JP2632391B2 - Method for stabilizing peroxidase - Google Patents

Method for stabilizing peroxidase

Info

Publication number
JP2632391B2
JP2632391B2 JP63289892A JP28989288A JP2632391B2 JP 2632391 B2 JP2632391 B2 JP 2632391B2 JP 63289892 A JP63289892 A JP 63289892A JP 28989288 A JP28989288 A JP 28989288A JP 2632391 B2 JP2632391 B2 JP 2632391B2
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
pod
compound
solution
preservative
present
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Fee Related
Application number
JP63289892A
Other languages
Japanese (ja)
Other versions
JPH02135090A (en
Inventor
由嗣 佐方
寿郎 花田
亮介 松田
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Fujifilm Wako Pure Chemical Corp
Original Assignee
Wako Pure Chemical Industries Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Wako Pure Chemical Industries Ltd filed Critical Wako Pure Chemical Industries Ltd
Priority to JP63289892A priority Critical patent/JP2632391B2/en
Publication of JPH02135090A publication Critical patent/JPH02135090A/en
Application granted granted Critical
Publication of JP2632391B2 publication Critical patent/JP2632391B2/en
Anticipated expiration legal-status Critical
Expired - Fee Related legal-status Critical Current

Links

Landscapes

  • Enzymes And Modification Thereof (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明は、例えば生体成分の定量を行う際の共役酵素
として、或は、酵素免疫測定法等の標識酵素として用い
られるペルオキシダーゼ(以下、PODと略記する。)
の、NaN3を防腐剤として用いる溶液中での安定化方法に
関する。
DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION [Industrial Application Field] The present invention relates to a peroxidase (hereinafter referred to as POD) used as a conjugated enzyme for, for example, quantification of a biological component or as a labeling enzyme in an enzyme immunoassay or the like. Abbreviated.)
A method for stabilizing in a solution using NaN 3 as a preservative.

〔発明の背景〕[Background of the Invention]

PODは、酵素反応を利用した臨床検査に於て、共役酵
素として広く利用されているものの一つである。例え
ば、酸化酵素、POD及び被酸化性呈色試薬とを組み合わ
せた試薬を用いて体液成分を定量する方法は、特異性及
び操作の簡便性に優れているところから、近年その重要
性を増してきている。
POD is one of the widely used conjugated enzymes in clinical tests using enzyme reactions. For example, the method of quantifying a body fluid component using a reagent in which an oxidase, POD and an oxidizable color reagent are combined has recently been gaining importance because of its excellent specificity and simplicity of operation. ing.

また、最近では、免疫染色法、酵素免疫測定法等の免
疫学的測定法の分野に於いても、PODは標識酵素として
広く用いられるようになってきている。
Recently, POD has been widely used as a labeling enzyme also in the field of immunoassays such as immunostaining and enzyme immunoassay.

一方、臨床検査用試液、或は免疫学的測定用試液を長
期間保存する場合、試液中への防腐剤の添加は不可欠で
ある。このような目的で使用される防腐剤としては種々
のものが挙げられるが、中でもNaN3は、pHが中性付近の
溶液中に於ける防腐効果に優れ、酸化酵素を用いる酵素
反応系への影響も少ない等の利点を有するところから、
上記した如き試液に添加される防腐剤として広く用いら
れている。しかしながら、NaN3は他方に於てPODを失活
させる作用を有しており、PODを含む試液の防腐剤とし
てNaN3を用いた場合にはPODの安定性が悪くなるので、
試液の保存期間も必然的に短かくならざるを得ない。そ
れ故、NaN3を防腐剤として含む試液中でのPODの効果的
な安定化方法の出現が切に望まれている現状にある。
On the other hand, when a reagent for a clinical test or a reagent for an immunological measurement is stored for a long period of time, it is essential to add a preservative to the reagent. Various kinds of preservatives can be used for such a purpose. Among them, NaN 3 has an excellent preservative effect in a solution having a pH around neutrality, and is used in an enzyme reaction system using an oxidase. Because it has advantages such as less influence,
It is widely used as a preservative added to the test solution as described above. However, NaN 3 has the effect of deactivating POD on the other side, and when NaN 3 is used as a preservative of a test solution containing POD, the stability of POD is deteriorated.
The storage period of the test solution must be shortened inevitably. Therefore, the emergence of an effective method for stabilizing POD in a test solution containing NaN 3 as a preservative has been urgently desired.

