JP2811565B2 - Chemiluminescence detection device and temperature correction method in chemiluminescence reaction - Google Patents
Chemiluminescence detection device and temperature correction method in chemiluminescence reactionInfo
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Description
【発明の詳細な説明】DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION
【０００１】[0001]
【産業上の利用分野】本発明は、反応セル内において生
ずる化学発光の強度を光検出器によって検出するように
した化学発光検出装置および化学発光反応における温度
補正方法に関する。BACKGROUND OF THE INVENTION 1. Field of the Invention The present invention relates to a chemiluminescence detecting apparatus in which the intensity of chemiluminescence generated in a reaction cell is detected by a photodetector, and a method of correcting a temperature in a chemiluminescence reaction.
【０００２】[0002]
【従来の技術】溶液の化学発光の強度を検出するのに、
従来は、ガラスまたはプラスチック製の筒状の反応セル
を積分球状のセルホルダに固定すると共に、シャッタを
介して光検出器としての光電子増倍管を発光セルに臨む
ようにして設け、反応セル内において生ずる化学発光量
を検出するようにしている。2. Description of the Related Art To detect the intensity of chemiluminescence of a solution,
Conventionally, a glass or plastic cylindrical reaction cell is fixed to an integrating spherical cell holder, and a photomultiplier tube as a photodetector is provided so as to face the light emitting cell via a shutter, and the chemical reaction generated in the reaction cell is provided. The light emission amount is detected.
【０００３】この場合、反応が行われる反応セルや反応
液を恒温状態に保ち、周囲温度変化の影響を受けないよ
うにすることが必要であり、そのため、反応液を分注す
るノズル部や、反応セルを温調したり、また、場合によ
っては、装置内全体を温調しなければならないことがあ
る。[0003] In this case, it is necessary to keep the reaction cell and the reaction solution in which the reaction takes place at a constant temperature so as not to be affected by changes in the ambient temperature. In some cases, it is necessary to control the temperature of the reaction cell or, in some cases, to control the temperature in the entire apparatus.
【０００４】[0004]
【発明が解決しようとする課題】上述のように、必要な
箇所または装置内全体を温調するようにした場合、装置
の構造が複雑になるばかりではなく、温調すべき部分が
熱的に大容量となるため、温調時のリップルに対して注
意を払う必要があり、それだけ温度コントロールが困難
となる。As described above, when the temperature of a necessary portion or the whole inside of the apparatus is controlled, not only the structure of the apparatus becomes complicated, but also the temperature control part is thermally controlled. Due to the large capacity, it is necessary to pay attention to the ripple during temperature control, and it becomes difficult to control the temperature accordingly.
【０００５】例えば酵素免疫測定（ＥＩＡ）で、化学発
光反応を用いた系では、反応セル内において行われる発
光反応時の発光量が周囲温度により変化し、測定値に影
響が現れる。これを、簡単に説明すると、次の通りであ
る。すなわち、免疫測定においては、まず、下記の反応
式（１）に示す反応によって過酸化水素（Ｈ２Ｏ２）が
発生する。すなわち、免疫反応後、標識酵素であるグル
コースオキシターゼ（ＧＯＤ）に基質（グルコース）を
作用させて過酸化水素を発生させる。この場合、反応が
行われる部分は例えば３７℃前後に温調されている。For example, in a system using a chemiluminescence reaction in enzyme immunoassay (EIA), the amount of luminescence at the time of the luminescence reaction performed in the reaction cell changes depending on the ambient temperature, and the measured value is affected. This will be briefly described as follows. That is, in the immunoassay, first, hydrogen peroxide (H 2 O 2 ) is generated by the reaction represented by the following reaction formula (1). That is, after the immune reaction, a substrate (glucose) is allowed to act on glucose oxidase (GOD), which is a labeling enzyme, to generate hydrogen peroxide. In this case, the temperature of the part where the reaction is performed is controlled, for example, at around 37 ° C.
