JP3118231B2 - Method for producing regular glycopeptides - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION

【０００１】[0001]

【発明の属する技術分野】本発明は科学研究・医療・食
品面等で応用が期待される糖ペプチドを容易に製造する
方法、並びにその重合体の製造法に関する。詳しくは、
立体選択的な糖ペプチドモノマー、その縮重合体である
規則性糖ペプチドの新規な製造方法に関する。[0001] The present invention relates to a method for easily producing a glycopeptide expected to be applied in scientific research, medical treatment, foodstuffs, and the like, and a method for producing a polymer thereof. For more information,
The present invention relates to a novel method for producing a stereoselective glycopeptide monomer and a regular glycopeptide which is a condensation polymer thereof.

【０００２】[0002]

【従来の技術】近年、生体内における糖鎖の役割につい
て非常に多くの知見が得られ、糖鎖生物学、糖鎖工学と
いった研究分野が医療・食品分野等へ幅広く応用されて
いる。特に複合糖質の中でも糖鎖がタンパク質に結合し
ている糖タンパク質・糖ペプチドは生体内で細胞認識、
分化、受精、老化、ガン化などに深く関与することが近
年知られてきている。このような現状により、天然の構
造を有する糖鎖や新規な糖鎖を合成する試みが盛んにな
されている。しかし糖鎖は複数個の分岐点があるばかり
でなく、その構成単位である単糖の結合様式も多様であ
るため、高度に構造が制御された糖鎖類あるいは糖ペプ
チド類の試料を得ることは極めて困難であった。2. Description of the Related Art In recent years, a great deal of knowledge has been obtained on the role of sugar chains in living organisms, and research fields such as sugar chain biology and sugar chain engineering have been widely applied to the medical and food fields. In particular, glycoproteins and glycopeptides, in which sugar chains are bound to proteins, among complex carbohydrates, recognize cells in vivo,
In recent years, it has been known that it is deeply involved in differentiation, fertilization, aging, canceration and the like. Under such circumstances, attempts to synthesize a sugar chain having a natural structure or a novel sugar chain have been actively made. However, sugar chains not only have multiple branch points, but also the monosaccharides, which are their constituent units, have a variety of bonding modes, so it is necessary to obtain a sample of sugar chains or glycopeptides with a highly controlled structure. Was extremely difficult.

【０００３】従来のように糖ペプチドを合成するに当た
ってアシル系の保護基を持つフッ素化グリコシドをグリ
コシドドナーとしペプチドとカップリングを行う(津田
ら、Chem. Comm. 2779 (1996))と糖鎖の脱離反応やペプ
チドのラセミ化反応を誘発する恐れがある。またこれま
で報告されている糖ペプチドの合成例はすべてアミノ酸
を逐次的に伸長させる逐次合成法によって行われてき
た。例えば、ペプチドを固相に固定化しペプチドを伸長
させる方法(中原ら、Carbohydr. Res., 292, 71-81 (19
96))あるいは液相中でペプチドを伸長させる方法(クン
ツら、Ang. Chem. Int. Ed. Engl., 36, 618-621 (199
7) などが挙げられる。しかし逐次合成の最大の欠点は
多段階の保護・脱保護反応を繰り返さなければならない
点にある。また、多段階の反応を用いると、多数の精製
過程が必要となり、さらに無駄となる試料も多くなる。[0003] In the conventional synthesis of glycopeptides, fluorinated glycosides having an acyl-type protecting group are used as glycoside donors for coupling with peptides (Tsuda et al., Chem. Comm. 2779 (1996)). It may cause an elimination reaction or a racemization reaction of the peptide. In addition, all the examples of synthesis of glycopeptides reported so far have been performed by a sequential synthesis method in which amino acids are sequentially extended. For example, a method of immobilizing a peptide on a solid phase and elongating the peptide (Nakahara et al., Carbohydr. Res., 292, 71-81 (19)
96)) or a method of elongating the peptide in the liquid phase (Kuntz et al., Ang. Chem. Int. Ed. Engl., 36, 618-621 (199).
7). However, the biggest disadvantage of the sequential synthesis is that a multi-step protection / deprotection reaction must be repeated. In addition, when a multi-stage reaction is used, a large number of purification steps are required, and more wasteful samples are used.

【０００４】[0004]

【発明が解決しようとする課題】本発明は糖ペプチド類
をきわめて簡単な操作で製造する方法、さらに本発明は
糖ペプチドモノマーを縮重合して規則性糖ペプチド類を
製造する方法を提供するものである。DISCLOSURE OF THE INVENTION The present invention provides a method for producing glycopeptides by a very simple operation, and the present invention further provides a method for producing regular glycopeptides by condensation polymerization of glycopeptide monomers. It is.

【０００５】[0005]

【課題を解決するための手段】本発明者の研究によれ
ば、水酸基をエーテル系保護基で保護した単糖またはオ
リゴ糖のフッ素化グリコシドをアミノ酸またはペプチド
誘導体とカップリングし、水素添加により糖ペプチドの
保護基を一度に脱保護することにより所望の糖ペプチド
が容易に得られること、さらに、得られた糖ペプチドを
ペプチド縮合剤の存在下に縮重合することにより簡単に
規則性糖ペプチド類を調製することができることを見出
し、本発明を完成するに至った。According to the study of the present inventors, a fluorinated glycoside of a monosaccharide or oligosaccharide in which a hydroxyl group is protected with an ether-based protecting group is coupled to an amino acid or peptide derivative, and the sugar is added by hydrogenation. A desired glycopeptide can be easily obtained by deprotecting the protecting group of the peptide at a time, and a regular glycopeptide can be easily obtained by condensation polymerization of the obtained glycopeptide in the presence of a peptide condensing agent. Can be prepared, and the present invention has been completed.

【０００６】[0006]

【発明の実施の形態】本発明の方法によれば、一般式
(Ｉ)：According to the method of the present invention, the general formula
(I):

【化１０】 (式中、Ｒ¹はエーテル系保護基で保護された水酸基また
はアジド基、Ｒ²およびＲ³は各々エーテル系保護基で保
護された水酸基または−Ｏ−（水酸基がエーテル系保護
基で保護されている糖残基）、Ｒ⁴は−ＣＨ₂Ｏ−（エー
テル系保護基）、−ＣＨ₂Ｏ−（水酸基がエーテル系保
護基で保護されている糖残基）または−ＣＨ_{3 、}Ｒ⁵は水
素原子を表す)で示される単糖またはオリゴ糖のフッ素
化グリコシドをＮ末端アミノ基を保護したＬ−アラニル
−Ｌ−スレオニル−Ｌ−アラニンベンジル（誘導体）エ
ステルとカップリングさせ、得られる一般式(ＩＩ):Embedded image (In the formula, R ¹ is a hydroxyl group or an azide group protected by an ether-based protecting group, and R ² and R ³ are a hydroxyl group protected by an ether-based protecting group or -O- (a hydroxyl group is protected by an ether-based protecting group. and the sugar residues are), R ⁴ is -CH ₂ O-(ether protecting group), - CH ₂ O- (sugar residues hydroxyl group is protected with an ether-type protecting group) or -CH _3, R ⁵ Represents a hydrogen atom), and the fluorinated glycoside of a monosaccharide or oligosaccharide represented by the formula (I) is coupled with an L-alanyl-L-threonyl-L-alaninebenzyl (derivative) ester having an N-terminal amino group protected. Formula (II):

【化１１】 (式中、Ｒ¹、Ｒ²、Ｒ³、Ｒ⁴、およびＲ⁵は前記と同義で
ある。Ｒ⁷およびＲ⁸はアラニン残基、Ｒ⁹はメチル基、
Ｒ¹⁰はＺ基誘導体から選ばれるアミノ基保護基、Ｒ¹¹は
ベンジルまたはその誘導体から選ばれるカルボキシル基
保護基を表す)で示される化合物を、必要によりアジド
基を保護されたアミノ基に変換したのち、水素添加して
脱保護することにより一般式(III):Embedded image (Wherein, R ¹ , R ² , R ³ , R ⁴ and R ⁵ are as defined above. R ⁷ and R ⁸ are alanine residues, R ⁹ is a methyl group,
R ¹⁰ represents an amino group-protecting group selected from a Z group derivative, and R ¹¹ represents a carboxyl group-protecting group selected from benzyl or a derivative thereof). Thereafter, hydrogenation and deprotection give the general formula (III):

【化１２】 (式中、Ｒ^1’は水酸基または保護されたアミノ基、Ｒ
^2’およびＲ^3’は各々水酸基または−Ｏ−（糖残基）、
Ｒ^4’は−ＣＨ₂ＯＨ、−ＣＨ₂Ｏ−（糖残基）または−
ＣＨ₃、Ｒ^5’は水素原子、Ｒ⁷、Ｒ⁸、Ｒ⁹は上記と同義
である)で示される糖ペプチド類が製造される。Embedded image (Wherein R ^{1 ′} is a hydroxyl group or a protected amino group,
^{2 ′} and R ^{3 ′} each represent a hydroxyl group or —O— (sugar residue);
R ^{4 ′} is -CH ₂ OH, -CH ₂ O- (sugar residue) or-
CH ₃ and R ^{5 ′} are hydrogen atoms, and R ⁷ , R ⁸ and R ⁹ have the same meanings as described above).

【０００７】上記の方法で出発物質として用いられる一
般式(Ｉ)で示される単糖またはオリゴ糖のフッ素化グリ
コシドは、水酸基の保護基としてアシル系保護基を有し
ていると、アミノ酸またはペプチドとカップリングさせ
て糖ペプチドに導く場合、その脱保護反応時に糖鎖の脱
離反応やアミノ酸のラセミ化反応などを誘発する恐れが
ある。したがって、出発化合物(Ｉ)における水酸基の保
護基としてはベンジル基、パラメトキシベンジル基、ト
リチル基等のエーテル系保護基で保護することが重要で
ある。[0007] The fluorinated glycoside of the monosaccharide or oligosaccharide represented by the general formula (I) used as a starting material in the above-mentioned method, when having an acyl protecting group as a protecting group for a hydroxyl group, may be an amino acid or a peptide. When the deprotection reaction leads to a sugar peptide elimination reaction or an amino acid racemization reaction, it may lead to a glycopeptide. Therefore, it is important to protect the hydroxyl group in the starting compound (I) with an ether-based protecting group such as a benzyl group, a paramethoxybenzyl group, and a trityl group.

【０００８】一方、このような単糖またはオリゴ糖のフ
ッ素化グリコシド(Ｉ)の製造は、単糖同士、単糖とオリ
ゴ糖(２〜１０個の糖残基からなる糖鎖を有するもの)、
あるいはオリゴ糖同士をグリコシデーション反応に付
し、ついでフッ素化して行われるが、該グリコシデーシ
ョン反応を立体選択的に行うために、糖残基の水酸基を
アセチル基、ベンゾイル基等のアシル系の保護基を用い
て保護することが多い。しかし、上述したように、その
ようなアシル系保護基を持つ化合物を直接アミノ酸また
はペプチドとのカップリングに供することは不都合であ
るため、かかるアシル系保護基をエーテル系保護基に変
換しておくことが必要である。そのような保護基の変換
は、常法によって行われ、例えば、アシル系保護基で保
護された単糖またはオリゴ糖をアルカリ、例えばナトリ
ウムメトキシド等のアルカリ金属アルコキシドで処理し
てアシル系保護基を脱離させたのち、これに水素化ナト
リウム、水素化カリウム等の水素化アルカリ金属の存在
下、ベンジルクロライド、ベンジルブロマイド、パラメ
トキシベンジルクロライド、パラメトキシベンジルブロ
マイド等の芳香族性ハライドを用いて水酸基をエーテル
化することにより達せられる。On the other hand, the production of such fluorinated glycosides (I) of monosaccharides or oligosaccharides is carried out by monosaccharides, monosaccharides and oligosaccharides (having a sugar chain consisting of 2 to 10 sugar residues). ,
Alternatively, the oligosaccharides are subjected to a glycosylation reaction and then fluorinated.In order to perform the glycosidation reaction stereoselectively, the hydroxyl group of the sugar residue is converted to an acyl group such as an acetyl group or a benzoyl group. Is often protected using a protecting group. However, as described above, it is inconvenient to directly subject a compound having such an acyl-type protecting group to coupling with an amino acid or a peptide. Therefore, such an acyl-type protecting group is converted to an ether-type protecting group. It is necessary. The conversion of such a protecting group is carried out by a conventional method. For example, a monosaccharide or an oligosaccharide protected with an acyl-based protecting group is treated with an alkali, for example, an alkali metal alkoxide such as sodium methoxide to obtain an acyl-based protecting group. And then, using an aromatic halide such as benzyl chloride, benzyl bromide, paramethoxybenzyl chloride, paramethoxybenzyl bromide in the presence of an alkali metal hydride such as sodium hydride and potassium hydride. It is achieved by etherifying the hydroxyl groups.

