JP3118869B2 - Fat body composition containing prostaglandins - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION

【０００１】[0001]

【産業上の利用分野】本発明は、プロスタグランジン類
（以下ＰＧ類という）の生体内における放出速度の抑制
（徐放化）され、ＰＧ類の脂肪小体への取り込み率の向
上され、さらに製剤中ないしは生体内におけるＰＧ類の
安定性が改善されたＰＧ類含有脂肪小体組成物に関す
る。The present invention relates to a prostaglandin (hereinafter referred to as "PGs") having a reduced rate of release in vivo (sustained release), an improved rate of incorporation of PGs into fat bodies, Furthermore, the present invention relates to a PG-containing fat body composition having improved stability of PGs in a preparation or in a living body.

【０００２】[0002]

【従来技術・発明が解決しようとする課題】ＰＧ類は、
血管拡張、末梢循環改善、降圧、抗脂肪分解、ナトリウ
ム利尿など種々多彩な生理作用を有することから、医薬
品への適用がなされている。ところが、ＰＧ類は生体内
で速やかに不活性物質へ代謝されてしまい、十分な薬効
を発揮しえないことが問題である。そのため、ＰＧ類製
剤は頻回投与することが必要となり、患者の苦痛を増す
ばかりでなく、瀕回投与に基づく副作用の恐れがある。
この問題点の解決の手段としてＰＧ類を脂肪小体に含有
させた製剤が知られている。2. Description of the Related Art PGs are:
Since it has various physiological actions such as vasodilation, improvement of peripheral circulation, hypotension, antilipolysis, and natriuresis, it has been applied to pharmaceuticals. However, there is a problem in that PGs are rapidly metabolized into an inactive substance in a living body and cannot exert a sufficient drug effect. Therefore, it is necessary to administer the PGs frequently, which not only increases the pain of the patient but also may cause side effects due to the frequent administration.
As a means for solving this problem, a preparation containing PGs in fat bodies is known.

【０００３】しかし、ＰＧ類含有脂肪小体製剤において
も、脂肪小体へのＰＧ類の取り込み（以下、封入ともい
う）率の改善、製剤自体の安定性の改善、脂肪小体に含
有させたＰＧ類の放出の抑制等の改善すべき問題点があ
り、様々の検討が行われている。[0003] However, in the case of liposome preparations containing PGs, the rate of incorporation (hereinafter also referred to as encapsulation) of PGs into the lipid bodies is improved, the stability of the preparation itself is improved, and the lipid bodies are contained in the lipid bodies. There are problems to be improved, such as suppression of the release of PGs, and various studies have been made.

【０００４】特表昭６３−５０３５２６号公報、特表平
２−５０４０２７号公報には脂肪小体にイオン勾配、ｐ
Ｈ勾配等の膜透過濃度勾配を持たせることにより、ＰＧ
類の取り込み率の改善された脂肪小体が提案されてい
る。しかしながら、上記公報に記載された脂肪小体にお
いても、製剤化時におけるＰＧ類の取り込み率の改善は
なされるものの、取り込まれたＰＧ類は生体内で速やか
に脂肪小体外に放出されて不活性化されてしまうため、
取り込み率の改善は実用上その薬効、特に薬効の持続性
には十分反映していないのが実情である。特に、水、血
液などによって希釈されることによって、脂肪小体内の
ＰＧ類は速やかに脂肪小体外に放出され、不活性化され
てしまうのでこの点の改善が待望されている。[0004] JP-T-63-503526 and JP-T-2-504027 disclose an ion gradient, p
By having a membrane permeation concentration gradient such as an H gradient,
Fat bodies with improved class uptake rates have been proposed. However, even in the fat bodies described in the above publication, although the uptake rate of PGs at the time of formulation is improved, the taken-up PGs are rapidly released outside the fat body in vivo and inactivated. To be done,
The fact is that the improvement in the uptake rate does not sufficiently reflect its medicinal effect in practical use, particularly, the persistence of the medicinal effect. In particular, when diluted with water, blood, or the like, PGs in the fat body are quickly released from the fat body and inactivated, and thus improvement in this respect is expected.

【０００５】本発明の目的は、ＰＧ類の脂肪小体への取
り込み率が改善され、しかも脂肪小体からのＰＧ類の血
液内での遊離速度が抑制され、ひいては製剤中ないしは
生体内におけるＰＧ類の安定性が改善されたＰＧ類含有
脂肪小体組成物を提供することにある。It is an object of the present invention to improve the rate of incorporation of PGs into lipid bodies, suppress the rate of release of PGs from lipid bodies in blood, and further reduce the rate of PGs in pharmaceutical preparations or in vivo. Another object of the present invention is to provide a PG-containing fat body composition having improved stability of the fat.

【０００６】[0006]

【課題を解決するための手段】本発明者らは、種々研究
を重ねてきたところ、膜透過濃度勾配を持たせたＰＧ類
含有脂肪小体組成物において、脂肪小体を構成する脂質
がヨウ素価６０以下であれば、ＰＧ類の取り込み率が改
善され、且つ脂肪小体からのＰＧ類の放出特性が改善さ
れ、生体内においてＰＧ類の薬効が十分に発揮されるこ
とをはじめて知見した。即ち、本発明は膜内外で濃度勾
配を有する脂肪小体であり、脂肪小体を構成する脂質が
ヨウ素価６０以下であることを特徴とするプロスタグラ
ンジン類含有脂肪小体組成物に関する。Means for Solving the Problems The present inventors have made various studies and found that lipids constituting lipid bodies are iodine in a PG-containing lipid body composition having a membrane permeation concentration gradient. When the value is 60 or less, it has been found for the first time that the uptake rate of PGs is improved, the release characteristics of PGs from fat bodies are improved, and the pharmacological effects of PGs are sufficiently exhibited in vivo. That is, the present invention relates to a prostaglandin-containing fat body composition, which is a fat body having a concentration gradient inside and outside the membrane, and a lipid constituting the fat body has an iodine value of 60 or less.

【０００７】本発明において、脂肪小体（リポソーム）
自体は既知の製剤であり、単一層あるいは多重層の脂質
二分子膜間構造をなし、各種蛋白質その他の生理活性物
質をその間隙に取り込む能力を有するものである。In the present invention, lipid bodies (liposomes)
It is a known formulation itself, having a monolayer or multilayer bilayer lipid bilayer structure, and having the ability to take in various proteins and other physiologically active substances into its interstices.

【０００８】本発明の脂肪小体を形成するための脂質成
分は、ヨウ素価６０以下のものであり、ヨウ素価は好ま
しくは４０以下、特に好ましくは２０以下である。ここ
にヨウ素価は日本薬局方の一般試験法の中の油脂試験法
にて測定した値である。[0008] The lipid component for forming lipid bodies according to the present invention has an iodine value of 60 or less, and preferably has an iodine value of 40 or less, particularly preferably 20 or less. Here, the iodine value is a value measured by the fat test method in the general test method of the Japanese Pharmacopoeia.

【０００９】このようなヨウ素価を有する脂質は、飽和
度の高い脂質、特に飽和度の高いリン脂質を含有させた
ものである。飽和度の高いリン脂質としては、例えば水
素添加リン脂質（即ち、天然リン脂質を水素添加したも
の）、天然リン脂質中の少なくとも一つの不飽和脂肪族
アシル基部分が炭素数１４〜２２の飽和脂肪族アシル基
と置き変わったものが挙げられ、それらは生理的に許容
され、そして代謝されうるものであればいずれも本発明
に用いられる。天然リン脂質とは、天然由来のリン酸エ
ステルおよびホスホン酸エステルをもつ脂質の総称をい
い、例えばホスファチジルコリン、ホスファチジルセリ
ン、ホスファチジルグリセロール、スフィンゴミエリ
ン、あるいは大豆リン脂質、卵黄リン脂質等が例示され
る。The lipid having such an iodine value contains a highly saturated lipid, particularly a highly saturated phospholipid. Examples of the phospholipid having a high degree of saturation include hydrogenated phospholipids (that is, hydrogenated natural phospholipids), wherein at least one unsaturated aliphatic acyl group moiety in the natural phospholipid has a saturated carbon number of 14 to 22. Aliphatic acyl groups may be substituted, and any physiologically acceptable and metabolizable can be used in the present invention. The natural phospholipid is a generic term for lipids having a phosphate ester and a phosphonate ester derived from nature, and examples thereof include phosphatidylcholine, phosphatidylserine, phosphatidylglycerol, sphingomyelin, soybean phospholipid, and egg yolk phospholipid.

【００１０】水素添加リン脂質としては、完全水素添加
リン脂質、不完全水素添加リン脂質（例えば、４０％水
素添加、５０％水素添加、７０％水素添加など）があ
り、これらは実質的に公知であるか、公知の方法または
それに準ずる方法によって製造される。水素添加リン脂
質の市販品としては、例えば卵黄ホスファチジルコリン
Ｎｏ．１（旭化成社製、ヨウ素価約１、約１００％水素
添加）、卵黄ホスファチジルコリンＮｏ．２０（旭化成
社製、ヨウ素価約２０）約７０％水素添加）、卵黄ホス
ファチジルコリンＮｏ．３０（旭化成社製、ヨウ素価約
３０）約５０％水素添加）、卵黄ホスファチジルコリン
Ｎｏ．４０（旭化成社製、ヨウ素価約４０、約４０％水
素添加）等が挙げられる。特に、好ましい脂質として
は、ホスファチジルコリンの水素添加物が挙げられる。
本発明においては１０〜１００％、好ましくは４０〜８
０％水素添加されていることが好適である。[0010] The hydrogenated phospholipids include fully hydrogenated phospholipids and incompletely hydrogenated phospholipids (eg, 40% hydrogenated, 50% hydrogenated, 70% hydrogenated, etc.), and these are substantially known. Or by a known method or a method analogous thereto. Commercially available hydrogenated phospholipids include, for example, egg yolk phosphatidylcholine No. 1 (manufactured by Asahi Kasei Corporation, iodine value about 1, about 100 % hydrogenated), yolk phosphatidylcholine No. 1 20 (manufactured by Asahi Kasei Corporation, iodine value about 20), about 70% hydrogenated), egg yolk phosphatidylcholine No. No. 30 (produced by Asahi Kasei Corporation, iodine value about 30), about 50% hydrogenated), yolk phosphatidylcholine No. 40 (manufactured by Asahi Kasei Corporation, iodine value about 40, about 40% hydrogenation) and the like. Particularly preferred lipids include hydrogenated phosphatidylcholines.
In the present invention, 10 to 100%, preferably 40 to 8%.
Preferably, it is hydrogenated at 0%.

