JP3107726B2 - Water-swellable polymer gel - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION

【０００１】[0001]

【産業上の利用分野】本発明は医療用高分子ゲルに関す
る。詳しくは、本発明は新規な薬剤放出特性を有する、
医療用高分子ゲルに関する。本発明の医療用高分子ゲル
は、創傷被覆材、生体組織接着剤、癒着防止材、骨補強
材、薬剤放出基材の構成成分として有用である。本発明
は透明性と耐熱性、生体親和性、安定性に優れた多糖類
の新規な水膨潤性高分子ゲルに関する。本発明により提
供される水膨潤性高分子ゲルは、上記の医療用高分子ゲ
ルの構成成分として有用であると共にそれ自体で耐熱性
と生体親和性に優れているので創傷被覆材、癒着防止
材、生体組織接着剤等の医療用材料の構成成分として有
用である。さらに透明性に優れているので創傷被覆材、
癒着防止材の構成成分として特に有用である。The present invention relates to a medical polymer gel. In particular, the present invention has novel drug release properties,
The present invention relates to a medical polymer gel. The polymer gel for medical use of the present invention is useful as a component of a wound covering material, a biological tissue adhesive, an adhesion preventing material, a bone reinforcing material, and a drug releasing base material. The present invention relates to a novel water-swellable polymer gel of a polysaccharide having excellent transparency, heat resistance, biocompatibility, and stability. The water-swellable polymer gel provided by the present invention is useful as a component of the above-mentioned medical polymer gel, and is itself excellent in heat resistance and biocompatibility, so that it can be used as a wound covering material, an adhesion preventing material. It is useful as a component of medical materials such as a biological tissue adhesive. Wound dressing material because it is more transparent,
It is particularly useful as a component of the adhesion preventing material.

【０００２】[0002]

【従来の技術および発明が解決しようとする課題】本明
細書において水膨潤性高分子ゲルとは、血液、血漿、細
胞間液等の体液または生理食塩水等の体液類似液に膨潤
するものであって、生体親和性を有するものを意味す
る。多糖類からなる水膨潤性高分子ゲルとしては、寒
天、アガロース、カラゲニンからなるゲルが知られてい
る。化学的に架橋したデキストランやセルロースのゲ
ル、カルシウムイオンで架橋されたアルギン酸ゲル、キ
チンまたはキトサンからなるゲルも知られている。BACKGROUND OF THE INVENTION In the present specification, a water-swellable polymer gel is one which swells in a body fluid such as blood, plasma or intercellular fluid or a body fluid similar to physiological saline. Means those having biocompatibility. As a water-swellable polymer gel composed of polysaccharide, a gel composed of agar, agarose, and carrageenin is known. Also known are chemically crosslinked dextran and cellulose gels, alginate gels crosslinked with calcium ions, and gels composed of chitin or chitosan.

【０００３】水膨潤性高分子ゲルが医療用途へ応用され
ている例としては、創傷被覆材、コンタクトレンズ、眼
内レンズ、生体組織接着剤、癒着防止材、血液浄化用吸
着剤、人工膵臓や人工肝臓等のハイブリッド人工臓器、
人工軟骨、薬剤徐放性基材等がある。水膨潤性高分子ゲ
ルはその組成と力学的性質が生体組織に近いので、今後
ますます広く応用されると考えられる。[0003] Examples of the application of the water-swellable polymer gel to medical applications include wound dressings, contact lenses, intraocular lenses, adhesives for living tissues, adhesion preventives, adsorbents for blood purification, artificial pancreas and the like. Hybrid artificial organs such as artificial livers,
Artificial cartilage, drug sustained release base, and the like. Since the composition and mechanical properties of the water-swellable polymer gel are close to those of living tissue, it is expected that the gel will be applied more and more widely in the future.

【０００４】従来、外傷や熱傷、潰瘍、褥瘡等の創傷の
治療にはガーゼや軟膏類が用いられてきた。これらは滲
出液を吸収し、かつ外部からの細菌等の侵入を防ぐ効果
がある。近年、創部の滲出液中に治癒を促進する種々の
増殖因子（ｂＦＧＦ、ＴＧＦβ等）が存在することが明
らかになり（Howell, J.M.,Current and Future Trends
in Wound Healing, Emerg. Med.Clin.North Amer., 1
0, 655-663 (1992). ）、これらの増殖因子を創部に保
持して創治癒促進効果を示す閉鎖性被覆材が注目される
ようになった（Eaglstein, W.E., Experience with bio
synthetic dressings. J. Am. Acad. Dermatol., 12, 4
34-440 (1985).）。Conventionally, gauze and ointments have been used for treating wounds such as trauma, burns, ulcers, pressure ulcers and the like. These have an effect of absorbing exudate and preventing invasion of bacteria and the like from the outside. In recent years, it has been revealed that various healing factors (bFGF, TGFβ, etc.) are present in wound exudate (Howell, JM, Current and Future Trends).
in Wound Healing, Emerg. Med. Clin. North Amer., 1
0, 655-663 (1992).), Occlusive dressings that retain these growth factors in the wound and exhibit a wound healing promoting effect have attracted attention (Eaglstein, WE, Experience with bio
synthetic dressings. J. Am. Acad. Dermatol., 12, 4
34-440 (1985).).

【０００５】閉鎖性被覆材としてはポリウレタンフィル
ム、ハイドロコロイド、アルギン酸塩繊維からなる不織
布、ポリビニルアルコールスポンジ、ポリエチレングリ
コールやポリアクリルアミドの水膨潤性高分子ゲル等が
用いられている。生体組織接着剤としてはシアノアクリ
レート系の重合性接着剤、フィブリン糊が使用されてい
る。癒着防止材としてはオキシセルロースメッシュから
なるものが知られている。As the occlusive covering material, polyurethane films, hydrocolloids, nonwoven fabrics made of alginate fibers, polyvinyl alcohol sponges, water-swellable polymer gels of polyethylene glycol and polyacrylamide and the like are used. As the biological tissue adhesive, a cyanoacrylate-based polymerizable adhesive or fibrin glue is used. As an adhesion preventing material, a material made of oxycellulose mesh is known.

【０００６】これらの水膨潤性高分子ゲルの製造方法と
しては、コハク酸またはグルタル酸で架橋したアミロー
ス、デキストランまたはプルラン等の固形物の製造方法
が知られている（特開昭５１−３４９７８号公報）。こ
れらは止血剤として好適である。また、キトサンとＮ−
ヒドロキシコハク酸イミドエステルとを反応させて得ら
れる架橋キトサンが知られている（特開平２−１８０９
０３号公報）。これは人工皮膚等の医薬関連分野に有用
である。さらに、キチン誘導体を硫酸、アスパラギン
酸、グルタミン酸等で一時的にイオン架橋した粘弾性流
体も製造されており、癒着予防に使用されている（特開
平３−１６７２０１号公報）。As a method for producing these water-swellable polymer gels, there is known a method for producing a solid substance such as amylose, dextran or pullulan crosslinked with succinic acid or glutaric acid (Japanese Patent Laid-Open No. 51-34978). Gazette). These are suitable as hemostatic agents. Also, chitosan and N-
Crosslinked chitosan obtained by reacting with hydroxysuccinimide ester is known (JP-A-2-1809).
03 publication). This is useful in medical-related fields such as artificial skin. Further, a viscoelastic fluid in which a chitin derivative is temporarily ion-crosslinked with sulfuric acid, aspartic acid, glutamic acid or the like has also been produced, and is used for preventing adhesion (Japanese Patent Laid-Open No. 3-167201).

【０００７】しかしながら、上記のような医療用材料に
は医療用途としての有用性のほかに生体親和性が必須の
性質として要求される。これまで多くの医療用材料が開
発されてきたが、生体親和性をもつ一種の材料で各種の
医療用途の全てを満足させるものはまだ知られていな
い。組成と力学的性質が生体に近い多糖類水膨潤性高分
子ゲルも医療用途へ応用が試みられているが、一般に安
定性と強度が低いので以下に示すような湿熱蒸気滅菌に
耐えるものが少なく、医療用具としては問題がある。医
療用具の製造上不可欠な滅菌は、ホルマリン滅菌、エチ
レンオキシドガス滅菌、湿熱蒸気滅菌または放射線滅菌
などにより行われる。ホルマリン滅菌、エチレンオキシ
ドガス滅菌は、水膨潤性高分子ゲルの場合特に残留薬物
を完全に除去することが困難であり、残留毒性の心配が
あった。湿熱蒸気滅菌は装置が安価で残留物がなく、安
全性の高い滅菌方法であるが、１２１℃、２０分間とい
う苛酷な条件に耐えられる水膨潤性高分子ゲルはほとん
どなかった。放射線滅菌は残留物がなく安全性の高い方
法であるが、照射装置が高価であること、放射線により
水から生じるラジカルが化学結合を切断したり架橋反応
を起こしたりして、水膨潤性高分子ゲルの性質が変化す
るなどの問題があった。However, such medical materials are required to have biocompatibility in addition to their usefulness as medical applications. Although many medical materials have been developed so far, there is still no known biocompatible material that satisfies all of various medical uses. Polysaccharide water-swellable polymer gels whose composition and mechanical properties are close to those of living organisms have also been applied to medical applications, but generally have low stability and strength, so few of them can withstand wet heat steam sterilization as shown below. However, there is a problem as a medical device. Sterilization essential for the production of medical devices is performed by formalin sterilization, ethylene oxide gas sterilization, wet heat steam sterilization, radiation sterilization, or the like. In formalin sterilization and ethylene oxide gas sterilization, in the case of a water-swellable polymer gel, it is particularly difficult to completely remove the residual drug, and there is a concern about residual toxicity. The wet heat steam sterilization is an inexpensive, residue-free, and highly safe sterilization method, but almost no water-swellable polymer gel can withstand the severe conditions of 121 ° C. for 20 minutes. Radiation sterilization is a highly safe method with no residue, but the expensive irradiation equipment and radicals generated from water by radiation break chemical bonds and cause a cross-linking reaction. There were problems such as a change in the properties of the gel.

【０００８】また、寒天、アガロース、カラゲニン等か
らなるゲルは、機械的強度が弱く、また加熱すると溶解
するので医療用具の構成材料としては適していない。化
学的に架橋したデキストランやセルロースのゲルは加熱
により溶解することはないが、架橋処理により硬くな
り、含水率も低下して生体親和性が悪くなる。また、架
橋処理により着色したり不透明となる。カルシウムイオ
ンで架橋されたアルギン酸ゲルは架橋度が高いと半透明
となり、また体液や生理的塩類溶液中でイオン交換によ
り徐々に溶解するという問題点がある。また、機械的強
度が弱く、破砕され易い。キチンやキトサンは体液や細
菌感染により溶解するという問題がある。A gel made of agar, agarose, carrageenan or the like has a low mechanical strength and dissolves when heated, and is not suitable as a constituent material of a medical device. A chemically crosslinked dextran or cellulose gel does not dissolve by heating, but becomes harder due to the crosslinking treatment, the water content decreases, and the biocompatibility deteriorates. In addition, it becomes colored or opaque by the crosslinking treatment. Alginate gel cross-linked with calcium ions has a problem that it becomes translucent when the degree of cross-linking is high, and that it is gradually dissolved by ion exchange in a body fluid or a physiological salt solution. Also, the mechanical strength is weak, and it is easily crushed. There is a problem that chitin and chitosan are dissolved by body fluid or bacterial infection.

【０００９】創傷被覆材として用いられるポリウレタン
フィルムは透明性と閉鎖性は高いものの水吸収性が無い
ので滲出液が多い創傷には使用できない。ハイドロコロ
イド、アルギン酸塩繊維からなる不織布およびポリビニ
ルアルコールスポンジ等は、いずれも滲出液貯溜性はあ
るが不透明なので創部の観察ができない。さらにハイド
ロコロイド系被覆材では、生体分解性がないためその主
要成分が組織中に長期間残存して、慢性炎症を引き起こ
すという問題もある（Ｙｏｕｎｇ，Ｓ．Ｒ．ｅｔ ａ
ｌ．，Ｊ． Ｉｎｖｅｓｔ．Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｏ
ｆ ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｓｅｍｉ−ｏｃｃｌ
ｕｓｉｖｅ ｐｏｌｙｕｒｅｔｈａｎｅｄｒｅｓｓｉｎ
ｇｓ ａｎｄ ｈｙｄｒｏｃｏｌｌｏｉｄ ｄｒｅｓｓ
ｉｎｇｓｏｎ ｄｅｒｍａｌ ｒｅｐａｉｒ：１．Ｃｅ
ｌｌｕｌａｒ ｃｈａｎｇｅｓ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．，
９７，５８６−５９２（１９９１））。ポリエチレング
リコールやポリアクリルアミドの水膨潤性高分子ゲルは
透明性が良好なものもあるが、やはり合成高分子なので
生体分解性がなく、ハイドロコロイド系被覆材の場合と
同様に創部に残存して慢性炎症反応を生じるという心配
がある。さらに両者の原料のモノマーは毒性が強く、モ
ノマーの残存や分解成分による毒性発現の心配がある。Polyurethane films used as wound dressings have high transparency and occlusive properties but do not absorb water, and therefore cannot be used for wounds with a large amount of exudate. Hydrocolloids, nonwoven fabrics made of alginate fibers, polyvinyl alcohol sponges, and the like all have exudate accumulating properties but are opaque, so that wound sites cannot be observed. Furthermore, the hydrocolloid-based coating material has a problem that, since it is not biodegradable, its main components remain in the tissue for a long period of time, causing chronic inflammation (Young, SR et a).
l. , J. et al. Invest. Comparison o
f the effect of semi-occl
use polyurethanedlessin
gs and hydrocolloid dress
ingson normal repair: 1. Ce
llular changes. Dermatol. ,
97, 586-592 (1991)). Polyethylene glycol and polyacrylamide water-swellable polymer gel and some is good transparency, but no biodegradable so also synthetic polymers, chronic inflammation remained in the wound as in the hydrocolloid based dressing There is a concern that a reaction will occur. Further, the monomers of both raw materials are highly toxic, and there is a concern that residual monomers and decomposed components may cause toxicity.

【００１０】また、ポリウレタンフィルムやハイドロコ
ロイドなどの閉鎖性被覆材は、治癒促進効果に優れてい
るものの、一度細菌感染を起こすと湿潤環境が細菌にと
っても好適な培地となるため、急激に増殖して重度の感
染をひきおこす危険性がある。これに対しては抗菌剤の
全身投与や、局所投与が行われるが、細菌感染創は一般
に血行が悪く全身投与では有効量の抗菌剤が創部に到達
せず、また局所投与では抗菌剤の細胞毒性による副作用
のおそれもある。[0010] In addition, although a covering material such as a polyurethane film or a hydrocolloid is excellent in a healing promoting effect, once a bacterial infection is caused, the humid environment becomes a medium suitable for the bacterium. Risk of severe infection. In response to this, systemic or local administration of antibacterial agents is performed.Bacterial wounds generally have poor blood circulation, and systemic administration does not allow an effective amount of the antibacterial agent to reach the wound. There may be side effects due to toxicity.

【００１１】生体組織接着剤として用いられているシア
ノアクリレート系の重合性接着剤はモノマーの細胞毒性
が強いこと、フィブリン糊は生体由来であるので安定な
供給と性能の維持が難しいことおよびウイルス感染の心
配があることなどの問題がある。癒着防止材として用い
られているオキシセルロースメッシュは布状であるので
操作性が悪く、また生体親和性も良くないので、慢性炎
症反応を引き起こすなどの問題がある。特開昭５１−３
４９７８号公報に開示されている製造方法により製造さ
れる、止血剤として好適なコハク酸またはグルタル酸で
架橋したアミロース、デキストランまたはプルランは、
固形物であって柔軟性がないので、該明細書に示される
ごとく粉砕した粉末、あるいはスポンジとせざるを得な
い。従って創傷被覆材や癒着防止材に要求されるような
透明性と閉鎖性を満足させることはできない。さらに、
架橋に用いられているエステル結合は水溶液中あるいは
体液中で容易に加水分解され、水膨潤性ゲルとしての性
質が時間とともに損なわれる。また、溶出物が多くな
り、安全性の点でも問題がある。実際に、これらは止血
材として短時間の使用を目的としたもので数日から数ヵ
月の連続使用に耐えうるものではない。A cyanoacrylate-based polymerizable adhesive used as a biological tissue adhesive has a strong cytotoxicity of a monomer. Since fibrin glue is derived from a living body, it is difficult to maintain a stable supply and maintain its performance. There are problems such as worrying about. The oxycellulose mesh used as the adhesion preventing material is in the form of a cloth and therefore has poor operability and poor biocompatibility, and thus has a problem of causing a chronic inflammatory reaction. JP-A-51-3
Amylose, dextran or pullulan cross-linked with succinic acid or glutaric acid suitable as a hemostatic agent, produced by the production method disclosed in No. 4978,
Since it is a solid material and lacks flexibility, it must be crushed powder or sponge as shown in the specification. Therefore, transparency and closure required for a wound dressing or an adhesion preventing material cannot be satisfied. further,
The ester bond used for the crosslinking is easily hydrolyzed in an aqueous solution or a body fluid, and the property as a water-swellable gel is deteriorated with time. In addition, the amount of eluted substances increases, and there is a problem in terms of safety. In fact, these are intended for short-term use as hemostatic materials and are not endurable for several days to months of continuous use.

【００１２】キトサンとＮ−ヒドロキシコハク酸イミド
エステル化合物とを反応させて得られる架橋キトサンが
知られており（特開平２−１８０９０３号公報）、人工
皮膚などの医薬関連分野に有用であると期待される。該
架橋キトサンは実施例によれば、破断伸び率が３０％以
下と硬く脆いものであり、創傷被覆材や癒着防止材に要
求される伸縮性や柔軟性を満足することは困難である。
また、これらも架橋剤中にエステル結合が存在するの
で、水溶液中あるいは体液中で加水分解を受け、溶出物
を生じるとともに、水膨潤性高分子ゲルの性質が劣化す
る。また、キチン誘導体を硫酸またはアスパラギン酸、
グルタミン酸で一時的にイオン架橋した粘弾性流体を用
いる組織の癒着予防法が知られている（特開平３−１６
７２０１号公報）が、これらは可逆的なイオン結合なの
で、体液等の高濃度の塩を含む溶液と接触すること等に
より、水膨潤性高分子ゲルの性質が劣化する。このよう
に、従来知られている水膨潤性高分子ゲルの中には、各
種の医療用途に必要な性質を全て具備し、しかも生体親
和性を有するものは見当たらないのが現状である。A crosslinked chitosan obtained by reacting chitosan with an N-hydroxysuccinimide ester compound is known (JP-A-2-180903), and is expected to be useful in pharmaceutical-related fields such as artificial skin. Is done. According to the examples, the crosslinked chitosan has a breaking elongation of 30% or less and is hard and brittle, and it is difficult to satisfy the elasticity and flexibility required for a wound covering material and an adhesion preventing material.
Further, since these also have an ester bond in the cross-linking agent, they are hydrolyzed in an aqueous solution or a body fluid to generate an eluted substance and deteriorate the properties of the water-swellable polymer gel. In addition, a chitin derivative is converted to sulfuric acid or aspartic acid,
A method for preventing tissue adhesion using a viscoelastic fluid temporarily ion-crosslinked with glutamic acid is known (Japanese Patent Laid-Open No. 3-16 / 1991).
No. 7201), since these are reversible ionic bonds, the properties of the water-swellable polymer gel are deteriorated by contact with a solution containing a high concentration of salt such as a body fluid. As described above, at present, none of the conventionally known water-swellable polymer gels has all the properties required for various medical uses and has biocompatibility.

【００１３】一方、高分子ゲルは医療分野において上記
のような各種用途に用いられているばかりでなく、近年
では、高分子ゲルに薬剤を含有させたドラッグデリバリ
ーシステム（ＤＤＳ）や薬物を含有させた創傷被覆材等
が提案されている。例えば、薬剤を封入した脂質微粒子
をＯＨラジカルにより分解する架橋ヒアルロン酸ゲルに
含有させたもの（由井他、Ｐｏｌｙｍｅｒ Ｐｒｅｐｒ
ｉｎｔｓ，Ｊａｐａｎ（１９９３）４２（８），ｐ．３
１８６−３１８８参照）や、セルロース粉末に−Ｐｈｅ
−、−Ｔｙｒ−、−Ｉｌｅ−Ｔｙｒ−、−Ｇｌｙ−Ｉｌ
ｅ−Ｔｙｒ−を介してｐｈｏｌｃｏｄｉｎｅを結合させ
たもの（Ｆ．Ｌａｐｉｃｑｕｅ ＆ Ｅ．Ｄｅｌｌａｃ
ｈｅｒｉｅ，Ｊ Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ Ｒｅｌｅａｓ
ｅ（１９８６）４，ｐ．３９−４５参照）等がその例と
して挙げられる。また、薬物を含有させた創傷被覆材と
しては、傷手当て具を構成している不溶性アルギン酸塩
と可溶性アルギン酸塩との混合アルギン酸塩からなる傷
接触パッドに、抗微生物剤や局部麻酔剤等の薬剤を含有
させたものが知られている（特表平４−５０１０６７号
公報）。また、少なくとも表面に創傷治癒を促進するペ
プチドを共有結合し、かつ殺菌剤を含有させたヒドロゲ
ルを構成材料とする創傷用被覆物も記載されている（特
表平６−５０００２８号公報）。On the other hand, polymer gels are used not only for the above-mentioned various uses in the medical field, but also in recent years, a drug delivery system (DDS) in which a drug is contained in a polymer gel or a drug is contained in the polymer gel. wound dressings and the like have been proposed a. For example, a drug containing encapsulated lipid microparticles in a crosslinked hyaluronic acid gel decomposed by OH radicals (Yui et al., Polymer Prepr
ints, Japan (1993) 42 (8), p. 3
186-3188) or cellulose powder with -Phe
-, -Tyr-, -Ile-Tyr-, -Gly-Il
Pholicodine bound via e-Tyr- (F. Lapicque & E. Dellac)
hereie, J Controlled Releases
e (1986) 4, p. 39-45) and the like. In addition, as a wound dressing material containing a drug, a wound contact pad made of a mixed alginate of an insoluble alginate and a soluble alginate, which constitutes a wound dressing device, is applied to a drug such as an antimicrobial agent or a local anesthetic. Is known (Japanese Unexamined Patent Publication No. Hei 4-501067). In addition, a wound dressing comprising, as a constituent material, a hydrogel containing a peptide that promotes wound healing covalently bound to at least the surface and containing a bactericide is also described (Japanese Patent Application Laid-Open No. 6-500028).

【００１４】しかし、薬剤を封入した脂質微粒子をＯＨ
ラジカルにより分解される架橋ヒアルロン酸ゲルに含有
させたドラッグデリバリーシステムでは、ＯＨラジカル
の発生する部位でヒアルロン酸ゲルが分解され、薬剤を
封入した脂質微粒子が放出されるが、ＯＨラジカルが多
量に発生するのは、炎症の一時期および炎症部位のごく
一部に限定されるため、適用対象疾患がかなり限定され
る。また、脂溶性が高くない薬剤は脂質微粒子に封入さ
れないので、使用できる薬剤もかなり限定される。さら
に、脂質微粒子に封入された薬剤は、脂質微粒子から外
部の水相に徐々に放出されるので、病巣部位以外におい
ても薬剤が徐々に放出されてしまい、副作用のおそれが
ある。さらに、セルロース粉末に-Phe- 、-Tyr- 、-Ile
-Tyr- 、-Gly-Ile-Tyr- を介してpholcodineを結合させ
たドラッグデリバリーシステムでは、酵素の存在によ
り、セルロース粉末に固定化された薬剤は一応放出され
はするが、薬剤の放出量は固定化量の１／１０００〜１
／２００００と非常に少なく、実用的でない。However, the lipid microparticles in which the drug is encapsulated are OH
In a drug delivery system containing a crosslinked hyaluronic acid gel that is decomposed by radicals, the hyaluronic acid gel is decomposed at the site where OH radicals are generated, and lipid microparticles containing the drug are released, but a large amount of OH radicals is generated Because it is limited to a single stage of inflammation and only a small part of the site of inflammation, the target disease is considerably limited. In addition, drugs that are not highly fat-soluble are not encapsulated in the lipid microparticles, so that usable drugs are considerably limited. Furthermore, since the drug encapsulated in the lipid fine particles is gradually released from the lipid fine particles into the external aqueous phase, the drug is gradually released even in areas other than the lesion site, and there is a possibility of side effects. In addition, -Phe-, -Tyr-, -Ile
In a drug delivery system in which pholcodine is bound via -Tyr- and -Gly-Ile-Tyr-, the drug immobilized on cellulose powder is released temporarily due to the presence of the enzyme, but the amount of drug released is 1/1000 to 1 of immobilized amount
/ 20000, which is very low and not practical.

【００１５】特表平４−５０１０６７号公報に記載され
ている創傷被覆材では、抗微生物剤や局部麻酔剤等の薬
剤をゲルのパッドに含有させ得ることが記載されている
が、この薬剤はゲルに固定化されていないので、常に放
出されており、副作用のおそれがある。特表平６−５０
００２８号公報の創傷用被覆物では、表面に創傷治癒促
進ペプチドが化学結合されており、この結合は切断され
ないので、創傷用被覆物に接触している部位でしか効果
が発現しない。また、殺菌剤を構成成分のヒドロゲルに
含有させた場合には、殺菌剤が常に放出されるため、副
作用が発現するおそれがある。このように、従来知られ
ている医療用高分子ゲルでは、目的の病巣部位において
のみ、治療に有効な量の薬剤が放出されるようなものは
得られておらず、より安全な治療システムが求められて
いる。The wound dressing described in Japanese Patent Application Laid-Open No. 4-501068 describes that a drug such as an antimicrobial agent or a local anesthetic can be contained in a gel pad. Since it is not immobilized on the gel, it is always released, which may cause side effects. Tokiohei 6-50
In the wound dressing disclosed in Japanese Patent Publication No. 0028, the wound healing promoting peptide is chemically bonded to the surface, and the bond is not broken, so that the effect is exhibited only at the site in contact with the wound dressing. Further, when a bactericide is contained in the constituent hydrogel, the bactericide is constantly released, which may cause side effects. As described above, in a conventionally known medical polymer gel, a drug capable of releasing a therapeutically effective amount of a drug only at a target lesion site has not been obtained, and a safer treatment system has been developed. It has been demanded.

