JP2023548597A

JP2023548597A - がんを処置するための可溶性インターロイキン－７受容体（ｓＩＬ７Ｒ）変調療法

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Publication number: JP2023548597A
Application number: JP2023527326A
Authority: JP
Inventors: エー．ガルシア－ブランコ，マリアーノ; ガラルザ－ムノズ，ガディエル
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 2020-10-29
Filing date: 2021-10-29
Publication date: 2023-11-17
Also published as: WO2022094320A3; WO2022094320A2; EP4237436A2

Abstract

本発明は、自己免疫障害またはがんの処置を、それを必要とする被験体において行なうための組成物および方法を含み、該方法は：エクソン６のスプライシングに影響を及ぼすインターロイキン－７受容体（ＩＬ７Ｒ）プレｍＲＮＡの相補的配列に特異的に結合するオリゴヌクレオチドを含む組成物を有効量で投与することを含み、ＳＭ－ＡＳＯはＩＬ７ＲプレｍＲＮＡのエクソン６排除を減少または増加させ、それぞれＩＬ７Ｒの可溶性アイソフォーム（ｓＩＬ７Ｒ）の発現を減少または増加させる。一部の特定の実施形態では、該オリゴヌクレオチドがアンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳＯ）またはスプライス変調アンチセンスオリゴヌクレオチド（ＳＭ－ＡＳＯ）である。【選択図】図１

Description

連邦政府による資金提供を受けた研究の記載
本発明は、ＮＩＨによって付与されたＦ３２－ＮＳ０８７８９９での政府の補助を伴ってなされた。米国政府は、本発明において一定の権利を有する。

本発明は、一般に、自己免疫疾患（例えば、多発性硬化症）またはがんを処置するための、それぞれ可溶性ＩＬ７Ｒ（ｓＩＬ７Ｒ）を減少または増加させる新規な治療薬の分野に関する。

本発明は、自己免疫経路がｓＩＬ７Ｒの高値発現によって駆動されるという知見に基づいており、したがって本発明の範囲を限定するものではないが、その背景を一例として多発性硬化症との関連において記載する。

多発性硬化症（ＭＳ）は、軸索脱髄、神経細胞死および進行性の神経機能障害に至る中枢神経系（ＣＮＳ）内の神経細胞のミエリン鞘に対する自己反応性免疫細胞媒介性の損傷を特徴とする慢性自己免疫疾患である。これまで、この疾患に対する治療法はなく、利用可能な処置は疾患進行を遅らせることしかできず、多くの場合、免疫系を全身的に抑制することによるものであり、重度または致命的となる可能性がある多くの有害な副作用が引き起こされる。この全身性の免疫抑制は現下の治療薬の大きな弱みである。

ＭＳに至る免疫学的寛容の破綻は、環境因子と遺伝因子間の複雑な相互作用から生じると考えられている。この見識では、個体の遺伝的背景が自己反応性リンパ球の生存を許容する環境を作り出している可能性があり、続いてこれが、通常、感染性因子の形態の環境性誘発因子の存在によって活性化されている可能性がある。

本発明者らおよび他者は、これまでに、インターロイキン－７受容体（ＩＬ７Ｒ）遺伝子のエクソン６内のバリアントｒｓ６８９７９３２（Ｃ／Ｔ、ここで、Ｃはリスク対立遺伝子である）がＭＳの高リスクと強く関連していることを示した（Ｇｒｅｇｏｒｙｅｔａｌ．，２００７；ＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌＭｕｌｔｉｐｌｅＳｃｌｅｒｏｓｉｓＧｅｎｅｔｉｃｓｅｔａｌ．，２００７；Ｌｕｎｄｍａｒｋｅｔａｌ．，２００７）。さらに、本発明者らは、このバリアントのリスク‘Ｃ’対立遺伝子がこのエクソンのスキッピングを増大させ（Ｅｖｓｙｕｋｏｖａｅｔａｌ．，２０１３；Ｇｒｅｇｏｒｙｅｔａｌ．，２００７）、ｓＩＬ７Ｒの上方調節をもたらすことを示した（Ｈｏｅｅｔａｌ．，２０１０；Ｌｕｎｄｓｔｒｏｍｅｔａｌ．，２０１３）。重要なことに、ｓＩＬ７Ｒは、おそらくサイトカインＩＬ７のバイオアベイラビリティおよび／または生理活性を増強することにより、ＭＳの実験的自己免疫性脳脊髄炎（ＥＡＥ）マウスモデルにおいてこの疾患の臨床的進行および重症度を悪化させることが示されている（Ｌｕｎｄｓｔｒｏｍｅｔａｌ．，２０１３）。ｓＩＬ７ＲによるこのＩＬ７の増強によりＣＤ４^＋Ｔ細胞およびＣＤ８^＋Ｔ細胞の両方の恒常性拡大増殖が促進される（Ｌｕｎｄｓｔｒｏｍｅｔａｌ．，２０１３）。多発性硬化症およびおそらく自己免疫全般の発症機序におけるｓＩＬ７Ｒの役割をさらに裏付けることに、高値レベルのｓＩＬ７Ｒタンパク質またはｓＩＬ７ＲＲＮＡが多発性硬化症（ＭｃＫａｙｅｔａｌ．２００８）、関節リウマチ（Ｂａｄｏｔｅｔａｌ．，２０１１）、１型糖尿病（Ｍｏｎｔｉｅｔａｌ．，２０１３）および全身性エリテマトーデス（Ｌａｕｗｅｒｙｓｅｔａｌ．，２０１４）の患者において報告されており、ここで、ｓＩＬ７Ｒのレベルは疾患活動性と相関している。総合すると、このようなデータにより、高値レベルのｓＩＬ７ＲはＭＳおよび自己免疫の発症機序と関連づけられ、ＩＬ７Ｒエクソン６の選択的スプライシングはＭＳおよび自己免疫の新規な治療標的であると位置づけられる。

これらの参考文献により、ｓＩＬ７ＲはＴ細胞の拡大増殖を増大させ、がん細胞を死滅させるために必要とされるものと同様の自己反応性応答の促進をもたらすことが教示される。したがって、ｓＩＬ７Ｒの上方調節は、単独療法薬としてであれ、他の抗がん剤との併用療法薬としてであれ、がんに対抗するための新規な免疫療法として使用され得、がんの処置のためのｓＩＬ７Ｒの上方調節を目的とする新規な組成物および方法の必要性が依然として存在している。

がん免疫学は急速に成長している分野であり、これまで難治性のがんを有する患者にとって大いに有望である；しかしながら、免疫療法のインパクトは、ほとんどのがんおよび個体で奏効率が非常に低いことにより限定的となっている。免疫チェックポイント阻害剤などの免疫療法薬は、いろいろな型のがんを有効に根絶することが示されているが、残念ながら、その奏効は患者間で異なり、少数割合の患者しか寛解に到達していない。したがって、抗がん免疫を追加刺激するために既存の免疫療法薬と相乗作用し得る改善された免疫療法免疫療法薬の開発の必要性が存在している。かかる薬物の一例は、ｓＩＬ７Ｒの発現を増大させ、非限定的な一例として、所与の患者の奏効レベルおよび患者間の奏効率を高めることができ得るものである。

アンチセンスオリゴヌクレオチド療法は、特定の疾患の原因となる特定の遺伝子の遺伝子配列を、標的配列に相補的な短鎖オリゴヌクレオチドを用いて標的化する。典型的には、メッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）、プレｍＲＮＡ、ｍｉＲＮＡ、非コードＲＮＡまたは他の型のＲＮＡ内の標的配列に結合して標的ＲＮＡを変調させ、薬理学応答を誘導する一本鎖または二本鎖の核酸（ＤＮＡ、ＲＮＡ、ハイブリッドまたは化学的類似体）を設計する。スプライス変調アンチセンスオリゴヌクレオチド（ＳＭ－ＡＳＯ）の場合、得られるｍＲＮＡのエクソン含有量を加減するプレｍＲＮＡ内の特定の配列に結合する相補的核酸が設計される。アンチセンスオリゴヌクレオチドは、中でも、がん、糖尿病、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、デュシェンヌ型筋ジストロフィー、脊髄筋萎縮症、毛細血管拡張性運動失調症、喘息および関節炎などの疾患を標的化するために使用されている。いくつかのアンチセンスオリゴヌクレオチド薬が、数例を挙げるとサイトメガロウイルス網膜炎、家族性高コレステロール血症ホモ接合体、デュシェンヌ型筋ジストロフィーおよび脊髄筋萎縮症の処置に対して米食品医薬品局（ＦＤＡ）に承認されており、最後の２つに対するものはＳＭ－ＡＳＯである。しかしながら、各場合において、オリゴヌクレオチドの標的配列は、対象の疾患の下地となっているか、または変調によって治療的となり得る具体的なＲＮＡに対して個別調整しなければならない。

Ｇｒｅｇｏｒｙｅｔａｌ．，２００７ＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌＭｕｌｔｉｐｌｅＳｃｌｅｒｏｓｉｓＧｅｎｅｔｉｃｓｅｔａｌ．，２００７Ｌｕｎｄｍａｒｋｅｔａｌ．，２００７Ｅｖｓｙｕｋｏｖａｅｔａｌ．，２０１３Ｈｏｅｅｔａｌ．，２０１０Ｌｕｎｄｓｔｒｏｍｅｔａｌ．，２０１３ＭｃＫａｙｅｔａｌ．２００８Ｂａｄｏｔｅｔａｌ．，２０１１Ｍｏｎｔｉｅｔａｌ．，２０１３Ｌａｕｗｅｒｙｓｅｔａｌ．，２０１４

一実施形態において、本発明は、高値レベルのインターロイキン７受容体の可溶性アイソフォーム（ｓＩＬ７Ｒ）を伴う疾患または病状の処置を、それを必要とする被験体において行なう方法であって：エクソン６のスプライシングに影響を及ぼすインターロイキン－７受容体（ＩＬ７Ｒ）プレｍＲＮＡの配列に特異的に結合するオリゴヌクレオチドを含む組成物を有効量で投与することを含み、該オリゴヌクレオチドはＩＬ７ＲプレｍＲＮＡ内におけるエクソン６の含有を増大させ、ＩＬ７Ｒの可溶性アイソフォーム（ｓＩＬ７Ｒ）の発現を低減させるものである方法を含む。一態様において、該オリゴヌクレオチドはアンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳＯ）またはスプライス変調アンチセンスオリゴヌクレオチド（ＳＭ－ＡＳＯ）である。別の態様では、該組成物中のオリゴヌクレオチドが、エクソン内スプライシング抑制配列（ＥＳＳ）および／またはイントロン内スプライシング抑制配列（ＩＳＳ）からなる群のうちの少なくとも１つにおけるＩＬ７ＲプレｍＲＮＡ内の配列に特異的に結合し、それによりＩＬ７ＲプレｍＲＮＡ内におけるエクソン６の含有を促進させ、ｓＩＬ７Ｒの発現を低減させる。別の態様では、該組成物中のオリゴヌクレオチドが、ＩＬ７ＲプレｍＲＮＡ上のイントロン－エクソンスプライス部位、分岐点配列および／またはポリピリミジントラクトの配列に特異的に結合する。別の態様では、該オリゴヌクレオチド内の少なくとも１個またはそれより多くのヌクレオチドが：１つまたはそれより多くのホスホロチオエート、ホスホロジチオエート、ホスホジエステル、メチルホスホネート、ホスホロアミデート、メチルホスホネート、ホスホトリエステル、ホスホロアリデート（ｐｈｏｓｐｈｏｒｏａｒｉｄａｔｅ）、モルフォリノ、アミデートカルバメート、カルボキシメチル、アセトアミデート、ポリアミド、スルホネート、スルホンアミド、スルファメート、ホルムアセタール、チオホルムアセタールおよび／またはアルキルシリル置換、一部または完全修飾骨格、例えば完全修飾糖リン酸骨格、ロック核酸骨格、ペプチド性骨格、ホスホトリエステル骨格、ホスホロアミデート骨格、シロキサン骨格、カルボキシメチルエステル骨格、アセトアミデート骨格、カルバメート骨格、チオエーテル骨格、架橋メチレンホスホネート骨格、ホスホロチオエート骨格、メチルホスホネート骨格、アルキルホスホネート骨格、リン酸エステル骨格、アルキルホスホノチオエート骨格、ホスホロジチオエート骨格、カーボネート骨格、リン酸トリエステル骨格、カルボキシメチルエステル骨格、メチルホスホロチオエート骨格、ホスホロジチオエート骨格、ｐ－エトキシ結合を有する骨格、糖修飾、例えば２’－Ｏ－メチル（２’－Ｏ－メチルヌクレオチド）、２’－Ｏ－メチルオキシエトキシ（２’－Ｏ－ＭＯＥ）、２’－Ｏ－アルキル修飾糖部分または二環性糖部分、ヌクレオチド模倣物、ペプチド核酸（ＰＮＡ）、モルフォリノ核酸、シクロヘキセニル核酸、アンヒドロヘキシトール核酸、グリコール核酸、トレオース核酸およびロック核酸（ＬＮＡ）ならびに前述のもののいずれかの２つ以上の組合せから選択される（１）リボースもしくは他の糖単位、（２）塩基または（３）骨格の修飾または置換を含む天然に存在しない修飾を含む。

別の態様では、オリゴヌクレオチド内の少なくとも１個またはそれより多くのヌクレオチドがペプチド、細胞膜透過性ペプチド、抗体、ナノボディ、ラクダ部、抗体可変領域、小分子および／またはオリゴヌクレオチドの安定性、分布もしくは特定の組織への送達を促進させるか、あるいは促進させ得るリガンド（例えば、タンパク質、脂質、糖鎖）にコンジュゲートされる。

別の態様では、該オリゴヌクレオチド内の少なくとも１個またはそれより多くのヌクレオチドが、ヌクレオチド塩基に対する天然に存在しない修飾を含む。別の態様では、該オリゴヌクレオチドが、表１のＳＭ－ＡＳＯの任意のＳＥＱＩＤ（ＳＭ－ＡＳＯの配列番号：１～１３）またはその一部分の単独または組合せのいずれか、あるいはＩＬ７ＲＲＮＡ内の標的の完全配列において少なくとも７０、７５、８０、８４、８５、８８、９２、９３、９４、９５または９６％の相補性およびまたは同一性を有する配列から選択される。別の態様では、該オリゴヌクレオチドが、表２の任意の標的ＳＥＱＩＤ（標的配列番号：１～１３）を全体または部分的のいずれかで標的化する。別の態様では、該組成物が薬学的に許容され得る賦形剤、塩または担体をさらに含む。別の態様では、該疾患または病状が、以下のもの：多発性硬化症、Ｉ型糖尿病、関節リウマチ、全身性エリテマトーデス、アトピー性皮膚炎、強直性脊椎炎、原発性胆汁性肝硬変または炎症性腸症候群、例えば潰瘍性大腸炎、クローン病または疾患もしくは病状のない正常被験体と比較した場合、ｓＩＬ７Ｒが高値である任意の他の病状のうちの少なくとも１つから選択される自己免疫障害である。別の態様では、該疾患または病状が炎症性の疾患または病状である。別の態様では、該オリゴヌクレオチドが、例えば、ｓＩＬ７ＲＲＮＡの安定性を低下させる（例えば、分解を増大させる）ＡＳＯ、ｓｉＲＮＡ、ｓｈＲＮＡおよび／またはｓＩＬ７ＲＲＮＡの翻訳を低減させるＡＳＯを用いてＩＬ７Ｒのエクソン５－エクソン７の境界を標的化することにより、エクソン６が欠損しているＩＬ７ＲｍＲＮＡの分解を促進させる。別の態様では、該方法が、ＳＭ－ＡＳＯと自己免疫疾患の処置に有効な１種類またはそれより多くの活性薬剤、例えば限定されないがミトキサントロン、インターフェロンベータ－１ａ、ＰＥＧ－インターフェロンベータ－１ａ、アザチオプリン、フィンゴリモド、ナタリズマブ、メチルプレドニゾロンまたはオクレリズマブとの併用療法をさらに含む。別の態様では、該方法が、患者から細胞を得、該細胞を、エクソン６のスプライシングに影響を及ぼすインターロイキン－７受容体（ＩＬ７Ｒ）プレｍＲＮＡの配列に特異的に結合する該オリゴヌクレオチドを一過的または永久的に発現するように修飾する工程をさらに含む。別の態様では、該方法が、遺伝子治療における使用のための、エクソン６のスプライシングに影響を及ぼすインターロイキン－７受容体（ＩＬ７Ｒ）プレｍＲＮＡの配列に特異的に結合する該オリゴヌクレオチドを発現するベクターを作成すること、および該患者を、該ベクターを用いて処置することをさらに含む。

別の実施形態において、本発明は、アンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳＯ）またはスプライス変調アンチセンスオリゴヌクレオチド（ＳＭ－ＡＳＯ）であり、エクソン６のスプライシングに影響を及ぼすインターロイキン７受容体（ＩＬ７Ｒ）のプレｍＲＮＡ内の配列に特異的に結合するオリゴヌクレオチドを含む組成物であって、ＳＭ－ＡＳＯはＩＬ７ＲプレｍＲＮＡ内におけるエクソン６の含有を増大させ、ＩＬ７Ｒの可溶性アイソフォーム（ｓＩＬ７Ｒ）の発現を低減させるものである組成物を含む。一態様において、該組成物中のオリゴヌクレオチドは、エクソン内スプライシング抑制配列（ＥＳＳ）および／またはイントロン内スプライシング抑制配列（ＩＳＳ）からなる群のうちの少なくとも１つにおけるＩＬ７ＲプレｍＲＮＡ内の配列に特異的に結合し、それによりＩＬ７ＲプレｍＲＮＡ内におけるエクソン６の含有を促進させ、ｓＩＬ７Ｒの発現を低減させる。別の態様では、該組成物中のオリゴヌクレオチドが、ＩＬ７ＲプレｍＲＮＡ上のイントロン－エクソンスプライス部位、分岐点配列および／またはポリピリミジントラクトの配列に特異的に結合する。別の態様では、該オリゴヌクレオチド内の少なくとも１個またはそれより多くのヌクレオチドが：１つまたはそれより多くのホスホロチオエート、ホスホロジチオエート、ホスホジエステル、メチルホスホネート、ホスホロアミデート、メチルホスホネート、ホスホトリエステル、ホスホロアリデート、モルフォリノ、アミデートカルバメート、カルボキシメチル、アセトアミデート、ポリアミド、スルホネート、スルホンアミド、スルファメート、ホルムアセタール、チオホルムアセタールおよび／またはアルキルシリル置換、一部または完全修飾骨格、例えば完全修飾糖リン酸骨格、ロック核酸骨格、ペプチド性骨格、ホスホトリエステル骨格、ホスホロアミデート骨格、シロキサン骨格、カルボキシメチルエステル骨格、アセトアミデート骨格、カルバメート骨格、チオエーテル骨格、架橋メチレンホスホネート骨格、ホスホロチオエート骨格、メチルホスホネート骨格、アルキルホスホネート骨格、リン酸エステル骨格、アルキルホスホノチオエート骨格、ホスホロジチオエート骨格、カーボネート骨格、リン酸トリエステル骨格、カルボキシメチルエステル骨格、メチルホスホロチオエート骨格、ホスホロジチオエート骨格、ｐ－エトキシ結合を有する骨格、糖修飾、例えば２’－Ｏ－メチル（２’－Ｏ－メチルヌクレオチド）、２’－Ｏ－メチルオキシエトキシ（２’－Ｏ－ＭＯＥ）、２’－Ｏ－アルキル修飾糖部分または二環性糖部分、ヌクレオチド模倣物、ペプチド核酸（ＰＮＡ）、モルフォリノ核酸、シクロヘキセニル核酸、アンヒドロヘキシトール核酸、グリコール核酸、トレオース核酸およびロック核酸（ＬＮＡ）ならびに前述のもののいずれかの２つ以上の任意の組合せから選択される（１）リボースもしくは他の糖単位、（２）塩基または（３）骨格の修飾または置換を含む天然に存在しない修飾を含む。別の態様では、該オリゴヌクレオチド内の少なくとも１個またはそれより多くのヌクレオチドが、ヌクレオチド塩基に対する天然に存在しない修飾を含む。別の態様では、該オリゴヌクレオチドが、表１のＳＭ－ＡＳＯの任意のＳＥＱＩＤ（ＳＭ－ＡＳＯの配列番号：１～１３）またはその一部分の単独または組合せのいずれか、あるいはＩＬ７ＲＲＮＡ内の標的の完全配列において少なくとも７０、７５、８０、８４、８５、８８、９２、９３、９４、９５または９６％の相補性およびまたは同一性を有する配列から選択される。別の態様では、該オリゴヌクレオチドが、表２の任意の標的ＳＥＱＩＤ（標的配列番号：１～１３）を全体または部分的のいずれかで標的化する。別の態様では、該組成物が薬学的に許容され得る賦形剤、塩または担体をさらに含む。別の態様では、該組成物が、以下のもの：多発性硬化症、Ｉ型糖尿病、関節リウマチ、全身性エリテマトーデス、アトピー性皮膚炎、強直性脊椎炎、原発性胆汁性肝硬変、炎症性腸症候群、例えば潰瘍性大腸炎およびクローン病またはｓＩＬ７Ｒが高値である任意の他の病状のうちの少なくとも１つから選択される自己免疫障害を処置するための投与に適合される。別の態様では、該オリゴヌクレオチドが、例えば、ｓＩＬ７ＲＲＮＡの安定性を低下させる（例えば、分解を増大させる）ＡＳＯ、ｓｉＲＮＡ、ｓｈＲＮＡおよび／またはｓＩＬ７ＲＲＮＡの翻訳を低減させるＡＳＯを用いてＩＬ７Ｒのエクソン５－エクソン７の境界を標的化することにより、エクソン６が欠損しているＩＬ７ＲｍＲＮＡの分解を促進させる。

また別の実施形態において、本発明は、インターロイキン－７受容体（ＩＬ７Ｒ）プレｍＲＮＡのエクソン６の含有を増大させる方法であって：エクソン６のスプライシングに影響を及ぼすインターロイキン－７受容体（ＩＬ７Ｒ）プレｍＲＮＡ内の配列に特異的に結合するスプライス変調アンチセンスオリゴヌクレオチド（ＳＭ－ＡＳＯ）を接触させることを含み、ＳＭ－ＡＳＯはＩＬ７ＲプレｍＲＮＡ内におけるエクソン６の含有を増大させ、ＩＬ７Ｒの可溶性アイソフォーム（ｓＩＬ７Ｒ）の発現を低減させるものである方法を含む。一態様において、該組成物中のＳＭ－ＡＳＯは、エクソン内スプライシング抑制配列（ＥＳＳ）および／またはイントロン内スプライシング抑制配列（ＩＳＳ）からなる群のうちの少なくとも１つにおけるＩＬ７ＲプレｍＲＮＡ内の配列に特異的に結合し、それによりＩＬ７ＲプレｍＲＮＡ内におけるエクソン６の含有を促進させ、ｓＩＬ７Ｒの発現を低減させる。別の態様では、該組成物中のＳＭ－ＡＳＯが、ＩＬ７ＲプレｍＲＮＡ上のイントロン－エクソンスプライス部位、分岐点配列および／またはポリピリミジントラクトの配列に特異的に結合する。別の態様では、ＳＭ－ＡＳＯ内の少なくとも１個またはそれより多くのヌクレオチドが：１つまたはそれより多くのホスホロチオエート、ホスホロジチオエート、ホスホジエステル、メチルホスホネート、ホスホロアミデート、メチルホスホネート、ホスホトリエステル、ホスホロアリデート、モルフォリノ、アミデートカルバメート、カルボキシメチル、アセトアミデート、ポリアミド、スルホネート、スルホンアミド、スルファメート、ホルムアセタール、チオホルムアセタールおよび／またはアルキルシリル置換、一部または完全修飾骨格、例えば完全修飾糖リン酸骨格、ロック核酸骨格、ペプチド性骨格、ホスホトリエステル骨格、ホスホロアミデート骨格、シロキサン骨格、カルボキシメチルエステル骨格、アセトアミデート骨格、カルバメート骨格、チオエーテル骨格、架橋メチレンホスホネート骨格、ホスホロチオエート骨格、メチルホスホネート骨格、アルキルホスホネート骨格、リン酸エステル骨格、アルキルホスホノチオエート骨格、ホスホロジチオエート骨格、カーボネート骨格、リン酸トリエステル骨格、カルボキシメチルエステル骨格、メチルホスホロチオエート骨格、ホスホロジチオエート骨格、ｐ－エトキシ結合を有する骨格、糖修飾、例えば２’－Ｏ－メチル（２’－Ｏ－メチルヌクレオチド）、２’－Ｏ－メチルオキシエトキシ（２’－Ｏ－ＭＯＥ）、２’－Ｏ－アルキル修飾糖部分または二環性糖部分、ヌクレオチド模倣物、ペプチド核酸（ＰＮＡ）、モルフォリノ核酸、シクロヘキセニル核酸、アンヒドロヘキシトール核酸、グリコール核酸、トレオース核酸およびロック核酸（ＬＮＡ）ならびに前述のもののいずれかの２つ以上の任意の組合せから選択される（１）リボースもしくは他の糖単位、（２）塩基または（３）骨格の修飾または置換を含む天然に存在しない修飾を含む。別の態様では、ＳＭ－ＡＳＯ内の少なくとも１個またはそれより多くのヌクレオチドが、ヌクレオチド塩基に対する天然に存在しない修飾を含む。別の態様では、ＳＭ－ＡＳＯが、例えば、ｓＩＬ７ＲＲＮＡの安定性を低下させる（例えば、分解を増大させる）ＡＳＯ、ｓｉＲＮＡ、ｓｈＲＮＡおよび／またはｓＩＬ７ＲＲＮＡの翻訳を低減させるＡＳＯを用いてＩＬ７Ｒのエクソン５－エクソン７の境界を標的化することにより、エクソン６が欠損しているＩＬ７ＲｍＲＮＡの分解を促進させる。別の態様では、ＳＭ－ＡＳＯが、エクソン６が欠損しているＩＬ７ＲｍＲＮＡの翻訳をブロックする。別の態様では、ＳＭ－ＡＳＯが、表１のＳＭ－ＡＳＯの任意のＳＥＱＩＤ（ＳＭ－ＡＳＯの配列番号：１～１３）またはその一部分の単独または組合せのいずれか、あるいはＩＬ７ＲＲＮＡ内の標的の完全配列において少なくとも７０、７５、８０、８４、８５、８８、９２、９３、９４、９５または９６％の相補性およびまたは同一性を有する配列から選択される。別の態様では、該オリゴヌクレオチドが、表２の任意の標的ＳＥＱＩＤ（標的配列番号：１～１３）を全体または部分的のいずれかで標的化する。別の態様では、該組成物が薬学的に許容され得る賦形剤、塩または担体をさらに含む。別の態様では、自己免疫障害が、以下のもの：多発性硬化症、Ｉ型糖尿病、関節リウマチ、全身性エリテマトーデス、アトピー性皮膚炎、強直性脊椎炎、原発性胆汁性肝硬変、炎症性腸症候群、例えば潰瘍性大腸炎およびクローン病またはｓＩＬ７Ｒが高値である任意の病状のうちの少なくとも１つから選択される。別の態様では、該方法が、患者から細胞を得、該細胞を、エクソン６のスプライシングに影響を及ぼすインターロイキン－７受容体（ＩＬ７Ｒ）プレｍＲＮＡの配列に特異的に結合する該オリゴヌクレオチドを一過的または永久的に発現するように修飾する工程をさらに含む。別の態様では、該方法が、遺伝子治療における使用のための、エクソン６のスプライシングに影響を及ぼすインターロイキン－７受容体（ＩＬ７Ｒ）プレｍＲＮＡの配列に特異的に結合する該オリゴヌクレオチドを発現するベクターを作成すること、および該患者を、該ベクターを用いて処置することをさらに含む。

別の実施形態において、本発明は、インターロイキン－７受容体（ＩＬ７Ｒ）プレｍＲＮＡ内におけるエクソン６の含有を増大させるための組成物、エクソン６のスプライシングに影響を及ぼすインターロイキン－７受容体（ＩＬ７Ｒ）プレｍＲＮＡ内の配列に特異的に結合するスプライス変調アンチセンスオリゴヌクレオチド（ＳＭ－ＡＳＯ）を接触させることを含む方法を含み、ＳＭ－ＡＳＯはＩＬ７ＲプレｍＲＮＡ内におけるエクソン６の含有を増大させ、ＩＬ７Ｒの可溶性アイソフォーム（ｓＩＬ７Ｒ）の発現を低減させるものである。一態様において、該組成物は、限定されないがミトキサントロン、インターフェロンベータ－１ａ、ＰＥＧ－インターフェロンベータ－１ａ、アザチオプリン、フィンゴリモド、ナタリズマブ、メチルプレドニゾロンまたはオクレリズマブから選択される自己免疫疾患の処置に有効な１種類またはそれより多くの活性薬剤とのＳＭ－ＡＳＯの併用療法をさらに含む。

別の実施形態において、本発明は、アンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳＯ）またはスプライス変調アンチセンスオリゴヌクレオチド（ＳＭ－ＡＳＯ）であり、エクソン６のスプライシングに影響を及ぼすインターロイキン－７受容体（ＩＬ７Ｒ）プレｍＲＮＡ内の配列に特異的に結合するオリゴヌクレオチドを含む核酸を発現するベクターであって、ＳＭ－ＡＳＯはＩＬ７ＲプレｍＲＮＡ内におけるエクソン６の含有を増大させ、ＩＬ７Ｒの可溶性アイソフォーム（ｓＩＬ７Ｒ）の発現を低減させるものであるベクターを含む。一態様において、該ベクターはウイルスベクターまたはプラスミドである。