【０００９】該出発化合物のフッ素化グリコシドは公知
の方法にしたがって容易に製造される(D.Picq and D.An
ker, Carbohydrate Research, 166巻，309頁，1987)。
たとえば、水酸基等の官能基を保護基で保護した単糖ま
たはオリゴ糖に、アセトニトリル等の不活性有機溶媒
中、トリメチルアミン、トリエチルアミン、トリエタノ
ールアミン、ピリジン等の塩基の存在下、常温、好まし
くは４０〜５０℃に加温下、トリエチルアミン−３フッ
化水素を反応させることにより容易にフッ素化物に導く
ことができ、その生成物を所望により上述したように、
保護基の変換を行なったのち、アミノ酸またはペプチド
とのカップリング反応に供することができる。The fluorinated glycosides of the starting compound are easily prepared according to known methods (D. Picq and D. An
ker, Carbohydrate Research, 166, 309, 1987).
For example, a monosaccharide or oligosaccharide in which a functional group such as a hydroxyl group is protected with a protecting group is added to an inert organic solvent such as acetonitrile in the presence of a base such as trimethylamine, triethylamine, triethanolamine and pyridine at room temperature and preferably at room temperature. By reacting triethylamine-3 hydrogen fluoride under heating to ５０50 ° C., it can be easily led to a fluorinated product, and the product is optionally subjected to, as described above,
After conversion of the protecting group, it can be subjected to a coupling reaction with an amino acid or a peptide.

【００１０】一般式(Ｉ)で示される単糖またはオリゴ糖
のフッ素化グリコシドをアミノ酸またはペプチドとカッ
プリングさせる方法は、鈴木らの手法(Tetrahedron Let
t.,30, 4853 (1989))を用いて行うことができる。すな
わち、チッ素ガス雰囲気下、メタロセンクロライドおよ
び酸化銀の存在下に、塩化メチレン等の有機溶媒中で単
糖またはオリゴ糖のフッ素化グリコシドおよびアミノ酸
またはペプチドを攪拌しながら反応させる。なお、一般
式(ＩＩ)で示される化合物において、Ｒ¹⁰のアミノ基保
護基としては、一般にペプチド合成において用いられる
アミノ基保護基が含まれ得るが、好ましくは、ベンジル
オキシカルボニル、Ｐ−クロロベンジルオキシカルボニ
ル、Ｐ−メトキシベンジルオキシカルボニルなどのいわ
ゆるＺ基誘導体が挙げられる。またＲ¹¹のカルボキシル
基保護基も一般にペプチド合成において用いられるカル
ボキシル基保護基が含まれ得るが、好ましくは、ベンジ
ル、Ｐ−クロロベンジル、Ｐ−メトキシベンジルなどの
ベンジル誘導体が挙げられる。特にＲ¹⁰をＺ基誘導体、
Ｒ¹¹をベンジル誘導体とすることにより、後述するよう
に、水素添加によりアミノ基とカルボキシル基の両保護
基が一挙に脱保護できるため好ましい。A method for coupling a fluorinated glycoside of a monosaccharide or oligosaccharide represented by the general formula (I) with an amino acid or a peptide is described by Suzuki et al. (Tetrahedron Lett.
t., 30, 4853 (1989)). That is, a fluorinated glycoside of a monosaccharide or an oligosaccharide and an amino acid or a peptide are reacted with stirring in an organic solvent such as methylene chloride in a nitrogen gas atmosphere in the presence of a metallocene chloride and silver oxide. In the compound represented by the general formula (II), the amino group-protecting group for R ¹⁰ may include an amino group-protecting group generally used in peptide synthesis, but is preferably benzyloxycarbonyl, P-chlorobenzyl. So-called Z group derivatives such as oxycarbonyl and P-methoxybenzyloxycarbonyl are exemplified. The carboxyl group-protecting group for R ¹¹ may also include a carboxyl group-protecting group generally used in peptide synthesis, but preferably includes benzyl derivatives such as benzyl, P-chlorobenzyl, and P-methoxybenzyl. In particular, R ¹⁰ is a Z group derivative,
By the R ¹¹ and benzyl derivative, as described below, preferred for both protecting group of the amino group and a carboxyl group can be deprotected at once by hydrogenation.

【００１１】上記カップリング反応で得られる一般式(I
I)で示される化合物において、Ｒ¹がアミノ基前駆体(例
えばアジド基)である場合には、該アミノ基前駆体を常
法にしたがって処理して保護されたアミノ基に変換す
る。例えば、Ｒ¹がアジド基である式(II)の化合物は、
ピリジン等の塩基の存在下、室温または加温下にチオ酢
酸で処理することによりＲ¹がアセチルアミノ基である
化合物に変換される。この生成物を、ついで常法により
水素添加することにより水酸基のエーテル系保護基を脱
離させて一般式(III)で示される糖ペプチド類が得られ
る。例えば、該生成物をジメチルホルムアミド、メタノ
ール、エタノール、水、酢酸水溶液等の適当な溶媒中、
パラジウムカーボン等の接触還元剤の存在下に水素添加
することにより目的の糖ペプチド(III)が得られる。The general formula (I) obtained by the above coupling reaction
In the compound represented by I), when R ¹ is an amino group precursor (for example, an azide group), the amino group precursor is converted into a protected amino group by treating the amino group precursor according to a conventional method. For example, a compound of formula (II) wherein R ¹ is an azide group is
Treatment with thioacetic acid at room temperature or under heating in the presence of a base such as pyridine converts the compound to a compound in which R ¹ is an acetylamino group. This product is then hydrogenated by a conventional method to remove the ether-based protecting group of the hydroxyl group, thereby obtaining a glycopeptide represented by the general formula (III). For example, the product is dissolved in a suitable solvent such as dimethylformamide, methanol, ethanol, water, and acetic acid aqueous solution.
The desired glycopeptide (III) can be obtained by hydrogenation in the presence of a catalytic reducing agent such as palladium carbon.

【００１２】本発明によれば、さらに、上記で得られる
一般式(III)で示される糖ペプチドを縮重合させること
により下記一般式(IV)で示される規則性糖ペプチドが得
られる。According to the present invention, a regular glycopeptide represented by the following general formula (IV) is obtained by polycondensing the glycopeptide represented by the general formula (III) obtained above.

【化１１】 (式中、Ｒ^{1 ’}、Ｒ^{2 ’}、Ｒ^{3 ’}、Ｒ^{4 ’}、Ｒ^{5 ’}、Ｒ⁷、Ｒ⁸
およびＲ⁹は前記と同義であり、ｎは２〜２０の整数で
ある)Embedded image (Wherein, R ^{1 ′} , R ^{2 ′} , R ^{3 ′} , R ^{4 ′} , R ^{5 ′} , R ⁷ , R ⁸
And R ⁹ are as defined above, and n is an integer of 2 to 20.

【００１３】この糖ペプチドの縮重合は、例えば、ジフ
ェニルホスホリルアジド(ＤＰＰＡ)、ジエチルホスホリ
ルシアニデート、アジドトリス(ジメチルアミノ)ホスホ
ニウムヘキサフルオロリン酸塩等の有機リン化合物を用
いる方法や、例えば、Ｎ−エトキシカルボニル−２−エ
トキシ−１,２−ジハイドロキノリン(ＥＥＤＱ)、１−
イソブチル−２−イソブチル−１,２−ジハイドロキノ
リン等のキノリン系ペプチド縮合剤を用いる方法があ
る。The polycondensation of the glycopeptide can be carried out, for example, by a method using an organic phosphorus compound such as diphenylphosphoryl azide (DPPA), diethylphosphoryl cyanidate, azidotris (dimethylamino) phosphonium hexafluorophosphate or the like. -Ethoxycarbonyl-2-ethoxy-1,2-dihydroquinoline (EEDQ), 1-
There is a method using a quinoline-based peptide condensing agent such as isobutyl-2-isobutyl-1,2-dihydroquinoline.

【００１４】上記糖ペプチドの縮重合は公知の条件で行
うことができ、例えば有機リン化合物を用いる場合は、
一般式(III)で示される糖ペプチド化合物をＮ,Ｎ−ジメ
チルホルムアミド、ジメチルスルホキシド等の有機溶媒
中、トリエチルアミン、トリメチルアミン等の塩基の存
在下に上記有機リン化合物で処理することにより容易に
目的とする規則性糖ペプチド類(IV)が得られる。またキ
ノリン系ペプチド縮合剤を用いる方法は、一般式(III)
で示される糖ペプチドをメタノール、エタノール等の有
機溶媒に溶解させ、これに前記キノリン系ペプチド縮合
剤を加えて室温〜加温下に反応させることにより達せら
れる。The polycondensation of the glycopeptide can be carried out under known conditions. For example, when an organic phosphorus compound is used,
The objective is easily achieved by treating the glycopeptide compound represented by the general formula (III) with the above organic phosphorus compound in the presence of a base such as triethylamine or trimethylamine in an organic solvent such as N, N-dimethylformamide or dimethylsulfoxide. Thus, regular glycopeptides (IV) are obtained. The method using a quinoline-based peptide condensing agent has a general formula (III)
Is dissolved in an organic solvent such as methanol or ethanol, and the above quinoline-based peptide condensing agent is added thereto, and the mixture is reacted at room temperature to under heating.

【００１５】なお、本明細書を通して単糖とは、Ｄ−グ
ルコース、Ｄ−ガラクトース、Ｄ−マンノース、Ｌ−フ
コース等の天然の単糖類を、またオリゴ糖とはこれらの
糖の２〜１０個が結合したものを意味する。また、一般
式(Ｉ)〜(IV)における糖残基とはＤ−グルコース、Ｄ−
ガラクトース、Ｎ−アセチルグルコサミン、Ｎ−アセチ
ルガラクトサミン等の残基、すなわちα−Ｄ−グルコピ
ラノシル、β−Ｄ−グルコピラノシル、α−Ｄ−ガラク
トピラノシル−、β−Ｄ−ガラクトピラノシル−、２−
アセチルアミノ−２−デオキシ−１−β−Ｄ−グルコピ
ラノシル、２−アセチルアミノ−２−デオキシ−１−β
−Ｄ−ガラクトピラノシル等を意味し、それら糖残基の
アミノ基および／またはカルボキシ基等の官能基がアセ
チル基、フタロイル基等の通常のアミノ保護基、メチ
ル、エチル、ベンジル等のカルボキシル基保護基で保護
されているのが好ましい。これらの保護基も他の保護基
と同様に最終工程で常法により脱保護される。[0015] In the present specification, a monosaccharide is a natural monosaccharide such as D-glucose, D-galactose, D-mannose and L-fucose, and an oligosaccharide is 2 to 10 of these sugars. Means a bond. The sugar residues in the general formulas (I) to (IV) are D-glucose and D-glucose.
Residues such as galactose, N-acetylglucosamine, N-acetylgalactosamine, i.e., α-D-glucopyranosyl, β-D-glucopyranosyl, α-D-galactopyranosyl-, β-D-galactopyranosyl-, −
Acetylamino-2-deoxy-1-β-D-glucopyranosyl, 2-acetylamino-2-deoxy-1-β
-D-galactopyranosyl and the like, wherein the functional group such as amino group and / or carboxy group of the sugar residue is a normal amino protecting group such as acetyl group and phthaloyl group, and carboxyl group such as methyl, ethyl and benzyl. It is preferably protected with a group protecting group. These protecting groups are also deprotected by a conventional method in the final step similarly to other protecting groups.

【００１６】[0016]

【実施例】つぎに参考例および実施例を挙げて本発明方
法をさらに具体的に説明するが、本発明はこれらに限定
されない。EXAMPLES The method of the present invention will be described more specifically with reference to Reference Examples and Examples, but the present invention is not limited thereto.