【００１１】また、少なくとも一つの脂肪酸部分の炭素
数が１４〜２２の飽和脂肪酸からなるリン脂質も実質的
に公知であり、天然リン脂質のアシル基を、加水分解に
よって切断した後、炭素数１４〜２２の飽和脂肪酸に相
当するアシル化を行うことによって製造することができ
る。市販品としてジパルミトイルホスファチジルコリン
（シグマ社製）等がある。Also, a phospholipid comprising a saturated fatty acid having at least one fatty acid moiety having 14 to 22 carbon atoms is substantially known, and after the acyl group of a natural phospholipid is cleaved by hydrolysis, it has 14 carbon atoms. To 22 saturated fatty acids. Dipalmitoyl phosphatidylcholine as a commercial product
(Manufactured by Sigma) .

【００１２】本発明においては、上記飽和度の高いリン
脂質に加えて、例えば天然リン脂質、糖脂質、誘導脂質
等を配合することができる。糖脂質としては、セレブロ
シド、硫脂質（Ｓulfatide) 、ガングリオシド等が例示
される。また、誘導脂質としては、コール酸、デオキシ
コール酸等が例示される。In the present invention, for example, natural phospholipids, glycolipids, derived lipids and the like can be blended in addition to the highly saturated phospholipids. Examples of glycolipids include cerebroside, sulfatide, ganglioside, and the like. Examples of the derived lipid include cholic acid and deoxycholic acid.

【００１３】脂質成分中における飽和度の高い脂質の配
合割合は、ヨウ素価６０以下とするに十分量であればよ
く、その量は脂質の種類等によって異なるが、通常４０
モル％以上、好ましくは６０モル％以上、さらに好まし
くは８０モル％以上の割合で配合される。脂質はＰＧ類
１重量部当たり、通常１０〜５０００重量部、好ましく
は５００〜２０００重量部配合される。The mixing ratio of the highly saturated lipid in the lipid component may be an amount sufficient to make the iodine value 60 or less, and the amount varies depending on the kind of the lipid.
It is blended in an amount of at least mol%, preferably at least 60 mol%, more preferably at least 80 mol%. The lipid is generally blended in an amount of 10 to 5,000 parts by weight, preferably 500 to 2,000 parts by weight, per part by weight of the PG.

【００１４】本発明で用いられるＰＧ類は、アラキドン
酸代謝物またはそれらの構造類似化合物である。アラキ
ドン酸代謝物としては、例えばプロスタグランジン、プ
ロスタサイクリン、トロンボキサン、ロイコトリエン等
が挙げられる。The PGs used in the present invention are arachidonic acid metabolites or structurally similar compounds thereof. Examples of arachidonic acid metabolites include, for example, prostaglandins, prostacyclins, thromboxanes, leukotrienes and the like.

【００１５】本発明の脂肪小体は、膜内外間で濃度勾配
を有する脂肪小体であり、濃度勾配としては、ｐＨ勾配
が好ましいものとして挙げられる。ｐＨ勾配としては、
脂肪小体外液のｐＨが２〜６であり、脂肪小体内封溶液
のｐＨが７〜１１であるものが好ましく、脂肪小体内封
溶液のｐＨは弱酸と強塩基の組み合わせにて７〜１１に
調整されてなるものが好ましい。The fat body of the present invention is a fat body having a concentration gradient between the inside and outside of the membrane, and the concentration gradient is preferably a pH gradient. As the pH gradient,
It is preferable that the pH of the extracorporeal solution is 2 to 6, and the pH of the encapsulating solution is 7 to 11. The pH of the encapsulating solution is 7 to 11 by a combination of a weak acid and a strong base. Those that are adjusted are preferred.

【００１６】脂肪小体外液はｐＨ２〜６、好ましくはｐ
Ｈ３〜５である。かかるｐＨとするためには、通常緩衝
液が使用される。緩衝液は本発明の目的を達成しうる限
り特に制限はなく、例えばクエン酸緩衝液、酢酸緩衝
液、乳酸緩衝液等が例示され、特に好ましい外液として
はクエン酸緩衝液が挙げられる。当該緩衝液の濃度は５
〜５００ｍＭ、好ましくは２０〜２００ｍＭである。ま
た、浸透圧を調整するために、蔗糖などを配合してもよ
い。The extracorporeal fluid has a pH of 2 to 6, preferably p
H3 to 5. To achieve such a pH, a buffer is usually used. The buffer is not particularly limited as long as the object of the present invention can be achieved. Examples thereof include a citrate buffer, an acetate buffer, and a lactate buffer, and a particularly preferred external solution is a citrate buffer. The concentration of the buffer is 5
５００500 mM, preferably 20-200 mM. Further, sucrose or the like may be blended to adjust the osmotic pressure.

【００１７】本発明の脂肪小体内封溶液は、ｐＨ７〜１
１、好ましくはｐＨ９〜１０である。このｐＨの調製は
弱酸と強塩基にて行われることが好ましい。弱酸と強塩
基の組み合わせとしては、炭酸と炭酸ナトリウム、リン
酸とリン酸ナトリウム、ホウ酸とホウ酸ナトリウム、ピ
ロリン酸とピロリン酸ナトリウムとの組み合わせ等が挙
げられ、特に好ましくは炭酸と炭酸ナトリウムとの組み
合わせが挙げられる。脂肪小体内封溶液濃度は、通常１
００〜１０００ｍＭ、好ましくは５００〜６００ｍＭで
ある。The fat body sealing solution of the present invention has a pH of 7-1.
1, preferably pH 9-10. This pH adjustment is preferably performed with a weak acid and a strong base. Examples of the combination of a weak acid and a strong base include carbonic acid and sodium carbonate, phosphoric acid and sodium phosphate, boric acid and sodium borate, a combination of pyrophosphoric acid and sodium pyrophosphate, and particularly preferably carbonic acid and sodium carbonate. Combinations. Fat body sealing solution concentration is usually 1
It is 00 to 1000 mM, preferably 500 to 600 mM.

【００１８】本発明の脂肪小体の製造の概略は、次の通
りである。即ち、適当な脂質を含有する溶液（当該溶液
は脂質を変性しない溶媒を使用するものであればよく、
例えばクロロホルム等の有機溶媒溶液が例示される）か
ら溶媒を留去して脂質の薄膜を作り、この薄膜に脂肪小
体内封溶液と同組成の溶液を加え、凍結融解を行い、脂
肪小体を調製する。凍結融解の際の凍結はドライアイス
上に静置する方法等によって行われ、融解は３０〜４０
℃の温浴に浸漬する方法等によって行われる。The outline of the production of the fat body of the present invention is as follows. That is, a solution containing an appropriate lipid (the solution may be a solution using a solvent that does not denature the lipid,
For example, an organic solvent solution such as chloroform is exemplified), and the solvent is distilled off to form a lipid thin film, and a solution having the same composition as the fat body sealing solution is added to the thin film, followed by freezing and thawing to remove the fat body. Prepare. Freezing at the time of freezing and thawing is performed by a method of standing on dry ice or the like.
It is carried out by a method of immersion in a warm bath of ° C.

【００１９】均一なサイズ分布（２００ｎｍ程度）にま
でフィルター等を用いてサイズを減少させた後、脂肪小
体外液と同組成の溶液を加え、膜透過ｐＨ勾配を形成さ
せる。これは３００００〜７００００ｒｐｍ程度での超
遠心操作等により行う。脂肪小体外液の交換は、その
他、ゲル濾過、限外濾過等の既知の手段が使用できる。
次いでこの水性懸濁液にＰＧ類を添加し、ＰＧ類含有脂
肪小体を得る。ＰＧ類は膜透過ｐＨ勾配を形成させる前
に添加することもできる。After reducing the size to a uniform size distribution (about 200 nm) using a filter or the like, a solution having the same composition as the extracorporeal fat solution is added to form a pH gradient across the membrane. This is performed by ultracentrifugation at about 30,000 to 70000 rpm. For the exchange of the extracorporeal fluid, other known means such as gel filtration and ultrafiltration can be used.
Next, PGs are added to this aqueous suspension to obtain PGs-containing fat bodies. PGs can also be added prior to forming a transmembrane pH gradient.

【００２０】なお、脂質薄膜の調製に際し、トコフェロ
ール（ビタミンＥ）、コレステロール、ホスファチジン
酸、ジセチルホスフェート、脂肪酸（パルミチン酸等）
等を安定化剤として配合してもよい。In preparing the lipid thin film, tocopherol (vitamin E), cholesterol, phosphatidic acid, dicetyl phosphate, fatty acid (such as palmitic acid)
May be blended as a stabilizer.

