JP3236251B2 - 特定成分濃度の測定方法 - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、液状試料に含まれ
る特定成分の濃度、とりわけ人をはじめとする動物から
採取した尿のタンパク値（アルブミン濃度）および糖値
（グルコース濃度）の測定方法および測定装置に関する
ものである。

【０００２】

【従来の技術】尿糖値および尿タンパク値は、健康状態
の一部を反映している。そこで、容易かつ正確にこれら
を測定する方法が求められている。従来、尿検査は、
糖、タンパク質等、個々の検査項目に応じた試薬を含浸
した試験紙を尿に浸し、これの呈色反応を分光測定機等
によって観測することにより行われていた。この方法に
よると、検査項目ごとに異なる試験紙が必要である。ま
た、１回の検査ごとに新たな試験紙が必要である。した
がって、ランニングコストが高い。さらに、省力化のた
めの自動化にも限界がある。家庭において使用される場
合は、素人に試験紙の設定及び交換を要求することにな
る。この作業は、比較的嫌われるため、尿検査装置の家
庭への普及を妨げていた。

【０００３】これに対して、国際公開番号第ＷＯ９７／
１８４７０号公報には、試験紙等の消耗品を必要としな
い尿検査方法が提案されている。グルコースおよびアル
ブミンが旋光性を示すのに対して、その他の尿成分はほ
とんど旋光性を示さない。そこで、この尿検査方法で
は、尿の旋光度を測定することによって尿糖値および尿
タンパク値を求めている。旋光性物質を含む液体に光を
伝搬させると、旋光性物質の濃度に比例して光の偏光方
向が回転する。すなわち、下式が満たされる。 Ａ＝Ｌ×α （１） 但し、 Ｌ：測定光路長 Ａ：旋光度[度] α：旋光性物質の比旋光度

【０００４】例えば濃度が１００ｍｇ／ｄｌのグルコー
ス水溶液中を波長５８９ｎｍの光が１００ｍｍ伝搬する
と、光の偏光方向は５０×１０^ー3度回転する。そこで、
このような特性を利用して、上式より尿糖値および尿タ
ンパク値を求めている。２０℃におけるグルコース及び
アルブミンの水溶液の比旋光度を表１に示す。

【０００５】

【表１】

【０００６】液体中に旋光性物質がＮ種類含まれる場合
には、以下のようになる。 Ａ＝Ｌ×（α₁×Ｃ₁＋α₂×Ｃ₂＋・・・＋α_N×Ｃ_N） （２） 但し、 Ｌ ：測定光路長 Ａ ：旋光度[度] α_n：物質ｎ（但し、ｎは１〜Ｎの自然数）の比旋光度 Ｃ_n：物質ｎの濃度［ｋｇ／ｌ］ α_n：物質ｎの比旋光度

【０００７】式（２）より明らかなように、測定で得ら
れる液体の旋光度には、複数の旋光性物質濃度の情報が
含まれる。すなわち、尿の場合には、得られた旋光度に
グルコースによる旋光とアルブミンによる旋光の和が含
まれる。ここで、比旋光度は伝搬させる光の波長により
異なることから、複数の波長の光を用いてそれぞれ旋光
度を測定し、式（２）の連立方程式より、尿糖値および
尿タンパク値を求めている。

【０００８】この方法によると、一種類の光源を用いた
場合には、尿糖値および尿タンパク値の一方が既知であ
れば他方を算出することが可能であるが、尿糖値および
尿タンパク値がともに未知の場合には、複数の光源が必
要となる。さらに、表１に示すように、グルコースの比
旋光度の光の波長の変化に対する変化率とアルブミンの
それに大きな差がないことから、複数の光源を用いても
尿糖値および尿タンパク値の高精度の判定は期待できな
い。特に尿タンパク値は尿糖値に比べて一桁小さいこと
から、精度は低い。

【０００９】

【発明が解決しようとする課題】本発明は、以上のよう
な問題点を解決し、液状試料の特定成分濃度、とりわけ
タンパク質濃度を精度良く判定することができる尿検査
に最適な方法を提供することを目的とする。

【００１０】

【課題を解決するための手段】本発明では、尿等のタン
パク質を含む液状試料を加熱して白濁化させ、同試料に
光を投射し、試料を透過した光または試料より散乱した
光の強度を測定する。これにより、試料のタンパク質濃
度を精度よく判定することができる。しかしながら、ま
れに加熱しても白濁しにくい試料がある。例えばｐＨが
異常に高い尿では、尿の白濁すなわちアルブミンの凝結
は起こりにくい。このように加熱によっても白濁しにく
い試料に対しては、加熱する前の試料に２価の金属イオ
ンまたは酸を添加して、加熱による白濁化を促進させ
る。

【００１１】

【発明の実施の形態】本発明では、あらかじめ加熱処理
を加えて白濁化した被検試料に光を投射して、その透過
光または散乱光の強度を測定する。また、タンパク質を
含む液状試料を加熱しながら、同試料に光を投射して、
その透過光または散乱光の強度を測定し、試料温度に対
するこれらの光の強度の変化量からタンパク質濃度を判
定してもよい。透過光または散乱光の強度の測定は、連
続的に行う必要はなく、異なる２つの温度において透過
光または散乱光の強度を測定し、これら２点において得
られた透過光または散乱光の強度の比を用いてもよい。
例えば、６０〜８０℃のうちの２点において測定し、こ
れら２点における透過光または散乱光の強度の比からタ
ンパク質濃度を判定することができる。タンパク質を含
む試料の白濁化は、温度の上昇とともに進行する。そこ
で、試料を加熱しながら、同時にその透過光または散乱
光を検知することにより、これらの温度に対する変化量
から試料のタンパク質濃度を判定することができる。例
えば、７０℃の時の透過光強度と、７５℃の透過光強度
の比からタンパク質濃度を算出する。これによって、加
熱前の試料の透過率の影響を排除できる。また、タンパ
ク質以外の物質による散乱等の影響も排除できる。

【００１２】また、試料にタンパク質以外の旋光性物質
が含まれる場合、加熱前に試料の旋光度を測定する。こ
れにより、尿検査においては、尿タンパク値とともに尿
糖値を精度良く判定することができる。まず、透過光量
または散乱光量を検量線と比較して尿タンパク値を算出
し、得られた尿タンパク値と尿の旋光度を式（２）に代
入すれば尿糖値が得られる。本発明の特定成分濃度の測
定方法は、尿の他、たとえば培養液などのタンパク質濃
度の判定にも有用である。

