JP3021954B2 - Long-chain carboxylic acid imide ester - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION

【０００１】[0001]

【産業上の利用分野】本発明は、長鎖カルボン酸イミド
エステルまたはその塩に関する。本発明により提供され
る長鎖カルボン酸イミドエステルまたはその塩は、生理
活性を有する酵素または蛋白質（以下、酵素および蛋白
質を蛋白質と総称する）の生理活性を概ね保持したまま
で、該蛋白質に比べて大幅に延長された血中半減期を有
し、抗原性がなく、かつ生体内への投与が可能な蛋白質
誘導体を与える蛋白質の化学修飾剤として有用である。The present invention relates to a long-chain carboxylic imide ester or a salt thereof. The long-chain carboxylic acid imide ester or a salt thereof provided by the present invention can be compared with a protein or protein having a physiological activity (hereinafter, enzymes and proteins are collectively referred to as a protein) while substantially retaining the physiological activity of the protein or protein. Thus, it is useful as a chemical modifier for a protein that has a significantly extended blood half-life, has no antigenicity, and gives a protein derivative that can be administered in vivo.

【０００２】[0002]

【従来の技術】従来、蛋白質を種々の修飾剤により改良
する試みが数多くなされてきている。最も活発に研究が
行われている修飾剤としてポリエチレングリコ−ル（以
下、これをＰＥＧと略称する）を挙げることができる。
ＰＥＧは、例えば抗癌剤としてのアスパラギナ−ゼ、ア
ルギナ−ゼ、インタ−ロイキン−２（以下、これをＩＬ
−２と略称する）等の修飾、血栓溶解剤としてのウロキ
ナ−ゼ、ストレプトキナ−ゼ、ティッシュ−プラスミノ
−ゲンアクチベ−タ−（以下、これをＴＰＡと略称す
る）等の修飾、酵素欠損症治療剤としてのβ−グルコシ
ダ−ゼ、β−グルクロニダ−ゼ、α−ガラクトシダ−
ゼ、アデノシンデアミナ−ゼ等の修飾、痛風治療剤とし
てのウリカ−ゼの修飾、抗炎症剤または虚血性疾患治療
剤などとしてのス−パ−オキシドジスムタ−ゼ（以下、
これをＳＯＤと略称する）の修飾、糖尿病治療剤として
のインシュリンの修飾、高ビリルビン血症治療剤として
のビリルビンオキシダ−ゼの修飾などに使用されてい
る。さらに、最近、造血促進因子の１つであるヒト顆粒
球コロニ−刺激因子（以下、これをＧ−ＣＳＦと略称す
る）をＰＥＧで修飾し、その血中寿命を延長し、造血障
害の治療等に用いようとする試みもなされている（特開
平 1-316400号公報および国際公開 WO90/06952号公報参
照）。また、ＰＥＧ以外の修飾剤として、血清アルブミ
ン、デキストラン等の天然高分子物質、ポリアスパラギ
ン酸、部分半エステル化されたスチレン−無水マレイン
酸共重合体（以下、これをＳＭＡと略称する）、長鎖脂
肪酸の反応性誘導体などを例示することができる（「タ
ンパク質ハイブリッド」、第１章、第２章、第３章およ
び第６章、共立出版株式会社、1987年 4月 1日発行；
「続タンパク質ハイブリッド」、第３章、第４章および
第６章、共立出版株式会社、1988年5月 20日発行；「Ｓ
ＯＤの新知見」、107 頁、日本アクセル・シュプリンガ
−出版株式会社、1990年 12月 20日発行参照）。2. Description of the Related Art Conventionally, many attempts have been made to improve proteins with various modifiers. The most actively studied modifier is polyethylene glycol (hereinafter abbreviated as PEG).
PEG can be used, for example, as an anti-cancer drug asparaginase, arginase, interleukin-2 (hereinafter referred to as IL).
-2), urokinase, streptokinase, tissue-plasminogen activator (hereinafter abbreviated as TPA) as a thrombolytic agent, treatment of enzyme deficiency Β-glucosidase, β-glucuronidase, α-galactosidase as agents
, Adenosine deaminase and the like, uricase as a gout remedy, and superoxide dismutase (hereinafter referred to as an anti-inflammatory or ischemic disease therapeutic).
This is used for modification of insulin as a therapeutic agent for diabetes, bilirubin oxidase as a therapeutic agent for hyperbilirubinemia, and the like. Furthermore, recently, human granulocyte colony-stimulating factor (hereinafter, abbreviated as G-CSF), which is one of the hematopoietic promoting factors, is modified with PEG to extend its blood life and treat hematopoietic disorders. Attempts have also been made (see JP-A 1-316400 and WO 90/06952). Examples of modifiers other than PEG include natural polymer substances such as serum albumin and dextran, polyaspartic acid, partially semi-esterified styrene-maleic anhydride copolymer (hereinafter abbreviated as SMA), Examples thereof include reactive derivatives of chain fatty acids ("Protein hybrid", Chapter 1, Chapter 2, Chapter 3, and Chapter 6, published by Kyoritsu Shuppan Co., Ltd., April 1, 1987;
"Sequence of protein hybrids", Chapters 3, 4 and 6, Kyoritsu Shuppan Co., Ltd., published May 20, 1988; "S
New Findings of OD ”, p. 107, Axel Springer-Japan Publishing Co., Ltd., issued on December 20, 1990).

【０００３】[0003]

【発明が解決しようとする課題】血清アルブミンで修飾
されたＳＯＤには抗原性がある［エイジェンツ・アンド
・アクションズ（Agents and Actions）、10巻、231頁
(1980)参照］。また、デキストラン、ＰＥＧ、ポリアス
パラギン酸、ＳＭＡ等の修飾剤は高分子化学的には構造
が特定できるが、その分子量には分布が存在するため、
これらにより修飾された蛋白質の分子量は一定ではな
く、医薬の有効成分は単一の化学構造を有することが望
ましい状況にあることを考慮すれば実用上問題がある。SOD modified with serum albumin has antigenicity [Agents and Actions, 10, 231]
(1980)]. Modifiers such as dextran, PEG, polyaspartic acid, and SMA can be structurally identified by polymer chemistry, but their molecular weights have a distribution.
The molecular weight of the protein modified by these is not constant, and there is a practical problem in view of the fact that it is desirable that the active ingredient of a medicine has a single chemical structure.

【０００４】しかして、本発明の目的は、非修飾蛋白質
に比べて、大幅に血中寿命が延長され、抗原性がなく、
生体への投与が可能な蛋白質誘導体を与える蛋白質の化
学修飾剤であり、かつ単一の化学構造を有する新規な長
鎖カルボン酸イミドエステルまたはその塩を提供するこ
とにある。[0004] Accordingly, an object of the present invention is to significantly extend the lifespan in blood and to have no antigenicity, as compared with an unmodified protein.
An object of the present invention is to provide a novel long-chain carboxylic acid imide ester having a single chemical structure or a salt thereof, which is a protein chemical modifier that gives a protein derivative that can be administered to a living body.

【０００５】[0005]

【課題を解決するための手段】本発明によれば、上記の
目的は、下記の一般式（Ｉ）According to the present invention, the above object is achieved by the following general formula (I)

【０００６】[0006]

【化２】 Embedded image

【０００７】（式中、Ｗは１個以上の酸素原子、硫黄原
子、または式−Ｎ（Ｒ^１）−（式中、Ｒ^１は低級アルキ
ル基を表す）で示される基で中断されていてもよい主鎖
原子数が８〜２８の２価の炭化水素基を示し、Ｘは置換
基を有していてもよい２価の炭化水素基を示す）で示さ
れる長鎖カルボン酸イミドエステル（以下、長鎖カルボ
ン酸イミドエステル（Ｉ）と略称する）またはその塩を
提供することによって達成される。Wherein W is interrupted by one or more oxygen atoms, sulfur atoms, or groups of the formula -N (R ¹ )-, wherein R ¹ represents a lower alkyl group. Good backbone
A long-chain carboxylic acid imide ester represented by a divalent hydrocarbon group having 8 to 28 atoms , and X represents a divalent hydrocarbon group which may have a substituent (hereinafter referred to as a long-chain hydrocarbon group) (Abbreviated as carboxylic acid imide ester (I)) or a salt thereof.

【０００８】上記一般式（Ｉ）におけるＷで表される２
価の炭化水素基としては、長鎖カルボン酸イミドエステ
ル（Ｉ）の蛋白質の化学修飾剤としての有用性を考慮す
れば、主鎖原子数が８〜２８であることが好ましく、１
０〜２０であることがより好ましい。[0008] 2 represented by W in the above general formula (I)
In view of the usefulness of the long-chain carboxylic imide ester (I) as a chemical modifier for proteins, the monovalent hydrocarbon group preferably has 8 to 28 main chain atoms, and
More preferably, it is 0-20.

【０００９】またＲ¹が表す低級アルキル基としては、
例えば、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピ
ル基などを挙げることができる。The lower alkyl group represented by R ¹ includes:
For example, a methyl group, an ethyl group, a propyl group, an isopropyl group and the like can be mentioned.

【００１０】しかして、長鎖カルボン酸イミドエステル
（Ｉ）において、Ｗで示される２価の炭化水素基として
は、例えば下記に示す基を挙げることができる。In the long-chain carboxylic imide ester (I), examples of the divalent hydrocarbon group represented by W include the following groups.

