JP2024505756A - 植物毛状突起における毛状突起密度の増加および代謝物の輸送の改善の方法 - Google Patents

植物毛状突起における毛状突起密度の増加および代謝物の輸送の改善の方法 Download PDF

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Abstract

本開示は、毛状突起密度の改変および代謝物の輸送に関連する組成物および方法、ならびにタバコおよび***を含む植物におけるそれらの使用に関する。提供される転写因子は、植物における毛状突起密度の増加を可能にする。TIFF2024505756000013.tif57170

Description

関連出願の相互参照および配列表の組み入れ
本出願は、2021年2月3日に出願された米国仮特許出願第63/145,259号；2021年2月3日に出願された米国仮特許出願第63/145,262号；および2021年2月3日に出願された米国仮特許出願第63/145,263号の恩典を主張するものであり、これらはすべて、参照によりその全体が本明細書に組み入れられる。本出願はまた、ASCIIフォーマットで電子提出されている配列表を含み、これは、参照によりその全体が本明細書に組み入れられる。2022年1月25日に作成された前記ASCIIコピーは、P335029WO00_SL.txtという名称であり、Microsoft Windows（登録商標）で測定した場合に141,791バイトサイズである。
分野
本開示は、植物組織の表面の毛状突起の形成および発達を増強すること、ならびに、毛状突起への特化代謝物の輸送、毛状突起からの特化代謝物の滲出を改善すること、そして、タバコを含めた植物におけるその化学組成を変化させるためのその適用に関する。
背景
腺毛状突起は、代謝化合物の合成および貯蔵部分である植物の表皮派生物である。茎、葉および花芽組織上のそれらの存在は、様々な生物的および非生物的ストレスから植物を保護する。腺毛状突起はまた、特化代謝物または二次代謝物の生合成、貯蔵および分泌においても役割を果たす。
腺毛状突起によって産生および分泌される代謝物は、疎水性であることが多い（例えば、脂肪酸誘導体、フラボノイド、テルペノイド）。テルペノイドは、最大かつ最も多様な植物代謝物のクラスを構成する。テルペノイドのオレフィン骨格は、5炭素（C）イソプレン単位の倍数からできており、主要なグループは、モノテルペン（10C）、セスキテルペン（15C）、およびジテルペン（20C）である。これらのテルペノイドは、5炭素イソプレン単位（ジメチルアリル二リン酸［DMAPP］およびイソペンテニル二リン酸［IPP］）同士の、ほとんどがDMAPPからIPPへの逐次的な頭尾付加による、縮合を通じて産生される。
産生される二次代謝物の量は、しばしば、植物表皮上に存在する腺毛状突起密度に厳密に相関する（Chalvin et al., Cell, 25:477-487 (2020)（非特許文献1））。植物において二次代謝物産生の量を増加させる1つの方法は、植物表皮上に存在する毛状突起の密度を増加させることである。毛状突起形成の転写調節は、転写因子のMYBおよびC2H2ジンクフィンガーファミリーのメンバーが関与していることが示されている。アルテミシア・アンヌア（Artemisia annua）MYB1（AaMYB1）のトランスジェニック過剰発現が、毛状突起密度を増加させ、続いて、アルテミシン（artemisin）の産生を増加させることが示された（Matias-Hernandez et al., Plant Journal, 90:520-534 (2017)（非特許文献2））。
脂質輸送タンパク質（LTP）は、腺毛状突起における特化代謝物の輸送において重要である。研究は、LTPの過剰発現が、植物腺毛状突起において滲出物の増加を導くことを示している（Choi et al., Plant Journal, 70:480-491 (2012)（非特許文献3））。
腺毛状突起がテルペノイドの生合成および分泌において重要な役割を果たすことから、植物における毛状突起の形成および発達の制御に関与する、遺伝子、調節因子およびシグナル伝達機構をより良く理解する必要性がある。また、毛状突起の上皮へのこれらの特化代謝物の分泌の様式を理解することも重要である。本開示では、植物における毛状突起密度を改変するために使用できる候補遺伝子が提供される。毛状突起密度の改変はまた、腺毛状突起における特化代謝物の輸送も改善するだろう。
Chalvin et al., Cell, 25:477-487 (2020) Matias-Hernandez et al., Plant Journal, 90:520-534 (2017) Choi et al., Plant Journal, 70:480-491 (2012)
概要
一局面では、本開示は、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも80％同一または類似のアミノ酸配列をコードする核酸配列を含む組換え核酸分子を含む、改変された植物、種子または植物部分であって、前記核酸配列が異種プロモーターに機能的に連結されている、改変された植物、種子または植物部分を提供する。
一局面では、本開示は、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも80％同一または類似のアミノ酸配列をコードする核酸配列を含む組換え核酸分子を含む改変されたタバコ植物またはタバコ植物部分由来の乾燥タバコ材料であって、前記核酸配列が異種プロモーターに機能的に連結されている、乾燥タバコ材料を提供する。
一局面では、本開示は、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも80％同一または類似のアミノ酸配列をコードする核酸配列を含む組換え核酸分子を含む改変されたタバコ植物、タバコ種子またはタバコ植物部分由来の材料を含むタバコ製品であって、前記核酸配列が異種プロモーターに機能的に連結されている、タバコ製品を提供する。
一局面では、本開示は、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも80％同一または類似のアミノ酸配列をコードする核酸配列を含む組換え核酸分子を含む改変された***植物、***種子または***植物部分由来の材料を含む***製品であって、前記核酸配列が、異種プロモーターに機能的に連結されている、***製品を提供する。
一局面では、本開示は、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも80％同一または類似のアミノ酸配列をコードする核酸配列を含む組換え核酸分子であって、前記核酸配列が異種プロモーターに機能的に連結されている、組換え核酸分子を提供する。
一局面では、本開示は、以下の工程を含む、植物を生産するための方法を提供する：（a）SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される配列に対して少なくとも80％同一である核酸配列を含む組換え核酸分子を含む少なくとも1つの植物を得る工程であって、前記核酸配列が異種プロモーターに機能的に連結されている、工程；（b）少なくとも1つの後代種子を生産するために、前記少なくとも1つの植物を第2の品種の少なくとも1つの植物と交雑させる工程；ならびに（c）工程（b）で生産された前記少なくとも1つの後代種子、またはそれから発芽した植物を選択する工程であって、前記少なくとも1つの後代種子またはそれから発芽した植物が前記組換え核酸分子を含む、工程。
一局面では、本開示は、以下の工程を含む、改変された植物を作製する方法を提供する：（a）SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される配列に対して少なくとも80％同一である核酸配列を含む組換え核酸分子を、少なくとも1つの植物細胞に導入する工程であって、前記核酸配列が異種プロモーターに機能的に連結されている、工程；（b）工程（a）から少なくとも1つの植物細胞を選択する工程であって、少なくとも1つの植物細胞が組換え核酸分子を含む、工程；ならびに（c）工程（b）で選択された少なくとも1つの植物細胞から、改変された植物を再生させる工程。
一局面では、本開示は、改変されたタバコ植物またはそれに由来する部分由来の乾燥タバコ材料を使用してタバコ製品を調製する工程を含む方法であって、改変されたタバコ植物またはそれに由来する部分が、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される配列に対して少なくとも80％同一である核酸配列であって、異種プロモーターに機能的に連結されている前記核酸配列を含む組換え核酸分子を、少なくとも1つの植物細胞に含む、方法を提供する。
一局面では、本開示は、改変された***植物またはそれに由来する部分由来の材料を使用して***製品を調製する工程を含む方法であって、改変された***植物またはそれに由来する部分が、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される配列に対して少なくとも80％同一である核酸配列であって、異種プロモーターに機能的に連結されている前記核酸配列を含む組換え核酸分子を、少なくとも1つの植物細胞に含む、方法を提供する。
一局面では、本開示は、植物細胞を、少なくとも1つの植物細胞に対する組換え核酸分子で形質転換する工程を含む方法であって、組換え核酸分子が、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される配列に対して少なくとも80％同一である核酸配列を含み、核酸配列が異種プロモーターに機能的に連結されている、方法を提供する。
一局面では、本開示は、以下の工程を含む、毛状突起密度が増加した植物を生産するための方法を提供する：（a）少なくとも1つの植物細胞に、ポリヌクレオチドに機能的に連結されている異種プロモーターを含む組換え核酸を提供する工程であって、ポリヌクレオチドが、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも80％同一または類似のアミノ酸配列をコードする、工程；（b）工程（a）の少なくとも1つの植物細胞から、改変された植物を再生させる工程であって、改変された植物が、同等条件下で生育させたときの組換え核酸を欠く対照植物由来の葉と比較して、少なくとも1枚の葉において、増加した毛状突起密度を含む、工程。
配列の簡単な説明
SEQ ID NO：1～12は、トランスジェニック植物での発現のための本明細書に記載される核酸配列のクローニングに使用できるプライマーである。
SEQ ID NO：13～17は、本明細書に記載される関心対象のタバコ遺伝子、具体的にはNtMYB86、NtGIS、NbGIS、およびNtLTP1のコード配列に対応する核酸配列である。
SEQ ID NO：18～22は、SEQ ID NO：13～17の核酸配列に対応するアミノ酸配列である。
SEQ ID NO：23～27は、本明細書に記載される関心対象のタバコ遺伝子、具体的にはNtMYB86、NtGIS、NbGIS、およびNtLTP1のゲノム配列に対応する核酸配列である。
SEQ ID NO：28～30は、本明細書に記載される関心対象の***遺伝子、具体的にはMYB61、GIS3、および非特異的脂質輸送タンパク質1様のコード配列に対応する核酸配列である。
SEQ ID NO：31～33は、SEQ ID NO：28～30の核酸配列に対応するアミノ酸配列である。
SEQ ID NO：34～36は、本明細書に記載される関心対象の***遺伝子、具体的にはMYB61、GIS3、および非特異的脂質輸送タンパク質1様のゲノム配列に対応する核酸配列である。
SEQ ID NO：37は、スイートワームウッド（アルテミシア・アンヌア）、具体的にはMYB転写因子のコード配列に対応する核酸配列である。
SEQ ID NO：38は、SEQ ID NO：37の核酸配列に対応するアミノ酸配列である。
SEQ ID NO：39～43は、本明細書に記載される関心対象のタバコ遺伝子、具体的にはMFS、NMD、CBTS2a（HM）、GGPPS2およびcis-アビエノールシンターゼ（ABS）のコード配列に対応する核酸配列である。
SEQ ID NO：44～48は、本明細書に記載される関心対象のタバコ遺伝子、具体的にはMFS、NMD、CBTS2a（HM）、GGPPS2およびcis-アビエノールシンターゼ（ABS）のゲノム配列に対応する核酸配列である。
SEQ ID NO：49～53は、SEQ ID NO：39～43の核酸配列に対応するアミノ酸配列である。
SEQ ID NO：54～62および63～71は、それぞれ、タバコLTP遺伝子のコード配列およびゲノム配列に対応する核酸配列である。
SEQ ID NO：72～80は、SEQ ID NO：54～62の核酸配列に対応するアミノ酸配列である。SEQ ID NO：81は、コンセンサスLTPアミノ酸配列である。SEQ ID NO：82～91は、図9に示されるようなSEQ ID NO：21および72～80の部分配列である。SEQ ID NO：92は、図9に示されるコンセンサスアミノ酸配列である。
表1は、本開示において使用される核酸配列およびアミノ酸配列を提供する。
（表１）本開示において使用される配列
Figure 2024505756000002
Figure 2024505756000003
Figure 2024505756000004
パネルA、B、およびCを含む。パネルAは、ニコチアナ・ベンサミアナ（Nicotiana benthamiana）における腺毛状突起を描写している。パネルBは、ニコチアナ・タバカム（Nicotiana tabacum）品種「TN90」における腺毛状突起を描写しており、パネルCは、ニコチアナ・タバカム品種「イズミル・エゴ（Izmir Ego）」における腺毛状突起を描写している。 タバコ形質転換に使用される発現ベクターを描写している。 図3は、パネル図3Aおよび図3Bを含む。図3Aは、タバコ植物におけるMYB転写因子ファミリーのDNA結合ドメインの系統樹解析（N＝319）を描写している。図3Bは、タバコMYB86遺伝子（SEQ ID NO：18、XP_016450602.1）およびスイートワームウッド（アルテミシア・アンヌア）MYB（SEQ ID NO：38、AGR40501.1）のタンパク質配列ペアワイズアライメントを描写しており、R2およびR3DNA結合ドメイン（ボックスで囲まれた）を具体的に強調している。黒丸は、分岐図上のMYB86を示す。図3A中のスケールバーは、系統樹を推測するために使用される進化距離を表す。 図3Aの説明を参照されたい。 タバコ植物におけるC2H2転写因子のGlabrous Inflorescence Stems（GIS）ファミリーの系統樹解析（N＝247）を描写している。黒丸は、分岐図上のNtGIS遺伝子（SEQ ID NO：19）を示す。スケールバーは、系統樹を推測するために使用される進化距離を表す。 パネルA、B、C、およびDを含む。パネルAは、野生型（WT）TN90の背軸の葉中央脈における腺毛状突起密度を描写している。パネルBは、CaMV 35Sプロモーターの制御下でNtMYB86（SEQ ID NO：13）を過剰発現するTN90の背軸の中央脈における腺毛状突起密度を描写しており、野生型TN90と比較した腺毛状突起密度の増加を実証している。野生型（WT）N. ベンサミアナの葉の小花柄の背軸図をパネルCに示す。パネルDは、野生型（パネルC）と比較した、CaMV 35Sプロモーターの制御下でNtMYB86を過剰発現するN. ベンサミアナにおける腺毛状突起密度の増加を描写している。画像は、10×の倍率で示される光学顕微鏡写真である。 パネルAおよびパネルBを含む。パネルAは、野生型（WT）ニコチアナ・ベンサミアナの主な栄養茎における腺毛状突起密度を描写している。パネルBは、NtMYB86（SEQ ID NO：18）を過剰発現するN. ベンサミアナの主な栄養茎における腺毛状突起密度を描写している。画像は、160×の倍率で示される光学顕微鏡写真である。 図7は、パネル図7Aおよび図7Bを含む。図7Aは、野生型ニコチアナ・タバカム品種イズミル・エゴ（a）と比較した、イズミル・エゴバックグラウンドにおけるNtMYB86（SEQ ID NO：18）（b）、NtGIS（SEQ ID NO：19）（c）、およびNbGIS（SEQ ID NO：20）（c）を過剰発現するタバコ葉の腺毛状突起密度の光学顕微鏡写真を描写している。画像は、70×の倍率で示しており、スケールバーは、1mmを表す。図7Bは、イズミル・エゴWT、NtMYB86（SEQ ID NO：18）、NtGIS（SEQ ID NO：19）、およびNbGIS（SEQ ID NO：20）を過剰発現するイズミル・エゴT0トランスジェニック系統の葉の毛状突起数を描写している。 図7Aの説明を参照されたい。 図8は、パネル図8Aおよび図8Bを含む。図8Aは、LTP遺伝子ファミリーの系統樹解析を描写しており、NtLTP1遺伝子の位置は、黒丸によって印が付けられている。図8Bは、2つのNtLTP1アイソフォームのタバコ植物における配列アライメントおよび遺伝子構造比較を描写している（それぞれ、登場順に、SEQ ID NO：21、22、および93）。 図8Aの説明を参照されたい。 ClustalW多重配列アライメントアルゴリズム後にニコチアナ・タバカムゲノムにおいて特定された76の代表NtLTP数の保存モチーフを描写している。特定されたNtLTPの≧90％で、6個の保存システイン残基（ボックスで囲まれた）が特に保存されている。 T0世代の9つの独立したイズミル・エゴトランスジェニック系統におけるNtMYB86（SEQ ID NO：14）の相対遺伝子発現を描写している。相対遺伝子発現は、2(-ΔΔC(t))法後に定量した。2(-ΔΔC(t))法に関する情報については、Livak and Schmittgen, Methods, 25:402-408 (2001)を参照されたい。野生型対照イズミル・エゴ植物におけるNtMYB86の発現は、ベースラインとして使用し（例えば、野生型発現を1に設定する）、示していない。 T0世代の8つの独立したイズミル・エゴトランスジェニック系統におけるNtGIS（SEQ ID NO：16）の相対遺伝子発現を描写している。相対遺伝子発現は、2-ΔΔCT法後に定量した。野生型対照イズミル・エゴ植物におけるNtGISの発現は、ベースラインとして使用し（例えば、野生型発現を1に設定する）、示していない。 NbGIS（SEQ ID NO：20）、NtGIS（SEQ ID NO：19）、NtMFS（SEQ ID NO：39）、NtNMD（29837；SEQ ID NO：40）、ニコチアナ・シルベストリス（Nicotiana sylvestris）センブラトリエノールシンターゼ2a（HM；SEQ ID NO：41）、ゲラニルゲラニル二リン酸シンターゼ（GQ；SEQ ID NO：42）、およびcis-アビエノールシンターゼ（AAB；SEQ ID NO：43）を過剰発現するT0イズミル・エゴトランスジェニック系統の葉における、デュバトリエンジオールの相対存在量を描写している。 NbGIS（SEQ ID NO：20）、NtGIS（SEQ ID NO：19）、NtMFS（SEQ ID NO：39）、NtNMD（29837；SEQ ID NO：40）、ニコチアナ・シルベストリスセンブラトリエノールシンターゼ2a（HM；SEQ ID NO：41）、ゲラニルゲラニル二リン酸シンターゼ（GQ；SEQ ID NO：42）、およびcis-アビエノールシンターゼ（AAB；SEQ ID NO：43）を過剰発現するT0イズミル・エゴトランスジェニック系統の葉における、ネオフィタジエンの相対存在量を描写している。 NbGIS（SEQ ID NO：20）、NtGIS（SEQ ID NO：19）、NtMFS（SEQ ID NO：39）、NtNMD（29837；SEQ ID NO：40）、ニコチアナ・シルベストリスセンブラトリエノールシンターゼ2a（HM；SEQ ID NO：41）、ゲラニルゲラニル二リン酸シンターゼ（GQ；SEQ ID NO：42）、およびcis-アビエノールシンターゼ（AAB；SEQ ID NO：43）を過剰発現するT0イズミル・エゴトランスジェニック系統の葉における、2,4-ジメチル-1-ヘプテンの相対存在量を描写している。 NbGIS（SEQ ID NO：20）、NtGIS（SEQ ID NO：19）、NtMFS（SEQ ID NO：39）、NtNMD（29837；SEQ ID NO：40）、ニコチアナ・シルベストリスセンブラトリエノールシンターゼ2a（HM；SEQ ID NO：41）、ゲラニルゲラニル二リン酸シンターゼ（GQ；SEQ ID NO：42）、およびcis-アビエノールシンターゼ（AAB；SEQ ID NO：43）を過剰発現するT0イズミル・エゴトランスジェニック系統の葉における、cis-アビエノールの相対存在量を描写している。 イズミル・エゴ品種のT1トランスジェニックタバコ系統におけるCaMV 35Sプロモーターの制御下でのNtMYB86（SEQ ID NO：13）の相対遺伝子発現レベルを描写している。 イズミル・エゴ品種のT1トランスジェニックタバコ系統におけるCaMV 35Sプロモーターの制御下でのNbGIS（SEQ ID NO：15）の相対遺伝子発現レベルを描写している。
詳細な説明
特に定義のない限り、使用されるすべての技術用語および科学用語は、本開示が属する技術分野の当業者によって一般に理解されるものと同じ意味を有する。用語が単数形で提供される場合、本発明者らは、その用語の複数形によって記載される本開示の局面も想定している。参照により組み入れられる参考文献において使用される用語および定義に相違がある場合、本出願において使用される用語は、本明細書に与えられる定義を有するものとする。使用される他の技術用語は、様々な専門用語辞典、例えば、「The American Heritage（登録商標）Science Dictionary」（Editors of the American Heritage Dictionaries, 2011, Houghton Mifflin Harcourt, Boston and New York）、「McGraw-Hill Dictionary of Scientific and Technical Terms」（6th edition, 2002, McGraw-Hill, New York）、または「Oxford Dictionary of Biology」（6th edition, 2008, Oxford University Press, Oxford and New York）に例示されるように、それらが使用される技術分野における一般的な意味を有する。
例えば、すべての特許、公開特許出願および非特許刊行物を含め、本明細書において引用されるあらゆる参考文献が、参照によりその全体が本明細書に組み入れられる。
選択肢のグループ分けが提示される場合、その選択肢のグループ分けを成すメンバーのありとあらゆる組み合わせが具体的に想定される。例えば、ある項目が、A、B、C、およびDからなる群より選択される場合、本発明者らは、それぞれの選択肢を個別に（例えば、A単独、B単独など）、また、例えばAとBとD；AとC；BとCなどの組み合わせも、具体的に想定している。「および／または」という用語は、2つ以上の項目の一覧において使用される場合、列挙された項目のいずれか1つを単独として、またはその他の列挙された項目のいずれか1つもしくは複数との組み合わせとして意味する。例えば、「Aおよび／またはB」という表現は、AとBのいずれか一方または両方、すなわち、A単独、B単独、またはAとBの組み合わせを意味することが意図される。「A、Bおよび／またはC」という表現は、A単独、B単独、C単独、AとBの組み合わせ、AとCの組み合わせ、BとCの組み合わせ、またはAとBとCの組み合わせを意味することが意図される。
本明細書において数値の範囲が提供される場合、その範囲は、その範囲の端部も、その規定された範囲の端部間の任意の数値も包含するものと理解される。例えば、「1～10」は、1～10の間の任意の数値も、数値1および数値10も含む。
数値に関して「約」という用語が使用される場合、＋または－10％を意味するものと理解される。例えば、「約100」は、90から110までを含むだろう。
本明細書において使用される場合、単数形の「1つの（a）」、「1つの（an）」および「その（the）」は、文脈が明確にそうでないと示していない限り、複数の指示対象を含む。例えば、「1つの化合物」または「少なくとも1つの化合物」という用語は、その混合物を含め、複数の化合物を含み得る。
本明細書に提供される任意のタバコ植物、またはその部分が、本明細書に提供される任意の方法との使用に具体的に想定される。同様に、任意の改変されたタバコ植物、またはその部分も、本明細書に提供される任意の方法との使用に具体的に想定される。本明細書に提供される任意の核酸配列、アミノ酸配列、または他の組成物が、本明細書に提供される任意の方法との使用に具体的に想定される。
本明細書に提供される任意の***植物、またはその部分が、本明細書に提供される任意の方法との使用に具体的に想定される。同様に、任意の改変された***植物、またはその部分も、本明細書に提供される任意の方法との使用に具体的に想定される。本明細書に提供される任意の核酸配列、アミノ酸配列、または他の組成物が、本明細書に提供される任意の方法との使用に具体的に想定される。
毛状突起は、一般に、ほとんどの地上植物組織を覆う毛様の表皮派生物である。毛状突起は、多細胞性である傾向があるが、単細胞性の毛状突起も知られている。個々の植物において複数の種類の毛状突起を見いだすことができ、毛状突起は、形状、サイズおよび細胞構成が様々である。個々の毛状突起は、腺毛状突起または非腺毛状突起として分類することができる。
腺毛状突起（図1を参照のこと）は、大量の特化代謝物（例えば、テルペン）を分泌または貯蔵できる細胞から成る突出部（head）の存在を特徴とする。腺毛状突起のグループ内で、毛状突起は、楯状または頭状としてさらに特徴付けることができる。頭状の腺毛状突起は、典型的には、突出部の高さの2倍を超える長さの柄を持ち、毛状突起における細胞の数は、非常に変動的である。楯状の毛状突起は、1つまたは2つの同心円に配置された4～18個の細胞から成る大きな突出部を有する、短い柄を持つ毛状突起である。
ある局面では、毛状突起は、腺毛状突起である。ある局面では、腺毛状突起は、頭状の腺毛状突起である。ある局面では、腺毛状突起は、楯状の腺毛状突起である。ある局面では、腺毛状突起は、頭状の腺毛状突起および楯状の腺毛状突起からなる群より選択される。
ある局面では、腺毛状突起の形成および発達は、MYBおよびC2H2転写因子遺伝子ファミリーに属する遺伝子を含むがそれらに限定されない数個の転写因子によって調節される。
ある局面では、本開示は、その密度を改善するための毛状突起の形成および発達のための、異種プロモーターに機能的に連結されているポリペプチドをコードする核酸配列を含む組換え核酸分子を含む、改変された植物、種子または植物部分を提供する。別の局面では、本開示は、毛状突起上皮への代謝物の分泌を改善するための、異種プロモーターに機能的に連結されているポリペプチドをコードする核酸配列を含む、改変された植物、種子または植物部分を提供する。さらなる局面では、改変された植物、種子または植物部分は、ニコチアナ（Nicotiana）属の植物、種子または植物部分である。さらなる局面では、改変された植物、種子または植物部分は、カンナビス（Cannabis）属の植物、種子または植物部分である。
毛状突起形成の転写因子の調節
転写因子は、植物の生育および発達に関与する様々な生物学的プロセスの公知の調節因子である。腺毛状突起形成の調節因子として数個の転写因子が特定されている。これらは、転写因子遺伝子ファミリーR2R3-MYB、HD-ZIP IV、MYC、およびC2H2を含むが、それらに限定されない（Chavlin et al., 2020）。アルテミシア・アンヌアにおけるMYB1（AaMYB1）の過剰発現は、毛状突起密度の増加だけでなく、セスキテルペンラクトンであるアルテミシンの産生も有意に増加させる（Matias-Hernandez et al., 2017）。毛状突起の発達ならびにテルペン生合成を調節する別の転写因子は、塩基性ヘリックスループヘリックス（bHLH）であるMYC1である。トマトにおけるMYC1（SlMYC1）のノックダウンは、モノテルペンの有意な低減、ならびにより小さなVI型腺毛状突起の低密度の異所発生を導いた（Xu et al., Plant Cell, 30:2988-3005 (2018)）。C2H2遺伝子ファミリーに属する転写因子もまた、タバコにおける毛状突起の発達の調節に関与する。ニコチアナ・ベンサミアナのGIS（NbGIS）の過剰発現は、トランスジェニック系統において腺毛状突起密度の増加をもたらした（Liu et al., Plant Molecular Biology, 98:153-167 (2018)）。
腺毛状突起における代謝物の貯蔵および輸送
腺毛状突起は、葉の乾燥重量の最大20％を占め得る大量の代謝物を産生する（Tissier et al., Trends in Plant Science, 22:930-938 (2017)）。毛状突起は、二次代謝物の貯蔵を可能にする形態学的特徴を発現する。これらの形態学的特徴の種類、形状およびサイズは、腺毛状突起の種類に依存する。ジテルペノイドを含めた不揮発性化合物は、典型的には、頭状の腺毛状突起によって産生され、毛状突起の先端から直接分泌されるが、一方、揮発性化合物を産生する腺毛状突起は、分泌および貯蔵のための専用の構造を有する（Tissier et al., 2017）。毛状突起における疎水性分子の輸送は、揮発性有機化合物の親水性の細胞壁を通過する移動を促進し、VOCの原形質膜への再分配を防ぐ、輸送体および脂質輸送タンパク質（LTP）を必要とする（Tissier et al., 2017）。LTPは、高度に保存されたシステインリッチモチーフを特徴とする小さな（約10kDa）の可溶性タンパク質である（Salminen et al., Planta, 244:971-997 (2016)）。図10を参照されたい。LTPは、クチクラワックスの蓄積、花粉および種子の発生ならびに細胞の増大を含むがそれらに限定されない、植物の生育および発達中の様々な機能に関与する（Salminen et al., 2016）。毛状突起特異的NtLTP1は、タバコ植物において毛状突起滲出物での分泌を増加させ、過剰発現されたときに害虫防御を高めることも報告された（Choi et al., 2012）。
植物
ある局面では、本明細書に提供される植物は、改変された植物である。ある局面では、本明細書に提供される種子は、改変された種子である。ある局面では、本明細書に提供される植物部分は、改変された植物部分である。本明細書において使用される場合、植物、種子または植物部分との関連での「改変された」は、ある特定の目的のために導入され、自然多型の域を超える遺伝子変異を含む、植物、種子または植物部分のことを指す。限定されないが、改変された植物、種子または植物部分は、組換え核酸分子を含む。別の局面では、改変された植物、種子または植物部分は、遺伝子改変を含む。ある局面では、改変された植物、種子または植物部分は、トランスジェニック植物、種子または植物部分である。
