JP2974434B2 - 分泌性コンポネント含有組成物 - Google Patents
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Description
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、分泌性コンポネント含
有組成物に関する。さらに詳しくは、乳またはホエーを
イオン交換クロマトグラフ処理して得ることができ、細
菌に対する感染防御作用を有する分泌性コンポネント含
有組成物に関する。
有組成物に関する。さらに詳しくは、乳またはホエーを
イオン交換クロマトグラフ処理して得ることができ、細
菌に対する感染防御作用を有する分泌性コンポネント含
有組成物に関する。
【０００２】本発明の分泌性コンポネント含有組成物
は、細菌に対する感染防御効果を有するので、医薬品、
化粧品、飲食品、飼料などの分野で利用可能である。
は、細菌に対する感染防御効果を有するので、医薬品、
化粧品、飲食品、飼料などの分野で利用可能である。
【０００３】
【従来の技術】分泌性コンポネント〔Ｓｅｃｒｅｔｏｒ
ｙ ｃｏｍｐｏｎｅｎｔ（ＳＣ）〕は乳腺中で合成さ
れ、乳汁中に分泌される糖蛋白質であり、免疫グロブリ
ンの一種である免疫グロブリンＡ（ＩｇＡ）と結合す
る。ＳＣの結合したＩｇＡを分泌型ＩｇＡ〔Ｓｅｃｒｅ
ｔｏｒｙ ｉｍｍｕｎｏｇｌｏｂｕｌｉｎ（ＳＩｇ
Ａ）〕と呼び、乳汁、特に母乳中には比較的大量に含ま
れている。ＳＩｇＡは乳児にとって最も重要な感染防御
因子であり、消化器官内でプロテアーゼなどによって簡
単には分解されず、外来抗原に対する凝集作用など局所
感染防禦に関与している。このようなＳＩｇＡのプロテ
アーゼ耐性は、ＳＣによって付与されていることが知ら
れている。このように、ＳＣは生体系の感染防御機構に
おいて重要な役割を果たしている。このような背景にお
いて、乳よりＳＣを単離し、その物理化学的あるいは生
化学的特性を明らかにする試みは古くから行われてい
る。乳よりＳＣを単離する方法がいくつか知られてい
る。まず、ＳＩｇＡをＤＥＡＥ型イオン交換樹脂クロマ
トグラフ処理及びＣＭ型イオン交換樹脂クロマトグラフ
処理によって得、これを還元してＳＣを得る方法〔例え
ば、Ｋ．コバヤシ、イミュノ・ケミストリー、８、７８
５−８００（１９７１）〕及び乳中に元来存在している
遊離型のＳＣを得る方法がある。後者の方法に関して
は、ホエーを硫安分画し、さらにＤＥＡＥ型イオン交
換樹脂クロマトグラフ処理を行い、未吸着画分をゲル濾
過クロマトグラフ処理、ＣＭ型イオン交換樹脂クロマト
グラフ処理あるいはリン酸化イオン交換樹脂クロマトグ
ラフ処理する方法〔Ｊ．Ｅ．パトラー、ジャーナル・オ
ブ・デアリーサイエンス、５５、１５１−１６３（１９
７２）、Ｋ．コバヤシ、イミュノ・ケミストリー、８、
７８５−８００（１９７１）、Ｒ．Ｓ．ラビブら、ジャ
ーナル・オブ・バイオケミストリー、２５１、１９６９
−１９７４（１９７６）〕、ホエーのＤＥＡＥ型イオ
ン交換樹脂クロマトグラフ処理を行い、ｐＨ７．６の
０．０１Ｍリン酸緩衝液で溶出する画分をＣＭ型イオン
交換樹脂クロマトグラフ処理する方法〔榎本ら、消化器
と免疫、１６、１４６−１５０（１９８６）〕、ホエ
ーをＩｇＭ固定化アフィニティクロマトグラフ処理する
方法〔Ｂ．Ｊ．アンダーダウンら、イミュノ・ケミスト
リー、１４、１１１−１１８（１９７７）〕、あるいは
これらの方法を若干改良した方法などが知られている。
ｙ ｃｏｍｐｏｎｅｎｔ（ＳＣ）〕は乳腺中で合成さ
れ、乳汁中に分泌される糖蛋白質であり、免疫グロブリ
ンの一種である免疫グロブリンＡ（ＩｇＡ）と結合す
る。ＳＣの結合したＩｇＡを分泌型ＩｇＡ〔Ｓｅｃｒｅ
ｔｏｒｙ ｉｍｍｕｎｏｇｌｏｂｕｌｉｎ（ＳＩｇ
Ａ）〕と呼び、乳汁、特に母乳中には比較的大量に含ま
れている。ＳＩｇＡは乳児にとって最も重要な感染防御
因子であり、消化器官内でプロテアーゼなどによって簡
単には分解されず、外来抗原に対する凝集作用など局所
感染防禦に関与している。このようなＳＩｇＡのプロテ
アーゼ耐性は、ＳＣによって付与されていることが知ら
れている。このように、ＳＣは生体系の感染防御機構に
おいて重要な役割を果たしている。このような背景にお
いて、乳よりＳＣを単離し、その物理化学的あるいは生
化学的特性を明らかにする試みは古くから行われてい
る。乳よりＳＣを単離する方法がいくつか知られてい
る。まず、ＳＩｇＡをＤＥＡＥ型イオン交換樹脂クロマ
トグラフ処理及びＣＭ型イオン交換樹脂クロマトグラフ
処理によって得、これを還元してＳＣを得る方法〔例え
ば、Ｋ．コバヤシ、イミュノ・ケミストリー、８、７８
５−８００（１９７１）〕及び乳中に元来存在している
遊離型のＳＣを得る方法がある。後者の方法に関して
は、ホエーを硫安分画し、さらにＤＥＡＥ型イオン交
換樹脂クロマトグラフ処理を行い、未吸着画分をゲル濾
過クロマトグラフ処理、ＣＭ型イオン交換樹脂クロマト
グラフ処理あるいはリン酸化イオン交換樹脂クロマトグ
ラフ処理する方法〔Ｊ．Ｅ．パトラー、ジャーナル・オ
ブ・デアリーサイエンス、５５、１５１−１６３（１９
７２）、Ｋ．コバヤシ、イミュノ・ケミストリー、８、
７８５−８００（１９７１）、Ｒ．Ｓ．ラビブら、ジャ
ーナル・オブ・バイオケミストリー、２５１、１９６９
−１９７４（１９７６）〕、ホエーのＤＥＡＥ型イオ
ン交換樹脂クロマトグラフ処理を行い、ｐＨ７．６の
０．０１Ｍリン酸緩衝液で溶出する画分をＣＭ型イオン
交換樹脂クロマトグラフ処理する方法〔榎本ら、消化器
と免疫、１６、１４６−１５０（１９８６）〕、ホエ
ーをＩｇＭ固定化アフィニティクロマトグラフ処理する
方法〔Ｂ．Ｊ．アンダーダウンら、イミュノ・ケミスト
リー、１４、１１１−１１８（１９７７）〕、あるいは
これらの方法を若干改良した方法などが知られている。
【０００４】しかし、これらの方法では実験室的に分
離、精製してＳＣを得ているが、工業的に利用可能なＳ
Ｃ含有組成物の製造については提案されていないのが現
状である。さらに、従来の方法では、硫安分画でＳＣを
回収した後の原料については再利用が困難であること、
ＤＥＡＥ型イオン交換クロマトグラフ処理の場合、イオ
ン交換樹脂が大量に必要となって工業的に適さないこ
と、ゲル濾過クロマトグラフ処理も工業的な大量処理に
適さないこと、ＩｇＭ固定化アフィニティクロマトグラ
フ処理は高価であり、洗浄、殺菌にも制限があって工業
的に全く適さないことなど問題があった。
離、精製してＳＣを得ているが、工業的に利用可能なＳ
Ｃ含有組成物の製造については提案されていないのが現
状である。さらに、従来の方法では、硫安分画でＳＣを
回収した後の原料については再利用が困難であること、
ＤＥＡＥ型イオン交換クロマトグラフ処理の場合、イオ
ン交換樹脂が大量に必要となって工業的に適さないこ
と、ゲル濾過クロマトグラフ処理も工業的な大量処理に
適さないこと、ＩｇＭ固定化アフィニティクロマトグラ
フ処理は高価であり、洗浄、殺菌にも制限があって工業
的に全く適さないことなど問題があった。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】本発明者らは、上述の
現状に鑑み、乳またはホエーを原料として、安全で安価
