JP3192791B2 - Method for producing optically active DN-piperonyl-2-amino- (benzo [b] thiophen-3-yl) -propionylamide - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION

【０００１】[0001]

【産業上の利用分野】本発明は、哺乳動物の中枢神経に
影響し、抗不安効果、学習改善効果を有する向精神薬と
して、下記の式The present invention relates to a psychotropic drug which affects the central nervous system of mammals and has an anxiolytic effect and learning improvement effect.

【０００２】[0002]

【化８】 Embedded image

【０００３】で表わされる光学活性なＤ−Ｎ−ピペロニ
ル−１，２，３，４−テトラヒドロ−ベンゾ［ｂ］チエ
ノ［２，３−ｃ］ピリジン−３−カルボアミドの前駆体
であるＤ−Ｎ−ピペロニル−２−アミノ−（ベンゾ
［ｂ］チオフェン−３−イル）−プロピオニルアミドの
製造法に関するものである。Is a precursor of an optically active DN-piperonyl-1,2,3,4-tetrahydro-benzo [b] thieno [2,3-c] pyridine-3-carbamide represented by the following formula: -Piperonyl-2-amino- (benzo [b] thiophen-3-yl) -propionylamide

【０００４】[0004]

【従来の技術】下記の式2. Description of the Related Art

【０００５】[0005]

【化９】 Embedded image

【０００６】で表わされるＮ−ピペロニル−１，２，
３，４−テトラヒドロ−ベンゾ［ｂ］チエノ［２，３−
ｃ］ピリジン−３−カルボアミド（ラセミ体）及びその
製造法ならびにそれを含有する薬剤の、抗不安効果、学
習改善効果を有する向精神薬としての有用性について
は、本願出願人により出願済である（特開平５−１６３
２７８号、特願平４−１２６７０６号）。しかしなが
ら、この前駆体合成はラセミ体のままで進行している。N-piperonyl-1,2,2
3,4-tetrahydro-benzo [b] thieno [2,3-
[c] Pyridine-3-carbamide (racemic form), a method for producing the same, and usefulness of a drug containing the same as a psychotropic drug having an anxiolytic effect and learning improvement effect have been filed by the present applicant. (JP-A-5-163
278, Japanese Patent Application No. 4-126706). However, this precursor synthesis is proceeding in a racemic form.

【０００７】[0007]

【発明が解決しようとする課題】しかしながら、分子内
に不斉炭素を持つ化合物は、ほとんどの物理化学的性質
が全く等しい光学異性体が存在する。光学異性体の分離
定量は、近年の分析化学の進歩により容易になり研究が
進み、多くの場合、生体内での挙動が異なることが明ら
かにされている。即ち、２つの光学異性体間では、薬効
及び毒性が異なり、有用でない方の異性体は不純物であ
るという問題点があった。However, compounds having an asymmetric carbon in the molecule include optical isomers having almost exactly the same physicochemical properties. Separation and quantification of optical isomers has been facilitated and advanced by recent advances in analytical chemistry, and it has been clarified that behavior in vivo is often different. That is, the two optical isomers have different drug efficacy and toxicity, and there has been a problem that the less useful isomer is an impurity.

【０００８】本発明に関わるＤ−Ｎ−ピペロニル−２−
アミノ−（ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−プロ
ピオニルアミドは不斉炭素を有する化合物であり、２つ
の光学異性体が存在する。この前駆体を利用して最終化
合物を医薬品として使用する場合、どちらか一方の光学
活性体を用いた方が好ましいことが考えられる。[0008] DN-piperonyl-2-related to the present invention
Amino- (benzo [b] thiophen-3-yl) -propionylamide is a compound having an asymmetric carbon and has two optical isomers. When the final compound is used as a drug using this precursor, it may be preferable to use one of the optically active substances.

【０００９】[0009]

【課題を解決するための手段】本発明者は、上記の課題
を解決するために鋭意検討を行い、下記の製造方法１の
プロセスを見出し本発明に至った。Means for Solving the Problems The present inventor has conducted intensive studies in order to solve the above-mentioned problems, and found the following process 1 of production method, and has reached the present invention.

