JP2024038951A - Ａｋｋｅｒｍａｎｓｉａ属細菌増殖促進剤 - Google Patents
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Abstract
【課題】 Akkermansia属細菌を増殖促進することができるAkkermansia属細菌増殖促進剤及びそれを配合した腸内環境改善用組成物を提供する。【解決手段】 セラミド類を含有するAkkermansia属細菌増殖促進剤。セラミド類は、パイナップル由来セラミドまたは米由来セラミドであることことが好ましい。Akkermansia属細菌は、Akkermansia muciniphilaであることが好ましい。Akkermansia属細菌増殖促進剤は、抗肥満用であることが好ましい。前記Akkermansia属細菌増殖促進剤を配合した腸内環境改善用組成物。【選択図】 図１
Description
本発明はAkkermansia属細菌増殖促進剤に関する。さらに詳しく言うと、本発明は、セラミドを含有するAkkermansia属細菌増殖促進剤及びそれを配合した腸内環境改善用組成物に関する。
Akkermansia属細菌は、成人のヒト腸内に生息する嫌気性菌である。
Akkermansia属細菌は多様な健康増進効果を有することが知られており、肥満、炎症、アレルギー、糖尿病、肝機能障害、更年期障害、癌等に対して抑制、緩和、改善、治療効果を有する。
しかし、Akkermansia属細菌は、成人ヒト腸内に豊富に存在するとは言い難く、肥満症などAkkermansia属細菌の効果が期待される人ほど保有率が低い。また、加齢によって腸内保有率が減少する傾向がある。
そのため、同細菌を増殖促進させることによって腸内の相対的存在量を増加させ、それを維持することが求められている。
Akkermansia属細菌は多様な健康増進効果を有することが知られており、肥満、炎症、アレルギー、糖尿病、肝機能障害、更年期障害、癌等に対して抑制、緩和、改善、治療効果を有する。
しかし、Akkermansia属細菌は、成人ヒト腸内に豊富に存在するとは言い難く、肥満症などAkkermansia属細菌の効果が期待される人ほど保有率が低い。また、加齢によって腸内保有率が減少する傾向がある。
そのため、同細菌を増殖促進させることによって腸内の相対的存在量を増加させ、それを維持することが求められている。
これまでにも、腸内における同細菌の存在量を増加、維持するための技術が報告されている。例えば、ポリフェノール類（特許文献１）、アスタキサンチン（特許文献２）ペプチド類（特許文献３）、ビタミン類（特許文献４）、ムコ多糖類（特許文献５）を用いてAkkermansia属細菌を増加させる方法が報告されている。
しかしながら、これらの文献に記載の素材は、Akkermansia属細菌への特異性があまりないという問題があった。
したがって、善玉菌であるAkkermansia属細菌への特異性を有し、同菌を増殖促進できる素材を用いる増殖促進剤の開発が期待される。
しかしながら、これらの文献に記載の素材は、Akkermansia属細菌への特異性があまりないという問題があった。
したがって、善玉菌であるAkkermansia属細菌への特異性を有し、同菌を増殖促進できる素材を用いる増殖促進剤の開発が期待される。
このような状況下で、本発明は、Akkermansia属細菌を増殖促進することができるAkkermansia属細菌増殖促進剤及びそれを配合した腸内環境改善用組成物を提供することを課題とする。
本発明者らは、Akkermansia属細菌に対し約１５００種以上の素材を添加して同菌の増殖促進作用の評価を行ったところ、セラミド類がAkkermansia属細菌に対して同菌を著しく増殖促進し得ることを見出し、本発明を完成させた。
すなわち、本発明は、下記のAkkermansia属細菌増殖促進剤及びそれを含有する腸内環境改善用組成物を提供するものである。
（１）セラミド類を含有するAkkermansia属細菌増殖促進剤。
（２）セラミド類が、パイナップル由来セラミドまたは米由来セラミドである上記（１）に記載のAkkermansia属細菌増殖促進剤。
（３）Akkermansia属細菌が、Akkermansia muciniphilaである上記（１）または（２）に記載のAkkermansia属細菌増殖促進剤。
（４）抗肥満用であることを特徴とする上記（１）～（３）のいずれかに記載のAkkermansia属細菌増殖促進剤。