〔発明の目的〕[Object of the invention]

本発明は上記した如き状況に鑑みなされたもので、Na
N3を防腐剤として含む溶液中に於いて、PODを長期間安
定に保存する方法を提供することを目的とする。
The present invention has been made in view of the circumstances as described above.
An object of the present invention is to provide a method for stably storing POD for a long time in a solution containing N 3 as a preservative.

〔発明の概要〕[Summary of the Invention]

本発明は、下記〜から成る群より選ばれた少なく
とも一種の化合物を共存させることを特徴とする、NaN3
を防腐剤として含む溶液中のPODの安定化方法の発明で
ある。(但し、下記3−メチルベンゾチアゾリノンヒ
ドラゾンとアニリン系化合物とを共存させる場合、及
び3−メチルベンゾチアゾリノンヒドラゾンとアニ
リン系化合物とフェロシアン化化合物とを共存させる
場合を除く。)4−アミノアンチピリン(以下、4−
AAと略す。)、3−メチルベンゾチアゾリノンヒドラ
ゾン(以下、MBTHと略す。)、2,2′−アジノビス
(3−エチルベンゾチアゾリン−6−スルホン酸)(以
下、ABTSと略す。)、トリフェニルメタン系ロイコ色
素、メチレンブルー系ロイコ色素、ジフェニルアミ
ン系ロイコ色素、フェノール系化合物、アニリン系
化合物、ナフトール系化合物、フェロシアン化化合
物。
The present invention is characterized by the coexistence of at least one compound selected from the group consisting of: ~, NaN 3
The invention is a method of stabilizing POD in a solution containing as a preservative. (However, this excludes the case where the following 3-methylbenzothiazolinone hydrazone coexists with an aniline-based compound and the case where 3-methylbenzothiazolinone hydrazone coexists with an aniline-based compound and a ferrocyanated compound.) -Aminoantipyrine (hereinafter referred to as 4-
Abbreviated as AA. ), 3-methylbenzothiazolinone hydrazone (hereinafter abbreviated as MBTH), 2,2'-azinobis (3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) (hereinafter abbreviated as ABTS), triphenylmethane-based Leuco dyes, methylene blue leuco dyes, diphenylamine leuco dyes, phenolic compounds, aniline compounds, naphthol compounds, ferrocyanide compounds.

即ち、本発明者らは、PODを失活させる作用を有するN
aN3を防腐剤として含む溶液中に於いて、PODを長期間安
定に保存する方法につき鋭意研究の結果、NaN3を防腐剤
として含むPOD溶液に、上記〜から成る群より選ば
れた少くとも一種の化合物(以下、本発明の安定化剤と
略記する。)を共存させた場合には、PODはNaN3により
失活させられることなく安定に保存され得ることを見出
し、本発明を完成するに至った。
That is, the present inventors have found that N has the effect of inactivating POD.
aN 3 In a solution containing a preservative, a result of intensive studies for each method of storing POD stable for a long time, the POD solution containing NaN 3 as preservative, at a minimum selected from the group consisting of the - When a compound (hereinafter, abbreviated as the stabilizer of the present invention) coexists, the present inventors have found that POD can be stably stored without being inactivated by NaN 3 , thereby completing the present invention. Reached.