【００１３】

【実施例】本発明の特定成分濃度の測定方法は、液状試
料のタンパク質濃度を精度良く判定することが可能であ
ることから、とりわけ尿検査に有用である。すなわち、
本発明によると、消耗品を必要とせずに尿タンパク値を
精度良く測定することが可能になる。

【００１４】健常な成人は、１日当たり通常１０００〜
１５００ｍｌの尿を排出する。このうち、総固形分は５
０〜７０ｇである。固形分のうち、およそ２５ｇ前後
が、塩化ナトリウムおよび塩化カリウムを主とする無機
物で、これらはほとんどがイオン化した状態で尿中に溶
解している。残りが有機物で、尿素および尿酸を主とす
るが、リン酸や、僅かながら糖すなわちグルコースやタ
ンパク質も存在する。尿中のタンパク質は基本的にはア
ルブミンである。グルコースは、１日当たり通常、０．
１３〜０．５ｇ尿中に排出される。これと尿量から、尿
のグルコース濃度すなわち尿糖値を概算すると、平均的
には、およそ５０ｍｇ／ｄｌ以下である。しかし、糖尿
病患者の場合、これが数百ｍｇ／ｄｌになり、ときには
数千ｍｇ／ｄｌに達することもある。すなわち、通常値
に対して、およそ１〜２桁程度増加する。一方、アルブ
ミンは、通常、グルコースより更に少なく、１日当たり
３〜６０ｍｇ尿中に排出される。これと尿量から概算す
ると、尿のアルブミン濃度すなわち尿タンパク値は、通
常、およそ６ｍｇ／ｄｌ以下である。しかし、腎臓疾患
を有する患者の尿タンパク値は、１００ｍｇ／ｄｌ以
上、すなわち通常値に対して１０倍以上になることもあ
る。

【００１５】尿は、６０〜８０℃に加熱すると白濁す
る。これは尿に含まれるタンパク質であるアルブミンが
凝結して巨大なコロイドになるためである。アルブミン
以外の尿成分は、いずれも分子量が小さく、これらによ
る光の散乱は無視することができる。また、この程度の
温度に加熱しても、グルコース等の他の成分は変化しな
い。したがって、白濁化した尿に投射した光のうち尿を
透過した光または尿より散乱した光の強度は、尿タンパ
ク値に依存する。尿タンパク値の取りうるアルブミン濃
度範囲においては、透過光の強度はほぼ尿タンパク値に
比例すると考えられる。したがって、白濁した尿に光を
投射し、その散乱光または透過光の強度を測定し、これ
をあらかじめ作成した検量線（すなわち、アルブミン水
溶液の濃度とその散乱光または透過光の強度の関係式）
と比較することにより、尿のアルブミン濃度すなわちタ
ンパク値を判定することができる。

【００１６】しかしながら、組成比によっては、まれに
一定量のタンパク質が含まれていながら加熱しても白濁
しない。例えばｐＨが異常に高い尿は、白濁しにくい。
このような被検試料の場合には、カルシウムイオンやマ
グネシウムイオンなどの２価の金属イオンを添加するこ
とにより、アルブミンの凝結を促すことができる。これ
らは、例えば塩化物の状態で添加する。カルシウムイオ
ンを用いる場合には、試料１ｄｌに対して０．２ミリモ
ル以上添加することが望ましい。マグネシウムイオンを
用いる場合には、被検試料１ｄｌに対して０．１ミリモ
ル以上添加することが好ましい。また、このような２価
金属イオンに代えて酸を被検試料に添加し、被検試料の
ｐＨを低く、好ましくは５．５以下にすることによって
も、同様にアルブミンの凝結を促進させることができ
る。添加する酸としては、例えば酢酸やリン酸を用い
る。

【００１７】尿検査に用いる場合には、好ましくは、波
長が５００ｎｍ以上の光を尿に投射する。旋光性物質の
比旋光度は、旋光分散による異常分散が出現するまで
は、表１に示すように波長が短くなるにつれて大きくな
る。従って、より短い波長の光を用いたほうが、高い精
度での判定が可能になる。しかしながら、一般に、波長
が５００ｎｍ以下の光は、ウロクローム等の尿成分によ
る吸収が大きくなるため、このような波長の光を用いて
測定すると、精度はかえって悪化する場合がある。ま
た、上記のように、尿の旋光度を測定すると尿に含まれ
る旋光性物質、すなわちグルコースおよびアルブミンの
情報を得ることができる。そこで、あらかじめ尿の旋光
度を測定しておき、その後、上記のように尿を加熱して
白濁させてその白濁の度合いを測定することにより、併
せて尿糖値を精度よく判定することができる。これによ
り、消耗品が不要で、維持管理が容易な尿検査方法を実
現することができる。以下、本発明の実施例を図面を用
いて詳細に説明する。

【００１８】《実施例１》本実施例で用いた測定装置の
構成を図１に示す。投射モジュール１は、半導体レーザ
を光源とする光学系と、半導体レーザの駆動回路を備え
る。この投射モジュール１は、波長が６７０ｎｍで、強
度が５ｍＷの略平行光を、サンプルセル２に投射する。
サンプルセル２は、円筒形で、両端は直径１０ｍｍのガ
ラス製で投射モジュール１より投射された光を透過させ
る。このサンプルセル２の実質光路長は５０ｍｍであ
る。光センサ３は、投射モジュール１から投射され、サ
ンプルセル２を透過した光を検知する。ロックインアン
プ４は、光センサ３の出力信号を、信号発生器５が投射
モジュール１に発した変調信号を参照して位相敏感検波
し、透過光量に相当する電気信号を出力する。ここで、
信号発生器５は、投射モジュール１に変調信号を供給
し、この信号と同期して投射光をパルス変調させる。

【００１９】濃度がそれぞれ１００、３００および１０
００ｍｇ／ｄｌのアルブミン水溶液を調製した。つい
で、これら水溶液および純水１ｄｌに塩化カルシウムを
２２．２ｍｇ（０．２ミリモルに相当）溶解させた。得
られた水溶液をそれぞれ８０℃で５分間加熱し、３５℃
まで冷却した。加熱処理された水溶液をそれぞれサンプ
ルセル２に注入し、透過光を観測した。得られた透過光
強度を縦軸に、アルブミン濃度を横軸にプロットして、
図２に示す検量線を作成した。