なＳＣ含有組成物を求めて鋭意研究を重ねてきた結果、
乳またはホエーを原料として用い、イオン交換クロマト
グラフ処理を行うことで、高純度のＳＣ含有組成物を工
業的規模で、しかも簡易な処理工程によって得ることが
できることを見出し、本発明を完成するに至った。した
がって、本発明は細菌に対する感染防御効果を有し、医
薬品、化粧品、飲食品、飼料などの分野で利用するＳＣ
含有組成物を提供することを課題とする。
現状に鑑み、乳またはホエーを原料として、安全で安価
なＳＣ含有組成物を求めて鋭意研究を重ねてきた結果、
乳またはホエーを原料として用い、イオン交換クロマト
グラフ処理を行うことで、高純度のＳＣ含有組成物を工
業的規模で、しかも簡易な処理工程によって得ることが
できることを見出し、本発明を完成するに至った。した
がって、本発明は細菌に対する感染防御効果を有し、医
薬品、化粧品、飲食品、飼料などの分野で利用するＳＣ
含有組成物を提供することを課題とする。
【０００６】
【課題を解決するための手段】本発明のＳＣ含有組成物
は、乳またはホエーを陽イオン交換樹脂と接触させて
ＳＣを吸着させ、次いでＳＣを溶出させることによって
得ることができ、ｐＨ６〜９に調整した乳またはホエ
ーを陽イオン交換樹脂と接触させてＳＣを吸着させ、次
いでＳＣを溶出させて得ることができ、電気伝導度５
ｍＳ／ｃｍ以下に脱塩した乳またはホエーを陽イオン交
換樹脂と接触させてＳＣを吸着させ、次いでＳＣを溶出
させて得ることができ、ラクトフェリンおよび／また
はラクトパーオキシダーゼを除去した後、電気伝導度５
ｍＳ／ｃｍ以下に脱塩した乳またはホエーを陽イオン交
換樹脂と接触させてＳＣを吸着させ、次いでＳＣを溶出
させて得ることができ、ラクトフェリンおよび／また
はラクトパーオキシダーゼを除去した後、電気伝導度５
ｍＳ／ｃｍ以下となるまで脱塩した乳またはホエーを陽
イオン交換樹脂と接触させてＳＣを吸着させ、次いでＳ
Ｃを溶出させて得られる画分を電気伝導３ｍＳ／ｃｍ以
下となるまで脱塩し、さらに陰イオン交換樹脂と接触さ
せて未吸着画分からＳＣを回収することができる。
は、乳またはホエーを陽イオン交換樹脂と接触させて
ＳＣを吸着させ、次いでＳＣを溶出させることによって
得ることができ、ｐＨ６〜９に調整した乳またはホエ
ーを陽イオン交換樹脂と接触させてＳＣを吸着させ、次
いでＳＣを溶出させて得ることができ、電気伝導度５
ｍＳ／ｃｍ以下に脱塩した乳またはホエーを陽イオン交
換樹脂と接触させてＳＣを吸着させ、次いでＳＣを溶出
させて得ることができ、ラクトフェリンおよび／また
はラクトパーオキシダーゼを除去した後、電気伝導度５
ｍＳ／ｃｍ以下に脱塩した乳またはホエーを陽イオン交
換樹脂と接触させてＳＣを吸着させ、次いでＳＣを溶出
させて得ることができ、ラクトフェリンおよび／また
はラクトパーオキシダーゼを除去した後、電気伝導度５
ｍＳ／ｃｍ以下となるまで脱塩した乳またはホエーを陽
イオン交換樹脂と接触させてＳＣを吸着させ、次いでＳ
Ｃを溶出させて得られる画分を電気伝導３ｍＳ／ｃｍ以
下となるまで脱塩し、さらに陰イオン交換樹脂と接触さ
せて未吸着画分からＳＣを回収することができる。
【０００７】このようにすると（イ）ＳＣ含有量が少く
とも20重量％以上であり、（ロ）ＳＣ以外に少なくとも
免疫グロブリン及び血清アルブミンを含み、（ハ）細菌
に対する感染防御作用を有する、ＳＣ含有組成物を得る
ことができる。
とも20重量％以上であり、（ロ）ＳＣ以外に少なくとも
免疫グロブリン及び血清アルブミンを含み、（ハ）細菌
に対する感染防御作用を有する、ＳＣ含有組成物を得る
ことができる。
【０００８】次に、本発明のＳＣ含有組成物を得る方法
について、詳細に説明する。原料としては、ヒト、ウ
シ、スイギュウ、ヒツジ、ヤギなどの哺乳類由来の乳ま
たはホエーを用いる。乳は全乳を用いてもよいが、全乳
に含まれる脂肪はイオン交換樹脂に付着して、結果的に
ＳＣの回収量及び純度を低下させることとなるので、脱
脂乳を用いた方がより好ましい。また、ホエーとして
は、乳をｐＨ４．６としてカゼインを沈澱除去したも
の、あるいはチーズの製造過程で排出された上清ホエー
などを用いることができる。このようなホエーを用いる
ことは樹脂に対する負担を軽減し、洗浄を容易にするの
で望ましい。
について、詳細に説明する。原料としては、ヒト、ウ
シ、スイギュウ、ヒツジ、ヤギなどの哺乳類由来の乳ま
たはホエーを用いる。乳は全乳を用いてもよいが、全乳
に含まれる脂肪はイオン交換樹脂に付着して、結果的に
ＳＣの回収量及び純度を低下させることとなるので、脱
脂乳を用いた方がより好ましい。また、ホエーとして
は、乳をｐＨ４．６としてカゼインを沈澱除去したも
の、あるいはチーズの製造過程で排出された上清ホエー
などを用いることができる。このようなホエーを用いる
ことは樹脂に対する負担を軽減し、洗浄を容易にするの
で望ましい。
【０００９】乳またはホエーを陽イオン交換樹脂と接触
させてＳＣを吸着させる場合、乳またはホエーのｐＨは
６〜９が好ましい。乳のｐＨが６より低い場合は、カゼ
インの沈澱が生じて好ましくない。また、ホエーのｐＨ
が６より低い場合は、例えばβ−ラクトグロブリン、α
−ラクトアルブミン、血清アルブミン、免疫グロブリン
などＳＣ以外の夾雑物も樹脂に吸着するので、結果的に
ＳＣ純度が２０％未満となる。乳またはホエーのｐＨが
９より高い場合は、樹脂に吸着するＳＣを含む蛋白質の
量が低下するので、結果的にＳＣの回収量が低下する。
したがって、組成物中のＳＣ純度を２０％以上とするた
めには、乳またはホエーを陽イオン交換樹脂と接触させ
てＳＣを吸着させる際に、乳またはホエーのｐＨを６〜
９に調整することが望ましい。
させてＳＣを吸着させる場合、乳またはホエーのｐＨは
６〜９が好ましい。乳のｐＨが６より低い場合は、カゼ
インの沈澱が生じて好ましくない。また、ホエーのｐＨ
が６より低い場合は、例えばβ−ラクトグロブリン、α
−ラクトアルブミン、血清アルブミン、免疫グロブリン
などＳＣ以外の夾雑物も樹脂に吸着するので、結果的に
ＳＣ純度が２０％未満となる。乳またはホエーのｐＨが
９より高い場合は、樹脂に吸着するＳＣを含む蛋白質の
量が低下するので、結果的にＳＣの回収量が低下する。
したがって、組成物中のＳＣ純度を２０％以上とするた
めには、乳またはホエーを陽イオン交換樹脂と接触させ
てＳＣを吸着させる際に、乳またはホエーのｐＨを６〜
９に調整することが望ましい。
【００１０】本発明に係るＳＣ含有組成物は、希望する
最終製品のＳＣ純度によってその調製方法が異なる。
最終製品のＳＣ純度によってその調製方法が異なる。
【００１１】希望する最終製品のＳＣ純度が２０％以上
５０％未満のＳＣ含有組成物を調製する場合は、乳また
はホエーを陽イオン交換樹脂と接触させてＳＣを吸着さ
せることによって得ることができる。この際、乳または
ホエーのｐＨを約６〜９に調整すればよい。
５０％未満のＳＣ含有組成物を調製する場合は、乳また
はホエーを陽イオン交換樹脂と接触させてＳＣを吸着さ
せることによって得ることができる。この際、乳または
ホエーのｐＨを約６〜９に調整すればよい。
【００１２】希望する最終製品のＳＣ純度が５０％以上
７０％未満のＳＣ含有組成物を調製する場合は、原料と