【００１１】（ＣＨ₂）₁₀、（ＣＨ₂）₁₁、（Ｃ
Ｈ₂）₁₂、（ＣＨ₂）₁₃、（ＣＨ₂）₁₄、（ＣＨ₂）₁₅、
（ＣＨ₂）₁₆、（ＣＨ₂）₁₇、（ＣＨ₂）₁₈、（Ｃ
Ｈ₂）₁₉、（ＣＨ₂）₂₀、ＣＨ₂ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ₂）₇、
（ＣＨ₂）₂ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ₂）₇、（ＣＨ₂）₃ＣＨ＝Ｃ
Ｈ（ＣＨ₂）₇、（ＣＨ₂）₄ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ₂）₇、（Ｃ
Ｈ₂）₅ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ₂）₇、（ＣＨ₂）₆ＣＨ＝ＣＨ
（ＣＨ₂）₇、（ＣＨ₂）₇ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ₂）₇、（ＣＨ
₂）₈ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ₂）₇、（ＣＨ₂）₉ＣＨ＝ＣＨ（Ｃ
Ｈ₂）₇、（ＣＨ₂）₁₀ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ₂）₇、（ＣＨ₂）
₁₁ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ₂）₇、（ＣＨ₂）₈ＣＨ＝ＣＨＣ
Ｈ₂、（ＣＨ₂）₈ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ₂）₂、（ＣＨ₂）₈Ｃ
Ｈ＝ＣＨ（ＣＨ₂）₃、（ＣＨ₂）₈ＣＨ＝ＣＨ（Ｃ
Ｈ₂）₄、（ＣＨ₂）₈ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ₂）₅、（ＣＨ₂）₈
ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ₂）₆、（ＣＨ₂）₈ＣＨ＝ＣＨ（Ｃ
Ｈ₂）₇、（ＣＨ₂）₈ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ₂）₈、（ＣＨ₂）₈
ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ₂）₉、（ＣＨ₂）₈ＣＨ＝ＣＨ（Ｃ
Ｈ₂）₁₀、ＣＨ₂ＣＨ＝ＣＨＣＨ₂ＣＨ＝ＣＨ（Ｃ
Ｈ₂）₇、（ＣＨ₂）₂ＣＨ＝ＣＨＣＨ₂ＣＨ＝ＣＨ（Ｃ
Ｈ₂）₇、（ＣＨ₂）₃ＣＨ＝ＣＨＣＨ₂ＣＨ＝ＣＨ（Ｃ
Ｈ₂）₇、（ＣＨ₂）₄ＣＨ＝ＣＨＣＨ₂ＣＨ＝ＣＨ（Ｃ
Ｈ₂）₇、（ＣＨ₂）₅ＣＨ＝ＣＨＣＨ₂ＣＨ＝ＣＨ（Ｃ
Ｈ₂）₇、（ＣＨ₂）₆ＣＨ＝ＣＨＣＨ₂ＣＨ＝ＣＨ（Ｃ
Ｈ₂）₇、（ＣＨ₂）₇ＣＨ＝ＣＨＣＨ₂ＣＨ＝ＣＨ（Ｃ
Ｈ₂）₇、（ＣＨ₂）₈ＣＨ＝ＣＨＣＨ₂ＣＨ＝ＣＨ（Ｃ
Ｈ₂）₇、（ＣＨ₂）₂−Ｏ−（ＣＨ₂）₇、（ＣＨ₂）₂−Ｏ
−（ＣＨ₂）₈、（ＣＨ₂）₂−Ｏ−（ＣＨ₂）₉、（Ｃ
Ｈ₂）₂−Ｏ−（ＣＨ₂）₁₀、（ＣＨ₂）₂−Ｏ−（ＣＨ₂）
₁₁、（ＣＨ₂）₂−Ｏ−（ＣＨ₂）₁₂、（ＣＨ₂）₂−Ｏ−
（ＣＨ₂）₁₃、（ＣＨ₂）₂−Ｏ−（ＣＨ₂）₁₄、（Ｃ
Ｈ₂）₂−Ｏ−（ＣＨ₂）₁₅、（ＣＨ₂）₂−Ｏ−（ＣＨ₂）
₁₆、（ＣＨ₂）₂−Ｏ−（ＣＨ₂）₁₇、（ＣＨ₂）₄−Ｏ−
（ＣＨ₂）₅、（ＣＨ₂）₄−Ｏ−（ＣＨ₂）₆、（ＣＨ₂）₄
−Ｏ−（ＣＨ₂）₇、（ＣＨ₂）₄−Ｏ−（ＣＨ₂）₈、（Ｃ
Ｈ₂）₄−Ｏ−（ＣＨ₂）₉、（ＣＨ₂）₄−Ｏ−（ＣＨ₂）
₁₀、（ＣＨ₂）₄−Ｏ−（ＣＨ₂）₁₁、（ＣＨ₂）₄−Ｏ−
（ＣＨ₂）₁₂、（ＣＨ₂）₄−Ｏ−（ＣＨ₂）₁₃、（Ｃ
Ｈ₂）₄−Ｏ−（ＣＨ₂）₁₄、（ＣＨ₂）₄−Ｏ−（ＣＨ₂）
₁₅、（ＣＨ₂）₆−Ｏ−（ＣＨ₂）₃、（ＣＨ₂）₆−Ｏ−
（ＣＨ₂）₄、（ＣＨ₂）₆−Ｏ−（ＣＨ₂）₅、（ＣＨ₂）₆
−Ｏ−（ＣＨ₂）₆、（ＣＨ₂）₆−Ｏ−（ＣＨ₂）₇、（Ｃ
Ｈ₂）₆−Ｏ−（ＣＨ₂）₈、（ＣＨ₂）₆−Ｏ−（Ｃ
Ｈ₂）₉、（ＣＨ₂）₆−Ｏ−（ＣＨ₂）₁₀、（ＣＨ₂）₆−
Ｏ−（ＣＨ₂）₁₁、（ＣＨ₂）₆−Ｏ−（ＣＨ₂）₁₂、（Ｃ
Ｈ₂）₆−Ｏ−（ＣＨ₂）₁₃、（ＣＨ₂）₈−Ｏ−ＣＨ₂、
（ＣＨ₂）₈−Ｏ−（ＣＨ₂）₂、（ＣＨ₂）₈−Ｏ−（ＣＨ
₂）₃、（ＣＨ₂）₈−Ｏ−（ＣＨ₂）₄、（ＣＨ₂）₈−Ｏ−
（ＣＨ₂）₅、（ＣＨ₂）₈−Ｏ−（ＣＨ₂）₆、（ＣＨ₂）₈
−Ｏ−（ＣＨ₂）₇、（ＣＨ₂）₈−Ｏ−（ＣＨ₂）₈、（Ｃ
Ｈ₂）₈−Ｏ−（ＣＨ₂）₉、（ＣＨ₂）₈−Ｏ−（ＣＨ₂）
₁₀、（ＣＨ₂）₈−Ｏ−（ＣＨ₂）₁₁、（ＣＨ₂）₁₀−Ｏ−
ＣＨ₂、（ＣＨ₂）₁₀−Ｏ−（ＣＨ₂）₂、（ＣＨ₂）₁₀−
Ｏ−（ＣＨ₂）₃、（ＣＨ₂）₁₀−Ｏ−（ＣＨ₂）₄、（Ｃ
Ｈ₂）₁₀−Ｏ−（ＣＨ₂）₅、（ＣＨ₂）₁₀−Ｏ−（Ｃ
Ｈ₂）₆、（ＣＨ₂）₁₀−Ｏ−（ＣＨ₂）₇、（ＣＨ₂）₁₀−
Ｏ−（ＣＨ₂）₈、（ＣＨ₂）₁₀−Ｏ−（ＣＨ₂）₉、（Ｃ
Ｈ₂）₁₂−Ｏ−ＣＨ₂、（ＣＨ₂）₁₂−Ｏ−（ＣＨ₂）₂、
（ＣＨ₂）₁₂−Ｏ−（ＣＨ₂）₃、（ＣＨ₂）₁₂−Ｏ−（Ｃ
Ｈ₂）₄、（ＣＨ₂）₁₂−Ｏ−（ＣＨ₂）₅、（ＣＨ₂）₁₂−
Ｏ−（ＣＨ₂）₆、（ＣＨ₂）₁₂−Ｏ−（ＣＨ₂）₇、ＣＨ₂
−Ｏ−（ＣＨ₂）₅ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ₂）₇、（ＣＨ₂）₂−
Ｏ−（ＣＨ₂）₅ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ₂）₇、（ＣＨ₂）₃−Ｏ
−（ＣＨ₂）₅ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ₂）₇、（ＣＨ₂）₄−Ｏ−
（ＣＨ₂）₅ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ₂）₇、（ＣＨ₂）₅−Ｏ−
（ＣＨ₂）₅ＣＨ＝ＣＨ（ＣＨ₂）₇、（ＣＨ₂）₂−Ｓ−
（ＣＨ₂）₇、（ＣＨ₂）₂−Ｓ−（ＣＨ₂）₈、（ＣＨ₂）₂
−Ｓ−（ＣＨ₂）₉、（ＣＨ₂）₂−Ｓ−（ＣＨ₂）₁₀、
（ＣＨ₂）₂−Ｓ−（ＣＨ₂）₁₁、（ＣＨ₂）₂−Ｓ−（Ｃ
Ｈ₂）₁₂、（ＣＨ₂）₂−Ｓ−（ＣＨ₂）₁₃、（ＣＨ₂）₂−
Ｓ−（ＣＨ₂）₁₄、（ＣＨ₂）₂−Ｓ−（ＣＨ₂）₁₅、（Ｃ
Ｈ₂）₂−Ｓ−（ＣＨ₂）₁₆、（ＣＨ₂）₂−Ｓ−（ＣＨ₂）
₁₇、（ＣＨ₂）₄−Ｓ−（ＣＨ₂）₅、（ＣＨ₂）₄−Ｓ−
（ＣＨ₂）₆、（ＣＨ₂）₄−Ｓ−（ＣＨ₂）₇、（ＣＨ₂）₄
−Ｓ−（ＣＨ₂）₈、（ＣＨ₂）₄−Ｓ−（ＣＨ₂）₉、（Ｃ
Ｈ₂）₄−Ｓ−（ＣＨ₂）₁₀、（ＣＨ₂）₄−Ｓ−（ＣＨ₂）
₁₁、（ＣＨ₂）₄−Ｓ−（ＣＨ₂）₁₂、（ＣＨ₂）₄−Ｓ−
（ＣＨ₂）₁₃、（ＣＨ₂）₄−Ｓ−（ＣＨ₂）₁₄、（Ｃ
Ｈ₂）₄−Ｓ−（ＣＨ₂）₁₅、（ＣＨ₂）₆−Ｓ−（ＣＨ₂）
₃、（ＣＨ₂）₆−Ｓ−（ＣＨ₂）₄、（ＣＨ₂）₆−Ｓ−
（ＣＨ₂）₅、（ＣＨ₂）₆−Ｓ−（ＣＨ₂）₆、（ＣＨ₂）₆
−Ｓ−（ＣＨ₂）₇、（ＣＨ₂）₆−Ｓ−（ＣＨ₂）₈、（Ｃ
Ｈ₂）₆−Ｓ−（ＣＨ₂）₉、（ＣＨ₂）₆−Ｓ−（ＣＨ₂）
₁₀、（ＣＨ₂）₆−Ｓ−（ＣＨ₂）₁₁、（ＣＨ₂）₆−Ｓ−
（ＣＨ₂）₁₂、（ＣＨ₂）₆−Ｓ−（ＣＨ₂）₁₃、（Ｃ
Ｈ₂）₈−Ｓ−ＣＨ₂、（ＣＨ₂）₈−Ｓ−（ＣＨ₂）₂、
（ＣＨ₂）₈−Ｓ−（ＣＨ₂）₃、（ＣＨ₂）₈−Ｓ−（ＣＨ
₂）₄、（ＣＨ₂）₈−Ｓ−（ＣＨ₂）₅、（ＣＨ₂）₈−Ｓ−
（ＣＨ₂）₆、（ＣＨ₂）₈−Ｓ−（ＣＨ₂）₇、（ＣＨ₂）₈
−Ｓ−（ＣＨ₂）₈、（ＣＨ₂）₈−Ｓ−（ＣＨ₂）₉、（Ｃ
Ｈ₂）₈−Ｓ−（ＣＨ₂）₁₀、（ＣＨ₂）₈−Ｓ−（ＣＨ₂）
₁₁、（ＣＨ₂）₁₀−Ｓ−ＣＨ₂、（ＣＨ₂）₁₀−Ｓ−（Ｃ
Ｈ₂）₂、（ＣＨ₂）₁₀−Ｓ−（ＣＨ₂）₃、（ＣＨ₂）₁₀−
Ｓ−（ＣＨ₂）₄、（ＣＨ₂）₁₀−Ｓ−（ＣＨ₂）₅、（Ｃ
Ｈ₂）₁₀−Ｓ−（ＣＨ₂）₆、（ＣＨ₂）₁₀−Ｓ−（Ｃ
Ｈ₂）₇、（ＣＨ₂）₁₀−Ｓ−（ＣＨ₂）₈、（ＣＨ₂）₁₀−
Ｓ−（ＣＨ₂）₉、（ＣＨ₂）₁₂−Ｓ−ＣＨ₂、（ＣＨ₂）
₁₂−Ｓ−（ＣＨ₂）₂、（ＣＨ₂）₁₂−Ｓ−（ＣＨ₂）₃、
（ＣＨ₂）₁₂−Ｓ−（ＣＨ₂）₄、（ＣＨ₂）₁₂−Ｓ−（Ｃ
Ｈ₂）₅、（ＣＨ₂）₁₂−Ｓ−（ＣＨ₂）₆、（ＣＨ₂）₁₂−
Ｓ−（ＣＨ₂）₇、（ＣＨ₂）₂−Ｎ（ＣＨ₃）−（ＣＨ₂）
₇、（ＣＨ₂）₂−Ｎ（ＣＨ₃）−（ＣＨ₂）₈、（ＣＨ₂）₂
−Ｎ（ＣＨ₃）−（ＣＨ₂）₉、（ＣＨ₂）₂−Ｎ（ＣＨ₃）
−（ＣＨ₂）₁₀、（ＣＨ₂）₂−Ｎ（ＣＨ₃）−（ＣＨ₂）
₁₁、（ＣＨ₂）₂−Ｎ（ＣＨ₃）−（ＣＨ₂）₁₂、（Ｃ
Ｈ₂）₂−Ｎ（ＣＨ₃）−（ＣＨ₂）₁₃、（ＣＨ₂）₂−Ｎ
（ＣＨ₃）−（ＣＨ₂）₁₄、（ＣＨ₂）₂−Ｎ（ＣＨ₃）−
（ＣＨ₂）₁₅、（ＣＨ₂）₂−Ｎ（ＣＨ₃）−（Ｃ
Ｈ₂）₁₆、（ＣＨ₂）₂−Ｎ（ＣＨ₃）−（ＣＨ₂）₁₇、
（ＣＨ₂）₄−Ｎ（ＣＨ₃）−（ＣＨ₂）₅、（ＣＨ₂）₄−
Ｎ（ＣＨ₃）−（ＣＨ₂）₆、（ＣＨ₂）₄−Ｎ（ＣＨ₃）−
（ＣＨ₂）₇、（ＣＨ₂）₄−Ｎ（ＣＨ₃）−（ＣＨ₂）₈、
（ＣＨ₂）₄−Ｎ（ＣＨ₃）−（ＣＨ₂）₉、（ＣＨ₂）₄−
Ｎ（ＣＨ₃）−（ＣＨ₂）₁₀、（ＣＨ₂）₄−Ｎ（ＣＨ₃）
−（ＣＨ₂）₁₁、（ＣＨ₂）₄−Ｎ（ＣＨ₃）−（ＣＨ₂）
₁₂、（ＣＨ₂）₄−Ｎ（ＣＨ₃）−（ＣＨ₂）₁₃、（Ｃ
Ｈ₂）₄−Ｎ（ＣＨ₃）−（ＣＨ₂）₁₄、（ＣＨ₂）₄−Ｎ
（ＣＨ₃）−（ＣＨ₂）₁₅、（ＣＨ₂）₆−Ｎ（ＣＨ₃）−
（ＣＨ₂）₃、（ＣＨ₂）₆−Ｎ（ＣＨ₃）−（ＣＨ₂）₄、
（ＣＨ₂）₆−Ｎ（ＣＨ₃）−（ＣＨ₂）₅、（ＣＨ₂）₆−
Ｎ（ＣＨ₃）−（ＣＨ₂）₆、（ＣＨ₂）₆−Ｎ（ＣＨ₃）−
（ＣＨ₂）₇、（ＣＨ₂）₆−Ｎ（ＣＨ₃）−（ＣＨ₂）₈、
（ＣＨ₂）₆−Ｎ（ＣＨ₃）−（ＣＨ₂）₉、（ＣＨ₂）₆−
Ｎ（ＣＨ₃）−（ＣＨ₂）₁₀、（ＣＨ₂）₆−Ｎ（ＣＨ₃）
−（ＣＨ₂）₁₁、（ＣＨ₂）₆−Ｎ（ＣＨ₃）−（ＣＨ₂）
₁₂、（ＣＨ₂）₆−Ｎ（ＣＨ₃）−（ＣＨ₂）₁₃、（Ｃ
Ｈ₂）₂−Ｎ（Ｃ₂Ｈ₅）−（ＣＨ₂）₇、（ＣＨ₂）₂−Ｎ
（Ｃ₂Ｈ₅）−（ＣＨ₂）₈、（ＣＨ₂）₂−Ｎ（Ｃ₂Ｈ₅）−
（ＣＨ₂）₉、（ＣＨ₂）₂−Ｎ（Ｃ₂Ｈ₅）−（Ｃ
Ｈ₂）₁₀、（ＣＨ₂）₂−Ｎ（Ｃ₂Ｈ₅）−（ＣＨ₂）₁₁、
（ＣＨ₂）₂−Ｎ（Ｃ₂Ｈ₅）−（ＣＨ₂）₁₂、（ＣＨ₂）₂
−Ｎ（Ｃ₂Ｈ₅）−（ＣＨ₂）₁₃、（ＣＨ₂）₂−Ｎ（Ｃ₂Ｈ
₅）−（ＣＨ₂）₁₄、（ＣＨ₂）₂−Ｎ（Ｃ₂Ｈ₅）−（ＣＨ
₂）₁₅、（ＣＨ₂）₂−Ｎ（Ｃ₂Ｈ₅）−（ＣＨ₂）₁₆、（Ｃ
Ｈ₂）₂−Ｎ（Ｃ₂Ｈ₅）−（ＣＨ₂）₁₇、（ＣＨ₂）₄−Ｎ
（Ｃ₂Ｈ₅）−（ＣＨ₂）₅、（ＣＨ₂）₄−Ｎ（Ｃ₂Ｈ₅）−
（ＣＨ₂）₆、（ＣＨ₂）₄−Ｎ（Ｃ₂Ｈ₅）−（ＣＨ₂）₇、
（ＣＨ₂）₄−Ｎ（Ｃ₂Ｈ₅）−（ＣＨ₂）₈、（ＣＨ₂）₄−
Ｎ（Ｃ₂Ｈ₅）−（ＣＨ₂）₉、（ＣＨ₂）₄−Ｎ（Ｃ₂Ｈ₅）
−（ＣＨ₂）₁₀、（ＣＨ₂）₄−Ｎ（Ｃ₂Ｈ₅）−（ＣＨ₂）
₁₁、（ＣＨ₂）₄−Ｎ（Ｃ₂Ｈ₅）−（ＣＨ₂）₁₂、（Ｃ
Ｈ₂）₄−Ｎ（Ｃ₂Ｈ₅）−（ＣＨ₂）₁₃、（ＣＨ₂）₄−Ｎ
（Ｃ₂Ｈ₅）−（ＣＨ₂）₁₄、（ＣＨ₂）₄−Ｎ（Ｃ₂Ｈ₅）
−（ＣＨ₂）₁₅、（ＣＨ₂）₆−Ｎ（Ｃ₂Ｈ₅）−（ＣＨ₂）
₃、（ＣＨ₂）₆−Ｎ（Ｃ₂Ｈ₅）−（ＣＨ₂）₄、（ＣＨ₂）
₆−Ｎ（Ｃ₂Ｈ₅）−（ＣＨ₂）₅、（ＣＨ₂）₆−Ｎ（Ｃ₂Ｈ
₅）−（ＣＨ₂）₆、（ＣＨ₂）₆−Ｎ（Ｃ₂Ｈ₅）−（Ｃ
Ｈ₂）₇、（ＣＨ₂）₆−Ｎ（Ｃ₂Ｈ₅）−（ＣＨ₂）₈、（Ｃ
Ｈ₂）₆−Ｎ（Ｃ₂Ｈ₅）−（ＣＨ₂）₉、（ＣＨ₂）₆−Ｎ
（Ｃ₂Ｈ₅）−（ＣＨ₂）₁₀、（ＣＨ₂）₆−Ｎ（Ｃ₂Ｈ₅）
−（ＣＨ₂）₁₁、（ＣＨ₂）₆−Ｎ（Ｃ₂Ｈ₅）−（ＣＨ₂）
₁₂、（ＣＨ₂）₆−Ｎ（Ｃ₂Ｈ₅）−（ＣＨ₂）₁₃、（Ｃ
Ｈ₂）₂−Ｏ−（ＣＨ₂）₂−Ｏ−（ＣＨ₂）₄、（ＣＨ₂）₂
−Ｏ−（ＣＨ₂）₂−Ｏ−（ＣＨ₂）₅、（ＣＨ₂）₂−Ｏ−
（ＣＨ₂）₂−Ｏ−（ＣＨ₂）₆、（ＣＨ₂）₂−Ｏ−（ＣＨ
₂）₂−Ｏ−（ＣＨ₂）₇、（ＣＨ₂）₂−Ｏ−（ＣＨ₂）₂−
Ｏ−（ＣＨ₂）₈、（ＣＨ₂）₂−Ｏ−（ＣＨ₂）₂−Ｏ−
（ＣＨ₂）₉、（ＣＨ₂）₂−Ｏ−（ＣＨ₂）₂−Ｏ−（ＣＨ
₂）₁₀、（ＣＨ₂）₂−Ｏ−（ＣＨ₂）₂−Ｏ−（Ｃ
Ｈ₂）₁₁、（ＣＨ₂）₂−Ｏ−（ＣＨ₂）₂−Ｏ−（ＣＨ₂）
₁₂、（ＣＨ₂）₂−Ｏ−（ＣＨ₂）₂−Ｏ−（ＣＨ₂）₁₃、
（ＣＨ₂）₂−Ｏ−（ＣＨ₂）₂−Ｏ−（ＣＨ₂）₁₄、（Ｃ
Ｈ₂）₄−Ｏ−（ＣＨ₂）₂−Ｏ−（ＣＨ₂）₂、（ＣＨ₂）₄
−Ｏ−（ＣＨ₂）₂−Ｏ−（ＣＨ₂）₃、（ＣＨ₂）₄−Ｏ−
（ＣＨ₂）₂−Ｏ−（ＣＨ₂）₄、（ＣＨ₂）₄−Ｏ−（ＣＨ
₂）₂−Ｏ−（ＣＨ₂）₅、（ＣＨ₂）₄−Ｏ−（ＣＨ₂）₂−
Ｏ−（ＣＨ₂）₆、（ＣＨ₂）₄−Ｏ−（ＣＨ₂）₂−Ｏ−
（ＣＨ₂）₇、（ＣＨ₂）₄−Ｏ−（ＣＨ₂）₂−Ｏ−（ＣＨ
₂）₈、（ＣＨ₂）₄−Ｏ−（ＣＨ₂）₂−Ｏ−（ＣＨ₂）₉、
（ＣＨ₂）₄−Ｏ−（ＣＨ₂）₂−Ｏ−（ＣＨ₂）₁₀、（Ｃ
Ｈ₂）₄−Ｏ−（ＣＨ₂）₂−Ｏ−（ＣＨ₂）₁₁、（ＣＨ₂）
₄−Ｏ−（ＣＨ₂）₂−Ｏ−（ＣＨ₂）₁₂、（ＣＨ₂）₂−Ｓ
−Ｓ−（ＣＨ₂）₇、（ＣＨ₂）₂−Ｓ−Ｓ−（ＣＨ₂）₉、
（ＣＨ₂）₂−Ｓ−Ｓ−（ＣＨ₂）₁₁、（ＣＨ₂）₂−Ｓ−
Ｓ−（ＣＨ₂）₁₃、（ＣＨ₂）₂−Ｓ−Ｓ−（ＣＨ₂）₁₅、
（ＣＨ₂）₄−Ｓ−Ｓ−（ＣＨ₂）₅、（ＣＨ₂）₄−Ｓ−Ｓ
−（ＣＨ₂）₇、（ＣＨ₂）₄−Ｓ−Ｓ−（ＣＨ₂）₉、（Ｃ
Ｈ₂）₄−Ｓ−Ｓ−（ＣＨ₂）₁₁、（ＣＨ₂）₄−Ｓ−Ｓ−
（ＣＨ₂）₁₃、（ＣＨ₂）₆−Ｓ−Ｓ−（ＣＨ₂）₃、（Ｃ
Ｈ₂）₆−Ｓ−Ｓ−（ＣＨ₂）₅、（ＣＨ₂）₆−Ｓ−Ｓ−
（ＣＨ₂）₇、（ＣＨ₂）₆−Ｓ−Ｓ−（ＣＨ₂）₉、（ＣＨ
₂）₆−Ｓ−Ｓ−（ＣＨ₂）₁₁、（ＣＨ₂）₈−Ｓ−Ｓ−Ｃ
Ｈ₂、（ＣＨ₂）₈−Ｓ−Ｓ−（ＣＨ₂）₃、（ＣＨ₂）₈−
Ｓ−Ｓ−（ＣＨ₂）₅、（ＣＨ₂）₈−Ｓ−Ｓ−（Ｃ
Ｈ₂）₇、（ＣＨ₂）₈−Ｓ−Ｓ−（ＣＨ₂）₉ (CH ₂ ) ₁₀ , (CH ₂ ) ₁₁ , (C
_{H 2) 12, (CH 2} ) 13, (CH 2) 14, (CH 2) 15,
(CH ₂ ) ₁₆ , (CH ₂ ) ₁₇ , (CH ₂ ) ₁₈ , (C
_{H 2) 19, (CH 2} ) 20, CH 2 CH = CH (CH 2) 7,
(CH ₂ ) ₂ CH = CH (CH ₂ ) ₇ , (CH ₂ ) ₃ CH = C
H (CH ₂ ) ₇ , (CH ₂ ) ₄ CH = CH (CH ₂ ) ₇ , (C
_{H 2) 5 CH = CH (} CH 2) 7, (CH 2) 6 CH = CH
(CH ₂ ) ₇ , (CH ₂ ) ₇ CH = CH (CH ₂ ) ₇ , (CH
₂ ) ₈ CH = CH (CH ₂ ) ₇ , (CH ₂ ) ₉ CH = CH (C
_{H 2) 7, (CH 2} ) 10 CH = CH (CH 2) 7, (CH 2)
₁₁ CH = CH (CH ₂ ) ₇ , (CH ₂ ) ₈ CH = CHC
H ₂ , (CH ₂ ) ₈ CH = CH (CH ₂ ) ₂ , (CH ₂ ) ₈ C
H = CH (CH ₂ ) ₃ , (CH ₂ ) ₈ CH = CH (C
_{H 2) 4, (CH 2} ) 8 CH = CH (CH 2) 5, (CH 2) 8
CH = CH (CH ₂ ) ₆ , (CH ₂ ) ₈ CH = CH (C
_{H 2) 7, (CH 2} ) 8 CH = CH (CH 2) 8, (CH 2) 8
CH = CH (CH ₂ ) ₉ , (CH ₂ ) ₈ CH = CH (C
_{H 2) 10, CH 2 CH} = CHCH 2 CH = CH (C
_{H 2) 7, (CH 2} ) 2 CH = CHCH 2 CH = CH (C
H ₂ ) ₇ , (CH ₂ ) ₃ CH ＝ CHCH ₂ CH ＝ CH (C
_{H 2) 7, (CH 2} ) 4 CH = CHCH 2 CH = CH (C
_{H 2) 7, (CH 2} ) 5 CH = CHCH 2 CH = CH (C
_{H 2) 7, (CH 2} ) 6 CH = CHCH 2 CH = CH (C
_{H 2) 7, (CH 2} ) 7 CH = CHCH 2 CH = CH (C
_{H 2) 7, (CH 2} ) 8 CH = CHCH 2 CH = CH (C
_{H 2) 7, (CH 2} ) 2 -O- (CH 2) 7, (CH 2) 2 -O
— (CH ₂ ) ₈ , (CH ₂ ) ₂ —O— (CH ₂ ) ₉ , (C
_{H 2) 2 -O- (CH 2} ) 10, (CH 2) 2 -O- (CH 2)
_{11, (CH 2) 2 -O-} (CH 2) 12, (CH 2) 2 -O-
_{(CH 2) 13, (CH} 2) 2 -O- (CH 2) 14, (C
_{H 2) 2 -O- (CH 2} ) 15, (CH 2) 2 -O- (CH 2)
_{16, (CH 2) 2 -O-} (CH 2) 17, (CH 2) 4 -O-
_{(CH 2) 5, (CH} 2) 4 -O- (CH 2) 6, (CH 2) 4
—O— (CH ₂ ) ₇ , (CH ₂ ) ₄ —O— (CH ₂ ) ₈ , (C
_{H 2) 4 -O- (CH 2} ) 9, (CH 2) 4 -O- (CH 2)
_{10, (CH 2) 4 -O-} (CH 2) 11, (CH 2) 4 -O-
_{(CH 2) 12, (CH} 2) 4 -O- (CH 2) 13, (C
_{H 2) 4 -O- (CH 2} ) 14, (CH 2) 4 -O- (CH 2)
_{15, (CH 2) 6 -O-} (CH 2) 3, (CH 2) 6 -O-
_{(CH 2) 4, (CH} 2) 6 -O- (CH 2) 5, (CH 2) 6
—O— (CH ₂ ) ₆ , (CH ₂ ) ₆ —O— (CH ₂ ) ₇ , (C
_{H 2) 6 -O- (CH 2} ) 8, (CH 2) 6 -O- (C
_{H 2) 9, (CH 2} ) 6 -O- (CH 2) 10, (CH 2) 6 -
_{O- (CH 2) 11, (} CH 2) 6 -O- (CH 2) 12, (C
_{H 2) 6 -O- (CH 2} ) 13, (CH 2) 8 -O-CH 2,
_{(CH 2) 8 -O- (CH} 2) 2, (CH 2) 8 -O- (CH
_{2) 3, (CH 2)} 8 -O- (CH 2) 4, (CH 2) 8 -O-
_{(CH 2) 5, (CH} 2) 8 -O- (CH 2) 6, (CH 2) 8
—O— (CH ₂ ) ₇ , (CH ₂ ) ₈ —O— (CH ₂ ) ₈ , (C
_{H 2) 8 -O- (CH 2} ) 9, (CH 2) 8 -O- (CH 2)
_{10, (CH 2) 8 -O-} (CH 2) 11, (CH 2) 10 -O-
_{CH 2, (CH 2) 10} -O- (CH 2) 2, (CH 2) 10 -
_{O- (CH 2) 3, (} CH 2) 10 -O- (CH 2) 4, (C
_{H 2) 10 -O- (CH 2} ) 5, (CH 2) 10 -O- (C
_{H 2) 6, (CH 2} ) 10 -O- (CH 2) 7, (CH 2) 10 -
_{O- (CH 2) 8, (} CH 2) 10 -O- (CH 2) 9, (C
_{H 2) 12 -O-CH 2} , (CH 2) 12 -O- (CH 2) 2,
_{(CH 2) 12 -O- (CH} 2) 3, (CH 2) 12 -O- (C
_{H 2) 4, (CH 2} ) 12 -O- (CH 2) 5, (CH 2) 12 -
_{O- (CH 2) 6, (} CH 2) 12 -O- (CH 2) 7, CH 2
—O— (CH ₂ ) ₅ CH ＝ CH (CH ₂ ) ₇ , (CH ₂ ) ₂ —
_{O- (CH 2) 5 CH =} CH (CH 2) 7, (CH 2) 3 -O
_{- (CH 2) 5 CH =} CH (CH 2) 7, (CH 2) 4 -O-
_{(CH 2) 5 CH = CH} (CH 2) 7, (CH 2) 5 -O-
_{(CH 2) 5 CH = CH} (CH 2) 7, (CH 2) 2 -S-
_{(CH 2) 7, (CH} 2) 2 -S- (CH 2) 8, (CH 2) 2
—S— (CH ₂ ) ₉ , (CH ₂ ) ₂ —S— (CH ₂ ) ₁₀ ,
(CH ₂ ) ₂ -S- (CH ₂ ) ₁₁ , (CH ₂ ) ₂ -S- (C
_{H 2) 12, (CH 2} ) 2 -S- (CH 2) 13, (CH 2) 2 -
_{S- (CH 2) 14, (} CH 2) 2 -S- (CH 2) 15, (C
_{H 2) 2 -S- (CH 2} ) 16, (CH 2) 2 -S- (CH 2)
_{17, (CH 2) 4 -S-} (CH 2) 5, (CH 2) 4 -S-
_{(CH 2) 6, (CH} 2) 4 -S- (CH 2) 7, (CH 2) 4
—S— (CH ₂ ) ₈ , (CH ₂ ) ₄ —S— (CH ₂ ) ₉ , (C
_{H 2) 4 -S- (CH 2} ) 10, (CH 2) 4 -S- (CH 2)
_{11, (CH 2) 4 -S-} (CH 2) 12, (CH 2) 4 -S-
_{(CH 2) 13, (CH} 2) 4 -S- (CH 2) 14, (C
_{H 2) 4 -S- (CH 2} ) 15, (CH 2) 6 -S- (CH 2)
_{3, (CH 2) 6 -S-} (CH 2) 4, (CH 2) 6 -S-
_{(CH 2) 5, (CH} 2) 6 -S- (CH 2) 6, (CH 2) 6
—S— (CH ₂ ) ₇ , (CH ₂ ) ₆ —S— (CH ₂ ) ₈ , (C
_{H 2) 6 -S- (CH 2} ) 9, (CH 2) 6 -S- (CH 2)
_{10, (CH 2) 6 -S-} (CH 2) 11, (CH 2) 6 -S-
_{(CH 2) 12, (CH} 2) 6 -S- (CH 2) 13, (C
_{H 2) 8 -S-CH 2} , (CH 2) 8 -S- (CH 2) 2,
_{(CH 2) 8 -S- (CH} 2) 3, (CH 2) 8 -S- (CH
₂ ) ₄ , (CH ₂ ) ₈ -S- (CH ₂ ) ₅ , (CH ₂ ) ₈ -S-
_{(CH 2) 6, (CH} 2) 8 -S- (CH 2) 7, (CH 2) 8
—S— (CH ₂ ) ₈ , (CH ₂ ) ₈ —S— (CH ₂ ) ₉ , (C
_{H 2) 8 -S- (CH 2} ) 10, (CH 2) 8 -S- (CH 2)
_{11, (CH 2) 10 -S} -CH 2, (CH 2) 10 -S- (C
_{H 2) 2, (CH 2} ) 10 -S- (CH 2) 3, (CH 2) 10 -
S- (CH ₂ ) ₄ , (CH ₂ ) ₁₀ -S- (CH ₂ ) ₅ , (C
_{H 2) 10 -S- (CH 2} ) 6, (CH 2) 10 -S- (C
_{H 2) 7, (CH 2} ) 10 -S- (CH 2) 8, (CH 2) 10 -
_{S- (CH 2) 9, (} CH 2) 12 -S-CH 2, (CH 2)
_{12 -S- (CH 2) 2,} (CH 2) 12 -S- (CH 2) 3,
(CH ₂ ) ₁₂ -S- (CH ₂ ) ₄ , (CH ₂ ) ₁₂ -S- (C
_{H 2) 5, (CH 2} ) 12 -S- (CH 2) 6, (CH 2) 12 -
_{S- (CH 2) 7, (} CH 2) 2 -N (CH 3) - (CH 2)
_{7, (CH 2) 2 -N} (CH 3) - (CH 2) 8, (CH 2) 2
_{-N (CH 3) - (CH} 2) 9, (CH 2) 2 -N (CH 3)
_{- (CH 2) 10, (} CH 2) 2 -N (CH 3) - (CH 2)
_{11, (CH 2) 2 -N} (CH 3) - (CH 2) 12, (C
_{H 2) 2 -N (CH 3} ) - (CH 2) 13, (CH 2) 2 -N
_{(CH 3) - (CH 2} ) 14, (CH 2) 2 -N (CH 3) -
_{(CH 2) 15, (CH} 2) 2 -N (CH 3) - (C
_{H 2) 16, (CH 2} ) 2 -N (CH 3) - (CH 2) 17,
_{(CH 2) 4 -N (CH} 3) - (CH 2) 5, (CH 2) 4 -
_{N (CH 3) - (CH} 2) 6, (CH 2) 4 -N (CH 3) -
_{(CH 2) 7, (CH} 2) 4 -N (CH 3) - (CH 2) 8,
_{(CH 2) 4 -N (CH} 3) - (CH 2) 9, (CH 2) 4 -
_{N (CH 3) - (CH} 2) 10, (CH 2) 4 -N (CH 3)
_{- (CH 2) 11, (} CH 2) 4 -N (CH 3) - (CH 2)
_{12, (CH 2) 4 -N} (CH 3) - (CH 2) 13, (C
_{H 2) 4 -N (CH 3} ) - (CH 2) 14, (CH 2) 4 -N
_{(CH 3) - (CH 2} ) 15, (CH 2) 6 -N (CH 3) -
_{(CH 2) 3, (CH} 2) 6 -N (CH 3) - (CH 2) 4,
_{(CH 2) 6 -N (CH} 3) - (CH 2) 5, (CH 2) 6 -
_{N (CH 3) - (CH} 2) 6, (CH 2) 6 -N (CH 3) -
_{(CH 2) 7, (CH} 2) 6 -N (CH 3) - (CH 2) 8,
_{(CH 2) 6 -N (CH} 3) - (CH 2) 9, (CH 2) 6 -
_{N (CH 3) - (CH} 2) 10, (CH 2) 6 -N (CH 3)
— (CH ₂ ) ₁₁ , (CH ₂ ) ₆ —N (CH ₃ ) — (CH ₂ )
_{12, (CH 2) 6 -N} (CH 3) - (CH 2) 13, (C
_{H 2) 2 -N (C 2} H 5) - (CH 2) 7, (CH 2) 2 -N
_{(C 2 H 5) - (} CH 2) 8, (CH 2) 2 -N (C 2 H 5) -
_{(CH 2) 9, (CH} 2) 2 -N (C 2 H 5) - (C
_{H 2) 10, (CH 2} ) 2 -N (C 2 H 5) - (CH 2) 11,
_{(CH 2) 2 -N (C} 2 H 5) - (CH 2) 12, (CH 2) 2
_{-N (C 2 H 5) -} (CH 2) 13, (CH 2) 2 -N (C 2 H
_{5) - (CH 2) 14} , (CH 2) 2 -N (C 2 H 5) - (CH
₂ ) ₁₅ , (CH ₂ ) ₂ -N (C ₂ H ₅ )-(CH ₂ ) ₁₆ , (C
_{H 2) 2 -N (C 2} H 5) - (CH 2) 17, (CH 2) 4 -N
_{(C 2 H 5) - (} CH 2) 5, (CH 2) 4 -N (C 2 H 5) -
_{(CH 2) 6, (CH} 2) 4 -N (C 2 H 5) - (CH 2) 7,
_{(CH 2) 4 -N (C} 2 H 5) - (CH 2) 8, (CH 2) 4 -
_{N (C 2 H 5) -} (CH 2) 9, (CH 2) 4 -N (C 2 H 5)
_{- (CH 2) 10, (} CH 2) 4 -N (C 2 H 5) - (CH 2)
_{11, (CH 2) 4 -N} (C 2 H 5) - (CH 2) 12, (C
_{H 2) 4 -N (C 2} H 5) - (CH 2) 13, (CH 2) 4 -N
_{(C 2 H 5) - (} CH 2) 14, (CH 2) 4 -N (C 2 H 5)
_{- (CH 2) 15, (} CH 2) 6 -N (C 2 H 5) - (CH 2)
_{3, (CH 2) 6 -N} (C 2 H 5) - (CH 2) 4, (CH 2)
_{6 -N (C 2 H 5)} - (CH 2) 5, (CH 2) 6 -N (C 2 H
_{5) - (CH 2) 6} , (CH 2) 6 -N (C 2 H 5) - (C
_{H 2) 7, (CH 2} ) 6 -N (C 2 H 5) - (CH 2) 8, (C
_{H 2) 6 -N (C 2} H 5) - (CH 2) 9, (CH 2) 6 -N
_{(C 2 H 5) - (} CH 2) 10, (CH 2) 6 -N (C 2 H 5)
_{- (CH 2) 11, (} CH 2) 6 -N (C 2 H 5) - (CH 2)
_{12, (CH 2) 6 -N} (C 2 H 5) - (CH 2) 13, (C
_{H 2) 2 -O- (CH 2} ) 2 -O- (CH 2) 4, (CH 2) 2
—O— (CH ₂ ) ₂ —O— (CH ₂ ) ₅ , (CH ₂ ) ₂ —O—
_{(CH 2) 2 -O- (CH} 2) 6, (CH 2) 2 -O- (CH
₂ ) ₂ -O- (CH ₂ ) ₇ , (CH ₂ ) ₂ -O- (CH ₂ ) _{2-
O- (CH 2) 8, (} CH 2) 2 -O- (CH 2) 2 -O-
_{(CH 2) 9, (CH} 2) 2 -O- (CH 2) 2 -O- (CH
_{2) 10, (CH 2)} 2 -O- (CH 2) 2 -O- (C
_{H 2) 11, (CH 2} ) 2 -O- (CH 2) 2 -O- (CH 2)
_{12, (CH 2) 2 -O-} (CH 2) 2 -O- (CH 2) 13,
(CH ₂ ) ₂ —O— (CH ₂ ) ₂ —O— (CH ₂ ) ₁₄ , (C
_{H 2) 4 -O- (CH 2} ) 2 -O- (CH 2) 2, (CH 2) 4
—O— (CH ₂ ) ₂ —O— (CH ₂ ) ₃ , (CH ₂ ) ₄ —O—
_{(CH 2) 2 -O- (CH} 2) 4, (CH 2) 4 -O- (CH
_{2) 2 -O- (CH 2)} 5, (CH 2) 4 -O- (CH 2) 2 -
_{O- (CH 2) 6, (} CH 2) 4 -O- (CH 2) 2 -O-
_{(CH 2) 7, (CH} 2) 4 -O- (CH 2) 2 -O- (CH
_{2) 8, (CH 2)} 4 -O- (CH 2) 2 -O- (CH 2) 9,
_{(CH 2) 4 -O- (CH} 2) 2 -O- (CH 2) 10, (C
_{H 2) 4 -O- (CH 2} ) 2 -O- (CH 2) 11, (CH 2)
_{4 -O- (CH 2) 2 -O-} (CH 2) 12, (CH 2) 2 -S
—S— (CH ₂ ) ₇ , (CH ₂ ) ₂ —SS— (CH ₂ ) ₉ ,
_{(CH 2) 2 -S-S-} (CH 2) 11, (CH 2) 2 -S-
_{S- (CH 2) 13, (} CH 2) 2 -S-S- (CH 2) 15,
_{(CH 2) 4 -S-S-} (CH 2) 5, (CH 2) 4 -S-S
_{- (CH 2) 7, (} CH 2) 4 -S-S- (CH 2) 9, (C
_{H 2) 4 -S-S- (} CH 2) 11, 4 -S-S- (CH 2)
_{(CH 2) 13, (CH} 2) 6 -S-S- (CH 2) 3, (C
_{H 2) 6 -S-S- (} CH 2) 5, (CH 2) 6 -S-S-
_{(CH 2) 7, (CH} 2) 6 -S-S- (CH 2) 9, (CH
_{2) 6 -S-S- (CH} 2) 11, (CH 2) 8 -S-S-C
_{H 2, (CH 2) 8} -S-S- (CH 2) 3, (CH 2) 8 -
SS- (CH ₂ ) ₅ , (CH ₂ ) ₈ -SS- (C
_{H 2) 7, (CH 2} ) 8 -S-S- (CH 2) 9

