハイブリドーマ細胞ＣＲＡ２配列 CAG GTG CAG CTG CAG GAG TCA GGG GGA GGT TTA GTG CAG CCT GGA 45 GGG TCC CTG AAA CTC TCC TGT ACA GCC TCT GGA TTC ACT TTC AGC 90 ACC TAT CCC ATG TCT TGG GTT CGC CAG ACT CCA GAG AAG AGG CTG 135 GAG TGG GTC GCA TTC ATT AGT AAT CGT GGT GGT AGC ACC TAC TAT 180 CCA GAC ACT GTA AAG GGC CGA TTC ACC GTC TCC AGA GAC AAT GCC 225 AAG AAT ATC CTG TAT CTG CAA ATG ACC AGT CTG AAG TCT GAG GAC 270 ACG GCC ATG TAT TAC TGT GCA AGA CAT AAT TAT GGA GGA ATG GAC 315 TAC TGG GGC CAA GGG ACC ACG GTC ACC GTC TCC TCA 351

【００８４】配列番号：４４配列の長さ：３３６配列の型：核酸鎖の数：二本鎖トポロジー：直鎖状配列の種類：ｃＤＮＡｔｏｍＲＮＡ起源細胞の種類：マウスハイブリドーマ細胞ＣＲＡ２配列 GAC ATC CAG ATG CCC CAG TCT CCA GCT TCT TTG GCT GTG TCT CTA 45 GGG CAG AGG GCC ACC ATA TCC TGC AGA GCC AGT GAA AGT GTT GAT 90 AGT TAT GGC AAC AGT TTT ATG CAC TGG TAC CAG CAG AAA CCA GGA 135 CAG TCA CCC AAA CTC CTC ATG TAT CTT GCA TCC AAC CTA GAA TCT 180 GGG GTC CCT GCC AGG TTC ACT GGC AGT GGG TCT AGG ACA GAC TTC 225 ACC CTC ACC ATT GAT CCT GTG GAG GCT GAT GAT GCT GCA ACC TAT 270 TAC TGT CAG CAA AAT AAT GAG GAT CCG TAC ACG TTC GGA GGG GGG 315 ACC AAG CTG GAA ATC AAA CGG 336

【００８５】配列番号：４５配列の長さ：３５１配列の型：核酸鎖の数：二本鎖トポロジー：直鎖状配列の種類：ｃＤＮＡｔｏｍＲＮＡ起源細胞の種類：マウスハイブリドーマ細胞ＣＲＡ３配列 CAG GTG AAG CTG CAG GAG TCA GGG GGA GGT TTA GTG CAG CCT GGA 45 GGG TCC CTG AAA GTC TCC TGT ACA GCC TCT GGA TTC ACT TTC AGT 90 ACC TAT CCC ATG TCC TGG GTT CGC CAG ACT CCA GAG AAG AGG CTG 135 GAG TGG GTC GCA TAC ATA AGT AAT CGT GGT GGT AGC ACC TAC TAT 180 CCA GAC ACT ATA ATG GGC CGA TTC ACC ATC TCC AGA GAC AAT GCC 225 AAG AAC ACC CTG TAC CTA CAA ATG AAC AGT CTG AAG TCT GAG GAC 270 ACG GCC ATG TAT TAC TGT GCA AGA CAT AAC TAT GGA GGG ATG GAC 315 TAC TGG GGC CAA GGG ACC ACG GTC ACC GTC TCC TCA 351

【００８６】配列番号：４６配列の長さ：３３６配列の型：核酸鎖の数：二本鎖トポロジー：直鎖状配列の種類：ｃＤＮＡｔｏｍＲＮＡ起源細胞の種類：マウスハイブリドーマ細胞ＣＲＡ３配列 GAC ATC CAG ATG ACG CAG TCT CCA GCT TCT TTG GCT GTG TCT CTA 45 GGG CAG AGG GCC ACC ATA TCC TGC AGA GCC AGT GAA AGT GTT GAT 90 AGT TAT GGC AAT AGT TTT ATG CAC TGG TAC CAG CAG AAA CCA GGA 135 CAG CCA CCC AAA CTC CTC ATG TAT CTT GCA TCC AAC CTA GAA TCT 180 GGG GTC CCT GCC AGG TTC AGT GGC AGT GGG TCT AGG ACA CAC TTC 225 ACC CTC ACC ATT GAT CCT GTG GAG GCT GAT GAT GCT GCA ACC TAT 270 TAC TGT CAG CAA AAT AAT GAG GAT CCG TAC ACG TTC GGA GGG GGG 315 ACC AAG CTG GAA ATC AAA CGG 336