【００１７】参考例１ Ｏ−(２,３,４,６−テトラ−Ｏ−ベンジル−β−Ｄ−ガ
ラクトピラノシル)−(１→３)−２−アジド−４,６−Ｏ
−ベンジリデン−２−デオキシ−１−β−Ｄ−ガラクト
ピラノシル フロリドの合成Reference Example 1 O- (2,3,4,6-tetra-O-benzyl-β-D-galactopyranosyl)-(1 → 3) -2-azido-4,6-O
Of benzylidene-2-deoxy-1-β-D-galactopyranosyl fluoride

【００１８】(i)２,３,６−トリ−Ｏ−アセチル−β−
Ｄ−ガラクタールの合成 Ｄ−ガラクトースの完全アセチル体(５０g,１２８mmol)
をジクロルメタン(１５０ml)に溶解し、無水酢酸(１０m
l)加える。氷温まで冷やした後、３０％ＨＢｒ−酢酸
(８２ml,３２０mmol)を射光条件下で滴下する。反応系
の温度を徐々に室温まで上げて、２.５時間反応させ
る。反応終了後、氷水(１０ml)を加えた後クロロホルム
で抽出する。有機層を水、炭酸水素ナトリウム水溶液お
よび食塩水で洗浄した後、無水硫酸マグネシウムで乾燥
させ、ろ過、濃縮することにより、１位ブロモ体を得
る。酢酸(８０ml)と水(１２０ml)の混合溶媒に酢酸ナト
リウム(１０５g,１.２８mol)、硫酸銅(ＣｕＳＯ₄・５Ｈ
₂Ｏ；８.０g,３２mmol)および亜鉛(８３.７g,１.２８mo
l)を溶かした溶液に、上記１位ブロモ体の酢酸(８０ml)
溶液を氷温で滴下する。反応系の温度を徐々に室温まで
上げて、１２時間反応させる。反応液をろ過後、クロロ
ホルムで抽出する。有機層を水、炭酸水素ナトリウム水
溶液および食塩水で洗浄した後、無水硫酸マグネシウム
で乾燥させ、ろ過、濃縮して２,３,６−トリ−Ｏ−アセ
チル−β−Ｄ−ガラクタール(３４.８ｇ,定量的)を得
る。(I) 2,3,6-tri-O-acetyl-β-
Synthesis of D-galactal Complete acetylated form of D-galactose (50 g, 128 mmol)
Was dissolved in dichloromethane (150 ml), and acetic anhydride (10 m
l) Add. After cooling to ice temperature, 30% HBr-acetic acid
(82 ml, 320 mmol) are added dropwise under lighting conditions. The temperature of the reaction system is gradually raised to room temperature and reacted for 2.5 hours. After completion of the reaction, ice water (10 ml) was added, followed by extraction with chloroform. The organic layer is washed with water, aqueous sodium hydrogen carbonate solution and brine, dried over anhydrous magnesium sulfate, filtered and concentrated to obtain the 1-bromo compound. Solvent mixture of sodium acetate acetic acid (80 ml) and water (120ml) (105g, 1.28mol) , copper sulfate (CuSO ₄ · 5H
₂ O; 8.0 g, 32 mmol) and zinc (83.7 g, 1.28 mol)
l) was dissolved in the solution, and the 1-bromo form of acetic acid (80 ml) was added to the solution.
The solution is added dropwise at ice temperature. The temperature of the reaction system is gradually raised to room temperature and reacted for 12 hours. The reaction solution is filtered and extracted with chloroform. The organic layer was washed with water, an aqueous solution of sodium hydrogen carbonate and brine, dried over anhydrous magnesium sulfate, filtered, and concentrated to obtain 2,3,6-tri-O-acetyl-β-D-galactal (34.8 g). , Quantitative).

【００１９】(ii)３,４,６−トリ−Ｏ−アセチル−２−
アジド−２−デオキシ−β−ガラクトピラノシルナイト
レートの合成 上記(i)で得られた２,３,６−トリ−Ｏ−アセチル−β
−Ｄ−ガラクタール(１２.５g,４.６mmol)をアセトニト
リル(１５０ml)に溶解し、硝酸セリウム(IV)アンモニウ
ム(Ｃｅ(IV)(ＮＯ₃)₆(ＮＨ₄)₂；５０g,９.２mmol)を加
え、反応系を−２０℃まで冷却した後、窒化ナトリウム
(４.２g,６.４mmol)を加える。反応系の温度を徐々に室
温まで上げて、１２時間反応させる。反応終了後、氷水
を加え酢酸エチルで抽出する。有機層を食塩水で洗浄し
た後、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、ろ過、濃縮
後、シリカゲルカラムクロマトグラフィ(トルエン：酢
酸エチル＝１０：１)により分取して、３,４,６−トリ
−Ｏ−アセチル−２−アジド−２−デオキシ−β−Ｄ−
ガラクトピラノシルナイトレート(１１.６g,６８％)を
得る。(Ii) 3,4,6-tri-O-acetyl-2-
Synthesis of azido-2-deoxy-β-galactopyranosyl nitrate 2,3,6-tri-O-acetyl-β obtained in (i) above
-D- galactal (12.5 g, 4.6 mmol) was dissolved in acetonitrile (150 ml), cerium (IV) nitrate ammonium _{(Ce (IV) (NO 3} ) 6 (NH 4) 2; 50g, 9.2mmol) , And the reaction system was cooled to -20 ° C.
(4.2 g, 6.4 mmol) are added. The temperature of the reaction system is gradually raised to room temperature and reacted for 12 hours. After completion of the reaction, ice water is added, and the mixture is extracted with ethyl acetate. The organic layer was washed with brine, dried over anhydrous magnesium sulfate, filtered, concentrated, and separated by silica gel column chromatography (toluene: ethyl acetate = 10: 1) to give 3,4,6-tri-O -Acetyl-2-azido-2-deoxy-β-D-
Galactopyranosyl nitrate (11.6 g, 68%) is obtained.

【００２０】(iii)３,４,６−トリ−Ｏ−アセチル−２
−アジド−２−デオキシ−β−Ｄ−ガラクトピラノシル
フロリドの合成 上記(ii)で得られた３,４,６−トリ−Ｏ−アセチル−２
−アジド−２−デオキシ−β−Ｄ−ガラクトピラノシル
ナイトレート(６.２g,１６.５mmol)をアセトニトリル
(３０ml)に溶解し、これにトリエチルアミン(１.５ml)
とトリエチルアミン−３ＨＦ(６.６ml,４１.２mmol)を
加え、反応系を窒素置換する。４０〜５０℃で１８時間
反応させた後、濃縮し、クロロホルムで抽出する。有機
層を食塩水で洗浄した後、無水硫酸マグネシウムで乾燥
させ、ろ過、濃縮後、シリカゲルカラムクロマトグラフ
ィ(トルエン：酢酸エチル＝４：１)により分取して３,
４,６−トリ−Ｏ−アセチル−２−アジド−２−デオキ
シ−β−Ｄ−ガラクトピラノシルフロリド(３.２g,５８
％)を得る。上記反応の副成物として得られる１位水酸
基の遊離体(１.３g,３.９２mmol)をテトラヒドロフラン
(１５ml)に溶解し、反応系を窒素置換する。−２０℃ま
で冷やした後、ジエチルアミノスルファトリフロリド
(ＤＡＳＴ；０.６２ml,４.７mmol)を加え、室温で１０
分反応させる。反応終了後、再び−２０℃まで冷やしメ
タノール(３ml)を加えた後、濃縮し、クロロホルムで抽
出する。有機層を炭酸水素ナトリウム水溶液および食塩
水で洗浄した後、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、ろ
過、濃縮後、シリカゲルカラムクロマトグラフィ(トル
エン：酢酸エチル＝１５：１)により分取して同生成物
(１.０g,８８％)を得る。この工程の出発ナイトレート
化合物から目的のフロリド化合物の総収量は４.２g(７
６％)である(Iii) 3,4,6-tri-O-acetyl-2
Synthesis of -azido-2-deoxy-β-D-galactopyranosyl fluoride 3,4,6-tri-O-acetyl-2 obtained in (ii) above
-Azido-2-deoxy-β-D-galactopyranosyl nitrate (6.2 g, 16.5 mmol) in acetonitrile
(30 ml), and triethylamine (1.5 ml) was added thereto.
And triethylamine-3HF (6.6 ml, 41.2 mmol) were added, and the reaction system was replaced with nitrogen. After reacting at 40-50 ° C. for 18 hours, the mixture is concentrated and extracted with chloroform. The organic layer was washed with brine, dried over anhydrous magnesium sulfate, filtered, concentrated, and separated by silica gel column chromatography (toluene: ethyl acetate = 4: 1) to obtain 3,3.
4,6-Tri-O-acetyl-2-azido-2-deoxy-β-D-galactopyranosyl fluoride (3.2 g, 58
%). The free form of the hydroxyl group at the 1-position (1.3 g, 3.92 mmol) obtained as a by-product of the above reaction was added to tetrahydrofuran
(15 ml), and the reaction system was purged with nitrogen. After cooling to -20 ° C, diethylaminosulfatrifluoride
(DAST; 0.62 ml, 4.7 mmol) and added at room temperature for 10 minutes.
Let react for minutes. After completion of the reaction, the mixture was cooled again to -20 ° C, methanol (3 ml) was added, and the mixture was concentrated and extracted with chloroform. The organic layer was washed with an aqueous solution of sodium hydrogen carbonate and brine, dried over anhydrous magnesium sulfate, filtered, concentrated, and separated by silica gel column chromatography (toluene: ethyl acetate = 15: 1) to obtain the same product.
(1.0 g, 88%). The total yield of the desired fluoride compound from the starting nitrate compound in this step was 4.2 g (7
6%)

【００２１】(iv)２−アジド−４,６−Ｏ−ベンジリデ
ン−２−デオキシ−β−Ｄ−ガラクトピラノシルフロリ
ドの合成 上記(iii)で得られた３,４,６−トリ−Ｏ−アセチル−
２−アジド−２−デオキシ−β−Ｄ−ガラクトピラノシ
ルフロリド(１.７４g,５.２２mmol)を無水メタノール
(２０ml)に溶解させる。これにナトリウムメチレート
(２７mg,０.５２mmol)を加え室温で反応させる。１時間
後、陽イオン交換樹脂(DOWEX ５０−８X)を用いて反応
系をｐH＝７に調整する。陽イオン交換樹脂をろ過し濃
縮する。濃縮されたシロップをジメチルホルムアミド
(２０ml)に溶解し、ベンズアルデヒドジメチルアセター
ル(１.５７ml,１０.４mmol)と樟脳スルホン酸(６０６m
g,２.６１mmol)を加える。反応系から生成するメタノー
ルをエバポレーターで除去しながら、５０℃で２時間反
応させる。反応終了後、トリエチルアミン(１.８ml,１
３mmol)を加えて反応をとめる。濃縮後シリカゲルカラ
ムクロマトグラフィ(ヘキサン：酢酸エチル＝４：１〜
１：３−０.５％トリエチルアミン)により分取して２−
アジド−４,６−Ｏ−ベンジリデン−２−デオキシ−β
−Ｄ−ガラクトピラノシルフロリド(１.５１g,９８％)
を得る。(Iv) Synthesis of 2-azido-4,6-O-benzylidene-2-deoxy-β-D-galactopyranosylfluoride 3,4,6-tri- obtained in the above (iii) O-acetyl-
2-Azido-2-deoxy-β-D-galactopyranosyl fluoride (1.74 g, 5.22 mmol) was treated with anhydrous methanol.
(20 ml). Sodium methylate
(27 mg, 0.52 mmol) was added and reacted at room temperature. After 1 hour, the reaction system is adjusted to pH = 7 using a cation exchange resin (DOWEX 50-8X). Filter and concentrate the cation exchange resin. Concentrate the syrup into dimethylformamide
(20 ml), and benzaldehyde dimethyl acetal (1.57 ml, 10.4 mmol) and camphorsulfonic acid (606 ml).
g, 2.61 mmol). The reaction is carried out at 50 ° C. for 2 hours while removing the methanol generated from the reaction system by an evaporator. After completion of the reaction, triethylamine (1.8 ml, 1
(3 mmol) is added to stop the reaction. After concentration, silica gel column chromatography (hexane: ethyl acetate = 4: 1 to 1)
1: 3-0.5% triethylamine).
Azide-4,6-O-benzylidene-2-deoxy-β
-D-galactopyranosyl fluoride (1.51 g, 98%)
Get.

【００２２】(v)２−アジド−４,６−ジ−tert−ブチル
シリレンジイル−２−デオキシ−β−Ｄ−ガラクトピラ
ノシルフロリドの合成 上記(iv)で得られた３,４,６−トリ−Ｏ−アセチル−２
−アジド−２−デオキシ−β−Ｄ−ガラクトピラノシル
フロリド(１.９２mg,５.７９mmol)を無水メタノール(１
５ml)に溶解させる。これにナトリウムメチレート(３１
mg,０.５８mmol)を加え、室温で反応させる。１時間
後、陽イオン交換樹脂(DOWEX ５０−８X)を用いて反応
系をｐH＝７に調製する。陽イオン交換樹脂をろ過し濃
縮する。濃縮されたシロップをピリジン(２０ml)に溶解
し、１−ヒドロキシベンゾトリアゾール(１６０mg,０.
０７mmol)とジ−tert−ブチルジクロロシラン(１.３４m
l,０.４mmol)を加え、反応系を窒素置換する。８０〜９
０℃で１３時間反応させた後、室温まで放冷し濃縮す
る。クロロホルムで抽出し、有機層を１N硫酸、炭酸水
素ナトリウム水溶液および食塩水で洗浄した後、無水硫
酸マグネシウムで乾燥させ、ろ過、濃縮後、シリカゲル
カラムクロマトグラフィ(トルエン：酢酸エチル＝１
５：１)により分取して、２−アジド−４,６−ジ−ｔｅ
ｒｔ−ブチルシリレンジイル−２−デオキシ−β−Ｄ−
ガラクトピラノシルフロリド(１.５２g,７６％)を得
る。(V) Synthesis of 2-azido-4,6-di-tert-butylsilylenediyl-2-deoxy-β-D-galactopyranosyl fluoride 3,4 obtained in (iv) above , 6-Tri-O-acetyl-2
-Azido-2-deoxy-β-D-galactopyranosyl fluoride (1.92 mg, 5.79 mmol) in anhydrous methanol (1
5 ml). Add sodium methylate (31
mg, 0.58 mmol) and react at room temperature. After one hour, the reaction system is adjusted to pH = 7 using a cation exchange resin (DOWEX 50-8X). Filter and concentrate the cation exchange resin. The concentrated syrup was dissolved in pyridine (20 ml) and 1-hydroxybenzotriazole (160 mg, 0.1 ml) was added.
07 mmol) and di-tert-butyldichlorosilane (1.34 m
1,0.4 mmol), and the reaction system is purged with nitrogen. 80-9
After reacting at 0 ° C. for 13 hours, the mixture is allowed to cool to room temperature and concentrated. After extraction with chloroform, the organic layer was washed with 1N sulfuric acid, aqueous sodium hydrogen carbonate solution and brine, dried over anhydrous magnesium sulfate, filtered, concentrated, and then subjected to silica gel column chromatography (toluene: ethyl acetate = 1).
5: 1) to give 2-azido-4,6-di-te
rt-butylsilylenediyl-2-deoxy-β-D-
Galactopyranosyl fluoride (1.52 g, 76%) is obtained.