【００１６】そこで、本発明の第１の目的は、酵素が産
生される病巣部位においてのみ、治療に有効な量の薬剤
を放出させることが可能な医療用高分子ゲルを提供する
ことにある。さらに、本発明の第２の目的は、透明性が
高く、生体親和性と耐熱性、安定性に優れており、創傷
被覆材、生体組織接着剤、癒着防止材等の各種の医療用
材料の構成成分として有用な水膨潤性高分子ゲルを提供
することにある。Accordingly, a first object of the present invention is to provide a medical polymer gel capable of releasing a therapeutically effective amount of a drug only at a lesion site where an enzyme is produced. Further, a second object of the present invention is to provide a high transparency, excellent biocompatibility, heat resistance, and stability, and various medical materials such as a wound covering material, a biological tissue adhesive, and an adhesion preventing material. It is to provide a water-swellable polymer gel useful as a constituent.

【００１７】[0017]

【課題を解決するための手段】本発明者らは、上記の課
題を解決すべく鋭意研究を続け、第１の目的に対して
は、酵素反応で主鎖が切断され得る分解性基およびスペ
ーサーを介して、薬剤が水膨潤性高分子ゲルに固定化さ
れた医療用高分子ゲルを提供することにより達成される
ことを発見した。さらに、第２の目的に対しては、分子
内にカルボキシル基を有する多糖類を、ジアミノアルカ
ンまたはその誘導体で共有結合架橋して得られる水膨潤
性高分子ゲルを提供することによって達成されることを
発見した。本発明は、これらの発見に基づきさらに研究
を進めて完成するに至ったものである。Means for Solving the Problems The present inventors have continued intensive studies to solve the above-mentioned problems, and as a first object, a degradable group and a spacer capable of cutting the main chain by an enzymatic reaction. It has been discovered that the drug is achieved by providing a medical polymer gel immobilized on a water-swellable polymer gel. Further, the second object is achieved by providing a water-swellable polymer gel obtained by covalently crosslinking a polysaccharide having a carboxyl group in the molecule with diaminoalkane or a derivative thereof. Was found. The present invention has been completed by further research based on these findings.

【００１８】即ち、本発明の要旨は （１） 分子内にカルボキシル基を有する多糖類を、下
記の一般式（II） Ｒ¹ ＨＮ−（ＣＨ₂)_n −ＮＨＲ² （II） （式中、ｎは２から１８の整数を表し、Ｒ¹ およびＲ²
はそれぞれ水素原子または−ＣＯＣＨ（ＮＨ₂ ）−（Ｃ
Ｈ₂ ）₄ −ＮＨ₂ で表される基を示す。）で表される架
橋性試薬の塩で共有結合架橋して得られる水膨潤性高分
子ゲルに関する。[0018] That is, the gist of the present invention is a polysaccharide having a carboxyl group in (1) minute child, the general formula ^{(II) R 1 HN- (CH} 2) n -NHR 2 (II) ( wherein , N represents an integer of 2 to 18, and R ¹ and R ²
Represents a hydrogen atom or —COCH (NH ₂ ) — (C
H ₂₎ a group represented by ₄ -NH _2. ) Was covalently crosslinked represented by crosslinking reagent salt at about the water-swellable polymer gel obtained.

【００１９】以下に本発明について詳細に説明する。本
発明の医療用高分子ゲルは、一般式（Ｉ）、Ａ−Ｂ−Ｃ
−Ｄにより表される結合形態により、薬剤が、酵素反応
で主鎖が切断され得る分解性基およびスペーサーを介し
て、水膨潤性高分子ゲルに固定化されたものである。式
中、Ａは水膨潤性高分子ゲルを表し、Ｂはスペーサーを
表し、Ｃは酵素反応で主鎖が切断され得る分解性基を表
し、Ｄは薬剤を表す。Ａの水膨潤性高分子ゲルは、血
液、血漿、細胞間液等の体液、または生理食塩水等の体
液類似液に膨潤するものであって、生体親和性を有する
ものであれば特に限定されない。該高分子ゲルを構成す
る高分子素材としては、例えば、アルギン酸、キチン、
キトサン、ヒアルロン酸、セルロースおよびこれらの誘
導体等の多糖類、ゼラチン、コラーゲン、カゼイン、ア
ルブミン等の蛋白質類、ポリアスパラギン酸、ポリグル
タミン酸、ポリリジン等のポリペプチド類、ポリビニル
アルコール（ＰＶＡ）、エチレンビニルアルコール共重
合体類、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）、ポリアクリ
ル酸およびこれらの誘導体等の合成高分子類を挙げるこ
とができる。これらの高分子素材の化合物単独または２
種類以上の混合物を、共有結合、疎水結合、水素結合、
静電結合等で架橋することにより、水膨潤性高分子ゲル
が得られる。例えば、アルギン酸、ポリアクリル酸、ポ
リアスパラギン酸、ポリグルタミン酸、およびこれらの
誘導体等のカルボキシル基を有する高分子素材では、Ｃ
ａ⁺⁺イオン等の多価金属イオンを添加することにより、
静電結合架橋ゲルが得られる。同様に、これらのカルボ
キシル基を有する高分子素材と、キトサン、ポリリジン
等のアミノ基を有する高分子素材を混合することによっ
ても、静電結合架橋ゲルが得られる。ゼラチン、ＰＶＡ
およびこれらの誘導体等の高分子素材では、これらの水
溶液またはこれらの有機溶媒の溶液を冷却することによ
り、水素結合架橋ゲルが得られる。エチレンビニルアル
コール共重合体、ポリアクリル酸およびこれらの誘導体
等の、水混和性有機溶媒に溶解する高分子素材の場合
は、水混和性有機溶媒に溶解して得られた溶液を水中に
投入することにより水素結合・疎水結合架橋ゲルが得ら
れる。アルギン酸、ヒアルロン酸、キトサン、蛋白質、
ポリリジン、ポリアスパラギン酸、ポリグルタミン酸、
ポリアクリル酸、ＰＶＡおよびこれらの誘導体等の反応
性基を有する高分子素材では、リジンのオリゴマー、エ
チレンジアミン、ジアミノアルカン誘導体、グリセリ
ン、コハク酸、シュウ酸等の多官能性化合物と共有結合
を形成させることにより、共有結合架橋ゲルが得られ
る。さらに、これらの高分子素材では、アルキル化オリ
ゴペプチド、脂肪酸、脂肪族アミン、脂肪族アルコー
ル、およびこれらの誘導体等の疎水性化合物を結合する
ことにより、疎水結合架橋ゲルが得られる。ポリアクリ
ル酸、ＰＶＡ、ＰＶＰ、およびこれらの誘導体等の合成
高分子素材では、これらの重合の際に、ビスアクリルア
ミド、エチレングリコールビスメタクリレート等の多官
能性モノマーを共重合させることにより、共有結合架橋
ゲルが得られる。なかでも、アルギン酸などの多糖類を
高分子素材とした疎水結合架橋ゲル、静電結合架橋ゲ
ル、共有結合架橋ゲル、ＰＶＡを高分子素材とした水素
結合架橋ゲル、疎水結合架橋ゲルが好ましい。特に、分
子内にカルボキシル基を有する多糖類を、下記の一般式
（II） Ｒ¹ ＨＮ−（ＣＨ₂)_n −ＮＨＲ² （II） （式中、ｎは２から１８の整数を表し、Ｒ¹ およびＲ²
はそれぞれ水素原子または−ＣＯＣＨ（ＮＨ₂ ）−（Ｃ
Ｈ₂ ）₄ −ＮＨ₂ で表される基を示す。）で表される架
橋性試薬またはその塩で共有結合架橋して得られる水膨
潤性高分子ゲル（以下、これを水膨潤性高分子ゲル（I
I）と略記することがある。）が好ましい。この水膨潤
性高分子ゲル（II）は、後記するように共有結合架橋ゲ
ルが主体であり、機械的強度が強く、安定性、耐熱水性
に優れているため滅菌処理等が容易であるばかりでな
く、含水性にも優れているため生体親和性が特によく、
また透明性にも優れているため創傷部位の観察が可能で
ある等のかずかずのメリットを有するからである。Hereinafter, the present invention will be described in detail. The polymer gel for medical use of the present invention has the general formula (I), ABC
The drug is immobilized on the water-swellable polymer gel via a decomposable group and a spacer, whose main chain can be cleaved by an enzymatic reaction, by the bond form represented by -D. In the formula, A represents a water-swellable polymer gel, B represents a spacer, C represents a degradable group whose main chain can be cleaved by an enzymatic reaction, and D represents a drug. The water-swellable polymer gel of A is not particularly limited as long as it swells in a body fluid such as blood, plasma, intercellular fluid, or a body fluid-like fluid such as physiological saline, and has biocompatibility. . As a polymer material constituting the polymer gel, for example, alginic acid, chitin,
Polysaccharides such as chitosan, hyaluronic acid, cellulose and derivatives thereof, proteins such as gelatin, collagen, casein and albumin, polypeptides such as polyaspartic acid, polyglutamic acid and polylysine, polyvinyl alcohol (PVA), ethylene vinyl alcohol Synthetic polymers such as copolymers, polyvinylpyrrolidone (PVP), polyacrylic acid and derivatives thereof can be mentioned. Compounds of these polymer materials alone or 2
Mixtures of more than one type can be covalently bonded, hydrophobically bonded, hydrogen bonded,
By cross-linking by electrostatic bonding or the like, a water-swellable polymer gel is obtained. For example, in a polymer material having a carboxyl group such as alginic acid, polyacrylic acid, polyaspartic acid, polyglutamic acid, and derivatives thereof, C
By adding a polyvalent metal ion such as a ⁺⁺ ion,
An electrostatically bonded crosslinked gel is obtained. Similarly, by mixing these polymer materials having a carboxyl group and a polymer material having an amino group such as chitosan or polylysine, an electrostatically-bonded crosslinked gel can be obtained. Gelatin, PVA
In the case of polymer materials such as these and derivatives thereof, a hydrogen bond crosslinked gel can be obtained by cooling these aqueous solutions or solutions of these organic solvents. In the case of a polymer material that dissolves in a water-miscible organic solvent, such as an ethylene vinyl alcohol copolymer, polyacrylic acid, and derivatives thereof, a solution obtained by dissolving in a water-miscible organic solvent is put into water. Thereby, a hydrogen bond / hydrophobic bond crosslinked gel is obtained. Alginic acid, hyaluronic acid, chitosan, protein,
Polylysine, polyaspartic acid, polyglutamic acid,
Polymer materials having reactive groups such as polyacrylic acid, PVA and derivatives thereof form covalent bonds with polyfunctional compounds such as lysine oligomers, ethylenediamine, diaminoalkane derivatives, glycerin, succinic acid and oxalic acid. As a result, a covalently crosslinked gel is obtained. Further, in these polymer materials, a hydrophobic bond crosslinked gel can be obtained by binding hydrophobic compounds such as alkylated oligopeptides, fatty acids, aliphatic amines, aliphatic alcohols, and derivatives thereof. Synthetic polymer materials such as polyacrylic acid, PVA, PVP, and derivatives thereof are covalently cross-linked by copolymerizing polyfunctional monomers such as bisacrylamide and ethylene glycol bismethacrylate during their polymerization. A gel is obtained. Among them, a hydrophobic cross-linking gel using a polysaccharide such as alginic acid as a polymer material, an electrostatic bonding cross-linking gel, a covalent cross-linking gel, a hydrogen bonding cross-linking gel using PVA as a polymer material, and a hydrophobic cross-linking gel are preferable. In particular, a polysaccharide having a carboxyl group in the molecule is represented by the following general formula (II): R ¹ HN— (CH ₂ ) _n —NHR ² (II) (where n represents an integer of 2 to 18, ¹ and R ²
Represents a hydrogen atom or —COCH (NH ₂ ) — (C
H ₂₎ a group represented by ₄ -NH _2. ), A water-swellable polymer gel obtained by covalently crosslinking with a crosslinking reagent or a salt thereof (hereinafter referred to as a water-swellable polymer gel (I
Sometimes abbreviated as I). Is preferred. This water-swellable polymer gel (II) is mainly composed of a covalent cross-linked gel as described later, and has high mechanical strength, excellent stability, and excellent hot water resistance, so that it can be easily sterilized. No, especially good biocompatibility because it is also excellent in water content,
In addition, it is also excellent in transparency, so that it has a merit of being able to observe a wound site.

【００２０】高分子ゲルの構成素材としてＰＶＡを用い
る場合には、平均重合度１５００以上、ケン化度６０〜
１００％のものが好ましい。得られるゲルの強度の面か
ら、平均重合度が４０００以上のものが好ましく、平均
重合度が１００００以上のものがさらに好ましい。得ら
れるゲルの強度の面から、ダイアッド表示によるシンジ
オタクティシティーが５０％以上のものが好ましく、５
３％以上のものがより好ましい。When PVA is used as a constituent material of the polymer gel, the average degree of polymerization is 1500 or more, and the degree of saponification is 60 to
100% is preferred. From the viewpoint of the strength of the obtained gel, those having an average degree of polymerization of 4000 or more are preferable, and those having an average degree of polymerization of 10,000 or more are more preferable. From the viewpoint of the strength of the obtained gel, those having a syndiotacticity of 50% or more as indicated by diad are preferable, and
More than 3% is more preferable.

【００２１】細胞や組織の表面は、親水性の糖鎖の存在
により多量の水を含んだゲル様の構造を持つ。一方水膨
潤性高分子ゲルも多量の水を含み、生体と類似した構造
を持つので優れた生体親和性を示す。しかし、水膨潤率
が高すぎるとゲルの物理的な強度が低下する。従って、
Ａの水膨潤性高分子ゲルの膨潤率は、ゲルを構成する高
分子素材の乾燥重量１に対して、平衡膨潤後の吸水重量
として１〜１０００の範囲が好ましく、１０〜２００の
範囲がより好ましい。The surface of cells or tissues has a gel-like structure containing a large amount of water due to the presence of hydrophilic sugar chains. On the other hand, the water-swellable polymer gel also contains a large amount of water and has a structure similar to a living body, so that it exhibits excellent biocompatibility. However, if the water swelling ratio is too high, the physical strength of the gel decreases. Therefore,
The swelling ratio of the water-swellable polymer gel of A is preferably in the range of 1 to 1000, more preferably 10 to 200, as the weight of water absorbed after equilibrium swelling with respect to the dry weight of the polymer material constituting the gel of 1. preferable.

【００２２】Ｃの酵素反応で主鎖が切断され得る分解性
基としては、病巣部位に存在する酵素、例えば、エラス
ターゼ、カテプシンＧ、カテプシンＥ、カテプシンＢ、
カテプシンＨ、カテプシンＬ、トリプシン、ペプシン、
キモトリプシン、γ- グルタミルトランスフェラーゼ
（γ−ＧＴＰ）等のペプチド加水分解酵素、ホスホリラ
ーゼ、ノイラミニダーゼ、デキストラナーゼ、アミラー
ゼ、リゾチーム、オリゴサッカラーゼ等の糖鎖加水分解
酵素、アルカリホスファターゼ、エンドリボヌクレアー
ゼ、エンドデオキシリボヌクレアーゼ等のオリゴヌクレ
オチド加水分解酵素等、またはこれら以外の病巣部位に
存在する酵素によって特異的に主鎖が切断されるもので
あれば、特に限定されるものではない。該分解性基とし
ては、例えば、-Arg- 、-Ala- 、-Ala(D)-、-Val- 、-L
eu- 、-Lys- 、-Pro- 、-Phe- 、-Tyr- 、-Glu- 等のア
ミノ酸残基、または-Ile-Glu-Gly-Arg- 、-Ala-Gly-Pro
-Arg- 、-Arg-Val-(Arg)₂-、-Val-Pro-Arg- 、-Gln-Ala
-Arg- 、-Gln-Gly-Arg- 、-Asp-Pro-Arg- 、-Gln-(Arg)
₂-、-Phe-Arg- 、 -(Ala)₃- 、-(Ala)₂-、-Ala-Ala(D)
-、-(Ala)₂-Pro-Val-、-(Val)₂-、-(Ala)₂-Leu-、-Gly-
Leu- 、-Phe-Leu- 、-Val-Leu-Lys- 、-Gly-Pro-Leu-Gl
y-Pro- 、-(Ala)₂-Phe-、-(Ala)₂-Tyr-、-(Ala)₂-His
-、-(Ala)₂-Pro-Phe-、-Ala-Gly-Phe- 、-Asp-Glu- 、-
(Glu)₂-、-Ala-Glu- 、-Ile-Glu- 、-Gly-Phe-Leu-Gly-
、-(Arg)₂-等の２〜６量体のオリゴペプチド類、Ｄ−
グルコース、Ｎ−アセチルガラクトサミン、Ｎ−アセチ
ルノイラミン酸、Ｎ−アセチルグルコサミン、Ｎ−アセ
チルマンノサミンまたはこれらのオリゴ糖類、オリゴデ
オキシアデニン、オリゴデオキシグアニン、オリゴデオ
キシシトシン、オリゴデオキシチミジンのオリゴデオキ
シリボ核酸類、オリゴアデニン、オリゴグアニン、オリ
ゴシトシン、オリゴウリジン等のオリゴリボ核酸類等を
挙げることができる。なかでも、酵素による切断のされ
易さや、体内に入った場合の安全性等の観点から、アミ
ノ酸または２〜６量体のオリゴペプチドを用いるのが好
ましく、-Val-Pro-Arg- 、-(Ala)₂-Pro-Val-、-Ala-Gly
-Phe- 、-(Ala)₃-、-Asp-Glu- 、-(Ala)₂-Phe-、-(Ala)
₂-Pro-Phe-、-Gly-Phe-Leu-Gly- 、-(Arg)₂-、-Phe-Arg
- のオリゴペプチドを用いるのがより好ましい。The degradable group whose main chain can be cleaved by the enzymatic reaction of C includes enzymes existing at the lesion site, for example, elastase, cathepsin G, cathepsin E, cathepsin B,
Cathepsin H, cathepsin L, trypsin, pepsin,
Peptide hydrolases such as chymotrypsin and γ-glutamyltransferase (γ-GTP); sugar chain hydrolases such as phosphorylase, neuraminidase, dextranase, amylase, lysozyme, oligosaccharase, alkaline phosphatase, endoribonuclease, and endodeoxyribonuclease There is no particular limitation as long as the main chain is specifically cleaved by an oligonucleotide hydrolase or the like, or an enzyme present at a lesion site other than these. Examples of the decomposable group include -Arg-, -Ala-, -Ala (D)-, -Val-, -L
amino acid residues such as eu-, -Lys-, -Pro-, -Phe-, -Tyr-, -Glu-, or -Ile-Glu-Gly-Arg-, -Ala-Gly-Pro
-Arg-, -Arg-Val- (Arg) _2- , -Val-Pro-Arg-, -Gln-Ala
-Arg-, -Gln-Gly-Arg-, -Asp-Pro-Arg-, -Gln- (Arg)
_2- , -Phe-Arg-,-(Ala) ₃ -,-(Ala) _2- , -Ala-Ala (D)
-,-(Ala) ₂ -Pro-Val-,-(Val) ₂ -,-(Ala) ₂ -Leu-, -Gly-
Leu-, -Phe-Leu-, -Val-Leu-Lys-, -Gly-Pro-Leu-Gl
y-Pro-,-(Ala) ₂ -Phe-,-(Ala) ₂ -Tyr-,-(Ala) ₂ -His
-,-(Ala) ₂ -Pro-Phe-, -Ala-Gly-Phe-, -Asp-Glu-,-
(Glu) _2- , -Ala-Glu-, -Ile-Glu-, -Gly-Phe-Leu-Gly-
,-(Arg) _2- and the like, _2- to 6-mer oligopeptides, D-
Oligodeoxyribonucleic acid of glucose, N-acetylgalactosamine, N-acetylneuraminic acid, N-acetylglucosamine, N-acetylmannosamine or oligosaccharides thereof, oligodeoxyadenine, oligodeoxyguanine, oligodeoxycytosine, oligodeoxythymidine And oligoribonucleic acids such as oligoadenine, oligoguanine, oligocytosine and oligouridine. Among them, it is preferable to use an amino acid or a dimeric to hexameric oligopeptide from the viewpoint of ease of cleavage by an enzyme, safety in the case of entering the body, etc., and -Val-Pro-Arg-,-( Ala) ₂ -Pro-Val-, -Ala-Gly
-Phe-,-(Ala) _3- , -Asp-Glu-,-(Ala) ₂ -Phe-,-(Ala)
₂ -Pro-Phe-, -Gly-Phe-Leu-Gly-,-(Arg) _2- , -Phe-Arg
More preferably, an oligopeptide of-is used.

【００２３】Ｂのスペーサーは、酵素と前記の分解性基
との反応性を制御するものであり、本質的にスペーサー
自体は酵素によって分解されない。病巣部位に存在する
酵素が分解性基と適切に反応し得るように作用するもの
であれば、特にスペーサーの構造は限定されないが、ス
ペーサーの長さは分解性基と酵素との反応性に直接的な
影響を与えるので重要である。スペーサーを使用しない
場合には、分解性基の分解反応性が著しく低下し、治療
に有効な量の薬剤が本発明の医療用高分子ゲルから放出
され難くなる。即ち、炭素原子、窒素原子および酸素原
子のうち主鎖に含有されている原子の数の合計が少ない
分子鎖をスペーサーとして用いる場合には、水膨潤性高
分子ゲルの立体障害のため、酵素と分解性基との反応性
が低下し、薬剤の放出量が減少する。該原子の数の合計
が３個以下では、治療に有効な量の薬剤の放出は期待で
きない。該原子の数の合計が増大すると、酵素と分解性
基との反応性が増大するが、該原子の数の合計が２０個
を越える場合には、スペーサーがターン構造やα- ヘリ
ックス等の高次構造をとる場合もあり、このような高次
構造をとった場合には酵素と分解性基との反応性が低下
することがある。さらに、該原子の数の合計が２０個を
越えると、スペーサー内あるいはスペーサー間の疎水性
相互作用などによりスペーサーが凝集し、酵素と分解性
基との反応性が低下することがある。また、酵素と分解
性基との反応性が増大し過ぎて、不必要な量の薬剤が放
出されることもある。したがって、スペーサーが、炭素
原子、窒素原子および酸素原子のうち主鎖に含有されて
いる原子の数の合計が４個以上の分子鎖であるのが好ま
しく、４〜２０個の分子鎖であるのがより好ましく、６
〜１６個の分子鎖であるのがさらに好ましい。スペーサ
ーとして水酸基等の極性基を有するものは、酵素と分解
性基との反応性を高め、薬剤放出量を増大させる。スペ
ーサーが連続したメチレン鎖やエチレンオキシド鎖の場
合には、酵素と分解性基との反応性が増大する。一方、
アミド基や環状基が多く含まれると、スペーサーが特定
の構造に固定されるため、酵素と分解性基との反応性が
減少する傾向がある。The spacer B controls the reactivity between the enzyme and the above-mentioned decomposable group, and the spacer itself is not essentially decomposed by the enzyme. The structure of the spacer is not particularly limited as long as the enzyme present at the lesion site can react appropriately with the degradable group, but the length of the spacer is directly related to the reactivity between the degradable group and the enzyme. This is important because it has a significant effect. When the spacer is not used, the decomposition reactivity of the decomposable group is significantly reduced, and it becomes difficult to release a therapeutically effective amount of the drug from the medical polymer gel of the present invention. That is, when a molecular chain having a small total number of atoms contained in the main chain among carbon atoms, nitrogen atoms, and oxygen atoms is used as a spacer, steric hindrance of a water-swellable polymer gel causes Reactivity with degradable groups is reduced and drug release is reduced. If the total number of the atoms is three or less, release of a therapeutically effective amount of the drug cannot be expected. When the total number of the atoms increases, the reactivity between the enzyme and the decomposable group increases. However, when the total number of the atoms exceeds 20, when the spacer has a high structure such as a turn structure or α-helix. In some cases, it takes a secondary structure, and when it takes such a higher-order structure, the reactivity between the enzyme and the decomposable group may decrease. Further, when the total number of the atoms exceeds 20, the spacers may aggregate due to hydrophobic interaction in the spacer or between the spacers, and the reactivity between the enzyme and the decomposable group may decrease. Also, the reactivity between the enzyme and the degradable group may be too high, releasing an unnecessary amount of drug. Therefore, the spacer is preferably a molecular chain in which the total number of atoms contained in the main chain among carbon atoms, nitrogen atoms and oxygen atoms is 4 or more, and 4 to 20 molecular chains. Is more preferable, and 6
More preferably, it has up to 16 molecular chains. A spacer having a polar group such as a hydroxyl group as a spacer enhances the reactivity between an enzyme and a decomposable group, and increases the amount of drug release. When the spacer is a continuous methylene chain or ethylene oxide chain, the reactivity between the enzyme and the decomposable group increases. on the other hand,
When the amide group or the cyclic group is contained in a large amount, the spacer is fixed to a specific structure, and thus the reactivity between the enzyme and the decomposable group tends to decrease.