【００２０】次に、試験紙を用いて尿タンパク値が１０
０ｍｇ／ｄｌ以上、２５０ｍｇ／ｄｌ以下であると判定
されたｐＨが７．２の尿を８０℃で５分間加熱し、３５
℃まで冷却した。これを比較例１とする。ついでこの尿
を上記の測定装置のサンプルセル２に注入し、透過光を
観測した。比較例１に用いた尿１ｄｌに塩化カルシウム
を２２．２ｍｇ溶解させた。ついで、この溶液を８０℃
で５分間加熱し、３５℃まで冷却した。これを試料Ａと
する。この尿をサンプルセル２に注入して同様に透過光
を観測した。

【００２１】また、試験紙を用いて尿タンパク値が３０
０ｍｇ／ｄｌ以上、５００ｍｇ／ｄｌ以下であると判定
されたｐＨが７．０の尿１ｄｌに塩化カルシウムを２
２．２ｍｇ溶解させた。ついで、この尿を８０℃で５分
間加熱し、３５℃まで冷却した。これを比較例２とす
る。さらに、この尿をサンプルセル２に注入し、上記の
測定装置を用いて透過光を観測した。比較例２に用いた
尿１ｄｌに塩化カルシウムを２２．２ｍｇ溶解させた。
ついで、この溶液を８０℃で５分間加熱し、３５℃まで
冷却した。これを試料Ｂとする。この尿をサンプルセル
２に注入して透過光を観測した。

【００２２】以上の各尿の透過光強度を図２に示す。な
お、図中矢印で示す範囲は、試験紙を用いて得られた尿
タンパク値範囲を示す。図２より、比較例１および比較
例２は、加熱による白濁化の度合いが小さく、得られた
透過光強度が検量線から大きく外れていることがわか
る。試料Ａおよび試料Ｂのアルブミン濃度を検量線より
求めると、それぞれ１２０ｍｇ／ｄｌおよび４００ｍｇ
／ｄｌとなる。これらはそれぞれ試験紙を用いて得られ
た値と一致する。次に、塩化カルシウムの添加量に対す
る尿の白濁化の度合いを目視により観察した。その結
果、塩化カルシウムの添加量を大きくすると、尿がより
白濁化することが確認された。このとき、尿１ｄｌに対
する塩化カルシウムの添加量が０．２ミリモルを超える
と、白濁化の度合いはほとんど変化しなかった。これよ
り、尿１ｄｌに対して塩化カルシウムを０．２ミリモル
以上添加することにより、尿中のアルブミンをすべて凝
結させることができると考えられる。以上のように、加
熱によっても白濁しにくい尿の場合にも塩化カルシウム
を添加することによって尿中のアルブミンを凝結させる
ことができ、精度よく尿タンパク値を判定することがで
きる。特に、高精度の測定を行うためには、尿１ｄｌに
対して塩化カルシウムを０．２ミリモル以上添加するこ
とが好ましい。

【００２３】また、上記と同様の尿に塩化マグネシウム
を添加して行った同様の検討により、塩化マグネシウム
を添加しても、同様に尿中のアルブミンの凝結が促進さ
れることが確認された。このとき、尿１ｄｌに対する塩
化マグネシウムの添加量が９．５ｍｇ（０．１ミリモル
に相当）を超えると、白濁化の度合いはほとんど変化し
なかった。これより、尿１ｄｌに対して塩化マグネシウ
ムを０．１ミリモル以上添加することによって、より高
精度で測定できることがわかる。実際に尿１ｄｌに対し
て塩化マグネシウムを９．５ｍｇ溶解させ、これを用い
て上記と同様に透過光を観測した。その結果、塩化マグ
ネシウムを用いた場合にも精度よく測定できることが確
認された。以上のように、２価の金属イオンを添加する
ことによって、白濁しにくい尿においても精度よく尿タ
ンパク値を判定することができる。ただし、これら２価
の金属イオンを添加することにより、無添加の場合と比
べて検量線が変動する。たとえば、尿１ｄｌに対して塩
化カルシウムを０．２ミリモル以上添加した場合にも、
若干ではあるが塩化カルシウムの添加量に応じて検量線
は変動する。したがって、いずれの場合にも、測定しよ
うとする尿に添加する量と同量の２価金属イオンを溶解
させたアルブミン水溶液を用いて検量線を作成する必要
がある。

【００２４】《実施例２》本実施例では、加熱しても白
濁化しにくい尿に対して酸を添加する。尿に酢酸等の酸
を添加して尿のｐＨを低下させても、アルブミンの凝結
を促進することができる。上記実施例で比較例２に用い
たものと同様の尿１ｄｌに濃度が１％の酢酸水溶液を
０．１ｍｌ添加して、尿を白濁させた。酢酸水溶液の添
加により尿のｐＨは５．５になった。ついで、これを８
０℃で５分間加熱し、３５℃まで冷却した。これを試料
Ｃとする。一方、濃度がそれぞれ１００、３００および
１０００ｍｇ／ｄｌのアルブミン水溶液を調製した。こ
れら水溶液および純水１ｄｌに上記と同様の酢酸水溶液
を０．１ｍｌ添加した。ついで、これら水溶液をそれぞ
れ８０℃で５分間加熱し、３５℃まで冷却した。加熱処
理された尿および水溶液をそれぞれサンプルセルに注入
し、実施例１と同様に透過光量を測定した。その結果を
図３に示す。図に示すように、２価金属イオンに代えて
酸を添加した場合にも、精度よく尿タンパク値を判定す
ることができる。また、酢酸の添加量を増やして、尿の
ｐＨをさらに低くしても同様に精度よく尿タンパク値を
判定することができることが確認された。また、酢酸に
代えてリン酸を用いてｐＨを５．５以下に調整しても同
様の効果が得られた。

【００２５】《実施例３》本実施例では、液状試料から
の散乱光を観測することにより、試料中のタンパク質濃
度を測定する方法について説明する。本実施例で用いた
測定装置の概略を図４に示す。実施例１と同様に、投射
モジュール１１より、投射光をサンプルセル１２に投射
する。信号発生器１５は、投射モジュール１１に変調信
号を供給し、この信号と同期して投射モジュール１１の
投射する光をパルス変調させる。サンプルセル１２中に
はタンパク質を含む液状試料が注入される。光センサ１
３は、投射モジュール１１から投射され、サンプルセル
１２中の試料を伝搬する際に散乱した光を検知し、検知
した光の強度に相当する信号を出力する。ロックインア
ンプ１４は、光センサ１３の出力電圧を、信号発生器１
５が投射モジュール１１に発した変調信号を参照して、
位相敏感検波する。

