JP2024059699A - Ｉａｐアンタゴニスト及び抗ｐｄ－１分子による併用抗癌療法 - Google Patents

Abstract

【課題】癌治療の効能を増強させるために又は癌患者をそのような癌治療に適格にするために併用療法を改善する必要性が今もなおある。【解決手段】抗ＰＤ－１分子によるその後の治療が抗癌応答をもたらす可能性を増強させるために又は抗ＰＤ－１分子によるその後の治療に対する対象の癌の応答性を増強させるために、癌と診断されたヒト対象を前治療するためのＩＡＰアンタゴニストの使用が開示される。ＩＡＰアンタゴニストによる対象の前治療及び抗ＰＤ－１分子による対象のその後の治療を含む、対象の癌の治療のための方法もまた、包含される。【選択図】なし

Description

発明の分野
本発明は、抗ＰＤ－１分子による対象の治療の前に対象の癌の微小環境の免疫原性を増強させるためのＩＡＰアンタゴニストの使用に関する。

発明の背景
多くの癌のタイプには、外因性又は内因性の細胞死経路の構成要素が遺伝子改変されている症例が含まれる。これには、FAS-associated via death domain（ＦＡＤＤ）若しくはアポトーシスタンパク質阻害剤（ＩＡＰ）の過剰発現又は機能的カスパーゼの発現の欠如を含むことができる。結果として、癌の特徴である細胞死抵抗性となり得る。Hoadley et al. (2014) Cell 158: 929-44；The Cancer Genome Atlas Network (2015) Nat 517: 576-82；Eytan et al. (2016) Cancer Res 76: 5442-54；Hanahan and Weinberg (2011) Cell 144: 646-74。

外因性及び内因性の死経路についての簡潔な説明は、Derakhshan et al. (2017) Clin Cancer Res 23: 1379-87において見つけられる。手短かに言えば、外因性の経路は、細胞表面受容体で始まる。外因性の経路は、Ｆａｓリガンド（ＦａｓＬ）、ＴＮＦα、又はＴＲＡＩＬなどのような死リガンドの、細胞外側のそれらのそれぞれの受容体（すなわちＦａｓ、ＴＮＦＲ１、ＴＲＡＩＬＲ１／ＤＲ４、ＴＲＡＩＬ２／ＤＲ５）への結合によって起こされる。結果として、ＦＡＤＤは、細胞内側の受容体に結合し、プロカスパーゼ８は、受容体結合ＦＡＤＤに結合して、death-inducing signaling complex（ＤＩＳＣ）を構成する。これに、カスパーゼ８、次いでカスパーゼ３の活性化が続き、アポトーシスに至る。外因性の経路はまた、ＦＡＤＤ、ＲＩＰキナーゼ、及びmixed lineage kinase domain-like protein（ＭＬＫＬ）を伴う、ネクロトーシスによる死をも引き起こし得る。

内因性の経路は、シトクロムｃ及び第２ミトコンドリア由来カスパーゼ活性化因子（second mitochondria-derived activator of caspases、ＳＭＡＣ）などのようなアポトーシス促進タンパク質の細胞質への放出をもたらすミトコンドリアに対する攻撃から始まる。シトクロムｃは、アポトーシスプロテアーゼ活性化因子（ＡＰＡＦ１）に結合し、アポトソーム複合体を形成する。この複合体は、プロカスパーゼ９に結合し、プロカスパーゼ９は活性化され、次にプロカスパーゼ３を活性化する。ＳＭＡＣは、cellular IAP1（ｃＩＡＰ１）、cellular IAP2（ｃＩＡＰ２）、及びX-linked IAP（ＸＩＡＰ）を含むＩＡＰファミリータンパク質に結合し、その分解又は阻害を引き起こす。

ＩＡＰは、１から３個のバキュロウイルスＩＡＰリピート（ＢＩＲ）ドメインの存在によって定義されるタンパク質である。ヒト細胞は、８つの異なるＩＡＰを発現し、このうちＸＩＡＰ、ｃＩＡＰ１、及びｃＩＡＰ２は、カスパーゼ誘発性のアポトーシス及びＲＩＰキナーゼ媒介性のネクロトーシスを阻害することが示された。Salvesen and Duckett (2002) Nat Rev Mol Cell Biol 3: 401-10。後者のＩＡＰのうち、ＸＩＡＰだけが、カスパーゼに直接結合し、それらの機能を阻害することができる。Derakhshan et al. (Clin Cancer Res. 2017 Mar 15;23(6):1379-1387. doi: 10.1158/1078-0432.CCR-16-2172. Epub 2016 Dec 30)。ｃＩＡＰ１、ｃＩＡＰ２、及びＸＩＡＰは、Ｅ３ユビキチンリガーゼ活性を有するいわゆるＲＩＮＧドメインを含有する。ｃＩＡＰ１及びｃＩＡＰ２の抗アポトーシス効果は、それらのユビキチンリガーゼ活性によって媒介される。

ＳＭＡＣは、そのアミノ末端にペプチド配列Ａｌａ－Ｖａｌ－Ｐｒｏ－Ｉｌｅ（ＡＶＰＩ）を含有する二量体タンパク質であり、この配列は、ＩＡＰのＢＩＲドメインへのこのタンパク質の結合を媒介している。後者のペプチド配列を模倣し、それによってＸＩＡＰ、ｃＩＡＰ１、及びｃＩＡＰ２に結合するＳＭＡＣの能力を再現するペプチドミメティックが開発された（本明細書において「ＳＭＡＣミメティック」と呼ばれる）。ＳＭＡＣミメティックは、ＸＩＡＰがカスパーゼと相互作用するのを妨げる。ｃＩＡＰ１及びｃＩＡＰ２に関しては、ＳＭＡＣミメティックは、ＩＡＰのＥ３ユビキチンリガーゼ活性を活性化し、それらの自己ユビキチン化及びプロテアソーム分解による排除を引き起こす。

アポトーシスに対するＩＡＰの阻害効果に加えて、ＩＡＰはまた、炎症、免疫、細胞遊走、及び細胞生存にとって重要な遺伝子の発現を駆動するＮＦ－κＢ転写因子の活性化を調節するユビキチン依存性シグナル伝達現象などのような、多くの他の細胞プロセスにも影響を及ぼす。Gyrd-Hansen and Meier (2010) Nat Rev Cancer 10: 561-74。cellular IAPは、ＮＦ－κＢ活性化の古典的経路において決定的な意味を持つ。Derakhshan et al. (2017)。ＴＮＦＲ１へのＴＮＦαの結合は、TNF receptor 1-associated via death domain（ＴＲＡＤＤ）及びＴＮＦ受容体関連因子２（ＴＲＡＦ２）のＴＮＦＲ１への動員をもたらす。ＲＩＰ１及びｃＩＡＰ１／２は、次いで、その活性複合体に動員される。ＲＩＰ１のcellular IAP媒介性のユビキチン化は、最終的に、ＮＦ－κＢ阻害剤キナーゼＩＫＫβのリン酸化をもたらし、これにより、阻害性ＮＦ－ｋＢサブユニットＩｋβがリン酸化される。Ｉｋβは、次いで、分解され、ＮＦ－ｋＢサブユニットｐ５０及びＲＥＬＡを遊離し、これらは組み合わさって、活性転写因子ＮＦ－κＢを形成する。ＴＮＦＲ１のこの関与は、そのアポトーシス又はネクロトーシスシグナル伝達を妨げる。ＮＦ－κＢシグナル伝達経路のＩＡＰ依存性の調節は、免疫系の機能に多大な影響を有し、自然免疫及び適応免疫の両方に影響を与える。Beug et al. (2012) Trends Immunol 33: 535-45。このように、ＩＡＰは、抗原提示細胞、リンパ球、及びナチュラルキラー細胞を含む抗腫瘍免疫応答に関係があるいくつかの免疫細胞型の機能を調節することが実証されてきた。

cellular IAPはまた、ＮＦ－κＢ誘発性キナーゼＮＩＫのユビキチン化を担い、そのプロテアソーム分解をもたらす。Derakhshan et al. (2017)。ＩＡＰの非存在下において、すなわち、ＳＭＡＣミメティックなどのようなＩＡＰアンタゴニストの存在下において、ＮＩＫは、蓄積して、ＩＫＫαをリン酸化し、これは、不活性なＮＦ－κＢサブユニットｐ１００をリン酸化する。このサブユニットは、切断されて活性サブユニットｐ５２になり、これは、ＲＥＬＢと組み合わさって、活性なＮＦ－ｋＢ転写因子を形成する。ＮＦ－ｋＢのこの非古典的活性化は、サイトカイン産生による自然免疫及び適応免疫の調整に必要不可欠である。Chesi et al. (2016) Nat Med, 22:1411-20及びその中で引用される参考文献。ＩＡＰ阻害剤ＬＢＷ２４２は、初代Ｔ細胞受容体刺激の状況下でＴ細胞の増殖及び共刺激を誘発することによって抗腫瘍免疫応答を増加させ、Ｔ細胞活性化の増加及び予防癌ワクチンモデルにおける効能の増強をもたらすことが示された。Dougan et al. (2010) J Exp Med 207: 2195-206。ＩＡＰ阻害剤ＢＶ６及びビリナパントは、たとえば、樹状細胞成熟を誘発することによって又は腫瘍促進性の（pro-tumoral）ＩＩ型マクロファージを炎症促進性のＩ型マクロファージに変換することによって抗原提示細胞の機能を調整することが示された。Muller-Sienerth et al. (2011) PLoS One 6: e21556；Knights et al. (2013) Cancer Immunol Immunother 62: 321-35；Lecis et al. (2013) Cell Death Dis 4: e920。そのうえ、ＩＡＰ阻害は、ナチュラルキラー細胞媒介性の又はＴ細胞媒介性のエフェクター機構であるグランザイムＢ及びパーフォリンに対する腫瘍細胞の感受性を増加させる。Brinkmann et al. (2014) Leuk Lymphoma 55: 645-51；Nachmias et al. (2007) Eur J Immunol 37: 3467-76。そのうえ、ＩＡＰ阻害剤はまた、免疫細胞上の免疫チェックポイント分子の発現を調整することによって、免疫系の調節に寄与し得る。Knights et al. (2013)；Pinzon-Ortiz et al. (2016) Cancer Res 76 (14 Suppl): abstract 2343。ＩＡＰの非存在下において、すなわち、ＳＭＡＣミメティックなどのようなＩＡＰアンタゴニストの存在下において、ＴＮＦＲ１は、もはや古典的ＮＦ－ｋＢ活性化に関与せず、細胞をＴＮＦα媒介性のアポトーシスの影響を受けやすくすることが注目される。

典型的に、腫瘍細胞の免疫破壊は、非効率的である。今のところ、これは、癌患者が、腫瘍を破壊することができるＴ細胞を大量には貯蔵していないから及び／又は適応免疫及び自然免疫系の細胞が抑制されているから又はそれらの活性化若しくはそれらのエフェクター機能を阻害する経路によって中和されているからであると思われる。この抑制において手段となっているのは、いわゆる免疫チェックポイント分子である。いくつかのそのようなチェックポイント分子が、過去２０年にわたって同定された。このタイプのプロトタイプとなる分子は、細胞傷害性Ｔリンパ球抗原４（ＣＴＬＡ－４）である。この分子の遮断は、マウスモデルにおいて腫瘍縮小をもたらすことがわかった。Leach et al. (1996) Science 271: 1734-36。ＣＴＬＡ－４は、活性化Ｔ細胞、主にＣＤ４細胞に発現し、マスターＴ細胞共刺激分子ＣＤ２８の活性に干渉することによって、Ｔ細胞応答を制限する。ＣＴＬＡ－４及びＣＤ２８は、リガンドＣＤ８０及びＣＤ８６を共有し、それによって、ＣＴＬＡ－４は、後者のリガンドに対するそのより高い親和性によりＣＤ２８にまさる。Linsley et al. (1994) Immunity 1: 793-801。

ＣＴＬＡ－４のように、免疫チェックポイント分子ＰＤ－１は、活性化Ｔ細胞上に発現される。Parry et al. (2005) Mol Cell Biol 25: 9543-53。それはまた、ホスファターゼＳＨＰ２及びＰＰ２Ａをも活性化する。ＰＤ－１の関与は、ＴＣＲ媒介性のエフェクター機能に直接干渉し、Ｔ細胞遊走を増加させると考えられる。チェックポイント分子は、主として腫瘍微小環境においてその機能を発揮すると考えられるのに対して、ＣＴＬＡ－４は、主として二次リンパ組織において作用する。Wing et al. (2008) Science 322: 271-5；Peggs et al. (2009) J Exp Med 206: 1717-1725。ＰＤ－１の２つの既知のリガンドは、ＰＤ－Ｌ１及びＰＤ－Ｌ２である。Dong et al. (1999) Nat Med 5: 1365-9；Latchman et al. (2001) Nat Immunol 261-8；Tseng et al. (2001) J Exp Med 193: 839-46。リガンド分子は相同性を共有するが、多様に調節される。ＰＤ－Ｌ１は、ＩＦＮγ（活性化されたＴ細胞及びナチュラルキラー細胞によって産生される）によって、活性化された造血細胞及び上皮細胞において誘発される。ＰＤ－Ｌ２は、活性化樹状細胞及びいくつかのマクロファージにおいて誘発されることがわかっている。誘発は、主にＩＬ－４によるものであり得る。ＰＤ－１ノックアウトマウスは、遅発性の器官特異的炎症を呈する。Nishimura et al. (1999) Immunity 11: 141-51；Science 291: 319-22 (2001)。この表現型は、ＣＴＬＡ－４ノックアウトマウスにおいて観察されるものよりもはるかに重症ではない。同様に、抗ＰＤ－１療法の臨床上の免疫に関係する効果は、抗ＣＴＬＡ－４療法に関連するものよりもゆるやかな傾向がある。ＰＤ－Ｌ１は、多くの固形腫瘍において発現され、ＰＤ－Ｌ２は、Ｂ細胞リンパ腫のある種のサブセットにおいて発現される。ＰＤ－１は、腫瘍浸潤リンパ球において高度に発現される。Dong et al. (2002) Nat Med 8: 793-800；Ansell et al. (2015) N Engl J Med 372: 311-9；Amadzadeh et al. (2009) Blood 114: 1537-44；Sfanos et al. (2009) Prostate 69: 1694-1703。