【０００６】[0006]
【化１】 Embedded image
【０００７】次いで、前記反応式（１）に示す反応によ
って生じた過酸化水素とルミノール／ミクロパーオキシ
ダーゼ（ｍＰＯＤ）とを、下記反応式（２）に示すよう
に反応させることにより、ｈνで表される発光が生ず
る。Next, hydrogen peroxide produced by the reaction shown in the above-mentioned reaction formula (1) and luminol / microperoxidase (mPOD) are reacted as shown in the following reaction formula (2) to obtain a value represented by hν. Light emission occurs.
【０００８】[0008]
【化２】 Embedded image
【０００９】ところで、前記酵素免疫測定においては、
その測定項目の如何に拘らず、共通の発光反応、つま
り、前記反応式（２）に示される反応が最終的に行われ
る。 従って、あらゆる項目における温度影響は、過酸化
水素に対する化学発光反応の温度影響であると考えられ
る。 また、発光反応が行われるセルがアルミブロックな
どで形成されるなど比較的熱容量が大きいこと、反応液
および発光試薬の分注ノズルは、内径が小さく長いた
め、これらの液の温度は周囲温度の変化に容易に追従
し、反応セル近傍の温度を計測することにより、反応液
の温度を計測していることになる。In the enzyme immunoassay,
Regardless of the measurement item, a common luminescence reaction, that is, the reaction represented by the reaction formula (2) is finally performed. Therefore, it is considered that the temperature effect in all items is the temperature effect of the chemiluminescence reaction on hydrogen peroxide. Also, since the cell in which the luminescence reaction takes place is formed of an aluminum block, etc., the heat capacity is relatively large, and the dispensing nozzles for the reaction solution and luminescence reagent have small inside diameters and long lengths. The temperature of the reaction solution is measured by easily following the change and measuring the temperature in the vicinity of the reaction cell.
【００１０】従って、上記，のことより、過酸化水
素に対する発光反応の温度影響曲線を補正曲線として温
度センサーによって得られる温度に対して、その温度で
の補正係数を発光量に乗ずることにより、温度影響を補
正することができることになる。Therefore, from the above, the temperature obtained by the temperature sensor using the temperature effect curve of the luminescence reaction to hydrogen peroxide as a correction curve is multiplied by the correction coefficient at that temperature by the luminescence amount to obtain the temperature. The effect can be corrected.
【００１１】本発明は、上述の事柄に留意してなされた
もので、その目的は、周囲温度の影響を補正し、その温
度における発光量を正確に求めることができる化学発光
検出装置および化学発光反応における温度補正方法を提
供することにある。SUMMARY OF THE INVENTION The present invention has been made in consideration of the above-mentioned matters, and has as its object to correct the influence of the ambient temperature and to obtain the amount of luminescence at that temperature accurately. An object of the present invention is to provide a method for correcting a temperature in a reaction.
【００１２】[0012]
【課題を解決するための手段】上記目的を達成するた
め、本発明に係る化学発光検出装置は、セルホルダの内
部に積分球状の空間を形成し、この空間内に先端部側が
位置するようにセルホルダの上方から反応セルを挿入
し、この反応セルの近傍に温度センサーを設け、更に、
干渉フィルタを介して高感度の光電子増倍管と低感度の
光電子増倍管とを前記反応セルを挟むようにして一直線
状に設け、前記反応セル内に反応液や発光試薬などを注
入することにより過酸化水素に対する発光反応において
発生する化学発光の強度を感度の異なる前記二種類の光
電子増倍管によって検出するようにした化学発光検出装
置であって、前記温度センサーによって得られた温度に
基づいて前記化学発光の強度を補正するようにしてい
る。In order to achieve the above object, a chemiluminescence detecting apparatus according to the present invention forms an integrating spherical space inside a cell holder, and places the cell holder such that a tip end side is located in this space. A reaction cell is inserted from above, and a temperature sensor is provided near this reaction cell .
High sensitivity photomultiplier tube and low sensitivity
Align the photomultiplier tube with the reaction cell
And a reaction solution, a luminescent reagent, etc. are poured into the reaction cell.