して用いる乳またはホエーを電気伝導度が５ｍＳ／ｃｍ
以下、好ましくは２ｍＳ／ｃｍ以下になるまで脱塩した
ものを用いればよい。なお、乳またはホエーの脱塩は、
電気透析膜、限外濾過膜、逆浸透膜、あるいはイオン交
換樹脂、ゲル濾過用ゲルなどを用いて行う。ＳＣの回収
量及び純度は、ここで行う脱塩の程度に依存している。
電気伝導度が５ｍＳ／ｃｍ以上の原料を用いれば、ＳＣ
純度は５０％未満となる。
７０％未満のＳＣ含有組成物を調製する場合は、原料と
して用いる乳またはホエーを電気伝導度が５ｍＳ／ｃｍ
以下、好ましくは２ｍＳ／ｃｍ以下になるまで脱塩した
ものを用いればよい。なお、乳またはホエーの脱塩は、
電気透析膜、限外濾過膜、逆浸透膜、あるいはイオン交
換樹脂、ゲル濾過用ゲルなどを用いて行う。ＳＣの回収
量及び純度は、ここで行う脱塩の程度に依存している。
電気伝導度が５ｍＳ／ｃｍ以上の原料を用いれば、ＳＣ
純度は５０％未満となる。
【００１３】希望する最終製品のＳＣ純度が７０％以上
８０％未満のＳＣ含有組成物を調製する場合は、あらか
じめラクトフェリン（ＬＦ）及び／またはラクトパーオ
キシダーゼ（ＬＰＯ）を除去し、電気伝導度５ｍＳ／ｃ
ｍ以下、好ましくは２ｍＳ／ｃｍ以下になるまで脱塩し
た乳またはホエーを原料として用いる。ＬＦ及び／また
はＬＰＯの除去は、抗ＬＦモノクローナル抗体固定化カ
ラムを用いる方法（特開昭６１−１４５２００）、硫酸
エステル化した多糖類担体を乳と接触させる方法（特開
昭６３−２５５３００）などを利用することができる。
ＬＦ及び／またはＬＰＯを除去した場合、ＳＣ純度は７
０％以上となる。
８０％未満のＳＣ含有組成物を調製する場合は、あらか
じめラクトフェリン（ＬＦ）及び／またはラクトパーオ
キシダーゼ（ＬＰＯ）を除去し、電気伝導度５ｍＳ／ｃ
ｍ以下、好ましくは２ｍＳ／ｃｍ以下になるまで脱塩し
た乳またはホエーを原料として用いる。ＬＦ及び／また
はＬＰＯの除去は、抗ＬＦモノクローナル抗体固定化カ
ラムを用いる方法（特開昭６１−１４５２００）、硫酸
エステル化した多糖類担体を乳と接触させる方法（特開
昭６３−２５５３００）などを利用することができる。
ＬＦ及び／またはＬＰＯを除去した場合、ＳＣ純度は７
０％以上となる。
【００１４】本発明で、ＳＣの吸着に用いる陽イオン交
換樹脂としては、架橋型の多糖類やセルロース、あるい
はアクリルアミド樹脂に、カルボキシメチル基、スルホ
ン基、スルホプロピル基、リン酸基などを導入した陽イ
オン交換樹脂を用いることができる。例えば、カルボキ
シメチル基を導入したＣＭ−セルロファインＣ−５００
（生化学工業（株）製）、スルホン基を導入したスルホ
ン化キトパール（富士紡績（株）製）、スルホプロピル
基を導入したＳＰ−セファデックス（ファルマシア社
製）、リン酸基を導入したホスホセルロース（ファルマ
シア社製）などを例示することができる。なお、スルホ
ン化キトパールを用いる場合、脱塩していない乳または
ホエーを用いるとＳＣの吸着量は少ないが、脱塩した乳
またはホエーを用いるとＳＣの殆どを吸着することがで
きる。乳またはホエーとこれらの陽イオン交換樹脂に接
触させる方法としては、タンク内で両者を接触させる方
法、樹脂を充填したカラムに通液する方法、あるいは回
転型カラム反応器を用いる方法（特開平２−１３８２９
５）などがある。特に、大量調製するには回転型カラム
反応器を用いることが効率的である。乳またはホエーと
これらの陽イオン交換樹脂に接触させる温度は特に限定
されないが、通常４℃以上６０℃未満の範囲で行う。４
℃未満の温度では、原料凍結、粘度上昇、脂肪分離など
が生じる。６０℃以上の温度では、ＳＣが変性する場合
がある。なお、１５℃以上の温度では、微生物の繁殖が
著しいので、大量処理を行う場合は、温度１５℃未満で
行うことが望ましい。この場合、原料１Ｋｇに対し、樹
脂を１〜１００ｇの目安で混合し、１５分〜６時間程度
撹拌して行うことが望ましい。
換樹脂としては、架橋型の多糖類やセルロース、あるい
はアクリルアミド樹脂に、カルボキシメチル基、スルホ
ン基、スルホプロピル基、リン酸基などを導入した陽イ
オン交換樹脂を用いることができる。例えば、カルボキ
シメチル基を導入したＣＭ−セルロファインＣ−５００
（生化学工業（株）製）、スルホン基を導入したスルホ
ン化キトパール（富士紡績（株）製）、スルホプロピル
基を導入したＳＰ−セファデックス（ファルマシア社
製）、リン酸基を導入したホスホセルロース（ファルマ
シア社製）などを例示することができる。なお、スルホ
ン化キトパールを用いる場合、脱塩していない乳または
ホエーを用いるとＳＣの吸着量は少ないが、脱塩した乳
またはホエーを用いるとＳＣの殆どを吸着することがで
きる。乳またはホエーとこれらの陽イオン交換樹脂に接
触させる方法としては、タンク内で両者を接触させる方
法、樹脂を充填したカラムに通液する方法、あるいは回
転型カラム反応器を用いる方法（特開平２−１３８２９
５）などがある。特に、大量調製するには回転型カラム
反応器を用いることが効率的である。乳またはホエーと
これらの陽イオン交換樹脂に接触させる温度は特に限定
されないが、通常４℃以上６０℃未満の範囲で行う。４
℃未満の温度では、原料凍結、粘度上昇、脂肪分離など
が生じる。６０℃以上の温度では、ＳＣが変性する場合
がある。なお、１５℃以上の温度では、微生物の繁殖が
著しいので、大量処理を行う場合は、温度１５℃未満で
行うことが望ましい。この場合、原料１Ｋｇに対し、樹
脂を１〜１００ｇの目安で混合し、１５分〜６時間程度
撹拌して行うことが望ましい。
【００１５】吸着したＳＣの溶出には、イオン強度０．
００５〜０．２５、ｐＨが６〜９の塩溶液を用いる。イ
オン強度が０．００５より低い場合は、樹脂からＳＣを
溶出できない。イオン強度が０．２５より高い場合は、
樹脂からＳＣと共に吸着している他の不純物が同時に溶
出するので、結果的にＳＣ純度は低下する。ＳＣの溶出
に用いる塩の種類は特に限定されないが、塩化ナトリウ
ム、塩化カリウムなどを例示することができる。
００５〜０．２５、ｐＨが６〜９の塩溶液を用いる。イ
オン強度が０．００５より低い場合は、樹脂からＳＣを
溶出できない。イオン強度が０．２５より高い場合は、
樹脂からＳＣと共に吸着している他の不純物が同時に溶
出するので、結果的にＳＣ純度は低下する。ＳＣの溶出
に用いる塩の種類は特に限定されないが、塩化ナトリウ
ム、塩化カリウムなどを例示することができる。
【００１６】ＳＣの吸着、溶出に用いた陽イオン交換樹
脂は、イオン強度が０．２５より高い塩溶液で洗浄した
後、水で十分洗浄することによって再度利用することが
可能となる。得られたＳＣは、必要に応じて、濃縮、脱
塩、乾燥を行う。濃縮は、真空濃縮法、限外濾過法、逆
浸透圧濾過法などを用いて行うことができる。脱塩は、
限外濾過膜、透析膜、電気透析膜、あるいはイオン交換
樹脂、ゲル濾過用ゲルなどを用いて行うことができる。
乾燥は、凍結乾燥法や噴霧乾燥法などを用いて行うこと
ができる。
脂は、イオン強度が０．２５より高い塩溶液で洗浄した
後、水で十分洗浄することによって再度利用することが
可能となる。得られたＳＣは、必要に応じて、濃縮、脱
塩、乾燥を行う。濃縮は、真空濃縮法、限外濾過法、逆