抗ＰＤ－１療法の第１のヒト臨床試験は、Bristol-Myers Squibb/Ono Pharmaceuticalsの完全ヒトＩｇＧ４抗体であるモノクローナル抗体ニボルマブを用いた。最先端の治療をした難治性ＮＳＣＬＣについて１７％、ＲＣＣについて２０％、及び黒色腫について３１％の客観的奏効率が、立証された。これらの応答の多くは、長く続いた。全生存期間は、それぞれ９．９、２２．４、及び１６．８か月であった。Topalian et al. (2012) N Engl J Med 366: 2443-54；J Clin Oncol 32: 1020-30 (2014)。現在までのところ、ニボルマブは、切除不能又は転移性黒色腫の、腎癌（ＲＣＣ）、転移性又は再発性頭頸部扁平上皮癌（ＳＣＣＨＮ）、転移性非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）、及びホジキンリンパ腫についての治療について米国、日本、及び欧州において承認されている。Iwai et al. (2017) J Biomed Science 24: 36；Balar and Weber (2017) Cancer Immunol Immunother 66: 551-64。尿路上皮癌についてのＦＤＡの承認もまた、得られている。Merckのヒト化ＩｇＧ４抗体、モノクローナル抗ＰＤ－１抗体ペンブロリズマブもまた、転移性黒色腫、転移性ＮＳＣＬＣ（米国、日本、及び欧州）、並びに頭頸部癌及び原発部位がわからない高頻度マイクロサテライト不安定性（ＭＳＩ）腫瘍（microsatellite instability (MSI) high tumors from agnostic primary site）（米国）について承認されている。Roche/GenentechのＩｇＧ１タイプの別の抗体、アテゾリズマブは、リガンドＰＤ－Ｌ１を阻害する。アテゾリズマブは、尿路上皮癌（膀胱癌）及び転移性ＮＳＣＬＣについてＦＤＡの承認を得た。２つのさらなるＰＤ－Ｌ１抗体が、最近市場に現われた。デュルバルマブは、局所的に進行した又は転移性尿路上皮癌についてＦＤＡにより承認されている、Medimmune/AstraZenecaのヒトＩｇＧ１ｋ抗体である。アベルマブは、転移性メルケル細胞癌及び尿路上皮／膀胱癌の治療についてＦＤＡによって承認されているMerck Serono/PfizerのヒトＩｇＧ１抗体である。ＰＤ－１に対して特異的なさらなる分子は、治験を通して進展している。これらには、Novartisのヒト化ＩｇＧ４抗体ＰＤＲ００１、Innovent Biologicsのモノクローナル抗体ＩＢＩ－３０８、Regeneronの完全ヒト化モノクローナル抗体セミプリマブ（ＲＥＧＮ－２８１０）、Jiangsu Hengrui Medicineのヒト化ＩｇＧ４モノクローナル抗体カムレリズマブ（ＳＨＲ－１２１０）、BeiGeneのＢＧＢ－Ａ３１７モノクローナルヒト化抗体、Biocadのモノクローナル抗体ＢＣＤ－１００、Shanghai Junshi Biosciencesのヒト化ＩｇＧ４Ｋ組換え抗体ＪＳ－００１、Johnson & JohnsonのＪＮＪ－３２８３（ＪＮＪ－６３７２３２８３）モノクローナル抗体、Amplimmune（現在Medimmune［AstraZenec］）のモノクローナル抗体ＡＭＰ－５１４（現在「ＭＥＤＩ０６８０」と呼ばれている）、AgenusによるＡＧＥＮ－２０３４、AnaptysBio and Tesaroのヒト化モノクローナル抗体ＴＳＲ－０４２、Symphogenのヒト化モノクローナル抗体Ｓｙｍ－０２１、PfizerのＰＦ－０６８０１５９１抗体、Macrogenicsの二重特異性四価ヒト化ＤＡＲＴ（dual-affinity re-targeting）分子ＭＧＤ－０１３、MacrogenicsのＭＧＡ－０１２ヒト化モノクローナル抗体、Livzon Pharmaceuticalの組換えヒト化抗体ＬＺＭ－００９、Gloria Pharmaceuticalsのヒト組換え体モノクローナル抗体ＧＬＳ－０１０（ＡＢ－１２２）、Walvax BiotechnologyのＩｇＧ４ヒト化モノクローナル抗体ゲノリムズマブ（genolimzumab）（ＣＢＴ－５０１）、Boehringer Ingelheimのモノクローナル抗体ＢＩ ７５４０９１、及びAkeso Biopharmaの二重特異性モノクローナル抗体ＡＫ－１０４が含まれる。ＰＤ－Ｌ１に対して特異的なさらなる分子もまた、治験を通して進展している。これらには、CytomX Therapeuticsのモノクローナル抗体ＣＸ－０７２、CStone Pharmaceuticalsの完全ヒト化組換えＩｇＧモノクローナル抗体ＷＢＰ３１５５（ＣＳ－１００１）、Atridiaのヒト化ＩｇＧ４モノクローナル抗体ＳＨＲ－１３１６、Bristol-Myers SquibbのＰＤ－Ｌ１阻害剤ミラモレキュール（millamolecule）、Bristol-Myers SquibbのヒトＩｇＧ４抗体ＢＭＳ－９３６５５９（ＭＤＸ１１０５）、Merck KGaAのＰＤ－Ｌ１モノクローナル抗体及びＴＧＦβを標的にする二機能融合タンパク質Ｍ－７８２４（ＭＳＢ００１１３５９Ｃ）、Eli Lillyのモノクローナル抗体ＬＹ－３３０００５４、Alphamabのナノボディ（nanobody）ＫＮ－０３５、Novartisのモノクローナル抗体ＦＡＺ－０５３、TG TherapeuticsのＩｇＧ１抗体ＣＫ－３０１、Aurigene DiscoveryのＰＤ－Ｌ１及びＴ細胞活性化のＶドメインＩｇサプレッサー（V-domain Ig suppressor of T cell activation）（ＶＩＳＴＡ）を標的にする経口小分子ＣＡ－１７０が含まれる。２０１５年の時点で、抗ＰＤ－１／ＰＤ－Ｌ１療法についての客観的奏効率は、黒色腫について１７から４０％、肺癌について１０から３０％、腎臓癌について１２から２９％、膀胱癌について２５％、卵巣癌について６から２３％、頭頸部癌について１４から２０％、胃癌について２２％、結腸直腸癌について２４％、トリプルネガティブ乳癌について１８％、中皮腫についての２４％、及びホジキンリンパ腫について８７％であることが報告された。Lejeune (2015) Melanoma Res 25: 373-375。ニボルマブ、ペンブロリズマブ、アテゾリズマブ、及びデュルバルマブの奏効率のより最近の更新については、Balar and Weber (2017)及びIwai et al. (2017)を参照されたい。

上記に挙げられるデータが示すように、抗ＰＤ－１／ＰＤ－Ｌ１療法は、大多数の患者において印象的な客観的奏効をもたらしていない。免疫調節薬（たとえば共刺激分子のアクチベーター又は免疫チェックポイント分子の阻害剤）を、ＩＡＰ阻害剤、ＴＯＲキナーゼ阻害剤、ＨＤＭ２リガーゼ阻害剤、ＰＩＭキナーゼ阻害剤、ＨＥＲ３キナーゼ阻害剤、ヒストンデアセチラーゼ（ＨＤＡＣ）阻害剤、Ｊａｎｕｓキナーゼ阻害剤、ＦＧＦ受容体阻害剤、ＥＧＦ受容体阻害剤、ｃ－ＭＥＴ阻害剤、ＡＬＫ阻害剤、ＣＤＫ４／６阻害剤、ＰＩ３Ｋ阻害剤、ＢＲＡＦ阻害剤、ＣＡＲ Ｔ細胞（たとえばＣＤ１９を標的にするＣＡＲ Ｔ細胞）、ＭＥＫ阻害剤、又はＢＣＲ－ＡＢＬ阻害剤（国際公開第２０１６／０５４５５５号）などのような第２の作用物質と組み合わせることによる多くの併用療法が、提唱された。最近の報告は、ＩＡＰ阻害剤が、免疫適格マウス同系癌モデルにおいて免疫チェックポイント阻害剤である抗ＰＤ－１の効果を増強させることを示し、ＩＡＰ阻害剤が、癌の治療のための免疫療法との併用に好適な候補となることを示した。Chesi et al. (2016)；Pinzon-Ortiz et al. (2016)；Beug et al. (2017) Nat Commun. Feb 15; 8. doi: 10.1038/ncomms14278。

同様に、ＩＡＰアンタゴニストの投与による癌の治療が、提唱されてきたが、そのようなＩＡＰアンタゴニスト単独の投与は、ある種の癌を治療するのに不十分であるように思われる。免疫賦活性剤又は免疫調節剤とＳＭＡＣミメティック化合物を併用する考え方は、癌の治療においてＳＭＡＣミメティックの効能を増強させる目的で提唱されてきた（国際公開第２０１７／１４３４４９号）。

アベルマブと組み合わせたＤｅｂｉｏ １１４３（ClinicalTrials.gov識別名：ＮＣＴ０３２７０１７６）、ペンブロリズマブと組み合わせたビリナパント（ClinicalTrials.gov識別名：ＮＣＴ０２５８７９６２）、及びＰＤＲ００１と組み合わせたＬＣＬ－１６１（ClinicalTrials.gov識別名：ＮＣＴ０２８９００６９）を含む治験は、現在進行中である。さらに、Bo (2017) 「Role of Smac in Lung Carcinogenesis and Therapy」doi: 10.1371/journal.pone.0107165は、Ｄｅｂｉｏ１１４３及び抗ＰＤ－１抗体の同時の投与を開示する。しかしながら、先行技術において提供される治療法のどれも、本明細書において記載される導入療法の使用を開示していない。

癌治療の効能を増強させるために又は癌患者をそのような癌治療に適格にするために併用療法を改善する必要性が今もなおある。

発明の概要
本発明者らは、患者の腫瘍微小環境の免疫原性を増強させるために腫瘍を有する患者をＳＭＡＣミメティックなどのようなＩＡＰアンタゴニストにより前治療することができることを提唱する。前治療は、腫瘍に対する免疫応答を引き起こすための抗ＰＤ－１分子による治療の有効性を増強させる。

したがって、一態様では、本発明は、ヒト対象において癌を治療するための方法であって、（ｉ）導入期の間にＩＡＰアンタゴニストを投与すること、これに続いて（ｉｉ）導入期の終了後に抗ＰＤ－１分子を投与することを含む方法を提供する。

別の態様では、本発明は、ヒト対象において癌を治療するための方法において使用するためのＩＡＰアンタゴニストであって、方法は、（ｉ）導入期の間にＩＡＰアンタゴニストを投与すること、これに続いて（ｉｉ）導入期の終了後に抗ＰＤ－１分子を投与することを含むＩＡＰアンタゴニストを提供する。

さらなる態様では、本発明は、ヒト対象において癌を治療するための方法において使用するための抗ＰＤ－１分子であって、方法は、（ｉ）導入期の間にＩＡＰアンタゴニストを投与すること、これに続いて（ｉｉ）導入期の終了後に抗ＰＤ－１分子を投与することを含む抗ＰＤ－１分子を提供する。

別の態様では、本発明は、ヒト対象において癌を治療するための方法において使用するためのＩＡＰアンタゴニスト及び抗ＰＤ－１分子であって、方法は、（ｉ）導入期の間にＩＡＰアンタゴニストを投与すること、これに続いて（ｉｉ）導入期の終了後に抗ＰＤ－１分子を投与することを含むＩＡＰアンタゴニスト及び抗ＰＤ－１分子を提供する。

下記に記載される本開示、実施形態、及び態様は、上記の態様のいずれか１つに適用可能である。

ＩＡＰアンタゴニストによる前治療は、抗ＰＤ－１分子との同時の投与にまさる、いくつかの異なる利点を有することが期待される。前治療は、腫瘍微小環境を改変し、抗ＰＤ－１分子がまさに最初に投与される前に、腫瘍を抗ＰＤ－１分子に対して感受性にする。これは、ＩＡＰアンタゴニスト及び抗ＰＤ－１分子による同時治療と比較した場合、抗ＰＤ－１分子治療の効能を増加させ得る。前治療はまた、抗ＰＤ－１分子治療に関係する応答を観察するために必要とされる時間をも低下させ得る。抗ＰＤ－１分子の有効性が、前治療によって増加し得るので、患者は、より短い期間にわたって、より少ない抗ＰＤ－１分子を投与される必要があるだけになり得る。

したがって、本開示は、抗ＰＤ－１分子によるその後の治療が抗癌応答をもたらす可能性を増強させるために、癌と診断された対象を前治療するためのＩＡＰアンタゴニスト（の使用）からなる導入療法に関する。そのうえ又はその代わりに、ＩＡＰアンタゴニストの使用、すなわち導入療法は、抗ＰＤ－１分子によるその後の治療に対する対象の癌の応答性を増強させることが意図される。出願人らは理論によって束縛されることを望まないが、ＩＡＰアンタゴニストの効果の増強は、おそらく、対象の腫瘍微小環境の免疫原性を増加させるこの分子の能力によるものであろう。

特定の実施形態では、癌に罹患している対象は、１から４８日間、好ましくは１から２８日間、より好ましくは５から２８日間の導入期又は前治療期の間に、ＩＡＰアンタゴニストにより前治療され、これに続いてその後の抗ＰＤ－１分子治療が開始される。当然、これは、抗ＰＤ－１分子が導入期の間に投与されないことを意味する。導入期は、ＩＡＰアンタゴニストが投与されない１又はそれ以上の日（オフ日）を含んでいてもよい。たとえば、導入期の間のＩＡＰアンタゴニストの最後の投与と抗ＰＤ－１分子の第１の投与との間に、１又はそれ以上のオフ日があってもよい。ＩＡＰアンタゴニストが使用され、毎日投与される場合、導入期は、ＩＡＰアンタゴニストが投与されない１又はそれ以上の日を含んでいてもよい。

原則として、任意のＩＡＰアンタゴニストを、導入療法において使用することができる。しかしながら、好ましいＩＡＰアンタゴニストは、Ｄｅｂｉｏ １１４３、ＧＤＣ－９１７／ＣＵＤＣ－４２７、ＬＣＬ１６１、ＧＤＣ－０１５２、ＴＬ－３２７１１／ビリナパント、ＨＧＳ－１０２９／ＡＥＧ－４０８２６、ＢＩ ８９１０６５、ＡＳＴＸ－６６０、及びＡＰＧ－１３８７を含む。好ましくは、ＩＡＰアンタゴニストは、ＳＭＡＣミメティックであり、最も好ましいＩＡＰアンタゴニストは、Ｄｅｂｉｏ １１４３である。