本発明に於てPODの安定化剤として用いられるトリフ
ェニルメタン系ロイコ色素の具体例としては、例えばロ
イコマラカイトグリーン,ロイコクリスタルバイオレッ
ト,ビス(p−ジエチルアミノフェニル)2−スルホフ
ェニルメタン,ビス(p−ジエチルアミノフェニル)4
−スルホプロポキシフェニルメタンナトリウム塩,ビス
(p−ジエチルアミノフェニル)3,4−ジスルホプロポ
キシフェニルメタン・ジナトリウム塩(以下、BS−dipr
o PMと略す。)等が挙げられる。また、メチレンブルー
系ロイコ色素の具体例として、例えば10−カルボキシメ
チルアミノカルボニル−3,7−ジメチルアミノ−フェノ
チアジンナトリウム,10−N−メチルカルバモイル−3,7
−ジメチルアミノ−10H−フェノチアジン等が挙げられ
る。更に、ジフェニルアミン系ロイコ色素の具体例とし
ては、例えば4−ビス(ブトキシエチル)アミノ−2,
2′−ジメチル−4′−ジペンチルアミノ−ジフェニル
アミン,4−ビス(ブトキシエチル)アミノ−2′−メチ
ル−4′−ジペンチルアミノ−ジフェニルアミン,ビス
〔3−ビス(4−クロロフェニル)メチル−4−ジメチ
ル−アミノフェニル〕アミン等が挙げられる。また、フ
ェノール系化合物の具体例としては、例えばフェノー
ル,p−クロロフェノール,2,4−ジクロロフェノール,p−
ブロモフェノール,o−クロロフェノール,m−クロロフェ
ノール,p−ヒドロキシフェニル酢酸,3−(p−ヒドロキ
シフェニル)プロピオン酸等が挙げられる。更にまた、
アニリン系化合物の具体例としては、例えばアニリン,
N,N−ジメチルアニリン,N,N−ジエチルアニリン,N,N−
ジエチル−m−トルイジン,3−メチル−N−エチル−N
−(β−ヒドロキシエチル)−アニリン,N−エチル−N
−(2−ヒドロキシ−3−スルホプロピル)−m−トル
イジン,N−エチル−N−(2−ヒドロキシ−3−スルホ
プロピル)−3,5−ジメチルアニリン,N−エチル−N−
(2−ヒドロキシ−3−スルホプロピル)−3,5−ジメ
トキシアニリン等が挙げられる。そして、ナフトール系
化合物の具体例としては、例えば1−ナフトール,1−ナ
フトール−2−スルホン酸,1−ナフトール−2−カルボ
ン酸,1−ナフトール−8−スルホン酸,1−ナフトール−
3−スルホン酸,1−ナフトール−4−スルホン酸等が挙
げられる。そしてまた、フェロシアン化化合物の具体例
としては、フェロシアン化カリウム,フェロシアン化ナ
トリウム等が挙げられる。
Specific examples of the triphenylmethane-based leuco dye used as a POD stabilizer in the present invention include, for example, leucomalachite green, leuco crystal violet, bis (p-diethylaminophenyl) 2-sulfophenylmethane, bis (p -Diethylaminophenyl) 4
-Sulfopropoxyphenylmethane sodium salt, bis (p-diethylaminophenyl) 3,4-disulfopropoxyphenylmethane disodium salt (hereinafter, BS-dipr
o Abbreviated as PM. ) And the like. Specific examples of methylene blue leuco dyes include, for example, 10-carboxymethylaminocarbonyl-3,7-dimethylamino-phenothiazine sodium, 10-N-methylcarbamoyl-3,7
-Dimethylamino-10H-phenothiazine and the like. Further, specific examples of diphenylamine-based leuco dyes include, for example, 4-bis (butoxyethyl) amino-2,
2'-dimethyl-4'-dipentylamino-diphenylamine, 4-bis (butoxyethyl) amino-2'-methyl-4'-dipentylamino-diphenylamine, bis [3-bis (4-chlorophenyl) methyl-4-dimethyl -Aminophenyl] amine and the like. Specific examples of the phenolic compound include, for example, phenol, p-chlorophenol, 2,4-dichlorophenol, p-
Bromophenol, o-chlorophenol, m-chlorophenol, p-hydroxyphenylacetic acid, 3- (p-hydroxyphenyl) propionic acid and the like can be mentioned. Furthermore,
Specific examples of the aniline compound include, for example, aniline,
N, N-dimethylaniline, N, N-diethylaniline, N, N-
Diethyl-m-toluidine, 3-methyl-N-ethyl-N
-(Β-hydroxyethyl) -aniline, N-ethyl-N
-(2-hydroxy-3-sulfopropyl) -m-toluidine, N-ethyl-N- (2-hydroxy-3-sulfopropyl) -3,5-dimethylaniline, N-ethyl-N-
(2-hydroxy-3-sulfopropyl) -3,5-dimethoxyaniline and the like. Specific examples of the naphthol compound include, for example, 1-naphthol, 1-naphthol-2-sulfonic acid, 1-naphthol-2-carboxylic acid, 1-naphthol-8-sulfonic acid, and 1-naphthol.
3-sulfonic acid, 1-naphthol-4-sulfonic acid and the like. Further, specific examples of the ferrocyanide compound include potassium ferrocyanide, sodium ferrocyanide, and the like.