浸透圧濾過法などを用いて行うことができる。脱塩は、
限外濾過膜、透析膜、電気透析膜、あるいはイオン交換
樹脂、ゲル濾過用ゲルなどを用いて行うことができる。
乾燥は、凍結乾燥法や噴霧乾燥法などを用いて行うこと
ができる。
【００１７】さらに、希望する最終製品のＳＣ純度が８
０％以上のＳＣ含有組成物を調製する場合は、乳からＬ
Ｆ及び／またはＬＰＯを除き、電気伝導度５ｍＳ／ｃｍ
以下、好ましくは２ｍＳ／ｃｍ以下になるまで脱塩して
陽イオン交換樹脂で吸着、溶出したＳＣ含有画分に含ま
れる不純物を陰イオン交換樹脂で吸着除去すればよい。
すなわち、陽イオン交換樹脂処理で得られたＳＣ含有画
分を電気伝導度が３ｍＳ／ｃｍ以下、好ましくは１ｍＳ
／ｃｍ以下となるまで脱塩した後、陰イオン交換樹脂と
接触させ、未吸着画分及び／またはイオン強度０．０５
未満の水溶液で溶出される画分を回収することによって
ＳＣ純度が８０％以上となる。ＳＣ含有画分の電気伝導
度が３ｍＳ／ｃｍより高い場合は、不純物が樹脂に吸着
されにくくなるので、ＳＣ含有画分を陰イオン交換樹脂
と接触させさせても純度を高めることができない。ここ
で用いることのできる陰イオン交換樹脂としては、３級
あるいは４級アミンを導入した樹脂、例えばＤＥＡＥ−
セファロースＦＦ（ファルマシア社製）、Ｑ−セファロ
ースＦＦ（ファルマシア社製）などを例示することがで
きる。陰イオン交換樹脂と接触させる方法は、陽イオン
交換樹脂と接触させる方法に準じて行うことができる。
本発明におけるＳＣ含有量は、これが２０重量％程度の
ときは、飼料として、その後ＳＣ含有量が高くなるに従
って、飲食品、化粧品、医薬品などの原料として用いる
ことができる。ここで用いた陰イオン交換樹脂は、イオ
ン強度が０．２より高い塩溶液で洗浄した後、水で十分
洗浄することによって再度使用することができる。一
方、ＳＣを回収した後の乳またはホエーは、そのまま、
飲食品、医薬品、化粧品などの素材として利用すること
が可能である。
０％以上のＳＣ含有組成物を調製する場合は、乳からＬ
Ｆ及び／またはＬＰＯを除き、電気伝導度５ｍＳ／ｃｍ
以下、好ましくは２ｍＳ／ｃｍ以下になるまで脱塩して
陽イオン交換樹脂で吸着、溶出したＳＣ含有画分に含ま
れる不純物を陰イオン交換樹脂で吸着除去すればよい。
すなわち、陽イオン交換樹脂処理で得られたＳＣ含有画
分を電気伝導度が３ｍＳ／ｃｍ以下、好ましくは１ｍＳ
／ｃｍ以下となるまで脱塩した後、陰イオン交換樹脂と
接触させ、未吸着画分及び／またはイオン強度０．０５
未満の水溶液で溶出される画分を回収することによって
ＳＣ純度が８０％以上となる。ＳＣ含有画分の電気伝導
度が３ｍＳ／ｃｍより高い場合は、不純物が樹脂に吸着
されにくくなるので、ＳＣ含有画分を陰イオン交換樹脂
と接触させさせても純度を高めることができない。ここ
で用いることのできる陰イオン交換樹脂としては、３級
あるいは４級アミンを導入した樹脂、例えばＤＥＡＥ−
セファロースＦＦ（ファルマシア社製）、Ｑ−セファロ
ースＦＦ（ファルマシア社製）などを例示することがで
きる。陰イオン交換樹脂と接触させる方法は、陽イオン
交換樹脂と接触させる方法に準じて行うことができる。
本発明におけるＳＣ含有量は、これが２０重量％程度の
ときは、飼料として、その後ＳＣ含有量が高くなるに従
って、飲食品、化粧品、医薬品などの原料として用いる
ことができる。ここで用いた陰イオン交換樹脂は、イオ
ン強度が０．２より高い塩溶液で洗浄した後、水で十分
洗浄することによって再度使用することができる。一
方、ＳＣを回収した後の乳またはホエーは、そのまま、
飲食品、医薬品、化粧品などの素材として利用すること
が可能である。
【００１８】次に、本発明の分泌性コンポネント含有組
成物の細菌に対する感染防御試験を示す。試験動物とし
て体重約 200g のウイスター系雄ラット20匹を５匹ずつ
４群に分け、１群をコントロール、他の３群を試験群と
した。試験群には、経口ゾンデを用い、ＳＣ換算でそれ
ぞれ 0.05mg/日、0.1mg/日、1mg/日の割合となるようＳ
Ｃ含有組成物を強制投与した。次いで、各群に病原性大
腸菌ATCC 12014を一定量経口投与し、下痢の発生率を調
べた。結果を表１に示す。
成物の細菌に対する感染防御試験を示す。試験動物とし
て体重約 200g のウイスター系雄ラット20匹を５匹ずつ
４群に分け、１群をコントロール、他の３群を試験群と
した。試験群には、経口ゾンデを用い、ＳＣ換算でそれ
ぞれ 0.05mg/日、0.1mg/日、1mg/日の割合となるようＳ
Ｃ含有組成物を強制投与した。次いで、各群に病原性大
腸菌ATCC 12014を一定量経口投与し、下痢の発生率を調
べた。結果を表１に示す。
【００１９】
【表１】 次に本発明の実施例を挙げて本発明を具体的に説明す
る。
る。
【００２０】
【実施例１】未殺菌牛乳を遠心分離で脱塩し、得られた
生脱脂乳のｐＨを塩酸で４．６に調整してカゼインを沈
澱、除去することによってホエーを得た。このホエー１
２．４ＫｇをカセイソーダでｐＨ６．２に調整し、ＣＭ
−セルロファインＣ−５００（生化学工業（株）製）１
００ｇと共にタンク内で１時間混合撹拌してＳＣ含有画
分を樹脂に吸着させた後、上清をデカンテーションで除
去し、ＳＣ含有画分を吸着させた樹脂を充填層型カラム
（３×３０ｃｍ）に充填した。次に、水を通液してカラ
ムを十分洗浄し、さらに０．１４Ｍ食塩水を通液して洗
浄した後、０．２Ｍ食塩水５００ｍｌを通液して、ＳＣ
含有画分を溶出させた。この画分をロータリーエバポレ
ーターで５０ｍｌまで濃縮し、脱イオン水に対して透析
を行って塩類を除去した後、凍結乾燥して６ｍｇのＳＣ
含有組成物を得た。組成物中のＳＣ純度は、ＳＤＳ−ポ
リアクリルアミド電気泳動によると５２％であり、残り
は免疫グロブリン４２重量％及び血清アルブミン６重量
％であった。
生脱脂乳のｐＨを塩酸で４．６に調整してカゼインを沈
澱、除去することによってホエーを得た。このホエー１
２．４ＫｇをカセイソーダでｐＨ６．２に調整し、ＣＭ
−セルロファインＣ−５００（生化学工業（株）製）１
００ｇと共にタンク内で１時間混合撹拌してＳＣ含有画
分を樹脂に吸着させた後、上清をデカンテーションで除
去し、ＳＣ含有画分を吸着させた樹脂を充填層型カラム
（３×３０ｃｍ）に充填した。次に、水を通液してカラ
ムを十分洗浄し、さらに０．１４Ｍ食塩水を通液して洗
浄した後、０．２Ｍ食塩水５００ｍｌを通液して、ＳＣ
含有画分を溶出させた。この画分をロータリーエバポレ
ーターで５０ｍｌまで濃縮し、脱イオン水に対して透析
を行って塩類を除去した後、凍結乾燥して６ｍｇのＳＣ
含有組成物を得た。組成物中のＳＣ純度は、ＳＤＳ−ポ
リアクリルアミド電気泳動によると５２％であり、残り
は免疫グロブリン４２重量％及び血清アルブミン６重量
％であった。
【００２１】
【実施例２】山羊乳からチーズを製造した際に排出され
たホエーの凍結乾燥物３．５Ｋｇを水３１．５Ｋｇで溶
解して得られたｐＨ６．１の溶液をＣＭ−セルロファイ
ンＣ−５００（生化学工業（株）製）２００ｇを充填し
たカラム（３×３０ｃｍ）に７ｌ／時の流速で通液し
て、ＳＣ含有画分を吸着させた。次に、水を通液してカ
ラムを十分洗浄し、さらに０．１３Ｍ食塩水２ｌを通液
して洗浄した後、０．２５Ｍ食塩水２ｌを通液して、Ｓ