導入期において、様々な用量及びスケジュールが、選択されるＩＡＰアンタゴニストについて使用される。選ばれる用量及びスケジュールは、癌のタイプ、患者の特徴、及び対象が受け得る他の療法などのような様々な因子に依存していてもよく、臨床医の判断及び経験に従ってもよい。たとえば、経口的に毎週１回５００ｍｇ、経口的に毎週１回１２００ｍｇ、経口的に毎週１回１５００ｍｇ、経口的に毎週１回１８００ｍｇを含む毎週１回５００から１８００ｍｇの間の経口用量が、ＬＣＬ－１６１について使用されてもよい。ビリナパントは、２８日間のサイクルのうち１、８、及び１５日目に（２から７、９から１４、及び１６から２８日目はビリナパントオフ日とする）１３から４７ｍｇ／ｍ^２の間の、たとえば４７ｍｇ／ｍ^２の又は４週間のうち３週間、毎週２回１３ｍｇ／ｍ^２の用量で使用されてもよい。Ｄｅｂｉｏ １１４３は、約１００から約１０００ｍｇ、好ましくは約１００から約５００ｍｇ、最も好ましくは約１００から約２５０ｍｇの１日量で、２８日以下の期間に毎日又は５から１４日の間の連続投与、これに続く１６から５日間のＤｅｂｉｏ １１４３オフ日、２１日毎に５日間の連続投与、２１日毎に１４日間の連続投与、若しくは１４日毎に７から１０日間の連続投与を含むサイクルで、経口的に投与される。

別の実施形態では、癌患者は、抗ＰＤ－１分子治療の前だけでなく、それと同時にＩＡＰアンタゴニストが投与される。ＩＡＰアンタゴニスト治療は、抗ＰＤ－１分子が投与される全期間の間に継続させることができる。その代わりに、ＩＡＰアンタゴニストの同時投与は、抗ＰＤ－１分子治療の完了の前に終了させることができる又はＩＡＰアンタゴニストの投与は、抗ＰＤ－１分子治療の完了以降、継続させることができる。

導入療法、すなわち、抗ＰＤ－１分子による治療の前に癌患者を前治療するためのＩＡＰアンタゴニストの使用は、患者が罹患している癌種によって制限されない。特定の実施形態では、癌は、かなりの割合の治療患者において抗ＰＤ－１分子による治療に対して応答性であることが知られている種類のものである。これは、治療のために選択される抗ＰＤ－１分子が認可されている又は推奨されている癌の種類を含むが、これらに限定されない。その特定の実施形態では、癌は、頭頸部癌、黒色腫、尿路上皮癌、非小細胞肺癌、原発部位がわからない高頻度マイクロサテライト不安定性（ＭＳＩ）腫瘍、又は腎臓癌である。いくつかの実施形態では、癌は、抗ＰＤ－１分子による治療に対する応答者の割合が、１０％以上、好ましくは２０％以上、より好ましくは３０％以上である癌である。別の実施形態では、癌は、抗ＰＤ－１分子による治療に応答することが示された患者のパーセンテージが低く（たとえば５％以下）且つ本発明による導入療法が、奏効率を改善すると思われる種類のものである。これは、治療のために選択される抗ＰＤ－１分子が（まだ）認可されていない又は推奨されていない癌の種類を含むが、これらに限定されない。その特定の実施形態では、癌は、膵癌、結腸直腸癌、多発性骨髄腫、小細胞肺癌、肝臓がん、又は卵巣癌である。

原則として、任意のＩＡＰアンタゴニストを、使用することができる。しかしながら、好ましいＩＡＰアンタゴニストは、Ｄｅｂｉｏ １１４３、ＧＤＣ－９１７／ＣＵＤＣ－４２７、ＬＣＬ１６１、ＧＤＣ－０１５２、ＴＬ－３２７１１／ビリナパント、ＨＧＳ－１０２９／ＡＥＧ－４０８２６、ＢＩ ８９１０６５、ＡＳＴＸ－６６０、及びＡＰＧ－１３８７を含む。好ましくは、ＩＡＰアンタゴニストは、ＳＭＡＣミメティックであり、最も好ましいＩＡＰアンタゴニストは、Ｄｅｂｉｏ １１４３である。

ＩＡＰアンタゴニストが抗ＰＤ－１分子治療の間に継続される場合、導入期と同じ又は異なる、好ましくは同じＩＡＰアンタゴニストが、使用されてもよい。ＩＡＰアンタゴニストの好ましい例は、Ｄｅｂｉｏ １１４３、ＧＤＣ－９１７／ＣＵＤＣ－４２７、ＬＣＬ１６１、ＧＤＣ－０１５２、ＴＬ－３２７１１／ビリナパント、ＨＧＳ－１０２９／ＡＥＧ－４０８２６、ＢＩ ８９１０６５、ＡＳＴＸ－６６０、及びＡＰＧ－１３８７を含む。好ましくは、ＩＡＰアンタゴニストは、ＳＭＡＣミメティックであり、最も好ましいＩＡＰアンタゴニストは、Ｄｅｂｉｏ １１４３である。用量及びスケジュール（サイクル）もまた、臨床医の判断及び経験に従って、導入期と同じであってもよい又は異なっていてもよい。症状の悪化がない、ＲＥＣＩＳＴ／ｉＲＥＣＩＳＴガイドラインによって客観的に評価されるように疾患進行がない、及び容認できない毒性がないといった臨床上の有益性が観察される限り又は治療のアプローチの変更が臨床上必要になるまで、サイクルは、反復されてもよい。

導入期の後に投与される抗ＰＤ－１分子は、任意の抗ＰＤ－１分子とすることができる。使用することができる特定の抗ＰＤ－１分子は、ニボルマブ、ペンブロリズマブ、アテゾリズマブ、デュルバルマブ、アベルマブ、ＰＤＲ００１、ＩＢＩ－３０８、セミプリマブ、カムレリズマブ、ＢＧＢ－Ａ３１７、ＢＣＤ－１００、ＪＳ－００１、ＪＮＪ－３２８３、ＭＥＤＩ０６８０、ＡＧＥＮ－２０３４、ＴＳＲ－０４２、Ｓｙｍ－０２１、ＰＦ－０６８０１５９１、ＭＧＤ－０１３、ＭＧＡ－０１２、ＬＺＭ－００９、ＧＬＳ－０１０、ゲノリムズマブ、ＢＩ ７５４０９１、ＡＫ－１０４、ＣＸ－０７２、ＷＢＰ３１５５、ＳＨＲ－１３１６、ＰＤ－Ｌ１阻害剤ミラモレキュール、ＢＭＳ－９３６５５９、Ｍ－７８２４、ＬＹ－３３０００５４、ＫＮ－０３５、ＦＡＺ－０５３、ＣＫ－３０１、及びＣＡ－１７０を含む。好ましい分子は、ＰＤ－１又はＰＤ－Ｌ１に対する抗体である。導入期の後に治療のために選択される抗ＰＤ－１分子は、医療現場でよく使用される量及び投与スケジュールで投与される。特定の実施形態では、導入期の後に投与される抗ＰＤ－１分子は、他の免疫療法（抗ＣＴＬＡ４抗体を含むが、これらに限定されない他の免疫チェックポイント阻害剤、ＩＤＯ阻害剤、細胞療法、癌ワクチン、他の免疫調節物質）、放射線療法、化学療法、化学放射線療法、腫瘍溶解性ウイルス、血管新生抑制療法（ＶＥＧＦＲ阻害剤など）、及び／又は標的癌療法を含むが、これらに限定されない、１つ又はそれ以上の他の癌療法と組み合わせられてもよい。

特定の実施形態では、本発明の導入療法は、癌微小環境の免疫原性が不十分であるという判断を条件としてなされる又はその判断の後にのみ推奨される。よって、いくつかの実施形態では、患者は、その癌の免疫原性が不十分であると判断された後に、導入療法に適格であると見なされる。いくつかの実施形態では、癌は、免疫原性が不十分であると判断されている。たとえば、いくつかの実施形態では、癌は、本明細書において下記に提供される定義のうちの１つに従って、免疫原性が低いと判断されたかもしれない。判断は、典型的に、ＩＡＰアンタゴニストによる前治療の前に採取された癌生検材料（液体生検材料を含む）などのような患者の生物学的サンプルにおける免疫原性のマーカーの分析、及びマーカーの存在、発現レベル、又は導き出されたスコアが所定の閾値に達しないという所見を含む。好ましいマーカーは、癌細胞及び／又は免疫細胞上に発現されるＰＤ－Ｌ１である。他の好ましいマーカーは、腫瘍浸潤リンパ球及び／又は腫瘍中の遺伝子変異量（tumor mutation burden）を含む。

別の特定の実施形態では、抗ＰＤ－１分子による患者の治療は、癌が導入期、すなわちＩＡＰアンタゴニストによる前治療の終了時に免疫原性であるという判断を条件としてなされる又はその判断の後にのみ推奨される。いくつかの実施形態では、導入期の終了時の癌は、本明細書において下記に提供される定義のうちの１つに従って、免疫原性が高いと判断されたかもしれない。判断は、典型的に、ＩＡＰアンタゴニストによる患者の前治療の後に採取された癌生検材料（液体生検材料を含む）などのような患者の生物学的サンプルにおける免疫原性のマーカーの分析、及びマーカーの存在、発現レベル、又は導き出されたスコアが所定の閾値を超えるという所見を含む。好ましいマーカーは、癌細胞及び／又は免疫細胞上に発現されるＰＤ－Ｌ１である。他の好ましいマーカーは、腫瘍浸潤リンパ球及び／又は腫瘍中の遺伝子変異量を含む。

さらに別の特定の実施形態では、導入治療の間に、放射線療法、化学療法、腫瘍溶解性ウイルス、標的癌療法、癌ワクチン、細胞療法、及び／又は血管新生抑制療法などのような１つ又はそれ以上の他の癌療法が、使用されてもよい。任意の癌共同療法を、抗ＰＤ－１分子療法を除いて、導入期の間に使用することができる。したがって、抗ＰＤ－１分子は、導入期の間に投与されない。

本発明はまた、ＩＡＰアンタゴニストによる対象の前治療及び抗ＰＤ－１分子による対象のその後の治療を含む対象の癌の治療の方法にも関する。

導入期において、様々な用量及びスケジュールが、選択されるＩＡＰアンタゴニストについて使用される。選ばれる用量及びスケジュールは、癌のタイプ、患者の特徴、及び対象が受け得る他の療法などのような様々な因子に依存していてもよく、臨床医の判断及び経験に従ってもよい。たとえば、経口的に毎週１回５００ｍｇ、経口的に毎週１回１２００ｍｇ、経口的に毎週１回１５００ｍｇ、経口的に毎週１回１８００ｍｇを含む毎週１回５００から１８００ｍｇの間の経口用量が、ＬＣＬ－１６１について使用されてもよい。ビリナパントは、２８日間のサイクルのうち１、８、及び１５日目に（２から７、９から１４、及び１６から２８日目はビリナパントオフ日とする）１３から４７ｍｇ／ｍ^２の間の、たとえば４７ｍｇ／ｍ^２の又は４週間のうち３週間、毎週２回１３ｍｇ／ｍ^２の用量で使用されてもよい。Ｄｅｂｉｏ １１４３は、約１００から約１０００ｍｇ、好ましくは約１００から約５００ｍｇ、最も好ましくは約１００から約２５０ｍｇの１日量で、２８日以下の期間に毎日又は５から１４日の間の連続投与、これに続く１６から５日間のＤｅｂｉｏ １１４３オフ日、２１日毎に５日間の連続投与、２１日毎に１４日間の連続投与、若しくは１４日毎に７から１０日間の連続投与を含むサイクルで、経口的に投与される。

ＩＡＰアンタゴニストが抗ＰＤ－１分子治療の間に継続される場合、前治療期と同じ又は異なる、好ましくは同じＩＡＰアンタゴニストが、使用されてもよい。ＩＡＰアンタゴニストの好ましい例は、Ｄｅｂｉｏ １１４３、ＧＤＣ－９１７／ＣＵＤＣ－４２７、ＬＣＬ１６１、ＧＤＣ－０１５２、ＴＬ－３２７１１／ビリナパント、ＨＧＳ－１０２９／ＡＥＧ－４０８２６、ＢＩ ８９１０６５、ＡＳＴＸ－６６０、及びＡＰＧ－１３８７を含む。好ましくは、ＩＡＰアンタゴニストは、ＳＭＡＣミメティックであり、最も好ましいＩＡＰアンタゴニストは、Ｄｅｂｉｏ １１４３である。用量及びスケジュールもまた、臨床医の判断及び経験に従って、導入期と同じであってもよい又は異なっていてもよい。症状の悪化がない、ＲＥＣＩＳＴ／ｉＲＥＣＩＳＴガイドラインによって客観的に評価されるように疾患進行がない、及び容認できない毒性がないといった臨床上の有益性が観察される限り又は治療のアプローチの変更が臨床上必要になるまで、サイクルは、反復されてもよい。

投与される抗ＰＤ－１分子は、任意の抗ＰＤ－１分子とすることができる。使用することができる特定の抗ＰＤ－１分子は、ニボルマブ、ペンブロリズマブ、アテゾリズマブ、デュルバルマブ、アベルマブ、ＰＤＲ００１、ＩＢＩ－３０８、セミプリマブ、カムレリズマブ、ＢＧＢ－Ａ３１７、ＢＣＤ－１００、ＪＳ－００１、ＪＮＪ－３２８３、ＭＥＤＩ０６８０、ＡＧＥＮ－２０３４、ＴＳＲ－０４２、Ｓｙｍ－０２１、ＰＦ－０６８０１５９１、ＭＧＤ－０１３、ＭＧＡ－０１２、ＬＺＭ－００９、ＧＬＳ－０１０、ゲノリムズマブ、ＢＩ ７５４０９１、ＡＫ－１０４、ＣＸ－０７２、ＷＢＰ３１５５、ＳＨＲ－１３１６、ＰＤ－Ｌ１阻害剤ミラモレキュール、ＢＭＳ－９３６５５９、Ｍ－７８２４、ＬＹ－３３０００５４、ＫＮ－０３５、ＦＡＺ－０５３、ＣＫ－３０１、及びＣＡ－１７０を含む。好ましい分子は、ＰＤ－１又はＰＤ－Ｌ１に対する抗体である。抗ＰＤ－１分子は、医療現場でよく使用される量及び投与スケジュールで投与される。特定の実施形態では、抗ＰＤ－１分子は、他の免疫療法（抗ＣＴＬＡ４抗体を含むが、これらに限定されない他の免疫チェックポイント阻害剤、ＩＤＯ阻害剤、細胞療法、癌ワクチン、他の免疫調節物質）、放射線療法、化学療法、化学放射線療法、腫瘍溶解性ウイルス、血管新生抑制療法（ＶＥＧＦＲ阻害剤など）、及び／又は標的癌療法を含むが、これらに限定されない、１つ又はそれ以上の他の癌療法と組み合わせられてもよい。