（５）上記（１）～（４）のいずれかに記載のAkkermansia属細菌増殖促進剤を配合した腸内環境改善用組成物。
（１）セラミド類を含有するAkkermansia属細菌増殖促進剤。
（２）セラミド類が、パイナップル由来セラミドまたは米由来セラミドである上記（１）に記載のAkkermansia属細菌増殖促進剤。
（３）Akkermansia属細菌が、Akkermansia muciniphilaである上記（１）または（２）に記載のAkkermansia属細菌増殖促進剤。
（４）抗肥満用であることを特徴とする上記（１）～（３）のいずれかに記載のAkkermansia属細菌増殖促進剤。
（５）上記（１）～（４）のいずれかに記載のAkkermansia属細菌増殖促進剤を配合した腸内環境改善用組成物。
本発明によれば、安全な素材を用いて、Akkermansia属細菌を増殖促進できる増殖促進剤及びそれを配合した腸内環境改善用組成物が得られる。
以下、本発明について、例を挙げながら詳しく説明する。
本発明は、セラミド類を含有するAkkermansia属細菌増殖促進剤及びそれを配合した腸内環境改善用組成物に関する。
本発明におけるAkkermansia属細菌は、特に限定されないが、例えば、Akkermansia muciniphilaが好ましい。
本発明におけるAkkermansia属細菌は、特に限定されないが、例えば、Akkermansia muciniphilaが好ましい。
本発明におけるセラミド類はスフィンゴ脂質の一種であり、動物、植物、ヒトの細胞膜に存在する。本発明においては、パイナップル由来セラミドまたは米由来セラミドのような植物セラミドを用いることが好ましい。
パイナップル由来セラミドは、パイナップル（Ananas comosus）の可食部を、溶媒を用いて抽出して得られるセラミドであることが好ましい。
米由来セラミドは、イネ科イネ(Oryza sativa Linne)の種子から得られる米ぬかや米胚芽を、溶媒を用いて抽出して得られるセラミドであることが好ましい。
パイナップル由来セラミドも米由来セラミドも安全性において問題のない素材である。
本発明において、これらのセラミドは、いずれか一方を用いてもよいが、両者を同時に用いてもよい。
米由来セラミドは、イネ科イネ(Oryza sativa Linne)の種子から得られる米ぬかや米胚芽を、溶媒を用いて抽出して得られるセラミドであることが好ましい。
パイナップル由来セラミドも米由来セラミドも安全性において問題のない素材である。
本発明において、これらのセラミドは、いずれか一方を用いてもよいが、両者を同時に用いてもよい。
本発明のAkkermansia属細菌増殖促進剤は、腸内に存在するAkkermansia属細菌を増殖促進させ、維持することにより腸内環境を改善することができる。
本発明のAkkermansia属細菌増殖促進剤により改善される疾患や症状としては、例えば、肥満症、炎症、アレルギー、肝機能障害、更年期障害、癌等などが例として挙げられるが、特に肥満症に対して有効であり、抗肥満用として用いることができる。肥満症に対しては、同菌による腸内環境改善によって、内臓脂肪・皮下脂肪の量や腹部周囲径を低減させることができ、好ましい。
また、本発明のAkkermansia属細菌増殖促進剤は、痩身願望を有する者の使用にも適しており、無理なダイエットをせずとも、肥満症と同様に、内臓脂肪・皮下脂肪・腹部総脂肪の量や腹部周囲径が低減され、好ましい。
本発明のAkkermansia属細菌増殖促進剤は、Akkermansia属細菌のプロバイオティクス菌としての利用にとって非常に有用である。
本発明のAkkermansia属細菌増殖促進剤により改善される疾患や症状としては、例えば、肥満症、炎症、アレルギー、肝機能障害、更年期障害、癌等などが例として挙げられるが、特に肥満症に対して有効であり、抗肥満用として用いることができる。肥満症に対しては、同菌による腸内環境改善によって、内臓脂肪・皮下脂肪の量や腹部周囲径を低減させることができ、好ましい。
また、本発明のAkkermansia属細菌増殖促進剤は、痩身願望を有する者の使用にも適しており、無理なダイエットをせずとも、肥満症と同様に、内臓脂肪・皮下脂肪・腹部総脂肪の量や腹部周囲径が低減され、好ましい。
本発明のAkkermansia属細菌増殖促進剤は、Akkermansia属細菌のプロバイオティクス菌としての利用にとって非常に有用である。