別の実施形態において、本発明は、エクソン６欠損ＩＬ７ＲＲＮＡの阻害または分解を促進させるインターロイキン－７受容体（ＩＬ７Ｒ）プレｍＲＮＡ内の配列に特異的に結合するアンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳＯ）、スプライス変調アンチセンスオリゴヌクレオチド（ＳＭ－ＡＳＯ）、翻訳ブロックアンチセンスオリゴヌクレオチド、ｓｉＲＮＡ、ｓｈＲＮＡまたはｍｉＲＮＡを含む核酸を発現するベクターであって、該核酸はＩＬ７Ｒの可溶性アイソフォーム（ｓＩＬ７Ｒ）の発現を低減させるものであるベクターを含む。一態様において、該ベクターはウイルスベクターまたはプラスミドである。

別の実施形態において、本発明は、多発性硬化症の処置を、それを必要とする被験体において行なう方法であって：エクソン６のスプライシングに影響を及ぼすインターロイキン－７受容体（ＩＬ７Ｒ）プレｍＲＮＡの配列に特異的に結合するスプライス変調アンチセンスオリゴヌクレオチド（ＳＭ－ＡＳＯ）を薬学的に許容され得る賦形剤中に含む組成物を有効量で投与することを含み、ＳＭ－ＡＳＯはＩＬ７ＲプレｍＲＮＡ内におけるエクソン６の含有を増大させ、ＩＬ７Ｒの可溶性アイソフォーム（ｓＩＬ７Ｒ）の発現を低減させる方法を含む。一態様において、該方法は、ＳＭ－ＡＳＯと多発性硬化症疾患の処置に有効な１種類またはそれより多くの活性薬剤との併用療法をさらに含む。別の態様では、多発性硬化症を処置するための該１種類またはそれより多くの薬剤が、限定されないがミトキサントロン、インターフェロンベータ－１ａ、ＰＥＧ－インターフェロンベータ－１ａ、アザチオプリン、フィンゴリモド、ナタリズマブ、メチルプレドニゾロンまたはオクレリズマブから選択される。

別の実施形態において、本発明は、がんの処置を、それを必要とする被験体において行なう方法であって：エクソン６のスプライシングに影響を及ぼすインターロイキン－７受容体（ＩＬ７Ｒ）プレｍＲＮＡの配列に特異的に結合するオリゴヌクレオチドを含む組成物を有効量で投与することを含み、該オリゴヌクレオチドはＩＬ７ＲプレｍＲＮＡ内におけるエクソン６の含有を低減させ、ＩＬ７Ｒの可溶性アイソフォーム（ｓＩＬ７Ｒ）の発現を増大させるものである方法を含む。一態様において、該オリゴヌクレオチドはアンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳＯ）またはスプライス変調アンチセンスオリゴヌクレオチド（ＳＭ－ＡＳＯ）である。別の態様では、該組成物中のオリゴヌクレオチドが、エクソン内スプライシング促進配列（ＥＳＥ）および／またはイントロン内スプライシング促進配列（ＩＳＥ）からなる群のうちの少なくとも１つにおけるＩＬ７ＲプレｍＲＮＡ内の配列に特異的に結合し、それによりエクソン６の含有が低減され、ｓＩＬ７Ｒの発現が増大する。別の態様では、該組成物中のオリゴヌクレオチドが、ＩＬ７ＲプレｍＲＮＡ上のイントロン－エクソンスプライス部位、分岐点配列および／またはポリピリミジントラクトの配列、あるいはエクソン６のスプライシングに影響を及ぼす任意の他のエレメントに特異的に結合し、それによりエクソン６の含有が低減され、ｓＩＬ７Ｒの発現が増大する。別の態様では、該組成物中のオリゴヌクレオチドが、５’ＵＴＲ、３’ＵＴＲ、イントロン、エクソンおよび／またはその境界内のＩＬ７ＲＲＮＡに結合することにより、エクソン６が欠損しているＩＬ７ＲＲＮＡの安定性または翻訳を促進させ、それによりｓＩＬ７Ｒの発現が増大する。別の態様では、該組成物中のオリゴヌクレオチドが、ｍｉＲＮＡ、非コードＲＮＡまたはエクソン６が欠損しているＩＬ７ＲＲＮＡの安定性を調節する他のＲＮＡなどのＲＮＡに結合することにより、エクソン６が欠損しているＩＬ７ＲＲＮＡの安定性または翻訳を促進させ、それによりｓＩＬ７Ｒの発現が増大する。別の態様では、該オリゴヌクレオチド内の少なくとも１個またはそれより多くのヌクレオチドが：１つまたはそれより多くのホスホロチオエート、ホスホロジチオエート、ホスホジエステル、メチルホスホネート、ホスホロアミデート、メチルホスホネート、ホスホトリエステル、ホスホロアリデート、モルフォリノ、アミデートカルバメート、カルボキシメチル、アセトアミデート、ポリアミド、スルホネート、スルホンアミド、スルファメート、ホルムアセタール、チオホルムアセタールおよび／またはアルキルシリル置換、一部または完全修飾骨格、例えば完全修飾糖リン酸骨格、ロック核酸骨格、ペプチド性骨格、ホスホトリエステル骨格、ホスホロアミデート骨格、シロキサン骨格、カルボキシメチルエステル骨格、アセトアミデート骨格、カルバメート骨格、チオエーテル骨格、架橋メチレンホスホネート骨格、ホスホロチオエート骨格、メチルホスホネート骨格、アルキルホスホネート骨格、リン酸エステル骨格、アルキルホスホノチオエート骨格、ホスホロジチオエート骨格、カーボネート骨格、リン酸トリエステル骨格、カルボキシメチルエステル骨格、メチルホスホロチオエート骨格、ホスホロジチオエート骨格、ｐ－エトキシ結合を有する骨格、糖修飾、例えば２’－Ｏ－メチル（２’－Ｏ－メチルヌクレオチド）、２’－Ｏ－メチルオキシエトキシ（２’－Ｏ－ＭＯＥ）、２’－Ｏ－アルキル修飾糖部分または二環性糖部分、ヌクレオチド模倣物、ペプチド核酸（ＰＮＡ）、モルフォリノ核酸、シクロヘキセニル核酸、アンヒドロヘキシトール核酸、グリコール核酸、トレオース核酸およびロック核酸（ＬＮＡ）ならびに前述のもののいずれかの２つ以上の組合せから選択される（１）リボースもしくは他の糖単位、（２）塩基または（３）骨格の修飾または置換を含む天然に存在しない修飾を含む。別の態様では、該オリゴヌクレオチド内の少なくとも１個またはそれより多くのヌクレオチドが、ヌクレオチド塩基に対する天然に存在しない修飾を含む。別の態様では、該オリゴヌクレオチドが、表３のＳＭ－ＡＳＯのＳＥＱＩＤ（ＳＭ－ＡＳＯの配列番号：１４～５０）のうちの任意のものまたはその一部分の単独または組合せのいずれか、あるいはＩＬ７ＲＲＮＡ内の標的の完全配列において少なくとも７０、７５、８０、８４、８５、８８、９２、９３、９４、９５または９６％の相補性およびまたは同一性を有する配列から選択される。別の態様では、該オリゴヌクレオチドが、表４の標的ＳＥＱＩＤ（標的配列番号：１４～５０）のうちの任意のものまたはその一部分を標的化する。別の態様では、該組成物が薬学的に許容され得る賦形剤、塩または担体をさらに含む。別の態様では、該方法が、組換えｓＩＬ７Ｒタンパク質（任意の形態のもの、例えば限定されないが、Ｆｃ受容体を有するキメラ）を単独または組換えＩＬ７もしくは他のサイトカインと一緒のいずれかで送達することをさらに含む。別の態様では、該がんが、従来の免疫療法に対して低奏効を示すもの、非限定的な一例として肝細胞癌である。別の態様では、該方法が、ＳＭ－ＡＳＯまたは組換えｓＩＬ７Ｒとがんの処置に有効な１種類またはそれより多くの活性薬剤、例えば限定されないが、免疫チェックポイント阻害剤（例えば、ニボルマブ、ペムブロリズマブ、イピリムマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ、デュルバルマブ）、治療用抗体（例えば、トラスツズマブ、リツキシマブ、ラムシルマブ、ベバシズマブ）、従来の化学療法（例えば、タキソール）または治療用放射線との併用療法をさらに含む。ＳＭ－ＡＳＯまたは組換えｓＩＬ７Ｒの併用療法の一部として使用され得るがんの処置に有効な活性薬剤のリストを図９に示す。別の態様では、該方法が、患者から細胞を得、該細胞を、該インターロイキン－７受容体（ＩＬ７Ｒ）プレｍＲＮＡの配列に特異的に結合してエクソン６の含有を低減させ、それによりｓＩＬ７Ｒの発現を増大させる該オリゴヌクレオチドを一過的もしくは永久的に発現するように修飾するか、または該細胞に、ｓＩＬ７Ｒ発現を促進させる該ＡＳＯを負荷する工程および修飾された該細胞を該患者に再導入する工程をさらに含む。別の態様では、該方法が、患者から細胞を得、該細胞を、ｓＩＬ７Ｒを一過的または永久的に発現するように修飾する工程および修飾された該細胞を該患者に再導入する工程をさらに含む。別の態様では、該方法が、遺伝子治療における使用のための、エクソン６のスプライシングに影響を及ぼすインターロイキン－７受容体（ＩＬ７Ｒ）プレｍＲＮＡの配列に特異的に結合する該オリゴヌクレオチドを発現するベクターを作成すること、および該患者を、該ベクターを用いて処置することをさらに含む。別の態様では、該方法が、遺伝子治療における使用のための、ｓＩＬ７Ｒを発現し、それによりｓＩＬ７Ｒの発現を増大させるベクターを作成すること、および該患者を、該ベクターを用いて処置することをさらに含む。

別の実施形態において、本発明は、アンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳＯ）またはスプライス変調アンチセンスオリゴヌクレオチド（ＳＭ－ＡＳＯ）であり、エクソン６のスプライシングに影響を及ぼすインターロイキン７受容体（ＩＬ７Ｒ）プレｍＲＮＡ内の配列に特異的に結合するオリゴヌクレオチドを含む組成物であって、ＳＭ－ＡＳＯはＩＬ７ＲプレｍＲＮＡ内におけるエクソン６の含有を低減させ、ＩＬ７Ｒの可溶性アイソフォーム（ｓＩＬ７Ｒ）の発現を増大させるものである組成物を含む。別の態様では、該組成物中のオリゴヌクレオチドが、エクソン内スプライシング促進配列（ＥＳＥ）および／またはイントロン内スプライシング促進配列（ＩＳＥ）からなる群のうちの少なくとも１つにおけるＩＬ７ＲプレｍＲＮＡ内の配列に特異的に結合し、それによりエクソン６の含有が低減され、ｓＩＬ７Ｒの発現が増大する。別の態様では、該組成物中のオリゴヌクレオチドが、ＩＬ７ＲプレｍＲＮＡ上のイントロン－エクソンスプライス部位、分岐点配列および／またはポリピリミジントラクトの配列、あるいはエクソン６のスプライシングに影響を及ぼす任意の他のエレメントに特異的に結合し、それによりエクソン６の含有が低減され、ｓＩＬ７Ｒの発現が増大する。別の態様では、該組成物中のオリゴヌクレオチドが、５’ＵＴＲ、３’ＵＴＲ、イントロン、エクソンおよび／またはその境界内のＩＬ７ＲＲＮＡに結合することにより、エクソン６が欠損しているＩＬ７ＲＲＮＡの安定性または翻訳を促進させ、それによりｓＩＬ７Ｒの発現が増大する。別の態様では、該組成物中のオリゴヌクレオチドが、ｍｉＲＮＡ、非コードＲＮＡまたはエクソン６が欠損しているＩＬ７ＲＲＮＡの安定性を調節する他のＲＮＡなどのＲＮＡに結合することにより、エクソン６が欠損しているＩＬ７ＲＲＮＡの安定性または翻訳を促進させ、それによりｓＩＬ７Ｒの発現が増大する。別の態様では、該オリゴヌクレオチド内の少なくとも１個またはそれより多くのヌクレオチドが：１つまたはそれより多くのホスホロチオエート、ホスホロジチオエート、ホスホジエステル、メチルホスホネート、ホスホロアミデート、メチルホスホネート、ホスホトリエステル、ホスホロアリデート、モルフォリノ、アミデートカルバメート、カルボキシメチル、アセトアミデート、ポリアミド、スルホネート、スルホンアミド、スルファメート、ホルムアセタール、チオホルムアセタールおよび／またはアルキルシリル置換、一部または完全修飾骨格、例えば完全修飾糖リン酸骨格、ロック核酸骨格、ペプチド性骨格、ホスホトリエステル骨格、ホスホロアミデート骨格、シロキサン骨格、カルボキシメチルエステル骨格、アセトアミデート骨格、カルバメート骨格、チオエーテル骨格、架橋メチレンホスホネート骨格、ホスホロチオエート骨格、メチルホスホネート骨格、アルキルホスホネート骨格、リン酸エステル骨格、アルキルホスホノチオエート骨格、ホスホロジチオエート骨格、カーボネート骨格、リン酸トリエステル骨格、カルボキシメチルエステル骨格、メチルホスホロチオエート骨格、ホスホロジチオエート骨格、ｐ－エトキシ結合を有する骨格、糖修飾、例えば２’－Ｏ－メチル（２’－Ｏ－メチルヌクレオチド）、２’－Ｏ－メチルオキシエトキシ（２’－Ｏ－ＭＯＥ）、２’－Ｏ－アルキル修飾糖部分または二環性糖部分、ヌクレオチド模倣物、ペプチド核酸（ＰＮＡ）、モルフォリノ核酸、シクロヘキセニル核酸、アンヒドロヘキシトール核酸、グリコール核酸、トレオース核酸およびロック核酸（ＬＮＡ）ならびに前述のもののいずれかの２つ以上の任意の組合せから選択される（１）リボースもしくは他の糖単位、（２）塩基または（３）骨格の修飾または置換を含む天然に存在しない修飾を含む。別の態様では、該オリゴヌクレオチド内の少なくとも１個またはそれより多くのヌクレオチドが、ヌクレオチド塩基に対する天然に存在しない修飾を含む。別の態様では、該オリゴヌクレオチドが、表３のＳＭ－ＡＳＯのＳＥＱＩＤ（ＳＭ－ＡＳＯの配列番号：１４～５０）のうちの任意のものまたはその一部分の単独または組合せのいずれか、あるいはＩＬ７ＲＲＮＡ内の標的の完全配列において少なくとも７０、７５、８０、８４、８５、８８、９２、９３、９４、９５または９６％の相補性およびまたは同一性を有する配列から選択される。別の態様では、該オリゴヌクレオチドが、表４の標的ＳＥＱＩＤ（標的配列番号：１４～５０）のうちの任意のものを全体または部分的のいずれかで標的化する。別の態様では、該組成物が薬学的に許容され得る賦形剤、塩または担体をさらに含む。別の態様では、該組成物が、がんを処置するための投与に適合されている。一実施形態では、治療薬を含む該組成物が、経表面、経腸または非経口の投与経路を用いる局所送達または全身送達のいずれかのために製剤化され得る。さらに、本明細書に開示しているＡＳＯまたはＳＭ－ＡＳＯは、単独で組成物に製剤化してもよく、１種類またはそれより多くの他の治療薬と一緒に製剤化して単一の組成物にする組成物に製剤化してもよい。さらなる一態様では、ＡＳＯおよび／またはＳＭ－ＡＳＯを含む組成物が、静脈内輸注、腫瘍微小環境内への直接注射、両方の組合せ、経口、直腸内、皮下、膣内、筋肉内、髄腔内または一般的に使用されている他の送達経路によって投与される。

また別の実施形態において、本発明は、インターロイキン－７受容体（ＩＬ７Ｒ）プレｍＲＮＡにおけるエクソン６の含有を低減させる方法であって：エクソン６のスプライシングに影響を及ぼすインターロイキン－７受容体（ＩＬ７Ｒ）プレｍＲＮＡ内の配列に特異的に結合するスプライス変調アンチセンスオリゴヌクレオチド（ＳＭ－ＡＳＯ）を接触させることを含み、ＳＭ－ＡＳＯはＩＬ７ＲプレｍＲＮＡ内におけるエクソン６の含有を低減させ、ＩＬ７Ｒの可溶性アイソフォーム（ｓＩＬ７Ｒ）の発現を増大させるものである方法を含む。別の態様では、該組成物中のオリゴヌクレオチドが、エクソン内スプライシング促進配列（ＥＳＥ）および／またはイントロン内スプライシング促進配列（ＩＳＥ）からなる群のうちの少なくとも１つにおけるＩＬ７ＲプレｍＲＮＡ内の配列に特異的に結合し、それによりエクソン６の含有が低減され、ｓＩＬ７Ｒの発現が増大する。別の態様では、該組成物中のＳＭ－ＡＳＯが、ＩＬ７ＲプレｍＲＮＡ上のイントロン－エクソンスプライス部位、分岐点配列および／またはポリピリミジントラクトの配列、あるいはエクソン６のスプライシングに影響を及ぼす任意の他のエレメントに特異的に結合し、それによりエクソン６の含有が低減され、ｓＩＬ７Ｒの発現が増大する。別の態様では、該組成物中のオリゴヌクレオチドが、５’ＵＴＲ、３’ＵＴＲ、イントロン、エクソンおよび／またはその境界内のＩＬ７ＲＲＮＡに結合することにより、エクソン６が欠損しているＩＬ７ＲＲＮＡの安定性または翻訳を促進させ、それによりｓＩＬ７Ｒの発現が増大する。別の態様では、該組成物中のオリゴヌクレオチドが、ｍｉＲＮＡ、非コードＲＮＡまたはエクソン６が欠損しているＩＬ７ＲＲＮＡの安定性を調節する他のＲＮＡなどのＲＮＡに結合することにより、エクソン６が欠損しているＩＬ７ＲＲＮＡの安定性または翻訳を促進させ、それによりｓＩＬ７Ｒの発現が増大する。別の態様では、ＳＭ－ＡＳＯ内の少なくとも１個またはそれより多くのヌクレオチドが：１つまたはそれより多くのホスホロチオエート、ホスホロジチオエート、ホスホジエステル、メチルホスホネート、ホスホロアミデート、メチルホスホネート、ホスホトリエステル、ホスホロアリデート、モルフォリノ、アミデートカルバメート、カルボキシメチル、アセトアミデート、ポリアミド、スルホネート、スルホンアミド、スルファメート、ホルムアセタール、チオホルムアセタールおよび／またはアルキルシリル置換、一部または完全修飾骨格、例えば完全修飾糖リン酸骨格、ロック核酸骨格、ペプチド性骨格、ホスホトリエステル骨格、ホスホロアミデート骨格、シロキサン骨格、カルボキシメチルエステル骨格、アセトアミデート骨格、カルバメート骨格、チオエーテル骨格、架橋メチレンホスホネート骨格、ホスホロチオエート骨格、メチルホスホネート骨格、アルキルホスホネート骨格、リン酸エステル骨格、アルキルホスホノチオエート骨格、ホスホロジチオエート骨格、カーボネート骨格、リン酸トリエステル骨格、カルボキシメチルエステル骨格、メチルホスホロチオエート骨格、ホスホロジチオエート骨格、ｐ－エトキシ結合を有する骨格、糖修飾、例えば２’－Ｏ－メチル（２’－Ｏ－メチルヌクレオチド）、２’－Ｏ－メチルオキシエトキシ（２’－Ｏ－ＭＯＥ）、２’－Ｏ－アルキル修飾糖部分または二環性糖部分、ヌクレオチド模倣物、ペプチド核酸（ＰＮＡ）、モルフォリノ核酸、シクロヘキセニル核酸、アンヒドロヘキシトール核酸、グリコール核酸、トレオース核酸およびロック核酸（ＬＮＡ）ならびに前述のもののいずれかの２つ以上の任意の組合せから選択される（１）リボースもしくは他の糖単位、（２）塩基または（３）骨格の修飾または置換を含む天然に存在しない修飾を含む。別の態様では、ＳＭ－ＡＳＯ内の少なくとも１個またはそれより多くのヌクレオチドが、ヌクレオチド塩基に対する天然に存在しない修飾を含む。別の態様では、ＳＭ－ＡＳＯが、ＩＬ７Ｒのエクソン５－エクソン７の境界を標的化することにより、エクソン６が欠損しているＩＬ７ＲｍＲＮＡの安定性を高める。別の態様では、ＳＭ－ＡＳＯが、エクソン６が欠損しているＩＬ７ＲｍＲＮＡの翻訳を促進させる。別の態様では、ＳＭ－ＡＳＯが、表３のＳＭ－ＡＳＯのＳＥＱＩＤ（ＳＭ－ＡＳＯの配列番号：１４～５０）のうちの任意のものまたはその一部分の単独または組合せのいずれか、あるいはＩＬ７ＲＲＮＡ内の標的の完全配列において少なくとも７０、７５、８０、８４、８５、８８、９２、９３、９４、９５または９６％の相補性およびまたは同一性を有する配列から選択される。別の態様では、該オリゴヌクレオチドが、表４の標的ＳＥＱＩＤ（標的配列番号：１４～５０）のうちの任意のものを全体または部分的のいずれかで標的化する。別の態様では、該組成物が薬学的に許容され得る賦形剤、塩または担体をさらに含む。別の態様では、該障害が、ある型のがんである。別の態様では、該方法が、患者から細胞を得、該細胞を、該インターロイキン－７受容体（ＩＬ７Ｒ）プレｍＲＮＡの配列に特異的に結合してエクソン６の含有を低減させ、それによりｓＩＬ７Ｒの発現を増大させる該オリゴヌクレオチドを一過的もしくは永久的に発現するように修飾するか、または該細胞に、ｓＩＬ７Ｒ発現を促進させる該ＡＳＯを負荷する工程および修飾された該細胞を該患者に再導入する工程をさらに含む。別の態様では、該方法が、遺伝子治療における使用のための、エクソン６のスプライシングに影響を及ぼすインターロイキン－７受容体（ＩＬ７Ｒ）プレｍＲＮＡの配列に特異的に結合する該オリゴヌクレオチドを発現するベクターを作成すること、および該患者を、該ベクターを用いて処置することをさらに含む。

別の実施形態において、本発明は、インターロイキン－７受容体（ＩＬ７Ｒ）プレｍＲＮＡ内におけるエクソン６の含有を増大させるための組成物、エクソン６のスプライシングに影響を及ぼすインターロイキン－７受容体（ＩＬ７Ｒ）プレｍＲＮＡ内の配列に特異的に結合するスプライス変調アンチセンスオリゴヌクレオチド（ＳＭ－ＡＳＯ）を接触させることを含む方法を含み、ＳＭ－ＡＳＯはＩＬ７ＲプレｍＲＮＡ内におけるエクソン６の含有を低減させ、ＩＬ７Ｒの可溶性アイソフォーム（ｓＩＬ７Ｒ）の発現を増大させるものである。一態様において、該組成物は、がんの処置に有効な１種類またはそれより多くの活性薬剤、例えば限定されないが、免疫チェックポイント阻害剤（例えば、ニボルマブ）、治療用抗体（例えば、ハーセプチン）、従来の化学療法（例えば、タキソール）または治療用放射線とのＳＭ－ＡＳＯの併用療法をさらに含む。

別の実施形態において、本発明は、患者から細胞を得、該細胞を、該インターロイキン－７受容体（ＩＬ７Ｒ）プレｍＲＮＡの配列に特異的に結合してエクソン６の含有を低減させ、それによりｓＩＬ７Ｒの発現を増大させる該オリゴヌクレオチドを一過的もしくは永久的に発現するように修飾するか、または該細胞に、ｓＩＬ７Ｒ発現を促進させる該ＡＳＯを負荷する工程および修飾された該細胞を該患者に再導入する工程をさらに含む。別の態様では、該方法が、患者から細胞を得、該細胞を、ｓＩＬ７Ｒを一過的または永久的に発現するように修飾する工程および修飾された該細胞を該患者に再導入する工程をさらに含む。別の実施形態において、本発明は、遺伝子治療における使用のための、エクソン６のスプライシングに影響を及ぼすインターロイキン－７受容体（ＩＬ７Ｒ）プレｍＲＮＡの配列に特異的に結合する該オリゴヌクレオチドを発現するベクターおよび該患者を、該ベクターを用いて処置することを含む。別の実施形態において、本発明は、遺伝子治療における使用のための、ｓＩＬ７Ｒを発現するベクターおよび該患者を、該ベクターを用いて処置することを含む。

別の実施形態において、本発明は、アンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳＯ）またはスプライス変調アンチセンスオリゴヌクレオチド（ＳＭ－ＡＳＯ）であり、エクソン６のスプライシングに影響を及ぼすインターロイキン－７受容体（ＩＬ７Ｒ）プレｍＲＮＡ内の配列に特異的に結合するオリゴヌクレオチドを含む核酸を発現するベクターを含み、ＳＭ－ＡＳＯはＩＬ７ＲプレｍＲＮＡ内におけるエクソン６の含有を低減させ、ＩＬ７Ｒの可溶性アイソフォーム（ｓＩＬ７Ｒ）の発現を増大させるものである。別の実施形態において、本発明は、ｓＩＬ７Ｒを発現し、それによりｓＩＬ７Ｒの発現を増大させるベクターを含む。一態様において、該ベクターはウイルスベクターまたはプラスミドである。