本発明の安定化方法に用いられる安定化剤の溶液中の
濃度としては、4−AAの場合は通常0.001〜0.5%、好ま
しくは0.005〜0.1%であり、MBTH,ABTSの場合は通常0.0
005〜0.4%、好ましくは0.001〜0.2%であり、トリフェ
ニルメタン系ロイコ色素の場合は通常0.0005〜0.5%、
好ましくは0.02〜0.2%であり、メチレンブルー系ロイ
コ色素、ジフェニルアミン系ロイコ色素の場合は通常0.
0002〜0.05%、好ましくは0.001〜0.01%であり、フェ
ノール系化合物,アニリン系化合物,ナフトール系化合
物の場合は通常0.001〜0.5%、好ましくは0.01〜0.3%
であり、フェロシアン化化合物の場合は通常0.00005〜
0.01%、好ましくは0.0002〜0.005%である。
The concentration of the stabilizer in the solution used in the stabilizing method of the present invention is usually 0.001 to 0.5%, preferably 0.005 to 0.1% in the case of 4-AA, and usually 0.05 to 0.1% in the case of MBTH and ABTS.
005 to 0.4%, preferably 0.001 to 0.2%, and in the case of triphenylmethane leuco dye, usually 0.0005 to 0.5%,
Preferably it is 0.02 to 0.2%, and in the case of a methylene blue leuco dye or a diphenylamine leuco dye, it is usually 0.1%.
0002-0.05%, preferably 0.001-0.01%, and in the case of phenol compounds, aniline compounds and naphthol compounds, usually 0.001-0.5%, preferably 0.01-0.3%.
In the case of a ferrocyan compound, usually 0.00005 to
It is 0.01%, preferably 0.0002 to 0.005%.

本発明の方法によりPODを安定化させるに際し、防腐
剤として共存するNaN3の許容量としては、通常この種目
的に於て用いられる使用量の範囲内であれば特に問題は
ないが、例えばPODを含む溶液中の濃度として0.02〜0.2
%程度が挙げられる。
In stabilizing POD by the method of the present invention, the allowable amount of NaN 3 coexisting as a preservative is not particularly limited as long as it is within the range of the amount usually used for this kind of purpose. 0.02-0.2 as the concentration in the solution containing
%.

本発明の方法により安定化し得るPODとしては、通常
生化学や免疫学の分野で用いられるものであれば特に限
定されることなく挙げられるが、例えば西洋ワサビ,牛
乳,白血球,酵母等に由来するもの、或はこれらに由来
するPODを抗体や抗原に結合したもの等が代表的なもの
として挙げられる。また、本発明の方法により安定化さ
れ得るPODの濃度は、通常臨床検査用試液や免疫学的測
定用試液に於て用いられている濃度範囲であれば特に限
定されない。
The POD which can be stabilized by the method of the present invention is not particularly limited as long as it is generally used in the fields of biochemistry and immunology. For example, POD derived from horseradish, milk, leukocytes, yeast, etc. And those obtained by binding POD derived therefrom to an antibody or an antigen. In addition, the concentration of POD that can be stabilized by the method of the present invention is not particularly limited as long as it is within a concentration range usually used in a clinical test solution or an immunological measurement test solution.