本発明のAkkermansia属細菌増殖促進剤は、そのまま単独で用いることができるが、Akkermansia属細菌を増殖促進し得るその他の物質と組み合わせて用いてもよい。
本発明のAkkermansia属細菌増殖促進剤を配合した腸内環境改善用組成物（以下、腸内環境改善用組成物）は、食品組成物、医薬組成物、飼料組成物として用いることができる。食品組成物は、特に限定されないが、健康食品、サプリメント、美容用食品、栄養補助食品、機能性食品、特定保健用食品などとして使用することができる。
また、本発明のAkkermansia属細菌増殖促進剤は、他の機能を有する組成物中に配合してもよい。
本発明の腸内環境改善用組成物の形態、剤型は限定されず、カプセル、錠剤、粉剤、顆粒、ゼリー剤、ドリンク剤、液剤等いずれの形態、剤型としてもよい。
また、本発明のAkkermansia属細菌増殖促進剤は、他の機能を有する組成物中に配合してもよい。
本発明の腸内環境改善用組成物の形態、剤型は限定されず、カプセル、錠剤、粉剤、顆粒、ゼリー剤、ドリンク剤、液剤等いずれの形態、剤型としてもよい。
本発明の腸内環境改善用組成物は、食品組成物、医薬組成物、飼料組成物の製造において通常使用される栄養成分、賦形剤、添加物などいかなる原料も適宜用いることができる。
本発明の腸内環境改善用組成物に配合することができる栄養成分としては、ビタミン類、ミネラル類、タンパク質、脂質、糖質等を適宜用いることができ、その種類や配合量は限定されない。
本発明の腸内環境改善用組成物に配合することができる賦形剤としては、例えば、水、精製水、アルコール、グリセリン、乳糖、デンプン、デキストリン、白糖、沈降シリカ、蜂蜜等を用いることができ、その種類や配合量は限定されない。
本発明の腸内環境改善用組成物に配合することができる添加物としては、例えば、乳化剤、凝固剤、軟化剤、ｐＨ調整剤、酵素、香料、光沢剤、苦味剤、調味料等を用いることができ、その種類や配合量は限定されない。
本発明の腸内環境改善用組成物に配合することができる賦形剤としては、例えば、水、精製水、アルコール、グリセリン、乳糖、デンプン、デキストリン、白糖、沈降シリカ、蜂蜜等を用いることができ、その種類や配合量は限定されない。
本発明の腸内環境改善用組成物に配合することができる添加物としては、例えば、乳化剤、凝固剤、軟化剤、ｐＨ調整剤、酵素、香料、光沢剤、苦味剤、調味料等を用いることができ、その種類や配合量は限定されない。
本発明の腸内環境改善用組成物は、本発明のAkkermansia属細菌増殖促進剤とは別のAkkermansia属細菌増殖促進物質や、その他のいかなる医薬成分をも適宜配合することができる。
本発明のAkkermansia属細菌増殖促進剤の１日当たりの摂取、投与量は、特に限定されないが、セラミドの量で、０．１ｍｇ～１００ｍｇ、さらに、０．６ｍｇ～６．０ｍｇの範囲であることが好ましい。
ただし、１日当たりの摂取量は、対象者の症状、年齢、体重、性別などにより適宜変更することができる。
本発明の腸内環境改善用組成物においても、それに含まれるAkkermansia属細菌増殖促進剤の１日当たりの摂取量が上記と同じ量となるようにセラミド類を配合することが好ましい。
ただし、１日当たりの摂取量は、対象者の症状、年齢、体重、性別などにより適宜変更することができる。
本発明の腸内環境改善用組成物においても、それに含まれるAkkermansia属細菌増殖促進剤の１日当たりの摂取量が上記と同じ量となるようにセラミド類を配合することが好ましい。
なお、本発明のAkkermansia属細菌増殖促進剤及びそれを配合した腸内環境改善用組成物の製造方法は、特に限定されず、慣用のいかなる方法で製造してもよい。
以下、実施例を挙げて本発明を詳しく説明する。実施例において、単に「％」と記載するものはすべて「質量％」を意味する。
（実施例１）
本実施例では、セラミド類によるAkkermansia muciniphilaの増殖促進作用について試験、評価を行った。
本実施例では、セラミド類によるAkkermansia muciniphilaの増殖促進作用について試験、評価を行った。
（１）試験試料
Akkermansia属細菌は、国立研究開発法人理化学研究所バイオリソースセンター微生物材料開発室より分譲されたAkkermansia muciniphila JCM30893株を使用した。