【００１２】一方、長鎖カルボン酸イミドエステル
（Ｉ）におけるイミド部分は、該長鎖カルボン酸イミド
エステル（Ｉ）の蛋白質の化学修飾剤としての有用性を
考慮すれば、イミドであれば如何なる構造であってもよ
い。したがって、上記一般式（Ｉ）においてＸが表す基
は、本発明の本質的な部分ではなく、２価の炭化水素基
であればとくに制限されない。On the other hand, the imide moiety in the long-chain carboxylic imide ester (I) may have any structure as long as it is an imide in consideration of the usefulness of the long-chain carboxylic imide ester (I) as a chemical modifier for proteins. It may be. Therefore, the group represented by X in the above general formula (I) is not an essential part of the present invention, and is not particularly limited as long as it is a divalent hydrocarbon group.

【００１３】しかるに、長鎖カルボン酸イミドエステル
（Ｉ）のイミド部分としては、原料が入手しやすいこと
および合成が容易であることなどから、下記一般式
（Ａ）However, the imide moiety of the long-chain carboxylic imide ester (I) is represented by the following general formula (A) because of the availability of raw materials and the ease of synthesis.

【００１４】[0014]

【化３】 Embedded image

【００１５】（式中、Ｒ²、Ｒ³、Ｒ⁴およびＲ⁵はそれぞ
れ水素原子、アルキル基、アリ−ル基、アラルキル基、
または式−ＳＯ₃Ｈ、式−ＯＲ⁶（式中、Ｒ⁶は水素原
子、アルキル基、アリ−ル基、アラルキル基もしくはア
シル基を表す）、式−ＮＲ⁷Ｒ⁸（式中、Ｒ⁷、Ｒ⁸はそれ
ぞれアルキル基、アリ−ル基、アラルキル基もしくはア
シル基を表す）、もしくは式−ＣＯ₂Ｒ⁹（式中、Ｒ⁹は
水素原子、アルキル基、アリ−ル基、アラルキル基を表
す）で示される基を示す。また、Ｒ²、Ｒ³、Ｒ⁴および
Ｒ⁵は、それらが結合している炭素原子と一緒になっ
て、置換基を有していてもよい環を形成してもよい。さ
らに、Ｒ²とＲ³、および／またはＲ⁴とＲ⁵は一緒になっ
てそれぞれ置換基を有していてもよいメチレン基を表し
てもよい）で示されるイミド部分（以下、これをイミド
部分Ａと略称する）、または下記一般式（Ｂ）(Wherein R ² , R ³ , R ⁴ and R ⁵ are each a hydrogen atom, an alkyl group, an aryl group, an aralkyl group,
Or the formula -SO ₃ H, wherein -OR ⁶ (wherein, R ⁶ is a hydrogen atom, an alkyl group, ant - represents a group, an aralkyl group or an acyl group), the formula -NR ⁷ R ⁸ (wherein, R ⁷ , R ⁸ represents an alkyl group, an aryl group, an aralkyl group or an acyl group, respectively, or a formula —CO ₂ R ⁹ (where R ⁹ represents a hydrogen atom, an alkyl group, an aryl group, an aralkyl group) Represents a group represented by Further, R ² , R ³ , R ⁴ and R ⁵ may form a ring which may have a substituent together with the carbon atom to which they are bonded. Further, an imide moiety represented by R ² and R ³ and / or R ⁴ and R ⁵ together may represent a methylene group which may have a substituent (hereinafter referred to as an imide moiety) Part A) or the following general formula (B)

【００１６】[0016]

【化４】 Embedded image

【００１７】（式中、Ｒ¹⁰、Ｒ¹¹、Ｒ¹²、Ｒ¹³、Ｒ¹⁴お
よびＲ¹⁵はそれぞれ水素原子、アルキル基、アリ−ル
基、アラルキル基、または式−ＳＯ₃Ｈ、式−ＯＲ⁶（式
中、Ｒ⁶は前記定義のとおりである）、式−ＮＲ⁷Ｒ
⁸（式中、Ｒ⁷およびＲ⁸は前記定義のとおりである）、
もしくは式−ＣＯ₂Ｒ⁹（式中、Ｒ⁹は前記定義のとおり
である）で示される基を示す）で示されるイミド部分
（以下、これをイミド部分Ｂと略称する）が好ましく、
なかでもイミド部分Ａがより好ましい。(Wherein R ¹⁰ , R ¹¹ , R ¹² , R ¹³ , R ¹⁴ and R ¹⁵ are each a hydrogen atom, an alkyl group, an aryl group, an aralkyl group, or a group represented by the formula —SO ₃ H, the formula —OR ⁶ (wherein R ⁶ is as defined above), -NR ⁷ R
⁸ (wherein R ⁷ and R ⁸ are as defined above),
Alternatively, an imide moiety represented by the formula -CO ₂ R ⁹ (wherein R ⁹ is as defined above) is preferable (hereinafter, this is abbreviated as imide moiety B),
Among them, the imide moiety A is more preferred.

【００１８】上記の一般式（Ａ）および（Ｂ）において
Ｒ²、Ｒ³、Ｒ⁴、Ｒ⁵、Ｒ⁶、Ｒ⁷、Ｒ⁸、Ｒ⁹、Ｒ¹⁰、
Ｒ¹¹、Ｒ¹²、Ｒ¹³、Ｒ¹⁴およびＲ¹⁵が表すアルキル基と
しては、例えば、メチル基、エチル基、プロピル基、イ
ソプロピル基、オクタデシル基などが挙げられる。ま
た、アリ−ル基としては、例えば、フェニル基、ｐ−ブ
ロモフェニル基などが挙げられる。アラルキル基として
は、例えば、ベンジル基、ｐ−メトキシベンジル基など
が挙げられる。また、Ｒ⁶、Ｒ⁷およびＲ⁸が表すアシル
基としては、例えば、アセチル基、ベンゾイル基などが
挙げられる。In the above general formulas (A) and (B), R ² , R ³ , R ⁴ , R ⁵ , R ⁶ , R ⁷ , R ⁸ , R ⁹ , R ¹⁰ ,
Examples of the alkyl group represented by R ¹¹ , R ¹² , R ¹³ , R ¹⁴ and R ¹⁵ include a methyl group, an ethyl group, a propyl group, an isopropyl group, an octadecyl group and the like. Examples of the aryl group include a phenyl group and a p-bromophenyl group. Examples of the aralkyl group include a benzyl group and a p-methoxybenzyl group. Examples of the acyl group represented by R ⁶ , R ⁷ and R ⁸ include, for example, an acetyl group and a benzoyl group.

【００１９】しかして、式−ＯＲ⁶で示される基として
は、例えば、水酸基、メトキシ基、エトキシ基、プロポ
キシ基、イソプロポキシ基などのアルコキシ基、フェノ
キシ基、ｐ−ブロモフェノキシ基などのアリロキシ基、
およびベンジルオキシ基、ｐ−メトキシベンジルオキシ
基などのアラルキルオキシ基が挙げられる。式−ＮＲ⁷
Ｒ⁸で示される基としては、例えば、ジメチルアミノ
基、ジエチルアミノ基などの置換アミノ基、およびＮ−
メチルアセトアミド基、Ｎ−メチルベンズアミド基など
のＮ−置換アシルアミド基が挙げられる。また、式−Ｃ
Ｏ₂Ｒ⁹で示される基としては、例えば、カルボキシル
基、メトキシカルボニル基、エトキシカルボニル基、プ
ロポキシカルボニル基、イソプロポキシカルボニル基、
ベンジルオキシカルボニル基、ｐ−メトキシベンジルオ
キシカルボニル基などのアルコキシカルボニル基、およ
びフェノキシカルボニル基、ｐ−ブロモフェノキシカル
ボニル基などのアリロキシカルボニル基が挙げられる。[0019] Thus, the group of the formula -OR ^6, for example, a hydroxyl group, a methoxy group, an ethoxy group, a propoxy group, an alkoxy group such as an isopropoxy group, a phenoxy group, allyloxy group such as p- bromophenoxy group ,
And aralkyloxy groups such as benzyloxy group and p-methoxybenzyloxy group. Formula -NR ⁷
Examples of the group represented by R ⁸ include a substituted amino group such as a dimethylamino group and a diethylamino group;
N-substituted acylamide groups such as methylacetamide group and N-methylbenzamide group are exemplified. Also, the formula -C
Examples of the group represented by O ₂ R ⁹ include a carboxyl group, a methoxycarbonyl group, an ethoxycarbonyl group, a propoxycarbonyl group, an isopropoxycarbonyl group,
Examples include an alkoxycarbonyl group such as a benzyloxycarbonyl group and a p-methoxybenzyloxycarbonyl group, and an allyloxycarbonyl group such as a phenoxycarbonyl group and a p-bromophenoxycarbonyl group.

【００２０】一方、上記一般式（Ａ）において、Ｒ²、
Ｒ³、Ｒ⁴およびＲ⁵が、それらが結合している炭素原子
と一緒になって、置換基を有していてもよい環を形成す
る場合、該環は飽和であってもよいし、不飽和であって
もよい。該環としては、基本骨格としてベンゼン環、シ
クロヘキサン環、シクロペンタン環ならびにビシクロ
［２，２，１］ヘプタン骨格、ビシクロ［２，２，１］
ヘプタ−２−エン骨格、７−オキサビシクロ［２，２，
１］ヘプタン骨格、７−オキサビシクロ［２，２，１］
ヘプタ−２−エン骨格などを有するものが挙げられる。On the other hand, in the general formula (A), R ² ,
When R ³ , R ⁴ and R ⁵ together with the carbon atom to which they are attached form a ring which may have a substituent, the ring may be saturated, It may be unsaturated. The ring includes a benzene ring, a cyclohexane ring, a cyclopentane ring, a bicyclo [2,2,1] heptane skeleton, a bicyclo [2,2,1] as a basic skeleton.
Hepta-2-ene skeleton, 7-oxabicyclo [2,2,
1] heptane skeleton, 7-oxabicyclo [2,2,1]
Those having a hepta-2-ene skeleton and the like can be mentioned.