【００２４】スペーサーとしては、例えば、置換基を有
していてもよいメチレン鎖、エーテル結合、ペプチド結
合、イミノ結合、Ｃ＝Ｃ二重結合等を有していてもよい
線状分子鎖を挙げることができる。具体例としては、-C
O-(CH₂)₂-CO-、-CH₂-CO-NH-(CH₂)₂-NH-CO-(CH₂)₂-CO-、
-CH₂-CH(OH)-CH₂-NH-CO-(CH₂)₂CO- 、-CH₂-CH(OH)-CH₂-
NH-(CH₂)₂-NH-CO-(CH₂)₂CO- 、-NH-(CH₂)₂-NH-CO-CH₂-N
H-CO-(CH₂)₂-CO- 、-CO-(CH₂)₂-NH-CO-CH₂-NH-CO-(CH₂)
₂-CO- 、-NH-(CH₂)₂-NH-CO-CH₂-NH-CO-(CH₂)₃-CO- 、-N
H-(CH₂)₂-NH-CO-(CH₂)₂-NH-CO-(CH₂)₂-CO-、-NH-(CH₂)₂
-NH-CO-CH(CH₃)-NH-CO-(CH₂)₂-CO- 、-NH-(CH)₂-NH-CO-
CH(CH₂OH)-NH-CO-(CH₂)-CO- 等を挙げることができる。
なかでも、-NH-(CH₂)₂-NH-CO-CH₂-NH-CO-(CH₂)₂-CO- 、
-CH₂-CH(OH)-CH₂-NH-CO-(CH₂)₂CO- が好ましい。Examples of the spacer include a methylene chain which may have a substituent, a linear molecular chain which may have an ether bond, a peptide bond, an imino bond, and a CＣC double bond. be able to. As a specific example, -C
O- (CH ₂ ) ₂ -CO-, -CH ₂ -CO-NH- (CH ₂ ) ₂ -NH-CO- (CH ₂ ) ₂ -CO-,
-CH ₂ -CH (OH) -CH ₂ -NH-CO- (CH ₂ ) ₂ CO-, -CH ₂ -CH (OH) -CH _2-
NH- (CH ₂ ) ₂ -NH-CO- (CH ₂ ) ₂ CO-, -NH- (CH ₂ ) ₂ -NH-CO-CH ₂ -N
H-CO- (CH ₂ ) ₂ -CO-, -CO- (CH ₂ ) ₂ -NH-CO-CH ₂ -NH-CO- (CH ₂ )
₂ -CO-, -NH- (CH ₂ ) ₂ -NH-CO-CH ₂ -NH-CO- (CH ₂ ) ₃ -CO-, -N
H- (CH ₂ ) ₂ -NH-CO- (CH ₂ ) ₂ -NH-CO- (CH ₂ ) ₂ -CO-, -NH- (CH ₂ ) ₂
-NH-CO-CH (CH ₃ ) -NH-CO- (CH ₂ ) ₂ -CO-, -NH- (CH) ₂ -NH-CO-
CH (CH ₂ OH) —NH—CO— (CH ₂ ) —CO— and the like.
Among _{them, -NH- (CH 2) 2 -NH} -CO-CH 2 -NH-CO- (CH 2) 2 -CO-,
_{-CH 2 -CH (OH) -CH 2} -NH-CO- (CH 2) 2 CO- is preferred.

【００２５】スペーサーおよび酵素反応で主鎖が切断さ
れ得る分解性基は、通常の有機合成によって調製され
る。オリゴペプチドは、ペプチドの合成において通常用
いられる方法、例えば、固相合成法または液相合成法に
よって調製される〔例えば、日本生化学会編「続生化学
実験講座２ タンパク質の化学（下）」（昭和６２年５
月２０日、株式会社東京化学同人発行）第６４１〜６９
４頁参照〕。オリゴ糖は糖鎖の合成ないし抽出において
通常用いられる方法によって調製される〔例えば、日本
生化学会編「新生化学実験講座３ 糖質Ｉ」（１９９０
年、株式会社東京化学同人発行）第９５〜１４０頁およ
び第４２１〜４３８頁参照〕。オリゴ核酸は核酸の合成
ないし抽出において通常用いられる方法によって調製さ
れる〔例えば、日本生化学会編「新生化学実験講座２
核酸III 」（１９９２年、株式会社東京化学同人発行）
第２５４〜２６９頁；日本生化学会編「新生化学実験講
座２核酸Ｉ」（１９９１年、株式会社東京化学同人発
行）第１４７〜１６８頁参照〕。The decomposable group whose main chain can be cleaved by a spacer and an enzymatic reaction is prepared by ordinary organic synthesis. The oligopeptide is prepared by a method commonly used in peptide synthesis, for example, a solid phase synthesis method or a liquid phase synthesis method [for example, “Seizoku Chemistry Experimental Course 2 Protein Chemistry (Lower)” edited by The Biochemical Society of Japan (below) ( 1987 5
20th, issued by Tokyo Chemical Co., Ltd.) No. 641-69
See page 4. Oligosaccharides are prepared by a method usually used in the synthesis or extraction of sugar chains [for example, “The New Chemistry Experiment Course 3 Carbohydrate I” edited by The Biochemical Society of Japan (1990)
Year, Tokyo Chemical Co., Ltd.) (pp. 95-140 and 421-438). The oligonucleic acid is prepared by a method usually used in the synthesis or extraction of a nucleic acid [for example, “The New Chemistry Experiment Course 2” edited by The Biochemical Society of Japan.
Nucleic acid III "(1992, issued by Tokyo Chemical Co., Ltd.)
Pages 254 to 269; edited by The Biochemical Society of Japan, "New Course Chemistry Experiment Course 2 Nucleic Acid I" (1991, Tokyo Kagaku Dojin Co., Ltd., pp. 147-168).

【００２６】本発明に用いられるＤの薬剤は、用途によ
って適宜選択できる。創傷被覆材、生体組織接着剤、癒
着防止材として用いる場合には、例えば、消毒剤、抗生
剤等の抗菌剤、アクトシン、プロスタグランジンＥ1
（ＰＧＥ1 ）等の血行改善薬、ステロイド、インドメタ
シン等の消炎鎮痛剤、形質転換成長因子（transforming
growth factor β：ＴＧＦβ）、血小板由来成長因子
（platelet-derived growth factor：ＰＤＧＦ）、繊維
芽細胞成長因子（fibroblast growth factor：ＦＧＦ）
等の成長因子、ウリナスタチン、tissue inhibitor of
metalloproteinase （ＴＩＭＰ）等の酵素阻害剤等が用
いられる。骨補強材として用いる場合には、例えば、骨
誘導因子（bone morphogenetic protein：ＢＭＰ）、Ｔ
ＧＦβ、副甲状腺ホルモン（parathyroid hormone ：Ｐ
ＴＨ）等の骨細胞成長因子、インターロイキン１（ＩＬ
−１）阻害剤、ビスホスホネート、カルシトニン等の骨
吸収抑制因子等が用いられる。薬剤放出基材として用い
る場合には、例えば、ネオカルチノスタチン、アドリア
マイシン等の抗癌剤、ステロイド、非ステロイド性抗炎
症剤等の抗炎症剤等が挙げられる。The drug D used in the present invention can be appropriately selected depending on the use. When used as a wound covering material, a living tissue adhesive, or an adhesion preventing material, for example, antibacterial agents such as disinfectants and antibiotics, actosin, prostaglandin E1
(PGE1) and other blood circulation improving agents, steroids, anti-inflammatory analgesics such as indomethacin, and transforming growth factors (transforming).
growth factor β: TGFβ), platelet-derived growth factor (PDGF), fibroblast growth factor (FGF)
Growth factors such as ulinastatin, tissue inhibitor of
An enzyme inhibitor such as metalloproteinase (TIMP) is used. When used as a bone reinforcing material, for example, bone morphogenetic protein (BMP), TMP
GFβ, parathyroid hormone (P
Osteocyte growth factors such as TH), interleukin 1 (IL
-1) Bone resorption inhibiting factors such as inhibitors, bisphosphonates, calcitonin and the like are used. When used as a drug release substrate, examples thereof include anti-cancer agents such as neocarzinostatin and adriamycin, and anti-inflammatory agents such as steroids and non-steroidal anti-inflammatory agents.

【００２７】本発明の医療用高分子ゲルからは、病巣部
位において産生される酵素の量に応じて薬剤が放出され
るため、薬剤の固定化量を厳密に制御する必要はない
が、病巣部位において治療効果が発現されるのに最低限
必要な量以上が固定化されている必要がある。薬剤固定
化量は水膨潤性高分子ゲルへのスペーサー導入率で制御
されうる。スペーサー導入率が低すぎると有効な量の薬
剤を固定化できないので好ましくない。一方、スペーサ
ー導入率が高すぎると水膨潤性高分子ゲルの性質が変化
するため好ましくない。したがって、水膨潤性高分子ゲ
ルへのスペーサー導入率は、水膨潤性高分子ゲル１ｍｌ
あたり０. ０５μｍｏｌ以上であることが好ましく、
０. ２μｍｏｌ以上５０μｍｏｌ以下であることがさら
に好ましい。水膨潤性高分子ゲルへのスペーサー導入率
は、例えば中間生成物のアミノ基の量をニンヒドリン法
（Sarin, V.K.et al., Anal. Biochem., 117, 147-157
(1981)参照）で定量することによって測定しうる。Since the drug is released from the medical polymer gel of the present invention in accordance with the amount of the enzyme produced at the lesion site, it is not necessary to strictly control the amount of the drug immobilized. Must be immobilized in an amount that is at least the minimum required for a therapeutic effect to be exhibited. The amount of drug immobilized can be controlled by the rate of introducing the spacer into the water-swellable polymer gel. If the spacer introduction ratio is too low, an effective amount of the drug cannot be immobilized, which is not preferable. On the other hand, if the spacer introduction ratio is too high, the properties of the water-swellable polymer gel change, which is not preferable. Therefore, the rate of introduction of the spacer into the water-swellable polymer gel was 1 ml of the water-swellable polymer gel.
It is preferably 0.05 μmol or more per
More preferably, it is 0.2 μmol or more and 50 μmol or less. The spacer introduction rate into the water-swellable polymer gel can be determined, for example, by determining the amount of amino groups in the intermediate product by the ninhydrin method (Sarin, VKet al., Anal. Biochem., 117, 147-157).
(1981)).

【００２８】薬剤を、酵素反応で主鎖が切断され得る分
解性基およびスペーサーを介して、水膨潤性高分子ゲル
に固定化させる方法としては、共有結合による方法が好
ましく、固定化酵素、アフィニティクロマトグラフィー
等で通常用いられている公知の活性化方法および反応方
法を用いることができる。例えば、１−エチル−３−
（３−ジメチルアミノプロピル）−カルボジイミド塩酸
塩、ジシクロヘキシルカルボジイミド等の縮合剤を用い
た脱水縮合反応、アルカリ触媒を用いた脱炭酸反応、エ
ポキシ基のアンモノリシス反応、酸無水物のアンモノリ
シス反応、エステル交換反応等を挙げることができる。
酵素で主鎖が切断され得る分解性基と薬剤とが、エステ
ル結合、エーテル結合またはペプチド結合により結合さ
れている場合には、酵素によりこの結合部位が特異的に
切断されて、本来の化学構造を有する薬剤が放出される
ので好ましい。The method of immobilizing a drug on a water-swellable polymer gel via a decomposable group and a spacer capable of cleaving the main chain by an enzymatic reaction is preferably a covalent bond method. Known activation methods and reaction methods generally used in chromatography and the like can be used. For example, 1-ethyl-3-
Dehydration condensation reaction using a condensing agent such as (3-dimethylaminopropyl) -carbodiimide hydrochloride, dicyclohexylcarbodiimide, decarboxylation reaction using an alkali catalyst, ammonolysis reaction of epoxy group, ammonolysis reaction of acid anhydride, transesterification reaction And the like.
When a degradable group whose main chain can be cleaved by an enzyme and a drug are bonded by an ester bond, an ether bond or a peptide bond, the bond is specifically cleaved by the enzyme to form the original chemical structure. Is preferred since the drug having

【００２９】本発明の医療用高分子ゲルの適用形態は、
シート、フィルム、繊維、織布、不織布、液状、粉末
状、スポンジ状等の使用目的に適した形態をとりうる。
本発明の医療用高分子ゲルを、例えば平板状、微粒子状
などの形態に成形することにより創傷被覆材が得られ
る。また、上記のように成形した後、ポリウレタン樹脂
やシリコン樹脂製のフィルムと貼り合わせ、粘着剤を添
加または塗布することによっても創傷被覆材が得られ
る。本発明の医療用高分子ゲルから得られる創傷被覆材
は、含水率が高く柔軟であるので、創部に対する物理的
刺激が少なく患者に与える苦痛が少ない。さらに保水性
が良好なので、被覆材の交換回数が少なくなり、貼り替
えによる患者の苦痛、看護の手間、創のダメージが軽減
できること、滲出液中の治癒促進因子を良好に保持しそ
の作用を妨げないこと等の利点がある。また、添加物と
して、Ｃａ⁺⁺イオン等の金属イオン、グリセリン、ポリ
エチレングリコール（ＰＥＧ）等のゲルの柔軟剤・安定
化剤等通常の薬理学的に許容されるものを目的に応じて
使用できる。本発明の医療用高分子ゲルは、あらかじめ
５％ブドウ糖液や生理食塩水等の生理学的に許容し得る
溶液で適宜膨潤させて用いてもよい。なお、該溶液は薬
理学的に許容される種々の添加剤を含んでいてもよい。
また、体液等の滲出液の量が多い場合には、乾燥状態で
適用してもよい。The application form of the medical polymer gel of the present invention is as follows:
Sheets, films, fibers, woven fabrics, non-woven fabrics, liquids, powders, sponges, and other forms suitable for the intended use can be taken.
The wound dressing material can be obtained by molding the polymer gel for medical use of the present invention into, for example, a plate shape or a fine particle shape. Alternatively, the wound dressing material can be obtained by forming as described above, bonding the film to a polyurethane resin or silicone resin film, and adding or applying an adhesive. Since the wound dressing obtained from the medical polymer gel of the present invention has a high moisture content and is flexible, it causes less physical irritation to the wound and less pain to the patient. Furthermore, since the water retention is good, the number of times of changing the coating material is reduced, the pain of the patient due to replacement, the labor of nursing, the wound damage can be reduced, the healing promoting factor in the exudate is well retained and its action is prevented. There are advantages such as not having. In addition, as the additives, usual pharmacologically acceptable substances such as metal ions such as Ca ⁺⁺ ions, gel softeners and stabilizers such as glycerin and polyethylene glycol (PEG) can be used according to the purpose. . The medical polymer gel of the present invention may be used by appropriately swelling it in advance with a physiologically acceptable solution such as 5% glucose solution or physiological saline. The solution may contain various pharmacologically acceptable additives.
Further, when the amount of exudate such as body fluid is large, it may be applied in a dry state.

【００３０】投与方法としては、例えば、創面に被覆材
として、または接着剤、癒着防止剤として外用できる。
骨補強剤として用いる場合は骨腔内投与、骨折部位断面
に対する投与、薬剤徐放基材としては、皮下投与、腹腔
投与、関節内投与、経皮投与、経口投与、脈管内投与等
が挙げられる。As an administration method, for example, it can be externally applied as a dressing material on the wound surface, or as an adhesive or an anti-adhesion agent.
When used as a bone augmentation agent, intraosseous administration, administration to a fracture site cross section, and a sustained-release drug substrate include subcutaneous administration, intraperitoneal administration, intraarticular administration, transdermal administration, oral administration, intravascular administration, etc. .

【００３１】本発明の特徴は、前記の一般式（Ｉ）によ
り表される結合形態により、薬剤を、酵素反応で主鎖が
切断され得る分解性基およびスペーサーを介して、水膨
潤性高分子ゲルに固定化することにあり、酵素反応で主
鎖が切断され得る分解性基またはスペーサーのいずれか
一方のみでは満足な性能を発揮しない。即ち、酵素反応
で主鎖が切断され得る分解性基のみを用いて薬剤を固定
化した場合には、酵素による分解性基の分解反応速度が
著しく低く、治療に有効な量の薬剤が放出されない。ま
た、スペーサーのみを用いた場合には、酵素が存在する
部位での薬剤の放出は達成されない。A feature of the present invention is that, by the bonding form represented by the general formula (I), a drug can be converted into a water-swellable polymer via a decomposable group and a spacer whose main chain can be cleaved by an enzymatic reaction. The immobilization on the gel means that only one of the decomposable group and the spacer, whose main chain can be cleaved by the enzymatic reaction, does not exhibit satisfactory performance. That is, when a drug is immobilized using only a decomposable group whose main chain can be cleaved by an enzymatic reaction, the decomposition reaction rate of the decomposable group by the enzyme is extremely low, and a therapeutically effective amount of the drug is not released. . Also, when only the spacer is used, the release of the drug at the site where the enzyme is present is not achieved.

【００３２】好中球が産生する酵素（エラスターゼ、カ
テプシンＧ）で切断される分解性基（例えば、-(Ala)
₃-、-(Ala)₂-Pro-Val-、-(Ala)₂-Phe-等のオリゴペプチ
ド）を介して、薬剤（例えば、抗炎症剤、抗菌剤等）を
固定化した本発明の医療用高分子ゲルを用いれば、好中
球が浸潤し、活性化されている炎症部位でのみ、そこに
存在する酵素量に対応した薬剤が放出され、抗炎症作用
または抗菌作用が発現する。炎症部位以外では該薬剤は
放出されないので、該薬剤による副作用が発現する可能
性は著しく低い。また、細菌が産生する酵素（Staphylo
coccal serin proteinase 、Staphylococcal cysteine
proteinase）で切断される分解性基（例えば、-Asp-Glu
- 、-Ala-Gly-Phe- 等）を介して、抗菌剤を結合した本
発明の医療用高分子ゲルを用いれば、細菌感染発生時に
感染部位でのみ抗菌剤が放出され、抗菌作用が発現す
る。酸性条件下で活性化される酵素（カテプシンＥ、ペ
プシン）で切断される分解性基（例えば、-(Ala)₂-Phe
-、-(Ala)₂-Pro-Phe-、-Ala-Gly-Phe- 、-Phe- 、-Tyr-
等）を介して、アクトシン、ＰＧＥ1 等の血行改善剤
を結合した本発明の医療用高分子ゲルを用いれば、血行
不良部位でのみ該薬剤が放出され、血行が改善する。癌
細胞が産生する酵素（アルカリホスファターゼ、γ- グ
ルタミルトランスフェラーゼ（γ−ＧＴＰ）、カテプシ
ンＢ、カテプシンＨ、カテプシンＬ）で切断される分解
性基（例えば、-Gly-Phe-Leu-Gly- 、-(Arg)₂-、-Phe-A
rg- 、リン酸ジエステル結合等）を介して抗癌剤を結合
した本発明の医療用高分子ゲルを用いれば、癌細胞近辺
でのみ抗癌剤が放出され、抗癌作用が発現する。いずれ
の場合にも、それぞれ引き金となる酵素が産生されてい
ない正常部位、および産生されていない時期には、固定
化された薬剤は放出されないため、該薬剤の毒性に基づ
く副作用を最小限に抑制することが可能である。Degradable groups (for example,-(Ala)) which are cleaved by enzymes (elastase, cathepsin G) produced by neutrophils
₃ -,-(Ala) ₂ -Pro-Val-,-(Ala) ₂ -Phe- and other oligopeptides) via a drug (eg, an anti-inflammatory agent, an antibacterial agent, etc.) of the present invention. When a medical polymer gel is used, neutrophils are infiltrated and a drug corresponding to the amount of enzyme present therein is released only at an activated inflammation site, and an anti-inflammatory or antibacterial effect is exhibited. Since the drug is not released outside the site of inflammation, the possibility of side effects of the drug is extremely low. Also, enzymes produced by bacteria (Staphylo
coccal serin proteinase, Staphylococcal cysteine
degradable groups (eg, -Asp-Glu
-, -Ala-Gly-Phe-, etc.), the antibacterial agent is released only at the site of infection when a bacterial infection occurs, and the antibacterial effect is exhibited when the medical polymer gel of the present invention to which the antibacterial agent is bound is used. I do. Degradable groups that are cleaved by enzymes (cathepsin E, pepsin) activated under acidic conditions (eg,-(Ala) ₂ -Phe
-,-(Ala) ₂ -Pro-Phe-, -Ala-Gly-Phe-, -Phe-, -Tyr-
If the medical polymer gel of the present invention to which a blood circulation improving agent such as actosin or PGE1 is bound via the above-mentioned method is used, the drug is released only at the site of poor circulation and blood circulation is improved. Degradable groups (eg, -Gly-Phe-Leu-Gly-,-) that are cleaved by enzymes (alkaline phosphatase, γ-glutamyltransferase (γ-GTP), cathepsin B, cathepsin H, cathepsin L) produced by cancer cells. (Arg) _2- , -Phe-A
When the medical polymer gel of the present invention to which the anticancer agent is bound via rg-, phosphodiester bond or the like is used, the anticancer agent is released only in the vicinity of the cancer cells, and the anticancer effect is exhibited. In each case, the immobilized drug is not released at the normal site where the trigger enzyme is not produced, and at the time when the trigger enzyme is not produced, so that side effects based on the toxicity of the drug are minimized. It is possible to

【００３３】本発明の医療用高分子ゲルは、毒性試験に
おいて低毒性であることが確認されている。また、保存
状態での安定性が高いことも確認されている。本発明の
医療用高分子ゲルは、創傷被覆材、生体組織接着剤、癒
着防止材、骨補強材、薬剤放出基材の構成成分として有
用であり、擦過創、切創、挫創等の一般創傷、採皮創、
削皮創等の人為的な皮膚欠損創、切開創等の手術創、熱
傷、潰瘍、褥瘡等の創傷部位における炎症の治療と治癒
促進、手術後の創面や臓器の接着、手術後の創面と他組
織の癒着防止、骨粗鬆症や骨折における骨の補強、悪性
新生物等の治療等に適用可能である。なお、前記の水膨
潤性高分子ゲル（II）は、共有結合架橋ゲルが主体であ
り、機械的強度が強く、安定性、耐熱水性に優れている
ため滅菌処理等が容易であるばかりでなく、含水性にも
優れているため生体親和性が特によく、また透明性にも
優れているため創傷部位の観察が可能である等のかずか
ずのメリットを有するため創傷被覆材として有用であ
る。また、湿熱蒸気滅菌（１２１℃、２０分間）条件下
でも溶出物が少ないので安全性が高い。また、透明性に
優れているので、創傷被覆材として用いた場合、創部に
貼り付けたままで創の状態、即ち細菌感染の有無、真皮
または上皮細胞の増殖の様子等が観察可能であるため、
擦過創、切創、挫創等の一般創傷、採皮創、削皮創等の
手術創、熱傷、潰瘍、褥瘡等の創傷の治療と治癒促進に
有用である。さらに、生体親和性がよく細胞毒性が少な
いので、生体組織接着剤や癒着防止材として、手術後の
創面の接着や創面と組織の癒着防止に用いた場合、損傷
組織の回復が促進され大変有用である。安定性も高いの
で組織の接着や修復に必要な期間にわたって十分に目的
の機能を発揮することができる。The polymer gel for medical use of the present invention has been confirmed to have low toxicity in toxicity tests. It has also been confirmed that the stability in the storage state is high. The medical polymer gel of the present invention is useful as a component of a wound covering material, a biological tissue adhesive, an adhesion preventive material, a bone reinforcing material, a drug releasing base material, and is used for general wounds such as abrasions, cuts, and wounds. , Skin wounds,
Treatment of artificial skin defects such as dermabra, wounds such as incisions, treatment of inflammation at wound sites such as burns, ulcers, pressure ulcers and promotion of healing, adhesion of wounds and organs after surgery, and wounds after surgery It is applicable to prevention of adhesion of other tissues, reinforcement of bone in osteoporosis and fracture, treatment of malignant neoplasm, and the like. The water-swellable polymer gel (II) is mainly composed of a covalently crosslinked gel, has high mechanical strength, and is excellent in stability and hot water resistance. It is also excellent in water content, so it has a particularly good biocompatibility, and because it is also excellent in transparency, it has the advantage of being able to observe the wound site. Further, even under conditions of wet heat steam sterilization (121 ° C., 20 minutes), the amount of eluted substances is small, so that the safety is high. In addition, because it is excellent in transparency, when used as a wound dressing, it is possible to observe the state of the wound, that is, the presence or absence of bacterial infection, the growth of the dermis or epithelial cells, etc.
It is useful for treating and promoting healing of general wounds such as abrasion wounds, cut wounds and bruises, surgical wounds such as cutaneous wounds and cutaneous wounds, and wounds such as burns, ulcers and pressure sores. In addition, since it has good biocompatibility and low cytotoxicity, it is very useful when used as a biological tissue adhesive or adhesion preventive material for adhesion of wound surfaces after surgery and prevention of adhesion between wound surfaces and tissues. It is. Since the stability is high, the desired function can be sufficiently exhibited for a period required for tissue adhesion and repair.