【００２６】あらかじめ尿試験紙によってアルブミン濃
度が１０ｍｇ／ｄｌ以下と判定された尿を溶媒として、
濃度１００、３００および１０００ｍｇ／ｄｌのアルブ
ミン溶液を調製した。ついで、得られたアルブミン溶液
および溶媒に用いた尿１ｄｌに塩化マグネシウムを９．
５ｍｇ添加して溶解させた。これらをそれぞれ、８０℃
で５分間加熱した後、３５℃まで冷却した。ついで、こ
れらの溶液をサンプルセル１２に注入し、その散乱光を
観測した。この結果、すなわちロックインアンプ１４の
出力電圧を図５に示す。ここで、出力電圧を縦軸に対数
で示し、アルブミン溶液の濃度を横軸に示す。濃度０は
溶媒単独すなわち尿を表している。このように、散乱光
の測定においても、出力電圧は、アルブミン濃度に対し
て直線で近似される。したがって、この直線を検量線と
することによって、尿中アルブミン濃度すなわち尿タン
パク値を判定することができる。

【００２７】あらかじめ尿試験紙によってアルブミン濃
度が１００ｍｇ／ｄｌ以上、かつ２５０ｍｇ／ｄｌ以下
と判定された尿を、本装置を用いて検査した。その結
果、ロックインアンプ６４の出力電圧は、０．１２Ｖで
あった。図５に示す検量線からアルブミン濃度を求める
と、１２０ｍｇ／ｄｌとなった。これは試験紙による結
果と一致する。また、この装置を用いて、尿試験紙によ
ってアルブミン濃度が３００ｍｇ／ｄｌ以上、５００ｍ
ｇ／ｄｌ以下と判定された尿を検査した。その結果、ロ
ックインアンプ１４の出力信号強度は０．３５Ｖを示
し、図５に示す検量線から求めたアルブミン濃度は４０
０ｍｇ／ｄｌとなった。これは試験紙による結果と一致
する。

【００２８】以上のように、本実施例のように、散乱光
を観測することによっても、尿タンパク値を精度よく判
定することができる。なお、塩化マグネシウムに代えて
塩化カルシウムを添加しても、同様に尿中のアルブミン
の凝結が促進されることが確認された。以上のように、
試料に２価の金属イオンを添加し、その散乱光を観測す
ることによっても、同様に試料中のタンパク質濃度を測
定することができる。また、試料に酢酸等の酸を添加し
てそのｐＨを５．５以下に調整してもタンパク質の凝結
を促進することができ、同様に試料中のタンパク質濃度
を測定することができる。

【００２９】《実施例４》本実施例で用いた測定装置の
構成を図６に示す。本実施例では、尿などのタンパク質
を含む液状試料を加熱し、さらにその温度を測定しなが
ら、試料を透過する光の強度を測定する。実施例１で用
いたものと同様に、投射モジュール２１は光をサンプル
セル２２に投射する。サンプルセル２２中には試料が注
入される。光センサ２３は、投射モジュール２１から投
射された後、サンプルセル２２中の試料を伝搬した光を
検知する。ここで、信号発生器２５は、投射モジュール
２１に変調信号を供給し、この信号と同期して投射光を
パルス変調させる。ロックインアンプ２４は、光センサ
２３の出力信号を、信号発生器２５が投射モジュール２
１に発した変調信号を参照して、位相敏感検波する。こ
のロックインアンプ２４の出力電圧が透過光強度に相当
する。サンプルセル２２の周囲には、サンプルセル２２
内の試料を加熱するためのソレノイドコイル状のヒータ
２８が配されている。このヒータ２８はエナメル線を５
００回巻いて構成されている。コイル状のヒータドライ
バ２９は、コンピュータ２７からの指示に従ってヒータ
２８に最大５Ａの電流を流す。熱電対２０は、サンプル
セル２２に密着して設置してあり、実質的にサンプルセ
ル２２内の試料の温度を検知する。温度指示計２６は、
熱電対２０が検知した試料の温度を表示するとともに、
この値をコンピュータ２７に送る。ロックインアンプ２
４の出力すなわち透過光強度を示す値も、コンピュータ
２７に送られる。これにより、コンピュータ２７は、あ
らかじめ設定されたプログラムにしたがって、試料を加
熱し、同時にその温度と透過光の強度を測定する。

【００３０】以下、本実施例の測定方法について説明す
る。あらかじめ尿試験紙によってアルブミン濃度が１０
ｍｇ／ｄｌ以下であると判定された尿を溶媒として、濃
度が１００、３００および１０００ｍｇ／ｄｌのアルブ
ミン溶液をそれぞれ調製した。得られたアルブミン溶液
および溶媒に用いた尿にそれぞれ濃度１重量％の酢酸水
溶液を０．１ｍｌ添加した。酢酸の添加によりこれらの
ｐＨは、いずれも約５．５になった。ついで、これら
を、それぞれサンプルセル２２に注入し、３５℃から８
０℃まで、加熱速度を２℃／分として加熱した。試料を
加熱しながら、６秒おきに透過光を測定した。その結果
を図７に示す。ここで、試料の温度を横軸に、各試料の
透過光強度に対応したロックインアンプの出力電圧を縦
軸に表す。また、下式で定義する各アルブミン濃度の溶
液に対する７０℃の透過光強度と７５℃の透過光強度の
比Ｒを図８に示す。 Ｒ＝（７５℃での透過光強度）／（７０℃での透過光強度） （３） ここで、Ｒは縦軸に対数表示している。図８より明らか
なように、Ｒとアルブミン濃度の関係は直線で近似され
る。したがって、この直線を検量線とすることによっ
て、試料のタンパク質濃度を判定することができる。本
実施例の測定方法によると、加熱しながら、異なる２点
の温度における透過光強度の比に基づいてタンパク質濃
度を判定することから、加熱前の試料の透過率等の妨害
要因を除くことができ、実施例１よりさらに高精度の測
定が可能になる。