【００２３】(vi)２,３,４,６−テトラ−Ｏ−アセチル
−β−Ｄ−ガラクトピラノシルトリクロロアセトイミデ
ートの合成 Ｄ−ガラクトースの完全アセチル体(２０g,５１.２mmo
l)をテトラヒドロフラン(１５０ml)に溶解し、ベンジル
アミン(９.５ml,８７.１mmol)を加え、１２時間反応さ
せる。反応終了後、濃縮し、クロロホルムで抽出し、有
機層を１N硫酸、炭酸水素ナトリウム水溶液および食塩
水で洗浄した後、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、ろ
過、濃縮後、シリカゲルカラムクロマトグラフィ(トル
エン：酢酸エチル＝５：１)により分取し、濃縮する。
得られた１位水酸基の遊離体をジクロルメタン(１００m
l)に溶解し、−１０℃まで冷やした後、トリクロロアセ
トニトリル(２４.７ml,２４６mmol)と１,８−ジアザビ
シクロ[５,４,０]ウンデカ−７−エン(３.８３ml,２５.
６mmol)を加える。氷温で１時間反応させた後、１５℃
で濃縮する。この反応液をシリカゲルカラムクロマトグ
ラフィ(トルエン：酢酸エチル＝５：１−０.５％トリエ
チルアミン)により分取して、２,３,４,６−テトラ−Ｏ
−アセチル−β−Ｄ−ガラクトピラノシルトリクロロア
セトイミデート(１７.５g,７０％)を得る。(Vi) Synthesis of 2,3,4,6-tetra-O-acetyl-β-D-galactopyranosyltrichloroacetimidate Full acetylated form of D-galactose (20 g, 51.2 mmol)
l) was dissolved in tetrahydrofuran (150 ml), benzylamine (9.5 ml, 87.1 mmol) was added and reacted for 12 hours. After completion of the reaction, the mixture was concentrated, extracted with chloroform, and the organic layer was washed with 1N sulfuric acid, an aqueous solution of sodium hydrogen carbonate and brine, dried over anhydrous magnesium sulfate, filtered, concentrated, and then subjected to silica gel column chromatography (toluene: ethyl acetate). = 5: 1) and concentrated.
The obtained free form of the hydroxyl group at the 1-position was converted to dichloromethane (100 m
After cooling to -10 ° C, trichloroacetonitrile (24.7 ml, 246 mmol) and 1,8-diazabicyclo [5,4,0] undec-7-ene (3.83 ml, 25.
6 mmol) are added. After reacting for 1 hour at ice temperature, 15 ℃
And concentrate. The reaction solution was separated by silica gel column chromatography (toluene: ethyl acetate = 5: 1-0.5% triethylamine), and 2,3,4,6-tetra-O
-Acetyl-β-D-galactopyranosyltrichloroacetimidate (17.5 g, 70%) was obtained.

【００２４】(vii)Ｏ−(２,３,４,６−テトラ−Ｏ−ア
セチル−β−Ｄ−ガラクトピラノシル)−(１→３)−２
−アジド−４,６−Ｏ−ベンジリデン−２−デオキシ−
β−Ｄ−ガラクトピラノシルフロリドの合成 上記(vi)で得られた２,３,４,６−テトラ−Ｏ−アセチ
ル−β−Ｄ−ガラクトピラノシルトリクロロアセトイミ
デート(２.３６g,４.８mmol)と上記(iv)で得られた２−
アジド−４,６−Ｏ−ベンジリデン−２−デオキシ−β
−Ｄ−ガラクトピラノシルフロリド(１.１８g,４.０mmo
l)をジクロルメタン(１５ml)に溶解し、モノキュラーシ
ーブス(１.０g)を加え、反応系を窒素置換する。−１５
℃まで冷やした後、トリメチルシリルトリフロロメタン
スルホネート(７７μl,０.４０mmol)のジクロルメタン
(０.５ml)希釈液を加える。−１５℃を保ったまま２時
間反応させた後、トリエチルアミン(１ml)を加えて反応
を止める。ろ過、濃縮後、シリカゲルカラムクロマトグ
ラフィ(トルエン：酢酸エチル＝５：１−０.５％トリエ
チルアミン)により分取して、Ｏ−(２,３,４,６−テト
ラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−ガラクトピラノシル)−(１
→３)−２−アジド−４,６−Ｏ−ベンジリデン−２−デ
オキシ−β−Ｄ−ガラクトピラノシルフロリド(２.１７
g,８７％)を得る。¹ H-NMRδ(CDCl₃):5.57(s,1H,Ph-CH),5.07(dd,1H,J＝52.
5,7.5Hz,H-1),4.80(d,1H,J＝7.9Hz,H-1')(Vii) O- (2,3,4,6-tetra-O-acetyl-β-D-galactopyranosyl)-(1 → 3) -2
-Azide-4,6-O-benzylidene-2-deoxy-
Synthesis of β-D-galactopyranosyl fluoride 2,3,4,6-tetra-O-acetyl-β-D-galactopyranosyltrichloroacetimidate obtained in (vi) above (2.36 g) , 4.8 mmol) and 2- (obtained in (iv) above).
Azide-4,6-O-benzylidene-2-deoxy-β
-D-galactopyranosyl fluoride (1.18 g, 4.0 mmol)
l) was dissolved in dichloromethane (15 ml), monocular sieves (1.0 g) was added, and the reaction system was purged with nitrogen. -15
After cooling to ℃, trimethylsilyl trifluoromethanesulfonate (77 μl, 0.40 mmol) in dichloromethane
(0.5 ml) add diluent. After the reaction at -15 ° C for 2 hours, the reaction was stopped by adding triethylamine (1 ml). After filtration and concentration, the product was fractionated by silica gel column chromatography (toluene: ethyl acetate = 5: 1-0.5% triethylamine) to obtain O- (2,3,4,6-tetra-O-acetyl-β-D). -Galactopyranosyl)-(1
→ 3) -2-Azido-4,6-O-benzylidene-2-deoxy-β-D-galactopyranosyl fluoride (2.17)
g, 87%). _{^{1 H-NMRδ (CDCl 3)}} : 5.57 (s, 1H, Ph-CH), 5.07 (dd, 1H, J = 52.
5,7.5Hz, H-1), 4.80 (d, 1H, J = 7.9Hz, H-1 ')

【００２５】(viii)Ｏ−(２,３,４,６,−テトラ−Ｏ−
ベンジル−β−Ｄ−ガラクトピラノシル)−(１→３)−
２−アジド−４,６−Ｏ−ベンジリデン−２−デオキシ
−β−Ｄ−ガラクトピラノシルフロリドの合成 上記(vii)で得られたＯ−(２,３,４,６−テトラ−Ｏ−
アセチル−β−Ｄ−ガラクトピラノシル)−(１→３)−
２−アジド−４,６−Ｏ−ベンジリデン−２−デオキシ
−１−β−Ｄ−ガラクトピラノシルフロリド(１.３g,
２.０８mmol)を無水メタノール２０mlに溶解させる。ナ
トリウムメチレート(１０mg,０.２mmol)を加え室温で反
応させる。１時間後、陽イオン交換樹脂(DOWEX５０−８
X)を用いて反応系をpH＝７に調整する。陽イオン交換樹
脂をろ過し濃縮する。濃縮されたシロップをＮ,Ｎ−ジ
メチルホルムアミド２０mlに溶解した後、−２０℃まで
冷却する。水酸化ナトリウム(６０％)(５５２mg,１６mm
ol)を加え１５分間攪拌し、ベンジルブロミド(４.９ml,
４０mmol)を加える。反応系の温度を徐々に室温まで上
げて、３時間反応させる。反応終了後、氷水１０mlを加
えた後クロロホルムで抽出する。有機層を５％クエン酸
水溶液、飽和食塩水で洗浄した後、無水硫酸マグネシウ
ムで乾燥させる。ろ過、濃縮の後、シリカゲルカラムク
ロマトグラフィ(移動相、ヘキサン：酢酸エチル＝５：
１、トリエチルアミン０.５％)により分取して目的物
(１.２g,７１％)を得る。¹ H-NMRδ(CDCl₃):5.50(s,1H,Ph-CH),5.15(dd,1H,J＝52.
6,7.5Hz,H-1),4.68(d,1H,J＝7.6Hz,H-1'),4.31〜4.26
(m,2H,H-4,H-6a),4.01〜3.84(m,4H,H-2,H-2',H-4',H-6
b),3.61〜3.48(m,5H,H-3,H-3',H-5',H-6a,H-6b'),3.39
(s,1H,H-5)(Viii) O- (2,3,4,6, -tetra-O-
Benzyl-β-D-galactopyranosyl)-(1 → 3)-
Synthesis of 2-azido-4,6-O-benzylidene-2-deoxy-β-D-galactopyranosyl fluoride O- (2,3,4,6-tetra-O obtained in (vii) above −
Acetyl-β-D-galactopyranosyl)-(1 → 3)-
2-azido-4,6-O-benzylidene-2-deoxy-1-β-D-galactopyranosyl fluoride (1.3 g,
(2.08 mmol) are dissolved in 20 ml of anhydrous methanol. Sodium methylate (10 mg, 0.2 mmol) is added and reacted at room temperature. One hour later, use a cation exchange resin (DOWEX50-8)
The reaction is adjusted to pH = 7 using X). Filter and concentrate the cation exchange resin. The concentrated syrup is dissolved in 20 ml of N, N-dimethylformamide and cooled to -20 ° C. Sodium hydroxide (60%) (552 mg, 16 mm
ol) and stirred for 15 minutes. Benzyl bromide (4.9 ml,
40 mmol) are added. The temperature of the reaction system is gradually raised to room temperature and reacted for 3 hours. After completion of the reaction, 10 ml of ice water is added, and the mixture is extracted with chloroform. The organic layer is washed with a 5% aqueous citric acid solution and saturated saline, and then dried over anhydrous magnesium sulfate. After filtration and concentration, silica gel column chromatography (mobile phase, hexane: ethyl acetate = 5:
1, 0.5% triethylamine)
(1.2 g, 71%). ¹ H-NMR δ (CDCl ₃ ): 5.50 (s, 1 H, Ph-CH), 5.15 (dd, 1 H, J = 52.
6,7.5Hz, H-1), 4.68 (d, 1H, J = 7.6Hz, H-1 '), 4.31 ~ 4.26
(m, 2H, H-4, H-6a), 4.01 ~ 3.84 (m, 4H, H-2, H-2 ', H-4', H-6
b), 3.61-3.48 (m, 5H, H-3, H-3 ', H-5', H-6a, H-6b '), 3.39
(s, 1H, H-5)