【００３４】本発明において使用される多糖類は、分子
内にカルボキシル基を有し、かつ架橋反応を阻害する官
能基を有さない水溶性の多糖類であればよいが、アルギ
ン酸、ヒアルロン酸等の分子内にカルボキシル基を有す
る酸性多糖類の水溶性塩が好ましく用いられる。特にア
ルギン酸ナトリウム塩が、得られるゲルの性質が医療用
材料の構成成分として優れているので最も好ましい。こ
れらの多糖類は市販品から入手することができる。分子
内にカルボキシル基を有する多糖類の好ましい分子量
は、多糖類の性質により一概に決めることはできない
が、一般に１０万〜１０００万の範囲内である。多糖類
としてヒアルロン酸ナトリウムを用いる場合、その分子
量の下限は、得られるゲルの強度の観点から、１００万
以上であるのが好ましく、２００万以上であるのがより
好ましい。一方ヒアルロン酸ナトリウムの分子量の上限
は、製造上の操作性の観点から１０００万以下であるの
が好ましい。また、アルギン酸の場合は、その分子量を
決定する方法に確立されたものはなく、一般にアルギン
酸ナトリウムの１重量％水溶液の２０℃における粘度で
規定されている。したがって、本発明における多糖類と
してアルギン酸ナトリウムを用いる場合、その１重量％
水溶液の２０℃における粘度は、１００ｃｐ（センチポ
アズ）以上であるのが好ましく、得られるゲルの強度の
観点から、３００ｃｐ以上であるのがより好ましい。し
かし、粘度が高すぎると溶解に時間を要するなど、製造
上の操作性が悪くなるので、アルギン酸ナトリウムの１
重量％水溶液の粘度は、１２００ｃｐ以下であるのが好
ましい。The polysaccharide used in the present invention may be any water-soluble polysaccharide that has a carboxyl group in the molecule and does not have a functional group that inhibits a cross-linking reaction. Are preferably used water-soluble salts of acidic polysaccharides having a carboxyl group in the molecule. In particular, sodium alginate is most preferred because the properties of the resulting gel are excellent as components of medical materials. These polysaccharides can be obtained from commercial products. The preferred molecular weight of the polysaccharide having a carboxyl group in the molecule cannot be unconditionally determined depending on the properties of the polysaccharide, but is generally in the range of 100,000 to 10,000,000. When sodium hyaluronate is used as the polysaccharide, the lower limit of the molecular weight is preferably 1,000,000 or more, more preferably 2,000,000 or more, from the viewpoint of the strength of the obtained gel. On the other hand, the upper limit of the molecular weight of sodium hyaluronate is preferably 10,000,000 or less from the viewpoint of operability in production. In the case of alginic acid, there is no established method for determining its molecular weight, and it is generally specified by the viscosity at 20 ° C. of a 1% by weight aqueous solution of sodium alginate. Therefore, when sodium alginate is used as the polysaccharide in the present invention, 1% by weight thereof is used.
The viscosity of the aqueous solution at 20 ° C. is preferably 100 cp (centipoise) or more, and more preferably 300 cp or more from the viewpoint of the strength of the obtained gel. However, if the viscosity is too high, it takes a long time to dissolve, and the operability in production deteriorates.
The viscosity of the aqueous solution by weight is preferably 1200 cp or less.

【００３５】一般式（II）で表される架橋性試薬におい
て、ｎはメチレン鎖の数を表し、メチレン鎖の数が少な
いと分子間の架橋反応が有効に行われない。一方多すぎ
ると架橋性試薬自身または架橋性試薬間等で疎水性相互
作用による凝集が生じ、架橋反応が阻害される。従っ
て、ｎは２から１８であることが好ましく、２から１２
であることがさらに好ましい。一般式（II）で表される
架橋性試薬は、架橋反応促進作用と水溶性の向上、アミ
ノ基への安定性の付与などのためカルボン酸塩以外の水
溶性塩を形成していることが望ましい。カルボン酸塩は
架橋反応を阻害するので好ましくない。特に、Ｎ- ヒド
ロキシコハク酸イミド塩が架橋反応促進作用が優れてお
り最も好ましい。Ｒ¹ およびＲ² はそれぞれ水素原子ま
たは−ＣＯＣＨ（ＮＨ₂ ）−（ＣＨ₂ ）₄ −ＮＨ₂ で表
される基を示し、架橋性試薬の架橋に関与する反応性基
の数が選択される。Ｒ¹ およびＲ² がともに水素原子で
ある場合には架橋に関与する反応性基の数は２となり、
Ｒ¹ 、Ｒ² のいずれかが水素原子で、他方が−ＣＯＣＨ
（ＮＨ₂ ）−（ＣＨ₂ ）₄ −ＮＨ₂ である場合には架橋
に関与する反応性基の数は３となり、Ｒ¹ およびＲ² が
ともに−ＣＯＣＨ（ＮＨ₂ ）−（ＣＨ₂ ）₄ −ＮＨ₂ で
ある場合には架橋に関与する反応性基の数は４となる。
架橋に関与する反応性基の数は２以上が必須であり、一
般には数が多いほど架橋は有効に行われるが、５以上に
なると架橋に関与しない反応性基の割合が無視できなく
なるとともに、酸性多糖類とイオン結合による凝集沈殿
を生じ易くなるので２〜４の範囲内が好ましい。In the crosslinkable reagent represented by the general formula (II), n represents the number of methylene chains, and if the number of methylene chains is small, the cross-linking reaction between molecules cannot be effectively performed. On the other hand, if the amount is too large, aggregation occurs due to hydrophobic interaction between the crosslinking reagents themselves or between the crosslinking reagents, and the crosslinking reaction is inhibited. Therefore, n is preferably 2 to 18, and 2 to 12 is preferable.
Is more preferable. The crosslinking reagent represented by the general formula (II) may form a water-soluble salt other than a carboxylate for promoting a crosslinking reaction, improving water solubility, and imparting stability to an amino group. desirable. Carboxylates are not preferred because they inhibit the crosslinking reaction. In particular, N-hydroxysuccinimide salts are most preferred because of their excellent cross-linking reaction promoting action. R ¹ and R ² each represent a hydrogen atom or a group represented by —COCH (NH ₂ ) — (CH ₂ ) ₄ —NH ₂ , and the number of reactive groups involved in crosslinking of the crosslinking reagent is selected. . When R ¹ and R ² are both hydrogen atoms, the number of reactive groups involved in crosslinking is 2, and
One of R ¹ and R ² is a hydrogen atom, and the other is —COCH
In the case of (NH ₂ ) — (CH ₂ ) ₄ —NH ₂ , the number of reactive groups involved in crosslinking is 3, and both R ¹ and R ² are —COCH (NH ₂ ) — (CH ₂ ) ₄ In the case of —NH ₂ , the number of reactive groups involved in crosslinking is 4.
The number of reactive groups involved in cross-linking is essentially 2 or more. Generally, the larger the number, the more effectively cross-linking is performed. The range of 2 to 4 is preferable because aggregation precipitation due to ionic bond with the acidic polysaccharide is easily caused.

【００３６】一般式（II）で表される架橋性試薬の塩と
しては、具体的にはジアミノエタン、ジアミノプロパ
ン、ジアミノブタン、ジアミノペンタン、ジアミノヘキ
サン、ジアミノヘプタン、ジアミノオクタン、ジアミノ
ノナン、ジアミノデカン、ジアミノドデカン、ジアミノ
オクタデカン等のジアミノアルカン類の塩、Ｎ−（リジ
ル）−ジアミノエタン、Ｎ, Ｎ’−ジ（リジル）−ジア
ミノエタン、Ｎ−（リジル）−ジアミノヘキサン、Ｎ,
Ｎ’−ジ（リジル）−ジアミノヘキサン等のモノまたは
ジ（リジル）ジアミノアルカン類の塩が例示される。な
かでも、ジアミノエタンの２Ｎ−ヒドロキシコハク酸イ
ミド塩、ジアミノヘキサンの２Ｎ−ヒドロキシコハク酸
イミド塩、Ｎ, Ｎ’−ジ（リジル）−ジアミノエタンの
４Ｎ−ヒドロキシコハク酸イミド塩、Ｎ−（リジル）−
ジアミノヘキサンの３Ｎ−ヒドロキシコハク酸イミド塩
などが好ましく用いられる。Examples of the salt of the crosslinking reagent represented by the general formula (II) include diaminoethane, diaminopropane, diaminobutane, diaminopentane, diaminohexane, diaminoheptane, diaminooctane, diaminononane, diaminodecane, Salts of diaminoalkanes such as diaminododecane and diaminooctadecane, N- (lysyl) -diaminoethane, N, N′-di (lysyl) -diaminoethane, N- (lysyl) -diaminohexane,
Examples thereof include salts of mono- or di (lysyl) diaminoalkanes such as N′-di (lysyl) -diaminohexane. Among them, diaminoethane 2N-hydroxysuccinimide salt, diaminohexane 2N-hydroxysuccinimide salt, N, N′-di (lysyl) -diaminoethane 4N-hydroxysuccinimide salt, N- (lysyl) )-
A 3N-hydroxysuccinimide salt of diaminohexane or the like is preferably used.

【００３７】一般式（II）で表される架橋性試薬のうち
ジアミノアルカン類は市販品として容易に入手できる。
モノまたはジリジルジアミノアルカン類は通常の有機合
成法により合成できる。例えば、α−アミノ基とε−ア
ミノ基を保護したリジンのカルボキシル基とジアミノア
ルカン類のアミノ基とをカルボジイミド等の脱水縮合剤
を用いて結合し、その後α−アミノ基とε−アミノ基の
保護基を除去する方法、α−アミノ基とε−アミノ基を
保護したリジンをＮ−ヒドロキシコハク酸イミドなどと
の活性エステルとした後、ジアミノアルカン類と反応さ
せ、その後α−アミノ基とε−アミノ基の保護基を除去
する方法等が挙げられる。α−アミノ基とε−アミノ基
の保護基の除去は、例えば保護基がｔ−ブチルオキシカ
ルボニル基の場合には、トリフルオロ酢酸や４規定の塩
化水素を溶解したジオキサンで処理することにより行わ
れる。保護基がフルオレニルメチルオキシカルボニル基
の場合には２０％ピペリジンのジメチルホルムアミド溶
液で処理することで除去できる。α−アミノ基とε−ア
ミノ基を保護したリジンとジアミノアルカン類のモル比
を１：１で反応を行えばモノリジルジアミノアルカン
が、２：１で反応すればジリジルジアミノアルカンが、
それぞれ得られる。これらは遊離のアミノ基の形で得ら
れる場合には、酢酸エチルなどに溶解し、アミノ基と当
量のＮ−ヒドロキシコハク酸イミドを加えることで塩が
得られる。塩酸塩やトリフルオロ酢酸塩などの形で得ら
れる場合には、水溶液をＮ−ヒドロキシコハク酸イミド
で平衡化した陰イオン交換樹脂カラムに通じることによ
ってＮ−ヒドロキシコハク酸イミド塩が得られる。Among the crosslinking agents represented by the general formula (II), diaminoalkanes can be easily obtained as commercial products.
Mono or diridyl diaminoalkanes can be synthesized by a conventional organic synthesis method. For example, a carboxyl group of lysine protected with an α-amino group and an ε-amino group and an amino group of a diaminoalkane are bound using a dehydration condensing agent such as carbodiimide, and then the α-amino group and the ε-amino group are combined. A method for removing a protecting group, lysine having an α-amino group and an ε-amino group protected is converted into an active ester such as N-hydroxysuccinimide, and then reacted with diaminoalkanes. -A method of removing a protecting group for an amino group. For example, when the protecting group is a t-butyloxycarbonyl group, removal of the protecting group for the α-amino group and the ε-amino group is performed by treating with trifluoroacetic acid or dioxane in which 4N hydrogen chloride is dissolved. Will be When the protecting group is a fluorenylmethyloxycarbonyl group, it can be removed by treating with a 20% piperidine in dimethylformamide solution. If the reaction is carried out at a molar ratio of lysine and diaminoalkanes protecting the α-amino group and ε-amino group of 1: 1, monoridyldiaminoalkane is reacted at 2: 1, and diridyldiaminoalkane is reacted at 2: 1.
Obtained respectively. When these are obtained in the form of free amino groups, salts are obtained by dissolving them in ethyl acetate or the like and adding an N-hydroxysuccinimide in an amount equivalent to the amino groups. When obtained in the form of a hydrochloride or trifluoroacetate, the N-hydroxysuccinimide salt is obtained by passing the aqueous solution through an anion exchange resin column equilibrated with N-hydroxysuccinimide.

【００３８】一般式（II）で表される架橋性試薬によ
る、分子内にカルボキシル基を有する多糖類の架橋反応
は、水溶性カルボジイミド等の脱水縮合剤を用いて行う
ことができる。架橋性試薬は、アミノ基が塩を形成して
いないときは架橋反応が遅い。Ｎ−ヒドロキシコハク酸
イミドの塩は架橋反応が速やかで、水膨潤性高分子ゲル
（II）が速く得られるので本発明に特に好適である。塩
酸塩を用いると水膨潤性高分子ゲル（II）は得られるが
架橋反応によるゲル化が遅くなる。架橋率は、用いる架
橋性試薬の多糖類に対するモル比で制御できる。架橋率
を低くすると柔軟で含水率の高いゲルが得られる。架橋
率を高くすると強固で含水率の低いゲルが得られる。架
橋率は、得られる水膨潤性高分子ゲル（II）の用途によ
り適宜選択されうる。架橋率が低すぎると、実用的な機
械的強度・安定性を有するゲルが得られず好ましくな
い。また、多すぎると架橋性試薬のアミノ基が未反応の
ままゲル中に存在することになり好ましくない。従って
一般式（II）で表される架橋性試薬の多糖類に対する反
応率は、多糖類の有するカルボキシル基に対して１から
５０モル％の割合であることが好ましく、１０から４０
モル％の範囲にあることがさらに好ましい。架橋率は、
用いる架橋性試薬の多糖類に対するモル比で制御可能で
あるが、元素分析法、ＮＭＲ法等によって実測しうる。
例えばアルギン酸塩やヒアルロン酸塩などの窒素原子を
含まない多糖類を用いる場合には得られたゲル中の窒素
原子の元素分析により求められる。また、得られたゲル
のプロトンＮＭＲにおける、多糖類のメチンプロトンと
架橋性試薬のメチレンプロトンのシグナル強度比からも
求められる。本発明の水膨潤性高分子ゲル（II）はそれ
自身でも実用的な強度と安定性を示すが、用途によりさ
らにイオン結合架橋、疎水結合架橋などの他のゲル化方
法と併用してもよい。The crosslinking reaction of the polysaccharide having a carboxyl group in the molecule with the crosslinking reagent represented by the general formula (II) can be carried out using a dehydrating condensing agent such as a water-soluble carbodiimide. The crosslinking reagent has a slow crosslinking reaction when the amino group does not form a salt. The salt of N-hydroxysuccinimide is particularly suitable for the present invention because the crosslinking reaction is rapid and a water-swellable polymer gel (II) can be obtained quickly. When the hydrochloride is used, a water-swellable polymer gel (II) can be obtained, but the gelation by the crosslinking reaction becomes slow. The crosslinking ratio can be controlled by the molar ratio of the crosslinking reagent used to the polysaccharide. If the cross-linking rate is lowered, a soft and high-moisture content gel can be obtained. When the crosslinking ratio is increased, a gel having a strong and low moisture content can be obtained. The crosslinking ratio can be appropriately selected depending on the use of the obtained water-swellable polymer gel (II). If the crosslinking ratio is too low, a gel having practical mechanical strength and stability cannot be obtained, which is not preferable. On the other hand, if the amount is too large, the amino group of the cross-linking reagent remains unreacted in the gel, which is not preferable. Therefore, the reaction rate of the crosslinking reagent represented by the general formula (II) with respect to the polysaccharide is preferably 1 to 50 mol% based on the carboxyl group of the polysaccharide, and is preferably 10 to 40 mol%.
More preferably, it is in the range of mol%. The crosslinking rate is
It can be controlled by the molar ratio of the crosslinking reagent to the polysaccharide used, but can be measured by elemental analysis, NMR, or the like.
For example, when a polysaccharide containing no nitrogen atom, such as alginate or hyaluronate, is used, it can be determined by elemental analysis of nitrogen atoms in the obtained gel. It can also be determined from the signal intensity ratio between the methine proton of the polysaccharide and the methylene proton of the crosslinking reagent in the proton NMR of the obtained gel. The water-swellable polymer gel (II) of the present invention shows practical strength and stability by itself, but may be used in combination with other gelling methods such as ionic bond crosslinking and hydrophobic bond crosslinking depending on the application. .

【００３９】本発明の水膨潤性高分子ゲル（II）は、含
水率が高いこと、多糖類からなるので免疫原性が低いこ
と、架橋性試薬の原料は生体に投与可能な化合物である
ので仮に生体内に残存した場合でも吸収と***が容易に
行われること、などから、生体親和性と安全性に優れて
いる。The water-swellable polymer gel (II) of the present invention has a high water content, is low in immunogenicity because it is composed of polysaccharides, and is a compound which can be administered to a living body because the raw material of the crosslinking reagent is a compound which can be administered to a living body. It is excellent in biocompatibility and safety because it can be easily absorbed and excreted even if it remains in the living body.

【００４０】本発明の水膨潤性高分子ゲル（II）に、含
水率のコントロールや粘着性の付与などの目的で、Ｎａ
⁺ 、Ｃａ⁺⁺、Ｍｇ⁺⁺等の無機イオン類、エチレングリコ
ール、プロピレングリコール、グリセリン、ＰＥＧ等の
多価アルコール類、ポリビニルアルコール、ポリアクリ
ル酸等の高分子化合物等、薬理学的に許容される添加剤
を添加することもできる。また、消毒剤、抗生剤、抗菌
剤、アクトシン、PGE1などの血行改善薬、TGF β、PDG
F、FGF 等の増殖因子、ウリナスタチン、TIMP等の酵素
阻害剤、ステロイド、非ステロイド性抗炎症剤等の抗炎
症剤、フィブリン、コラーゲンなどの構造蛋白質、など
の薬剤や生理活性物質等を添加することもできる。The water-swellable polymer gel (II) of the present invention may contain Na for the purpose of controlling the water content and imparting tackiness.
^+, Ca ^++, inorganic ions such as Mg ^++, ethylene glycol, propylene glycol, glycerin, polyhydric alcohols such as PEG, polyvinyl alcohol, polymer compounds such as polyacrylic acid, pharmacologically tolerated Additives can also be added. In addition, disinfectants, antibiotics, antibacterials, actosin, blood circulation improvers such as PGE1, TGFβ, PDG
Drugs such as growth factors such as F and FGF, enzyme inhibitors such as urinastatin and TIMP, anti-inflammatory agents such as steroids and non-steroidal anti-inflammatory agents, structural proteins such as fibrin and collagen, and physiologically active substances are added. You can also.

【００４１】本発明の水膨潤性高分子ゲル（II）は、創
傷被覆材、生体組織接着剤、癒着防止材等の医療用材料
の構成成分として有用である。本発明の水膨潤性高分子
ゲル（II）を、例えば平板状、微粒子状などの形態に成
形することにより創傷被覆材が得られる。また、上記の
ように成形した後、ポリウレタン樹脂やシリコン樹脂製
のフィルムと貼り合わせ、粘着剤を添加または塗布する
ことによっても創傷被覆材が得られる。本発明の水膨潤
性高分子ゲル（II）から得られる創傷被覆材は、透明性
が高いので創部の観察に好都合である。また含水率が高
く柔軟であるので、創部に対する物理的刺激が少なく患
者に与える苦痛が少ない。さらに保水性が良好でかつ体
液等により溶解しないので、被覆材の交換回数が少なく
なり、貼り替えによる患者の苦痛、看護の手間、創のダ
メージが軽減できること、滲出液中の治癒促進因子を良
好に保持しその作用を妨げないこと等の利点がある。湿
熱蒸気滅菌ができるので安全性も高い。The water-swellable polymer gel (II) of the present invention is useful as a component of medical materials such as a wound covering material, a living tissue adhesive, and an adhesion preventing material. The wound dressing material can be obtained by molding the water-swellable polymer gel (II) of the present invention into, for example, a plate or a fine particle. Alternatively, the wound dressing material can be obtained by forming as described above, bonding the film to a polyurethane resin or silicone resin film, and adding or applying an adhesive. The wound dressing obtained from the water-swellable polymer gel (II) of the present invention has high transparency and is therefore convenient for observation of a wound. In addition, since it has a high moisture content and is flexible, there is little physical irritation to the wound and less pain is given to the patient. In addition, because it has good water retention and does not dissolve due to body fluids, etc., the number of times of changing the coating material is reduced, the pain of the patient due to replacement, the labor of nursing, the damage to the wound can be reduced, and the healing promoting factor in the exudate is good. And that the operation is not hindered. High safety due to wet steam sterilization.

【００４２】本発明の水膨潤性高分子ゲル（II）を、例
えば平板状、織布状、不織布状、微粒子状、スポンジ状
等の形態に成形することにより癒着防止材が得られる。
また、上記のように成形した後、グリセリン、ＰＥＧ等
と混合するか、またはこれらを分散することによっても
癒着防止材が得られる。The anti-adhesion material can be obtained by molding the water-swellable polymer gel (II) of the present invention into, for example, a plate, a woven fabric, a nonwoven fabric, a fine particle, or a sponge.
Further, after forming as described above, an adhesion preventing material can be obtained by mixing with glycerin, PEG, or the like, or by dispersing them.

【００４３】本発明の水膨潤性高分子ゲル（II）を、例
えば平板状、織布状、不織布状、微粒子状、スポンジ状
等の形態に成形することにより生体組織接着剤が得られ
る。また、上記のように成形した後、デキストラン、プ
ルラン、フィブリン、コラーゲンなどと混合するかまた
はこれらを分散することによっても生体組織接着剤が得
られる。A living tissue adhesive can be obtained by molding the water-swellable polymer gel (II) of the present invention into, for example, a flat plate, a woven fabric, a nonwoven fabric, a fine particle, a sponge, or the like. After molding as described above, a living tissue adhesive can also be obtained by mixing or dispersing with dextran, pullulan, fibrin, collagen, or the like.

【００４４】本発明の水膨潤性高分子ゲル（II）は耐熱
水性に優れているので溶出物が少ないこと、毒性試験に
おいて低毒性であることが確認されている。Since the water-swellable polymer gel (II) of the present invention is excellent in hot water resistance, it has been confirmed that there is little eluted material and that it has low toxicity in a toxicity test.

【００４５】[0045]

【実施例】以下、実施例、参考例、比較例および試験例
により本発明を具体的に説明する。なお、本発明はこれ
らの実施例等により限定されるものではない。The present invention will be specifically described below with reference to Examples, Reference Examples, Comparative Examples and Test Examples. The present invention is not limited by these examples and the like.

【００４６】実施例１ ２. ３ｇ（２０ｍｍｏｌ）のＮ−ヒドロキシコハク酸イ
ミド（ＨＯＳｕ、（株）ペプチド研究所）を酢酸エチル
１５０ｍｌに溶解し、１０ｍｌの酢酸エチルに溶解した
０. ６ｇ（１０ｍｍｏｌ）のエチレンジアミン（ＥＤ
Ａ、和光純薬工業株式会社）を室温で撹拌しながら滴下
した。滴下終了後さらに１時間撹拌を続けた。析出した
結晶を濾取し、減圧下に乾燥して２. ９ｇ（収率約１０
０％）のエチレンジアミン２Ｎ−ヒドロキシコハク酸イ
ミド塩（ＥＤＡ・２ＨＯＳｕ）を得た。アルギン酸ナト
リウム（和光純薬工業株式会社、５００〜６００ｃｐ）
の１重量％水溶液３０ｍｌ（カルボキシル基：１. ５ｍ
ｍｏｌ）に、０. ２０ｇ（０.７ｍｍｏｌ）のＥＤＡ・
２ＨＯＳｕと０. ９６ｇ（５ｍｍｏｌ）の１−エチル−
３−（３−ジメチルアミノプロピル）−カルボジイミド
塩酸塩（ＥＤＣ・ＨＣｌ、（株）ペプチド研究所）を溶
解して、１２ｃｍ×８ｃｍのポリスチレン製トレイに流
延し室温で静置した。およそ１５時間後に水膨潤性高分
子ゲルが得られた。Example 1 2.3 g (20 mmol) of N-hydroxysuccinimide (HOSu, Peptide Research Laboratories) was dissolved in 150 ml of ethyl acetate, and 0.6 g (10 mmol) dissolved in 10 ml of ethyl acetate. Of ethylenediamine (ED
A, Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) was added dropwise with stirring at room temperature. After completion of the dropwise addition, stirring was continued for another hour. The precipitated crystals were collected by filtration and dried under reduced pressure to give 2.9 g (yield of about 10%).
0%) of ethylenediamine 2N-hydroxysuccinimide salt (EDA.2HOSu). Sodium alginate (Wako Pure Chemical Industries, Ltd., 500-600 cp)
30 ml of 1% by weight aqueous solution (carboxyl group: 1.5 m
mol), 0.20 g (0.7 mmol) of EDA.
2HOSu and 0.96 g (5 mmol) of 1-ethyl-
3- (3-Dimethylaminopropyl) -carbodiimide hydrochloride (EDC · HCl, Peptide Research Laboratories) was dissolved, cast on a 12 cm × 8 cm polystyrene tray, and allowed to stand at room temperature. After about 15 hours, a water-swellable polymer gel was obtained.

【００４７】実施例２ アルギン酸ナトリウム（和光純薬工業株式会社、５００
〜６００ｃｐ）の１重量％水溶液３０ｍｌ（カルボキシ
ル基：１. ５ｍｍｏｌ）に、０. ０５ｇ（０.１７５ｍ
ｍｏｌ）のＥＤＡ・２ＨＯＳｕと０. ９６ｇ（５ｍｍｏ
ｌ）のＥＤＣ・ＨＣｌを溶解して、１２ｃｍ×８ｃｍの
ポリスチレン製トレイに流延し室温で静置した。およそ
１５時間後に水膨潤性高分子ゲルが得られた。Example 2 Sodium alginate (Wako Pure Chemical Industries, Ltd., 500
0.05 g (0.175 m) in 30 ml of 1% by weight aqueous solution (carboxyl group: 1.5 mmol).
mol) of EDA · 2HOSu and 0.96 g (5 mmo)
1) EDC · HCl was dissolved, cast on a 12 cm × 8 cm polystyrene tray, and allowed to stand at room temperature. After about 15 hours, a water-swellable polymer gel was obtained.

【００４８】実施例３ アルギン酸ナトリウム（和光純薬工業株式会社、５００
〜６００ｃｐ）の１重量％水溶液３０ｍｌ（カルボキシ
ル基：１. ５ｍｍｏｌ）に、０. ８０ｇ（２.８ｍｍｏ
ｌ）のＥＤＡ・２ＨＯＳｕと０. ９６ｇ（５ｍｍｏｌ）
のＥＤＣ・ＨＣｌを溶解して、１２ｃｍ×８ｃｍのポリ
スチレン製トレイに流延し室温で静置した。およそ１５
時間後に水膨潤性高分子ゲルが得られた。Example 3 Sodium alginate (Wako Pure Chemical Industries, Ltd., 500
0.80 g (2.8 mmol) in 30 ml (carboxyl group: 1.5 mmol) of a 1% by weight aqueous solution of
l) EDA · 2HOSu and 0.96 g (5 mmol)
Was dissolved in EDC.HCl, cast on a 12 cm × 8 cm polystyrene tray, and allowed to stand at room temperature. About 15
After an hour, a water-swellable polymer gel was obtained.

