JP3082942B2 - 核酸による物質の標識及び追跡方法 - Google Patents

核酸による物質の標識及び追跡方法

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Description

【発明の詳細な説明】 本発明は核酸を標識剤として利用する、物質の標識方
法及び追跡方法を提供する。標識工程は、ある物質を変
異させ、その物質のその後の同定をその変異体を検出す
るこによって可能にする方法を含む。本明細書が開示す
るこの変異体は核酸を包含する。
社会は最近になって、（１）天然資源、例えば動物、
植物、油、鉱物及び水；（２）化学物質、例えば薬剤、
溶媒、石油生成物、及び爆薬物；（３）汚染物質を含む
商業上の副産物、例えば放射性又はその他の危険な廃棄
物、並びに（４）製品、例えば銃、タイプライター、自
動車及び自動車部品を含む多数の様々な物質の製造及び
流通の追跡調査することが試みられている。標識は製品
の同一性の確認に役立ち、従って製造者及び消費者に有
用な情報を提供する。
標識方法及び試薬の様々な利用の中には、爆薬物の製
造者の同定を爆発後でも行えること、及びその汚染物質
の散在を測定するための流出パターンの確認が含まれ
る。本発明は当分野において有意な進歩を提供し、その
理由は該標識剤は逐次的な同定のための多量の情報の解
読を可能にするからである。更に、近年の有用な増幅技
術を利用することにより、従来よりもはるかに少ない標
識剤にて検出を可能にすることができる。事実、このよ
うな非常に微量の標識剤による本標識方法作業、即ち本
方法により標識される薬剤は、あらゆる生成物における
DNA標識剤のケースにおいてDNA量のFDA基準（10pg/投
与）をパスすることができる。ポリペプチドによる標識
物質の利用は周知である。（米国特許第4,359,353号及
び第4,441,943号。）本発明の核酸標識剤と同様、この
ポリペプチド標識剤はポリポペプチドにおけるアミノ酸
配列を情報の解読のために利用する。
本発明は物質（あらゆる物質）の標識のための方法を
提供し、それは該物質を核酸標識剤によって処理して該
核酸を該物質にその後の検出のために十分な量にて結合
させることによる。該核酸標識剤は特異的なヌクレオチ
ド配列を含んで成るか又は追跡を促進せしめる認識でき
る特異的なヌクレオチドの組成物を有する。本発明は
又、核酸標識剤により標識されている物体を追跡するた
めの方法を提供する。この方法は該物体における前記標
識剤についての特異的な核酸配列の有無を検出すること
を含んで成る。好ましい態様において、本追跡方法は特
異的な核酸配列が存在するかを検出するために、この標
識剤の該核酸配列がもし存在するならばその増幅をもた
らすような条件のもとでこの物体を処理することをも含
んで成る。
より詳しくは、本発明は物質の存在をモニターする方
法であって、該物質を核酸によって標識せしめ、該物質
を回収し、そして該核酸を検出することを含んで成る方
法を提供する。該核酸の増幅させる更なる段階も本明細
書に詳述する。この増幅は一般に検出の前に行われ、そ
して好ましくはポリメラーゼ連鎖反応（polymerase cha
in reaction）技術を利用して達成される。その核酸は
天然又は合成的に得られるもののいづれかでありうる。
好ましい合成核酸はイノシン塩基又は７−デアゾ−２′
−デオキシグアノシンヌクレオチドを含んで成る。
本発明の物体又は物質は、大気汚染物質、油、芳香化
合物、爆薬組成物、食品、医薬品、インキ、紙製品及び
塗料製品より成る群から選ばれるものを含む。この核酸
は標識すべき物質の構成成分に共有結合を介して任意的
に結合させることができる。「物質の構成部分との共有
結合」は、該核酸が該標識すべき物質又はその構成成分
に共有結合していることを意味する。該物体が異なる構
成成分、例えば異なる化学化合物を含んで成る場合、該
核酸は該構成成分の任意のいづれか１つ又は全てと共有
結合させてよい。
標識剤として利用される核酸は遊離であるか、又は固
相支持体（例えばラテックスビーズ、デキストラン又は
磁性ビーズ）と共有結合させた後に標識すべき物質と混
合せしめることもできる。一方、この核酸はポリマー物
質（例えばタンパク質）又は脂肪親和性組成物（例えば
リポソーム）により封入されうる。
本発明は物質を標識する方法も提供し、ここで該方法
は核酸を物質の上に、又は物質の中に一体化せしめる段
階を含んで成る。好ましい標識剤及び物質は前述の通り
である。
本発明は標識された物質の組成物も提供し、ここで該
標識剤は遡及力のある同定のための特異的なヌクレオチ
ド塩基配列を有する核酸である。好ましい組成物は、核
酸、並びに物質であって大気汚染物質、油、芳香化合
物、爆薬組成物、食品、医薬品、インキ、紙製品及び塗
料製品により成る群から選ばれる物質を含んで成るもの
である。該核酸は前述の通り、合成的に得られ、固相支
持体と共有結合しているか、又は封入されていることが
できる。
本発明は、核酸により標識されている物質の検定のた
めのキットも提供する。このようなキットは、標識剤の
検出のため、標識剤の増幅のため、そして標識剤として
の利用のための核酸を含むことがある。
以下の定義は、本発明の理解に役立たせるために提示
する： 物質−本発明の方法に従って標識され、そして追跡さ
れることができる物体。
核酸−一本鎖又は二本鎖型のいづれかにおけるデオキ
シリボヌクレオチド又はリボヌクレオチドポリマー；変
性せしめたヌクレオチドは、核酸全体又はその一部を含
んで成りうる。
標識剤−核酸であって、特異的なヌクレオチド配列を
含んで成るもの、又は特定のヌクレオチド構造物を有す
るものであり、該配列又は構造物の特異性は情報の保存
の手段を提供する。標識剤は一般に生物学的に機能せ
ず、その理由はそれらは生存細胞において働く機能的な
核酸配列の一部でないからである。当業者は生存してい
る生物は天然又は人工的に誘導された独特の核酸配列を
含んでいることを理解している。本発明はそのような天
然、及び生物学的に機能する標識剤の型を包含する意図
はない。標識剤は一般に物質に付加される。それらはそ
の物質の機能的な部分ではない。
標識する−標識剤の検出による物体の逐次的同定のた
め、組成物、即ち、標識剤により物体を処理せしめる工
程。
追跡する−物体の起源又は供給源の検定のための工
程。
本発明は環境又は商品流通経路に放たれた物質をモニ
ターする、検出する、そして追跡するための核酸の利用
に関する。該核酸はこのような物質を標識せしめるため
の添加剤として利用される。核酸を標識剤として化合せ
しめる特性、及び分析のためのその後の回収の特性は、
該核酸を付加する特定の物質に依存する。以下の概容を
提供する。
核酸 本発明において利用する核酸は無限の情報量を提供す
る。一般的な配列（工業規格として受け入れられる）の
組合せを利用すること、及び特異的な配列のレベルを変
えることにより、一般の製品、製品の供給源（会社の特
有の配列）、ロット又はバッチのみでなく商業単位の鑑
定者のタイプの同定も可能にする。
本発明における利用のために適切な核酸配列は天然及
び天然でない核酸の両者を含む。それらは一本鎖又は二
本鎖でありうる。天然の核酸とは、５種類の天然塩基、
アデニン、チミン、グアニン、シトシン及びウラシルを
含むDNA又はRNAのいづれかのポリマーに関する。
天然でない、又は合成核酸も本発明において利用でき
る。ある例における合成核酸は、例えば、安定性、可溶
性、他において天然核酸をしのぐ利点を有する。ある合
成ヌクレオチドは、ヌクレアーゼ活性、化学的活性物
質、又は環境条件、例えば熱もしくは紫外線照射によっ
て分解されにくい。天然でないヌクレオチドの利用は、
選ばれる検出手段によって効率的に検出されるそれらの
能力によってのみ制限される。好ましいPCR技術を利用
する標識方法のため、この合成核酸はプライマーとの二
重構造を形成せねばならず、そしてこの工程において利
用するポリメラーゼのための鋳型として機能しなければ
ならない。本発明において利用するための天然でない核
酸は、イノシン塩基並びに誘導ヌクレオチド、例えば７
−デアゾ−２′デオキシグアノシン、メチル−（又はよ
り長いアルキル−）ホスホネートオリゴデオキシヌクレ