【００２６】参考例２ Ｏ−(２,３,４,６,−テトラ−Ｏ−ベンジル−β−Ｄ−
ガラクトピラノシル)−(１→３)−２−アジド−４,６−
ジ−Ｏ−ベンジル−２−デオキシ−β−Ｄ−ガラクトピ
ラノシルフロリドの合成 前記参考例１−(Vii)で得られたＯ−(２,３,４,６−テ
トラ−Ｏ−ベンジル−β−Ｄ−ガラクトピラノシル)−
(１→３)−２−アジド−４,６−Ｏ−ベンジリデン−２
−デオキシ−β−Ｄ−ガラクトピラノシルフロリド(４
７４mg,０.７５８mmol)を無水メタノール(１０ml)に溶
解させ、その溶液を氷温まで冷やした後ナトリウムメチ
レート(８mg,０.１５２mmol)を加え、室温で反応させ
る。１時間後、陽イオン交換樹脂(DOWEX５０−８X)を用
いて反応系をｐH＝７に調整する。陽イオン交換樹脂を
ろ過し、濃縮する。その濃縮物を再びメタノール(１５m
l)に溶解し、樟脳スルホン酸(５５mg,０.２３７mmol)を
加え、３７℃で２時間反応させる。反応終了後、トリエ
チルアミン(０.３１ml,３.０３mmol)を加えた後、濃縮
する。濃縮されたシロップをジメチルホルムアミド(１
５ml)に溶解した後、−２０℃まで冷却する。水素化ナ
トリウム(６０％)(３６４mg,９.１０mmol)を加え、１５
分間攪拌し、ベンジルブロミド(１.６２ml,１３.６mmo
l)を加える。反応系の温度を徐々に室温まで上げて、１
２時間反応させる。反応終了後、氷を加えて攪拌した
後、濃縮し、クロロホルムで抽出する。有機層を水で洗
浄した後、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、ろ過、濃
縮後、シリカゲルカラムクロマトグラフィ(ヘキサン：
酢酸エチル＝５：１)により分取して目的物(４８６mg,
７７％)を得る。¹ H-NMRδ(CDCl₃):5.10(dd,1H,J＝52.5,7.3Hz,H-1)4.65
(d,1H,J＝7.8Hz,H-1'),3.95〜3.83(m,4H,H-2,H-2',H-4,
H-4'),3.63〜3.43(m,8H,H-3,H-3',H-5,H-5',H-6a,H-6b,
H-6a',H-6b').Reference Example 2 O- (2,3,4,6, -tetra-O-benzyl-β-D-
Galactopyranosyl)-(1 → 3) -2-azido-4,6-
Synthesis of di-O-benzyl-2-deoxy-β-D-galactopyranosyl fluoride O- (2,3,4,6-tetra-O-benzyl obtained in Reference Example 1- (Vii) -Β-D-galactopyranosyl)-
(1 → 3) -2-azido-4,6-O-benzylidene-2
-Deoxy-β-D-galactopyranosyl fluoride (4
74 mg, 0.758 mmol) was dissolved in anhydrous methanol (10 ml), the solution was cooled to ice temperature, sodium methylate (8 mg, 0.152 mmol) was added, and the mixture was reacted at room temperature. After 1 hour, the reaction system is adjusted to pH = 7 using a cation exchange resin (DOWEX 50-8X). Filter and concentrate the cation exchange resin. The concentrate was reconstituted in methanol (15 m
l), camphorsulfonic acid (55 mg, 0.237 mmol) was added, and the mixture was reacted at 37 ° C for 2 hours. After completion of the reaction, triethylamine (0.31 ml, 3.03 mmol) was added, and the mixture was concentrated. Concentrate the syrup with dimethylformamide (1
5 ml) and cooled to -20 ° C. Sodium hydride (60%) (364 mg, 9.10 mmol) was added and 15
And stirred with benzyl bromide (1.62 ml, 13.6 mmol).
l) is added. The temperature of the reaction system is gradually raised to room temperature,
Incubate for 2 hours. After completion of the reaction, ice was added and the mixture was stirred, concentrated, and extracted with chloroform. The organic layer was washed with water, dried over anhydrous magnesium sulfate, filtered, concentrated, and then subjected to silica gel column chromatography (hexane: hexane:
The target product (486 mg,
77%). _{^{1 H-NMRδ (CDCl 3)}} : 5.10 (dd, 1H, J = 52.5,7.3Hz, H-1) 4.65
(d, 1H, J = 7.8Hz, H-1 '), 3.95-3.83 (m, 4H, H-2, H-2', H-4,
H-4 '), 3.63-3.43 (m, 8H, H-3, H-3', H-5, H-5 ', H-6a, H-6b,
H-6a ', H-6b').

【００２７】参考例３ Ｏ−(２,３,４,６,−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−
ガラクトピラノシル)−(１→３)２−アジド−４,６−ジ
−tert−ブチルシリレンジイル−２−デオキシ−β−Ｄ
−ガラクトピラノシルフロリドの合成 前記参考例１−(vi)で得られた２,３,４,６,−テトラ−
Ｏ−アセチル−β−Ｄ−ガラクトピラノシルトリクロロ
アセトイミデート(４０３mg,０.８２mmol)と前記参考例
１−(ｖ)で得られた２−アジド−４,６−ジ−tert−ブ
チルシリレンジイル−２−デオキシ−β−Ｄ−ガラクト
ピラノシルフロリド(２３７g,０.６８mmol)をジクロル
メタン(３ml)に溶解し、その溶液にモノキュラーシーブ
ス(２００mg)を加え、反応系を窒素置換する。−２０℃
まで冷やした後、トリメチルシリルトリフロロメタンス
ルホネート(１３μｌ,６８μｍｏｌ)のジクロルメタン
(０.５ml)希釈液を加える。−２０℃を保ったまま２時
間反応させた後、トリエチルアミン(１ml)加えて反応を
止める。ろ過、濃縮後、シリカゲルカラムクロマトグラ
フィ(トルエン：酢酸エチル＝１０：１−０.５％トリエ
チルアミン)により分取して目的物(３９７mg,８６％)を
得る。¹ H-NMRδ(CDCl₃):5.04(dd,1H,J＝54.6,7.6Hz,H-1),4.76
(d,1H,J＝7.8Hz,H-1'),1.04(d,18H,t-Bu×2)Reference Example 3 O- (2,3,4,6, -tetra-O-acetyl-β-D-
(Galactopyranosyl)-(1 → 3) 2-azido-4,6-di-tert-butylsilylenediyl-2-deoxy-β-D
-Synthesis of galactopyranosyl fluoride 2,3,4,6, -tetra- obtained in Reference Example 1- (vi) above
O-acetyl-β-D-galactopyranosyltrichloroacetimidate (403 mg, 0.82 mmol) and 2-azido-4,6-di-tert-butylsilyl obtained in Reference Example 1- (v). Rangeyl-2-deoxy-β-D-galactopyranosyl fluoride (237 g, 0.68 mmol) was dissolved in dichloromethane (3 ml), and to the solution was added monocular sieves (200 mg), and the reaction system was purged with nitrogen. . -20 ° C
After cooling to room temperature, trimethylsilyl trifluoromethanesulfonate (13 μl, 68 μmol) in dichloromethane
(0.5 ml) add diluent. After the reaction at -20 ° C for 2 hours, the reaction was stopped by adding triethylamine (1 ml). After filtration and concentration, the residue is separated by silica gel column chromatography (toluene: ethyl acetate = 10: 1-0.5% triethylamine) to obtain the desired product (397 mg, 86%). _{^{1 H-NMRδ (CDCl 3)}} : 5.04 (dd, 1H, J = 54.6,7.6Hz, H-1), 4.76
(d, 1H, J = 7.8Hz, H-1 '), 1.04 (d, 18H, t-Bu × 2)

【００２８】参考例４ ベンジルオキシカルボニル−Ｌ−アラニン−Ｌ−スレオ
ニン−Ｌ−アラニン−ベンジルエステルの合成 Ｈ−Ｌ−アラニンベンジルエステル・トルエンスルホン
酸塩(２.７１g,８.４８mmol)をクロロホルム(２０ml)に
溶解し、氷温まで冷却する。これにトリエチルアミン
(１.２ml,８.４８mmol)を加え、塩を中和した後、濃縮
してＨ−Ｌ−アラニンベンジルエステルを得る。次にｔ
−ブトキシカルボニル−スレオニン(１.６９g,７.７１m
mol)をベンゼン(１０ml)に溶解し、ＥＥＤＱ(Ｎ−エト
キシカルボニル−２−エトキシ−１,２−ジヒドロキノ
リン)(２.１０g,８.４８mmol)を加え、室温で１０分間
攪拌する。この混合液に、上記Ｈ−Ｌ−アラニンベンジ
ルエステルのベンゼン(１０ml)溶液を加える。室温で１
２時間反応させた後、濃縮し、酢酸エチルで抽出し、有
機層を５％クエン酸、炭酸水素ナトリウム水溶液、およ
び食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、
ろ過、濃縮してｔ−ブトキシカルボニル−Ｌ−スレオニ
ン(ＯＨ)−Ｌ−アラニンベンジルエステル(２.５１g,８
６％)を得る。この生成物(３.３g,８.６７mmol)を４Ｎ
−ＨＣｌ−ジオキサン(５０ml,０.２mol)に溶解し、室
温で１時間反応させ、濃縮する。次にエタノール(３０m
l)に溶解し、トリエチルアミン(１.３ml,９.５３mmol)
を加え、塩を中和した後、濃縮してＨ−Ｌ−スレオニン
(ＯＨ)−Ｌ−アラニンベンジルエステルを得る。別途、
ベンジルオキシカルボニル−Ｌ−アラニン(２.０３g,
９.１mmol)をエタノール−ジメチルホルムアミド(１：
１)の混合溶媒(３０ml)に溶解し、ＥＥＤＱ(２.４７g,
９.９mmol)を加え、室温で１０分間攪拌する。これに、
上記Ｈ−Ｌ−スレオニン(ＯＨ)−Ｌ−アラニンベンジル
エステルのエタノール(１５ml)溶液を加える。室温で１
２時間反応させた後、濃縮し、その濃縮液を少量のエタ
ノールに溶かし、エーテルとｎ−ヘキサンを加えて結晶
化させる。結晶をろ取し、１Ｎ塩酸、炭酸水素ナトリウ
ム水溶液および食塩水で洗浄して目的物(３.６g,８５
％)を得る。¹ H-NMRδ(DMSO):1.02(d,3H,J＝6.3Hz,Thr-γ-H),1.20
(d,3H,J＝7.0Hz,Ala-β−H),1.28(d,3H,J＝7.3Hz,Ala-
β-H),3.31(dd,1H,J＝10.4,5.0Hz,Thr-β-H),3.31(ddd,
1H,J＝7.2,7.0,7.0Hz,Ala-α-H),4.17(dd,1H,J＝8.2,4.
0Hz,Thr-α-H),4.30(ddd,1H,J＝7.2,7.1,7.0Hz,Ala-α-
H),7.31(m,10H,Ar)Reference Example 4 Synthesis of benzyloxycarbonyl-L-alanine-L-threonine-L-alanine-benzyl ester HL-alanine benzyl ester toluenesulfonate (2.71 g, 8.48 mmol) was added to chloroform ( 20 ml) and cool to ice temperature. This is triethylamine
(1.2 ml, 8.48 mmol) was added to neutralize the salt and then concentrated to give HL-alanine benzyl ester. Then t
-Butoxycarbonyl-threonine (1.69 g, 7.71 m
mol) was dissolved in benzene (10 ml), EEDQ (N-ethoxycarbonyl-2-ethoxy-1,2-dihydroquinoline) (2.10 g, 8.48 mmol) was added, and the mixture was stirred at room temperature for 10 minutes. To this mixture was added a solution of the above HL-alanine benzyl ester in benzene (10 ml). 1 at room temperature
After reacting for 2 hours, concentrate, extract with ethyl acetate, wash the organic layer with 5% citric acid, aqueous sodium bicarbonate, and brine, dry over anhydrous magnesium sulfate,
After filtration and concentration, tert-butoxycarbonyl-L-threonine (OH) -L-alanine benzyl ester (2.51 g, 8
6%). This product (3.3 g, 8.67 mmol) was added to 4N
Dissolve in -HCl-dioxane (50 ml, 0.2 mol), react at room temperature for 1 hour, and concentrate. Next, ethanol (30m
l) and triethylamine (1.3 ml, 9.53 mmol)
To neutralize the salt, and then concentrated to give HL-threonine.
(OH) -L-alanine benzyl ester is obtained. Separately,
Benzyloxycarbonyl-L-alanine (2.03 g,
9.1 mmol) in ethanol-dimethylformamide (1:
EEDQ (2.47 g, dissolved in a mixed solvent (30 ml) of 1).
9.9 mmol) and stir at room temperature for 10 minutes. to this,
A solution of the above HL-threonine (OH) -L-alanine benzyl ester in ethanol (15 ml) is added. 1 at room temperature
After reacting for 2 hours, the mixture is concentrated, and the concentrate is dissolved in a small amount of ethanol, and crystallized by adding ether and n-hexane. The crystals were collected by filtration, washed with 1N hydrochloric acid, an aqueous solution of sodium hydrogencarbonate and brine, to give the desired product (3.6 g, 85%).
%). ^{1 H-NMRδ (DMSO):} 1.02 (d, 3H, J = 6.3Hz, Thr-γ-H), 1.20
(d, 3H, J = 7.0Hz, Ala-β-H), 1.28 (d, 3H, J = 7.3Hz, Ala-
β-H), 3.31 (dd, 1H, J = 10.4,5.0Hz, Thr-β-H), 3.31 (ddd,
1H, J = 7.2,7.0,7.0Hz, Ala-α-H), 4.17 (dd, 1H, J = 8.2,4.
0Hz, Thr-α-H), 4.30 (ddd, 1H, J = 7.2,7.1,7.0Hz, Ala-α-
H), 7.31 (m, 10H, Ar)

【００２９】実施例１ Ｌ−アラニン−(β−Ｄ−ガラクトピラノシル)−(１→
３)−２−(アセトアミド−２−デオキシ−１−α−Ｄ−
ガラクトピラノシル)−Ｌ−スレオニン−Ｌ−アラニン
の合成Example 1 L-alanine- (β-D-galactopyranosyl)-(1 →
3) -2- (acetamido-2-deoxy-1-α-D-
Synthesis of (Galactopyranosyl) -L-threonine-L-alanine