ある局面では、本開示は、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも80％同一または類似のアミノ酸配列をコードする核酸配列を含む組換え核酸分子を含む、改変された植物、種子または植物部分であって、核酸配列が、異種プロモーターに機能的に連結されている、改変された植物、種子または植物部分を提供する。ある局面では、本開示は、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも85％同一または類似のアミノ酸配列をコードする核酸配列を含む組換え核酸分子を含む、改変された植物、種子または植物部分であって、核酸配列が異種プロモーターに機能的に連結されている、改変された植物、種子または植物部分を提供する。ある局面では、本開示は、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも90％同一または類似のアミノ酸配列をコードする核酸配列を含む組換え核酸分子を含む、改変された植物、種子または植物部分であって、核酸配列が異種プロモーターに機能的に連結されている、改変された植物、種子または植物部分を提供する。ある局面では、本開示は、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも95％同一または類似のアミノ酸配列をコードする核酸配列を含む組換え核酸分子を含む、改変された植物、種子または植物部分であって、核酸配列が異種プロモーターに機能的に連結されている、改変された植物、種子または植物部分を提供する。ある局面では、本開示は、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも96％同一または類似のアミノ酸配列をコードする核酸配列を含む組換え核酸分子を含む、改変された植物、種子または植物部分であって、核酸配列が異種プロモーターに機能的に連結されている、改変された植物、種子または植物部分を提供する。ある局面では、本開示は、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも97％同一または類似のアミノ酸配列をコードする核酸配列を含む組換え核酸分子を含む、改変された植物、種子または植物部分であって、核酸配列が異種プロモーターに機能的に連結されている、改変された植物、種子または植物部分を提供する。ある局面では、本開示は、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも98％同一または類似のアミノ酸配列をコードする核酸配列を含む組換え核酸分子を含む、改変された植物、種子または植物部分であって、核酸配列が異種プロモーターに機能的に連結されている、改変された植物、種子または植物部分を提供する。ある局面では、本開示は、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも99％同一または類似のアミノ酸配列をコードする核酸配列を含む組換え核酸分子を含む、改変された植物、種子または植物部分であって、核酸配列が異種プロモーターに機能的に連結されている、改変された植物、種子または植物部分を提供する。ある局面では、本開示は、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも99.9％同一または類似のアミノ酸配列をコードする核酸配列を含む組換え核酸分子を含む、改変された植物、種子または植物部分であって、核酸配列が異種プロモーターに機能的に連結されている、改変された植物、種子または植物部分を提供する。ある局面では、本開示は、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して100％同一または類似のアミノ酸配列をコードする核酸配列を含む組換え核酸分子を含む、改変された植物、種子または植物部分であって、核酸配列が異種プロモーターに機能的に連結されている、改変された植物、種子または植物部分を提供する。
ある局面では、本開示は、SEQ ID NO：72～81からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも80％、少なくとも85％、少なくとも90％、少なくとも95％、少なくとも96％、少なくとも97％、少なくとも98％、少なくとも99％、少なくとも99.5％、少なくとも99.9％、または100％同一または類似のアミノ酸配列をコードする核酸配列を含む組換え核酸分子を含む、改変された植物、種子または植物部分であって、核酸配列が異種プロモーターに機能的に連結されている、改変された植物、種子または植物部分を提供する。
ある局面では、本開示は、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される核酸配列に対して少なくとも80％同一である核酸配列を含む組換え核酸分子を含む、改変された植物、種子または植物部分であって、核酸配列が異種プロモーターに機能的に連結されている、改変された植物、種子または植物部分を提供する。ある局面では、本開示は、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される核酸配列に対して少なくとも85％同一である核酸配列を含む組換え核酸分子を含む、改変された植物、種子または植物部分であって、核酸配列が異種プロモーターに機能的に連結されている、改変された植物、種子または植物部分を提供する。ある局面では、本開示は、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される核酸配列に対して少なくとも90％同一である核酸配列を含む組換え核酸分子を含む、改変された植物、種子または植物部分であって、核酸配列が異種プロモーターに機能的に連結されている、改変された植物、種子または植物部分を提供する。ある局面では、本開示は、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される核酸配列に対して少なくとも95％同一である核酸配列を含む組換え核酸分子を含む、改変された植物、種子または植物部分であって、核酸配列が異種プロモーターに機能的に連結されている、改変された植物、種子または植物部分を提供する。ある局面では、本開示は、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される核酸配列に対して少なくとも96％同一である核酸配列を含む組換え核酸分子を含む、改変された植物、種子または植物部分であって、核酸配列が異種プロモーターに機能的に連結されている、改変された植物、種子または植物部分を提供する。ある局面では、本開示は、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される核酸配列に対して少なくとも97％同一である核酸配列を含む組換え核酸分子を含む、改変された植物、種子または植物部分であって、核酸配列が異種プロモーターに機能的に連結されている、改変された植物、種子または植物部分を提供する。ある局面では、本開示は、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される核酸配列に対して少なくとも98％同一である核酸配列を含む組換え核酸分子を含む、改変された植物、種子または植物部分であって、核酸配列が異種プロモーターに機能的に連結されている、改変された植物、種子または植物部分を提供する。ある局面では、本開示は、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される核酸配列に対して少なくとも99％同一である核酸配列を含む組換え核酸分子を含む、改変された植物、種子または植物部分であって、核酸配列が異種プロモーターに機能的に連結されている、改変された植物、種子または植物部分を提供する。ある局面では、本開示は、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される核酸配列に対して少なくとも99.9％同一である核酸配列を含む組換え核酸分子を含む、改変された植物、種子または植物部分であって、核酸配列が異種プロモーターに機能的に連結されている、改変された植物、種子または植物部分を提供する。ある局面では、本開示は、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される核酸配列に対して100％同一である核酸配列を含む組換え核酸分子を含む、改変された植物、種子または植物部分であって、核酸配列が異種プロモーターに機能的に連結されている、改変された植物、種子または植物部分を提供する。
ある局面では、本開示は、SEQ ID NO：54～71からなる群より選択される核酸配列に対して少なくとも80％、少なくとも85％、少なくとも90％、少なくとも95％、少なくとも96％、少なくとも97％、少なくとも98％、少なくとも99％、少なくとも99.5％、少なくとも99％、または100％同一である核酸配列を含む組換え核酸分子を含む、改変された植物、種子または植物部分であって、核酸配列が異種プロモーターに機能的に連結されている、改変された植物、種子または植物部分を提供する。
ある局面では、改変された植物の少なくとも1枚の葉は、同等条件下で生育させた対照植物の葉と比較して、より大きな平均毛状突起密度を含む。ある局面では、改変された植物の少なくとも1枚の葉は、同等条件下で生育させた対照植物の葉の背軸面と比較して、葉の背軸面において、より大きな平均毛状突起密度を含む。ある局面では、改変された植物の少なくとも1枚の葉は、同等条件下で生育させた対照植物の葉の向軸面と比較して、葉の向軸面において、より大きな平均毛状突起密度を含む。
ある局面では、改変された植物の少なくとも2枚の葉は、同等条件下で生育させた対照植物の2枚の葉と比較して、より大きな平均毛状突起密度を含む。ある局面では、改変された植物の葉の大部分は、同等条件下で生育させた対照植物の同数の葉と比較して、より大きな平均毛状突起密度を含む。ある局面では、改変された植物の葉のすべては、同等条件下で生育させた対照植物の葉のすべてと比較して、より大きな平均毛状突起密度を含む。
ある局面では、改変された植物の少なくとも1つの茎は、同等条件下で生育させた対照植物の茎と比較して、より大きな平均毛状突起密度を含む。ある局面では、改変された植物の少なくとも1つの花は、同等条件下で生育させた対照植物の花と比較して、より大きな平均毛状突起密度を含む。ある局面では、改変された植物の少なくとも1つの根は、同等条件下で生育させた対照植物の根と比較して、より大きな平均毛状突起密度を含む。
ある局面では、改変された植物は、対照植物と比較して、より大きな平均密度の腺毛状突起を含む。ある局面では、改変された植物は、対照植物と比較して、より大きな平均密度の非腺毛状突起を含む。
ある局面では、改変されたタバコ植物の葉は、少なくとも70個の毛状突起／平方センチメートルを含む。ある局面では、改変されたタバコ植物の葉は、少なくとも75個の毛状突起／平方センチメートルを含む。ある局面では、改変されたタバコ植物の葉は、少なくとも80個の毛状突起／平方センチメートルを含む。ある局面では、改変されたタバコ植物の葉は、少なくとも85個の毛状突起／平方センチメートルを含む。ある局面では、改変されたタバコ植物の葉は、少なくとも90個の毛状突起／平方センチメートルを含む。ある局面では、改変されたタバコ植物の葉は、少なくとも95個の毛状突起／平方センチメートルを含む。ある局面では、改変されたタバコ植物の葉は、少なくとも100個の毛状突起／平方センチメートルを含む。ある局面では、改変されたタバコ植物の葉は、少なくとも105個の毛状突起／平方センチメートルを含む。ある局面では、改変されたタバコ植物の葉は、少なくとも110個の毛状突起／平方センチメートルを含む。ある局面では、改変されたタバコ植物の葉は、少なくとも115個の毛状突起／平方センチメートルを含む。ある局面では、改変されたタバコ植物の葉は、少なくとも120個の毛状突起／平方センチメートルを含む。ある局面では、改変されたタバコ植物の葉は、少なくとも125個の毛状突起／平方センチメートルを含む。ある局面では、改変されたタバコ植物の葉は、少なくとも130個の毛状突起／平方センチメートルを含む。ある局面では、改変されたタバコ植物の葉は、少なくとも140個の毛状突起／平方センチメートルを含む。ある局面では、改変されたタバコ植物の葉は、少なくとも150個の毛状突起／平方センチメートルを含む。
ある局面では、改変されたタバコ植物の葉は、60個～200個の毛状突起／平方センチメートルを含む。ある局面では、改変されたタバコ植物の葉は、60個～190個の毛状突起／平方センチメートルを含む。ある局面では、改変されたタバコ植物の葉は、60個～180個の毛状突起／平方センチメートルを含む。ある局面では、改変されたタバコ植物の葉は、60個～170個の毛状突起／平方センチメートルを含む。ある局面では、改変されたタバコ植物の葉は、60個～160個の毛状突起／平方センチメートルを含む。ある局面では、改変されたタバコ植物の葉は、60個～150個の毛状突起／平方センチメートルを含む。ある局面では、改変されたタバコ植物の葉は、60個～140個の毛状突起／平方センチメートルを含む。ある局面では、改変されたタバコ植物の葉は、60個～130個の毛状突起／平方センチメートルを含む。ある局面では、改変されたタバコ植物の葉は、60個～120個の毛状突起／平方センチメートルを含む。ある局面では、改変されたタバコ植物の葉は、60個～110個の毛状突起／平方センチメートルを含む。ある局面では、改変されたタバコ植物の葉は、60個～100個の毛状突起／平方センチメートルを含む。ある局面では、改変されたタバコ植物の葉は、60個～90個の毛状突起／平方センチメートルを含む。ある局面では、改変されたタバコ植物の葉は、60個～80個の毛状突起／平方センチメートルを含む。ある局面では、改変されたタバコ植物の葉は、60個～70個の毛状突起／平方センチメートルを含む。
ある局面では、改変されたタバコ植物の葉は、80個～130個の毛状突起／平方センチメートルを含む。ある局面では、改変されたタバコ植物の葉は、80個～120個の毛状突起／平方センチメートルを含む。ある局面では、改変されたタバコ植物の葉は、80個～100個の毛状突起／平方センチメートルを含む。ある局面では、改変されたタバコ植物の葉は、75個～140個の毛状突起／平方センチメートルを含む。ある局面では、改変されたタバコ植物の葉は、75個～130個の毛状突起／平方センチメートルを含む。ある局面では、改変されたタバコ植物の葉は、75個～125個の毛状突起／平方センチメートルを含む。
ある局面では、改変されたタバコ植物の葉は、同等条件下で生育させたときの同齢の対照葉と比較して、少なくとも1％多くの毛状突起／平方センチメートルを含む。ある局面では、改変されたタバコ植物の葉は、同等条件下で生育させたときの同齢の対照葉と比較して、少なくとも5％多くの毛状突起／平方センチメートルを含む。ある局面では、改変されたタバコ植物の葉は、同等条件下で生育させたときの同齢の対照葉と比較して、少なくとも10％多くの毛状突起／平方センチメートルを含む。ある局面では、改変されたタバコ植物の葉は、同等条件下で生育させたときの同齢の対照葉と比較して、少なくとも15％多くの毛状突起／平方センチメートルを含む。ある局面では、改変されたタバコ植物の葉は、同等条件下で生育させたときの同齢の対照葉と比較して、少なくとも20％多くの毛状突起／平方センチメートルを含む。ある局面では、改変されたタバコ植物の葉は、同等条件下で生育させたときの同齢の対照葉と比較して、少なくとも25％多くの毛状突起／平方センチメートルを含む。ある局面では、改変されたタバコ植物の葉は、同等条件下で生育させたときの同齢の対照葉と比較して、少なくとも30％多くの毛状突起／平方センチメートルを含む。ある局面では、改変されたタバコ植物の葉は、同等条件下で生育させたときの同齢の対照葉と比較して、少なくとも40％多くの毛状突起／平方センチメートルを含む。ある局面では、改変されたタバコ植物の葉は、同等条件下で生育させたときの同齢の対照葉と比較して、少なくとも50％多くの毛状突起／平方センチメートルを含む。ある局面では、改変されたタバコ植物の葉は、同等条件下で生育させたときの同齢の対照葉と比較して、少なくとも60％多くの毛状突起／平方センチメートルを含む。ある局面では、改変されたタバコ植物の葉は、同等条件下で生育させたときの同齢の対照葉と比較して、少なくとも70％多くの毛状突起／平方センチメートルを含む。ある局面では、改変されたタバコ植物の葉は、同等条件下で生育させたときの同齢の対照葉と比較して、少なくとも80％多くの毛状突起／平方センチメートルを含む。ある局面では、改変されたタバコ植物の葉は、同等条件下で生育させたときの同齢の対照葉と比較して、少なくとも90％多くの毛状突起／平方センチメートルを含む。ある局面では、改変されたタバコ植物の葉は、同等条件下で生育させたときの同齢の対照葉と比較して、少なくとも100％多くの毛状突起／平方センチメートルを含む。ある局面では、改変されたタバコ植物の葉は、同等条件下で生育させたときの同齢の対照葉と比較して、少なくとも110％多くの毛状突起／平方センチメートルを含む。ある局面では、改変されたタバコ植物の葉は、同等条件下で生育させたときの同齢の対照葉と比較して、少なくとも125％多くの毛状突起／平方センチメートルを含む。ある局面では、改変されたタバコ植物の葉は、同等条件下で生育させたときの同齢の対照葉と比較して、少なくとも150％多くの毛状突起／平方センチメートルを含む。ある局面では、改変されたタバコ植物の葉は、同等条件下で生育させたときの同齢の対照葉と比較して、少なくとも200％多くの毛状突起／平方センチメートルを含む。
特に指定のない限り、改変された葉と同等条件下で生育させた対照植物由来の葉との比較は、改変された植物と対照植物上の同葉数の葉を使用しなければならない（例えば、改変されたV5葉は、対照のV5葉と比較されなければならない）ことが理解されよう。
ある局面では、植物は、タバコ植物である。ある局面では、植物は、ニコチアナ植物である。ある局面では、タバコ植物は、ニコチアナ・タバカム植物である。
ある局面では、ニコチアナ植物、種子または植物部分は、ニコチアナ・タバカム（Nicotiana tabacum）、ニコチアナ・アンプレクシカウリス（Nicotiana amplexicaulis）PI 271989；ニコチアナ・ベンサミアナ（Nicotiana benthamiana）PI 555478；ニコチアナ・ビゲロヴィー（Nicotiana bigelovii）PI 555485；ニコチアナ・デブネイ（Nicotiana debneyi）；ニコチアナ・エクセルシオール（Nicotiana excelsior）PI 224063；ニコチアナ・グルチノーサ（Nicotiana glutinosa）PI 555507；ニコチアナ・グッドスピーディ（Nicotiana goodspeedii）PI 241012；ニコチアナ・ゴッセイ（Nicotiana gossei）PI 230953；ニコチアナ・ヘスペリス（Nicotiana hesperis）PI 271991；ニコチアナ・ナイチアナ（Nicotiana knightiana）PI 555527；ニコチアナ・マリチマ（Nicotiana maritima）PI 555535；ニコチアナ・メガロシホン（Nicotiana megalosiphon）PI 555536；ニコチアナ・ヌディカウリス（Nicotiana nudicaulis）PI 555540；ニコチアナ・パニキュラータ（Nicotiana paniculata）PI 555545；ニコチアナ・プルムバギニフォリア（Nicotiana plumbaginifolia）PI 555548；ニコチアナ・レパンダ（Nicotiana repanda）PI 555552；ニコチアナ・ラスティカ（Nicotiana rustica）；ニコチアナ・スアベオレンス（Nicotiana suaveolens）PI 230960；ニコチアナ・シルベストリス（Nicotiana sylvestris）PI 555569；ニコチアナ・トメントサ（Nicotiana tomentosa）PI 266379；ニコチアナ・トメントシフォルミス（Nicotiana tomentosiformis）；およびニコチアナ・トリゴノフィラ（Nicotiana trigonophylla）PI 555572からなる群より選択される。
ある局面では、種子は、タバコ種子である。ある局面では、種子は、ニコチアナ種子である。ある局面では、タバコ種子は、ニコチアナ・タバカムまたはニコチアナ・ベンサミアナ種子である。
ある局面では、植物部分は、タバコ植物部分である。ある局面では、植物部分は、ニコチアナ植物部分である。ある局面では、タバコ植物部分は、ニコチアナ・タバカム植物部分またはニコチアナ・ベンサミアナ植物部分である。
ある局面では、植物は、***植物（cannabis plant）である。ある局面では、植物は、カンナビス植物（Cannabis plant）である。ある局面では、***植物は、カンナビス・サティバ（Cannabis sativa）植物である。ある局面では、***植物は、カンナビス・インディカ（Cannabis indica）植物である。ある局面では、***植物は、カンナビス・ルデラリス（Cannabis ruderalis）植物である。ある局面では、***植物は、カンナビス・サティバ、カンナビス・インディカ、およびカンナビス・ルデラリスからなる群より選択される。
ある局面では、種子は、***種子（cannabis seed）である。ある局面では、種子は、カンナビス種子（Cannabis seed）である。ある局面では、***種子は、カンナビス・サティバ種子である。ある局面では、***種子は、カンナビス・インディカ種子である。ある局面では、***種子は、カンナビス・ルデラリス種子である。ある局面では、***種子は、カンナビス・サティバ、カンナビス・インディカ、およびカンナビス・ルデラリスからなる群より選択される。
ある局面では、植物部分は、***植物部分（cannabis plant part）である。ある局面では、植物部分は、カンナビス植物部分（Cannabis plant part）である。ある局面では、***植物部分は、カンナビス・サティバ植物部分である。ある局面では、***植物部分は、カンナビス・インディカ植物部分である。ある局面では、***植物部分は、カンナビス・ルデラリス植物部分である。ある局面では、***植物部分は、カンナビス・サティバ、カンナビス・インディカ、およびカンナビス・ルデラリスからなる群より選択される。
ある局面では、提供される植物部分は、葉、茎、根、毛状突起、種子、花、花粉、葯、胚珠、小花柄、果実、***組織、子葉、胚軸、莢、胚、胚乳、外植体、カルス、組織培養物、芽、細胞、およびプロトプラストを含むが、それらに限定されない。ある局面では、植物部分は、種子を含まない。ある局面では、本開示は、生殖物質ではなくかつ植物の自然生殖を媒介しない、植物細胞、組織および器官を提供する。別の局面では、本開示はまた、生殖物質でありかつ植物の自然生殖を媒介する、植物細胞、組織および器官も提供する。別の局面では、本開示は、光合成を介して自らを維持できない植物細胞、組織および器官を提供する。別の局面では、本開示は、体細胞性の植物細胞を提供する。体細胞は、生殖系細胞とは対照的に、植物生殖を媒介しない。
細胞、組織および器官は、種子、果実、葉、子葉、胚軸、***組織、胚、胚乳、根、芽、茎、毛状突起、莢、花、花序、柄、小花柄、花柱、柱頭、花托、花弁、萼、花粉、葯、花糸、子房、胚珠、果皮、師部、維管束組織由来であることができる。別の局面では、本開示は、植物葉緑体を提供する。さらなる局面では、本開示は、表皮細胞、ストーマ細胞、葉もしくは根毛、貯蔵根、または塊茎を提供する。別の局面では、本開示は、タバコプロトプラストを提供する。
当業者は、タバコおよび***植物が、無性生殖または栄養繁殖を介するのではなく、種子を介して自然生殖することを理解する。ある局面では、本開示は、植物胚乳を提供する。
本開示は、本明細書に提供される植物由来の細胞を提供する。
本明細書において使用される場合、「後代植物」または「後代種子」は、任意の雑種世代、例えば、F1、F2、F3、F4、F5、F6、F7など由来であることができる。
ある局面では、タバコ植物、種子または植物部分は、熱風乾燥品種（flue cured variety）、ブライト品種（bright variety）、バーレー品種（Burley variety）、バージニア品種（Virginia variety）、メリーランド品種（Maryland variety）、ダーク品種（dark variety）、ガルパオ品種（Galpao variety）、オリエンタル品種（Oriental variety）、およびトルコ品種（Turkish variety）からなる群より選択されるタバコ品種のものである。
ある局面では、タバコ細胞は、熱風乾燥品種、ブライト品種、バーレー品種、バージニア品種、メリーランド品種、ダーク品種、ガルパオ品種、オリエンタル品種、およびトルコ品種からなる群より選択されるタバコ品種のものである。
ある局面では、タバコ葉は、熱風乾燥品種、ブライト品種、バーレー品種、バージニア品種、メリーランド品種、ダーク品種、ガルパオ品種、オリエンタル品種、およびトルコ品種からなる群より選択されるタバコ品種のものである。
ある局面では、乾燥タバコ葉または植物部分は、熱風乾燥品種、ブライト品種、バーレー品種、バージニア品種、メリーランド品種、ダーク品種、ガルパオ品種、オリエンタル品種、およびトルコ品種からなる群より選択されるタバコ品種のものである。当業者は、乾燥タバコが、生物の構成要素となることがなく、生育または生殖することができないことをさらに理解する。
熱風乾燥タバコ（「バージニア」または「ブライト」タバコとも呼ばれる）は、世界のタバコ生産のおよそ40％を占める。熱風乾燥タバコは、しばしば、乾燥の間に到達する金色を帯びた黄色～濃い橙色のため、「ブライトタバコ」とも称される。熱風乾燥タバコは、軽快で華やかな芳香および香気を有する。熱風乾燥タバコは、一般的に、糖分が多く油分が少ない。主な熱風乾燥タバコ栽培国は、アルゼンチン、ブラジル、中国、インド、タンザニアおよび米国である。一局面では、本明細書に提供されるタバコ植物、種子または植物部分は、表2に列挙される品種からなる群より選択される熱風乾燥タバコ品種、および前述の品種のいずれか1つに本質的に由来する任意の品種のものである。WO 2004/041006 A1を参照されたい。さらなる局面では、本明細書に提供されるタバコ植物、種子または植物部分は、K326、K346、およびNC196からなる群より選択される熱風乾燥品種中のものである。
（表２）熱風乾燥タバコ品種
Figure 2024505756000005
Figure 2024505756000006
空気乾燥タバコは、「バーレー」、「メリーランド」および「ダーク」タバコを含む。空気乾燥タバコをつなぐ共通因子は、主として人工的な熱源および水分源なしに乾燥が行われることである。バーレータバコは、淡褐色～暗褐色であり、油分が多く糖分が少ない。バーレータバコは、典型的には、倉庫で空気乾燥される。主なバーレー栽培国は、アルゼンチン、ブラジル、イタリア、マラウイ、および米国を含む。
メリーランドタバコは、非常にふわふわしており、良好な燃焼特性、低ニコチンおよび中性的な香りを有する。主なメリーランド栽培国は、米国およびイタリアを含む。
一局面では、本明細書に提供されるタバコ植物、種子または植物部分は、表3に列挙されるタバコ品種からなる群より選択されるバーレータバコ品種、および前述の品種のいずれか1つに本質的に由来する任意の品種のものである。さらなる局面では、本明細書に提供されるタバコ植物、種子または植物部分は、TN 90、KT 209、KT 206、KT212、およびHB 4488からなる群より選択されるバーレー品種中のものである。
（表３）バーレータバコ品種
Figure 2024505756000007
別の局面では、本明細書に提供されるタバコ植物、種子または植物部分は、表4に列挙されるタバコ品種からなる群より選択されるメリーランドタバコ品種、および前述の品種のいずれか1つに本質的に由来する任意の品種のものである。
（表４）メリーランドタバコ品種
Figure 2024505756000008
暗色空気乾燥タバコは、主にその中褐色～暗褐色および異なる芳香を暗色空気乾燥タバコに与えるその乾燥プロセスによって、他のタバコタイプと区別される。暗色空気乾燥タバコは、主に、噛みタバコおよびスナッフの生産において使用される。一局面では、本明細書に提供されるタバコ植物、種子または植物部分は、スマトラ（Sumatra）、ジャティム（Jatim）、ドミニカンキューバノ（Dominican Cubano）、ベスキ（Besuki）、ワンサッカー（One sucker）、グリーンリバー（Green River）、天日乾燥バージニア（Virginia sun-cured）、およびパラグアンパッサード（Paraguan Passado）からなる群より選択される暗色空気乾燥タバコ品種、ならびに前述の品種のいずれか1つに本質的に由来する任意の品種のものである。
暗色火力乾燥タバコは、一般的に、密閉された乾燥倉庫の床上での低燃焼木材の火で乾燥させる。暗色火力乾燥タバコは、典型的には、パイプブレンド、シガレット、噛みタバコ、スナッフ、および味が強い葉巻を製造するために使用される。暗色火力乾燥タバコの主な栽培地域は、米国のテネシー州、ケンタッキー州およびバージニア州である。一局面では、本明細書に提供されるタバコ植物、種子または植物部分は、表5に列挙されるタバコ品種からなる群より選択される暗色火力乾燥タバコ品種、および前述の品種のいずれか1つに本質的に由来する任意の品種のものである。
（表５）暗色火力乾燥タバコ品種
Figure 2024505756000009
オリエンタルタバコは、典型的にはトルコ、ギリシャ、ブルガリア、マケドニア、シリア、レバノン、イタリアおよびルーマニアなどの東地中海地方で栽培されていることから、ギリシャ・ローマ・トルコ（Greek, aroma and Turkish）タバコとも称される。オリエンタルタバコ品種の小さな植物サイズ、小さな葉サイズ、および特有の芳香特性は、痩せた土壌およびストレスの多い気候条件の中で進化してきたその適応の結果である。一局面では、本明細書に提供されるタバコ植物、種子または植物部分は、表6に列挙されるタバコ品種からなる群より選択されるオリエンタルタバコ品種、および前述の品種のいずれか1つに本質的に由来する任意の品種のものである。
（表６）オリエンタルタバコ品種
Figure 2024505756000010
ある局面では、本明細書に提供されるタバコ植物、種子または植物部分は、表7に列挙されるタバコ品種からなる群より選択される葉巻タバコ品種、および前述の品種のいずれか1つに本質的に由来する任意の品種のものである。
（表７）葉巻タバコ品種
Figure 2024505756000011
ある局面では、本明細書に提供されるタバコ植物、種子または植物部分は、表8に列挙されるタバコ品種からなる群より選択されるタバコ品種、および前述の品種のいずれか1つに本質的に由来する任意の品種のものである。
（表８）他のタバコ品種
Figure 2024505756000012
ある局面では、タバコ植物または植物部分は、表2、表3、表4、表5、表6、表7および表8に列挙されるタバコ品種からなる群より選択される品種由来である。別の局面では、タバコ植物または植物部分は、表2に列挙される品種由来である。別の局面では、タバコ植物または植物部分は、表3に列挙される品種由来である。別の局面では、タバコ植物または植物部分は、表4に列挙される品種由来である。別の局面では、タバコ植物または植物部分は、表5に列挙される品種由来である。別の局面では、タバコ植物または植物部分は、表6に列挙される品種由来である。別の局面では、タバコ植物または植物部分は、表7に列挙される品種由来である。別の局面では、タバコ植物または植物部分は、表8に列挙される品種由来である。