本発明の好ましい実施形態では、Ｄｅｂｉｏ １１４３は、導入期において（又は前治療として）及びその後の抗ＰＤ－１分子治療の間に使用される。前記その後の治療の間、好ましい抗ＰＤ－１分子は、ニボルマブ、ペンブロリズマブ、アテゾリズマブ、デュルバルマブ、アベルマブ、ＰＤＲ ００１、又はＢＩ－７５４０９１である。本発明の特に好ましい実施形態では、Ｄｅｂｉｏ １１４３は、５から２８日間の導入期において（又は前治療として）及びその後の抗ＰＤ－１分子治療の間に、頭頸部癌、黒色腫、尿路上皮癌、非小細胞肺癌、原発部位がわからない高頻度マイクロサテライト不安定性（ＭＳＩ）腫瘍、腎臓癌、膵臓癌、結腸直腸癌、多発性骨髄腫、小細胞肺癌、肝臓がん、又は卵巣癌のための治療に使用される。前記その後の治療の間、好ましい抗ＰＤ－１分子は、ニボルマブ、ペンブロリズマブ、アテゾリズマブ、デュルバルマブ、アベルマブ、ＰＤＲ ００１、又はＢＩ－７５４０９１である。

図面の簡単な説明
図１は、実施例１のとおり、Ｄｅｂｉｏ １１４３治療が、ヒト頭頸部癌患者（患者ｎ＝１２）の腫瘍においてｃＩＡＰ１の分解を誘発することを示す図である。統計分析に、対応のあるｔ検定及びＰ値＝０．０４５を使用した。 図２は、実施例１のとおり、Ｄｅｂｉｏ １１４３治療が、頭頸部癌患者（患者ｎ＝１２）の腫瘍においてＣＤ４＋（Ａ）及びＣＤ８＋（Ｂ）Ｔリンパ球の数を増加させることを示す図である。統計分析に、対応のあるｔ検定を使用した。図２（Ａ）についてのＰ値＝０．５１１及び図２（Ｂ）についてのＰ値＝０．０２０。 図３は、実施例１のとおり、Ｄｅｂｉｏ １１４３が、頭頸部癌患者（患者ｎ＝１２）の腫瘍においてＰＤ－１＋免疫細胞（Ａ）並びにＰＤ－Ｌ１＋免疫（Ｂ）及び腫瘍（Ｃ）細胞の数を増加させることを示す図である。統計分析に、対応のあるｔ検定を使用した。図３（Ａ）についてのＰ値＝０．００２、図３（Ｂ）についてのＰ値＝０．００４、及び図３（Ｃ）についてのＰ値＝０．１２９。 図４は、腫瘍量の中央値によって測定されるように、Ｄｅｂｉｏ １１４３による前治療が、抗ＰＤ－Ｌ１抗体によるその後の治療に対してＭＣ３８腫瘍を感作することを示す図である。最適なＴ／Ｃの日（１８日目）に：Ｄｅｂｉｏ １１４３前治療のみ対ビヒクルについてｐ＜０．０５（^＊）；Ｄｅｂｉｏ １１４３前治療、次いでＰＤ－Ｌ１対ビヒクルについてｐ＜０．０００１（^＊＊）；Ｄｅｂｉｏ １１４３前治療、次いでｃｏｍｂｏ対ビヒクルについてｐ＜０．０００１（^＊＊）；ｓｔｕｄｅｎｔ ｔ検定（両側、独立、等分散）によって決定される。１８日目のビヒクルについてのｎ＝６を除いてグループ当たりマウスＮ＝８。注：ｃｏｍｂｏ＝Ｄｅｂｉｏ １１４３＋抗ＰＤ－Ｌ１。 図５は、腫瘍量の中央値によって測定されるように、ビリナパントによる前治療が、抗ＰＤ－Ｌ１抗体によるその後の治療に対してＭＣ３８腫瘍を感作することを示す図である。最適なＴ／Ｃの日（１５日目）に：ビリナパント前治療のみ対ビヒクルについてｐ＞０．０５；ビリナパント前治療、次いでＰＤ－Ｌ１対ビヒクルについてｐ＜０．０５（^＊）；ビリナパント前治療、次いでｃｏｍｂｏ対ビヒクルについてｐ＜０．００１（^＊＊）；ｓｔｕｄｅｎｔ ｔ検定（両側、独立、等分散）によって決定される。グループ当たりマウスＮ＝８。注：ｃｏｍｂｏ＝ビリナパント＋抗ＰＤ－Ｌ１。 図６は、腫瘍量の中央値によって測定されるように、ＬＣＬ１６１による前治療が、抗ＰＤ－Ｌ１抗体によるその後の治療に対してＭＣ３８腫瘍を感作することを示す図である。最適なＴ／Ｃの日（１５日目）に：ＬＣＬ１６１前治療のみ対ビヒクルについてｐ＜０．０５（^＊）；ＬＣＬ１６１前治療、次いでＰＤ－Ｌ１対ビヒクルについてｐ＜０．０５（^＊）；ＬＣＬ１６１前治療、次いでｃｏｍｂｏ対ビヒクルについてｐ＜０．００１（^＊＊）；ｓｔｕｄｅｎｔ ｔ検定（両側、独立、等分散）によって決定される。グループ当たりマウスＮ＝８。注：ｃｏｍｂｏ＝ＬＣＬ１６１＋抗ＰＤ－Ｌ１。 図７は、腫瘍量の中央値によって測定されるように、Ｄｅｂｉｏ １１４３による前治療が、抗ＰＤ－１抗体によるその後の治療に対してＣＴ２６腫瘍を感作することを示す図である。最適なＴ／Ｃの日（１７日目）に：Ｄｅｂｉｏ １１４３前治療のみ対ビヒクルについてｐ＞０．０５；Ｄｅｂｉｏ １１４３前治療、次いでＰＤ－１対ビヒクルについてｐ＜０．０５（^＊）；Ｄｅｂｉｏ １１４３前治療、次いでｃｏｍｂｏ対ビヒクルについてｐ＜０．０００１（^＊＊）；ｓｔｕｄｅｎｔ ｔ検定（両側、独立、等分散）によって決定される。１７日目のビヒクルについてのｎ＝７を除いてグループ当たりマウスＮ＝８。注：ｃｏｍｂｏ＝Ｄｅｂｉｏ １１４３＋抗ＰＤ－１。

発明の詳細な説明
定義
用語「アンタゴニスト」及び「阻害剤」は、区別なく使用され、もう一方の生理学的作用に干渉する又はそれを阻害する物質を指す。いくつかの実施形態では、用語「アンタゴニスト」及び「阻害剤」は、最先の優先日、すなわち２０１７年１２月２１日に当業者によって理解されるものと同じ意味を有し、最先の優先日の時点での当業者の共通の一般知識を念頭に置く。

用語「抗体」は、特定の抗原に結合する、すなわち免疫学的に反応を示す、少なくとも１つの免疫グロブリンドメインを含む分子を指す。この用語は、抗体全体及び任意の抗原結合部分又はその単鎖及びその組み合わせを含む。用語「抗体」は、特に、二重特異性抗体を含む。

典型的なタイプの抗体は、ジスルフィド結合によって相互に連結した少なくとも２つの重鎖（「ＨＣ」）及び２つの軽鎖（「ＬＣ」）を含む。

それぞれの「重鎖」は、「重鎖可変ドメイン」（「ＶＨ」と本明細書において略される）及び「重鎖定常ドメイン」（「ＣＨ」と本明細書において略される）を含む。重鎖定常ドメインは、典型的に、３つの定常ドメイン、ＣＨ１、ＣＨ２、及びＣＨ３を含む。

それぞれの「軽鎖」は、「軽鎖可変ドメイン」（「ＶＬ」と本明細書において略される）及び「軽鎖定常ドメイン」（「ＣＬ」と本明細書においてされる）を含む。軽鎖定常ドメイン（ＣＬ）は、カッパ型又はラムダ型とすることができる。ＶＨドメイン及びＶＬドメインは、「フレームワーク領域」（「ＦＷ」）と称される、より保存された領域が点在する相補性決定領域（「ＣＤＲ」）と称される超可変性の領域にさらに細分することができる。

それぞれのＶＨ及びＶＬは、以下の順でアミノ末端からカルボキシ末端に配置される３つのＣＤＲ及び４つのＦＷから構成される：ＦＷ１、ＣＤＲ１、ＦＷ２、ＣＤＲ２、ＦＷ３、ＣＤＲ３、ＦＷ４。本開示は、特に、ＶＨ配列及びＶＬ配列並びにＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３に対応するサブ配列を提供する。

したがって、当業者は、ＦＷ１、ＦＷ２、ＦＷ３、及びＦＷ４の配列が等しく開示されることを理解するであろう。特定のＶＨについて、ＦＷ１は、ＶＨのＮ－末端とＨ－ＣＤＲ１のＮ－末端との間のサブ配列であり、ＦＷ２は、Ｈ－ＣＤＲ１のＣ－末端とＨ－ＣＤＲ２のＮ－末端との間のサブ配列であり、ＦＷ３は、Ｈ－ＣＤＲ２のＣ－末端とＨ－ＣＤＲ３のＮ－末端との間のサブ配列であり、ＦＷ４は、Ｈ－ＣＤＲ３のＣ－末端とＶＨのＣ－末端との間のサブ配列である。同様に、特定のＶＬについて、ＦＷ１は、ＶＬのＮ－末端とＬ－ＣＤＲ１のＮ－末端との間のサブ配列であり、ＦＷ２は、Ｌ－ＣＤＲ１のＣ－末端とＬ－ＣＤＲ２のＮ－末端との間のサブ配列である。ＦＷ３は、Ｌ－ＣＤＲ２のＣ－末端とＬ－ＣＤＲ３のＮ－末端との間のサブ配列であり、ＦＷ４は、Ｌ－ＣＤＲ３のＣ－末端とＶＬのＣ－末端との間のサブ配列である。

重鎖及び軽鎖の可変ドメインは、抗原と相互作用する領域を含有し、抗原と相互作用するこの領域はまた、「抗原結合性部位」又は「抗原結合部位」とも本明細書において呼ばれる。抗体の定常ドメインは、免疫系の様々な細胞（たとえばエフェクター細胞）及び古典的補体系の第１の構成成分（Ｃ１ｑ）を含む宿主組織又は宿主因子への免疫グロブリンの結合を媒介することができる。本開示の例示的な抗体は、定型抗体、それだけではなく、ｓｃＦｖなどのようなその断片及び変形物並びにその組み合わせもまた含み、たとえば、ｓｃＦｖは、定型抗体の重鎖及び／又は軽鎖のＮ－末端に共有結合される（たとえばペプチド結合若しくは化学的リンカーを介して）又は定型抗体の重鎖及び／又は軽鎖に挿入される。さらに、本開示の例示的な抗体は、二重特異性抗体を含む。

本明細書において使用されるように、用語「抗体」は、インタクトなポリクローナル抗体、インタクトなモノクローナル抗体、抗体断片（Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、及びＦｖ断片など）、単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）、ジスルフィド安定化ｓｃＦｖ、二重特異性抗体などのような多重特異性抗体（multispecific antibody）、キメラ抗体、ヒト化抗体、ヒト抗体、抗体の抗原決定部分を含む融合タンパク質、並びに抗原結合部位を含む任意の他の修飾免疫グロブリン分子を包含する。

抗体は、それぞれアルファ、デルタ、イプシロン、ガンマ、及びミューと呼ばれるそれらの重鎖定常ドメインの特徴に基づく５つの主要なクラスの免疫グロブリン（アイソタイプ）のいずれかとすることができる：ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ、及びＩｇＭ又はそのサブクラス（たとえばＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１、及びＩｇＡ２）。異なるクラスの免疫グロブリンは、異なる、よく知られているサブユニット構造及び三次元立体配置を有する。抗体は、ありのままのものとすることができる又は治療剤若しくは診断剤などのような他の分子にコンジュゲートされ、免疫複合体を形成することができる。いくつかの実施形態では、用語「抗体」は、最先の優先日、すなわち２０１７年１２月２１日に当業者によって理解されるものと同じ意味を有し、最先の優先日の時点での当業者の共通の一般知識を念頭に置く。

用語「抗癌応答」、「応答」、又は「応答性」は、ＲＥＣＩＳＴ ｖ１．１判定基準を使用して判断される客観的放射線的及び臨床的改善に関する（Eur. J. Cancer 45; 2009: 228-247）。ＲＥＣＩＳＴは、癌患者が治療の間に改善する（「応答する」）、変わらない（「安定している」）、又は悪化する（「進行」）を客観的に定義する、正式に発表されている一連のルールである。ＲＥＣＩＳＴ １．１は、最近、免疫療法剤の評価用に適合されたｉＲＥＣＩＳＴ １．１。（Seymour, L., et al., iRECIST: Guidelines for response criteria for use in trials testing immunotherapeutics. Lancet Oncol, 2017. 18(3): p. e143-e152）。本発明では、患者は、完全奏効（ＣＲ）、部分奏効（ＰＲ）、若しくは安定病態（ＳＤ）と又は無増悪生存期間若しくは全生存期間の状況によって判定されるように応答若しくは疾患安定の継続期間の増加を有すると判断されるＲＥＣＩＳＴｖ１．１に従う患者についての任意の臨床上の有益性がある場合、所定の治療に対して応答すると見なされる。

用語「抗ＰＤ－１分子」は、ＰＤ－１阻害剤及びＰＤ－Ｌ１阻害剤を指す。これらの阻害剤は、ＰＤ－１又はＰＤ－Ｌ１を標的にする抗体を含むが、これらに限定されない。抗ＰＤ－１分子は、ＣＡ－１７０などのような小分子であってもよい（たとえばJ.J. Lee et al., Journal of Clinical Oncology 35, no. 15_suppl, DOI: 10.1200/JCO.2017.35.15_suppl.TPS3099において記載されるＡＵＰＭ－１７０、Curis、Aurigene）。ＰＤ－１／ＰＤ－Ｌ１相互作用のさらなる小分子阻害剤は、本発明にとって有用であり、国際公開第２０１８／１９５３２１Ａ号において記載される。

「癌」は、一般に、転移性であっても、非転移性であってもよい悪性新生物を指す。たとえば、胃腸管及び皮膚などのような上皮組織から発症する癌の非限定的な例は、非黒色腫皮膚癌、頭頸部癌、食道癌、肺癌、胃がん、十二指腸癌、乳癌、前立腺癌、子宮頸癌、子宮体癌（cancer of endometrial uterine body）、膵癌、肝癌、胆管癌、胆嚢癌、結腸直腸癌、結腸癌、膀胱癌、及び卵巣癌を含む。筋肉などのような中胚葉起源を有する非上皮組織（間質）から発症する肉腫の非限定的な例は、骨肉腫、軟骨肉腫、横紋筋肉腫、平滑筋肉腫、脂肪肉腫、消化管間質性腫瘍（ＧＩＳＴ）、及び血管肉腫を含む。外胚葉（神経堤の個体発生）に由来する腫瘍の非限定的な例は、脳腫瘍、神経内分泌腫瘍などを含む。さらに、造血器官に由来する血液癌の非限定的な例は、ホジキンリンパ腫及び非ホジキンリンパ腫を含む悪性リンパ腫、急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、急性リンパ性白血病、慢性リンパ性白血病を含む白血病、並びに多発性骨髄腫を含む。癌の最後の例はまた、本明細書において癌種とも呼ばれる。