【００２１】かかる飽和または不飽和の環を有するイミ
ド部分Ａの具体例として、下記に示すものを挙げること
ができる。Specific examples of the imide moiety A having a saturated or unsaturated ring include the following.

【００２２】[0022]

【化５】 Embedded image

【００２３】また、Ｒ²とＲ³、および／またはＲ⁴とＲ⁵
が一緒になって、それぞれ置換基を有していてもよいメ
チレン基を表す場合、該置換基を有していてもよいメチ
レン基としてはメチレン基、イソプロピリデン基などを
挙げることができる。Also, R ² and R ³ , and / or R ⁴ and R ⁵
When taken together represent a methylene group which may have a substituent, the methylene group which may have a substituent includes a methylene group and an isopropylidene group.

【００２４】かかる置換基を有していてもよいメチレン
基を有するイミド部分Ａの具体例として、下記に示すも
のを挙げることができる。Specific examples of the imide moiety A having a methylene group which may have a substituent include those shown below.

【００２５】[0025]

【化６】 Embedded image

【００２６】長鎖カルボン酸イミドエステル（Ｉ）の塩
としては、例えば、リチウム、ナトリウム、カリウムな
どのアルカリ金属との塩、マグネシウム、カルシウムな
どのアルカリ土類金属との塩などが挙げられる。かかる
塩は、長鎖カルボン酸イミドエステル（Ｉ）の長鎖カル
ボン酸部分および／またはイミド部分において塩を形成
する。Examples of the salt of the long-chain carboxylic imide ester (I) include a salt with an alkali metal such as lithium, sodium and potassium, and a salt with an alkaline earth metal such as magnesium and calcium. Such a salt forms a salt at the long-chain carboxylic acid moiety and / or imide moiety of the long-chain carboxylic acid imide ester (I).

【００２７】長鎖カルボン酸イミドエステル（Ｉ）は下
記の一般式（II）The long-chain carboxylic imide ester (I) has the following general formula (II)

【００２８】ＨＯ₂Ｃ−Ｗ−ＣＯ₂Ｈ （II）HO ₂ C—W—CO ₂ H (II)

【００２９】（式中、Ｗは前記定義のとおりである）で
示される長鎖ジカルボン酸（以下、これを長鎖ジカルボ
ン酸（II）と略称する）を、ジシクロヘキシルカルボジ
イミド（以下、これをＤＣＣと略称する）の存在下に、
下記の一般式（III）(Wherein W is as defined above), a long-chain dicarboxylic acid (hereinafter abbreviated as long-chain dicarboxylic acid (II)) is converted to dicyclohexylcarbodiimide (hereinafter referred to as DCC). Abbreviated) in the presence of
The following general formula (III)

【００３０】[0030]

【化７】 Embedded image

【００３１】（式中、Ｘは前記定義のとおりである）で
示される N - ヒドロキシイミド（以下、これを N - ヒ
ドロキシイミド（III）と略称する）１当量と脱水縮合
させることにより製造することができる。(Wherein X is as defined above) by dehydration condensation with 1 equivalent of N-hydroxyimide (hereinafter abbreviated as N-hydroxyimide (III)). Can be.

【００３２】また、長鎖カルボン酸イミドエステル
（Ｉ）は、Ｒ²とＲ³、および／またはＲ⁴とＲ⁵が一緒に
なって、それぞれ置換基を有していてもよいメチレン基
を形成する場合を除き、長鎖ジカルボン酸（II）を、Ｄ
ＣＣの存在下に、ベンジルアルコ−ル１当量と脱水縮合
させることにより下記の一般式（IV）In the long-chain carboxylic imide ester (I), R ² and R ³ and / or R ⁴ and R ⁵ together form a methylene group which may have a substituent. Except when the long-chain dicarboxylic acid (II) is
By dehydration condensation with 1 equivalent of benzyl alcohol in the presence of CC, the following general formula (IV)

【００３３】[0033]

【化８】 Embedded image

【００３４】（式中、Ｗは前記定義のとおりである）で
示される長鎖ジカルボン酸モノベンジルエステル（以
下、これを長鎖ジカルボン酸モノベンジルエステル（I
V）と略称する）を得たのち、該長鎖ジカルボン酸モノ
ベンジルエステル（IV）を常法に従って N - ヒドロキ
シイミド（III）と反応させることにより下記の一般式
（Ｖ）(Where W is as defined above) (hereinafter referred to as long-chain dicarboxylic acid monobenzyl ester (I
V)), and then reacting the long-chain dicarboxylic acid monobenzyl ester (IV) with N-hydroxyimide (III) according to a conventional method to obtain the following general formula (V)

【００３５】[0035]

【化９】 Embedded image

【００３６】（式中、ＷおよびＸは前記定義のとおりで
ある）で示される長鎖ジカルボン酸モノベンジルモノイ
ミドエステル（以下、これを長鎖ジカルボン酸ジエステ
ル（Ｖ）と略称する）とし、次いで該長鎖ジカルボン酸
ジエステル（Ｖ）のベンジルエステル部分を常法に従っ
て加水素分解により除去することにより製造することが
できる。(Wherein W and X are as defined above), which is hereinafter referred to as long-chain dicarboxylic acid monobenzyl monoimide ester (hereinafter abbreviated as long-chain dicarboxylic acid diester (V)), The long-chain dicarboxylic acid diester (V) can be produced by removing the benzyl ester moiety by hydrogenolysis according to a conventional method.

【００３７】長鎖カルボン酸イミドエステル（Ｉ）の塩
は、通常の塩形成反応により合成することができる。ま
た、長鎖カルボン酸イミドエステル（Ｉ）のイミド部分
が塩を形成する場合には、該長鎖カルボン酸イミドエス
テル（Ｉ）の塩は、塩を形成しているN-ヒドロキシイミ
ド（III）を出発原料として上記と同様の反応を行うこ
とによって合成することもできる。The salt of the long-chain carboxylic imide ester (I) can be synthesized by a usual salt forming reaction. When the imide moiety of the long-chain carboxylic imide ester (I) forms a salt, the salt of the long-chain carboxylic imide ester (I) is converted to a salt-forming N-hydroxyimide (III). Can be synthesized by carrying out the same reaction as described above using as a starting material.

【００３８】本発明の長鎖カルボン酸イミドエステル
（Ｉ）またはその塩（以下、これを長鎖カルボン酸イミ
ドエステル誘導体と略称する）は、蛋白質の化学修飾剤
として有用である。The long-chain carboxylic imide ester (I) of the present invention or a salt thereof (hereinafter, abbreviated as a long-chain carboxylic imide ester derivative) is useful as a chemical modifying agent for proteins.

【００３９】長鎖カルボン酸イミドエステル誘導体と蛋
白質とを pH 6 〜 10 の水溶液中で反応させることによ
り、下記の一般式By reacting a long-chain carboxylic acid imide ester derivative with a protein in an aqueous solution having a pH of 6 to 10, the following general formula is obtained.

【００４０】［蛋白質］［Ｚ］ｎ[Protein] [Z] n

【００４１】（式中、［蛋白質］はアミノ基に換えてア
ミノ基から１個の水素原子を除いた残基をｎ個有する蛋
白質を表し、［Ｚ］は下記の一般式(Wherein [protein] represents a protein having n residues in which one hydrogen atom has been removed from the amino group in place of the amino group, and [Z] represents the following general formula:

【００４２】[0042]

【化１０】 Embedded image

【００４３】（式中、Ｗは前記定義のとおりである）で
示される、長鎖ジカルボン酸（ＩＩ）の一方のカルボキ
シル基から水酸基を除いた残基（以下、これを長鎖カル
ボン酸残基と略称する）を表し、ｎは［Ｚ］が［蛋白
質］とアミド結合する数の平均値を意味し、１〜８の範
囲の数を表す）で示される蛋白質誘導体を製造すること
ができる。(Wherein W is as defined above), a residue obtained by removing a hydroxyl group from one of the carboxyl groups of the long-chain dicarboxylic acid (II) (hereinafter referred to as a long-chain carboxylic acid residue) And n represents the average number of amide bonds of [Z] to [protein], and represents a number in the range of 1 to 8).

【００４４】蛋白質と長鎖カルボン酸イミドエステル誘
導体との反応は、蛋白質により多少異なるが、通常、炭
酸ナトリウム、重炭酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、リ
ン酸ナトリウムなどの塩の水溶液中に蛋白質を溶解し、
得られた溶液に粉末状の長鎖カルボン酸イミドエステル
誘導体またはジメチルスルホキシドなどの有機溶媒に溶
解した長鎖カルボン酸イミドエステル誘導体を添加する
ことにより行われる。反応中、溶液の pH は 6 〜 10
の範囲内に維持されていることが必要である。pH が 6
より低い場合には、長鎖カルボン酸イミドエステル誘導
体の溶解性が低下して反応は進行しにくくなる。また、
pH が 10 より高い場合には、蛋白質が失活してしまう
ことが多く、本発明の蛋白質誘導体を効率的に得ること
はできない。反応温度としては、蛋白質の変性温度以下
の温度、通常約 3 〜 50 ℃の範囲の温度が好ましく、
約 3 〜 40 ℃の範囲の温度がより好ましい。また、反
応時間は、反応温度、長鎖カルボン酸イミドエステル誘
導体の添加方法により異なるが、通常約 10 分間〜 30
日間の範囲である。長鎖カルボン酸イミドエステル誘導
体の使用量は蛋白質 1 モルに対して約 1 〜 100 モル
の範囲である。蛋白質としてＳＯＤを使用する場合に
は、長鎖カルボン酸イミドエステル誘導体の使用量は、
ＳＯＤ 1 モルに対して約 2 〜 50 モルの範囲とするの
が好ましい。この使用量によって蛋白質に結合させる長
鎖カルボン酸残基の分子数を調整することができる。The reaction between the protein and the long-chain carboxylic acid imide ester derivative is slightly different depending on the protein. Usually, the protein is dissolved in an aqueous solution of a salt such as sodium carbonate, sodium bicarbonate, sodium acetate, sodium phosphate, and the like.
This is performed by adding a powdery long-chain carboxylic imide ester derivative or a long-chain carboxylic imide ester derivative dissolved in an organic solvent such as dimethyl sulfoxide to the obtained solution. During the reaction, the pH of the solution is between 6 and 10.
Should be maintained within the range. pH 6
When it is lower, the solubility of the long-chain carboxylic acid imide ester derivative decreases, and the reaction hardly proceeds. Also,
When the pH is higher than 10, the protein is often inactivated, and the protein derivative of the present invention cannot be obtained efficiently. The reaction temperature is preferably a temperature lower than the denaturation temperature of the protein, usually in the range of about 3 to 50 ° C.
Temperatures in the range of about 3-40 ° C are more preferred. The reaction time varies depending on the reaction temperature and the method of adding the long-chain carboxylic acid imide ester derivative, but is usually about 10 minutes to 30 minutes.
Range of days. The amount of the long-chain carboxylic acid imide ester derivative used is in the range of about 1 to 100 mol per 1 mol of the protein. When SOD is used as a protein, the amount of the long-chain carboxylic imide ester derivative used is:
It is preferably in the range of about 2 to 50 moles per mole of SOD. The amount of the long-chain carboxylic acid residue to be bound to the protein can be adjusted by the amount used.

【００４５】このようにして得られた反応液には蛋白質
誘導体と未反応の蛋白質および長鎖カルボン酸イミドエ
ステル誘導体などが存在するが、かかる反応液を濾過
し、濾液をゲル濾過し、得られる蛋白質誘導体を含む溶
出液を必要に応じてハイドロフォ−ビック・クロマトグ
ラフィ−、イオン交換クロマトグラフィ−などに付した
のち、限外濾過に付することにより濃縮し、凍結乾燥す
ることにより蛋白質誘導体の固形物を得ることができ
る。The reaction solution thus obtained contains a protein derivative and unreacted protein, a long-chain carboxylic acid imide ester derivative, and the like. The reaction solution is filtered, and the filtrate is subjected to gel filtration. The eluate containing the protein derivative is subjected to hydrophobic chromatography, ion exchange chromatography, etc., if necessary, then concentrated by ultrafiltration, and solidified by freeze-drying to obtain a solid of the protein derivative. Can be obtained.

【００４６】上記の反応により、蛋白質が有するアミノ
基と長鎖カルボン酸イミドエステル誘導体が有するイミ
ドエステル部分とが反応し、蛋白質誘導体が生成する。By the above reaction, the amino group of the protein reacts with the imide ester portion of the long-chain carboxylic acid imide ester derivative to produce a protein derivative.

【００４７】上記の反応により得られる蛋白質誘導体は
蛋白質に種々の分子数の長鎖カルボン酸イミドエステル
誘導体が反応して得られたものの混合物であり、個々の
蛋白質誘導体の１分子当たりに結合している長鎖カルボ
ン酸残基の数は同一ではない。したがって、蛋白質誘導
体を表す前記一般式において、ｎは蛋白質１分子に結合
する長鎖カルボン酸残基の数の平均値を意味する。しか
しながら、蛋白質に結合する長鎖カルボン酸残基の数が
同数の蛋白質誘導体が所望される場合には、前記の方法
により得られる蛋白質誘導体をさらにゲル濾過、イオン
交換クロマトグラフィ−などの操作に付することにより
所望の蛋白質誘導体を得ることができる。なお、前記の
反応および反応後の処理において、蛋白質誘導体の有す
るカルボキシル基がアルカリ金属塩またはアンモニウム
塩を形成する可能性があるが、かかる塩を形成したカル
ボキシル基を有する蛋白質誘導体も医薬の有効成分とし
て用いることに不都合はない。The protein derivative obtained by the above reaction is a mixture of proteins obtained by reacting a long-chain carboxylic acid imide ester derivative of various molecules with the protein, and the mixture is formed by binding per molecule of each protein derivative. The number of long chain carboxylic acid residues present is not the same. Therefore, in the above general formula representing a protein derivative, n means an average value of the number of long-chain carboxylic acid residues bonded to one protein molecule. However, when a protein derivative having the same number of long-chain carboxylic acid residues bonded to the protein is desired, the protein derivative obtained by the above method is further subjected to operations such as gel filtration and ion exchange chromatography. As a result, a desired protein derivative can be obtained. In the above-mentioned reaction and the treatment after the reaction, the carboxyl group of the protein derivative may form an alkali metal salt or an ammonium salt. There is no inconvenience to use as.

【００４８】蛋白質誘導体は蛋白質１分子に対して 1
〜 8 の範囲の数の長鎖カルボン酸残基が結合したもの
であり、非修飾蛋白質に比べて大幅に延長された血中半
減期を有する。蛋白質誘導体のうち、ネオカルチノスタ
チン（以下、これをＮＣＳと略称する）誘導体は、血中
寿命延長および化学構造簡略化という観点で、ＮＣＳの
1 位のアラニンおよび 20 位のリジンの両方のアミノ基
を長鎖カルボン酸イミドエステル誘導体で修飾したもの
が好ましい。The protein derivative is one protein molecule per molecule.
It has a number of long chain carboxylic acid residues ranging from 8 to 8 and has a significantly extended blood half-life compared to the unmodified protein. Among the protein derivatives, neocarzinostatin (hereinafter abbreviated as NCS) derivative is an NCS derivative from the viewpoint of prolonging blood life and simplifying chemical structure.
It is preferred that both amino groups of alanine at position 1 and lysine at position 20 are modified with a long-chain carboxylic imide ester derivative.

【００４９】原料として用いることのできる蛋白質とし
ては、例えば次のものを挙げることができる。[0049] Examples of proteins that can be used as a raw material include the following.

【００５０】アスパラギナ−ゼ、アルギナ−ゼ、インタ
−ロイキン−１、ＩＬ−２、インタ−ロイキン−３、イ
ンタ−ロイキン−４、インタ−ロイキン−５、インタ−
ロイキン−６、インタ−ロイキン−７、インタ−ロイキ
ン−８、ウロキナ−ゼ、プロウロキナ−ゼ、ストレプト
キナ−ゼ、ＴＰＡ、β−グルコシダ−ゼ、β−グルクロ
ニダ−ゼ、α−ガラクトシダ−ゼ、アデノシンデアミナ
−ゼ、ウリカ−ゼ、ＳＯＤ、インシュリン、ビリルビン
オキシダ−ゼ、Ｇ−ＣＳＦ、顆粒球−マクロファ−ジコ
ロニ−刺激因子、マクロファ−ジコロニ−刺激因子、Ｎ
ＣＳ、カタラ−ゼ、エラスタ−ゼ、エリスロポエチン、
インタ−フェロン−α、インタ−フェロン−β、インタ
−フェロン−γ、腫瘍壊死因子−α、腫瘍壊死因子−
β、神経成長因子、上皮成長因子、卵アルブミン、血小
板由来成長因子、トロンボモジュリン、α1−アンチト
リプシン、骨形成蛋白質、軟骨由来因子、線維芽細胞成
長因子、成長ホルモン、形質転換成長因子−β（ＴＧＦ
−β）、血液凝固 IX 因子、プロテインＣ、プロテイン
Ｓ、インシュリン様成長因子、カルシトニン、ソマトス
タチン、組織性メタロプロテア−ゼ阻害因子（ＴＩＭ
Ｐ）、心房性ナトリウム利尿ホルモン、ＣＤ−４蛋白
質、シスタチン、カルパスタチン、ウリナスタチン、副
甲状腺ホルモン。Asparaginase, arginase, interleukin-1, IL-2, interleukin-3, interleukin-4, interleukin-5, interleukin-5
Leukin-6, inter-leukin-7, inter-leukin-8, urokinase, prourokinase, streptokinase, TPA, β-glucosidase, β-glucuronidase, α-galactosidase, adenosine Deaminase, uricase, SOD, insulin, bilirubin oxidase, G-CSF, granulocyte-macrophage-colony stimulating factor, macrophage-colony-stimulating factor, N
CS, catalase, elastase, erythropoietin,
Interferon-α, interferon-β, interferon-γ, tumor necrosis factor-α, tumor necrosis factor-
β, nerve growth factor, epidermal growth factor, ovalbumin, platelet-derived growth factor, thrombomodulin, α1-antitrypsin, bone morphogenetic protein, cartilage-derived factor, fibroblast growth factor, growth hormone, transforming growth factor-β (TGF
-Β), blood coagulation factor IX, protein C, protein S, insulin-like growth factor, calcitonin, somatostatin, tissue metalloproteinase inhibitor (TIM
P), atrial natriuretic hormone, CD-4 protein, cystatin, calpastatin, ulinastatin, parathyroid hormone.

【００５１】本発明の長鎖カルボン酸イミドエステル誘
導体は脂肪酸部分を有する。従って、かかる長鎖カルボ
ン酸イミドエステル誘導体で修飾した蛋白質は、血清タ
ンパク質および生体膜との可逆的な結合性を有してお
り、これにより血中半減期が延長され、また臓器への移
行性が良好となる。The long-chain carboxylic imide ester derivative of the present invention has a fatty acid moiety. Therefore, the protein modified with such a long-chain carboxylic acid imide ester derivative has reversible binding to serum proteins and biological membranes, thereby prolonging the half-life in blood and transferring to organs. Is good.

【００５２】長鎖カルボン酸イミドエステル誘導体によ
って、ＳＯＤを修飾する場合には、該長鎖カルボン酸イ
ミドエステル誘導体におけるＷが表す炭化水素基の主鎖
原子数は 10 〜 15 であることが特に好ましい。主鎖原
子数が 8 より少ない長鎖カルボン酸イミドエステル誘
導体を蛋白質と反応させて得られる蛋白質誘導体は血清
タンパク質への結合能が不良となるので好ましくない。
主鎖原子数が 28 より多い長鎖カルボン酸イミドエステ
ル誘導体は pH 6 〜 10 の水溶液中への溶解性が不良と
なり、かかる長鎖カルボン酸イミドエステル誘導体を蛋
白質に結合させることが難しくなる。When SOD is modified with a long-chain carboxylic imide ester derivative, the number of main chain atoms of the hydrocarbon group represented by W in the long-chain carboxylic imide ester derivative is particularly preferably 10 to 15. . A protein derivative obtained by reacting a long-chain carboxylic acid imide ester derivative having less than 8 main chain atoms with a protein is not preferred because it has a poor ability to bind to serum proteins.
A long-chain carboxylic acid imide ester derivative having more than 28 main chain atoms has poor solubility in an aqueous solution having a pH of 6 to 10, making it difficult to bind such a long-chain carboxylic acid imide ester derivative to a protein.

【００５３】蛋白質誘導体は、該蛋白質が有することが
知られている薬理作用を効果的に発現する。例えば、Ｓ
ＯＤ誘導体は後述の試験例２の結果から明らかなように
優れた抗潰瘍作用を有する。さらにＳＯＤ誘導体は抗炎
症作用、抗不整脈作用、抗虚血障害作用、抗脳浮腫作用
などの薬理作用をも有する。また、ＮＣＳ誘導体は優れ
た抗癌作用を有する。The protein derivative effectively exhibits the pharmacological action known to be possessed by the protein. For example, S
The OD derivative has an excellent anti-ulcer effect as apparent from the results of Test Example 2 described below. Furthermore, SOD derivatives also have pharmacological actions such as anti-inflammatory action, anti-arrhythmic action, anti-ischemic injury action, and anti-cerebral edema action. In addition, NCS derivatives have excellent anticancer effects.