ある局面では、タバコ種子は、表2、表3、表4、表5、表6、表7および表8に列挙されるタバコ品種からなる群より選択される品種由来である。別の局面では、タバコ種子は、表2に列挙される品種由来である。別の局面では、タバコ種子は、表3に列挙される品種由来である。別の局面では、タバコ種子は、表4に列挙される品種由来である。別の局面では、タバコ種子は、表5に列挙される品種由来である。別の局面では、タバコ種子は、表6に列挙される品種由来である。別の局面では、タバコ種子は、表7に列挙される品種由来である。別の局面では、タバコ種子は、表8に列挙される品種由来である。
ある局面では、タバコ細胞は、表2、表3、表4、表5、表6、表7および表8に列挙されるタバコ品種からなる群より選択される品種由来である。別の局面では、タバコ細胞は、表2に列挙される品種由来である。別の局面では、タバコ細胞は、表3に列挙される品種由来である。別の局面では、タバコ細胞は、表4に列挙される品種由来である。別の局面では、タバコ細胞は、表5に列挙される品種由来である。別の局面では、タバコ細胞は、表6に列挙される品種由来である。別の局面では、タバコ細胞は、表7に列挙される品種由来である。別の局面では、タバコ細胞は、表8に列挙される品種由来である。
熱風乾燥、暗色空気乾燥、バーレー、メリーランド、暗色火力乾燥、葉巻、またはオリエンタルタイプの前述の特定の品種はすべて、例示的な目的でのみ列記される。任意のさらなる熱風乾燥、暗色空気乾燥、バーレー、メリーランド、暗色火力乾燥、葉巻、またはオリエンタル品種も、本出願において想定される。
ある局面では、本明細書に提供される植物または品種は、同系交配植物または品種である。本明細書において使用される場合、「同系交配」品種は、遺伝的等質性のために繁殖された品種である。
本明細書において使用される場合、「ハイブリッド」は、子孫がそれぞれの親由来の遺伝物質を含むように、異なる品種または種由来の2つの植物を交雑させることによって産出される。当業者は、より高次のハイブリッドも同様に作出できることを認識する。例えば、第1のハイブリッドは、品種Cを品種Dと交雑してC×Dハイブリッドを産出させることによって作製することができ、第2のハイブリッドは、品種Eを品種Fと交雑してE×Fハイブリッドを産出させることによって作製することができる。第1および第2のハイブリッドをさらに交雑して、4つの親品種のすべての遺伝情報を含むより高次のハイブリッド（C×D）×（E×F）を産出させることができる。ある局面では、本明細書に提供される植物または種子は、ハイブリッド植物または種子である。
ある局面では、本明細書に提供されるタバコ植物は、同系交配タバコ植物である。ある局面では、本明細書に提供されるタバコ種子は、同系交配タバコ種子である。ある局面では、本明細書に提供されるタバコ植物は、ハイブリッドタバコ植物である。別の局面では、本明細書に提供されるタバコ種子は、ハイブリッドタバコ種子である。
ある局面では、本明細書に提供される***植物は、同系交配***植物である。ある局面では、本明細書に提供される***種子は、同系交配***種子である。ある局面では、本明細書に提供される***植物は、ハイブリッド***植物である。ある局面では、本明細書に提供される***種子は、ハイブリッド***種子である。
特に指定のない限り、対照植物とのすべての比較は、2つの植物が比較されるために類似の生育条件または同等の生育条件を必要とする。本明細書において使用される場合、「同等条件下で生育させた」、「類似の生育条件」または「同等の生育条件」は、2つ以上の植物遺伝子型間での生育および有意義な比較のための類似の環境条件および／または農耕法であって、2つ以上の植物遺伝子型間で観察される相違に寄与することも、それを説明することもないような、環境条件および／または農耕法のことを指す。環境条件は、例えば、光、温度、水分（湿気）、および栄養（例えば、窒素およびリン）を含む。農耕法は、例えば、播種、刈込み、下部切取り、植付け、摘心、および株分けを含む。Chapters 4B and 4C of Tobacco, Production, Chemistry and Technology, Davis & Nielsen, eds., Blackwell Publishing, Oxford (1999), pp 70-103を参照されたい。
本明細書において使用される場合、「対照植物」は、改変された植物に導入された本明細書に提供される組換え核酸分子以外は、比較されている改変された植物と同一またはほぼ同一の遺伝子構造の植物のことを指す。
ある局面では、本明細書に提供される植物または品種は、雄性不稔である。別の局面では、本明細書に提供される植物または品種は、細胞質雄性不稔（CMS）である。雄性不稔植物は、当技術分野において公知の任意の方法によって生産することができる。雄性不稔タバコを生産する方法は、Wernsman, E. A., and Rufty, R. C. 1987. Chapter Seventeen. Tobacco. Pages 669-698 In: Cultivar Development. Crop Species. W. H. Fehr (ed.), MacMillan Publishing Co., Inc., New York, N.Y. 761 ppに記載されている。
別の局面では、本明細書に提供される植物または品種は、雌性不稔である。非限定的な例として、雌性不稔植物は、STIG1遺伝子を変異させることによって作製することができる。例えば、Goldman et al. 1994, EMBO Journal 13:2976-2984を参照されたい。
ある局面では、本開示は、以下の工程を含む、植物を生産するための方法を提供する：（a）少なくとも1つの後代種子を生産するために、第1の品種の少なくとも1つの植物を第2の品種の少なくとも1つの植物と交雑させる工程であって、第1の品種の少なくとも1つの植物が、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子を含み、核酸配列が、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも80％同一である、工程；ならびに（b）工程（a）で生産された少なくとも1つの後代種子、またはそれから発芽した植物を選択する工程であって、少なくとも1つの後代種子またはそれから発芽した植物が組換え核酸分子を含む、工程。ある局面では、本開示は、以下の工程を含む、植物を生産するための方法を提供する：（a）少なくとも1つの後代種子を生産するために、第1の品種の少なくとも1つの植物を第2の品種の少なくとも1つの植物と交雑させる工程であって、第1の品種の少なくとも1つの植物が、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子を含み、核酸配列が、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも85％同一である、工程；ならびに（b）工程（a）で生産された少なくとも1つの後代種子、またはそれから発芽した植物を選択する工程であって、少なくとも1つの後代種子またはそれから発芽した植物が組換え核酸分子を含む、工程。ある局面では、本開示は、以下の工程を含む、植物を生産するための方法を提供する：（a）少なくとも1つの後代種子を生産するために、第1の品種の少なくとも1つの植物を第2の品種の少なくとも1つの植物と交雑させる工程であって、第1の品種の少なくとも1つの植物が、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子を含み、核酸配列が、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも90％同一である、工程；ならびに（b）工程（a）で生産された少なくとも1つの後代種子、またはそれから発芽した植物を選択する工程であって、少なくとも1つの後代種子またはそれから発芽した植物が組換え核酸分子を含む、工程。ある局面では、本開示は、以下の工程を含む、植物を生産するための方法を提供する：（a）少なくとも1つの後代種子を生産するために、第1の品種の少なくとも1つの植物を第2の品種の少なくとも1つの植物と交雑させる工程であって、第1の品種の少なくとも1つの植物が、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子を含み、核酸配列が、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも92.5％同一である、工程；ならびに（b）工程（a）で生産された少なくとも1つの後代種子、またはそれから発芽した植物を選択する工程であって、少なくとも1つの後代種子またはそれから発芽した植物が組換え核酸分子を含む、工程。ある局面では、本開示は、以下の工程を含む、植物を生産するための方法を提供する：（a）少なくとも1つの後代種子を生産するために、第1の品種の少なくとも1つの植物を第2の品種の少なくとも1つの植物と交雑させる工程であって、第1の品種の少なくとも1つの植物が、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子を含み、核酸配列が、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも95％同一である、工程；ならびに（b）工程（a）で生産された少なくとも1つの後代種子、またはそれから発芽した植物を選択する工程であって、少なくとも1つの後代種子またはそれから発芽した植物が組換え核酸分子を含む、工程。ある局面では、本開示は、以下の工程を含む、植物を生産するための方法を提供する：（a）少なくとも1つの後代種子を生産するために、第1の品種の少なくとも1つの植物を第2の品種の少なくとも1つの植物と交雑させる工程であって、第1の品種の少なくとも1つの植物が、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子を含み、核酸配列が、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも96％同一である、工程；ならびに（b）工程（a）で生産された少なくとも1つの後代種子、またはそれから発芽した植物を選択する工程であって、少なくとも1つの後代種子またはそれから発芽した植物が組換え核酸分子を含む、工程。ある局面では、本開示は、以下の工程を含む、植物を生産するための方法を提供する：（a）少なくとも1つの後代種子を生産するために、第1の品種の少なくとも1つの植物を第2の品種の少なくとも1つの植物と交雑させる工程であって、第1の品種の少なくとも1つの植物が、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子を含み、核酸配列が、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも97％同一である、工程；ならびに（b）工程（a）で生産された少なくとも1つの後代種子、またはそれから発芽した植物を選択する工程であって、少なくとも1つの後代種子またはそれから発芽した植物が組換え核酸分子を含む、工程。ある局面では、本開示は、以下の工程を含む、植物を生産するための方法を提供する：（a）少なくとも1つの後代種子を生産するために、第1の品種の少なくとも1つの植物を第2の品種の少なくとも1つの植物と交雑させる工程であって、第1の品種の少なくとも1つの植物が、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子を含み、核酸配列が、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも98％同一である、工程；ならびに（b）工程（a）で生産された少なくとも1つの後代種子、またはそれから発芽した植物を選択する工程であって、少なくとも1つの後代種子またはそれから発芽した植物が組換え核酸分子を含む、工程。ある局面では、本開示は、以下の工程を含む、植物を生産するための方法を提供する：（a）少なくとも1つの後代種子を生産するために、第1の品種の少なくとも1つの植物を第2の品種の少なくとも1つの植物と交雑させる工程であって、第1の品種の少なくとも1つの植物が、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子を含み、核酸配列が、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも99％同一である、工程；ならびに（b）工程（a）で生産された少なくとも1つの後代種子、またはそれから発芽した植物を選択する工程であって、少なくとも1つの後代種子またはそれから発芽した植物が組換え核酸分子を含む、工程。ある局面では、本開示は、以下の工程を含む、植物を生産するための方法を提供する：（a）少なくとも1つの後代種子を生産するために、第1の品種の少なくとも1つの植物を第2の品種の少なくとも1つの植物と交雑させる工程であって、第1の品種の少なくとも1つの植物が、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子を含み、核酸配列が、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも99.9％同一である、工程；ならびに（b）工程（a）で生産された少なくとも1つの後代種子、またはそれから発芽した植物を選択する工程であって、少なくとも1つの後代種子またはそれから発芽した植物が組換え核酸分子を含む、工程。ある局面では、本開示は、以下の工程を含む、植物を生産するための方法を提供する：（a）少なくとも1つの後代種子を生産するために、第1の品種の少なくとも1つの植物を第2の品種の少なくとも1つの植物と交雑させる工程であって、第1の品種の少なくとも1つの植物が、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子を含み、核酸配列が、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される配列、またはその機能的断片である、工程；ならびに（b）工程（a）で生産された少なくとも1つの後代種子、またはそれから発芽した植物を選択する工程であって、少なくとも1つの後代種子またはそれから発芽した植物が組換え核酸分子を含む、工程。
ある局面では、本開示は、以下の工程を含む、植物を生産するための方法を提供する：（a）少なくとも1つの後代種子を生産するために、第1の品種の少なくとも1つの植物を第2の品種の少なくとも1つの植物と交雑させる工程であって、第1の品種の少なくとも1つの植物が、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子を含み、核酸配列が、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列、またはその機能的断片に対して少なくとも80％同一または類似のアミノ酸配列をコードする、工程；ならびに（b）工程（a）で生産された少なくとも1つの後代種子、またはそれから発芽した植物を選択する工程であって、少なくとも1つの後代種子またはそれから発芽した植物が組換え核酸分子を含む、工程。ある局面では、本開示は、以下の工程を含む、植物を生産するための方法を提供する：（a）少なくとも1つの後代種子を生産するために、第1の品種の少なくとも1つの植物を第2の品種の少なくとも1つの植物と交雑させる工程であって、第1の品種の少なくとも1つの植物が、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子を含み、核酸配列が、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列、またはその機能的断片に対して少なくとも85％同一または類似のアミノ酸配列をコードする、工程；ならびに（b）工程（a）で生産された少なくとも1つの後代種子、またはそれから発芽した植物を選択する工程であって、少なくとも1つの後代種子またはそれから発芽した植物が組換え核酸分子を含む、工程。ある局面では、本開示は、以下の工程を含む、植物を生産するための方法を提供する：（a）少なくとも1つの後代種子を生産するために、第1の品種の少なくとも1つの植物を第2の品種の少なくとも1つの植物と交雑させる工程であって、第1の品種の少なくとも1つの植物が、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子を含み、核酸配列が、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列、またはその機能的断片に対して少なくとも90％同一または類似のアミノ酸配列をコードする、工程；ならびに（b）工程（a）で生産された少なくとも1つの後代種子、またはそれから発芽した植物を選択する工程であって、少なくとも1つの後代種子またはそれから発芽した植物が組換え核酸分子を含む、工程。ある局面では、本開示は、以下の工程を含む、植物を生産するための方法を提供する：（a）少なくとも1つの後代種子を生産するために、第1の品種の少なくとも1つの植物を第2の品種の少なくとも1つの植物と交雑させる工程であって、第1の品種の少なくとも1つの植物が、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子を含み、核酸配列が、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列、またはその機能的断片に対して少なくとも95％同一または類似のアミノ酸配列をコードする、工程；ならびに（b）工程（a）で生産された少なくとも1つの後代種子、またはそれから発芽した植物を選択する工程であって、少なくとも1つの後代種子またはそれから発芽した植物が組換え核酸分子を含む、工程。ある局面では、本開示は、以下の工程を含む、植物を生産するための方法を提供する：（a）少なくとも1つの後代種子を生産するために、第1の品種の少なくとも1つの植物を第2の品種の少なくとも1つの植物と交雑させる工程であって、第1の品種の少なくとも1つの植物が、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子を含み、核酸配列が、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列、またはその機能的断片に対して少なくとも96％同一または類似のアミノ酸配列をコードする、工程；ならびに（b）工程（a）で生産された少なくとも1つの後代種子、またはそれから発芽した植物を選択する工程であって、少なくとも1つの後代種子またはそれから発芽した植物が組換え核酸分子を含む、工程。ある局面では、本開示は、以下の工程を含む、植物を生産するための方法を提供する：（a）少なくとも1つの後代種子を生産するために、第1の品種の少なくとも1つの植物を第2の品種の少なくとも1つの植物と交雑させる工程であって、第1の品種の少なくとも1つの植物が、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子を含み、核酸配列が、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列、またはその機能的断片に対して少なくとも97％同一または類似のアミノ酸配列をコードする、工程；ならびに（b）工程（a）で生産された少なくとも1つの後代種子、またはそれから発芽した植物を選択する工程であって、少なくとも1つの後代種子またはそれから発芽した植物が組換え核酸分子を含む、工程。ある局面では、本開示は、以下の工程を含む、植物を生産するための方法を提供する：（a）少なくとも1つの後代種子を生産するために、第1の品種の少なくとも1つの植物を第2の品種の少なくとも1つの植物と交雑させる工程であって、第1の品種の少なくとも1つの植物が、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子を含み、核酸配列が、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列、またはその機能的断片に対して少なくとも98％同一または類似のアミノ酸配列をコードする、工程；ならびに（b）工程（a）で生産された少なくとも1つの後代種子、またはそれから発芽した植物を選択する工程であって、少なくとも1つの後代種子またはそれから発芽した植物が組換え核酸分子を含む、工程。ある局面では、本開示は、以下の工程を含む、植物を生産するための方法を提供する：（a）少なくとも1つの後代種子を生産するために、第1の品種の少なくとも1つの植物を第2の品種の少なくとも1つの植物と交雑させる工程であって、第1の品種の少なくとも1つの植物が、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子を含み、核酸配列が、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列、またはその機能的断片に対して少なくとも99％同一または類似のアミノ酸配列をコードする、工程；ならびに（b）工程（a）で生産された少なくとも1つの後代種子、またはそれから発芽した植物を選択する工程であって、少なくとも1つの後代種子またはそれから発芽した植物が組換え核酸分子を含む、工程。ある局面では、本開示は、以下の工程を含む、植物を生産するための方法を提供する：（a）少なくとも1つの後代種子を生産するために、第1の品種の少なくとも1つの植物を第2の品種の少なくとも1つの植物と交雑させる工程であって、第1の品種の少なくとも1つの植物が、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子を含み、核酸配列が、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列、またはその機能的断片に対して少なくとも99.9％同一または類似のアミノ酸配列をコードする、工程；ならびに（b）工程（a）で生産された少なくとも1つの後代種子、またはそれから発芽した植物を選択する工程であって、少なくとも1つの後代種子またはそれから発芽した植物が組換え核酸分子を含む、工程。ある局面では、本開示は、以下の工程を含む、植物を生産するための方法を提供する：（a）少なくとも1つの後代種子を生産するために、第1の品種の少なくとも1つの植物を第2の品種の少なくとも1つの植物と交雑させる工程であって、第1の品種の少なくとも1つの植物が、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子を含み、核酸配列が、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列、またはその機能的断片に対して100％同一または類似のアミノ酸配列をコードする、工程；ならびに（b）工程（a）で生産された少なくとも1つの後代種子、またはそれから発芽した植物を選択する工程であって、少なくとも1つの後代種子またはそれから発芽した植物が組換え核酸分子を含む、工程。
ある局面では、本開示は、以下の工程を含む、毛状突起密度が増加した植物を生産するための方法を提供する：（a）少なくとも1つの植物細胞に、ポリヌクレオチドに機能的に連結されている異種プロモーターを含む組換え核酸を提供する工程であって、ポリヌクレオチドが、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される核酸配列に対して少なくとも80％同一である核酸配列を含む、工程；（b）工程（a）の少なくとも1つの植物細胞から、改変された植物を再生させる工程であって、改変された植物が、同等条件下で生育させたときの組換え核酸を欠く対照植物由来の葉と比較して、少なくとも1枚の葉において、増加した毛状突起密度を含む、工程。ある局面では、本開示は、以下の工程を含む、毛状突起密度が増加した植物を生産するための方法を提供する：（a）少なくとも1つの植物細胞に、ポリヌクレオチドに機能的に連結されている異種プロモーターを含む組換え核酸を提供する工程であって、ポリヌクレオチドが、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される核酸配列に対して少なくとも85％同一である核酸配列を含む、工程；（b）工程（a）の少なくとも1つの植物細胞から、改変された植物を再生させる工程であって、改変された植物が、同等条件下で生育させたときの組換え核酸を欠く対照植物由来の葉と比較して、少なくとも1枚の葉において、増加した毛状突起密度を含む、工程。ある局面では、本開示は、以下の工程を含む、毛状突起密度が増加した植物を生産するための方法を提供する：（a）少なくとも1つの植物細胞に、ポリヌクレオチドに機能的に連結されている異種プロモーターを含む組換え核酸を提供する工程であって、ポリヌクレオチドが、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される核酸配列に対して少なくとも90％同一である核酸配列を含む、工程；（b）工程（a）の少なくとも1つの植物細胞から、改変された植物を再生させる工程であって、改変された植物が、同等条件下で生育させたときの組換え核酸を欠く対照植物由来の葉と比較して、少なくとも1枚の葉において、増加した毛状突起密度を含む、工程。ある局面では、本開示は、以下の工程を含む、毛状突起密度が増加した植物を生産するための方法を提供する：（a）少なくとも1つの植物細胞に、ポリヌクレオチドに機能的に連結されている異種プロモーターを含む組換え核酸を提供する工程であって、ポリヌクレオチドが、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される核酸配列に対して少なくとも95％同一である核酸配列を含む、工程；（b）工程（a）の少なくとも1つの植物細胞から、改変された植物を再生させる工程であって、改変された植物が、同等条件下で生育させたときの組換え核酸を欠く対照植物由来の葉と比較して、少なくとも1枚の葉において、増加した毛状突起密度を含む、工程。ある局面では、本開示は、以下の工程を含む、毛状突起密度が増加した植物を生産するための方法を提供する：（a）少なくとも1つの植物細胞に、ポリヌクレオチドに機能的に連結されている異種プロモーターを含む組換え核酸を提供する工程であって、ポリヌクレオチドが、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される核酸配列に対して少なくとも96％同一である核酸配列を含む、工程；（b）工程（a）の少なくとも1つの植物細胞から、改変された植物を再生させる工程であって、改変された植物が、同等条件下で生育させたときの組換え核酸を欠く対照植物由来の葉と比較して、少なくとも1枚の葉において、増加した毛状突起密度を含む、工程。ある局面では、本開示は、以下の工程を含む、毛状突起密度が増加した植物を生産するための方法を提供する：（a）少なくとも1つの植物細胞に、ポリヌクレオチドに機能的に連結されている異種プロモーターを含む組換え核酸を提供する工程であって、ポリヌクレオチドが、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される核酸配列に対して少なくとも97％同一である核酸配列を含む、工程；（b）工程（a）の少なくとも1つの植物細胞から、改変された植物を再生させる工程であって、改変された植物が、同等条件下で生育させたときの組換え核酸を欠く対照植物由来の葉と比較して、少なくとも1枚の葉において、増加した毛状突起密度を含む、工程。ある局面では、本開示は、以下の工程を含む、毛状突起密度が増加した植物を生産するための方法を提供する：（a）少なくとも1つの植物細胞に、ポリヌクレオチドに機能的に連結されている異種プロモーターを含む組換え核酸を提供する工程であって、ポリヌクレオチドが、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される核酸配列に対して少なくとも98％同一である核酸配列を含む、工程；（b）工程（a）の少なくとも1つの植物細胞から、改変された植物を再生させる工程であって、改変された植物が、同等条件下で生育させたときの組換え核酸を欠く対照植物由来の葉と比較して、少なくとも1枚の葉において、増加した毛状突起密度を含む、工程。ある局面では、本開示は、以下の工程を含む、毛状突起密度が増加した植物を生産するための方法を提供する：（a）少なくとも1つの植物細胞に、ポリヌクレオチドに機能的に連結されている異種プロモーターを含む組換え核酸を提供する工程であって、ポリヌクレオチドが、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される核酸配列に対して少なくとも99％同一である核酸配列を含む、工程；（b）工程（a）の少なくとも1つの植物細胞から、改変された植物を再生させる工程であって、改変された植物が、同等条件下で生育させたときの組換え核酸を欠く対照植物由来の葉と比較して、少なくとも1枚の葉において、増加した毛状突起密度を含む、工程。ある局面では、本開示は、以下の工程を含む、毛状突起密度が増加した植物を生産するための方法を提供する：（a）少なくとも1つの植物細胞に、ポリヌクレオチドに機能的に連結されている異種プロモーターを含む組換え核酸を提供する工程であって、ポリヌクレオチドが、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される核酸配列に対して少なくとも99.9％同一である核酸配列を含む、工程；（b）工程（a）の少なくとも1つの植物細胞から、改変された植物を再生させる工程であって、改変された植物が、同等条件下で生育させたときの組換え核酸を欠く対照植物由来の葉と比較して、少なくとも1枚の葉において、増加した毛状突起密度を含む、工程。ある局面では、本開示は、以下の工程を含む、毛状突起密度が増加した植物を生産するための方法を提供する：（a）少なくとも1つの植物細胞に、ポリヌクレオチドに機能的に連結されている異種プロモーターを含む組換え核酸を提供する工程であって、ポリヌクレオチドが、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される核酸配列に対して100％同一である核酸配列を含む、工程；（b）工程（a）の少なくとも1つの植物細胞から、改変された植物を再生させる工程であって、改変された植物が、同等条件下で生育させたときの組換え核酸を欠く対照植物由来の葉と比較して、少なくとも1枚の葉において、増加した毛状突起密度を含む、工程。