【００８７】配列番号：４７配列の長さ：３５４配列の型：核酸鎖の数：二本鎖トポロジー：直鎖状配列の種類：ｃＤＮＡｔｏｍＲＮＡ起源細胞の種類：マウスハイブリドーマ細胞ＣＲＡ４配列 CAG GTG AAA CTG CAG CAG TCA GGA CCT GAG CTG GTG AAG CCT GGG 45 GCT TCA GTG AGG ATA TCC TGC AAG GCT TCT GGC TAC ACC TTC ACA 90 AGC TAC TAT ATA CAC TGG GTG AAG CAG AGG CCT GGA CAG GGA CTT 135 GAG TGG ATT GGA TGG ATT TAT CCT AAA AAT GTT AAT ACT AAG TAC 180 AAT GAG AGG TTC AAG GGC AAG GCC ACA CTG ACT ACA GAC AAA TCC 225 TCC AGC ACA GCC TAC ATG CAG CTC AGC AGC CTG ACC TCT GAG GAC 270 TCT GCG GTC TAT TTC TGT GCG CTT ACA GCT CGG GCT ACG GCT ATG 315 GAC TAC TGG GGC CAA GGG ACC ACG GTC ACC GTC TCC TCA 354

【００８８】配列番号：４８配列の長さ：３２４配列の型：核酸鎖の数：二本鎖トポロジー：直鎖状配列の種類：ｃＤＮＡｔｏｍＲＮＡ起源細胞の種類：マウスハイブリドーマ細胞ＣＲＡ４配列 GAC ATC CAG ATG ACT CAG TCT CCA GCC TCC CTA TCT GTA TCT GTG 45 GGA GAA ACT GTC ACC ATC ACA TGT CGA GCA AGT GAG AAT ATT TAC 90 AGT AAT TTA GCA TGG TAT CAG CAG AAA CAG GGA AAA TCT CCT CAG 135 CTC CTG GTC TAT GCT GCA ACA AAC TTA GCA GAT GGT GTG CCA TCA 180 AGG TTC AGT GGC AGT GGA TCA GGC ACA CAG TAT TCC CTC AAG ATC 225 AAC AGC CTG CAG TCT GAA GAT TTT GGG AGT TAT TAC TGT CAA CAT 270 TTT TGG GGT ACT CCG TGG ACG TTC GGT GGA GGC ACC AAG CTG GAA 315 ATC AAA CGG 324

【００８９】配列番号：４９配列の長さ：３５１配列の型：核酸鎖の数：二本鎖トポロジー：直鎖状配列の種類：ｃＤＮＡｔｏｍＲＮＡ起源細胞の種類：マウスハイブリドーマ細胞ＣＲＡ５配列 CAG GTG AAG CTG CAG CAG TCT GGG GGA GGC TTA GTG CAG CCT GGA 45 GGG TCC CTG AAA CTC TCC TGT GCA ACC TCT GGA TTT ACT GAC TAT 90 TAC ATG TTT TGG GTT CGC CAG ACT CCA GAG AAG AAG CTG GAG TGG 135 GTC GCA TAC ATT AGT GAT GGT GAT ATT AGC ACC TAT TAT CCA GAC 180 ACT GTA AAG GGC CGA TTC ACC ATC TCC AGA GAC AAT GCC AAG AAC 225 ACC CTG TAC CTG CAA ATG AGC CGT CTG AAG TCT GAG GAC ACA GCC 270 ATG TAT TAC TGT GCA AGA GGA AAC TAT AGG TAC GGC TAT GCT GTG 315 GAC TAC TGG GGC CAA GGG ACC ACG GTC ACC GTC TCC TCA 354

【００９０】配列番号：５０配列の長さ：３２７配列の型：核酸鎖の数：二本鎖トポロジー：直鎖状配列の種類：ｃＤＮＡｔｏｍＲＮＡ起源細胞の種類：マウスハイブリドーマ細胞ＣＲＡ５配列 GAC ATC CAG ATG ACC CAG TCT CCA ACC ACC ATG GCT GCA TCT CCC 45 GGG GAG AAG ATC ACT ATC ACC TGC AGT GCC AGC TCA AGT ATA AGT 90 TCC AAT TAC TTG CAT TGG TAT CAG CAG AAG CCA GGA TTC TCC CCT 135 AAA CTC TTG ATT TAT AGG ACA TCC AAT CTG GCT TCT GGA GTC CCA 180 GCT CGC TTC AGT GGC AGT GGG TCT GGG ACC TCT TAC TCT CTC ACA 225 ATT GGC ACC ATG GAG GCT GAA GAT GTT GCC ACT TAC TAC TGC CAG 270 CAG GGT AGT AGT ATA CCA CTC ACG TTC GGT GCT GGG ACC AAG CTG 315 GAG CTG AAA CGG 327