【００４９】実施例４ ２. ３ｇ（２０ｍｍｏｌ）のＨＯＳｕを酢酸エチル１５
０ｍｌに溶解し、１０ｍｌの酢酸エチルに溶解した１.
２ｇ（１０ｍｍｏｌ）のヘキサメチレンジアミン（ＨＤ
Ａ、和光純薬工業株式会社）を室温で撹拌しながら滴下
した。滴下終了後さらに１時間撹拌を続けた。析出した
結晶を濾取し、減圧下に乾燥して３. ３ｇ（収率約９６
％）のヘキサメチレンジアミン２Ｎ−ヒドロキシコハク
酸イミド塩（ＨＤＡ・２ＨＯＳｕ）を得た。アルギン酸
ナトリウム（和光純薬工業株式会社、５００〜６００ｃ
ｐ）の１重量％水溶液３０ｍｌ（カルボキシル基：１.
５ｍｍｏｌ）に、０. ２４ｇ（０.７ｍｍｏｌ）のＨＤ
Ａ・２ＨＯＳｕと０. ９６ｇ（５ｍｍｏｌ）のＥＤＣ・
ＨＣｌを溶解して、１２ｃｍ×８ｃｍのポリスチレン製
トレイに流延し室温で静置した。およそ１５時間後に水
膨潤性高分子ゲルが得られた。Example 4 2.3 g (20 mmol) of HOSu was added to ethyl acetate 15
Dissolved in 0 ml and dissolved in 10 ml of ethyl acetate 1.
2 g (10 mmol) of hexamethylenediamine (HD
A, Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) was added dropwise with stirring at room temperature. After completion of the dropwise addition, stirring was continued for another hour. The precipitated crystals were collected by filtration and dried under reduced pressure to give 3.3 g (yield about 96).
%) Of hexamethylenediamine 2N-hydroxysuccinimide salt (HDA.2HOSu). Sodium alginate (Wako Pure Chemical Industries, Ltd., 500-600c
30 ml of a 1% by weight aqueous solution of p) (carboxyl group: 1.
5 mmol) and 0.24 g (0.7 mmol) of HD
A ・ 2HOSu and 0.96g (5mmol) EDC ・
HCl was dissolved, cast on a 12 cm × 8 cm polystyrene tray, and allowed to stand at room temperature. After about 15 hours, a water-swellable polymer gel was obtained.

【００５０】実施例５ アルギン酸ナトリウム（和光純薬工業株式会社、５００
〜６００ｃｐ）の１重量％水溶液３０ｍｌ（カルボキシ
ル基：１. ５ｍｍｏｌ）に、９３ｍｇ（０. ７ｍｍｏ
ｌ）のＥＤＡ・２ＨＣｌ（和光純薬工業株式会社）と
０. ９６ｇ（５ｍｍｏｌ）のＥＤＣ・ＨＣｌを溶解し
て、１２ｃｍ×８ｃｍのポリスチレン製トレイに流延し
室温で静置した。およそ４日後に水膨潤性高分子ゲルが
得られた。Example 5 Sodium alginate (Wako Pure Chemical Industries, Ltd., 500
93 mg (0.7 mmol) in 30 ml (carboxyl group: 1.5 mmol) of a 1% by weight aqueous solution of
1) EDA · 2HCl (Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) and 0.96 g (5 mmol) of EDC · HCl were dissolved, cast on a 12 cm × 8 cm polystyrene tray, and allowed to stand at room temperature. After about 4 days, a water-swellable polymer gel was obtained.

【００５１】実施例６ ４. ７ｇ（０. ０１ｍｏｌ）のＮα−フルオレニルメト
キシカルボニル−Ｎε−ｔ−ブチルオキシカルボニル−
Ｌ−リジン（Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）、（株）ペプ
チド研究所）と１. １５ｇ（０. ０１ｍｏｌ）のＨＯＳ
ｕを酢酸エチル５０ｍｌに溶解し、氷冷下に撹拌しなが
ら１. ７ｇ（０. ０１１ｍｏｌ）のジシクロヘキシルカ
ルボジイミド（ＤＣＣ、（株）ペプチド研究所）を加
え、氷冷下１時間、その後室温で一晩撹拌した。不溶物
を濾過して除き、濾液を減圧濃縮して得られた結晶をイ
ソプロピルアルコール−酢酸エチルから再結晶した。結
晶を減圧乾燥して４. ７ｇ（収率８０％）のＮα−フル
オレニルメトキシカルボニル−Ｎε−ｔ−ブチルオキシ
カルボニル−Ｌ−リジル−N −ヒドロキシコハク酸イミ
ドエステル（Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＳｕ）を
得た。２. ８２ｇ（５ｍｍｏｌ）のＦｍｏｃ−Ｌｙｓ
（Ｂｏｃ）−ＯＳｕを酢酸エチル５０ｍｌに溶解して室
温で撹拌しながら、０. １５ｇ（２. ５ｍｍｏｌ）のエ
チレンジアミンを溶解した酢酸エチル溶液１０ｍｌを滴
下した。滴下終了後さらに一晩撹拌を続けた。析出した
結晶を濾取し、減圧下に乾燥して２. ４ｇ（収率１００
％）のＮ、Ｎ’−（Ｎα−フルオレニルメトキシカルボ
ニル−Ｎε−ｔ−ブチルオキシカルボニル−Ｌ−リジ
ル）−エチレンジアミン（（Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏ
ｃ））₂ −ＥＤＡ）を得た。Example 6 4.7 g (0.01 mol) of Nα-fluorenylmethoxycarbonyl-Nε-t-butyloxycarbonyl-
L-Lysine (Fmoc-Lys (Boc), Peptide Research Institute, Inc.) and 1.15 g (0.01 mol) of HOS
was dissolved in 50 ml of ethyl acetate, and 1.7 g (0.011 mol) of dicyclohexylcarbodiimide (DCC, Peptide Research Laboratories, Inc.) was added thereto while stirring under ice cooling, and the mixture was cooled for 1 hour under ice cooling and then at room temperature for 1 hour. Stirred overnight. The insolubles were removed by filtration, and the filtrate was concentrated under reduced pressure. The obtained crystals were recrystallized from isopropyl alcohol-ethyl acetate. The crystals were dried under reduced pressure and 4.7 g (80% yield) of Nα-fluorenylmethoxycarbonyl-Nε-t-butyloxycarbonyl-L-lysyl-N-hydroxysuccinimide ester (Fmoc-Lys (Boc)) -OSu). 2. 82 g (5 mmol) of Fmoc-Lys
(Boc) -OSu was dissolved in 50 ml of ethyl acetate, and 10 ml of an ethyl acetate solution in which 0.15 g (2.5 mmol) of ethylenediamine was dissolved was added dropwise with stirring at room temperature. After completion of the dropwise addition, stirring was continued overnight. The precipitated crystals were collected by filtration and dried under reduced pressure to obtain 2.4 g (yield: 100).
%) Of N, N ′-(Nα-fluorenylmethoxycarbonyl-Nε-t-butyloxycarbonyl-L-lysyl) -ethylenediamine ((Fmoc-Lys (Bo
c)) _2- EDA) was obtained.

【００５２】得られた（Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ））
₂ −ＥＤＡの全量を２００ｍｌのジオキサンに懸濁し、
４０ｍｌのピペリジン（和光純薬工業株式会社）を加え
室温で１時間撹拌した。減圧濃縮して得られる結晶をジ
エチルエーテルで洗浄した後、減圧下に乾燥してＮ、
Ｎ’−ジ（Ｎε−ｔ−ブチルオキシカルボニル−Ｌ−リ
ジル）−エチレンジアミン（（Ｌｙｓ（Ｂｏｃ））₂ −
ＥＤＡ）を得た。得られた（（Ｌｙｓ（Ｂｏｃ））₂ −
ＥＤＡ）の全量を１０ｍｌのトリフルオロ酢酸（ＴＦ
Ａ、（株）ペプチド研究所）に溶解し、室温で２時間撹
拌した。減圧濃縮して得られる結晶をジエチルエーテル
で洗浄した後、減圧下に乾燥してＮ、Ｎ’−ジ（Ｌ−リ
ジル）−エチレンジアミントリフルオロ酢酸塩（（Ｌｙ
ｓ）₂ −ＥＤＡ・４ＴＦＡ）を得た。得られた全量の
（Ｌｙｓ）₂ −ＥＤＡ・４ＴＦＡを５０ｍｌの精製水に
溶解し、１ＭのＨＯＳｕ水溶液で平衡化した２０ｇのジ
エチルアミノエチルセルロース（ＤＥ５２、ワットマ
ン）を充填したカラムに通じ、通過液を減圧濃縮して
Ｎ、Ｎ’−ジ（Ｌ−リジル）−エチレンジアミンN −ヒ
ドロキシコハク酸イミド塩（（Ｌｙｓ）₂ −ＥＤＡ・４
ＨＯＳｕ）０. ７８ｇ（収率４０％）を得た。アルギン
酸ナトリウム（和光純薬工業株式会社、５００〜６００
ｃｐ）の１重量％水溶液３０ｍｌ（カルボキシル基：
１. ５ｍｍｏｌ）に、０. ２９ｇ（０.３７５ｍｍｏ
ｌ）の（Ｌｙｓ）₂ −ＥＤＡ・４ＨＯＳｕおよび０. ９
６ｇ（５ｍｍｏｌ）のＥＤＣ・ＨＣｌを溶解して、１２
ｃｍ×８ｃｍのポリスチレン製トレイに流延し室温で静
置した。およそ１５時間後に水膨潤性高分子ゲルが得ら
れた。The obtained (Fmoc-Lys (Boc))
The entire amount of _2- EDA is suspended in 200 ml of dioxane,
40 ml of piperidine (Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) was added, and the mixture was stirred at room temperature for 1 hour. The crystals obtained by concentration under reduced pressure are washed with diethyl ether, and then dried under reduced pressure to obtain N,
N′-di (Nε-t-butyloxycarbonyl-L-lysyl) -ethylenediamine ((Lys (Boc)) ₂ —
EDA) was obtained. The obtained ((Lys (Boc)) _2-
EDA) to 10 ml of trifluoroacetic acid (TF)
A, Peptide Research Laboratories) and stirred at room temperature for 2 hours. The crystals obtained by concentration under reduced pressure are washed with diethyl ether, dried under reduced pressure, and dried with N, N′-di (L-lysyl) -ethylenediaminetrifluoroacetate ((Ly
s) _2- EDA / 4TFA) was obtained. The total amount of (Lys) ₂ -EDA.4TFA obtained was dissolved in 50 ml of purified water, passed through a column filled with 20 g of diethylaminoethylcellulose (DE52, Whatman) equilibrated with a 1 M aqueous solution of HOSu, and the flow-through liquid was decompressed. Concentrate and concentrate N, N'-di (L-lysyl) -ethylenediamine N-hydroxysuccinimide salt ((Lys) ₂ -EDA.4
HOSu) (0.78 g, yield 40%). Sodium alginate (Wako Pure Chemical Industries, Ltd., 500-600
30 ml of a 1% by weight aqueous solution of cp) (carboxyl group:
1.5 mmol) to 0.29 g (0.375 mmol)
l) (Lys) ₂ -EDA.4HOSu and 0.9
Dissolve 6 g (5 mmol) of EDC.HCl and add 12
It was cast on a polystyrene tray measuring 8 cm x 8 cm and allowed to stand at room temperature. After about 15 hours, a water-swellable polymer gel was obtained.

【００５３】実施例７ ヒアルロン酸ナトリウムの１重量％水溶液（生化学工業
株式会社）６０ｍｌに、０. ２９ｇ（０. ３７５ｍｍｏ
ｌ）の（Ｌｙｓ）₂ −ＥＤＡ・４ＨＯＳｕおよび０. ９
６ｇ（５ｍｍｏｌ）のＥＤＣ・ＨＣｌを溶解して、１２
ｃｍ×８ｃｍのポリスチレン製トレイに流延し４℃で静
置した。およそ４８時間後に水膨潤性高分子ゲルが得ら
れた。Example 7 0.29 g (0.375 mmol) of a 1% by weight aqueous solution of sodium hyaluronate (Seikagaku Corporation) was added to 60 ml.
l) (Lys) ₂ -EDA.4HOSu and 0.9
Dissolve 6 g (5 mmol) of EDC.HCl and add 12
The mixture was cast on a polystyrene tray of cm × 8 cm and allowed to stand at 4 ° C. After about 48 hours, a water-swellable polymer gel was obtained.

【００５４】参考例１ 実施例１〜４、６で得られた水膨潤性高分子ゲルを、細
胞間質液と同じ濃度（Ｃａイオン：５ｍｅｑ、Ｎａイオ
ン：１４３ｍｅｑ）になるようにＣａＣｌ₂ とＮａＣｌ
を溶解した水溶液（ＥＣＦ）で十分に洗浄した後、５０
％グリセリン-生食液を含浸して湿熱蒸気滅菌（１２１
℃、２０分間）を施し透明なシート状創傷被覆材とし
た。Reference Example 1 The water-swellable polymer gels obtained in Examples 1 to 4 and 6 were mixed with CaCl ₂ so as to have the same concentration (Ca ion: 5 meq, Na ion: 143 meq) as the interstitial fluid. NaCl
After thoroughly washing with an aqueous solution (ECF) in which
% Glycerin-saline solution and sterilized by wet heat and steam (121
C. for 20 minutes) to give a transparent sheet-like wound dressing.

【００５５】参考例２ 実施例１〜４、６で得られた水膨潤性高分子ゲルを、Ｅ
ＣＦで十分に洗浄した後、ポリメタクリル酸エステル系
の粘着剤が塗布されたポリウレタンシートとはり合わ
せ、湿熱蒸気滅菌（１２１℃、２０分間）を施し、透明
なシート状創傷被覆材とした。Reference Example 2 The water-swellable polymer gels obtained in Examples 1 to 4 and 6 were
After sufficiently washing with CF, the sheet was bonded to a polyurethane sheet coated with a polymethacrylic acid ester-based adhesive, and subjected to wet heat steam sterilization (121 ° C., 20 minutes) to obtain a transparent sheet-like wound dressing.

【００５６】参考例３ 実施例１〜４、６で得られた水膨潤性高分子ゲルを、Ｅ
ＣＦで十分に洗浄した後、湿熱蒸気滅菌（１２１℃、２
０分間）を施した。該ゲルを濾過滅菌したゲンタマイシ
ンの１ｍｇ／ｍｌ水溶液に浸漬して、ゲンタマイシンを
含有する創傷被覆材とした。Reference Example 3 The water-swellable polymer gels obtained in Examples 1 to 4 and 6 were
After sufficiently washing with CF, wet heat steam sterilization (121 ° C, 2
0 minutes). The gel was immersed in a 1 mg / ml aqueous solution of gentamicin sterilized by filtration to obtain a wound dressing material containing gentamicin.

【００５７】参考例４ 実施例７で得られた水膨潤性高分子ゲルを純水で十分に
洗浄後、凍結乾燥してスポンジ状のシートを得た。γ線
滅菌を施し癒着防止材とした。Reference Example 4 The water-swellable polymer gel obtained in Example 7 was sufficiently washed with pure water and freeze-dried to obtain a sponge-like sheet. Gamma ray sterilization was performed to obtain an adhesion preventing material.

【００５８】参考例５ 実施例７で得られた水膨潤性高分子ゲルを生理食塩液で
洗浄後、凍結乾燥してスポンジ状とし、γ線滅菌を施し
た。等量の滅菌された０. ５重量％コラーゲン酸性水溶
液（株式会社高研）とともに、ミキサーで無菌的に氷冷
下粉砕し、スラリー状の透明な生体組織接着剤とした。Reference Example 5 The water-swellable polymer gel obtained in Example 7 was washed with physiological saline, freeze-dried to form a sponge, and sterilized by γ-ray. It was aseptically pulverized with an equal amount of sterilized 0.5% by weight collagen acidic aqueous solution (Koken Co., Ltd.) under ice-cooling using a mixer to obtain a slurry-like transparent biological tissue adhesive.

【００５９】比較例１ アルギン酸ナトリウム（和光純薬工業株式会社、５００
〜６００ｃｐ）の１重量％水溶液３０ｍｌ（カルボキシ
ル基：１. ５ｍｍｏｌ）に、４２ｍｇ（０. ７ｍｍｏ
ｌ）のＥＤＡ（和光純薬工業株式会社）と０. ９６ｇ
（５ｍｍｏｌ）のＥＤＣ・ＨＣｌを溶解して、１２ｃｍ
×８ｃｍのポリスチレン製トレイに流延し室温で静置し
たが８日後にも水膨潤性高分子ゲルは得られなかった。Comparative Example 1 Sodium alginate (Wako Pure Chemical Industries, Ltd., 500
30 mg (carboxyl group: 1.5 mmol) of a 1% by weight aqueous solution (~ 600 cp) in 42 mg (0.7 mmol).
l) EDA (Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) and 0.96 g
(5 mmol) of EDC · HCl was dissolved and 12 cm
It was cast on a polystyrene tray of × 8 cm and allowed to stand at room temperature, but no water-swellable polymer gel was obtained after 8 days.

【００６０】比較例２ アルギン酸ナトリウム（和光純薬工業株式会社、５００
〜６００ｃｐ）の１重量％水溶液３０ｍｌを１２ｃｍ×
８ｃｍのポリスチレン製トレイに流延し、１％塩化カル
シウム水溶液を重層後、１日静置して半透明のシート状
水膨潤性高分子ゲルを得た。Comparative Example 2 Sodium alginate (Wako Pure Chemical Industries, Ltd., 500
~ 600 cp) of 30% 1% by weight aqueous solution
The mixture was cast on an 8-cm polystyrene tray, overlaid with a 1% calcium chloride aqueous solution, and allowed to stand for one day to obtain a translucent sheet-like water-swellable polymer gel.

【００６１】比較例３ １重量％のキトサン５００（和光純薬工業株式会社）の
０. ０１Ｎ塩酸水溶液３０ｍｌに４７ｍｇ（０. ３ｍｍ
ｏｌ）のＨＯＳｕを溶解した後、７４ｍｇ（０. ３ｍｍ
ｏｌ）のｔ- ブチルオキシカルボニル- Ｌ- グルタミン
酸（（株）ペプチド研究所）と０. ９６ｇ（５ｍｍｏ
ｌ）のＥＤＣ・ＨＣｌを加えて、１２ｃｍ×８ｃｍのポ
リスチレン製トレイに流延し室温で静置した。およそ２
４時間後に水膨潤性高分子ゲルが得られた。Comparative Example 3 47 mg (0.3 mm
HOSu) was dissolved, and 74 mg (0.3 mm) was dissolved.
ol) of t-butyloxycarbonyl-L-glutamic acid (Peptide Research Institute, Inc.) and 0.96 g (5 mmol)
1) EDC · HCl was added, and the mixture was cast on a 12 cm × 8 cm polystyrene tray and allowed to stand at room temperature. About 2
After 4 hours, a water-swellable polymer gel was obtained.

【００６２】比較例４ １０重量％デキストラン（和光純薬工業株式会社、分子
量１０万〜２０万）の水溶液３０ｍｌに、氷冷撹拌下３
ｇの無水コハク酸（和光純薬工業株式会社）を、５ＮＮ
ａＯＨ水溶液でｐＨを８〜９に保ちながら加えて反応さ
せた。およそ６ｍｌの５ＮＮａＯＨ水溶液が消費された
後、氷酢酸でｐＨを４に調整し、４℃で水に対して２日
間透析した。５０℃以下の温度で２０ｍｌまで濃縮した
後、８ｃｍ×８ｃｍのガラス板に流延し、６０℃で２時
間、その後１２０℃で１時間加熱してフィルム状のコハ
ク酸架橋デキストランを得た。ＥＣＦに浸漬して水膨潤
性高分子ゲルを得たが、膨潤時に数センチ以下の大きさ
に細片化した。また得られたゲルは着色が認められ、ま
た脆弱でありピンセットなどでつかむとさらに細片化し
た。Comparative Example 4 A 30% aqueous solution of 10% by weight dextran (Wako Pure Chemical Industries, Ltd., molecular weight 100,000-200,000) was added to 30 ml of an aqueous solution under ice cooling and stirring.
g of succinic anhydride (Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) in 5NN
While maintaining the pH at 8 to 9 with an aOH aqueous solution, the mixture was added and reacted. After approximately 6 ml of 5N aqueous NaOH was consumed, the pH was adjusted to 4 with glacial acetic acid and dialyzed against water at 4 ° C. for 2 days. After concentrating to 20 ml at a temperature of 50 ° C. or less, the solution was cast on a glass plate of 8 cm × 8 cm and heated at 60 ° C. for 2 hours and then at 120 ° C. for 1 hour to obtain a film-like succinic acid-crosslinked dextran. A water-swellable polymer gel was obtained by immersion in ECF, which was swelled to a size of several centimeters or less. In addition, the resulting gel was colored and was brittle, and was further fragmented when grasped with tweezers or the like.

【００６３】試験例１ 実施例２および比較例２〜４で得られた水膨潤性高分子
ゲルをＥＣＦで十分に洗浄した後、以下の各試験を行っ
た。結果はまとめて表１に示す。 （取り扱い性）各水膨潤性高分子ゲルを約２ｃｍ平方の
大きさに切断し、歯科用ピンセットで取り扱うことがで
きるかどうかを調べた。 （柔軟性）各水膨潤性高分子ゲルを約２ｃｍ平方の大き
さに切断し、歯科用ピンセットあるいはスパーテルで一
方の端を持ち上げて他方の端と接触するまで曲げること
ができるかどうかを調べた。 （耐熱性）各水膨潤性高分子ゲルを約２ｃｍ平方の大き
さに切断し、生理食塩液中で湿熱蒸気滅菌（１２１℃、
２０分間）を施した。前後の外観および取り扱い性の変
化を調べた。 （圧縮挙動）各水膨潤性高分子ゲルを約３ｃｍ平方で厚
さ０. ３ｃｍの大きさに切断してステンレス製の台にの
せ、下端が直径約１ｃｍの平坦面を持つポリプロピレン
製の治具で上部から徐々に圧縮した。ゲルが破砕するま
での歪と応力の測定値から、初期応力／歪の値と破壊強
度を求めた。また両者が破壊点まで直線関係を保つ場合
を弾性体、非線形となるものを粘弾性体とした。Test Example 1 After the water-swellable polymer gels obtained in Example 2 and Comparative Examples 2 to 4 were sufficiently washed with ECF, the following tests were performed. The results are summarized in Table 1. (Handleability) Each water-swellable polymer gel was cut into a size of about 2 cm square, and it was examined whether or not it could be handled with dental tweezers. (Flexibility) Each water-swellable polymer gel was cut into a size of about 2 cm square, and one end was lifted with dental tweezers or a spatula to determine whether it could be bent until it came into contact with the other end. . (Heat resistance) Each water-swellable polymer gel is cut into a size of about 2 cm square, and sterilized by wet heat and steam (121 ° C.,
20 minutes). Changes in appearance and handling before and after were examined. (Compression behavior) Each water-swellable polymer gel is cut into a size of about 3 cm square and 0.3 cm thick, placed on a stainless steel table, and a jig made of polypropylene having a flat surface with a lower end of about 1 cm in diameter. And compressed gradually from the top. From the measured values of the strain and the stress until the gel fractured, the initial stress / strain value and the breaking strength were determined. An elastic body is defined as a case where both maintain a linear relationship to the breaking point, and a viscoelastic body is defined as a non-linear structure.

【００６４】（透明度）各水膨潤性高分子ゲルを光路長
１ｃｍの吸光度測定用セルに隙間なく充填し、ベックマ
ン社製ＤＵ- ６５型分光光度計で４００ｎｍの透過度を
測定した。 （吸水率）各水膨潤性高分子ゲルのＥＣＦ中の吸水率を
吸水重量と乾燥重量の比として求めた。 （溶解性）各水膨潤性高分子ゲル１ｇに１０ｍｌの注射
用水を加え、３７℃で１５時間静置した。各水膨潤性高
分子ゲルの溶解の程度を、上清液の０. ２２μｍの細孔
径を持つフィルター（ミリポア社製、マイレクスＧＶ）
の通過性から調べた。 （耐久性）各水膨潤性高分子ゲルを約２ｃｍ平方の大き
さに切断し、ＰＢＳ（０．１５ＭのＮａＣｌを含む１０
ｍＭリン酸塩緩衝液、ｐＨ ７．４）中で、３７℃に加
温し、毎分１６０回、２４時間振盪して、振盪前後の外
観および強度の変化を調べた。(Transparency) Each water-swellable polymer gel was filled into a cell for measuring absorbance having an optical path length of 1 cm without any gap, and the transmittance at 400 nm was measured with a DU-65 spectrophotometer manufactured by Beckman. (Water absorption) The water absorption in the ECF of each water-swellable polymer gel was determined as the ratio of the water absorption to the dry weight. (Solubility) 10 ml of water for injection was added to 1 g of each water-swellable polymer gel, and the mixture was allowed to stand at 37 ° C. for 15 hours. The degree of dissolution of each water-swellable polymer gel was determined by measuring the supernatant with a filter having a pore size of 0.22 μm (Millipore, Millex GV).
Was examined from the passing property. (Durability) Each water-swellable polymer gel was cut into a size of about 2 cm square, and PBS (10% containing 0.15 M NaCl) was cut.
In a phosphate buffer (mM, pH 7.4), the mixture was heated to 37 ° C., shaken 160 times per minute for 24 hours, and examined for changes in appearance and strength before and after shaking.