Akkermansia属細菌は、国立研究開発法人理化学研究所バイオリソースセンター微生物材料開発室より分譲されたAkkermansia muciniphila JCM30893株を使用した。
使用したセラミド類は下記の通りである。
・パイナップル由来セラミド
品名：ブライトニングパイン乳化物、Ｌｏｔ番号：８１１２５０２８、原料：パイナップル食用部分を用い、水とエタノールで抽出したもの。規格成分：グルコシルセラミド１.１８％、フィトール０.０６２％を含有。丸善製薬社製
・米由来セラミド
品名：オリザセラミド（登録商標）－ＷＳＰ、Ｌｏｔ番号：Ｑ－６２５、原料：イネ科イネ(Oryza sativa Linne)の種子由来の米ぬか及び米胚芽からヘキサン及びエタノールで抽出したもの。規格成分：スフィンゴ糖脂質３.１％を含有。米由来スフィンゴ脂質は長鎖塩基スフィンゴシンに脂肪酸が酸アミド結合した疎水性セラミドが基本骨格となっている。オリザ油化社製
・パイナップル由来セラミド
品名：ブライトニングパイン乳化物、Ｌｏｔ番号：８１１２５０２８、原料：パイナップル食用部分を用い、水とエタノールで抽出したもの。規格成分：グルコシルセラミド１.１８％、フィトール０.０６２％を含有。丸善製薬社製
・米由来セラミド
品名：オリザセラミド（登録商標）－ＷＳＰ、Ｌｏｔ番号：Ｑ－６２５、原料：イネ科イネ(Oryza sativa Linne)の種子由来の米ぬか及び米胚芽からヘキサン及びエタノールで抽出したもの。規格成分：スフィンゴ糖脂質３.１％を含有。米由来スフィンゴ脂質は長鎖塩基スフィンゴシンに脂肪酸が酸アミド結合した疎水性セラミドが基本骨格となっている。オリザ油化社製
（２）増殖促進作用の評価
０.５％のムチン（Ｍ２３７８：シグマ社製）を添加したブレインハートインフィージョン（ＢＨＩ）培地（ＢＤ２３７５００:ベクトン・ディッキンソン社製）１０mLに、Akkermansia muciniphilaを植菌後、２４時間前培養を行った。
本培養には、パイナップル由来セラミドと米由来セラミドをそれぞれ終濃度１５０μg/ml、５００μg/mlとなるように添加したＢＨＩ培地１０mLを使用した。被験物質の溶解にはジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）を使用した。コントロール（陰性対照）にはＤＭＳＯを終濃度０.５％となるように添加したＢＨＩ培地を用い、陽性対照にはムチンを終濃度０.５％となるように添加したＢＨＩ培地を用いた。次いで、超微量分光光度計（ＮａｎｏＤｒｏｐ：サーモフィッシャーサイエンティフィック社製）を用いて前培養液の６００ｎｍ（ＯＤ６００）の光学密度を計測し、初期濁度が０.０３になるように前培養液の菌体を各本培養液に添加し、本培養を開始した。作業はすべて嫌気ワークステーションコンセプト４００（ラスキン社製）内の嫌気的条件下で、３７℃で実施した。
０.５％のムチン（Ｍ２３７８：シグマ社製）を添加したブレインハートインフィージョン（ＢＨＩ）培地（ＢＤ２３７５００:ベクトン・ディッキンソン社製）１０mLに、Akkermansia muciniphilaを植菌後、２４時間前培養を行った。
本培養には、パイナップル由来セラミドと米由来セラミドをそれぞれ終濃度１５０μg/ml、５００μg/mlとなるように添加したＢＨＩ培地１０mLを使用した。被験物質の溶解にはジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）を使用した。コントロール（陰性対照）にはＤＭＳＯを終濃度０.５％となるように添加したＢＨＩ培地を用い、陽性対照にはムチンを終濃度０.５％となるように添加したＢＨＩ培地を用いた。次いで、超微量分光光度計（ＮａｎｏＤｒｏｐ：サーモフィッシャーサイエンティフィック社製）を用いて前培養液の６００ｎｍ（ＯＤ６００）の光学密度を計測し、初期濁度が０.０３になるように前培養液の菌体を各本培養液に添加し、本培養を開始した。作業はすべて嫌気ワークステーションコンセプト４００（ラスキン社製）内の嫌気的条件下で、３７℃で実施した。
菌の増殖促進は２４時間培養後の菌液を用いて、生菌由来ＡＴＰ量とＯＤ６００の２つの指標を用い、下記の方法で評価した。
生菌由来ＡＴＰ量については、本培養液１００μLを96-Well Flat-Bottom Microplate（白色：ヌンク社製）に分取し、BacTiter-Glo（登録商標）Microbial Cell Viability Assay（プロメガ社製）を用い、添付の説明書に従って操作を行い、発光プレートリーダー（Infinite 200 PRO：テカン社製）で生菌由来ＡＴＰ産生量を測定し、コントロールと各セラミド２種を比較して増殖促進を判定した。