【００１０】[0010]

【化１０】 Embedded image

【００１１】即ち、本発明は、この製造方法１に従い、
α−アセトアミノ−α−カルボキシ−β−（３−ベンゾ
［ｂ］チオフェン−３−イル）−プロピオン酸（２）
を、アシラーゼ等のα−アシルアミノ酸を加水分解する
酵素を用い、Ｌ−体を脱アシル加水分解し、Ｌ−２−ア
ミノ−（ベンゾ〔ｂ〕チオフェン−３−イル）−プロピ
オン酸（３）とし、Ｄ−体を未分解のままＤ−α−アセ
トアミノ−α−カルボキシ−β−（３−ベンゾ［ｂ］チ
オフェン−３−イル）−プロピオン酸（４）として残
し、２種の光学活性な中間体を得る。さらに、この製造
方法について詳細に記載すると、α−アセトアミノ−α
−カルボキシ−β−（３−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３
−イル）−プロピオン酸（２）のラセミ体の１．０％か
ら７０％（Ｗ／Ｖ）水溶液、好ましくは５．０〜４０％
（Ｗ／Ｖ）を水酸化ナトリウムでｐＨ３．０〜１１付
近、好ましくはｐＨ５．５〜７．０に調整した水性溶媒
中に、アシラーゼを添加後、反応温度５．０〜６０℃、
好ましくは３０〜４５℃、反応時間０．５〜３００時
間、好ましくは５．０〜２４時間撹拌することにより、
α−アセトアミノ−α−カルボキシ−β−（３−ベンゾ
［ｂ］チオフェン−３−イル）−プロピオン酸（２）の
Ｌ体のみがＬ−２−アミノ−（ベンゾ［ｂ］チオフェン
−３−イル）−プロピオン酸（３）に変換する。本発明
において使用するアシラーゼは、α−アセトアミノ−α
−カルボキシ−β−（３−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３
−イル）−プロピオン酸（２）のＬ−体のみを加水分解
するものであれば特に限定されるものではない。例え
ば、いかなる種類の菌体より取得されたものでもよく、
具体的には例えば、糸状菌のアスペルギルス属、ペニシ
リウム属、細菌のシュードモナス属、アクロモバクター
属、ミクロコッカス属及び放線菌のストレプトミセスな
どが利用される。実施例に記載された通り、天野製薬社
製アミラーゼ（アスペルギルス属由来）を利用すること
が簡便であり好ましい。アシラーゼの使用量は、α−ア
セトアミノ−α−カルボキシ−β−（３−ベンゾ［ｂ］
チオフェン−３−イル）−プロピオン酸（２）の濃度に
より異なるが、α−アセトアミノ−α−カルボキシ−β
−（３−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−プロピ
オン酸（２）に対し０．１〜１００重量％、特に０．５
〜２．０重量％程度が好ましい。また、本発明において
反応を促進、さらには安定させるためにコバルトを共存
させてもよい。使用するコバルトは、塩化コバルト・硫
酸コバルト・酢酸コバルト等水に溶解するものであれば
任意のコバルト塩を使用することができる。そして、そ
の濃度は、０．００１〜１００ｍＭの範囲内である。本
発明において使用される水性溶媒としては、水各種の緩
衝液、さらには水に混合する有機溶媒、例えば、メタノ
ールを適宜加えてもよい。上記のような方法で得られた
反応終了液には、生成したＬ−２−アミノ−（ベンゾ
［ｂ］チオフェン−３−イル）−プロピオン酸（３）が
結晶として析出し、溶解度の大きい未反応のＤ−α−ア
セトアミノ−α−カルボキシ−β−（３−ベンゾ［ｂ］
チオフェン−３−イル）−プロピオン酸（４）は溶液と
して残る。この反応液を固液分離、例えば、ろ過するこ
とにより高収量で光学純度の高いＬ−２−アミノ−（ベ
ンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−プロピオン酸
（３）を取得することができる。一方、固液分離した溶
液のｐＨを塩酸などで３以下にすることにより、未反応
のＤ−α−アセトアミノ−α−カルボキシ−β−（３−
ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−プロピオン酸
（４）の結晶を高い純度にて取得することができる。こ
の中間体をさらに誘導化し、Ｄ−Ｎ−ピペロニル−２−
アミノ−（ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−プロ
ピオニルアミド（１）に導くものである。ここで誘導化
とは、具体的には下記に述べる製造方法２のようなプロ
セスを経ることである。That is, the present invention provides the following
α-acetamino-α-carboxy-β- (3-benzo [b] thiophen-3-yl) -propionic acid (2)
Using an enzyme that hydrolyzes an α-acyl amino acid such as acylase, the L-isomer is deacylated and hydrolyzed to give L-2-amino- (benzo [b] thiophen-3-yl) -propionic acid (3) The D-form is left undegraded as D-α-acetoamino-α-carboxy-β- (3-benzo [b] thiophen-3-yl) -propionic acid (4) to give two optically active compounds. Obtain the intermediate. Further, when this production method is described in detail, α-acetamino-α
-Carboxy-β- (3-benzo [b] thiophene-3
-Yl) -Propionic acid (2) in a 1.0% to 70% (W / V) aqueous solution of a racemate, preferably 5.0 to 40%
(W / V) was added to an aqueous solvent adjusted to pH 3.0 to about 11, preferably pH 5.5 to 7.0 with sodium hydroxide, and after adding acylase, the reaction temperature was adjusted to 5.0 to 60 ° C.
