JP2872809B2 - モノシアロガングリオシドｇｍ▲下１▼またはその誘導体を含有する，パーキンソン病の治療に適する医薬組成物 - Google Patents
モノシアロガングリオシドｇｍ▲下１▼またはその誘導体を含有する，パーキンソン病の治療に適する医薬組成物Info
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Description
【発明の詳細な説明】 技術分野 本発明は、モノシアロガングリオシドGM1またはその
誘導体を含有する、パーキンソン病の治療に適する医薬
組成物に関する。
誘導体を含有する、パーキンソン病の治療に適する医薬
組成物に関する。
先行技術 パーキンソン病は神経変性性の疾患で、高い発症率を
有し（米国では100、000人につき20人）、一般的には45
才以上の人間に発症する。
有し（米国では100、000人につき20人）、一般的には45
才以上の人間に発症する。
パーキンソン病はドーパミン作動性欠乏によって特徴
づけられ、これは一連のニューロン異変をもたらし、そ
の結果、運動不能症、筋肉の硬直、および振せんが起こ
る。
づけられ、これは一連のニューロン異変をもたらし、そ
の結果、運動不能症、筋肉の硬直、および振せんが起こ
る。
総体的症状は、黒質および緻密層部におけるDA（ドー
パミン）産生ニューロンの変性により、線条体のドーパ
ミン作動性神経支配の最低85％が失われると発現すると
考えられている（Kish S.J.ら,The New England J.of M
ed.,318,876,1988）。
パミン）産生ニューロンの変性により、線条体のドーパ
ミン作動性神経支配の最低85％が失われると発現すると
考えられている（Kish S.J.ら,The New England J.of M
ed.,318,876,1988）。
パーキンソン病の薬理学的治療が25年以上も研究され
てきたが、この疾患が特にドーパミン作動系の緩慢で進
行性の変性ゆえにいまだに重大な問題であることは強調
されるべきである（McGeer P.L.ら,Ann.Neurol.,24,57
4,1988）。
てきたが、この疾患が特にドーパミン作動系の緩慢で進
行性の変性ゆえにいまだに重大な問題であることは強調
されるべきである（McGeer P.L.ら,Ann.Neurol.,24,57
4,1988）。
公知のように、Ｌ−ドーパと末梢デカルボキシラーゼ
阻害剤（カルビドパまたはベンセラジド）やモノアミン
オキシダーゼ阻害剤（Shoulson I.ら，“Effect of Dep
renyl on the progression of disability in early Pa
rkinson′s disease",The New England J.of Med.,16,1
364−1371,1989）の併用に基づく治療、並びに長期作用
性直接ドーパミン作動性アゴニスト（ペルゴリド、カベ
ルゴリン）に基づく治療は、初期症例の大多数において
臨床状態を相当改善し、またいくつかの症例においては
症状の完全な制御をもたらしている。
阻害剤（カルビドパまたはベンセラジド）やモノアミン
オキシダーゼ阻害剤（Shoulson I.ら，“Effect of Dep
renyl on the progression of disability in early Pa
rkinson′s disease",The New England J.of Med.,16,1
364−1371,1989）の併用に基づく治療、並びに長期作用
性直接ドーパミン作動性アゴニスト（ペルゴリド、カベ
ルゴリン）に基づく治療は、初期症例の大多数において
臨床状態を相当改善し、またいくつかの症例においては
症状の完全な制御をもたらしている。
しかし、治療後数年たつと（すなわち最低２〜３年か
ら一般には最大10年またはそれ以上）、臨床的には主と
して種々の振せんおよび運動障害により特徴づけられる
諸症状がほとんどの患者（80〜90％）にまた現われる。
ら一般には最大10年またはそれ以上）、臨床的には主と
して種々の振せんおよび運動障害により特徴づけられる
諸症状がほとんどの患者（80〜90％）にまた現われる。
この動的振せん［特にオンオフ（on−off）現象］お
よび過剰な筋活動は、治療によって病気がおさまり数年
間安寧に過ごした後に悪化状態に逆戻りする患者をひど
く狼狽させ、彼／彼女が十分な家族生活、社会生活およ
び職業生活を享受するのを妨げる。
よび過剰な筋活動は、治療によって病気がおさまり数年
間安寧に過ごした後に悪化状態に逆戻りする患者をひど
く狼狽させ、彼／彼女が十分な家族生活、社会生活およ
び職業生活を享受するのを妨げる。
パーキンソン病の治療が直面する主な問題、すなわち
病勢悪化期、を解決するために、現在臨床的実践ではレ
ボドーパとベンゼラジドまたはカルビドーパの併用に基
づく徐放性組成物、長期作用性直接ドーパミン作動性ア
ゴニスト（ペルゴリド、カベルゴリン）および注射法
（リスリドおよびアポモルフィンの皮下注射）を採用し
ている。しかし、現在にいたるまでいかなる治療も、こ
の病気の進行期に起こるすべての合併症の根本にある異
変の進行を遅くする、または止めるのに有効であるとは
実証されていない。
病勢悪化期、を解決するために、現在臨床的実践ではレ
ボドーパとベンゼラジドまたはカルビドーパの併用に基
づく徐放性組成物、長期作用性直接ドーパミン作動性ア
ゴニスト（ペルゴリド、カベルゴリン）および注射法
（リスリドおよびアポモルフィンの皮下注射）を採用し
ている。しかし、現在にいたるまでいかなる治療も、こ
の病気の進行期に起こるすべての合併症の根本にある異
変の進行を遅くする、または止めるのに有効であるとは
実証されていない。
公知のように、Ｌ−ドーパとそのヒドロキシル化され
た代謝物（TOPA）は神経毒性作用を生じ、患者の能力を
損なう神経変性性病状の進行を悪化させる可能性がある
（Only J.W.ら，“Excitotoxicity of L−dopa and 6−
OH−dopa:implications for Parkinson′s and Hunting
ton′s diseases",Exp.Neurol.,108,268−272,1990;Res
enberg P.A.ら、“2,4,5−Trihydroxyphenyl alanine i
n solution forms a non−Ｎ−methyl−Ｄ−aspartate
glutamatergic agonist and neurotoxin",Proc.Natl.Ac
ad.Sci.USA,88,4865−4869,1991;Newcomer T.A.ら，“D
etection of TOPA（６−OH−DOPA）and TOPA quinone b
y HPLC reveals a spontaneous DOPA to TOPA conversi
on in aqueous solutions",Excitatory Amino Acids:Ex
cito−toxicity Ip.83）。
た代謝物（TOPA）は神経毒性作用を生じ、患者の能力を
損なう神経変性性病状の進行を悪化させる可能性がある
（Only J.W.ら，“Excitotoxicity of L−dopa and 6−
OH−dopa:implications for Parkinson′s and Hunting
ton′s diseases",Exp.Neurol.,108,268−272,1990;Res
enberg P.A.ら、“2,4,5−Trihydroxyphenyl alanine i
n solution forms a non−Ｎ−methyl−Ｄ−aspartate
glutamatergic agonist and neurotoxin",Proc.Natl.Ac
ad.Sci.USA,88,4865−4869,1991;Newcomer T.A.ら，“D
etection of TOPA（６−OH−DOPA）and TOPA quinone b
y HPLC reveals a spontaneous DOPA to TOPA conversi
on in aqueous solutions",Excitatory Amino Acids:Ex
cito−toxicity Ip.83）。
パーキンソン病の進行を遅くするまたは抑制すること
によりこの病気の進展を緩和することが可能な新しい薬
理学的治療法を開発するために、動物を用いた実験的研
究がいくつかなされた。それらは特にパーキンソン病に
おいて細胞の死、とりわけ黒質細胞の死、を引き起こす
神経生物学的メカニズムの同定を目的とするものであっ
た。
によりこの病気の進展を緩和することが可能な新しい薬
理学的治療法を開発するために、動物を用いた実験的研
究がいくつかなされた。それらは特にパーキンソン病に
おいて細胞の死、とりわけ黒質細胞の死、を引き起こす
神経生物学的メカニズムの同定を目的とするものであっ
た。
パーキンソン病の症状と酷似した神経病理学的および
神経薬理学的症状を作り出すことができる毒性物質であ
るメチルフェニルテトラヒドロピリジン（MPTP）を用い
て得た情報は非常に重要なものである（Langston J.W.,
“MPTP and Parkinson′s disease",Trends in Neurosc
iences,8,2,79−83,1985）。