次に、本発明の特長および利点のより完全な理解のため、添付の図とともに本発明の詳細な説明を記載する。図において：

ＩＬ７Ｒエクソン６内の機能性シス作用性スプライシングエレメントを標的化するＡＳＯのスクリーニング。（Ａ）ＧＦＰ－ＩＬ７Ｒレポーターの模式図。ＩＬ７Ｒエクソン６のスプライシングの蛍光レポーターを、イントロン５と６にまたがり、ＧＦＰのコード配列を介在させたＩＬ７Ｒのゲノム配列をクローニングすることにより作出した。ここで、ＧＦＰはＩＬ７Ｒエクソン６排除によってのみ発現される。（Ｂ）機能性シス作用性スプライシングエレメントの変異誘発の効果を、ＡＳＯでの対応するエレメントのブロックと比較するアプローチの模式図。５’ｓｓ、ＥＳＥ２およびＥＳＳ３に対する変異をＧＦＰ－ＩＬ７Ｒレポーター内に導入し、その効果を、ＡＳＯでの対応するシスエレメントの立体的ブロックと比較した。エクソン６の配列を下方に拡大しており（薄い灰色の四角）、関連するシス作用性エレメントを太い水平線で示す：エンハンサーＥＳＥ２、サイレンサーＥＳＳ２およびＥＳＳ３ならびに５’ｓｓ。ＥＳＥ２、ＥＳＳ３および５’ｓｓは転換型置換によって変異させ、変異された配列を各エレメントの下部に灰色背景の四角でハイライトする：５’Ｃｏｎｓおよび５’Ｍｕｔは、それぞれ、５’ｓｓに対するコンセンサスまたはクリッピング変異を表し、一方、ΔＥＳＥ２およびΔＥＳＳ３は、それぞれＥＳＥ２およびＥＳＳ３に対する変異を表す。これらのシスエレメントを標的化するＡＳＯ（ＩＬ７Ｒ－００１～ＩＬ７Ｒ－００５）の配列をエクソン配列の上部に示す：ＩＬ７Ｒ－００１はエクソン６内の５’ｓｓをブロックし、ＩＬ７Ｒ－００２はＥＳＥ２をブロックし、ＩＬ７Ｒ－００３はＥＳＳ２とＥＳＳ３をブロックし、ＩＬ７Ｒ－００４はＥＳＳ２とＥＳＳ３の間の配列をブロックし、ＩＬ７Ｒ－００５はＥＳＳ３をブロックする。（Ｃ，Ｅ）レポータースプライシング。エクソン６のスプライシングをレポーター由来の転写物におけるＲＴ－ＰＣＲにより、野生型もしくは変異型のレポーターを安定的に発現しているＨｅＬａ細胞（Ｃ）、または野生型レポーターを安定的に発現しており、１０μＭの対照（ＡＳＯ－Ｃｔｒｌ）もしくは実験（ＩＬ７Ｒ－００１～ＩＬ７Ｒ－００５）モルフォリノＡＳＯで、Ｅｎｄｏ－Ｐｏｒｔｅｒトランスフェクション試薬を用いてトランスフェクトした細胞（Ｅ）において定量した。エクソン６排除のパーセンテージ（％）（平均±Ｓ．Ｄ．）は：［排除された産物／（排除された産物＋含有された産物）］として求め、各条件でのゲル画像の下部に示す。（Ｄ、Ｆ）ＧＦＰ発現。ＧＦＰの発現を、異なる型のレポーターを安定的に発現しているパネルＣの細胞（Ｄ）またはＡＳＯでトランスフェクトしたパネルＥの細胞（Ｆ）におけるフローサイトメトリーによる平均蛍光強度（ＭＦＩ）として定量した。ＧＦＰのＭＦＩ（平均±Ｓ．Ｄ．）の定量を、すべての変異型の野生型に対する（Ｄ）またはすべてのＡＳＯの対照ＡＳＯに対する（Ｆ）Ｌｏｇ２（変化倍数）［Ｌｏｇ２（ＦＣ）］として示す。すべてのパネルにおいて、統計学的有意性は、野生型または対照ＡＳＯに対するスチューデントのｔ検定ペアワイズ比較によってアセスメントした（^＊ｐ＜０．０５、^＊＊ｐ＜０．０１、^＊＊＊ｐ＜０．００１）。ＩＬ７Ｒエクソン６内の機能性シス作用性スプライシングエレメントを標的化するＡＳＯのスクリーニング。（Ａ）ＧＦＰ－ＩＬ７Ｒレポーターの模式図。ＩＬ７Ｒエクソン６のスプライシングの蛍光レポーターを、イントロン５と６にまたがり、ＧＦＰのコード配列を介在させたＩＬ７Ｒのゲノム配列をクローニングすることにより作出した。ここで、ＧＦＰはＩＬ７Ｒエクソン６排除によってのみ発現される。（Ｂ）機能性シス作用性スプライシングエレメントの変異誘発の効果を、ＡＳＯでの対応するエレメントのブロックと比較するアプローチの模式図。５’ｓｓ、ＥＳＥ２およびＥＳＳ３に対する変異をＧＦＰ－ＩＬ７Ｒレポーター内に導入し、その効果を、ＡＳＯでの対応するシスエレメントの立体的ブロックと比較した。エクソン６の配列を下方に拡大しており（薄い灰色の四角）、関連するシス作用性エレメントを太い水平線で示す：エンハンサーＥＳＥ２、サイレンサーＥＳＳ２およびＥＳＳ３ならびに５’ｓｓ。ＥＳＥ２、ＥＳＳ３および５’ｓｓは転換型置換によって変異させ、変異された配列を各エレメントの下部に灰色背景の四角でハイライトする：５’Ｃｏｎｓおよび５’Ｍｕｔは、それぞれ、５’ｓｓに対するコンセンサスまたはクリッピング変異を表し、一方、ΔＥＳＥ２およびΔＥＳＳ３は、それぞれＥＳＥ２およびＥＳＳ３に対する変異を表す。これらのシスエレメントを標的化するＡＳＯ（ＩＬ７Ｒ－００１～ＩＬ７Ｒ－００５）の配列をエクソン配列の上部に示す：ＩＬ７Ｒ－００１はエクソン６内の５’ｓｓをブロックし、ＩＬ７Ｒ－００２はＥＳＥ２をブロックし、ＩＬ７Ｒ－００３はＥＳＳ２とＥＳＳ３をブロックし、ＩＬ７Ｒ－００４はＥＳＳ２とＥＳＳ３の間の配列をブロックし、ＩＬ７Ｒ－００５はＥＳＳ３をブロックする。（Ｃ，Ｅ）レポータースプライシング。エクソン６のスプライシングをレポーター由来の転写物におけるＲＴ－ＰＣＲにより、野生型もしくは変異型のレポーターを安定的に発現しているＨｅＬａ細胞（Ｃ）、または野生型レポーターを安定的に発現しており、１０μＭの対照（ＡＳＯ－Ｃｔｒｌ）もしくは実験（ＩＬ７Ｒ－００１～ＩＬ７Ｒ－００５）モルフォリノＡＳＯで、Ｅｎｄｏ－Ｐｏｒｔｅｒトランスフェクション試薬を用いてトランスフェクトした細胞（Ｅ）において定量した。エクソン６排除のパーセンテージ（％）（平均±Ｓ．Ｄ．）は：［排除された産物／（排除された産物＋含有された産物）］として求め、各条件でのゲル画像の下部に示す。（Ｄ、Ｆ）ＧＦＰ発現。ＧＦＰの発現を、異なる型のレポーターを安定的に発現しているパネルＣの細胞（Ｄ）またはＡＳＯでトランスフェクトしたパネルＥの細胞（Ｆ）におけるフローサイトメトリーによる平均蛍光強度（ＭＦＩ）として定量した。ＧＦＰのＭＦＩ（平均±Ｓ．Ｄ．）の定量を、すべての変異型の野生型に対する（Ｄ）またはすべてのＡＳＯの対照ＡＳＯに対する（Ｆ）Ｌｏｇ２（変化倍数）［Ｌｏｇ２（ＦＣ）］として示す。すべてのパネルにおいて、統計学的有意性は、野生型または対照ＡＳＯに対するスチューデントのｔ検定ペアワイズ比較によってアセスメントした（^＊ｐ＜０．０５、^＊＊ｐ＜０．０１、^＊＊＊ｐ＜０．００１）。ＩＬ７Ｒエクソン６内の機能性シス作用性スプライシングエレメントを標的化するＡＳＯのスクリーニング。（Ａ）ＧＦＰ－ＩＬ７Ｒレポーターの模式図。ＩＬ７Ｒエクソン６のスプライシングの蛍光レポーターを、イントロン５と６にまたがり、ＧＦＰのコード配列を介在させたＩＬ７Ｒのゲノム配列をクローニングすることにより作出した。ここで、ＧＦＰはＩＬ７Ｒエクソン６排除によってのみ発現される。（Ｂ）機能性シス作用性スプライシングエレメントの変異誘発の効果を、ＡＳＯでの対応するエレメントのブロックと比較するアプローチの模式図。５’ｓｓ、ＥＳＥ２およびＥＳＳ３に対する変異をＧＦＰ－ＩＬ７Ｒレポーター内に導入し、その効果を、ＡＳＯでの対応するシスエレメントの立体的ブロックと比較した。エクソン６の配列を下方に拡大しており（薄い灰色の四角）、関連するシス作用性エレメントを太い水平線で示す：エンハンサーＥＳＥ２、サイレンサーＥＳＳ２およびＥＳＳ３ならびに５’ｓｓ。ＥＳＥ２、ＥＳＳ３および５’ｓｓは転換型置換によって変異させ、変異された配列を各エレメントの下部に灰色背景の四角でハイライトする：５’Ｃｏｎｓおよび５’Ｍｕｔは、それぞれ、５’ｓｓに対するコンセンサスまたはクリッピング変異を表し、一方、ΔＥＳＥ２およびΔＥＳＳ３は、それぞれＥＳＥ２およびＥＳＳ３に対する変異を表す。これらのシスエレメントを標的化するＡＳＯ（ＩＬ７Ｒ－００１～ＩＬ７Ｒ－００５）の配列をエクソン配列の上部に示す：ＩＬ７Ｒ－００１はエクソン６内の５’ｓｓをブロックし、ＩＬ７Ｒ－００２はＥＳＥ２をブロックし、ＩＬ７Ｒ－００３はＥＳＳ２とＥＳＳ３をブロックし、ＩＬ７Ｒ－００４はＥＳＳ２とＥＳＳ３の間の配列をブロックし、ＩＬ７Ｒ－００５はＥＳＳ３をブロックする。（Ｃ，Ｅ）レポータースプライシング。エクソン６のスプライシングをレポーター由来の転写物におけるＲＴ－ＰＣＲにより、野生型もしくは変異型のレポーターを安定的に発現しているＨｅＬａ細胞（Ｃ）、または野生型レポーターを安定的に発現しており、１０μＭの対照（ＡＳＯ－Ｃｔｒｌ）もしくは実験（ＩＬ７Ｒ－００１～ＩＬ７Ｒ－００５）モルフォリノＡＳＯで、Ｅｎｄｏ－Ｐｏｒｔｅｒトランスフェクション試薬を用いてトランスフェクトした細胞（Ｅ）において定量した。エクソン６排除のパーセンテージ（％）（平均±Ｓ．Ｄ．）は：［排除された産物／（排除された産物＋含有された産物）］として求め、各条件でのゲル画像の下部に示す。（Ｄ、Ｆ）ＧＦＰ発現。ＧＦＰの発現を、異なる型のレポーターを安定的に発現しているパネルＣの細胞（Ｄ）またはＡＳＯでトランスフェクトしたパネルＥの細胞（Ｆ）におけるフローサイトメトリーによる平均蛍光強度（ＭＦＩ）として定量した。ＧＦＰのＭＦＩ（平均±Ｓ．Ｄ．）の定量を、すべての変異型の野生型に対する（Ｄ）またはすべてのＡＳＯの対照ＡＳＯに対する（Ｆ）Ｌｏｇ２（変化倍数）［Ｌｏｇ２（ＦＣ）］として示す。すべてのパネルにおいて、統計学的有意性は、野生型または対照ＡＳＯに対するスチューデントのｔ検定ペアワイズ比較によってアセスメントした（^＊ｐ＜０．０５、^＊＊ｐ＜０．０１、^＊＊＊ｐ＜０．００１）。ＩＬ７Ｒエクソン６内の機能性シス作用性スプライシングエレメントを標的化するＡＳＯのスクリーニング。（Ａ）ＧＦＰ－ＩＬ７Ｒレポーターの模式図。ＩＬ７Ｒエクソン６のスプライシングの蛍光レポーターを、イントロン５と６にまたがり、ＧＦＰのコード配列を介在させたＩＬ７Ｒのゲノム配列をクローニングすることにより作出した。ここで、ＧＦＰはＩＬ７Ｒエクソン６排除によってのみ発現される。（Ｂ）機能性シス作用性スプライシングエレメントの変異誘発の効果を、ＡＳＯでの対応するエレメントのブロックと比較するアプローチの模式図。５’ｓｓ、ＥＳＥ２およびＥＳＳ３に対する変異をＧＦＰ－ＩＬ７Ｒレポーター内に導入し、その効果を、ＡＳＯでの対応するシスエレメントの立体的ブロックと比較した。エクソン６の配列を下方に拡大しており（薄い灰色の四角）、関連するシス作用性エレメントを太い水平線で示す：エンハンサーＥＳＥ２、サイレンサーＥＳＳ２およびＥＳＳ３ならびに５’ｓｓ。ＥＳＥ２、ＥＳＳ３および５’ｓｓは転換型置換によって変異させ、変異された配列を各エレメントの下部に灰色背景の四角でハイライトする：５’Ｃｏｎｓおよび５’Ｍｕｔは、それぞれ、５’ｓｓに対するコンセンサスまたはクリッピング変異を表し、一方、ΔＥＳＥ２およびΔＥＳＳ３は、それぞれＥＳＥ２およびＥＳＳ３に対する変異を表す。これらのシスエレメントを標的化するＡＳＯ（ＩＬ７Ｒ－００１～ＩＬ７Ｒ－００５）の配列をエクソン配列の上部に示す：ＩＬ７Ｒ－００１はエクソン６内の５’ｓｓをブロックし、ＩＬ７Ｒ－００２はＥＳＥ２をブロックし、ＩＬ７Ｒ－００３はＥＳＳ２とＥＳＳ３をブロックし、ＩＬ７Ｒ－００４はＥＳＳ２とＥＳＳ３の間の配列をブロックし、ＩＬ７Ｒ－００５はＥＳＳ３をブロックする。（Ｃ，Ｅ）レポータースプライシング。エクソン６のスプライシングをレポーター由来の転写物におけるＲＴ－ＰＣＲにより、野生型もしくは変異型のレポーターを安定的に発現しているＨｅＬａ細胞（Ｃ）、または野生型レポーターを安定的に発現しており、１０μＭの対照（ＡＳＯ－Ｃｔｒｌ）もしくは実験（ＩＬ７Ｒ－００１～ＩＬ７Ｒ－００５）モルフォリノＡＳＯで、Ｅｎｄｏ－Ｐｏｒｔｅｒトランスフェクション試薬を用いてトランスフェクトした細胞（Ｅ）において定量した。エクソン６排除のパーセンテージ（％）（平均±Ｓ．Ｄ．）は：［排除された産物／（排除された産物＋含有された産物）］として求め、各条件でのゲル画像の下部に示す。（Ｄ、Ｆ）ＧＦＰ発現。ＧＦＰの発現を、異なる型のレポーターを安定的に発現しているパネルＣの細胞（Ｄ）またはＡＳＯでトランスフェクトしたパネルＥの細胞（Ｆ）におけるフローサイトメトリーによる平均蛍光強度（ＭＦＩ）として定量した。ＧＦＰのＭＦＩ（平均±Ｓ．Ｄ．）の定量を、すべての変異型の野生型に対する（Ｄ）またはすべてのＡＳＯの対照ＡＳＯに対する（Ｆ）Ｌｏｇ２（変化倍数）［Ｌｏｇ２（ＦＣ）］として示す。すべてのパネルにおいて、統計学的有意性は、野生型または対照ＡＳＯに対するスチューデントのｔ検定ペアワイズ比較によってアセスメントした（^＊ｐ＜０．０５、^＊＊ｐ＜０．０１、^＊＊＊ｐ＜０．００１）。ＩＬ７Ｒエクソン６内の機能性シス作用性スプライシングエレメントを標的化するＡＳＯのスクリーニング。（Ａ）ＧＦＰ－ＩＬ７Ｒレポーターの模式図。ＩＬ７Ｒエクソン６のスプライシングの蛍光レポーターを、イントロン５と６にまたがり、ＧＦＰのコード配列を介在させたＩＬ７Ｒのゲノム配列をクローニングすることにより作出した。ここで、ＧＦＰはＩＬ７Ｒエクソン６排除によってのみ発現される。（Ｂ）機能性シス作用性スプライシングエレメントの変異誘発の効果を、ＡＳＯでの対応するエレメントのブロックと比較するアプローチの模式図。５’ｓｓ、ＥＳＥ２およびＥＳＳ３に対する変異をＧＦＰ－ＩＬ７Ｒレポーター内に導入し、その効果を、ＡＳＯでの対応するシスエレメントの立体的ブロックと比較した。エクソン６の配列を下方に拡大しており（薄い灰色の四角）、関連するシス作用性エレメントを太い水平線で示す：エンハンサーＥＳＥ２、サイレンサーＥＳＳ２およびＥＳＳ３ならびに５’ｓｓ。ＥＳＥ２、ＥＳＳ３および５’ｓｓは転換型置換によって変異させ、変異された配列を各エレメントの下部に灰色背景の四角でハイライトする：５’Ｃｏｎｓおよび５’Ｍｕｔは、それぞれ、５’ｓｓに対するコンセンサスまたはクリッピング変異を表し、一方、ΔＥＳＥ２およびΔＥＳＳ３は、それぞれＥＳＥ２およびＥＳＳ３に対する変異を表す。これらのシスエレメントを標的化するＡＳＯ（ＩＬ７Ｒ－００１～ＩＬ７Ｒ－００５）の配列をエクソン配列の上部に示す：ＩＬ７Ｒ－００１はエクソン６内の５’ｓｓをブロックし、ＩＬ７Ｒ－００２はＥＳＥ２をブロックし、ＩＬ７Ｒ－００３はＥＳＳ２とＥＳＳ３をブロックし、ＩＬ７Ｒ－００４はＥＳＳ２とＥＳＳ３の間の配列をブロックし、ＩＬ７Ｒ－００５はＥＳＳ３をブロックする。（Ｃ，Ｅ）レポータースプライシング。エクソン６のスプライシングをレポーター由来の転写物におけるＲＴ－ＰＣＲにより、野生型もしくは変異型のレポーターを安定的に発現しているＨｅＬａ細胞（Ｃ）、または野生型レポーターを安定的に発現しており、１０μＭの対照（ＡＳＯ－Ｃｔｒｌ）もしくは実験（ＩＬ７Ｒ－００１～ＩＬ７Ｒ－００５）モルフォリノＡＳＯで、Ｅｎｄｏ－Ｐｏｒｔｅｒトランスフェクション試薬を用いてトランスフェクトした細胞（Ｅ）において定量した。エクソン６排除のパーセンテージ（％）（平均±Ｓ．Ｄ．）は：［排除された産物／（排除された産物＋含有された産物）］として求め、各条件でのゲル画像の下部に示す。（Ｄ、Ｆ）ＧＦＰ発現。ＧＦＰの発現を、異なる型のレポーターを安定的に発現しているパネルＣの細胞（Ｄ）またはＡＳＯでトランスフェクトしたパネルＥの細胞（Ｆ）におけるフローサイトメトリーによる平均蛍光強度（ＭＦＩ）として定量した。ＧＦＰのＭＦＩ（平均±Ｓ．Ｄ．）の定量を、すべての変異型の野生型に対する（Ｄ）またはすべてのＡＳＯの対照ＡＳＯに対する（Ｆ）Ｌｏｇ２（変化倍数）［Ｌｏｇ２（ＦＣ）］として示す。すべてのパネルにおいて、統計学的有意性は、野生型または対照ＡＳＯに対するスチューデントのｔ検定ペアワイズ比較によってアセスメントした（^＊ｐ＜０．０５、^＊＊ｐ＜０．０１、^＊＊＊ｐ＜０．００１）。ＩＬ７Ｒエクソン６内の機能性シス作用性スプライシングエレメントを標的化するＡＳＯのスクリーニング。（Ａ）ＧＦＰ－ＩＬ７Ｒレポーターの模式図。ＩＬ７Ｒエクソン６のスプライシングの蛍光レポーターを、イントロン５と６にまたがり、ＧＦＰのコード配列を介在させたＩＬ７Ｒのゲノム配列をクローニングすることにより作出した。ここで、ＧＦＰはＩＬ７Ｒエクソン６排除によってのみ発現される。（Ｂ）機能性シス作用性スプライシングエレメントの変異誘発の効果を、ＡＳＯでの対応するエレメントのブロックと比較するアプローチの模式図。５’ｓｓ、ＥＳＥ２およびＥＳＳ３に対する変異をＧＦＰ－ＩＬ７Ｒレポーター内に導入し、その効果を、ＡＳＯでの対応するシスエレメントの立体的ブロックと比較した。エクソン６の配列を下方に拡大しており（薄い灰色の四角）、関連するシス作用性エレメントを太い水平線で示す：エンハンサーＥＳＥ２、サイレンサーＥＳＳ２およびＥＳＳ３ならびに５’ｓｓ。ＥＳＥ２、ＥＳＳ３および５’ｓｓは転換型置換によって変異させ、変異された配列を各エレメントの下部に灰色背景の四角でハイライトする：５’Ｃｏｎｓおよび５’Ｍｕｔは、それぞれ、５’ｓｓに対するコンセンサスまたはクリッピング変異を表し、一方、ΔＥＳＥ２およびΔＥＳＳ３は、それぞれＥＳＥ２およびＥＳＳ３に対する変異を表す。これらのシスエレメントを標的化するＡＳＯ（ＩＬ７Ｒ－００１～ＩＬ７Ｒ－００５）の配列をエクソン配列の上部に示す：ＩＬ７Ｒ－００１はエクソン６内の５’ｓｓをブロックし、ＩＬ７Ｒ－００２はＥＳＥ２をブロックし、ＩＬ７Ｒ－００３はＥＳＳ２とＥＳＳ３をブロックし、ＩＬ７Ｒ－００４はＥＳＳ２とＥＳＳ３の間の配列をブロックし、ＩＬ７Ｒ－００５はＥＳＳ３をブロックする。（Ｃ，Ｅ）レポータースプライシング。エクソン６のスプライシングをレポーター由来の転写物におけるＲＴ－ＰＣＲにより、野生型もしくは変異型のレポーターを安定的に発現しているＨｅＬａ細胞（Ｃ）、または野生型レポーターを安定的に発現しており、１０μＭの対照（ＡＳＯ－Ｃｔｒｌ）もしくは実験（ＩＬ７Ｒ－００１～ＩＬ７Ｒ－００５）モルフォリノＡＳＯで、Ｅｎｄｏ－Ｐｏｒｔｅｒトランスフェクション試薬を用いてトランスフェクトした細胞（Ｅ）において定量した。エクソン６排除のパーセンテージ（％）（平均±Ｓ．Ｄ．）は：［排除された産物／（排除された産物＋含有された産物）］として求め、各条件でのゲル画像の下部に示す。（Ｄ、Ｆ）ＧＦＰ発現。ＧＦＰの発現を、異なる型のレポーターを安定的に発現しているパネルＣの細胞（Ｄ）またはＡＳＯでトランスフェクトしたパネルＥの細胞（Ｆ）におけるフローサイトメトリーによる平均蛍光強度（ＭＦＩ）として定量した。ＧＦＰのＭＦＩ（平均±Ｓ．Ｄ．）の定量を、すべての変異型の野生型に対する（Ｄ）またはすべてのＡＳＯの対照ＡＳＯに対する（Ｆ）Ｌｏｇ２（変化倍数）［Ｌｏｇ２（ＦＣ）］として示す。すべてのパネルにおいて、統計学的有意性は、野生型または対照ＡＳＯに対するスチューデントのｔ検定ペアワイズ比較によってアセスメントした（^＊ｐ＜０．０５、^＊＊ｐ＜０．０１、^＊＊＊ｐ＜０．００１）。機能性ＡＳＯを見出すためのＡＳＯ－Ｗａｌｋスクリーニング。モルホリノＡＳＯ（１５～２５ｎｔ）は、エクソン６に隣接する領域から始まり、このエクソンから５ｎｔ鎖分離れたＩＬ７Ｒイントロン５および６内のオーバーラップ配列に相補的であった。１０μＭのＡＳＯで、ＧＦＰ－ＩＬ７Ｒスプライシングレポーターを安定的に発現しているＨｅＬａ細胞株をトランスフェクトし、ここで、ＩＬ７Ｒエクソン６排除によってＧＦＰが発現される。Ａ～Ｂ，イントロン５（Ａ）または６（Ｂ）を標的化するＡＳＯのＧＦＰ発現解析。ＧＦＰ発現の変化をフローサイトメトリーによる平均蛍光強度（ＭＦＩ）として定量し、対照（ＡＳＯ－Ｃｔｒｌ）に対するＬｏｇ２（変化倍数）として示す。灰色でハイライトしたバーはＧＦＰ発現を統計学的に有意に促進させたＡＳＯを示す。統計学的有意性は、対照に対するスチューデントのｔ検定ペアワイズ比較によってアセスメントした（^＊ｐ＜０．０５、^＊＊ｐ＜０．０１、^＊＊＊ｐ＜０．００１）。機能性ＡＳＯを見出すためのＡＳＯ－Ｗａｌｋスクリーニング。モルホリノＡＳＯ（１５～２５ｎｔ）は、エクソン６に隣接する領域から始まり、このエクソンから５ｎｔ鎖分離れたＩＬ７Ｒイントロン５および６内のオーバーラップ配列に相補的であった。１０μＭのＡＳＯで、ＧＦＰ－ＩＬ７Ｒスプライシングレポーターを安定的に発現しているＨｅＬａ細胞株をトランスフェクトし、ここで、ＩＬ７Ｒエクソン６排除によってＧＦＰが発現される。Ａ～Ｂ，イントロン５（Ａ）または６（Ｂ）を標的化するＡＳＯのＧＦＰ発現解析。ＧＦＰ発現の変化をフローサイトメトリーによる平均蛍光強度（ＭＦＩ）として定量し、対照（ＡＳＯ－Ｃｔｒｌ）に対するＬｏｇ２（変化倍数）として示す。灰色でハイライトしたバーはＧＦＰ発現を統計学的に有意に促進させたＡＳＯを示す。統計学的有意性は、対照に対するスチューデントのｔ検定ペアワイズ比較によってアセスメントした（^＊ｐ＜０．０５、^＊＊ｐ＜０．０１、^＊＊＊ｐ＜０．００１）。ＩＬ７Ｒエクソン６のスプライシングに対するリードＡＳＯの濃度依存的効果。モルホリノＡＳＯＡＳＯ－Ｃｔｒｌ、ＩＬ７Ｒ－００１またはＩＬ７Ｒ－００４でＥｎｄｏ－Ｐｏｒｔｅｒを伴って、野生型レポーター安定細胞株を漸増濃度（０、１、５および１０μＭ）にてトランスフェクトした。トランスフェクションの２日後、細胞をＧＦＰ発現およびエクソン６のスプライシングについて、レポーターおよび内因性ＩＬ７Ｒ遺伝子由来の転写物においてアッセイした。（Ａ）ＧＦＰ発現。ＧＦＰの平均蛍光強度（ＭＦＩ）をフローサイトメトリーによって定量した。ＭＦＩの定量を、０μＭに対するＬｏｇ２（ＦＣ）の用量応答曲線として示す。（Ｂ～Ｃ）ＩＬ７Ｒエクソン６のスプライシング。エクソン６排除をＧＦＰ－ＩＬ７Ｒレポーター（Ｂ）または内因性ＩＬ７Ｒ遺伝子（Ｃ）由来の転写物においてＲＴ－ＰＣＲによってアセスメントした。代表的なゲル画像を、下部にＡＳＯ濃度の関数としてのプロットしたエクソン６排除のパーセンテージ（％）の定量（平均±Ｓ．Ｄ．）の上部に示す。統計学的有意性は、すべてのパネルにおいて、０μＭに対するスチューデントのｔ検定ペアワイズ比較によってアセスメントした（^＊ｐ＜０．０５、^＊＊ｐ＜０．０１、^＊＊＊ｐ＜０．００１）。ＩＬ７Ｒエクソン６のスプライシングに対するリードＡＳＯの濃度依存的効果。モルホリノＡＳＯＡＳＯ－Ｃｔｒｌ、ＩＬ７Ｒ－００１またはＩＬ７Ｒ－００４でＥｎｄｏ－Ｐｏｒｔｅｒを伴って、野生型レポーター安定細胞株を漸増濃度（０、１、５および１０μＭ）にてトランスフェクトした。トランスフェクションの２日後、細胞をＧＦＰ発現およびエクソン６のスプライシングについて、レポーターおよび内因性ＩＬ７Ｒ遺伝子由来の転写物においてアッセイした。（Ａ）ＧＦＰ発現。ＧＦＰの平均蛍光強度（ＭＦＩ）をフローサイトメトリーによって定量した。ＭＦＩの定量を、０μＭに対するＬｏｇ２（ＦＣ）の用量応答曲線として示す。（Ｂ～Ｃ）ＩＬ７Ｒエクソン６のスプライシング。エクソン６排除をＧＦＰ－ＩＬ７Ｒレポーター（Ｂ）または内因性ＩＬ７Ｒ遺伝子（Ｃ）由来の転写物においてＲＴ－ＰＣＲによってアセスメントした。代表的なゲル画像を、下部にＡＳＯ濃度の関数としてのプロットしたエクソン６排除のパーセンテージ（％）の定量（平均±Ｓ．Ｄ．）の上部に示す。統計学的有意性は、すべてのパネルにおいて、０μＭに対するスチューデントのｔ検定ペアワイズ比較によってアセスメントした（^＊ｐ＜０．０５、^＊＊ｐ＜０．０１、^＊＊＊ｐ＜０．００１）。ＩＬ７Ｒエクソン６のスプライシングに対するリードＡＳＯの濃度依存的効果。モルホリノＡＳＯＡＳＯ－Ｃｔｒｌ、ＩＬ７Ｒ－００１またはＩＬ７Ｒ－００４でＥｎｄｏ－Ｐｏｒｔｅｒを伴って、野生型レポーター安定細胞株を漸増濃度（０、１、５および１０μＭ）にてトランスフェクトした。トランスフェクションの２日後、細胞をＧＦＰ発現およびエクソン６のスプライシングについて、レポーターおよび内因性ＩＬ７Ｒ遺伝子由来の転写物においてアッセイした。（Ａ）ＧＦＰ発現。ＧＦＰの平均蛍光強度（ＭＦＩ）をフローサイトメトリーによって定量した。ＭＦＩの定量を、０μＭに対するＬｏｇ２（ＦＣ）の用量応答曲線として示す。（Ｂ～Ｃ）ＩＬ７Ｒエクソン６のスプライシング。エクソン６排除をＧＦＰ－ＩＬ７Ｒレポーター（Ｂ）または内因性ＩＬ７Ｒ遺伝子（Ｃ）由来の転写物においてＲＴ－ＰＣＲによってアセスメントした。代表的なゲル画像を、下部にＡＳＯ濃度の関数としてのプロットしたエクソン６排除のパーセンテージ（％）の定量（平均±Ｓ．Ｄ．）の上部に示す。統計学的有意性は、すべてのパネルにおいて、０μＭに対するスチューデントのｔ検定ペアワイズ比較によってアセスメントした（^＊ｐ＜０．０５、^＊＊ｐ＜０．０１、^＊＊＊ｐ＜０．００１）。リードＡＳＯはＨｅＬａ細胞におけるｓＩＬ７Ｒの分泌を変調させる。１０μＭの対象のモルホリノＡＳＯ（ＡＳＯ－Ｃｔｒｌ、ＩＬ７Ｒ－００１、ＩＬ７Ｒ－００４、ＩＬ７Ｒ－００５およびＩＬ７Ｒ－００６）で、Ｅｎｄｏ－Ｐｏｒｔｅｒトランスフェクション試薬を伴ってＨｅＬａ細胞をトランスフェクトし、細胞を３日後に、ＩＬ７Ｒエクソン６のスプライシングおよびｓＩＬ７Ｒの分泌についてアッセイした。（Ａ）内因性ＩＬ７Ｒスプライシング。内因性ＩＬ７Ｒ遺伝子由来の転写物におけるエクソン６排除のパーセンテージ（％）をＲＴ－ＰＣＲによって定量し、各ＡＳＯについてゲル画像の下部に平均±Ｓ．Ｄ．として示す。（Ｂ）ｓＩＬ７Ｒの分泌。ｓＩＬ７Ｒの分泌レベル（平均±Ｓ．Ｄ．）をＥＬＩＳＡにより、パネルＡの細胞由来の上清みにおいて定量した。統計学的有意性すべてのパネルにおいては、対照に対するスチューデントのｔ検定ペアワイズ比較によってアセスメントした（^＊ｐ＜０．０５、^＊＊ｐ＜０．０１、^＊＊＊ｐ＜０．００１）。リードＡＳＯはＨｅＬａ細胞におけるｓＩＬ７Ｒの分泌を変調させる。１０μＭの対象のモルホリノＡＳＯ（ＡＳＯ－Ｃｔｒｌ、ＩＬ７Ｒ－００１、ＩＬ７Ｒ－００４、ＩＬ７Ｒ－００５およびＩＬ７Ｒ－００６）で、Ｅｎｄｏ－Ｐｏｒｔｅｒトランスフェクション試薬を伴ってＨｅＬａ細胞をトランスフェクトし、細胞を３日後に、ＩＬ７Ｒエクソン６のスプライシングおよびｓＩＬ７Ｒの分泌についてアッセイした。（Ａ）内因性ＩＬ７Ｒスプライシング。内因性ＩＬ７Ｒ遺伝子由来の転写物におけるエクソン６排除のパーセンテージ（％）をＲＴ－ＰＣＲによって定量し、各ＡＳＯについてゲル画像の下部に平均±Ｓ．Ｄ．として示す。（Ｂ）ｓＩＬ７Ｒの分泌。ｓＩＬ７Ｒの分泌レベル（平均±Ｓ．Ｄ．）をＥＬＩＳＡにより、パネルＡの細胞由来の上清みにおいて定量した。統計学的有意性すべてのパネルにおいては、対照に対するスチューデントのｔ検定ペアワイズ比較によってアセスメントした（^＊ｐ＜０．０５、^＊＊ｐ＜０．０１、^＊＊＊ｐ＜０．００１）。リードＡＳＯは、ヒト初代ＣＤ４^＋Ｔ細胞におけるＩＬ７Ｒタンパク質アイソフォームの発現を変調させる。対照（ＡＳＯ－Ｃｔｒｌ）またはリード（ＩＬ７Ｒ－００１、ＩＬ７Ｒ－００４、ＩＬ７Ｒ－００５およびＩＬ７Ｒ－００６）モルフォリノＡＳＯで２μＭにてヒト初代ＣＤ４^＋Ｔ細胞をヌクレオフェクションした。細胞をＩＬ７Ｒスプライシング、ｓＩＬ７Ｒの分泌およびｍＩＬ７Ｒ細胞表面発現について、ヌクレオフェクションの４日後にアッセイした。（Ａ）内因性ＩＬ７Ｒスプライシング。エクソン６排除のパーセンテージ（％）を内因性ＩＬ７Ｒ転写物においてＲＴ－ＰＣＲによって先のとおりに定量し、各ＡＳＯでの値（平均±Ｓ．Ｄ．）をゲル画像の下部に示す。（Ｂ）ｓＩＬ７Ｒの分泌。ｓＩＬ７Ｒの分泌レベル（平均±Ｓ．Ｄ．）をＥＬＩＳＡにより、パネルＡの細胞由来の上清みにおいて定量した。（Ｃ）ｍＩＬ７Ｒの細胞表面発現。ｍＩＬ７Ｒの染色をインタクトな細胞において行ない、発現を、フローサイトメトリーによる平均蛍光強度（ＭＦＩ）として定量した。ＡＳＯ－Ｃｔｒｌに対するＭＦＩ値（平均±Ｓ．Ｄ．）を示す。統計学的有意性は、すべてのパネルにおいて、対照に対するスチューデントのｔ検定ペアワイズ比較によってアセスメントした（^＊ｐ＜０．０５、^＊＊ｐ＜０．０１、^＊＊＊ｐ＜０．００１）。リードＡＳＯは、ヒト初代ＣＤ４^＋Ｔ細胞におけるＩＬ７Ｒタンパク質アイソフォームの発現を変調させる。対照（ＡＳＯ－Ｃｔｒｌ）またはリード（ＩＬ７Ｒ－００１、ＩＬ７Ｒ－００４、ＩＬ７Ｒ－００５およびＩＬ７Ｒ－００６）モルフォリノＡＳＯで２μＭにてヒト初代ＣＤ４^＋Ｔ細胞をヌクレオフェクションした。細胞をＩＬ７Ｒスプライシング、ｓＩＬ７Ｒの分泌およびｍＩＬ７Ｒ細胞表面発現について、ヌクレオフェクションの４日後にアッセイした。（Ａ）内因性ＩＬ７Ｒスプライシング。エクソン６排除のパーセンテージ（％）を内因性ＩＬ７Ｒ転写物においてＲＴ－ＰＣＲによって先のとおりに定量し、各ＡＳＯでの値（平均±Ｓ．Ｄ．）をゲル画像の下部に示す。（Ｂ）ｓＩＬ７Ｒの分泌。ｓＩＬ７Ｒの分泌レベル（平均±Ｓ．Ｄ．）をＥＬＩＳＡにより、パネルＡの細胞由来の上清みにおいて定量した。（Ｃ）ｍＩＬ７Ｒの細胞表面発現。ｍＩＬ７Ｒの染色をインタクトな細胞において行ない、発現を、フローサイトメトリーによる平均蛍光強度（ＭＦＩ）として定量した。ＡＳＯ－Ｃｔｒｌに対するＭＦＩ値（平均±Ｓ．Ｄ．）を示す。統計学的有意性は、すべてのパネルにおいて、対照に対するスチューデントのｔ検定ペアワイズ比較によってアセスメントした（^＊ｐ＜０．０５、^＊＊ｐ＜０．０１、^＊＊＊ｐ＜０．００１）。リードＡＳＯは、ヒト初代ＣＤ４^＋Ｔ細胞におけるＩＬ７Ｒタンパク質アイソフォームの発現を変調させる。対照（ＡＳＯ－Ｃｔｒｌ）またはリード（ＩＬ７Ｒ－００１、ＩＬ７Ｒ－００４、ＩＬ７Ｒ－００５およびＩＬ７Ｒ－００６）モルフォリノＡＳＯで２μＭにてヒト初代ＣＤ４^＋Ｔ細胞をヌクレオフェクションした。細胞をＩＬ７Ｒスプライシング、ｓＩＬ７Ｒの分泌およびｍＩＬ７Ｒ細胞表面発現について、ヌクレオフェクションの４日後にアッセイした。（Ａ）内因性ＩＬ７Ｒスプライシング。エクソン６排除のパーセンテージ（％）を内因性ＩＬ７Ｒ転写物においてＲＴ－ＰＣＲによって先のとおりに定量し、各ＡＳＯでの値（平均±Ｓ．Ｄ．）をゲル画像の下部に示す。（Ｂ）ｓＩＬ７Ｒの分泌。ｓＩＬ７Ｒの分泌レベル（平均±Ｓ．Ｄ．）をＥＬＩＳＡにより、パネルＡの細胞由来の上清みにおいて定量した。（Ｃ）ｍＩＬ７Ｒの細胞表面発現。ｍＩＬ７Ｒの染色をインタクトな細胞において行ない、発現を、フローサイトメトリーによる平均蛍光強度（ＭＦＩ）として定量した。ＡＳＯ－Ｃｔｒｌに対するＭＦＩ値（平均±Ｓ．Ｄ．）を示す。統計学的有意性は、すべてのパネルにおいて、対照に対するスチューデントのｔ検定ペアワイズ比較によってアセスメントした（^＊ｐ＜０．０５、^＊＊ｐ＜０．０１、^＊＊＊ｐ＜０．００１）。プロｓＩＬ７ＲＡＳＯはＳＮＰｒｓ６８９７９３２のリスク‘Ｃ’対立遺伝子によるエクソン６排除の促進を表現型模写する。対照（ＡＳＯ－Ｃｔｒｌ）またはリードプロｓＩＬ７ＲモルフォリノＡＳＯＩＬ７Ｒ－００１およびＩＬ７Ｒ－００４でＥｎｄｏ－Ｐｏｒｔｅｒを伴って、自己反応性を促進させるＩＬ７ＲＳＮＰｒｓ６８９７９３２のリスク‘Ｃ’対立遺伝子または防御的‘Ｔ’対立遺伝子のいずれかを含むレポーター型を安定的に発現しているＨｅＬａ細胞をトランスフェクトした。（Ａ）レポータースプライシング。レポーター由来の転写物におけるエクソン６排除のパーセンテージ（％）をＲＴ－ＰＣＲによって先のとおりに定量し、各条件での値（平均±Ｓ．Ｄ．）を、ゲル画像の下部においてプロットしている。（Ｂ）ＧＦＰ発現。ＧＦＰの平均蛍光強度（ＭＦＩ±Ｓ．Ｄ．）をフローサイトメトリーによって先のとおりに定量し、各条件について、ＡＳＯ－Ｃｔｒｌで処理したＣレポーターに対して示す。統計学的有意性を、すべてのパネルにおいて、Ｃレポーターに対するスチューデントのｔ検定ペアワイズ比較によって、または表示したとおりにアセスメントした（^＊＊＊ｐ＜０．００１）。プロｓＩＬ７ＲＡＳＯはＳＮＰｒｓ６８９７９３２のリスク‘Ｃ’対立遺伝子によるエクソン６排除の促進を表現型模写する。対照（ＡＳＯ－Ｃｔｒｌ）またはリードプロｓＩＬ７ＲモルフォリノＡＳＯＩＬ７Ｒ－００１およびＩＬ７Ｒ－００４でＥｎｄｏ－Ｐｏｒｔｅｒを伴って、自己反応性を促進させるＩＬ７ＲＳＮＰｒｓ６８９７９３２のリスク‘Ｃ’対立遺伝子または防御的‘Ｔ’対立遺伝子のいずれかを含むレポーター型を安定的に発現しているＨｅＬａ細胞をトランスフェクトした。（Ａ）レポータースプライシング。レポーター由来の転写物におけるエクソン６排除のパーセンテージ（％）をＲＴ－ＰＣＲによって先のとおりに定量し、各条件での値（平均±Ｓ．Ｄ．）を、ゲル画像の下部においてプロットしている。（Ｂ）ＧＦＰ発現。ＧＦＰの平均蛍光強度（ＭＦＩ±Ｓ．Ｄ．）をフローサイトメトリーによって先のとおりに定量し、各条件について、ＡＳＯ－Ｃｔｒｌで処理したＣレポーターに対して示す。統計学的有意性を、すべてのパネルにおいて、Ｃレポーターに対するスチューデントのｔ検定ペアワイズ比較によって、または表示したとおりにアセスメントした（^＊＊＊ｐ＜０．００１）。ＩＬ７Ｒ－００１は、ＣＤ４^＋Ｔ細胞におけるｓＩＬ７Ｒの分泌およびＩＬ７シグナル伝達を促進させる。（Ａ，Ｂ）最小有効濃度（ＭＥＣ）の特定。ヒト初代ＣＤ４^＋Ｔ細胞を３日間、漸増濃度の対照ＡＳＯ（ＡＳＯ－Ｃｔｒｌ）またはＩＬ７Ｒ－００１とともにインキュベートし、ＩＬ７Ｒエクソン６のスプライシングについてＲＴ－ＰＣＲによって（Ａ）および細胞バイアビリティについてフローサイトメトリーによって７－ＡＡＤ排除を用いて（Ｂ）アッセイした。Ｔｈｅエクソン６排除のパーセンテージ（％）（ｓＩＬ７ＲＲＮＡの％）を先のとおりにして求めた。ＭＥＣ（０．５μＭ、黒矢印）は、細胞バイアビリティに影響することなくｓＩＬ７ＲＲＮＡを目標の５０％排除まで有意に増やす濃度と定義した。（Ｃ～Ｄ）ＭＥＣの確認。ヒト初代ＣＤ４^＋Ｔ細胞を３日間、０または０．５μＭ（ＭＥＣ）のＡＳＯ－ＣｔｒｌまたはＩＬ７Ｒ－００１ＡＳＯのいずれかとともにインキュベートし、ＩＬ７Ｒエクソン６のスプライシングについてＲＴ－ＰＣＲによって（Ｃ）および細胞上清み中へのｓＩＬ７Ｒの分泌についてＥＬＩＳＡによって（Ｄ）アッセイした。（Ｅ～Ｆ）ＩＬ７活性の変調。ヒト初代ＣＤ４^＋Ｔ細胞を０．５μＭ（ＭＥＣ）のＡＳＯ－ＣｔｒｌまたはＩＬ７Ｒ－００１ＡＳＯとともに２日間インキュベートした後、１ｎｇ／ｍｌのＩＬ７で１日処理した。ＩＬ７を細胞上清みにおいてＥＬＩＳＡによって定量し（Ｅ）、ＩＬ７誘導性遺伝子ＢＣＬ２およびＣＩＳＨの発現をＲＴ－ｑＰＣＲによって定量した（Ｆ）。ＥおよびＦのデータを変化倍数のＬｏｇ２（Ｌｏｇ２（ＦＣ））として示す。統計学的有意性は、０μＭ（Ａ～Ｂ）またはＡＳＯ－Ｃｔｒｌ（Ｃ～Ｅ）に対するスチューデントのｔ検定ペアワイズ比較によってアセスメントした。ＩＬ７Ｒ－００１は、ＣＤ４^＋Ｔ細胞におけるｓＩＬ７Ｒの分泌およびＩＬ７シグナル伝達を促進させる。（Ａ，Ｂ）最小有効濃度（ＭＥＣ）の特定。ヒト初代ＣＤ４^＋Ｔ細胞を３日間、漸増濃度の対照ＡＳＯ（ＡＳＯ－Ｃｔｒｌ）またはＩＬ７Ｒ－００１とともにインキュベートし、ＩＬ７Ｒエクソン６のスプライシングについてＲＴ－ＰＣＲによって（Ａ）および細胞バイアビリティについてフローサイトメトリーによって７－ＡＡＤ排除を用いて（Ｂ）アッセイした。Ｔｈｅエクソン６排除のパーセンテージ（％）（ｓＩＬ７ＲＲＮＡの％）を先のとおりにして求めた。ＭＥＣ（０．５μＭ、黒矢印）は、細胞バイアビリティに影響することなくｓＩＬ７ＲＲＮＡを目標の５０％排除まで有意に増やす濃度と定義した。（Ｃ～Ｄ）ＭＥＣの確認。ヒト初代ＣＤ４^＋Ｔ細胞を３日間、０または０．５μＭ（ＭＥＣ）のＡＳＯ－ＣｔｒｌまたはＩＬ７Ｒ－００１ＡＳＯのいずれかとともにインキュベートし、ＩＬ７Ｒエクソン６のスプライシングについてＲＴ－ＰＣＲによって（Ｃ）および細胞上清み中へのｓＩＬ７Ｒの分泌についてＥＬＩＳＡによって（Ｄ）アッセイした。（Ｅ～Ｆ）ＩＬ７活性の変調。ヒト初代ＣＤ４^＋Ｔ細胞を０．５μＭ（ＭＥＣ）のＡＳＯ－ＣｔｒｌまたはＩＬ７Ｒ－００１ＡＳＯとともに２日間インキュベートした後、１ｎｇ／ｍｌのＩＬ７で１日処理した。ＩＬ７を細胞上清みにおいてＥＬＩＳＡによって定量し（Ｅ）、ＩＬ７誘導性遺伝子ＢＣＬ２およびＣＩＳＨの発現をＲＴ－ｑＰＣＲによって定量した（Ｆ）。ＥおよびＦのデータを変化倍数のＬｏｇ２（Ｌｏｇ２（ＦＣ））として示す。統計学的有意性は、０μＭ（Ａ～Ｂ）またはＡＳＯ－Ｃｔｒｌ（Ｃ～Ｅ）に対するスチューデントのｔ検定ペアワイズ比較によってアセスメントした。ＩＬ７Ｒ－００１は、ＣＤ４^＋Ｔ細胞におけるｓＩＬ７Ｒの分泌およびＩＬ７シグナル伝達を促進させる。（Ａ，Ｂ）最小有効濃度（ＭＥＣ）の特定。ヒト初代ＣＤ４^＋Ｔ細胞を３日間、漸増濃度の対照ＡＳＯ（ＡＳＯ－Ｃｔｒｌ）またはＩＬ７Ｒ－００１とともにインキュベートし、ＩＬ７Ｒエクソン６のスプライシングについてＲＴ－ＰＣＲによって（Ａ）および細胞バイアビリティについてフローサイトメトリーによって７－ＡＡＤ排除を用いて（Ｂ）アッセイした。Ｔｈｅエクソン６排除のパーセンテージ（％）（ｓＩＬ７ＲＲＮＡの％）を先のとおりにして求めた。ＭＥＣ（０．５μＭ、黒矢印）は、細胞バイアビリティに影響することなくｓＩＬ７ＲＲＮＡを目標の５０％排除まで有意に増やす濃度と定義した。（Ｃ～Ｄ）ＭＥＣの確認。ヒト初代ＣＤ４^＋Ｔ細胞を３日間、０または０．５μＭ（ＭＥＣ）のＡＳＯ－ＣｔｒｌまたはＩＬ７Ｒ－００１ＡＳＯのいずれかとともにインキュベートし、ＩＬ７Ｒエクソン６のスプライシングについてＲＴ－ＰＣＲによって（Ｃ）および細胞上清み中へのｓＩＬ７Ｒの分泌についてＥＬＩＳＡによって（Ｄ）アッセイした。（Ｅ～Ｆ）ＩＬ７活性の変調。ヒト初代ＣＤ４^＋Ｔ細胞を０．５μＭ（ＭＥＣ）のＡＳＯ－ＣｔｒｌまたはＩＬ７Ｒ－００１ＡＳＯとともに２日間インキュベートした後、１ｎｇ／ｍｌのＩＬ７で１日処理した。ＩＬ７を細胞上清みにおいてＥＬＩＳＡによって定量し（Ｅ）、ＩＬ７誘導性遺伝子ＢＣＬ２およびＣＩＳＨの発現をＲＴ－ｑＰＣＲによって定量した（Ｆ）。ＥおよびＦのデータを変化倍数のＬｏｇ２（Ｌｏｇ２（ＦＣ））として示す。統計学的有意性は、０μＭ（Ａ～Ｂ）またはＡＳＯ－Ｃｔｒｌ（Ｃ～Ｅ）に対するスチューデントのｔ検定ペアワイズ比較によってアセスメントした。ＩＬ７Ｒ－００１は、ＣＤ４^＋Ｔ細胞におけるｓＩＬ７Ｒの分泌およびＩＬ７シグナル伝達を促進させる。（Ａ，Ｂ）最小有効濃度（ＭＥＣ）の特定。ヒト初代ＣＤ４^＋Ｔ細胞を３日間、漸増濃度の対照ＡＳＯ（ＡＳＯ－Ｃｔｒｌ）またはＩＬ７Ｒ－００１とともにインキュベートし、ＩＬ７Ｒエクソン６のスプライシングについてＲＴ－ＰＣＲによって（Ａ）および細胞バイアビリティについてフローサイトメトリーによって７－ＡＡＤ排除を用いて（Ｂ）アッセイした。Ｔｈｅエクソン６排除のパーセンテージ（％）（ｓＩＬ７ＲＲＮＡの％）を先のとおりにして求めた。ＭＥＣ（０．５μＭ、黒矢印）は、細胞バイアビリティに影響することなくｓＩＬ７ＲＲＮＡを目標の５０％排除まで有意に増やす濃度と定義した。（Ｃ～Ｄ）ＭＥＣの確認。ヒト初代ＣＤ４^＋Ｔ細胞を３日間、０または０．５μＭ（ＭＥＣ）のＡＳＯ－ＣｔｒｌまたはＩＬ７Ｒ－００１ＡＳＯのいずれかとともにインキュベートし、ＩＬ７Ｒエクソン６のスプライシングについてＲＴ－ＰＣＲによって（Ｃ）および細胞上清み中へのｓＩＬ７Ｒの分泌についてＥＬＩＳＡによって（Ｄ）アッセイした。（Ｅ～Ｆ）ＩＬ７活性の変調。ヒト初代ＣＤ４^＋Ｔ細胞を０．５μＭ（ＭＥＣ）のＡＳＯ－ＣｔｒｌまたはＩＬ７Ｒ－００１ＡＳＯとともに２日間インキュベートした後、１ｎｇ／ｍｌのＩＬ７で１日処理した。ＩＬ７を細胞上清みにおいてＥＬＩＳＡによって定量し（Ｅ）、ＩＬ７誘導性遺伝子ＢＣＬ２およびＣＩＳＨの発現をＲＴ－ｑＰＣＲによって定量した（Ｆ）。ＥおよびＦのデータを変化倍数のＬｏｇ２（Ｌｏｇ２（ＦＣ））として示す。統計学的有意性は、０μＭ（Ａ～Ｂ）またはＡＳＯ－Ｃｔｒｌ（Ｃ～Ｅ）に対するスチューデントのｔ検定ペアワイズ比較によってアセスメントした。ＩＬ７Ｒ－００１は、ＣＤ４^＋Ｔ細胞におけるｓＩＬ７Ｒの分泌およびＩＬ７シグナル伝達を促進させる。（Ａ，Ｂ）最小有効濃度（ＭＥＣ）の特定。ヒト初代ＣＤ４^＋Ｔ細胞を３日間、漸増濃度の対照ＡＳＯ（ＡＳＯ－Ｃｔｒｌ）またはＩＬ７Ｒ－００１とともにインキュベートし、ＩＬ７Ｒエクソン６のスプライシングについてＲＴ－ＰＣＲによって（Ａ）および細胞バイアビリティについてフローサイトメトリーによって７－ＡＡＤ排除を用いて（Ｂ）アッセイした。Ｔｈｅエクソン６排除のパーセンテージ（％）（ｓＩＬ７ＲＲＮＡの％）を先のとおりにして求めた。ＭＥＣ（０．５μＭ、黒矢印）は、細胞バイアビリティに影響することなくｓＩＬ７ＲＲＮＡを目標の５０％排除まで有意に増やす濃度と定義した。（Ｃ～Ｄ）ＭＥＣの確認。ヒト初代ＣＤ４^＋Ｔ細胞を３日間、０または０．５μＭ（ＭＥＣ）のＡＳＯ－ＣｔｒｌまたはＩＬ７Ｒ－００１ＡＳＯのいずれかとともにインキュベートし、ＩＬ７Ｒエクソン６のスプライシングについてＲＴ－ＰＣＲによって（Ｃ）および細胞上清み中へのｓＩＬ７Ｒの分泌についてＥＬＩＳＡによって（Ｄ）アッセイした。（Ｅ～Ｆ）ＩＬ７活性の変調。ヒト初代ＣＤ４^＋Ｔ細胞を０．５μＭ（ＭＥＣ）のＡＳＯ－ＣｔｒｌまたはＩＬ７Ｒ－００１ＡＳＯとともに２日間インキュベートした後、１ｎｇ／ｍｌのＩＬ７で１日処理した。ＩＬ７を細胞上清みにおいてＥＬＩＳＡによって定量し（Ｅ）、ＩＬ７誘導性遺伝子ＢＣＬ２およびＣＩＳＨの発現をＲＴ－ｑＰＣＲによって定量した（Ｆ）。ＥおよびＦのデータを変化倍数のＬｏｇ２（Ｌｏｇ２（ＦＣ））として示す。統計学的有意性は、０μＭ（Ａ～Ｂ）またはＡＳＯ－Ｃｔｒｌ（Ｃ～Ｅ）に対するスチューデントのｔ検定ペアワイズ比較によってアセスメントした。ＩＬ７Ｒ－００１は、ＣＤ４^＋Ｔ細胞におけるｓＩＬ７Ｒの分泌およびＩＬ７シグナル伝達を促進させる。（Ａ，Ｂ）最小有効濃度（ＭＥＣ）の特定。ヒト初代ＣＤ４^＋Ｔ細胞を３日間、漸増濃度の対照ＡＳＯ（ＡＳＯ－Ｃｔｒｌ）またはＩＬ７Ｒ－００１とともにインキュベートし、ＩＬ７Ｒエクソン６のスプライシングについてＲＴ－ＰＣＲによって（Ａ）および細胞バイアビリティについてフローサイトメトリーによって７－ＡＡＤ排除を用いて（Ｂ）アッセイした。Ｔｈｅエクソン６排除のパーセンテージ（％）（ｓＩＬ７ＲＲＮＡの％）を先のとおりにして求めた。ＭＥＣ（０．５μＭ、黒矢印）は、細胞バイアビリティに影響することなくｓＩＬ７ＲＲＮＡを目標の５０％排除まで有意に増やす濃度と定義した。（Ｃ～Ｄ）ＭＥＣの確認。ヒト初代ＣＤ４^＋Ｔ細胞を３日間、０または０．５μＭ（ＭＥＣ）のＡＳＯ－ＣｔｒｌまたはＩＬ７Ｒ－００１ＡＳＯのいずれかとともにインキュベートし、ＩＬ７Ｒエクソン６のスプライシングについてＲＴ－ＰＣＲによって（Ｃ）および細胞上清み中へのｓＩＬ７Ｒの分泌についてＥＬＩＳＡによって（Ｄ）アッセイした。（Ｅ～Ｆ）ＩＬ７活性の変調。ヒト初代ＣＤ４^＋Ｔ細胞を０．５μＭ（ＭＥＣ）のＡＳＯ－ＣｔｒｌまたはＩＬ７Ｒ－００１ＡＳＯとともに２日間インキュベートした後、１ｎｇ／ｍｌのＩＬ７で１日処理した。ＩＬ７を細胞上清みにおいてＥＬＩＳＡによって定量し（Ｅ）、ＩＬ７誘導性遺伝子ＢＣＬ２およびＣＩＳＨの発現をＲＴ－ｑＰＣＲによって定量した（Ｆ）。ＥおよびＦのデータを変化倍数のＬｏｇ２（Ｌｏｇ２（ＦＣ））として示す。統計学的有意性は、０μＭ（Ａ～Ｂ）またはＡＳＯ－Ｃｔｒｌ（Ｃ～Ｅ）に対するスチューデントのｔ検定ペアワイズ比較によってアセスメントした。ＩＬ７Ｒ－００１はＩＬ７を増強し、Ｔ細胞の生存を向上させる。ヒト初代ＣＤ４^＋Ｔ細胞を０．５μＭのＡＳＯ－ＣｔｒｌまたはＩＬ７Ｒ－００１とともにインキュベートした後、１０ｎｇ／ｍｌのＩＬ７で処理した。ＩＬ７処理後０日目および５日目、細胞を（Ａ）ＩＬ７活性についてＩＬ７誘導性遺伝子ＢＣＬ２のＲＴ－ｑＰＣＲ定量により、（Ｂ）細胞上清み中へのｓＩＬ７Ｒの分泌についてＥＬＩＳＡにより、および（Ｃ）細胞の生存についてフローサイトメトリーにより７－ＡＡＤ排除を用いてアッセイした。ＩＬ７Ｒ－００１はＩＬ７を増強し、Ｔ細胞の生存を向上させる。ヒト初代ＣＤ４^＋Ｔ細胞を０．５μＭのＡＳＯ－ＣｔｒｌまたはＩＬ７Ｒ－００１とともにインキュベートした後、１０ｎｇ／ｍｌのＩＬ７で処理した。ＩＬ７処理後０日目および５日目、細胞を（Ａ）ＩＬ７活性についてＩＬ７誘導性遺伝子ＢＣＬ２のＲＴ－ｑＰＣＲ定量により、（Ｂ）細胞上清み中へのｓＩＬ７Ｒの分泌についてＥＬＩＳＡにより、および（Ｃ）細胞の生存についてフローサイトメトリーにより７－ＡＡＤ排除を用いてアッセイした。ＩＬ７Ｒ－００１はＩＬ７を増強し、Ｔ細胞の生存を向上させる。ヒト初代ＣＤ４^＋Ｔ細胞を０．５μＭのＡＳＯ－ＣｔｒｌまたはＩＬ７Ｒ－００１とともにインキュベートした後、１０ｎｇ／ｍｌのＩＬ７で処理した。ＩＬ７処理後０日目および５日目、細胞を（Ａ）ＩＬ７活性についてＩＬ７誘導性遺伝子ＢＣＬ２のＲＴ－ｑＰＣＲ定量により、（Ｂ）細胞上清み中へのｓＩＬ７Ｒの分泌についてＥＬＩＳＡにより、および（Ｃ）細胞の生存についてフローサイトメトリーにより７－ＡＡＤ排除を用いてアッセイした。がんに苦しんでいる患者を処置するために本発明のＡＳＯまたはＳＭ－ＡＳＯとともに使用され得る、がんを処置するために使用される治療薬の一覧。