本発明の方法により安定化し得る溶液のpHとしては、
POD自体を不安定化する範囲でなければ特に限定されな
いが、好ましくは5.0〜9.0の範囲で選択される。また、
このpH範囲を維持するためには、適当な緩衝液が添加さ
れるが、このような目的のために用いられる緩衝液とし
ては、例えばリン酸塩緩衝液、トリス(ヒドロキシメチ
ル)アミノメタン緩衝液、例えばピペラジン−N,N′−
ビス(2−エタンスルホン酸)(以下、PIPESと略
す。)等のグッド(Goods')緩衝液等、通常生化学や免
疫化学の分野で汎用されているものであれば特に限定さ
れることなく挙げられる。
The pH of the solution that can be stabilized by the method of the present invention includes:
The POD is not particularly limited as long as it does not destabilize the POD itself, but is preferably selected in the range of 5.0 to 9.0. Also,
To maintain this pH range, an appropriate buffer is added. Examples of the buffer used for such a purpose include a phosphate buffer and a tris (hydroxymethyl) aminomethane buffer. For example, piperazine-N, N'-
No particular limitation is imposed on the type of the buffer, such as bis (2-ethanesulfonic acid) (hereinafter abbreviated as PIPES), as long as it is commonly used in the fields of biochemistry and immunochemistry, such as Goods' buffer. No.

本発明の方法により安定化されたPOD溶液は、長期間
保存可能であり、臨床検査用試液や免疫学的測定用試液
として各種用途に有効に利用し得る。
The POD solution stabilized by the method of the present invention can be stored for a long period of time, and can be effectively used for various uses as a reagent for a clinical test or a reagent for an immunological measurement.

以下に実施例を挙げて本発明を更に詳細に説明する
が、本発明はこれら実施例により何ら制約を受けるもの
ではない。
Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to Examples, but the present invention is not limited by these Examples.

〔実施例〕〔Example〕

実施例1. (POD溶液) 以下の組成の溶液をPOD溶液とした。 Example 1. (POD solution) A solution having the following composition was used as a POD solution.

NaN3 0.1 % エマルゲン913〔花王(株)社商品名;ポリオキシエチ
レンノニルフェニルエーテル〕 0.2 % エチレンジアミン四酢酸二ナトリウム 0.007% 水溶性ゼラチン 0.4 % POD(西洋ワサビ由来) 1,500U/dl 安定化剤 所定濃度 in 0.05M PIPES−KOH緩衝液(pH6.6) (試料) 調製直後、及び調製後5℃で15日間保存後の上記POD
溶液を、0.066Mリン酸緩衝液(pH5.6)で300倍希釈して
ものを試料とした。
NaN 3 0.1% Emulgen 913 (trade name of Kao Corporation; polyoxyethylene nonylphenyl ether) 0.2% Disodium ethylenediaminetetraacetate 0.007% Water-soluble gelatin 0.4% POD (derived from horseradish) 1,500U / dl Stabilizer prescribed Concentration in 0.05M PIPES-KOH buffer (pH 6.6) (sample) The above POD immediately after preparation and after storage at 5 ° C for 15 days
The sample was prepared by diluting the solution 300-fold with a 0.066 M phosphate buffer (pH 5.6).

(残存POD活性率の測定) o−ジアニシジン・二塩酸塩を0.08%、H2O2を0.007
%含む0.055Mリン酸緩衝液(pH5.6)3mlを30℃で予備加
温した後、調製直後のPOD溶液により得られた試料50μ
を添加した。30℃で5分間加温した後、18N硫酸溶液1
mlを加えて反応を停止させ、530nmに於ける吸光度Es
測定した。
(Measurement of residual POD activity ratio) 0.08% of o-dianisidine dihydrochloride and 0.007% of H 2 O 2
Pre-warmed 3 ml of 0.055M phosphate buffer (pH 5.6) containing 30% at 30 ° C., and then obtained a 50 μm sample obtained from the POD solution immediately after preparation.
Was added. After heating at 30 ° C for 5 minutes, 18N sulfuric acid solution 1
reaction was quenched by the addition of ml, and measured at an absorbance E s to 530 nm.