オチド、ホスホロチオエートオリゴデオキシヌクレオチ
ド及びアルファーアノメリックオリゴデオキシヌクレオ
チドを一体化したものを含む。
本発明において利用するための核酸は無限の情報量を
提供できる。一般の配列（工業規格として受け入れられ
る）の組合せを利用すること、及び特異的な配列のレベ
ルを変えることにより、一般的な製品、製品の供給源
（会社特有の配列）及びロットもしくはバッチを同定又
は鑑定することが可能である。
標識物質 下記の物質は限定のためではなく、当業者に本発明の
多様性を理解してもらうために提供する。例えば本発明
は、爆薬物（例えばプラスチック爆弾及び火薬）、エー
ロゾル（例えば自動車又は工場の噴煙口からの汚染物
質）、有機溶媒（例えばドライクリーナー、化学工場、
飛工場及びガスステーション由来）、紙製品（例えば新
聞用紙、紙幣、法的文書）、インキ、香水並びに医薬製
剤（例えば医薬品）において用途が見い出されることを
予想している。
核酸の製造は、物質の性質に従って、そしてこの物質
が置かれると思われる環境から予想される影響に基づい
て変更できる。この物質は、固体、液体又は気体として
分類されうる。この物質は液体及びエーロゾルと不活性
又は活性、更には極性又は非極性のいづれかとして分け
ることができるもののいづれかであってもよい。
不活性な固体、例えば紙、多数の医薬製品、木材、い
くつかの食品、又はポリマー化合物（例えばプラスチッ
ク）をこの標識剤で処理せしめるか、又はこの標識剤を
この固体の表面に噴霧させることもできる。標識剤を不
活性な液体又は気体と物理的に混合してもよい。
化学的に活性な物質、例えば酸素活性を有する食品、
荷電している基を有するポリマー、又は酸性の医薬品
は、この核酸標識剤に保護組成分を加えることを必要と
する。保護組成物には核酸を封入せしめ、そしてそれら
を酸素又は化学分解から保護する物質を含むであろう。
リポソームは核酸のための保護カプセルとしての利用の
ために有用な最近の技術である。典型的なリポソームは
洗浄剤によって形成されるミセル体である。一方、ポリ
マー物質は核酸に静電的に結合させて封入せしめるため
に利用される。ポリマー物質にはタンパク質、例えばウ
イルス被覆タンパク質が含まれる。
同一の手法が、標識剤を化学的に活性な液体に付加せ
しめるために利用されるが、旦し液体のための保護組成
物は好ましくは液体の極性と適合するものである。標識
剤と液体物質の適合は、不活性及び化学的に活性な液体
の両者のために好適である。例えば、油及びその他の非
極性液は、該液体に標識剤を加える前に該標識剤に洗浄
剤を加えることを利用することにより、効率的に標識さ
れうる。液体において均一な分散を確実にすることは、
ブラウン運動に依存することができる。
気体については、この標識剤は気体と単に混合させ
る。その理由はこの標識剤が非常に小さく、通常塵状の
粒子（0.2ミクロン）であると考えられているからであ
る。コンテナーに入れた気体は、該コンテナーに入れた
標識剤を有するであろう。大気中に放たれている気体の
ためには、該標識剤を放出前又は放出と同時に混合させ
ることができる。例えば、工業的に放出される気体の分
散パターンを追跡するため、エーロゾル放出装置を排気
口に継ぎ、そして該気体の放出に伴い、計量済みの標識
剤を導入する。
放射性生成物であってその廃棄物を含むものを追跡す
るための核酸標識剤の利用が期待される。追跡のための
手段は、非放射性物質についての本明細書の詳細と同
様、適当な保護を利用することによるであろう。1000個
の塩基よりも短いオリゴヌクレオチドが、それらが輻射
線による分解に対してより安定であることに基づき好ま
しいことが理解される。
標識剤の回収及び検出 核酸標識剤の物質に加える量並びに回収及び検出する
ための好ましい手段はモニターすべき物質に依存する。
検出のための手段及び回収すべき有用なサンプル量は本
発明の各用途のために必要な標識剤の量を決定せしめ
る。従って、標識を増幅せしめる手段がない場合におい
て、加える標識剤の量は検出可能な量の標識剤を回収す
るための十分な物質を集収する方法論に基づくであろ
う。
この核酸標識剤の好ましい分子構造は該核酸の検出に
利用される手段に伴って変わるであろう。一般にあらゆ
る標識剤について十分な特異性を確実にするためには少
なくとも20個の塩基を必要とし、これによって偶発的な
夾雑が招く失敗結果を防げるであろう。好ましくは、こ
の配列は複数の特異的な領域を含んで成るべきである。
配列が長くなるに従い、より多くの情報が運ばれる。し
かしながら、標識剤の情報内容がより多くなるに従い、
分解が問題となる傾向にあることが理解されるであろ
う。一般に、１キロベースより下のフラグメントが好適
である。
標識剤の回収は標準的な技術の利用によって達成され
うる。一般に、サンプルは蒸留水又は緩衝溶液によって
洗浄又は抽出される。生理学的なpHが好ましく、何故な
ら極端なpHは核酸を分解しうるからである。荷電してい
る物質は、静電的に結合している核酸とのイオン交換体
として働く高モル量の塩緩衝液における洗浄を必要とし
うる。イオン性又は非イオン性のいづれかの洗浄剤は、
表面又は複合生物学的混合物から核酸を除去するのに役
立つ。フェノールをベースとする抽出又はフェノール／
クロロホルム抽出を利用することにより、核酸を複合生
物学的物質又は油をベースとする物質から回収すること
ができる。
回収した核酸は標準的な方法、例えばアルコールによ
る沈殿、エバポレーション又はマイクロフィルトレーシ
ョンによって濃縮できる。
核酸の検出についての感度の限界により、回収される
標識剤を増幅させるための方法の利用には明らかな利点
がある。例えば米国特許第4,683,202号及び4,683,195並
びヨーロッパ特許出願第258,017号及び237,362号に開示
のポリメラーゼ連鎖反応工程（PCR）を利用することに
より、核酸分子を増幅させて検出できる。このPCR方法
は、一本鎖標識剤、二本鎖標識剤及びDNA又はRNA標識剤
を増幅せしめるための改良を伴って利用されうる。
当業者はPCR増幅が種々の方法において実施されうる
ことを周知している。例えば逆PCR及び非対称性PCRがこ
の技術の変形方法として周知である。その他の変形方法
において、PCRによって伸長及び複製が行われる際にRNA
転写のためのプロモーターをプライマーの中に一体化せ
しめることができ、これを標的配列のRNAコピーを作成
せしめるために利用することができる。これらのRNAコ
ピーは交互に、DNAへと複数回逆転写されることがで
き、そしてこれはPCRによって増幅されうる。全てのPCR
工程と同様、反応のサイクルは必要される回数繰り返す
ことができる。
PCRについての増幅のために好ましい手段は二本鎖標
識剤が好適であるが、しかしながら一本鎖標識剤は増幅
の第１サイクル後に二本鎖となる。この標識剤は好まし
くは最低60塩基の長さにある。このことは、それぞれが
好ましくは20塩基の長さである２つのプライマーのハイ
ブリダイゼーションを可能とし、そして標識剤にハイブ
リダイズせしめた際に、約20個の更なる塩基の標識剤の
プライマー特定領域の間の介在領域によって分離され
る。
PCRによる核酸配列の検出の際に、標的配列の予備知
識は適切なるプライマーの提供のために必要である。こ
の必要な知識は有用な安全性をそれを必要とする者に提
供する。特性を保持できるプライマーなしでは、この標
識剤は本質的に検出できない。
標識剤の検出のためには、標準的な核酸ハイブリダイ
ゼーションアッセイ又は核酸シーケンシングが利用でき
る。この標準的なハイブリダイゼーションアッセイは単
相及び混合相アッセイ、例えばサンドイッチアッセイを
含む。
利用するこの特定の検出工程は本発明の本質ではな
い。核酸ハイブリダイゼーション技術は不変的な技術で
はない。新規の開発が期待され、そして本発明はあらゆ
る新規の改良に適用できる。当業界の全景は、Nucleic
Acid Hybridization A Practial Approach,Eds.Hames,
B.D.及びHiggins,S.J.,IRL Press,Wash.D.C.,1987にお
いて見い出せる。
核酸ハイブリダイゼーションアッセイの利用は検出す