By stirring at preferably 30 to 45 ° C and a reaction time of 0.5 to 300 hours, preferably 5.0 to 24 hours,
Only the L-form of α-acetamino-α-carboxy-β- (3-benzo [b] thiophen-3-yl) -propionic acid (2) is L-2-amino- (benzo [b] thiophen-3-yl) ) -Convert to propionic acid (3). The acylase used in the present invention is α-acetamino-α
-Carboxy-β- (3-benzo [b] thiophene-3
-Yl) -propionic acid (2) is not particularly limited as long as it hydrolyzes only the L-form. For example, it may be obtained from any kind of cells,
Specifically, for example, filamentous fungi Aspergillus, Penicillium, bacteria Pseudomonas, Achromobacter, Micrococcus and actinomycete Streptomyces are used. As described in the examples, it is convenient and preferable to use amylase (from Aspergillus) manufactured by Amano Pharmaceutical Co., Ltd. The amount of acylase used was α-acetamino-α-carboxy-β- (3-benzo [b].
Thiophen-3-yl) -propionic acid (2), which depends on the concentration of α-acetamino-α-carboxy-β
-(3-benzo [b] thiophen-3-yl) -propionic acid (2) in an amount of 0.1 to 100% by weight, particularly 0.5% by weight.
About 2.0% by weight is preferred. Further, in the present invention, cobalt may be allowed to coexist in order to promote and further stabilize the reaction. As the cobalt to be used, any cobalt salt can be used as long as it is soluble in water such as cobalt chloride, cobalt sulfate, and cobalt acetate. And the concentration is in the range of 0.001 to 100 mM. As the aqueous solvent used in the present invention, various buffers of water, or an organic solvent mixed with water, for example, methanol may be appropriately added. In the reaction-terminated liquid obtained by the above-mentioned method, the formed L-2-amino- (benzo [b] thiophen-3-yl) -propionic acid (3) is precipitated as crystals, and the L-amino- (benzo [b] thiophen-3-yl) -propionic acid (3) has high solubility. Reaction D-α-acetamino-α-carboxy-β- (3-benzo [b]
Thiophen-3-yl) -propionic acid (4) remains as a solution. By solid-liquid separation of this reaction solution, for example, filtration, L-2-amino- (benzo [b] thiophen-3-yl) -propionic acid (3) having high yield and high optical purity can be obtained. . On the other hand, by adjusting the pH of the solution subjected to solid-liquid separation to 3 or less with hydrochloric acid or the like, unreacted D-α-acetamino-α-carboxy-β- (3-
Crystals of benzo [b] thiophen-3-yl) -propionic acid (4) can be obtained with high purity. This intermediate was further derivatized to give DN-piperonyl-2-
It leads to amino- (benzo [b] thiophen-3-yl) -propionylamide (1). Here, the derivatization means, specifically, a process such as a manufacturing method 2 described below.