ある局面では、本開示は、以下の工程を含む、毛状突起密度が増加した植物を生産するための方法を提供する：（a）少なくとも1つの植物細胞に、ポリヌクレオチドに機能的に連結されている異種プロモーターを含む組換え核酸を提供する工程であって、ポリヌクレオチドが、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも80％同一または類似のアミノ酸配列をコードする、工程；（b）工程（a）の少なくとも1つの植物細胞から、改変された植物を再生させる工程であって、改変された植物が、同等条件下で生育させたときの組換え核酸を欠く対照植物由来の葉と比較して、少なくとも1枚の葉において、増加した毛状突起密度を含む、工程。ある局面では、本開示は、以下の工程を含む、毛状突起密度が増加した植物を生産するための方法を提供する：（a）少なくとも1つの植物細胞に、ポリヌクレオチドに機能的に連結されている異種プロモーターを含む組換え核酸を提供する工程であって、ポリヌクレオチドが、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも85％同一または類似のアミノ酸配列をコードする、工程；（b）工程（a）の少なくとも1つの植物細胞から、改変された植物を再生させる工程であって、改変された植物が、同等条件下で生育させたときの組換え核酸を欠く対照植物由来の葉と比較して、少なくとも1枚の葉において、増加した毛状突起密度を含む、工程。ある局面では、本開示は、以下の工程を含む、毛状突起密度が増加した植物を生産するための方法を提供する：（a）少なくとも1つの植物細胞に、ポリヌクレオチドに機能的に連結されている異種プロモーターを含む組換え核酸を提供する工程であって、ポリヌクレオチドが、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも90％同一または類似のアミノ酸配列をコードする、工程；（b）工程（a）の少なくとも1つの植物細胞から、改変された植物を再生させる工程であって、改変された植物が、同等条件下で生育させたときの組換え核酸を欠く対照植物由来の葉と比較して、少なくとも1枚の葉において、増加した毛状突起密度を含む、工程。ある局面では、本開示は、以下の工程を含む、毛状突起密度が増加した植物を生産するための方法を提供する：（a）少なくとも1つの植物細胞に、ポリヌクレオチドに機能的に連結されている異種プロモーターを含む組換え核酸を提供する工程であって、ポリヌクレオチドが、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも92.5％同一または類似のアミノ酸配列をコードする、工程；（b）工程（a）の少なくとも1つの植物細胞から、改変された植物を再生させる工程であって、改変された植物が、同等条件下で生育させたときの組換え核酸を欠く対照植物由来の葉と比較して、少なくとも1枚の葉において、増加した毛状突起密度を含む、工程。ある局面では、本開示は、以下の工程を含む、毛状突起密度が増加した植物を生産するための方法を提供する：（a）少なくとも1つの植物細胞に、ポリヌクレオチドに機能的に連結されている異種プロモーターを含む組換え核酸を提供する工程であって、ポリヌクレオチドが、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも95％同一または類似のアミノ酸配列をコードする、工程；（b）工程（a）の少なくとも1つの植物細胞から、改変された植物を再生させる工程であって、改変された植物が、同等条件下で生育させたときの組換え核酸を欠く対照植物由来の葉と比較して、少なくとも1枚の葉において、増加した毛状突起密度を含む、工程。ある局面では、本開示は、以下の工程を含む、毛状突起密度が増加した植物を生産するための方法を提供する：（a）少なくとも1つの植物細胞に、ポリヌクレオチドに機能的に連結されている異種プロモーターを含む組換え核酸を提供する工程であって、ポリヌクレオチドが、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも96％同一または類似のアミノ酸配列をコードする、工程；（b）工程（a）の少なくとも1つの植物細胞から、改変された植物を再生させる工程であって、改変された植物が、同等条件下で生育させたときの組換え核酸を欠く対照植物由来の葉と比較して、少なくとも1枚の葉において、増加した毛状突起密度を含む、工程。ある局面では、本開示は、以下の工程を含む、毛状突起密度が増加した植物を生産するための方法を提供する：（a）少なくとも1つの植物細胞に、ポリヌクレオチドに機能的に連結されている異種プロモーターを含む組換え核酸を提供する工程であって、ポリヌクレオチドが、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも97％同一または類似のアミノ酸配列をコードする、工程；（b）工程（a）の少なくとも1つの植物細胞から、改変された植物を再生させる工程であって、改変された植物が、同等条件下で生育させたときの組換え核酸を欠く対照植物由来の葉と比較して、少なくとも1枚の葉において、増加した毛状突起密度を含む、工程。ある局面では、本開示は、以下の工程を含む、毛状突起密度が増加した植物を生産するための方法を提供する：（a）少なくとも1つの植物細胞に、ポリヌクレオチドに機能的に連結されている異種プロモーターを含む組換え核酸を提供する工程であって、ポリヌクレオチドが、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも98％同一または類似のアミノ酸配列をコードする、工程；（b）工程（a）の少なくとも1つの植物細胞から、改変された植物を再生させる工程であって、改変された植物が、同等条件下で生育させたときの組換え核酸を欠く対照植物由来の葉と比較して、少なくとも1枚の葉において、増加した毛状突起密度を含む、工程。ある局面では、本開示は、以下の工程を含む、毛状突起密度が増加した植物を生産するための方法を提供する：（a）少なくとも1つの植物細胞に、ポリヌクレオチドに機能的に連結されている異種プロモーターを含む組換え核酸を提供する工程であって、ポリヌクレオチドが、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも99％同一または類似のアミノ酸配列をコードする、工程；（b）工程（a）の少なくとも1つの植物細胞から、改変された植物を再生させる工程であって、改変された植物が、同等条件下で生育させたときの組換え核酸を欠く対照植物由来の葉と比較して、少なくとも1枚の葉において、増加した毛状突起密度を含む、工程。ある局面では、本開示は、以下の工程を含む、毛状突起密度が増加した植物を生産するための方法を提供する：（a）少なくとも1つの植物細胞に、ポリヌクレオチドに機能的に連結されている異種プロモーターを含む組換え核酸を提供する工程であって、ポリヌクレオチドが、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも99.9％同一または類似のアミノ酸配列をコードする、工程；（b）工程（a）の少なくとも1つの植物細胞から、改変された植物を再生させる工程であって、改変された植物が、同等条件下で生育させたときの組換え核酸を欠く対照植物由来の葉と比較して、少なくとも1枚の葉において、増加した毛状突起密度を含む、工程。ある局面では、本開示は、以下の工程を含む、毛状突起密度が増加した植物を生産するための方法を提供する：（a）少なくとも1つの植物細胞に、ポリヌクレオチドに機能的に連結されている異種プロモーターを含む組換え核酸を提供する工程であって、ポリヌクレオチドが、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して100％同一または類似のアミノ酸配列をコードする、工程；（b）工程（a）の少なくとも1つの植物細胞から、改変された植物を再生させる工程であって、改変された植物が、同等条件下で生育させたときの組換え核酸を欠く対照植物由来の葉と比較して、少なくとも1枚の葉において、増加した毛状突起密度を含む、工程。
ある局面では、第1の植物品種および第2の植物品種は、同じ品種である。ある局面では、第1の植物品種および第2の植物品種は、2つの異なる品種である。ある局面では、第2の植物品種は、組換え核酸分子を含む。
ある局面では、第1の植物品種は、組換え核酸分子についてヘテロ接合性である。ある局面では、第1の植物品種は、組換え核酸分子についてヘミ接合性である。ある局面では、第1の植物品種は、組換え核酸分子についてホモ接合性である。ある局面では、第2の植物品種は、組換え核酸分子についてヘテロ接合性である。ある局面では、第2の植物品種は、組換え核酸分子についてヘミ接合性である。ある局面では、第2の植物品種は、組換え核酸分子についてホモ接合性である。ある局面では、後代種子、またはそれから発芽した植物は、組換え核酸分子についてヘテロ接合性である。ある局面では、後代種子、またはそれから発芽した植物は、組換え核酸分子についてヘミ接合性である。ある局面では、後代種子、またはそれから発芽した植物は、組換え核酸分子についてホモ接合性である。
ある局面では、第1の植物品種は、タバコ植物品種である。ある局面では、第2の植物品種は、タバコ植物品種である。ある局面では、第1の植物品種は、***植物品種である。ある局面では、第2の植物品種は、***植物品種である。
本明細書において使用される場合、「交雑する」という用語は、2つの植物の意図的な交配のことを指す。ある局面では、交雑することは、第1の植物の第2の植物による授粉および／または受精を含む。交雑されている2つの植物は、遠い関係にある、近い関係にある、または同一であることができる。ある局面では、交雑されている2つの植物は、共に改変された植物である。ある局面では、交雑されている2つの植物は、同じ品種のものである。ある局面では、交雑されている2つの植物は、2つの異なる品種のものである。ある局面では、交雑されている2つの植物の一方は、雄性不稔である。ある局面では、交雑されている2つの植物の一方は、雌性不稔である。ある局面では、交雑されている2つの植物の少なくとも一方は、ハイブリッドタバコ植物である。ある局面では、交雑されている2つの植物の少なくとも一方は、改変された植物である。
ある局面では、第1の品種の植物は、交雑工程において雄親である。ある局面では、第1の品種の植物は、交雑工程において雌親である。ある局面では、第2の品種の植物は、交雑工程において雄親である。ある局面では、第2の品種の植物は、交雑工程において雌親である。
核酸およびアミノ酸
本明細書において使用される場合、「異種」は、外来種を起源とする、または、同じ種に由来する場合、意図的なヒトの介入によって組成および／もしくはゲノム遺伝子座がその天然形態から実質的に改変されている、配列（核酸またはアミノ酸）のことを指す。この用語はまた、本明細書において「ポリヌクレオチド構築物」とも称される核酸構築物にも適用可能である。このように、「異種」核酸構築物は、外来種を起源とする、または、同じ種に由来する場合、意図的なヒトの介入によって組成および／もしくはゲノム遺伝子座がその天然形態から実質的に改変されている、構築物を意味することが意図される。異種核酸構築物は、植物またはその植物部分に、例えば、形質転換法またはトランスジェニック植物と関心対象の別の植物とのその後の繁殖を介して導入された、組換えヌクレオチド構築物を含むが、それに限定されない。内因性プロモーターと内因性遺伝子が天然に機能的に連結されていない場合、内因性プロモーターは、機能的に連結されている内因性遺伝子に対して異種と見なすことができる（例えば、ヒト介入は、それらを機能的連結状態に置くことを必要とする）ことが理解されよう。本明細書において使用される場合、「内因性」核酸配列は、生物のゲノム中に天然に存在する核酸配列のことを指す。
ある局面では、異種ポリヌクレオチドは、遺伝子を含む。ある局面では、異種ポリヌクレオチドは、小さなRNA分子またはその前駆体をコードする。ある局面では、異種ポリヌクレオチドは、ポリペプチドをコードする。
本明細書において使用される場合、「遺伝子」は、機能的単位（例えば、限定されないが、例えば、ポリペプチド、または小さなRNA分子）を産生できるポリヌクレオチドのことを指す。遺伝子は、プロモーター、エンハンサー配列、リーダー配列、転写開始部位、転写停止部位、ポリアデニル化部位、1つもしくは複数のエクソン、1つもしくは複数のイントロン、5'-UTR、3'-UTR、またはそれらの任意の組み合わせを含むことができる。「遺伝子配列」は、プロモーター、エンハンサー配列、リーダー配列、転写開始部位、転写停止部位、ポリアデニル化部位、1つもしくは複数のエクソン、1つもしくは複数のイントロン、5'-UTR、3'-UTR、またはそれらの任意の組み合わせをコードするポリヌクレオチド配列を含むことができる。一局面では、遺伝子は、小さなRNA分子またはその前駆体をコードする。別の局面では、遺伝子は、ポリペプチドをコードする。
ある局面では、遺伝子は、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される核酸配列に対して少なくとも80％同一である核酸配列を含む。ある局面では、遺伝子は、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される核酸配列に対して少なくとも85％同一である核酸配列を含む。ある局面では、遺伝子は、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される核酸配列に対して少なくとも90％同一である核酸配列を含む。ある局面では、遺伝子は、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される核酸配列に対して少なくとも92.5％同一である核酸配列を含む。ある局面では、遺伝子は、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される核酸配列に対して少なくとも95％同一である核酸配列を含む。ある局面では、遺伝子は、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される核酸配列に対して少なくとも96％同一である核酸配列を含む。ある局面では、遺伝子は、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される核酸配列に対して少なくとも97％同一である核酸配列を含む。ある局面では、遺伝子は、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される核酸配列に対して少なくとも98％同一である核酸配列を含む。ある局面では、遺伝子は、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される核酸配列に対して少なくとも99％同一である核酸配列を含む。ある局面では、遺伝子は、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される核酸配列に対して少なくとも99.5％同一である核酸配列を含む。ある局面では、遺伝子は、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される核酸配列に対して100％同一である核酸配列を含む。
ある局面では、本開示は、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される核酸配列に対して少なくとも80％同一である核酸配列を提供する。ある局面では、本開示は、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される核酸配列に対して少なくとも85％同一である核酸配列を提供する。ある局面では、本開示は、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される核酸配列に対して少なくとも90％同一である核酸配列を提供する。ある局面では、本開示は、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される核酸配列に対して少なくとも92.5％同一である核酸配列を提供する。ある局面では、本開示は、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される核酸配列に対して少なくとも95％同一である核酸配列を提供する。ある局面では、本開示は、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される核酸配列に対して少なくとも96％同一である核酸配列を提供する。ある局面では、本開示は、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される核酸配列に対して少なくとも97％同一である核酸配列を提供する。ある局面では、本開示は、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される核酸配列に対して少なくとも98％同一である核酸配列を提供する。ある局面では、本開示は、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される核酸配列に対して少なくとも99％同一である核酸配列を提供する。ある局面では、本開示は、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される核酸配列に対して少なくとも99.5％同一である核酸配列を提供する。ある局面では、本開示は、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される核酸配列に対して100％同一である核酸配列を提供する。
ある局面では、遺伝子は、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも80％同一または類似のアミノ酸配列をコードする核酸配列を含む。ある局面では、遺伝子は、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも85％同一または類似のアミノ酸配列をコードする核酸配列を含む。ある局面では、遺伝子は、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも90％同一または類似のアミノ酸配列をコードする核酸配列を含む。ある局面では、遺伝子は、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも92.5％同一または類似のアミノ酸配列をコードする核酸配列を含む。ある局面では、遺伝子は、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも95％同一または類似のアミノ酸配列をコードする核酸配列を含む。ある局面では、遺伝子は、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも96％同一または類似のアミノ酸配列をコードする核酸配列を含む。ある局面では、遺伝子は、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも97％同一または類似のアミノ酸配列をコードする核酸配列を含む。ある局面では、遺伝子は、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも98％同一または類似のアミノ酸配列をコードする核酸配列を含む。ある局面では、遺伝子は、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも99％同一または類似のアミノ酸配列をコードする核酸配列を含む。ある局面では、遺伝子は、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも99.9％同一または類似のアミノ酸配列をコードする核酸配列を含む。ある局面では、遺伝子は、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して100％同一または類似のアミノ酸配列をコードする核酸配列を含む。
ある局面では、本開示は、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも80％同一または類似のアミノ酸配列をコードする核酸配列を提供する。ある局面では、本開示は、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも85％同一または類似のアミノ酸配列をコードする核酸配列を提供する。ある局面では、本開示は、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも90％同一または類似のアミノ酸配列をコードする核酸配列を提供する。ある局面では、本開示は、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも92.5％同一または類似のアミノ酸配列をコードする核酸配列を提供する。ある局面では、本開示は、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも95％同一または類似のアミノ酸配列をコードする核酸配列を提供する。ある局面では、本開示は、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも96％同一または類似のアミノ酸配列をコードする核酸配列を提供する。ある局面では、本開示は、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも97％同一または類似のアミノ酸配列をコードする核酸配列を提供する。ある局面では、本開示は、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも98％同一または類似のアミノ酸配列をコードする核酸配列を提供する。ある局面では、本開示は、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも99％同一または類似のアミノ酸配列をコードする核酸配列を提供する。ある局面では、本開示は、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも99.9％同一または類似のアミノ酸配列をコードする核酸配列を提供する。ある局面では、本開示は、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して100％同一または類似のアミノ酸配列をコードする核酸配列を提供する。
ある局面では、ポリペプチドは、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも80％同一または類似のアミノ酸配列を含む。ある局面では、ポリペプチドは、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも85％同一または類似のアミノ酸配列を含む。ある局面では、ポリペプチドは、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも90％同一または類似のアミノ酸配列を含む。ある局面では、ポリペプチドは、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも92.5％同一または類似のアミノ酸配列を含む。ある局面では、ポリペプチドは、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも95％同一または類似のアミノ酸配列を含む。ある局面では、ポリペプチドは、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも96％同一または類似のアミノ酸配列を含む。ある局面では、ポリペプチドは、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも97％同一または類似のアミノ酸配列を含む。ある局面では、ポリペプチドは、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも98％同一または類似のアミノ酸配列を含む。ある局面では、ポリペプチドは、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも99％同一または類似のアミノ酸配列を含む。ある局面では、ポリペプチドは、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも99.9％同一または類似のアミノ酸配列を含む。ある局面では、ポリペプチドは、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して100％同一または類似のアミノ酸配列を含む。
「パーセント同一性」または「パーセント同一である」という用語は、2つ以上のヌクレオチドまたはアミノ酸配列に関して本明細書において使用される場合、（i）2つの最適にアライメントされた配列（ヌクレオチドまたはアミノ酸）を比較ウインドウ（「アライメント可能な」1つまたは複数の領域）にわたって比較すること、（ii）両方の配列において同一の核酸塩基（ヌクレオチド配列について）またはアミノ酸残基（タンパク質およびポリペプチドについて）が生じる位置の数を決定して、一致した位置の数を得ること、（iii）一致した位置の数を比較ウインドウ中の位置の総数で割ること、次いで、（iv）この商に100％を掛けてパーセント同一性を得ることによって算出される。「パーセント同一性」が、特定の比較ウインドウが指定されることなく参照配列に関して算出される場合、パーセント同一性は、アライメントの領域にわたる一致した位置の数を参照配列の全長で割ることによって決定される。したがって、本出願の目的では、2つの配列（クエリーおよび対象）が最適にアライメントされるとき（それらのアライメントにおいてギャップが許容される）、クエリー配列に対する「パーセント同一性」は、2つの配列間で同一の位置の数を、クエリー配列中のその長さ（または比較ウインドウ）にわたる位置の総数で割って、それに100％を掛けたものに等しい。
配列同一性のパーセンテージがアミノ酸に関して使用されるとき、同一でない残基位置は、しばしば保存的アミノ酸置換によって相違することが認識されており、この場合、アミノ酸残基は、類似の化学的特性（例えば、電荷または疎水性）を有する他のアミノ酸残基に置換されており、それゆえ、分子の機能的特性を変化させることはない。配列が保存的置換で相違するとき、置換の保存的性質が補正されるようにパーセント配列同一性を上方調整することができる。そのような保存的置換によって相違する配列は、「配列類似性」または「類似性」を有すると言われる。
パーセント同一性を算出するための配列の最適なアライメントについて、2つ以上のヌクレオチドまたはアミノ酸配列間の配列同一性または類似性を比較するために使用できる、ClustalWまたはBasic Local Alignment Search Tool（登録商標）（BLAST（商標））などの様々なペアワイズまたは多重配列アライメントアルゴリズムおよびプログラムが、当技術分野において公知である。他のアライメントおよび比較法が当技術分野において公知であるが、2つの配列間のアライメントおよびパーセント同一性（上述したパーセント同一性範囲を含む）は、ClustalWアルゴリズムによって決定することができ、例えば、Chenna et al., "Multiple sequence alignment with the Clustal series of programs," Nucleic Acids Research 31: 3497-3500 (2003)；Thompson et al., "Clustal W: Improving the sensitivity of progressive multiple sequence alignment through sequence weighting, position-specific gap penalties and weight matrix choice," Nucleic Acids Research 22: 4673-4680 (1994)；Larkin MA et al., "Clustal W and Clustal X version 2.0," Bioinformatics 23: 2947-48 (2007)；およびAltschul et al. "Basic local alignment search tool." J. Mol. Biol. 215:403-410 (1990)を参照されたく、これらの全内容および開示は、参照により本明細書に組み入れられる。
「パーセント相補性」または「パーセント相補的である」という用語は、2つのヌクレオチド配列に関して本明細書において使用される場合、パーセント同一性の概念と同様であるが、クエリーおよび対象配列が、ループ、ステムまたはヘアピンなどの二次フォールディング構造なく、直線的に配置されて最適に塩基対合されたときに、対象配列のヌクレオチドに最適に塩基対合またはハイブリダイズするクエリー配列のヌクレオチドのパーセンテージのことを指す。そのようなパーセント相補性は、2本のDNA鎖、2本のRNA鎖、またはDNA鎖とRNA鎖との間のものであることができる。「パーセント相補性」は、（i）2つのヌクレオチド配列を、比較ウインドウにわたって直線的かつ完全に伸びた配置（すなわち、フォールディングまたは二次構造なし）で最適に塩基対合またはハイブリッドさせること、（ii）比較ウインドウにわたって2つの配列間で塩基対合する位置の数を決定して、相補位置の数を得ること、（iii）相補位置の数を比較ウインドウ中の位置の総数で割ること、および（iv）この商に100％を掛けて2つの配列のパーセント相補性を得ることによって算出することができる。2つの配列の最適な塩基対合は、水素結合を通じたヌクレオチド塩基の既知の対合（G-C、A-TおよびA-Uなど）に基づいて決定することができる。「パーセント相補性」が、特定の比較ウインドウが指定されることなく参照配列に関して算出されている場合、パーセント同一性は、2つの直線配列間の相補位置の数を参照配列の全長で割ることによって決定される。したがって、本出願の目的では、2つの配列（クエリーおよび対象）が最適に塩基対合されるとき（ミスマッチまたは非塩基対合ヌクレオチドが許容される）、クエリー配列に対する「パーセント相補性」は、2つの配列間の塩基対合した位置の数を、クエリー配列中のその長さにわたる位置の総数で割って、それに100％を掛けたものに等しい。
「ポリヌクレオチド」または「核酸分子」という用語の使用は、本開示を、デオキシリボ核酸（DNA）を含むポリヌクレオチドに限定することを意図していない。例えば、リボ核酸（RNA）分子も想定される。当業者は、ポリヌクレオチドおよび核酸分子が、リボヌクレオチドおよびリボヌクレオチドとデオキシリボヌクレオチドの組み合わせを含むことができることを認識するだろう。そのようなデオキシリボヌクレオチドおよびリボヌクレオチドは、天然に存在する分子および合成類似体の両方を含む。本開示のポリヌクレオチドはまた、一本鎖形態、二本鎖形態、ヘアピン、ステム・ループ構造などを含むがそれらに限定されないあらゆる形態の配列を包含する。ある局面では、本明細書に提供される核酸分子は、DNA分子である。別の局面では、本明細書に提供される核酸分子は、RNA分子である。ある局面では、本明細書に提供される核酸分子は、一本鎖である。別の局面では、本明細書に提供される核酸分子は、二本鎖である。核酸分子は、ポリペプチドまたは小さなRNAをコードすることができる。
本明細書において使用される場合、「組換え核酸分子」は、限定されないが分子クローニングなどの遺伝子組換えの実験法によって形成される核酸分子のことを指す。同様に、「組換えDNA構築物」は、遺伝子組換えの実験法によって形成されるDNA分子のことを指す。