べき配列を予め知っておくことを必要とする。標識剤配
列を知っておくことは、補獲又はシグナルの目的のため
の適切な相補性オリゴヌクレオチドの利用を可能にす
る。
他方、サンプルから回収される核酸は常用のシーケン
シング技術を用いてシーケンス化されうる。市販のキッ
トが本目的のために適切である。基本的なシーケンシン
グ技術はセミナル文献、例えばマキサム（Maxam）とギ
ルバート（Gilbert）の、Methods in Enzymology 65:
（パート１）497〜559に詳細のDNAシーケンシングにつ
いての工程による。シーケンシングは実施するために非
常に困難な工程であるが、しかし核酸ハイブリダイゼー
ションアッセイよりも信頼性が高い。その理由は、選ば
れたプローブとハイブリダイズするのに十分に相補的な
外因性核酸の夾雑によって誤まった陽性を提供しうる可
能性による。
キット 本発明は製造された製品、例えば物質の標識及びモニ
ターのためにデザインされたキットも提供する。このよ
うなキットには、核酸標識剤及び該標識剤と相補性のポ
リヌクレオチドを含むであろう。この相補的なポリヌク
レオチドは、シグナルプローブ、捕獲プローブ又はPCR
法におけるプライマーとしての利用のためにデザインさ
れることがある。これらのキットはシグナル手段、例え
ば酵素、ラジオアイソトープ、蛍光ラベル等も含むこと
がある。
全ての引用文献は、読み手の便宜のために提供した。
それらに含まれる周知事項は当業者によく知られてい
る。このような周知事項は本発明の実施のための本質的
事項であると考えられ、引用した文献それぞれを本明細
書に組入れた。
以下の実施例は実例の目的のために提供するものであ
り、本発明の範囲を限定するものではない。
実施例 以下の例は全て、DQαアレル1.3と相補性の配列の二
本鎖標識剤を利用している。この配列は、未処理のDQα
型に由来し、そして以下の材料において夾雑物として偶
発的に存在するものの確率は低い。この標識剤を32Pで
ラベルし、工程全体にわたって標識物を実験的に追っ
た。この標識剤の独特の一本鎖配列を表１に示した。
この標識剤は以下の通りに回収した。全ての増幅はパ
ーキンスーエルマーシータスの熱循環装置において、こ
の会社より提供されるプロトコール及び試薬を用いて、
40サイクル行った。表１に記載の配列を有するビオチニ
ル化プライマーGH26及びGH27はPCR工程の開始のために
用いた。
以下のPCR工程を、以下に記す異なる各物質におけるD
Qαの増幅のために用いた。
基本的なPCR混合物は以下のものより成る： 10xTAQ緩衝液 10μｌ 100mM トリスHClpH8.3 500mM KCl 15.0Mm MgCl2 10μΜ GH26 1.5μｌ 10μΜ GH27 1.5μｌ 100mM dNTP 0.75μｌ 5U/μl TAQ 0.5μｌ 蒸留水 35μｌ 50μｌの基本的PCR混合物を等量のサンプルと混合せ
しめた。各サイクルは94℃での30秒間のインキュベーシ
ョン、それに続く55℃で30秒間、そして72℃で30秒間の
インキュベーションより成る。最終（40周目）のサイク
ルの後、このサンプル混合物を72℃で10分間インキュベ
ートせしめた。
PCR増幅標識剤の検出は、表１に記載の捕獲プローブ
を用いる標準的な核酸ハイブリダイゼーションアッセイ
により行なわれた。このハイブリダイゼーションアッセ
イのためのプロトコールは重要ではない。用いた手段は
PCT公開番号89/11548（1989年11月30日公開）に詳述さ
れている（本明細書に参考文献として引用）。簡単に述
べると、この標識剤は固形プローブGH89（表１）へのハ
イブリダイゼーションによって捕獲される。このプロー
ブを、正に荷電されているナイロン膜上に紫外線照射を
利用して固定化した。
A.火薬 準備：（ａ）16ngの標識剤を1mlの蒸留水に加える；
（ｂ）この溶液を1gのニトロセルロースベース火薬と混
ぜ、そして（ｃ）大気中又は真空下で85℃にて乾燥せし
める。
回収：（ａ）火薬を蒸留水（1ml）で洗浄する；
（ｂ）この溶液50μｌをPCR反応混合物に加えるか、又
は火薬粉を100μｌのPCR反応混合物に直接加え；そして
（ｃ）増幅させる。
B.油 準備：（ａ）40μｇの標識剤、10μｌの「ツイーン8
0」（Tween80）（洗浄剤）、10μｌの「スパン80」（Sp
an80）（洗浄剤）及び100μｌの蒸留水を混合し；そし
て（ｂ）この混合物を1.7mlの油に加える。次にこの組
合せ物をよく混合する。
回収：この油をPCR混合物に直接加え、撹拌し、そし
て増幅させる；又は標準的なフェノール−クロロホルム
抽出を利用する。フェールで処理後、この標識剤は油と
水の相の間の結合層において検出される。
C.医薬品（水可溶性錠剤） 準備：（ａ）48μｇの標識剤を325μｌの蒸留水に加
える；（ｂ）この混合物50μｌを錠剤に加え；そして
（ｃ）乾燥させる。
回収：（ａ）錠剤を5mlのH2Oに溶解せしめる；（ｂ）
この溶液50μｌをPCR混合物に入れ；そして（ｃ）増幅
せしめる。
D.インキ 準備：もし水に可溶性でないならば、油の標識と同様
の洗浄剤と混合する。もし水に可溶性ならば、希釈した
標識剤をインキに直接加える。
回収：油及び医薬品に記載と同様。
E.紙製品 準備：（ａ）標識剤の希釈溶液を紙に２−3ng/cm2で
加え；そして（ｂ）空気乾燥又は真空下で乾燥させる。
回収：（ａ）溶解に役立つ洗浄剤を有する、又は有さ
ない蒸留水に紙を浸し；（ｂ）任意に標識剤を濃縮せし
め；そして（ｃ）標準的なPCR工程によって増幅せしめ
る。
F.食品 準備:20ngの標識剤を物理的な混合又は噴霧塗布によ
って食品1g当りに加える。
回収：（ａ）食品物質を蒸留水で洗浄する；（ｂ）す
すぎ水を任意に濃縮し；そして（ｃ）このすすぎ水を標
準的なPCR工程にかける。

Claims (11)

    (57)【特許請求の範囲】
  1. 【請求項１】輻射線にさらされた環境又は商品流通に流
    出される物の存在をモニターする方法であって、 当該物を、それが輻射線にさらされた環境又は商品流通
    に流出された後に同定されるため、当該物の機能的な部
    分でない長さ20以上、1,000未満のヌクレオチドの核酸
    を有する標識別で標識しておき、 当該環境又は商品流通に流出された当該物を回収し、 前記核酸を増幅し、そして この増幅した核酸を検出する、 ことを含んで成る方法。
  2. 【請求項２】前記増幅の工程がポリメラーゼ連鎖反応技
    術を利用して達成される、請求項１記載の方法。
  3. 【請求項３】前記核酸が合成核酸である、請求項１又は
    ２記載の方法。
  4. 【請求項４】前記合成核酸が、イノシン塩基又は７−デ
    アゾ−２′−デオキシグアノシン、アルキル−ホスホネ
    ートオリゴデオキヌクレオチド、ホスホロチオエートオ
    リゴデオキヌクレオチド及びアルファー−アノマーオリ
    ゴデオキヌクレオチドから成る群から選ばれる誘導化ヌ
    クレオチドを含んで成る、請求項３記載の方法。
  5. 【請求項５】前記物が、大気汚染物質、油、芳香化合
    物、爆薬組成物、食品、医薬品、インキ、紙製品及び塗
    料製品から選ばれる、請求項１〜４のいずれか１項記載
    の方法。
  6. 【請求項６】前記核酸を前記物の成分又は当該物と混合
    した固相支持体に共有結合させる、請求項１〜５のいず
    れか１項記載の方法。
  7. 【請求項７】前記核酸がポリマー物質又は親油性組成物
    により封入されている、請求項１〜５のいずれか１項記
    載の方法。
  8. 【請求項８】標識剤の検出により輻射線にさらされた環
    境又は商品流通に流出される物をそれが当該環境又は商
    品流通に流出された後に同定するために当該物を標識し
    ておく方法であって、当該物の中又は上に当該物の機能
    的な部分でない長さ20以上、1,000未満のヌクレオチド
    塩基の特異的な配列を有する核酸を組み込む工程を含ん
    で成り、ここで当該核酸はイノシン塩基又は７−デアゾ
    −２′−デオキシグアノシン、アルキル−ホスホネート
    オリゴデオキヌクレオチド、ホスホロチオエートオリゴ