【００２１】上記に例示した製造法は凍結融解法（Pick
U.: Arch. Biochem. Biophys., 212, 186(1986)）によ
る製造法であるが、これに限らず超音波処理法（Huang,
C.: Biochemistry, 8, 344 (1969))、界面活性剤処理
法（Brunner, J. et al. : Biochem. Biophys. Acta, 4
55, 322 (1976)) 、逆相蒸発法（Szoka, F. et al. :Pr
oc. Natl. Acad. Sci.: USA, 75, 4194 (1978))、乳化
機による方法（Talsma, H. et al.: Drug Dev. and In
d. Pharmacy, 15, 197 (1989)) 等によっても製造する
ことができる。The production method exemplified above is a freeze-thaw method (Pick
U .: Arch. Biochem. Biophys., 212, 186 (1986)), but not limited thereto, and an ultrasonic treatment method (Huang,
C .: Biochemistry, 8, 344 (1969)), a surfactant treatment method (Brunner, J. et al .: Biochem. Biophys. Acta, 4
55 , 322 (1976)), reverse phase evaporation method (Szoka, F. et al .: Pr
oc. Natl. Acad. Sci .: USA, 75 , 4194 (1978)), a method using an emulsifier (Talsma, H. et al .: Drug Dev. and In
d. Pharmacy, 15 , 197 (1989)).

【００２２】また、本発明の脂肪小体はアルブミン、デ
キストラン、ビニル重合体、非イオン性界面活性剤、ゼ
ラチン、ヒドロキシエチル澱粉から選ばれた高分子物質
等を安定化剤として配合してもよい。当該高分子物質安
定化剤は、ＰＧ類と共に脂肪小体内の空隙に取り込まれ
ていてもよいし、またＰＧ類を取り込んだ脂肪小体に配
合（即ち、脂肪小体外に配合）してもよい。もちろん脂
肪小体の内外ともに配合してもよいことはいうまでもな
い。当該安定化剤の添加量は脂質１重量部に対して０．
５〜１０重量部、好ましくは１〜５重量部である。The fat body of the present invention may contain, as a stabilizer, a polymer selected from albumin, dextran, vinyl polymer, nonionic surfactant, gelatin, and hydroxyethyl starch. . The polymer stabilizer is taken into voids in the fat body together with the PGs.
It may be, also fat bodies formulated incorporating PG compound (i.e., blended fat small outside) may be. Of course, it is needless to say that both inside and outside of the fat body may be blended. The amount of the stabilizing agent to be added is 0.1 to 1 part by weight of the lipid.
It is 5 to 10 parts by weight, preferably 1 to 5 parts by weight.

【００２３】また、糖類の添加は、浸透圧の調整およ
び、後述する凍結乾燥製剤を調製する際に有利である。
かかる糖類としては、単糖類（グルコース、マンノー
ス、ガラクトース、果糖等）、二糖類（ショ糖、麦芽
糖、乳糖等）、糖アルコール（マンニット、ソルビッ
ト、キシリット等）が好適なものとして例示されるが、
これらに限定されるものではない。その添加量は脂質１
重量部に対して０．５〜１０重量部、好ましくは１〜５
重量部である。The addition of a saccharide is advantageous in adjusting the osmotic pressure and preparing a lyophilized preparation described later.
Preferred examples of such saccharides include monosaccharides (glucose, mannose, galactose, fructose, etc.), disaccharides (sucrose, maltose, lactose, etc.) and sugar alcohols (mannitol, sorbitol, xylit, etc.). ,
It is not limited to these. The amount added is 1 lipid
0.5 to 10 parts by weight, preferably 1 to 5 parts by weight per part by weight
Parts by weight.

【００２４】本発明の脂肪小体の直径は、通常２０〜５
００ｎｍ、好ましくは５０〜２５０ｎｍであり、かかる
粒径のものは肺での不活化を受けにくいものである。本
発明の脂肪小体へのＰＧ類の取り込み率は極めて良好で
あり、特に脂肪小体内封溶液のｐＨが弱酸と強塩基の組
み合わせにて７〜１１に調整されてなるもののＰＧ類の
取り込み率は１００％に近いため、さらに精製処理する
必要はなく、そのまま医薬品として使用可能であるが、
要すれば、さらに分子ふるい処理、夾雑物、遊離物を除
去するためのゲル濾過処理等の任意の少なくとも一つの
処理を行うこともできる。The diameter of the fat body of the present invention is usually 20 to 5
00 nm, preferably 50-250 nm, with such a particle size being less susceptible to lung inactivation. The incorporation rate of PGs into the fat body of the present invention is extremely good, and in particular, the incorporation rate of PGs in the case where the pH of the fat body sealing solution is adjusted to 7 to 11 by a combination of a weak acid and a strong base. Is close to 100%, so there is no need for further purification, and it can be used as a pharmaceutical as it is,
If necessary, any at least one treatment such as a molecular sieving treatment, a gel filtration treatment for removing contaminants and free matter, and the like can be performed.

【００２５】ＰＧ類を取り込んだ脂肪小体は沈澱物とし
て回収することができる。例えば、脂肪小体を含有する
媒体を超遠心処理し、脂肪小体を沈澱物として回収する
ことができる。このものは次いで要すれば生理的に許容
される水溶液で洗浄し、ペレット状、懸濁状の製剤とし
て調製する。製剤化は医薬品の製法において広く公知の
方法に準ずる。Fat bodies incorporating PGs can be recovered as a precipitate. For example, a medium containing lipid bodies can be subjected to ultracentrifugation, and the lipid bodies can be collected as a precipitate. This is then washed, if necessary, with a physiologically acceptable aqueous solution to prepare a pellet or suspension. Formulation is in accordance with widely known methods in the production of pharmaceuticals.

【００２６】かくして得られたＰＧ類含有脂肪小体組成
物は脂肪小体へのＰＧ類の取り込み率が非常に高く、し
かもその粒子径は均一であり、極めて微小であることか
ら医療用製剤として好ましい。特に本発明のＰＧ類含有
脂肪小体組成物は、生体内においてもＰＧ類の遊離が抑
制されており、持続性を有するものであり、頻回投与す
る必要がない。また本発明の脂肪小体は、その液状製剤
を凍結させた後、減圧下で乾燥させ、凍結乾燥製剤とし
ても提供されるが、その調製法は公知の方法に従えばよ
い。The PG-containing fat body composition thus obtained has a very high incorporation rate of PGs into the fat body, and its particle diameter is uniform and extremely small. preferable. In particular, the PG-containing lipid body composition of the present invention has a suppressed release of PGs even in a living body, has a long-lasting property, and does not require frequent administration. The lipid body of the present invention is also provided as a lyophilized preparation by freezing the liquid preparation and then drying it under reduced pressure. The preparation method may be in accordance with a known method.

【００２７】本発明の脂肪小体組成物の製剤は、一般的
に経口薬または注射薬として経口的または非経口的に投
与され、その投与量は成人の場合、ＰＧ類として１〜５
０μｇ／１回の量において投与される。凍結乾燥製剤
は、その使用時に、生理的に許容される水性溶媒（例え
ば、注射用蒸留水）によって溶解または希釈して用いら
れるのが一般的である。また、当該凍結乾燥製剤は、製
剤上の工夫によって錠剤化、カプセル化、腸液性カプセ
ル化してもよい。The preparation of the lipid body composition of the present invention is generally administered orally or parenterally as an oral drug or an injection, and the dose is 1 to 5 as PGs for an adult.
It is administered at a dose of 0 μg / single . The lyophilized preparation is generally used by dissolving or diluting it with a physiologically acceptable aqueous solvent (for example, distilled water for injection) at the time of use. In addition, the freeze-dried preparation may be tableted, encapsulated, or enteric-encapsulated by devising the preparation.

【００２８】[0028]

【実施例・実験例】以下の参考例、実施例および実験例
は、特に言及しない限り各々次の要領で行った。 １．ＰＧ類含有脂肪小体の製造： 本発明で規定されるリン脂質〔例えば、完全水素添加卵
黄由来フォスファチジルコリン（以下、Ｈ−ＥＰＣと略
す）７０ｍｇとコレステロール適当量とを混合する。こ
の混合物をクロロホルム１ｍｌに溶解した後、２５ｍｌ
容の梨型フラスコに入れ、ロータリーエバポレータでク
ロロホルムを留去し、脂質薄膜を調製した。内壁に脂質
薄膜を形成したフラスコをデシケーターに入れ真空ポン
プで１時間吸引した。次に、フラスコに第１の緩衝液
〔脂肪小体内封溶液と同組成：例えば５０ｍＭ炭酸緩衝
液（炭酸および炭酸ナトリウムからなる。ｐＨ１０．
１）〕を１ｍｌ加え、ボルテクス・ミキサーで攪拌して
脂質懸濁液（ＭＬＶ）を調製した。Examples and Experimental Examples The following Reference Examples, Examples and Experimental Examples were performed in the following manner unless otherwise specified. 1. Production of PG-containing fat bodies: 70 mg of a phospholipid [for example, phosphatidylcholine (hereinafter abbreviated as H-EPC) derived from completely hydrogenated egg yolk and an appropriate amount of cholesterol are mixed in the present invention. After dissolving this mixture in 1 ml of chloroform, 25 ml
The mixture was placed in a pear-shaped flask, and chloroform was distilled off with a rotary evaporator to prepare a lipid thin film. The flask in which the lipid thin film was formed on the inner wall was placed in a desiccator and sucked for one hour with a vacuum pump. Next, a first buffer solution (having the same composition as the fat body sealing solution: for example, 50 mM carbonate buffer) was added to the flask.
Liquid (consisting of carbonic acid and sodium carbonate, pH 10.
1) ] was added and stirred with a vortex mixer to prepare a lipid suspension (MLV).