本発明の種々の実施形態の作製および使用を以下に詳細に論考するが、本発明により、多種多様な具体的な状況において具現化され得る多くの適用可能な発明思想が提供されることを認識されたい。本明細書において論考する具体的な実施形態は、本発明を作製および使用するための具体的な様式の実例を示しているにすぎず、本発明の範囲を画定するものではない。

本発明の理解を容易にするため、いくつかの用語を以下に定義する。本明細書において定義する用語は、本発明と関連する分野の当業者に一般的に理解されている意味を有する。「ａ」、「ａｎ」および「ｔｈｅ」などの用語は単数の実体のみを示すことを意図しているのではなく、具体的な一例が実例説明のために使用され得る一般分類を包含している。本明細書における専門用語は、本発明の具体的な実施形態を説明するために使用しており、その使用は、特許請求の範囲に概略が示されていること以外、本発明を限定するものではない。

本発明は、自己免疫疾患（例えば、多発性硬化症）またはがんを処置するための、それぞれ可溶性ＩＬ７Ｒ（ｓＩＬ７Ｒ）を減少または増加させる新規な組成物および方法に関する。本発明では、ｓＩＬ７Ｒの発現が抑制もしくは減弱されるか、または反対にｓＩＬ７Ｒの発現が増大されるかのいずれかとなるようにインターロイキン７受容体（ＩＬ７Ｒ）プレｍＲＮＡの選択的スプライシングを制御するためにＳＭ－ＡＳＯを使用する。例えば、自己反応性を促進させるｓＩＬ７Ｒの能力を考慮し、本明細書において、ｓＩＬ７Ｒレベルを高めることにより、現下の免疫療法薬（例えば、免疫チェックポイント阻害剤）に対する応答が向上することを実証する。

特に定義していない限り、本明細書において使用している科学技術用語はすべて、一般的に、本発明が属する技術分野の当業者に一般的に理解されているものと同じ意味を有する。一般的に、本明細書において使用している専門用語ならびに細胞培養、分子遺伝学、有機化学、有機合成、核酸化学および核酸ハイブリダイゼーションの研究手順はよく知られたものであり、当該技術分野で一般的に使用されている。さらに、核酸およびペプチドの合成には標準的な手法が使用され得る。かかる手法および手順は一般的に、当該技術分野で知られた慣用的な方法ならびに種々の一般的な参考文献（例えば、ＳａｍｂｒｏｏｋａｎｄＲｕｓｓｅｌｌ，２０１２，ＭｏｌｅｃｕｌａｒＣｌｏｎｉｎｇ，ＡＬａｂｏｒａｔｏｒｙＡｐｐｒｏａｃｈ，ＣｏｌｄＳｐｒｉｎｇＨａｒｂｏｒＰｒｅｓｓ，ＣｏｌｄＳｐｒｉｎｇＨａｒｂｏｒ，Ｎ．Ｙ．およびＡｕｓｕｂｅｌｅｔａｌ．，２０１２，ＣｕｒｒｅｎｔＰｒｏｔｏｃｏｌｓｉｎＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙ，ＪｏｈｎＷｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，ＮＹ）（関連する部分は引用により本明細書に組み込まれる）で知られた慣用的な方法に従って行なわれる。