    デオキヌクレオチド及びアルファー−アノマーオリゴデ
    オキヌクレオチドから成る群から選ばれる誘導化ヌクレ
    オチドを含んで成るものである、方法。
  9. 【請求項９】前記物が、大気汚染物質、油、芳香化合
    物、爆薬組成物、食品、医薬品、インキ、紙製品及び塗
    料製品から選ばれる、請求項８記載の方法。
  10. 【請求項１０】前記核酸を前記物の成分又は当該物と混
    合した固相支持体に共有結合させる、請求項８又は９記
    載の方法。
  11. 【請求項１１】前記核酸がポリマー物質又は親油性組成
    物により封入されている、請求項８又は９記載の方法。
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Families Citing this family (162)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5429952A (en) * 1988-02-02 1995-07-04 Biocode, Inc. Marking of products to establish identity and source
US5776713A (en) * 1988-02-02 1998-07-07 Biocode Ltd. Marking of products to establish identity and source
US5800992A (en) 1989-06-07 1998-09-01 Fodor; Stephen P.A. Method of detecting nucleic acids
GB9010138D0 (en) * 1990-05-04 1990-06-27 Slater James H An ultrasensitive microtrace procedure for monitoring the origin,movement and fate of any liquid or solid material
US6083689A (en) * 1990-10-16 2000-07-04 Bayer Corporation Sensitive immunoassays utilizing antibody conjugates with replicable DNA templates
WO1992010588A1 (en) 1990-12-06 1992-06-25 Affymax Technologies N.V. Sequencing by hybridization of a target nucleic acid to a matrix of defined oligonucleotides
AU669489B2 (en) * 1991-09-18 1996-06-13 Affymax Technologies N.V. Method of synthesizing diverse collections of oligomers
US5639603A (en) * 1991-09-18 1997-06-17 Affymax Technologies N.V. Synthesizing and screening molecular diversity
CA2129444A1 (en) * 1992-02-04 1993-08-05 Richard C. Ebersole Amplification of assay reporters by nucleic acid replication
GB9218131D0 (en) * 1992-08-26 1992-10-14 Slater James H A method of marking a liquid
US5985548A (en) * 1993-02-04 1999-11-16 E. I. Du Pont De Nemours And Company Amplification of assay reporters by nucleic acid replication
GB9314394D0 (en) * 1993-07-12 1993-08-25 Slater James H A security device using an ultrasensitive microtrace for protecting materials,articles and items
US6165778A (en) * 1993-11-02 2000-12-26 Affymax Technologies N.V. Reaction vessel agitation apparatus
US5503805A (en) * 1993-11-02 1996-04-02 Affymax Technologies N.V. Apparatus and method for parallel coupling reactions
GB9326277D0 (en) * 1993-12-23 1994-02-23 Marconi Gec Ltd Labelling
CA2206486A1 (en) * 1994-12-08 1996-06-13 Peter Alestrom Chemical labelling of objects
US5776737A (en) * 1994-12-22 1998-07-07 Visible Genetics Inc. Method and composition for internal identification of samples
US6458530B1 (en) * 1996-04-04 2002-10-01 Affymetrix Inc. Selecting tag nucleic acids
US6110710A (en) * 1996-10-15 2000-08-29 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services Sequence modification of oligonucleotide primers to manipulate non-templated nucleotide addition
WO1998046544A1 (en) * 1997-04-17 1998-10-22 The Dow Chemical Company Encapsulated vapor-detection and identification tags
NO972556D0 (no) * 1997-06-05 1997-06-05 Forskningsparken I Aas As Metode for merking av væsker og objekter
DE19738816A1 (de) * 1997-09-05 1999-03-11 November Ag Molekulare Medizin Verfahren zur Markierung von festen, flüssigen oder gasförmigen Substanzen
AU6331398A (en) * 1998-02-20 1999-09-06 Biotraces, Inc. Methods and additives for microtagging fluids
GB9822729D0 (en) * 1998-10-20 1998-12-16 Wrc Plc Release system for a marker substance
DE19860546A1 (de) * 1998-12-23 2000-06-29 Knoell Hans Forschung Ev Verfahren zur Identifikation der Herkunft von organischen Flüssigkeiten
AU717638B3 (en) * 1999-01-18 2000-03-30 Legends Genuine Memorabilia Pty Ltd Product and method
US6153389A (en) * 1999-02-22 2000-11-28 Haarer; Brian K. DNA additives as a mechanism for unambiguously marking biological samples