神経薬理学的症状を作り出すことができる毒性物質であ
るメチルフェニルテトラヒドロピリジン（MPTP）を用い
て得た情報は非常に重要なものである（Langston J.W.,
“MPTP and Parkinson′s disease",Trends in Neurosc
iences,8,2,79−83,1985）。
MPTPの神経毒性は、モノアミンオキシダーゼＢの触媒
作用により、酸化してMPP+イオンになることに起因する
とされていた。MPP+はドーパミン作動性細胞末端によっ
て積極的に取り込まれ、NADH依存性基質のミトコンドリ
アでの酸化に対して抑制作用を及ぼす。これは、黒質お
よび緻密層部のドーパミン作動性ニューロンの喪失、お
よび線条体を神経支配するドーパミン作動性線維の喪失
に帰着し、その結果生化学的および行動的欠陥をもたら
す。
作用により、酸化してMPP+イオンになることに起因する
とされていた。MPP+はドーパミン作動性細胞末端によっ
て積極的に取り込まれ、NADH依存性基質のミトコンドリ
アでの酸化に対して抑制作用を及ぼす。これは、黒質お
よび緻密層部のドーパミン作動性ニューロンの喪失、お
よび線条体を神経支配するドーパミン作動性線維の喪失
に帰着し、その結果生化学的および行動的欠陥をもたら
す。
ガングリオシド類、すなわちニューロン膜に存在する
複合シアログリコスフィンゴ脂質（Ando S.,“Ganglios
ides in the nervous system",Neuroch.Inst.,5,507−5
37,1983）が、いくつかの急性疾患障害実験モデルの中
枢神経系において神経病的経過を改善することも知られ
ている。この結果に基づき、GM1は臨床に適用され、大
脳虚血発作の治療（U.S.4,940,694 dated 10th July,19
90;Argentino C.ら，“GM1 ganglioside therapy in ac
ute ischemic stroke",Stroke,20,1143−1149,1989）お
よび外傷性脊髄損傷の治療（1991年12月23日付特許出願
PD 91 000234;Geisler F.H.,“Recovery of mortor fun
ction after spinal−cord injury−a randomized plac
ebo−controlled trial with GM1 ganglioside",The Ne
w England J.of Med.,324,1829−1838,1991）がなされ
た。
複合シアログリコスフィンゴ脂質（Ando S.,“Ganglios
ides in the nervous system",Neuroch.Inst.,5,507−5
37,1983）が、いくつかの急性疾患障害実験モデルの中
枢神経系において神経病的経過を改善することも知られ
ている。この結果に基づき、GM1は臨床に適用され、大
脳虚血発作の治療（U.S.4,940,694 dated 10th July,19
90;Argentino C.ら，“GM1 ganglioside therapy in ac
ute ischemic stroke",Stroke,20,1143−1149,1989）お
よび外傷性脊髄損傷の治療（1991年12月23日付特許出願
PD 91 000234;Geisler F.H.,“Recovery of mortor fun
ction after spinal−cord injury−a randomized plac
ebo−controlled trial with GM1 ganglioside",The Ne
w England J.of Med.,324,1829−1838,1991）がなされ
た。
GM1の内部エステル誘導体（AGF2）と、低用量で迅速
に作用するその治療効果、特に急性虚血モデルに対する
治療効果もまた公知である（Cahn R.ら，“Influence o
f monosialoganglioside inner ester on neurologic r
ecovery after global cerebral ischemia in monkey
s",Stroke 20,652−656,1989）。
に作用するその治療効果、特に急性虚血モデルに対する
治療効果もまた公知である（Cahn R.ら，“Influence o
f monosialoganglioside inner ester on neurologic r
ecovery after global cerebral ischemia in monkey
s",Stroke 20,652−656,1989）。
さらに、GM1エステル誘導体がその前駆体であるGM1よ
り薬物速度論的に有利であることはすでに記述されてい
る（Bellato P.ら，“Disposition of exogenous triti
um labelled GM1 lactone in the rat",Neurochem.,pp.
1−6,1991;EP patent 85401291.1）。
り薬物速度論的に有利であることはすでに記述されてい
る（Bellato P.ら，“Disposition of exogenous triti
um labelled GM1 lactone in the rat",Neurochem.,pp.
1−6,1991;EP patent 85401291.1）。
要旨 驚くべきことに、モノシアロガングリオシド（G
M1）、その内部エステル誘導体（AGF2）、そのメチルエ
ステル（AGF4）およびＮ−ジクロロアセチルリソGM1よ
りなる群から選ばれた化合物は、Ｌ−ドーパによる長期
治療によって誘発される神経変性を防止または回復させ
るために、慢性パーキンソン病の治療に効果的に使用し
得ることが判明した。
M1）、その内部エステル誘導体（AGF2）、そのメチルエ
ステル（AGF4）およびＮ−ジクロロアセチルリソGM1よ
りなる群から選ばれた化合物は、Ｌ−ドーパによる長期
治療によって誘発される神経変性を防止または回復させ
るために、慢性パーキンソン病の治療に効果的に使用し
得ることが判明した。
事実、上記の化合物は、TOPA等のＬ−ドーパ代謝物の
神経毒性に対し中和作用を及ぼすのである。
神経毒性に対し中和作用を及ぼすのである。
よって、本発明はパーキンソン病の治療に有効な医薬
組成物の製造における上記化合物の使用、および当該治
療方法に関するものである。
組成物の製造における上記化合物の使用、および当該治
療方法に関するものである。
発明の詳細な説明 モノシアロガングリオシドGM1、その内部エステル誘
導体AGF2、およびそのメチルエステルAGF4を用いたパー
キンソン病の治療の特徴および有利な点を、以下にサル
を使ったテストおよび試験管テストに言及しながらより
詳細に説明する。
導体AGF2、およびそのメチルエステルAGF4を用いたパー
キンソン病の治療の特徴および有利な点を、以下にサル
を使ったテストおよび試験管テストに言及しながらより
詳細に説明する。
上記の実験的テストは、本発明の化合物をパーキンソ
ン病の治療に有効に使用し得ることを示した。
ン病の治療に有効に使用し得ることを示した。
また、上記化合物およびＮ−ジクロロアセチルリソGM
1（LIGA20）は、パーキンソン病の治療に使用される他
の医薬品、たとえばＬ−ドーパやBDNF（脳由来神経栄養
因子）などと有利に併用し得ることが判明した。
1（LIGA20）は、パーキンソン病の治療に使用される他
の医薬品、たとえばＬ−ドーパやBDNF（脳由来神経栄養
因子）などと有利に併用し得ることが判明した。
これから報告する実験は、特に以下のことを示した： −MPTP（１−メチル−４−フェニル−１、２、３、６−
テトラヒドロピリジン）投与により誘発された深刻なパ
ーキンソン病の全症状を示すサルを、GM1、その誘導体A
GF2およびAGF4で治療すると、パーキンソン病に特徴的
な運動障害諸症状から有意に回復し（運動不能症および
筋肉硬直のほぼ完全な治癒）、また同時に認識欠陥から
も回復した。
テトラヒドロピリジン）投与により誘発された深刻なパ
ーキンソン病の全症状を示すサルを、GM1、その誘導体A
GF2およびAGF4で治療すると、パーキンソン病に特徴的
な運動障害諸症状から有意に回復し（運動不能症および
筋肉硬直のほぼ完全な治癒）、また同時に認識欠陥から
も回復した。
−GM1、その誘導体AGF2、AGF4およびLIGA20は、ドーパ
ミン作動性中脳ニューロンおよび小脳ニューロンの培養
物において、TOPA（Ｌ−ドーパ酸化物）によって誘発さ
れる神経毒性を防止した。
ミン作動性中脳ニューロンおよび小脳ニューロンの培養
物において、TOPA（Ｌ−ドーパ酸化物）によって誘発さ
れる神経毒性を防止した。
GM1を用いた生体実験を、リスザル15匹（雄または
雌）およびマカクザル４匹を使って実施した。
雌）およびマカクザル４匹を使って実施した。
サルの筋肉内に塩酸ケタミン5mg/kgを注射して麻酔し
た後、MPTP生理食塩水溶液を以下のように投与した： −0.35mg/kg/用量、静脈注射（マカクザル） −2mg/kg/用量、筋肉注射（リスザル） パーキンソン病運動障害の全症状、すなわち運動不能
症、刺激への反応欠如、および登ること・自律的に食べ
ること・毛づくろいができない、が完全に出現するまで
MPTPを３日ごとに投与した。最後のMPTP投与から48〜60