【００５４】蛋白質誘導体は毒性試験においても低毒性
であることが確認されている。[0054] The toxicity of the protein derivative has also been confirmed in toxicity tests.

【００５５】以上の結果より、蛋白質誘導体は、該蛋白
質が有することが知られている薬理作用に応じて種々の
疾患の治療剤および予防剤として使用することができ
る。From the above results, the protein derivative can be used as a therapeutic or prophylactic agent for various diseases, depending on the pharmacological actions known to be possessed by the protein.

【００５６】ＳＯＤ誘導体は活性酸素ラジカルが関与す
る種々の疾患に対して有効であり、特に抗炎症剤、抗潰
瘍剤、虚血性疾患治療剤、脳浮腫治療剤、パラコ−ト治
療剤として使用することができる。またＳＯＤ誘導体
は、活性酸素ラジカルに起因する制癌剤の副作用を軽減
するための医薬としても有用である。さらにＳＯＤ誘導
体は火傷、外傷、各種の皮膚炎などの皮膚の疾病などの
治療薬としても有用である。ＳＯＤ誘導体は上記の薬効
以外に本来ＳＯＤが有することが知られている薬効［最
新医学、39 巻 2 号、339 (1984)；医学と薬学、14 巻
1 号、55 (1985)；実験医学、4 巻 1 号 (1986)、特集
／生体内フリ−ラジカルと疾患；およびフレグランス・
ジャ−ナル、No.79、89 (1986) 参照］をより効果的に
保有しており、またＳＯＤでは薬効が認められていない
活性酸素ラジカルが関与する疾病に対しても薬効を示
す。The SOD derivative is effective against various diseases involving active oxygen radicals, and is particularly used as an anti-inflammatory agent, an anti-ulcer agent, a therapeutic agent for ischemic disease, a therapeutic agent for cerebral edema, and a therapeutic agent for paraquat. be able to. The SOD derivative is also useful as a drug for reducing the side effects of anticancer drugs caused by active oxygen radicals. Further, the SOD derivative is also useful as a remedy for skin diseases such as burns, trauma and various dermatitis. In addition to the above-mentioned medicinal effects, SOD derivatives have medicinal effects that SOD is known to have originally [Latest Medicine, Vol. 39, No. 2, 339 (1984);
No. 1, 55 (1985); Experimental Medicine, Vol. 4, No. 1 (1986), Special Issue: In Vivo Free Radicals and Diseases; and Fragrances
Journal, Nos. 79 and 89 (1986)], and has a drug effect on diseases associated with active oxygen radicals, for which no drug effect has been recognized in SOD.

【００５７】また、ＮＣＳ誘導体は抗癌剤として有用で
ある。The NCS derivative is useful as an anticancer agent.

【００５８】蛋白質誘導体の投与量は疾病、患者の重篤
度、薬物に対する認容性などにより異なる。例えば、Ｓ
ＯＤ誘導体の投与量は、通常成人 1 日あたり 0.1 〜 5
00 mg の範囲、好ましくは 0.5 〜 100 mg の範囲の量
である。ＮＣＳ誘導体の投与量は、投与法と癌の悪性
度、癌の種類、患者の病状および一般状態、癌の進行度
等によって一定ではなく、また手術等のリンパ節転移予
防等の目的か、または治療目的かによって異なるが、通
常成人 1 日あたり 0.01 〜 100 mgの範囲、好ましくは
0.1 〜 10 mg の範囲の量である。これらの投与量は 1
度に、または分割して投与されるのが適当である。投
与に際しては投与ル−トに適した任意の形態をとること
ができる。ＮＣＳ誘導体をヒトに投与するには、癌の原
発部位、手術後の癌摘出部位等の局所組織内投与法、皮
内、皮下、筋肉内、静脈内、動脈内、経口等の投与法お
よび局所への塗布、噴霧、座薬、膀胱内注入等の外用的
投与法が好適である。The dosage of the protein derivative varies depending on the disease, the severity of the patient, the tolerability of the drug, and the like. For example, S
The dose of the OD derivative is usually 0.1 to 5 per adult per day.
Amounts range from 00 mg, preferably from 0.5 to 100 mg. The dose of the NCS derivative is not fixed depending on the administration method and the degree of malignancy of the cancer, the type of the cancer, the condition and general condition of the patient, the progress of the cancer, etc., or for the purpose of preventing lymph node metastasis such as surgery, or Depending on the purpose of treatment, it is usually in the range of 0.01 to 100 mg per adult per day, preferably
Amounts range from 0.1 to 10 mg. These doses are 1
Suitably, they will be administered at once or in divided doses. For administration, any form suitable for the administration route can be used. In order to administer the NCS derivative to humans, administration methods in local tissues such as the primary site of cancer, the site of removal of cancer after surgery, intradermal, subcutaneous, intramuscular, intravenous, intraarterial, and oral administration methods and local External administration methods such as application to the skin, spraying, suppositories, and intravesical injection are preferred.

【００５９】蛋白質誘導体は任意慣用の製剤方法を用い
て投与用に調製することができる。蛋白質誘導体を少な
くとも 1 種含有する医薬組成物は任意所用の製薬用担
体、賦形剤などの医療上許容される添加剤などを使用し
て慣用の手段によって調製される。The protein derivative can be prepared for administration using any conventional formulation method. Pharmaceutical compositions containing at least one protein derivative are prepared by conventional means using pharmaceutically acceptable additives such as optional pharmaceutical carriers and excipients.

【００６０】この医薬組成物が経口用製剤である場合に
は、該製剤は消化管からの吸収に好適な形態で提供され
るのが好ましい。経口投与の錠剤およびカプセルは単位
量投与形態であり、結合剤、例えば、シロップ、アラビ
アゴム、ゼラチン、ソルビット、トラガント、ポリビニ
ルピロリドンなど；賦形薬、例えば、乳糖、とうもろこ
し澱粉、りん酸カルシウム、ソルビット、グリシンな
ど；潤滑剤、例えば、ステアリン酸マグネシウム、タル
ク、ポリエチレングリコ−ル、シリカなど；崩壊剤、例
えば、馬鈴薯でんぷんなど；または許容し得る湿潤剤、
例えば、ラウリル硫酸ナトリウムなどのような慣用の賦
形剤を含有していてもよい。錠剤は当業界において周知
の方法でコ−ティングしてもよい。経口用液体製剤は水
性または油性の懸濁剤、溶液、シロップ、エリキシル
剤、その他であってもよく、または使用する前に水もし
くは他の適当なビヒクルで再溶解させる乾燥生成物であ
ってもよい。このような液体製剤は普通に用いられる添
加剤、例えば、懸濁化剤、例えば、ソルビットシロッ
プ、メチルセルロ−ス、グルコ−ス／糖シロップ、ゼラ
チン、ヒドロキシエチルセルロ−ス、カルボキシメチル
セルロ−ス、ステアリン酸アルミニウムゲル、水素化食
用脂など；乳化剤、例えば、レシチン、モノオレイン酸
ソルビタン、アラビアゴムなど；非水溶性ビヒクル、例
えば、ア−モンド油、分別ココナット油、油性エステ
ル、プロピレングリコ−ル、エタノ−ルなど、；防腐
剤、例えば、ｐ−ヒドロキシ安息香酸メチル、ｐ−ヒド
ロキシ安息香酸プロピル、ソルビン酸などを含有しても
よい。When the pharmaceutical composition is an oral preparation, the preparation is preferably provided in a form suitable for absorption from the digestive tract. Tablets and capsules for oral administration are in unit dosage form and include binders such as syrup, acacia, gelatin, sorbitol, tragacanth, polyvinylpyrrolidone and the like; excipients such as lactose, corn starch, calcium phosphate, sorbit Lubricants such as magnesium stearate, talc, polyethylene glycol, silica and the like; disintegrants such as potato starch; and an acceptable wetting agent;
For example, it may contain conventional excipients such as sodium lauryl sulfate. Tablets may be coated in a manner well known in the art. Oral liquid preparations may be aqueous or oily suspensions, solutions, syrups, elixirs, etc., or may be dry products which are redissolved in water or other suitable vehicle before use. Good. Such liquid preparations may contain commonly used additives such as suspending agents, for example, sorbitol syrup, methylcellulose, glucose / sugar syrup, gelatin, hydroxyethylcellulose, carboxymethylcellulose, Emulsifiers such as lecithin, sorbitan monooleate, gum arabic and the like; water-insoluble vehicles such as almond oil, fractionated coconut oil, oily esters, propylene glycol, etc. Preservatives such as methyl p-hydroxybenzoate, propyl p-hydroxybenzoate, sorbic acid and the like.

【００６１】また注射剤は、蛋白質誘導体を生理食塩
水、注射用ブドウ糖液などの溶剤に溶解し、蛋白質誘導
体 2 〜 20 mg／溶剤 2 〜 10 ml の濃度に調整し、常
法により調製される。調製時に必要により水溶液に pH
調整剤、緩衝剤、安定化剤、保存剤、可溶化剤などを添
加することもできる。The injection is prepared by a conventional method by dissolving the protein derivative in a solvent such as physiological saline or glucose solution for injection, adjusting the concentration of the protein derivative to 2 to 20 mg / solvent to 2 to 10 ml. . Add pH to aqueous solution as needed during preparation
Adjusters, buffers, stabilizers, preservatives, solubilizers and the like can also be added.

【００６２】上記の医薬組成物は、その形態等に依存し
て、蛋白質誘導体を一般に約 0.01〜 50 重量％、好ま
しくは約 0.1 〜 20 重量％の濃度で含有することがで
きる。The above-mentioned pharmaceutical composition can contain a protein derivative in a concentration of generally about 0.01 to 50% by weight, preferably about 0.1 to 20% by weight, depending on the form and the like.

【００６３】[0063]

【実施例】以下に、実施例により本発明を具体的に説明
する。なお、本発明はこれらの実施例により限定される
ものではない。¹H-NMR はテトラメチルシランを内部標
準として測定し、IR は KBr 錠剤法により測定した。The present invention will be specifically described below with reference to examples. Note that the present invention is not limited by these examples. ¹ H-NMR was measured using tetramethylsilane as an internal standard, and IR was measured by the KBr tablet method.

【００６４】実施例１N -（13 - カルボキシトリデカノイルオキシ）コハク酸
イミドの合成 1,14 - テトラデカン二酸（1.0 g, 3.87 mmol）を無水
テトラヒドロフラン 15ml に溶解し、得られた溶液に N
- ヒドロキシコハク酸イミド（445 mg, 3.87mmol）の無
水テトラヒドロフラン 5 ml 溶液および N,N - ジメチ
ルアミノピリジン塩酸塩（3.1 mg, 0.02mmol）を加え、
30 分間攪拌したのち、ＤＣＣ（799 mg, 3.87 mmol）の
無水テトラヒドロフラン 5 ml 溶液を加えて一晩攪拌し
た。反応液を濾過し、濾液を減圧下に濃縮したのち、残
渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィ−［展開液：ベ
ンゼンとクロロホルムの混合液（容量比：1 対 3）］で
分離精製し、下記の物性値を示す N -（13 - カルボキ
シトリデカノイルオキシ）コハク酸イミド（510 mg, 37
%）を得た。 m.p. 116 〜 118 ℃ FD-MS（m/z）:［M+H］⁺ 356¹ H-NMR（CDCl₃, 270 MHz）: δ 1.18 〜 1.47 ( m,16H
), 1.63 ( m,2H ),1.74 ( m,2H ), 2.35 ( t,2H ),2.5
7 ( t,2H ), 2.84 ( s,4H ),7.85 〜 10.50 ( br,1H ) IR（cm^-1）: 2920, 2850, 1825, 1790, 1740, 1725, 17
10, 1210, 1070Example 1 N- (13-carboxytridecanoyloxy) succinic acid
Synthesis of imide 1,14-Tetradecandioic acid (1.0 g, 3.87 mmol) was dissolved in 15 ml of anhydrous tetrahydrofuran, and N was added to the resulting solution.
-Hydroxysuccinimide (445 mg, 3.87 mmol) in 5 ml of anhydrous tetrahydrofuran and N, N-dimethylaminopyridine hydrochloride (3.1 mg, 0.02 mmol) were added.
After stirring for 30 minutes, a solution of DCC (799 mg, 3.87 mmol) in 5 ml of anhydrous tetrahydrofuran was added, and the mixture was stirred overnight. The reaction solution is filtered, the filtrate is concentrated under reduced pressure, and the residue is separated and purified by silica gel column chromatography [developing solution: a mixture of benzene and chloroform (volume ratio: 1: 3)] to obtain the following physical property values. N- (13-carboxytridecanoyloxy) succinimide (510 mg, 37
%). mp 116 ~ 118 ℃ FD-MS (m / z): [M + H] + 356 1 H-NMR (CDCl 3, 270 MHz): δ 1.18 ~ 1.47 (m, 16H
), 1.63 (m, 2H), 1.74 (m, 2H), 2.35 (t, 2H), 2.5
7 (t, 2H), 2.84 (s, 4H), 7.85 to 10.50 (br, 1H) IR (cm- ¹ ): 2920, 2850, 1825, 1790, 1740, 1725, 17
10, 1210, 1070

【００６５】実施例２N -（15 - カルボキシペンタデカノイルオキシ）コハク
酸イミドの合成 1,16 - ヘキサデカン二酸（1.0 g, 3.49 mmol）を無水
テトラヒドロフラン 30ml に溶解し、得られた溶液に N
- ヒドロキシコハク酸イミド（402 mg, 3.49mmol）の無
水テトラヒドロフラン 10 ml 溶液および N,N - ジメチ
ルアミノピリジン塩酸塩（2.8 mg, 0.018 mmol）を加
え、30 分間攪拌したのち、ＤＣＣ（720mg, 3.49 mmo
l）の無水テトラヒドロフラン 10 ml 溶液を加えて一晩
攪拌した。反応液を濾過し、濾液を減圧下に濃縮したの
ち、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィ−［展開
液：ベンゼンとクロロホルムの混合液（容量比：1 対
3）］で分離精製し、下記の物性値を示す N -（15 - カ
ルボキシペンタデカノイルオキシ）コハク酸イミド（42
9 mg, 32 %）を得た。 m.p. 118.5 〜 121 ℃ FD-MS（m/z）:［M+H］⁺ 384¹ H-NMR（CDCl₃, 270 MHz）: δ 1.18 〜 1.45 ( m,20H
), 1.62 ( m,2H ),1.74 ( m,2H ), 2.34 ( t,2H ),2.6
0 ( t,2H ), 2.83 ( s,4H ) IR（cm^-1）: 2920, 2850, 1825, 1790, 1740, 1725, 17
10, 1210, 1070Example 2 N- (15-carboxypentadecanoyloxy) succinic
Synthesis of acid imide 1,16-Hexadecandioic acid (1.0 g, 3.49 mmol) was dissolved in 30 ml of anhydrous tetrahydrofuran, and N was added to the resulting solution.
-A solution of hydroxysuccinimide (402 mg, 3.49 mmol) in anhydrous tetrahydrofuran (10 ml) and N, N-dimethylaminopyridine hydrochloride (2.8 mg, 0.018 mmol) are added, and the mixture is stirred for 30 minutes and then DCC (720 mg, 3.49 mmo).
A solution of l) in 10 ml of anhydrous tetrahydrofuran was added and stirred overnight. The reaction solution is filtered, the filtrate is concentrated under reduced pressure, and the residue is subjected to silica gel column chromatography [developing solution: a mixture of benzene and chloroform (volume ratio: 1: 1).
3)] and purified by N- (15-carboxypentadecanoyloxy) succinimide (42) having the following physical property values.
9 mg, 32%). mp 118.5 ~ 121 ℃ FD-MS (m / z): [M + H] + 384 1 H-NMR (CDCl 3, 270 MHz): δ 1.18 ~ 1.45 (m, 20H
), 1.62 (m, 2H), 1.74 (m, 2H), 2.34 (t, 2H), 2.6
0 (t, 2H), 2.83 (s, 4H) IR (cm ^-1 ): 2920, 2850, 1825, 1790, 1740, 1725, 17
10, 1210, 1070

【００６６】実施例３N - （ 17 - カルボキシヘプタデカノイルオキシ）コハ
ク酸イミドの合成 1,18 - オクタデカン二酸（1.0 g, 3.18 mmol）を無水
テトラヒドロフラン 30ml に溶解し、得られた溶液に N
- ヒドロキシコハク酸イミド（366 mg, 3.18mmol）の無
水テトラヒドロフラン 10 ml 溶液および N,N - ジメチ
ルアミノピリジン塩酸塩（2.5 mg, 0.016 mmol）を加
え、30 分間攪拌したのち、ＤＣＣ（656mg, 3.18 mmo
l）の無水テトラヒドロフラン 10 ml 溶液を加えて一晩
攪拌した。反応液を濾過し、濾液を減圧下に濃縮したの
ち、シリカゲルカラムクロマトグラフィ−［展開液：ベ
ンゼンとクロロホルムの混合液（容量比：1 : 3.5）］
で分離精製し、下記の物性値を示す N -（17 - カルボ
キシヘプタデカノイルオキシ）コハク酸イミド（480 m
g, 37 %）を得た。 m.p. 120 〜 122.5 ℃ FD-MS（m/z）:［M+H］⁺ 412¹ H-NMR（CDCl₃, 270 MHz）: δ 1.13 〜 1.47 ( m,24H
), 1.63 ( m,2H ),1.75 ( m,2H ), 2.34 ( t,2H ),2.6
0 ( t,2H ), 2.84 ( s,4H ),5.0〜 7.0 ( br,1H ) IR（cm^-1）: 2920, 2850, 1825, 1790, 1740, 1725, 17
10, 1210, 1070Example 3 N- (17-carboxyheptadecanoyloxy) coha
Synthesis of succinimide 1,18-Octadecanedioic acid (1.0 g, 3.18 mmol) was dissolved in 30 ml of anhydrous tetrahydrofuran, and N was added to the resulting solution.
-A solution of hydroxysuccinimide (366 mg, 3.18 mmol) in anhydrous tetrahydrofuran (10 ml) and N, N-dimethylaminopyridine hydrochloride (2.5 mg, 0.016 mmol) were added, and after stirring for 30 minutes, DCC (656 mg, 3.18 mmo) was added.
A solution of l) in 10 ml of anhydrous tetrahydrofuran was added and stirred overnight. The reaction solution is filtered, and the filtrate is concentrated under reduced pressure, followed by silica gel column chromatography [developing solution: a mixture of benzene and chloroform (volume ratio: 1: 3.5)].
And purified with N- (17-carboxyheptadecanoyloxy) succinimide (480 m
g, 37%). mp 120 ~ 122.5 ℃ FD-MS (m / z): [M + H] + 412 1 H-NMR (CDCl 3, 270 MHz): δ 1.13 ~ 1.47 (m, 24H
), 1.63 (m, 2H), 1.75 (m, 2H), 2.34 (t, 2H), 2.6
0 (t, 2H), 2.84 (s, 4H), 5.0 to 7.0 (br, 1H) IR (cm- ¹ ): 2920, 2850, 1825, 1790, 1740, 1725, 17
10, 1210, 1070

【００６７】実施例４N -（19 - カルボキシノナデカノイルオキシ）コハク酸
イミドの合成 1,20 - エイコサン二酸（1.0 g, 2.92 mmol）を無水テ
トラヒドロフラン 50 ml に溶解し、得られた溶液に N-
ヒドロキシコハク酸イミド（336 mg, 2.92 mmol）の無
水テトラヒドロフラン 10 ml 溶液および N,N - ジメチ
ルアミノピリジン塩酸塩（2.3 mg, 0.015 mmol）を加
え、30 分間攪拌したのち、ＤＣＣ（602 mg, 2.92 mmo
l）の無水テトラヒドロフラン 10 ml 溶液を加えて一晩
攪拌した。反応液を濾過し、濾液を減圧下に濃縮したの
ち、シリカゲルカラムクロマトグラフィ−［展開液：ベ
ンゼンとクロロホルムの混合液（容量比：1 対 3.5）］
で分離精製し、下記の物性値を示す N -（19 -カルボキ
シノナデカノイルオキシ）コハク酸イミド（420 mg, 33
%）を得た。 m.p. 121.5 〜 124 ℃ FD-MS（m/z）:［M+H］⁺ 440¹ H-NMR（CDCl₃, 270 MHz）: δ 1.14 〜 1.45 ( m,28H
), 1.63 ( m,2H ),1.74 ( m,2H ), 2.35 ( t,2H ),2.6
0 ( t,2H ), 2.84 ( s,4H ) IR（cm^-1）: 2920, 2850, 1825, 1790, 1740, 1725, 17
10, 1210, 1070Example 4 N- (19-carboxynonadecanoyloxy) succinic acid
Synthesis of imide 1,20-Eicosandioic acid (1.0 g, 2.92 mmol) was dissolved in 50 ml of anhydrous tetrahydrofuran, and N-
A solution of hydroxysuccinimide (336 mg, 2.92 mmol) in anhydrous tetrahydrofuran (10 ml) and N, N-dimethylaminopyridine hydrochloride (2.3 mg, 0.015 mmol) were added, and after stirring for 30 minutes, DCC (602 mg, 2.92 mmo) was added.
A solution of l) in 10 ml of anhydrous tetrahydrofuran was added and stirred overnight. The reaction solution is filtered, and the filtrate is concentrated under reduced pressure, followed by silica gel column chromatography [developing solution: a mixture of benzene and chloroform (volume ratio: 1: 3.5)].
And purified by N- (19-carboxynonadecanoyloxy) succinimide (420 mg, 33
%). mp 121.5 ~ 124 ℃ FD-MS (m / z): [M + H] + 440 1 H-NMR (CDCl 3, 270 MHz): δ 1.14 ~ 1.45 (m, 28H
), 1.63 (m, 2H), 1.74 (m, 2H), 2.35 (t, 2H), 2.6
0 (t, 2H), 2.84 (s, 4H) IR (cm ^-1 ): 2920, 2850, 1825, 1790, 1740, 1725, 17
10, 1210, 1070