【００３１】あらかじめ尿試験紙によって、アルブミン
濃度が１００ｍｇ／ｄｌ以上、かつ２５０ｍｇ／ｄｌ以
下と判定された尿を上記測定装置を用いて判定した。そ
の結果、Ｒは、０．８９となった。これと図８の検量線
からアルブミン濃度を求めると、１２０ｍｇ／ｄｌとな
った。これは試験紙による結果と一致する。また、尿試
験紙によって、アルブミン濃度が３００ｍｇ／ｄｌ以
上、かつ５００ｍｇ／ｄｌ以下と判定された尿を同様に
検査した。その結果、Ｒは０．６７となり、これを用い
て図８の検量線からアルブミン濃度を求めると、４００
ｍｇ／ｄｌとなった。これは試験紙による結果と一致す
る。以上のように、本実施例のように、互いに異なる温
度における透過光の強度の比を用いても、尿タンパク値
を精度よく判定することができる。

【００３２】《実施例５》本実施例で用いた測定装置の
構成を図９に示す。本実施例では、実施例４と同様に液
状試料を加熱し、液状試料の温度を測定しながら、液状
試料に光を投射し、その散乱光を観測する。実施例１と
同様に、投射モジュール３１より、投射光をサンプルセ
ル３２に投射する。サンプルセル３２中には液状試料が
注入される。光センサ３３は、投射モジュール３１から
投射された後、サンプルセル３２中の液状試料を伝搬す
る際に散乱した光を検知する。ロックインアンプ３４
は、光センサ３３の出力信号を、信号発生器３５が投射
モジュール３１に発した変調信号を参照して、位相敏感
検波し、散乱光強度に相当する信号を出力する。ここ
で、信号発生器３５は、投射モジュール３１に変調信号
を供給し、この信号と同期して投射光をパルス変調す
る。サンプルセル３２の周囲には、実施例３と同様のヒ
ータ３８が配されている。コイル状のヒータドライバ３
９は、コンピュータ３７からの指示に従ってヒータ３８
に最大５Ａの電流を流す。熱電対３０は、サンプルセル
３２に密着して設置されており、実質的にサンプルセル
３２内の液状試料の温度を検知する。温度指示計３６
は、熱電対３０が検知した液状試料の温度を表示すると
ともに、この値をコンピュータ３７に送る。ロックイン
アンプ３４の出力すなわち散乱光の強度を示す値も、コ
ンピュータ３７に送られる。これにより、コンピュータ
３７は、あらかじめ設定されたプログラムにしたがっ
て、液状試料を加熱し、同時に液状試料の温度と散乱光
強度を測定する。

【００３３】以下、本測定装置を用いた尿検査方法につ
いて説明する。あらかじめ尿試験紙によってアルブミン
濃度が１０ｍｇ／ｄｌ以下と判定された尿を溶媒とし
て、濃度１００、３００、１０００ｍｇ／ｄｌのアルブ
ミン溶液を調製した。ついで、これらのアルブミン溶液
および溶媒に用いた尿に塩化カルシウムを２２．２ｍｇ
（０．２ミリモルに相当）添加して溶解させた。これら
を、それぞれサンプルセル３２に注入して３５℃から８
０℃まで加熱速度２℃／分で加熱した。このとき、６秒
ごとに散乱光強度を測定した。このときのアルブミン濃
度に対する７０℃における散乱光強度と７５℃における
散乱光強度の比ｒを図１０に示す。ただし、以下、ｒは
下式のように定義する。 ｒ＝（７５℃での散乱光強度）／（７０℃での散乱光強度） （３） ここで、縦軸にｒを対数表示している。図１０より明ら
かなように、ｒは、アルブミン濃度に対して直線で近似
される。したがって、この直線を検量線とすることによ
って、未知の尿のアルブミン濃度すなわち尿タンパク値
を測定することができる。

【００３４】あらかじめ尿試験紙によってアルブミン濃
度が１００ｍｇ／ｄｌ以上、かつ２５０ｍｇ／ｄｌ以下
と判定された尿を上記測定装置を用いて検査した。その
結果、ｒは、４．６を示した。これを用いて、図１０に
示す検量線からアルブミン濃度を求めると、１２０ｍｇ
／ｄｌとなった。これは試験紙による結果と一致する。
また、尿試験紙によって、アルブミン濃度が３００ｍｇ
／ｄｌ以上、かつ５００ｍｇ／ｄｌ以下と判定された尿
を同様に検査した。その結果、Ｒは１３．３を示し、こ
の値と図１０に示す検量線からアルブミン濃度を求める
と、４００ｍｇ／ｄｌとなった。これは試験紙による結
果と一致する。

【００３５】以上のように、本尿検査方法によれば、尿
タンパク値を精度よく判定することができる。また、試
験紙等の消耗品を使用することない。さらに、本実施例
の検査方法によると、加熱前の尿の透過率等の影響を受
けないため、実施例４よりもさらに高精度の測定が可能
になる。

【００３６】《実施例６》本実施例では、液状試料を加
熱する前に、常温下でその旋光度を測定する。ついで、
加熱しながら、液状試料の温度とそれを透過する光の強
度を測定する。旋光度を測定することにより、試料内の
旋光性物質についての情報を得ることができる。とりわ
け尿検査においては、尿タンパク値と併せて尿糖値を算
出することが可能になる。すなわち、上記のように尿の
旋光は尿中のグルコースに起因するものとアルブミンに
起因するものの和と考えられることから、尿を白濁化さ
せることにより得られた尿タンパク値と旋光度から、尿
糖値を算出することができる。

【００３７】本実施例で用いた測定装置を図１１に示
す。本装置の旋光度測定の基本原理は、ファラデー効果
を利用した偏光面振動による光学零位法である。投射モ
ジュール４１は、実施例１で用いたものと同様で、波長
６７０ｎｍ、強度５ｍＷの略平行光を投射する。偏光子
５３は、投射された光のうち、特定の方向成分のみを透
過する。サンプルセル４２は実施例１で用いたものと同
様であり、その中に注入された尿は、この透過光の偏向
方向を光ファラデー効果によって微少幅変調させる。検
光子５４は偏光子５３に対して直交ニコルの状態に配置
されており、偏光子５３の透過軸を回転軸として回転さ
せることができる。ここで、偏光子５３および検光子５
４が理想的なものであれば、すなわち消光比が無限大で
あれば、透過光は光センサ４３に到達しない。しかし、
実際には偏光子および検光子の消光比は無限大にはなら
ない。本実施例で使用した偏光子５３および検光子５４
の消光比は約５０００のため、約１μＷ程度の透過光が
光センサ４３に到達する。この光の強度は、透過光強度
を測定するのに十分である。