ある局面では、本開示は、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子であって、核酸配列が、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも80％同一である、組換え核酸分子を提供する。ある局面では、本開示は、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子であって、核酸配列が、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも85％同一である、組換え核酸分子を提供する。ある局面では、本開示は、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子であって、核酸配列が、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも90％同一である、組換え核酸分子を提供する。ある局面では、本開示は、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子であって、核酸配列が、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも92.5％同一である、組換え核酸分子を提供する。ある局面では、本開示は、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子であって、核酸配列が、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも95％同一である、組換え核酸分子を提供する。ある局面では、本開示は、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子であって、核酸配列が、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも96％同一である、組換え核酸分子を提供する。ある局面では、本開示は、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子であって、核酸配列が、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも97％同一である、組換え核酸分子を提供する。ある局面では、本開示は、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子であって、核酸配列が、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも98％同一である、組換え核酸分子を提供する。ある局面では、本開示は、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子であって、核酸配列が、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも99％同一である、組換え核酸分子を提供する。ある局面では、本開示は、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子であって、核酸配列が、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも99.9％同一である、組換え核酸分子を提供する。ある局面では、本開示は、異種ポリヌクレオチドに機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子であって、核酸配列が、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して100％同一である、組換え核酸分子を提供する。
ある局面では、本開示は、異種ポリヌクレオチドに機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子であって、ポリヌクレオチドが、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも80％同一または類似のアミノ酸配列をコードする、組換え核酸分子を提供する。ある局面では、本開示は、異種ポリヌクレオチドに機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子であって、ポリヌクレオチドが、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも85％同一または類似のアミノ酸配列をコードする、組換え核酸分子を提供する。ある局面では、本開示は、異種ポリヌクレオチドに機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子であって、ポリヌクレオチドが、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも90％同一または類似のアミノ酸配列をコードする、組換え核酸分子を提供する。ある局面では、本開示は、異種ポリヌクレオチドに機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子であって、ポリヌクレオチドが、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも95％同一または類似のアミノ酸配列をコードする、組換え核酸分子を提供する。ある局面では、本開示は、異種ポリヌクレオチドに機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子であって、ポリヌクレオチドが、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも96％同一または類似のアミノ酸配列をコードする、組換え核酸分子を提供する。ある局面では、本開示は、異種ポリヌクレオチドに機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子であって、ポリヌクレオチドが、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも97％同一または類似のアミノ酸配列をコードする、組換え核酸分子を提供する。ある局面では、本開示は、異種ポリヌクレオチドに機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子であって、ポリヌクレオチドが、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも98％同一または類似のアミノ酸配列をコードする、組換え核酸分子を提供する。ある局面では、本開示は、異種ポリヌクレオチドに機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子であって、ポリヌクレオチドが、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも99％同一または類似のアミノ酸配列をコードする、組換え核酸分子を提供する。ある局面では、本開示は、異種ポリヌクレオチドに機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子であって、ポリヌクレオチドが、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも99.9％同一または類似のアミノ酸配列をコードする、組換え核酸分子を提供する。ある局面では、本開示は、異種ポリヌクレオチドに機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子であって、ポリヌクレオチドが、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して100％同一または類似のアミノ酸配列をコードする、組換え核酸分子を提供する。
核酸は、当技術分野において慣用の技法を使用して単離することができる。例えば、核酸は、非限定的に組換え核酸技術および／またはポリメラーゼ連鎖反応（PCR）を含めた任意の方法を使用して単離することができる。一般的なPCR技法は、例えば、PCR Primer: A Laboratory Manual, Dieffenbach & Dveksler, Eds., Cold Spring Harbor Laboratory Press, 1995に記載されている。組換え核酸技法は、例えば、制限酵素消化およびライゲーションを含み、これらは、核酸を単離するために使用することができる。単離核酸はまた、単一核酸分子としてまたは一連のオリゴヌクレオチドとしてのいずれかで、化学的に合成することもできる。ポリペプチドは、天然供給源（例えば、生体試料）から、DEAEイオン交換、ゲル濾過およびヒドロキシアパタイトクロマトグラフィーなどの公知の方法によって精製することができる。ポリペプチドはまた、例えば、発現ベクターで核酸を発現させることによって精製することもできる。加えて、精製ポリペプチドを化学合成によって得ることもできる。ポリペプチドの純度の程度は、任意の適切な方法、例えば、カラムクロマトグラフィー、ポリアクリルアミドゲル電気泳動、またはHPLC解析を使用して測定することができる。
一局面では、本開示は、植物細胞における組換え核酸およびポリペプチドを検出する方法を提供する。限定されないが、核酸はまた、ハイブリダイゼーションを使用して検出することもできる。核酸間のハイブリダイゼーションは、Sambrookら（1989, Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 2nd Ed., Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY）において詳細に考察されている。
本明細書において使用される場合、「ポリペプチド」という用語は、少なくとも2つの共有結合で連結されたアミノ酸の鎖のことを指す。ポリペプチドは、本明細書に提供されるポリヌクレオチドによってコードされ得る。本明細書に提供されるタンパク質は、本明細書に提供される核酸分子によってコードされ得る。タンパク質は、本明細書に提供されるポリペプチドを含むことができる。本明細書において使用される場合、「タンパク質」は、細胞に構造または酵素活性を提供可能なアミノ酸残基の鎖のことを指す。
ポリペプチドは、抗体を使用して検出することができる。抗体を使用してポリペプチドを検出するための技法は、酵素結合免疫吸着測定法（ELISA）、ウェスタンブロット、免疫沈降および免疫蛍光法を含む。本明細書に提供される抗体は、ポリクローナル抗体またはモノクローナル抗体であることができる。本明細書に提供されるポリペプチドに対して特異的な結合親和性を有する抗体を、当技術分野において周知の方法を使用して作製することができる。本明細書に提供される抗体は、当技術分野において公知の方法を使用して、マイクロタイタープレートなどの固体支持体に付着させることができる。
検出（例えば、増幅産物の、ハイブリダイゼーション複合体の、ポリペプチドの）は、検出可能な標識を使用して達成することができる。「標識」という用語は、直接標識の使用も間接標識の使用も包含することを意図している。検出可能な標識は、酵素、補欠分子族、蛍光物質、発光物質、生物発光物質および放射性物質を含む。
ある局面では、本開示は、プロモーターを提供する。ある局面では、プロモーターは、機能的に連結されている核酸配列に対して異種である。本明細書において使用される場合、「機能的に連結されている」は、2つ以上の要素間の機能的連結のことを指す。例えば、関心対象のポリヌクレオチドと調節配列（例えば、プロモーター）との間の機能的連結は、関心対象のポリヌクレオチドの発現を可能にする機能的な関係性である。機能的に連結されている要素は、連続的であっても非連続的であってもよい。
生物のある特定の組織において生物の他の組織と比べて増強された発現を駆動するプロモーターは、「組織優先型（tissue-preferred）」プロモーターと称される。したがって、「組織優先型」プロモーターは、植物の特定の組織において比較的高いまたは優先的な発現を引き起こすが、植物の他の組織における発現レベルはより低い。ある局面では、プロモーターは、組織優先型プロモーターである。ある局面では、組織優先型プロモーターは、葉組織優先型プロモーターである。ある局面では、組織優先型プロモーターは、アントシアニジンシンターゼ（NtANS1）をコードする遺伝子のプロモーターなどの花組織優先型プロモーターである（Lim et al., Plant Cell Tissue Organ Cult 114(3):373-383 (2013)）。ある局面では、組織優先型プロモーターは、伸長様（extension-like）タンパク質（NtREL1）のプロモーターなどの根組織優先型プロモーターである（Zhang et al. Plant Cell Rep 35,757-769 (2016)）。ある局面では、プロモーターは、根表皮中の脂質輸送タンパク質（Ntltp1）をコードする遺伝子のプロモーターなどの表皮組織優先型プロモーターである（Canevascini et al., Plant Physiol 112(2) 513-524 (1996)）。
植物の全組織または大部分の組織において発現を駆動するプロモーターは、「構成的」プロモーターと呼ばれる。ある局面では、プロモーターは、構成的プロモーターである。ある局面では、構成的プロモーターは、カリフラワーモザイクウイルス35Sプロモーター、ユビキチンプロモーター、アクチンプロモーター、オピンプロモーター、およびアルコールデヒドロゲナーゼプロモーターからなる群より選択される。
「誘導性」プロモーターは、熱、寒冷、日照り、光などの環境刺激、または創傷もしくは化学薬品の適用などの他の刺激に応答して転写を開始するプロモーターである。ある局面では、プロモーターは、誘導性プロモーターである。
ある局面では、プロモーターは、植物細胞において発現可能である。
テルペン
テルペンは、植物および一部の昆虫によって産生される芳香族有機化合物のクラスである。テルペンは、食害を直接阻止するためかまたは植物草食動物の捕食者もしくは寄生生物を誘引するために植物がよく利用する炭化水素分子である。テルペンの非限定的な例は、シトラール、メントール、ショウノウ、サルビノリンA、カンナビノイド、およびクルクミノイドを含む。
ある局面では、テルペンは、テルペノイドである。テルペノイド（イソプレノイドとも称される）は、酸素を含み得るさらなる官能基を含有する改変テルペンである。環式または非環式であり得るテルペノイドは、5炭素ヘミテルペンから数千のイソプレン単位を含有する長い複合分子まで、サイズが様々である。テルペノイドは、5炭素イソプレン単位（例えば、ジメチルアリル二リン酸（DMAPP）およびイソペンテニル二リン酸（IPP））同士の、ほとんどがDMAPPからIPPへの逐次的な頭尾付加による、縮合を通じて産生される。初期の環化プロセスは、異なるテルペンシンターゼによって触媒され、酵素の変異は、モノテルペン構造の変異を導く。
テルペノイドは、親テルペンを含むイソプレン単位の数に従って分類される。ヘミテルペノイドは、1個のイソプレン単位を含む。モノテルペノイドは、2個のイソプレン単位を含む。セスキテルペノイドは、3個のイソプレン単位を含む。ジテルペノイドは、4個のイソプレン単位を含む。セスタテルペノイドは、5個のイソプレン単位を含む。トリテルペノイドは、6個のイソプレン単位を含む。テトラテルペノイドは、8個のイソプレン単位を含む。ポリテルペノイドは、8個を超えるイソプレン単位を含む。
ある局面では、テルペンは、メントールである。ある局面では、テルペンは、メントールまたは関連化合物である。ある局面では、テルペンは、ラブダノイドである。ある局面では、テルペンは、センブラトリエンジオールである。ある局面では、テルペンは、レボピマル酸である。ある局面では、テルペンは、L-ロイシンである。ある局面では、テルペンは、ネオフィタジエンである。ある局面では、ラブダノイドは、cis-アビエノールである。ある局面では、テルペンは、メントールまたは関連化合物、ラブダノイド、センブラトリエンジオール、レボピマル酸、およびL-ロイシンからなる群より選択される。ある局面では、テルペンは、メントールまたは関連化合物、ラブダノイド、センブラトリエンジオール、レボピマル酸、L-ロイシン、およびネオフィタジエンからなる群より選択される。ある局面では、テルペンは、メントール、ラブダノイド、センブラトリエンジオール、レボピマル酸、およびL-ロイシンからなる群より選択される。ある局面では、テルペンは、メントール、ラブダノイド、センブラトリエンジオール、レボピマル酸、L-ロイシン、およびネオフィタジエンからなる群より選択される。
本明細書において使用される場合、「メントール」は、化学式：C10H20OおよびInternational Union of Pure and Applied Chemistry（IUPAC）名：5-メチル-2-(プロパン-2-イル)シクロヘキサン-1-オールを有する有機化合物のことを指す。メントールは、「(-)-メントール」とも称される。メントールの関連化合物は、(+)-メントール、(+)-イソメントール、(+)-ネオメントール、(+)-ネオイソメントール、(-)-イソメントール、(-)-ネオメントール、および(-)-ネオイソメントールを含むが、それらに限定されない。ある局面では、メントールの関連化合物は、(+)-メントール、(+)-イソメントール、(+)-ネオメントール、(+)-ネオイソメントール、(-)-イソメントール、(-)-ネオメントール、および(-)-ネオイソメントールからなる群より選択される。
本明細書において使用される場合、「ネオフィタジエン」は、化学式：C20H38およびIUPAC名：7,11,15-トリメチル-3-メチリデンヘキサデカ-1-エンを有する有機化合物のことを指す。
本明細書において使用される場合、「センブラトリエンジオール」は、化学式：C20H34O2およびIUPAC名：(1R,3R,4Z,8Z,12S,13Z)-1,5,9-トリメチル-12-プロパン-2-イルシクロテトラデカ-4,8,13-トリエン-1,3-ジオールを有する有機化合物のことを指す。センブラトリエンジオールは、「ベータ-センブレンジオール」とも称される。
本明細書において使用される場合、「レボピマル酸」は、化学式：C20H30O2およびIUPAC名：(1R,4aR,4bS,10aR)-1,4a-ジメチル-7-プロパン-2-イル-2,3,4,4b,5,9,10,10a-オクタヒドロフェナントレン-1-カルボン酸を有する有機化合物のことを指す。レボピマル酸は、「L-ピマル酸」とも称される。
本明細書において使用される場合、「L-ロイシン」は、化学式：C6H12NO2およびIUPAC名：(2S)-2-アミノ-4-メチルペンタン酸を有するアミノ酸のことを指す。
本明細書において使用される場合、「ラブダノイド」は、基本的な親ラブダンのテルペノイド誘導体であるジテルペンのことを指す。ラブダンは、化学式：C20H38およびIUPAC名：(1S,2S,4aS,8aR)-2,5,5,8a-テトラメチル-1-[(3R)-3-メチルペンチル]-1,2,3,4,4a,6,7,8-オクタヒドロナフタレンを有する。
ラブダノイドの非限定的な例は、cis-アビエノールである。本明細書において使用される場合、「cis-アビエノール」は、化学式：C20H34OおよびIUPAC名：(1R,2R,4aS,8aS)-2,5,5,8a-テトラメチル-1-[(2Z)-3-メチルペンタ-2,4,-ジエニル]-3,4,4a,6,7,8-ヘキサヒドロ-1H-ナフタレン-2-オールを有する有機化合物のことを指す。
ある局面では、本明細書に提供される組換え核酸を含む改変された植物、種子または植物部分は、同等条件下で生育させたときの組換え核酸分子を欠く対照植物、種子または植物部分と比較して、少なくとも1つのテルペンの増加した量を含む。ある局面では、本明細書に提供される組換え核酸を含む改変されたタバコ植物、タバコ種子またはタバコ植物部分は、同等条件下で生育させたときの組換え核酸分子を欠く対照タバコ植物、タバコ種子またはタバコ植物部分と比較して、少なくとも1つのテルペンの増加した量を含む。ある局面では、本明細書に提供される組換え核酸を含む改変された***植物、***種子または***植物部分は、同等条件下で生育させたときの組換え核酸分子を欠く対照***植物、***種子または***植物部分と比較して、少なくとも1つのテルペンの増加した量を含む。
ある局面では、少なくとも1つのテルペンの増加した量は、少なくとも0.5％の増加を含む。ある局面では、少なくとも1つのテルペンの増加した量は、少なくとも1％の増加を含む。ある局面では、少なくとも1つのテルペンの増加した量は、少なくとも2％の増加を含む。ある局面では、少なくとも1つのテルペンの増加した量は、少なくとも3％の増加を含む。ある局面では、少なくとも1つのテルペンの増加した量は、少なくとも4％の増加を含む。ある局面では、少なくとも1つのテルペンの増加した量は、少なくとも5％の増加を含む。ある局面では、少なくとも1つのテルペンの増加した量は、少なくとも10％の増加を含む。ある局面では、少なくとも1つのテルペンの増加した量は、少なくとも12.5％の増加を含む。ある局面では、少なくとも1つのテルペンの増加した量は、少なくとも15％の増加を含む。ある局面では、少なくとも1つのテルペンの増加した量は、少なくとも17.5％の増加を含む。ある局面では、少なくとも1つのテルペンの増加した量は、少なくとも20％の増加を含む。ある局面では、少なくとも1つのテルペンの増加した量は、少なくとも25％の増加を含む。ある局面では、少なくとも1つのテルペンの増加した量は、少なくとも30％の増加を含む。ある局面では、少なくとも1つのテルペンの増加した量は、少なくとも40％の増加を含む。ある局面では、少なくとも1つのテルペンの増加した量は、少なくとも50％の増加を含む。ある局面では、少なくとも1つのテルペンの増加した量は、少なくとも60％の増加を含む。ある局面では、少なくとも1つのテルペンの増加した量は、少なくとも70％の増加を含む。ある局面では、少なくとも1つのテルペンの増加した量は、少なくとも80％の増加を含む。ある局面では、少なくとも1つのテルペンの増加した量は、少なくとも90％の増加を含む。ある局面では、少なくとも1つのテルペンの増加した量は、少なくとも100％の増加を含む。ある局面では、少なくとも1つのテルペンの増加した量は、少なくとも150％の増加を含む。ある局面では、少なくとも1つのテルペンの増加した量は、少なくとも200％の増加を含む。ある局面では、少なくとも1つのテルペンの増加した量は、少なくとも250％の増加を含む。ある局面では、少なくとも1つのテルペンの増加した量は、少なくとも500％の増加を含む。
ある局面では、少なくとも1つのテルペンの増加した量は、0.5％～500％の増加を含む。ある局面では、少なくとも1つのテルペンの増加した量は、0.5％～250％の増加を含む。ある局面では、少なくとも1つのテルペンの増加した量は、0.5％～100％の増加を含む。ある局面では、少なくとも1つのテルペンの増加した量は、0.5％～75％の増加を含む。ある局面では、少なくとも1つのテルペンの増加した量は、0.5％～50％の増加を含む。ある局面では、少なくとも1つのテルペンの増加した量は、0.5％～25％の増加を含む。ある局面では、少なくとも1つのテルペンの増加した量は、0.5％～10％の増加を含む。ある局面では、少なくとも1つのテルペンの増加した量は、0.5％～5％の増加を含む。ある局面では、少なくとも1つのテルペンの増加した量は、0.5％～500％の増加を含む。ある局面では、少なくとも1つのテルペンの増加した量は、5％～250％の増加を含む。ある局面では、少なくとも1つのテルペンの増加した量は、5％～100％の増加を含む。ある局面では、少なくとも1つのテルペンの増加した量は、5％～50％の増加を含む。ある局面では、少なくとも1つのテルペンの増加した量は、25％～500％の増加を含む。ある局面では、少なくとも1つのテルペンの増加した量は、25％～250％の増加を含む。ある局面では、少なくとも1つのテルペンの増加した量は、50％～100％の増加を含む。ある局面では、少なくとも1つのテルペンの増加した量は、100％～500％の増加を含む。
植物中のテルペンの量は、限定されないがガスクロマトグラフィー質量分析（GC-MS）、核磁気共鳴分光法および液体クロマトグラフィー結合質量分析を含む、当技術分野において公知の任意の方法を使用して測定することができる。The Handbook of Plant Metabolomics, edited by Weckwerth and Kahl, (Wiley-Blackwell) (May 28, 2013)を参照されたい。ある局面では、少なくとも1つのテルペンの量は、採取された組織中の少なくとも1つのテルペンの濃度のことを指す。
製品
ある局面では、本開示は、本明細書に提供される任意の植物または植物部分由来の乾燥植物材料を提供する。ある局面では、本開示は、本明細書に提供される任意のタバコ植物またはタバコ植物部分由来の乾燥タバコ材料を提供する。
ある局面では、乾燥植物材料は、熱風乾燥、空気乾燥、火力乾燥、および天日乾燥からなる群より選択される乾燥プロセスによって作製される。ある局面では、乾燥タバコ材料は、熱風乾燥、空気乾燥、火力乾燥、および天日乾燥からなる群より選択される乾燥プロセスによって作製される。
「乾燥」は、水分量を低下させてクロロフィルの破壊を招くことで、タバコ葉に金色を付け、それによってデンプンを糖に変換する、熟成プロセスである。乾燥タバコは、それゆえ、収穫した緑色の葉と比べて還元糖含有量が高く、デンプン含有量が低い。一局面では、本明細書に提供されるタバコ植物または植物成分は、従来の手段（例えば、熱風乾燥、倉庫乾燥、火力乾燥、空気乾燥または天日乾燥）を使用して乾燥することができる。異なる種類の乾燥法の説明については、例えば、Tso（1999, Chapter 1 in Tobacco, Production, Chemistry and Technology, Davis & Nielsen, eds., Blackwell Publishing, Oxford）を参照されたい。乾燥タバコは、通常、木製ドラム（例えば、大樽）または厚紙カートン内で、圧縮条件で数年間（例えば、2～5年）、10％～約25％の範囲の水分含有量で熟成される。米国特許第4,516,590号および同第5,372,149号を参照されたい。乾燥および熟成させたタバコを、その後さらに加工することができる。さらなる加工は、様々な温度で蒸気を注入してまたは注入しないで真空下でタバコをコンディショニングすること、低温殺菌、および発酵を含む。
バーレーおよびダークタバコ品種の収穫に関する情報は、ケンタッキー大学、テネシー大学、バージニア工科大学、およびノースカロライナ州立大学によって出版された2019-2020 Burley and Dark Tobacco Production Guide（December 2018）に見いだすことができ、これは、参照によりその全体が本明細書に組み入れられる。
ある局面では、乾燥タバコ材料は、乾燥葉材料、乾燥茎材料、乾燥蕾材料、乾燥花材料、および乾燥根材料から選択される群より選択されるタバコ材料を含む。ある局面では、乾燥タバコ材料は、乾燥葉材料、乾燥茎材料、または両方を含む。ある局面では、乾燥タバコ材料は、乾燥葉材料を含む。ある局面では、乾燥タバコ材料は、乾燥茎材料を含む。
ある局面では、乾燥タバコ材料は、熱風乾燥タバコ材料を含む。ある局面では、乾燥タバコ材料は、空気乾燥タバコ材料を含む。ある局面では、乾燥タバコ材料は、火力乾燥タバコ材料を含む。ある局面では、乾燥タバコ材料は、天日乾燥タバコ材料を含む。ある局面では、本明細書に提供される乾燥タバコ材料は、空気乾燥タバコ材料、火力乾燥タバコ材料、天日乾燥タバコ材料、および熱風乾燥タバコ材料からなる群より選択される。ある局面では、乾燥タバコ材料は、熱風乾燥品種、ブライト品種、バーレー品種、バージニア品種、メリーランド品種、ダーク品種、オリエンタル品種、およびトルコ品種からなる群より選択されるタバコ品種由来である。
ある局面では、本明細書に提供される乾燥タバコ葉は、空気乾燥タバコ葉、火力乾燥タバコ葉、天日乾燥タバコ葉、および熱風乾燥タバコ葉からなる群より選択される。ある局面では、乾燥タバコ葉は、熱風乾燥品種、ブライト品種、バーレー品種、バージニア品種、メリーランド品種、ダーク品種、オリエンタル品種、およびトルコ品種からなる群より選択されるタバコ品種由来である。
発酵は、典型的には、高い初期水分含有量、熱発生、および乾燥重量の10～20％の喪失を特徴とする。例えば、米国特許第4,528,993号、同第4,660,577号、同第4,848,373号、同第5,372,149号；米国特許公開第2005/0178398号；およびTso（1999, Chapter 1 in Tobacco, Production, Chemistry and Technology, Davis & Nielsen, eds., Blackwell Publishing, Oxford）を参照されたい。乾燥、熟成および発酵させたタバコは、さらに加工（例えば、カット、細断、膨張、またはブレンド）することができる。例えば、米国特許第4,528,993号；同第4,660,577号；および同第4,987,907号を参照されたい。ある局面では、本開示は、本明細書に提供される任意のタバコ植物またはその部分由来の発酵タバコ材料を提供する。別の局面では、本開示は、本明細書に提供される任意の改変されたタバコ植物またはその部分由来の発酵タバコ材料を提供する。
本開示のタバコ系統、品種またはハイブリッドから得られたタバコ材料を使用して、タバコ製品を製造することができる。本明細書において使用される場合、「タバコ製品」は、ヒトでの使用または消費を意図したタバコから製造されるまたはそれに由来する任意の製品として定義される。ある局面では、本開示は、本明細書に提供されるタバコ植物由来の植物材料を含むタバコ製品を提供する。別の局面では、本開示は、本明細書に提供される改変されたタバコ植物由来の植物材料を含むタバコ製品を提供する。別の局面では、本開示は、乾燥タバコ材料を含むタバコ製品を提供する。別の局面では、本開示は、発酵させたタバコ材料を含むタバコ製品を提供する。別の局面では、本開示は、タバコブレンドを含むタバコ製品を提供する。
タバコ製品は、非限定的に、シガレット製品（例えば、シガレットおよびビディシガレット）、葉巻製品（例えば、葉巻包装タバコおよびシガリロ）、パイプタバコ製品、タバコに由来する製品、タバコ由来ニコチン製品、無煙タバコ製品（例えば、モイストスナッフ、ドライスナッフ、および噛みタバコ）、フィルム、チュアブル、タブ、シェイプドパーツ、ゲル、コンシューマブルユニット、不溶性マトリックス、中空形状物、再構成タバコ、膨張タバコなどを含む。例えば、米国特許公開第US 2006/0191548号を参照されたい。
本明細書において使用される場合、「シガレット」は、「棒状部」および「充填物」を有するタバコ製品のことを指す。シガレットの「棒状部」は、シガレット用紙、フィルター、プラグラップ（濾過材を収納するために使用される）、フィルターにシガレット用紙（充填物を含む）を固定するチッピング紙、およびこれら成分を一緒に固定するすべての接着剤を含む。「充填物」は、（1）再構成タバコおよび膨張タバコを含むがそれらに限定されないすべてのタバコ、（2）非タバコ代替物（ハーブ、非タバコ植物材料およびシガレット用紙に巻かれるタバコに付随し得る他のスパイスを含むが、それらに限定されない）、（3）ケーシング、（4）香料、および（5）他のすべての添加物（タバコおよび代替物に混合され、シガレット中に巻かれる）を含む。
ある局面では、タバコ製品は、再構成タバコを含む。別の局面では、本開示は、乾燥タバコ材料を含む再構成タバコを提供する。本明細書において使用される場合、「再構成タバコ」は、シート状に加工されてタバコに似せて細片にカットされた、タバコダストおよび他のタバコスクラップ材料から製造されたタバコ充填物の一員のことを指す。コスト削減に加えて、再構成タバコは、アンモニアと糖との間の反応を使用して香りの発生を進めることから、シガレット風味へのその寄与に対しても非常に重要である。
ある局面では、タバコ製品は、膨張タバコを含む。本明細書において使用される場合、「膨張タバコ」は、タバコを「膨らませて」密度の低下およびより大きな充填性能を生じるように、適切な気体の膨張を通じて加工されているタバコ充填物の一員のことを指す。膨張タバコは、シガレットで使用されるタバコの重量を低減する。