本明細書では、ポリヌクレオチド配列を記載するのに慣用的な表記法を使用しており、例えば一本鎖ポリヌクレオチド配列の左側の末端は５’末端であり、３’末端はその逆（右側の末端）であり；配列、例えばコード配列になるものに関して、二本鎖ポリヌクレオチド配列の左方向を５’方向と称し、３’方向はその逆（右方向）である。新生ＲＮＡ転写物に対するヌクレオチドの５’から３’の方向の付加を転写方向と称する。ｍＲＮＡと同じ配列を有するＤＮＡ鎖を「コード鎖」と称する。ＤＮＡまたはＲＮＡの基準点に対して５’側に位置する該ＤＮＡまたはＲＮＡの鎖上の配列を「上流配列」と称し、ＤＮＡまたはＲＮＡの基準点に対して３’側に位置する該ＤＮＡまたはＲＮＡの鎖上の配列を「下流配列」と称する。

本明細書において使用する場合、用語「アンチセンス」は、ＲＮＡ内の標的配列にワトソン－クリック塩基対合によってハイブリダイズし、該標的配列、典型的にはｍＲＮＡまたはプレｍＲＮＡを有するＲＮＡ：オリゴヌクレオチドヘテロ二本鎖を形成する配列を有するオリゴヌクレオチドを示す。アンチセンスオリゴヌクレオチドは標的配列との厳密な配列相補性およびまたは配列同一性を有するものであってもよく、ほぼ相補性およびまたは同一性を有するものであってもよい。このようなアンチセンスオリゴヌクレオチドは、ｍＲＮＡの翻訳をブロックもしくは阻害するもの、ｍＲＮＡのスプライスバリアントが生じるように該ｍＲＮＡのプロセッシングを修飾するもの、および／または所与のｍＲＮＡまたはｍＲＮＡのバリアントの特異的分解を促すものであり得る。また、非限定的な一例はＲＮａｓｅＨ依存性分解であり得る。アンチセンス配列がＲＮＡ分子のコード部分のみに相補的であることは必要でない。アンチセンス配列は、タンパク質をコードしているＲＮＡ分子の非コード領域（例えば、イントロン、非翻訳領域）上に指定される調節配列に相補的であってもよく、調節配列はコード配列の発現を制御する。アンチセンスオリゴヌクレオチドは典型的には、約５～約１００ヌクレオチド長、より典型的には約７～約５０ヌクレオチド長、さらにより典型的には約１０ヌクレオチド～約３０ヌクレオチド長である。

本明細書において使用する場合、用語「核酸」または「核酸分子」は、線状形態であれ環状形態であれ、一本鎖または二本鎖のいずれかの任意のＤＮＡまたはＲＮＡ分子を示す。本発明の核酸に関して、用語「単離された核酸」は、ＤＮＡまたはＲＮＡに適用される場合、由来する生物体の天然に存在するゲノムまたは遺伝子産物内では直に隣接している配列から分離されているＤＮＡまたはＲＮＡ分子を示す。例えば、「単離された核酸」は、ベクター、例えばプラスミドまたはウイルスベクター内に挿入されるＤＮＡ分子、あるいは原核生物細胞もしくは真核生物細胞または宿主生物体のゲノムＤＮＡ内に組み込まれるＤＮＡ分子を含み得る。

本明細書において使用する場合、用語「特異的にハイブリダイズする」または「実質的に相補的な」とは、当該技術分野で一般的に使用されている所定の条件下でのハイブリダイゼーションを可能にするのに充分な相補性およびまたは同一性の２つのヌクレオチド分子間の会合を示す。低ストリンジェンシーハイブリダイゼーション条件、中または中間ストリンジェンシーハイブリダイゼーション条件および高ストリンジェンシーハイブリダイゼーション条件の例は、例えばＳａｍｂｒｏｏｋａｎｄＲｕｓｓｅｌｌ，２０１２，ＭｏｌｅｃｕｌａｒＣｌｏｎｉｎｇ，ＡＬａｂｏｒａｔｏｒｙＡｐｐｒｏａｃｈ，ＣｏｌｄＳｐｒｉｎｇＨａｒｂｏｒＰｒｅｓｓ，ＣｏｌｄＳｐｒｉｎｇＨａｒｂｏｒ，Ｎ．Ｙ．またはＡｕｓｕｂｅｌｅｔａｌ．，２０１２，ＣｕｒｒｅｎｔＰｒｏｔｏｃｏｌｓｉｎＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙ，ＪｏｈｎＷｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，ＮＹ（関連する部分は引用により本明細書に組み込まれる）を使用すると当業者には充分にわかる。

本明細書において使用する場合、語句「化学修飾されたオリゴヌクレオチド」は、センスまたはアンチセンスであり得る短鎖核酸（ＤＮＡまたはＲＮＡ）であって、修飾または置換、例えばＷａｎａｎｄＳｅｔｈ，“ＴｈｅＭｅｄｉｃｉｎａｌＣｈｅｍｉｓｔｒｙｏｆＴｈｅｒａｐｅｕｔｉｃＯｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓ”，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２０１６，５９，２１，９６４５－９６６７（関連する部分は組み込まれる）に教示されているものを含む短鎖核酸（ＤＮＡまたはＲＮＡ）を示し、ここで、該修飾または置換としては：（１）リボースもしくは他の糖単位、（２）塩基または（３）当該技術分野で知られているように本質的にリン酸基で構成されている骨格の修飾が挙げられ得る。修飾またはヌクレオチドアナログの非限定的な例としては、限定されないが、１つまたはそれより多くのホスホロチオエート、ホスホロジチオエート、ホスホジエステル、メチルホスホネート、ホスホロアミデート、メチルホスホネートペプチド、細胞膜透過性ペプチド、抗体、ナノボディ、ラクダ部、抗体可変領域、小分子および／またはオリゴヌクレオチドの安定性、分布もしくは特定の組織への送達を促進させるか、あるいは促進させ得るリガンド（例えば、タンパク質、脂質、糖鎖）、ホスホトリエステル、ホスホロアリデート、モルフォリノ、アミデートカルバメート、カルボキシメチル、アセトアミデート、ポリアミド、スルホネート、スルホンアミド、スルファメート、ホルムアセタール、チオホルムアセタールおよび／またはアルキルシリル置換を含むリン酸基修飾を有するヌクレオチド（例えば、ＨｕｎｚｉｋｅｒａｎｄＬｅｕｍａｎｎ（１９９５）ＮｕｃｌｅｉｃＡｃｉｄＡｎａｌｏｇｕｅｓ：ＳｙｎｔｈｅｓｉｓａｎｄＰｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，ｉｎＭｏｄｅｒｎＳｙｎｔｈｅｔｉｃＭｅｔｈｏｄｓ，ＶＣＨ，３３１－４１７；Ｍｅｓｍａｅｋｅｒｅｔａｌ．（１９９４）ＮｏｖｅｌＢａｃｋｂｏｎｅＲｅｐｌａｃｅｍｅｎｔｓｆｏｒＯｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓ，ｉｎＣａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅＭｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎｓｉｎＡｎｔｉｓｅｎｓｅＲｅｓｅａｒｃｈ，ＡＣＳ，２４－３９参照）；修飾糖（例えば、米国特許出願公開第２００５／０１１８６０５号参照）および糖修飾、例えば２’－Ｏ－メチル（２’－Ｏ－メチルヌクレオチド）および２’－Ｏ－メチルオキシエトキシ（２’－Ｏ－ＭＯＥ）、２’－Ｏ－アルキル修飾糖部分または二環性糖部分を有するヌクレオチドならびにヌクレオチド模倣物、例えば限定されないが、ペプチド核酸（ＰＮＡ）、モルフォリノ核酸、シクロヘキセニル核酸、アンヒドロヘキシトール核酸、グリコール核酸、トレオース核酸およびロック核酸（ＬＮＡ）、ならびに一部または完全修飾骨格、例えば完全修飾糖リン酸骨格、ロック核酸骨格、ペプチド性骨格、ホスホトリエステル骨格、ホスホロアミデート骨格、シロキサン骨格、カルボキシメチルエステル骨格、アセトアミデート骨格、カルバメート骨格、チオエーテル骨格、架橋メチレンホスホネート骨格、ホスホロチオエート骨格、メチルホスホネート骨格、アルキルホスホネート骨格、リン酸エステル骨格、アルキルホスホノチオエート骨格、ホスホロジチオエート骨格、カーボネート骨格、リン酸トリエステル骨格、カルボキシメチルエステル骨格、メチルホスホロチオエート骨格、ホスホロジチオエート骨格、ｐ－エトキシ結合を有する骨格ならびに前述のもののいずれかの２つ以上の組合せ（例えば、米国特許第５，８８６，１６５号；同第６，１４０，４８２号；同第５，６９３，７７３号；同第５，８５６，４６２号；同第５，９７３，１３６号；同第５，９２９，２２６号；同第６，１９４，５９８号；同第６，１７２，２０９号；同第６，１７５，００４号；同第６，１６６，１９７号；同第６，１６６，１８８号；同第６，１６０，１５２号；同第６，１６０，１０９号；同第６，１５３，７３７号；同第６，１４７，２００号；同第６，１４６，８２９号；同第６，１２７，５３３号；および同第６，１２４，４４５号ならびにＷａｎａｎｄＳｅｔｈ，“ＴｈｅＭｅｄｉｃｉｎａｌＣｈｅｍｉｓｔｒｙｏｆＴｈｅｒａｐｅｕｔｉｃＯｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓ”，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２０１６，５９，２１，９６４５－９６６７（関連する部分は引用により本明細書に組み込まれる）参照）が挙げられる。

本明細書において使用する場合、用語「発現カセット」は、転写、プロセッシングおよび任意にコード配列の翻訳またはスプライシングに必要なプロモーター／調節配列に作動可能に連結されたコード配列を含む核酸分子を示す。

ｓＩＬ７Ｒを減少させるＩＬ７ＲＳＭ－ＡＳＯは、自己免疫疾患および／または炎症性疾患などの疾患または障害の処置のために使用され得る。ｓＩＬ７Ｒを増加させるＩＬ７ＲＳＭ－ＡＳＯは、がん免疫学用途に使用され得る。ｓＩＬ７Ｒの発現メッセージまたはタンパク質を増加させるにせよ減少させるにせよ、本発明は遺伝子治療およびエクスビボ用途との関連において使用され得る。例えば、該オリゴヌクレオチドは、細胞が該被験体または別の被験体から単離され、該細胞が、ｓＩＬ７Ｒの発現を修飾する該オリゴヌクレオチドを一過的もしくは永久的に発現するように修飾されるか、または該細胞に、ｓＩＬ７Ｒの発現を修飾する該オリゴヌクレオチドが負荷される場合もあり得、次いで該細胞が該被験体に移入されて戻され得る方法において使用され得る。本発明は、既知の種々の送達方法および発現方法、例えばプラスミドまたはウイルスベクターとともに使用され得る。また、本発明は、あらゆる細胞修飾方法、例えば遺伝子編集、一過的であれ永久的であれ、または調節可能なプロモーターの制御下での核酸（天然、合成もしくは修飾型のいずれかの任意の核酸）、タンパク質（完全長のタンパク質もしくはペプチド）の送達とともに使用され得る。該オリゴヌクレオチドまたは該オリゴヌクレオチドを発現するベクターは、例えば以下の非限定的な例のトランスフェクション、エレクトロポレーション、担体媒介性のもの、ウイルス系のもの、自由取り込みなどの既知の方法によって送達され得る。

本明細書において使用する場合、用語「プロモーター／調節配列」は、該プロモーター／レギュレーター配列に作動可能に連結された遺伝子産物の発現に必要とされる核酸配列を示す。一部の場合では、プロモーター／調節配列がコアプロモーター配列であり得、他の場合では、この配列はまた、エンハンサー配列および遺伝子産物の発現に必要とされる他の調節エレメントも含み得る。プロモーター／調節配列は、例えば、遺伝子産物の発現を構成的様式および／または誘導性様式で駆動する配列であり得る。本明細書において使用する場合、用語「誘導性プロモーター」は、遺伝子産物をコードまたは指定するポリヌクレオチドと作動可能に連結されている場合、該遺伝子産物の産生を実質的に、該プロモーターに対応する誘導因子が存在する場合にのみ引き起こすヌクレオチド配列を示す。

本明細書において使用する場合、用語「類似性パーセント」、「同一性パーセント」および「相同性パーセント」は、２つの具体的な配列間の比較に言及している場合、パーセンテージまたはある特定の配列上において同じである塩基の特定である。類似性、同一性または相同性のパーセンテージは、例えばＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＷｉｓｃｏｎｓｉｎＧＣＧソフトウェアプログラムまたは同等物を用いて計算され得る。

本明細書において使用する場合、用語「相補性または同一性のパーセント」は、２つの相補的配列間、例えばアンチセンスオリゴヌクレオチドとその標的配列間の比較に言及している場合、パーセンテージまたは該アンチセンスオリゴヌクレオチドと該標的配列間において相補的である塩基の特定である。

本明細書において使用する場合、用語「レプリコン」は、多くは自身の制御下で複製することができる任意の遺伝因子、例えばプラスミド、コスミド、バクミド、ファージまたはウイルスを示す。レプリコンはＲＮＡまたはＤＮＡのいずれかであり得、一本鎖であっても二本鎖であってもよい。

本明細書において使用する場合、用語「ベクター」は、別の遺伝子配列または遺伝因子（ＤＮＡまたはＲＮＡのいずれか）が結合され得る遺伝因子、例えばプラスミド、コスミド、バクミド、ファージまたはウイルスを示す。ベクターは、結合されている配列または因子の複製をもたらすためのレプリコンであり得る。「発現ベクター」は、宿主細胞内または生物体における核酸、例えばオリゴヌクレオチドまたはポリペプチドコード核酸配列の発現を容易にするベクターである。

本明細書において使用する場合、用語「作動可能に連結された」とは、核酸配列が別の核酸配列と機能的関係で配置されていることを示す。作動可能に連結され得る核酸配列の例としては、限定されないがプロモーター、転写ターミネーター、エンハンサーまたはアクチベーターおよび転写され、適切な場合は翻訳されると機能性産物、例えばタンパク質、リボザイムもしくはＲＮＡ分子が産生される異種遺伝子が挙げられる。

本明細書において使用する場合、用語「オリゴヌクレオチド」は、典型的には遺伝子のコード配列より短い長さを有する一本鎖または二本鎖の核酸鎖を示し、例えば、オリゴヌクレオチドは一般的に少なくとも４～６塩基または塩基対の長さであって約２００塩基または塩基対の長さまでであり、最も典型的なオリゴヌクレオチドは８～２０、１０～２５、１２～３０塩基もしくは塩基対の範囲または約３０、３５、４０もしくは５０塩基もしくは塩基対である。本発明の具体的な一例では、オリゴヌクレオチドは、インターロイキン－７受容体（ＩＬ７Ｒ）遺伝子のプレｍＲＮＡ内のエクソン６の含有を変調する配列を有する核酸鎖であり、２個以上、好ましくは４個より多くのリボヌクレオチドまたはデオキシリボヌクレオチドで構成され、多様な化学修飾および／または天然に存在しないヌクレオチドを含んでいてもよい核酸分子であると定義する。オリゴヌクレオチドの厳密なサイズおよび化学組成は、当業者には必要以上に実験を行なうことなく本明細書における教示に従うとわかるように、および例えば、ＳａｍｂｒｏｏｋａｎｄＲｕｓｓｅｌｌ，２０１２，ＭｏｌｅｃｕｌａｒＣｌｏｎｉｎｇ，ＡＬａｂｏｒａｔｏｒｙＡｐｐｒｏａｃｈ，ＣｏｌｄＳｐｒｉｎｇＨａｒｂｏｒＰｒｅｓｓ，ＣｏｌｄＳｐｒｉｎｇＨａｒｂｏｒ，Ｎ．Ｙ．またはＡｕｓｕｂｅｌｅｔａｌ．，２０１２，ＣｕｒｒｅｎｔＰｒｏｔｏｃｏｌｓｉｎＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙ，ＪｏｈｎＷｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，ＮＹ（関連する部分は引用により本明細書に組み込まれる）に教示されているようにさまざまであり得る種々の要素ならびにオリゴヌクレオチドの具体的な用途および使用に依存する。

本明細書において使用する場合、用語「ｍＲＮＡのスプライスバリアントまたはアイソフォーム」は、欠陥性または病原性である可能性もあり、タンパク質をコードしているＲＮＡの選択的スプライシングの結果物である可能性もあるバリアントｍＲＮＡを意図する。欠陥性であるか、または病状をもたらすｍＲＮＡのスプライスバリアントが生じるスプライシング事象を本発明においてスプライシング欠陥と称する。かかるスプライシング欠陥の一例は、より短鎖のタンパク質である可溶性ＩＬ７Ｒ（ｓＩＬ７Ｒ）の発現を引き起こすＩＬ７Ｒのエクソン６排除であり、このタンパク質は細胞から分泌され、例えば血流または他の体液中に存在するに至る。本発明は、最終成熟ｍＲＮＡもしくはプロセッシングされたｍＲＮＡ内のＩＬ７Ｒエクソン６の含有もしくは排除を制御するＩＬ７ＲプレｍＲＮＡ内のエレメント（すなわち、配列）または翻訳もしくは安定性を制御するｓＩＬ７ＲｍＲＮＡ内の配列を標的化する。

本明細書において使用する場合、用語「タンパク質のスプライスバリアントまたはアイソフォーム」は、欠陥性または病原性である可能性もあり、タンパク質をコードしているＲＮＡの選択的スプライシングの結果物である可能性もあるバリアントタンパク質を意図する。あるいはまた、分解が増大するバリアントについて論考する場合、該スプライスバリアントはタンパク質産生が低減または消失され得よう。欠陥性であるか、または病状をもたらすタンパク質のスプライスバリアントが生じるスプライシング事象を本発明においてスプライシング欠陥と称する。かかるスプライシング欠陥の一例は、より短鎖のタンパク質である可溶性ＩＬ７Ｒ（ｓＩＬ７Ｒ）の発現を引き起こすＩＬ７Ｒのエクソン６排除であり、このタンパク質は細胞から分泌され、例えば血流または他の体液中に存在するに至る。本発明は、最終成熟ｍＲＮＡもしくはプロセッシングされたｍＲＮＡ内のＩＬ７Ｒエクソン６の含有もしくは排除を制御するＩＬ７ＲプレｍＲＮＡ内のエレメント（すなわち、配列）または翻訳もしくは安定性を制御するｓＩＬ７ＲｍＲＮＡ内の配列を標的化する。

本明細書において使用する場合、用語「処置」は、この用語が適用される疾患または障害、例えばがんまたはその１つもしくはそれより多くの症状、例えば自己免疫疾患もしくは障害またはがんが被験体において反転される、緩和される、その発症が遅延される、その進行が抑止される、および／または予防されることを示す。一部の実施形態では、処置が、１つまたはそれより多くの症状が現れた後に施され得る。他の実施形態では、処置が無症状下で施行され得る。例えば、処置は、症状が出る前（例えば、症状の前歴、疾患の家族歴および／または１つもしくはそれより多くの他の感受性因子に鑑みて）、あるいは症状が消えた後、例えば再発を予防または遅延させるために施行され得る。非限定的なかかる一例は再発寛解型ＭＳである。

本明細書において使用する場合、用語「有効量」および「医薬有効量」は、所望の生物学的成果を得るための充分な薬剤量を示す。好ましくは、充分な薬剤量は毒性副作用を誘導しない量である。ｓＩＬ７Ｒを減少させるＩＬ７ＲＳＭ－ＡＳＯを使用する本発明は、自己免疫性の疾患または障害の徴候、症状または原因の低減および／または緩和をもたらすものであるのがよい。設計どおり、この発明は宿主免疫応答の低下が引き起こされることを期待するものではなく、したがって広範な免疫抑制と関連している副作用は少ないか、または低度である。任意の個々の症例における適切な有効量は当業者により、常套的な実験手法を用いて決定され得る。ｓＩＬ７Ｒを増加させるＩＬ７ＲＳＭ－ＡＳＯを使用する本発明は、がんの徴候、症状または原因の低減および／または緩和をもたらすものであるのがよい。設計どおり、この発明は単独療法薬として宿主免疫応答の増強を引き起こすこと、および／または併用療法薬として現下の免疫療法薬を増強することを期待するものである。任意の個々の症例における適切な有効量は当業者により、常套的な実験手法を用いて決定され得る。

本発明は、動物、より特別にはヒトにおける使用のための１種類またはそれより多くの「薬学的に許容され得る」薬剤、担体、バッファー、塩または一般的に連邦政府もしくは州政府の規制機関による承認を示す米国薬局方もしくは一般的に認知されている他の薬局方に記載された他の薬剤との関連において提供され得る。オリゴヌクレオチドとの使用のための典型的な薬学的に許容され得る製剤としては、限定されないが、塩、例えば：塩化カルシウム二水和物（米国薬局方（ＵＳＰ））、塩化マグネシウム六水和物ＵＳＰ、塩化カリウムＵＳＰ、塩化ナトリウムＵＳＰが挙げられ；バッファー、例えば”リン酸ナトリウム二塩基性（無水）ＵＳＰ、リン酸ナトリウム一塩基性二水和物ＵＳＰおよび水ＵＳＰも挙げられ得る。典型的には、製剤品のｐＨは、塩酸または水酸化ナトリウムを用いて約６．８、６．９、７．０、７．１または７．２のｐＨに修正され得る。

本発明は、処置の有効性を実証するために使用される１つまたはそれより多くの診断検査との関連において提供され得る。

本明細書において使用する場合、用語「担体」は、例えば、本発明の活性薬剤とともに投与される希釈剤、保存料、可溶化剤、乳化剤、佐剤、賦形剤、補助剤またはビヒクルを示す。かかる医薬用担体は滅菌された液状物、例えば水および油、例えば石油、動物、植物または合成起源のもの、例えばピーナツ油、ダイズ油、鉱物油、ゴマ油などであり得る。水または生理食塩水溶液および水性デキストロースならびにグリセロール溶液が担体として使用され得る。好適な医薬用担体は“Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ”２０１２に記載されている。

一実施形態において、本発明は、自己免疫障害、例えば限定されないが多発性硬化症（ＭＳ）を処置するための新規な組成物および方法に関する。ＭＳは成人早期の最も一般的な神経系疾患であり、中枢神経系において脱髄および神経細胞の損傷をもたらし、進行性の神経機能障害となる自己免疫機構によって媒介される。これまで、この疾患に対する治療法はなく、現在利用可能な処置薬は、多くの場合、免疫系を抑制することによって将来的な免疫学的攻撃を抑制することに重点を置いたものである。この免疫抑制的アプローチは、多くの有害な副作用、中でも重度または致命的となり得るがんおよび感染症のリスクの上昇を引き起こす。したがって、本発明者らは、有害な免疫抑制的副作用のない、ＭＳの発症を止めるための有効で耐容性が良好な治療薬の開発という未達の明確な必要性を満たす新規な治療薬を開発した。

また、本発明は、がんを処置するための新規な組成物および方法に関する。がんは、米国では死因の第２位であり多くの病因によって媒介される。これまで、多くのがんは処置が可能でない；しかしながら、最近、免疫認識およびがん細胞の死滅に基づいた治療薬によって新たな希望がもたらされている。残念ながら、免疫療法を受けている多くの患者で充分に奏効せず、一部の型のがん（例えば、肝細胞癌）は奏効率が低い。したがって、本発明者らは、改善された免疫療法薬または従来の免疫療法薬の有効性を高めることができる薬物という未達の明確な必要性を満たす新規な治療薬を開発した。

本発明者らは、具体的なＭＳの病因を訂正する標的化アンチセンスオリゴヌクレオチド、例えばアンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳＯ）および／またはスプライス変調アンチセンスオリゴヌクレオチド（ＳＭ－ＡＳＯ）を開発した。ＳＭ－ＡＳＯは、異常なＲＮＡスプライシングによって引き起こされる障害を処置するための新規で有益な治療ツールであることが証明されている。３つのかかるＳＭ－ＡＳＯが最近、脊髄筋萎縮症（スピンラザ，Ｂｉｏｇｅｎ）ならびにデュシェンヌ型筋ジストロフィー（Ｅｘｏｎｄｙｓ５１およびＶｙｏｎｄｙｓ５３，ＳａｒｅｐｔａＴｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）の処置についてＦＤＡの承認を受けている。

新規な本標的療法薬は、インターロイキン７受容体（ＩＬ７Ｒ）ＲＮＡの異常なスプライシングを訂正し、このとき、選択的エクソン６排除により高値レベルの病原性である可溶性形態のＩＬ７Ｒ（ｓＩＬ７Ｒ）がもたらされる。いくつかのエビデンスは、ＭＳおよび他の自己免疫疾患の発症機序におけるＩＬ７Ｒエクソン６の選択的スプライシングの役割に直接関連しており、これを強く支持している：（１）このエクソンの排除を増大させる遺伝子バリアントは高いＭＳリスクと強く関連している（Ｇａｌａｒｚａ－Ｍｕｎｏｚｅｔａｌ．，２０１７；Ｇｒｅｇｏｒｙｅｔａｌ．，２００７）；（２）ｓＩＬ７Ｒは、ＭＳの実験的自己免疫性脳脊髄炎（ＥＡＥ）マウスモデルにおいてこの疾患の重症度および進行を増悪させる（Ｌｕｎｄｓｔｒｏｍｅｔａｌ．，２０１３）；（３）ｓＩＬ７Ｒは、ＩＬ７のバイオアベイラビリティおよび活性を増強し、Ｔ細胞の恒常性拡大増殖の促進をもたらす（Ｌｕｎｄｓｔｒｏｍｅｔａｌ．，２０１３）、ならびに（４）ｓＩＬ７Ｒは、いくつかの自己免疫疾患、例えばＭＳ、Ｉ型糖尿病、関節リウマチおよび全身性エリテマトーデスの患者において高値である（Ｂａｄｏｔｅｔａｌ．，２０１１；Ｂａｄｏｔｅｔａｌ．，２０１３；Ｌａｕｗｅｒｙｓｅｔａｌ．，２０１４；ＭｃＫａｙｅｔａｌ．，２００８；Ｍｏｎｔｉｅｔａｌ．，２０１３）。

本発明者らは、いくつかのＳＭ－ＡＳＯを開発し（表１）、中でも、リードのＡＳＯＩＬ７Ｒ－００５およびＩＬ７Ｒ－００６は培養細胞においてＩＬ７ＲプレｍＲＮＡ内におけるエクソン６の含有を促進し、ＩＬ７Ｒタンパク質アイソフォームの発現を訂正する。この治療アプローチにとって重要なことに、これらのＳＭ－ＡＳＯは、膜結合型ＩＬ７Ｒ（ｍＩＬ７Ｒ）の発現に対してマイナスに影響することなくｓＩＬ７Ｒレベルを低下させる。自己免疫を処置するため、本発明は、エクソン６排除を駆動するＩＬ７ＲプレｍＲＮＡ内の特定の配列をブロックし、それによりエクソン６の含有を促進させ、ｓＩＬ７Ｒレベルを低下させるために使用される。さらに、がんを処置するため、本発明は、エクソン６の含有を駆動するＩＬ７ＲプレｍＲＮＡ内の特定の配列をブロックし、それによりエクソン６の含有を低減させ、ｓＩＬ７Ｒレベルを高めるために使用される。当業者には、本発明のＳＭ－ＡＳＯは単独で使用しても他の治療薬と併用して使用してもよいことが認識されよう。さらに、単純な一塩基変異により、ヒトＩＬ７Ｒもしくは異なる動物のＩＬ７Ｒの対立遺伝子バリアントにおけるエクソン６のスプライシングまたは多型を有するか、あるいは標的化対象の配列に変異が起こっている場合の個体におけるエクソン６のスプライシングが制御されるようにＳＭ－ＡＳＯを適合させ、したがって、該バリアント配列とのＳＭ－ＡＳＯの相補性およびまたは同一性を個別調整してもよい。

本発明では多種多様なＳＭ－ＡＳＯ、例えば、ＳＭ－ＡＳＯに対する多種多様な塩基修飾、糖修飾または骨格修飾を含むものが使用され得る。ＳＭ－ＡＳＯの非限定的な例としては、天然状態の核酸が挙げられ得るが、例えば、ＳＭ－ＡＳＯの結合効率を高める、ＳＭ－ＡＳＯの安定性（例えば、半減期）を高める、発現を増大させる、発現、分布または局在する場所を制御する骨格または塩基の修飾体（化学修飾されたオリゴヌクレオチド）なども挙げられ得る。

自己免疫疾患、例えばＭＳに対して現下の処置薬は、自己免疫疾患の患者が自身の症状をマネージメントする助けにはなっているが、このような薬物は、重度または致命的であり得る多種多様な有害な副作用が引き起こされることを考慮すると理想とはほど遠い。有効であるがより安全なＭＳ用薬物の開発は、数多くの病因によってＭＳの発症機序がもたらされるというこの疾患の複雑な性質が妨げとなっていた。このようなあらゆる病因によってミエリンに対する免疫学的寛容の破綻に至ることを考慮し、この分野ではこれまで、免疫学的応答を多様な機構によって減弱させるための治療薬の開発に重点が置かれてきた。例えば、ナタリズマブは、白血球が血液脳関門を通過して遊走すること、および炎症部位に動員されることをブロックするように設計されている。別の例はオクレリズマブであり、これはＢ細胞を枯渇させる。しかしながら、これらの機構はどちらも（異なる作用を介するが）最終的に免疫抑制に至る。患者に対して所与の病因の帰結を免疫変調によって対処するのではなく、有効だがより安全な薬物を提供するため、具体的なＭＳの病因の訂正（これを、本発明者らは本明細書において免疫訂正と称する）を目標とする新たな治療薬を開発することが急務である。