時間のうちに最低30ポイント（図１の説明中に定義され
ている）が獲得されなければならなかった。次に、２種
類のサルを無作為に２つの治療グループ、すなわちGM1
による治療グループと生理食塩水による治療グループに
分けた。
た後、MPTP生理食塩水溶液を以下のように投与した： −0.35mg/kg/用量、静脈注射（マカクザル） −2mg/kg/用量、筋肉注射（リスザル） パーキンソン病運動障害の全症状、すなわち運動不能
症、刺激への反応欠如、および登ること・自律的に食べ
ること・毛づくろいができない、が完全に出現するまで
MPTPを３日ごとに投与した。最後のMPTP投与から48〜60
時間のうちに最低30ポイント（図１の説明中に定義され
ている）が獲得されなければならなかった。次に、２種
類のサルを無作為に２つの治療グループ、すなわちGM1
による治療グループと生理食塩水による治療グループに
分けた。
MPTPの投与回数と最初の全症状評価は、両グループに
ついて同一であった。
ついて同一であった。
GM1を長期にわたって以下の投与量で筋肉内に投与し
た： −マカクザルには15mg/kg/日 −リスザルには30mg/kg/日。
た： −マカクザルには15mg/kg/日 −リスザルには30mg/kg/日。
対照グループには生理食塩水水を投与した。
実験第１週には、サルは集中的食物療法も受けた。
サルの神経学的および行動的機能の記録は調査開始の
１〜２週間前からスタートし、調査の全期間を通して継
続した。
１〜２週間前からスタートし、調査の全期間を通して継
続した。
特に以下の機能を記録した：全般的活動、登る能力、
移行／歩きぶり、上下肢の動き、細かい運動能力、運動
緩徐／運動不能症、運動異状症（ジスキネジー）／失調
症（ジストニー）、姿勢、振せん、バランス、毛づくろ
い能力、運動中の突然のすくみ、及び食べる能力。
移行／歩きぶり、上下肢の動き、細かい運動能力、運動
緩徐／運動不能症、運動異状症（ジスキネジー）／失調
症（ジストニー）、姿勢、振せん、バランス、毛づくろ
い能力、運動中の突然のすくみ、及び食べる能力。
マカクザルの試験では、顔の表情変化および防御反応
も調べた。
も調べた。
リスザルの試験は単純な運動機能（例えば深い容器の
中にいれた食物をつかむ）に関するもので、反応時間の
測定と手足の機能的使用の評価を目的としたものであっ
た。具体的には、サルは直径9.5mmの窪みをもつプレキ
シガラス製プラットフォームからレーズンをつかみ取る
訓練を受けた。つかみ取り開始までに要した時間と６分
の制限時間内につかんだレーズンの数を記録した。上記
の試験はすべて１日の最初の食事の前に実施した。
中にいれた食物をつかむ）に関するもので、反応時間の
測定と手足の機能的使用の評価を目的としたものであっ
た。具体的には、サルは直径9.5mmの窪みをもつプレキ
シガラス製プラットフォームからレーズンをつかみ取る
訓練を受けた。つかみ取り開始までに要した時間と６分
の制限時間内につかんだレーズンの数を記録した。上記
の試験はすべて１日の最初の食事の前に実施した。
マカクザルの行動的および神経学的機能の試験も行な
った。マカクザルにもまた物体をつかむ訓練をしたが、
これはMPTPを投与されたサルの運動および認識機能の指
標となることが実証されたものである（Taylor J.R.ら,
Brain,113,617,1990）。
った。マカクザルにもまた物体をつかむ訓練をしたが、
これはMPTPを投与されたサルの運動および認識機能の指
標となることが実証されたものである（Taylor J.R.ら,
Brain,113,617,1990）。
つかみ取り試験はDiamond A.,“The development and
neural bases of higher cognitive functions",Annal
s of the New York Academy of Sciences,vol.608,A.Di
amond Ed.（The New York Academy of Sciences,New Yo
rk,637−676,1990）にしたがって実施した。
neural bases of higher cognitive functions",Annal
s of the New York Academy of Sciences,vol.608,A.Di
amond Ed.（The New York Academy of Sciences,New Yo
rk,637−676,1990）にしたがって実施した。
要約すると、サルは檻の外に腕を伸ばして、左右に動
きまた回転するプラットフォームに固定された、片側が
開いているプレキシガラス製の箱（15cm×15cm××5c
m）から食物（レーズンまたはリンゴ）をつかみ取るよ
う訓練された。
きまた回転するプラットフォームに固定された、片側が
開いているプレキシガラス製の箱（15cm×15cm××5c
m）から食物（レーズンまたはリンゴ）をつかみ取るよ
う訓練された。
箱の開いた側はサルの正面にくることも左側か右側に
くることもあった。各実験は30回のテストからなった。
次の事柄が記録された：成功した腕伸ばし（最初の試み
で食物をつかんだ）、正しい腕伸ばし（いろいろ試みて
から食物をつかんだ）、および「障害」への腕伸ばし
（すなわち、開いている側に届くまで箱の回りに腕を伸
ばすのではなく、閉まっている側に伸ばす）。５分以内
に全く食物がつかめない場合は、そのテストは「反応な
し」と判定された。
くることもあった。各実験は30回のテストからなった。
次の事柄が記録された：成功した腕伸ばし（最初の試み
で食物をつかんだ）、正しい腕伸ばし（いろいろ試みて
から食物をつかんだ）、および「障害」への腕伸ばし
（すなわち、開いている側に届くまで箱の回りに腕を伸
ばすのではなく、閉まっている側に伸ばす）。５分以内
に全く食物がつかめない場合は、そのテストは「反応な
し」と判定された。
ドーパミン（DA）とその代謝物、例えばホモバニリン
酸（HVA）や3,4−ジヒドロフェニル酢酸（DOPAC）など
を測定するため、死後、線条体組織の神経化学的検査を
行なった。DAとその代謝物の線条体におけるレベルは、
電気化学的検出器を用いた高速液体クロマトグラフィー
（HPLC）により定量した（Schneider J.S.,Brain Res.,
24,534,1990）。
酸（HVA）や3,4−ジヒドロフェニル酢酸（DOPAC）など
を測定するため、死後、線条体組織の神経化学的検査を
行なった。DAとその代謝物の線条体におけるレベルは、
電気化学的検出器を用いた高速液体クロマトグラフィー
（HPLC）により定量した（Schneider J.S.,Brain Res.,
24,534,1990）。
さらに、MPTPを投与したリスザル（６匹）に、AGF2と
AGF420mg/1g/日の用量で６週間筋肉内投与した後の運動
行動を評価する目的で、予備テストを実施した（実験条
件および運動指数評価は上述のものと同じ）。
AGF420mg/1g/日の用量で６週間筋肉内投与した後の運動
行動を評価する目的で、予備テストを実施した（実験条
件および運動指数評価は上述のものと同じ）。
行動および神経学的テストの結果、ならびに神経免疫
組織化学的検査の結果を以下に報告する。
組織化学的検査の結果を以下に報告する。
行動的・神経学的テストは次のことを示した： −MPTP投与は深刻なパーキンソン病の全症状を引き起こ
す：運動行動の変化（図１参照）および顕著な認識欠陥
（図２参照）。
す：運動行動の変化（図１参照）および顕著な認識欠陥
（図２参照）。
−６〜８週間の調査の終了時には、GM1の長期間投与は
パーキンソン病の全症状を、ほとんど完全に（86〜89
％）回復した運動行動にまで戻すことができる。GM1の
効果は３〜４週間治療した時点ですでに明らかである
（図１参照）。同様の結果が、リスザルを用いた予備テ
ストでも、AFG2とAFG4の投与の後に得られた［第６週に
おける運動行動平均ポイント：生理食塩水＝40（２
匹）;AGF2＝７（２匹）;AGF4＝９（２匹）］。
パーキンソン病の全症状を、ほとんど完全に（86〜89
％）回復した運動行動にまで戻すことができる。GM1の
効果は３〜４週間治療した時点ですでに明らかである
（図１参照）。同様の結果が、リスザルを用いた予備テ
ストでも、AFG2とAFG4の投与の後に得られた［第６週に
おける運動行動平均ポイント：生理食塩水＝40（２
匹）;AGF2＝７（２匹）;AGF4＝９（２匹）］。
−GM1は、運動認識欠陥の回復にも効果がある（「物体
つかみ取り」テストにより決定される−図２参照）。
つかみ取り」テストにより決定される−図２参照）。
ここで図１および図２を詳細に検討する。図１はMPTP
およびGM1が運動行動に及ぼした影響を示す。リスザル
の行動／運動ポイント（Ａ）およびマカクザルのそれ
（Ｂ）は縦軸に示してある。棒は平均ポイント［±標準
偏差（S.D.）］を表わす；正常ポイントは０で、MPTPポ
イントは最後のMPTP注射の後であってGM1と生理食塩水
の投与が始まる前に記録されたポイントである。治療開
始後３〜４週間以内にGM1で治療したサルは、生理食塩
水で治療したサルに比較すると、改善された運動機能を
示すようになった。調査終了時には、GM1で治療したサ
ルはほぼ正常な行動を示したが、生理食塩水で治療した
サルは深刻なパーキンソン病全症状を示した［＊ｐ＜0.