In the luminescence reaction to hydrogen peroxide
The two types of light with different sensitivity to the intensity of the generated chemiluminescence
A chemiluminescence detection device configured to detect by a photomultiplier tube , wherein the intensity of the chemiluminescence is corrected based on a temperature obtained by the temperature sensor.
【００１３】また、本発明に係る化学発光反応における
温度補正方法は、セルホルダの内部に積分球状の空間を
形成し、この空間内に先端部側が位置するようにセルホ
ルダの上方から反応セルを挿入し、この反応セルの近傍
に温度センサーを設け、更に、干渉フィルタを介して高
感度の光電子増倍管と低感度の光電子増倍管とを前記反
応セルを挟むようにして一直線状に設け、前記反応セル
内に反応液や発光液などを注入することにより過酸化水
素に対する発光反応において発生する化学発光の強度を
感度の異なる前記二種類の光電子増倍管によって検出す
るようにした化学発光検出装置を用いて、化学発光反応
時における温度を測定し、過酸化水素に対する発光反応
の温度影響曲線を補正曲線とし、前記温度センサーによ
って得られた温度における補正係数を、前記光検出器に
よって得られる発光量に乗ずるようにしている。Further, according to the method for correcting temperature in a chemiluminescence reaction according to the present invention, an integrating spherical space is formed inside a cell holder, and a reaction cell is inserted from above the cell holder so that a tip portion is located in this space. A temperature sensor is provided near the reaction cell, and the temperature is further increased through an interference filter.
The high sensitivity photomultiplier tube and the low sensitivity photomultiplier tube are
A reaction solution, a luminescent solution, etc. are injected into the reaction cell so as to sandwich the reaction cell.
The intensity of the chemiluminescence generated in the luminescence reaction to
Using a chemiluminescence detection device that was detected by the two types of photomultiplier tubes having different sensitivities, the temperature during the chemiluminescence reaction was measured, and the temperature effect curve of the luminescence reaction to hydrogen peroxide was used as a correction curve, The correction coefficient at the temperature obtained by the temperature sensor is multiplied by the light emission amount obtained by the photodetector.
【００１４】[0014]
【作用】本発明においては、反応セルや装置内全体を温
調をするのではなく、反応時の温度によって発光反応に
おいて生ずる発光量を補正するものであるから、装置の
構成が複雑化することがないと共に、精度の高い測定が
可能になる。In the present invention, the temperature of the reaction cell and the whole inside of the apparatus are not controlled, but the amount of luminescence generated in the luminescence reaction is corrected by the temperature during the reaction. And accurate measurement is possible.
【００１５】[0015]
【実施例】以下、本発明の実施例を、図面を参照しなが
ら説明する。Embodiments of the present invention will be described below with reference to the drawings.
【００１６】まず、図１は本発明に係る化学発光検出装
置の構成の一例を示し、この図において、１は例えば真
鍮よりなるセルホルダで、その内部には積分球状の空間
２が形成されている。３はその先端部側が前記積分球２
内に位置するようにセルホルダ１の上方から垂直に挿入
され、支持部材４によって保持されるガラス製の反応セ
ルである。５は反応液や発光液などを注入するための分
注ノズルである。反応セル３の近傍には、図示してない
が、図１の紙面の表裏方向に干渉フィルタを介して高感
度の光電子増倍管と低感度の光電子増倍管とが反応セル
３を挟むようにして一直線状に配設されている。なお、
このような構成については、本願出願人が平成２年３月
１３日付けにて特許出願（特願平２−６２１９０号）し
ているところである。First, FIG. 1 shows an example of the configuration of a chemiluminescence detection apparatus according to the present invention. In this figure, reference numeral 1 denotes a cell holder made of, for example, brass, in which an integrating spherical space 2 is formed. . 3 is the tip of the integrating sphere 2
This is a glass reaction cell that is vertically inserted from above the cell holder 1 so as to be positioned inside, and is held by the support member 4. Reference numeral 5 denotes a dispensing nozzle for injecting a reaction liquid, a luminescent liquid, and the like. In the vicinity of the reaction cell 3, although not shown, a high-sensitivity photomultiplier tube and a low-sensitivity photomultiplier tube sandwich the reaction cell 3 via an interference filter in the front and back directions of the paper of FIG. 1. They are arranged in a straight line. In addition,
With respect to such a configuration, the present applicant has filed a patent application (Japanese Patent Application No. 2-62190) on March 13, 1990.