古典的な膜結合型インターロイキン７受容体（ｍＩＬ７Ｒ）は、ＭＳおよび数多くの自己免疫障害における治療介入のこれまでの候補であった。しかしながら、ｍＩＬ７ＲはＴ細胞の恒常性および正常な免疫機能に極めて重要であり、ＩＬ７Ｒ機能の低下は、ヒトおよびマウスのどちらにおいても重度の免疫不全を引き起こす（Ｍａｒａｓｋｏｖｓｋｙｅｔａｌ．，１９９６；Ｐｅｓｃｈｏｎｅｔａｌ．，１９９４；Ｐｕｅｌｅｔａｌ．，１９９８；Ｒｏｉｆｍａｎｅｔａｌ．，２０００）。したがって、ｍＩＬ７Ｒの発現または機能を阻害する新規なＭＳ治療薬では重度の免疫不全が引き起こされるであろう。ここに開発された治療用ＳＭ－ＡＳＯはＩＬ７Ｒエクソン６の異常なスプライシングを訂正し、そうすることにおいて、これは、ｍＩＬ７Ｒの発現および／または機能に対するマイナスの影響を抑制しつつ、ｓＩＬ７Ｒレベルを下げる。したがって、免疫抑制機構に依存する現下のＭＳ処置薬とは異なり、ｓＩＬ７Ｒを減少させる本発明の治療用ＳＭ－ＡＳＯ（表１および２）はＭＳを処置するための、免疫抑制を回避する有効でより安全な選択肢である。ｓＩＬ７Ｒを減少させる本発明のＳＭ－ＡＳＯ（表１および２）は現下の薬物と比べて、免疫系を抑制することによって問題の帰結に対処するのではなくその根本を正すという点において大きな改善を提示する。

さらに、高いｓＩＬ７Ｒレベル（自己免疫疾患を有していない被験体におけるｓＩＬ７Ｒの通常レベルと比較した場合）は他の自己免疫疾患、例えばＩ型糖尿病、関節リウマチおよび全身性エリテマトーデスとも関連しており、このような疾患の患者は、高い疾患活動性と相関する高値レベルの循環ｓＩＬ７Ｒを有することが示されている（Ｂａｄｏｔｅｔａｌ．，２０１１；Ｂａｄｏｔｅｔａｌ．，２０１３；Ｌａｕｗｅｒｙｓｅｔａｌ．，２０１４；Ｍｏｎｔｉｅｔａｌ．，２０１３）。したがって、治療用ＳＭ－ＡＳＯは、高値レベルのｓＩＬ７Ｒを有する数多くの疾患または障害を処置するために使用することができよう。

がんは、米国では主な死因の第２位である。多くの病因が組織化されていることを考慮すると、多くのがんで有効な処置選択肢が不足している。がん免疫学は急速に成長している分野であり、これまで難治性のがんに対する新規な処置薬として身体の免疫系を使用する。免疫チェックポイント阻害剤、例えば、負の免疫調節因子ＣＴＬＡ－４を標的化するモノクローナル抗体（イピリムマブ（ヤーボイ，Ｂｒｉｓｔｏｌ－ＭｙｅｒｓＳｑｕｉｂｂ））ならびにＰＤ－１を標的化するモノクローナル抗体（ペムブロリズマブ（キイトルーダ，Ｍｅｒｃｋ）およびニボルマブ（オプジーボ，Ｂｒｉｓｔｏｌ－ＭｙｅｒｓＳｑｕｉｂｂ））がＦＤＡ承認されている。その潜在的可能性の一例は、これまで未処置であり、手術できないか、または転移性の黒色腫を有する患者において、患者をニボルマブとイピリムマブの組合せで処置し、５０％の全奏効率が報告された試験である（ＬａｒｋｉｎＪ，Ｃｈｉａｒｉｏｎ－ＳｉｌｅｎｉＶ，ＧｏｎｚａｌｅｚＲ，ＧｒｏｂＪＪ，ＣｏｗｅｙＣＬ，ｅｔａｌ．２０１５．ＮＥｎｇｌＪＭｅｄ３７３：２３－３４）。

最近のがん免疫療法薬によって新たな希望がもたらされているが、残念ながら、免疫療法を受けているほとんどの患者で充分に奏効せず、一部の型のがん（例えば、肝細胞癌）は奏効率が低い。例えば、ニボルマブは、キナーゼ阻害剤ソラフェニブが奏効しなかった肝細胞癌を有する患者に対してＦＤＡ承認されているが、試験した１５４人の患者の全奏効率はたった１４．３％であり、完全奏効が観察された患者は３人だけであった（ＮＣＴ０１６５８８７８）。励みになるが、このようなデータは、所与の患者における奏効レベルのレベルおよび患者集団の奏効率を上げる決定的な必要性があることを示す。

免疫療法の奏効率を上げる必要性により、現在開発されている免疫チェックポイント遮断薬の奏効を予測するマーカー（例えば、腫瘍細胞におけるＰＤ－Ｌ１発現および高いマイクロサテライト不安定性）の精力的な研究が鼓舞されている。あまり開発されていないが、チェックポイントのブロックとともに相乗作用する可能性がある免疫促進調節因子の研究も同様に刺激的である。高値レベルのｓＩＬ７Ｒは、サイトカインＩＬ７のバイオアベイラビリティおよび／または生理活性を増強し、Ｔ細胞の生存を高めることによって免疫学的応答を促進させると考えられている（Ｌｕｎｄｓｔｒｏｍｅｔａｌ．，２０１３）。これにより、がんに対する免疫応答を高める潜在的可能性を有する炎症性促進環境が作出される。したがって、本発明では、ｓＩＬ７Ｒを増加させるＳＭ－ＡＳＯ、例えばリードＳＭ－ＡＳＯＩＬ７Ｒ－００１およびＩＬ７Ｒ－００４ならびに表３および表４のさらなるＳＭ－ＡＳＯをがんに対する新規な免疫療法薬として使用する。

本発明の組成物はオリゴヌクレオチド、例えばＡＳＯまたはＳＭ－ＡＳＯを含む。また、該組成物にがんを処置するために使用される１種類またはそれより多くのさらなる治療薬も含めてもよい。かかるさらなる治療薬の一覧は図８を参照されたい。一実施形態では、組成物は、オリゴヌクレオチド、例えばＡＳＯまたはＳＭ－ＡＳＯおよびさらなる治療薬、例えば図８に示したものを含む。

この実施形態の他の態様において、本明細書に開示の組成物化合物により腫瘍のサイズが例えば少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％縮小する。この実施形態のまた他の態様では、本明細書に開示の組成物により腫瘍のサイズが例えば約５％～約１００％、約１０％～約１００％、約２０％～約１００％、約３０％～約１００％、約４０％～約１００％、約５０％～約１００％、約６０％～約１００％、約７０％～約１００％、約８０％～約１００％、約１０％～約９０％、約２０％～約９０％、約３０％～約９０％、約４０％～約９０％、約５０％～約９０％、約６０％～約９０％、約７０％～約９０％、約１０％～約８０％、約２０％～約８０％、約３０％～約８０％、約４０％～約８０％、約５０％～約８０％または約６０％～約８０％、約１０％～約７０％、約２０％～約７０％、約３０％～約７０％、約４０％～約７０％または約５０％～約７０％縮小する。

本明細書に開示の組成物は、個体に対する慣用的な投与が可能であるのに充分な量である。この実施形態の諸態様において、本明細書に開示のＡＳＯまたはＳＭ－ＡＳＯは例えば少なくとも５ｎｇ、少なくとも１０ｎｇ、少なくとも１５ｎｇ、少なくとも２０ｎｇ、少なくとも２５ｎｇ、少なくとも３０ｎｇ、少なくとも３５ｎｇ、少なくとも４０ｎｇ、少なくとも４５ｎｇ、少なくとも５０ｎｇ、少なくとも５５ｎｇ、少なくとも６０ｎｇ、少なくとも６５ｎｇ、少なくとも７０ｎｇ、少なくとも７５ｎｇ、少なくとも８０ｎｇ、少なくとも８５ｎｇ、少なくとも９０ｎｇ、少なくとも９５ｎｇ、または少なくとも１００ｎｇ、または少なくとも２００ｎｇ、または少なくとも３００ｎｇ、または少なくとも４００ｎｇ、または少なくとも５００ｎｇ、または少なくとも６００ｎｇ、または少なくとも７００ｎｇ、または少なくとも８００ｎｇ、または少なくとも９００ｎｇ、少なくとも５ｍｇ、少なくとも１０ｍｇ、少なくとも１５ｍｇ、少なくとも２０ｍｇ、少なくとも２５ｍｇ、少なくとも３０ｍｇ、少なくとも３５ｍｇ、少なくとも４０ｍｇ、少なくとも４５ｍｇ、少なくとも５０ｍｇ、少なくとも５５ｍｇ、少なくとも６０ｍｇ、少なくとも６５ｍｇ、少なくとも７０ｍｇ、少なくとも７５ｍｇ、少なくとも８０ｍｇ、少なくとも８５ｍｇ、少なくとも９０ｍｇ、少なくとも９５ｍｇまたは少なくとも１００ｍｇの組成物であり得る。この実施形態の他の態様において、本明細書に開示のＡＳＯまたはＳＭ－ＡＳＯは例えば少なくとも５ｎｇ、少なくとも１０ｎｇ、少なくとも１５ｎｇ、少なくとも２０ｎｇ、少なくとも２５ｎｇ、少なくとも３０ｎｇ、少なくとも３５ｎｇ、少なくとも４０ｎｇ、少なくとも４５ｎｇ、少なくとも５０ｎｇ、少なくとも５５ｎｇ、少なくとも６０ｎｇ、少なくとも６５ｎｇ、少なくとも７０ｎｇ、少なくとも７５ｎｇ、少なくとも８０ｎｇ、少なくとも８５ｎｇ、少なくとも９０ｎｇ、少なくとも９５ｎｇ、または少なくとも１００ｎｇ、または少なくとも２００ｎｇ、または少なくとも３００ｎｇ、または少なくとも４００ｎｇ、または少なくとも５００ｎｇ、または少なくとも６００ｎｇ、または少なくとも７００ｎｇ、または少なくとも８００ｎｇ、または少なくとも９００ｎｇ、少なくとも５ｍｇ、少なくとも１０ｍｇ、少なくとも２０ｍｇ、少なくとも２５ｍｇ、少なくとも５０ｍｇ、少なくとも７５ｍｇ、少なくとも１００ｍｇ、少なくとも２００ｍｇ、少なくとも３００ｍｇ、少なくとも４００ｍｇ、少なくとも５００ｍｇ、少なくとも６００ｍｇ、少なくとも７００ｍｇ、少なくとも８００ｍｇ、少なくとも９００ｍｇ、少なくとも１，０００ｍｇ、少なくとも１，１００ｍｇ、少なくとも１，２００ｍｇ、少なくとも１，３００ｍｇ、少なくとも１，４００ｍｇまたは少なくとも１，５００ｍｇの組成物であり得る。この実施形態のまた他の態様では、本明細書に開示のＡＳＯまたはＳＭ－ＡＳＯは例えば約５ｎｇ～約１００ｎｇ、約１０ｎｇ～約１００ｎｇ、約５０ｎｇ～約１５０ｎｇ、約１００ｎｇ～約２５０ｎｇ、約１５０ｎｇ～約３５０ｎｇ、約２５０ｎｇ～約５００ｎｇ、約３５０ｎｇ～約６００ｎｇ、約５００ｎｇ～約７５０ｎｇ、約６００ｎｇ～約９００ｎｇ、約７５０ｎｇ～約１，０００ｎｇ、約８５０ｎｇ～約１，２００ｎｇ、ｏｒ約１，０００ｎｇ～約１，５００ｎｇ、約５ｍｇ～約１００ｍｇ、約１０ｍｇ～約１００ｍｇ、約５０ｍｇ～約１５０ｍｇ、約１００ｍｇ～約２５０ｍｇ、約１５０ｍｇ～約３５０ｍｇ、約２５０ｍｇ～約５００ｍｇ、約３５０ｍｇ～約６００ｍｇ、約５００ｍｇ～約７５０ｍｇ、約６００ｍｇ～約９００ｍｇ、約７５０ｍｇ～約１，０００ｍｇ、約８５０ｍｇ～約１，２００ｍｇまたは約１，０００ｍｇ～約１，５００ｍｇの範囲であり得る。

この実施形態のさらに他の態様において、本明細書に開示のＡＳＯまたはＳＭ－ＡＳＯは例えば約１０ｎｇ～約２５０ｎｇ、約１０ｎｇ～約５００ｎｇ、約１０ｎｇ～約７５０ｎｇ、約１０ｎｇ～約１，０００ｎｇ、約１０ｎｇ～約１，５００ｎｇ、約５０ｎｇ～約２５０ｎｇ、約５０ｎｇ～約５００ｎｇ、約５０ｎｇ～約７５０ｎｇ、約５０ｎｇ～約１，０００ｎｇ、約５０ｎｇ～約１，５００ｎｇ、約１００ｎｇ～約２５０ｎｇ、約１００ｎｇ～約５００ｎｇ、約１００ｎｇ～約７５０ｎｇ、約１００ｎｇ～約１，０００ｎｇ、約１００ｎｇ～約１，５００ｎｇ、約２００ｎｇ～約５００ｎｇ、約２００ｎｇ～約７５０ｎｇ、約２００ｎｇ～約１，０００ｎｇ、約２００ｎｇ～約１，５００ｎｇ、約５ｎｇ～約１，５００ｎｇ、約５ｎｇ～約１，０００ｎｇ、ｏｒ約５ｎｇ～約２５０ｎｇ、１０ｍｇ～約２５０ｍｇ、約１０ｍｇ～約５００ｍｇ、約１０ｍｇ～約７５０ｍｇ、約１０ｍｇ～約１，０００ｍｇ、約１０ｍｇ～約１，５００ｍｇ、約５０ｍｇ～約２５０ｍｇ、約５０ｍｇ～約５００ｍｇ、約５０ｍｇ～約７５０ｍｇ、約５０ｍｇ～約１，０００ｍｇ、約５０ｍｇ～約１，５００ｍｇ、約１００ｍｇ～約２５０ｍｇ、約１００ｍｇ～約５００ｍｇ、約１００ｍｇ～約７５０ｍｇ、約１００ｍｇ～約１，０００ｍｇ、約１００ｍｇ～約１，５００ｍｇ、約２００ｍｇ～約５００ｍｇ、約２００ｍｇ～約７５０ｍｇ、約２００ｍｇ～約１，０００ｍｇ、約２００ｍｇ～約１，５００ｍｇ、約５ｍｇ～約１，５００ｍｇ、約５ｍｇ～約１，０００ｍｇまたは約５ｍｇ～約２５０ｍｇの範囲であり得る。

本明細書に開示の組成物には溶媒、エマルジョンまたは他の希釈剤が、本明細書に開示の組成物を溶解させるのに充分な量で含められ得る。この実施形態の他の態様において、本明細書に開示の組成物には溶媒、エマルジョンまたは希釈剤が、例えば約９０％（ｖ／ｖ）未満、約８０％（ｖ／ｖ）未満、約７０％（ｖ／ｖ）未満、約６５％（ｖ／ｖ）未満、約６０％（ｖ／ｖ）未満、約５５％（ｖ／ｖ）未満、約５０％（ｖ／ｖ）未満、約４５％（ｖ／ｖ）未満、約４０％（ｖ／ｖ）未満、約３５％（ｖ／ｖ）未満、約３０％（ｖ／ｖ）未満、約２５％（ｖ／ｖ）未満、約２０％（ｖ／ｖ）未満、約１５％（ｖ／ｖ）未満、約１０％（ｖ／ｖ）未満、約５％（ｖ／ｖ）未満または約１％（ｖ／ｖ）未満の量で含められ得る。この実施形態の他の態様において、本明細書に開示の組成物には溶媒、エマルジョンまたは他の希釈剤が、例えば約１％（ｖ／ｖ）～９０％（ｖ／ｖ）、約１％（ｖ／ｖ）～７０％（ｖ／ｖ）、約１％（ｖ／ｖ）～６０％（ｖ／ｖ）、約１％（ｖ／ｖ）～５０％（ｖ／ｖ）、約１％（ｖ／ｖ）～４０％（ｖ／ｖ）、約１％（ｖ／ｖ）～３０％（ｖ／ｖ）、約１％（ｖ／ｖ）～２０％（ｖ／ｖ）、約１％（ｖ／ｖ）～１０％（ｖ／ｖ）、約２％（ｖ／ｖ）～５０％（ｖ／ｖ）、約２％（ｖ／ｖ）～４０％（ｖ／ｖ）、約２％（ｖ／ｖ）～３０％（ｖ／ｖ）、約２％（ｖ／ｖ）～２０％（ｖ／ｖ）、約２％（ｖ／ｖ）～１０％（ｖ／ｖ）、約４％（ｖ／ｖ）～５０％（ｖ／ｖ）、約４％（ｖ／ｖ）～４０％（ｖ／ｖ）、約４％（ｖ／ｖ）～３０％（ｖ／ｖ）、約４％（ｖ／ｖ）～２０％（ｖ／ｖ）、約４％（ｖ／ｖ）～１０％（ｖ／ｖ）、約６％（ｖ／ｖ）～５０％（ｖ／ｖ）、約６％（ｖ／ｖ）～４０％（ｖ／ｖ）、約６％（ｖ／ｖ）～３０％（ｖ／ｖ）、約６％（ｖ／ｖ）～２０％（ｖ／ｖ）、約６％（ｖ／ｖ）～１０％（ｖ／ｖ）、約８％（ｖ／ｖ）～５０％（ｖ／ｖ）、約８％（ｖ／ｖ）～４０％（ｖ／ｖ）、約８％（ｖ／ｖ）～３０％（ｖ／ｖ）、約８％（ｖ／ｖ）～２０％（ｖ／ｖ）、約８％（ｖ／ｖ）～１５％（ｖ／ｖ）または約８％（ｖ／ｖ）～１２％（ｖ／ｖ）の範囲の量で含められ得る。

本明細書に開示の組成物中の本明細書に開示のＡＳＯまたはＳＭ－ＡＳＯの最終濃度は、所望される任意の濃度であり得る。この実施形態の一態様において、組成物中のＡＳＯまたはＳＭ－ＡＳＯの最終濃度は治療有効量であり得る。この実施形態の他の態様において、組成物中のＡＳＯまたはＳＭ－ＡＳＯの最終濃度は例えば少なくとも０．００００１ｍｇ／ｍＬ、少なくとも０．０００１ｍｇ／ｍＬ、少なくとも０．００１ｍｇ／ｍＬ、少なくとも０．０１ｍｇ／ｍＬ、少なくとも０．１ｍｇ／ｍＬ、少なくとも１ｍｇ／ｍＬ、少なくとも１０ｍｇ／ｍＬ、少なくとも２５ｍｇ／ｍＬ、少なくとも５０ｍｇ／ｍＬ、少なくとも１００ｍｇ／ｍＬ、少なくとも２００ｍｇ／ｍＬ、少なくとも５００ｍｇ／ｍＬ、少なくとも７００ｍｇ／ｍＬ、少なくとも１，０００ｍｇ／ｍＬまたは少なくとも１，２００ｍｇ／ｍＬであり得る。この実施形態の他の態様において、溶液中の本明細書に開示のＡＳＯまたはＳＭ－ＡＳＯの濃度は例えば最大で１，０００ｎｇ／ｍＬ、最大で１，１００ｎｇ／ｍＬ、最大で１，２００ｎｇ／ｍＬ、最大で１，３００ｎｇ／ｍＬ、最大で１，４００ｎｇ／ｍＬ、最大で１，５００ｎｇ／ｍＬ、最大で２，０００ｎｇ／ｍＬ、最大で２，０００ｎｇ／ｍＬ、または最大で３，０００ｎｇ／ｍＬ、最大で１，０００ｍｇ／ｍＬ、最大で１，１００ｍｇ／ｍＬ、最大で１，２００ｍｇ／ｍＬ、最大で１，３００ｍｇ／ｍＬ、最大で１，４００ｍｇ／ｍＬ、最大で１，５００ｍｇ／ｍＬ、最大で２，０００ｍｇ／ｍＬ、最大で２，０００ｍｇ／ｍＬ、または最大で３，０００ｍｇ／ｍＬであり得る。この実施形態の他の態様において、組成物中のＡＳＯまたはＳＭ－ＡＳＯの最終濃度は例えば約０．００００１ｎｇ／ｍＬ～約３，０００ｎｇ／ｍＬ、約０．０００１ｎｇ／ｍＬ～約３，０００ｎｇ／ｍＬ、約０．０１ｎｇ／ｍＬ～約３，０００ｎｇ／ｍＬ、約０．１ｎｇ／ｍＬ～約３，０００ｎｇ／ｍＬ、約１ｎｇ／ｍＬ～約３，０００ｎｇ／ｍＬ、約２５０ｎｇ／ｍＬ～約３，０００ｎｇ／ｍＬ、約５００ｎｇ／ｍＬ～約３，０００ｎｇ／ｍＬ、約７５０ｎｇ／ｍＬ～約３，０００ｎｇ／ｍＬ、約１，０００ｎｇ／ｍＬ～約３，０００ｎｇ／ｍＬ、約１００ｎｇ／ｍＬ～約２，０００ｎｇ／ｍＬ、約２５０ｎｇ／ｍＬ～約２，０００ｎｇ／ｍＬ、約５００ｎｇ／ｍＬ～約２，０００ｎｇ／ｍＬ、約７５０ｎｇ／ｍＬ～約２，０００ｎｇ／ｍＬ、約１，０００ｎｇ／ｍＬ～約２，０００ｎｇ／ｍＬ、約１００ｎｇ／ｍＬ～約１，５００ｎｇ／ｍＬ、約２５０ｎｇ／ｍＬ～約１，５００ｎｇ／ｍＬ、約５００ｎｇ／ｍＬ～約１，５００ｎｇ／ｍＬ、約７５０ｎｇ／ｍＬ～約１，５００ｎｇ／ｍＬ、約１，０００ｎｇ／ｍＬ～約１，５００ｎｇ／ｍＬ、約１００ｎｇ／ｍＬ～約１，２００ｎｇ／ｍＬ、約２５０ｎｇ／ｍＬ～約１，２００ｎｇ／ｍＬ、約５００ｎｇ／ｍＬ～約１，２００ｎｇ／ｍＬ、約７５０ｎｇ／ｍＬ～約１，２００ｎｇ／ｍＬ、約１，０００ｎｇ／ｍＬ～約１，２００ｎｇ／ｍＬ、約１００ｎｇ／ｍＬ～約１，０００ｎｇ／ｍＬ、約２５０ｎｇ／ｍＬ～約１，０００ｎｇ／ｍＬ、約５００ｎｇ／ｍＬ～約１，０００ｎｇ／ｍＬ、約７５０ｎｇ／ｍＬ～約１，０００ｎｇ／ｍＬ、約１００ｎｇ／ｍＬ～約７５０ｎｇ／ｍＬ、約２５０ｎｇ／ｍＬ～約７５０ｎｇ／ｍＬ、約５００ｎｇ／ｍＬ～約７５０ｎｇ／ｍＬ、約１００ｎｇ／ｍＬ～約５００ｎｇ／ｍＬ、約２５０ｎｇ／ｍＬ～約５００ｎｇ／ｍＬ、約０．００００１ｎｇ／ｍＬ～約０．０００１ｎｇ／ｍＬ、約０．００００１ｎｇ／ｍＬ～約０．００１ｎｇ／ｍＬ、約０．００００１ｎｇ／ｍＬ～約０．０１ｎｇ／ｍＬ、約０．００００１ｎｇ／ｍＬ～約０．１ｎｇ／ｍＬ、約０．００００１ｎｇ／ｍＬ～約１ｎｇ／ｍＬ、約０．００１ｎｇ／ｍＬ～約０．０１ｎｇ／ｍＬ、約０．００１ｎｇ／ｍＬ～約０．１ｎｇ／ｍＬ、約０．００１ｎｇ／ｍＬ～約１ｎｇ／ｍＬ、約０．００１ｎｇ／ｍＬ～約１０ｎｇ／ｍＬ、または約０．００１ｎｇ／ｍＬ～約１００ｎｇ／ｍＬ、約０．００００１ｍｇ／ｍＬ～約３，０００ｍｇ／ｍＬ、約０．０００１ｍｇ／ｍＬ～約３，０００ｍｇ／ｍＬ、約０．０１ｍｇ／ｍＬ～約３，０００ｍｇ／ｍＬ、約０．１ｍｇ／ｍＬ～約３，０００ｍｇ／ｍＬ、約１ｍｇ／ｍＬ～約３，０００ｍｇ／ｍＬ、約２５０ｍｇ／ｍＬ～約３，０００ｍｇ／ｍＬ、約５００ｍｇ／ｍＬ～約３，０００ｍｇ／ｍＬ、約７５０ｍｇ／ｍＬ～約３，０００ｍｇ／ｍＬ、約１，０００ｍｇ／ｍＬ～約３，０００ｍｇ／ｍＬ、約１００ｍｇ／ｍＬ～約２，０００ｍｇ／ｍＬ、約２５０ｍｇ／ｍＬ～約２，０００ｍｇ／ｍＬ、約５００ｍｇ／ｍＬ～約２，０００ｍｇ／ｍＬ、約７５０ｍｇ／ｍＬ～約２，０００ｍｇ／ｍＬ、約１，０００ｍｇ／ｍＬ～約２，０００ｍｇ／ｍＬ、約１００ｍｇ／ｍＬ～約１，５００ｍｇ／ｍＬ、約２５０ｍｇ／ｍＬ～約１，５００ｍｇ／ｍＬ、約５００ｍｇ／ｍＬ～約１，５００ｍｇ／ｍＬ、約７５０ｍｇ／ｍＬ～約１，５００ｍｇ／ｍＬ、約１，０００ｍｇ／ｍＬ～約１，５００ｍｇ／ｍＬ、約１００ｍｇ／ｍＬ～約１，２００ｍｇ／ｍＬ、約２５０ｍｇ／ｍＬ～約１，２００ｍｇ／ｍＬ、約５００ｍｇ／ｍＬ～約１，２００ｍｇ／ｍＬ、約７５０ｍｇ／ｍＬ～約１，２００ｍｇ／ｍＬ、約１，０００ｍｇ／ｍＬ～約１，２００ｍｇ／ｍＬ、約１００ｍｇ／ｍＬ～約１，０００ｍｇ／ｍＬ、約２５０ｍｇ／ｍＬ～約１，０００ｍｇ／ｍＬ、約５００ｍｇ／ｍＬ～約１，０００ｍｇ／ｍＬ、約７５０ｍｇ／ｍＬ～約１，０００ｍｇ／ｍＬ、約１００ｍｇ／ｍＬ～約７５０ｍｇ／ｍＬ、約２５０ｍｇ／ｍＬ～約７５０ｍｇ／ｍＬ、約５００ｍｇ／ｍＬ～約７５０ｍｇ／ｍＬ、約１００ｍｇ／ｍＬ～約５００ｍｇ／ｍＬ、約２５０ｍｇ／ｍＬ～約５００ｍｇ／ｍＬ、約０．００００１ｍｇ／ｍＬ～約０．０００１ｍｇ／ｍＬ、約０．００００１ｍｇ／ｍＬ～約０．００１ｍｇ／ｍＬ、約０．００００１ｍｇ／ｍＬ～約０．０１ｍｇ／ｍＬ、約０．００００１ｍｇ／ｍＬ～約０．１ｍｇ／ｍＬ、約０．００００１ｍｇ／ｍＬ～約１ｍｇ／ｍＬ、約０．００１ｍｇ／ｍＬ～約０．０１ｍｇ／ｍＬ、約０．００１ｍｇ／ｍＬ～約０．１ｍｇ／ｍＬ、約０．００１ｍｇ／ｍＬ～約１ｍｇ／ｍＬ、約０．００１ｍｇ／ｍＬ～約１０ｍｇ／ｍＬ、または約０．００１ｍｇ／ｍＬ～約１００ｍｇ／ｍＬの範囲であり得る。

本明細書の諸態様において、一部において、がんに苦しんでいる個体の処置を開示する。本明細書において使用する場合、用語「処置する」とは、個体においてがんの臨床症状を低減もしくは消失させること；または個体においてがんの臨床症状の発生を遅延もしくは予防することを示す。例えば、用語「処置する」は、がんを特徴とする病状の症状、例えば限定されないが腫瘍サイズを例えば少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％少なくとも９５％または少なくとも１００％低減させることを意味し得る。がんと関連している実際の症状はよく知られており、当業者により、限定されないががんの場所、がんの原因、がんの重症度および／またはがんに冒されている組織もしくは器官などの要素を考慮することによって判断され得る。当業者は、特定の型のがんと関連している適切な症状または指標がわかり、個体が本明細書に開示のような処置の候補であるかどうかをどのようにして判定するかがわかるであろう。

この実施形態の諸態様において、治療有効量の本明細書に開示の組成物により、がんと関連している症状が例えば少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％または少なくとも１００％低減される。この実施形態の他の態様において、治療有効量の本明細書に開示の組成物により、がんと関連している症状が例えば最大で１０％、最大で１５％、最大で２０％、最大で２５％、最大で３０％、最大で３５％、最大で４０％、最大で４５％、最大で５０％、最大で５５％、最大で６０％、最大で６５％、最大で７０％、最大で７５％、最大で８０％、最大で８５％、最大で９０％、最大で９５％または最大で１００％低減される。この実施形態のまた他の態様では、治療有効量の本明細書に開示の組成物により、がんと関連している症状が例えば約１０％～約１００％、約１０％～約９０％、約１０％～約８０％、約１０％～約７０％、約１０％～約６０％、約１０％～約５０％、約１０％～約４０％、約２０％～約１００％、約２０％～約９０％、約２０％～約８０％、約２０％～約２０％、約２０％～約６０％、約２０％～約５０％、約２０％～約４０％、約３０％～約１００％、約３０％～約９０％、約３０％～約８０％、約３０％～約７０％、約３０％～約６０％または約３０％～約５０％低減される。