01（Ａ）；＊Ｐ＜0.05（Ｂ），マン−ウィットニー（Ma
nn−Whitney）テスト］。
およびGM1が運動行動に及ぼした影響を示す。リスザル
の行動／運動ポイント（Ａ）およびマカクザルのそれ
（Ｂ）は縦軸に示してある。棒は平均ポイント［±標準
偏差（S.D.）］を表わす；正常ポイントは０で、MPTPポ
イントは最後のMPTP注射の後であってGM1と生理食塩水
の投与が始まる前に記録されたポイントである。治療開
始後３〜４週間以内にGM1で治療したサルは、生理食塩
水で治療したサルに比較すると、改善された運動機能を
示すようになった。調査終了時には、GM1で治療したサ
ルはほぼ正常な行動を示したが、生理食塩水で治療した
サルは深刻なパーキンソン病全症状を示した［＊ｐ＜0.
01（Ａ）；＊Ｐ＜0.05（Ｂ），マン−ウィットニー（Ma
nn−Whitney）テスト］。
図1/Cは、リスザルの食物つかみ取りテストにおける
反応開始時間を示す。正常なサルは食物容器を見るとす
ぐ反応を開始した。MPTP投与後の初期状態では、すべて
のサルが反応開始に遅れを示した。しかし、治療後３週
間以内に、GM1で治療したサルは、生理食塩水で治療し
たサルよりも先に反応を開始するようになった（＊ｐ＜
0.005）。調査終了時には、前者はほどんどすぐに反応
を開始したが、後者はまだ運動不能症的で運動緩徐的で
あった（＊ｐ＜0.002）。
反応開始時間を示す。正常なサルは食物容器を見るとす
ぐ反応を開始した。MPTP投与後の初期状態では、すべて
のサルが反応開始に遅れを示した。しかし、治療後３週
間以内に、GM1で治療したサルは、生理食塩水で治療し
たサルよりも先に反応を開始するようになった（＊ｐ＜
0.005）。調査終了時には、前者はほどんどすぐに反応
を開始したが、後者はまだ運動不能症的で運動緩徐的で
あった（＊ｐ＜0.002）。
図1/Dは、テスト中につかみ取られた食物の百分率を
示す。正常なリスザルは、100％の食物をつかみ取るこ
とに成功した。MPTP投与の直後には、すべてのサルが危
機にさらされ、約15％の食物しかつかみ取れなかった。
治療開始３週間目にGM1で治療したサルは、生理食塩水
で治療したサルに比較すると、より大量の食物をつかみ
取るようになった。調査終了時には、前者は100％の食
物をつかみ取ったが、後者は25％の食物をつかみ取るだ
けであった（＊ｐ＜0.05）。
示す。正常なリスザルは、100％の食物をつかみ取るこ
とに成功した。MPTP投与の直後には、すべてのサルが危
機にさらされ、約15％の食物しかつかみ取れなかった。
治療開始３週間目にGM1で治療したサルは、生理食塩水
で治療したサルに比較すると、より大量の食物をつかみ
取るようになった。調査終了時には、前者は100％の食
物をつかみ取ったが、後者は25％の食物をつかみ取るだ
けであった（＊ｐ＜0.05）。
図２は、MPTPおよびGM1が「物体つかみ取り」テスト
においてマカクザルに及ぼした影響を示す。
においてマカクザルに及ぼした影響を示す。
図2/Aは、正しい反応（物体が結果的にサルによって
つかみ取られる）の百分率を、図2/Bは成功した試み
（最初の試みで食物がつかみ取られる）の百分率を示
す。若干の訓練の後、正常なサルはこの課題をほぼ完全
にこなせるようになった。何ら深刻な運動障害を引き起
こさない低用量MPTPの実験的な長期間投与においては、
サルがこの課題をこなすのは非常に困難であった。
つかみ取られる）の百分率を、図2/Bは成功した試み
（最初の試みで食物がつかみ取られる）の百分率を示
す。若干の訓練の後、正常なサルはこの課題をほぼ完全
にこなせるようになった。何ら深刻な運動障害を引き起
こさない低用量MPTPの実験的な長期間投与においては、
サルがこの課題をこなすのは非常に困難であった。
対照的に、GM1で治療したパーキンソン病のサルは調
査終了時に上記の課題をほぼ完全にこなすことができ
た。他方、生理食塩水で治療したパーキンソン病のサル
は、主として深刻な運動障害が原因で、これをこなすこ
とが非常に困難であった。
査終了時に上記の課題をほぼ完全にこなすことができ
た。他方、生理食塩水で治療したパーキンソン病のサル
は、主として深刻な運動障害が原因で、これをこなすこ
とが非常に困難であった。
図2/Cは、反応阻害の徴候である「障害」への試み
（箱のしまっている側に腕を伸ばす）を示す。治療の初
期段階では、GM1で治療したサルも（彼らが実際に反応
を示したテストの中で）この種の試みを数回行なった。
（箱のしまっている側に腕を伸ばす）を示す。治療の初
期段階では、GM1で治療したサルも（彼らが実際に反応
を示したテストの中で）この種の試みを数回行なった。
神経免疫組織化学的検査は以下のことを示した： −MPTP投与は、検査した種々の線条体サブ領域における
ドーパミンおよびその代謝物のレベルを著しく低下させ
る（表１参照）。
ドーパミンおよびその代謝物のレベルを著しく低下させ
る（表１参照）。
−GM1を使用した長期治療は、ドーパミンおよびその代
謝物（HVAおよびDOPAC）のレベルを有意に上昇させ（表
１参照）、この上昇は神経脱落のより少ない領域、例え
ば腹側正中領域においてより高い。
謝物（HVAおよびDOPAC）のレベルを有意に上昇させ（表
１参照）、この上昇は神経脱落のより少ない領域、例え
ば腹側正中領域においてより高い。
以下に記述するように、ニューロン培養物に及ぼすTO
PAの神経毒性作用に対するGM1、AGF2、AGF4およびLIGA2
0の保護作用に関する研究を行なった。
PAの神経毒性作用に対するGM1、AGF2、AGF4およびLIGA2
0の保護作用に関する研究を行なった。
公知のように、ドーパミンの天然に存在する前駆体で
あるＬ−ドーパに基づく治療は、パーキンソン病の全症
状に幾分効果的な作用をもたらしはするが、長期的には
副作用を生じる。実際、Ｌ−ドーパおよびその代謝物、
例えば６−ヒドロキシ−ドーパ（TOPA）もまたニューロ
ンに対して毒性となりうるもので、そのため患者の能力
を損なう神経変性性の病状進行を悪化させる。
あるＬ−ドーパに基づく治療は、パーキンソン病の全症
状に幾分効果的な作用をもたらしはするが、長期的には
副作用を生じる。実際、Ｌ−ドーパおよびその代謝物、
例えば６−ヒドロキシ−ドーパ（TOPA）もまたニューロ
ンに対して毒性となりうるもので、そのため患者の能力
を損なう神経変性性の病状進行を悪化させる。
本出願人が実施したテストは、ガングリオシド類が、
Ｌ−ドーパのヒドロキシル化した代謝物によって引き起
こされる神経毒性の予防および／または抑制に効果的で
あることを明らかにした。
Ｌ−ドーパのヒドロキシル化した代謝物によって引き起
こされる神経毒性の予防および／または抑制に効果的で
あることを明らかにした。
それゆえ、この結果は該化合物をパーキンソン病の治
療に適用することによってもたらされる非常に有利な点
を示すものである。したがって患者は、パーキンソン
病、特にＬ−ドーパ等のドーパミン作動性医薬品で治療
された患者に見られる神経の変性を予防および／または
抑制するという利点を提供する、ガングリオシドとＬ−
ドーパの組み合わせによる治療を受けることができる。
療に適用することによってもたらされる非常に有利な点
を示すものである。したがって患者は、パーキンソン
病、特にＬ−ドーパ等のドーパミン作動性医薬品で治療
された患者に見られる神経の変性を予防および／または
抑制するという利点を提供する、ガングリオシドとＬ−
ドーパの組み合わせによる治療を受けることができる。
テストは、２種類のニューロン培養物、すなわち中脳
ドーパミン作動性ニューロンと小脳ニューロンについて
実施した。
ドーパミン作動性ニューロンと小脳ニューロンについて
実施した。
中脳ニューロン培養物はDal Tosoらにしたがって（Da
l Tosoら，“Development and survival of neurons in
dissociated fetal messencephalic serum−free cell
cultures:I.Effects of cell density and of an adul
t mammalian striatal−derived neuronotrophic facto
r（SDNF）",J.Neurosci.,8（３）733−745,1988）、日