本開示の植物に由来するタバコ製品はまた、シガレットおよび他の喫煙物品、特に、フィルター要素を含む喫煙物品も含み、この場合、喫煙可能材料の棒状部は、タバコブレンド内に乾燥タバコを含む。ある局面では、本開示のタバコ製品は、クレテック、ビディシガレット、シガリロ、非通気リセスドフィルター（non-ventilated recess filter）シガレット、通気リセスドフィルター（vented recess filter）シガレット、葉巻、スナッフ、パイプタバコ、葉巻タバコ、シガレットタバコ、噛みタバコ、葉タバコ、水タバコ、刻みタバコ、およびカットタバコからなる群より選択される。
ある局面では、本開示のタバコ製品は、シガレット、加熱タバコ製品、クレテック、ビディシガレット、葉巻、シガリロ、非通気シガレット、通気リセスドフィルターシガレット、パイプタバコ、スナッフ、スヌース、噛みタバコ、モイスト無煙タバコ、ファインカット噛みタバコ、ロングカット噛みタバコ、ポーチ入り噛みタバコ製品、ガム、タブレット、ロゼンジ、および溶解ストリップからなる群より選択される。
ある局面では、本開示のタバコ製品は、無煙タバコ製品である。ある局面では、無煙タバコ製品は、ルーズリーフ噛みタバコ、固形噛みタバコ、モイストスナッフ、鼻用スナッフ、ドライスナッフ、およびスヌースからなる群より選択される。
無煙タバコ製品は、燃焼せず、噛みタバコ、湿性無煙タバコ、スヌースおよびドライスナッフを含むが、それらに限定されない。噛みタバコは、粗く分割されたタバコ葉であり、典型的には大きなポーチ様パッケージに包装されて、固形またはねじった状態で使用される。モイスト無煙タバコは、湿り気を有するより細かく分割されたタバコであり、ばらばらの形態または袋の形態で提供され、典型的には、円形缶に包装され、一つまみとしてまたは袋状で成人のタバコ消費者の頬と歯茎の間に入れて使用される。スヌースは、加熱処理された無煙タバコである。ドライスナッフは、細かく粉末にされたタバコであり、口内に置くかまたは経鼻使用される。
さらに別の局面では、本開示のタバコ製品は、電子加熱シガレット、e-シガレット、電子式気化デバイスからなる群より選択される。
ある局面では、本開示のタバコ製品は、ブレンドタバコ製品であることができる。
別の局面では、本開示は、乾燥タバコ材料を含むタバコブレンドを提供する。タバコブレンドは、乾燥タバコ、未乾燥タバコ、発酵タバコ、未発酵タバコ、膨張タバコ、および再構成タバコの任意の組み合わせを含むことができる。
ある局面では、タバコブレンドは、少なくとも5重量％の乾燥タバコを含む。ある局面では、タバコブレンドは、少なくとも10重量％の乾燥タバコを含む。ある局面では、タバコブレンドは、少なくとも15重量％の乾燥タバコを含む。ある局面では、タバコブレンドは、少なくとも20重量％の乾燥タバコを含む。ある局面では、タバコブレンドは、少なくとも25重量％の乾燥タバコを含む。ある局面では、タバコブレンドは、少なくとも30重量％の乾燥タバコを含む。ある局面では、タバコブレンドは、少なくとも35重量％の乾燥タバコを含む。ある局面では、タバコブレンドは、少なくとも40重量％の乾燥タバコを含む。ある局面では、タバコブレンドは、少なくとも45重量％の乾燥タバコを含む。ある局面では、タバコブレンドは、少なくとも50重量％の乾燥タバコを含む。ある局面では、タバコブレンドは、少なくとも55重量％の乾燥タバコを含む。ある局面では、タバコブレンドは、少なくとも60重量％の乾燥タバコを含む。ある局面では、タバコブレンドは、少なくとも65重量％の乾燥タバコを含む。ある局面では、タバコブレンドは、少なくとも70重量％の乾燥タバコを含む。ある局面では、タバコブレンドは、少なくとも75重量％の乾燥タバコを含む。ある局面では、タバコブレンドは、少なくとも80重量％の乾燥タバコを含む。ある局面では、タバコブレンドは、少なくとも85重量％の乾燥タバコを含む。ある局面では、タバコブレンドは、少なくとも90重量％の乾燥タバコを含む。ある局面では、タバコブレンドは、少なくとも95重量％の乾燥タバコを含む。
ある局面では、タバコブレンドは、少なくとも5体積％の乾燥タバコを含む。ある局面では、タバコブレンドは、少なくとも10体積％の乾燥タバコを含む。ある局面では、タバコブレンドは、少なくとも15体積％の乾燥タバコを含む。ある局面では、タバコブレンドは、少なくとも20体積％の乾燥タバコを含む。ある局面では、タバコブレンドは、少なくとも25体積％の乾燥タバコを含む。ある局面では、タバコブレンドは、少なくとも30体積％の乾燥タバコを含む。ある局面では、タバコブレンドは、少なくとも35体積％の乾燥タバコを含む。ある局面では、タバコブレンドは、少なくとも40体積％の乾燥タバコを含む。ある局面では、タバコブレンドは、少なくとも45体積％の乾燥タバコを含む。ある局面では、タバコブレンドは、少なくとも50体積％の乾燥タバコを含む。ある局面では、タバコブレンドは、少なくとも55体積％の乾燥タバコを含む。ある局面では、タバコブレンドは、少なくとも60体積％の乾燥タバコを含む。ある局面では、タバコブレンドは、少なくとも65体積％の乾燥タバコを含む。ある局面では、タバコブレンドは、少なくとも70体積％の乾燥タバコを含む。ある局面では、タバコブレンドは、少なくとも75体積％の乾燥タバコを含む。ある局面では、タバコブレンドは、少なくとも80体積％の乾燥タバコを含む。ある局面では、タバコブレンドは、少なくとも85体積％の乾燥タバコを含む。ある局面では、タバコブレンドは、少なくとも90体積％の乾燥タバコを含む。ある局面では、タバコブレンドは、少なくとも95体積％の乾燥タバコを含む。
ある局面では、本開示は、本明細書に提供される***植物、***種子または***植物部分由来の材料を含む***製品を提供する。ある局面では、***製品は、無煙製品である。さらなる局面では、無煙***製品は、食用***製品である。さらなる局面では、無煙***製品は、繊維系製品である。ある局面では、***製品は、喫煙可能製品である。ある局面では、***製品は、***バイオマスに由来する。ある局面では、***製品は、***バイオマスに由来する蒸留物である。
ある局面では、本開示は、改変されたタバコ植物またはそれに由来する部分由来の乾燥タバコ材料を使用して生産するタバコ製品を調製する工程を含む方法であって、改変されたタバコ植物またはそれに由来する部分が、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子を含み、核酸配列が、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも80％同一である、方法を提供する。ある局面では、本開示は、改変されたタバコ植物またはそれに由来する部分由来の乾燥タバコ材料を使用して生産するタバコ製品を調製する工程を含む方法であって、改変されたタバコ植物またはそれに由来する部分が、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子を含み、核酸配列が、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも85％同一である、方法を提供する。ある局面では、本開示は、改変されたタバコ植物またはそれに由来する部分由来の乾燥タバコ材料を使用して生産するタバコ製品を調製する工程を含む方法であって、改変されたタバコ植物またはそれに由来する部分が、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子を含み、核酸配列が、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも90％同一である、方法を提供する。ある局面では、本開示は、改変されたタバコ植物またはそれに由来する部分由来の乾燥タバコ材料を使用して生産するタバコ製品を調製する工程を含む方法であって、改変されたタバコ植物またはそれに由来する部分が、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子を含み、核酸配列が、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも92.5％同一である、方法を提供する。ある局面では、本開示は、改変されたタバコ植物またはそれに由来する部分由来の乾燥タバコ材料を使用して生産するタバコ製品を調製する工程を含む方法であって、改変されたタバコ植物またはそれに由来する部分が、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子を含み、核酸配列が、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも95％同一である、方法を提供する。ある局面では、本開示は、改変されたタバコ植物またはそれに由来する部分由来の乾燥タバコ材料を使用して生産するタバコ製品を調製する工程を含む方法であって、改変されたタバコ植物またはそれに由来する部分が、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子を含み、核酸配列が、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも96％同一である、方法を提供する。ある局面では、本開示は、改変されたタバコ植物またはそれに由来する部分由来の乾燥タバコ材料を使用して生産するタバコ製品を調製する工程を含む方法であって、改変されたタバコ植物またはそれに由来する部分が、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子を含み、核酸配列が、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも97％同一である、方法を提供する。ある局面では、本開示は、改変されたタバコ植物またはそれに由来する部分由来の乾燥タバコ材料を使用して生産するタバコ製品を調製する工程を含む方法であって、改変されたタバコ植物またはそれに由来する部分が、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子を含み、核酸配列が、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも98％同一である、方法を提供する。ある局面では、本開示は、改変されたタバコ植物またはそれに由来する部分由来の乾燥タバコ材料を使用して生産するタバコ製品を調製する工程を含む方法であって、改変されたタバコ植物またはそれに由来する部分が、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子を含み、核酸配列が、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも99％同一である、方法を提供する。ある局面では、本開示は、改変されたタバコ植物またはそれに由来する部分由来の乾燥タバコ材料を使用して生産するタバコ製品を調製する工程を含む方法であって、改変されたタバコ植物またはそれに由来する部分が、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子を含み、核酸配列が、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも99.9％同一である、方法を提供する。ある局面では、本開示は、改変されたタバコ植物またはそれに由来する部分由来の乾燥タバコ材料を使用して生産するタバコ製品を調製する工程を含む方法であって、改変されたタバコ植物またはそれに由来する部分が、異種ポリヌクレオチドに機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子を含み、核酸配列が、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される、またはその機能的断片である、方法を提供する。
ある局面では、本開示は、改変されたタバコ植物またはそれに由来する部分由来の乾燥タバコ材料を使用して生産するタバコ製品を調製する工程を含む方法であって、改変されたタバコ植物またはそれに由来する部分が、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子を含み、核酸配列が、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも80％同一または類似のアミノ酸配列をコードする、方法を提供する。ある局面では、本開示は、改変されたタバコ植物またはそれに由来する部分由来の乾燥タバコ材料を使用して生産するタバコ製品を調製する工程を含む方法であって、改変されたタバコ植物またはそれに由来する部分が、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子を含み、核酸配列が、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも85％同一または類似のアミノ酸配列をコードする、方法を提供する。ある局面では、本開示は、改変されたタバコ植物またはそれに由来する部分由来の乾燥タバコ材料を使用して生産するタバコ製品を調製する工程を含む方法であって、改変されたタバコ植物またはそれに由来する部分が、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子を含み、核酸配列が、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも90％同一または類似のアミノ酸配列をコードする、方法を提供する。ある局面では、本開示は、改変されたタバコ植物またはそれに由来する部分由来の乾燥タバコ材料を使用して生産するタバコ製品を調製する工程を含む方法であって、改変されたタバコ植物またはそれに由来する部分が、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子を含み、核酸配列が、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも92.5％同一または類似のアミノ酸配列をコードする、方法を提供する。ある局面では、本開示は、改変されたタバコ植物またはそれに由来する部分由来の乾燥タバコ材料を使用して生産するタバコ製品を調製する工程を含む方法であって、改変されたタバコ植物またはそれに由来する部分が、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子を含み、核酸配列が、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも95％同一または類似のアミノ酸配列をコードする、方法を提供する。ある局面では、本開示は、改変されたタバコ植物またはそれに由来する部分由来の乾燥タバコ材料を使用して生産するタバコ製品を調製する工程を含む方法であって、改変されたタバコ植物またはそれに由来する部分が、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子を含み、核酸配列が、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも96％同一または類似のアミノ酸配列をコードする、方法を提供する。ある局面では、本開示は、改変されたタバコ植物またはそれに由来する部分由来の乾燥タバコ材料を使用して生産するタバコ製品を調製する工程を含む方法であって、改変されたタバコ植物またはそれに由来する部分が、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子を含み、核酸配列が、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも97％同一または類似のアミノ酸配列をコードする、方法を提供する。ある局面では、本開示は、改変されたタバコ植物またはそれに由来する部分由来の乾燥タバコ材料を使用して生産するタバコ製品を調製する工程を含む方法であって、改変されたタバコ植物またはそれに由来する部分が、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子を含み、核酸配列が、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも98％同一または類似のアミノ酸配列をコードする、方法を提供する。ある局面では、本開示は、改変されたタバコ植物またはそれに由来する部分由来の乾燥タバコ材料を使用して生産するタバコ製品を調製する工程を含む方法であって、改変されたタバコ植物またはそれに由来する部分が、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子を含み、核酸配列が、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも99％同一または類似のアミノ酸配列をコードする、方法を提供する。ある局面では、本開示は、改変されたタバコ植物またはそれに由来する部分由来の乾燥タバコ材料を使用して生産するタバコ製品を調製する工程を含む方法であって、改変されたタバコ植物またはそれに由来する部分が、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子を含み、核酸配列が、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも99.9％同一または類似のアミノ酸配列をコードする、方法を提供する。ある局面では、本開示は、改変されたタバコ植物またはそれに由来する部分由来の乾燥タバコ材料を使用して生産するタバコ製品を調製する工程を含む方法であって、改変されたタバコ植物またはそれに由来する部分が、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子を含み、核酸配列が、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列、またはその機能的断片をコードする、方法を提供する。
ある局面では、本開示は、改変された***植物またはそれに由来する部分由来の材料を使用して***製品を調製する工程を含む方法であって、改変された***植物またはそれに由来する部分が、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子を含み、核酸配列が、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも80％同一である、方法を提供する。ある局面では、本開示は、改変された***植物またはそれに由来する部分由来の材料を使用して***製品を調製する工程を含む方法であって、改変された***植物またはそれに由来する部分が、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子を含み、核酸配列が、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも85％同一である、方法を提供する。ある局面では、本開示は、改変された***植物またはそれに由来する部分由来の材料を使用して***製品を調製する工程を含む方法であって、改変された***植物またはそれに由来する部分が、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子を含み、核酸配列が、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも90％同一である、方法を提供する。ある局面では、本開示は、改変された***植物またはそれに由来する部分由来の材料を使用して***製品を調製する工程を含む方法であって、改変された***植物またはそれに由来する部分が、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子を含み、核酸配列が、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも92.5％同一である、方法を提供する。ある局面では、本開示は、改変された***植物またはそれに由来する部分由来の材料を使用して***製品を調製する工程を含む方法であって、改変された***植物またはそれに由来する部分が、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子を含み、核酸配列が、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも95％同一である、方法を提供する。ある局面では、本開示は、改変された***植物またはそれに由来する部分由来の材料を使用して***製品を調製する工程を含む方法であって、改変された***植物またはそれに由来する部分が、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子を含み、核酸配列が、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも96％同一である、方法を提供する。ある局面では、本開示は、改変された***植物またはそれに由来する部分由来の材料を使用して***製品を調製する工程を含む方法であって、改変された***植物またはそれに由来する部分が、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子を含み、核酸配列が、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも97％同一である、方法を提供する。ある局面では、本開示は、改変された***植物またはそれに由来する部分由来の材料を使用して***製品を調製する工程を含む方法であって、改変された***植物またはそれに由来する部分が、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子を含み、核酸配列が、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも98％同一である、方法を提供する。ある局面では、本開示は、改変された***植物またはそれに由来する部分由来の材料を使用して***製品を調製する工程を含む方法であって、改変された***植物またはそれに由来する部分が、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子を含み、核酸配列が、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも99％同一である、方法を提供する。ある局面では、本開示は、改変された***植物またはそれに由来する部分由来の材料を使用して***製品を調製する工程を含む方法であって、改変された***植物またはそれに由来する部分が、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子を含み、核酸配列が、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも99.9％同一である、方法を提供する。ある局面では、本開示は、改変された***植物またはそれに由来する部分由来の材料を使用して***製品を調製する工程を含む方法であって、改変された***植物またはそれに由来する部分が、異種ポリヌクレオチドに機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子を含み、核酸配列が、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して100％同一である、方法を提供する。
ある局面では、本開示は、改変された***植物またはそれに由来する部分由来の材料を使用して***製品を調製する工程を含む方法であって、改変された***植物またはそれに由来する部分が、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子を含み、核酸配列が、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも80％同一または類似のアミノ酸配列をコードする、方法を提供する。ある局面では、本開示は、改変された***植物またはそれに由来する部分由来の材料を使用して***製品を調製する工程を含む方法であって、改変された***植物またはそれに由来する部分が、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子を含み、核酸配列が、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも85％同一または類似のアミノ酸配列をコードする、方法を提供する。ある局面では、本開示は、改変された***植物またはそれに由来する部分由来の材料を使用して***製品を調製する工程を含む方法であって、改変された***植物またはそれに由来する部分が、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子を含み、核酸配列が、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも90％同一または類似のアミノ酸配列をコードする、方法を提供する。ある局面では、本開示は、改変された***植物またはそれに由来する部分由来の材料を使用して***製品を調製する工程を含む方法であって、改変された***植物またはそれに由来する部分が、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子を含み、核酸配列が、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも92.5％同一または類似のアミノ酸配列をコードする、方法を提供する。ある局面では、本開示は、改変された***植物またはそれに由来する部分由来の材料を使用して***製品を調製する工程を含む方法であって、改変された***植物またはそれに由来する部分が、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子を含み、核酸配列が、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも95％同一または類似のアミノ酸配列をコードする、方法を提供する。ある局面では、本開示は、改変された***植物またはそれに由来する部分由来の材料を使用して***製品を調製する工程を含む方法であって、改変された***植物またはそれに由来する部分が、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子を含み、核酸配列が、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも96％同一または類似のアミノ酸配列をコードする、方法を提供する。ある局面では、本開示は、改変された***植物またはそれに由来する部分由来の材料を使用して***製品を調製する工程を含む方法であって、改変された***植物またはそれに由来する部分が、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子を含み、核酸配列が、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも97％同一または類似のアミノ酸配列をコードする、方法を提供する。ある局面では、本開示は、改変された***植物またはそれに由来する部分由来の材料を使用して***製品を調製する工程を含む方法であって、改変された***植物またはそれに由来する部分が、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子を含み、核酸配列が、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも98％同一または類似のアミノ酸配列をコードする、方法を提供する。ある局面では、本開示は、改変された***植物またはそれに由来する部分由来の材料を使用して***製品を調製する工程を含む方法であって、改変された***植物またはそれに由来する部分が、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子を含み、核酸配列が、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも99％同一または類似のアミノ酸配列をコードする、方法を提供する。ある局面では、本開示は、改変された***植物またはそれに由来する部分由来の材料を使用して***製品を調製する工程を含む方法であって、改変された***植物またはそれに由来する部分が、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子を含み、核酸配列が、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも99.9％同一または類似のアミノ酸配列をコードする、方法を提供する。ある局面では、本開示は、改変された***植物またはそれに由来する部分由来の材料を使用して***製品を調製する工程を含む方法であって、改変された***植物またはそれに由来する部分が、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子を含み、核酸配列が、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列、またはその機能的断片をコードする、方法を提供する。
形質転換