【化１２】 (i)参考例４で得られたベンジルオキシカルボニル−Ｌ
−アラニン−Ｌ−スレオニン−Ｌ−アラニン−ベンジル
エステル(１.１６５g,２.４mmol)を、塩化メチレン１０
ml、モレキュラーシーブス１.５g、ジルコノセンジクロ
リド(Ｃｐ₂ＺｒＣｌ₂)(４６８mg,１.６mmol)、過塩素酸
銀(６６３mg,３.２mmol)と共に混ぜ、反応系を水素ガス
で置換した後−２０℃に冷却し、３０分間攪拌する。こ
の反応液に、上記参考例１で得られた(Ｏ−(２,３,４,
６−テトラ−Ｏ−ベンジル−β−Ｄ−ガラクトピラノシ
ル)−(１→３)−２−アジド−４,６−Ｏ−ベンジリデン
−２−デオキシ−１−α−Ｄ−ガラクトピラノシルフロ
リド(６５４mg,０.８mmol)の塩化メチレン(５ml)溶液を
加える。６時間攪拌した後、反応液をろ過し、ろ液を濃
縮する。得られたシロップをクロロホルム５０mlに溶解
した後、飽和食塩水で有機層を洗い、無水硫酸マグネシ
ウムで乾燥させる。ろ過、濃縮後、シリカゲルカラムク
ロマトグラフィ(移動相、ヘキサン:酢酸エチル=３:１)
により分収することでベンジルオキシカルボニル−Ｌ−
アラニン−(Ｏ−(２,３,４,６−テトラ−Ｏ−ベンジル
−β−Ｄ−ガラクトピラノシル)−(１→３)−(２−アジ
ド−４,６−Ｏ−ベンジリデン−２−デオキシ−１−α
−Ｄ−ガラクトピラノシル)−Ｌ−スレオニン−Ｌ−ア
ラニン−ベンジルエステル(４６３mg,４５％)を得る。¹ H-NMRδ(CDCl₃):5.48(s,1H,Ph-CH),5.35(d,1H,J＝3.5H
z,H-1),4.67(d,1H,J＝7.6Hz,H-1')Embedded image (i) benzyloxycarbonyl-L obtained in Reference Example 4
-Alanine-L-threonine-L-alanine-benzyl ester (1.165 g, 2.4 mmol) was added to methylene chloride 10
ml, 1.5 g of molecular sieves, zirconocene dichloride (Cp ₂ ZrCl ₂ ) (468 mg, 1.6 mmol), and silver perchlorate (663 mg, 3.2 mmol). And stir for 30 minutes. This reaction solution was added with (O- (2,3,4,
6-tetra-O-benzyl-β-D-galactopyranosyl)-(1 → 3) -2-azido-4,6-O-benzylidene-2-deoxy-1-α-D-galactopyranosylph A solution of chloride (654 mg, 0.8 mmol) in methylene chloride (5 ml) is added. After stirring for 6 hours, the reaction solution is filtered, and the filtrate is concentrated. After dissolving the obtained syrup in 50 ml of chloroform, the organic layer is washed with saturated saline and dried over anhydrous magnesium sulfate. After filtration and concentration, silica gel column chromatography (mobile phase, hexane: ethyl acetate = 3: 1)
Benzyloxycarbonyl-L-
Alanine- (O- (2,3,4,6-tetra-O-benzyl-β-D-galactopyranosyl)-(1 → 3)-(2-azido-4,6-O-benzylidene-2 -Deoxy-1-α
This gives -D-galactopyranosyl) -L-threonine-L-alanine-benzyl ester (463 mg, 45%). ¹ H-NMR δ (CDCl ₃ ): 5.48 (s, 1 H, Ph-CH), 5.35 (d, 1 H, J = 3.5 H
z, H-1), 4.67 (d, 1H, J = 7.6Hz, H-1 ')

【００３０】(ii)ベンジルオキシカルボニル−Ｌ−アラ
ニン−(Ｏ−(２,３,４,６−テトラ−Ｏ−ベンジル−β
−Ｄ−ガラクトピラノシル)−(１→３)−(２−アジド−
４,６−Ｏ−ベンジリデン−２−デオキシ−１−α−Ｄ
−ガラクトピラノシル)−Ｌ−スレオニン−Ｌ−アラニ
ン−ベンジルエステル(４１９mg,０.３２６mmol)をチオ
酢酸４mlとピリジン２ml中室温で２０時間攪拌した後、
反応系を濃縮する。得られたシロップをシリカゲルカラ
ムクロマトグラフィ(移動相、トルエン:酢酸エチル=１:
１−０.５トリエチルアミン)により分取してベンジルオ
キシカルボニル−Ｌ−アラニン−(Ｏ−(２,３,４,６−
テトラ−Ｏ−ベンジル−β−Ｄ−ガラクトピラノシル)
−(１→３)−(２−アセトアミド−４,６−Ｏ−ベンジリ
デン−２−デオキシ−１−α−Ｄ−ガラクトピラノシ
ル)−Ｌ−スレオニン−Ｌ−アラニン−ベンジルエステ
ル(２６６mg,６３％)を得る。¹ H-NMRδ(CDCl₃):5.41(s,1H,Ph-CH),5.21(d,1H,J＝3.5H
z,H-1),4.60(d,1H,J＝8.7Hz,H-1'),1.97(s,3H,CH₃NH)(Ii) benzyloxycarbonyl-L-alanine- (O- (2,3,4,6-tetra-O-benzyl-β
-D-galactopyranosyl)-(1 → 3)-(2-azido-
4,6-O-benzylidene-2-deoxy-1-α-D
-Galactopyranosyl) -L-threonine-L-alanine-benzyl ester (419 mg, 0.326 mmol) was stirred in 4 ml of thioacetic acid and 2 ml of pyridine at room temperature for 20 hours.
Concentrate the reaction. The obtained syrup is subjected to silica gel column chromatography (mobile phase, toluene: ethyl acetate = 1:
1-0.5 triethylamine) to give benzyloxycarbonyl-L-alanine- (O- (2,3,4,6-
Tetra-O-benzyl-β-D-galactopyranosyl)
-(1 → 3)-(2-acetamido-4,6-O-benzylidene-2-deoxy-1-α-D-galactopyranosyl) -L-threonine-L-alanine-benzyl ester (266 mg, 63 %). ¹ H-NMR δ (CDCl ₃ ): 5.41 (s, 1 H, Ph-CH), 5.21 (d, 1 H, J = 3.5 H
z, H-1), 4.60 (d, 1H, J = 8.7Hz, H-1 '), 1.97 (s, 3H, CH 3 NH)

【００３１】(iii)ベンジルオキシカルボニル−Ｌ−ア
ラニン−(Ｏ−(２,３,４,６−テトラ−Ｏ−ベンジル−
β−Ｄ−ガラクトピラノシル)−(１→３)−（２−アセ
トアミド−４,６−Ｏ−ベンジリデン−２−デオキシ−
１−α−Ｄ−ガラクトピラノシル)−Ｌ−スレオニン−
Ｌ−アラニン−ベンジルエステル(１５ｍｇ,１２μｍｏ
ｌ)を、Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド３ml、酢酸１ml、
水１mlに溶かし、パラジウムカーボン１００mgを加え、
反応系を水素で置換する。３時間室温で反応させた後、
パラジウムカーボンを取り除く。Ｇ−１０を用いてゲル
ろ過した後、凍結乾燥することにより目的物(７.２mg、
定量的)を得る。¹ H-NMRδ(D₂O):4.88(d,1H,J＝3.7Hz,H-1),4.43(d,1H,J
＝2.1Hz,Thr-α-H),4.33(dd,J＝6.6,2.1Hz,Thr-β-H),
4.36(d,1H,J＝7.8Hz,H-1'),4.20(dd,1H,J＝11.1,3.7Hz,
H-2).4.16(m,1H,Ala-α-H),4.11(d,1H,J＝1.7Hz,H-4),
4.05(dd,1H,J＝14.2,7.1Hz,Ala-α-H),3.97(m,1H,H-5),
3.94(m,1H,H-3),3.80(d,1H,J＝3.2Hz,H-4'),3.66(m,4H,
H-6a,6b,6a',6b'),3.97(m,1H,H-5'),3.53(m,1H,H-3'),
3.42(dd,1H,J＝9.8,7.8Hz,H-2'),1.91(s,3H,CH₃NH),1.5
0(d,3H,J＝7.0Hz,Ala-β-II),1.22(d,3H,J＝7.2Hz,Ala-
β-H),1.20(d,3H,J＝6.6Hz,Thr-γ-H)¹³ C-NMRδ(D₂O):105.5(C-1'),99.0(C-1).(Iii) Benzyloxycarbonyl-L-alanine- (O- (2,3,4,6-tetra-O-benzyl-
β-D-galactopyranosyl)-(1 → 3)-(2-acetamido-4,6-O-benzylidene-2-deoxy-
1-α-D-galactopyranosyl) -L-threonine-
L-alanine-benzyl ester (15 mg, 12 μmo
l) was treated with 3 ml of N, N-dimethylformamide, 1 ml of acetic acid,
Dissolve in 1 ml of water, add 100 mg of palladium carbon,
The reaction is replaced with hydrogen. After reacting for 3 hours at room temperature,
Remove palladium carbon. After gel filtration using G-10, the desired product (7.2 mg,
Quantitative). _{^{1 H-NMRδ (D 2 O}} ): 4.88 (d, 1H, J = 3.7Hz, H-1), 4.43 (d, 1H, J
= 2.1Hz, Thr-α-H), 4.33 (dd, J = 6.6, 2.1Hz, Thr-β-H),
4.36 (d, 1H, J = 7.8Hz, H-1 '), 4.20 (dd, 1H, J = 11.1,3.7Hz,
H-2) .4.16 (m, 1H, Ala-α-H), 4.11 (d, 1H, J = 1.7Hz, H-4),
4.05 (dd, 1H, J = 14.2,7.1Hz, Ala-α-H), 3.97 (m, 1H, H-5),
3.94 (m, 1H, H-3), 3.80 (d, 1H, J = 3.2Hz, H-4 '), 3.66 (m, 4H,
H-6a, 6b, 6a ', 6b'), 3.97 (m, 1H, H-5 '), 3.53 (m, 1H, H-3'),
3.42 (dd, 1H, J = 9.8,7.8Hz, H-2 '), 1.91 (s, 3H, CH ₃ NH), 1.5
0 (d, 3H, J = 7.0Hz, Ala-β-II), 1.22 (d, 3H, J = 7.2Hz, Ala-
(β-H), 1.20 (d, 3H, J = 6.6 Hz, Thr-γ-H) ¹³ C-NMR δ (D ₂ O): 105.5 (C-1 ′), 99.0 (C-1).

【００３２】実施例２ Ｌ−アラニン−(β−Ｄ−ガラクトピラノシル)−(１→
３)−(２−アセトアミド−２−デオキシ−１−α−Ｄ−
ガラクトピラノシル)−Ｌ−スレオニン−Ｌ−アラニン
の合成 (i)ジルコノセンジクロリド(Ｃｐ₂ＺｒＣｌ₂)(５４３m
g,１.８６mmol)、過塩素酸銀(７７１mg,３.７２mmol)を
ジクロルメタン(１０ml)に溶かし、モノキュラーシーブ
ス１.０g加えた後、反応系を窒素置換して１０分間室温
で攪拌する。これに、参考例４で得られたベンジルオキ
シカルボニル−Ｌ−アラニン−Ｌ−スレオニン−Ｌ−ア
ラニンベンジルエステル(９０４mg,１.８６mmol)を加
え、反応系を−４０℃まで冷却する。この反応液に、Ｃ
Ｈ₂Ｃｌ₂(３ml)に溶かした参考例２で得られたＯ−(２,
３,４,６−テトラ−Ｏ−ベンジル−β−Ｄ−ガラクトピ
ラノシル)−(１→３)−２−アジド−４,６−ジ−Ｏ−ベ
ンジル−２−デオキシ−α−Ｄ−ガラクトピラノシルフ
ロリド(６２０mg,０.７４mmol)のジクロルメタン(３ml)
溶液を加え、ゆっくり室温まで温度を上げ、１８時間反
応させる。ピリジン(１ml)を加え反応を終結させ、クロ
ロホルムで抽出する。有機層を炭酸水素ナトリウム水溶
液および食塩水で洗浄した後、無水硫酸マグネシウムで
乾燥させ、ろ過、濃縮後、シリカゲルカラムクロマトグ
ラフィ(トルエン：酢酸エチル＝９：１−０.５％トリエ
チルアミン)により分取してベンジルオキシカルボニル
−Ｌ−アラニン−(Ｏ−(２,３,４,６−テトラ−Ｏ−ベ
ンジル−β−Ｄ−ガラクトピラノシル)−(１→３)−(２
−アジド−４,６−ジ−Ｏ−ベンジル−２−デオキシ−
α−Ｄ−ガラクトピラノシル)−Ｌ−スレオニン−Ｌ−
アラニンベンジルエステル(３３３mg,３３％)を得る。¹ H-NMRδ(CDCl₃):5.17(d,1H,J＝3.7Hz,H-1),4.64(d,1H,
J＝8.1Hz,H-1')Example 2 L-alanine- (β-D-galactopyranosyl)-(1 →
3)-(2-acetamido-2-deoxy-1-α-D-
Synthesis of (galactopyranosyl) -L-threonine-L-alanine (i) Zirconocene dichloride (Cp ₂ ZrCl ₂ ) (543 m ₂ )
g, 1.86 mmol) and silver perchlorate (771 mg, 3.72 mmol) were dissolved in dichloromethane (10 ml), and 1.0 g of monocular sieve was added. The reaction system was replaced with nitrogen and stirred at room temperature for 10 minutes. To this was added benzyloxycarbonyl-L-alanine-L-threonine-L-alanine benzyl ester (904 mg, 1.86 mmol) obtained in Reference Example 4, and the reaction system was cooled to -40 ° C. This reaction solution contains C
O- (2,2) obtained in Reference Example 2 dissolved in H ₂ Cl ₂ (3 ml).
3,4,6-tetra-O-benzyl-β-D-galactopyranosyl)-(1 → 3) -2-azido-4,6-di-O-benzyl-2-deoxy-α-D- Galactopyranosyl fluoride (620 mg, 0.74 mmol) in dichloromethane (3 ml)
Add the solution, slowly raise the temperature to room temperature and react for 18 hours. The reaction was terminated by the addition of pyridine (1 ml) and extracted with chloroform. The organic layer was washed with an aqueous sodium hydrogen carbonate solution and brine, dried over anhydrous magnesium sulfate, filtered, concentrated, and separated by silica gel column chromatography (toluene: ethyl acetate = 9: 1-0.5% triethylamine). Benzyloxycarbonyl-L-alanine- (O- (2,3,4,6-tetra-O-benzyl-β-D-galactopyranosyl)-(1 → 3)-(2
-Azido-4,6-di-O-benzyl-2-deoxy-
α-D-galactopyranosyl) -L-threonine-L-
Alanine benzyl ester (333 mg, 33%) is obtained. _{^{1 H-NMRδ (CDCl 3)}} : 5.17 (d, 1H, J = 3.7Hz, H-1), 4.64 (d, 1H,
J = 8.1Hz, H-1 ')