齢14.5〜15日のラットの胎児の中脳被蓋より調製した。
l Tosoら，“Development and survival of neurons in
dissociated fetal messencephalic serum−free cell
cultures:I.Effects of cell density and of an adul
t mammalian striatal−derived neuronotrophic facto
r（SDNF）",J.Neurosci.,8（３）733−745,1988）、日
齢14.5〜15日のラットの胎児の中脳被蓋より調製した。
ニューロン（0.75×106）をポリ−Ｌ−オルニチン基
質上に12穴（それぞれ直径25mm）の群としてプレートし
た。
質上に12穴（それぞれ直径25mm）の群としてプレートし
た。
培養物は、培地を変えずに、第４日から６日のあいだ
に使用した。
に使用した。
顆粒細胞培養物はSkaperら（Skaper S.D.ら，“Cultu
re and use of primary and clonal neural cells",Met
hods in Neurosciences,Ed,by P.M.Conn,Vol.2,pp.17−
33,Academic Press,Orlando,1990）にしたがって、日齢
４日のラットの小脳から得て、ポリ−Ｌ−リシン基質を
塗布したプレート上で培養（３×106細胞）した。
re and use of primary and clonal neural cells",Met
hods in Neurosciences,Ed,by P.M.Conn,Vol.2,pp.17−
33,Academic Press,Orlando,1990）にしたがって、日齢
４日のラットの小脳から得て、ポリ−Ｌ−リシン基質を
塗布したプレート上で培養（３×106細胞）した。
24時間後に、非ニューロンの増殖を抑制するため、シ
トシンアラビノシド（10μＭ）を添加した。小脳顆粒細
胞は、培地を変えずに10〜12日後に使用した。
トシンアラビノシド（10μＭ）を添加した。小脳顆粒細
胞は、培地を変えずに10〜12日後に使用した。
細胞は、TOPAとともに40分間（100μＭ急性暴露）ま
たは24時間（10μＭ長期暴露）インキュベートした。
たは24時間（10μＭ長期暴露）インキュベートした。
GM1、AGF2、AGF4（100μＭ）およびLIGA20（１〜30μ
Ｍ）による処理は、以下のように行なった： −TOPAとの急性インキュベーションの前に、２時間の前
処理 −TOPAとの急性インキュベーションの前に、LIGA20のみ
による共処理 −TOPAとの（100μM2時間）インキュベーションの前お
よび／またはTOPAとの（100μM24時間）長期インキュベ
ーションの間における共処理あり／なしの前処理 TOPAの細胞毒性は細胞生残率の評価により決定した。
より詳細には、以下の方法で決定した： −中脳ドーパミン作動性ニューロンについては、Berger
らが記述するTH蛍光抗体法（チロシンヒドロキシラーゼ
特異性）（Berger B.ら，“Long−term development of
mesencephalic dopaminergic neurons of mouse embry
os in dissociated primary culture":morphological a
nd histochemical characteristics",Neurosci.,7,193
−205,1982） −Mosmannが記述する小脳ニューロンのMTT比色分析（Mo
smann T.,“Rapid colorimetric assay for cellular g
rowth and survival:application to proliferation an
d cytotoxicity assays",J.Immunol.Meth.,65,55−63,1
983）。
Ｍ）による処理は、以下のように行なった： −TOPAとの急性インキュベーションの前に、２時間の前
処理 −TOPAとの急性インキュベーションの前に、LIGA20のみ
による共処理 −TOPAとの（100μM2時間）インキュベーションの前お
よび／またはTOPAとの（100μM24時間）長期インキュベ
ーションの間における共処理あり／なしの前処理 TOPAの細胞毒性は細胞生残率の評価により決定した。
より詳細には、以下の方法で決定した： −中脳ドーパミン作動性ニューロンについては、Berger
らが記述するTH蛍光抗体法（チロシンヒドロキシラーゼ
特異性）（Berger B.ら，“Long−term development of
mesencephalic dopaminergic neurons of mouse embry
os in dissociated primary culture":morphological a
nd histochemical characteristics",Neurosci.,7,193
−205,1982） −Mosmannが記述する小脳ニューロンのMTT比色分析（Mo
smann T.,“Rapid colorimetric assay for cellular g
rowth and survival:application to proliferation an
d cytotoxicity assays",J.Immunol.Meth.,65,55−63,1
983）。
細胞毒性は細胞生残率（％）で表わしている。
２つの試験（３回の繰り返し実験による）は、ダンカ
ン試験（Duncan′s test）にしたがって統計的に分析し
た。その要約を以下に報告する： −GM1（100μＭ×24時間）は、毒性レベルのTOPAに暴露
された（10μＭ×24時間、共インキュベーション）中脳
ドーパミン作動性ニューロンに対し、神経保護効果を奏
する。
ン試験（Duncan′s test）にしたがって統計的に分析し
た。その要約を以下に報告する： −GM1（100μＭ×24時間）は、毒性レベルのTOPAに暴露
された（10μＭ×24時間、共インキュベーション）中脳
ドーパミン作動性ニューロンに対し、神経保護効果を奏
する。
−TH免疫陽性ニューロンは、TOPAとGM1の共インキュベ
ーションにかけても無傷のままである（表２参照）。
ーションにかけても無傷のままである（表２参照）。
−また、GM1誘導体（AGF2およびAGF4）は、TOPAによっ
て引き起される神経毒性に対し保護的効果を奏する（表
２参照）。
て引き起される神経毒性に対し保護的効果を奏する（表
２参照）。
−GM1は、TOPAへの急性または長期暴露（100μＭ×40分
または10μＭ×24時間）後の小脳ニューロンに対して保
護的作用を及ぼす。
または10μＭ×24時間）後の小脳ニューロンに対して保
護的作用を及ぼす。
特に、細胞が組み合わせ処理、すなわち前処理および
共処理（TOPAの不在下で100μＭGM1×２時間＋10μMTOP
Aの存在化で100μＭGM1×24時間）を受けていると、長
期インキュベーションの後、GM1は更に効果を発揮する
（表３参照）。
共処理（TOPAの不在下で100μＭGM1×２時間＋10μMTOP
Aの存在化で100μＭGM1×24時間）を受けていると、長
期インキュベーションの後、GM1は更に効果を発揮する
（表３参照）。
−さらにLIGA20は、共処理において、小脳顆粒細胞をTO
PAの急性毒性（ED50・９μＭ）から保護するのに用量依
存的に効果的である。共処理のこのような条件下では、
200μＭまでのGM1は効果がない（図３参照）。
PAの急性毒性（ED50・９μＭ）から保護するのに用量依
存的に効果的である。共処理のこのような条件下では、
200μＭまでのGM1は効果がない（図３参照）。
図３には、TOPAによって誘発される培養小脳顆粒細胞
の死に対するLIGA20の用量依存的保護効果が示されてい
る。細胞は、100μＭのTOPAおよび１〜30μＭのLIGA20
または200μＭのGM1に同時にロック液中で45分間暴露し
（24℃）、洗浄して、もとの培地へ戻した。24時間後
に、MTT法により生残率を評価した。平均値±S.E.M.