Ｃ含有画分を溶出させた。この溶出画分を分画分子量が
５００００の限外濾過膜を用いて脱塩し、ロータリーエ
バポレーターで５００ｍｌまで濃縮した後、凍結乾燥し
て１０８ｇのＳＣ含有組成物を得た。組成物中のＳＣ純
度は、ＳＤＳ−ポリアクリルアミド電気泳動によると４
７％であった。
たホエーの凍結乾燥物３．５Ｋｇを水３１．５Ｋｇで溶
解して得られたｐＨ６．１の溶液をＣＭ−セルロファイ
ンＣ−５００（生化学工業（株）製）２００ｇを充填し
たカラム（３×３０ｃｍ）に７ｌ／時の流速で通液し
て、ＳＣ含有画分を吸着させた。次に、水を通液してカ
ラムを十分洗浄し、さらに０．１３Ｍ食塩水２ｌを通液
して洗浄した後、０．２５Ｍ食塩水２ｌを通液して、Ｓ
Ｃ含有画分を溶出させた。この溶出画分を分画分子量が
５００００の限外濾過膜を用いて脱塩し、ロータリーエ
バポレーターで５００ｍｌまで濃縮した後、凍結乾燥し
て１０８ｇのＳＣ含有組成物を得た。組成物中のＳＣ純
度は、ＳＤＳ−ポリアクリルアミド電気泳動によると４
７％であった。
【００２２】
【実施例３】分画分子量が１００００の限外濾過膜を用
いて、ｐＨが６．２のチーズホエー４００ｍｌを電気伝
導度１ｍＳ／ｃｍ以下となるまで脱塩した後、ＣＭ−セ
ルロファインＣ−５００（生化学工業（株）製）１０ｍ
ｌを充填したカラム（１．３×１５ｃｍ）に３ｍｌ／分
の流速で通液して、ＳＣ含有画分を吸着させた。次に、
イオン強度０．００４、ｐＨが７．０のリン酸緩衝液を
通液してカラムを洗浄した後、イオン強度０．０３４、
ｐＨが７．０のリン酸緩衝液を通液して、ＳＣ含有画分
を溶出させた。この溶出画分を分画分子量が１００００
の限外濾過膜を用いて濃縮した後、凍結乾燥して２４ｍ
ｇのＳＣ含有組成物を得た。組成物中のＳＣ純度は、Ｓ
ＤＳ−ポリアクリルアミドゲル電気泳動によると６２％
であった。
いて、ｐＨが６．２のチーズホエー４００ｍｌを電気伝
導度１ｍＳ／ｃｍ以下となるまで脱塩した後、ＣＭ−セ
ルロファインＣ−５００（生化学工業（株）製）１０ｍ
ｌを充填したカラム（１．３×１５ｃｍ）に３ｍｌ／分
の流速で通液して、ＳＣ含有画分を吸着させた。次に、
イオン強度０．００４、ｐＨが７．０のリン酸緩衝液を
通液してカラムを洗浄した後、イオン強度０．０３４、
ｐＨが７．０のリン酸緩衝液を通液して、ＳＣ含有画分
を溶出させた。この溶出画分を分画分子量が１００００
の限外濾過膜を用いて濃縮した後、凍結乾燥して２４ｍ
ｇのＳＣ含有組成物を得た。組成物中のＳＣ純度は、Ｓ
ＤＳ−ポリアクリルアミドゲル電気泳動によると６２％
であった。
【００２３】
【実施例４】分画分子量が１００００の限外濾過膜を用
いて、ｐＨが６．７の脱脂乳５００ｍｌを電気伝導度３
ｍＳ／ｃｍとなるまで脱塩した後、スルホン化キトパー
ル（富士紡績（株）製）１２ｍｌを充填したカラム
（１．３×１５ｃｍ）に３ｍｌ／分の流速で通液して、
ＳＣ含有画分を吸着させた。次に、脱イオン水を通液し
てカラムを洗浄した後、イオン強度０．０７の食塩水を
通液して、ＳＣ含有画分を溶出させた。この溶出画分を
分画分子量が２００００の限外濾過膜を用いて濃縮した
後、凍結乾燥して３２ｍｇのＳＣ含有組成物を得た。組
成物のＳＣ純度は、ＳＤＳ−ポリアクリルアミドゲル電
気泳動によると６４％であった。
いて、ｐＨが６．７の脱脂乳５００ｍｌを電気伝導度３
ｍＳ／ｃｍとなるまで脱塩した後、スルホン化キトパー
ル（富士紡績（株）製）１２ｍｌを充填したカラム
（１．３×１５ｃｍ）に３ｍｌ／分の流速で通液して、
ＳＣ含有画分を吸着させた。次に、脱イオン水を通液し
てカラムを洗浄した後、イオン強度０．０７の食塩水を
通液して、ＳＣ含有画分を溶出させた。この溶出画分を
分画分子量が２００００の限外濾過膜を用いて濃縮した
後、凍結乾燥して３２ｍｇのＳＣ含有組成物を得た。組
成物のＳＣ純度は、ＳＤＳ−ポリアクリルアミドゲル電
気泳動によると６４％であった。
【００２４】
【実施例５】チーズホエー２０ｌをｐＨ８．０に調整し
た後、タンク内で４℃に保持しながら８時間攪拌し、Ｓ
Ｐ−セファデックス（ファルマシア社製）５００ｍｌと
接触させて、ＳＣ含有画分をゲルに吸着させた。次に、
このゲルを回収してカラム（５．８×３０ｃｍ）に充填
した後、水を通液してカラムを十分洗浄し、さらにイオ
ン強度０．００１、ｐＨが８．０のトリス−塩酸緩衝液
を通液してカラムを洗浄した。そして、イオン強度０．
１０、ｐＨが８．０の塩化カリウムを含む１０ｍＭトリ
ス−塩酸緩衝液を通液して、ＳＣ含有画分を溶出した。
この溶出画分を脱塩用のイオン交換樹脂であるアンバー
ライトＭＢ−３（オルガノ（株）製）を用いて電気伝導
度０．６ｍＳ／ｃｍまで脱塩した後、濃縮、凍結乾燥し
て１６７ｍｇのＳＣ含有組成物を得た。組成物のＳＣ純
度は、ＳＤＳ−ポリアクリルアミドゲル電気泳動による
と４６％であった。
た後、タンク内で４℃に保持しながら８時間攪拌し、Ｓ
Ｐ−セファデックス（ファルマシア社製）５００ｍｌと
接触させて、ＳＣ含有画分をゲルに吸着させた。次に、
このゲルを回収してカラム（５．８×３０ｃｍ）に充填
した後、水を通液してカラムを十分洗浄し、さらにイオ
ン強度０．００１、ｐＨが８．０のトリス−塩酸緩衝液
を通液してカラムを洗浄した。そして、イオン強度０．
１０、ｐＨが８．０の塩化カリウムを含む１０ｍＭトリ
ス−塩酸緩衝液を通液して、ＳＣ含有画分を溶出した。
この溶出画分を脱塩用のイオン交換樹脂であるアンバー
ライトＭＢ−３（オルガノ（株）製）を用いて電気伝導
度０．６ｍＳ／ｃｍまで脱塩した後、濃縮、凍結乾燥し
て１６７ｍｇのＳＣ含有組成物を得た。組成物のＳＣ純
度は、ＳＤＳ−ポリアクリルアミドゲル電気泳動による
と４６％であった。
【００２５】
【実施例６】生脱脂乳４００Ｋｇをスルホン化キトパー
ル（富士紡績（株）製）１．７ｌを充填した回転型カラ
ム反応器（東京理化器械（株）製）に２００ｌ／時の流
速で２時間循環通液した後、水でカラムを十分洗浄し、
さらに１．０Ｍ食塩水６０ｌを通液してＬＦ画分を得
た。このＬＦ画分は、分画分子量が５００００の限外濾
過膜を用いて脱塩濃縮した後、凍結乾燥してＬＦ粉末と
した。一方、ＬＦ画分を分取した残りの脱脂乳をＳＰ−
セファデックス（ファルマシア社製）１．７ｌを充填し
た回転型カラム反応器（東京理化器械（株）製）に２０
０ｌ／時の流速で４時間循環通液した後、水でカラムを
十分洗浄し、０．１３Ｍ食塩水６０ｌで不純物をさらに
洗浄し、次いで０．２２Ｍ食塩水６０ｌを通液してＳＣ
含有画分を溶出した。この溶出画分を分画分子量が５０
０００の限外濾過膜を用いて脱塩濃縮し、ＤＥＡＥ−セ
ルロファイン（生化学工業（株）製）２００ｇと３０分
間撹拌接触させた後、濾過布で樹脂を除去して上清を
得、凍結乾燥して９．５ｇのＳＣ含有組成物を得た。組
成物中のＳＣ純度は、ＳＤＳ−ポリアクリルアミド電気
泳動によると８２％であった。なお、ここで原料として
用いた脱塩乳は、殺菌した後噴霧乾燥して脱脂粉乳とし
た。
ル（富士紡績（株）製）１．７ｌを充填した回転型カラ
ム反応器（東京理化器械（株）製）に２００ｌ／時の流
速で２時間循環通液した後、水でカラムを十分洗浄し、
さらに１．０Ｍ食塩水６０ｌを通液してＬＦ画分を得
た。このＬＦ画分は、分画分子量が５００００の限外濾