調製直後のPOD溶液により得られた試料の代りに、調
製後5℃で15日間保存後のPOD溶液から得られた試料を
用いて同様の操作を行い、530nmに於ける吸光度Etを測
定した。
Instead of the sample obtained by the POD solution immediately after preparation, by the same operation using samples obtained from a POD solution after storage for 15 days at 5 ° C. After the preparation was measured at absorbance E t to 530nm .

また、試料の代りに蒸留水を用いて同様の操作を行っ
て、試薬盲検EBlを求めた。
Further, the same operation was performed using distilled water instead of the sample, to obtain a reagent blind EBl .

これらの値を次式に代入して、調製後5℃で15日間保
存後のPOD溶液に於ける、POD残存活性率Z(%)を求め
た。
By substituting these values into the following equation, the POD residual activity ratio Z (%) in the POD solution after storage at 5 ° C. for 15 days was determined.

Z(%)=(Et−EBl)÷(Es−EBl)×100 結果を表1に示す。Z (%) = (E t −E Bl ) ÷ (E s −E Bl ) × 100 The results are shown in Table 1.

表1の結果から明らかな如く、本発明に係る化合物に
より、PODが顕著に安定化されることが判る。
As is clear from the results in Table 1, it can be seen that the compounds according to the present invention significantly stabilize POD.

実施例2. (POD溶液) 安定化剤として、フェノールを0.01,0.05又は0.1%、
若しくはフェロシアン化カリウムを0.00025,0.0005又は
0.001%使用し、実施例1と全く同様にしてPOD溶液を調
製した。
Example 2. (POD solution) Phenol was used as a stabilizer at 0.01, 0.05 or 0.1%,
Or 0.00025, 0.0005 potassium ferrocyanide or
Using 0.001%, a POD solution was prepared in exactly the same manner as in Example 1.

(試料) 調製直後及び調製後5℃で6日間、12日間又は15日間
保存後の上記POD溶液を、0.066Mリン酸緩衝液(pH5.6)
で300倍希釈したものを試料とした。
(Sample) Immediately after preparation and after storage at 5 ° C. for 6 days, 12 days or 15 days, the above POD solution was added to a 0.066 M phosphate buffer (pH 5.6).
The sample diluted 300 times with was used as a sample.

(残存POD活性率の測定) 実施例1と全く同様にして、調製後5℃で6日間、12
日間又は15日間保存後のPOD溶液に於ける、各POD残存活
性率Z(%)を求めた。
(Measurement of Residual POD Activity) In the same manner as in Example 1, 12 days at 5 ° C. for 12 days after preparation.
The residual activity rate Z (%) of each POD in the POD solution after storage for 15 days or 15 days was determined.

結果を表2に示す。 Table 2 shows the results.

表2の結果から明らかな如く、本発明に係る安定化剤
は幅広い濃度範囲でPODの安定化効果を有しており、し
かもその効果は安定化剤の濃度が高いほど良好であるこ
とが判る。
As is clear from the results in Table 2, the stabilizer according to the present invention has a POD stabilizing effect in a wide concentration range, and the effect is better as the concentration of the stabilizer is higher. .

実施例3. (POD溶液) 安定化剤として、フェノールと4−AA、若しくは4−
AAとN−エチル−N−(2−ヒドロキシ−3−スルホプ
ロピル)−m−トルイジン(以下、TOOSと略す。)を所
定濃度含む以外は、実施例1と同じ組成のものをPOD溶
液とした。
Example 3 (POD solution) As a stabilizer, phenol and 4-AA or 4-AA
A POD solution having the same composition as in Example 1 except that AA and N-ethyl-N- (2-hydroxy-3-sulfopropyl) -m-toluidine (hereinafter abbreviated as TOOS) were contained at a predetermined concentration. .

(試料) 調製直後、及び調製後5℃で15日間保存後の上記POD
溶液を、0.066Mリン酸緩衝液(pH5.6)で300倍希釈した
ものを試料とした。
(Sample) The above POD immediately after preparation and after storage at 5 ° C for 15 days after preparation
A solution obtained by diluting the solution 300-fold with a 0.066 M phosphate buffer (pH 5.6) was used as a sample.