この実施形態のまた他の態様では、本明細書に開示のＡＳＯまたはＳＭ－ＡＳＯの治療有効量は、一般的に約０．００１ｍｇ／ｋｇ／日～約１００ｍｇ／ｋｇ／日の範囲である。この実施形態の諸態様において、本明細書に開示のＡＳＯまたはＳＭ－ＡＳＯの有効量は例えば少なくとも０．００１ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも０．０１ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも０．１ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも１．０ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも５．０ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも１０ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも１５ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも２０ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも２５ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも３０ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも３５ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも４０ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも４５ｍｇ／ｋｇ／日または少なくとも５０ｍｇ／ｋｇ／日であり得る。この実施形態の他の態様において、本明細書に開示のＡＳＯまたはＳＭ－ＡＳＯの有効量は例えば約０．００１ｍｇ／ｋｇ／日～約１０ｍｇ／ｋｇ／日、約０．００１ｍｇ／ｋｇ／日～約１５ｍｇ／ｋｇ／日、約０．００１ｍｇ／ｋｇ／日～約２０ｍｇ／ｋｇ／日、約０．００１ｍｇ／ｋｇ／日～約２５ｍｇ／ｋｇ／日、約０．００１ｍｇ／ｋｇ／日～約３０ｍｇ／ｋｇ／日、約０．００１ｍｇ／ｋｇ／日～約３５ｍｇ／ｋｇ／日、約０．００１ｍｇ／ｋｇ／日～約４０ｍｇ／ｋｇ／日、約０．００１ｍｇ／ｋｇ／日～約４５ｍｇ／ｋｇ／日、約０．００１ｍｇ／ｋｇ／日～約５０ｍｇ／ｋｇ／日、約０．００１ｍｇ／ｋｇ／日～約７５ｍｇ／ｋｇ／日または約０．００１ｍｇ／ｋｇ／日～約１００ｍｇ／ｋｇ／日の範囲であり得る。この実施形態のまた他の態様では、本明細書に開示のＡＳＯまたはＳＭ－ＡＳＯの有効量は例えば約０．０１ｍｇ／ｋｇ／日～約１０ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０１ｍｇ／ｋｇ／日～約１５ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０１ｍｇ／ｋｇ／日～約２０ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０１ｍｇ／ｋｇ／日～約２５ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０１ｍｇ／ｋｇ／日～約３０ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０１ｍｇ／ｋｇ／日～約３５ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０１ｍｇ／ｋｇ／日～約４０ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０１ｍｇ／ｋｇ／日～約４５ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０１ｍｇ／ｋｇ／日～約５０ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０１ｍｇ／ｋｇ／日～約７５ｍｇ／ｋｇ／日または約０．０１ｍｇ／ｋｇ／日～約１００ｍｇ／ｋｇ／日の範囲であり得る。この実施形態のさらに他の態様において、本明細書に開示のＡＳＯまたはＳＭ－ＡＳＯの有効量は例えば約０．１ｍｇ／ｋｇ／日～約１０ｍｇ／ｋｇ／日、約０．１ｍｇ／ｋｇ／日～約１５ｍｇ／ｋｇ／日、約０．１ｍｇ／ｋｇ／日～約２０ｍｇ／ｋｇ／日、約０．１ｍｇ／ｋｇ／日～約２５ｍｇ／ｋｇ／日、約０．１ｍｇ／ｋｇ／日～約３０ｍｇ／ｋｇ／日、約０．１ｍｇ／ｋｇ／日～約３５ｍｇ／ｋｇ／日、約０．１ｍｇ／ｋｇ／日～約４０ｍｇ／ｋｇ／日、約０．１ｍｇ／ｋｇ／日～約４５ｍｇ／ｋｇ／日、約０．１ｍｇ／ｋｇ／日～約５０ｍｇ／ｋｇ／日、約０．１ｍｇ／ｋｇ／日～約７５ｍｇ／ｋｇ／日または約０．１ｍｇ／ｋｇ／日～約１００ｍｇ／ｋｇ／日の範囲であり得る。

本明細書に開示の組成物中、典型的にはＡＳＯおよび／またはＳＭ－ＡＳＯは約０．０１％～約４５％（重量基準）であり得る。この実施形態の諸態様において、本明細書に開示のＡＳＯおよび／またはＳＭ－ＡＳＯの量は例えば約０．１％～約４５％（重量基準）、約０．１％～約４０％（重量基準）、約０．１％～約３５％（重量基準）、約０．１％～約３０％（重量基準）、約０．１％～約２５％（重量基準）、約０．１％～約２０％（重量基準）、約０．１％～約１５％（重量基準）、約０．１％～約１０％（重量基準）、約０．１％～約５％（重量基準）、約１％～約４５％（重量基準）、約１％～約４０％（重量基準）、約１％～約３５％（重量基準）、約１％～約３０％（重量基準）、約１％～約２５％（重量基準）、約１％～約２０％（重量基準）、約１％～約１５％（重量基準）、約１％～約１０％（重量基準）、約１％～約５％（重量基準）、約５％～約４５％（重量基準）、約５％～約４０％（重量基準）、約５％～約３５％（重量基準）、約５％～約３０％（重量基準）、約５％～約２５％（重量基準）、約５％～約２０％（重量基準）、約５％～約１５％（重量基準）、約５％～約１０％（重量基準）、約１０％～約４５％（重量基準）、約１０％～約４０％（重量基準）、約１０％～約３５％（重量基準）、約１０％～約３０％（重量基準）、約１０％～約２５％（重量基準）、約１０％～約２０％（重量基準）、約１０％～約１５％（重量基準）、約１５％～約４５％（重量基準）、約１５％～約４０％（重量基準）、約１５％～約３５％（重量基準）、約１５％～約３０％（重量基準）、約１５％～約２５％（重量基準）、約１５％～約２０％（重量基準）、約２０％～約４５％（重量基準）、約２０％～約４０％（重量基準）、約２０％～約３５％（重量基準）、約２０％～約３０％（重量基準）、約２０％～約２５％（重量基準）、約２５％～約４５％（重量基準）、約２５％～約４０％（重量基準）、約２５％～約３５％（重量基準）または約２５％～約３０％（重量基準）であり得る。

組成物またはＡＳＯもしくはＳＭ－ＡＳＯは個体に投与される。個体は典型的には人間であるが、動物、例えば限定されないがイヌ、ネコ、トリ、ウシ、ウマ、ヒツジ、ヤギ、爬虫類、サルおよび他の動物であってもよく、飼養化されているか否かに関わらない。典型的には、処置の候補である任意の個体は、何らかの形態のがんを有する候補であり、このがんは、良性もしくは悪性、腫瘍、充実性またはその他、腫瘍内に位置していないがん細胞あるいは何らかの他の形態のがんのいずれかである。

がんを処置するための組成物の投薬は単回投薬量であっても累積的（連続投薬）であってもよく、当業者によって容易に判断され得る。例えば、がんの処置は有効用量の本明細書に開示の組成物の１回での投与を含むものであり得る。あるいはまた、がんの処置は、ある範囲の期間にわたって例えば１日１回、１日２回、１日３回、数日毎に１回、週１回、月１回などで行なわれる有効用量の組成物の反復投与を含むものであり得る。投与のタイミングは個体ごとに、個体の症状の重症度などの要素に応じて異なり得る。例えば、がんを処置するための有効用量の本明細書に開示の組成物は個体に１日１回、不確定期限、または該個体がもはや治療を必要としなくなるまで投与され得る。当業者には、個体の病状が、がんの処置過程全体を通してモニタリングされ得ること、および投与される本明細書に開示の組成物の有効量はそれに応じて調整され得ることが認識されよう。

一実施形態において、本明細書に開示のＡＳＯまたはＳＭ－ＡＳＯは、がんに苦しんでいる個体においてがん細胞の数または腫瘍サイズを、例えば同じ処置を受けていない患者と比べて少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％低減させることができる。この実施形態の他の態様において、ＡＳＯまたはＳＭ－ＡＳＯは、がんに苦しんでいる個体においてがん細胞の数または腫瘍サイズを、同じ処置を受けていない患者と比べて例えば約１０％～約１００％、約２０％～約１００％、約３０％～約１００％、約４０％～約１００％、約５０％～約１００％、約６０％～約１００％、約７０％～約１００％、約８０％～約１００％、約１０％～約９０％、約２０％～約９０％、約３０％～約９０％、約４０％～約９０％、約５０％～約９０％、約６０％～約９０％、約７０％～約９０％、約１０％～約８０％、約２０％～約８０％、約３０％～約８０％、約４０％～約８０％、約５０％～約８０％または約６０％～約８０％、約１０％～約７０％、約２０％～約７０％、約３０％～約７０％、約４０％～約７０％または約５０％～約７０％低減させることができる。

さらなる一実施形態では、ＡＳＯまたはＳＭ－ＡＳＯおよびその誘導体は２時間、３時間、４時間、５時間、６時間、７時間、８時間、９時間、１０時間、１１時間、１２時間、１３時間、１４時間、１５時間、１６時間、１７時間、１８時間、１９時間、２０時間、２１時間、２２時間、２３時間、１日、２日間、３日間、４日間、５日間、６日間、７日間、１週間、２週間、３週間、４週間、１ヶ月間、２ヶ月間、３ヶ月間、４ヶ月間またはそれ以上の半減期を有する。

一実施形態では、ＡＳＯまたはＳＭ－ＡＳＯの投与期間は１日、２日間、３日間、４日間、５日間、６日間、７日間、８日間、９日間、１０日間、１１日間、１２日間、１３日間、１４日間、３週間、４週間、５週間、６週間、７週間、８週間、９週間、１０週間、１１週間、１２週間、４ヶ月間、５ヶ月間、６ヶ月間、７ヶ月間、８ヶ月間、９ヶ月間、１０ヶ月間、１１ヶ月間、１２ヶ月間であるか、またはそれより長い。さらなる一実施形態では、ＡＳＯまたはＳＭ－ＡＳＯの投与が停止される期間は１日、２日間、３日間、４日間、５日間、６日間、７日間、８日間、９日間、１０日間、１１日間、１２日間、１３日間、１４日間、３週間、４週間、５週間、６週間、７週間、８週間、９週間、１０週間、１１週間、１２週間、４ヶ月間、５ヶ月間、６ヶ月間、７ヶ月間、８ヶ月間、９ヶ月間、１０ヶ月間、１１ヶ月間、１２ヶ月間であるか、またはそれより長い。

この実施形態の諸態様において、治療有効量の本明細書に開示のＡＳＯまたはＳＭ－ＡＳＯにより、個体におけるがん細胞集団および／または腫瘍細胞のサイズが例えば少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％または少なくとも１００％低減されるか、あるいは維持される。この実施形態の他の態様において、治療有効量の本明細書に開示のＡＳＯまたはＳＭ－ＡＳＯにより、個体におけるがん細胞集団および／または腫瘍細胞のサイズが例えば最大で１０％、最大で１５％、最大で２０％、最大で２５％、最大で３０％、最大で３５％、最大で４０％、最大で４５％、最大で５０％、最大で５５％、最大で６０％、最大で６５％、最大で７０％、最大で７５％、最大で８０％、最大で８５％、最大で９０％、最大で９５％または最大で１００％低減されるか、あるいは維持される。この実施形態のまた他の態様では、治療有効量の本明細書に開示のＡＳＯまたはＳＭ－ＡＳＯにより、個体におけるがん細胞集団および／または腫瘍細胞のサイズが例えば約１０％～約１００％、約１０％～約９０％、約１０％～約８０％、約１０％～約７０％、約１０％～約６０％、約１０％～約５０％、約１０％～約４０％、約２０％～約１００％、約２０％～約９０％、約２０％～約８０％、約２０％～約２０％、約２０％～約６０％、約２０％～約５０％、約２０％～約４０％、約３０％～約１００％、約３０％～約９０％、約３０％～約８０％、約３０％～約７０％、約３０％～約６０％または約３０％～約５０％低減されるか、あるいは維持される。

ＡＳＯまたはＳＭ－ＡＳＯを含む組成物は、がんに苦しんでいる個体に投与される。がんに苦しんでいる個体は典型的には人間であるが、動物、例えば限定されないがイヌ、ネコ、トリ、ウシ、ウマ、ヒツジ、ヤギ、爬虫類、サルおよび他の動物であってもよく、飼養化されているか否かに関わらない。典型的には、処置の候補である任意の個体は、何らかの形態のがんを有する候補であり、このがんは、良性もしくは悪性、腫瘍、充実性またはその他、腫瘍内に位置していないがん細胞あるいは何らかの他の形態のがんのいずれかである。中でも、最も一般的な型のがんとしては、限定されないが、リンパ腫（例えば、ホジキンリンパ腫（ＨＬ）、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）およびあらゆる亜型）、原発性縦隔大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、白血病（例えば、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、Ｔ細胞白血病およびあらゆる亜型、Ｂ細胞白血病およびあらゆる亜型）、結腸直腸がん、肝臓がん（例えば、肝細胞癌（ＨＣＣ）、胆管癌（胆管がん）および肝芽腫）、肝細胞癌（ＨＣＣ）、黒色腫、肺がん（例えば、小細胞肺がん（ＳＣＬＣ）および非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）、腺癌、扁平上皮（類表皮）癌および大細胞（未分化）癌、非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）（扁平上皮または非扁平上皮）、小細胞肺がん、腎臓がん、腎細胞癌、食道の扁平上皮癌、頭頸部がん（例えば、扁平上皮または非扁平上皮）、頭頸部の扁平上皮癌、尿路上皮癌、子宮頸がん、皮膚扁平上皮癌、子宮内膜癌、胃（ｇａｓｔｒｉｃ）（胃（ｓｔｏｍａｃｈ））がんまたは胃食道接合部がん、食道がん（例えば、扁平上皮癌および腺癌）、メルケル細胞癌、高頻度マイクロサテライト不安定性（ＭＳＩ－Ｈ）またはミスマッチ修復欠損（ｄＭＭＲ）がん、充実性腫瘍（例えば、腫瘍遺伝子変異量高スコア（ＴＭＢ－Ｈ）または転移性がん）、結腸直腸がん（例えば、転移性の高頻度マイクロサテライト不安定性（ＭＳＩ－Ｈ）またはミスマッチ修復欠損（ｄＭＭＲ）がん）、トリプルネガティブ乳がん、トリプルポジティブ乳がん、脳のがん（例えば、星状細胞腫、上衣細胞腫、神経膠腫、髄膜腫、髄芽細胞腫、神経芽細胞腫）、膀胱がん、小児がん（例えば、急性リンパ性白血病、脳のがん、神経芽細胞腫、非ホジキンリンパ腫、ホジキンリンパ腫、甲状腺癌、精巣胚細胞腫瘍）、多発性骨髄腫、卵巣がん、膵がん、前立腺がん、肉腫（例えば、骨肉腫、軟骨肉腫、脂肪肉腫および平滑筋肉腫）、皮膚がん（例えば、基底細胞癌（ＢＣＣ）、扁平上皮癌（ＳＣＣ）、黒色腫、メルケル細胞癌（ＭＣＣ）およびカポジ肉腫（ＫＳ））、胃がんならびに子宮（子宮内膜）がんが挙げられる。術前評価は典型的には、処置に関する関連するあらゆるリスクと便益を開示する充分なインフォームドコンセントに加えて常套的な病歴聴取および身体診察を含む。

本明細書に開示の組成物にはＡＳＯおよび／またはＳＭ－ＡＳＯが治療有効量で含められ得る。本明細書において使用する場合、用語「有効量」は、「治療有効量」、「有効用量」または「治療有効用量」と同義であり、個体におけるがん細胞集団および／または腫瘍細胞のサイズの低減または維持に関して使用する場合、所望の治療効果を得るために必要な本明細書に開示のＡＳＯおよび／またはＳＭ－ＡＳＯを含む組成物の最小用量を示し、個体においてがん細胞集団および／または腫瘍細胞のサイズが低減または維持されるのに充分な用量を含む。個体におけるがん細胞集団および／または腫瘍細胞のサイズを低減または維持することができる本明細書に開示のＡＳＯおよび／またはＳＭ－ＡＳＯを含む組成物の有効性は、個体における改善を、個体における１つもしくはそれより多くの臨床症状ならびに／またはがん細胞集団および／もしくは腫瘍細胞のサイズの低減もしくは維持と関連している生理学的指標に基づいて観察することによって判断され得る。がん細胞集団および／または腫瘍細胞のサイズの維持または低減は、同時治療の必要性の低下によって示される場合もあり得る。個体におけるがん細胞集団および／または腫瘍細胞のサイズを低減または維持することができる本明細書に開示のＡＳＯおよび／またはＳＭ－ＡＳＯを含む組成物の有効性は、個体における改善を、１つもしくはそれより多くの臨床症状ならびに／またはがん細胞集団および／もしくは腫瘍細胞のサイズの低減もしくは維持と関連している生理学的指標に基づいて観察することによって判断され得る。また、本明細書に開示のＡＳＯおよび／またはＳＭ－ＡＳＯを含む組成物の有効性により個体の寿命を、ＡＳＯおよび／またはＳＭ－ＡＳＯを含む該組成物が投与されない場合の同じ個体と比べて長くすることができる。また、本明細書に開示のＡＳＯおよび／またはＳＭ－ＡＳＯを含む組成物の有効性により個体の生活の質を、ＡＳＯおよび／またはＳＭ－ＡＳＯを含む該組成物が投与されない場合の同じ個体と比べて高めることができる。

個体の病状におけるがん細胞集団および／または腫瘍細胞のサイズを低減または維持するために投与される本明細書に開示のＡＳＯおよび／またはＳＭ－ＡＳＯを含む組成物の適切な有効量は当業者により、限定されないが血液試料もしくは生検材料において測定されたがん細胞の数あるいは個体で撮影された、または個体のＣＡＴスキャン、ＰＥＴスキャン、ＮＭＲおよび／またはソノグラム、具体的な特徴、患者の病歴およびリスクファクター、例えば年齢、体重、一般健康状態など、あるいはその任意の組合せなどの要素を考慮することによって決定され得る。さらに、ＡＳＯおよび／またはＳＭ－ＡＳＯを含む組成物の反復投与が使用される場合、ＡＳＯおよび／またはＳＭ－ＡＳＯを含む組成物の有効量はさらに、限定されないが、投与頻度、がん治療薬の半減期またはその任意の組合せなどの要素に依存する。本明細書に開示のＡＳＯおよび／またはＳＭ－ＡＳＯを含む組成物の有効量は、ヒトまたは動物への投与の前のインビトロアッセイおよび動物モデルを用いたインビボ投与試験から外挿され得る当業者に知られている。一実施形態では、ＡＳＯおよび／またはＳＭ－ＡＳＯを含む組成物がＡＳＯおよび／またはＳＭ－ＡＳＯを単独で、あるいは１種類またはそれより多くの賦形剤および／または他の活性治療薬とともに含む。

一実施形態において、組成物が、限定されないが個々の投薬形態または個別の投薬形態（例えば、カプセル剤または錠剤）として投与される場合では、キットは、限定されないが、本発明の組成物を構成する組成物を使用説明書とともに備えている。さらなる一実施形態において、組成物は、限定されないが投与に適した任意の様式でパッケージングされ得るが、パッケージングは、投与のための使用説明書と一緒であることが考慮される場合、限定されないが、該組成物の各成分を投与する様式を明白に示しているものとする。さらなる一実施形態では、組成物が、限定されないが、単一の投与可能な投薬形態、例えばカプセル剤、錠剤または他の固形もしくは液状の製剤に一体化され得る。組成物を個体にパッケージにて提供してもよい。パッケージは容器、例えば限定されないがビン、キャニスター、チューブまたは他の密閉容器であり得る。また、パッケージは小袋包装、例えばブリスターパックであってもよい。

一実施形態では、治療薬を含む該組成物が、経表面、経腸または非経口の投与経路を用いる局所送達または全身送達のいずれかのために製剤化され得る。さらに、本明細書に開示しているＡＳＯまたはＳＭ－ＡＳＯは、単独で組成物に製剤化してもよく、１種類またはそれより多くの他の治療薬と一緒に製剤化して単一の組成物にする組成物に製剤化してもよい。さらなる一態様では、ＡＳＯおよび／またはＳＭ－ＡＳＯを含む組成物が、静脈内輸注、腫瘍微小環境内への直接注射、両方の組合せ、経口、直腸内、皮下、膣内、筋肉内、髄腔内または一般的に使用されている他の送達経路によって投与される。

本明細書に開示のＡＳＯおよび／またはＳＭ－ＡＳＯ治療薬あるいはかかる治療薬を含む組成物を吸入用製剤に作製してもよい。経腸または非経口投与に適した吸入用製剤としては、限定されないがエールゾル剤、乾燥粉末剤が挙げられる。かかる投与が意図される本明細書に開示のＡＳＯおよび／またはＳＭ－ＡＳＯ治療薬あるいは組成物は、組成物の製造のための当該技術分野で知られた任意の方法に従って調製され得る。

かかる吸入用投薬形態において、ＡＳＯおよび／またはＳＭ－ＡＳＯ治療薬あるいは組成物は、加圧式（ＰＤＩ）または他の定量吸入器（ＭＤＩ）における使用のための液状プロペラント中のエールゾル剤としての送達のために調製され得る。ＰＤＩまたはＭＤＩにおける使用に適したプロペラントとしては、限定されないが、ＣＦＣ－１２、ＨＦＡ－１３４ａ、ＨＦＡ－２２７、ＨＣＦＣ－２２（ジフルオロクロロメタン）、ＨＦＡ－１５２（ジフルオロエタンとイソブタン）が挙げられる。また、ＡＳＯおよび／またはＳＭ－ＡＳＯ治療薬を、ネブライザーまたは他のエールゾル送達系を用いて送達してもよい。ＡＳＯおよび／またはＳＭ－ＡＳＯ治療薬は、ドライパウダー吸入器（ＤＰＩ）における使用のための乾燥粉末剤としての送達のために調製され得る。該吸入器における使用のための乾燥粉末剤は通常、３０ｐｍ未満、好ましくは２０ｐｍ未満、より好ましくは１０ｐｍ未満の空気力学的質量中央径を有する。約５ｐｍ～約０．５ｐｍの範囲の空気力学的直径を有する微粒子は一般的に呼吸細気管支内に沈着し、一方、約２ｐｍ～約０．０５ｐｍの範囲の空気力学的直径を有する、より小さい粒子は肺胞内沈着する可能性が高い。ＤＰＩは、肺内に粒子を導入するために個体の吸息に依存する受動的送達機構であってもよく、個体に粉末を送達するための機構が必要とされる能動的送達機構であってもよい。吸入製剤において、吸入用製剤用の本明細書に開示のＡＳＯおよび／またはＳＭ－ＡＳＯ治療薬の治療有効量は約０．０００１％（ｗ／ｖ）～約６０％（ｗ／ｖ）、約０．００１％（ｗ／ｖ）～約４０．０％（ｗ／ｖ）または約０．０１％（ｗ／ｖ）～約２０．０％（ｗ／ｖ）であり得る。また、吸入製剤において、吸入用製剤用の本明細書に開示のがん治療薬の治療有効量は約０．０００１％（ｗ／ｗ）～約６０％（ｗ／ｗ）、約０．００１％（ｗ／ｗ）～約４０．０％（ｗ／ｗ）または約０．０１％（ｗ／ｗ）～約２０．０％（ｗ／ｗ）であり得る。

本明細書に開示のＡＳＯおよび／またはＳＭ－ＡＳＯ治療薬あるいはかかるＡＳＯおよび／またはＳＭ－ＡＳＯ治療薬を含む組成物を固形製剤に作製してもよい。経腸または非経口投与に適した固形製剤としては、限定されないが、カプセル剤、錠剤、丸剤、トローチ剤、ロゼンジ剤、吸入または滅菌された注射用の液剤もしくは懸濁剤への再構成に適した粉末剤および顆粒剤が挙げられる。かかる投与が意図される本明細書に開示のＡＳＯおよび／またはＳＭ－ＡＳＯ治療薬あるいは組成物は、医薬組成物の製造のための当該技術分野で知られた任意の方法に従って調製され得る。かかる固形投薬形態において、ＡＳＯおよび／またはＳＭ－ＡＳＯは（ａ）少なくとも１種類の不活性な慣用的な賦形剤（もしくは担体）、例えばクエン酸ナトリウムもしくはリン酸二カルシウムなど、または（ｂ）例えばデンプン、ラクトース、スクロース、グルコース、マンニトール、イソマルトおよびケイ酸のような充填剤もしくは増量剤、（ｃ）結合剤、例えばカルボキシメチルセルロース、アリグネート（ａｌｉｇｎａｔｅ）、ゼラチン、ポリビニルピロリドン、スクロースおよびアカシアなど、（ｄ）保湿剤、例えばグリセロールなど、（ｅ）崩壊剤、例えばアガー－アガー、炭酸カルシウム、コーンスターチ、イモデンプン、タピオカデンプン、アルギン酸、シリケートと炭酸ナトリウムの特定の複合体など、（ｆ）溶解遅延剤、例えばパラフィンなど、（ｇ）吸収促進剤、例えば第４級アンモニウム化合物など、（ｈ）湿潤剤、例えばセチルアルコールおよびモノステアリン酸グリセロールなど、（ｉ）吸着剤、例えばカオリンおよびベントナイトなど、（ｊ）滑沢剤、例えばタルク、ステアリン酸、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、固形ポリエチレングリコール、ラウリル硫酸ナトリウムまたはその混合物など、ならびに（ｋ）緩衝剤と混合状態にされ得る。錠剤は非コーティングであってもよく、消化管内での崩壊および吸収を遅延させ、それにより長期間にわたる持続作用をもたらすための既知の手法によってコーティングされてもよい。例えば、モノステアリン酸グリセリルまたはジステアリン酸グリセリルなどの時間遅延材料が使用され得る。固形製剤において、本明細書に開示のＡＳＯおよび／またはＳＭ－ＡＳＯの治療有効量は典型的には、約０．０００１％（ｗ／ｗ）～約６０％（ｗ／ｗ）、約０．００１％（ｗ／ｗ）～約４０．０％（ｗ／ｗ）または約０．０１％（ｗ／ｗ）～約２０．０％（ｗ／ｗ）であり得る。

本明細書に開示のＡＳＯおよび／またはＳＭ－ＡＳＯあるいはかかるＡＳＯおよび／またはＳＭ－ＡＳＯを含む組成物を半固形製剤に作製してもよい。経表面投与に適した半固形製剤としては、限定されないが、軟膏、クリーム剤、膏薬およびゲル剤が挙げられる。かかる投与が意図される本明細書に開示のＡＳＯおよび／またはＳＭ－ＡＳＯあるいは組成物は、医薬組成物の製造のための当該技術分野で知られた任意の方法に従って調製され得る。半固形製剤において、本明細書に開示のＡＳＯおよび／またはＳＭ－ＡＳＯの治療有効量は典型的には、約０．０００１％（ｗ／ｖ）～約６０％（ｗ／ｖ）、約０．００１％（ｗ／ｖ）～約４０．０％（ｗ／ｖ）または約０．０１％（ｗ／ｖ）～約２０．０％（ｗ／ｖ）であり得る。半固形製剤において、また、本明細書に開示のＡＳＯおよび／またはＳＭ－ＡＳＯの治療有効量は典型的には、約０．０００１％（ｗ／ｗ）～約６０％（ｗ／ｗ）、約０．００１％（ｗ／ｗ）～約４０．０％（ｗ／ｗ）または約０．０１％（ｗ／ｗ）～約２０．０％（ｗ／ｗ）であり得る。本明細書に開示の、あるいはかかるＡＳＯおよび／またはＳＭ－ＡＳＯを含む組成物を半固形製剤に作製してもよい。経表面投与に適した半固形製剤としては、限定されないが、軟膏、クリーム剤、膏薬およびゲル剤が挙げられる。かかる投与が意図される本明細書に開示のＡＳＯおよび／またはＳＭ－ＡＳＯあるいは組成物は、組成物の製造のための当該技術分野で知られた任意の方法に従って調製され得る。半固形製剤において、本明細書に開示のＡＳＯおよび／またはＳＭ－ＡＳＯの治療有効量は典型的には、約０．０００１％（ｗ／ｖ）～約６０％（ｗ／ｖ）、約０．００１％（ｗ／ｖ）～約４０．０％（ｗ／ｖ）または約０．０１％（ｗ／ｖ）～約２０．０％（ｗ／ｖ）であり得る。半固形製剤において、また、本明細書に開示のＡＳＯおよび／またはＳＭ－ＡＳＯの治療有効量は典型的には、約０．０００１％（ｗ／ｗ）～約６０％（ｗ／ｗ）、約０．００１％（ｗ／ｗ）～約４０．０％（ｗ／ｗ）または約０．０１％（ｗ／ｗ）～約２０．０％（ｗ／ｗ）であり得る。

本明細書に開示のＡＳＯおよび／またはＳＭ－ＡＳＯあるいはかかるＡＳＯおよび／またはＳＭ－ＡＳＯを含む組成物を液状製剤に作製してもよい。経腸または非経口投与に適した液状製剤としては、限定されないが、液剤、シロップ剤、エリキシル剤、分散剤、エマルジョンおよび懸濁剤、例えば限定されないが静脈内投与に使用されるものが挙げられる。かかる投与が意図される本明細書に開示のＡＳＯおよび／またはＳＭ－ＡＳＯあるいは組成物は、組成物の製造のための当該技術分野で知られた任意の方法に従って調製され得る。かかる液状投薬形態において、本明細書に開示のＡＳＯおよび／またはＳＭ－ＡＳＯあるいは組成物は（ａ）適当な水性および非水性の担体、（ｂ）希釈剤、（ｃ）溶媒、例えば水、エタノール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、グリセロール、植物油、例えば菜種油およびオリーブ油など、ならびに注射用有機エステル、例えばオレイン酸エチルなど；および／または流動化剤、例えば界面活性剤などもしくはレシチンなどのコーティング剤と混合状態にされ得る。分散剤および懸濁剤の場合、流動性はまた、特定の粒径を維持することによっても制御され得る。液状製剤において、本明細書に開示のＡＳＯおよび／またはＳＭ－ＡＳＯの治療有効量は典型的には、約０．０００１％（ｗ／ｖ）～約６０％（ｗ／ｖ）、約０．００１％（ｗ／ｖ）～約４０．０％（ｗ／ｖ）または約０．０１％（ｗ／ｖ）～約２０．０％（ｗ／ｖ）であり得る。