【００１７】そして、この実施例においては、上記従来
の構成に加えて、前記反応セル３の近傍に温度センサー
６を設け、この温度センサー６によって得られた温度に
基づいて、反応セル３内において行われる化学発光反応
時における化学発光量の強度を補正するようにしてい
る。すなわち、温度センサー６の出力は、アンプ７を介
してＡＤ変換器８に入力され、さらに、ＣＰＵ９に入力
されるように構成されている。なお、１０は温度センサ
ー６を、反応セル３に対してできるだけ近くなるように
保持するための支持部材である。In this embodiment, a temperature sensor 6 is provided in the vicinity of the reaction cell 3 in addition to the above-described conventional structure, and the temperature in the reaction cell 3 is determined based on the temperature obtained by the temperature sensor 6. The intensity of the amount of chemiluminescence during the chemiluminescence reaction to be performed is corrected. That is, the output of the temperature sensor 6 is input to the AD converter 8 via the amplifier 7 and further input to the CPU 9. Reference numeral 10 denotes a support member for holding the temperature sensor 6 as close as possible to the reaction cell 3.
【００１８】ところで、前記反応セル３内における過酸
化水素に対する発光反応において発生する化学発光量
は、図２に示すようにして得ることができる。すなわ
ち、光電子増倍管の出力を下記（１）式によって積算す
るのである。Incidentally, the amount of chemiluminescence generated in the luminescence reaction of hydrogen peroxide in the reaction cell 3 can be obtained as shown in FIG. That is, the output of the photomultiplier is integrated by the following equation (1).
【００１９】[0019]
【数１】 但し、Ｖｏ：反応液注入時における光電子増倍管の出力 Ｖｎ：ｎ個目のデータサンプリング時における 光電子増倍管の出力(Equation 1) Where V o : the output of the photomultiplier at the time of injecting the reaction solution V n : the output of the photomultiplier at the time of sampling the nth data
【００２０】そして、前記発光反応において発生する化
学発光量に対する温度影響は、図３〜図５に示すよう
に、過酸化水素の広い濃度範囲にわたって同様の傾向が
あることが判る。すなわち、これらの図は、過酸化水素
として、その濃度がそれぞれ１×１０−４Ｍ（モル、以
下同じ）、５×１０−６Ｍ、１×１０−７Ｍを用い、上
述の装置の環境温度を種々変化させたときにおける温度
影響を調べたものである。これによれば、過酸化水素の
濃度の如何に拘らず、温度の変化に伴って発光量に大き
く影響が及ぼされていることが判る。The effect of temperature on the amount of chemiluminescence generated in the luminescence reaction has a similar tendency over a wide concentration range of hydrogen peroxide, as shown in FIGS. That is, in these figures, the concentration of hydrogen peroxide is 1 × 10 −4 M (mol, the same applies hereinafter), 5 × 10 −6 M, and 1 × 10 −7 M, respectively. The effect of temperature when various temperatures are changed is examined. According to this, it is understood that the light emission amount is greatly affected by the change in temperature regardless of the concentration of hydrogen peroxide.
【００２１】そして、前記図３〜図５に示した各濃度に
おいて２５℃（標準温度）の化学発光量に対する各濃度
の化学発光量の比の変化を表すと、図６に示すようにな
る。この図において、曲線Ａ，Ｂ，Ｃはそれぞれ図３、
図４、図５に表した曲線に対応している。この図６に示
した曲線Ａ，Ｂ，Ｃの実験点から対２５℃発光量積算値
比Ｒを温度ｔの関数ｆ（ｔ）とした回帰式を温度補正式
として用いる。FIG. 6 shows the change in the ratio of the amount of chemiluminescence at each concentration to the amount of chemiluminescence at 25 ° C. (standard temperature) at each concentration shown in FIGS. In this figure, curves A, B and C are respectively shown in FIG.