【００２９】次に、ドライアイス上で凍結後、３７℃温
浴中で融解するという操作を５回繰り返し、脂肪小体
（ＬＵＶ）を調製した。次に、０．２μｍのＮｕｃｌｅ
ｐｏｒｅ フィルター（Ｃｏｓｔａｒ Ｃｏｒｐｏｒａ
ｔｉｏｎ）を用いて１０回濾過を行い、粒子径を均一に
した。次に前記調製に用いたのと同じ緩衝液３ｍｌに脂
肪小体１００μｌを加えたサンプルに、第２の緩衝液
〔脂肪小体外液と同組成、例えば８００ｍＭ蔗糖含有２
０ｍＭクエン酸緩衝液（ｐＨ３．０）を使用〕を５ｍｌ
加え、超遠心（５００００ｒｐｍ、３０分間）を２回行
い、膜透過ｐＨ勾配を有した脂肪小体を調製した。次
に、風乾したＰＧ類に上記脂肪小体を加え６０℃、１分
間インキュベーションした。以上の工程によりＰＧ類含
有脂肪小体を調製した。尚、ＭＬＶは多重ラメラ小胞で
あり、ＬＵＶは粒子径の大きな単層ラメラ小胞である。Next, the procedure of freezing on dry ice and thawing in a 37 ° C. warm bath was repeated five times to prepare fat bodies (LUV). Next, a 0.2 μm Nucle
pore filter (Costar Corpora
The mixture was filtered 10 times using a thiol) to make the particle size uniform. Next, a sample obtained by adding 100 μl of fat bodies to 3 ml of the same buffer solution used in the above preparation was added to a second buffer solution [having the same composition as the extra-fat body solution, for example, 2 mM containing 800 mM sucrose.
Using 0 mM citrate buffer (pH 3.0)]
In addition, ultracentrifugation (50,000 rpm, 30 minutes) was performed twice to prepare a lipid body having a transmembrane pH gradient. Next, the fat bodies were added to the air-dried PGs and incubated at 60 ° C. for 1 minute. By the above steps, PG-containing fat bodies were prepared. MLV is a multilamellar vesicle, and LUV is a single- lamellar vesicle having a large particle diameter.

【００３０】２．ＰＧ類の封入効率の測定： トリチウム標識ＰＧ類を利用して、限外濾過法にて測定
した。即ち、限外濾過膜（Ａｍｉｃｏｎ製ＡＰ−１）上
に捕捉されたＰＧ類を脂肪小体に取り込まれたＰＧ類と
し、限外濾過膜を通過したＰＧ類をフリーのＰＧ類とし
た。そして、全体のＰＧ類に対する捕捉されたＰＧ類の
割合を以てＰＧ類の封入効率とした。すなわち、ＰＧ類
の封入効率は、図１に示した如き手法を経て、限外濾過
膜の放射活性および濾液の放射活性を各々測定し、下式
によって求めたものである。 （限外濾過膜の放射活性）÷（限外濾過膜の放射活性＋
濾液の放射活性）×１００ （放射活性の測定） サンプリングした液１００μｌに液体シンチレーター１
０ｍｌを加え、良く攪拌した後、放射活性を測定した。2. Measurement of encapsulation efficiency of PGs: It was measured by an ultrafiltration method using tritium-labeled PGs. That is, PGs captured on the ultrafiltration membrane (AP-1 manufactured by Amicon) were defined as PGs incorporated into the fat body, and PGs passed through the ultrafiltration membrane were defined as free PGs. Then, the ratio of PGs captured to the entire PGs was used as the PG encapsulation efficiency. That is, the encapsulation efficiency of the PGs was determined by the following formula by measuring the radioactivity of the ultrafiltration membrane and the radioactivity of the filtrate through the method shown in FIG. (Radioactivity of ultrafiltration membrane) ÷ (Radioactivity of ultrafiltration membrane +
(Radioactivity of filtrate) × 100 (Measurement of radioactivity) 100 μl of sampled liquid was added to liquid scintillator 1
After adding 0 ml and stirring well, radioactivity was measured.

【００３１】３．リン脂質（ＰＣ）の定量： リン脂質測定用試薬（酵素剤）（デンカ生研社製）を用
いて測定した。3. Quantification of phospholipid (PC): Measurement was performed using a reagent (enzyme) for measuring phospholipid (manufactured by Denka Seiken Co., Ltd.).

【００３２】実施例１・実験例１ 内封緩衝液のｐＨを７．０〜１０．０とした時のＰＧＥ
₁ 封入効率：ＰＧ類としてＰＧＥ₁ を使用し、脂質とし
て卵黄ホスファチジルコリンＮｏ．１（旭化成社製、ヨ
ウ素価約１、Ｈ−ＥＰＣ）：コレステロール（ＣＨＯ
Ｌ）を５５：４５（モル比）の配合で使用して、前記
「１．ＰＧ類含有脂肪小体の製造」で述べた方法に準じ
て製造した脂肪小体であって、内封緩衝液ｐＨを各々
７．０、８．０、９．０および１０．０としたもののＰ
ＧＥ₁ 封入効率を調べ、その結果を図２に示した。な
お、本実施例ではＰＧＥ₁５μｇに対し脂質（ＰＣ）量
を７．５ｍｇとした。また、脂質のヨウ素価はＨ−ＥＰ
Ｃ自体のヨウ素価である約１である。以下の実施例にお
いても、脂質としてＨ−ＥＰＣとＣＨＯＬとを併用した
場合、そのヨウ素価はＨ−ＥＰＣ自体のヨウ素価に等し
い。Example 1 / Experimental Example 1 PGE when the pH of the encapsulating buffer was adjusted to 7.0 to 10.0
₁ Encapsulation efficiency: PGE ₁ was used as PGs, and yolk phosphatidylcholine No. ₁ was used as lipid. 1 (manufactured by Asahi Kasei Corporation, iodine value about 1, H-EPC): cholesterol (CHO
L) is used in a ratio of 55:45 (molar ratio), and is a fat body produced according to the method described in the above-mentioned "1. Production of PG-containing fat body," P at pH 7.0, 8.0, 9.0 and 10.0 respectively
The GE ₁ encapsulation efficiency was examined, and the results are shown in FIG. In this example, the amount of lipid (PC) was 7.5 mg with respect to 5 μg of PGE ₁ . The iodine value of lipid is H-EP
It is about 1, which is the iodine value of C itself. Also in the following Examples, when H-EPC and CHOL are used in combination as lipids, the iodine value of H-EPC is equal to the iodine value of H-EPC itself.

【００３３】本実験において内封緩衝液としては、各々
次のものを使用した。すなわち、本発明の脂肪小体とし
ては、ｐＨ７．０は５００ｍＭリン酸緩衝液（リン酸お
よびリン酸ナトリウムからなる）、ｐＨ８．０および
９．０は５００ｍＭトリス緩衝液、ｐＨ１０．０は５０
０ｍＭ炭酸緩衝液（炭酸および炭酸ナトリウムからな
る）を使用した。また、対照脂肪小体としては、緩衝液
として内外液（ｐＨ３．０）とも２０ｍＭクエン酸緩衝
液を使用した。図２に示した結果から明らかなようにＰ
ＧＥ_１封入効率は、ｐＨ１０．０の炭酸緩衝液が最も高
く、次いでｐＨ７．０のリン酸緩衝液であった。In the present experiment, the following were used as the internal buffer. That is, as the fat body of the present invention, pH 7.0 is 500 mM phosphate buffer (phosphate and phosphate buffer).
And consisting of sodium phosphate), pH 8.0 and 9.0 500mM Tris buffer, the pH 10.0 50
0 mM carbonate buffer (from carbonate and sodium carbonate)
Was used . In addition, as a control fat body, a 20 mM citrate buffer was used as both a buffer and an internal / external solution (pH 3.0).
The liquid was used. As is clear from the results shown in FIG.
GE ₁ encapsulation efficiency, highest carbonate buffer of pH 10.0, followed by a phosphate buffer pH 7.0.

【００３４】実施例２・実験例２ 完全水素添加ＰＣを使用した時のＰＧＥ₁ 封入効率：Ｐ
Ｇ類としてＰＧＥ₁ を使用し、脂質としてＨ−ＥＰＣま
たはＨ−ＥＰＣ＋ＣＨＯＬ〔但し、Ｈ−ＥＰＣとＣＨＯ
Ｌとの配合比（モル比）は５５：４５および８０：２
０〕を使用し、前記「１．ＰＧ類含有脂肪小体の製造」
で述べた方法に準じて製造した脂肪小体のＰＧＥ₁ 封入
効率を調べ、その結果を表１に示した。なお、本実施例
ではＰＧＥ₁ ５μｇに対しＰＣ量を７５ｍｇとした。Example 2 and Experimental Example 2 PGE ₁ encapsulation efficiency when completely hydrogenated PC was used: P
Using PGE ₁ as a G class, H-EPC or H-EPC + CHOL as lipid [However, H-EPC and CHO
The mixing ratio (molar ratio) with L is 55:45 and 80: 2
0] and the above-mentioned “1. Production of PG-containing fat body”.
The PGE1 encapsulation efficiency of fat bodies produced according to the method described in ( ₁₎ was examined, and the results are shown in Table 1. In this example, the amount of PC was 75 mg with respect to 5 μg of PGE ₁ .

【００３５】[0035]

【表１】 表１の結果からも明らかなように、本発明の全てのもの
が封入効率９８％以上という高封入効率であった。[Table 1] Table As is apparent from the results, everything of the invention have a high encapsulation efficiency of the encapsulation efficiency 98%.