US6806478B1 (en) 1999-03-16 2004-10-19 Cryovac, Inc. Authentication system and methodology
US7253435B2 (en) 1999-04-15 2007-08-07 Millipore Corporation Particles with light-polarizing codes
US6908737B2 (en) * 1999-04-15 2005-06-21 Vitra Bioscience, Inc. Systems and methods of conducting multiplexed experiments
US20030207249A1 (en) * 1999-04-15 2003-11-06 Beske Oren E. Connection of cells to substrates using association pairs
EP1175505A4 (en) * 1999-04-15 2005-04-20 Vitra Bioscience Inc COMBINATORY CHEMICAL BANK HOLDERS HAVING BRANDS AT CODING POSITIONS, AND METHODS OF USE
US20030134330A1 (en) * 1999-04-15 2003-07-17 Ilya Ravkin Chemical-library composition and method
US20030166015A1 (en) * 1999-04-15 2003-09-04 Zarowitz Michael A. Multiplexed analysis of cell-substrate interactions
US20030129654A1 (en) * 1999-04-15 2003-07-10 Ilya Ravkin Coded particles for multiplexed analysis of biological samples
US7112445B1 (en) * 2000-05-19 2006-09-26 Richard P Welle Fragmented taggant coding system and method with application to ammunition tagging
DE19934573C2 (de) * 1999-07-22 2002-12-05 November Ag Molekulare Medizin Verfahren zur Markierung von festen, flüssigen und gasförmigen Substanzen
GB9927292D0 (en) 1999-11-19 2000-01-12 Maxwell Paul Security system
US7157564B1 (en) 2000-04-06 2007-01-02 Affymetrix, Inc. Tag nucleic acids and probe arrays
US20030104494A1 (en) * 2001-10-26 2003-06-05 Ilya Ravkin Assay systems with adjustable fluid communication
US6560544B1 (en) * 2000-04-28 2003-05-06 Ford Motor Company Method for monitoring a mixture
JP2001352980A (ja) * 2000-06-07 2001-12-25 Internatl Business Mach Corp <Ibm> Ｄｎａへの情報記述方法、遺伝情報の出所認証方法、情報を付加したｄｎａ、塩基配列及び生物体の細胞
DE10038169A1 (de) * 2000-08-04 2002-03-07 November Ag Molekulare Medizin Synthetisches Partikel zur Markierung einer Substanz
AUPQ935700A0 (en) * 2000-08-11 2000-09-07 Starguard International Pty Ltd Authentication system and device
US6629038B1 (en) * 2000-09-05 2003-09-30 Yeda Research And Development Co. Ltd. Method and system for identifying commercially distributed organisms
JP2004537712A (ja) * 2000-10-18 2004-12-16 バーチャル・アレイズ・インコーポレーテッド 多重細胞分析システム
DE10055368A1 (de) * 2000-11-08 2002-05-29 Agrobiogen Gmbh Biotechnologie Verfahren zur Kennzeichnung von DNA enthaltenden Proben mittels Oligonukleotiden
FR2819831A1 (fr) * 2001-01-22 2002-07-26 Arjo Wiggins Sa Papier comportant des corps porteurs d'au moins un marqueur biochimique
US7115301B2 (en) 2001-04-09 2006-10-03 Rixflex Holdings Limited Method of marking solid or liquid substances with nucleic acid for anti-counterfeiting and authentication
CA2446206A1 (en) * 2001-05-03 2002-11-14 Warnex Research Inc. A molecular tag code for monitoring a product and process using same
KR100851764B1 (ko) * 2001-06-27 2008-08-13 (주)바이오니아 상전환촉매와 결합된 올리고뉴클레오티드 유도체 및 이를사용하는 물체의 식별 또는 감식 방법
GB0123278D0 (en) * 2001-09-27 2001-11-21 Ucb Sa Labelled articles and uses thereof
US20030219800A1 (en) * 2001-10-18 2003-11-27 Beske Oren E. Multiplexed cell transfection using coded carriers
US20080187949A1 (en) * 2001-10-26 2008-08-07 Millipore Corporation Multiplexed assays of cell migration
JP2003157004A (ja) * 2001-11-21 2003-05-30 Id Technica:Kk 識別手段を付加する添加物及びその添加物を含有する識別情報保持物
DE10222075A1 (de) * 2002-05-17 2003-12-11 Henkel Kgaa Identifizierungsverfahren zum Produktschutz
US20040126773A1 (en) * 2002-05-23 2004-07-01 Beske Oren E. Assays with coded sensor particles to sense assay conditions
AR037006A1 (es) * 2002-06-20 2004-10-20 S I G Sist S De Identificacion Marcador de objetos a identificar consistente en al menos un fragmento de adn.