用語「癌」及び「腫瘍」（悪性腫瘍を意味する）は、本明細書において区別なく使用される。

用語「同時療法」、「同時治療」、又は「共同療法」は、ＩＡＰアンタゴニスト及び抗ＰＤ－１分子の両方の同一時間の又は同時の投与を指す。いくつかの実施形態では、用語「同時療法」又は「同時治療」は、抗ＰＤ－１分子が投与される前に、腫瘍の微小環境の免疫原性能力を増強させるのに十分な時間、ＩＡＰアンタゴニストが与えられない治療を指す。いくつかの実施形態では、用語「同時治療」、「共同療法」、及び「同時療法」は、最先の優先日、すなわち２０１７年１２月２１日に当業者によって理解されるものと同じ意味を有し、最先の優先日の時点での当業者の共通の一般知識を念頭に置く。

ＩＡＰアンタゴニスト又は抗ＰＤ－１分子の「有効量」は、臨床医が求める生物学的又は医学的抗癌応答を誘起する化合物の量を意味する。

句「腫瘍の微小環境の免疫原性能力を増強させる」は、刺激されていない免疫系と比較して免疫応答の増加をもたらす、腫瘍微小環境における免疫系の刺激を指す。本件では、免疫系は、ＩＡＰアンタゴニストによって刺激されてもよい。刺激は、癌の免疫原性を増加させてもよい、刺激は、腫瘍微小環境でエフェクター細胞の量を増加させてもよい、及び／又は刺激は、がん細胞に対する、腫瘍微小環境中に存在する免疫エフェクター細胞の感応性を増加させてもよい。いくつかの実施形態では、句「腫瘍の微小環境の免疫原性能力を増強させる」は、最先の優先日、すなわち２０１７年１２月２１日に当業者によって理解されるものと同じ意味を有し、最先の優先日の時点での当業者の共通の一般知識を念頭に置く。

本明細書において使用される抗ＰＤ－１分子の「第１の投与」という用語は、抗ＰＤ－１分子が患者に初めて投与されることを明示する。いくつかの実施形態では、患者は、以前に抗ＰＤ－１分子により治療されたことがない。いくつかの実施形態では、患者は、抗ＰＤ－１分子により治療されたことがあるが、患者は再発した又は抗ＰＤ－１分子療法は効果がなかった。これらの実施形態では、血清中の以前に投与された抗ＰＤ－１分子レベルは、本発明の導入療法がスタートされる前に、十分に、たとえば９５％、低下している。いくつかの実施形態では、以前に投与された抗ＰＤ－１分子の最後の投与と本発明の導入療法のスタートとの間の時間は、規制当局によって承認される又は医学界によって認められる少なくとも１又は２の投与間隔（反復投与の間の時間）を示す。いくつかの実施形態では、対象は、導入期のスタート前の少なくとも１、２、３、４、又は６週間、抗ＰＤ－１分子を投与されていない。

腫瘍微小環境に関して本明細書において使用される用語「免疫原性の」及び「免疫原性」は、免疫応答を引き起こすこと又はもたらすことを意味する。いくつかの実施形態では、免疫原性は、患者の癌細胞を免疫染色することによって明らかにされるＰＤ－Ｌ１の発現レベルを決定することによって判断される。

いくつかの実施形態では、免疫原性は、癌サンプル中のＣＤ８＋細胞のレベルをマーカーと見なすことによって判断される。この判断は、下記の実施例１の材料及び方法を使用して実行されてもよい。

いくつかの実施形態では、癌サンプルは、前述のマーカーを組み合わせて考慮することによって低及び高免疫原性として判断され、分類されてもよい。よって、いくつかの実施形態では、免疫原性は、癌サンプルにおいてＣＤ８＋細胞のレベルとＰＤ－Ｌ１マーカー発現レベルの組み合わせを考慮することによって判断される。いくつかの実施形態では、導入期の間にＩＡＰアンタゴニストによる治療が、たとえば抗体２２ｃ３ ｐｈａｒｍＤｘ（Dako,Inc.）などのような適した抗体を使用する免疫組織化学アッセイにおいて、たとえばＰＤ－Ｌ１について染色（任意の強度の）を呈する癌サンプルの細胞の割合に換算して少なくとも１、２、３、又は４％、患者の癌細胞上のＰＤ－Ｌ１の発現レベルを増加させる場合、治療は、ＩＡＰアンタゴニストによるものであり、腫瘍の微小環境の免疫原性能力を増強させると見なされる。同様に、免疫原性能力の増強は、いくつかの実施形態において、下記の実施例１の材料及び方法を使用して決定される場合、少なくとも１、２、３、又は４％の、癌サンプル中のＣＤ８＋細胞のレベルの増加によって同定されてもよい。

本明細書において使用されるＩＡＰアンタゴニスト又は阻害剤は、アポトーシスタンパク質阻害剤（ＩＡＰと略される）に対して親和性を有する化合物を意味する。この化合物は、ＩＡＰの阻害剤又はアンタゴニストである。いくつかの実施形態では、ＩＡＰアンタゴニストは、ＩＡＰアンタゴニスト並びにｃＩＡＰ１及び／又はｃＩＡＰ２の間の相互作用が、これらのタンパク質の分解及びその後のＮＦ－κＢの調整をもたらすという特徴を示す。いくつかの実施形態では、この効果は、ＩＡＰ阻害活性について化合物をテストするために使用することができ、インビトロにおいてｃＩＡＰ１及び／又はｃＩＡＰ２と有望なＩＡＰアンタゴニストを接触させ、ＩＡＰ阻害剤について、ウエスタンブロット分析を含むが、これらに限定されない適した技術により効果を分析する場合、ｃＩＡＰ１に対する効果は、１０μＭ未満、好ましくは＜１μＭの濃度で観察されるべきである。いくつかの実施形態では、用語「ＩＡＰ阻害剤」及び「ＩＡＰアンタゴニスト」は、最先の優先日、すなわち２０１７年１２月２１日に当業者によって理解されるものと同じ意味を有し、最先の優先日の時点での当業者の共通の一般知識を念頭に置く。

一般に、用語「導入療法」は、後に投与される別の薬剤の有効性を強める、患者における応答を誘発するために、ある薬剤が患者に投与される一種の治療を指す。本発明に関して、導入療法は、「前治療」を含む。「前治療」又は「導入」は、抗ＰＤ－１分子の第１の投与の前の、ある一定の時間のＩＡＰアンタゴニストの投与を指す。ＩＡＰアンタゴニストが投与される期間は、「導入期」又は「前治療期」と呼ばれる。腫瘍の微小環境の免疫原性能力が増強される限り、導入期は、特に制限されない。いくつかの実施形態では、導入期は、１から４８日間、好ましくは１から２８日間、より好ましくは５から２８日間の範囲から選択される継続期間を有する。いくつかの実施形態では、導入期は、腫瘍の微小環境の免疫原性能力を増強させるのに十分に長い。いくつかの実施形態では、抗ＰＤ－１分子治療の効能は、ＩＡＰアンタゴニストによる導入療法なしの同時治療と比較して増加する。抗ＰＤ－１分子は、次いで、導入期の後に、すなわち、腫瘍の微小環境の免疫原性能力が増強した後に、投与される。免疫系がＩＡＰアンタゴニストによって予備刺激されたので、これは、抗ＰＤ－１分子の能力の増加をもたらす。いくつかの実施形態では、用語「導入療法」、「前治療」、「導入」、「導入期」、及び「前治療期」は、最先の優先日、すなわち２０１７年１２月２１日に当業者によって理解されるものと同じ意味を有し、最先の優先日の時点での当業者の共通の一般知識を念頭に置く。

「ＳＭＡＣミメティック」は、ＩＡＰの治療的阻害のための小分子阻害剤を意味し、この小分子阻害剤は、内在性ＳＭＡＣ配列Ｎ末端の４アミノ酸ストレッチを模倣し、少なくとも部分的に、非ペプチド性要素から構成される。内在性ＳＭＡＣのＮ末端配列は、Ａｌａ－Ｖａｌ－Ｐｒｏ－Ｉｌｅ（ＡＶＰＩ）であり、ＩＡＰへの結合に必要とされる。

用語「対象」は、哺乳類動物、好ましくは人間に関する。ヒト対象はまた、「患者」とも呼ばれる。

導入療法
本発明者らは、患者の腫瘍微小環境の免疫原性を増強させるために腫瘍を有する患者をＳＭＡＣミメティックなどのようなＩＡＰアンタゴニストにより前治療することができることを提唱する。続いて、患者は、抗ＰＤ－１分子により治療される。前治療は、患者の腫瘍が抗ＰＤ－１分子による治療に対して応答する可能性を増加させる及び／又は抗ＰＤ－１分子に対する腫瘍の応答の有効性を増強させる。ＩＡＰアンタゴニストは、既に（２０１７年１２月２１日の時点のように）承認されている又は現在臨床開発中であるものの中から、特に以下のものの中から選択されてもよい：
Ｄｅｂｉｏ １１４３（Debiopharm、ＣＡＳ ＲＮ：１０７１９９２－９９－８）、ＧＤＣ－９１７／ＣＵＤＣ－４２７（Curis/Genentech、ＣＡＳ ＲＮ：１４４６１８２－９４－０）、ＬＣＬ１６１（Novartis、ＣＡＳ ＲＮ：１００５３４２－４６－０）、ＧＤＣ－０１５２（Genentech、ＣＡＳ ＲＮ：８７３６５２－４８－３）、ＴＬ－３２７１１／ビリナパント（Medivir、ＣＡＳ ＲＮ：１２６０２５１－３１－７）、ＨＧＳ－１０２９／ＡＥＧ－４０８２６８（Aegera、ＣＡＳ ＲＮ：１１０７６６４－４４－７）、ＢＩ ８９１０６５（Boehringer Ingelheim）、ＡＳＴＸ－６６０（Astex/Otsuka、ＣＡＳ ＲＮ：１６０５５８４－１４－２）、ＡＰＧ－１３８７（Ascentage、ＣＡＳ ＲＮ：１８０２２９３－８３－９）、又はそれらの医薬品の許容され得る塩のいずれか。好ましくは、ＩＡＰアンタゴニストは、ＳＭＡＣミメティックであり、最も好ましいＩＡＰアンタゴニストは、Ｄｅｂｉｏ １１４３である。

ＩＡＰアンタゴニストによる前治療は、患者の腫瘍微小環境の免疫原性が不十分であるという所見に依存してなされてもよい。免疫原性は、前治療の前に採取された腫瘍生検材料（液体生検材料を含む）などのような患者の生物学的サンプルにおいて判断されてもよい。用いられてもよい免疫原性についての判定基準は、癌生検材料中に存在するがん細胞において又はすべての細胞において発現されるＰＤ－Ｌ１のレベルを含む。それはまた、検出可能な量のＰＤ－Ｌ１を発現する腫瘍細胞及び／又は免疫細胞のパーセンテージであってもよい。免疫原性についての閾値は、医学界、分析に使用される抗ＰＤ－１分子のメーカー／販売者、又は治療している医師によって定義されてもよい。たとえば、ペンブロリズマブによる治療についての閾値は、第一選択療法については、癌の細胞の５０％超が抗体２２ｃ３ ｐｈａｒｍＤｘ（Dako, Inc.）を使用する免疫組織化学アッセイにおいてＰＤ－Ｌ１について染色される（任意の強度で）、第二選択療法については、１％超の細胞がＰＤ－Ｌ１について染色されるとして、メーカー（Merck）によって定義されている。よって、この例では、ＰＤ－Ｌ１発現細胞の頻度が低い癌を有する患者は、ＩＡＰアンタゴニストによる前治療に適格であると見なされるであろう。いくつかの実施形態では、ＩＡＰアンタゴニストによる前治療は、ＰＤ－Ｌ１発現細胞及び／又はＣＤ８＋細胞の頻度が高免疫原性についての前述の閾値を超えるまで実行されてもよい。さらなる判定基準は、ベースライン生検材料又はサンプル中に存在するリンパ球又はＣＤ８＋Ｔ細胞又はＣＤ４＋Ｔ細胞のパーセンテージを含んでいてもよい。免疫原性の他の適した判定基準が、医学界による承諾を得てもよい（たとえば、樹状細胞の数／パーセンテージ、調節性Ｔ細胞に対するＣＤ８＋Ｔ細胞の比率、腫瘍中の遺伝子変異量など）。適格性はまた、複数の判定基準に基づいて判断されてもよい。

特定の理論に拘束されないが、導入期の後の癌細胞上のＰＤ－Ｌ１マーカーの発現の増加は、腫瘍微小環境の免疫原性能力が増強したというサインであると考えられる。これは、免疫原性能力の増加が、癌細胞が生き残るために免疫系を回避する必要性の増加に関連するはずだからである。ＰＤ－Ｌ１の過剰発現は、癌細胞が免疫系の目を逃れることができるメカニズムであると考えられる。したがって、ＰＤ－Ｌ１発現のレベルの増加は、腫瘍細胞が腫瘍微小環境で免疫系の増強に直面しているというサインである。

方法はまた、ＩＡＰアンタゴニストによる前治療の終了時の患者の癌微小環境の免疫原性に基づいて、抗ＰＤ－１分子による治療のための患者を選択するために変更してもよい。免疫原性は、前治療の終了時に採取された腫瘍生検材料（液体生検材料を含む）などのような患者の生物学的サンプルにおいて判断されてもよい。免疫原性を判断する及び閾値を定義するための判定基準は、前の段落において記載されたものに類似していてもよい。免疫原性の選択マーカーが所定の閾値を上回る癌を有する患者は、抗ＰＤ－１分子による治療のために選択されてもよい。

癌生検材料における免疫原性を判断するための方法
原則として、任意の適した方法が、用いられてもよい。免疫組織化学的検査及びフローサイトメトリーに基づく手順が、最もよく使用される。