【００３６】実施例３・実験例３ 内封炭酸緩衝液の種類、濃度のＰＧＥ_１封入効率への影
響： ａ）ＰＧ類としてＰＧＥ_１を使用し、脂質としてＨ−Ｅ
ＰＣ／ＣＨＯＬ（モル比、５５：４５）を使用し、前記
「１．ＰＧ類含有脂肪小体の製造」で述べた方法に準じ
て製造した脂肪小体であって、下記の緩衝液を使用した
脂肪小体のＰＧＥ_１封入効率を調べ、その結果を図３に
示した。緩衝液としては、ｐＨ９．０は５００ｍＭトリ
ス緩衝液、１５０ｍＭホウ酸緩衝液（ホウ酸およびホウ
酸ナトリウムからなる）および５００ｍＭ炭酸緩衝液
を、ｐＨ１０．０は５００ｍＭ炭酸緩衝液を使用した。
また、対照脂肪小体としては、内外液とも２０ｍＭクエ
ン酸緩衝液にてｐＨ３．０に調製された脂肪小体を用い
た。なお、本実施例ではＰＧＥ_１５μｇに対しＰＣ量を
７．５ｍｇとした。本発明はいずれも優れた封入効率を
示し、特にホウ酸緩衝液、および炭酸緩衝液は高い封入
効率を示した。Example 3 / Experimental Example 3 PGE of Kind and Concentration of Enclosed Carbonate Buffer₁Shadow on encapsulation efficiency
Hibiki: a) PGE as PGs₁Using HE as a lipid
Using PC / CHOL (molar ratio, 55:45),
According to the method described in "1. Production of PG-containing fat body".
Fat body produced by using the following buffer solution
Fat body PGE₁The encapsulation efficiency was examined, and the results are shown in FIG.
Indicated. As a buffer, pH 9.0 is 500 mMbird
Buffer, 150 mMBorate buffer (borate and borate
Consisting of sodium acid)And 500 mMCarbonate buffer
PH 10.0 is 500 mMCarbonate bufferIt was used.
In addition, as a control fat body, both the inner and outer fluids were 20 mM.Que
Phosphate bufferUsing fat bodies adjusted to pH 3.0 at
Was. In this embodiment, PGE₁PC amount to 5μg
7.5 mg. The present invention provides excellent encapsulation efficiency
Shown, especially for borate and carbonate buffers with high encapsulation
Efficiency was shown.

【００３７】ｂ）ＰＧ類としてＰＧＥ_１５μｌを使用
し、脂質としてＨ−ＥＰＣ／ＣＨＯＬ（モル比、５５：
４５）を使用し、前記「１．ＰＧ類含有脂肪小体の製
造」で述べた方法に準じて製造した脂肪小体であって、
炭酸緩衝液（ｐＨ１０．０）の濃度を２５０ｍＭ、５０
０ｍＭ、１０００ｍＭに変化させた時のＰＧＥ_１封入効
率を測定し、その結果を図４に示した。図４に示した結
果から明らかなように炭酸濃度が高い程、ＰＧＥ_１封入
効率も高くなることがわかる。B) Using 5 μl of PGE ₁ as PGs and H-EPC / CHOL (molar ratio: 55:
45) a fat body produced according to the method described in the above-mentioned "1. Production of PG-containing fat body",
The concentration of carbonate buffer (pH 10.0) was adjusted to 250 mM, 50 mM
0 mM, measured PGE ₁ encapsulation efficiency when changing the 1000 mM, and the results are shown in FIG. The higher carbon dioxide concentration as apparent from the results shown in FIG. 4, it can be seen that PGE ₁ encapsulation efficiency also increases.

【００３８】実施例４・実験例４ 水素添加リン脂質のＰＧＥ₁ 封入効率：ＰＧ類としてＰ
ＧＥ₁ を使用し、脂質として水素添加リン脂質、すなわ
ち卵黄ホスファチジルコリンＮｏ．１（旭化成社製、ヨ
ウ素価約１）、卵黄ホスファチジルコリンＮｏ．２０
（旭化成社製、ヨウ素価約２０）、卵黄ホスファチジル
コリンＮｏ．３０（旭化成社製、ヨウ素価約３０）また
は卵黄ホスファチジルコリンＮｏ．４０（旭化成社製、
ヨウ素価約４０）／ＣＨＯＬ（モル比、５５：４５）を
使用し、前記「１．ＰＧ類含有脂肪小体の製造」で述べ
た方法に準じて製造した脂肪小体のＰＧＥ₁ 封入効率を
調べ、その結果を表２に示した。本実施例ではＰＧＥ₁
５μｇに対しＰＣ量を７．５ｍｇとした。Example 4 and Experimental Example 4 PGE ₁ encapsulation efficiency of hydrogenated phospholipid: P as PGs
GE1 was used, and hydrogenated phospholipid, ie, egg yolk phosphatidylcholine No. ₁ was used as a lipid. 1 (produced by Asahi Kasei Corporation, iodine value about 1), yolk phosphatidylcholine No. 1 20
(Produced by Asahi Kasei Corporation, iodine value approx. 20), egg yolk phosphatidylcholine No. 30 (manufactured by Asahi Kasei Corporation, iodine value about 30) or egg yolk phosphatidylcholine No. 30 40 (made by Asahi Kasei Corporation,
Using an iodine value of about 40) / CHOL (molar ratio: 55:45), the PGE ₁ encapsulation efficiency of a fat body produced according to the method described in “1. Production of PG-containing fat body” was determined. Investigation and the results are shown in Table 2. In this embodiment, PGE ₁
The amount of PC was 7.5 mg for 5 μg.

【００３９】[0039]

【表２】 表２に示した結果から明らかなように、本発明の脂肪小
体のＰＧＥ_１封入効率は、いずれも極めて良好なもので
あった。[Table 2] Table 2 As can be seen from the results shown in, PGE ₁ encapsulation efficiency of fat bodies of the present invention are all was extremely good.

【００４０】実施例５・実験例５ ＰＧＥ₁ の遊離率（放出率）：ＰＧ類としてＰＧＥ₁ を
使用し、脂質としてＨ−ＥＰＣまたはＨ−ＥＰＣ＋ＣＨ
ＯＬ〔但し、Ｈ−ＥＰＣとＣＨＯＬとの配合比（モル
比）は５５：４５または８０：２０〕を使用し、前記
「１．ＰＧ類含有脂肪小体の製造」で述べた方法に準じ
て製造した脂肪小体を２０ｍＭクエン酸緩衝液（ｐＨ
４．５）で１０倍希釈し、冷蔵庫で１０℃以下にて保存
し、経時的な脂肪小体からのＰＧＥ₁ の放出状況を、限
外濾過法によって調べた。対照脂肪小体として、天然リ
ン脂質（ＥＰＣ）／ＣＨＯＬ（モル比は５５：４５）を
使用した。その結果は表３に示した通りであり、本発明
の脂肪小体は９０時間保存によってもＰＧＥ₁ の放出は
僅かであった。このことから本発明の脂肪小体において
は、ＰＧ類の放出性が抑制されていること、即ち持続性
のあることがわかる。なお、内部緩衝液としては、５０
０ｍＭ炭酸緩衝液を使用した。Example 5 / Experimental Example 5 PGE ₁ release rate (release rate): PGE ₁ was used as PGs, and H-EPC or H-EPC + CH was used as lipid.
OL [however, the mixing ratio (molar ratio) of H-EPC and CHOL is 55:45 or 80:20], and according to the method described in the above-mentioned “1. The produced fat bodies were added to a 20 mM citrate buffer (pH
The mixture was diluted 10-fold in 4.5), stored in a refrigerator at 10 ° C. or lower, and the release status of PGE ₁ from fat bodies over time was examined by ultrafiltration. Natural phospholipid (EPC) / CHOL (molar ratio 55:45) was used as control fat body. The results are as shown in Table 3, release of PGE ₁ was slightly depending fat bodies store 90 hours of the invention. From this, it can be seen that in the fat body of the present invention, the release of PGs is suppressed, that is, it is persistent. In addition, as the internal buffer, 50
0 mM carbonate buffer was used.

【００４１】[0041]

【表３】 [Table 3]

【００４２】実施例６・実験例６ 脂肪小体に封入されたＰＧＥ₁ の放出性：（ａ）ＰＧ類
としてＰＧＥ₁ を使用し、脂質としてＨ−ＥＰＣまたは
Ｈ−ＥＰＣ＋ＣＨＯＬ〔但し、Ｈ−ＥＰＣとＣＨＯＬと
の配合比（モル比）は５５：４５または８０：２０〕を
使用し前記「１．ＰＧ類含有脂肪小体の製造」で述べた
方法に準じて脂肪小体を製造した。一方、脂質としてＥ
ＰＣ＋ＣＨＯＬ〔ＥＰＣとＣＨＯＬとの配合比（モル
比）は５５：４５〕を使用する以外は上記と同様の脂肪
小体（対照）を製造した。これら脂肪小体はいずれも内
封緩衝液として５００ｍＭ炭酸緩衝液（ｐＨ１０．０）
を、外液として２０ｍＭクエン酸緩衝液（ｐＨ４．５）
を使用したものであり、それらのＰＧＥ₁ 封入効率はい
ずれも９５％以上である。なお、ＰＧＥ₁ ５μｇに対し
ＰＣ量を７．５ｍｇとした。Example 6 / Experimental example 6 Release of PGE ₁ encapsulated in fat bodies: (a) PGE ₁ was used as PGs, and H-EPC or H-EPC + CHOL [here, H-EPC A fat body was produced according to the method described in “1. Production of PG-containing fat body” using a compounding ratio (molar ratio) of CHO and CHOL of 55:45 or 80:20]. On the other hand, E
A fat body (control) was produced in the same manner as described above, except that PC + CHOL (the mixing ratio (molar ratio of EPC and CHOL was 55:45)) was used. Each of these fat bodies was used as a buffer for encapsulation in a 500 mM carbonate buffer (pH 10.0).
With 20 mM citrate buffer (pH 4.5) as an external solution
And their PGE ₁ encapsulation efficiencies are all 95% or more. The amount of PC was 7.5 mg with respect to 5 μg of PGE ₁ .