過膜を用いて脱塩濃縮した後、凍結乾燥してＬＦ粉末と
した。一方、ＬＦ画分を分取した残りの脱脂乳をＳＰ−
セファデックス（ファルマシア社製）１．７ｌを充填し
た回転型カラム反応器（東京理化器械（株）製）に２０
０ｌ／時の流速で４時間循環通液した後、水でカラムを
十分洗浄し、０．１３Ｍ食塩水６０ｌで不純物をさらに
洗浄し、次いで０．２２Ｍ食塩水６０ｌを通液してＳＣ
含有画分を溶出した。この溶出画分を分画分子量が５０
０００の限外濾過膜を用いて脱塩濃縮し、ＤＥＡＥ−セ
ルロファイン（生化学工業（株）製）２００ｇと３０分
間撹拌接触させた後、濾過布で樹脂を除去して上清を
得、凍結乾燥して９．５ｇのＳＣ含有組成物を得た。組
成物中のＳＣ純度は、ＳＤＳ−ポリアクリルアミド電気
泳動によると８２％であった。なお、ここで原料として
用いた脱塩乳は、殺菌した後噴霧乾燥して脱脂粉乳とし
た。
【００２６】
【実施例７】スルホン化キトパール（富士紡績（株）
製）１．７ｌを充填した回転型カラム反応器（東京理化
器械（株）製）にｐＨが６．４、電気伝導度６ｍＳ／ｃ
ｍの脱脂乳２００ｌを２００ｌ／時の流速で２時間循環
通液して、脱脂乳からＬＦ及びＬＰＯを除去した。な
お、この回転型カラム反応器はＳＣ含有画分の吸着、溶
出に再度用いるので、水を通液して十分洗浄し、０．７
Ｍの食塩水を通液してＬＦ及びＬＰＯを溶出させた後、
水を通液して再生しておいた。一方、電気透析膜を用い
て、このＬＦ及びＬＰＯを除去した脱脂乳を電気伝導度
１．５ｍＳ／ｃｍとなるまで脱塩した後、ＬＦ及びＬＰ
Ｏの除去に用いた回転型カラム反応器に２００ｌ／時間
の流速で４時間循環通液して、ＳＣ含有画分を吸着させ
た。次に、水を通液して回転型カラム反応器を十分洗浄
し、さらにイオン強度０．００３の食塩水を通液して回
転型カラム反応器を洗浄した。そして、イオン強度０．
２の食塩水を通液してＳＣ含有画分を溶出した。なお、
さらに１Ｍの食塩水を通液して洗浄した後、水を通液し
て回転型カラム反応器の洗浄を十分行った。この溶出画
分６０ｌを分画分子量が５００００の限外濾過膜を用い
て２ｌとなるまで濃縮し、電気透析膜を用いて電気伝導
度０．３ｍＳ／ｃｍまで脱塩した後、凍結乾燥して５．
１ｇのＳＣ含有組成物を得た。組成物のＳＣ純度は、Ｓ
ＤＳ−ポリアクリルアミドゲル電気泳動によると７９％
であった。
製）１．７ｌを充填した回転型カラム反応器（東京理化
器械（株）製）にｐＨが６．４、電気伝導度６ｍＳ／ｃ
ｍの脱脂乳２００ｌを２００ｌ／時の流速で２時間循環
通液して、脱脂乳からＬＦ及びＬＰＯを除去した。な
お、この回転型カラム反応器はＳＣ含有画分の吸着、溶
出に再度用いるので、水を通液して十分洗浄し、０．７
Ｍの食塩水を通液してＬＦ及びＬＰＯを溶出させた後、
水を通液して再生しておいた。一方、電気透析膜を用い
て、このＬＦ及びＬＰＯを除去した脱脂乳を電気伝導度
１．５ｍＳ／ｃｍとなるまで脱塩した後、ＬＦ及びＬＰ
Ｏの除去に用いた回転型カラム反応器に２００ｌ／時間
の流速で４時間循環通液して、ＳＣ含有画分を吸着させ
た。次に、水を通液して回転型カラム反応器を十分洗浄
し、さらにイオン強度０．００３の食塩水を通液して回
転型カラム反応器を洗浄した。そして、イオン強度０．
２の食塩水を通液してＳＣ含有画分を溶出した。なお、
さらに１Ｍの食塩水を通液して洗浄した後、水を通液し
て回転型カラム反応器の洗浄を十分行った。この溶出画
分６０ｌを分画分子量が５００００の限外濾過膜を用い
て２ｌとなるまで濃縮し、電気透析膜を用いて電気伝導
度０．３ｍＳ／ｃｍまで脱塩した後、凍結乾燥して５．
１ｇのＳＣ含有組成物を得た。組成物のＳＣ純度は、Ｓ
ＤＳ−ポリアクリルアミドゲル電気泳動によると７９％
であった。
【００２７】
【実施例８】実施例７で得られたＳＣ含有画分を陰イオ
ン交換樹脂でさらに精製した。ＳＣ含有画分をＤＥＡＥ
−セファロースＣＬ−６Ｂ（ファルマシア社製）５００
ｍｌを充填し、イオン強度０．００１、ｐＨが７．０の
リン酸緩衝液で平衡化したカラム（５．８×３０ｃｍ）
に３ｍｌ／分の流速で通液して未吸着画分を回収した
後、濃縮、凍結乾燥して３．９ｇのＳＣ含有組成物を得
た。組成物のＳＣ純度は、ＳＤＳ−ポリアクリルアミド
ゲル電気泳動によると８８％であった。さらに、イオン
強度０．０１、ｐＨが７．０のリン酸緩衝液をカラムに
通液して陰イオン交換樹脂に吸着した画分を溶出した
後、濃縮し、脱イオン水に対して二晩透析を行った。こ
の画分を凍結乾燥して０．８ｇのＳＣ含有組成物を得
た。組成物のＳＣ純度は、ＳＤＳ−ポリアクリルアミド
ゲル電気泳動によると８２％であった。
ン交換樹脂でさらに精製した。ＳＣ含有画分をＤＥＡＥ
−セファロースＣＬ−６Ｂ（ファルマシア社製）５００
ｍｌを充填し、イオン強度０．００１、ｐＨが７．０の
リン酸緩衝液で平衡化したカラム（５．８×３０ｃｍ）
に３ｍｌ／分の流速で通液して未吸着画分を回収した
後、濃縮、凍結乾燥して３．９ｇのＳＣ含有組成物を得
た。組成物のＳＣ純度は、ＳＤＳ−ポリアクリルアミド
ゲル電気泳動によると８８％であった。さらに、イオン
強度０．０１、ｐＨが７．０のリン酸緩衝液をカラムに
通液して陰イオン交換樹脂に吸着した画分を溶出した
後、濃縮し、脱イオン水に対して二晩透析を行った。こ
の画分を凍結乾燥して０．８ｇのＳＣ含有組成物を得
た。組成物のＳＣ純度は、ＳＤＳ−ポリアクリルアミド
ゲル電気泳動によると８２％であった。
【００２８】
【発明の効果】本発明によると（イ）ＳＣ含有量が少く
とも20重量％以上であり、（ロ）ＳＣ以外に免疫グロブ
リン及び血清アルブミンを含み、（ハ）細菌に対する感
染防御作用を有する分泌性コンポネント含有組成物を得
ることができる。この高純度のＳＣ含有組成物は、乳を
直接陽イオン交換樹脂と接触させてＳＣを吸着し、これ
を塩類溶液で溶出するという簡単な操作で得ることがで
きる。原料乳中のＳＣ含量は、ホエー蛋白含量(30g/Kg)
にくらべて0.01〜0.05g/Kgと低いので、従来のまず陰イ
オン交換樹脂を用いてホエー蛋白等を吸着除去する前処
理を行う方法にくらべて、少量の陽イオン交換樹脂の使
用ですみ、短時間で大量の乳を処理することが可能であ
り、最終的にはより多くのＳＣ含有組成物を得ることが
できる。しかも、従来法では、大量のＳＣ含有組成物を
得ようとする場合には、多量の陰イオン交換樹脂を使用
し、大型の設備を必要とし、これに基づきコストが高く
なっていたのに対し、少量の陽イオン交換樹脂の使用で
すみ、大型の設備を必要とせず、ＳＣ含有組成物の取得
コストを低減することができる。
とも20重量％以上であり、（ロ）ＳＣ以外に免疫グロブ
リン及び血清アルブミンを含み、（ハ）細菌に対する感
染防御作用を有する分泌性コンポネント含有組成物を得
ることができる。この高純度のＳＣ含有組成物は、乳を
直接陽イオン交換樹脂と接触させてＳＣを吸着し、これ
を塩類溶液で溶出するという簡単な操作で得ることがで
きる。原料乳中のＳＣ含量は、ホエー蛋白含量(30g/Kg)
にくらべて0.01〜0.05g/Kgと低いので、従来のまず陰イ
オン交換樹脂を用いてホエー蛋白等を吸着除去する前処
理を行う方法にくらべて、少量の陽イオン交換樹脂の使
用ですみ、短時間で大量の乳を処理することが可能であ