免疫組織化学的検査：免疫組織化学的検査（ＩＨＣ）は、組織切片中のタンパク質の存在及び場所を示すことができる方法である。免疫組織化学的検査は、無傷の組織に関するプロセスの観察を可能にする。ＩＨＣプロトコールの基本的なステップは、以下のとおりである：組織の固定及び包埋、切片のカット及びマウント、切片の脱パラフィン及び再水和、抗原賦活化プロセスの適用、免疫組織化学的染色、並びに顕微鏡下で染色を見る。例のプロトコールでは、免疫染色は、４μｍパラフィン包埋組織切片に対して実行した。手短かに言えば、スライドをキシレン中で脱パラフィンし、一連の段階的なエタノールを利用して脱水し、内在性ペルオキシダーゼを３％過酸化水素により遮断した。エピトープ賦活化の後、スライドを、０．１％（ｖｏｌ．）Tween 20／５％（ｖｏｌ．）正常ヤギ血清を有するＴＲＩＳ緩衝食塩水により洗浄し、遮断した。一次抗体とのインキュベーションを４℃で一晩実行し、これに続いて室温で３０分間二次抗体とインキュベーションした。切片を０．１％（ｖｏｌ．）Tween 20を有するＴＲＩＳ緩衝食塩水で３回洗浄し、ジアミノベンジジン（ＤＡＢ）で染色し、ヘマトキシリンで対比染色した。Guancial et al. (2014)；Redler, A. et al. (2013) PLoS One. 8: e72224。手順は、手作業で実行されてもよい又は部分的に若しくは完全に自動化されてもよい。特定のＩＨＣ法もまた、下記の実施例の部において記載される。

フローサイトメトリー：フローサイトメトリーは、細胞のカウント、細胞選別、バイオマーカー検出、及びタンパク質工学において用いられる、レーザーに基づく生物物理学的技術であり、液体の流れの中に細胞を浮遊させること及び電子検出装置のそばを細胞に通過させることを含む。それは、毎秒何千にも及ぶ粒子の物理的及び化学的特徴の同時のマルチパラメトリック解析を可能にする。タンパク質に特異的な抗体を使用すると、フローサイトメトリーは、細胞表面の発現、ある場合には、複雑な細胞の集団又はプロセスを理解するために使用される細胞質内マーカー又は核マーカーに関する情報を提供することができる。Yan, D. et al. (2011) Arthritis Res.Ther. 13: R130。

ＩＡＰアンタゴニストを含む医薬組成物及びそれらの投与
ＩＡＰアンタゴニストを含む医薬組成物は、経口的に、非経口的に、吸入噴霧剤によって、局所的に、直腸に、経鼻的に、頬側に（buccally）、腟に（vaginally）、又は植込み貯蔵器を介して、好ましくは経口投与又は注射による投与によって、投与されてもよい。しかしながら、二量体のＳＭＡＣミメティックは、典型的に静脈内に投与されることに注意される。医薬組成物は、任意の従来の無毒性の薬学的に許容され得るキャリヤ、補助剤、又はビヒクルを含有してもよい。ある場合には、製剤のｐＨは、活性剤又はその送達形態の安定性を増強させるために、薬学的に許容され得る酸、塩基、又はバッファーにより調整されてもよい。標準的な医薬キャリヤ及びそれらの製剤は、非限定的に、Remington’s Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Co., Easton, PA, 19th ed. 1995において記載される。本明細書において使用される非経口的という用語は、皮下、皮内、静脈内、筋肉内、関節内、動脈内、滑液包内、胸骨内（intrasternal）、髄腔内、病巣内、及び頭蓋内注射又は注入技術を含む。

経口投与のための液体投薬形態は、薬学的に許容され得るエマルション、マイクロエマルション、水剤、懸濁剤、シロップ、及びエリキシル剤を含む。活性剤（ＳＭＡＣミメティックなどのようなＩＡＰアンタゴニスト）に加えて、液体投薬形態は、たとえば、水又は他の乳化剤、可溶化剤、並びにエチルアルコール、イソプロピルアルコール、炭酸エチル、酢酸エチル、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、プロピレングリコール、１，３－ブチレングリコール、ジメチルホルムアミド、油（特に綿実油、ピーナッツ油、トウモロコシ油、胚芽油、オリーブ油、ヒマシ油、及びゴマ油）、グリセロール、テトラヒドロフルフリルアルコール、ポリエチレングリコール、並びにソルビタンの脂肪酸エステルなどのような溶媒並びにその混合物などのような、当技術分野においてよく使用される不活性希釈剤を含有してもよい。不活性希釈剤に加えて、経口組成物はまた、湿潤剤、乳剤及び懸濁剤、甘味剤、香味料、並びに芳香剤などのような補助剤を含むこともできる。

注射用調製物、たとえば滅菌注射用水性又は油性懸濁剤は、適した分散剤又は湿潤剤及び懸濁化剤を使用し、既知の技術に従って製剤されてもよい。滅菌注射用調製物はまた、無毒な非経口的に許容され得る希釈剤又は溶媒中の滅菌注射用水剤、懸濁剤、又はエマルション、たとえば１，３－ブタンジオール中の水剤であってもよい。用いられてもよい許容され得るビヒクル及び溶媒の中には、水、リンゲル液、Ｕ．Ｓ．Ｐ．、並びに等張食塩水及びデキストロース溶液がある。そのうえ、滅菌不揮発性油は、溶媒又は懸濁化媒体として従来から用いられている。この目的のために、合成モノ又はジグリセリドを含む、任意の、刺激がない不揮発性油を用いることができる。そのうえ、オレイン酸などのような脂肪酸は、注射液の調製において使用される。

注射用製剤は、たとえば、細菌保持フィルターによる濾過、電離放射線によって、又は使用の前に滅菌水若しくは他の滅菌注射用媒体中に溶解する若しくは分散させることができる滅菌固体組成物の形態をした活性剤を組み込むことによって滅菌することができる。用いられる特定のＩＡＰアンタゴニストの化学的性質に依存して、滅菌はまた、オートクレーブ又は乾熱によるものであってもよい。

活性剤の効果を延ばすために、皮下又は筋肉内注射からの活性剤の吸収を遅らせることが望ましいことが多い。これは、不十分な水溶解性を有する結晶又はアモルファス材料の液体懸濁剤の使用によって達成されてもよい。それゆえ、活性剤の吸収速度は、その分解速度に依存し、これはさらには結晶サイズ及び結晶形態に依存し得る。その代わりに、非経口的に投与される薬剤形態の吸収遅延は、油ビヒクル中に活性剤を溶解する又は懸濁することによって達成される。注射用デポー形態は、ポリラクチド－ポリグリコライドなどのような生分解性ポリマー中に活性剤をマイクロカプセル化することによって作製される。ポリマーに対する活性剤の比率及び用いられる特定のポリマーの性質に依存して、活性剤の放出の速度を制御することができる。他の生分解性ポリマーの例は、ポリ（オルトエステル）及びポリ（無水物）を含む。デポー注射用製剤はまた、体組織と適合性のリポソーム又はマイクロエマルション中に活性剤を封入することによっても調製される。

経口投与のための固体投薬形態は、カプセル剤、錠剤、丸剤、散剤、及び顆粒剤を含む。そのような固体投薬形態では、活性剤は、クエン酸ナトリウム若しくはリン酸カルシウムなどのような少なくとも１つの不活性で薬学的に許容され得る賦形剤若しくはキャリヤ及び／又はａ）デンプン、ラクトース、セルロース、スクロース、グルコース、マンニトール、及びケイ酸などのような充填剤若しくは増量剤、ｂ）たとえばカルボキシメチルセルロース、アルギネート、ゼラチン、ポリビニルピロリドン、スクロース、及びアラビアゴムなどのようなバインダー、ｃ）グリセロールなどのような保湿剤、ｄ）寒天、炭酸カルシウム、クロスカルメロース、クロスポビドン、カルボキシメチルセルロース、ジャガイモ若しくはタピオカデンプン、アルギン酸、ある種のシリケート、及び炭酸ナトリウムなどのような崩壊剤、ｅ）パラフィンなどのような溶解遅延剤、ｆ）第四級アンモニウム化合物などのような吸収促進剤、ｇ）たとえばセチルアルコール、ラウリル硫酸ナトリウム、及びモノステアリン酸グリセロールなどのような湿潤剤、ｈ）カオリン粘土及びベントナイト粘土などのような吸収剤、及び／又はｉ）滑石、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、固体ポリエチレングリコール、ラウリル硫酸ナトリウム、及びその混合物などのような潤滑剤と混合される。カプセル剤、錠剤、及び丸剤の場合、投薬形態はまた、緩衝剤を含んでいてもよい。

同様のタイプの固体組成物もまた、ラクトース又は乳糖並びに高分子量ポリエチレングリコール及びその他同種のもののような賦形剤を使用して、軟又は硬ゼラチンカプセルにおいて充填剤として用いられてもよい。

錠剤、糖剤、カプセル剤、丸剤、及び顆粒剤の固体投薬形態は、腸溶コーティング及び医薬製剤技術においてよく知られている他のコーティングなどのような、コーティング及びシェルを用いて調製することができる。それらは、任意選択で、乳白剤を含有してもよく、活性剤のみを放出する又は優先的に腸管のある部分で、任意選択で遅延方式で、活性剤を放出する組成物からできていてもよい。使用することができる包埋組成物の例は、ポリマー物質及びワックスを含む。

単一の投薬形態を産生するために薬学的に許容され得る賦形剤又はキャリヤと組み合わせられてもよい活性剤の量は、選ばれる特定のＩＡＰアンタゴニスト、投与の特定のモード、及び場合により治療される対象に依存して変動するであろう。典型的な調製物は、１％から９５％の活性剤（ｗ／ｗ）を含有するであろう。その代わりに、そのような調製物は、２０％から８０％の活性剤を含有してもよい。上記に詳述されるものよりも低い又は高い用量が必要とされてもよい。任意の特定の対象についての特定の投薬及び治療レジメンは、年齢、体重、体表面積、一般的な健康状態、性別、食事、投与の時間、***率、ＩＡＰアンタゴニスト、薬剤の組み合わせ、疾患の重症度及び経過、状態又は症状、疾患、状態、又は症状に対する対象の素因、並びに治療している医師の見解を含む様々な因子に依存するであろう。

抗ＰＤ－１分子を含む医薬組成物及びそれらの投与
抗ＰＤ－１分子は、典型的に静脈内注入によって投与される。

ニボルマブは、「OPDIVO」という商品名で販売されている。ニボルマブは、ニボルマブ抗体、マンニトール、ペンテト酸、ポリソルベート８０、塩化ナトリウム、クエン酸ナトリウム二水和物、及び水を含む１０ｍｇ／ｍｌの液剤として売っている。投与のために、ニボルマブは、０．９％塩化ナトリウム又は５％デキストロース中に希釈される。ペンブロリズマブは、「KEYTRUDA」という商品名で販売されている。ペンブロリズマブは、５０ｍｇの抗体並びに非活性成分Ｌ－ヒスチジン、ポリソルベート８０、及びスクロースを含む固形組成物として提供される。投与のために、この組成物は、０．９％塩化ナトリウム中に懸濁される。アテゾリズマブ（販売名：「TECENTRIQ」）は、氷酢酸、ヒスチジン、スクロース、及びポリソルベート２０を含有するＩＶ液剤（１２００ｍｇ活性／２０ｍｌ）として提供される。投与のために、この液剤は、０．９％ＮａＣｌにより希釈される。デュルバルマブ（「IMFINZI」）は、Ｌ－ヒスチジン、Ｌ－ヒスチジン塩酸塩一水和物、α，α－トレハロース二水和物、ポリソルベート８０、及び注射用水、ＵＳＰ中５００ｍｇ／１０ｍｌ又は１２０ｍｇ／２．４ｍｌ液剤として売っている。アベルマブ（「BAVENCIO」）は、マンニトール、酢酸、ポリソルベート２０、水酸化ナトリウム、及び水を含有する２００ｍｇ（活性）／１０ｍｌの注射用の液剤として市販されている。０．４５％又は０．９％ＮａＣｌ中での希釈の後に、適切な用量が、６０分間、注入によって投与される。

チェックポイント阻害剤の適した用量は、臨床において使用される用量である。ニボルマブの適した用量は、３ｍｇ／ｋｇ体重である。この用量は、６０分間の期間、静脈内注入によって投与される。ペンブロリズマブの適した用量は、２ｍｇ／ｋｇ体重である。この用量は、３０分間の期間、静脈内注入によって投与される。アテゾリズマブの成人用量は、６０分間の期間にわたって注入される１２００ｍｇである。デュルバルマブについて推奨される用量は、６０分間にわたって静脈内注入によって投与される１０ｍｇ／ｋｇ体重である。アベルマブの適した用量は、１０ｍｇ／ｋｇ体重である。これらの用量は、医療現場において認められる変更と同時進行で変更されてもよい。ニボルマブの投薬は、典型的に２週間毎に反復され、ペンブロリズマブは３週間毎、アテゾリズマブは３週間毎、デュルバルマブは２週間毎、アベルマブは２週間毎に反復される。

抗ＰＤ－１分子の投与の投薬量及びスケジュール（投与間隔を含む）は、規制当局によって承認されるとおりになるであろう。医学界によって認められる用量及びスケジュールの任意の調整もまた、ここで記載されている療法に適用されるであろう。