This corresponds to the curves shown in FIGS. From the experimental points of the curves A, B, and C shown in FIG. 6, a regression equation in which the integrated value R of the light emission amount at 25 ° C. is a function f (t) of the temperature t is used as the temperature correction equation.
【００２２】すなわち、各温度の化学発光量に対する２
５℃の化学発光量の比（Ｌｔ／Ｌｔ−２５）をＲとする
と、 Ｒ＝ｆ （ｔ） ……（２） と表される。That is, 2 for the amount of chemiluminescence at each temperature.
Assuming that the ratio of the amount of chemiluminescence at 5 ° C. ( Lt / Lt−25 ) is R, R = f (t) (2)
【００２３】そして、各温度での化学発光量をＬとし、
前記（２）式で補正された発光量をＬ’とすると、 Ｌ’ ＝Ｌ／Ｒ ……（３） で表される。Then, let the amount of chemiluminescence at each temperature be L,
Assuming that the light emission amount corrected by the equation (2) is L ′, the light emission amount is represented by L ′ = L / R (3).
【００２４】このような補正は、図１に示したＣＰＵ９
において行われる。Such correction is performed by the CPU 9 shown in FIG.
It is performed in.
【００２５】上述した温度補正方法を用いて、装置環境
温度を変化させて化学発光量を測定した場合の温度補正
を行わなかったときと、行ったときのデータは、例えば
図７〜図１１に示す通りである。すなわち、図７はＡＦ
Ｐ（アルファフェトプロテイン）、図８はＣＥＡ（癌胎
児性抗原）、図９はＬＨ（黄体ホルモン）、図１０はＰ
ＲＬ（プロラクチン）、図１１はｈＣＧ（人絨毛腺ゴナ
ドトロピン）における化学発光量を示すもので、各図に
おいて、曲線ａは補正を行わない場合を示し、曲線ｂは
補正を行った場合を示す。これらの図から、上記（３）
式による補正を行った場合、温度影響を確実に除去でき
ることが判る。The data obtained when the amount of chemiluminescence was measured by changing the environmental temperature of the apparatus by using the above-described temperature correction method and when the temperature was not corrected are shown in FIGS. 7 to 11, for example. As shown. That is, FIG.
P (alpha fetoprotein), FIG. 8 is CEA (carcinoembryonic antigen), FIG. 9 is LH (progestin), FIG.
RL (prolactin), FIG. 11 shows the amount of chemiluminescence in hCG (human chorionic gonadotropin), and in each figure, curve a shows the case without correction, and curve b shows the case with correction. From these figures, the above (3)
It can be seen that when the correction is made by the equation, the temperature effect can be reliably removed.
【００２６】本発明に係る温度補正方法は、化学発光反
応を用いた酵素免疫測定法のみならず、その原理上、比
色（呈色）反応を用いた免疫測定法や蛍光反応を用いた
酵素免疫測定法などにも適用できる。The temperature correction method according to the present invention is not limited to an enzyme immunoassay using a chemiluminescent reaction, but in principle, an immunoassay using a colorimetric (color) reaction or an enzyme using a fluorescent reaction. It can also be applied to immunoassays and the like.
【００２７】[0027]
【発明の効果】以上説明したように、請求項１に記載し
た発明によれば、反応セルや装置内全体を温調をするの
ではなく、反応時の温度によって発光反応において生ず
る発光量を補正するものであるから、装置の構成が複雑
化することがないと共に、精度の高い測定が可能にな
る。すなわち、請求項１に記載した発明では、過酸化水
素に対する化学発光反応の温度影響は反応セル近傍の温
度を計測して補正で対応し ている。 As described above, according to the first aspect of the present invention, the amount of luminescence generated in the luminescence reaction is corrected by the temperature during the reaction, instead of controlling the temperature of the reaction cell or the entire inside of the apparatus. Therefore, the configuration of the apparatus is not complicated, and highly accurate measurement is possible. That is, according to the first aspect of the present invention,
The effect of the temperature of the chemiluminescence reaction on element is the temperature near the reaction cell.