(残存POD活性率の測定) 実施例1と全く同様にして調製後5℃で15日間保存後
のPOD溶液に於ける、POD残存活性率Z(%)を求めた。
(Measurement of Residual POD Activity Rate) The POD residual activity rate Z (%) in the POD solution after storage at 5 ° C. for 15 days after preparation was determined in exactly the same manner as in Example 1.

結果を表3に示す。 Table 3 shows the results.

表3の結果から明らかな如く、本発明に係る安定化剤
を2種以上組み合わせて使用した場合でも、PODが顕著
に安定化されることが判る。
As is clear from the results in Table 3, it can be seen that even when two or more stabilizers according to the present invention are used in combination, POD is significantly stabilized.

〔発明の効果〕〔The invention's effect〕

本発明は、NaN3を防腐剤として含む溶液中に於て、PO
Dを長期間安定に保存する方法を提供するものであり、
本発明の方法によれば優れた防腐効果を有しながら、PO
Dを失活させる作用を有するために、PODを含む溶液中で
の使用には支障のあったNaN3を、PODを含む溶液の防腐
剤として使用可能ならしめた点に顕著な効果を奏するも
のであり、斯業に貢献するところ極めて大なる発明であ
る。
The present invention provides a method for preparing PO in a solution containing NaN 3 as a preservative.
It provides a method to store D stably for a long time,
According to the method of the present invention, while having an excellent preservative effect, PO
In order to have an effect of deactivating D, and NaN 3 for which the trouble in use of a solution containing POD, which exhibits a remarkable effect in that occupies possibly used as a preservative solution containing POD This is an extremely large invention that contributes to the industry.

Claims (1)

(57)【特許請求の範囲】(57) [Claims] 【請求項1】下記〜から成る群より選ばれた少なく
とも一種の化合物を共存させることを特徴とする、NaN3
を防腐剤として含む溶液中でのペルオキシダーゼの安定
化方法。(但し、下記3−メチルベンゾチアゾリノン
ヒドラゾンとアニリン系化合物とを共存させる場合、
及び3−メチルベンゾチアゾリノンヒドラゾンとア
ニリン系化合物とフェロシアン化化合物とを共存させ
る場合を除く。) 4−アミノアンチピリン 3−メチルベンゾチアゾリノンヒドラゾン 2,2′−アジノビス(3−エチルベンゾチアゾリン−
6−スルホン酸) トリフェニルメタン系ロイコ色素 メチレンブルー系ロイコ色素 ジフェニルアミン系ロイコ色素 フェノール系化合物 アニリン系化合物 ナフトール系化合物 フェロシアン化化合物
(1) NaN 3 wherein at least one compound selected from the group consisting of:
A method for stabilizing peroxidase in a solution containing as a preservative. (However, when the following 3-methylbenzothiazolinone hydrazone and an aniline compound coexist,
And the case where 3-methylbenzothiazolinone hydrazone, an aniline-based compound and a ferrocyanide compound coexist. ) 4-Aminoantipyrine 3-methylbenzothiazolinone hydrazone 2,2'-azinobis (3-ethylbenzothiazoline-
6-sulfonic acid) triphenylmethane leuco dye methylene blue leuco dye diphenylamine leuco dye phenolic compound aniline compound naphthol compound ferrocyanide compound
JP63289892A 1988-11-16 1988-11-16 Method for stabilizing peroxidase Expired - Fee Related JP2632391B2 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP63289892A JP2632391B2 (en) 1988-11-16 1988-11-16 Method for stabilizing peroxidase

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP63289892A JP2632391B2 (en) 1988-11-16 1988-11-16 Method for stabilizing peroxidase

Publications (2)

Publication Number Publication Date
JPH02135090A JPH02135090A (en) 1990-05-23
JP2632391B2 true JP2632391B2 (en) 1997-07-23

Family

ID=17749119

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP63289892A Expired - Fee Related JP2632391B2 (en) 1988-11-16 1988-11-16 Method for stabilizing peroxidase