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号ＦＩＣ１２Ｐ 21/08 Ｃ１２Ｎ 5/00 Ｂ (72)発明者羅智靖千葉県千葉市花見川区花園２−14−13 (72)発明者奥村康千葉県千葉市中央区松波１−14−９ (72)発明者高井敏朗東京都大田区大森北２−13−１アサヒビール株式会社中央研究所内 (72)発明者奥村康東京都大田区大森北２−13−１アサヒビール株式会社中央研究所内 (72)発明者佐藤恵士千葉県千葉市緑区高田町396−24 シティーハイムユートピアＹ−102 (72)発明者渋谷一郎千葉県柏市増尾字松山967番地ニッカウヰスキー株式会社生産技術研究所内 (56)参考文献国際公開92／011018（ＷＯ，Ａ１) 代謝，1990，Ｖｏｌ．27，増刊号，ｐｐ．103−112 ＴｈｅＪｏｕｒｎａｌｏｆＢｉｏｌｏｇｉｃａｌＣｈｅｍｉｓｔｒｙ，1991，Ｖｏｌ．266，Ｎｏ．４, ｐｐ．2639−2646 ＴｈｅＪｏｕｒｎａｌｏｆＩｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，1988，Ｖｏｌ. 140，Ｎｏ．８，ｐｐ．2585−2588 Ｎａｔｕｒｅ，1988，Ｖｏｌ．332, Ｎｏ．6162，ｐｐ．323−327 (58)調査した分野(Int.Cl.⁷，ＤＢ名) C12N 15/09 C07K 16/28 C12P 21/08

Claims

(57)【特許請求の範囲】

【請求項１】下記の塩基配列からなるＤＮＡ： CAG GTG CAG CTG CAG GAG TCA GGG GGA GGT TTA GTG CAG CCT GGA GGG TCC CTG AAA CTC TCC TGT ACA GCC TCT GGA TTC ACT TTC AGC ACC TAT CCC ATG TCT TGG GTT CGC CAG ACT CCA GAG AAG AGG CTG GAG TGG GTC GCA TTC ATT AGT AAT CGT GGT GGT AGC ACC TAC TAT CCA GAC ACT GTA AAG GGC CGA TTC ACC GTC TCC AGA GAC AAT GCC AAG AAT ATC CTG TAT CTG CAA ATG ACC AGT CTG AAG TCT GAG GAC ACG GCC ATG TAT TAC TGT GCA AGA CAT AAT TAT GGA GGA ATG GAC TAC TGG GGC CAA GGG ACC ACG GTC ACC GTC TCC TCA
【請求項２】下記の塩基配列からなるＤＮＡ： GAC ATC CAG ATG CCC CAG TCT CCA GCT TCT TTG GCT GTG TCT CTA GGG CAG AGG GCC ACC ATA TCC TGC AGA GCC AGT GAA AGT GTT GAT AGT TAT GGC AAC AGT TTT ATG CAC TGG TAC CAG CAG AAA CCA GGA CAG TCA CCC AAA CTC CTC ATG TAT CTT GCA TCC AAC CTA GAA TCT GGG GTC CCT GCC AGG TTC ACT GGC AGT GGG TCT AGG ACA GAC TTC ACC CTC ACC ATT GAT CCT GTG GAG GCT GAT GAT GCT GCA ACC TAT TAC TGT CAG CAA AAT AAT GAG GAT CCG TAC ACG TTC GGA GGG GGG ACC AAG CTG GAA ATC AAA CGG
【請求項３】下記の塩基配列からなるＤＮＡ： CAG GTG AAA CTG CAG CAG TCA GGA CCT GAG CTG GTG AAG CCT GGG GCT TCA GTG AGG ATA TCC TGC AAG GCT TCT GGC TAC ACC TTC ACA AGC TAC TAT ATA CAC TGG GTG AAG CAG AGG CCT GGA CAG GGA CTT GAG TGG ATT GGA TGG ATT TAT CCT AAA AAT GTT AAT ACT AAG TAC AAT GAG AGG TTC AAG GGC AAG GCC ACA CTG ACT ACA GAC AAA TCC TCC AGC ACA GCC TAC ATG CAG CTC AGC AGC CTG ACC TCT GAG GAC TCT GCG GTC TAT TTC TGT GCG CTT ACA GCT CGG GCT ACG GCT ATG GAC TAC TGG GGC CAA GGG ACC ACG GTC ACC GTC TCC TCA
【請求項４】下記の塩基配列からなるＤＮＡ： GAC ATC CAG ATG ACT CAG TCT CCA GCC TCC CTA TCT GTA TCT GTG GGA GAA ACT GTC ACC ATC ACA TGT CGA GCA AGT GAG AAT ATT TAC AGT AAT TTA GCA TGG TAT CAG CAG AAA CAG GGA AAA TCT CCT CAG CTC CTG GTC TAT GCT GCA ACA AAC TTA GCA GAT GGT GTG CCA TCA AGG TTC AGT GGC AGT GGA TCA GGC ACA CAG TAT TCC CTC AAG ATC AAC AGC CTG CAG TCT GAA GAT TTT GGG AGT TAT TAC TGT CAA CAT TTT TGG GGT ACT CCG TGG ACG TTC GGT GGA GGC ACC AAG CTG GAA ATC AAA CGG