（ｎ＝9,3実験）。TOPA（□）,LIGA20（●）、GM
1（○）。
の死に対するLIGA20の用量依存的保護効果が示されてい
る。細胞は、100μＭのTOPAおよび１〜30μＭのLIGA20
または200μＭのGM1に同時にロック液中で45分間暴露し
（24℃）、洗浄して、もとの培地へ戻した。24時間後
に、MTT法により生残率を評価した。平均値±S.E.M.
（ｎ＝9,3実験）。TOPA（□）,LIGA20（●）、GM
1（○）。
−LIGA20（30μＭ）による共処理は、急性毒性レベルの
TOPAに暴露された（100μＭ×45分）中脳ドーパミン作
動性ニューロンに対し、神経保護的効果を奏するが、他
方、GM1（200μＭ）は共処理に用いるだけでは効果がな
い（表４参照）。
TOPAに暴露された（100μＭ×45分）中脳ドーパミン作
動性ニューロンに対し、神経保護的効果を奏するが、他
方、GM1（200μＭ）は共処理に用いるだけでは効果がな
い（表４参照）。
表4:中脳細胞培養物におけるTOPAによって誘発されるド
ーパミン作動性ニューロンの喪失に対する、LIGA20およ
びGM1の保護的効果 5DIVの培養物を、30μＭのLIGA20または200μＭのGM1
とともに、100μＭのTOPAを含有するロック液中で45分
間インキュベートし（22℃）、十分洗浄し、もとの培地
に戻した。ある場合には、細胞をロック液中で200μＭ
のGM1によって２時間処理し（37℃）、洗浄し、その後
上記のようにTOPAに暴露した。すべての培養物は、TOPA
への暴露終了の24時間後に、TH免疫細胞学用に処理さ
れ、TH+細胞数を計測した。平均値±S.E.M.（ｎ＝８、
４実験）。対照（100％）＝偽薬品で洗浄したTOPAに暴
露していない姉妹培養物。
ーパミン作動性ニューロンの喪失に対する、LIGA20およ
びGM1の保護的効果 5DIVの培養物を、30μＭのLIGA20または200μＭのGM1
とともに、100μＭのTOPAを含有するロック液中で45分
間インキュベートし（22℃）、十分洗浄し、もとの培地
に戻した。ある場合には、細胞をロック液中で200μＭ
のGM1によって２時間処理し（37℃）、洗浄し、その後
上記のようにTOPAに暴露した。すべての培養物は、TOPA
への暴露終了の24時間後に、TH免疫細胞学用に処理さ
れ、TH+細胞数を計測した。平均値±S.E.M.（ｎ＝８、
４実験）。対照（100％）＝偽薬品で洗浄したTOPAに暴
露していない姉妹培養物。
表2:TOPAによって誘発される中脳ドーパミン作動性ニュ
ーロンへの神経毒性に対するGM1およびその誘導体（AGF
2ならびにAGF4）の効果 血清を含まない中脳細胞を５日間培養し、次にこれを
GM1、AGF2、AGF4（100μＭ）、およびTOPA（10μＭ）と
ともに24時間インキュベートした。固定化およびチロシ
ンヒドロキシラーゼ抗体による免疫染色の後、TH+ニュ
ーロンの数を計測した。数値は３回の測定による平均値
（±S.D.）である。
ーロンへの神経毒性に対するGM1およびその誘導体（AGF
2ならびにAGF4）の効果 血清を含まない中脳細胞を５日間培養し、次にこれを
GM1、AGF2、AGF4（100μＭ）、およびTOPA（10μＭ）と
ともに24時間インキュベートした。固定化およびチロシ
ンヒドロキシラーゼ抗体による免疫染色の後、TH+ニュ
ーロンの数を計測した。数値は３回の測定による平均値
（±S.D.）である。
表3:TOPAによって誘発される小脳顆粒細胞への神経毒性
に対するGM1の効果 11日目の試験管内顆粒細胞を上記のようにインキュベ
ートした。TOPAへの40分暴露においては、GM1（100μ
Ｍ）を２時間の前処理にのみ使用した。TOPAへの24時間
暴露においては、GM1（100μＭ）を２時間の前処理にの
み、または２時間の前処理およびTOPAとの共処理に使用
した。数値は、対応の対照培養物を100％ととして表わ
しており、それぞれ３回繰り返し測定して得た２個の定
量の平均値（±S.D.）である。
に対するGM1の効果 11日目の試験管内顆粒細胞を上記のようにインキュベ
ートした。TOPAへの40分暴露においては、GM1（100μ
Ｍ）を２時間の前処理にのみ使用した。TOPAへの24時間
暴露においては、GM1（100μＭ）を２時間の前処理にの
み、または２時間の前処理およびTOPAとの共処理に使用
した。数値は、対応の対照培養物を100％ととして表わ
しており、それぞれ３回繰り返し測定して得た２個の定
量の平均値（±S.D.）である。
（ａ）＝ｐ＜0.01vsアゴニスト単独 （ｂ）＝ｐ＜0.05vsGM1前処理群 Ｌ−ドーパの存在下または不在下で、GM1、AGF2、お
よびAGF4をBDNF（脳由来神経栄養因子）と併用して、中
脳ドーパミン作動性ニューロンの研究を行なった。G
M1、AGF2、およびAGF4のBDNFとの併用は、中脳ドーパミ
ン作動性ニューロンをTOPAによる神経毒性から保護する
上で相乗効果を有することが判明した。この相乗効果
は、GM1、AGF2、およびAGF4（１〜10μＭ）ならびにBDN
F（1ng/ml）が極めて低い濃度、つまり個々の濃度にお
いては全く神経保護作用がないような濃度においても、
かなり認められる。特にある実験で中脳ドーパミン作動
性ニューロンを1ng/mlのBDNFおよび10μＭのGM1と一緒
にしたところ、TOPAによって誘発された毒性障害から生
き残ったニューロン数は、飽和濃度（50ng/ml）のBDNF
を単独で使用して得たニューロン生残数と有意差がなか
った。これらの結果から、GM1とその誘導体AGF2、AGF4
およびLIGA20は、TOPAによって引き起こされる毒性から
神経細胞を保護するという結論に達した。この効果は、
中脳ニューロン（ドーパミン作動性のものも、そうでな
いものも）についてばかりでなく他の神経集団、例えば
小脳ニューロンについても明らかである。これらの結果
は、常用のドーパミン作動性医薬品（Ｌ−ドーパ等）で
治療されているパーキンソン病患者に、GM1及びその誘
導体を適用する新しい治療方法を予言する。特にGM1誘
導体であるLIGA20は、GM1自体またはその誘導体AGF2及
びAGF4より強力でかつより即効性であり、共処理のみに
使用しても効果的で、経口使用の可能性を示唆してい
る。
よびAGF4をBDNF（脳由来神経栄養因子）と併用して、中
脳ドーパミン作動性ニューロンの研究を行なった。G
M1、AGF2、およびAGF4のBDNFとの併用は、中脳ドーパミ
ン作動性ニューロンをTOPAによる神経毒性から保護する
上で相乗効果を有することが判明した。この相乗効果
は、GM1、AGF2、およびAGF4（１〜10μＭ）ならびにBDN
F（1ng/ml）が極めて低い濃度、つまり個々の濃度にお
いては全く神経保護作用がないような濃度においても、
かなり認められる。特にある実験で中脳ドーパミン作動
性ニューロンを1ng/mlのBDNFおよび10μＭのGM1と一緒
にしたところ、TOPAによって誘発された毒性障害から生
き残ったニューロン数は、飽和濃度（50ng/ml）のBDNF
を単独で使用して得たニューロン生残数と有意差がなか
った。これらの結果から、GM1とその誘導体AGF2、AGF4
およびLIGA20は、TOPAによって引き起こされる毒性から
神経細胞を保護するという結論に達した。この効果は、
中脳ニューロン（ドーパミン作動性のものも、そうでな
いものも）についてばかりでなく他の神経集団、例えば
小脳ニューロンについても明らかである。これらの結果
は、常用のドーパミン作動性医薬品（Ｌ−ドーパ等）で
治療されているパーキンソン病患者に、GM1及びその誘
導体を適用する新しい治療方法を予言する。特にGM1誘
導体であるLIGA20は、GM1自体またはその誘導体AGF2及
びAGF4より強力でかつより即効性であり、共処理のみに
使用しても効果的で、経口使用の可能性を示唆してい
る。
ガングリオシド＋Ｌ−ドーパおよび／またはBDNFを併
用する新しい治療は、Ｌ−ドーパによる長期治療がもた
らす神経変性を予防しおよび／または回復させるという
大きな利点を提供する。
用する新しい治療は、Ｌ−ドーパによる長期治療がもた
らす神経変性を予防しおよび／または回復させるという
大きな利点を提供する。
したがって、モノガングリオシドGM1、その内部エス
テル誘導体AGF2、およびそのメチルエステル誘導体AGF4
は、薬学上許容される賦形剤および希釈剤と混合され
た、薬学上有効な量の上記化合物を含有する、パーキン