【００６５】（細胞毒性試験）各水膨潤性高分子ゲル１
ｇに１０ｍｌの注射用水を加え、３７℃で１５時間静置
した。上清を濾過滅菌（ミリポア社製、マイレクスＧ
Ｖ）したもの５ｍｌに１ｍｌの牛胎児血清と４ｍｌの
２. ２５倍濃縮イーグルＭＥＭ培地（日水製薬株式会
社）を加えて、これにＬ９２９細胞株（ＡＴＣＣ ＣＣ
Ｌ１、ＮＣＴＣ ｃｌｏｎｅ９２９）を３００００個／
ｍｌになるように分散し、１００μｌ／ウエルづつヌン
ク社製９６穴Ｕ底プレートに分注した。プレートを５％
ＣＯ₂ 存在下、３７℃で３日間培養した後、各ウエルの
生細胞数をヨウ化プロピジウムを用いる蛍光法（Brunin
g, J.W., Automated reading of HLA-A,B,C typing and
screening. The propidium iodide method. Hum Immun
ol, 5, 225-231 (1982) 参照）で測定して、水膨潤性高
分子ゲルを加えない注射用水を用いたコントロールと比
較した。(Cytotoxicity test) Each water-swellable polymer gel 1
10 g of water for injection was added to g, and the mixture was allowed to stand at 37 ° C. for 15 hours. The supernatant is sterilized by filtration (Millex G, manufactured by Millipore).
V) 1 ml of fetal calf serum and 4 ml of 2.25-fold concentrated Eagle's MEM medium (Nissui Pharmaceutical Co., Ltd.) were added to 5 ml of the resultant, and L929 cell line (ATCC CC) was added thereto.
L1 and NCTC clone 929)
The mixture was dispersed to 100 ml / well and dispensed at 100 μl / well into a 96-well U-bottom plate manufactured by Nunc. 5% plate
After culturing at 37 ° C. for 3 days in the presence of CO ₂ , the number of viable cells in each well was determined by a fluorescence method using propidium iodide (Brunin
g, JW, Automated reading of HLA-A, B, C typing and
screening. The propidium iodide method. Hum Immun
ol, 5, 225-231 (1982)) and compared with a control using water for injection without adding a water-swellable polymer gel.

【００６６】[0066]

【表１】 [Table 1]

【００６７】（結果）表１より明らかなように、実施例
２で得られた水膨潤性高分子ゲルは、医療用材料の構成
成分としての水膨潤性高分子ゲルに必要とされる全ての
条件を満足し、本目的に適していることが示された。(Results) As is clear from Table 1, the water-swellable polymer gel obtained in Example 2 was obtained from all the water-swellable polymer gels required as constituents of medical materials. It was shown that the conditions were satisfied and that it was suitable for this purpose.

【００６８】試験例２ 実施例２、比較例２および比較例３で得られた水膨潤性
高分子ゲルを参考例２に示した方法と同様にしてシート
状創傷被覆材を得た。ブタの背部に５ｃｍ×５ｃｍの分
創欠損創を計８個作製し、実施例２から得られたシート
状創傷被覆材と比較例２または比較例３から得られたシ
ート状創傷被覆材を、それぞれ隣接する創部に７日間貼
付する、いわゆるハーフサイド試験を各２組づつ行っ
た。Test Example 2 A sheet-like wound dressing was obtained from the water-swellable polymer gels obtained in Example 2, Comparative Example 2 and Comparative Example 3 in the same manner as in Reference Example 2. A total of eight 5 cm × 5 cm wound wounds were created on the back of the pig, and the sheet-shaped wound dressing obtained from Example 2 and the sheet-shaped wound dressing obtained from Comparative Example 2 or Comparative Example 3 were used. A so-called half-side test, in which each pair was affixed to adjacent wounds for 7 days, was performed for each two sets.

【００６９】（結果）実施例２から得られたシート状創
傷被覆材と比較例２から得られたシート状創傷被覆材の
比較において、試験期間中実施例２から得られたシート
状創傷被覆材の方が２例とも透明性において優れてい
た。７日目の治癒傾向も実施例２から得られたシート状
創傷被覆材の方が優れていた。さらに比較例２から得ら
れたシート状創傷被覆材は創部に貼付中に溶解する傾向
があった。実施例２から得られたシート状創傷被覆材と
比較例３から得られたシート状創傷被覆材の比較におい
ては、７日目の治癒傾向と透明性において有意な差を認
めなかったが、比較例３から得られたシート状創傷被覆
材は創部で貼付後数分間で液状化することがわかった。
創傷被覆材が液状化することは以下の点で致命的な欠点
である。即ち、漏れから細菌感染を生じる可能性が大変
高く、一旦感染すると細菌の培地となり大変危険である
こと、衣服やベッドを汚染して周囲に細菌感染を拡げる
可能性が高いことである。これは臨床上大きな問題とな
っている。これを回避するためには頻繁に被覆材交換が
必要であるが、貼り替えによる患者の苦痛、看護の手間
の増大とともに、創にダメージが生じる。さらに保持さ
れていた滲出液中の治癒促進因子が交換の度に失われる
ので、閉鎖性被覆材の最大の利点が発揮できなくなる。
実施例２から得られたシート状創傷被覆材はいずれの試
験においても対照に劣らない治癒率と、透明性を示し、
液状化する傾向は全くなかった。(Results) In the comparison between the sheet-shaped wound dressing obtained from Example 2 and the sheet-shaped wound dressing obtained from Comparative Example 2, the sheet-shaped wound dressing obtained from Example 2 during the test period was used. Was superior in transparency in both cases. The healing tendency on the seventh day was also better with the sheet-shaped wound dressing obtained from Example 2. Furthermore, the sheet-shaped wound dressing obtained from Comparative Example 2 had a tendency to dissolve during application to the wound. In the comparison between the sheet-shaped wound dressing obtained from Example 2 and the sheet-shaped wound dressing obtained from Comparative Example 3, no significant difference was observed in the healing tendency and transparency on the 7th day. It was found that the sheet-shaped wound dressing obtained from Example 3 became liquefied within a few minutes after application at the wound.
Liquefaction of the wound dressing is a fatal disadvantage in the following respects. That is, there is a very high possibility that bacterial infection will occur from the leak, and once infected, the medium becomes a bacterial medium, which is very dangerous, and there is a high possibility that bacterial infection will spread to the surroundings by contaminating clothes and beds. This is a major clinical problem. In order to avoid this, frequent replacement of the covering material is necessary. However, the pain is caused by the replacement and the labor for nursing is increased, and the wound is damaged. In addition, the healing promoting factor in the retained exudate is lost with each exchange, so that the maximum advantage of the occlusive dressing cannot be exhibited.
The sheet-shaped wound dressing obtained from Example 2 showed a healing rate not inferior to the control in any of the tests, and showed transparency,
There was no tendency to liquefy.

【００７０】実施例８ 水膨潤性高分子ゲルとしてアルギン酸ゲル、スペーサー
として-NH-(CH₂)₂-NH-CO-CH₂-NH-CO-(CH₂)₂-CO- 、分解
性基として-(Ala)₂-Pro-Val-、および薬剤としてマフェ
ニド（Mafenide）からなる医療用高分子ゲル〔次式（II
I ）参照〕を、下記に示す方法で製造した。Example 8 Alginate gel as a water-swellable polymer gel, -NH- (CH ₂ ) ₂ -NH-CO-CH ₂ -NH-CO- (CH ₂ ) ₂ -CO- as a spacer, a decomposable group -(Ala) ₂ -Pro-Val- as a drug and a polymer gel for medical use comprising mafenide as a drug [formula (II)
I) was produced by the following method.

【００７１】[0071]

【化１】 Embedded image

【００７２】２. ３ｇ（２０ｍｍｏｌ）のＮ−ヒドロキ
シコハク酸イミド（ＨＯＳｕ、（株）ペプチド研究所）
を酢酸エチル１５０ｍｌに溶解し、１０ｍｌの酢酸エチ
ルに溶解した０. ６ｇ（１０ｍｍｏｌ）のエチレンジア
ミン（ＥＤＡ、和光純薬工業株式会社）を室温で撹拌し
ながら滴下した。滴下終了後さらに１時間撹拌を続け
た。析出した結晶を濾取し、減圧下に乾燥して２. ９ｇ
（収率約１００％）のエチレンジアミン２Ｎ−ヒドロキ
シコハク酸イミド塩（ＥＤＡ・２ＨＯＳｕ）を得た。ア
ルギン酸ナトリウム（和光純薬工業株式会社、１００〜
１５０ｃｐ）の１重量％水溶液１００ｍｌに、０. １１
ｇ（０. ３３ｍｍｏｌ）のＮ- （ｔ- ブチルオキシカル
ボニルグリシル）エチレンジアミンのＨＯＳｕ塩（Ｂｏ
ｃ−Ｇｌｙ−ＥＤＡ・ＨＯＳｕ、（株）ペプチド研究
所）と０. １９ｇ（１ｍｍｏｌ）の１−エチル−３−
（３−ジメチルアミノプロピル）−カルボジイミド塩酸
塩（ＥＤＣ・ＨＣｌ、（株）ペプチド研究所）を加え、
４℃で終夜撹拌した。得られた水溶液をトリフルオロ酢
酸（ＴＦＡ、（株）ペプチド研究所）２００ｍｌ中に滴
下し、室温で１時間撹拌した。生じた沈殿物をメタノー
ルでよく洗浄し、減圧乾燥してＡｌｇｉｎ−ＥＤＡ−Ｇ
ｌｙを得た。ニンヒドリン法で求めたアミノ基の導入量
は２０μｍｏｌ／ｇ（１重量％のゲル換算で、０. ２μ
ｍｏｌ／ｍｌ）であった。また、得られたＡｌｇｉｎ−
ＥＤＡ−Ｇｌｙの０. ０５Ｍ ＮａＨＣＯ₃ 水溶液の２
２０ｎｍ〜４００ｎｍの紫外吸収スペクトルを、光路長
１ｃｍの吸光度測定用セルを用いてベックマン社製ＤＵ
- ６５型分光光度計で測定した結果を第１図に示す。2.3 g (20 mmol) of N-hydroxysuccinimide (HOSu, Peptide Research Laboratories)
Was dissolved in 150 ml of ethyl acetate, and 0.6 g (10 mmol) of ethylenediamine (EDA, Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) dissolved in 10 ml of ethyl acetate was added dropwise with stirring at room temperature. After completion of the dropwise addition, stirring was continued for another hour. The precipitated crystals were collected by filtration and dried under reduced pressure to give 2.9 g.
(Yield: about 100%) ethylenediamine 2N-hydroxysuccinimide salt (EDA.2HOSu) was obtained. Sodium alginate (Wako Pure Chemical Industries, Ltd., 100-
150 cp) in 100 ml of a 1% by weight aqueous solution.
g (0.33 mmol) of HOSu salt of N- (t-butyloxycarbonylglycyl) ethylenediamine (Bo
c-Gly-EDA.HOSu, Peptide Research Institute, Inc.) and 0.19 g (1 mmol) of 1-ethyl-3-
(3-Dimethylaminopropyl) -carbodiimide hydrochloride (EDC · HCl, Peptide Research Institute) was added,
Stirred at 4 ° C. overnight. The obtained aqueous solution was dropped into 200 ml of trifluoroacetic acid (TFA, Peptide Research Laboratories) and stirred at room temperature for 1 hour. The resulting precipitate is thoroughly washed with methanol, dried under reduced pressure, and dried with Algin-EDA-G.
ly was obtained. The introduced amount of amino group determined by the ninhydrin method was 20 μmol / g (0.2 μmol in terms of gel of 1% by weight).
mol / ml). In addition, the obtained Algin-
EDA-Gly in 0.05M NaHCO ₃ aqueous solution 2
The UV absorption spectrum of 20 nm to 400 nm was measured using a Beckman DU using an absorbance measurement cell having an optical path length of 1 cm.
FIG. 1 shows the results of measurement with a 65-type spectrophotometer.

【００７３】液相合成法により得られた４６ｍｇ（０.
１ｍｍｏｌ）のBoc-(Ala)₂-Pro-Valと２２ｍｇ（０. １
ｍｍｏｌ）のマフェニド塩酸塩（Ｓｉｇｍａ）をジメチ
ルホルムアミド（ＤＭＦ）に溶解し、１４ｍｇ（０. １
ｍｍｏｌ）のヒドロキシベンズトリアゾ−ル（ＨＯＢ
ｔ、（株）ペプチド研究所）と９５ｍｇ（０. ５ｍｍｏ
ｌ）のＥＤＣ・ＨＣｌと１４μｌ（０. １ｍｍｏｌ）の
トリエチルアミンを加えて氷冷下１時間、その後室温で
一晩撹拌した。水を加えて析出する不溶物を濾取し、水
洗後減圧下に乾燥して３５ｍｇ（収率５０％）のBoc-(A
la)₂-Pro-Val-Mafenide を得た。得られたBoc-(Ala)₂-P
ro-Val-Mafenide の全量を５％の水を含むＴＦＡ１０ｍ
ｌに溶解して室温で１時間静置し、その後ジエチルエ−
テルで沈殿させて(Ala)₂-Pro-Val-Mafenide を得た。得
られた(Ala)₂-Pro-Val-Mafenide の全量をＤＭＦに溶解
し、１５ｍｇ（０. １５ｍｍｏｌ）の無水コハク酸を加
えて、室温で終夜撹拌することにより約２０ｍｇのSuc-
(Ala)₂-Pro-Val-Mafenide を得た。１重量％のＡｌｇｉ
ｎ−ＥＤＡ−Ｇｌｙの ０．０５Ｍ ＮａＨＣＯ₃ 水溶
液５ｍｌに、７ｍｇ（１０μｍｏｌ）のSuc-(Ala)₂-Pro
-Val-Mafenide と９５ｍｇ（０. ５ｍｍｏｌ）のＥＤＣ
・ＨＣｌを加えて４℃で終夜撹拌した。さらに、１１ｍ
ｇ（３８μｍｏｌ）のＥＤＡ・２ＨＯＳｕと０. １９ｇ
（１ｍｍｏｌ）のＥＤＣ・ＨＣｌを加えて溶解した後、
直径３ｃｍのシャーレに流延し、室温で１日静置してゲ
ル化させた。得られたゲルを純水中でよく洗浄し、エタ
ノールに置換後、無菌的に減圧乾燥して乾燥シート状の
医療用高分子ゲルを得た。46 mg (0.4%) obtained by the liquid phase synthesis method.
1 mmol) of Boc- (Ala) ₂ -Pro-Val and 22 mg (0.1
mmol) of mafenide hydrochloride (Sigma) was dissolved in dimethylformamide (DMF) and 14 mg (0.1
mmol) of hydroxybenztriazole (HOB)
t, Peptide Research Institute Co., Ltd.) and 95 mg (0.5 mmol)
1) EDC · HCl and 14 μl (0.1 mmol) of triethylamine were added, and the mixture was stirred for 1 hour under ice-cooling and then overnight at room temperature. Water was added, and the precipitated insoluble material was collected by filtration, washed with water, and dried under reduced pressure to obtain 35 mg (yield 50%) of Boc- (A
la) I got ₂ -Pro-Val-Mafenide. Boc- (Ala) ₂ -P obtained
ro-Val-Mafenide total amount of TFA 10m containing 5% water
and left at room temperature for 1 hour.
Precipitation with tel gave (Ala) ₂ -Pro-Val-Mafenide. The total amount of the obtained (Ala) ₂ -Pro-Val-Mafenide was dissolved in DMF, 15 mg (0.15 mmol) of succinic anhydride was added, and the mixture was stirred at room temperature overnight to obtain about 20 mg of Suc-
(Ala) ₂ -Pro-Val-Mafenide was obtained. 1% by weight Algi
7 mg (10 μmol) of Suc- (Ala) ₂ -Pro was added to 5 ml of a 0.05 M NaHCO ₃ aqueous solution of n-EDA-Gly.
-Val-Mafenide and 95mg (0.5mmol) EDC
HCl was added and stirred at 4 ° C. overnight. In addition, 11m
g (38 μmol) of EDA · 2HOSu and 0.19 g
(1 mmol) of EDC · HCl was added and dissolved.
The mixture was cast on a petri dish having a diameter of 3 cm, and allowed to stand at room temperature for 1 day to gel. The obtained gel was thoroughly washed in pure water, replaced with ethanol, and then dried under reduced pressure under aseptic conditions to obtain a dried sheet-shaped medical polymer gel.

【００７４】実施例９ 水膨潤性高分子ゲルとしてＰＶＡゲル、スペーサーとし
て-CH₂-CH(OH)-CH₂-NH-CO-(CH₂)₂CO- 、分解性基として
-Ala-Gly-Phe- 、および薬剤としてアクリノール（ＡＣ
Ｒ）からなる医療用高分子ゲル〔次式（IV）参照〕を、
下記に示す方法で製造した。Example 9 PVA gel as a water-swellable polymer gel, -CH ₂ -CH (OH) -CH ₂ -NH-CO- (CH ₂ ) ₂ CO- as a spacer, and a decomposable group
-Ala-Gly-Phe- and acrinol (AC
R) a medical polymer gel (see the following formula (IV))
It was manufactured by the method shown below.

【００７５】[0075]

【化２】 Embedded image

【００７６】２重量％のＰＶＡ（平均重合度１７９０
０、ケン化度９９．９％、ダイアッド表示によるシンジ
オタクティシティー５３％）水溶液を、−７０℃に冷却
したｎ−ヘキサン中に撹拌しながら滴下した後、室温融
解と−７０℃凍結を２回繰り返してＰＶＡゲルビーズを
得た。得られたＰＶＡゲルビーズをアセトンでよく洗浄
して減圧乾燥した。乾燥ＰＶＡゲルビーズ２０ｇを０．
５Ｎ ＮａＯＨ水溶液５０ｍｌとジオキサン５０ｍｌの
混合液に懸濁し、エピクロルヒドリン１０ｍｌと約４０
℃で２時間反応させて、エポキシ化ＰＶＡゲルビーズを
得た。水洗後、１００ｍｌのアンモニア水に懸濁し、約
４０℃で２時間反応させてアミノ化ＰＶＡゲルビーズを
得た。得られたアミノ化ＰＶＡゲルビーズをアセトンで
よく洗浄して減圧乾燥した。ニンヒドリン法で求めたア
ミノ基の導入量は５０μｍｏｌ／ｇ（２重量％のゲル換
算で、１μｍｏｌ／ｍｌ）であった。実施例８におけ
る、Boc-(Ala)₂-Pro-Valの代わりにBoc-Ala-Gly-Phe
を、マフェニドの代わりにアクリノール（和光純薬工業
株式会社）を用いる以外は同様の方法によりSuc-Ala-Gl
y-Phe-ACR を得た。アミノ化ＰＶＡゲルビーズ１００ｍ
ｇを０．０５Ｍ ＮａＨＣＯ₃ 水溶液１０ｍｌに懸濁
し、６ｍｇ（１０μｍｏｌ）のSuc-Ala-Gly-Phe-ACR と
９６ｍｇ（０. ５ｍｍｏｌ）のＥＤＣ・ＨＣｌを加えて
４℃で終夜撹拌した。よく水洗した後、エタノールに置
換し、無菌的に減圧乾燥することにより、ビーズ状の医
療用高分子ゲルを得た。2% by weight of PVA (average degree of polymerization 1790)
0, a saponification degree of 99.9%, and a syndiotacticity of 53% as indicated by a diad) were dropped into n-hexane cooled to -70 ° C while stirring, followed by melting at room temperature and freezing at -70 ° C for 2 hours. This was repeated twice to obtain PVA gel beads. The obtained PVA gel beads were thoroughly washed with acetone and dried under reduced pressure. Add 20 g of dry PVA gel beads to 0.
Suspended in a mixture of 50 ml of 5N NaOH aqueous solution and 50 ml of dioxane, 10 ml of epichlorohydrin and about 40
The reaction was performed at 2 ° C. for 2 hours to obtain epoxidized PVA gel beads. After washing with water, the suspension was suspended in 100 ml of aqueous ammonia and reacted at about 40 ° C. for 2 hours to obtain aminated PVA gel beads. The obtained aminated PVA gel beads were thoroughly washed with acetone and dried under reduced pressure. The amount of amino groups introduced by the ninhydrin method was 50 μmol / g (1 μmol / ml in terms of a gel of 2% by weight). In Example 8, Boc-Ala-Gly-Phe was used instead of Boc- (Ala) ₂ -Pro-Val
Was replaced with Suc-Ala-Gl by the same method except that acrinol (Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) was used instead of mafenide.
y-Phe-ACR was obtained. Aminated PVA gel beads 100m
was suspended in 10 ml of a 0.05 M NaHCO ₃ aqueous solution, 6 mg (10 μmol) of Suc-Ala-Gly-Phe-ACR and 96 mg (0.5 mmol) of EDC · HCl were added, and the mixture was stirred at 4 ° C. overnight. After thoroughly washing with water, the mixture was replaced with ethanol and dried under reduced pressure under aseptic conditions to obtain a bead-shaped medical polymer gel.

【００７７】実施例１０ 水膨潤性高分子ゲルとしてＰＶＡゲル、スペーサーとし
て-CH₂-CH(OH)-CH₂-NH-CO-(CH₂)₂CO- 、分解性基として
-Ala-Ala-Phe- 、および薬剤としてゲンタマイシン（Ｇ
Ｍ）からなる医療用高分子ゲル〔次式（Ｖ）参照〕を、
下記に示す方法で製造した。Example 10 PVA gel as a water-swellable polymer gel, -CH ₂ -CH (OH) -CH ₂ -NH-CO- (CH ₂ ) ₂ CO- as a spacer, and a decomposable group
-Ala-Ala-Phe- and gentamicin (G
M) a medical polymer gel (see the following formula (V))
It was manufactured by the method shown below.

【００７８】[0078]

【化３】 Embedded image

【００７９】実施例９と同様の２重量％ＰＶＡ水溶液３
０ｍｌを１０ｃｍ×１０ｃｍのガラス板上に流延し、−
２０℃に一晩静置して凍結した。さらに、室温での融解
と−２０℃の凍結を２回繰り返してＰＶＡゲルシートを
得た。実施例９と同様の方法でＰＶＡゲルシートにアミ
ノ基を導入した。水膨潤状態でニンヒドリン法により測
定したアミノ基導入量は２０μｍｏｌ／ｍｌであった。
アミノ化されたＰＶＡゲルシートを１００ｍｌのジオキ
サン中で１ｇの無水コハク酸と一晩振盪し、その後水洗
してカルボキシル基の導入されたＰＶＡゲルシートを得
た。ニンヒドリン法ではアミノ基が検出されず、カルボ
キシル基の導入量は２０μｍｏｌ／ｍｌと計算された。
さらにジオキサン１００ｍｌ中でカルボキシル基の導入
されたＰＶＡゲルシートと０. ２３ｇ（２ｍｍｏｌ）の
ＨＯＳｕと０. ４ｇ（２ｍｍｏｌ）のＤＣＣとを室温で
一晩振盪した。メタノールで良く洗浄した後、固相法で
合成した７４ｍｇ（０. ２ｍｍｏｌ）の-Ala-Ala-Phe-
を溶解した１０ｍＭリン酸塩緩衝液（ＰＢ、ｐＨ７.
４）１０ｍｌを加え、４℃で一晩振盪した。よく水洗し
た後、ゲンタマイシン硫酸塩（ＧＭ、シグマ）０. ３７
ｇ（０. ５ｍｍｏｌ）と０. ３８ｇ（２ｍｍｏｌ）のＥ
ＤＣ・ＨＣｌを加えて４℃で終夜撹拌した。よく水洗し
てシート状の医療用高分子ゲルを得た。The same 2% by weight aqueous PVA solution 3 as in Example 9
0 ml is cast on a 10 cm × 10 cm glass plate,
It was left standing at 20 ° C. overnight and frozen. Furthermore, melting at room temperature and freezing at -20 ° C were repeated twice to obtain a PVA gel sheet. Amino groups were introduced into the PVA gel sheet in the same manner as in Example 9. The amino group introduction amount measured by the ninhydrin method in a water-swelled state was 20 μmol / ml.
The aminated PVA gel sheet was shaken overnight with 1 g of succinic anhydride in 100 ml of dioxane, and then washed with water to obtain a carboxyl group-introduced PVA gel sheet. No amino groups were detected by the ninhydrin method, and the amount of carboxyl groups introduced was calculated to be 20 μmol / ml.
Further, in 100 ml of dioxane, a PVA gel sheet into which a carboxyl group was introduced, and 0.23 g (2 mmol) of HOSu and 0.4 g (2 mmol) of DCC were shaken at room temperature overnight. After washing well with methanol, 74 mg (0.2 mmol) of -Ala-Ala-Phe-
Was dissolved in 10 mM phosphate buffer (PB, pH 7.
4) 10 ml was added and shaken at 4 ° C overnight. After thorough washing with water, gentamicin sulfate (GM, Sigma) 0.37
g (0.5 mmol) and 0.38 g (2 mmol) of E
DC.HCl was added and the mixture was stirred at 4 ° C. overnight. After washing well with water, a sheet-shaped medical polymer gel was obtained.

【００８０】実施例１１ 水膨潤性高分子ゲルとしてアルギン酸ゲル、スペーサー
として-NH-(CH₂)₂-NH-CO-CH₂-NH-CO-(CH₂)₂-CO- 、分解
性基として-Ala-Ala-Phe- 、および薬剤としてノルフロ
キサシン（ＮＦＬＸ）からなる医療用高分子ゲル〔次式
（VI）参照〕を、下記に示す方法で製造した。Example 11 Alginate gel as a water-swellable polymer gel, -NH- (CH ₂ ) ₂ -NH-CO-CH ₂ -NH-CO- (CH ₂ ) ₂ -CO- as a spacer, a decomposable group -Ala-Ala-Phe-, and a pharmaceutical polymer gel comprising norfloxacin (NFLX) [see the following formula (VI)] were produced by the following method.