り、最終的にはより多くのＳＣ含有組成物を得ることが
できる。しかも、従来法では、大量のＳＣ含有組成物を
得ようとする場合には、多量の陰イオン交換樹脂を使用
し、大型の設備を必要とし、これに基づきコストが高く
なっていたのに対し、少量の陽イオン交換樹脂の使用で
すみ、大型の設備を必要とせず、ＳＣ含有組成物の取得
コストを低減することができる。
【００２９】さらにまた、２０重量％を大きく越える高
純度のＳＣ含有組成物を得ようとする場合には、（１）
ｐＨ６〜９の範囲に調整した乳またはホエーを陽イオン
交換樹脂と接触させてＳＣを吸着させ、次いでＳＣを溶
出させてＳＣ画分を回収することによって、（２）電気
伝導度５ｍＳ／ｃｍ以下に脱塩した乳またはホエーを陽
イオン交換樹脂と接触させてＳＣを吸着させ、次いでＳ
Ｃを溶出させてＳＣ画分を回収することによって、
（３）ＬＦ及び／またはＬＰＯを除去し、ｐＨ６〜９の
範囲に調整した乳またはホエーを電気伝導度５ｍＳ／ｃ
ｍ以下に脱塩し、陽イオン交換樹脂と接触させてＳＣを
吸着させ、次いでＳＣを溶出させてＳＣ画分をを回収す
ることによって、あるいは（４）上記のＳＣ溶出画分を
脱塩し、陰イオン交換樹脂と接触させ、非吸着画分を回
収することによって得ることができる。
純度のＳＣ含有組成物を得ようとする場合には、（１）
ｐＨ６〜９の範囲に調整した乳またはホエーを陽イオン
交換樹脂と接触させてＳＣを吸着させ、次いでＳＣを溶
出させてＳＣ画分を回収することによって、（２）電気
伝導度５ｍＳ／ｃｍ以下に脱塩した乳またはホエーを陽
イオン交換樹脂と接触させてＳＣを吸着させ、次いでＳ
Ｃを溶出させてＳＣ画分を回収することによって、
（３）ＬＦ及び／またはＬＰＯを除去し、ｐＨ６〜９の
範囲に調整した乳またはホエーを電気伝導度５ｍＳ／ｃ
ｍ以下に脱塩し、陽イオン交換樹脂と接触させてＳＣを
吸着させ、次いでＳＣを溶出させてＳＣ画分をを回収す
ることによって、あるいは（４）上記のＳＣ溶出画分を
脱塩し、陰イオン交換樹脂と接触させ、非吸着画分を回
収することによって得ることができる。
【００３０】このように、本発明によればＳＣ含量の高
い組成物を得ることができるばかりではなく、工程が簡
略化され、設備投資が少額ですみ、安価にかつ大量にＳ
Ｃを得ることができる。さらに副原料としては食塩等の
塩類しか用いていないため得られる含有組成物は、安全
性の面でも何ら問題はなく、不純物が少く、免疫グロブ
リン及び血清アルブミンを含み、細菌に対する感染防御
作用を有する。そして、ＳＣ含有量に応じて飼料、食
品、医薬品、化粧品素材として利用することができる。
また、原料乳を陽イオン交換樹脂と接触させた非吸着画
分あるいは吸着画分を塩類水溶液で溶出し、溶出液を陰
イオン交換樹脂と接触させた吸着画分等は、ホエー、乳
蛋白等を多量に含有しており、しかも上記したように副
原料は水と塩類とだけしか使用しておらず、これらの画
分を原料として脱脂乳等の食品素材を製造することがで
き原料乳を効率よく利用することができる。
い組成物を得ることができるばかりではなく、工程が簡
略化され、設備投資が少額ですみ、安価にかつ大量にＳ
Ｃを得ることができる。さらに副原料としては食塩等の
塩類しか用いていないため得られる含有組成物は、安全
性の面でも何ら問題はなく、不純物が少く、免疫グロブ
リン及び血清アルブミンを含み、細菌に対する感染防御
作用を有する。そして、ＳＣ含有量に応じて飼料、食
品、医薬品、化粧品素材として利用することができる。
また、原料乳を陽イオン交換樹脂と接触させた非吸着画
分あるいは吸着画分を塩類水溶液で溶出し、溶出液を陰
イオン交換樹脂と接触させた吸着画分等は、ホエー、乳
蛋白等を多量に含有しており、しかも上記したように副
原料は水と塩類とだけしか使用しておらず、これらの画
分を原料として脱脂乳等の食品素材を製造することがで
き原料乳を効率よく利用することができる。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 東 徳洋 栃木県宇都宮市下平出町950−13−２− 14 (72)発明者 栗城 均 栃木県宇都宮市平松本町931 平松ハイ ツ201 (56)参考文献 Ａｓｉａｎ Ｊ．Ｄａｉｒｙ Ｒｅ ｓ．，Ｖｏｌ．８（４），ｐ．219−222 （1989) (58)調査した分野(Int.Cl.6，ＤＢ名) C07K 14/47 C07K 1/18 A23J 1/20 A23J 3/08 ＢＩＯＳＩＳ（ＤＩＡＬＯＧ) ＣＡ（ＳＴＮ)
Claims (5)
- 【請求項１】 乳またはホエーを陽イオン交換樹脂と接
触させて分泌性コンポネントを吸着させ、次いで分泌性
コンポネントを溶出させることによって得ることがで
き、分泌性コンポネント20重量％以上と少なくとも免疫
グロブリンと血清アルブミンとよりなり、細菌に対する
感染防御作用を有する分泌性コンポネント含有組成物。 - 【請求項２】 乳またはホエーとして pH6〜９の範囲に
調整した乳またはホエーを用い、分泌性コンポネントが
20重量％以上50重量％未満である請求項１記載の分泌性
コンポネント含有組成物。 - 【請求項３】 乳またはホエーとして電気伝導度5mS/cm
以下に脱塩した乳またはホエーを用い、分泌性コンポネ
ントが50重量％以上70重量％未満である請求項１記載の
分泌性コンポネント含有組成物。 - 【請求項４】 乳またはホエーとしてラクトフェリンお
よび／またはラクトパーオキシダーゼを除去し、電気伝
導度5mS/cm以下に脱塩した乳またはホエーを用い、分泌
性コンポネントが70重量％以上80重量％未満である請求
項１記載の分泌性コンポネント含有組成物。 - 【請求項５】 乳またはホエーとしてラクトフェリンお
よび／またはラクトパーオキシダーゼを除去し、電気伝
導度5mS/cm以下に脱塩した乳またはホエーを用い、溶出
した分泌性コンポネント画分を電気伝導度3mS/cm以下と
なるまで脱塩し、さらに陰イオン交換樹脂と接触させて
未吸着画分から分泌性コンポネントを回収することによ
って得ることができ、分泌性コンポネントが80重量％以
上である請求項１記載の分泌性コンポネント含有組成
物。
Priority Applications (5)
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|---|---|---|---|
| JP3049162A JP2974434B2 (ja) | 1990-03-15 | 1991-02-21 | 分泌性コンポネント含有組成物 |
| DE69131284T DE69131284T2 (de) | 1990-03-15 | 1991-03-13 | Sekretionskörper enthaltende Zusammensetzung |
| EP91103776A EP0446876B1 (en) | 1990-03-15 | 1991-03-13 | Secretory component-containing composition |
| NZ237452A NZ237452A (en) | 1990-03-15 | 1991-03-15 | Secretory component-containing compositions from milk |