【００３３】(ii)上記ベンジルオキシカルボニル−Ｌ−
アラニン−(Ｏ−(２,３,４,６−テトラ−Ｏ−ベンジル
−β−Ｄ−ガラクトピラノシル)−(１→３)−(２−アジ
ド−４,６−ジ−Ｏ−ベンジル−２−デオキシ−α−Ｄ
−ガラクトピラノシル)−Ｌ−スレオニン−Ｌ−アラニ
ン−ベンジルエステル(２８３mg,０.２０６mmol)をチオ
酢酸(２ml)に溶解させる。ピリジン(１ml)を加え室温で
２０時間反応させた後、減圧濃縮する。その濃縮液をシ
リカゲルカラムクロマトグラフィ(ヘキサン：酢酸エチ
ル＝２：３)に付してベンジルオキシカルボニル−Ｌ−
アラニン−(Ｏ−(２,３,４,６−テトラ−Ｏ−ベンジル
−β−Ｄ−ガラクトピラノシル)−(１→３)−(２−アセ
トアミド−４,６−ジ−Ｏ−ベンジル−２−デオキシ−
α−Ｄ−ガラクトピラノシル)−Ｌ−スレオニン−Ｌ−
アラニン−ベンジルエステル(２３８mg,８３％)を得
る。¹ H-NMRδ(CDCl₃):5.20(d,1H,J＝3.5Hz,H-1),4.66(d,1H,
J＝7.8Hz,H-1'),1.65(s,3H,CH₃NH)(Ii) The above benzyloxycarbonyl-L-
Alanine- (O- (2,3,4,6-tetra-O-benzyl-β-D-galactopyranosyl)-(1 → 3)-(2-azido-4,6-di-O-benzyl -2-deoxy-α-D
-Galactopyranosyl) -L-threonine-L-alanine-benzyl ester (283 mg, 0.206 mmol) is dissolved in thioacetic acid (2 ml). After adding pyridine (1 ml) and reacting at room temperature for 20 hours, the mixture is concentrated under reduced pressure. The concentrated solution was subjected to silica gel column chromatography (hexane: ethyl acetate = 2: 3) to give benzyloxycarbonyl-L-
Alanine- (O- (2,3,4,6-tetra-O-benzyl-β-D-galactopyranosyl)-(1 → 3)-(2-acetamido-4,6-di-O-benzyl -2-deoxy-
α-D-galactopyranosyl) -L-threonine-L-
Alanine-benzyl ester (238 mg, 83%) is obtained. _{^{1 H-NMRδ (CDCl 3)}} : 5.20 (d, 1H, J = 3.5Hz, H-1), 4.66 (d, 1H,
J = 7.8Hz, H-1 '), 1.65 (s, 3H, CH ₃ NH)

【００３４】(iii)上記生成物を実施例１−(iii)と同様
に脱保護処理して目的のＬ−アラニン−(β−Ｄ−ガラ
クトピラノシル)−(１→３)−(２−アセトアミド−２−
デオキシ−β−Ｄ−ガラクトピラノシル)−Ｌ−スレオ
ニン−Ｌ−アラニンを得る。この生成物はＮＭＲにより
実施例１の生成物と同一であると確認される。(Iii) The above product was deprotected in the same manner as in Example 1- (iii), and the desired L-alanine- (β-D-galactopyranosyl)-(1 → 3)-(2 -Acetamide-2-
Deoxy-β-D-galactopyranosyl) -L-threonine-L-alanine is obtained. This product is confirmed by NMR to be identical to the product of Example 1.

【００３５】実施例３ ２−アセトアミド−２−デオキシー１−α↓Ｄ−ガラク
トピラノシル−Ｌ−セリンーポリマーの合成 ２−アセトアミド−２−デオキシ−１−α↓Ｄ−ガラク
トピラノシル−Ｌ−セリン３６ｍｇ(０.１２mmol)をＮ,
Ｎ−ジメチルホルムアミドに溶解させる。乾燥剤とし
て、ドライライト１００mgを加え、反応系を窒素置換す
る。３０分後にジフェニルホスホリルアジド２１μｌ
(０.５６mmol)とトリエチルアミン３７μl(０.２８mmo
l)を加える。室温で３日間反応させ減圧濃縮し、Ｇ−２
５を用いて分取し、凍結乾燥することにより標記化合物
２５mgを得る。Example 3 Synthesis of 2-acetamido-2-deoxy-1-α ↓ D-galactopyranosyl-L-serine polymer 2-acetamido-2-deoxy-1-α ↓ D-galactopyranosyl- 36 mg (0.12 mmol) of L-serine was added to N,
Dissolve in N-dimethylformamide. 100 mg of dry light is added as a drying agent, and the reaction system is purged with nitrogen. After 30 minutes, 21 μl of diphenylphosphoryl azide
(0.56 mmol) and 37 μl of triethylamine (0.28 mmol)
l) is added. The mixture was reacted at room temperature for 3 days and concentrated under reduced pressure.
Separate using 5 and freeze-dry to obtain 25 mg of the title compound.

【００３６】実施例４ ２−アセトアミド−２−デオキシ−１−α↓Ｄ−ガラク
トピラノシル−Ｌ−セリン−ポリマーの合成 ２−アセトアミド−２−デオキシ−１−α↓Ｄ−ガラク
トピラノシル−Ｌ−セリン１１６mg(３.７６mmol)をメ
タノールに溶解させる。Ｎ−エトキシカルボニル−２−
エトキシ−１,２−ジヒドロキノリン１００mg(４.１４m
mol)を加え、室温で１日反応させる。減圧濃縮後、ＬＨ
−２０を用いて分取し、凍結乾燥することにより標記化
合物７０mgを得る。Example 4 Synthesis of 2-acetamido-2-deoxy-1-α ↓ D-galactopyranosyl-L-serine-polymer 2-acetamido-2-deoxy-1-α ↓ D-galactopyranosyl -116 mg (3.76 mmol) of L-serine are dissolved in methanol. N-ethoxycarbonyl-2-
100 mg of ethoxy-1,2-dihydroquinoline (4.14 m
mol) and react at room temperature for 1 day. After concentration under reduced pressure, LH
Separation using -20 and freeze-drying affords 70 mg of the title compound.

【００３７】実施例５ Ｌ−アラニン−(β−Ｄ−ガラクトピラノシル)−(１→
３)−(２−アセトアミド−２−デオキシ−１−α−Ｄ−
ガラクトピラノシル)−Ｌ−スレオニン−Ｌ−アラニン
のポリマーの合成Example 5 L-alanine- (β-D-galactopyranosyl)-(1 →
3)-(2-acetamido-2-deoxy-1-α-D-
Synthesis of polymers of (galactopyranosyl) -L-threonine-L-alanine

【化１３】 実施例１の方法によって調整されたＬ−アラニン(β−
Ｄ−ガラクトピラノシル−(１→３)−(２−アセトアミ
ド−２−デオキシ−１−α−Ｄ−ガラクトピラノシル)
−Ｌ−スレオニン−Ｌ−アラニン(２１mg,３３.５μmo
l)をジメチルホルムアミド４００μlに溶解し、氷温ま
で冷やす。ＤＰＰＡ(ジフェニルホスホリルアジド)(９.
４μl,４３.６μmol)とトリエチルアミン(６.０μl,４
３.６μmol)を加える。反応系の温度を徐々に室温まで
上げ、３日間反応させる。反応後、エーテルとエタノー
ルを用いて沈殿物を得る。その沈殿物を１Ｍアンモニア
水に溶解し、１日攪拌する。再び、エーテルとエタノー
ルを用いて沈殿させ、沈殿物をゲルろ過によって精製
し、目的とする標記ポリマー(１８ｍｇ,８６％)を得
る。¹ H-NMRδ(D₂O):4.88(d,1H,J＝3.7Hz,H-1),4.37〜4.12
(m,7H,Thr-α-H,Thr-β-H,H-1',Ala-α-H×2,H-2,H-4),
3.97〜3.94(m,2H,H-5,H-3),3.80(d,1H,J＝2.9Hz,H-4'),
3.66(m,4H,H-6a,6b,6a',6b'),3.97〜3.53(m,2H,H-5',H-
3'),3.42(dd,1H,J＝9.8,7.8Hz,H-2'),1.92(s,3H,CH₃N
H),1.33(m,9H,-CH₃×3)¹³C-NMRδ(D₂O):105.5(C-1'),9
9.8(C-1)Embedded image L-alanine (β-alanine) prepared by the method of Example 1
D-galactopyranosyl- (1 → 3)-(2-acetamido-2-deoxy-1-α-D-galactopyranosyl)
-L-threonine-L-alanine (21 mg, 33.5 μmo
l) is dissolved in 400 μl of dimethylformamide and cooled to ice temperature. DPPA (diphenylphosphoryl azide) (9.
4 μl, 43.6 μmol) and triethylamine (6.0 μl, 4
(3.6 μmol). The temperature of the reaction system is gradually raised to room temperature, and the reaction is performed for 3 days. After the reaction, a precipitate is obtained using ether and ethanol. The precipitate is dissolved in 1 M aqueous ammonia and stirred for one day. Precipitation is again performed using ether and ethanol, and the precipitate is purified by gel filtration to obtain the desired title polymer (18 mg, 86%). _{^{1 H-NMRδ (D 2 O}} ): 4.88 (d, 1H, J = 3.7Hz, H-1), 4.37~4.12
(m, 7H, Thr-α-H, Thr-β-H, H-1 ', Ala-α-H × 2, H-2, H-4),
3.97 to 3.94 (m, 2H, H-5, H-3), 3.80 (d, 1H, J = 2.9 Hz, H-4 '),
3.66 (m, 4H, H-6a, 6b, 6a ', 6b'), 3.97 ~ 3.53 (m, 2H, H-5 ', H-
3 '), 3.42 (dd, 1H, J = 9.8,7.8Hz, H-2'), 1.92 (s, 3H, CH ₃ N
H), 1.33 (m, 9H, -CH ₃ × 3) ¹³ C-NMR δ (D ₂ O): 105.5 (C-1 '), 9
9.8 (C-1)

【００３８】実施例６ Ｌ−アラニン−(β−Ｄ−ガラクトピラノシル)−(１→
３)−(２−アセトアミド−２−デオキシ−１−α−Ｄ−
ガラクトピラノシル)−Ｌ−スレオニン−Ｌ−アラニン
のポリマーの合成 実施例１の方法によって調製されたＬ−アラニン−(β
−Ｄ−ガラクトピラノシル−(１→３)−(２−アセトア
ミド−２−デオキシ−１−α−Ｄ−ガラクトピラノシ
ル)−Ｌ−スレオニン−Ｌ−アラニン(１０mg,１６.０μ
mol)をメタノール(１５０μｌ)およびジメチルホルムア
ミド(５０μl)の混合溶媒に溶解し、ＥＥＤＱ(４.７mg,
１９.１μmol)を加え、室温で２４時間反応させる。反
応後、エーテルとエタノールを用いて沈殿物を得る。そ
の沈殿物をゲルろ過によって精製し、目的とする標記ポ
リマー(８mg,８０％)を得る。Example 6 L-alanine- (β-D-galactopyranosyl)-(1 →
3)-(2-acetamido-2-deoxy-1-α-D-
Synthesis of polymer of galactopyranosyl) -L-threonine-L-alanine L-alanine- (β prepared by the method of Example 1
-D-galactopyranosyl- (1 → 3)-(2-acetamido-2-deoxy-1-α-D-galactopyranosyl) -L-threonine-L-alanine (10 mg, 16.0 μl)
mol) was dissolved in a mixed solvent of methanol (150 μl) and dimethylformamide (50 μl), and EEDQ (4.7 mg,
19.1 μmol) and react at room temperature for 24 hours. After the reaction, a precipitate is obtained using ether and ethanol. The precipitate is purified by gel filtration to obtain the desired title polymer (8 mg, 80%).