【００８１】[0081]

【化４】 Embedded image

【００８２】アルギン酸ナトリウム（和光純薬工業株式
会社、５００〜６００ｃｐ）の１重量％水溶液１００ｍ
ｌに、０. １１ｇ（０. ３３ｍｍｏｌ）のＢｏｃ−Ｇｌ
ｙ−ＥＤＡ・ＨＯＳｕと０. ９６ｇ（５ｍｍｏｌ）のＥ
ＤＣ・ＨＣｌを加え、４℃で終夜撹拌した。得られた水
溶液をＴＦＡ２００ｍｌ中に滴下し、室温で１時間撹拌
した。不溶物をメタノールでよく洗浄し、減圧乾燥して
Ａｌｇｉｎ−ＥＤＡ−Ｇｌｙを得た。ニンヒドリン法で
求めたアミノ基の導入量は５５μｍｏｌ／ｇ（１重量％
のゲル換算で、０. ５５μｍｏｌ／ｍｌ）であった。ま
た、得られたＡｌｇｉｎ−ＥＤＡ−Ｇｌｙの０. ０５Ｍ
ＮａＨＣＯ₃ 水溶液の２２０ｎｍ〜４００ｎｍの紫外
吸収スペクトルは第１図とほぼ同等であった。得られた
Ａｌｇｉｎ−ＥＤＡ−Ｇｌｙを１重量％となるように
０. ０５ＭＮａＨＣＯ₃ 水溶液に溶解した溶液１０ｍｌ
に、氷冷撹拌下５ｍｇ（５０μｍｏｌ）の無水コハク酸
を加え、５規定のＮａＯＨ水溶液を滴下することにより
ｐＨを７前後に保った。およそ２時間でｐＨが低下しな
くなった。反応液を４℃で純水に対して２日間透析し
て、Ａｌｇｉｎ−ＥＤＡ−Ｇｌｙ−Ｓｕｃを得た。ニン
ヒドリン法で求めた残存アミノ基量は４μｍｏｌ／ｇで
あり、カルボキシル基の導入率は１重量％のゲル換算
で、０. ５１μｍｏｌ／ｍｌと計算された。100 g of a 1% by weight aqueous solution of sodium alginate (Wako Pure Chemical Industries, Ltd., 500-600 cp)
In 1 l, 0.11 g (0.33 mmol) of Boc-Gl
y-EDA.HOSu and 0.96 g (5 mmol) of E
DC.HCl was added, and the mixture was stirred at 4 ° C. overnight. The obtained aqueous solution was dropped into 200 ml of TFA and stirred at room temperature for 1 hour. The insolubles were thoroughly washed with methanol and dried under reduced pressure to obtain Algin-EDA-Gly. The introduced amount of amino group determined by the ninhydrin method was 55 μmol / g (1% by weight).
(In terms of gel) was 0.55 μmol / ml). In addition, 0.05M of the obtained Algin-EDA-Gly was used.
The UV absorption spectrum of the aqueous NaHCO ₃ solution at 220 nm to 400 nm was almost equivalent to FIG. 10 ml of a solution obtained by dissolving the obtained Algin-EDA-Gly in a 0.05 M NaHCO ₃ aqueous solution so as to be 1% by weight.
To the mixture was added 5 mg (50 μmol) of succinic anhydride under ice-cooling and stirring, and the pH was maintained at about 7 by dropwise addition of a 5 N aqueous NaOH solution. The pH did not drop in about 2 hours. The reaction solution was dialyzed against pure water at 4 ° C. for 2 days to obtain Algin-EDA-Gly-Suc. The amount of residual amino groups determined by the ninhydrin method was 4 μmol / g, and the introduction ratio of carboxyl groups was calculated to be 0.51 μmol / ml in terms of gel of 1% by weight.

【００８３】１０ｍｌの１重量％のＡｌｇｉｎ−ＥＤＡ
−Ｇｌｙ−Ｓｕｃ水溶液に、５ｍｇ（４０μｍｏｌ）の
ＨＯＳｕと４０ｍｇ（２００μｍｏｌ）のＥＤＣ・ＨＣ
ｌを加え、４℃で終夜撹拌しＡｌｇｉｎ−ＥＤＡ−Ｇｌ
ｙ−Ｓｕｃ−ＯＳｕを得た。この反応液に、固相合成法
で得られた１３ｍｇ（４０μｍｏｌ）のAla-Ala-Pheを
ＰＢ１ｍｌに溶解したものを加え、４℃で終夜撹拌し
た。反応液を純水に対して２日間透析して、Ａｌｇｉｎ
−ＥＤＡ−Ｇｌｙ−Ｓｕｃ−Ala-Ala-Phe を得た。得ら
れたＡｌｇｉｎ−ＥＤＡ−Ｇｌｙ−Ｓｕｃ−Ala-Ala-Ph
e を純水で１０倍希釈して測定した紫外吸収スペクトル
を第２図に示す。２５８ｎｍにフェニルアラニン（Phe
）のフェニル基に由来する吸収が認められた。得られ
たＡｌｇｉｎ−ＥＤＡ−Ｇｌｙ−Ｓｕｃ−Ala-Ala-Phe
の全量に、５ｍｇ（４０μｍｏｌ）のＨＯＳｕと４０ｍ
ｇ（２００μｍｏｌ）のＥＤＣ・ＨＣｌを加え、４℃で
終夜撹拌した。さらに、１ｍｌのジメチルスルフォキシ
ド（ＤＭＳＯ）に溶解した１３ｍｇ（３６μｍｏｌ）の
ノルフロキサシン（ＮＦＬＸ、Ｓｉｇｍａ）を加えて４
℃で終夜撹拌した。その後、２２ｍｇ（７６μｍｏｌ）
のＥＤＡ・２ＨＯＳｕと１５５ｍｇ（１ｍｍｏｌ）のＥ
ＤＣを加えて溶解した後、直径８ｃｍのシャーレに流延
し、室温で１日静置してゲル化させた。得られたゲルを
生理食塩液で良く洗浄してシート状の医療用高分子ゲル
を得た。得られたゲルの紫外吸収スペクトルを第３図に
示す。２８０ｎｍと３３０ｎｍにノルフロキサシンに由
来する吸収が認められた。10 ml of 1% by weight Algin-EDA
-5 mg (40 μmol) of HOSu and 40 mg (200 μmol) of EDC / HC in Gly-Suc aqueous solution
and stirred at 4 ° C. overnight to remove Algin-EDA-Gl.
y-Suc-OSu was obtained. To this reaction solution, a solution prepared by dissolving 13 mg (40 μmol) of Ala-Ala-Phe obtained by the solid phase synthesis method in 1 ml of PB was added and stirred at 4 ° C. overnight. The reaction solution was dialyzed against pure water for 2 days, and Algin
-EDA-Gly-Suc-Ala-Ala-Phe was obtained. Obtained Algin-EDA-Gly-Suc-Ala-Ala-Ph
FIG. 2 shows an ultraviolet absorption spectrum measured by diluting e with pure water 10-fold. Phenylalanine (Phe) at 258 nm
) Absorption due to the phenyl group was observed. Obtained Algin-EDA-Gly-Suc-Ala-Ala-Phe
5mg (40μmol) HOSu and 40m
g (200 μmol) of EDC · HCl was added, and the mixture was stirred at 4 ° C. overnight. Further, 13 mg (36 μmol) of norfloxacin (NFLX, Sigma) dissolved in 1 ml of dimethyl sulfoxide (DMSO) was added thereto, and
Stirred at C overnight. Then, 22mg (76μmol)
Of EDA · 2HOSu and 155 mg (1 mmol) of E
After adding and dissolving DC, the mixture was cast on a petri dish having a diameter of 8 cm, and allowed to stand at room temperature for 1 day to gel. The obtained gel was washed well with a physiological saline solution to obtain a sheet-shaped medical polymer gel. FIG. 3 shows an ultraviolet absorption spectrum of the obtained gel. Absorptions derived from norfloxacin were observed at 280 nm and 330 nm.

【００８４】実施例１２ 水膨潤性高分子ゲルとしてアルギン酸ゲル、スペーサー
として-NH-(CH₂)₂-NH-CO-CH₂-NH-CO-(CH₂)₂-CO- 、分解
性基として-Ala-Ala-Phe- 、および薬剤としてゲンタマ
イシン（ＧＭ）からなる医療用高分子ゲル〔次式（VII)
参照〕を、下記に示す方法で製造した。Example 12 Alginate gel as a water-swellable polymer gel, -NH- (CH ₂ ) ₂ -NH-CO-CH ₂ -NH-CO- (CH ₂ ) ₂ -CO- as a spacer, decomposable group -Ala-Ala-Phe- as a medical polymer gel comprising gentamicin (GM) as a drug [Formula (VII)
Was produced by the following method.

【００８５】[0085]

【化５】 Embedded image

【００８６】４. ７ｇ（０. ０１ｍｏｌ）のＮα−フル
オレニルメトキシカルボニル−Ｎε−ｔ−ブチルオキシ
カルボニル−Ｌ−リジン（Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏ
ｃ）、（株）ペプチド研究所）と１. １５ｇ（０. ０１
ｍｏｌ）のＨＯＳｕを酢酸エチル５０ｍｌに溶解し、氷
冷下に撹拌しながら１. ７ｇ（０. ０１１ｍｏｌ）のＤ
ＣＣを加え、氷冷下１時間、その後室温で一晩撹拌し
た。不溶物を濾過して除き、濾液を減圧濃縮して得られ
る結晶をイソプロピルアルコール−酢酸エチルから再結
晶した。結晶を減圧乾燥して４. ７ｇ（収率８０％）の
Ｎα−フルオレニルメトキシカルボニル−Ｎε−ｔ−ブ
チルオキシカルボニル−Ｌ−リジル−N −ヒドロキシ無
水コハク酸イミドエステル（Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏ
ｃ）−ＯＳｕ）を得た。２. ８２ｇ（５ｍｍｏｌ）のＦ
ｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）−ＯＳｕを酢酸エチル５０ｍ
ｌに溶解して室温で撹拌しながら、０. １５ｇ（２. ５
ｍｍｏｌ）のエチレンジアミンを溶解した酢酸エチル溶
液１０ｍｌを滴下した。滴下終了後さらに一晩撹拌を続
けた。析出する結晶を濾取して、減圧下に乾燥して２.
４ｇ（収率１００％）のＮ、Ｎ’−ジ（Ｎα−フルオレ
ニルメトキシカルボニル−Ｎε−ｔ−ブチルオキシカル
ボニル−Ｌ−リジル）−エチレンジアミン（（Ｆｍｏｃ
−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ））₂ −ＥＤＡ）を得た。4.7 g (0.01 mol) of Nα-fluorenylmethoxycarbonyl-Nε-t-butyloxycarbonyl-L-lysine (Fmoc-Lys (Bo)
c), Peptide Research Institute, Inc.) and 1.15 g (0.01
mol of HOSu) in 50 ml of ethyl acetate, and 1.7 g (0.011 mol) of D was stirred under ice cooling.
CC was added, and the mixture was stirred under ice-cooling for 1 hour and then at room temperature overnight. The insolubles were removed by filtration, and the filtrate was concentrated under reduced pressure, and the resulting crystals were recrystallized from isopropyl alcohol-ethyl acetate. The crystals were dried under reduced pressure to obtain 4.7 g (yield 80%) of Nα-fluorenylmethoxycarbonyl-Nε-t-butyloxycarbonyl-L-lysyl-N-hydroxysuccinimide (Fmoc-Lys (Bo)
c) -OSu) was obtained. 2. 82 g (5 mmol) of F
moc-Lys (Boc) -OSu was treated with ethyl acetate 50m
and stirred at room temperature with 0.15 g (2.5
(mmol) of ethylenediamine in 10 ml of an ethyl acetate solution. After completion of the dropwise addition, stirring was continued overnight. The precipitated crystals are collected by filtration and dried under reduced pressure.
4 g (100% yield) of N, N′-di (Nα-fluorenylmethoxycarbonyl-Nε-t-butyloxycarbonyl-L-lysyl) -ethylenediamine ((Fmoc
-Lys (Boc)) ₂ -EDA) was obtained.

【００８７】得られた（Ｆｍｏｃ−Ｌｙｓ（Ｂｏｃ））
₂ −ＥＤＡの全量を２００ｍｌのジオキサンに懸濁し、
４０ｍｌのピペリジン（和光純薬工業株式会社）を加え
室温で１時間撹拌した。減圧濃縮して得られる結晶をジ
エチルエーテルで洗浄した後、減圧下に乾燥してＮ、
Ｎ’−ジ（Ｎε−ｔ−ブチルオキシカルボニル−Ｌ−リ
ジル）−エチレンジアミン（（Ｌｙｓ（Ｂｏｃ））₂ −
ＥＤＡ）を得た。得られた（（Ｌｙｓ（Ｂｏｃ））₂ −
ＥＤＡ）の全量を１０ｍｌのＴＦＡに溶解し、室温で２
時間撹拌した。減圧濃縮して得られる結晶をジエチルエ
ーテルで洗浄した後、減圧下に乾燥してＮ、Ｎ’−ジ
（Ｌ−リジル）−エチレンジアミントリフルオロ酢酸塩
（（Ｌｙｓ）₂ −ＥＤＡ・４ＴＦＡ）を得た。得られた
全量の（Ｌｙｓ）₂ −ＥＤＡ・４ＴＦＡを５０ｍｌの精
製水に溶解し、１ＭのＨＯＳｕ水溶液で平衡化した２０
ｇのジエチルアミノエチルセルロース（ＤＥ５２、ワッ
トマン）を充填したカラムに通じ、通過液を減圧濃縮し
てＮ、Ｎ’−ジ（Ｌ−リジル）−エチレンジアミンN −
ヒドロキシコハク酸イミド塩（（Ｌｙｓ）₂ −ＥＤＡ・
４ＨＯＳｕ）０. ７８ｇ（収率４０％）を得た。アルギ
ン酸ナトリウム（和光純薬工業株式会社、５００〜６０
０ｃｐ）の１重量％水溶液３０ｍｌに、０. ２９ｇ
（０. ３７５ｍｍｏｌ）の（Ｌｙｓ）₂ −ＥＤＡ・４Ｈ
ＯＳｕおよび０. ９６ｇ（５ｍｍｏｌ）のＥＤＣ・ＨＣ
ｌを溶解して、１２ｃｍ×８ｃｍのポリスチレン製トレ
イに流延し室温で静置した。およそ１５時間後にゲルが
得られた。The obtained (Fmoc-Lys (Boc))
The entire amount of _2- EDA is suspended in 200 ml of dioxane,
40 ml of piperidine (Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) was added, and the mixture was stirred at room temperature for 1 hour. The crystals obtained by concentration under reduced pressure are washed with diethyl ether, and then dried under reduced pressure to obtain N,
N′-di (Nε-t-butyloxycarbonyl-L-lysyl) -ethylenediamine ((Lys (Boc)) ₂ —
EDA) was obtained. The obtained ((Lys (Boc)) _2-
EDA) was dissolved in 10 ml of TFA, and
Stirred for hours. The crystals obtained by concentration under reduced pressure are washed with diethyl ether and then dried under reduced pressure to obtain N, N'-di (L-lysyl) -ethylenediaminetrifluoroacetic acid salt ((Lys) ₂ -EDA.4TFA). Was. The total amount of (Lys) ₂ -EDA.4TFA obtained was dissolved in 50 ml of purified water and equilibrated with a 1 M aqueous HOSu solution.
g of diethylaminoethylcellulose (DE52, Whatman), and the filtrate is concentrated under reduced pressure to give N, N′-di (L-lysyl) -ethylenediamine N −.
Hydroxysuccinimide salt ((Lys) ₂ -EDA.
0.78 g (40% yield of 4HOSu) was obtained. Sodium alginate (Wako Pure Chemical Industries, Ltd., 500-60
0cp) in 30 ml of a 1% by weight aqueous solution.
(0.375 mmol) of (Lys) ₂ -EDA · 4H
OSu and 0.96 g (5 mmol) of EDC · HC
was melted, cast on a 12 cm × 8 cm polystyrene tray, and allowed to stand at room temperature. A gel was obtained after approximately 15 hours.

【００８８】得られたゲルをよく水洗した後、３３ｍｇ
（０. １ｍｍｏｌ）のＢｏｃ−Ｇｌｙ−ＥＤＡ・ＨＯＳ
ｕと０. ３８ｇ（２ｍｍｏｌ）のＥＤＣ・ＨＣｌを加
え、４℃で終夜振盪した。さらに、ポリプロピレン製の
トレイ中で１００ｍｌのＴＦＡと、室温で２時間振盪し
た。ニンヒドリン法で求めた、ゲル１ｍｌあたりのアミ
ノ基量は０. ３４μｍｏｌであった。得られたゲルに２
０ｍｇ（０. １ｍｍｏｌ）の無水コハク酸を加え、振盪
しながら５規定のＮａＯＨ水溶液を滴下してｐＨを７前
後に保った。およそ５時間でｐＨが低下しなくなった。
純水でよく洗浄した後のゲル中の残存アミノ基量はほと
んど検出されず、カルボキシル基の導入率は、０. ３４
μｍｏｌ／ｍｌと計算された。さらに、２０ｍｇ（０.
１６ｍｍｏｌ）のＨＯＳｕと１６０ｍｇ（０. ８ｍｍｏ
ｌ）のＥＤＣ・ＨＣｌを加え、４℃で終夜振盪した。こ
れに、固相合成法で得られた１３ｍｇ（４０μｍｏｌ）
の-Ala-Ala-Phe- をＰＢ１ｍｌに溶解したものを加え、
４℃で終夜撹拌した。得られたゲルをよく水洗した後、
２０ｍｇ（０.１６ｍｍｏｌ）のＨＯＳｕと１６０ｍｇ
（０. ８ｍｍｏｌ）のＥＤＣ・ＨＣｌを加え、４℃で終
夜振盪した。これに、２０ｍｌの０．０５Ｍ ＮａＨＣ
Ｏ₃ 水溶液に溶解した３０ｍｇ（４０μｍｏｌ）のＧＭ
と３８ｍｇ（０. ２ｍｍｏｌ）のＥＤＣ・ＨＣｌを加え
て、４℃で終夜振盪した。得られたゲルを生理食塩液で
良く洗浄して透明なシート状の医療用高分子ゲルを得
た。After thoroughly washing the obtained gel with water, 33 mg
(0.1 mmol) Boc-Gly-EDA.HOS
u and 0.38 g (2 mmol) of EDC.HCl were added, and the mixture was shaken at 4 ° C. overnight. Furthermore, it was shaken with 100 ml of TFA in a polypropylene tray at room temperature for 2 hours. The amount of amino groups per 1 ml of the gel determined by the ninhydrin method was 0.34 μmol. 2 in the resulting gel
0 mg (0.1 mmol) of succinic anhydride was added, and a 5N aqueous solution of NaOH was added dropwise with shaking to keep the pH at around 7. The pH did not drop in about 5 hours.
The amount of residual amino groups in the gel after well washing with pure water was hardly detected, and the introduction ratio of carboxyl groups was 0.34.
It was calculated as μmol / ml. In addition, 20 mg (0.
(16 mmol) HOSu and 160 mg (0.8 mmol)
1) EDC · HCl was added, and the mixture was shaken at 4 ° C. overnight. 13 mg (40 μmol) obtained by the solid phase synthesis method
-Ala-Ala-Phe- dissolved in 1 ml of PB is added,
Stirred at 4 ° C. overnight. After washing the obtained gel well,
20mg (0.16mmol) HOSu and 160mg
(0.8 mmol) of EDC.HCl was added and shaken at 4 ° C. overnight. 20 ml of 0.05 M NaHC
30 mg (40 μmol) of GM dissolved in O ₃ aqueous solution
And 38 mg (0.2 mmol) of EDC · HCl were added, and the mixture was shaken at 4 ° C. overnight. The obtained gel was thoroughly washed with a physiological saline solution to obtain a transparent sheet-shaped medical polymer gel.

【００８９】実施例１３ 水膨潤性高分子ゲルとしてアルギン酸ゲル、スペーサー
として-NH-(CH₂)₂-NH-CO-CH₂-NH-CO-(CH₂)₂-CO- 、分解
性基として-Gly-Pro-Leu-Gly-Pro- 、および薬剤として
形質転換成長因子β（ＴＧＦ- β）からなる医療用高分
子ゲル〔次式（VIII）参照〕を、下記に示す方法で製造
した。Example 13 Alginate gel as a water-swellable polymer gel, -NH- (CH ₂ ) ₂ -NH-CO-CH ₂ -NH-CO- (CH ₂ ) ₂ -CO- as a spacer, a decomposable group -Gly-Pro-Leu-Gly-Pro- as a pharmaceutical polymer gel comprising transforming growth factor β (TGF-β) as a drug [see the following formula (VIII)] was produced by the method shown below. .

【００９０】[0090]

【化６】 Embedded image

【００９１】アルギン酸ナトリウム（和光純薬工業株式
会社、５００〜６００ｃｐ）の１重量％水溶液３０ｍｌ
に、３３ｍｇ（０. １ｍｍｏｌ）のＢｏｃ−Ｇｌｙ−Ｅ
ＤＡ・ＨＯＳｕと０. ２９ｇ（０. ３７５ｍｍｏｌ）の
（Ｌｙｓ）₂ −ＥＤＡ・４ＨＯＳｕおよび０. ９６ｇ
（５ｍｍｏｌ）のＥＤＣ・ＨＣｌを溶解して、１２ｃｍ
×８ｃｍのポリスチレン製トレイに流延し、４℃で１
日、その後室温で１日間静置してゲル化させた。実施例
１２と同様の方法でＴＦＡ処理を行った。よく水洗した
後、水膨潤状態でニンヒドリン法により測定したところ
アミノ基導入量は３０μｍｏｌ／ｍｌであった。さら
に、実施例１２と同様の方法で無水コハク酸と反応させ
てカルボキシル基を導入した。得られたゲルをよく水洗
した後、２０ｍｇ（０. １６ｍｍｏｌ）のＨＯＳｕと１
６０ｍｇ（０. ８ｍｍｏｌ）のＥＤＣ・ＨＣｌを加え、
４℃で終夜振盪した。これに、固相法で合成した２２ｍ
ｇ（５０μｍｏｌ）のGly-Pro-Leu-Gly-Pro を溶解した
ＰＢ１０ｍｌを加え、４℃で一晩振盪した。得られたゲ
ルをよく水洗した後、２０ｍｇ（０. １６ｍｍｏｌ）の
ＨＯＳｕと１６０ｍｇ（０. ８ｍｍｏｌ）のＥＤＣ・Ｈ
Ｃｌを加え、４℃で終夜振盪した。さらに、ＰＢ１０ｍ
ｌに溶解したＴＧＦ- β（ヒト、コラボレイティブ社）
１μｇを加え、４℃で終夜振盪した。得られたゲルを生
理食塩液で良く洗浄して透明なシート状の医療用高分子
ゲルを得た。30 ml of a 1% by weight aqueous solution of sodium alginate (Wako Pure Chemical Industries, Ltd., 500 to 600 cp)
In addition, 33 mg (0.1 mmol) of Boc-Gly-E
DA · HOSu and 0.29 g (0.375 mmol) of (Lys) ₂ -EDA · 4HOSu and 0.96 g
(5 mmol) of EDC · HCl was dissolved and 12 cm
Cast onto a polystyrene tray measuring 8 x 8 cm.
And then allowed to stand for 1 day at room temperature to gel. TFA treatment was performed in the same manner as in Example 12. After thoroughly washing with water, the amount of amino groups introduced was 30 μmol / ml as measured by the ninhydrin method in a water-swelled state. Further, it was reacted with succinic anhydride in the same manner as in Example 12 to introduce a carboxyl group. After the obtained gel was thoroughly washed with water, 20 mg (0.16 mmol) of HOSu and 1 mg of HOSu were added.
60 mg (0.8 mmol) of EDC.HCl was added,
Shake at 4 ° C. overnight. In addition to this, 22m synthesized by solid phase method
g (50 μmol) of Gly-Pro-Leu-Gly-Pro was dissolved in 10 ml of PB, and the mixture was shaken at 4 ° C. overnight. After thoroughly washing the obtained gel with water, 20 mg (0.16 mmol) of HOSu and 160 mg (0.8 mmol) of EDC.H
Cl was added and shaken at 4 ° C overnight. Furthermore, PB10m
TGF-β (Human, Collaborative)
1 μg was added and shaken at 4 ° C. overnight. The obtained gel was thoroughly washed with a physiological saline solution to obtain a transparent sheet-shaped medical polymer gel.

【００９２】比較例５ 水膨潤性高分子ゲルとしてアルギン酸ゲル、分解性基と
して-(Ala)₂-Pro-Val-、および薬剤としてマフェニドか
らなる医療用高分子ゲル〔次式（IX）参照〕を、下記に
示す方法で製造した。Comparative Example 5 A medical polymer gel comprising alginic acid gel as a water-swellable polymer gel,-(Ala) ₂ -Pro-Val- as a decomposable group, and mafenide as a drug [see the following formula (IX)] Was produced by the method shown below.

【００９３】[0093]

【化７】 Embedded image

【００９４】実施例８と同様の１重量％ アルギン酸ナ
トリウムの０. ０５Ｍ ＮａＨＣＯ₃ 水溶液５ｍｌに、
６ｍｇ（１０μｍｏｌ）の(Ala)₂-Pro-Val-Mafenide と
９６ｍｇ（０. ５ｍｍｏｌ）のＥＤＣ・ＨＣｌを加えて
４℃で終夜撹拌した。さらに、１１ｍｇ（３８μｍｏ
ｌ）のＢｏｃ−Ｇｌｙ−ＥＤＡ・ＨＯＳｕと０. １９ｇ
（１ｍｍｏｌ）のＥＤＣ・ＨＣｌを加えて溶解した後、
直径３ｃｍのシャーレに流延し、室温で１日静置してゲ
ル化させた。得られたゲルを純水中でよく洗浄し、エタ
ノールに置換後、無菌的に減圧乾燥して、乾燥シート状
の医療用高分子ゲルを得た。In 5 ml of a 0.05 M NaHCO ₃ aqueous solution of 1% by weight of sodium alginate as in Example 8,
6 mg (10 μmol) of (Ala) ₂ -Pro-Val-Mafenide and 96 mg (0.5 mmol) of EDC · HCl were added, and the mixture was stirred at 4 ° C. overnight. Furthermore, 11 mg (38 μmo
l) Boc-Gly-EDA.HOSu and 0.19 g
(1 mmol) of EDC · HCl was added and dissolved.
The mixture was cast on a petri dish having a diameter of 3 cm, and allowed to stand at room temperature for 1 day to gel. The obtained gel was thoroughly washed in pure water, replaced with ethanol, and dried under reduced pressure under aseptic conditions to obtain a dried sheet-shaped medical polymer gel.