【００３８】ロックインアンプ４４は、光センサ４３の
出力信号を、信号発生器４５が投射モジュール４１に発
した変調信号を参照して、位相敏感検波する。スイッチ
５５は、旋光度測定の際は端子ａ側に接続され、信号発
生器４５の信号を磁場変調信号としてコイル状のヒータ
ドライバ４９に供給する。また、透過光測定の際は端子
ｂ側に接続され、信号を投射光の変調信号として投射モ
ジュール４１に供給する。ヒータードライバ４９は、コ
ンピュータ４７からの指示に従ってヒータ４８に最大５
Ａの電流を流す。ただし、旋光度を測定する際は、ヒー
タ４８及びヒータドライバ４９は、コンピュータ４７の
指示によって、サンプルセル４２中の液状試料に磁場を
印加し、この磁場を変調しながら掃引する機能も果たす
ことができる。すなわち、本装置において、ヒータ４８
は、旋光度測定の際には、試料に磁場を印加する機能を
果たし、試料を加熱する際にはヒータ本来の機能を果た
すことになる。熱電対４０は、サンプルセル４２に密着
して設置されており、実質的にサンプルセル４２内の試
料の温度を検知する。温度指示計４６は、熱電対４０が
検知した試料の温度を表示するとともに、この値をコン
ピュータ４７に送る。以上の構成において、コンピュー
タ４７の指示により、まず、試料の旋光度を測定し、そ
の後、試料を加熱しながらその温度と透過光の強度を測
定する。

【００３９】以下、本測定装置を用いた尿検査方法につ
いて説明する。あらかじめ尿試験紙によってアルブミン
濃度が１０ｍｇ／ｄｌ以下であると判定された尿を溶媒
として、濃度が１００、３００および１０００ｍｇ／ｄ
ｌのアルブミン溶液をそれぞれ調製した。ついで、これ
らの溶液および溶媒に用いた尿に塩化カルシウムをそれ
ぞれ２２．２ｍｇ添加した。これらを、それぞれサンプ
ルセル２２に注入して３５℃から８０℃まで加熱した。
このとき、加熱速度を２℃／分に設定して、６秒ごとに
透過光強度を測定した。溶液の各濃度おける７０℃と７
５℃の透過光強度の比Ｒを実施例２と同様に算出した。
このＲを、各濃度に対してプロットすると図１２の様に
なる。ここで、縦軸はＲを対数表示したものである。こ
の図１２の曲線を検量線とすることによって、尿中アル
ブミン濃度すなわち尿タンパク値を測定することができ
る。なお、尿中を伝搬する直線偏光の偏光度は、濁り度
が高くなるに伴って、小さくなる。すなわち散乱による
偏光解消が発生する。したがって、この偏光解消の影響
で、図１２の検量線は実施例４で得られた図８に示す検
量線のような直線にならない。

【００４０】次に、尿試験紙によってグルコース濃度が
５０ｍｇ／ｄｌ以下で、アルブミン濃度が１００ｍｇ／
ｄｌ以上、かつ２５０ｍｇ／ｄｌ以下と判定された尿
を、本装置を用いて上記と同様の方法で検査した。ま
ず、旋光度を測定し、 Ａ＝−１９．８×１０^-3［度］ を得た。次に、尿を加熱して、透過光強度を測定した。
これより、 Ｒ＝０．８５ を得た。このＲと図１２に示す検量線より、アルブミン
濃度は１２０ｍｇ／ｄｌと判定される。このアルブミン
濃度とＡを用いて式（２）を解くことによって、グルコ
ース濃度＝３０ｍｇ／ｄｌが得られた。これは試験紙に
よる結果と一致する。

【００４１】また、尿試験紙によって、グルコース濃度
が１００ｍｇ／ｄｌ以上、かつ２５０ｍｇ／ｄｌ以下、
アルブミン濃度が３００ｍｇ／ｄｌ以上、かつ５００ｍ
ｇ／ｄｌ以下と判定された尿を本装置を用いて検査し
た。まず、旋光度を測定した。その結果、 Ａ＝−５６×１０^-3［度］ を得た。次に尿を加熱して透過光強度を測定し、 Ｒ＝０．６２ を得た。このＲと図１２に示す検量線より、アルブミン
濃度は４００ｍｇ／ｄｌと判定される。このアルブミン
濃度とＡより式（２）を解くことによって、グルコース
濃度＝１５０ｍｇ／ｄｌが得られた。これは試験紙によ
る結果と一致する。

【００４２】以上のように、本実施例によれば、尿の旋
光度を測定した後に、尿を加熱して白濁化させ、その白
濁度合いを測定することにより、尿タンパク値と尿糖値
を同時に検査することができる。これにより、試験紙等
の消耗品を使用することなく、尿タンパク値，尿糖値を
検査することができる。

【００４３】《実施例７》本実施例の測定方法につい
て、図１３を用いて以下に詳細に説明する。本実施例に
おいても、まず液状試料の旋光度を測定し、その後に試
料を加熱しながら、その温度と透過光強度を測定する。
本装置の旋光度測定の基本原理は、実施例６と同様であ
る。実施例６と同様に、偏光子７３は、投射モジュール
６１より投射された略平行光のうち、特定の方向成分の
みを透過する。サンプルセル６２は実施例６で用いたも
のと同様であり、その中に注入された試料に旋光性物質
が含まれると、試料を透過する光の偏向方向が光ファラ
デー効果によって微少幅変調される。また、偏光子７３
および検光子７４は直交ニコルの状態に配置されてい
る。スイッチ７５は、旋光度測定の際は端子ａ側に接続
され、信号発生器６５の信号を磁場変調信号としてコイ
ル状のヒータドライバ６９に供給する。また透過光測定
の際は端子ｂ側に接続され、同信号を投射光の変調信号
として投射モジュール６１に供給する。ビームサンプラ
７８は、試料を透過した光の一部を取り出す。光センサ
７６は、取り出された光を検知し、その光の強度に応じ
た信号を発する。スイッチ７７は、スイッチ７５と同期
しており、旋光度測定の際は、光センサ６３の出力信号
をロックインアンプ６４に供給し、透過光測定の際は光
センサ７６の出力信号をロックインアンプ６４に供給す
る様に切り替える。また、旋光度を測定する際は、ヒー
タ６８及びヒータドライバ６９は、コンピュータ６７の
指示によって試料に磁場を印加し、この磁場を変調しな
がら掃引する機能も果たすことができる。熱電対６０
は、サンプルセル６２に密着して設置されており、実質
的にサンプルセル６２内の試料の温度を検知する。温度
指示計６６は、熱電対６０が検知した試料の温度を表示
するとともに、この値をコンピュータ６７に送る。本実
施例では、実施例６と同様に、液状試料の旋光度を測定
した後、試料を加熱しながらその温度と透過光の強度を
測定する。しかし、本実施例の場合、実施例６と異な
り、偏光解消の影響を受けない。したがって、直線状の
検量線が得られる。実際、実施例６と同様のアルブミン
溶液を用いて検査した結果、直線の検量線が得られた。