【００１２】Ｄ−Ｎ−ピペロニル−２−アミノ−（ベン
ゾ〔ｂ〕チオフェン−３−イル）−プロピオニルアミド
（１）においては、薬理上許容される酸付加塩として利
用することもでき、その塩としては、例えば、塩酸、硫
酸、リン酸等の無機酸、又は、マンデル酸、ｐ−トルエ
ンスルホン酸、マレイン酸等の有機酸の酸付加塩を挙げ
ることができる。前記の製造方法１において、化合物
（４）から化合物（１）を製造するプロセスをさらに詳
しく説明すると、製造方法２の通りである。The DN-piperonyl-2-amino- (benzo [b] thiophen-3-yl) -propionylamide (1) can be used as a pharmacologically acceptable acid addition salt. Examples thereof include an inorganic acid such as hydrochloric acid, sulfuric acid and phosphoric acid, and an acid addition salt of an organic acid such as mandelic acid, p-toluenesulfonic acid and maleic acid. In the above production method 1, the process for producing the compound (1) from the compound (4) will be described in more detail as the production method 2.

【００１３】[0013]

【化１１】 Embedded image

【００１４】製造方法２において、Ｄ−２−アミノ−
（ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−プロピオン酸
（５）はＤ−α−アセトアミノ−α−カルボキシ−β−
（３−ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−プロピオ
ン酸（４）を加水分解すればよく、例えば、酸を用いて
アシル基を加水分解することにより、ラセミ化を起こさ
ず製造できる。使用する酸は、塩酸、硫酸等の無機酸、
メタンスルホン酸、トリフルオロ酢酸等の有機酸等を使
用することができる。そして、その濃度は０．１〜１８
規定、好ましくは１〜１２規定である。In the production method 2, D-2-amino-
(Benzo [b] thiophen-3-yl) -propionic acid (5) is D-α-acetamino-α-carboxy-β-
(3-Benzo [b] thiophen-3-yl) -propionic acid (4) may be hydrolyzed. For example, by hydrolyzing an acyl group using an acid, the compound can be produced without racemization. Acids to be used include inorganic acids such as hydrochloric acid and sulfuric acid,
Organic acids such as methanesulfonic acid and trifluoroacetic acid can be used. And the concentration is 0.1-18
The rule is preferably 1 to 12.

【００１５】化合物（５）から化合物（６）の反応で使
用するアミノ基の保護には、ｔ−ブトキシカルボニル
基、ベンジルオキシカルボニル基等のウレタン型保護
基、アセチル基、ホルミル基、トリフルオロアセチル基
等のアシル型保護基などが用いられる。例えば、ｔ−ブ
トキシカルボニル基で保護する場合は、下記の合成法に
より得ることができる。The protection of the amino group used in the reaction of the compound (5) from the compound (5) includes a urethane-type protecting group such as a t-butoxycarbonyl group and a benzyloxycarbonyl group, an acetyl group, a formyl group, a trifluoroacetyl group. An acyl-type protecting group such as a group is used. For example, when protecting with a t-butoxycarbonyl group, it can be obtained by the following synthesis method.

【００１６】化合物（５）から化合物（６）への合成方
法は、光学活性な（５）をテトラヒドロフラン等のエ−
テル系溶媒と水の混合溶媒に溶解し、ジ−ｔ−ブチル−
ジ−カ−ボネイトとトリエチルアミンを１〜１２当量
（好ましくは１〜２当量である）を加えた後、室温にて
反応を行う。化合物（６）とピペロニルアミンとを縮合
せしめて化合物（７）を合成する方法は、通常のカルボ
ン酸とアミンからアミドを合成する方法を適用できる。
例えば、ＤＣＣ（ジシクロヘキシルカルボジイミド）等
の縮合剤を用いる方法、カルボン酸を酸クロライドにし
縮合する方法等があげられる。The method for synthesizing the compound (6) from the compound (5) is as follows.
Dissolved in a mixed solvent of a ter-based solvent and water, and di-t-butyl-
After adding 1 to 12 equivalents (preferably 1 to 2 equivalents) of dicarbonate and triethylamine, the reaction is carried out at room temperature. As a method of synthesizing the compound (7) by condensing the compound (6) with piperonylamine, a general method of synthesizing an amide from a carboxylic acid and an amine can be applied.
For example, a method using a condensing agent such as DCC (dicyclohexylcarbodiimide), a method of converting carboxylic acid into acid chloride and condensing the same, and the like can be mentioned.

【００１７】ＤＣＣを用いる方法は、例えば、次のよう
な方法で行うことができる。化合物（６）をクロロホル
ム等のハロゲン化溶媒に溶解し、１−ヒドロキシベンゾ
トリアゾ−ルを加える。この時、１−ヒドロキシベンゾ
トリアゾ−ルは１〜１０当量、好ましくは１．１〜２当
量である。さらに、ピペロニルアミン及び１，３−ジシ
クロヘキシルカルボジイミドを加える。この時は、ピペ
ロニルアミン及び１，３−ジシクロヘキシルカルボジイ
ミドは１〜１０当量、好ましくは１．１〜２当量であ
る。最後に生成したジシクロヘキシルウレアをろ過で除
く。The method using DCC can be performed, for example, by the following method. Compound (6) is dissolved in a halogenated solvent such as chloroform, and 1-hydroxybenzotriazole is added. At this time, 1-hydroxybenzotriazole is used in an amount of 1 to 10 equivalents, preferably 1.1 to 2 equivalents. Further, piperonylamine and 1,3-dicyclohexylcarbodiimide are added. At this time, the amount of piperonylamine and 1,3-dicyclohexylcarbodiimide is 1 to 10 equivalents, preferably 1.1 to 2 equivalents. Finally, dicyclohexylurea formed is removed by filtration.