ある局面では、本開示は、以下の工程を含む、改変された植物を作製する方法を提供する：（a）異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子を、少なくとも1つの植物細胞に導入する工程であって、核酸配列が、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも80％同一である、工程；（b）工程（a）から少なくとも1つの植物細胞を選択する工程であって、少なくとも1つの植物細胞が組換え核酸分子を含む、工程；ならびに（c）工程（b）で選択された少なくとも1つの植物細胞から、改変された植物を再生させる工程。ある局面では、本開示は、以下の工程を含む、改変された植物を作製する方法を提供する：（a）異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子を、少なくとも1つの植物細胞に導入する工程であって、核酸配列が、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも85％同一である、工程；（b）工程（a）から少なくとも1つの植物細胞を選択する工程であって、少なくとも1つの植物細胞が組換え核酸分子を含む、工程；ならびに（c）工程（b）で選択された少なくとも1つの植物細胞から、改変された植物を再生させる工程。ある局面では、本開示は、以下の工程を含む、改変された植物を作製する方法を提供する：（a）異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子を、少なくとも1つの植物細胞に導入する工程であって、核酸配列が、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも90％同一である、工程；（b）工程（a）から少なくとも1つの植物細胞を選択する工程であって、少なくとも1つの植物細胞が組換え核酸分子を含む、工程；ならびに（c）工程（b）で選択された少なくとも1つの植物細胞から、改変された植物を再生させる工程。ある局面では、本開示は、以下の工程を含む、改変された植物を作製する方法を提供する：（a）異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子を、少なくとも1つの植物細胞に導入する工程であって、核酸配列が、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも92.5％同一である、工程；（b）工程（a）から少なくとも1つの植物細胞を選択する工程であって、少なくとも1つの植物細胞が組換え核酸分子を含む、工程；ならびに（c）工程（b）で選択された少なくとも1つの植物細胞から、改変された植物を再生させる工程。ある局面では、本開示は、以下の工程を含む、改変された植物を作製する方法を提供する：（a）異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子を、少なくとも1つの植物細胞に導入する工程であって、核酸配列が、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも95％同一である、工程；（b）工程（a）から少なくとも1つの植物細胞を選択する工程であって、少なくとも1つの植物細胞が組換え核酸分子を含む、工程；ならびに（c）工程（b）で選択された少なくとも1つの植物細胞から、改変された植物を再生させる工程。ある局面では、本開示は、以下の工程を含む、改変された植物を作製する方法を提供する：（a）異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子を、少なくとも1つの植物細胞に導入する工程であって、核酸配列が、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも96％同一である、工程；（b）工程（a）から少なくとも1つの植物細胞を選択する工程であって、少なくとも1つの植物細胞が組換え核酸分子を含む、工程；ならびに（c）工程（b）で選択された少なくとも1つの植物細胞から、改変された植物を再生させる工程。ある局面では、本開示は、以下の工程を含む、改変された植物を作製する方法を提供する：（a）異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子を、少なくとも1つの植物細胞に導入する工程であって、核酸配列が、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも97％同一である、工程；（b）工程（a）から少なくとも1つの植物細胞を選択する工程であって、少なくとも1つの植物細胞が組換え核酸分子を含む、工程；ならびに（c）工程（b）で選択された少なくとも1つの植物細胞から、改変された植物を再生させる工程。ある局面では、本開示は、以下の工程を含む、改変された植物を作製する方法を提供する：（a）異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子を、少なくとも1つの植物細胞に導入する工程であって、核酸配列が、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも98％同一である、工程；（b）工程（a）から少なくとも1つの植物細胞を選択する工程であって、少なくとも1つの植物細胞が組換え核酸分子を含む、工程；ならびに（c）工程（b）で選択された少なくとも1つの植物細胞から、改変された植物を再生させる工程。ある局面では、本開示は、以下の工程を含む、改変された植物を作製する方法を提供する：（a）異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子を、少なくとも1つの植物細胞に導入する工程であって、核酸配列が、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも99％同一である、工程；（b）工程（a）から少なくとも1つの植物細胞を選択する工程であって、少なくとも1つの植物細胞が組換え核酸分子を含む、工程；ならびに（c）工程（b）で選択された少なくとも1つの植物細胞から、改変された植物を再生させる工程。ある局面では、本開示は、以下の工程を含む、改変された植物を作製する方法を提供する：（a）異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子を、少なくとも1つの植物細胞に導入する工程であって、核酸配列が、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも99.9％同一である、工程；（b）工程（a）から少なくとも1つの植物細胞を選択する工程であって、少なくとも1つの植物細胞が組換え核酸分子を含む、工程；ならびに（c）工程（b）で選択された少なくとも1つの植物細胞から、改変された植物を再生させる工程。ある局面では、本開示は、以下の工程を含む、改変された植物を作製する方法を提供する：（a）異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子を、少なくとも1つの植物細胞に導入する工程であって、核酸配列が、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される、またはその機能的断片である、工程；（b）工程（a）から少なくとも1つの植物細胞を選択する工程であって、少なくとも1つの植物細胞が組換え核酸分子を含む、工程；ならびに（c）工程（b）で選択された少なくとも1つの植物細胞から、改変された植物を再生させる工程。
ある局面では、本明細書に提供される方法は、植物細胞を組換え核酸分子で形質転換する工程であって、組換え核酸分子が、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含み、核酸配列が、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも80％同一である、工程を含む。ある局面では、本明細書に提供される方法は、植物細胞を組換え核酸分子で形質転換する工程であって、組換え核酸分子が、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含み、核酸配列が、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも85％同一である、工程を含む。ある局面では、本明細書に提供される方法は、植物細胞を組換え核酸分子で形質転換する工程であって、組換え核酸分子が、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含み、核酸配列が、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも90％同一である、工程を含む。ある局面では、本明細書に提供される方法は、植物細胞を組換え核酸分子で形質転換する工程であって、組換え核酸分子が、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含み、核酸配列が、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも92.5％同一である、工程を含む。ある局面では、本明細書に提供される方法は、植物細胞を組換え核酸分子で形質転換する工程であって、組換え核酸分子が、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含み、核酸配列が、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも95％同一である、工程を含む。ある局面では、本明細書に提供される方法は、植物細胞を組換え核酸分子で形質転換する工程であって、組換え核酸分子が、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含み、核酸配列が、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも96％同一である、工程を含む。ある局面では、本明細書に提供される方法は、植物細胞を組換え核酸分子で形質転換する工程であって、組換え核酸分子が、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含み、核酸配列が、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも97％同一である、工程を含む。ある局面では、本明細書に提供される方法は、植物細胞を組換え核酸分子で形質転換する工程であって、組換え核酸分子が、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含み、核酸配列が、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも98％同一である、工程を含む。ある局面では、本明細書に提供される方法は、植物細胞を組換え核酸分子で形質転換する工程であって、組換え核酸分子が、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含み、核酸配列が、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも99％同一である、工程を含む。ある局面では、本明細書に提供される方法は、植物細胞を組換え核酸分子で形質転換する工程であって、組換え核酸分子が、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含み、核酸配列が、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも99.9％同一である、工程を含む。ある局面では、本明細書に提供される方法は、植物細胞を組換え核酸分子で形質転換する工程であって、組換え核酸分子が、異種ポリヌクレオチドに機能的に連結されているプロモーターを含み、核酸配列が、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して100％同一である、工程を含む。
ある局面では、本開示は、以下の工程を含む、改変された植物を作製する方法を提供する：（a）異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子を、少なくとも1つの植物細胞に導入する工程であって、核酸配列が、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも80％同一または類似のアミノ酸配列をコードする、工程；（b）工程（a）から少なくとも1つの植物細胞を選択する工程であって、少なくとも1つの植物細胞が組換え核酸分子を含む、工程；ならびに（c）工程（b）で選択された少なくとも1つの植物細胞から、改変された植物を再生させる工程。ある局面では、本開示は、以下の工程を含む、改変された植物を作製する方法を提供する：（a）異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子を、少なくとも1つの植物細胞に導入する工程であって、核酸配列が、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも85％同一または類似のアミノ酸配列をコードする、工程；（b）工程（a）から少なくとも1つの植物細胞を選択する工程であって、少なくとも1つの植物細胞が組換え核酸分子を含む、工程；ならびに（c）工程（b）で選択された少なくとも1つの植物細胞から、改変された植物を再生させる工程。ある局面では、本開示は、以下の工程を含む、改変された植物を作製する方法を提供する：（a）異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子を、少なくとも1つの植物細胞に導入する工程であって、核酸配列が、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも90％同一または類似のアミノ酸配列をコードする、工程；（b）工程（a）から少なくとも1つの植物細胞を選択する工程であって、少なくとも1つの植物細胞が組換え核酸分子を含む、工程；ならびに（c）工程（b）で選択された少なくとも1つの植物細胞から、改変された植物を再生させる工程。ある局面では、本開示は、以下の工程を含む、改変された植物を作製する方法を提供する：（a）異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子を、少なくとも1つの植物細胞に導入する工程であって、核酸配列が、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも92.5％同一または類似のアミノ酸配列をコードする、工程；（b）工程（a）から少なくとも1つの植物細胞を選択する工程であって、少なくとも1つの植物細胞が組換え核酸分子を含む、工程；ならびに（c）工程（b）で選択された少なくとも1つの植物細胞から、改変された植物を再生させる工程。ある局面では、本開示は、以下の工程を含む、改変された植物を作製する方法を提供する：（a）異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子を、少なくとも1つの植物細胞に導入する工程であって、核酸配列が、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも95％同一または類似のアミノ酸配列をコードする、工程；（b）工程（a）から少なくとも1つの植物細胞を選択する工程であって、少なくとも1つの植物細胞が組換え核酸分子を含む、工程；ならびに（c）工程（b）で選択された少なくとも1つの植物細胞から、改変された植物を再生させる工程。ある局面では、本開示は、以下の工程を含む、改変された植物を作製する方法を提供する：（a）異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子を、少なくとも1つの植物細胞に導入する工程であって、核酸配列が、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも96％同一または類似のアミノ酸配列をコードする、工程；（b）工程（a）から少なくとも1つの植物細胞を選択する工程であって、少なくとも1つの植物細胞が組換え核酸分子を含む、工程；ならびに（c）工程（b）で選択された少なくとも1つの植物細胞から、改変された植物を再生させる工程。ある局面では、本開示は、以下の工程を含む、改変された植物を作製する方法を提供する：（a）異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子を、少なくとも1つの植物細胞に導入する工程であって、核酸配列が、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも97％同一または類似のアミノ酸配列をコードする、工程；（b）工程（a）から少なくとも1つの植物細胞を選択する工程であって、少なくとも1つの植物細胞が組換え核酸分子を含む、工程；ならびに（c）工程（b）で選択された少なくとも1つの植物細胞から、改変された植物を再生させる工程。ある局面では、本開示は、以下の工程を含む、改変された植物を作製する方法を提供する：（a）異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子を、少なくとも1つの植物細胞に導入する工程であって、核酸配列が、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも98％同一または類似のアミノ酸配列をコードする、工程；（b）工程（a）から少なくとも1つの植物細胞を選択する工程であって、少なくとも1つの植物細胞が組換え核酸分子を含む、工程；ならびに（c）工程（b）で選択された少なくとも1つの植物細胞から、改変された植物を再生させる工程。ある局面では、本開示は、以下の工程を含む、改変された植物を作製する方法を提供する：（a）異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子を、少なくとも1つの植物細胞に導入する工程であって、核酸配列が、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも99％同一または類似のアミノ酸配列をコードする、工程；（b）工程（a）から少なくとも1つの植物細胞を選択する工程であって、少なくとも1つの植物細胞が組換え核酸分子を含む、工程；ならびに（c）工程（b）で選択された少なくとも1つの植物細胞から、改変された植物を再生させる工程。ある局面では、本開示は、以下の工程を含む、改変された植物を作製する方法を提供する：（a）異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子を、少なくとも1つの植物細胞に導入する工程であって、核酸配列が、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも99.9％同一または類似のアミノ酸配列をコードする、工程；（b）工程（a）から少なくとも1つの植物細胞を選択する工程であって、少なくとも1つの植物細胞が組換え核酸分子を含む、工程；ならびに（c）工程（b）で選択された少なくとも1つの植物細胞から、改変された植物を再生させる工程。ある局面では、本開示は、以下の工程を含む、改変された植物を作製する方法を提供する：（a）異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含む組換え核酸分子を、少なくとも1つの植物細胞に導入する工程であって、核酸配列が、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるタンパク質、またはその機能的断片をコードする、工程；（b）工程（a）から少なくとも1つの植物細胞を選択する工程であって、少なくとも1つの植物細胞が組換え核酸分子を含む、工程；ならびに（c）工程（b）で選択された少なくとも1つの植物細胞から、改変された植物を再生させる工程。
ある局面では、本明細書に提供される方法は、植物細胞を組換え核酸分子で形質転換する工程であって、組換え核酸分子が、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含み、核酸配列が、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも80％同一または類似のアミノ酸配列をコードする、工程を含む。ある局面では、本明細書に提供される方法は、植物細胞を組換え核酸分子で形質転換する工程であって、組換え核酸分子が、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含み、核酸配列が、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも85％同一または類似のアミノ酸配列をコードする、工程を含む。ある局面では、本明細書に提供される方法は、植物細胞を組換え核酸分子で形質転換する工程であって、組換え核酸分子が、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含み、核酸配列が、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも90％同一または類似のアミノ酸配列をコードする、工程を含む。ある局面では、本明細書に提供される方法は、植物細胞を組換え核酸分子で形質転換する工程であって、組換え核酸分子が、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含み、核酸配列が、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも92.5％同一または類似のアミノ酸配列をコードする、工程を含む。ある局面では、本明細書に提供される方法は、植物細胞を組換え核酸分子で形質転換する工程であって、組換え核酸分子が、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含み、核酸配列が、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも95％同一または類似のアミノ酸配列をコードする、工程を含む。ある局面では、本明細書に提供される方法は、植物細胞を組換え核酸分子で形質転換する工程であって、組換え核酸分子が、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含み、核酸配列が、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも96％同一または類似のアミノ酸配列をコードする、工程を含む。ある局面では、本明細書に提供される方法は、植物細胞を組換え核酸分子で形質転換する工程であって、組換え核酸分子が、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含み、核酸配列が、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも97％同一または類似のアミノ酸配列をコードする、工程を含む。ある局面では、本明細書に提供される方法は、植物細胞を組換え核酸分子で形質転換する工程であって、組換え核酸分子が、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含み、核酸配列が、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも98％同一または類似のアミノ酸配列をコードする、工程を含む。ある局面では、本明細書に提供される方法は、植物細胞を組換え核酸分子で形質転換する工程であって、組換え核酸分子が、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含み、核酸配列が、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも99％同一または類似のアミノ酸配列をコードする、工程を含む。ある局面では、本明細書に提供される方法は、植物細胞を組換え核酸分子で形質転換する工程であって、組換え核酸分子が、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含み、核酸配列が、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択される配列、またはその機能的断片に対して少なくとも99.9％同一または類似のアミノ酸配列をコードする、工程を含む。ある局面では、本明細書に提供される方法は、植物細胞を組換え核酸分子で形質転換する工程であって、組換え核酸分子が、異種核酸配列に機能的に連結されているプロモーターを含み、核酸配列が、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列、またはその機能的断片をコードする、工程を含む。
植物細胞に組換え核酸分子を「導入する」ための数多くの方法が、当技術分野において公知であり、これらを本出願の方法に従って使用して、改変された植物細胞、植物、種子または植物部分を生産することができる。本明細書において使用される場合、「導入する」および「形質転換する」という用語は、互換的に使用することができる。当技術分野において公知の植物細胞の形質転換のための任意の好適な方法または技法を、本方法に従って使用することができる。植物の形質転換のための有効な方法は、細菌によって媒介される形質転換、例えば、アグロバクテリウム媒介またはリゾビウム媒介形質転換、および微粒子銃媒介形質転換を含む。細菌によって媒介される形質転換または微粒子銃を介して形質転換ベクターで外植体を形質転換し、その後、続いて、それらの外植体を培養などしてトランスジェニック植物を再生または発生させるために、多様な方法が当技術分野において公知である。植物形質転換のための他の方法、例えば、マイクロインジェクション、エレクトロポレーション、減圧浸潤、加圧、超音波処理、炭化ケイ素繊維撹拌、ポリエチレングリコール（PEG）媒介形質転換なども、当技術分野において公知である。これらの形質転換法によって産生された改変された植物は、使用される方法および外植体に応じて形質転換事象についてキメラまたは非キメラであり得る。
植物細胞を形質転換する方法は、当業者によく知られている。例えば、組換えDNAで被覆された粒子を用いた微粒子銃によって植物細胞を形質転換（例えば、バイオリステック形質転換）するための具体的教示を、米国特許第5,550,318号；同第5,538,880号、同第6,160,208号；同第6,399,861号；および同第6,153,812号に見いだすことができ、アグロバクテリウム媒介形質転換が、米国特許第5,159,135号；同第5,824,877号；同第5,591,616号；同第6,384,301号；同第5,750,871号；同第5,463,174号；および同第5,188,958号に記載されており、それらのすべてが参照により本明細書に組み入れられる。植物を形質転換するためのさらなる方法については、例えば、Compendium of Transgenic Crop Plants (2009) Blackwell Publishingに見いだすことができる。本明細書に提供される核酸分子のいずれかで植物細胞（例えば、タバコ細胞、***細胞）を形質転換するために、当業者に公知の任意の適切な方法を使用することができる。
ある局面では、植物細胞に組換え核酸分子を導入する方法は、アグロバクテリウム媒介形質転換を含む。別の局面では、植物細胞に組換え核酸分子を導入する方法は、PEG媒介形質転換を含む。別の局面では、植物細胞に組換え核酸分子を導入する方法は、バイオリステック形質転換を含む。別の局面では、植物細胞に組換え核酸分子を導入する方法は、リポソーム媒介トランスフェクション（リポフェクション）を含む。別の局面では、植物細胞に組換え核酸分子を導入する方法は、レンチウイルストランスフェクションを含む。
リポフェクションは、例えば、米国特許第5,049,386号、同第4,946,787号；および同第4,897,355号に記載されており、リポフェクション試薬は、市販されている（例えば、Transfectam（商標）およびLipofectin（商標））。ポリヌクレオチドの効率的な受容体認識リポフェクションに好適なカチオン性および中性脂質は、WO 91/17424およびWO 91/16024のものを含む。送達は、細胞（例えば、インビトロまたはエクスビボ投与）または標的組織（例えば、インビボ投与）に対するものであることができる。
稔性植物を再生できるあらゆる植物細胞が、本開示の実践のための有用な受容細胞として想定される。
ある局面では、組換え核酸分子は、タバコ細胞に導入される。ある局面では、組換え核酸分子は、タバコプロトプラスト細胞に導入される。別の局面では、組換え核酸分子は、タバコカルス細胞に導入される。ある局面では、組換え核酸分子は、種子細胞、果実細胞、葉細胞、子葉細胞、胚軸細胞、***組織細胞、胚細胞、胚乳細胞、根細胞、芽細胞、茎細胞、花細胞、花序細胞、柄細胞、小花柄細胞、花柱細胞、柱頭細胞、花托細胞、花弁細胞、萼細胞、花粉細胞、葯細胞、花糸細胞、子房細胞、胚珠細胞、果皮細胞、および師部細胞からなる群より選択されるタバコ細胞に導入される。
ある局面では、組換え核酸分子は、***細胞に導入される。ある局面では、組換え核酸分子は、***プロトプラスト細胞に導入される。別の局面では、組換え核酸分子は、***カルス細胞に導入される。ある局面では、組換え核酸分子は、種子細胞、果実細胞、葉細胞、子葉細胞、胚軸細胞、***組織細胞、胚細胞、胚乳細胞、根細胞、芽細胞、茎細胞、花細胞、花序細胞、柄細胞、小花柄細胞、花柱細胞、柱頭細胞、花托細胞、花弁細胞、萼細胞、花粉細胞、葯細胞、花糸細胞、子房細胞、胚珠細胞、果皮細胞、および師部細胞からなる群より選択される***細胞に導入される。
カルスは、未熟胚または胚の部分、苗頂端***組織、小胞子などを含むがそれらに限定されない様々な組織供給源から開始することができる。カルスとして増殖可能なそれらの細胞は、形質転換のための受容細胞として役立つことができる。本開示のトランスジェニック植物を作製するための実践的な形質転換法および材料（例えば、様々な培地および受容標的細胞、未熟胚の形質転換、その後の稔性トランスジェニック植物の再生）は、例えば、米国特許6,194,636および同6,232,526ならびに米国特許出願公開2004/0216189に開示されており、それらのすべてが参照により本明細書に組み入れられる。
態様
下記の非限定的な態様の例が想定される。
1. SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも80％同一または類似のアミノ酸配列をコードする核酸配列を含む組換え核酸分子を含む、改変された植物、種子または植物部分であって、該核酸配列が異種プロモーターに機能的に連結されている、前記改変された植物、種子または植物部分。
2. 前記核酸配列が、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される配列に対して少なくとも90％同一または類似の配列を含む、態様1の改変された植物、種子または植物部分。
3. 前記核酸配列が、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される配列に対して少なくとも95％同一である、態様1または2の改変された植物、種子または植物部分。
4. 前記核酸配列が、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択される配列に対して少なくとも90％同一または類似のタンパク質をコードする、態様1～3のいずれか1つの改変された植物、種子または植物部分。
5. 前記核酸配列が、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される、態様1～4のいずれか1つの改変された植物、種子または植物部分。
6. 前記アミノ酸配列が、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択される、態様1～5のいずれか1つの改変された植物、種子または植物部分。
7. 前記改変された植物、種子または植物部分が、タバコ植物、タバコ種子またはタバコ植物部分である、態様1～6のいずれか1つの改変された植物、種子またはその部分。
8. タバコ植物、タバコ種子または植物部分が、熱風乾燥品種、ブライト品種、バーレー品種、バージニア品種、メリーランド品種、ダーク品種、ガルパオ品種、オリエンタル品種、およびトルコ品種からなる群より選択されるタバコ品種のものである、態様7の改変された植物、種子またはその部分。
9. 前記植物が、雄性不稔または細胞質的に雄性不稔である、態様1～8のいずれか1つの改変された植物、種子またはその部分。
10. 前記改変された植物、種子または植物部分が、***植物、***種子または***植物部分である、態様1～6のいずれか1つの改変された植物、種子またはその部分。
11. 前記植物または植物部分が、前記組換え核酸分子を欠く対照植物と比較して少なくとも5％増加した量の少なくとも1つのテルペンを含む、態様1～10のいずれか1つの改変された植物、種子または植物部分。
12. 異種プロモーターが、構成的プロモーター、誘導性プロモーター、および組織優先型または組織特異的プロモーターからなる群より選択される、態様1～11のいずれか1つの改変された植物、種子または植物部分。