ＯＤ６００については、ＮａｎｏＤｒｏｐ（サーモフィッシャーサイエンティフィック社製）で測定した。
図１に生菌由来ＡＴＰ産生量を示し、図２にＯＤ６００を示す。図１、２におけるグラフ及び数値は、コントロールを用いた試料に対するAkkermansia属細菌の増殖促進割合を示す。
生菌由来ＡＴＰ量については、本培養液１００μLを96-Well Flat-Bottom Microplate（白色：ヌンク社製）に分取し、BacTiter-Glo（登録商標）Microbial Cell Viability Assay（プロメガ社製）を用い、添付の説明書に従って操作を行い、発光プレートリーダー（Infinite 200 PRO：テカン社製）で生菌由来ＡＴＰ産生量を測定し、コントロールと各セラミド２種を比較して増殖促進を判定した。
ＯＤ６００については、ＮａｎｏＤｒｏｐ（サーモフィッシャーサイエンティフィック社製）で測定した。
図１に生菌由来ＡＴＰ産生量を示し、図２にＯＤ６００を示す。図１、２におけるグラフ及び数値は、コントロールを用いた試料に対するAkkermansia属細菌の増殖促進割合を示す。
（比較例１）
比較例１として、一般的なプレバイオティクスであるオリゴ糖（ミルクオリゴ糖）を用いて、実施例１と同じ方法により試験を行い、生菌由来ＡＴＰ産生量を測定した。結果を図３に示す。図３におけるグラフ及び数値は、コントロールを用いた試料に対するAkkermansia属細菌の増殖促進割合を示す。
比較例１として、一般的なプレバイオティクスであるオリゴ糖（ミルクオリゴ糖）を用いて、実施例１と同じ方法により試験を行い、生菌由来ＡＴＰ産生量を測定した。結果を図３に示す。図３におけるグラフ及び数値は、コントロールを用いた試料に対するAkkermansia属細菌の増殖促進割合を示す。
（３）結果
図１、図２に示すように、生菌由来ＡＴＰ産生量及びＯＤ６００のいずれの指標においても、パイナップル由来セラミドまたは米由来セラミドを添加した試料は、コントロールに比べて、Akkermansia属細菌の著しい増殖促進作用が確認された。
それに対して、図３に示されるように、一般的なプレバイオティクスであるミルクオリゴ糖によっては、Akkermansia属細菌増殖促進作用はほとんど認められなかった。
図１、図２に示すように、生菌由来ＡＴＰ産生量及びＯＤ６００のいずれの指標においても、パイナップル由来セラミドまたは米由来セラミドを添加した試料は、コントロールに比べて、Akkermansia属細菌の著しい増殖促進作用が確認された。
それに対して、図３に示されるように、一般的なプレバイオティクスであるミルクオリゴ糖によっては、Akkermansia属細菌増殖促進作用はほとんど認められなかった。
（処方例１）
表１に示す処方で、ダイコンプレス式のハードカプセル充填機を用い常法に従いハードカプセル（サイズ２号）を製造した。
表１に示す処方で、ダイコンプレス式のハードカプセル充填機を用い常法に従いハードカプセル（サイズ２号）を製造した。
表１の処方により、ハードカプセル剤を問題なく製造することができた。
Claims (5)
- セラミド類を含有するAkkermansia属細菌増殖促進剤。
- セラミド類が、パイナップル由来セラミドまたは米由来セラミドであることを特徴とする請求項１に記載のAkkermansia属細菌増殖促進剤
- Akkermansia属細菌が、Akkermansia muciniphilaであることを特徴とする請求項１に記載のAkkermansia属細菌増殖促進剤。
- 抗肥満用であることを特徴とする請求項１に記載のAkkermansia属細菌増殖促進剤。
- 請求項１に記載のAkkermansia属細菌増殖促進剤を配合した腸内環境改善用組成物。
Priority Applications (1)
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|---|---|---|---|
| JP2022143341A JP2024038951A (ja) | 2022-09-08 | 2022-09-08 | Ａｋｋｅｒｍａｎｓｉａ属細菌増殖促進剤 |
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