【００１８】化合物（７）を脱保護して化合物（１）を
合成する方法は、例えば、酸を用いる方法、接触還元を
用いる方法が適用できる。この場合、分子内に硫黄原子
をもつので酸による方法が好ましい。メタンスルホン
酸、塩酸、硫酸など通常用いられる酸を用いることがで
きる。例えば、化合物（７）に４Ｎ塩酸１，４−ジオキ
サン溶液を加え反応させる。この時、酸の量は１〜１０
０当量、好ましくは２〜５当量である。反応の温度は０
〜１５５℃、好ましくは６０〜９０℃である。As a method for synthesizing the compound (1) by deprotecting the compound (7), for example, a method using an acid or a method using catalytic reduction can be applied. In this case, the method using an acid is preferable since the molecule has a sulfur atom. Usually used acids such as methanesulfonic acid, hydrochloric acid and sulfuric acid can be used. For example, a 4N hydrochloric acid 1,4-dioxane solution is added to the compound (7) and reacted. At this time, the amount of the acid is 1 to 10
It is 0 equivalent, preferably 2 to 5 equivalents. The reaction temperature is 0
To 155 ° C, preferably 60 to 90 ° C.

【００１９】[0019]

【実施例】以下、実施例により本発明をさらに詳しく説
明するが、本発明は、これに限定されるものではない。EXAMPLES The present invention will be described in more detail with reference to the following Examples, but it should not be construed that the invention is limited thereto.

【００２０】[0020]

【実施例１】水道水５００ｍｌ及びα−アセトアミノ−
α−カルボキシ−β−（３−ベンゾ［ｂ］チオフェン−
３−イル）−プロピオン酸１５０ｇからなるスラリー
に、４Ｎ−水酸化ナトリウム溶液を加えて溶解し最終ｐ
Ｈ６．５に調整した。この溶液にアシラーゼ（天野製
薬；アスペルギルス属由来：Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ
Ｍｅｌｌｅｕｓ，３００００単位）１．０ｇと塩化コバ
ルト６水塩０．０７２ｇを加え、３８℃、ｐＨ６．５に
て２４時間撹拌した。反応液中へ析出したＬ−２−アミ
ノ−（ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−プロピオ
ン酸の結晶をろ過し、水にて洗浄後、結晶を乾燥して白
色のＬ−２−アミノ−（ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−
イル）−プロピオン酸結晶５９．７ｇを得た。この結晶
をガスクロ工業製ＨＰＬＣカラムのユニシルパックＦ３
−５０Ａ、溶離液３５％メタノール／５０ｍＭ ＫＨ₂
ＰＯ₄ にて分析した結果、純度９９．９５％であった。
［α］^D ₂₅＝９．１７°（Ｃ０．６，０．１Ｎ−ＨＣ
ｌ）であり、ダイセル化学製光学異性体分離カラム・ク
ラウンパックＣＲ（＋）、溶離液ｐＨ４．０の１０％メ
タノール水で光学純度を調べた結果、Ｌ−体１００％の
純品であることが確認された。 Ｌ−２−アミノ−（ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イ
ル）−プロピオン酸の分析結果 ＩＲ（ν_max 、ｃｍ^-1）：３０３０、１６６５、１５９
０ 一方、分離母液約５００ｍｌに濃塩酸を加え、ｐＨを
３．０に下げ結晶化させた。結晶をろ過で取得後、０．
０１Ｎ−ＨＣｌにて洗浄した結晶を乾燥して白色の、Ｄ
−α−アセトアミノ−α−カルボキシ−β−（３−ベン
ゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−プロピオン酸結晶７
３．５ｇを得た。Example 1 500 ml of tap water and α-acetamino-
α-carboxy-β- (3-benzo [b] thiophene-
3-Nyl) -propionic acid (150 g) was dissolved in 4N-sodium hydroxide solution.
Adjusted to H6.5. To this solution was added acylase (Amano Pharmaceutical; Aspergillus genus: Aspergillus).
(Melleus, 30,000 units) (1.0 g) and 0.072 g of cobalt chloride hexahydrate were added, and the mixture was stirred at 38 ° C. and pH 6.5 for 24 hours. The crystals of L-2-amino- (benzo [b] thiophen-3-yl) -propionic acid precipitated in the reaction solution were filtered, washed with water, and dried to give white L-2-amino acid. -(Benzo [b] thiophene-3-
59.7 g of yl) -propionic acid crystals were obtained. The crystals were collected on a Unichrom Pak F3 HPLC column manufactured by Gaschrom Kogyo.
-50 A, eluent 35% methanol / 50 mM KH ₂
As a result of analysis with PO ₄ , the purity was 99.95%.
[Α] ^D ₂₅ = 9.17 ° (C0.6, 0.1N-HC
l), the optical purity was determined using 10% methanol water of Daicel Chemical's optical isomer separation column, Crown Pack CR (+) and eluent pH 4.0, and it was found that the product was a pure L-isomer. Was confirmed. Analysis result of L-2-amino- (benzo [b] thiophen-3-yl) -propionic acid IR (ν _max , cm ⁻¹ ): 3030, 1665, 159
0 On the other hand, concentrated hydrochloric acid was added to about 500 ml of the separated mother liquor to lower the pH to 3.0 for crystallization. After obtaining the crystals by filtration, 0.1.
The crystals washed with 01N-HCl are dried to give white, D
-Α-acetamino-α-carboxy-β- (3-benzo [b] thiophen-3-yl) -propionic acid crystal 7
3.5 g were obtained.