| US07/669,089 US5179197A (en) | 1990-03-15 | 1991-03-15 | Secretory component-containing composition |
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| JP2-65489 | 1990-03-15 | ||
| JP3049162A JP2974434B2 (ja) | 1990-03-15 | 1991-02-21 | 分泌性コンポネント含有組成物 |
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| JP2974434B2 true JP2974434B2 (ja) | 1999-11-10 |
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Family Applications (1)
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|---|---|---|---|
| JP3049162A Expired - Fee Related JP2974434B2 (ja) | 1990-03-15 | 1991-02-21 | 分泌性コンポネント含有組成物 |
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| US6096870A (en) * | 1994-01-05 | 2000-08-01 | Sepragen Corporation | Sequential separation of whey |
| EP0876106B1 (en) * | 1996-01-26 | 2004-04-21 | Massey University | Method of separating and recovering proteins from a protein solution |
| AU1458497A (en) | 1996-01-31 | 1997-08-22 | John Stephen Ayers | Production of an immunoglobulin enriched fraction from whey protein solutions |
| US6172040B1 (en) | 1999-05-28 | 2001-01-09 | A. Satyanarayan Naidu | Immobilized lactoferrin antimicrobial agents and the use thereof |
| WO2005085287A1 (en) * | 2004-03-03 | 2005-09-15 | En-N-Tech, Inc. | Treatments for contaminant reduction in lactoferrin preparations and lactoferrin-containing compositions |
| US7378123B2 (en) | 2004-05-07 | 2008-05-27 | Wisconsin Alumni Research | Methods involving whey protein isolates |
| JP2008540462A (ja) * | 2005-05-10 | 2008-11-20 | マレー ゴールバーン コーオペラティブ コー リミテッド | 免疫グロブリン分画およびそのためのプロセス |
| NZ583234A (en) | 2007-07-10 | 2012-06-29 | Glanbia Nutritionals | Method for removing endotoxin from proteins |
| JP6431851B2 (ja) * | 2013-12-25 | 2018-11-28 | 株式会社海月研究所 | 水不溶性高分子化合物の分解物の連続的製造方法 |
| WO2018203548A1 (ja) | 2017-05-01 | 2018-11-08 | 日産化学株式会社 | 水溶性が改善されたアニオン性高分子化合物の調製方法 |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR2505615A1 (fr) * | 1981-05-15 | 1982-11-19 | Elf Aquitaine | Procede d'extraction de lactoferrine et d'immunoglobulines du lait |
| US4816252A (en) * | 1985-04-15 | 1989-03-28 | Protein Technology, Inc. | Product and process for transferring passive immunity to newborn domestic animals using ultrafiltered whey containing immunoglobulins |
-
1991
- 1991-02-21 JP JP3049162A patent/JP2974434B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 1991-03-13 DE DE69131284T patent/DE69131284T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1991-03-13 EP EP91103776A patent/EP0446876B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1991-03-15 US US07/669,089 patent/US5179197A/en not_active Expired - Fee Related
- 1991-03-15 NZ NZ237452A patent/NZ237452A/en unknown
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Ａｓｉａｎ Ｊ．Ｄａｉｒｙ Ｒｅｓ．，Ｖｏｌ．８（４），ｐ．２１９−２２２（１９８９） |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| DE69131284T2 (de) | 1999-11-25 |
| EP0446876A2 (en) | 1991-09-18 |
| DE69131284D1 (de) | 1999-07-08 |
| NZ237452A (en) | 1992-05-26 |
| US5179197A (en) | 1993-01-12 |
| JPH04211100A (ja) | 1992-08-03 |
| EP0446876A3 (en) | 1992-02-26 |
| EP0446876B1 (en) | 1999-06-02 |
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