13. 前記改変された植物の少なくとも1枚の葉が、同等条件下で生育させた対照植物の葉と比較して、より大きな平均毛状突起密度を含む、態様1～12のいずれか1つの改変された植物、種子または植物部分。
14. 前記改変された植物の少なくとも1枚の葉が、同等条件下で生育させた対照植物の葉の背軸面と比較して、葉の背軸面において、より大きな平均毛状突起密度を含む、態様1～12のいずれか1つの改変された植物、種子または植物部分。
15. 前記改変された植物の少なくとも1枚の葉が、同等条件下で生育させた対照植物の葉の向軸面と比較して、葉の向軸面において、より大きな平均毛状突起密度を含む、態様1～12のいずれか1つの改変された植物、種子または植物部分。
16. SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも80％同一または類似のアミノ酸配列をコードする核酸配列を含む組換え核酸分子を含む改変されたタバコ植物またはタバコ植物部分由来の乾燥タバコ材料であって、該核酸配列が異種プロモーターに機能的に連結されている、前記乾燥タバコ材料。
17. 熱風乾燥タバコ材料、空気乾燥タバコ材料、火力乾燥タバコ材料、および天日乾燥タバコ材料からなる群より選択される、態様16の乾燥タバコ材料。
18. 態様16の乾燥タバコ材料を含む、タバコ製品。
19. クレテック、ビディシガレット、シガリロ、非通気リセスドフィルターシガレット、通気リセスドフィルターシガレット、葉巻、パイプタバコ、葉巻タバコ、シガレットタバコ、噛みタバコ、モイストスナッフ、鼻用スナッフ、ドライスナッフ、スヌース、葉タバコ、水タバコ、刻みタバコ、およびカットタバコからなる群より選択される、態様18または23のタバコ製品。
20. 無煙タバコ製品である、態様19のタバコ製品。
21. 無煙タバコ製品が、ルーズリーフ噛みタバコ、固形噛みタバコ、モイストスナッフ、鼻用スナッフ、ドライスナッフ、およびスヌースからなる群より選択される、態様20のタバコ製品。
22. 態様16の乾燥タバコ材料を含む、再構成タバコ。
23. SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも80％同一または類似のアミノ酸配列をコードする核酸配列を含む組換え核酸分子を含む、改変されたタバコ植物、タバコ種子またはタバコ植物部分由来の材料を含むタバコ製品であって、該核酸配列が異種プロモーターに機能的に連結されている、前記タバコ製品。
24. SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも80％同一または類似のアミノ酸配列をコードする核酸配列を含む組換え核酸分子を含む、改変された***植物、***種子または***植物部分由来の材料を含む***製品であって、該核酸配列が、異種プロモーターに機能的に連結されている、前記***製品。
25. SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも80％同一または類似のアミノ酸配列をコードする核酸配列を含む組換え核酸分子であって、該核酸配列が異種プロモーターに機能的に連結されている、前記組換え核酸分子。
26. 前記核酸配列が、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択される配列に対して少なくとも90％同一または類似のタンパク質をコードする、態様25の組換え核酸分子。
27. 前記核酸配列が、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される配列に対して少なくとも90％同一である、態様25または26の組換え核酸分子。
28. 前記核酸配列が、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択される配列に対して少なくとも95％同一または類似のタンパク質をコードする、態様25～27のいずれか1つの組換え核酸分子。
29. 前記核酸配列が、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される、態様25～28のいずれか1つの組換え核酸分子。
30. 前記核酸配列が、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるタンパク質をコードする、態様25～29のいずれか1つの組換え核酸分子。
31. 以下の工程を含む、植物を生産するための方法：
（a）SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される配列に対して少なくとも80％同一である核酸配列を含む組換え核酸分子を含む少なくとも1つの植物を得る工程であって、該核酸配列が異種プロモーターに機能的に連結されている、工程；
（b）少なくとも1つの後代種子を生産するために、該少なくとも1つの植物を第2の品種の少なくとも1つの植物と交雑させる工程；ならびに
（c）工程（b）で生産された該少なくとも1つの後代種子、またはそれから発芽した植物を選択する工程であって、該少なくとも1つの後代種子またはそれから発芽した植物が該組換え核酸分子を含む、工程。
32. 以下の工程をさらに含む、態様31の方法：
（f）前記少なくとも1つの後代種子から発芽した植物から植物材料を採取する工程；および
（g）該採取した植物材料からなるまたはそれに由来する製品を生産する工程。
33. 前記少なくとも1つの後代種子から生育させた植物が、前記組換え核酸分子を欠く対照植物と比較して少なくとも5％増加した量の少なくとも1つのテルペンをさらに含む、態様31または32の方法。
34. 前記少なくとも1つの後代種子から生育させた植物が、前記組換え核酸分子を欠く対照植物と比較して少なくとも10％増加した量の少なくとも1つのテルペンをさらに含む、態様31～33のいずれか1つの方法。
35. 前記少なくとも1つの植物が、ニコチアナおよびカンナビスからなる群より選択される属由来である、態様31～34のいずれか1つの方法。
36. 前記少なくとも1つの植物が、タバコおよび***からなる群より選択される属由来である、態様31～35のいずれか1つの方法。
37. 前記組換え核酸分子が、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択される配列に対して少なくとも80％同一または類似のタンパク質をコードする核酸配列を含む、態様31～36のいずれか1つの方法。
38. 前記組換え核酸分子が、SEQ ID NO：13～27および34～36からなる群より選択される配列に対して少なくとも90％同一である核酸配列を含む、態様31～37のいずれか1つの方法。
39. 前記組換え核酸分子が、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択される配列に対して少なくとも90％同一または類似のタンパク質をコードする核酸配列を含む、態様31～38のいずれか1つの方法。
40. 前記組換え核酸分子が、SEQ ID NO：13～27および34～36からなる群より選択される核酸配列を含む、態様31～39のいずれか1つの方法。
41. 前記組換え核酸分子が、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるタンパク質をコードする核酸配列を含む、態様31～40のいずれか1つの方法。
42. 以下の工程を含む、改変された植物を作製する方法：
（a）SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される配列に対して少なくとも80％同一である核酸配列を含む組換え核酸分子を、少なくとも1つの植物細胞に導入する工程であって、該核酸配列が異種プロモーターに機能的に連結されている、工程；
（b）工程（a）から少なくとも1つの植物細胞を選択する工程であって、該少なくとも1つの植物細胞が該組換え核酸分子を含む、工程；ならびに
（c）工程（b）で選択された少なくとも1つの植物細胞から、改変された植物を再生させる工程。
43. 改変されたタバコ植物またはそれに由来する部分由来の乾燥タバコ材料を使用してタバコ製品を調製する工程を含み、該改変されたタバコ植物またはそれに由来する部分が、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される配列に対して少なくとも80％同一である核酸配列を含む組換え核酸分子を少なくとも1つの植物細胞に含み、該核酸配列が異種プロモーターに機能的に連結されている、方法。
44. 改変された***植物またはそれに由来する部分由来の材料を使用して***製品を調製する工程を含み、該改変された***植物またはそれに由来する部分が、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される配列に対して少なくとも80％同一である核酸配列を含む組換え核酸分子を少なくとも1つの植物細胞に含み、該核酸配列が異種プロモーターに機能的に連結されている、方法。
45. 植物細胞を、少なくとも1つの植物細胞に対する組換え核酸分子で形質転換する工程を含み、該組換え核酸分子が、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される配列に対して少なくとも80％同一である核酸配列を含み、該核酸配列が異種プロモーターに機能的に連結されている、方法。
46. 以下の工程を含む、毛状突起密度が増加した植物を生産するための方法：
（a）少なくとも1つの植物細胞に、ポリヌクレオチドに機能的に連結されている異種プロモーターを含む組換え核酸を提供する工程であって、該ポリヌクレオチドが、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも80％同一または類似のアミノ酸配列をコードする、工程；ならびに
（b）工程（a）の少なくとも1つの植物細胞から、改変された植物を再生させる工程であって、該改変された植物が、同等条件下で生育させたときの組換え核酸を欠く対照植物由来の葉と比較して、少なくとも1枚の葉において、増加した毛状突起密度を含む、工程。
これまで本開示を一般的に説明してきたが、本開示は、下記実施例を参照してより容易に理解され、該実施例は、例証として提供されるものであって、特に指定のない限り本開示を制限することを意図するものではない。
実施例1. 毛状突起密度改変のための候補転写因子の特定
毛状突起の形成および発達の調節に関与する転写因子を、National Center for Biotechnology Information（NCBI）データベースの検索においてクエリーとして使用した。類似のアプローチを利用して、タバコにおける脂質輸送タンパク質を特定する。結果として得られた配列を、次いで、第2の内部データベースから抽出した。この方法論は、転写因子ファミリーメンバーのMYB（図3Aおよび3B）およびC2H2（図4）を特定した。これらのファミリーから、3つの転写因子候補を、植物における毛状突起密度の改変に選択する。このアプローチはまた、タバコにおいて脂質輸送タンパク質（LTP）ファミリーの86のメンバーも特定し、続いて、LTP1の2つのバリアントアイソフォームの特定に至った：アイソフォーム2（SEQ ID NO：27）は、アイソフォーム1（SEQ ID NO：26）と比較して5’伸長を有する。図8Aおよび8Bを参照されたい。このアプローチは、毛状突起特異的であり代謝物輸送に関与する候補遺伝子の一覧の精選を可能にした（SEQ ID NO：13～27および34～36）。表1を参照されたい。
実施例2. ベクターの構築
実施例1で特定された候補遺伝子（例えば、SEQ ID NO：13～27および34～36）を、PCR Cloning System with GATEWAY Technology（ThermoFisher Scientific, Catalog Number 12535029）を使用してクローニングする。クローニングした遺伝子を、続いて、GATEWAY発現ベクターにサブクローニングし、ここで、サブクローニングした遺伝子は、CaMV 35Sプロモーターに機能的に連結されているGREEN FUORESCENCE PROTEIN（G3GFP）と融合される。図2を参照されたい。
実施例3. 改変されたタバコ植物の形質転換および再生
実施例2で作製されたベクター構築物の各々を、別々の実験でタバコ細胞に別々に形質転換する。簡単に述べると、ベクターを、アグロバクテリウム形質転換を介してタバコ葉ディスクに導入する。例えば、Mayo et al., Nat. Protoc., 1:1105-1111 (2006)；およびHorsch et al., Science, 227:1229-1231 (1985)を参照されたい。
形質転換したタバコ植物（品種「TN90」および「イズミル・エゴ」）およびN. ベンサミアナを、Magenta（商標）GA-7ボックス内で生育させ、葉ディスクをカットしてペトリ皿に入れる。50mLの遠心分離チューブ中の20mLの細胞懸濁液を3500 RPMで10分間遠心分離することによって、形質転換ベクターを含むアグロバクテリウム・ツメファシエンス細胞を収集する。上清を取り除き、アグロバクテリウム・ツメファシエンス細胞ペレットを40mLの液体再懸濁培地に再懸濁する。中肋を避けたタバコ葉を、#15カミソリ刃で8つの0.6cmのディスクにカットし、上下逆にしてペトリ皿に入れる。B5ビタミン液体再懸濁培地を含むMurashige & Skoog（MS）の薄層をペトリ皿に加え、葉ディスクを先が細い針で均一に突く。約25mLのアグロバクテリウム・ツメファシエンス懸濁液をペトリ皿に加え、葉ディスクを懸濁液中で10分間インキュベートする。
葉ディスクを共栽培ペトリ皿（1/2 MS培地）に移し、ディスクを上下逆にして共栽培TOM培地（30g/L スクロース；0.1mg/L 1-ナフタレン酢酸（NAA）；および1mg/L 6-ベンジルアミノプリン（BAP）を含むMS培地）上に敷いたフィルター紙と接触させる。ペトリ皿をパラフィルムで密閉し、暗所で2日間インキュベートする。
インキュベーション後、葉ディスクを再生／選択TOM K培地ペトリ皿（TOM培地＋200mg/L セフォタキシムおよび50mg/L ハイグロマイシン）に移す。葉ディスクから生じたカルスを、薄明かり（60～80mE/ms）にて、24℃で18時間点灯と6時間消灯の光周期で、2週間に1回、新鮮TOM-Hyg培地に、芽（小植物体）が切り取り可能となるまで継代培養する。カルスから生じた小植物体を鉗子で取り出し、MS発根培地（200mg/L セフォタキシムおよび50mg/L ハイグロマイシンと共に、3g/L スクロース、7g/L デキストロースを含むMS培地）に継代培養する。50mg/L ハイグロマイシンを含むMS基礎培地上の芽を、同じ照明（およそ60～80mE/ms）にて、24℃で18時間点灯と6時間消灯の光周期でインキュベートして、発根を誘導する。
芽と根の両方を含む小植物体が十分に大きく生育したら（例えば、Magenta（商標）GA-7ボックスの高さの半分を超える）、これらを、生育室内の順化用のJiffyピートペレットに移す。根付いたら、実生をさらなる生育、繁殖および分析のために温室に移す。
実施例4. 改変されたタバコ植物における候補遺伝子の発現の確認
栄養生長期間中、実施例3で産生された改変されたタバコ植物の若葉から、そして、同等条件下で生育させた組換え核酸構築物を欠く対照タバコ植物から、RNAを抽出する。抽出したRNAを使用して、cDNAを生成させる。T0トランスジェニック植物において定量的リアルタイムPCR（qRT-PCR）を使用してNtMYBおよびNtGISの遺伝子発現を定量する（図10および11を参照のこと）。構築物が組換え核酸を発現しているかを確認するために、改変された植物におけるNtMYBおよびNtGISの発現を対照タバコ植物と比較する。
NtMYBおよびNbGISの遺伝子発現を、T1トランスジェニック植物においても定量する。それぞれ、図16および17を参照されたい。
実施例5. 改変されたタバコ植物における毛状突起密度の改変の確認
栄養生長期間中、様々なタバコバックグラウンドからのNtMYB86、NtGISおよびNbGISのトランスジェニック系統の試料を、実体顕微鏡下で調べて（モデル／タイプ）、様々な植物部分における毛状突起密度の変化を対照植物と比較して特定する。結果は、NtMYB86、NtGISまたはNbGISを含むトランスジェニック植物が、葉および茎組織において単位面積当たりの腺毛状突起の数の増加（すなわち、増加した毛状突起密度）を示すことを実証している（図5～7を参照のこと）。
実施例6. 改変されたタバコ植物におけるテルペンレベルの測定
栄養生長期間中、Jiangら（Curr Protoc Plant Biol. 2016;1:345-358）によって概説されるプロトコルに従う定性的代謝プロファイル分析に使用するために、実施例3、4および5からの改変されたタバコ植物から、そして、同等条件下で生育させた組換え核酸構築物を欠く対照タバコ植物から、若葉を収集する。葉試料を液体窒素中で粉砕し、次いで、試料を、ヘプタデカノール（内部標準）を補充した60：40のヘキサン：酢酸エチル（v/v）と混合し、振盪させながら一晩インキュベートする。
溶媒抽出物を、冷却SpeedVac（商標）（ThermoFisher Scientific）中で濃縮し、シリカカラムに装填する。カラムをヘキサンで洗浄し、収集チューブに流し入れる。収集チューブから試料を小分けし、これを代謝物のガスクロマトグラフィー－質量分析（GC-MS）に使用する。
葉の毛状突起から分泌された二次代謝物を特定するために、トランスジェニック系統由来の葉試料1グラムを、小切片にカットし、ヘプタデカノール（内部標準）を補充したヘキサンに浸漬させ、振盪させながら一晩インキュベートする。抽出物を、濾過し、ガスクロマトグラフィー－質量分析（GC-MS）での代謝プロファイルの分析に使用する。図12～15を参照されたい。

Claims (46)

  1. SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも80％同一または類似のアミノ酸配列をコードする核酸配列を含む組換え核酸分子を含む、改変された植物、種子または植物部分であって、該核酸配列が異種プロモーターに機能的に連結されている、前記改変された植物、種子または植物部分。
  2. 前記核酸配列が、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択される配列に対して少なくとも90％同一または類似の配列を含む、請求項1記載の改変された植物、種子または植物部分。
  3. 前記核酸配列が、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される配列に対して少なくとも95％同一である、請求項1記載の改変された植物、種子または植物部分。
  4. 前記核酸配列が、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択される配列に対して少なくとも90％同一または類似のタンパク質をコードする、請求項1記載の改変された植物、種子または植物部分。
  5. 前記核酸配列が、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される、請求項1記載の改変された植物、種子または植物部分。
  6. 前記アミノ酸配列が、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択される、請求項1記載の改変された植物、種子または植物部分。
  7. 前記改変された植物、種子または植物部分が、タバコ植物、タバコ種子またはタバコ植物部分である、請求項1記載の改変された植物、種子またはその部分。
  8. タバコ植物、タバコ種子または植物部分が、熱風乾燥品種（flue-cured variety）、ブライト品種（bright variety）、バーレー品種（Burley variety）、バージニア品種（Virginia variety）、メリーランド品種（Maryland variety）、ダーク品種（dark variety）、ガルパオ品種（Galpao variety）、オリエンタル品種（Oriental variety）、およびトルコ品種（Turkish variety）からなる群より選択されるタバコ品種のものである、請求項7記載の改変された植物、種子またはその部分。
  9. 前記植物が、雄性不稔または細胞質的に雄性不稔である、請求項1記載の改変された植物、種子またはその部分。
  10. 前記改変された植物、種子または植物部分が、***植物、***種子または***植物部分である、請求項1記載の改変された植物、種子またはその部分。
  11. 前記植物または植物部分が、前記組換え核酸分子を欠く対照植物と比較して少なくとも5％増加した量の少なくとも1つのテルペンを含む、請求項1記載の改変された植物、種子または植物部分。
  12. 異種プロモーターが、構成的プロモーター、誘導性プロモーター、および組織優先型（tissue-preferred）または組織特異的プロモーターからなる群より選択される、請求項1記載の改変された植物、種子または植物部分。
  13. 前記改変された植物の少なくとも1枚の葉が、同等条件下で生育させた対照植物の葉と比較して、より大きな平均毛状突起密度を含む、請求項1記載の改変された植物、種子または植物部分。
  14. 前記改変された植物の少なくとも1枚の葉が、同等条件下で生育させた対照植物の葉の背軸面と比較して、葉の背軸面において、より大きな平均毛状突起密度を含む、請求項1記載の改変された植物、種子または植物部分。
  15. 前記改変された植物の少なくとも1枚の葉が、同等条件下で生育させた対照植物の葉の向軸面と比較して、葉の向軸面において、より大きな平均毛状突起密度を含む、請求項1記載の改変された植物、種子または植物部分。
  16. SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも80％同一または類似のアミノ酸配列をコードする核酸配列を含む組換え核酸分子を含む改変されたタバコ植物またはタバコ植物部分由来の乾燥タバコ材料であって、該核酸配列が異種プロモーターに機能的に連結されている、前記乾燥タバコ材料。
  17. 熱風乾燥タバコ材料、空気乾燥タバコ材料、火力乾燥タバコ材料、および天日乾燥タバコ材料からなる群より選択される、請求項16記載の乾燥タバコ材料。
  18. 請求項16記載の乾燥タバコ材料を含む、タバコ製品。
  19. クレテック、ビディシガレット、シガリロ、非通気リセスドフィルター（non-ventilated recess filter）シガレット、通気リセスドフィルター（vented recess filter）シガレット、葉巻、パイプタバコ、葉巻タバコ、シガレットタバコ、噛みタバコ、モイストスナッフ、鼻用スナッフ、ドライスナッフ、スヌース、葉タバコ、水タバコ、刻みタバコ、およびカットタバコからなる群より選択される、請求項18記載のタバコ製品。
  20. 無煙タバコ製品である、請求項19記載のタバコ製品。
  21. 無煙タバコ製品が、ルーズリーフ噛みタバコ、固形噛みタバコ、モイストスナッフ、鼻用スナッフ、ドライスナッフ、およびスヌースからなる群より選択される、請求項20記載のタバコ製品。
  22. 請求項16記載の乾燥タバコ材料を含む、再構成タバコ。
  23. SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも80％同一または類似のアミノ酸配列をコードする核酸配列を含む組換え核酸分子を含む、改変されたタバコ植物、タバコ種子またはタバコ植物部分由来の材料を含むタバコ製品であって、該核酸配列が異種プロモーターに機能的に連結されている、前記タバコ製品。
  24. SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも80％同一または類似のアミノ酸配列をコードする核酸配列を含む組換え核酸分子を含む、改変された***植物、***種子または***植物部分由来の材料を含む***製品であって、該核酸配列が、異種プロモーターに機能的に連結されている、前記***製品。
  25. SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも80％同一または類似のアミノ酸配列をコードする核酸配列を含む組換え核酸分子であって、該核酸配列が異種プロモーターに機能的に連結されている、前記組換え核酸分子。
  26. 前記核酸配列が、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択される配列に対して少なくとも90％同一または類似のタンパク質をコードする、請求項25記載の組換え核酸分子。
  27. 前記核酸配列が、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される配列に対して少なくとも90％同一である、請求項25記載の組換え核酸分子。
  28. 前記核酸配列が、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択される配列に対して少なくとも95％同一または類似のタンパク質をコードする、請求項25記載の組換え核酸分子。
  29. 前記核酸配列が、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される、請求項25記載の組換え核酸分子。
  30. 前記核酸配列が、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるタンパク質をコードする、請求項25記載の組換え核酸分子。
  31. 以下の工程を含む、植物を生産するための方法：
    （a）SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される配列に対して少なくとも80％同一である核酸配列を含む組換え核酸分子を含む少なくとも1つの植物を得る工程であって、該核酸配列が異種プロモーターに機能的に連結されている、工程；
    （b）少なくとも1つの後代種子を生産するために、該少なくとも1つの植物を第2の品種の少なくとも1つの植物と交雑させる工程；ならびに
    （c）工程（b）で生産された該少なくとも1つの後代種子、またはそれから発芽した植物を選択する工程であって、該少なくとも1つの後代種子またはそれから発芽した植物が該組換え核酸分子を含む、工程。
  32. 以下の工程をさらに含む、請求項31記載の方法：
    （f）前記少なくとも1つの後代種子から発芽した植物から植物材料を採取する工程；および
    （g）該採取した植物材料からなるまたはそれに由来する製品を生産する工程。
  33. 前記少なくとも1つの後代種子から生育させた植物が、前記組換え核酸分子を欠く対照植物と比較して少なくとも5％増加した量の少なくとも1つのテルペンをさらに含む、請求項31記載の方法。
  34. 前記少なくとも1つの後代種子から生育させた植物が、前記組換え核酸分子を欠く対照植物と比較して少なくとも10％増加した量の少なくとも1つのテルペンをさらに含む、請求項31記載の方法。
  35. 前記少なくとも1つの植物が、ニコチアナ（Nicotiana）およびカンナビス（Cannabis ）からなる群より選択される属由来である、請求項31記載の方法。
  36. 前記少なくとも1つの植物が、タバコおよび***からなる群より選択される属由来である、請求項31記載の方法。
  37. 前記組換え核酸分子が、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択される配列に対して少なくとも80％同一または類似のタンパク質をコードする核酸配列を含む、請求項31記載の方法。
  38. 前記組換え核酸分子が、SEQ ID NO：13～27および34～36からなる群より選択される配列に対して少なくとも90％同一である核酸配列を含む、請求項31記載の方法。
  39. 前記組換え核酸分子が、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択される配列に対して少なくとも90％同一または類似のタンパク質をコードする核酸配列を含む、請求項31記載の方法。
  40. 前記組換え核酸分子が、SEQ ID NO：13～27および34～36からなる群より選択される核酸配列を含む、請求項31記載の方法。
  41. 前記組換え核酸分子が、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるタンパク質をコードする核酸配列を含む、請求項31記載の方法。
  42. 以下の工程を含む、改変された植物を作製する方法：
    （a）SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される配列に対して少なくとも80％同一である核酸配列を含む組換え核酸分子を、少なくとも1つの植物細胞に導入する工程であって、該核酸配列が異種プロモーターに機能的に連結されている、工程；
    （b）工程（a）から少なくとも1つの植物細胞を選択する工程であって、該少なくとも1つの植物細胞が該組換え核酸分子を含む、工程；ならびに
    （c）工程（b）で選択された少なくとも1つの植物細胞から、改変された植物を再生させる工程。
  43. 改変されたタバコ植物またはそれに由来する部分由来の乾燥タバコ材料を使用してタバコ製品を調製する工程を含み、該改変されたタバコ植物またはそれに由来する部分が、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される配列に対して少なくとも80％同一である核酸配列を含む組換え核酸分子を少なくとも1つの植物細胞に含み、該核酸配列が異種プロモーターに機能的に連結されている、方法。
  44. 改変された***植物またはそれに由来する部分由来の材料を使用して***製品を調製する工程を含み、該改変された***植物またはそれに由来する部分が、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される配列に対して少なくとも80％同一である核酸配列を含む組換え核酸分子を少なくとも1つの植物細胞に含み、該核酸配列が異種プロモーターに機能的に連結されている、方法。
  45. 植物細胞を、少なくとも1つの植物細胞に対する組換え核酸分子で形質転換する工程を含み、該組換え核酸分子が、SEQ ID NO：13～17、23～30および34～36からなる群より選択される配列に対して少なくとも80％同一である核酸配列を含み、該核酸配列が異種プロモーターに機能的に連結されている、方法。
  46. 以下の工程を含む、毛状突起密度が増加した植物を生産するための方法：
    （a）少なくとも1つの植物細胞に、ポリヌクレオチドに機能的に連結されている異種プロモーターを含む組換え核酸を提供する工程であって、該ポリヌクレオチドが、SEQ ID NO：18～22および31～33からなる群より選択されるアミノ酸配列に対して少なくとも80％同一または類似のアミノ酸配列をコードする、工程；ならびに
    （b）工程（a）の少なくとも1つの植物細胞から、改変された植物を再生させる工程であって、該改変された植物が、同等条件下で生育させたときの組換え核酸を欠く対照植物由来の葉と比較して、少なくとも1枚の葉において、増加した毛状突起密度を含む、工程。
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