【００４３】これら脂肪小体５００μｌを、それぞれ２
０ｍＭクエン酸緩衝液（ｐＨ４．５）にて２００倍およ
び２０００倍希釈し、直ちに脂肪小体内におけるＰＧＥ
₁ 量を測定し、その結果を図５に示した。この結果から
明らかなように、ＥＰＣからなる対照脂肪小体は、２０
０倍希釈では約７５％のＰＧＥ₁ 保持率を保ったもの
の、２０００倍希釈すると約２５％まで保持率が低下し
た。これに対して、Ｈ−ＥＰＣからなる本発明の脂肪小
体では２０００倍希釈においても、明らかなＰＧＥ₁ の
放出抑制が見られた。500 μl of each of these fat bodies was added to each of 2
Dilute 200-fold and 2000-fold with 0 mM citrate buffer (pH 4.5), and immediately
_One amount was measured, and the result is shown in FIG. As is evident from the results, the control fat body composed of EPC was 20
At 0-fold dilution, the retention of PGE _{1 was} maintained at about 75%, but at 2000-fold dilution, the retention decreased to about 25%. On the other hand, in the lipid body of the present invention composed of H-EPC, the release of PGE ₁ was clearly suppressed even at a 2,000-fold dilution.

【００４４】（ｂ）上記と同様にして、図６に示した各
割合でＨ−ＥＰＣまたはＥＰＣとＨ−ＥＰＣとを混合し
たもの５５モルとＣＨＯＬ４５モルとの混合物を脂質と
し、これらについても同様の試験を行った。これら脂肪
小体はいずれも内封緩衝液として５００ｍＭ炭酸緩衝液
（ｐＨ１０．０）を、外液として２０ｍＭクエン酸緩衝
液（ｐＨ４．５）を使用したものであり、それらのＰＧ
Ｅ_１封入効率はいずれも９５％以上である。なお、ＰＧ
Ｅ_１５μｇに対しＰＣ量を７．５ｍｇとした。試験結果
は図６に示した通りであり、Ｈ−ＥＰＣの混合率が高く
なるに従って、２０００倍希釈にしてもＰＧＥ_１の遊離
が抑制されることが明らかであった。(B) In the same manner as described above, a mixture of 55 mol of H-EPC or a mixture of EPC and H-EPC at each ratio shown in FIG. 6 and 45 mol of CHOL was used as a lipid. Was tested. Each of these fat bodies was prepared using a 500 mM carbonate buffer (pH 10.0) as an internal buffer and a 20 mM citrate buffer as an external solution.
Liquid (pH 4.5) and their PG
E ₁ encapsulation efficiency is both 95%. Note that PG
The amount of PC was 7.5 mg with respect to 5 μg of E ₁ . The test results are as shown in FIG. 6, according to the mixing ratio of H-EPC increases was evident that free also of PGE ₁ in the 2000-fold dilution is suppressed.

【００４５】各々のリン脂質のヨウ素価は、次の通りで
ある。ＥＰＣ／Ｈ−ＥＰＣ（０／１００）：ヨウ素価約
１ ＥＰＣ／Ｈ−ＥＰＣ（２０／８０）：ヨウ素価約１５ ＥＰＣ／Ｈ−ＥＰＣ（５０／５０）：ヨウ素価約３５ ＥＰＣ／Ｈ−ＥＰＣ（８０／２０）：ヨウ素価約５５ ＥＰＣ／Ｈ−ＥＰＣ（１００／０）：ヨウ素価約７０The iodine value of each phospholipid is as follows. EPC / H-EPC (0/100): Iodine value about 1 EPC / H-EPC (20/80): Iodine value about 15 EPC / H-EPC (50/50): Iodine value about 35 EPC / H-EPC (80/20): Iodine value about 55 EPC / H-EPC (100/0): Iodine value about 70

【００４６】（Ｃ）上記（ａ）と同様にして、脂質とし
てヨウ素価約１、ヨウ素価約２０、ヨウ素価約３０、ヨ
ウ素価約４０またはヨウ素価約５０の卵黄ホスファチジ
ルコリン（コレステロールを含まぬ）を使用して製造し
た脂肪小体を、それぞれ２０ｍＭクエン酸緩衝液（ｐＨ
４．５）にて２００倍および２０００倍希釈し、直ちに
脂肪小体内におけるＰＧＥ_１量を測定し、その結果を図
７に示した。対照脂肪小体としては水素添加していない
卵黄ホスファチジルコリン（ヨウ素価約６５）を使用し
たものを用いた。これら脂肪小体はいずれも内封緩衝液
として５００ｍＭ炭酸緩衝液（ｐＨ１０．０）を、外液
として２０ｍＭクエン酸緩衝液（ｐＨ４．５）を使用し
たものであり、それらのＰＧＥ_１封入効率はいずれも９
５％以上である。なお、ＰＧＥ_１５μｇに対しＰＣ量を
７．５ｍｇとした。図７の結果から明らかなようにヨウ
素価６０近辺以下において、ＰＧＥ_１の放出抑制が顕著
に認められる。(C) Egg yolk phosphatidylcholine (not containing cholesterol) having an iodine value of about 1, an iodine value of about 20, an iodine value of about 30, an iodine value of about 40, or an iodine value of about 50 in the same manner as in (a) above. Were prepared using a 20 mM citrate buffer (pH
4.5) at 200-fold diluted and 2000-fold, it was measured immediately PGE ₁ amount in adipose small body, and the results are shown in Figure 7. As control fat bodies, those using non-hydrogenated egg yolk phosphatidylcholine (iodine value about 65) were used. 500mM carbonate buffer as the encapsulating buffer Both of these fatty bodies of (pH 10.0), it is obtained by using 20mM citrate buffer (pH 4.5) as the external solution, their PGE ₁ encapsulation efficiency All 9
5% or more. Note that the amount of PC was 7.5 mg with respect to ₁₅ μg of PGE ₁₅ . Results clearly seen in iodine value 60 around less from FIG 7, PGE ₁ release suppression is observed remarkably.

【００４７】（ｄ）上記（ａ）に準じて製造した脂肪小
体を２０ｍＭクエン酸緩衝液（ｐＨ４．５）にて２００
０倍希釈後、３７℃でインキュベーションし、経時的な
ＰＧＥ₁ の放出状況を調べた。その結果を図８に示し
た。図８の結果から明らかなようにＥＰＣからなる脂肪
小体（高ヨウ素価脂質を使用）では希釈とほぼ同時にＰ
ＧＥ₁ の遊離が起こり、ただちに平衡状態に達してい
る。これに対して、Ｈ−ＥＰＣからなる本発明の脂肪小
体では、徐々にＰＧＥ₁ の放出が起こっており、その放
出速度はコレステロールの含有率が少なくなるに対応し
て遅くなっている。(D) The fat bodies prepared according to the above (a) were treated with 20 mM citrate buffer (pH 4.5) for 200 hours.
After 0-fold dilution, the mixture was incubated at 37 ° C., and the release status of PGE ₁ over time was examined. The result is shown in FIG. As is evident from the results in FIG. 8, in the lipid body composed of EPC (using a high iodine value lipid), P
GE ₁ release occurs and equilibrium is reached immediately. On the other hand, in the lipid body of the present invention composed of H-EPC, the release of PGE ₁ is gradually occurring, and the release rate is slowed down as the cholesterol content decreases.

【００４８】なお、本実験で使用した脂肪小体は、いず
れも内封緩衝液として５００ｍＭ炭酸緩衝液（ｐＨ１
０．０）を、外液として２０ｍＭクエン酸緩衝液（ｐＨ
４．５）を使用したものであり、それらのＰＧＥ_１封入
効率はいずれも９５％以上である。なお、ＰＧＥ_１５μ
ｇに対しＰＣ量を７．５ｍｇとした。The fat bodies used in this experiment were all 500 mM carbonate buffer (pH 1) as an internal buffer.
0.0) as a 20 mM citrate buffer (pH
4.5) is obtained by using, their PGE ₁ encapsulation efficiency is both 95%. In addition, _PGE 1 5μ
The amount of PC was 7.5 mg per g.