US20030236219A1 (en) 2002-06-21 2003-12-25 Nightingale Stephen D. Edible product markers and methods for making and using edible product markers
MXPA04012343A (es) 2002-06-21 2005-07-25 D Nightingale Stephen Marcadores multifuncionales de productos y metodos para fabricar y usar los mismos.
DE10231435A1 (de) * 2002-07-11 2004-02-12 Sension, Biologische Detektions- Und Schnelltestsysteme Gmbh Nachweisverfahren zur Prüfung der Originalität eines Objekts
US7279073B2 (en) * 2002-08-13 2007-10-09 U.S. Greenfiber, Llc Apparatus for liquid-based fiber separation
US20080073044A1 (en) * 2002-08-13 2008-03-27 Bowman David J Apparatus for liquid-based fiber separation
EP1560924A4 (en) * 2002-08-16 2006-05-31 Wayne John Cancer Inst MOLECULAR LYMPHATIC MAPPING OF VIRCHOV LYMPHOTIC NODES
US20040058457A1 (en) * 2002-08-29 2004-03-25 Xueying Huang Functionalized nanoparticles
US7361821B2 (en) * 2002-09-20 2008-04-22 Intel Corporation Controlled alignment of nanobarcodes encoding specific information for scanning probe microscopy (SPM) reading
WO2004038037A2 (en) * 2002-09-20 2004-05-06 Intel Corporation Controlled alignment of nano-barcodes encoding specific information for scanning probe microscopy (spm) reading
KR100851765B1 (ko) * 2002-10-16 2008-08-13 (주)바이오니아 올리고뉴클레오티드를 이용한 차량 식별 표지 및 차량감식 방법
US20080207465A1 (en) * 2002-10-28 2008-08-28 Millipore Corporation Assay systems with adjustable fluid communication
US8372648B2 (en) 2003-04-16 2013-02-12 APDN (B.V.I.), Inc. Optical reporter compositions
US20050112610A1 (en) * 2003-04-16 2005-05-26 Applied Dna Sciences, Inc. System and method for marking textiles with nucleic acids
WO2004094986A2 (en) 2003-04-16 2004-11-04 Handylab, Inc. System and method for electrochemical detection of biological compounds
US8426216B2 (en) 2003-04-16 2013-04-23 APDN (B.V.I.), Inc. Methods for authenticating articles with optical reporters
US8415165B2 (en) 2003-04-16 2013-04-09 APDN (B.V.I.), Inc. System and method for authenticating sports identification goods
US8415164B2 (en) 2003-04-16 2013-04-09 Apdn (B.V.I.) Inc. System and method for secure document printing and detection
US8124333B2 (en) 2003-04-16 2012-02-28 APDN, Inc. Methods for covalent linking of optical reporters
US8420400B2 (en) 2003-04-16 2013-04-16 APDN (B.V.I.), Inc. System and method for authenticating tablets
JP2004329014A (ja) * 2003-04-30 2004-11-25 Id Technica:Kk 偽造行為防止機能を備えた識別手段を付加する識別添加物質及び識別情報保持物並びに識別情報保持物の不正使用検出方法
WO2005028621A2 (en) * 2003-09-15 2005-03-31 Vitra Bioscience, Inc. Assays with primary cells
US7488451B2 (en) * 2003-09-15 2009-02-10 Millipore Corporation Systems for particle manipulation
US7875457B2 (en) * 2004-05-12 2011-01-25 Axsun Technologies, Inc. Erasable taggant distribution channel validation method and system
EP1647600A3 (en) 2004-09-17 2006-06-28 Affymetrix, Inc. (A US Entity) Methods for identifying biological samples by addition of nucleic acid bar-code tags
JP4674796B2 (ja) * 2004-12-15 2011-04-20 日産自動車株式会社 非露出面用塗料組成物及び非露出面塗膜
JP2006169332A (ja) * 2004-12-15 2006-06-29 Nissan Motor Co Ltd 着色上塗り塗料組成物及び着色上塗り塗膜
JP2006168084A (ja) * 2004-12-15 2006-06-29 Nissan Motor Co Ltd 積層塗膜構造
JP4674795B2 (ja) * 2004-12-15 2011-04-20 日産自動車株式会社 艶消し塗料組成物及び艶消し塗膜
JP4674794B2 (ja) * 2004-12-15 2011-04-20 日産自動車株式会社 クリヤー塗料組成物及びクリヤー塗膜
JP4674793B2 (ja) * 2004-12-15 2011-04-20 日産自動車株式会社 下塗り塗料組成物及び下塗り塗膜
US7393665B2 (en) * 2005-02-10 2008-07-01 Population Genetics Technologies Ltd Methods and compositions for tagging and identifying polynucleotides
EP1717321A1 (en) * 2005-04-29 2006-11-02 Avvocato Alberto Franchi System for surface identification of commercial products using DNA tracer
US20150141264A1 (en) * 2005-05-20 2015-05-21 Apdn (B.V.I.) Inc. In-field dna extraction, detection and authentication methods and systems therefor
US7874489B2 (en) * 2005-06-20 2011-01-25 Authentiform Technologies, Llc Product authentication
WO2007002016A2 (en) * 2005-06-20 2007-01-04 Johnson & Johnson Systems and methods for product authentication
US8247018B2 (en) * 2005-06-20 2012-08-21 Authentiform Technologies, Llc Methods for quality control
US8785130B2 (en) * 2005-07-07 2014-07-22 Bio-Id Diagnostic Inc. Use of markers including nucleotide sequence based codes to monitor methods of detection and identification of genetic material
WO2007021971A2 (en) * 2005-08-12 2007-02-22 Pharmorx Inc. Labeling compositions and methods of use for deterrent trackability
US20100021887A1 (en) * 2005-09-26 2010-01-28 Moshe Azoulay Probe for tagging valuables based on dna-metal complex
USH2257H1 (en) * 2005-09-28 2011-06-07 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Navy Microtags for detection and identification of materials
US9790538B2 (en) 2013-03-07 2017-10-17 Apdn (B.V.I.) Inc. Alkaline activation for immobilization of DNA taggants
US20140106357A1 (en) * 2012-10-16 2014-04-17 Applied Dna Sciences, Inc. Security system and method of marking an inventory item and/or person in the vicinity