【００９５】比較例６ 水膨潤性高分子ゲルとしてＰＶＡゲル、スペーサーとし
て-CH₂-CH(OH)-CH₂-NH-CO-(CH₂)₂CO- 、および薬剤とし
てアクリノールからなる医療用高分子ゲル〔次式（Ｘ）
参照〕を、下記に示す方法で製造した。Comparative Example 6 Medical use comprising PVA gel as a water-swellable polymer gel, -CH ₂ -CH (OH) -CH ₂ -NH-CO- (CH ₂ ) ₂ CO- as a spacer, and acrinol as a drug Polymer gel [Formula (X)
Was produced by the following method.

【００９６】[0096]

【化８】 Embedded image

【００９７】アクリノール３６１ｍｇ（１ｍｍｏｌ）と
トリエチルアミン１０１ｍｇ（１ｍｍｏｌ）をＤＭＦ５
０ｍｌに溶解し、３００ｍｇ（３ｍｍｏｌ）の無水コハ
ク酸を加えて、室温で終夜撹拌し、その後ジエチルエー
テルで沈殿させ、減圧下に乾燥してSuc-ACR ２５０ｍｇ
（収率７０％）を得た。実施例９で得られたアミノ化Ｐ
ＶＡゲルビーズ１００ｍｇを、０. ０５Ｍ ＮａＨＣＯ
₃ 水溶液１０ｍｌに懸濁し、４ｍｇ（１０μｍｏｌ）の
Suc-ACR と９６ｍｇ（０. ５ｍｍｏｌ）のＥＤＣ・ＨＣ
ｌを加えて４℃で終夜撹拌した。よく水洗した後、エタ
ノールに置換し、無菌的に減圧乾燥して、ビーズ状の医
療用高分子ゲルを得た。361 mg (1 mmol) of acrinol and 101 mg (1 mmol) of triethylamine were added to DMF5
0 ml, added with 300 mg (3 mmol) of succinic anhydride, stirred at room temperature overnight, then precipitated with diethyl ether, dried under reduced pressure and dried under reduced pressure to obtain 250 mg of Suc-ACR.
(70% yield). Aminated P obtained in Example 9
100 mg of VA gel beads was added to 0.05M NaHCO
₃ Suspend in 10 ml of aqueous solution and add 4 mg (10 μmol)
Suc-ACR and 96mg (0.5mmol) EDC / HC
and stirred at 4 ° C. overnight. After thorough washing with water, the mixture was replaced with ethanol and dried under reduced pressure under aseptic conditions to obtain a beaded medical polymer gel.

【００９８】比較例７ 結晶性セルロース粉末を担体として用い、スペーサーと
して-CH₂-CH(OH)-CH₂-、分解性基として-Ala-Ala-Phe-
、および薬剤としてゲンタマイシン（ＧＭ）からな
る、薬剤が固定化された結晶性セルロース粉末〔次式
（XI）参照〕を、下記に示す方法で製造した。Comparative Example 7 Crystalline cellulose powder was used as a carrier, -CH ₂ -CH (OH) -CH _2- as a spacer, and -Ala-Ala-Phe- as a decomposable group.
And a drug-immobilized crystalline cellulose powder [see the following formula (XI)], comprising gentamicin (GM) as a drug, was produced by the method shown below.

【００９９】[0099]

【化９】 Embedded image

【０１００】結晶性セルロース粉末（ＣＦ- １、Ｗｈａ
ｔｍａｎ）５ｇを１ＮＮａＯＨ水溶液５０ｍｌとジオキ
サン５０ｍｌの混合液に分散し、エピクロルヒドリン１
０ｍｌを加えて４０℃で３時間撹拌した。よく水洗した
後、固相合成法で得られた３１ｍｇ（０. １ｍｍｏｌ）
のAla-Ala-Phe を溶解した０. ０５ＭＮａＨＣＯ₃ 水溶
液を加え、室温で終夜撹拌した。よく水洗した後水分を
ジオキサンに置換し、１１５ｍｇ（１ｍｍｏｌ）のＨＯ
Ｓｕと２１０ｍｇ（１ｍｍｏｌ）のＤＣＣを加え室温で
終夜撹拌した。メタノールでよく洗浄した後、ＰＢ１０
ｍｌに溶解した７５ｍｇ（０. １ｍｍｏｌ）のＧＭを加
えて４℃で終夜撹拌した。生理食塩液で良く洗浄して、
薬剤が固定化された結晶性セルロース粉末を得た。Crystalline cellulose powder (CF-1, Wha
tman) 5 g was dispersed in a mixture of 50 ml of 1N NaOH aqueous solution and 50 ml of dioxane, and epichlorohydrin 1 was added.
0 ml was added and the mixture was stirred at 40 ° C. for 3 hours. After washing well with water, 31 mg (0.1 mmol) obtained by the solid phase synthesis method
Ala-Ala-Phe was dissolved in a 0.05M aqueous solution of NaHCO ₃ and stirred at room temperature overnight. After washing well with water, the water was replaced with dioxane, and 115 mg (1 mmol) of HO
Su and 210 mg (1 mmol) of DCC were added, and the mixture was stirred at room temperature overnight. After washing well with methanol, PB10
75 mg (0.1 mmol) of GM dissolved in ml was added and stirred at 4 ° C. overnight. Wash well with saline,
A crystalline cellulose powder on which the drug was immobilized was obtained.

【０１０１】試験例３ エラスターゼによる薬剤放出試験 実施例８または比較例５で得られた乾燥シート（直径３
ｃｍの円盤状）を、５０ｍｌのＰＢＳ（０．１５Ｍ Ｎ
ａＣｌを含む２０ｍＭ リン酸塩緩衝液、ｐＨ７．４）
に浸漬し、室温でときどき撹拌しながら、所定時間後に
上清を少量ずつサンプリングした。さらに、エラスター
ゼ（pig pancreas、biozyme Lab. Ltd製）を最終濃度が
１０，１，０．１Ｕ／ｍｌになるように該ＰＢＳ溶液に
添加し、所定時間後に上清を少量ずつサンプリングし
た。サンプリング液中のマフェニドの量はＨＰＬＣを用
いて定量した。エラスターゼ添加前後の上清中のマフェ
ニドの量を求めた。実施例８で得られた乾燥シートで
は、エラスターゼ添加前にはマフェニドの放出は全く認
められなかったが、エラスターゼ添加後にはエラスター
ゼ濃度に応じた速やかなマフェニドの放出が認められ
た。これに対して比較例５で得られた乾燥シートでは、
エラスターゼを添加してもわずかなマフェニドの放出が
認められたのみであった。Test Example 3 Drug Release Test Using Elastase The dry sheet (diameter 3) obtained in Example 8 or Comparative Example 5 was used.
cm) and 50 ml of PBS (0.15 M N
20 mM phosphate buffer containing aCl, pH 7.4)
The supernatant was sampled little by little after a predetermined time while stirring at room temperature occasionally. Further, elastase (pig pancreas, manufactured by biozyme Lab. Ltd) was added to the PBS solution to a final concentration of 10,1,0.1 U / ml, and after a predetermined time, the supernatant was sampled little by little. The amount of mafenide in the sampling solution was quantified using HPLC. The amount of mafenide in the supernatant before and after the addition of elastase was determined. In the dried sheet obtained in Example 8, no release of mafenide was observed before the addition of elastase, but rapid release of mafenide according to the elastase concentration was observed after the addition of elastase. On the other hand, in the dried sheet obtained in Comparative Example 5,
Only slight release of mafenide was observed with the addition of elastase.

【０１０２】試験例４ 緑膿菌培養液による薬剤放出試験 緑膿菌を乾燥ブイヨン培地（日水製薬株式会社）で終夜
培養し、遠心（１２，０００ｒｐｍ，１５ｍｉｎ）して
上清を得た。この上清５ｍｌと、実施例９または比較例
６で得られたビーズ１００ｍｇとを室温で２時間インキ
ュベートした。上清中に放出されるアクリノールの濃度
を４１０ｎｍの吸光度で定量した。実施例９で得られた
ビーズではアクリノールの放出量は５μｍｏｌであった
が、比較例６で得られたビーズではアクリノールの放出
は認められなかった。Test Example 4 Drug Release Test Using Pseudomonas aeruginosa Culture Solution Pseudomonas aeruginosa was cultured overnight in a dry broth medium (Nissui Pharmaceutical Co., Ltd.) and centrifuged (12,000 rpm, 15 min) to obtain a supernatant. 5 ml of the supernatant and 100 mg of the beads obtained in Example 9 or Comparative Example 6 were incubated at room temperature for 2 hours. The concentration of acrinol released into the supernatant was quantified by absorbance at 410 nm. The release amount of acrinol was 5 μmol in the beads obtained in Example 9, but no release of acrinol was observed in the beads obtained in Comparative Example 6.

【０１０３】試験例５ 酵素液による薬剤放出試験 実施例１０〜１２で得られた医療用高分子ゲルおよび比
較例７で得られた薬剤が固定化された結晶性セルロース
粉末の各０. ５ｇ（水膨潤状態）に、０. １５ＭのＮａ
Ｃｌを含む１０ｍＭリン酸塩緩衝液（ＰＢＳ、ｐＨ７.
４）５００μｌと１％トリプシン（ＤＩＦＣＯ、１：２
５０）ＰＢＳ溶液１００μｌを加えて３７℃で３時間イ
ンキュベートした。その後遠心して上清を採取し試験液
とした。 （黄色ブドウ球菌増殖阻止円形成試験）ブレイン- ハー
ト- インフュージョンブイヨン培地（日水製薬株式会
社）で終夜培養した黄色ブドウ球菌を、５×１０⁵ 個ず
つブレイン- ハート- インフュージョン寒天培地プレー
ト（直径１０ｃｍ）に均一に塗布した。上記試験液を７
５μｌずつ含浸させた直径８ｍｍの薬効検定用濾紙ディ
スクを、黄色ブドウ球菌を塗布したプレートにのせて３
７℃で終夜培養した。試験液を含浸させた濾紙ディスク
の周囲に生じた黄色ブドウ球菌増殖阻止円の直径を測定
したところ、実施例１０、１１および１２で得られた医
療用高分子ゲルの試験液ではそれぞれ９ｍｍ、１６ｍｍ
および１０ｍｍであった。比較例７で得られた結晶性セ
ルロース粉末の場合および実施例１０〜１２で得られた
医療用高分子ゲルを用い、１％トリプシン- ＰＢＳ溶液
１００μｌのかわりにＰＢＳ１００μｌを加えたコント
ロールの場合は増殖阻止円は観測されなかった。Test Example 5 Drug Release Test Using Enzyme Solution 0.5 g of the polymer gel for medical use obtained in Examples 10 to 12 and the crystalline cellulose powder obtained by immobilizing the drug obtained in Comparative Example 7 were each 0.5 g ( Water swelling), 0.15M Na
10 mM phosphate buffer containing Cl (PBS, pH 7.
4) 500 μl and 1% trypsin (DIFCO, 1: 2
50) 100 μl of a PBS solution was added and incubated at 37 ° C. for 3 hours. Thereafter, centrifugation was performed to collect the supernatant, which was used as a test solution. (Staphylococcus aureus growth inhibition circle formation test) Brain-heart-infusion broth medium (Nissui Pharmaceutical Co., Ltd.) was cultured overnight in 5 × 10 ⁵ Staphylococcus aureus brain-heart-infusion agar plate ( (Diameter: 10 cm). Apply the above test solution to 7
An 8 mm diameter filter paper for drug efficacy assay impregnated with 5 μl was placed on a plate coated with Staphylococcus aureus.
Cultured overnight at 7 ° C. When the diameter of the Staphylococcus aureus growth inhibition circle formed around the filter paper disc impregnated with the test solution was measured, the test solutions of the medical polymer gels obtained in Examples 10, 11 and 12 were 9 mm and 16 mm, respectively.
And 10 mm. Proliferation occurs in the case of the crystalline cellulose powder obtained in Comparative Example 7 and in the case of using the medical polymer gel obtained in Examples 10 to 12 and adding 100 μl of PBS instead of 100 μl of 1% trypsin-PBS solution. No stopping circle was observed.

【０１０４】試験例６ ２ｃｍ×２ｃｍの大きさのラット背部全層欠損創に１０
⁷ 個の緑膿菌、あるいは１０⁹ 個の黄色ブドウ球菌をそ
れぞれコラーゲンスポンジ（株式会社高研）とともに植
え付けた。緑膿菌は２４時間後、黄色ブドウ球菌は４８
時間後にコラーゲンスポンジを除去し、創部を生食液で
洗浄した。緑膿菌を植え付けた創には実施例１１で得ら
れた医療用高分子ゲルを、黄色ブドウ球菌を植え付けた
創には実施例１０で得られた医療用高分子ゲルをそれぞ
れ貼り付けた。２４時間後に採取した創部の組織をホモ
ジェナイズして、その一部を一定割合で希釈したＰＢＳ
溶液をブレイン- ハート- インフュージョン寒天培地プ
レート（直径１０ｃｍ）に均一に塗布した。３７℃で終
夜培養して生じるコロニーの数から組織中の細菌数を計
算した。実施例１１で得られた医療用高分子ゲルを貼付
した創部の細菌数が６. ７×１０⁴ ±８. ９×１０⁴ 個
／ｇ組織であり、貼付前の組織中の細菌数（１. １×１
０⁸ ±２. ０×１０⁷ 個／ｇ組織）と比較して明らかな
細菌数の減少が認められた。実施例１０で得られた医療
用高分子ゲルを貼付した創部の細菌数が１. ２×１０⁶
±１. １×１０⁶ 個／ｇ組織であり、貼付前の組織中の
細菌数（２. ２×１０⁷ ±４. ９×１０⁶ 個／ｇ組織）
と比較して明らかな細菌数の減少が認められた。Test Example 6 10 cm for a 2 cm × 2 cm large wound on the back of a rat
^Seven of Pseudomonas aeruginosa, or 10 ^nine Staphylococcus aureus were each planted with collagen sponge (Co., Ltd. Koken). Pseudomonas aeruginosa 24 hours later, Staphylococcus aureus 48
After an hour, the collagen sponge was removed, and the wound was washed with saline. The medical polymer gel obtained in Example 11 was adhered to the wound implanted with Pseudomonas aeruginosa, and the medical polymer gel obtained in Example 10 was adhered to the wound implanted with Staphylococcus aureus. Twenty-four hours later, the wound tissue collected is homogenized, and a part thereof is diluted with a fixed ratio of PBS.
The solution was uniformly spread on a Brain-Heart-Infusion agar plate (10 cm diameter). The number of bacteria in the tissue was calculated from the number of colonies formed by culturing overnight at 37 ° C. The number of bacteria in the wound to which the medical polymer gel obtained in Example 11 was applied was 6.7 × 10 ⁴ ± 8.9 × 10 ⁴ cells / g tissue, and the number of bacteria in the tissue before application (1 . 1 × 1
^{0 8 ± 2. 0 × 10} 7 cells / g tissue) and decreased apparent bacterial numbers compared were observed. The number of bacteria at the wound to which the medical polymer gel obtained in Example 10 was applied was 1.2 × 10 ⁶
± 1.1 × 10 ⁶ cells / g tissue, the number of bacteria in the tissue before application (2.2 × 10 ⁷ ± 4.9 × 10 ⁶ cells / g tissue)
A clear decrease in the number of bacteria was observed as compared to

【０１０５】上記試験例より、本発明の医療用高分子ゲ
ルが、存在する酵素の量に応じた薬剤放出特性を示し、
動物の細菌感染創で明らかな細菌数減少効果を発揮する
ことが示された。From the above test examples, the polymer gel for medical use of the present invention shows drug release characteristics according to the amount of the enzyme present,
It has been shown that bacterial wounds in animals exert a clear bacterial count reduction effect.

【０１０６】本明細書に用いられた各種アミノ酸残基の
略号は下記のとおりである。 Ala ：Ｌ−アラニン残基 Arg ：Ｌ−アルギニン残基 Asn ：Ｌ−アスパラギン残基 Asp ：Ｌ−アスパラギン酸残基 Cys ：Ｌ−システイン残基 Gln ：Ｌ−グルタミン残基 Glu ：Ｌ−グルタミン酸残基 Gly ：グリシン残基 His ：Ｌ−ヒスチジン残基 Ile ：Ｌ−イソロイシン残基 Leu ：Ｌ−ロイシン残基 Lys ：Ｌ−リシン残基 Phe ：Ｌ−フェニルアラニン残基 Pro ：Ｌ−プロリン残基 Ser ：Ｌ−セリン残基 Thr ：Ｌ−トレオニン残基 Trp ：Ｌ−トリプトファン残基 Tyr ：Ｌ−チロシン残基 Val ：Ｌ−バリン残基 Nle ：Ｌ−ノルロイシン残基 また、本明細書においては、常法に従ってペプチドのア
ミノ酸配列を、そのＮ末端のアミノ酸残基が左側に位置
し、Ｃ末端のアミノ酸残基が右側に位置するように記述
した。また、Ｄ体のアミノ酸の場合には略号の後に
（Ｄ）を付記して記述した。Abbreviations of various amino acid residues used in the present specification are as follows. Ala: L-alanine residue Arg: L-arginine residue Asn: L-asparagine residue Asp: L-aspartic acid residue Cys: L-cysteine residue Gln: L-glutamine residue Glu: L-glutamic acid residue Gly: glycine residue His: L-histidine residue Ile: L-isoleucine residue Leu: L-leucine residue Lys: L-lysine residue Phe: L-phenylalanine residue Pro: L-proline residue Ser: L -Serine residue Thr: L-threonine residue Trp: L-tryptophan residue Tyr: L-tyrosine residue Val: L-valine residue Nle: L-norleucine residue Also, in this specification, according to a conventional method. The amino acid sequence of the peptide was described such that the N-terminal amino acid residue was located on the left and the C-terminal amino acid residue was located on the right. In the case of D-form amino acids, (D) is added after the abbreviation and described.

【０１０７】[0107]

【発明の効果】本発明の医療用高分子ゲルは、酵素の量
に応じた薬剤放出特性を示すため、酵素が産生される病
巣においてのみ、治療に有効な量の薬剤を放出すること
が可能である。本発明の医療用高分子ゲルは、創傷被覆
材、生体組織接着剤、癒着防止材、骨補強材、薬剤放出
基材の構成成分として有用であり、擦過創、切創、挫創
等の一般創傷、採皮創、削皮創等の人為的な皮膚欠損
創、切開創等の手術創、熱傷、潰瘍、褥瘡等の創傷にお
ける炎症の治療と治癒促進、手術後の創面や臓器の接
着、手術後の創面と他組織の癒着防止、骨粗骨症や骨折
における骨の補強、悪性新生物等の治療に適用可能であ
る。本発明により提供される水膨潤性高分子ゲル（Ｉ
Ｉ）を構成材料とする創傷被覆材は、創傷、熱傷、褥瘡
などの患者に適用されることにより該患者の創の治癒を
促進することができる。また適用期間中、被覆材をはが
すことなく創の状態を観察することができるので、創の
管理に大変有用であり、被覆材交換の回数を減少させる
ことができる。The medical polymer gel of the present invention exhibits a drug release characteristic corresponding to the amount of the enzyme, so that a therapeutically effective amount of the drug can be released only at the lesion where the enzyme is produced. It is. The medical polymer gel of the present invention is useful as a component of a wound covering material, a biological tissue adhesive, an adhesion preventive material, a bone reinforcing material, a drug releasing base material, and is used for general wounds such as abrasions, cuts, and wounds. Treatment of inflammation and promotion of healing in wounds such as burns, ulcers, pressure ulcers, adhesion of wounds and organs after surgery, surgery The present invention is applicable to prevention of adhesion between a later wound surface and other tissues, reinforcement of bone in osteoporosis and fracture, and treatment of malignant neoplasm. The water-swellable polymer gel (I) provided by the present invention
The wound dressing comprising I) as a constituent material can promote the healing of a wound of a patient such as a wound, a burn or a pressure sore by being applied to the patient. In addition, since the condition of the wound can be observed without removing the covering material during the application period, it is very useful for wound management and the number of times of changing the covering material can be reduced.

【図面の簡単な説明】[Brief description of the drawings]

【図１】図１は、実施例８で得られたＡｌｇｉｎ−ＥＤ
Ａ−Ｇｌｙの０. ０５Ｍ ＮａＨＣＯ₃ 水溶液の２２０
ｎｍ〜４００ｎｍの紫外吸収スペクトルを、光路長１ｃ
ｍの吸光度測定用セルを用いてベックマン社製ＤＵ- ６
５型分光光度計で測定した結果を示す図である。BRIEF DESCRIPTION OF DRAWINGS FIG. 1 shows Algin-ED obtained in Example 8.
A-Gly in 0.05M NaHCO ₃ aqueous solution 220
The ultraviolet absorption spectrum from 400 nm to 400 nm is converted to an optical path length 1c.
DU-6 manufactured by Beckman Co., Ltd.
It is a figure showing the result of having measured with a type 5 spectrophotometer.

【図２】図２は、実施例１１で得られたＡｌｇｉｎ−Ｅ
ＤＡ−Ｇｌｙ−Ｓｕｃ−Ａｌａ−Ａｌａ−Ｐｈｅを純水
で１０倍希釈して測定した紫外吸収スペクトルである。FIG. 2 shows Algin-E obtained in Example 11.
It is an ultraviolet absorption spectrum measured by diluting DA-Gly-Suc-Ala-Ala-Phe ten times with pure water.

【図３】図３は、実施例１１で得られた医療用高分子ゲ
ルの紫外吸収スペクトルである。FIG. 3 is an ultraviolet absorption spectrum of the medical polymer gel obtained in Example 11.

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号 ＦＩ Ａ６１Ｌ 27/00 Ａ６１Ｌ 25/00 Ａ (56)参考文献 特開 昭61−244369（ＪＰ，Ａ) 特開 平２−180903（ＪＰ，Ａ) 特開 平１−248057（ＪＰ，Ａ) 特開 昭61−243026（ＪＰ，Ａ) 特表 昭61−502729（ＪＰ，Ａ) 国際公開93／13804（ＷＯ，Ａ１) (58)調査した分野(Int.Cl.⁷，ＤＢ名) A61K 9/ A61K 47/ A61L 15/ A61L 24/ A61L 27/ ────────────────────────────────────────────────── ─── Continuation of the front page (51) Int.Cl. ⁷ Identification code FI A61L 27/00 A61L 25 / 00A (56) References JP-A-61-244369 (JP, A) JP-A-2-180903 JP, A) JP-A-1-248057 (JP, A) JP-A-61-243026 (JP, A) JP-T-61-502729 (JP, A) WO 93/13804 (WO, A1) (58) Surveyed fields (Int.Cl. ⁷ , DB name) A61K 9 / A61K 47 / A61L 15 / A61L 24 / A61L 27 /

Claims (4)

(57)【特許請求の範囲】(57) [Claims] 【請求項１】 分子内にカルボキシル基を有する多糖類
を、下記の一般式（II） Ｒ¹ ＨＮ−（ＣＨ₂)_n −ＮＨＲ² （II） （式中、ｎは２から１８の整数を表し、Ｒ¹ およびＲ²
はそれぞれ水素原子または−ＣＯＣＨ（ＮＨ₂ ）−（Ｃ
Ｈ₂ ）₄ −ＮＨ₂ で表される基を示す。）で表される架
橋性試薬の塩で共有結合架橋して得られる水膨潤性高分
子ゲル。1. A polysaccharide having a carboxyl group in a molecule is represented by the following general formula (II): R ¹ HN— (CH ₂ ) _n —NHR ² (II) (where n is an integer of 2 to 18) And R ¹ and R ²
Represents a hydrogen atom or —COCH (NH ₂ ) — (C
H ₂₎ a group represented by ₄ -NH _2. ) With a cross-linkable reagent salt covalently crosslinked to the resulting water-swellable polymer gel of the represented. 【請求項２】 分子内にカルボキシル基を有する多糖類
がアルギン酸塩またはヒアルロン酸塩である請求項１記
載の水膨潤性高分子ゲル。2. A polysaccharide according to claim 1, wherein the water-swellable polymer gel is alginate or hyaluronic acid salts having a carboxyl group in the molecule. 【請求項３】 架橋性試薬の塩が、Ｎ−ヒドロキシコハ
ク酸イミド塩である請求項１または請求項２記載の水膨
潤性高分子ゲル。3. A salt of the crosslinking reagent, claim 1 or claim 2 wherein the water-swellable polymer gel is N- hydroxysuccinimide salt. 【請求項４】 架橋性試薬のＮ−ヒドロキシコハク酸イ
ミド塩が、ジアミノエタンの２Ｎ−ヒドロキシコハク酸
イミド塩、ジアミノヘキサンの２Ｎ−ヒドロキシコハク
酸イミド塩、Ｎ，Ｎ’−ジ（リジル）−ジアミノエタン
の４Ｎ−ヒドロキシコハク酸イミド塩およびＮ−（リジ
ル）−ジアミノヘキサンの３Ｎ−ヒドロキシコハク酸イ
ミド塩よりなる群から選択されるものである請求項３記
載の水膨潤性高分子ゲル。4. The N-hydroxysuccinimide salt of a cross-linking reagent is 2N-hydroxysuccinimide salt of diaminoethane, 2N-hydroxysuccinimide salt of diaminohexane, N, N′-di (lysyl)- The water-swellable polymer gel according to claim 3, which is selected from the group consisting of 4N-hydroxysuccinimide salt of diaminoethane and 3N-hydroxysuccinimide salt of N- (lysyl) -diaminohexane.