【００２１】この結晶は、ガスクロ工業製ＨＰＬＣカラ
ムのユニシルパックＦ３−５０Ａ、溶離液３５％メタノ
ール／５０ｍＭ−ＫＨ₂ ＰＯ₄ にて分析した結果、純度
９９．９１％であった。次に、ダイセル化学製光学異性
体分離カラム・キラルセルＯＪ、溶離液ヘキサン：２−
プロパノール：トリフルオロ酢酸９０：１０：０．１で
光学純度を調べた結果、Ｄ−体９９．７％であった。Ｄ
−α−アセトアミノ−α−カルボキシ−β−（３−ベン
ゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−プロピオン酸０．５
ｇに５Ｎ−メタンスルホン酸５ｍｌを加え、１００℃に
て６時間３０分撹拌した。室温にもどし水２０ｍｌを加
え、６Ｎ−水酸化ナトリウムでｐＨを６．５に調整し
た。析出した結晶を濾取して乾燥し、Ｄ−２−アミノ−
（ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−プロピオン酸
０．４１ｇを得た。（収率９３．０％） Ｄ−２−アミノ−（ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イ
ル）−プロピオン酸の分析結果 ＩＲ（ν_max 、ｃｍ^-1）：３０５０、１６６５、１５９
０The crystals were analyzed using a HPLC column manufactured by Gaschrom Kogyo with Unisilpak F3-50A and an eluent of 35% methanol / 50 mM-KH ₂ PO _{4 to} find that the purity was 99.91%. Next, an optical isomer separation column (Chiral Cell OJ, manufactured by Daicel Chemical Co., Ltd.), eluent hexane: 2-
As a result of examining the optical purity of propanol: trifluoroacetic acid at 90: 10: 0.1, the D-isomer was 99.7%. D
-Α-acetamino-α-carboxy-β- (3-benzo [b] thiophen-3-yl) -propionic acid 0.5
5 g of 5N-methanesulfonic acid was added to g, and the mixture was stirred at 100 ° C. for 6 hours 30 minutes. After returning to room temperature, 20 ml of water was added, and the pH was adjusted to 6.5 with 6N-sodium hydroxide. The precipitated crystals were collected by filtration and dried, and D-2-amino-
0.41 g of (benzo [b] thiophen-3-yl) -propionic acid was obtained. (Yield 93.0%) Analysis result of D-2-amino- (benzo [b] thiophen-3-yl) -propionic acid IR (ν _max , cm ⁻¹ ): 3050, 1665, 159
0

【００２２】[0022]

【実施例２】Ｄ−２−アミノ−（ベンゾ［ｂ］チオフェ
ン−３−イル）−プロピオン酸５３．５ｇをテトラヒド
ロフラン３５０ｍｌ、水３５０ｍｌに溶かし、０℃に冷
却し、ジ−ｔ−ブチル−ジ−カ−ボネイト６７．４ｇを
加えた。さらに室温にて、トリエチルアミン４１ｍｌを
加え、４時間撹拌した後、溶媒を減圧濃縮後、酢酸エチ
ル５００ｍｌ、１Ｎ塩酸５００ｍｌで洗浄し、さらに有
機層を水１００ｍｌ、飽和食塩水５００ｍｌで洗浄後硫
酸ナトリウムで乾燥した。有機層を硫酸マグネシウムで
乾燥し、減圧濃縮乾固すると、Ｄ−２−ブトキシカルボ
ニルアミノ−（ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−
プロピオン酸７７．４ｇを得た。（収率１００％） ＮＭＲ（δ、ＤＭＳＯ−ｄ6 ）：１．００〜１．５７
（ｍ、９Ｈ）、３．０８〜３．４０（ｍ、２Ｈ）、４．
２１〜４．５２（ｍ、１Ｈ）、７．１２〜８．０９
（ｍ、５Ｈ） ＩＲ（ν_max 、ｃｍ^-1）：３４４０、２９４０、１７０
０、１６３５、１５６０Example 2 D-2-Amino- (benzo [b] thiophen-3-yl) -propionic acid (53.5 g) was dissolved in tetrahydrofuran (350 ml) and water (350 ml), cooled to 0 ° C, and treated with di-tert-butyl-dithiophene. 67.4 g of carbonate were added. Further, at room temperature, 41 ml of triethylamine was added, and after stirring for 4 hours, the solvent was concentrated under reduced pressure, washed with 500 ml of ethyl acetate and 500 ml of 1N hydrochloric acid. The organic layer was further washed with 100 ml of water and 500 ml of saturated saline, and then washed with sodium sulfate. Dried. The organic layer was dried over magnesium sulfate and concentrated to dryness under reduced pressure to give D-2-butoxycarbonylamino- (benzo [b] thiophen-3-yl)-.
77.4 g of propionic acid were obtained. (Yield 100%) NMR (δ, DMSO-d6): 1.00-1.57
(M, 9H), 3.08-3.40 (m, 2H);
21-4.52 (m, 1H), 7.12-8.09
(M, 5H) IR (ν _max , cm ⁻¹ ): 3440, 2940, 170
0, 1635, 1560