US10741034B2 (en) 2006-05-19 2020-08-11 Apdn (B.V.I.) Inc. Security system and method of marking an inventory item and/or person in the vicinity
DE102007026958B4 (de) * 2006-06-13 2014-10-09 Csem Centre Suisse D'electronique Et De Microtechnique S.A. Presswerkzeug mit diffraktiver Mikrostruktur und Verfahren zur Herstellung eines solchen Werkzeugs sowie Tablettierungspresse
WO2007144826A2 (de) * 2006-06-13 2007-12-21 Csem Centre Suisse D'electronique Et De Microtechnique Sa Pharmazeutische tabletten mit diffraktiver mikrostruktur und presswerkzeuge zur herstellung solcher tabletten
CH699631B1 (de) * 2007-01-12 2010-04-15 Suisse Electronique Microtech Realisieren einer diffraktiven Mikrostruktur in eine Pillenoberfläche.
WO2008033042A2 (en) * 2006-09-12 2008-03-20 Agresearch Limited Method for identifying the origin of a compound biological product
DE102006044349A1 (de) * 2006-09-18 2008-03-27 Identif Gmbh Verfahren zum Vor-Ort-Authentifizieren einer Substanz
EP2119433B1 (en) 2007-02-16 2015-06-17 CSEM Centre Suisse d'Electronique et de Microtechnique SA - Recherche et Développement Verification method
WO2008124936A1 (en) * 2007-04-16 2008-10-23 Mcmaster University Method of producing bioactive paper
EP1990779B1 (en) 2007-05-07 2016-09-14 CSEM Centre Suisse d'Electronique et de Microtechnique SA - Recherche et Développement Security device for the identification or authentication of goods and method for securing goods using such a security device
EP2012293A1 (en) * 2007-07-06 2009-01-07 Nederlandse Organisatie voor toegepast- natuurwetenschappelijk onderzoek TNO Method for marking materials
FR2930063B1 (fr) * 2008-04-14 2013-02-15 Bioquanta Procede de marquage d'un produit, procede d'identification du marquage et produit marque
US20090269800A1 (en) * 2008-04-29 2009-10-29 Todd Covey Device and method for processing cell samples
US20120003749A1 (en) * 2008-05-21 2012-01-05 Nec Soft, Ltd. Nucleic acid molecule capable of binding to 2,4,6-trinitrophenyl skeleton, method for detecting compound having 2,4,6-trinitrophenyl skeleton using the nucleic acid molecule, and use of the nucleic acid molecule
US9183237B2 (en) 2008-07-10 2015-11-10 Nodality, Inc. Methods and apparatus related to gate boundaries within a data space
US20100030719A1 (en) * 2008-07-10 2010-02-04 Covey Todd M Methods and apparatus related to bioinformatics data analysis
US20100014741A1 (en) * 2008-07-10 2010-01-21 Banville Steven C Methods and apparatus related to gate boundaries within a data space
GB2474613A (en) * 2008-07-10 2011-04-20 Nodality Inc Methods and apparatus related to management of experiments
WO2010011833A1 (en) 2008-07-23 2010-01-28 Alexander Stuck Secure tracking of tablets
US9034257B2 (en) 2008-10-27 2015-05-19 Nodality, Inc. High throughput flow cytometry system and method
US8940485B2 (en) 2008-11-12 2015-01-27 Apdn (B.V.I.) Inc. Methods for genotyping mature cotton fibers and textiles
US8669079B2 (en) 2008-11-12 2014-03-11 Cara Therapeutics, Inc. Methods for genetic analysis of textiles made of Gossypium barbadense and Gossypium hirsutum cotton
FR2942807B1 (fr) * 2009-03-09 2013-10-18 Commissariat Energie Atomique Procede de detection, d'identification et/ou de quantification de nanotubes de carbone
US8053744B2 (en) * 2009-04-13 2011-11-08 Src, Inc. Location analysis using nucleic acid-labeled tags
GB2472371B (en) * 2009-04-24 2011-10-26 Selectamark Security Systems Plc Synthetic nucleotide containing compositions for use in security marking of property and/or for marking a thief or attacker
US9189728B2 (en) 2009-07-23 2015-11-17 I-Property Holding Corp. Method for the authentication of dosage forms
US8735327B2 (en) 2010-01-07 2014-05-27 Jeansee, Llc Combinatorial DNA taggants and methods of preparation and use thereof
US8703493B2 (en) 2010-06-15 2014-04-22 Src, Inc. Location analysis using fire retardant-protected nucleic acid-labeled tags
US8716027B2 (en) * 2010-08-03 2014-05-06 Src, Inc. Nucleic acid-labeled tags associated with odorant
KR101352391B1 (ko) * 2010-09-03 2014-01-24 (주)바이오니아 올리고뉴클레오티드 마커 및 이를 이용한 물체의 식별 또는 감식방법
KR101350919B1 (ko) * 2011-03-14 2014-01-14 (주)바이오니아 핵산을 포함하는 물체의 식별 방법
GB2489714B (en) 2011-04-05 2013-11-06 Tracesa Ltd Fluid Identification Method
JP2013050941A (ja) * 2011-07-30 2013-03-14 Visionbio Corp 製品検査方法
US9057712B1 (en) 2011-10-27 2015-06-16 Copilot Ventures Fund Iii Llc Methods of delivery of encapsulated perfluorocarbon taggants
US9266370B2 (en) 2012-10-10 2016-02-23 Apdn (B.V.I) Inc. DNA marking of previously undistinguished items for traceability
US9297032B2 (en) 2012-10-10 2016-03-29 Apdn (B.V.I.) Inc. Use of perturbants to facilitate incorporation and recovery of taggants from polymerized coatings
WO2014070958A1 (en) 2012-10-30 2014-05-08 Certirx Corporation Product, image, or document authentication, verification, and item identification