【００４４】あらかじめ尿試験紙によって、グルコース
濃度が５０ｍｇ／ｄｌ以下で、アルブミン濃度が１００
ｍｇ／ｄｌ以上、かつ２５０ｍｇ／ｄｌ以下と判定され
た尿をこの装置を用いて検査した。まず、旋光度を測定
し、 Ａ＝−１９．８×１０^-3［度］ を得た。次に尿を加熱して透過光強度を測定し、 Ｒ＝０．８９ を得た。このＲと得られた検量線より、アルブミン濃度
は１２０ｍｇ／ｄｌであると判定された。このアルブミ
ン濃度とＡより式（２）を解くことによって、グルコー
ス濃度＝３０ｍｇ／ｄｌが得られた。これは試験紙によ
る判定結果と一致する。

【００４５】また、尿試験紙によって、グルコース濃度
が１００ｍｇ／ｄｌ以上、かつ２５０ｍｇ／ｄｌ以下
で、アルブミン濃度が３００ｍｇ／ｄｌ以上、かつ５０
０ｍｇ／ｄｌ以下と判定された尿を同様に検査した。ま
ず、旋光度を測定し、 Ａ＝−５６×１０^-3［度］ を得た。次に尿を加熱して透過光強度を測定し、 Ｒ＝０．６７ を得た。このＲと得られた検量線より、アルブミン濃度
は４００ｍｇ／ｄｌであると判定された。このアルブミ
ン濃度とＡより式（２）を解くことによって、グルコー
ス濃度＝１５０ｍｇ／ｄｌが得られた。これは試験紙に
よる結果と一致する。

【００４６】以上のように、本実施例によれば、尿の旋
光度を測定した後に、尿を加熱し、尿の透過光強度を測
定することにより、白濁度合いを求め、尿タンパク値と
尿糖値を同時に検査することができる。これにより、試
験紙等の消耗品を使用することなく、尿タンパク値およ
び尿糖値を検査することができる。特に、本実施例によ
ると、直線の検量線が得られるため、Ｒからアルブミン
濃度への換算がより容易になる。

【００４７】《実施例８》本実施例では、尿の旋光度を
測定した後に、尿を加熱しながら、尿の温度と、尿の散
乱量を測定する。本実施例の測定装置を図１４に示す。
偏光子９３は、実施例１で用いたものと同様の投射モジ
ュール８１より投射された略平行光のうち、特定の方向
成分のみを透過する。サンプルセル８２は実施例１で用
いたものと同様であり、その中に注入された尿は、この
透過光の偏向方向を微少幅変調させる。偏光子９３およ
び検光子９４は、サンプルセル８２を挟んで投射モジュ
ール８１の光軸方向に直交ニコルの状態で配置されてい
る。サンプルセル８２の周囲にはコイル状のヒータ８８
が配されている。スイッチ９５は、旋光度測定の際は端
子ａ側に接続され、信号発生器８５の信号を磁場変調信
号としてコイル状のヒータドライバ８９に供給する。ま
た、散乱光測定の際は端子ｂ側に接続され、同信号を投
射光の変調信号として投射モジュール８１に供給する。
光センサ９６は、投射モジュール８１から投射された
後、サンプルセル８２中の液状試料を伝搬する際に散乱
した光を検知する。スイッチ９７は、旋光度測定の際
は、光センサ８３の出力信号をロックインアンプ８４に
供給し、散乱光測定の際は光センサ９６の出力信号をロ
ックインアンプ８４に供給する様に切り替える。熱電対
８０は、サンプルセル８２に密着して設置されており、
実質的にサンプルセル８２内の試料の温度を検知する。
温度指示計８６は、熱電対８０が検知した試料の温度を
表示するとともに、この値をコンピュータ８７に送る。
これによって、尿検査においては、実施例６と同様に尿
の旋光度を測定した後、尿を加熱しながら尿の温度と散
乱光強度を測定することができる。

【００４８】次に、尿試験紙によって、グルコース濃度
が５０ｍｇ／ｄｌ以下で、アルブミン濃度が１００ｍｇ
／ｄｌ以上、２５０ｍｇ／ｄｌ以下と判定された尿を本
装置を用いて検査した。まず、旋光度を測定し、 Ａ＝−１９．８×１０^-3［度］ を得た。次に尿を加熱して散乱光強度を測定し、 ｒ＝４．６ を得た。このｒと得られた検量線より、アルブミン濃度
は１２０ｍｇ／ｄｌと判定された。このアルブミン濃度
とＡより式（２）を解くことによって、グルコース濃度
＝３０ｍｇ／ｄｌが得られた。これは試験紙による結果
と一致する。

【００４９】また、尿試験紙によって、グルコース濃度
が１００ｍｇ／ｄｌ以上２５０ｍｇ／ｄｌ以下、アルブ
ミン濃度が３００ｍｇ／ｄｌ以上、５００ｍｇ／ｄｌ以
下と判定された尿を同様に検査した。まず、旋光度を測
定し、 Ａ＝−５６×１０^-3［度］ を得た。次に尿を加熱して散乱光強度を測定し、 ｒ＝１３．７ を得た。このｒと得られた検量線より、アルブミン濃度
は４００ｍｇ／ｄｌと判定された。このアルブミン濃度
とＡより式（２）を解くことによって、グルコース濃度
＝１５０ｍｇ／ｄｌが得られた。これは試験紙による結
果と一致する。