【００４９】（ｅ）脂質としてヨウ素価約１、ヨウ素価
約２０、ヨウ素価約３０、ヨウ素価約４０またはヨウ素
価約５０の水素添加卵黄ホスファチジルコリン（コレス
テロールを含まぬ）を使用して製造した脂肪小体を、そ
れぞれ２０ｍＭクエン酸緩衝液（ｐＨ４．５）にて２０
００倍希釈し、直ちに脂肪小体内におけるＰＧＥ_１量を
測定し、その結果を図９に示した。対照脂肪小体として
は水素添加していない卵黄ホスファチジルコリン（ヨウ
素価約６５）を使用したものを用いた。なお、本実験で
使用した脂肪小体は、いずれも内封緩衝液として５００
ｍＭ炭酸緩衝液（ｐＨ１０．０）を、外液として２０ｍ
Ｍクエン酸緩衝液（ｐＨ４．５）を使用したものであ
り、それらのＰＧＥ_１封入効率はいずれも９５％以上で
ある。なお、ＰＧＥ_１５μｇに対しＰＣ量を７．５ｍｇ
とした。図９の結果から明らかなようにヨウ素価６０近
辺以下において、ＰＧＥ_１の放出抑制が顕著に認められ
る。(E) Fat prepared using hydrogenated egg yolk phosphatidylcholine (not containing cholesterol) having an iodine value of about 1, an iodine value of about 20, an iodine value of about 30, an iodine value of about 40, or an iodine value of about 50 as a lipid. Each body was treated with 20 mM citrate buffer (pH 4.5) for 20 minutes.
00-fold diluted, it was measured immediately PGE ₁ amount in adipose small body, and the results are shown in Figure 9. As control fat bodies, those using non-hydrogenated egg yolk phosphatidylcholine (iodine value about 65) were used. The fat bodies used in this experiment were all 500 ml
mM carbonate buffer (pH 10.0)
It is obtained by using M citrate buffer (pH 4.5), their PGE ₁ encapsulation efficiency is 95% or more both. The amount of PC was 7.5 mg _per 5 μg of PGE _15.
And Results clearly seen in iodine value 60 near the following from Figure 9, PGE ₁ release suppression is observed remarkably.

【００５０】実施例７・実験例７ （ａ）ＰＧ類としてＰＧＥ_１を使用し、脂質としてＨ−
ＥＰＣまたはＨ−ＥＰＣ＋ＣＨＯＬ〔但し、Ｈ−ＥＰＣ
とＣＨＯＬとの配合比（モル比）は５５：４５および８
０：２０〕を使用し、前記「１．ＰＧ類含有脂肪小体の
製造」で述べた方法に準じて脂肪小体を製造した。一
方、脂質としてＥＰＣ＋ＣＨＯＬ〔ＥＰＣとＣＨＯＬと
の配合比（モル比）は５５：４５〕を使用する以外は上
記と同様の脂肪小体（対照）を製造した。これら脂肪小
体はいずれも内封緩衝液として５００ｍＭ炭酸緩衝液
（ｐＨ１０．０）を、外液として２０ｍＭクエン酸緩衝
液（ｐＨ４．５）を使用したものであり、それらのＰＧ
Ｅ_１ 封入効率はいずれも９５％以上である。なお、本実
施例ではＰＧＥ_１５μｇに対しＰＣ量を７．５ｍｇとし
た。[0050] Using the PGE ₁ as Example 7, Experiment 7 (a) PG compound, as a lipid H-
EPC or H-EPC + CHOL [however, H-EPC
And the molar ratio of CHOL are 55:45 and 8
0:20], and fat bodies were produced according to the method described in the above-mentioned "1. Production of PG-containing fat bodies". On the other hand, a fat body (control) similar to that described above was produced except that EPC + CHOL (the mixing ratio (molar ratio of EPC and CHOL was 55:45)) was used as the lipid. Each of these fat bodies was prepared using a 500 mM carbonate buffer (pH 10.0) as an internal buffer and a 20 mM citrate buffer as an external solution.
Liquid (pH 4.5) and their PG
E ₁ encapsulation efficiency is both 95%. In this example, the amount of PC was 7.5 mg with respect to 5 μg of PGE ₁₅ .

【００５１】これら脂肪小体を、上記外液にて１０倍に
希釈後、ラット血漿でさらに１０倍希釈し、希釈直後及
び３７℃５分間のインキュベーション後、脂肪小体内に
おけるＰＧＥ₁ 量を測定し、その結果を図１０に示し
た。図１０に示した結果から明らかな通り、ＥＰＣから
なる脂肪小体（対照）の場合、直ちに８０％以上のＰＧ
Ｅ₁ を遊離してしまうのに対し、本発明のＨ−ＥＰＣか
らなる脂肪小体では、イニシャルにおいて３５〜７５％
のＰＧＥ₁を保持し、特に３７℃、５分のインキュベー
ション後においては、対照に比べて極めて少ない放出率
である。また、その放出速度はコレステロールの含有率
が少なくなるに対応して遅くなっている。These fat bodies were diluted 10-fold with the above-mentioned external solution, further diluted 10-fold with rat plasma, and immediately after the dilution and after incubation at 37 ° C. for 5 minutes, the amount of PGE ₁ in the fat bodies was measured. The results are shown in FIG. As is clear from the results shown in FIG. 10, in the case of the fat body (control) composed of EPC, the PG
In contrast to the case where E ₁ is released, the fat body composed of the H-EPC of the present invention has an initial content of 35 to 75%.
PGE ₁ holds, in particular 37 ° C. of, after the 5 minute incubation, a very small release rates compared to the control. Also, its release rate is slower in response to lower cholesterol content.

【００５２】（ｂ）上記（ａ）と同様にして、脂質とし
てヨウ素価約１、ヨウ素価約２０、ヨウ素価約３０、ヨ
ウ素価約４０、ヨウ素価約５０の卵黄ホスファチジルコ
リン（コレステロールを含まぬ）を使用して製造した脂
肪小体を、上記（ａ）と同様に処理して脂肪小体内にお
けるＰＧＥ_１量を測定し、その結果を図１１に示した。
対照脂肪小体としては水素添加していない卵黄ホスファ
チジルコリン（ヨウ素価約６５）を使用したものを用い
た。これら脂肪小体はいずれも内封緩衝液として５００
ｍＭ炭酸緩衝液（ｐＨ１０．０）を、外液として２０ｍ
Ｍクエン酸緩衝液（ｐＨ４．５）を使用したものであ
り、それらのＰＧＥ_１ 封入効率はいずれも９５％以上で
ある。なお、本実施例ではＰＧＥ_１５μｇに対しＰＣ量
を７．５ｍｇとした。図１１の結果から明らかなように
ヨウ素価６０近辺以下において、ＰＧＥ_１の放出抑制が
顕著に認められ、ヨウ素価が低くなるに従って放出抑制
が顕著になる。(B) Egg yolk phosphatidylcholine (excluding cholesterol) having an iodine value of about 1, an iodine value of about 20, an iodine value of about 30, an iodine value of about 40, and an iodine value of about 50 in the same manner as in (a) above. fat bodies produced using, was treated in the same manner as above (a) measuring the PGE ₁ amount in adipose small body, and the results are shown in Figure 11.
As control fat bodies, those using non-hydrogenated egg yolk phosphatidylcholine (iodine value about 65) were used. Each of these fat bodies is 500
mM carbonate buffer (pH 10.0)
It is obtained by using M citrate buffer (pH 4.5), their PGE ₁ encapsulation efficiency is 95% or more both. In this example, the amount of PC was 7.5 mg with respect to 5 μg of PGE ₁₅ . As is clear from the results in FIG. 11, the suppression of the release of PGE ₁ is remarkably observed at an iodine value around 60 or lower, and the suppression of the release becomes more pronounced as the iodine value decreases.

【００５３】実施例８・実験例８ ラット血漿からの***（徐放性）： ＰＧ類としてＰＧＥ_１を使用し、脂質としてＨ−ＥＰＣ
またはＨ−ＥＰＣ＋ＣＨＯＬ（モル比、８０：２０また
は５５：４５）を使用し前記「１．ＰＧ類含有脂肪小体
の製造」で述べた方法に準じて脂肪小体（脂肪小体内封
緩衝液は５００ｍＭ炭酸緩衝液、ｐＨ１０．０）を製造
した。使用した脂質のヨウ素価はいずれも約１である。
当該製剤をラットに投与し、ラット血漿中におけるＰＧ
Ｅ_１残存量を、トレーサーとしてトリチウム標識ＰＧＥ
_１を用い、その放射活性の変化で経時的に調べた。投与
量はＰＧＥ_１５μｇ／ＰＣ７．５ｍｇ／ラット体重２５
０ｇとし、尾静脈より投与、採血は頸動脈に設けたカニ
ューレから行った。採血したサンプルは乾燥後、放射活
性を測定し、ｐｅｒｃｅｎｔ ｏｆ ｄｏｓｅを計算し
た。その結果を図１２に示した。図１２の結果から明ら
かなように本発明の脂肪小体において、生体内において
もＰＧＥ_１の放出抑制が顕著に認められる。[0053] Excretion of Examples 8 - Experimental Example 8 rat plasma (sustained release): using PGE ₁ as a PG compound, H-EPC as a lipid
Alternatively, using H-EPC + CHOL (molar ratio, 80:20 or 55:45), according to the method described in “1. Production of PG-containing fat body”, the fat body (fat body sealing buffer is 500 mM carbonate buffer , pH 10.0). All the iodine values of the lipids used are about 1.
The formulation was administered to rats, and PG in rat plasma was
The E ₁ remaining amount, tritiated PGE as a tracer
_{Using No. 1} , the change in radioactivity was examined over time. The dose was PGE ₁₅ 5 μg / PC 7.5 mg / rat weight 25.
It was set to 0 g, administered via the tail vein, and blood was collected from a cannula provided in the carotid artery. After the collected blood sample was dried, the radioactivity was measured, and the percentage of dose was calculated. FIG. 12 shows the result. In fat corpuscles obvious to the present invention from the results of FIG. 12, PGE ₁ release suppression is remarkably observed also in vivo.