【００６８】実施例５N -（21 - カルボキシヘンエイコサノイルオキシ）コハ
ク酸イミドの合成 1,22 - ドコサン二酸（1.0 g, 2.70 mmol）を無水テト
ラヒドロフラン 70 mlに溶解し、得られた溶液に N -ヒ
ドロキシコハク酸イミド（311 mg, 2.70 mmol）の無水
テトラヒドロフラン 10 ml 溶液および N,N - ジメチル
アミノピリジン塩酸塩（2.1 mg, 0.014 mmol）を加え、
30 分間攪拌したのち、ＤＣＣ（602 mg,2.70 mmol）の
無水テトラヒドロフラン 10 ml 溶液を加えて一晩攪拌
した。反応液を濾過し、濾液を減圧下に濃縮したのち、
シリカゲルカラムクロマトグラフィ−［展開液：ベンゼ
ンとクロロホルムの混合液（容量比：1 対 3.5）］で分
離精製し、下記の物性値を示す N -（21 - カルボキシ
ヘンエイコサノイルオキシ）コハク酸イミド（440 mg,
35%）を得た。 m.p. 122 〜 124.5 ℃ FD-MS（m/z）:［M+H］⁺ 468¹ H-NMR（CDCl₃, 270 MHz）: δ 1.12 〜 1.43 ( m,16H
), 1.63 ( m,2H ),1.74 ( m,2H ), 2.34 ( t,2H ),2.6
0 ( t,2H ), 2.84 ( s,4H ) IR（cm^-1）: 2920, 2850, 1825, 1790, 1740, 1725, 17
10, 1210, 1070Example 5 N- (21-carboxypheneicosanoyloxy) coha
Synthesis of succinimide 1,22-Docosandioic acid (1.0 g, 2.70 mmol) was dissolved in 70 ml of anhydrous tetrahydrofuran, and N-hydroxysuccinimide (311 mg, 2.70 mmol) of anhydrous tetrahydrofuran was added to the obtained solution. ml solution and N, N-dimethylaminopyridine hydrochloride (2.1 mg, 0.014 mmol)
After stirring for 30 minutes, a solution of DCC (602 mg, 2.70 mmol) in 10 ml of anhydrous tetrahydrofuran was added, and the mixture was stirred overnight. The reaction solution was filtered, and the filtrate was concentrated under reduced pressure.
Separation and purification by silica gel column chromatography [developing solution: mixed solution of benzene and chloroform (volume ratio: 1: 3.5)], the N- (21-carboxyheneicosanoyloxy) succinimide ( 440 mg,
35%). mp 122 to 124.5 ° C FD-MS (m / z): [M + H] ⁺ 468 ¹ H-NMR (CDCl ₃ , 270 MHz): δ 1.12 to 1.43 (m, 16H
), 1.63 (m, 2H), 1.74 (m, 2H), 2.34 (t, 2H), 2.6
0 (t, 2H), 2.84 (s, 4H) IR (cm ^-1 ): 2920, 2850, 1825, 1790, 1740, 1725, 17
10, 1210, 1070

【００６９】実施例６（ａ）1,14 - テトラデカン二酸モノベンジルエステル
の合成 1,14 -テトラデカン二酸（5.0 g, 19.4mmol）をテトラ
ヒドロフラン 80 ml に溶解し、得られた溶液にベンジ
ルアルコ−ル（2.1 g, 19.4 mmol）のテトラヒドロフラ
ン 10 ml 溶液および N,N - ジメチルアミノピリジン塩
酸塩（15 mg, 0.1mmol）を加え、30 分間攪拌したの
ち、ＤＣＣ（4.0 g, 19.4 mmol）のテトラヒドロフラン
10 ml 溶液を加えて、室温で 20 時間攪拌した。反応
液を濾過し、濾液を減圧下に濃縮したのち、シリカゲル
カラムクロマトグラフィ−［展開液：ヘキサンとジエチ
ルエ−テルの混合液（容量比：2 対 1）］で分離精製
し、下記の物性値を示す 1,14 - テトラデカン二酸モノ
ベンジルエステル（2.42 g, 38 %）を得た。 m.p. 73.5 〜 74 ℃¹ H-NMR（CDCl₃ , 270 MHz）: δ 1.17 〜 1.40 ( m,16H
),1.50 〜 1.70 ( m,4H ),2.23 〜 2.39 ( m,4H ),5.1
1 ( s,2H ), 7.32 ( m,5H ),7.40 〜 9.35 ( br,1H )Example 6 (a) Monobenzyl ester of 1,14-tetradecandioic acid
Synthesis of 1,14 - tetradecane diacid (5.0 g, 19.4mmol) was dissolved in tetrahydrofuran 80 ml, benzyl resulting solution alcohol - le (2.1 g, 19.4 mmol) in tetrahydrofuran in 10 ml and N, N - After adding dimethylaminopyridine hydrochloride (15 mg, 0.1 mmol) and stirring for 30 minutes, tetrahydrofuran of DCC (4.0 g, 19.4 mmol) was added.
A 10 ml solution was added, and the mixture was stirred at room temperature for 20 hours. The reaction solution is filtered, the filtrate is concentrated under reduced pressure, and then separated and purified by silica gel column chromatography [developing solution: a mixture of hexane and diethyl ether (volume ratio: 2 to 1)] to obtain the following physical property values. The indicated 1,14-tetradecandioic acid monobenzyl ester (2.42 g, 38%) was obtained. ^{mp 73.5 ~ 74 ℃ 1 H-} NMR (CDCl 3, 270 MHz): δ 1.17 ~ 1.40 (m, 16H
), 1.50 to 1.70 (m, 4H), 2.23 to 2.39 (m, 4H), 5.1
1 (s, 2H), 7.32 (m, 5H), 7.40-9.35 (br, 1H)

【００７０】（ｂ）N -（13 - ベンジルオキシカルボニ
ルトリデカノイルオキシ）コハク酸イミドの合成 1,14 - テトラデカン二酸モノベンジルエステル（2.4
g, 6.89 mmol）をテトラヒドロフラン 30 ml に溶解
し、得られた溶液に N - ヒドロキシコハク酸イミド（7
93 mg, 6.89 mmol）のテトラヒドロフラン 15 ml 溶液
および N,N - ジメチルアミノピリジン塩酸塩 （3.3 m
g, 0.02 mmol）を加え、室温で 30 分攪拌したのち、Ｄ
ＣＣ（1.42 g, 6.89 mmol）のテトラヒドロフラン 15 m
l 溶液を加えて、室温で 15 時間反応した。反応液を濾
過し、濾液を減圧下に濃縮したのち、シリカゲルカラム
クロマトグラフィ−［展開液：ヘキサンと酢酸エチルの
混合液（容量比：2 対 1）］で分離精製し、下記の物性
値を示す N -（13 - ベンジルオキシカルボニルトリデ
カノイルオキシ）コハク酸イミド（2.31 g, 75 %）を得
た。m.p. 61.5 〜 62.5 ℃¹ H-NMR（CDCl₃, 270 MHz）: δ 1.05 〜 1.46 ( m,16H
), 1.63 ( m,2H ),1.72 ( m,2H ), 2.33 ( t,2H ),2.5
8 ( t,2H ), 2.79 ( s,4H ),5.11 ( s,2H ), 7.33 ( m,
5H ) (B) N- (13-benzyloxycarbonyl)
Synthesis of rutridecanoyloxy ) succinimide 1,14-tetradecandioic acid monobenzyl ester (2.4
g, 6.89 mmol) was dissolved in 30 ml of tetrahydrofuran, and N-hydroxysuccinimide (7
93 mg, 6.89 mmol) in 15 ml of tetrahydrofuran and N, N-dimethylaminopyridine hydrochloride (3.3 m
g, 0.02 mmol) and stirred at room temperature for 30 minutes.
CC (1.42 g, 6.89 mmol) in tetrahydrofuran 15 m
l The solution was added and reacted at room temperature for 15 hours. The reaction solution is filtered, the filtrate is concentrated under reduced pressure, and then separated and purified by silica gel column chromatography [developing solution: a mixture of hexane and ethyl acetate (volume ratio: 2 to 1)], and the following physical property values are obtained. N- (13-Benzyloxycarbonyltridecanoyloxy) succinimide (2.31 g, 75%) was obtained. mp 61.5-62.5 ° C ¹ H-NMR (CDCl ₃ , 270 MHz): δ 1.05-1.46 (m, 16H
), 1.63 (m, 2H), 1.72 (m, 2H), 2.33 (t, 2H), 2.5
8 (t, 2H), 2.79 (s, 4H), 5.11 (s, 2H), 7.33 (m,
5H)

【００７１】（ｃ）N -（13 - カルボキシトリデカノイ
ルオキシ）コハク酸イミドの合成 N -（13 - ベンジルオキシカルボニルトリデカノイルオ
キシ）コハク酸イミド（2.28 g, 5.12 mmol）をテトラ
ヒドロフラン 15 ml に溶解し、得られた溶液に 10 %
パラジウム炭素 228 mg を加え、水素雰囲気下で 15 時
間攪拌した。反応液を濾過し、濾液を減圧下に濃縮した
のち、残渣を再結晶（エタノ−ル）してN -（13 - カル
ボキシトリデカノイルオキシ）コハク酸イミド（1.71
g, 94%）を得た。 m.p. 116 〜 118 ℃ FD-MS（m/z）:［M+H］⁺ 356¹ H-NMR（CDCl₃, 270 MHz）: δ 1.18 〜 1.47 ( m,16H
), 1.63 ( m,2H ),1.74 ( m,2H ), 2.35 ( t,2H ),2.5
7 ( t,2H ), 2.84 ( s,4H ),7.85 〜 10.50 ( br,1H ) IR（cm^-1）: 2920, 2850, 1825, 1790, 1740, 1725, 17
10, 1210, 1070 (C) N- (13-carboxytridecanoy)
Synthesis of N- (13-benzyloxycarbonyltridecanoyloxy) succinimide (2.28 g, 5.12 mmol) was dissolved in 15 ml of tetrahydrofuran, and 10% was added to the resulting solution.
228 mg of palladium carbon was added, and the mixture was stirred under a hydrogen atmosphere for 15 hours. After the reaction solution was filtered and the filtrate was concentrated under reduced pressure, the residue was recrystallized (ethanol) to give N- (13-carboxytridecanoyloxy) succinimide (1.71%).
g, 94%). mp 116 ~ 118 ℃ FD-MS (m / z): [M + H] + 356 1 H-NMR (CDCl 3, 270 MHz): δ 1.18 ~ 1.47 (m, 16H
), 1.63 (m, 2H), 1.74 (m, 2H), 2.35 (t, 2H), 2.5
7 (t, 2H), 2.84 (s, 4H), 7.85 to 10.50 (br, 1H) IR (cm- ¹ ): 2920, 2850, 1825, 1790, 1740, 1725, 17
10, 1210, 1070

【００７２】実施例７N -（15 - カルボキシペンタデカノイルオキシ）フタル
イミドの合成 1,16 - ヘキサデカン二酸（500 mg, 1.75 mmol）を無水
テトラヒドロフラン 15 ml に溶解し、得られた溶液にN
- ヒドロキシフタルイミド（285 mg, 1.75 mmol）の無
水テトラヒドロフラン 10 ml 溶液および N,N - ジメチ
ルアミノピリジン塩酸塩（1.4 mg）を加え、30 分間攪
拌したのち、ＤＣＣ（361 mg, 1.75 mmol）の無水テト
ラヒドロフラン 3 ml 溶液を加えて一晩攪拌した。反応
液を濾過し、濾液を減圧下に濃縮したのち、残渣をシリ
カゲルカラムクロマトグラフィ−で分離精製し、下記の
物性値を示す N -（15 - カルボキシペンタデカノイル
オキシ）フタルイミド（310 mg, 41 %）を得た。 m.p. 109 〜 110.5 ℃ FD-MS（m/z）:［M+H］⁺ 432¹ H-NMR（CDCl₃, 270 MHz）: δ 1.14 〜 1.50 ( m,20H
), 1.63 ( m,2H ),1.78 ( m,2H ), 2.34 ( t,2H ),2.6
6 ( t,2H ), 7.72 〜 7.94 ( m,4H )Example 7 N- (15-carboxypentadecanoyloxy) phthal
Synthesis of imide 1,16-Hexadecanedioic acid (500 mg, 1.75 mmol) was dissolved in 15 ml of anhydrous tetrahydrofuran, and N was added to the resulting solution.
-Add 10 ml of a solution of hydroxyphthalimide (285 mg, 1.75 mmol) in anhydrous tetrahydrofuran and N, N-dimethylaminopyridine hydrochloride (1.4 mg), stir for 30 minutes, and then add DCC (361 mg, 1.75 mmol) in anhydrous tetrahydrofuran A 3 ml solution was added and stirred overnight. The reaction solution was filtered, and the filtrate was concentrated under reduced pressure. The residue was separated and purified by silica gel column chromatography, and N- (15-carboxypentadecanoyloxy) phthalimide (310 mg, 41%) having the following physical properties was obtained. ) Got. mp 109 ~ 110.5 ℃ FD-MS (m / z): [M + H] + 432 1 H-NMR (CDCl 3, 270 MHz): δ 1.14 ~ 1.50 (m, 20H
), 1.63 (m, 2H), 1.78 (m, 2H), 2.34 (t, 2H), 2.6
6 (t, 2H), 7.72-7.94 (m, 4H)

【００７３】実施例８N -（15 - カルボキシペンタデカノイルオキシ）テトラ
メチルフタルイミドの合成 1,16 - ヘキサデカン二酸（100 mg, 0.35 mmol）を無水
テトラヒドロフラン 3ml に溶解し、得られた溶液に N-
ヒドロキシテトラメチルフタルイミド（77mg, 0.35 mm
ol）の無水テトラヒドロフラン 2 ml 溶液および N,N -
ジメチルアミノピリジン塩酸塩（0.3 mg）を加え、30
分間攪拌したのち、ＤＣＣ（72 mg,0.35 mmol）の無水
テトラヒドロフラン 0.5 ml 溶液を加えて一晩攪拌し
た。反応液を濾過し、濾液を減圧下に濃縮したのち、残
渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィ−で分離精製
し、下記の物性値を示す N -（15 - カルボキシペンタ
デカノイルオキシ）テトラメチルフタルイミド（58 mg,
34 %）を得た。 FD-MS（m/z）:［M+H］⁺ 488¹ H-NMR（CDCl₃, 270 MHz）: δ 1.14 〜 1.49 ( m,20H
), 1.61 ( m,2H ),1.78 ( m,2H ), 2.29 ( s,6H ),2.3
4 ( t,2H ), 2.66 ( t,s,8H )Example 8 N- (15-carboxypentadecanoyloxy) tetra
Synthesis of Methylphthalimide 1,16-Hexadecanedioic acid (100 mg, 0.35 mmol) was dissolved in 3 ml of anhydrous tetrahydrofuran, and N-
Hydroxytetramethylphthalimide (77mg, 0.35 mm
ol) in anhydrous tetrahydrofuran (2 ml) and N, N-
Add dimethylaminopyridine hydrochloride (0.3 mg) and add
After stirring for minutes, a solution of DCC (72 mg, 0.35 mmol) in 0.5 ml of anhydrous tetrahydrofuran was added and stirred overnight. The reaction solution was filtered, and the filtrate was concentrated under reduced pressure. The residue was separated and purified by silica gel column chromatography to give N- (15-carboxypentadecanoyloxy) tetramethylphthalimide (58 mg,
34%). FD-MS (m / z) : [M + H] + 488 1 H-NMR (CDCl 3, 270 MHz): δ 1.14 ~ 1.49 (m, 20H
), 1.61 (m, 2H), 1.78 (m, 2H), 2.29 (s, 6H), 2.3
4 (t, 2H), 2.66 (t, s, 8H)

【００７４】実施例９N -（15 - カルボキシペンタデカノイルオキシ）- 5 -
ノルボルネン - 2,3 -ジカルボキシイミドの合成 実施例７において使用した N - ヒドロキシフタルイミ
ド（285 mg, 1.75 mmol）に代えて、N - ヒドロキシ -
5- ノルボルネン - 2,3 -ジカルボキシイミド（313 mg,
1.75 mmol）を用いた以外は、実施例７と同様の操作を
行い、下記の物性値を示す N -（15 - カルボキシペン
タデカノイルオキシ）- 5 - ノルボルネン - 2,3 -ジカ
ルボキシイミド（340 mg, 44 %）を得た。 m.p. 103 〜 104.5 ℃ FD-MS（m/z）:［M+H］⁺ 448¹ H-NMR（CDCl₃, 270 MHz）: δ 1.14 〜 1.43 ( m,20H
),1.48 〜1.82 ( m,6H ),2.34 ( t,2H ), 2.52 ( t,2H
),3.32 ( s,2H ), 3.44 ( s,2H ),6.19 ( s,2H )Example 9 N- (15-carboxypentadecanoyloxy) -5-
Synthesis of Norbornene-2,3-dicarboximide Instead of N-hydroxyphthalimide (285 mg, 1.75 mmol) used in Example 7, N-hydroxy-
5-norbornene-2,3-dicarboximide (313 mg,
Except for using 1.75 mmol), the same operation as in Example 7 was carried out, and N- (15-carboxypentadecanoyloxy) -5-norbornene-2,3-dicarboximide (340) having the following physical property values was obtained. mg, 44%). mp 103 ~ 104.5 ℃ FD-MS (m / z): [M + H] + 448 1 H-NMR (CDCl 3, 270 MHz): δ 1.14 ~ 1.43 (m, 20H
), 1.48 to 1.82 (m, 6H), 2.34 (t, 2H), 2.52 (t, 2H)
), 3.32 (s, 2H), 3.44 (s, 2H), 6.19 (s, 2H)

【００７５】実施例１０（ａ）N -（13 - ベンジルオキシカルボニルトリデカノ
イルオキシ）酒石酸イミドの合成 N - ヒドロキシ酒石酸イミド（65 mg, 0.44 mmol）をテ
トラヒドロフラン 5 ml に溶解し、得られた溶液に 1,1
4 - テトラデカン二酸モノベンジルエステル（154 mg,
0.44 mmol）およびＤＣＣ（91 mg, 0.49 mmol）のテト
ラヒドロフラン0.3 ml 溶液を加えて、4 ℃で 3 晩攪拌
した。反応液を濾過し、濾液を減圧下に濃縮したのち、
シリカゲルカラムクロマトグラフィ−で分離精製し、下
記の物性値を示す N -（13 -ベンジルオキシカルボニル
トリデカノイルオキシ）酒石酸イミド（54 mg, 26 %）
を得た。¹ H-NMR（CDCl₃, 270 MHz）: δ 1.05 〜 1.45 ( m,16H
), 1.63 ( m,2H ),1.73 ( m,2H ), 2.34 ( t,2H ),2.5
9 ( t,2H ), 3.87 ( br,2H ),4.73 ( s,2H ), 5.11 (
s,2H ),7.33 ( m,5H )Example 10 (a) N- (13-benzyloxycarbonyltridecano)
Synthesis of yloxy) tartarimide N-hydroxytartarimide (65 mg, 0.44 mmol) was dissolved in 5 ml of tetrahydrofuran, and 1,1 was added to the resulting solution.
4-Tetradecandioic acid monobenzyl ester (154 mg,
0.44 mmol) and a solution of DCC (91 mg, 0.49 mmol) in 0.3 ml of tetrahydrofuran were added, and the mixture was stirred at 4 ° C. for 3 nights. The reaction solution was filtered, and the filtrate was concentrated under reduced pressure.
It is separated and purified by silica gel column chromatography, and has the following physical property values. N- (13-benzyloxycarbonyltridecanoyloxy) tartarimide (54 mg, 26%)
I got ¹ H-NMR (CDCl ₃ , 270 MHz): δ 1.05 to 1.45 (m, 16H
), 1.63 (m, 2H), 1.73 (m, 2H), 2.34 (t, 2H), 2.5
9 (t, 2H), 3.87 (br, 2H), 4.73 (s, 2H), 5.11 (
s, 2H), 7.33 (m, 5H)