一態様では、本発明は、下記に列挙される項目を含む。これらの項目は、上記の態様又は実施形態のいずれかと組み合わせられてもよい。
１．抗ＰＤ－１分子によるその後の治療が抗癌応答をもたらす可能性を増強させるために又は抗ＰＤ－１分子によるその後の治療に対する対象の癌の応答性を増強させるために、癌になったヒト対象を前治療するためのＩＡＰアンタゴニスト。
２．ヒト対象は、１から２８日間、好ましくは５から２８日間の前治療期の間に、ＩＡＰアンタゴニストにより前治療され、前記前治療期に続いて、前記その後の抗ＰＤ－１分子治療が開始される、項目１に記載のＩＡＰアンタゴニスト。
３．前記前治療期は、ＩＡＰアンタゴニストが投与されない１又はそれ以上の日を含む、項目２に記載のＩＡＰアンタゴニスト。
４．前記ＩＡＰアンタゴニスト又は異なるＩＡＰアンタゴニストはまた、抗ＰＤ－１分子による前記その後の治療の間にも投与される、項目１から３のいずれか１項に記載のＩＡＰアンタゴニスト。
５．前記ＩＡＰアンタゴニストの投与は、抗ＰＤ－１分子による前記その後の治療の全期間の間に継続されるか、又は抗ＰＤ－１分子による前記その後の治療の完了の前に終了する又は抗ＰＤ－１分子による前記その後の治療の完了以降、継続される、項目４に記載のＩＡＰアンタゴニスト。
６．前記癌は、かなりの割合の治療患者において抗ＰＤ－１分子による治療に対して応答性であることが知られている種類のものである、項目１から５のいずれか１項に記載のＩＡＰアンタゴニスト。
７．前記癌は、頭頸部癌、黒色腫、尿路上皮癌、非小細胞肺癌、原発部位がわからない高頻度マイクロサテライト不安定性（ＭＳＩ）腫瘍、又は腎臓癌である、項目６に記載のＩＡＰアンタゴニスト。
８．前記癌は、抗ＰＤ－１分子による治療に応答することが示された患者のパーセンテージが低い（たとえば５％以下）種類のものである、項目１から５のいずれか１項に記載のＩＡＰアンタゴニスト。
９．前記癌は、膵臓癌、結腸直腸癌、多発性骨髄腫、小細胞肺癌、肝臓がん、又は卵巣癌である、項目８に記載のＩＡＰアンタゴニスト。
１０．前記前治療は、癌の免疫原性が不十分であるという判断を条件とする、項目１から９のいずれか１項に記載のＩＡＰアンタゴニスト。
１１．前記判断は、前治療の前に採取された患者の生物学的サンプルにおける免疫原性のマーカーの分析、及びマーカーの存在、発現レベル、又は導き出されたスコアが所定の閾値に到達しないという所見からなる、項目１０に記載のＩＡＰアンタゴニスト。
１２．前記マーカーは、癌細胞及び／又は免疫細胞上に発現されるＰＤ－Ｌ１である、項目１１に記載のＩＡＰアンタゴニスト。
１３．前記マーカーは、腫瘍浸潤リンパ球又は腫瘍中の遺伝子変異量である、項目１１に記載のＩＡＰアンタゴニスト。
１４．抗ＰＤ－１分子による前記その後の治療の開始は、癌が前治療の終了時に免疫原性であるという判断を条件とする、項目１から１３のいずれか１項に記載のＩＡＰアンタゴニスト。
１５．前記判断は、ＩＡＰ阻害剤による前治療の後に採取された患者の生物学的サンプルにおける免疫原性のマーカーの分析、及びマーカーの存在、発現レベル、又は導き出されたスコアが所定の閾値を超えるという所見からなる、項目１４に記載のＩＡＰアンタゴニスト。
１６．前記マーカーは、癌細胞及び／又は免疫細胞上に発現されるＰＤ－Ｌ１である、項目１５に記載のＩＡＰアンタゴニスト。
１７．前記マーカーは、腫瘍浸潤リンパ球又は腫瘍中の遺伝子変異量である、項目１５に記載のＩＡＰアンタゴニスト。
１８．前記患者の生物学的サンプルは、腫瘍又は液体生検材料である、項目１１から１３及び１５から１７のいずれか１項に記載のＩＡＰアンタゴニスト。
１９．前記抗ＰＤ－１分子は、ニボルマブ、ペンブロリズマブ、アテゾリズマブ、デュルバルマブ、アベルマブ、ＰＤＲ００１、ＩＢＩ－３０８、セミプリマブ、カムレリズマブ、ＢＧＢ－Ａ３１７、ＢＣＤ－１００、ＪＳ－００１、ＪＮＪ－３２８３、ＭＥＤＩ０６８０、ＡＧＥＮ－２０３４、ＴＳＲ－０４２、Ｓｙｍ－０２１、ＰＦ－０６８０１５９１、ＭＧＤ－０１３、ＭＧＡ－０１２、ＬＺＭ－００９、ＧＬＳ－０１０、ゲノリムズマブ、ＢＩ ７５４０９１、ＡＫ－１０４、ＣＸ－０７２、ＷＢＰ３１５５、ＳＨＲ－１３１６、ＰＤ－Ｌ１阻害剤ミラモレキュール、ＢＭＳ－９３６５５９、Ｍ－７８２４、ＬＹ－３３０００５４、ＫＮ－０３５、ＦＡＺ－０５３、ＣＫ－３０１、又はＣＡ－１７０である、項目１から１８のいずれか１項に記載のＩＡＰアンタゴニスト。
２０．抗ＰＤ－１分子は、ニボルマブ、ペンブロリズマブ、アテゾリズマブ、デュルバルマブ、アベルマブ、ＰＤＲ００１、又はＢＩ ７５４０９１である、項目１９に記載のＩＡＰアンタゴニスト。
２１．前記抗ＰＤ－１分子は、ＰＤ－１又はＰＤ－Ｌ１に対する抗体である、項目１から１９のいずれか１項に記載のＩＡＰアンタゴニスト。
２２．抗ＰＤ－１分子による前記その後の治療は、別の免疫療法、放射線療法、化学療法、化学放射線療法、腫瘍溶解性ウイルス、血管新生抑制療法、標的癌療法を含む、１つ又はそれ以上の他の癌療法と組み合わせられる、項目１から２１のいずれか１項に記載のＩＡＰアンタゴニスト。
２３．１つ又はそれ以上の他の癌療法は、抗ＰＤ－１分子による治療を除外して、前記前治療期の間に使用される、項目１から２２のいずれか１項に記載のＩＡＰアンタゴニスト。
２４．前記ＩＡＰアンタゴニストは、Ｄｅｂｉｏ １１４３、ＧＤＣ－９１７／ＣＵＤＣ－４２７、ＬＣＬ１６１、ＧＤＣ－０１５２、ＴＬ－３２７１１／ビリナパント、ＨＧＳ－１０２９／ＡＥＧ－４０８２６、ＢＩ ８９１０６５、ＡＳＴＸ－６６０、又はＡＰＧ－１３８７である、項目１から２３のいずれか１項に記載のＩＡＰアンタゴニスト。
２５．前記ＩＡＰアンタゴニストは、ＳＭＡＣミメティックである、項目２４に記載のＩＡＰアンタゴニスト。
２６．前記ＩＡＰアンタゴニストは、Ｄｅｂｉｏ １１４３である、項目２５に記載のＩＡＰアンタゴニスト。

実施例
実施例１：頭頸部の切除可能な扁平上皮細胞癌を有する患者におけるシスプラチン（ＣＤＤＰ）あり又はなしのＤｅｂｉｏ １１４３の術前ウィンドウ・オブ・オポチュニティ試験（ＥＵＤＲＡＣＴ ２０１４－００４６５５－３１）
本治験のために、Ｄｅｂｉｏ １１４３は、その遊離塩基で使用し、デンプンと共に製剤し、硬カプセル内に充填した。

本治験の主な目的は、頭頸部の扁平上皮細胞癌を有する患者において、単独の又はシスプラチンと組み合わせたＤｅｂｉｏ １１４３の薬力学的活性を調査することであった。多数の副次的な目的の中で、免疫シグナル伝達に対する可能性として考えられる効果についても検討した。

試験には、口腔、中咽頭、下咽頭、又は喉頭の新たに診断された組織学的に検証済みの扁平上皮細胞癌を有する成人患者を登録した。２週間のスクリーニング期間（－１４から－１日目）の間に、腫瘍生検材料を採取し、分析した。治療は、１日目から１５日目（＋／－２日）とし、２００ｍｇ Ｄｅｂｉｏ １１４３の毎日のｐ．ｏ．投与からなった（１アームにおいて）。この治療期間の終了時に、第２の腫瘍生検材料を採取し、分析し、患者は手術を受けた。

生検材料は、免疫組織化学的方法によって分析した。ｃＩＡＰ１についての染色は、Dako自動染色装置（autostainer automaton）（Agilent）を使用して実行した。ＥＰＲ４６７３マウスｍＡｂ（Abcam）を１／１００希釈で利用し、組織スライドを２０分間抗体に曝露した。スライドの前処理は、EnVision FLEX Target Retrieval Solution, Low pHにより行い、EnVision FLEXシステム（クロモゲン：ＤＡＢ）をシグナルの可視化のために使用した。EnVision Flexシステム及び試薬は、Agilentからのものであった。同じプロトコールをＰＤ－Ｌ１染色に適用した。Ｅ１Ｌ３ＮウサギｍＡｂ（Cell Signaling Technology）を１／５００希釈で使用した。

Ｔ細胞は、Ventana RocheからのＣＤ３ウサギｍＡｂ ２ＧＶ６（すぐに使える溶液として提供される）を使用して同定した。スライドは、Ventana Benchmark Ultra自動装置で処理した。抗体への曝露は２０分間とした。スライドの前処理（６４分間）は、cell conditioning solution CC1（Ventana）により行い、Optiviewシステム（Ventana）（クロモゲン：ＤＡＢ）をシグナルの可視化のために用いた。ＣＤ８及びＣＤ４ Ｔ細胞の染色は、同じプロトコールにより行った。ＣＤ８抗体はＳＰ５７ウサギｍＡｂとし、ＣＤ４抗体はＳＰ３５ウサギｍＡｂとした。両方の抗体はVentana Rocheからのものであり、すぐに使える溶液として提供された。ＰＤ－１検出のために選択した抗体は、これもまたすぐに使える溶液として提供されるＮＡＴ１０５マウスｍＡｂ（Cell Marque）とした。ＰＤ－１検出のためのプロトコールは、抗体曝露及び前処理の時間をそれぞれ１６分間とした以外は、ＣＤ３染色に使用したものと同じとした。

１２人の評価可能な患者から得られたデータについて考察する。図１からわかるように、Ｄｅｂｉｏ １１４３による治療は、ほとんどの患者の腫瘍においてｃＩＡＰ１のレベルを低下させ（対応のあるｔ検定を使用して０．０４５のｐ値）、ＳＭＡＣミメティックの有効腫瘍濃度に届いたことを実証した。治療はまた、腫瘍微小環境におけるＣＤ４＋及びＣＤ８＋Ｔ細胞の数が治療の結果として上昇したという所見によって証拠づけられるように、腫瘍浸潤リンパ球の実質的な増加をももたらした（図２）。データの統計分析は、ＣＤ８＋及びＣＤ４＋ Ｔ細胞の数の平均値が、ともに増加したことを明らかにし、ＣＤ８＋ Ｔ細胞数の増加は、有意であった（対応のあるｔ検定により０．０２０のｐ値）（図２（Ｂ））。ＰＤ－１又はＰＤ－Ｌ１を発現する免疫細胞のパーセンテージは、治療した腫瘍において有意に増加した（図３（Ａ）、０．００２のｐ値及び（Ｂ）、０．００４のｐ値）。ほとんどの腫瘍において、ＰＤ－Ｌ１発現細胞の頻度もまた増加した（図３（Ｃ））。全体として、データは、Ｄｅｂｉｏ １１４３による治療が、ヒト患者における腫瘍微小環境の免疫原性を増強させることを強く示唆する。

実施例２：ＩＡＰ阻害剤Ｄｅｂｉｏ １１４３による動物試験
５グループ（ｎ＝８）の成体雌Ｃ５７ＢＬ／６Ｊマウス（Shanghai Lingchang Bio-Technology Co.から得た）の右下脇腹に１×１０^６細胞の同系結腸癌細胞株ＭＣ３８を接種した。平均腫瘍サイズが約５０ｍｍ^３に届いたら（１日目）、動物は、表１に示されるように、１００ｍｇ／ｋｇの用量のｐ．ｏ．ＳＭＡＣミメティックＤｅｂｉｏ １１４３（Debiopharm）又はビヒクルからなる前治療を受けた。投薬は、７日間（１から７日目）毎日反復した。後日（８日目）、ビヒクル治療グループ及びＤｅｂｉｏ １１４３前治療グループの動物に１０ｍｇ／ｋｇのコントロール抗体ｒＩｇＧ２ｂ（クローン：ＬＴＦ－２、BioXcell）をｉ．ｐ．で与えた。コントロール抗体は、試験の終了まで毎週２回投与した。２つのグループ（ビヒクル及びＤｅｂｉｏ １１４３前治療動物）の別のセットは、１０ｍｇ／ｋｇの抗ＰＤ－Ｌ１抗体（マウスサロゲート抗体、抗マウスＰＤ－Ｌ１、クローン：１０Ｆ．９Ｇ２、BioXcell）をｉ．ｐ．で受けた。投与は、コントロール抗体の場合と同様に毎週２回反復した。Ｄｅｂｉｏ １１４３前治療動物の最終グループは、抗ＰＤ－Ｌ１抗体を受け、毎日のＤｅｂｉｏ １１４３も継続した。腫瘍量及び体重は、毎週２回判断した。腫瘍サイズは、キャリパーを使用して二次元で測定し、容積は、式：Ｖ＝０．５ａ×ｂ^２、ａ及びｂは、それぞれ腫瘍の長径及び短径である、を使用してｍｍ^３で表現した。

実験の結果を図４に示す。Ｄｅｂｉｏ １１４３単独による前治療（すなわち、これに続くコントロール抗体の投与）は、中程度の抗癌効果を有した（グループ２）。Ｄｅｂｉｏ １１４３による前治療のないＰＤ－Ｌ１抗体による治療は、本質的に腫瘍増殖を遅延させなかった（グループ３）。Ｄｅｂｉｏ １１４３による前治療、これに続くＰＤ－Ｌ１抗体による治療の組み合わせは、非常に大きな抗癌効果を有した（グループ４）。治療期間の間のＤｅｂｉｏ １１４３の継続は、小さなさらなる有益性をもたらすように思われた（グループ５）。

これらの動物試験は、抗ＰＤ－１分子によるその後の治療に対する抗腫瘍応答の可能性及び／又は大きさを増強させるための、ＩＡＰアンタゴニストによる前治療の有効性について直接的な証拠を提供する。

実施例３：ＩＡＰ阻害剤ビリナパント及びＬＣＬ１６１による前治療はＭＣ３８モデルにおいて抗ＰＤ－Ｌ１の効能を増強させる
７２匹の成体雌Ｃ５７ＢＬ／６Ｊマウス（Shanghai Lingchang Bio-Technology Co.から得た）の右下脇腹に０．１ｍｌのＰＢＳ中１×１０^６細胞の同系結腸癌細胞株ＭＣ－３８を皮下接種した。腫瘍量は、キャリパーを使用して二次元で毎週３回測定し、容積は、式：Ｖ＝（Ｌ×Ｗ×Ｗ）／２、Ｖは腫瘍量であり、Ｌは腫瘍長（最長の腫瘍寸法）であり、Ｗは腫瘍幅（Ｌに垂直な最長の腫瘍寸法）である、を使用してｍｍ^３で表現した。動物はすべて、「Matched distribution」ランダム化法（StudyDirector（商標）ソフトウェア、バージョン３．１．３９９．１９）に基づいて、５２ｍｍ^３の平均腫瘍サイズを有する９つの異なる試験グループにランダムに割り当て、治療をスタートした（１日目とした）。投薬並びに腫瘍測定及び体重測定は、ラミナーフローキャビネットにおいて行った。

１日目に、一部の動物は、表２に示されるように、隔週のスケジュールで、３０ｍｇ／ｋｇの用量のｉ．ｐ．ＳＭＡＣミメティックビリナパント又はそのビヒクルからなる１週間の前治療を受けた。他の動物は、表２に示されるように、隔週のスケジュールで、７５ｍｇ／ｋｇの用量のｐ．ｏ．ＳＭＡＣミメティックＬＣＬ１６１又はそのビヒクルからなる１週間の前治療を受けた。