The degree is measured and corrected .
【００２８】また、請求項２に記載した発明によれば、
化学発光反応を用いた酵素免疫測定などにおける測定精
度を高めることができる。すなわち、前記酵素免疫測定
などにおける酵素活性の検出に化学発光反応を利用して
いるのは、化学発光反応のダイナミックレンジが本願の
図２に示したように、比色法や蛍光法と比較して広く、
臨床的に測定範囲が広い腫瘍マーカー、ホルモンなどの
測定に適しているからであり、そのため、感度の異なる
二種類の光電子増倍管で同時に化学発光量を測定し、そ
れぞれの化学発光量を換算することで例えば９桁の測定
レンジを確保することができる。そして、このような測
定レンジを得るために、請求項２に記載した発明でも、
過酸化水素に対する化学発光反応の温度影響は反応セル
近傍の温度を計測して補正で対応している。 According to the second aspect of the present invention,
Measurement accuracy in enzyme immunoassay using a chemiluminescence reaction can be improved. That is, the enzyme immunoassay
Of chemiluminescence reaction to detect enzyme activity in
The reason is that the dynamic range of the chemiluminescence reaction
As shown in FIG. 2, compared to the colorimetric method and the fluorescent method,
Clinically wide measurement range of tumor markers, hormones, etc.
Because they are suitable for measurement, and therefore have different sensitivities.
The chemiluminescence was measured simultaneously with two types of photomultiplier tubes, and the
By converting each chemiluminescence amount, for example, 9-digit measurement
A range can be secured. And such a measurement
In order to obtain a constant range, even in the invention described in claim 2,
Temperature effect of chemiluminescence reaction on hydrogen peroxide
The nearby temperature is measured and corrected.
【図１】本発明に係る化学発光検出装置の構成例を示す
図である。FIG. 1 is a diagram showing a configuration example of a chemiluminescence detection device according to the present invention.
【図２】化学発光量の積算値を求める手法を説明するた
めのグラフである。FIG. 2 is a graph for explaining a method of obtaining an integrated value of the amount of chemiluminescence.
【図３】１×１０−４Ｍの過酸化水素を用いたときの化
学発光量における温度影響を示すグラフである。FIG. 3 is a graph showing the effect of temperature on the amount of chemiluminescence when 1 × 10 −4 M hydrogen peroxide is used.
【図４】５×１０−６Ｍの過酸化水素を用いたときの化
学発光量における温度影響を示すグラフである。FIG. 4 is a graph showing the effect of temperature on the amount of chemiluminescence when 5 × 10 −6 M hydrogen peroxide is used.
【図５】１×１０−７Ｍの過酸化水素を用いたときの化
学発光量における温度影響を示すグラフである。FIG. 5 is a graph showing the effect of temperature on the amount of chemiluminescence when 1 × 10 −7 M hydrogen peroxide is used.
【図６】濃度を変えたときにおける２５℃（標準温度）
の化学発光量に対する各濃度の化学発光量の比の変化を
表すグラフである。FIG. 6: 25 ° C. (standard temperature) when the concentration is changed
6 is a graph showing a change in the ratio of the amount of chemiluminescence at each concentration to the amount of chemiluminescence of Example 1.
【図７】ＡＦＰ（アルファフェトプロテイン）における
化学発光量を示すグラフである。FIG. 7 is a graph showing the amount of chemiluminescence in AFP (alpha fetoprotein).
【図８】ＣＥＡ（癌胎児性抗原）における化学発光量を
示すグラフである。FIG. 8 is a graph showing the amount of chemiluminescence in CEA (carcinoembryonic antigen).
【図９】ＬＨ（黄体ホルモン）における化学発光量を示
すグラフである。FIG. 9 is a graph showing the amount of chemiluminescence in LH (progestin).
【図１０】ＰＲＬ（プロラクチン）における化学発光量
を示すグラフである。FIG. 10 is a graph showing the amount of chemiluminescence in PRL (prolactin).