【００５４】実施例９・実験例９ ラット血漿中のＰＧＥ₁ 未変化体量：ＰＧ類としてＰＧ
Ｅ₁ を使用し、脂質としてＨ−ＥＰＣおよびＨ−ＥＰＣ
＋ＣＨＯＬ（モル比、８０：２０）を使用し前記「１．
ＰＧ類含有脂肪小体の製造」で述べた方法に準じて脂肪
小体を調製した。使用した脂質のヨウ素価はいずれも約
１である。当該製剤をラットに投与し、ラット血漿中に
おけるＰＧＥ₁ 残存量を調べた。脂肪小体の投与量はＰ
ＧＥ₁ ５μｇ／ＰＣ７．５ｍｇ／ラット体重２５０ｇと
し、尾静脈より投与、採血は頸動脈に設けたカニューレ
から行った。投与後５分のラット血漿からＰＧ類を抽出
し、ＴＬＣ（薄層クロマトグラフ法）でＰＧＥ₁ 未変化
体とＰＧＥ₁ 代謝物を分離、定量した。その結果を表４
に示した。対照として、卵黄ホスファチジルコリン（Ｅ
ＰＣ）／ＣＨＯＬ（モル比８０／２０）を使用した。ま
た、ＰＧＥ₁ を溶液状態で投与し、２分後に採血したと
きの値を参考に示した。なお、ＰＧＥ₁ 代謝物はほとん
どが１５−Ｋｅｔｏ−ＰＧＥ₁ であった。Example 9 / Experimental example 9 PGE ₁ unchanged amount in rat plasma: PG as PGs
Using the E _1, H-EPC and H-EPC as a lipid
+ CHOL (molar ratio, 80:20) and the above-mentioned “1.
Fat Body was prepared according to the method described in "Production of PG-containing Fat Body". All the iodine values of the lipids used are about 1. The formulation was administered to rats, and the amount of PGE ₁ remaining in rat plasma was examined. Fat body dose is P
GE _{1 was} 5 μg / 7.5 mg of PC / 250 g of rat weight, administered via the tail vein, and blood was collected from a cannula provided in the carotid artery. The PG compound extracted from 5 minutes rat plasma after administration, separating the PGE ₁ unchanged and PGE ₁ metabolites by TLC (thin layer chromatography) was quantified. Table 4 shows the results.
It was shown to. As a control, yolk phosphatidylcholine (E
PC) / CHOL (80/20 molar ratio). Moreover, administration of PGE ₁ in a solution state, a value that is bled 2 minutes in Reference. Most of the PGE ₁ metabolite was 15-Keto-PGE ₁ .

【００５５】[0055]

【表４】 [Table 4]

【００５６】[0056]

【発明の効果】本発明ＰＧ類含有脂肪小体組成物は以下
の特徴を有する。ＰＧ類の封入量が多い：脂質一定量
当たりの封入量が対照リポソームの約１００倍である。
ＰＧ類の放出が抑制される：２０００倍希釈でもＰＧ
類の遊離を抑制できる。血漿中でも遊離抑制効果が認め
られる。また、脂質組成を選択することにより、遊離速
度をコントロールできる。脂質組成を変えることによ
って、ＰＧ類の血中維持時間を制御できる。従って、本
発明のＰＧ類含有脂肪小体組成物はＰＧ類の有する優れ
た薬効を持続的に発揮しえるものであり、医薬品として
極めて有用なものである。The present invention PG analog-containing fatty bodies composition according to the present invention has the following characteristics. High encapsulation of PGs: Encapsulation per fixed amount of lipid is about 100 times that of control liposomes.
Suppresses release of PGs: PG even at 2000-fold dilution
Release can be suppressed . Release inhibition effect was observed in plasma
Can be The release rate can be controlled by selecting the lipid composition. By changing the lipid composition, the blood maintenance time of PGs can be controlled. Therefore, the PG-containing fat body composition of the present invention can continuously exert the excellent medicinal properties of PGs, and is extremely useful as a pharmaceutical.

【図面の簡単な説明】[Brief description of the drawings]

【図１】分析に用いた限外濾過の原理図である。FIG. 1 is a principle diagram of ultrafiltration used for analysis.

【図２】脂肪小体内封緩衝液のｐＨのＰＧＥ _１ 封入効率
に及ぼす影響を示すグラフである。[Figure 2] PGE ₁ encapsulation efficiency in the pH of the fat small body sealing buffer
4 is a graph showing the effect on the stiffness .

【図３】内封炭酸緩衝液の種類によるＰＧＥ₁ 封入効率
に及ぼす影響を示すグラフである。FIG. 3 is a graph showing the effect of the type of encapsulated carbonate buffer on PGE ₁ encapsulation efficiency.

【図４】内封炭酸緩衝液の濃度のＰＧＥ_１封入効率に及
ぼす影響を示すグラフである。FIG. 4 is a graph showing the effect of the concentration of the encapsulated carbonate buffer on PGE ₁ encapsulation efficiency.

【図５】ＰＧＥ₁ を封入した脂肪小体を希釈したときの
内封ＰＧＥ₁ の放出性を示すグラフである。FIG. 5 is a graph showing the release of encapsulated PGE ₁ when diluting PGE ₁ encapsulated fat bodies.

【図６】ＰＧＥ₁ を封入した脂肪小体を希釈したときの
内封ＰＧＥ₁ の放出性を示すグラフである。FIG. 6 is a graph showing the release of encapsulated PGE ₁ when diluting PGE ₁ encapsulated fat bodies.

【図７】ＰＧＥ₁ を封入した脂肪小体を希釈したときの
内封ＰＧＥ₁ の放出性を示すグラフである。FIG. 7 is a graph showing the release of encapsulated PGE ₁ when diluting PGE ₁ encapsulated fat bodies.

【図８】ＰＧＥ₁ を封入した脂肪小体を、希釈したとき
の、経時的なＰＧＥ₁ 保持率を示すグラフである。FIG. 8 is a graph showing the PGE ₁ retention over time when PGE ₁ encapsulated fat bodies are diluted.

【図９】ＰＧＥ₁ を封入した脂肪小体を希釈したとき
の、経時的なＰＧＥ₁ 保持率を示すグラフである。FIG. 9 is a graph showing PGE ₁ retention over time when PGE ₁ encapsulated fat bodies are diluted.

【図１０】ＰＧＥ₁ を封入した脂肪小体を、ラット血漿
中３７℃でインキュベーションしたときのＰＧＥ₁ の放
出性を示すグラフである。FIG. 10 is a graph showing the release of PGE ₁ when PGE ₁ encapsulated fat bodies were incubated at 37 ° C. in rat plasma.

【図１１】ＰＧＥ₁ を封入した脂肪小体を、ラット血漿
中３７℃でインキュベーションしたときのＰＧＥ₁ の放
出性を示すグラフである。FIG. 11 is a graph showing the release of PGE ₁ when PGE ₁ encapsulated fat bodies were incubated at 37 ° C. in rat plasma.

【図１２】血中ＰＧＥ₁ 濃度の時間的推移を示すグラフ
である。FIG. 12 is a graph showing the time course of blood PGE ₁ concentration.

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 上田 泰生 大阪府枚方市招提大谷２丁目1180番地の １ 株式会社ミドリ十字中央研究所内 (56)参考文献 特開 昭59−222410（ＪＰ，Ａ) 特表 平２−504027（ＪＰ，Ａ) (58)調査した分野(Int.Cl.⁷，ＤＢ名) A61K 9/127 A61K 31/557 ────────────────────────────────────────────────── ─── Continuation of the front page (72) Inventor Yasuo Ueda 2-1-1180 Shodai Otani, Hirakata-shi, Osaka 1 Inside the Midori Cross Central Research Institute Co., Ltd. (56) References JP-A-59-222410 (JP, A) Table Hei 2-504027 (JP, A) (58) Field surveyed (Int. Cl. ⁷ , DB name) A61K 9/127 A61K 31/557

Claims (5)

(57)【特許請求の範囲】(57) [Claims] 【請求項１】膜内外で濃度勾配を有する脂肪小体であ
り、脂肪小体を構成する脂質がヨウ素価６０以下である
ことを特徴とするプロスタグランジン類含有脂肪小体組
成物。1. A prostaglandin-containing fat body composition, which is a fat body having a concentration gradient inside and outside the membrane, and a lipid constituting the fat body has an iodine value of 60 or less. 【請求項２】脂質として、水素添加された天然リン脂質
または天然リン脂質の少なくとも一つの不飽和脂肪族ア
シル基部分が炭素数１４〜２２の飽和脂肪族アシル基で
置換されたものを含有してなることを特徴とする請求項
１記載のプロスタグランジン類含有脂肪小体組成物。2. A lipid comprising a hydrogenated natural phospholipid or a natural phospholipid in which at least one unsaturated aliphatic acyl group moiety is substituted with a saturated aliphatic acyl group having 14 to 22 carbon atoms. The prostaglandin-containing fat body composition according to claim 1, comprising: 【請求項３】濃度勾配がｐＨ勾配である請求項１記載の
プロスタグランジン類含有脂肪小体組成物。3. The prostaglandin-containing fat body composition according to claim 1, wherein the concentration gradient is a pH gradient. 【請求項４】脂肪小体外液のｐＨが２〜６であり、脂肪
小体内封溶液のｐＨが７〜１１である請求項３記載のプ
ロスタグランジン類含有脂肪小体組成物。4. The prostaglandin-containing fat body composition according to claim 3 , wherein the pH of the extracorporeal fluid is 2 to 6, and the pH of the fat body sealing solution is 7 to 11. 【請求項５】脂肪小体内封溶液のｐＨが弱酸と強塩基の
組み合わせにて７〜１１に調整されてなる請求項４記載
のプロスタグランジン類含有脂肪小体組成物。5. The prostaglandin-containing fat body composition according to claim 4, wherein the pH of the fat body sealing solution is adjusted to 7 to 11 by a combination of a weak acid and a strong base.