Country Status (1)

Country Link
JP (1) JP2632391B2 (en)

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR940008029B1 (en) * 1991-06-28 1994-08-31 삼성전자 주식회사 Power supply for driving magnetron
JP2007289097A (en) * 2006-04-26 2007-11-08 Toyobo Co Ltd Liquid reagent for determination of molar ratio of total branched-chain amino acid/tyrosine

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS58899A (en) * 1981-06-23 1983-01-06 ベ−リンガ−・マンハイム・ゲゼルシヤフト・ミツト・ベシユレンクテル・ハフツング Stabilized reagent for detecting h2o2 or h2o2 donor system
JPS5985290A (en) * 1982-11-06 1984-05-17 Toyobo Co Ltd Stable cleatine amidinohydrolase pharmaceutical
JPS6178385A (en) * 1984-09-25 1986-04-21 Toyobo Co Ltd Stable peroxidase composition
JPS61227799A (en) * 1985-04-01 1986-10-09 Kobayashi Seiyaku Kk Creatinine amidohydrolase preparation
JPS6296099A (en) * 1985-10-22 1987-05-02 Toyobo Co Ltd Reagent for determination of acidic phosphatase activity

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS58899A (en) * 1981-06-23 1983-01-06 ベ−リンガ−・マンハイム・ゲゼルシヤフト・ミツト・ベシユレンクテル・ハフツング Stabilized reagent for detecting h2o2 or h2o2 donor system
JPS5985290A (en) * 1982-11-06 1984-05-17 Toyobo Co Ltd Stable cleatine amidinohydrolase pharmaceutical
JPS6178385A (en) * 1984-09-25 1986-04-21 Toyobo Co Ltd Stable peroxidase composition
JPS61227799A (en) * 1985-04-01 1986-10-09 Kobayashi Seiyaku Kk Creatinine amidohydrolase preparation
JPS6296099A (en) * 1985-10-22 1987-05-02 Toyobo Co Ltd Reagent for determination of acidic phosphatase activity

Also Published As

Publication number Publication date
JPH02135090A (en) 1990-05-23

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP0878716B1 (en) Measurement of LDL-cholesterol
JP6569193B2 (en) Biological component measuring method and measuring composition
JP6435605B2 (en) Biological component measuring method and measuring composition
JP2016019496A (en) Biogenic component measurement method and measurement composition therefor
JP2632391B2 (en) Method for stabilizing peroxidase
JP4214648B2 (en) Glycated protein measurement reagent
GB2170600A (en) Enzyme assays
US5885788A (en) Method for measuring an amount of LDL-Cholesterol
JP2632391C (en)
JP3601648B2 (en) Biological component measuring reagent and measuring method
JPH1084997A (en) Assay of ldl-cholesterol
JPH1130617A (en) Ldl-cholesterol measuring method
JPH06508759A (en) Chromogenic substrates to improve detection in peroxidase-based assays
JPH10311833A (en) Method for determinating ldl-cholesterol
CA2872006C (en) Method for stabilizing ascorbic acid oxidase
US11208675B2 (en) Reaction accelerating agent
WO2019216407A1 (en) Method for suppressing decrease in sensitivity of reagent kit for measuring biological component
Porstmann et al. Chromogenic substrates for enzyme immunoassay
JP2003227798A (en) Method for stabilizing reagent composition and stabilized reagent composition
JP2893139B2 (en) Immunoturbidimetry and measuring reagents used for it
JP2019198321A (en) Method for inhibiting sensitivity reduction of biological component measurement reagent kit
WO2023190087A1 (en) Enhacement of accuracy when measuring high-creatinine-value specimen
WO2019216406A1 (en) Method for suppressing reductions in biological component measurement reagent kit sensitivity
WO2023085323A1 (en) Method for reducing measurement errors due to hemolyzed hemoglobin
WO2019216405A1 (en) Method for suppressing reduction in sensitivity of biological-component-measuring reagent kit

Legal Events

Date Code Title Description
LAPS Cancellation because of no payment of annual fees