US9243283B2 (en) 2012-11-19 2016-01-26 Src, Inc. System and method for authentication and tamper detection using nucleic acid taggants
US9963740B2 (en) 2013-03-07 2018-05-08 APDN (B.V.I.), Inc. Method and device for marking articles
WO2014152775A2 (en) 2013-03-14 2014-09-25 Certirx Corporation Nucleic acid-based authentication and identification codes
AU2014233373B2 (en) * 2013-03-15 2019-10-24 Verinata Health, Inc. Generating cell-free DNA libraries directly from blood
US20140349861A1 (en) * 2013-05-22 2014-11-27 Sunpower Technologies Llc Method for Distinguishing Biological Material Products
GB201315745D0 (en) * 2013-09-04 2013-10-16 Maersk Olie & Gas Enhanced hydrocarbon recovery
CA2926436A1 (en) 2013-10-07 2015-04-16 Judith Murrah Multimode image and spectral reader
US10745825B2 (en) 2014-03-18 2020-08-18 Apdn (B.V.I.) Inc. Encrypted optical markers for security applications
CN106103121B (zh) 2014-03-18 2019-12-06 亚普蒂恩(B.V.I.)公司 用于安全应用的加密光学标记物
US9751812B2 (en) 2014-05-30 2017-09-05 Elwha Llc Taggant for cement authentication
US10760182B2 (en) 2014-12-16 2020-09-01 Apdn (B.V.I.) Inc. Method and device for marking fibrous materials
WO2016149296A1 (en) * 2015-03-17 2016-09-22 Apdn (B.V.I.) Inc. Method for authenticating active pharmaceutical ingredients
WO2016172137A1 (en) * 2015-04-20 2016-10-27 Apdn (B.V.I.) Inc. Hydrophobic nucleic acid salts as security markers
JP7051677B2 (ja) * 2015-09-29 2022-04-11 カパ バイオシステムズ， インコーポレイテッド 次世代シークエンシングのための高分子量ｄｎａサンプル追跡タグ
US10047235B2 (en) * 2015-12-08 2018-08-14 Xerox Corporation Encoding liquid ink with a device specific biomarker
US20170228826A1 (en) * 2016-02-08 2017-08-10 Apdn (B.V.I.) Inc. Identifying marked articles in the international stream of commerce
CN109070130B (zh) 2016-04-11 2022-03-22 亚普蒂恩（B V I）公司 用于标记纤维素产品的方法
JP2019521713A (ja) * 2016-07-22 2019-08-08 ヌクレオトレイス プロプライアタリー リミティド 核酸配列の増幅方法
US10995371B2 (en) 2016-10-13 2021-05-04 Apdn (B.V.I.) Inc. Composition and method of DNA marking elastomeric material
US20180194796A1 (en) * 2017-01-12 2018-07-12 Apdn (B.V.I.) Inc. Traceable nucleic acid marked fertilizer
GB201701574D0 (en) * 2017-01-31 2017-03-15 Forecast Tech Ltd Oil tagging
US10920274B2 (en) 2017-02-21 2021-02-16 Apdn (B.V.I.) Inc. Nucleic acid coated submicron particles for authentication
WO2019204482A1 (en) * 2018-04-17 2019-10-24 Invisidex, Inc. Composition of variegated witness mark
GB201819256D0 (en) 2018-11-27 2019-01-09 Crime Solutions Ltd Security markers
US20230101409A1 (en) 2021-09-30 2023-03-30 Microsoft Technology Licensing, Llc Anti-counterfeit tags using high-complexity polynucleotides
US20230101083A1 (en) 2021-09-30 2023-03-30 Microsoft Technology Licensing, Llc Anti-counterfeit tags using base ratios of polynucleotides

Family Cites Families (15)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4441943A (en) * 1981-05-18 1984-04-10 Hri Inc. Polypeptides as chemical tagging materials
US4359353A (en) * 1981-05-18 1982-11-16 Hydrocarbon Research, Inc. Polypeptides as chemical tagging materials
US4786600A (en) * 1984-05-25 1988-11-22 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Autocatalytic replication of recombinant RNA
US4957858A (en) * 1986-04-16 1990-09-18 The Salk Instute For Biological Studies Replicative RNA reporter systems
US4683195A (en) * 1986-01-30 1987-07-28 Cetus Corporation Process for amplifying, detecting, and/or-cloning nucleic acid sequences
US4683202A (en) * 1985-03-28 1987-07-28 Cetus Corporation Process for amplifying nucleic acid sequences
US4703011A (en) * 1985-11-12 1987-10-27 Novagene, Inc. Thymidine kinase deletion mutants of bovine herpesvirus-1
GB8529275D0 (en) * 1985-11-28 1986-01-02 Whitbread & Co Plc Dna recombination
JPH0684474B2 (ja) * 1986-02-26 1994-10-26 東レ・ダウコ−ニング・シリコ−ン株式会社 シリカ含有オルガノポリシロキサン組成物
GB8608629D0 (en) * 1986-04-09 1986-05-14 Biotechnica Ltd Labelling
ZA876216B (en) * 1986-08-22 1989-04-26 Cetus Corp Purified thermostable enzyme
CA1338457C (en) * 1986-08-22 1996-07-16 Henry A. Erlich Purified thermostable enzyme
EP0290144A1 (en) * 1987-05-05 1988-11-09 City of Hope Method of detecting incipient resistance to therapeutic agents in cancer patients
NO884048L (no) * 1988-09-12 1990-03-13 Cheminor As Elektrolyse av kobber i tynne loesninger som inneholder stoerre mengder jern.
FR2649518B1 (fr) * 1989-07-07 1991-10-18 Bioprobe Systems Sa Procede et dispositif de marquage crypte de haute securite pour la protection d'objets de valeur

Also Published As

Publication number Publication date
EP0477220A1 (en) 1992-04-01
ATE142274T1 (de) 1996-09-15
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DE69028402D1 (de) 1996-10-10
ES2091243T3 (es) 1996-11-01
EP0477220B1 (en) 1996-09-04
AU643217B2 (en) 1993-11-11
CA2017211A1 (en) 1990-11-22
DK0477220T3 (da) 1996-10-21
US5451505A (en) 1995-09-19
CA2017211C (en) 2004-02-10
WO1990014441A1 (en) 1990-11-29
JPH04505708A (ja) 1992-10-08
AU5741990A (en) 1990-12-18

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