８日目に、ビヒクル又はＳＭＡＣミメティック前治療動物を、隔週のｉ．ｐ．の１０ｍｇ／ｋｇのコントロール抗体ｒＩｇＧ２ｂ（クローン：ＬＴＦ－２、BioXcell）又は隔週のｉ．ｐ．の１０ｍｇ／ｋｇの抗ＰＤ－Ｌ１抗体（マウスサロゲート抗体、抗マウスＰＤ－Ｌ１、クローン：１０Ｆ．９Ｇ２、BioXcell）により、試験終了までその後さらに治療した。１週間のビリナパント前治療を受けた１グループの動物及び１週間のＬＣＬ１６１前治療を受けた１グループの動物は、試験終了まで抗ＰＤ－Ｌ１治療の期間の間、それぞれのＳＭＡＣミメティックをそれぞれ継続した。

実験の結果を、ビリナパントについては図５に及びＬＣＬ１６１については図６に示す。

ビリナパント単独による前治療（すなわち、これに続くコントロール抗体の投与）は、中程度の抗癌効果を有した（グループ２）。ビリナパントによる前治療のない抗ＰＤ－Ｌ１抗体による治療は、腫瘍増殖を本質的に遅延させなかった（グループ３）。ビリナパントによる前治療、これに続く抗ＰＤ－Ｌ１抗体による治療の組み合わせは、有意な抗癌効果を有した（グループ４）。治療期間の間のビリナパントの継続は、小さなさらなる有益性をもたらすように思われた（グループ５）。

ＬＣＬ１６１単独による前治療（すなわち、これに続くコントロール抗体の投与）は、中程度の抗癌効果を有した（グループ７）。ＬＣＬ１６１による前治療、これに続く抗ＰＤ－Ｌ１抗体による治療の組み合わせは、ＬＣＬ１６１前治療単独に対して、小さなさらなる有益性を提供するように思われたのに対して（グループ８）、治療期間の間のＬＣＬ１６１の継続は、有意なさらなる有益性を提供した（グループ９）。

これらの動物試験は、抗ＰＤ－Ｌ１分子によるその後の治療に対する抗腫瘍応答の可能性及び／又は大きさを増強させるための、任意のＩＡＰアンタゴニストによる前治療の有効性について直接的な証拠を提供する。

実施例４：３．Ｄｅｂｉｏ １１４３導入はＣＴ２６モデルにおいて抗ＰＤ－１の効能を増強させる
５グループ（ｎ＝８）の成体雌ＢＡＬＢ／ｃマウス（Shanghai Lingchang Bio-Technology Co.から得た）の右下脇腹に０．５×１０^６細胞の同系結腸癌細胞株ＣＴ２６を接種した。平均腫瘍サイズが約５０ｍｍ^３に届いたら（１日目）、動物は、表３ａに示されるように、１００ｍｇ／ｋｇの用量のｐ．ｏ．ＳＭＡＣミメティックＤｅｂｉｏ １１４３（Debiopharm）又はビヒクルからなる前治療を受けた。投薬は、７日間（１から７日目）毎日反復した。表３ｂに示されるように、後日（８日目）、ビヒクル治療グループ及びＤｅｂｉｏ １１４３前治療グループの動物に試験終了まで経口ビヒクルを毎日与えた。２つのグループ（ビヒクル及びＤｅｂｉｏ １１４３前治療動物）の別のセットは、１０ｍｇ／ｋｇの抗ＰＤ－１抗体（マウスサロゲート抗体、抗マウスＰＤ－１、クローン：ＲＭＰ１－１４、BioXcell）をｉ．ｐ．で隔週に受けた。Ｄｅｂｉｏ １１４３前治療動物の最終グループは、抗ＰＤ－１抗体を受け、毎日のＤｅｂｉｏ １１４３も継続した。腫瘍量及び体重は、毎週２回判断した。腫瘍サイズは、キャリパーを使用して二次元で測定し、容積は、式：Ｖ＝０．５ａ×ｂ^２、ａ及びｂは、それぞれ腫瘍の長径及び短径である、を使用してｍｍ^３で表現した。

実験の結果を図７に示す。Ｄｅｂｉｏ １１４３による前治療のない抗ＰＤ－１抗体による治療は、腫瘍増殖を本質的に遅延させなかった（グループ２）。Ｄｅｂｉｏ １１４３単独による前治療（すなわち、これに続く経口ビヒクルの投与）は、中程度の抗癌効果を有した（グループ３）。Ｄｅｂｉｏ １１４３による前治療、これに続く抗ＰＤ－１抗体による治療の組み合わせは、Ｄｅｂｉｏ １１４３前治療単独に対して、小さなさらなる有益性を提供するように思われた（グループ４）。治療期間の間のＤｅｂｉｏ １１４３の継続は、有意なさらなる有益性を提供した（グループ５）。

これらの動物試験は、抗ＰＤ－１分子によるその後の治療に対する抗腫瘍応答の可能性及び／又は大きさを増強させるための、ＩＡＰアンタゴニストによる前治療の有効性について直接的な証拠を提供する。

これらの動物試験は、任意のＩＣＩ分子、特に抗ＰＤ－１分子又は抗ＰＤ－Ｌ１分子によるその後の治療に対する抗腫瘍応答の可能性及び／又は大きさを増強させるための、任意のＩＡＰアンタゴニストによる前治療の有効性について直接的な証拠を提供する。

範囲及び均等性
本明細書における値の範囲の記述は、本明細書において別段の指示がない限り、範囲内にあるそれぞれの別々の値を個々に指すための省略表現の方法として果たすことが単に意図され、それぞれの別々の値は、あたかも個々に本明細書において詳述されるかのように、本明細書に組み込まれる。特に指定のない限り、本明細書において提供される厳密な値はすべて、対応する近似値の代表である（たとえば、特定の因子又は測定値に関して提供されるすべての厳密な例示的な値は、適切な場合、「約」によって修飾される、対応する近似の測定値をも提供すると考えることができる）。

本明細書において提供される任意の及びすべての例又は例示的な表現（たとえば「などのような」）の使用は、単に本発明をより明らかにすることが意図され、別段の指示がない限り、本発明の範囲を限定するものではない。

本明細書における特許文献の引用及び援用は、ただ便宜だけのために行っており、そのような特許文献の妥当性、特許性、及び／又は執行力のいかなる見方をも表すものではない。要素に関してなどのような用語を使用する本発明の任意の態様又は実施形態の本明細書における記載は、特に指定のない限り又は文脈によって明らかに否定されない限り、その特定の要素「からなる」、「から本質的になる」、又は「を実質的に含む」本発明の類似する態様又は実施形態への土台を提供することが意図される（たとえば、特定の要素を含むとして記載される組成物はまた、特に指定のない限り又は文脈によって明らかに否定されない限り、その要素からなる組成物を記載しているとして理解されるべきである）。

本発明は、適用法によって許可される最大限まで本明細書において提供される態様又は請求項において詳述される主題の変形及び等価物をすべて含む。

それぞれの個々の刊行物又は特許文書が参照によって組み込まれることが明確に、個々に示されるかのように、本明細書において引用される刊行物及び特許文献はすべて、それらの全体が参照によって本明細書に組み込まれる。

Claims (25)

1. ヒト対象において癌を治療するための方法における使用のためのアポトーシスタンパク質阻害剤（ＩＡＰ）アンタゴニストであって、前記方法が、
   （ｉ）導入期の間に前記ＩＡＰアンタゴニストを投与することであって、前記導入期の継続時間は、抗ＰＤ－１分子の第１の投与の１から４８日前の範囲から選択されることと、これに続いて
   （ｉｉ）前記導入期の終了後に抗ＰＤ－１分子を投与することと、
   を含む、
   使用のためのアポトーシスタンパク質阻害剤（ＩＡＰ）アンタゴニスト。
2. 前記ヒト対象が、１から２８日間の導入期の間に前記ＩＡＰアンタゴニストを投与され、これに続いて前記抗ＰＤ－１分子が投与される、請求項１に記載の使用のためのＩＡＰアンタゴニスト。
3. 前記ヒト対象が、５から２８日間の導入期の間に前記ＩＡＰアンタゴニストを投与され、これに続いて前記抗ＰＤ－１分子が投与される、請求項１又は２に記載の使用のためのＩＡＰアンタゴニスト。
4. 前記ＩＡＰアンタゴニストが、前記導入期の間の１又はそれ以上の日、投与されない、請求項１から３のいずれか１項に記載の使用のためのＩＡＰアンタゴニスト。
5. 前記ＩＡＰアンタゴニストの投与が、前記抗ＰＤ－１分子による投与がスタートした後、継続されるか、又は
   別のＩＡＰアンタゴニストが、前記抗ＰＤ－１分子と同時に投与される、請求項１から４のいずれか１項に記載の使用のためのＩＡＰアンタゴニスト。
6. 前記癌が、１０％以上の治療患者において抗ＰＤ－１分子による治療に対して応答性であることが知られている癌である、請求項１から５のいずれか１項に記載の使用のためのＩＡＰアンタゴニスト。
7. 前記癌が、頭頸部癌、黒色腫、尿路上皮癌、非小細胞肺癌、原発部位がわからない高頻度マイクロサテライト不安定性（ＭＳＩ）腫瘍、又は腎臓癌である、請求項１から５のいずれか１項に記載の使用のためのＩＡＰアンタゴニスト。
8. 前記癌が、抗ＰＤ－１分子による治療に対する奏効率が１０％以下、好ましくは５％以下である癌である、請求項１から５のいずれか１項に記載の使用のためのＩＡＰアンタゴニスト。
9. 前記癌が、膵癌、結腸直腸癌、多発性骨髄腫、小細胞肺癌、肝臓がん、又は卵巣癌である、請求項１から５のいずれか１項に記載の使用のためのＩＡＰアンタゴニスト。
10. 前記癌が、免疫原性が不十分であると判断されている、請求項１から９のいずれか１項に記載の使用のためのＩＡＰアンタゴニスト。
11. 前記判断が、前記導入期の前に採取された患者の生物学的サンプルにおける免疫原性のマーカーの分析、及びマーカーの存在、発現レベル、又は導き出されたスコアが所定の閾値に到達しないという所見からなる、請求項１０に記載の使用のためのＩＡＰアンタゴニスト。
12. 前記マーカーが、癌細胞及び／又は免疫細胞上に発現されるＰＤ－Ｌ１である、請求項１１に記載の使用のためのＩＡＰアンタゴニスト。
13. 前記マーカーが、腫瘍浸潤リンパ球、好ましくはＣＤ８＋細胞又は腫瘍中の遺伝子変異量である、請求項１１に記載の使用のためのＩＡＰアンタゴニスト。
14. 導入期の間の前記ＩＡＰアンタゴニストの投与が、前記癌が高免疫原性であることが判断されるまで継続される、請求項１から１３のいずれか１項に記載の使用のためのＩＡＰアンタゴニスト。
15. 前記判断が、前記導入期の後に採取された患者の生物学的サンプルにおける免疫原性のマーカーの分析、及びマーカーの存在、発現レベル、又は導き出されたスコアが所定の閾値を超えるという所見からなる、請求項１４に記載の使用のためのＩＡＰアンタゴニスト。
16. 前記マーカーが、癌細胞及び／又は免疫細胞上に発現されるＰＤ－Ｌ１である、請求項１５に記載の使用のためのＩＡＰアンタゴニスト。
17. 前記マーカーが、腫瘍浸潤リンパ球、好ましくはＣＤ８＋細胞又は腫瘍中の遺伝子変異量である、請求項１５に記載の使用のためのＩＡＰアンタゴニスト。
18. 前記生物学的サンプルが、腫瘍又は液体生検材料である、請求項１１から１３及び１５から１７のいずれか１項に記載の使用のためのＩＡＰアンタゴニスト。
19. 前記抗ＰＤ－１分子が、ニボルマブ、ペンブロリズマブ、アテゾリズマブ、デュルバルマブ、アベルマブ、ＰＤＲ００１、ＩＢＩ－３０８、セミプリマブ、カムレリズマブ、ＢＧＢ－Ａ３１７、ＢＣＤ－１００、ＪＳ－００１、ＪＮＪ－３２８３、ＭＥＤＩ０６８０、ＡＧＥＮ－２０３４、ＴＳＲ－０４２、Ｓｙｍ－０２１、ＰＦ－０６８０１５９１、ＭＧＤ－０１３、ＭＧＡ－０１２、ＬＺＭ－００９、ＧＬＳ－０１０、ゲノリムズマブ、ＢＩ ７５４０９１、ＡＫ－１０４、ＣＸ－０７２、ＷＢＰ３１５５、ＳＨＲ－１３１６、ＰＤ－Ｌ１阻害剤ミラモレキュール、ＢＭＳ－９３６５５９、Ｍ－７８２４、ＬＹ－３３０００５４、ＫＮ－０３５、ＦＡＺ－０５３、ＣＫ－３０１、又はＣＡ－１７０である、請求項１から１８のいずれか１項に記載の使用のためのＩＡＰアンタゴニスト。
20. 前記抗ＰＤ－１分子が、ニボルマブ、ペンブロリズマブ、アテゾリズマブ、デュルバルマブ、アベルマブ、ＰＤＲ００１、又はＢＩ ７５４０９１である、請求項１９に記載の使用のためのＩＡＰアンタゴニスト。
21. 前記抗ＰＤ－１分子が、ＰＤ－１又はＰＤ－Ｌ１に対する抗体である、請求項１から１９のいずれか１項に記載の使用のためのＩＡＰアンタゴニスト。
22. 前記抗ＰＤ－１分子の投与が、別の免疫療法、放射線療法、化学療法、化学放射線療法、腫瘍溶解性ウイルス、血管新生抑制療法、及び／又は標的癌療法を含む、１つ又はそれ以上の他の癌療法と組み合わせられる、請求項１から２１のいずれか１項に記載の使用のためのＩＡＰアンタゴニスト。
23. 前記ＩＡＰアンタゴニストが、第２ミトコンドリア由来カスパーゼ活性化因子（ＳＭＡＣ）ミメティックである、請求項１から２２のいずれか１項に記載の使用のためのＩＡＰアンタゴニスト。
24. 前記導入期の間に投与される前記ＩＡＰアンタゴニストが、Ｄｅｂｉｏ １１４３、ＧＤＣ－９１７／ＣＵＤＣ－４２７、ＬＣＬ１６１、ＧＤＣ－０１５２、ＴＬ－３２７１１／ビリナパント、ＨＧＳ－１０２９／ＡＥＧ－４０８２６、ＢＩ ８９１０６５、ＡＳＴＸ－６６０、又はＡＰＧ－１３８７であり、好ましくは、前記ＩＡＰアンタゴニストは、Ｄｅｂｉｏ １１４３、ＬＣＬ１６１、又はビリナパントである、請求項１から２３のいずれか１項に記載の使用のためのＩＡＰアンタゴニスト。
25. 前記ＩＡＰアンタゴニストが、Ｄｅｂｉｏ １１４３である、請求項２４に記載の使用のためのＩＡＰアンタゴニスト。