【００３９】実験例１ 前記実施例５で得られるポリマー(糖ペプチド)は、アン
チフリーズグリコプロテイン(ＡＦＧＰ)と呼ばれる天然
の糖ペプチドの配列を有しており、その凝固点降下作用
を計り、天然のＡＦＧＰとの類似性を調べた。 実験方法：本発明の実施例５のポリマーについて各種濃
度の水溶液を調製してその凝固点を調べた。凝固点降下
は温度コントローラー付き光学顕微鏡にて測定した。ま
ず、過冷却による測定凝固点の誤差を取り除くために、
あらかじめ系全体を−２０℃で凝結させ、氷核を溶かし
きらないように注意しつつ、系をふたたび０℃に戻す。
ここでさらに徐々に降温してゆき、氷晶の成長を観察し
た。氷晶の成長が止まり、系全体が凝結する温度を凝固
点とした。その結果を第１図に示す。第１図には、文献
の記載に基づいた天然由来のＡＦＧＰの凝固点降下(Art
hur L. DeVries,Stanley K. Komatsu & Robert E. Feen
ey, Journal of Biological Chemistry,245巻, 2901〜2
908頁，1970年を参照）も合せ示す。塩化ナトリウムな
どによる物理化学的な濃度依存性の凝固点降下の場合、
濃度と凝固点降下の度合いは直線関係になるが、ＡＦＧ
Ｐの場合は曲線になる。本発明のポリマーは、第１図に
示されるように、天然由来のＡＦＧＰとほぼ同じ凝固点
降下活性を示す。また本発明のポリマーは氷晶の成長阻
害を示した。これらの結果から、本発明の糖ペプチド
は、移植臓器などのための不凍化剤として利用すること
が期待され、さらに保湿剤として化粧品への応用も期待
できる。EXPERIMENTAL EXAMPLE 1 The polymer (glycopeptide) obtained in Example 5 has a sequence of a natural glycopeptide called antifreeze glycoprotein (AFGP). The similarity with AFGP was examined. Experimental method: Various concentrations of aqueous solutions of the polymer of Example 5 of the present invention were prepared, and their freezing points were examined. The freezing point depression was measured with an optical microscope equipped with a temperature controller. First, in order to remove the error of the measured freezing point due to supercooling,
The whole system is previously allowed to settle at -20 ° C, and the system is returned to 0 ° C again, taking care not to melt the ice nuclei.
Here, the temperature was further gradually lowered, and the growth of ice crystals was observed. The temperature at which ice crystal growth stopped and the entire system congealed was defined as the freezing point. The result is shown in FIG. FIG. 1 shows the freezing point depression of naturally occurring AFGP (Art
hur L. DeVries, Stanley K. Komatsu & Robert E. Feen
ey, Journal of Biological Chemistry, 245, 2901-2
See page 908, 1970). In the case of physicochemical concentration-dependent freezing point depression due to sodium chloride, etc.,
Although the concentration and the degree of freezing point drop have a linear relationship, AFG
In the case of P, it becomes a curve. As shown in FIG. 1, the polymer of the present invention shows almost the same freezing point lowering activity as that of naturally occurring AFGP. The polymers of the present invention also showed ice crystal growth inhibition. From these results, the glycopeptide of the present invention is expected to be used as an antifreezing agent for transplanted organs and the like, and is also expected to be applied to cosmetics as a humectant.

【００４０】[0040]

【発明の効果】本発明によれば、水酸基をエーテル系保
護基で保護した単糖またはオリゴ糖のフッ素化グリコシ
ドを用いてアミノ酸またはペプチドとカップリングさせ
ることにより容易に立体選択的な糖ペプチドモノマーが
得られ、さらにこれを縮重合することにより、科学研究
用材料および医療用、例えば、抗ウイルス剤、抗アレル
ギー剤,抗腫瘍剤などとして、また移植臓器用不凍化
剤、化粧品用保湿剤、さらに食品材料として有用な規則
性糖ペプチドを効率よく製造することができる。According to the present invention, a stereoselective glycopeptide monomer can be easily obtained by coupling a monosaccharide or oligosaccharide having a hydroxyl group protected with an ether-based protecting group to an amino acid or peptide using a fluorinated glycoside. Is obtained by polycondensation, which is used as a material for scientific research and medical use, for example, as an antiviral agent, an antiallergic agent, an antitumor agent, an antifreezing agent for transplanted organs, and a humectant for cosmetics. Further, a regular glycopeptide useful as a food material can be efficiently produced.

【図面の簡単な説明】[Brief description of the drawings]

【図１】 天然ＡＦＧＰと本発明のポリマーの凝固点降
下活性のグラフを示す。FIG. 1 shows a graph of the freezing point lowering activity of native AFGP and the polymer of the present invention.

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (58)調査した分野(Int.Cl.⁷，ＤＢ名) C07K 1/16 C07K 1/113 C07K 5/083 C07K 14/00 C08G 69/10 ＣＡ（ＳＴＮ) ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ)────────────────────────────────────────────────── ─── Continued on the front page (58) Fields surveyed (Int. Cl. ⁷ , DB name) C07K 1/16 C07K 1/113 C07K 5/083 C07K 14/00 C08G 69/10 CA (STN) REGISTRY (STN )

Claims (2)

(57)【特許請求の範囲】(57) [Claims] 【請求項１】 一般式(I): 【化１】 (式中、Ｒ¹はエーテル系保護基で保護された水酸基また
はアジド基、Ｒ²およびＲ³は各々エーテル系保護基で保
護された水酸基または−Ｏ−（水酸基がエーテル系保護
基で保護されている糖残基）、Ｒ⁴は−ＣＨ₂Ｏ−（エー
テル系保護基）、−ＣＨ₂Ｏ−（水酸基がエーテル系保
護基で保護されている糖残基）または−ＣＨ_{3 、}Ｒ⁵は水
素原子を表す)で示される単糖またはオリゴ糖のフッ素
化グリコシドをＮ末端アミノ基をＺ基誘導体で保護され
たＬ−アラニル−Ｌ−スレオニル−Ｌ−アラニンのベン
ジルまたはその誘導体のエステル類とカップリングさせ
て得られる一般式(II): 【化２】 (式中、Ｒ¹、Ｒ²、Ｒ³、Ｒ⁴、およびＲ⁵は前記と同義で
ある。Ｒ⁷およびＲ⁸はアラニン残基、Ｒ⁹はメチル基、
Ｒ¹⁰はＺ基誘導体から選ばれるアミノ基保護基、Ｒ¹¹は
ベンジルまたはその誘導体から選ばれるカルボキシル基
保護基を表す)で示される化合物を、必要によりアジド
基を保護されたアミノ基に変えたのち、水素添加して脱
保護することにより一般式(III): 【化３】 (式中、Ｒ^1’は水酸基または保護されたアミノ基、Ｒ
^2’およびＲ^3’は各々水酸基または−Ｏ−（糖残基）、
Ｒ^4’は−ＣＨ₂ＯＨ、−ＣＨ₂Ｏ−（糖残基）または−
ＣＨ₃、Ｒ^5’は水素原子、Ｒ⁷、Ｒ⁸、Ｒ⁹は上記と同義
である)で示される糖ペプチド類を得、ついで該糖ペプ
チド類（III）を有機リン化合物またはキノリン系ペプ
チド縮重合剤の存在下に縮重合させることを特徴とす
る、一般式(IV): 【化４】 (式中、Ｒ^1’、Ｒ^2’、Ｒ^3’、Ｒ^4’、Ｒ^5’、Ｒ⁷、Ｒ⁸
およびＲ⁹は前記と同義であり、ｎは２〜２０の整数で
ある)で示される規則性糖ペプチド類の製造方法。1. A compound of the general formula (I): (In the formula, R ¹ is a hydroxyl group or an azide group protected by an ether-based protecting group, and R ² and R ³ are a hydroxyl group protected by an ether-based protecting group or -O- (a hydroxyl group is protected by an ether-based protecting group. and the sugar residues are), R ⁴ is -CH ₂ O-(ether protecting group), - CH ₂ O- (sugar residues hydroxyl group is protected with an ether-type protecting group) or -CH _3, R ⁵ Represents a hydrogen atom) L-alanyl-L-threonyl-L-alanine benzyl or a derivative thereof in which the fluorinated glycoside of a monosaccharide or oligosaccharide is protected at the N-terminal amino group with a Z group derivative Formula (II) obtained by coupling with (Wherein, R ¹ , R ² , R ³ , R ⁴ and R ⁵ are as defined above. R ⁷ and R ⁸ are alanine residues, R ⁹ is a methyl group,
R ¹⁰ represents an amino group-protecting group selected from a Z group derivative, and R ¹¹ represents a carboxyl group-protecting group selected from benzyl or a derivative thereof). Then, the compound is deprotected by hydrogenation to give a compound of the general formula (III): (Wherein R ^{1 ′} is a hydroxyl group or a protected amino group,
^{2 ′} and R ^{3 ′} each represent a hydroxyl group or —O— (sugar residue);
R ^{4 ′} is -CH ₂ OH, -CH ₂ O- (sugar residue) or-
CH ₃ and R ^{5 ′} are hydrogen atoms, and R ⁷ , R ⁸ and R ⁹ are as defined above), and then the glycopeptide (III) is converted to an organophosphorus compound or a quinoline-based peptide. General formula (IV), characterized in that polycondensation is carried out in the presence of a polycondensation agent: (Wherein R ^{1 ′} , R ^{2 ′} , R ^{3 ′} , R ^{4 ′} , R ^{5 ′} , R ⁷ , R ⁸
And R ⁹ are as defined above, and n is an integer of 2 to 20). 【請求項２】 一般式(I): 【化５】 (式中、Ｒ¹はエーテル系保護基で保護された水酸基また
はアジド基、Ｒ²およびＲ³は各々エーテル系保護基で保
護された水酸基または−Ｏ−（水酸基がエーテル系保護
基で保護されている糖残基）、Ｒ⁴は−ＣＨ₂Ｏ−（エー
テル系保護基）、−ＣＨ₂Ｏ−（水酸基がエーテル系保
護基で保護されている糖残基）または−ＣＨ_{3 、}Ｒ⁵は水
素原子を表す)で示される単糖またはオリゴ糖のフッ素
化グリコシドをＮ末端アミノ基をＺ基誘導体で保護され
たＬ−アラニル−Ｌ−スレオニル−Ｌ−アラニンのベン
ジルまたはその誘導体のエステル類とカップリングさせ
て得られる一般式(II): 【化６】 (式中、Ｒ¹、Ｒ²、Ｒ³、Ｒ⁴、およびＲ⁵は前記と同義で
ある。Ｒ⁷およびＲ⁸はアラニン残基、Ｒ⁹はメチル基、
Ｒ¹⁰はＺ基誘導体から選ばれるアミノ基保護基、Ｒ¹¹は
ベンジルまたはその誘導体から選ばれるカルボキシル基
保護基を表す)で示される化合物を、必要によりアジド
基を保護されたアミノ基に変えたのち、水素添加して脱
保護することを特徴とする一般式(III): 【化７】 (式中、Ｒ^1’は水酸基または保護されたアミノ基、Ｒ
^2’およびＲ^3’は各々水酸基または−Ｏ−（糖残基）、
Ｒ^4’は−ＣＨ₂ＯＨ、−ＣＨ₂Ｏ−（糖残基）または−
ＣＨ₃、Ｒ^5’は水素原子、Ｒ⁷、Ｒ⁸、Ｒ⁹は上記と同義
である)で示される糖ペプチド類の製造法。2. A compound of the general formula (I): (In the formula, R ¹ is a hydroxyl group or an azide group protected by an ether-based protecting group, and R ² and R ³ are a hydroxyl group protected by an ether-based protecting group or -O- (a hydroxyl group is protected by an ether-based protecting group. and the sugar residues are), R ⁴ is -CH ₂ O-(ether protecting group), - CH ₂ O- (sugar residues hydroxyl group is protected with an ether-type protecting group) or -CH _3, R ⁵ Represents a hydrogen atom) L-alanyl-L-threonyl-L-alanine benzyl or a derivative thereof in which the fluorinated glycoside of a monosaccharide or oligosaccharide is protected at the N-terminal amino group with a Z group derivative General formula (II) obtained by coupling with (Wherein, R ¹ , R ² , R ³ , R ⁴ and R ⁵ are as defined above. R ⁷ and R ⁸ are alanine residues, R ⁹ is a methyl group,
R ¹⁰ represents an amino group-protecting group selected from a Z group derivative, and R ¹¹ represents a carboxyl group-protecting group selected from benzyl or a derivative thereof). General formula (III) characterized by deprotection by hydrogenation: (Wherein R ^{1 ′} is a hydroxyl group or a protected amino group,
^{2 ′} and R ^{3 ′} each represent a hydroxyl group or —O— (sugar residue);
R ^{4 ′} is -CH ₂ OH, -CH ₂ O- (sugar residue) or-
CH ₃ and R ^{5 ′} are hydrogen atoms, and R ⁷ , R ⁸ and R ⁹ are as defined above).