【図１１】ｈＣＧ（人絨毛腺ゴナドトロピン）における
化学発光量を示すグラフである。FIG. 11 is a graph showing the amount of chemiluminescence in hCG (gonadotropin of human chorionic gland).
１…セルホルダ、２…積分球状の空間、３…反応セル、
６…温度センサー。1 ... cell holder, 2 ... integrating spherical space, 3 ... reaction cell,
6 ... Temperature sensor.
フロントページの続き (58)調査した分野(Int.Cl.6，ＤＢ名) G01N 21/75 G01N 21/76Continuation of front page (58) Field surveyed (Int.Cl. 6 , DB name) G01N 21/75 G01N 21/76
Claims (2)
成し、この空間内に先端部側が位置するようにセルホル
ダの上方から反応セルを挿入し、この反応セルの近傍に
温度センサーを設け、更に、干渉フィルタを介して高感
度の光電子増倍管と低感度の光電子増倍管とを前記反応
セルを挟むようにして一直線状に設け、前記反応セル内
に反応液や発光試薬などを注入することにより過酸化水
素に対する発光反応において発生する化学発光の強度を
感度の異なる前記二種類の光電子増倍管によって検出す
るようにした化学発光検出装置であって、前記温度セン
サーによって得られた温度に基づいて前記化学発光の強
度を補正するようにしたことを特徴とする化学発光検出
装置。1. A forming the interior space of the integrating sphere of the cell holder, the insert the reaction cell from the top of the cell holder so that the tip portion is positioned in the space, a temperature sensor provided in the vicinity of the reaction cell, further High sensitivity through interference filter
Reaction between a photomultiplier tube with low sensitivity and a photomultiplier tube with low sensitivity
The reaction solution or the luminescent reagent is injected into the reaction cell in a straight line so as to sandwich the cell.
The intensity of the chemiluminescence generated in the luminescence reaction to
A chemiluminescence detection device configured to detect by the two types of photomultiplier tubes having different sensitivities , wherein the intensity of the chemiluminescence is corrected based on a temperature obtained by the temperature sensor. Chemiluminescence detector.
成し、この空間内に先端部側が位置するようにセルホル
ダの上方から反応セルを挿入し、この反応セルの近傍に
温度センサーを設け、更に、干渉フィルタを介して高感
度の光電子増倍管と低感度の光電子増倍管とを前記反応
セルを挟むようにして一直線状に設け、前記反応セル内
に反応液や発光液などを注入することにより過酸化水素
に対する発光反応において発生する化学発光の強度を感
度の異なる前記二種類の光電子増倍管によって検出する
ようにした化学発光検出装置を用いて、化学発光反応時
における温度を測定し、過酸化水素に対する発光反応の
温度影響曲線を補正曲線とし、前記温度センサーによっ
て得られた温度における補正係数を、前記光検出器によ
って得られる発光量に乗ずるようにしたことを特徴とす
る化学発光反応における温度補正方法。Wherein forming the interior space of the integrating sphere of the cell holder, the insert the reaction cell from the top of the cell holder so that the tip portion is positioned in the space, a temperature sensor provided in the vicinity of the reaction cell, further High sensitivity through interference filter
Reaction between a photomultiplier tube with low sensitivity and a photomultiplier tube with low sensitivity
Hydrogen peroxide is provided in a straight line so as to sandwich the cell, and a reaction solution or a luminescent solution is injected into the reaction cell.
Feeling the intensity of chemiluminescence generated in the light generating reaction to
Using a chemiluminescence detection device to be detected by the two types of photomultiplier tubes having different degrees, the temperature during the chemiluminescence reaction is measured, and the temperature effect curve of the luminescence reaction to hydrogen peroxide is used as a correction curve, A temperature correction method in a chemiluminescence reaction, wherein a correction coefficient at a temperature obtained by the temperature sensor is multiplied by a light emission amount obtained by the photodetector.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP4361073A JP2811565B2 (en) | 1992-12-30 | 1992-12-30 | Chemiluminescence detection device and temperature correction method in chemiluminescence reaction |
Applications Claiming Priority (1)
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