【００２３】[0023]

【実施例３】Ｄ−２−（ｔ−ブトキシカルボニルアミ
ノ）−（ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−プロピ
オン酸５８．７ｇ、１−ヒドロキシベンゾトリアゾ−ル
２４．７ｇ、ピペロニルアミン１９．４ｍｌをクロロホ
ルム８２０ｍｌに溶解し、０℃でジシクロヘキシルカル
ボジイミド４１．４ｇを加え、室温にて、１時間撹拌し
た。析出したジシクロヘキシルウレアをろ過で除いた。
飽和炭酸水素ナトリウム溶液、１０％クエン酸溶液、飽
和食塩水の各々３００ｍｌで洗浄し、硫酸ナトリウムで
乾燥した。溶媒の量が３００ｍｌ位になるよう溶媒を溜
去し、エーテルを５００ｍｌ加え、１６時間静置した。
析出した結晶をろ取し、Ｄ−Ｎ−ピペロニル−２−（ｔ
−ブトキシカルボニルアミノ）−（ベンゾ［ｂ］チオフ
ェン−３−イル）−プロピオニルアミド５５．４ｇ（収
率６７％）を得た。Example 3 58.7 g of D-2- (t-butoxycarbonylamino)-(benzo [b] thiophen-3-yl) -propionic acid, 24.7 g of 1-hydroxybenzotriazole, piperonylamine 4 ml of chloroform was dissolved in 820 ml of chloroform, 41.4 g of dicyclohexylcarbodiimide was added at 0 ° C., and the mixture was stirred at room temperature for 1 hour. The precipitated dicyclohexylurea was removed by filtration.
It was washed with 300 ml each of a saturated sodium hydrogen carbonate solution, a 10% citric acid solution and a saturated saline solution, and dried over sodium sulfate. The solvent was distilled off so that the amount of the solvent was about 300 ml, 500 ml of ether was added, and the mixture was allowed to stand for 16 hours.
The precipitated crystals were collected by filtration, and DN-piperonyl-2- (t
Thus, 55.4 g (yield 67%) of -butoxycarbonylamino)-(benzo [b] thiophen-3-yl) -propionylamide was obtained.

【００２４】ＮＭＲ（δ、ＣＤＣｌ₃ ）：１．３６
（ｓ、９Ｈ）、３．２９（ｄ、２Ｈ、Ｊ＝７．５Ｈ
ｚ）、４．１３（ｄ、２Ｈ、Ｊ＝７．５Ｈｚ）、４．４
３（ｑ、１Ｈ、Ｊ＝７．５Ｈｚ）、５．９７（ｓ、２
Ｈ）、６．００〜６．３０（ｍ、１Ｈ）、６．３０〜
６．７０（ｍ、３Ｈ）、７．１０〜７．９０（ｍ、５
Ｈ） ＩＲ（ν_max 、ｃｍ^-1）：３３００、１６８０、１６４
５、１５６５、１５２０NMR (δ, CDCl ₃ ): 1.36
(S, 9H), 3.29 (d, 2H, J = 7.5H
z), 4.13 (d, 2H, J = 7.5 Hz), 4.4
3 (q, 1H, J = 7.5 Hz), 5.97 (s, 2
H), 6.00 to 6.30 (m, 1H), 6.30 to
6.70 (m, 3H), 7.10 to 7.90 (m, 5
H) IR (ν _max , cm ⁻¹ ): 3300, 1680, 164
5, 1565, 1520

【００２５】[0025]