【００７６】（ｂ）N -（13 - カルボキシトリデカノイ
ルオキシ）酒石酸イミドの合成 N -（13 - ベンジルオキシカルボニルトリデカノイルオ
キシ）酒石酸イミド（12 mg, 0.03 mmol）をテトラヒド
ロフラン 2 ml に溶解し、得られた溶液に 10 % パラジ
ウム炭素 2 mg を加え、水素雰囲気下で 5 時間攪拌し
た。反応液を濾過し、濾液を減圧下に濃縮して下記の物
性値を示す N -（13 -カルボキシトリデカノイルオキ
シ）酒石酸イミド（5 mg, 51 %）を得た。 FD-MS（m/z）:［M+H］⁺ 388¹ H-NMR（CDCl₃, 270 MHz）: δ 1.05 〜 1.48 ( m,16H
), 1.62 ( m,2H ),1.73 ( m,2H ), 2.33 ( t,2H ),2.6
0 ( t,2H ), 3.82 ( br,2H ),4.72 ( s,2H ), (B) N- (13-carboxytridecanoy)
Synthesis of ( loxy) tartarimide N- (13-benzyloxycarbonyltridecanoyloxy) tartarimide (12 mg, 0.03 mmol) was dissolved in 2 ml of tetrahydrofuran, and 2 mg of 10% palladium carbon was added to the resulting solution. The mixture was stirred under a hydrogen atmosphere for 5 hours. The reaction solution was filtered, and the filtrate was concentrated under reduced pressure to obtain N- (13-carboxytridecanoyloxy) tartarimide (5 mg, 51%) having the following physical data. FD-MS (m / z) : [M + H] + 388 1 H-NMR (CDCl 3, 270 MHz): δ 1.05 ~ 1.48 (m, 16H
), 1.62 (m, 2H), 1.73 (m, 2H), 2.33 (t, 2H), 2.6
0 (t, 2H), 3.82 (br, 2H), 4.72 (s, 2H),

【００７７】実施例１１（ａ）N -（13 - ベンジルオキシカルボニルトリデカノ
イルオキシ）スルホコハク酸イミドナトリウム塩の合成 1,14 - テトラデカン二酸モノベンジルエステル（100 m
g,0.29 mmol）を無水ジメチルホルムアミド 0.4 ml に
溶解し、得られた溶液に N - ヒドロキシスルホコハク
酸イミドナトリウム塩（63 mg, 0.29 mmol）およびＤＣ
Ｃ（65 mg,0.29 mmol）の無水ジメチルホルムアミド 0.
4 ml 溶液を加えて、室温で 14 時間攪拌した。反応液
を濾過し、濾液を氷冷下の温度下で 2 時間攪拌したの
ち、生じた固体を濾別した。濾液に酢酸エチル 30 ml
を加えて、30 分攪拌したのち、生じた固体を濾取し、
減圧下に乾燥して、下記の物性値を示す N -（13 - ベ
ンジルオキシカルボニルトリデカノイルオキシ）スルホ
コハク酸イミドナトリウム塩（66 mg, 42 %）を得た。¹ H-NMR（DMSO-d₆, 270 MHz）: δ 1.13 〜 1.42 ( m,16
H ),1.47 〜 1.68 ( m,4H ),2.33 ( t,2H ), 2.63 ( t,
2H ),2.87 ( d,1H ), 3.14 ( m,1H ),3.94 ( m,1H ),
5.08 ( s,2H ),7.34 ( s,5H )Example 11 (a) N- (13-benzyloxycarbonyltridecano)
Synthesis of yloxy) sulfosuccinimide sodium salt 1,14-tetradecandioic acid monobenzyl ester (100 m
g, 0.29 mmol) was dissolved in 0.4 ml of anhydrous dimethylformamide, and the resulting solution was treated with N-hydroxysulfosuccinimide sodium salt (63 mg, 0.29 mmol) and DC
C (65 mg, 0.29 mmol) anhydrous dimethylformamide 0.
A 4 ml solution was added, and the mixture was stirred at room temperature for 14 hours. The reaction solution was filtered, and the filtrate was stirred under ice-cooling temperature for 2 hours, and the resulting solid was separated by filtration. Ethyl acetate 30 ml in the filtrate
After stirring for 30 minutes, the resulting solid was collected by filtration,
Drying under reduced pressure gave N- (13-benzyloxycarbonyltridecanoyloxy) sulfosuccinimide sodium salt (66 mg, 42%) having the following physical data. ^{1 H-NMR (DMSO-d} 6, 270 MHz): δ 1.13 ~ 1.42 (m, 16
H), 1.47-1.68 (m, 4H), 2.33 (t, 2H), 2.63 (t,
2H), 2.87 (d, 1H), 3.14 (m, 1H), 3.94 (m, 1H),
5.08 (s, 2H), 7.34 (s, 5H)

【００７８】（ｂ）N -（13 - カルボキシトリデカノイ
ルオキシ）スルホコハク酸イミドナトリウム塩の合成 N -（13 - ベンジルオキシカルボニルトリデカノイルオ
キシ）スルホコハク酸イミドナトリウム塩（50 mg, 0.1
1 mmol）をジメチルホルムアミド 1 ml に溶解し、得ら
れた溶液に 10 % パラジウム炭素 5 mg を加え、水素雰
囲気下で 20 時間攪拌した。反応液を濾過し、濾液に酢
酸エチル 30 ml を加えたのち、30 分攪拌した。析出し
た固体を濾取し、減圧下に乾燥して下記の物性値を示す
N -（13- カルボキシトリデカノイルオキシ）スルホコ
ハク酸イミドナトリウム塩（22mg, 63 %）を得た。 FAB-MS（m/z）: 480, 458, 435, 413¹ H-NMR（DMSO-d₆, 270 MHz）: δ 1.15 〜 1.39 ( m,16
H ),1.47 (m,2H ), 1.60 ( m,2H ),2.17 ( t,2H ), 2.6
3 ( t,2H ),2.87 ( d,1H ), 3.14 ( m,1H ),3.94 ( m,1
H ) (B) N- (13-carboxytridecanoy)
Synthesis of N- (13-benzyloxycarbonyltridecanoyloxy) sulfosuccinimide sodium salt (50 mg, 0.1
1 mmol) was dissolved in 1 ml of dimethylformamide, and 5 mg of 10% palladium carbon was added to the obtained solution, followed by stirring under a hydrogen atmosphere for 20 hours. The reaction solution was filtered, 30 ml of ethyl acetate was added to the filtrate, and the mixture was stirred for 30 minutes. The precipitated solid is collected by filtration and dried under reduced pressure to show the following physical properties.
N- (13-Carboxytridecanoyloxy) sulfosuccinimide sodium salt (22 mg, 63%) was obtained. FAB-MS (m / z) : 480, 458, 435, 413 1 H-NMR (DMSO-d 6, 270 MHz): δ 1.15 ~ 1.39 (m, 16
H), 1.47 (m, 2H), 1.60 (m, 2H), 2.17 (t, 2H), 2.6
3 (t, 2H), 2.87 (d, 1H), 3.14 (m, 1H), 3.94 (m, 1
H)

【００７９】実施例１２N -（15 - カルボキシペンタデカノイルオキシ）- 3 -
イソプロピルコハク酸イミドの合成 実施例８において使用した N - ヒドロキシテトラメチ
ルフタルイミド（77 mg, 0.35 mmol）に代えて、N - ヒ
ドロキシ - 3 - イソプロピルコハク酸イミド（55 mg,
0.35 mmol）を用いた以外は、実施例８と同様の操作を
行い、下記の物性値を示す N -（15 - カルボキシペン
タデカノイルオキシ）- 3- イソプロピルコハク酸イミ
ド（42 mg, 28 %）を得た。 FD-MS（m/z）:［M+H］⁺ 426¹ H-NMR（CDCl₃, 270 MHz）: δ 0.80 ( d,3H ), 1.00
( d,3H ) 1.18 〜 1.45 ( m,20H ), 1.62 ( m,2H ),1.74 ( m,2H
), 2.34 ( m,3H ),2.55 ( dd,1H ), 2.60 ( t,2H ),2.
79 ( dd,1H ), 2.91 ( m,1H )Example 12 N- (15-carboxypentadecanoyloxy) -3-
Synthesis of isopropyl succinimide Instead of N-hydroxytetramethylphthalimide (77 mg, 0.35 mmol) used in Example 8, N-hydroxy-3-isopropylsuccinimide (55 mg,
Except for using 0.35 mmol), the same operation as in Example 8 was carried out, and N- (15-carboxypentadecanoyloxy) -3-isopropylsuccinimide (42 mg, 28%) having the following physical property values was obtained. I got FD-MS (m / z): [M + H] ⁺ 426 ¹ H-NMR (CDCl ₃ , 270 MHz): δ 0.80 (d, 3H), 1.00
(d, 3H) 1.18 to 1.45 (m, 20H), 1.62 (m, 2H), 1.74 (m, 2H
), 2.34 (m, 3H), 2.55 (dd, 1H), 2.60 (t, 2H), 2.
79 (dd, 1H), 2.91 (m, 1H)

【００８０】実施例１３N -（15 - カルボキシペンタデカノイルオキシ）テトラ
メチルコハク酸イミドの合成 実施例８において使用した N - ヒドロキシテトラメチ
ルフタルイミド（77 mg, 0.35 mmol）に代えて、N - ヒ
ドロキシテトラメチルコハク酸イミド（60 mg,0.35 mmo
l）を用いた以外は、実施例８と同様の操作を行い、下
記の物性値を示す N -（15 - カルボキシペンタデカノ
イルオキシ）テトラメチルコハク酸イミド（40 mg, 26
%）を得た。 FD-MS（m/z）:［M+H］⁺ 440¹ H-NMR（CDCl₃, 270 MHz）: δ 1.18 〜 1.46 ( m,32H
), 1.62 ( m,2H ),1.74 ( m,2H ), 2.34 ( t,2H ),2.6
0 ( t,2H )Example 13 N- (15-Carboxypentadecanoyloxy) tetra
Synthesis of Methylsuccinimide Instead of N-hydroxytetramethylphthalimide (77 mg, 0.35 mmol) used in Example 8, N-hydroxytetramethylsuccinimide (60 mg, 0.35 mmol) was used.
Except for using l), the same procedures as in Example 8 were carried out, and N- (15-carboxypentadecanoyloxy) tetramethylsuccinimide (40 mg, 26
%). FD-MS (m / z) : [M + H] + 440 1 H-NMR (CDCl 3, 270 MHz): δ 1.18 ~ 1.46 (m, 32H
), 1.62 (m, 2H), 1.74 (m, 2H), 2.34 (t, 2H), 2.6
0 (t, 2H)

【００８１】実施例１４N -（15 - カルボキシペンタデカノイルオキシ）- 3 -
ベンジルコハク酸イミドの合成 実施例８において使用した N - ヒドロキシテトラメチ
ルフタルイミド（77 mg, 0.35 mmol）に代えて、N - ヒ
ドロキシ - 3 - ベンジルコハク酸イミド（72 mg, 0.35
mmol）を用いた以外は、実施例８と同様の操作を行
い、下記の物性値を示す N -（13 - カルボキシペンタ
デカノイルオキシ）- 3 -ベンジルコハク酸イミド（45
mg, 27 %）を得た。 FD-MS（m/z）:［M+H］⁺ 474¹ H-NMR（CDCl₃, 270 MHz）: δ 1.18 〜 1.45 ( m,20H
), 1.62 ( m,2H ),1.74 ( m,2H ), 2.30 〜 2.92 ( m,
9H ),7.06 ( s,5H )Example 14 N- (15-carboxypentadecanoyloxy) -3-
Synthesis of benzylsuccinimide Instead of N-hydroxytetramethylphthalimide (77 mg, 0.35 mmol) used in Example 8, N-hydroxy-3-benzylbenzylsuccinimide (72 mg, 0.35 mmol) was used.
The same operation as in Example 8 was carried out except that the above-mentioned N- (13-carboxypentadecanoyloxy) -3-benzylsuccinimide (45 mmol) was used.
mg, 27%). FD-MS (m / z) : [M + H] + 474 1 H-NMR (CDCl 3, 270 MHz): δ 1.18 ~ 1.45 (m, 20H
), 1.62 (m, 2H), 1.74 (m, 2H), 2.30 to 2.92 (m,
9H), 7.06 (s, 5H)

【００８２】実施例１５N -（15 - カルボキシペンタデカノイルオキシ）イタコ
ン酸イミドの合成 実施例８において使用した N - ヒドロキシテトラメチ
ルフタルイミド（77 mg, 0.35 mmol）に代えて、N - ヒ
ドロキシイタコン酸イミド（44 mg, 0.35 mmol）を用い
た以外は、実施例８と同様の操作を行い、下記の物性値
を示す N -（15- カルボキシペンタデカノイルオキシ）
イタコン酸イミド（49 mg, 31%）を得た。 FD-MS（m/z）:［M+H］⁺ 396¹ H-NMR（CDCl₃, 270 MHz）: δ 1.19 〜 1.44 ( m,20H
), 1.62 ( m,2H ),1.74 ( m,2H ), 2.34 ( t,2H ),2.6
0 ( t,2H ), 3.70 ( t,2H ),6.00 〜 6.59 ( m,2H )Example 15 N- (15-Carboxypentadecanoyloxy) itaco
Example 8 Synthesis of acid imide Example 8 was repeated except that N-hydroxyitaconic imide (44 mg, 0.35 mmol) was used instead of N-hydroxytetramethylphthalimide (77 mg, 0.35 mmol) used in Example 8. The same operation as described above is performed, and N- (15-carboxypentadecanoyloxy) having the following physical property values is obtained.
Itaconic imide (49 mg, 31%) was obtained. FD-MS (m / z) : [M + H] + 396 1 H-NMR (CDCl 3, 270 MHz): δ 1.19 ~ 1.44 (m, 20H
), 1.62 (m, 2H), 1.74 (m, 2H), 2.34 (t, 2H), 2.6
0 (t, 2H), 3.70 (t, 2H), 6.00-6.59 (m, 2H)

【００８３】実施例１６N -（15 - カルボキシペンタデカノイルオキシ）グルタ
ル酸イミドの合成 実施例８において使用した N - ヒドロキシテトラメチ
ルフタルイミド（77 mg, 0.35 mmol）に代えて、N - ヒ
ドロキシグルタル酸イミド（45 mg, 0.35 mmol）を用い
た以外は、実施例８と同様の操作を行い、下記の物性値
を示す N -（15- カルボキシペンタデカノイルオキシ）
グルタル酸イミド（40 mg, 29%）を得た。 FD-MS（m/z）:［M+H］⁺ 398¹ H-NMR（CDCl₃, 270 MHz）: δ 1.18 〜 1.47 ( m,20H
), 1.63 ( m,2H ),1.74 ( m,2H ), 2.02 ( m,2H ) 2.35 ( t,2H ), 2.50 〜 2.70 ( m,4H),7.85 〜 10.50
( br,1H )Example 16 N- (15-Carboxypentadecanoyloxy) gluta
Example 8 Synthesis of Luminimide Example 8 was repeated except that N-hydroxyglutarimide (45 mg, 0.35 mmol) was used in place of N-hydroxytetramethylphthalimide (77 mg, 0.35 mmol) used in Example 8. The same operation as described above is performed, and N- (15-carboxypentadecanoyloxy) having the following physical property values is obtained.
Glutarimide (40 mg, 29%) was obtained. FD-MS (m / z): [M + H] ⁺ 398 ¹ H-NMR (CDCl ₃ , 270 MHz): δ 1.18 to 1.47 (m, 20H
), 1.63 (m, 2H), 1.74 (m, 2H), 2.02 (m, 2H) 2.35 (t, 2H), 2.50 to 2.70 (m, 4H), 7.85 to 10.50
(br, 1H)

【００８４】参考例１N -（13 - カルボキシトリデカノイルオキシ）コハク酸
イミドとＳＯＤとの反応によるＳＯＤ誘導体の合成 ヒト赤血球型ＳＯＤ水溶液（71.2 mg/ml）1.4 ml に 0.
5M 重炭酸ナトリウム水溶液（pH 8.0）2.6ml を加え、
次いで実施例６で得られた N -（13 - カルボキシトリ
デカノイルオキシ）コハク酸イミド 10.1 mg をジメチ
ルスルホキシド0.2 ml に溶解して得られた溶液を攪拌
下に徐々に添加した。室温で一晩攪拌し、濾過したの
ち、反応液をセファデックス G-25（Sephadex G-25：商
品名、ファルマシア社製）を担体として用いるゲル濾過
［溶出液：10 mM 重炭酸アンモニウム水溶液］に付し、
高分子画分を集めた。この画分をそのまま DEAE - セフ
ァロ−ス（DEAE-Sepharose Fast Flow：商品名、ファル
マシア社製）を担体として用いるイオン交換クロマトグ
ラフィ−に付し、10mMトリス−塩酸緩衝液（pH 8）と
0.15M 塩化ナトリウム水溶液の混合液、10mM トリス−
塩酸緩衝液（pH 8）と0.20M 塩化ナトリウム水溶液の混
合液、10mM トリス−塩酸緩衝液（pH 8）と 0.25M 塩化
ナトリウム水溶液の混合液で順次溶出し、それぞれの画
分（以下、これらの画分を、それぞれ画分Ａ、画分Ｂ、
画分Ｃと略称する）を分取した。これらの画分を、それ
ぞれセファデックス G-25（Sephadex G-25：商品名、フ
ァルマシア社製）を担体として用いるゲル濾過［溶出
液：10 mM 重炭酸アンモニウム水溶液］に付し、脱塩し
たのち、高分子画分を凍結乾燥して、それぞれ画分Ａか
らＳＯＤ誘導体（以下、これをＳＯＤ誘導体Ａと略称す
る）を 33 mg、画分ＢからＳＯＤ誘導体（以下、これを
ＳＯＤ誘導体Ｂと略称する）を 18 mg、画分ＣからＳＯ
Ｄ誘導体（以下、これをＳＯＤ誘導体Ｃと略称する）を
15 mg 得た。ＳＯＤ誘導体Ａ、ＢおよびＣのそれぞれ
のアミノ基をトリニトロベンゼンスルホン酸（以下、こ
れを TNBS と略称する）法で定量したところ、ＳＯＤ誘
導体Ａ、ＢおよびＣは原料ＳＯＤのアミノ基のうち、そ
れぞれ 3.6 個、4.4 個、5.4 個が修飾されていること
が確認された。Reference Example 1 N- (13-carboxytridecanoyloxy) succinic acid
Synthesis of SOD derivative by reaction of imide and SOD . To 1.4 ml of human erythrocyte-type SOD aqueous solution (71.2 mg / ml) was added.
2.6 ml of 5M aqueous sodium bicarbonate solution (pH 8.0) was added.
Next, a solution obtained by dissolving 10.1 mg of N- (13-carboxytridecanoyloxy) succinimide obtained in Example 6 in 0.2 ml of dimethyl sulfoxide was gradually added with stirring. After stirring overnight at room temperature and filtering, the reaction solution was subjected to gel filtration using Sephadex G-25 (trade name, manufactured by Pharmacia) as a carrier [eluent: 10 mM aqueous ammonium bicarbonate]. Attached
The high molecular fraction was collected. This fraction was directly subjected to ion-exchange chromatography using DEAE-Sepharose Fast Flow (trade name, manufactured by Pharmacia) as a carrier, and treated with 10 mM Tris-HCl buffer (pH 8).
0.15M aqueous solution of sodium chloride, 10mM Tris
The mixture was eluted sequentially with a mixture of hydrochloric acid buffer (pH 8) and a 0.20 M aqueous sodium chloride solution, and a mixture of 10 mM Tris-HCl buffer (pH 8) and a 0.25 M aqueous sodium chloride solution. Fractions are referred to as Fraction A, Fraction B,
Fraction C). Each of these fractions was subjected to gel filtration using Sephadex G-25 (trade name, manufactured by Pharmacia) as a carrier [eluent: 10 mM aqueous solution of ammonium bicarbonate], and desalted. The polymer fraction was freeze-dried to obtain 33 mg of SOD derivative (hereinafter abbreviated as SOD derivative A) from fraction A, and SOD derivative (hereinafter abbreviated as SOD derivative B) from fraction B, respectively. To 18 mg, from fraction C to SO
D derivative (hereinafter abbreviated as SOD derivative C)
15 mg was obtained. When the respective amino groups of the SOD derivatives A, B, and C were quantified by the trinitrobenzenesulfonic acid (hereinafter, abbreviated as TNBS) method, the SOD derivatives A, B, and C each contained, among the amino groups of the raw material SOD, It was confirmed that 3.6, 4.4 and 5.4 were modified.

【００８５】使用したＳＯＤと得られたＳＯＤ誘導体Ｃ
のそれぞれの電気泳動図を模式的に図１の（ａ）および
（ｂ）に示す。また、ＳＯＤ誘導体Ｃの赤外線吸収スペ
クトルを図２に示す。SOD used and obtained SOD derivative C
1 are schematically shown in FIGS. 1A and 1B. FIG. 2 shows an infrared absorption spectrum of the SOD derivative C.