ソン病の治療に適した医薬組成物の製造に使用すること
できる。
テル誘導体AGF2、およびそのメチルエステル誘導体AGF4
は、薬学上許容される賦形剤および希釈剤と混合され
た、薬学上有効な量の上記化合物を含有する、パーキン
ソン病の治療に適した医薬組成物の製造に使用すること
できる。
さらに、上記の化合物およびＮ−ジクロロアセチルリ
ソGM1（LIGA20）は，パーキンソン病の全症状を緩和し
ドーパミン作動性機能を回復するための医薬品またはそ
の組み合わせとの併用治療にも活用し得る。特に便利な
のは、上記化合物とＬ−ドーパと併用し、かつBDNFまた
は他のデカルボキシラーゼまたはモノアミンオキシダー
ゼ阻害剤も共に使用することである。
ソGM1（LIGA20）は，パーキンソン病の全症状を緩和し
ドーパミン作動性機能を回復するための医薬品またはそ
の組み合わせとの併用治療にも活用し得る。特に便利な
のは、上記化合物とＬ−ドーパと併用し、かつBDNFまた
は他のデカルボキシラーゼまたはモノアミンオキシダー
ゼ阻害剤も共に使用することである。
本発明による医薬組成物は、１回の投与量あたり10か
ら200mgの有効成分を、１種類またはそれ以上の薬学上
許容される賦形剤または希釈剤と共に含有することがで
き、上述のように経口的または非経口的に（すなわち筋
肉内、静脈内または皮下への注射により）ヒトに投与す
ることができる。
ら200mgの有効成分を、１種類またはそれ以上の薬学上
許容される賦形剤または希釈剤と共に含有することがで
き、上述のように経口的または非経口的に（すなわち筋
肉内、静脈内または皮下への注射により）ヒトに投与す
ることができる。
投与されるべき有効成分の量は、所望の効果および投
与方法によって左右されるであろう。非経口的注入の場
合は、有効成分の投与量は0.1〜30mg/kg/日の範囲とな
ろう。経口投与の場合は、0.5〜150mg/kg/日の範囲とな
ろう。
与方法によって左右されるであろう。非経口的注入の場
合は、有効成分の投与量は0.1〜30mg/kg/日の範囲とな
ろう。経口投与の場合は、0.5〜150mg/kg/日の範囲とな
ろう。
本発明にしたがって調製された医薬組成物を以下に例
として示すが、本発明はこれらに限定されるものではな
い。
として示すが、本発明はこれらに限定されるものではな
い。
ケース１ 2mlバイアル１個が下記のものを含有する： −モノシアロガングリオシド（GM1）ナトリウム塩 20.00mg −二塩基リン酸ナトリウム12H2O 6.00mg −一塩基リン酸ナトリウム2H2O 0.50mg −塩化ナトリウム 16.00mg −注射用水 適量 ケース２ 2mlバイアル１個が下記のものを含有する： −モノシアロガングリオシド（GM1）ナトリウム塩 40.00mg −二塩基リン酸ナトリウム12H2O 6.00mg −一塩基リン酸ナトリウム2H2O 0.50mg −塩化ナトリウム 16.00mg −注射用水 適量 ケース３ 5mlバイアル１個が下記のものを含有する： −モノシアロガングリオシド（GM1）ナトリウム塩 100.00mg −二塩基リン酸ナトリウム12H2O 15.00mg −一塩基リン酸ナトリウム2H2O 1.25mg −塩化ナトリウム 40.00mg −注射用水 適量 ケース４ 2mlアンプル１個が下記のものを含有する： −GM1メチルエステル 5.00mg −塩化ナトリウム 16.00mg −非発熱性蒸留水中のpH6のクエン酸緩衝液 適量 ケース５ 2mlアンプル１個が下記のものを含有する： −GM1メチルエステル 50.00mg −塩化ナトリウム 16.00mg −非発熱性蒸留水中のpH6のクエン酸緩衝液 適量 ケース６ 4mlバイアル１個が下記のものを含有する： −GM1メチルエステル 100.00mg −塩化ナトリウム 32.00mg −非発熱性蒸留水中のpH6のクエン酸緩衝液 適量 ケース７ 2mlバイアル１個が下記のものを含有する： −Ｎ−ジクロロアセチルリソGM1 5.00mg −塩化ナトリウム 16.00mg −非発熱性蒸留水中のpH6のクエン酸緩衝液 2.00mlまで ケース８ ２個のバイアルに調製する医薬組成物 このケースに記載する組成物は、２個のバイアルに調製
される。片方のバイアルは薬学上許容される賦形剤であ
るグリシンまたはマンニトールと混合した凍結乾燥粉末
形態の有効成分（重量で10％〜90％）を含有する。他方
のバイアルは溶剤として塩化ナトリウム溶液およびクエ
ン酸緩衝液を含有する。システム６のバイアルが有効成
分のみを含有する時は、その粉末は注射用水または他の
溶剤（例：第三級ブタノール）を用いて凍結乾燥する
か、または滅菌粉末を無菌条件下で直接分割して得られ
る。
される。片方のバイアルは薬学上許容される賦形剤であ
るグリシンまたはマンニトールと混合した凍結乾燥粉末
形態の有効成分（重量で10％〜90％）を含有する。他方
のバイアルは溶剤として塩化ナトリウム溶液およびクエ
ン酸緩衝液を含有する。システム６のバイアルが有効成
分のみを含有する時は、その粉末は注射用水または他の
溶剤（例：第三級ブタノール）を用いて凍結乾燥する
か、または滅菌粉末を無菌条件下で直接分割して得られ
る。
システムNo.1 a.2mlの凍結乾燥粉末バイアル１個が下記のものを含有
する。
する。
−モノシアロガングリオシド（GM1）内部エステル 5.00mg −グリシン 30.00mg b.2mlの溶剤アンプル１個が下記のものを含有する： −塩化ナトリウム 16.00mg −非発熱性蒸留水中のクエン酸緩衝液 適量 システムNo.2 a.3mlの凍結乾燥粉末バイアル１個が下記のものを含有
する。
する。
−モノシアロガングリオシド（GM1）内部エステル 5.00mg −マンニトール 40.00mg b.2mlの溶剤アンプル１個が下記のものを含有する： −塩化ナトリウム 16.00mg −非発熱性蒸留水中のクエン酸緩衝液 適量 システムNo.3 a.3mlの凍結乾燥粉末バイアル１個が下記のものを含有
する。
する。
−モノシアロガングリオシド（GM1）内部エステル 50.00mg −マンニトール 20.00mg b.3mlの溶剤アンプル１個が下記のものを含有する： −塩化ナトリウム 24.00mg −非発熱性蒸留水中のクエン酸緩衝液 適量 システムNo.4 a.5mlの凍結乾燥粉末バイアル１個が下記のものを含有
する。
する。
−モノシアロガングリオシド（GM1）内部エステル 100.00mg −グリシン 50.00mg b.4mlの溶剤アンプル１個が下記のものを含有する： −塩化ナトリウム 32.00mg −非発熱性蒸留水中のクエン酸緩衝液 適量 システムNo.5 a.5mlの凍結乾燥粉末バイアル１個が下記のものを含有
する。
する。
−モノシアロガングリオシド（GM1）内部エステル 100.00mg −マンニトール 40.00mg b.4mlの溶剤アンプル１個が下記のものを含有する： −塩化ナトリウム 32.00mg −非発熱性蒸留水中のクエン酸緩衝液 適量 システムNo.6 a.5mlの凍結乾燥粉末バイアル１個が下記のものを含有
する。
する。
−モノシアロガングリオシド（GM1）内部エステル 100.00mg b.4mlの溶剤アンプル１個が下記のものを含有する： −一塩基リン酸ナトリウム2H2O 1.00mg −二塩基リン酸ナトリウム12H2O 12.00mg −マンニトール 160.00mg −注射用水 適量 システムNo.7 a.2mlの凍結乾燥粉末バイアル１個が下記のものを含有
する。
する。
−GM1メチルエステル 5.00mg −グリシン 30.00mg b.2mlの溶剤アンプル１個が下記のものを含有する： −塩化ナトリウム 16.00mg −非発熱性蒸留水中のクエン酸緩衝液 適量 システムNo.8 a.5mlの凍結乾燥粉末バイアル１個が下記のものを含有
する。
する。
−GM1メチルエステル 150.00mg −グリシン 50.00mg b.4mlの溶剤アンプル１個が下記のものを含有する： −塩化ナトリウム 32.00mg −非発熱性蒸留水中のクエン酸緩衝液 適量 システムNo.9 a.3mlの凍結乾燥粉末バイアル１個が下記のものを含有
する。
する。
−GM1メチルエステル 50.00mg −グリシン 25.00mg b.3mlの溶剤アンプル１個が下記のものを含有する： −塩化ナトリウム 24.00mg −非発熱性蒸留水中のクエン酸緩衝液 適量