【００５０】以上のように、本実施例によれば、尿の旋
光度を測定した後に、尿を加熱して白濁させ、その白濁
度合いを測定することにより、尿タンパク値と尿糖値を
同時に検査することができる。これにより、試験紙等の
消耗品を使用することなく、尿タンパク値および尿糖値
を検査することができる。特に、本実施例によると、実
施例７の測定装置のように複数の光センサを用いる必要
がない。以上のように、尿を白濁させ、透過光または散
乱光の強度よりその白濁化の度合いを求めることによっ
て、尿タンパク値を求めることができる。また、白濁化
する前に、尿の旋光度を測定することにより、尿タンパ
ク値とともに、尿糖値を求めることができる。

【００５１】

【発明の効果】本発明によれば、試験紙等の消耗品を使
用することのない尿検査方法を提供することができる。

【図面の簡単な説明】

【図１】本発明の一実施例で用いた測定装置の構成を示
す概略図である。

【図２】同実施例において得られたロックインアンプの
出力信号と試料のアルブミン濃度の関係を示す特性図で
ある。

【図３】本発明の他の実施例において得られたロックイ
ンアンプの出力信号と試料のアルブミン濃度の関係を示
す特性図である。

【図４】本発明のさらに他の実施例で用いた測定装置の
構成を示す概略図である。

【図５】同実施例において得られたロックインアンプの
出力信号と試料のアルブミン濃度の関係を示す特性図で
ある。

【図６】本発明のさらに他の実施例で用いた測定装置の
構成を示す概略図である。

【図７】同実施例において得られたロックインアンプの
出力信号と試料の温度の関係を示す特性図である。

【図８】同実施例において得られたＲ（７５℃における
透過光強度と７０℃における透過光強度の比）と試料の
アルブミン濃度の関係を示す特性図である。

【図９】本発明のさらに他の実施例で用いた測定装置の
構成を示す概略図である。

【図１０】同実施例において得られたｒ（７５℃におけ
る散乱光強度と７０℃における散乱光強度の比）と試料
のアルブミン濃度の関係を示す特性図である。

【図１１】本発明のさらに他の実施例で用いた測定装置
の構成を示す概略図である。

【図１２】同実施例において得られたＲと試料のアルブ
ミン濃度の関係を示す特性図である。

【図１３】本発明のさらに他の実施例で用いた測定装置
の構成を示す概略図である。

【図１４】本発明のさらに他の実施例で用いた測定装置
の構成を示す概略図である。

【符号の説明】

１、１１、２１、３１、４１、６１、８１ 投射モジュ
ール ２、１２、２２、３２、４２、６２、８２ サンプルセ
ル ３、１３、２３、３３、４３、６３、８３ 光センサ ４、１４、２４、３４、４４、６４、８４ ロックイン
アンプ ５、１５、２５、３５、４５、６５、８５ 信号発生器 ２６、３６、４６、６６、８６ 温度指示計 ２７、３７、４７、６７、８７ コンピュータ ２８、３８、４８、６８、８８ ヒータ ２９、４９、６９、８９ ヒータドライバ ３０、４０、６０、８０ 熱電対 ５３、７３、９３ 偏光子 ５４、７４、９４ 検光子 ５５、７５、９５ スイッチ ７６、９６ 光センサ ７７ スイッチ ７８ ビームサンプラ

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (56)参考文献 特開 昭３−170396（ＪＰ，Ａ) 特開 平４−214767（ＪＰ，Ａ) 特開 平８−113593（ＪＰ，Ａ) 特開 平９−138231（ＪＰ，Ａ) (58)調査した分野(Int.Cl.⁷，ＤＢ名) G01N 33/48 - 33/98

Claims (12)

(57)【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 タンパク質を含む液状試料に２価の金属
   イオンを添加する工程と、前記液状試料を加熱して白濁
   化させる工程と、白濁した液状試料に光を投射する工程
   と、投射された光のうち前記液状試料を透過した光また
   は前記液状試料より散乱した光を検知する工程と、検知
   した光の強度に基づいて前記液状試料のタンパク質濃度
   を判定する工程を含む特定成分濃度の測定方法。
2. 【請求項２】 タンパク質を含む液状試料に２価の金属
   イオンを添加する工程と、前記液状試料を加熱ししなが
   ら、同液状試料に光を投射する工程と、投射された光の
   うち前記液状試料を透過した光または前記液状試料より
   散乱した光を検知する工程と、検知した光の強度に基づ
   いて前記液状試料のタンパク質濃度を判定する工程を含
   む特定成分濃度の測定方法。
3. 【請求項３】 加熱する前の前記液状試料の旋光度を測
   定する工程、および前記旋光度および前記タンパク質濃
   度に基づいて前記液状試料のグルコース濃度を判定する
   工程を含む請求項１または２に記載の特定成分濃度の測
   定方法。
4. 【請求項４】 ６０〜８０℃のうちの互いに異なる２点
   の温度においてそれぞれ前記液状試料に光を投射し、得
   られた透過光または散乱光の強度の比より前記液状試料
   のタンパク質濃度を判定する請求項２記載の特定成分濃
   度の測定方法。
5. 【請求項５】 前記２価の金属イオンがカルシウムイオ
   ンまたはマグネシウムイオンである請求項１または２に
   記載の特定成分濃度の測定方法。
6. 【請求項６】 前記カルシウムイオンを前記液状試料１
   ｄｌに対して０．２ミリモル以上の比で添加する請求項
   ５記載の特定成分濃度の測定方法。
7. 【請求項７】 前記マグネシウムイオンを前記液状試料
   １ｄｌに対して０．１ミリモル以上の比で添加する請求
   項５記載の特定成分濃度の測定方法。
8. 【請求項８】 前記カルシウムイオンまたはマグネシウ
   ムイオンが塩化物として前記尿に添加される請求項５記
   載の特定成分濃度の測定方法。
9. 【請求項９】 タンパク質を含む液状試料に酸を添加
   し、同液状試料のｐＨを５．５以下に調整する工程と、
   前記液状試料を加熱して白濁化させる工程と、白濁した
   液状試料に光を投射する工程と、投射された光のうち前
   記液状試料を透過した光または前記液状試料より散乱し
   た光を検知する工程と、検知した光の強度に基づいて前
   記液状試料のタンパク質濃度を判定する工程を含む特定
   成分濃度の測定方法。
10. 【請求項１０】 前記酸が酢酸またはリン酸である請求
    項９記載の特定成分濃度の測定方法。
11. 【請求項１１】 前記液状試料が尿である請求項１、２
    または９に記載の特定成分濃度の測定方法。
12. 【請求項１２】 前記光の波長が５００ｎｍ以上である
    請求項１１記載の特定成分濃度の測定方法。