【００８６】参考例２N - （ 17 - カルボキシヘプタデカノイルオキシ）コハ
ク酸イミドとＳＯＤとの反応によるＳＯＤ誘導体の合成 ヒト赤血球型ＳＯＤ水溶液（88.9mg/ml）1.12ml に水
1.88 ml およ び 0.5M重炭酸ナトリウム水溶液（pH 8.
0）0.8 ml を加え、次いで実施例３で得られたN -（17
- カルボキシヘプタデカノイルオキシ）コハク酸イミド
3.9 mg をジメチルスルホキシド 0.2ml に溶解して得ら
れた溶液を攪拌下に徐々に添加した。室温で一晩攪拌
し、濾過したのち、反応液をセファデックス G-25 （Se
phadexG-25：商品名、ファルマシア社製）を担体として
用いるゲル濾過［溶出液：10mM 重炭酸アンモニウム水
溶液］に付し、高分子画分を集めた。この画分をそのま
ま DEAE - セファロ−ス（DEAE-Sepharose Fast Flow：
商品名、ファルマシア社製）を担体として用いるイオン
交換クロマトグラフィ−［溶出液：10mM トリス−塩酸
緩衝液（pH 8）と0.20M 塩化ナトリウム水溶液の混合
液］に付し、ＳＯＤ誘導体を含む画分を分取した。この
画分をセファデックス G-25 （SephadexG-25：商品名、
ファルマシア社製）を担体として用いるゲル濾過［溶出
液：10mM 重炭酸アンモニウム水溶液］に付し、脱塩し
たのち、高分子画分を凍結乾燥してＳＯＤ誘導体 18 mg
を得た。得られたＳＯＤ誘導体のアミノ基を TNBS 法
で定量したところ、原料ＳＯＤのアミノ基のうち、2.0
個が修飾されていることが確認された。Reference Example 2 N- (17-carboxyheptadecanoyloxy) coha
Synthesis of SOD Derivative by Reaction of Succinimide and SOD 1.12 ml of human erythrocyte-type SOD aqueous solution (88.9 mg / ml) was added to water
1.88 ml and 0.5 M sodium bicarbonate solution (pH 8.
0) 0.8 ml was added, and then N- (17) obtained in Example 3 was added.
-Carboxyheptadecanoyloxy) succinimide
A solution obtained by dissolving 3.9 mg in 0.2 ml of dimethyl sulfoxide was gradually added with stirring. After stirring at room temperature overnight and filtering, the reaction mixture was separated with Sephadex G-25 (Se
The mixture was subjected to gel filtration (eluent: 10 mM aqueous solution of ammonium bicarbonate) using phadexG-25 (trade name, manufactured by Pharmacia) as a carrier, and the high molecular fraction was collected. This fraction is directly used as DEAE-Sepharose Fast Flow:
Exchange chromatography using a carrier (trade name, manufactured by Pharmacia) [eluent: mixture of 10 mM Tris-HCl buffer (pH 8) and 0.20 M sodium chloride aqueous solution], and fractions containing the SOD derivative were obtained. I took it out. This fraction is separated by Sephadex G-25 (trade name,
(Pharmacia Co., Ltd.) as a carrier and subjected to gel filtration [eluent: 10 mM aqueous ammonium bicarbonate solution], desalted, and then lyophilized from the polymer fraction to obtain 18 mg of the SOD derivative.
I got The amino group of the obtained SOD derivative was quantified by the TNBS method.
It was confirmed that the individual was modified.

【００８７】使用したＳＯＤと得られたＳＯＤ誘導体の
それぞれの電気泳動図を模式的に図３の（ａ）および
（ｂ）に示す。また、得られたＳＯＤ誘導体の赤外線吸
収スペクトルを図４に示す。The respective electropherograms of the used SOD and the obtained SOD derivative are schematically shown in FIGS. 3 (a) and 3 (b). FIG. 4 shows an infrared absorption spectrum of the obtained SOD derivative.

【００８８】参考例３N -（19 - カルボキシノナデカノイルオキシ）コハク酸
イミドとＳＯＤとの反応によるＳＯＤ誘導体の合成 参考例２において N -（17 - カルボキシヘプタデカノ
イルオキシ）コハク酸イミド 3.9 mg に代えて、実施例
４で得られた N -（19 - カルボキシノナデカノイルオ
キシ）コハク酸イミド4.1 mg を使用した以外は同様の
操作を行い、ＳＯＤ誘導体 14mg を得た。得られたＳＯ
Ｄ誘導体のアミノ基を TNBS 法で定量したところ、原料
ＳＯＤのアミノ基のうち、2.0 個が修飾されていること
が確認された。Reference Example 3 N- (19-carboxynonadecanoyloxy) succinic acid
Synthesis of SOD Derivative by Reaction of Imide and SOD In Reference Example 2, N- (19-carboxynonadeca) obtained in Example 4 was used in place of 3.9 mg of N- (17-carboxyheptadecanoyloxy) succinimide. The same operation was performed except that 4.1 mg of (noyloxy) succinimide was used to obtain 14 mg of the SOD derivative. Obtained SO
When the amino group of the D derivative was quantified by the TNBS method, it was confirmed that 2.0 of the amino groups of the raw material SOD were modified.

【００８９】使用したＳＯＤと得られたＳＯＤ誘導体の
それぞれの電気泳動図を模式的に図５の（ａ）および
（ｂ）に示す。また、得られたＳＯＤ誘導体の赤外線吸
収スペクトルを図６に示す。The respective electropherograms of the used SOD and the obtained SOD derivative are schematically shown in FIGS. 5 (a) and 5 (b). FIG. 6 shows an infrared absorption spectrum of the obtained SOD derivative.

【００９０】参考例４N -（15 - カルボキシペンタデカノイルオキシ）コハク
酸イミドとＮＣＳとの反応によるＮＣＳ誘導体の合成 ＮＣＳ 50 mg を氷冷下に 0.5M 重炭酸ナトリウム水溶
液 18 ml に溶解して得られた溶液に、実施例２で得ら
れた N -（15 - カルボキシペンタデカノイルオキシ）
コハク酸イミド 79.8 mg をジメチルスルホキシド 2 ml
に溶解して得られた溶液を攪拌下に徐々に滴下した。
遮光下、4 ℃で 2 週間攪拌し、濾過したのち、反応液
をセファデックス G-25 （SephadexG-25：商品名、ファ
ルマシア社製）を担体として用いるゲル濾過［溶出液：
10 mM 重炭酸アンモニウム水溶液］に付し、高分子画分
を集めた。この画分をそのまま DEAE - セファロ−ス
（DEAE-Sepharose Fast Flow：商品名、ファルマシア社
製）を担体として用いるイオン交換クロマトグラフィ−
［溶出液：10mM トリス−塩酸緩衝液（pH 8）と 0.20M
塩化ナトリウム水溶液の混合液］に付し、ＮＣＳ誘導体
を含む画分を分取した。この画分をセファデックス G-2
5 （Sephadex G-25：商品名、ファルマシア社製）を担
体として用いるゲル濾過［溶出液：10 mM 重炭酸アンモ
ニウム水溶液］に付し、脱塩したのち、高分子画分を凍
結乾燥してＮＣＳ誘導体 7 mgを得た。得られたＮＣＳ
誘導体のアミノ基を TNBS 法で定量したところ、遊離の
アミノ基は検出されなかった。Reference Example 4 N- (15-carboxypentadecanoyloxy) succinic
Synthesis of NCS derivative by reaction of acid imide with NCS A solution obtained by dissolving 50 mg of NCS in 18 ml of a 0.5 M aqueous sodium bicarbonate solution under ice-cooling was added to the N- (15-) obtained in Example 2. Carboxypentadecanoyloxy)
79.8 mg of succinimide in 2 ml of dimethyl sulfoxide
Was slowly added dropwise with stirring.
The mixture was stirred at 4 ° C. for 2 weeks under light shielding, filtered, and then subjected to gel filtration using Sephadex G-25 (trade name, manufactured by Pharmacia) as a carrier [eluent:
10 mM aqueous ammonium bicarbonate] to collect the high molecular fraction. This fraction is used as it is for ion exchange chromatography using DEAE-Sepharose Fast Flow (trade name, manufactured by Pharmacia) as a carrier.
[Eluent: 10 mM Tris-HCl buffer (pH 8) and 0.20 M
A mixed solution of an aqueous solution of sodium chloride] and fractions containing the NCS derivative were collected. This fraction is separated by Sephadex G-2
5 Gel filtration using a carrier (Sephadex G-25: trade name, manufactured by Pharmacia) [eluent: 10 mM aqueous solution of ammonium bicarbonate], desalting, lyophilization of the polymer fraction and NCS 7 mg of the derivative were obtained. NCS obtained
When the amino group of the derivative was quantified by the TNBS method, no free amino group was detected.

【００９１】使用したＮＣＳと得られたＮＣＳ誘導体の
それぞれの電気泳動図を模式的に図７の（ａ）および
（ｂ）に示す。また、得られたＮＣＳ誘導体の赤外線吸
収スペクトルを図８に示す。The electropherograms of the NCS used and the obtained NCS derivative are schematically shown in FIGS. 7 (a) and 7 (b). FIG. 8 shows an infrared absorption spectrum of the obtained NCS derivative.

【００９２】参考例５N -（17 - カルボキシヘプタデカノイルオキシ）コハク
酸イミドとＮＣＳとの反応によるＮＣＳ誘導体の合成 参考例４において N -（15 - カルボキシペンタデカノ
イルオキシ）コハク酸イミド 79.8 mg に代えて、実施
例３で得られたN -（17 - カルボキシヘプタデカノイル
オキシ）コハク酸イミド 85.6 mg を使用した以外は同
様の操作を行い、ＮＣＳ誘導体 5 mg を得た。得られた
ＮＣＳ誘導体のアミノ基を TNBS 法で定量したところ、
遊離のアミノ基は検出されなかった。Reference Example 5 N- (17-carboxyheptadecanoyloxy) succinic
Synthesis of NCS Derivative by Reaction of Acidimide and NCS N- (15-carboxypentadecanoyloxy) succinimide was replaced with 79.8 mg of N- (17-carboxyhepta) obtained in Example 3 in Reference Example 4. The same operation was performed except that 85.6 mg of decanoyloxy) succinimide was used to obtain 5 mg of an NCS derivative. When the amino group of the obtained NCS derivative was quantified by the TNBS method,
Free amino groups were not detected.

【００９３】使用したＮＣＳと得られたＮＣＳ誘導体の
それぞれの電気泳動図を模式的に図９の（ａ）および
（ｂ）に示す。また、得られたＮＣＳ誘導体の赤外線吸
収スペクトルを図１０に示す。The electropherograms of the used NCS and the obtained NCS derivative are schematically shown in FIGS. 9 (a) and 9 (b). FIG. 10 shows an infrared absorption spectrum of the obtained NCS derivative.

【００９４】試験例１ＳＯＤ誘導体の血中濃度 ペントバルビタ−ル麻酔下にラット（Wistar 系雄性、7
週齢、体重約 200g）の大腿静脈よりカニュレ−ション
を行い、ヘパリン溶液（1000 U/ml）を 0.2ml注射し
た。ＳＯＤまたはＳＯＤ誘導体を生理食塩水に溶解して
得られる溶液（10mg/ml）をそれぞれラット１匹当たり
0.2ml 大腿静脈より注射した。経時的に0.2ml づつ採血
し、血漿中のＳＯＤ活性を測定することにより血中濃度
を測定した。ＳＯＤの血中濃度およびＳＯＤ誘導体の血
中濃度の経時変化を図１１に示す。Test Example 1 Blood concentration of SOD derivative Rats (Wistar male, 7 under pentobarbital anesthesia)
Cannulation was performed from a femoral vein (week old, body weight: about 200 g), and 0.2 ml of a heparin solution (1000 U / ml) was injected. A solution (10 mg / ml) obtained by dissolving SOD or SOD derivative in physiological saline was used for each rat.
0.2 ml was injected through the femoral vein. Blood was collected at intervals of 0.2 ml each time, and the blood concentration was measured by measuring the SOD activity in plasma. FIG. 11 shows changes over time in the blood concentration of SOD and the blood concentration of the SOD derivative.

【００９５】試験例２ラット急性胃粘膜病変（胃潰瘍）に対するＳＯＤ誘導体
の効果 SD 系雄性ラット（体重 200g）を一晩絶食させたのち、
1 群 3 匹としてストレスケ−ジに入れて拘束し、ラッ
トの胸から下を22℃の水に浸漬し、ラットにストレスを
負荷した。6 時間後にラットを水から引き揚げたのち、
脱血死させ、胃を摘出した。胃内腔に 1 % ホルマリン
を注入して組織を固定した。固定後、粘膜面の線状潰瘍
の長さを測定しその総和を潰瘍係数とした。Test Example 2 SOD derivative for acute gastric mucosal lesion (gastric ulcer) in rat
After the effect SD male rats (body weight 200g) were fasted overnight,
As a group, three rats were placed in a stress cage and restrained, and the rats were immersed in water at 22 ° C. under their breasts to apply stress to the rats. After withdrawing the rat from the water after 6 hours,
He was exsanguinated and the stomach was removed. The tissue was fixed by injecting 1% formalin into the gastric lumen. After fixation, the length of the linear ulcer on the mucosal surface was measured, and the total was defined as the ulcer index.

【００９６】なお、コントロ−ル群には 0.5ml の生理
食塩水を、また試験群には 2mg／ラットの参考例１で得
られたＳＯＤ誘導体Ｃを 0.2ml の生理食塩水溶液とし
て水浸拘束 5 分前に静脈内投与した。結果を下表に示
す。The control group was treated with 0.5 ml of physiological saline, and the test group was treated with 2 mg / rat of SOD derivative C obtained in Reference Example 1 as 0.2 ml of physiological saline solution. Minutes before intravenous administration. The results are shown in the table below.

【００９７】[0097]

【表１】 [Table 1]

【００９８】表１から明らかなとおり、試験群では該Ｓ
ＯＤ誘導体の顕著な抗潰瘍作用が認められた。As is clear from Table 1, in the test group, the S
A remarkable anti-ulcer effect of the OD derivative was observed.

【００９９】[0099]

【発明の効果】本発明によれば、蛋白質が有する生理活
性を概ね保持したままで、蛋白質に比べて大幅に血中寿
命が延長され、抗原性がなく、かつ生体への投与が可能
となった蛋白質誘導体を与える新規な長鎖カルボン酸イ
ミドエステル誘導体が提供される。該蛋白質誘導体は血
清タンパク質との可逆的な相互作用を有しており、病巣
局所に容易に移行することが可能である。Industrial Applicability According to the present invention, the life span in blood is significantly extended, the antigenicity is reduced, and administration to living organisms becomes possible, while maintaining the physiological activity of the protein substantially. Novel long-chain carboxylic imide ester derivatives that provide improved protein derivatives are provided. The protein derivative has a reversible interaction with a serum protein, and can be easily transferred to a local lesion.

【図面の簡単な説明】[Brief description of the drawings]

【図１】電気泳動の結果を示す模式図であり、（ａ）は
参考例１で使用したＳＯＤの電気泳動図の模式図を示
し、（ｂ）は参考例１で得られたＳＯＤ誘導体Ｃの電気
泳動図の模式図を示す。FIGS. 1A and 1B are schematic diagrams showing the results of electrophoresis. FIG. 1A is a schematic diagram of an electrophoretogram of the SOD used in Reference Example 1, and FIG. 1B is a schematic diagram showing the SOD derivative C obtained in Reference Example 1. The schematic diagram of the electrophoretogram of FIG.

【図２】参考例１で得られたＳＯＤ誘導体Ｃの赤外線吸
収スペクトルを示す図である。FIG. 2 is a view showing an infrared absorption spectrum of the SOD derivative C obtained in Reference Example 1.

【図３】電気泳動の結果を示す模式図であり、（ａ）は
参考例２で使用したＳＯＤの電気泳動図の模式図を示
し、（ｂ）は参考例２で得られたＳＯＤ誘導体の電気泳
動図の模式図を示す。FIGS. 3A and 3B are schematic diagrams showing the results of electrophoresis. FIG. 3A is a schematic diagram of an electrophoretogram of SOD used in Reference Example 2, and FIG. 3B is a schematic diagram of the SOD derivative obtained in Reference Example 2. The schematic diagram of an electrophoretogram is shown.

【図４】参考例２で得られたＳＯＤ誘導体の赤外線吸収
スペクトルを示す図である。FIG. 4 is a view showing an infrared absorption spectrum of the SOD derivative obtained in Reference Example 2.

【図５】電気泳動の結果を示す模式図であり、（ａ）は
参考例３で使用したＳＯＤの電気泳動図の模式図を示
し、（ｂ）は参考例３で得られたＳＯＤ誘導体の電気泳
動図の模式図を示す。5A and 5B are schematic diagrams showing the results of electrophoresis, in which FIG. 5A is a schematic diagram of the SOD electrophoretogram used in Reference Example 3, and FIG. 5B is a schematic diagram of the SOD derivative obtained in Reference Example 3. The schematic diagram of an electrophoretogram is shown.

【図６】参考例３で得られたＳＯＤ誘導体の赤外線吸収
スペクトルを示す図である。FIG. 6 is a view showing an infrared absorption spectrum of the SOD derivative obtained in Reference Example 3.

【図７】電気泳動の結果を示す模式図であり、（ａ）は
参考例４で使用したＮＣＳの電気泳動図の模式図を示
し、（ｂ）は参考例４で得られたＮＣＳ誘導体の電気泳
動図の模式図を示す。7A and 7B are schematic diagrams showing the results of electrophoresis, in which FIG. 7A is a schematic diagram of an electrophoretogram of NCS used in Reference Example 4, and FIG. 7B is a schematic diagram of the NCS derivative obtained in Reference Example 4. The schematic diagram of an electrophoretogram is shown.

【図８】参考例４で得られたＮＣＳ誘導体の赤外線吸収
スペクトルを示す図である。FIG. 8 is a view showing an infrared absorption spectrum of the NCS derivative obtained in Reference Example 4.

【図９】電気泳動の結果を示す模式図であり、（ａ）は
参考例５で使用したＮＣＳの電気泳動図の模式図を示
し、（ｂ）は参考例５で得られたＮＣＳ誘導体の電気泳
動図の模式図を示す。FIGS. 9A and 9B are schematic diagrams showing the results of electrophoresis. FIG. 9A is a schematic diagram of the electrophoretogram of NCS used in Reference Example 5, and FIG. 9B is a schematic diagram of the NCS derivative obtained in Reference Example 5. The schematic diagram of an electrophoretogram is shown.

【図１０】参考例５で得られたＮＣＳ誘導体の赤外線吸
収スペクトルを示す図である。FIG. 10 is a view showing an infrared absorption spectrum of the NCS derivative obtained in Reference Example 5.

【図１１】試験例１で測定した血中濃度の経時変化を示
す図であり、（１）、（２）、（３）および（４）はそ
れぞれＳＯＤ、参考例１で得られたＳＯＤ誘導体Ａ、Ｓ
ＯＤ誘導体Ｂ、およびＳＯＤ誘導体Ｃの血中濃度の経時
変化を示す。FIG. 11 is a graph showing changes over time in blood concentration measured in Test Example 1, wherein (1), (2), (3) and (4) are SOD, and the SOD derivative obtained in Reference Example 1, respectively. A, S
5 shows changes over time in blood concentrations of OD derivative B and SOD derivative C.

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (56)参考文献 特開 平２−48600（ＪＰ，Ａ) 特表 平２−500162（ＪＰ，Ａ) Ｐｒｅｐ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，Ｖｏ ｌ．10，Ｎｏ．２，ｐ．167−171 （1980) Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒ ｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．，Ｖｏｌ．145, Ｎｏ．２，ｐ．908−914（1987) (58)調査した分野(Int.Cl.⁷，ＤＢ名) C07D 207/00 - 207/50 C07D 211/00 - 211/98 ＣＡ（ＳＴＮ) ＣＡＯＬＤ（ＳＴＮ) ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ)──────────────────────────────────────────────────続 き Continuation of the front page (56) References JP-A-2-48600 (JP, A) JP-A-2-500162 (JP, A) Prep. Biochem. , Vol. 10, No. 2, p. 167-171 (1980) Biochem. Biophys. Res. Commun. , Vol. 145, no. 2, p. 908-914 (1987) (58) Fields investigated (Int. Cl. ⁷ , DB name) C07D 207/00-207/50 C07D 211/00-211/98 CA (STN) CAOLD (STN) REGISTRY (STN)

Claims (1)

(57)【特許請求の範囲】(57) [Claims] 【請求項１】 下記の一般式（Ｉ） 【化１】 （式中、Ｗは１個以上の酸素原子、硫黄原子、または式
−Ｎ（Ｒ^１）−（式中、Ｒ^１は低級アルキル基を表す）
で示される基で中断されていてもよい主鎖原子数が８〜
２８の２価の炭化水素基を示し、Ｘは置換基を有してい
てもよい２価の炭化水素基を示す）で示される長鎖カル
ボン酸イミドエステルまたはその塩。1. A compound represented by the following general formula (I): (Wherein W is one or more oxygen atoms, sulfur atoms, or a formula -N (R ¹ )-, wherein R ¹ represents a lower alkyl group)
The number of main chain atoms which may be interrupted by the group represented by 8 to
28 represents a divalent hydrocarbon group, and X represents a divalent hydrocarbon group which may have a substituent), or a salt thereof.