【実施例４】Ｄ−Ｎ−ピペロニル−２−（ｔ−ブトキシ
カルボニルアミノ）−（ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−
イル）−プロピオニルアミド６３．７ｇをジオキサン５
００ｍｌに加えた。さらに室温にて、４Ｎ塩酸ジオキサ
ン１４２ｍｌを加え、８０℃で１時間撹拌した。６０℃
で１５０ｍｌまで有機溶媒を減圧濃縮すると、結晶が析
出してくる。結晶をろ取し、Ｄ−Ｎ−ピペロニル−２−
アミノ−（ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イル）−プロ
ピオニルアミド塩酸塩５２．３ｇを得た（収率９５
％）。Example 4 DN-piperonyl-2- (t-butoxycarbonylamino)-(benzo [b] thiophen-3-
Yl) -propionylamide in 63.7 g of dioxane 5
Added to 00 ml. Further, at room temperature, 142 ml of 4N hydrochloric acid dioxane was added, and the mixture was stirred at 80 ° C. for 1 hour. 60 ° C
When the organic solvent is concentrated under reduced pressure to 150 ml with crystallization. The crystals were collected by filtration, and DN-piperonyl-2-
52.3 g of amino- (benzo [b] thiophen-3-yl) -propionylamide hydrochloride was obtained (yield: 95).
%).

【００２６】ＮＭＲ（δ、ＤＭＳＯ−ｄ6 ）：３．２０
〜３．４０（ｍ、２Ｈ）、４．００〜４．２０（ｍ、３
Ｈ）、５．９０（ｓ、２Ｈ）、６．６１（ｄｄ、１Ｈ、
Ｊ＝７．９Ｈｚ，Ｊ＝１．３Ｈｚ）、６．７２（ｄ、１
Ｈ、Ｊ＝１．３Ｈｚ）、６．７８（ｄ、１Ｈ、Ｊ＝７．
９Ｈｚ）、７．３０〜８．１０（ｍ，５Ｈ）、８．５１
（ｂｓ，３Ｈ），９．０４（ｍ，１Ｈ） ＩＲ（ν_max 、ｃｍ^-1）：３２５０、２９７０、１６６
０、１５５０NMR (δ, DMSO-d6): 3.20
~ 3.40 (m, 2H), 4.00 to 4.20 (m, 3H)
H), 5.90 (s, 2H), 6.61 (dd, 1H,
J = 7.9 Hz, J = 1.3 Hz), 6.72 (d, 1
H, J = 1.3 Hz), 6.78 (d, 1H, J = 7.
9 Hz), 7.30 to 8.10 (m, 5H), 8.51
(Bs, 3H), 9.04 (m, 1H) IR (ν _max , cm ⁻¹ ): 3250, 2970, 166
0, 1550

【００２７】[0027]

【発明の効果】本発明の製造方法は、Ｄ−Ｎ−ピペロニ
ル−２−アミノ−（ベンゾ［ｂ］チオフェン−３−イ
ル）−プロピオニルアミドを選択的に、かつ、高収率で
製造するのに好適である。According to the production method of the present invention, DN-piperonyl-2-amino- (benzo [b] thiophen-3-yl) -propionylamide can be produced selectively and in high yield. It is suitable for.

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (58)調査した分野(Int.Cl.⁷，ＤＢ名) C07D 409/12 C12P 41/00 A61K 31/381 A61P 25/22 ＣＡ（ＳＴＮ) ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ)──────────────────────────────────────────────────続 き Continued on the front page (58) Field surveyed (Int. Cl. ⁷ , DB name) C07D 409/12 C12P 41/00 A61K 31/381 A61P 25/22 CA (STN) REGISTRY (STN)

Claims (1)

(57)【特許請求の範囲】(57) [Claims] 【請求項１】 下記の式 【化４】 で表わされる非天然型アシルアミノ酸のラセミ体を、ア
シラーゼを用いＬ−体を脱アシル化せしめ、下記の式 【化５】 で表わされる非天然型Ｌ−アミノ酸を生成させ、この反
応物より下記の式 【化６】 で表わされる非天然型アシル−Ｄ−アミノ酸を分離し、
該非天然型アシル−Ｄ−アミノ酸を加水分解してアミノ
基を有する化合物を生成せしめ、該アミノ基を保護化
し、ピペロニルアミンと縮合せしめ、前記アミノ基の保
護基を脱保護することを特徴とする、下記の式 【化７】 で表わされる光学活性なＤ−Ｎ−ピペロニル−２−アミ
ノ−（ベンゾ〔ｂ〕チオフェン−３−イル）−プロピオ
ニルアミドの製造法。 (1) The following formula: The non-natural acyl amino acid represented by the formula is deacylated in an L-form using an acylase to give the following formula: A non-natural L-amino acid represented by the formula is produced, and from the reaction product, the following formula: Separating an unnatural acyl-D-amino acid represented by
Hydrolyzing the unnatural acyl-D-amino acid to produce a compound having an amino group, protecting the amino group, condensing it with piperonylamine, and deprotecting the amino-protecting group. The following formula: A method for producing an optically active DN-piperonyl-2-amino- (benzo [b] thiophen-3-yl) -propionylamide represented by the formula: