JP2937396B2 - クレアチンキナーゼ及びピルビン酸キナーゼの測定用試薬 - Google Patents
クレアチンキナーゼ及びピルビン酸キナーゼの測定用試薬Info
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- JP2937396B2 JP2937396B2 JP7365690A JP7365690A JP2937396B2 JP 2937396 B2 JP2937396 B2 JP 2937396B2 JP 7365690 A JP7365690 A JP 7365690A JP 7365690 A JP7365690 A JP 7365690A JP 2937396 B2 JP2937396 B2 JP 2937396B2
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Description
【発明の詳細な説明】 本発明は，生体液中のクレアチンキナーゼ（以下,CKと
略記する。）とピルビン酸キナーゼ（以下,PKと略記す
る。）の同時測定用試薬に関するものである。
略記する。）とピルビン酸キナーゼ（以下,PKと略記す
る。）の同時測定用試薬に関するものである。
（従来の技術） CKは，脳および筋組織に存在し，臨床検査の領域にお
いて，筋疾患，神経性疾患，心疾患等の診断の目的でCK
活性が日常的に測定されている。CKは，（１）式の左右
両方向の反応を触媒する酵素である。
いて，筋疾患，神経性疾患，心疾患等の診断の目的でCK
活性が日常的に測定されている。CKは，（１）式の左右
両方向の反応を触媒する酵素である。
（略号は,CrP:クレアチンリン酸,Cr:クレアチン,ADP:ア
デノシン二リン酸,ATP:アデノシン三リン酸である。） 一方,PKは，生体内において心筋，骨格筋，脳に分布
しているが，近年,PKを測定することによって心筋梗塞
や筋疾患の診断に応用するという研究が報告され，注目
されるようになった。これは，心筋梗塞を診断する他の
測定項目，例えば，前述したCK,乳酸脱水素酵素等が心
筋梗塞という病態に対する特異性に今ひとつ欠けること
が考えられ，その点で優れているPKが注目されるように
なったのである。
デノシン二リン酸,ATP:アデノシン三リン酸である。） 一方,PKは，生体内において心筋，骨格筋，脳に分布
しているが，近年,PKを測定することによって心筋梗塞
や筋疾患の診断に応用するという研究が報告され，注目
されるようになった。これは，心筋梗塞を診断する他の
測定項目，例えば，前述したCK,乳酸脱水素酵素等が心
筋梗塞という病態に対する特異性に今ひとつ欠けること
が考えられ，その点で優れているPKが注目されるように
なったのである。
PKが触媒する反応は，（２）式に示すとおりである。
（略号は,PEP:ホスホエノールピルビン酸,Pyr:ピルビン
酸である。） さて,CKとPKとを心筋梗塞の診断という意味において
比較すると，前述したように病態に対する特異性という
点では,CK活性は軽度の運動によっても上昇することか
ら,PKと比較するとやや劣るのである。次に，心筋梗塞
の発作からの応答時間，すなわち発作が起こってから血
清中の各酵素量が異常値となってあらわれるまでの時間
をCKとPKとで比較すると,CKの方がかなり早期に異常値
となることが報告されている。つまり，心筋梗塞の診断
に際して特異性を要求するのであればPKを，素早い応答
を要求するのならばCKを測定すればよいわけだか，実際
の診断のためには，これら２つの性能の両方ともが必要
であるので,CKとPKを各々別個に測定し，総合的な判断
材料とするのが望ましいのである。
酸である。） さて,CKとPKとを心筋梗塞の診断という意味において
比較すると，前述したように病態に対する特異性という
点では,CK活性は軽度の運動によっても上昇することか
ら,PKと比較するとやや劣るのである。次に，心筋梗塞
の発作からの応答時間，すなわち発作が起こってから血
清中の各酵素量が異常値となってあらわれるまでの時間
をCKとPKとで比較すると,CKの方がかなり早期に異常値
となることが報告されている。つまり，心筋梗塞の診断
に際して特異性を要求するのであればPKを，素早い応答
を要求するのならばCKを測定すればよいわけだか，実際
の診断のためには，これら２つの性能の両方ともが必要
であるので,CKとPKを各々別個に測定し，総合的な判断
材料とするのが望ましいのである。
従来,CKの測定方法として種々の方法が考案されてき
た。その一つは（１）式の右方向の活性を測定する際，
生成するCrを色素と反応させて比色するあるいは蛍光
を測定する方法，ロシフエラーゼを用いる方法（特開
昭51−41597号公報，特開昭55−120796号公報，特開昭5
6−26200号公報及び特開昭57−105199号公報参照），
ホスホグリセリン酸キナーゼとグリセルアルデヒド−３
−リン酸脱水素酵素を用いる方法（特公昭59−34119号
公報，特開昭56−15500号公報参照），及びヘキソキ
ナーゼあるいはグルコキナーゼとグルコース−６−リン
酸脱水素酵素を用いる方法等がある。
た。その一つは（１）式の右方向の活性を測定する際，
生成するCrを色素と反応させて比色するあるいは蛍光
を測定する方法，ロシフエラーゼを用いる方法（特開
昭51−41597号公報，特開昭55−120796号公報，特開昭5
6−26200号公報及び特開昭57−105199号公報参照），
ホスホグリセリン酸キナーゼとグリセルアルデヒド−３
−リン酸脱水素酵素を用いる方法（特公昭59−34119号
公報，特開昭56−15500号公報参照），及びヘキソキ
ナーゼあるいはグルコキナーゼとグルコース−６−リン
酸脱水素酵素を用いる方法等がある。
これらの中でも測定値の信頼性，再現性，測定試薬の
安定性，経済性等の観点からグルコキナーゼとグルコー
ス−６−リン酸脱水素酵素が最も好ましい方法であると
提案されている（特開昭62−104598号公報参照）。
安定性，経済性等の観点からグルコキナーゼとグルコー
ス−６−リン酸脱水素酵素が最も好ましい方法であると
提案されている（特開昭62−104598号公報参照）。
また,PKの測定方法として，（２）式において生成す
るPyrをピルビン酸酸化酵素とペルオキシダーゼを作
用させて比色定量する方法，及びPyrを乳酸脱水素酵
素を作用させ，その際の還元型ニコチンアミドアデニン
ジヌクレオチドの減少速度を測定する方法等が知られて
いる。さらに“臨床化学”第18巻,130〜135頁（1989）
には，生成するATPをヘキソキナーゼとグルコース−６
−リン酸脱水素酵素を使用して測定する方法が提案され
ている。
るPyrをピルビン酸酸化酵素とペルオキシダーゼを作
用させて比色定量する方法，及びPyrを乳酸脱水素酵
素を作用させ，その際の還元型ニコチンアミドアデニン
ジヌクレオチドの減少速度を測定する方法等が知られて
いる。さらに“臨床化学”第18巻,130〜135頁（1989）
には，生成するATPをヘキソキナーゼとグルコース−６
−リン酸脱水素酵素を使用して測定する方法が提案され
ている。
一方，特公平１−46113号公報，特公平１−51786号公
報には，複数の酵素活性値の分析方法についての記載が
ある。それらには，乳酸脱水素酵素（以下LDHと略記す
る。）とロイシンアミノペプチダーゼ（以下LAPと略記
する。）の２成分，さらに，グルタミン酸オキザロ酢酸
トランスアミナーゼ（以下GOTと略記する。）とグルタ
ミン酸ピルビン酸トランスアミナーゼ（以下GPTと略記
する。）の２成分測定について記載されている。
報には，複数の酵素活性値の分析方法についての記載が
ある。それらには，乳酸脱水素酵素（以下LDHと略記す
る。）とロイシンアミノペプチダーゼ（以下LAPと略記
する。）の２成分，さらに，グルタミン酸オキザロ酢酸
トランスアミナーゼ（以下GOTと略記する。）とグルタ
ミン酸ピルビン酸トランスアミナーゼ（以下GPTと略記
する。）の２成分測定について記載されている。
（発明が解決しようとする課題） 心筋梗塞の診断を目的とする項目は,CK,PK以外にも，
例えば，乳酸脱水素酵素，オキシ酪酸脱水素酵素，アル
ドラーゼ，ミオグロビン等数多くあり，前述した総合的
な判断を行うためには１つでも多くの項目を測定しなけ
ればならず，そのためには比較的多量の検体（血清）が
必要となる。しかしながら，心筋梗塞の発作を起こして
いる患者からの多量の採血は，大きな苦痛を伴い，重大
な問題となる。
例えば，乳酸脱水素酵素，オキシ酪酸脱水素酵素，アル
ドラーゼ，ミオグロビン等数多くあり，前述した総合的
な判断を行うためには１つでも多くの項目を測定しなけ
ればならず，そのためには比較的多量の検体（血清）が
必要となる。しかしながら，心筋梗塞の発作を起こして
いる患者からの多量の採血は，大きな苦痛を伴い，重大
な問題となる。
また，多くの項目を各々別個に測定するには多少の時
間を要するが，発作がすでに起こっている場合には，可
及的速やかに外科的処置を行わねばならず，各項目の測
定は極めて迅速に行う必要があるといった問題もある。
間を要するが，発作がすでに起こっている場合には，可
及的速やかに外科的処置を行わねばならず，各項目の測
定は極めて迅速に行う必要があるといった問題もある。
上記のような従来法では,CKとPKはもちろんそれぞれ
別個に測定するわけであるので，前述したような多量の
採血を必要とすることと，測定結果がでるまでに多少の
時間を要するという問題があった。
別個に測定するわけであるので，前述したような多量の
採血を必要とすることと，測定結果がでるまでに多少の
時間を要するという問題があった。
特公平１−46113号公報，特公平１−51786号公報に記
載された方法は，いずれも複数の酵素活性を測定するた
めの装置の機構を提供しようとするものである。また,L
DHとLAP,GOTとGPTといった組み合わせは，酵素の至適測
定条件，例えば，至適pH,測定のための試薬の種類，共
役酵素等，まったく共通性に乏しいものであり，単に装
置の機構に応用する目的で,2つの独立した測定用試薬の
うち，どちらか１つの酵素の基質を第２試薬として分離
しているにすぎないという問題があった。
載された方法は，いずれも複数の酵素活性を測定するた
めの装置の機構を提供しようとするものである。また,L
DHとLAP,GOTとGPTといった組み合わせは，酵素の至適測
定条件，例えば，至適pH,測定のための試薬の種類，共
役酵素等，まったく共通性に乏しいものであり，単に装
置の機構に応用する目的で,2つの独立した測定用試薬の
うち，どちらか１つの酵素の基質を第２試薬として分離
しているにすぎないという問題があった。
本発明は，主に心筋梗塞発作患者の迅速かつ微量の血
清で定量が可能なCK,PKの同時測定用試薬を提供するこ
とを目的とするものである。
清で定量が可能なCK,PKの同時測定用試薬を提供するこ
とを目的とするものである。
（課題を解決するための手段） 本発明者らは，このような問題点を解決すべく鋭意研
究を重ねた結果,PK活性を測定した直後にCrPを添加す
る，あるいは逆にCK活性を測定した直後にPEPを添加す
ることによって,CK,PK活性を同時に測定することが可能
であることを見出し，本発明を完成した。
究を重ねた結果,PK活性を測定した直後にCrPを添加す
る，あるいは逆にCK活性を測定した直後にPEPを添加す
ることによって,CK,PK活性を同時に測定することが可能
であることを見出し，本発明を完成した。
すなわち、本発明は、同一検体のクレアチンキナーゼ
及びピルビン酸キナーゼを同時測定するための試薬であ
って、以下の成分を含む第１試薬及び第２試薬、 第１試薬：クレアチンリン酸； β−ニコチンアミドアデニンジヌクテオチ
ド又はそのリン酸； ヘキソキナーゼ又はグルコキナーゼ グルコース６−リン酸脱水素酵素 アデノシン二リン酸；及び グルコース 第２試薬：ホスホエノールピルビン酸 から構成されることを特徴とするクレアチンキナーゼ及
びピルビン酸キナーゼの測定用試薬を提供する。
及びピルビン酸キナーゼを同時測定するための試薬であ
って、以下の成分を含む第１試薬及び第２試薬、 第１試薬：クレアチンリン酸； β−ニコチンアミドアデニンジヌクテオチ
ド又はそのリン酸； ヘキソキナーゼ又はグルコキナーゼ グルコース６−リン酸脱水素酵素 アデノシン二リン酸；及び グルコース 第２試薬：ホスホエノールピルビン酸 から構成されることを特徴とするクレアチンキナーゼ及
びピルビン酸キナーゼの測定用試薬を提供する。
また、本発明は、同一検体のクレアチンキナーゼ及び
ピルビン酸キナーゼを同時測定するための試薬であっ
て、以下の成分を含む第１試薬及び第２試薬、 第１試薬：ホスホエノールピルビン酸； β−ニコチンアミドアデニンジヌクレオチ
ド又はそのリン酸； ヘキソキナーゼ又はグルコキナーゼ； グルコース６−リン酸脱水素酵素； アデノシン二リン酸；および グルコース 第２試薬：クレアチンリン酸 から構成されることを特徴とするクレアチンキナーゼ及
びピルビン酸キナーゼの測定用試薬を提供する。
ピルビン酸キナーゼを同時測定するための試薬であっ
て、以下の成分を含む第１試薬及び第２試薬、 第１試薬：ホスホエノールピルビン酸； β−ニコチンアミドアデニンジヌクレオチ
ド又はそのリン酸； ヘキソキナーゼ又はグルコキナーゼ； グルコース６−リン酸脱水素酵素； アデノシン二リン酸；および グルコース 第２試薬：クレアチンリン酸 から構成されることを特徴とするクレアチンキナーゼ及
びピルビン酸キナーゼの測定用試薬を提供する。
以下，本発明を詳細に説明する。
本発明におけるCK,PKの測定原理を次に示す。
CK活性測定原理 PK活性測定原理 （反応式中の略号は,HK:ヘキソキナーゼ,GlcK:グルコキ
ナーゼ,G6PDH:グルコース６−リン酸脱水素酵素,NAD
（Ｐ）：β−ニコチンアミドアデニンジヌクレオチド
（リン酸）,NAD（Ｐ）H:還元型β−ニコチンアミドアデ
ニンジヌクレオチド（リン酸）をそれぞれ示してい
る。） 本発明の試薬は，例えば,CrP,PEP,NAD（Ｐ）,HK（ま
たはGlcK）,G6PDH,ADP,グルコース等が主成分である
が，その他に通常の賦活剤，防腐剤，安定化剤を支障な
く使用することができる。
ナーゼ,G6PDH:グルコース６−リン酸脱水素酵素,NAD
（Ｐ）：β−ニコチンアミドアデニンジヌクレオチド
（リン酸）,NAD（Ｐ）H:還元型β−ニコチンアミドアデ
ニンジヌクレオチド（リン酸）をそれぞれ示してい
る。） 本発明の試薬は，例えば,CrP,PEP,NAD（Ｐ）,HK（ま
たはGlcK）,G6PDH,ADP,グルコース等が主成分である
が，その他に通常の賦活剤，防腐剤，安定化剤を支障な
く使用することができる。
本発明に用いられるHKとしては、その給源が限定され
るものではなく、ベーカーズ・イースト（Bakers Yeas
t）由来のもの等を使用することができる。また,HKより
もグルコースに対する特異性が高いGlcKを使用すること
もできる。GlcKを使用することもできる。GlcKとして
も，その給源が限定されるものではなく，微生物，動物
由来のもの等，各種のものを使用することができるが，
中でも最適生育温度が50℃ないし85℃である微生物の産
生するものが好ましい。そのような微生物としては，例
えば，バチルス・ステアロサーモフイルス，バチルス・
サーモプロテオリテイカス等のバチルス属，サーモアク
チノマイセス属，サーマス属等があげられる。
るものではなく、ベーカーズ・イースト（Bakers Yeas
t）由来のもの等を使用することができる。また,HKより
もグルコースに対する特異性が高いGlcKを使用すること
もできる。GlcKを使用することもできる。GlcKとして
も，その給源が限定されるものではなく，微生物，動物
由来のもの等，各種のものを使用することができるが，
中でも最適生育温度が50℃ないし85℃である微生物の産
生するものが好ましい。そのような微生物としては，例
えば，バチルス・ステアロサーモフイルス，バチルス・
サーモプロテオリテイカス等のバチルス属，サーモアク
チノマイセス属，サーマス属等があげられる。
G6PDHについても，その給源が限定されるものではな
いが，好ましくは補酵素としてNADPだけでなくNADにも
作用するG6PDH,例えば，ロイコノストツク・メセンテロ
イデス，シユードモナス・フルオレツセンス由来のもの
等が好ましい。
いが，好ましくは補酵素としてNADPだけでなくNADにも
作用するG6PDH,例えば，ロイコノストツク・メセンテロ
イデス，シユードモナス・フルオレツセンス由来のもの
等が好ましい。
また、賦活剤としては，例えば，酢酸マグネシウム，
硫酸マグネシウム等のマグネシウム塩類，酢酸カリウ
ム，硫酸カリウム等のカリウム塩類を，防腐剤として
は，例えば，アジ化ナトリウム等の公知のものを使用す
ることができる。さらに，安定剤としては，例えば，可
溶性デンプン，カルボキシメチルセルロース等の多糖類
とその誘導体，アルブミン，γ−グロブリン等のタンパ
ク質，ポリビニルアルコール，ポリエチレングリコール
等の水溶性高分子化合物を適宜使用することができる。
硫酸マグネシウム等のマグネシウム塩類，酢酸カリウ
ム，硫酸カリウム等のカリウム塩類を，防腐剤として
は，例えば，アジ化ナトリウム等の公知のものを使用す
ることができる。さらに，安定剤としては，例えば，可
溶性デンプン，カルボキシメチルセルロース等の多糖類
とその誘導体，アルブミン，γ−グロブリン等のタンパ
ク質，ポリビニルアルコール，ポリエチレングリコール
等の水溶性高分子化合物を適宜使用することができる。
本発明の試薬の各成分の濃度としては，一般に次の濃
度が好ましい。例えば,HKまたはGlcKを0.1〜40ユニツト
/ml,G6PDHを0.1〜40ユニツト/ml,CrPを２〜70mM,PEPを
0.1〜20mM,ADPを0.1〜20mM,NAD（Ｐ）を0.05〜20mM,グ
ルコースを１〜200mM,マグネシウム塩類を0.5〜50mM,カ
リウム塩類を0.5〜50mM.アデノシン一リン酸（以下,AMP
と略記する。）を0.2〜30mM,ジアデノシンペンタホスフ
エート（以下,AP5Aと略記する。）を１〜100μＭ使用す
ればい。より好ましくは,HKまたはGlcKを0.2〜20ユニツ
ト/ml,G6PDHを0.2〜20ユニツト/ml,GrPを５〜40mM,PEP
を0.5〜10mM,ADPを0.2〜10mM,NAD（Ｐ）を0.1〜10mM,グ
ルコースを２〜100mM,マグネシウム塩類を２〜15mM,カ
リウム塩類を２〜30mM,AMP0.5mM,AP5Aを２〜50μＭを使
用すればよい。
度が好ましい。例えば,HKまたはGlcKを0.1〜40ユニツト
/ml,G6PDHを0.1〜40ユニツト/ml,CrPを２〜70mM,PEPを
0.1〜20mM,ADPを0.1〜20mM,NAD（Ｐ）を0.05〜20mM,グ
ルコースを１〜200mM,マグネシウム塩類を0.5〜50mM,カ
リウム塩類を0.5〜50mM.アデノシン一リン酸（以下,AMP
と略記する。）を0.2〜30mM,ジアデノシンペンタホスフ
エート（以下,AP5Aと略記する。）を１〜100μＭ使用す
ればい。より好ましくは,HKまたはGlcKを0.2〜20ユニツ
ト/ml,G6PDHを0.2〜20ユニツト/ml,GrPを５〜40mM,PEP
を0.5〜10mM,ADPを0.2〜10mM,NAD（Ｐ）を0.1〜10mM,グ
ルコースを２〜100mM,マグネシウム塩類を２〜15mM,カ
リウム塩類を２〜30mM,AMP0.5mM,AP5Aを２〜50μＭを使
用すればよい。
本発明の試薬を使用してCK,PKを測定する場合には，
必ず２試薬系に分けて使用しなければならない。具体的
には,PEPを第２試薬,PEP以外のすべての試薬を第１試薬
とするか，もしくは逆にCrPを第２試薬とし,CrP以外の
すべての試薬を第１試薬としなければならない。測定
は，まず，一定量の第１試薬を30℃あるいは37℃に保温
したセルに入れ，次に，血清等のサンプルを添加し,340
nmにおける吸光度の変化速度を測定し,CK（あるいはP
K）活性を得る。次いで，この反応液に一定量の第２試
薬を添加し，さらに，同じく340nmにおける吸光度の変
化速度を測定し，第１試薬の反応による吸光度変化量を
差し引いて演算することによってPK（あるいはCK）活性
を得ることができる。
必ず２試薬系に分けて使用しなければならない。具体的
には,PEPを第２試薬,PEP以外のすべての試薬を第１試薬
とするか，もしくは逆にCrPを第２試薬とし,CrP以外の
すべての試薬を第１試薬としなければならない。測定
は，まず，一定量の第１試薬を30℃あるいは37℃に保温
したセルに入れ，次に，血清等のサンプルを添加し,340
nmにおける吸光度の変化速度を測定し,CK（あるいはP
K）活性を得る。次いで，この反応液に一定量の第２試
薬を添加し，さらに，同じく340nmにおける吸光度の変
化速度を測定し，第１試薬の反応による吸光度変化量を
差し引いて演算することによってPK（あるいはCK）活性
を得ることができる。
（実施例） 次に，実施例によって本発明を具体的に説明する。
実施例１ 第１試薬として107.5mMイミダゾール−酢酸緩衝液（p
H6.8）,25mMグルコース,7.5mMADP,2.5mMNADP,6.25mMAM
P,12.5μMAP5A,25mMN−アセチル−Ｌ−システイン,20mM
硫酸マグネシウム,40mM硫酸カリウム,5u/mlGlcK（生化
学工業（株））,5u/mlG6PDH（ベーリンガーマンハイム
山之内（株），ロイコノストツクメセンテロイデス由
来）,35mMCrPを調製した。第２試薬として20mMイミダゾ
ール−酢酸緩衝液（pH6.8）,10mMPEPを調製した。サン
プルとしては，市販の標準血清を使用した。
H6.8）,25mMグルコース,7.5mMADP,2.5mMNADP,6.25mMAM
P,12.5μMAP5A,25mMN−アセチル−Ｌ−システイン,20mM
硫酸マグネシウム,40mM硫酸カリウム,5u/mlGlcK（生化
学工業（株））,5u/mlG6PDH（ベーリンガーマンハイム
山之内（株），ロイコノストツクメセンテロイデス由
来）,35mMCrPを調製した。第２試薬として20mMイミダゾ
ール−酢酸緩衝液（pH6.8）,10mMPEPを調製した。サン
プルとしては，市販の標準血清を使用した。
測定は，まず,2.4mlの第１試薬を光路長1cmのセルに
とり，セルホルダー部分を37℃に保温した分光光度計内
で３分間インキユベートした。20μの標準血清を添加
し,340nmにおける１分間当りの吸光度変化量を測定し
た。この段階の吸光度変化量とサンプルの試薬による希
釈倍率等からCK活性値を得た。さらに,0.6mlの第２試薬
を添加し，同じく340nmにおける１分間当りの吸光度変
化量を測定した。この第２段階の吸光度変化量から第１
段階での吸光度変化量を差し引き，さらにサンプルの試
薬による希釈倍率等からPK活性値を算出した。このよう
な操作を10回同様に行い,CK,PK活性の同時測定における
再現性を調べた。
とり，セルホルダー部分を37℃に保温した分光光度計内
で３分間インキユベートした。20μの標準血清を添加
し,340nmにおける１分間当りの吸光度変化量を測定し
た。この段階の吸光度変化量とサンプルの試薬による希
釈倍率等からCK活性値を得た。さらに,0.6mlの第２試薬
を添加し，同じく340nmにおける１分間当りの吸光度変
化量を測定した。この第２段階の吸光度変化量から第１
段階での吸光度変化量を差し引き，さらにサンプルの試
薬による希釈倍率等からPK活性値を算出した。このよう
な操作を10回同様に行い,CK,PK活性の同時測定における
再現性を調べた。
その結果，CK:平均値98.2u/，標準偏差2.96,変動
係数3.01％，PK:平均値62.3u/，標準偏差1.57,変動
係数2.52％と，両活性測定ともに極めて良好な再現性で
あった。
係数3.01％，PK:平均値62.3u/，標準偏差1.57,変動
係数2.52％と，両活性測定ともに極めて良好な再現性で
あった。
（発明の効果） 本発明のCK,PKの同時測定用試薬は，基質の違い以
外，至適pH,測定のための試薬の種類とその至適量は勿
論のこと，その測定の目的，緊急性に至るまで共通した
ものであるので，経済的かつ効率的な同時測定を可能に
したものである。
外，至適pH,測定のための試薬の種類とその至適量は勿
論のこと，その測定の目的，緊急性に至るまで共通した
ものであるので，経済的かつ効率的な同時測定を可能に
したものである。
そして，心筋梗塞の診断の際に，心筋梗塞という病態
に対する特異性と緊急性の両方の性能を有し，しかも迅
速な測定を可能としたものである。
に対する特異性と緊急性の両方の性能を有し，しかも迅
速な測定を可能としたものである。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 永田 和彦 京都府宇治市宇治小桜23番地 ユニチカ 株式会社中央研究所内 (72)発明者 坪田 博幸 千葉県八千代市大和田新田1144 株式会 社ヤトロン内 (72)発明者 坂元 浩二 千葉県八千代市大和田新田1144 株式会 社ヤトロン内 (56)参考文献 特開 昭62−104598（ＪＰ，Ａ) 臨床化学，第18巻，第３号（1989) 130−135 (58)調査した分野(Int.Cl.6，ＤＢ名) C12Q 1/00 - 3/00 ＢＩＯＳＩＳ（ＤＩＡＬＯＧ) ＷＰＩ（ＤＩＡＬＯＧ)
Claims (2)
- 【請求項１】同一検体のクレアチンキナーゼ及びピルビ
ン酸キナーゼを同時測定するための試薬であって、以下
の成分を含む第１試薬及び第２試薬、 第１試薬：クレアチンリン酸； β−ニコチンアミドアデニンジヌクレオチド又はそのリ
ン酸； ヘキソキナーゼ又はグルコキナーゼ； グルコース６−リン酸脱水素酵素； アデノシン二リン酸；および グルコース 第２試薬：ホスホエノールピルビン酸 から構成されることを特徴とするクレアチンキナーゼ及
びピルビン酸キナーゼの測定用試薬。 - 【請求項２】同一検体のクレアチンキナーゼ及びピルビ
ン酸キナーゼを同時測定するための試薬であって、以下
の成分を含む第１試薬及び第２試薬、 第１試薬：ホスホエノールピルビン酸； β−ニコチンアミドアデニンジヌクレオチド又はそのリ
ン酸； ヘキソキナーゼ又はグルコキナーゼ； グルコース６−リン酸脱水素酵素； アデノシン二リン酸；および グルコース 第２試薬：クレアチンリン酸 から構成されることを特徴とするクレアチンキナーゼ及
びピルビン酸キナーゼの測定用試薬。
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| JP7365690A JP2937396B2 (ja) | 1990-03-23 | 1990-03-23 | クレアチンキナーゼ及びピルビン酸キナーゼの測定用試薬 |
Applications Claiming Priority (1)
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|---|---|---|---|
| JP7365690A JP2937396B2 (ja) | 1990-03-23 | 1990-03-23 | クレアチンキナーゼ及びピルビン酸キナーゼの測定用試薬 |
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| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH03272699A JPH03272699A (ja) | 1991-12-04 |
| JP2937396B2 true JP2937396B2 (ja) | 1999-08-23 |
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-
1990
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|---|
| 臨床化学，第１８巻，第３号（１９８９）１３０−１３５ |
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|---|---|
| JPH03272699A (ja) | 1991-12-04 |
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