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.6 識別記号 ＦＩ Ａ６１Ｋ 45/00 Ｃ０７Ｈ 15/10 // Ｃ０７Ｈ 15/10 Ａ６１Ｋ 37/24 (72)発明者 スケイパー，ステファン ドレイク イタリア国 アイ―36100 ヴィセンザ 203／イー，リヴィエラ ベリカ (58)調査した分野(Int.Cl.6，ＤＢ名) A61K 31/70 A61K 31/165 A61K 31/18 A61K 31/19 A61K 38/18 A61K 45/00 C07H 15/10 ＣＡ（ＳＴＮ) ＭＥＤＬＩＮＥ（ＳＴＮ)
Claims (7)
- 【請求項１】パーキンソン病の治療において、Ｌ−ドー
パを用いた長期治療がもたらす神経毒性作用によって誘
発されるニューロン変性を防止または回復させるための
医薬組成物の製造に、モノシアロガングリオシドGM1ま
たはその誘導体を有効成分として使用する方法であっ
て、該誘導体が、内部エステルAGF2、メチルエステルAG
F4およびＮ−ジクロロアセチルリソGM1からなる群より
選ばれるものである前記使用方法。 - 【請求項２】該医薬組成物が、薬学的に許容される賦形
剤および希釈剤と混合された、治療上有効な量の該有効
成分を含有する、請求項１に記載の使用方法。 - 【請求項３】薬学的に許容される賦形剤および希釈剤と
混合された、薬学的に有効な量のモノシアロガングリオ
シドGM1またはその誘導体を含有する、パーキンソン病
の治療においてＬ−ドーパを用いた長期治療がもたらす
神経毒性作用によって誘発されるニューロン変性を防止
または回復させるための医薬組成物であって、該誘導体
が、内部エステルAGF2、メチルエステルAGF4およびＮ−
ジクロロアセチルリソGM1からなる群より選ばれるもの
である前記医薬組成物。 - 【請求項４】経口薬品として調製される請求項３に記載
の医薬組成物。 - 【請求項５】非経口薬品として調製される請求項３に記
載の医薬組成物。 - 【請求項６】該組成物が、パーキンソン病の全症状の緩
和とドーパミン作動性機能の回復のために用いられる医
薬品または医薬品の組み合わせと併用される、請求項３
に記載の医薬組成物。 - 【請求項７】該組成物が、Ｌ−ドーパ、BDNF、およびそ
れらとデカルボキシラーゼまたはモノアミンオキシダー
ゼ阻害剤の組み合わせからなる群より選ばれる医薬品と
併用される、請求項３に記載の医薬組成物。
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|---|---|---|---|
| IT92A000591 | 1992-03-13 | ||
| ITMI920591A IT1254280B (it) | 1992-03-13 | 1992-03-13 | Composizioni farmaceutiche comprendenti monosialoganglioside gm1 o un suo derivato atte al trattamento della malattia di parkinson |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH07508258A JPH07508258A (ja) | 1995-09-14 |
| JP2872809B2 true JP2872809B2 (ja) | 1999-03-24 |
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Family Applications (1)
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Country Status (8)
| Country | Link |
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| EP (2) | EP0770389B1 (ja) |
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| DE (1) | DE69330842T2 (ja) |
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| EP1435972B1 (en) * | 2001-08-29 | 2016-03-09 | Seneb Biosciences Inc. | Novel synthetic ganglioside derivatives and compositions thereof |
| EP1358910A1 (de) * | 2002-05-02 | 2003-11-05 | B.R.A.H.M.S Aktiengesellschaft | Verfahren und Mittel zur Prävention, Hemmung und Therapie von Krebserkrankungen |
| EP1367395A1 (de) | 2002-05-02 | 2003-12-03 | B.R.A.H.M.S Aktiengesellschaft | Diagnose von Neoplasmen mit Hilfe von anti-Gangliosid-Antikörpern |
| US7943750B2 (en) * | 2007-06-18 | 2011-05-17 | Laboratoire Medidom S.A. | Process for obtaining pure monosialoganglioside GM1 for medical use |
| CN101732331B (zh) * | 2008-11-20 | 2012-05-23 | 北京四环制药有限公司 | 一种单唾液酸四己糖神经节苷脂钠与谷氨酸的组合物 |
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| CN104490837A (zh) * | 2014-12-30 | 2015-04-08 | 哈尔滨医科大学科技开发总公司 | 单唾液酸四己糖神经节苷脂钠的口服制剂 |
| RU2632710C2 (ru) * | 2016-03-31 | 2017-10-09 | Лонг Шенг Фарма Лимитед | Способ получения натрий моносиалового ганглиозида и нейропротекторное средство на его основе |
| CN108815131B (zh) * | 2018-09-11 | 2021-01-01 | 四川奇格曼药业有限公司 | 一种神经节苷脂缓释片及其制备方法 |
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| IT1208751B (it) * | 1986-06-30 | 1989-07-10 | Fidia Farmaceutici | Possibile uso dei gangliosidi esogeni in malattie tumorali come fattore protettivo contro la neurotossicita' da farmaci antitumorali |
| IT1235161B (it) * | 1988-12-02 | 1992-06-22 | Fidia Farmaceutici | Derivati di lisogangliosidi |
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| IT1253832B (it) * | 1991-08-01 | 1995-08-29 | Fidia Spa | Derivati di gangliosidi |
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- 1992-03-13 IT ITMI920591A patent/IT1254280B/it active
-
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-
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- 1994-09-12 US US08/304,391 patent/US6620792B1/en not_active Expired - Lifetime
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