液状懸濁剤は、本明細書に開示のＡＳＯおよび／またはＳＭ－ＡＳＯを、水性懸濁剤の製造に適した賦形剤との混合状態で懸濁させることにより製剤化され得る。かかる賦形剤は懸濁化剤、例えば、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、アルギン酸ナトリウム、ペクチン、ポリビニルピロリドン、ポリビニルアルコール、天然ガム、寒天、トラガカントガムおよびアカシアガムであり；分散化剤または湿潤剤は天然に存在するホスファチド、例えばレシチン、またはアルキレンオキシドと脂肪酸との縮合生成物、例えばポリオキシエチレンステアレート、またはエチレンオキシドと長鎖脂肪族アルコールとの縮合生成物、例えばヘプタデカエチレンオキシセタノール、またはエチレンオキシドと脂肪酸から誘導される部分エステルとの縮合生成物、例えばポリオキシエチレンソルビタンモノオレエートであり得る。

油性懸濁剤は、本明細書に開示のＡＳＯおよび／またはＳＭ－ＡＳＯを、（ａ）植物油、例えばアーモンド油、ラッカセイ油、アボカド油、キャノーラ油、ヒマシ油、ココナッツ油、コーン油、綿実油、グレープシードオイル、ヘーゼルナッツ油、***油、アマニ油、オリーブ油、ヤシ油、ピーナツ油、菜種油、米ぬか油、ベニバナ油、ゴマ油、ダイズ（ｓｏｙｂｅａｎ）油、ダイズ（ｓｏｙａ）油、ヒマワリ油、クルミ油、小麦胚芽油またはその組合せなど、（ｂ）飽和脂肪酸、不飽和脂肪酸またはその組合せ、例えばパルミチン酸、ステアリン酸、オレイン酸、リノール酸、リノレン酸またはその組合せなど、（ｃ）鉱物油、例えば液状パラフィンなど、（ｄ）界面活性剤またはデタージェントとの混合状態で懸濁させることにより製剤化され得る。油性懸濁剤に増粘剤、例えばミツロウ、硬質パラフィンまたはセチルアルコールを含有させる場合もあり得る。口当たりのよい経口調製物を得るために甘味剤、例えば上記に示したもの、および香味剤を添加してもよい。このような組成物は、酸化防止剤、例えばアスコルビン酸の添加によって保存され得る。

水性懸濁剤の調製に適した分散性の粉末剤および顆粒剤は、水の添加により、ＡＳＯおよび／またはＳＭ－ＡＳＯが分散化剤または湿潤剤、懸濁化剤および１種類もしくはそれより多くの保存料と混合状態になる。

本明細書に開示のＡＳＯおよび／またはＳＭ－ＡＳＯは水中油型エマルジョンの形態であってもよい。油相は本明細書に開示のような植物油もしくは本明細書に開示のような鉱物油またはその混合物であり得る。好適な乳化剤は天然に存在するガム、例えばアカシアガムまたはトラガカントガムなど、天然に存在するホスファチド、例えばダイズ、レシチンおよび脂肪酸とヘキシトール無水物から誘導されるエステルまたは部分エステル、例えばソルビタンモノオレエートおよび前記部分エステルとエチレンオキシドとの縮合生成物、例えばポリオキシエチレンソルビタンモノオレエートであり得る。

また、本明細書に開示のＡＳＯおよび／またはＳＭ－ＡＳＯあるいはかかるＡＳＯおよび／またはＳＭ－ＡＳＯを含む組成物を、経時的に制御放出プロフィールを得るための組成物送達プラットフォームに組み込んでもよい。かかる組成物送達プラットフォームは、高分子マトリックス、典型的には生分解性、生体内分解性および／または生体吸収性の高分子マトリックス内に分散された本明細書に開示のＡＳＯおよび／またはＳＭ－ＡＳＯを含む。本明細書において使用する場合、用語「高分子」は、合成のホモポリマーまたはコポリマー、天然に存在するホモポリマーまたはコポリマーならびに線状、分枝状または星型の構造を有するその合成の修飾体または誘導体を示す。コポリマーは任意の形態に配列したもの、例えばランダム、ブロック、セグメント化、テーパードブロック、グラフトまたはトリブロックなどであり得る。高分子は一般的に縮合重合体である。高分子を、その機械的特性または分解特性を高めるために、架橋剤を導入すること、または側鎖の残基の疎水性を変更することによってさらに修飾してもよい。架橋する場合、高分子は通常、架橋が５％未満、通常架橋は１％未満である。

好適な高分子としては、限定されないが、アルギネート、脂肪族ポリエステル、ポリアルキレンオキサレート、ポリアミド、ポリアミドアミドエステル、ポリ無水物、ポリカーボネート、ポリエステル、ポリエチレングリコール、ポリヒドロキシ脂肪族カルボン酸、ポリオルトエステル、ポリオキサエステル、ポリペプチド、ポリホスファゼン、多糖類およびポリウレタンが挙げられる。高分子は通常、組成物プラットフォームの少なくとも約１０％（ｗ／ｗ）、少なくとも約２０％（ｗ／ｗ）、少なくとも約３０％（ｗ／ｗ）、少なくとも約４０％（ｗ／ｗ）、少なくとも約５０％（ｗ／ｗ）、少なくとも約６０％（ｗ／ｗ）、少なくとも約７０％（ｗ／ｗ）、少なくとも約８０％（ｗ／ｗ）または少なくとも約９０％（ｗ／ｗ）を構成する。生分解性、生体内分解性および／または生体吸収性の高分子ならびにがん治療薬の送達プラットフォームを作製するのに有用な方法の例は、例えば、Ｄｒｏｓｔ，ｅｔ．ａｌ．，ＣｏｎｔｒｏｌｌｅｄＲｅｌｅａｓｅＦｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ、米国特許４，７５６，９１１；Ｓｍｉｔｈ，ｅｔ．ａｌ．，ＳｕｓｔａｉｎｅｄＲｅｌｅａｓｅＤｒｕｇＤｅｌｉｖｅｒｙＤｅｖｉｃｅｓ、米国特許５，３７８，４７５；ＷｏｎｇａｎｄＫｏｃｈｉｎｋｅ，ＦｏｒｍｕｌａｔｉｏｎｆｏｒＣｏｎｔｒｏｌｌｅｄＲｅｌｅａｓｅｏｆＤｒｕｇｓｂｙＣｏｍｂｉｎｉｎｇＨｙｄｒｏｐｈｉｌｉｃａｎｄＨｙｄｒｏｐｈｏｂｉｃＡｇｅｎｔｓ、米国特許７，０４８，９４６；Ｈｕｇｈｅｓ，ｅｔ．ａｌ．，ＣｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓａｎｄＭｅｔｈｏｄｓｆｏｒＬｏｃａｌｉｚｅｄＴｈｅｒａｐｙｏｆｔｈｅＥｙｅ、米国特許出願公開２００５／０１８１０１７；Ｈｕｇｈｅｓ，ＨｙｐｏｔｅｎｓｉｖｅＬｉｐｉｄ－ＣｏｎｔａｉｎｉｎｇＢｉｏｄｅｇｒａｄａｂｌｅＩｎｔｒａｏｃｕｌａｒＩｍｐｌａｎｔｓａｎｄＲｅｌａｔｅｄＭｅｔｈｏｄｓ、米国特許出願公開２００５／０２４４４６４；Ａｌｔｍａｎ，ｅｔａｌ．，ＳｉｌｋＦｉｂｒｏｉｎＨｙｄｒｏｇｅｌｓａｎｄＵｓｅｓＴｈｅｒｅｏｆ、米国特許出願公開２０１１／０００８４３７に記載されており；これらの各々は引用によりその全体が組み込まれる。

組成物送達プラットフォームは、徐放組成物送達プラットフォームおよび持続放出組成物送達プラットフォームの両方を含む。本明細書において使用する場合、用語「徐放」は、約７日間またはそれより長い期間にわたる本明細書に開示のＡＳＯおよび／またはＳＭ－ＡＳＯの放出を示す。本明細書において使用する場合、用語「持続放出」は、約７日未満の期間の期間にわたる本明細書に開示のＡＳＯおよび／またはＳＭ－ＡＳＯの放出を示す。

この実施形態の諸態様において、徐放組成物送達プラットフォームにより、本明細書に開示のＡＳＯおよび／またはＳＭ－ＡＳＯは例えば投与後約７日間、投与後約１５日間、投与後約３０日間、投与後約４５日間、投与後約６０日間、投与後約７５日間または投与後約９０日間の期間にわたって実質的にゼロ次放出速度論で放出される。この実施形態の他の態様では、徐放組成物送達プラットフォームにより本明細書に開示のＡＳＯおよび／またはＳＭ－ＡＳＯが例えば投与後少なくとも７日間、投与後少なくとも１５日間、投与後少なくとも３０日間、投与後少なくとも４５日間、投与後少なくとも６０日間、投与後少なくとも７５日間または投与後少なくとも９０日間の期間にわたって実質的にゼロ次放出速度論で放出される。

個体におけるがん細胞集団および／または腫瘍細胞のサイズを低減および／または維持するための方法に従って本明細書に開示の組成物を投与するのに種々の投与経路が有用であり得る。組成物は個体に、例えば、使用される具体的な組成物または組成物に含められる他の化合物ならびに個体の病歴、リスクファクターおよび症状に応じて任意のさまざまな手段によって投与され得る。そのため、経表面、経腸、経口、静脈内、皮下、鼻腔内経由、直腸経由、膣経由、髄腔内、筋肉内または非経口での投与経路が、本明細書に開示のような個体におけるがん細胞集団および／または腫瘍細胞のサイズの低減または維持に好適であり得、かかる経路は、本明細書に開示のがん治療薬または組成物の局所送達および全身送達の両方を含む。単独の本明細書に開示のＡＳＯおよび／またはＳＭ－ＡＳＯあるいは２種類以上の本明細書に開示のＡＳＯおよび／またはＳＭ－ＡＳＯのいずれかを含む組成物が、吸入用、経表面、鼻腔内経由、経口、皮下、舌下、静脈内、髄腔内、直腸経由および／または膣経由での使用に意図され、医薬組成物の製造のための当該技術分野で知られた任意の方法に従って調製され得る。本明細書に開示の組成物は個体に単一の製剤にて、または別々の製剤にて併用投与、同時投与もしくは逐次投与で投与され得る。

本明細書の諸態様において、一部において、薬学的に許容され得る溶媒を開示する。溶媒は液状物、固形物または気体であり、別の固形物、液状物またはガス状物（溶質）を溶解して溶液をもたらす。本明細書に開示の組成物において有用な溶媒としては、限定されないが、薬学的に許容され得る極性非プロトン性溶媒、薬学的に許容され得る極性プロトン性溶媒および薬学的に許容され得る非極性溶媒が挙げられる。薬学的に許容され得る極性非プロトン性溶媒としては、限定されないが、ジクロロメタン（ＤＣＭ）、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）、酢酸エチル、アセトン、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、アセトニトリル（ＭｅＣＮ）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）が挙げられる。薬学的に許容され得る極性プロトン性溶媒としては、限定されないが、酢酸、ギ酸、エタノール、ｎ－ブタノール、１－ブタノール、２－ブタノール、イソブタノール、ｓｅｃ－ブタノール、ｔｅｒｔ－ブタノール、ｎ－プロパノール、イソプロパノール、１，２プロパン－ジオール、メタノール、グリセロールおよび水が挙げられる。薬学的に許容され得る非極性溶媒としては、限定されないが、ペンタン、シクロペンタン、ヘキサン、シクロヘキサン、ベンゼン、トルエン、１，４－ジオキサン、クロロホルム、ｎ－メチル－ピリリドン（ｐｙｒｒｉｌｉｄｏｎｅ）（ＮＭＰ）およびジエチルエーテルが挙げられる。

このように、本発明者らは、自己免疫およびがんの治療介入のための、インターロイキン７受容体（ＩＬ７Ｒ）ＲＮＡの選択的エクソン６のスプライシングを制御するアンチセンスオリゴヌクレオチドを使用するための組成物および方法を報告してきた。このようなアンチセンスオリゴヌクレオチドは、ＩＬ７ＲＲＮＡに内蔵された特定のシグナルをブロックすることによってＩＬ７Ｒエクソン６のスプライシングを制御する。このようなシグナルは、ＩＬ７Ｒエクソン６のスプライシング結果を決定する特定の配列である。さらに、ｓＩＬ７Ｒを減少させるためにアンチセンスオリゴヌクレオチドによってブロックするＩＬ７ＲＲＮＡ内の特定の配列を表２に示しており、ＩＬ７Ｒエクソン６の含有を増大させ、したがってｓＩＬ７Ｒの分泌を低減させるこれらの配列の多様性形態、これらの配列の任意の一部分、またはこれらの配列にフランキングしている任意のヌクレオチドを含む。さらに、ｓＩＬ７Ｒを増加させるためにアンチセンスオリゴヌクレオチドによってブロックするＩＬ７ＲＲＮＡ内のさらなるシグナルを表４に示しており、ＩＬ７Ｒエクソン６の含有を低減させ、したがってｓＩＬ７Ｒの分泌を増大させるこれらの配列の多様性形態、これらの配列の任意の一部分、またはこれらの配列にフランキングしている任意のヌクレオチドを含む。排除／含有を駆動する実際のエレメント（１つまたは複数）は標的化対象の配列全体ではなく、通常、標的化対象の配列内の４～８ｎｔの配列であるため、これらの配列内のほんの数個のヌクレオチドをブロックすることがエクソン６のスプライシングに影響を及ぼし得る。例えば、ＩＬ７Ｒ－００５の標的配列内の重要な配列は最後の５ｎｔのＵＧＧＵＣであり、したがって、この５ｎｔの配列だけ、またはこの配列のうちの数ｎｔをブロックするＡＳＯで充分に所望の効果がもたらされ得よう。しかしながら、機能性配列の標的化の特異性および効率を最大限にするため、オリゴヌクレオチドは多くの場合、より長い相補的配列となるように作製される。最後に、前記標的配列に対する高い親和性、選択性および効率的なアンチセンス活性を保持したまま、塩基対合を修飾するためにアンチセンスオリゴヌクレオチド内の１個またはそれより多くの塩基を置き換えることが可能であることはよく知られている。ＳＭ－ＡＳＯの長さにもよるが、非限定的な例は、それぞれ自己免疫疾患、炎症性疾患またはがんの処置のための、１５、２０または２５個のヌクレオチドを有し、表２および４の任意の標的ＳＥＱＩＤまたはその一部分の単独または組合せのいずれか、これらの標的ＳＥＱＩＤの完全もしくは部分的または任意の生物学的に活性な並べ換え配列と７０、７５、８０、８４、８５、８７、８８、９０、９２、９３、９４、９５または９６パーセントの相補性およびまたは同一性を有し得るもの、あるいは組成物としての使用のための、ならびに自己免疫疾患および／または炎症性疾患の処置のためにＩＬ７Ｒエクソン６の含有を促進させることにより可溶性ＩＬ７Ｒの発現を低減させるための方法、あるいはがんの処置のためにＩＬ７Ｒエクソン６の含有を低減させることにより可溶性ＩＬ７Ｒの発現を促進させるための方法における使用のためのこれらに相補的な配列である。５、１０、１５、２０または２５個のヌクレオチドを有するＳＭ－ＡＳＯでは、ミスマッチは例えば１、２、３、４、５個またはそれより多くのミスマッチであり得る。

本明細書において論考した任意の実施形態は本発明の任意の方法、キット、試薬または組成物に関して実施され得、逆も同様であることが想定される。さらに、本発明の組成物は本発明の方法を成し遂げるために使用され得る。

一実施形態において、各組成物が、限定されないが個々の投薬形態または個別の投薬形態（例えば、カプセル剤または錠剤）として投与される場合、キットは、限定されないが、本発明の組成物を構成する組成物を使用説明書とともに備えている。さらなる一実施形態において、組成物は、限定されないが、投与に適した任意の様式でパッケージングされ得るが、パッケージングは、投与のための使用説明書と一緒であることが考慮される場合、限定されないが、該組成物を投与する様式を明白に示しているものとする。さらなる一実施形態では、該組成物または該組成物と他の治療薬の組合せが、限定されないが、単一の投与可能な投薬形態、例えばカプセル剤、錠剤または他の固形もしくは液状の製剤に一体化され得る。がん治療薬を個体にパッケージにて提供してもよい。パッケージは容器、例えば限定されないがビン、キャニスター、チューブまたは他の密閉容器であり得る。また、パッケージは小袋包装、例えばブリスターパックであってもよい。

一実施形態において、組成物が、限定されないが個々の投薬形態または個別の投薬形態（例えば、カプセル剤または錠剤）として投与される場合、キットは、限定されないが、本発明の組成物を構成するＡＳＯおよび／またはＳＭ－ＡＳＯの各々を使用説明書とともに備えている。さらなる一実施形態において、組成物は、投与に適した任意の様式でパッケージングされ得るが、パッケージングは、投与のための使用説明書と一緒であることが考慮される場合、限定されないが、該組成物を投与する様式を明白に示しているものとする。さらなる一実施形態では、組成物が、限定されないが、単一の投与可能な投薬形態、例えばカプセル剤、錠剤または他の固形もしくは液状の製剤に一体化され得る。組成物を個体にパッケージにて提供してもよい。パッケージは容器、例えば限定されないがビン、キャニスター、チューブまたは他の密閉容器であり得る。また、パッケージは小袋包装、例えばブリスターパックであってもよい。

一実施形態では、個体に、組成物が定期的なスケジュールで投与される処置プロトコルが提供され、この場合、該個体が該組成物を服用することを思い出すように、該個体に電子通知によって該組成物を投与することが期間スケジュールで知らされる。この実施形態の一態様において、電子通知は電子メール、テキスト、インスタントメッセージングによるもの、または別の電子通知方法によるものである。一実施形態では、電話連絡、郵便物、速達便（例えば限定されないがＦｅｄＥｘおよびＵＰＳ）または他の通知方法を受けることによって個体に該組成物を投与することが期間スケジュールで知らされる。

実施例１：標的化ＡＳＯスクリーニングにより機能性ＩＬ７ＲＡＳＯ同定した
ＩＬ７Ｒエクソン６排除（スキッピングとも称され得る）を増大させるＡＳＯを同定するため、ＧＦＰ－ＩＬ７Ｒスプライシングレポーターを構築した。このＧＦＰ－ＩＬ７Ｒスプライシングレポーターでは、ＩＬ７Ｒエクソン６排除によってＧＦＰが発現される（図１－Ａ）。機能性ＡＳＯは、ＩＬ７Ｒエクソン６内のシス作用性スプライシングエレメントをブロックするＡＳＯの効果を対応するエレメントを変異させる効果と比較することによって同定した（図１－Ｂ）。５’－スプライス部位（５’ｓｓ）に対するコンセンサス（５’Ｃｏｎｓ）またはクリッピング（５’Ｍｕｔ）変異により、それぞれエクソン６の完全な含有または排除が強制され（図１－Ｃ）、一連のＧＦＰ－ＩＬ７Ｒスプライシングレポート発現が設定される（図１－Ｄ）。本発明者らは、エクソン６内の異なるシス作用性エレメントを標的化する５つのＡＳＯ（ＩＬ７Ｒ－００１～ＩＬ７Ｒ－００５）を設計した。ＡＳＯＩＬ７Ｒ－００１は、エクソン６内の５’ｓｓをブロックするように設計し、ＡＳＯＩＬ７Ｒ－００２は、エクソン６内のエクソン内スプライシング促進配列２（ＥＳＥ２）をブロックするように設計した（図１－Ｂ）。所望の配列のモルホリノＡＳＯはＧｅｎｅＴｏｏｌｓ社で合成された。ＧＦＰ－ＩＬ７Ｒレポーターを安定的に発現するＨｅＬａ細胞株をＡＳＯでトランスフェクトした。トランスフェクションは、Ｅｎｄｏ－Ｐｏｒｔｅｒトランスフェクション試薬（ＧｅｎｅＴｏｏｌｓ，カタログ番号ＳＫＵ：ＯＴ－ＥＰ－ＰＥＧ－１）を用いて行ない、細胞をＩＬ７Ｒエクソン６のスプライシングについてアッセイし（ＲＴ－ＰＣＲ）、ＧＦＰ発現を、フローサイトメトリー（ＧｕａｖａｅａｓｙＣｙｔｅ，ＬｕｍｉｎｅｘＣｏｒｐ）を用いてアッセイした。このような方法を使用し、本発明者らは、エクソン６排除（図１－Ｅ）およびＧＦＰ発現（図１－Ｆ）を促進させる３つのＡＳＯ（ＩＬ７Ｒ－００１、ＩＬ７Ｒ－００２およびＩＬ７Ｒ－００４）を見出した。ＩＬ７Ｒ－００１およびＩＬ７Ｒ－００２は、エクソン６排除を、その対応するシス作用性エレメント（それぞれ、５’ＭｕｔおよびΔＥＳＥ２）の変異と同様の様式で促進させ、それにより各々がスプライス変調できることを確認した。本発明者らは、ＡＳＯＩＬ７Ｒ－００１とＩＬ７Ｒ－００４がエクソン６を促進させる最も大きな有効能を有することを見出した。これらの２つのＡＳＯを、がん免疫学的処置薬の一部としての使用のさらなる開発のためのリードＡＳＯとして選択した。これらの２つのＡＳＯを以下、本明細書において集合的にプロｓＩＬ７ＲＡＳＯと称する。また、本発明者らは、エクソン６排除を低減させるさらなるＡＳＯ、すなわちＩＬ７Ｒ－００５およびＩＬ７Ｒ－００６（示していない）も同定した。これらのＡＳＯは自己免疫障害を処置するための開発中である。

実施例２：フランキングイントロンを標的化するＡＳＯ－Ｗａｌｋスクリーニングにより、さらなる機能性ＡＳＯを同定した
本発明者らは、実施例１で作成したＧＦＰ－ＩＬ７Ｒレポーター細胞株を用いてＩＬ７Ｒイントロン５および６を標的化するＡＳＯのＡＳＯ－Ｗａｌｋスクリーニングを実施した。このＡＳＯｗａｌｋスクリーニングは、Ｈｕａ（Ｈｕａ，Ｙ．，Ｖｉｃｋｅｒｓ，Ｔ．Ａ．，Ｂａｋｅｒ，Ｂ．Ｆ．，Ｂｅｎｎｅｔｔ，Ｃ．Ｆ．，ａｎｄＫｒａｉｎｅｒ，Ａ．Ｒ．（２００７）．ＥｎｈａｎｃｅｍｅｎｔｏｆＳＭＮ２ｅｘｏｎ７ｉｎｃｌｕｓｉｏｎｂｙａｎｔｉｓｅｎｓｅｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓｔａｒｇｅｔｉｎｇｔｈｅｅｘｏｎ．ＰＬｏＳＢｉｏｌ５，ｅ７３）に示されているようなスピンラザの発見において行なわれたアプローチと同様である。

使用したモルフォリノＡＳＯは１５～２５ｎｔの長さであり、エクソン６に最も近く、このエクソンから５ｎｔ鎖分離れたイントロン領域内で始まるオーバーラップ配列を標的化するものであった。このＡＳＯでＧＦＰ－ＩＬ７Ｒレポーター細胞株を、Ｅｎｄｏ－Ｐｏｒｔｅｒトランスフェクション試薬（ＧｅｎｅＴｏｏｌｓ，カタログ番号ＳＫＵ：ＯＴ－ＥＰ－ＰＥＧ－１）を用いてトランスフェクトし、細胞をＧＦＰ発現について、実施例１に開示したとおりにアッセイした。本発明者らは、合計５７個のＡＳＯをスクリーニングし、そのうち３２個がイントロン５を標的化し（図２－Ａ）、２５個がイントロン６を標的化した（図２－Ｂ）。すべての実験で、ＡＳＯＩＬ７Ｒ－００１を陽性対照として使用した。ＡＳＯＩＬ７Ｒ－００１、ＩＬ７Ｒ－００２、ＩＬ７Ｒ－００３およびＩＬ７Ｒ－００４に加え、このＡＳＯ－Ｗａｌｋアプローチにより、ＧＦＰ発現を統計学的に有意な様式で増大させるさらに３３個のＡＳＯが明らかになった（図２－Ａおよび２－Ｂにおいて黄色のハイライト；表３および４）。ＩＬ７Ｒ－００１またはＩＬ７Ｒ－００４は最も強力なＡＳＯであることがわかり、さらなる開発のためのリードプロｓＩＬ７ＲＡＳＯとして選択した。

実施例３：リードＡＳＯはＩＬ７Ｒスプライシングを濃度依存的様式で変調させる
エクソン６排除がＡＳＯの濃度に対して用量依存的であり得るかどうかを調べるため、ＩＬ７Ｒ－００１またはＩＬ７Ｒ－００４について用量応答試験を実施した。この目的のため、ＩＬ７Ｒ－００１またはＩＬ７Ｒ－００４モルフォリノＡＳＯでＧＦＰ－ＩＬ７Ｒレポーター細胞株を種々の濃度にてトランスフェクトした。本発明者らは、ＡＳＯＩＬ７Ｒ－００１およびＩＬ７Ｒ－００４の濃度の上昇（０、１μＭ、５μＭおよび１０μＭ）によってＧＦＰ発現（図３－Ａ）およびエクソン６排除（図３－Ｂ）が進行的に増大すると判断した。対照的に、対照ＡＳＯ（ＡＳＯ－Ｃｔｒｌ；ＧｅｎｅＴｏｏｌｓ，カタログ番号ＳＫＵ：ＰＣＯ－ＳｔａｎｄａｒｄＣｏｎｔｒｏｌ－１００）の濃度の上昇ではそうではなかった。本発明者らは、エクソン６排除のこの濃度依存的増大が内因性ＩＬ７Ｒ遺伝子由来の転写物において再現されていることを見出した（図３－Ｃ）。

実施例４：リードＡＳＯはＨｅＬａ細胞におけるｓＩＬ７Ｒの分泌を変調させる
本発明者らは次に、ｓＩＬ７Ｒの分泌に対するＡＳＯＩＬ７Ｒ－００１およびＩＬ７Ｒ－００４の効果をアセスメントした。対照（ＡＳＯ－Ｃｔｒｌ）ならびに実験（ＩＬ７Ｒ－００１、ＩＬ７Ｒ－００４、ＩＬ７Ｒ－００５およびＩＬ７Ｒ－００６）モルフォリノＡＳＯでＨｅＬａ細胞を１０μＭにて、Ｅｎｄｏ－Ｐｏｒｔｅｒトランスフェクション試薬を用いて実施例１のようにしてトランスフェクトした。３日後、細胞をエクソン６のスプライシングおよびｓＩＬ７Ｒの分泌についてアッセイした。トランスフェクトされた細胞のＲＴ－ＰＣＲ解析により、ＡＳＯ－Ｃｔｒｌでトランスフェクトされた細胞では３１．７％のエクソン６排除がみられた。細胞をＡＳＯＩＬ７Ｒ－００１およびＩＬ７Ｒ－００４でトランスフェクトした場合、エクソン６排除はそれぞれ、９６．０％および８６．１％であった（図４－Ａ）。エクソン６排除はＡＳＯＩＬ７Ｒ－００５（１３．９％）およびＩＬ７Ｒ－００６（１７．７％）によって低減された（図４－Ａ）。ＡＳＯＩＬ７Ｒ－００１およびＩＬ７Ｒ－００４はｓＩＬ７Ｒの分泌をそれぞれ、１．８倍および１．９倍増大させ、ＡＳＯＩＬ７Ｒ－００５およびＩＬ７Ｒ－００６はｓＩＬ７Ｒの分泌をそれぞれ、２．２倍および２．４倍低減させた（図４－Ｂ）。このような結果により、ＡＳＯＩＬ７Ｒ－００１およびＩＬ７Ｒ－００４は、ＨｅＬａ細胞をトランスフェクトした場合、エクソン６排除に対する効果に正比例してｓＩＬ７Ｒの発現を調節できることが示された。

実施例５：リードＡＳＯは、ｍＩＬ７Ｒ発現に対する影響は最小限でヒト初代ＣＤ４^＋Ｔ細胞におけるｓＩＬ７Ｒの分泌を変調させる
ＩＬ７ＲがＴ細胞において優勢的に発現されることを考慮すると、この細胞型はインビボでのｓＩＬ７Ｒ産生の主要な供給源である。したがって、本発明者らは次に、ｓＩＬ７Ｒの分泌に対するＡＳＯＩＬ７Ｒ－００１およびＩＬ７Ｒ－００４の効果を、健常ヒトドナーから単離されたヒト初代ＣＤ４^＋Ｔ細胞において評価した。ＡＳＯＩＬ７Ｒ－００１およびＩＬ７Ｒ－００４で、ヒト初代ＣＤ４^＋Ｔ細胞をヌクレオフェクション（ＡｍａｘａＮｕｃｌｅｏｆｅｃｔｏｒ，Ｌｏｎｚａ）によってトランスフェクトし、３日後、エクソン６のスプライシングおよびｓＩＬ７Ｒの分泌を確認するために細胞をアッセイした。ＡＳＯ－ＣｔｒｌでヌクレオフェクションされたＴ細胞では１７．０％のＩＬ７Ｒ転写物においてエクソン６が排除されたが、ＡＳＯＩＬ７Ｒ－００１（１００．０％）およびＩＬ７Ｒ－００４（９９．９％）では完全に排除された。対照的に、ＡＳＯＩＬ７Ｒ－００５（４．７％）およびＩＬ７Ｒ－００６（１．３％）では排除は本質的に無効になった（図５－Ａ）。ＡＳＯＩＬ７Ｒ－００１およびＩＬ７Ｒ－００４によるこのエクソン６スプライシングの変調によってｓＩＬ７Ｒの分泌の変化がもたらされ、これは予測された。ＡＳＯＩＬ７Ｒ－００１およびＩＬ７Ｒ－００４はｓＩＬ７Ｒの分泌を有意に増大させ（それぞれ、４．５倍および３．８倍）、一方、ＡＳＯＩＬ７Ｒ－００５およびＩＬ７Ｒ－００６はｓＩＬ７Ｒの分泌を５倍より大きく低減させた（ほぼ検出限界またはそれより下まで低減させた）（図５－Ｂ）。ＡＳＯＩＬ７Ｒ－００１およびＩＬ７Ｒ－００４はｓＩＬ７Ｒの分泌を促進させるため、これらを以下、本明細書において集合的にプロｓＩＬ７ＲＡＳＯと称する。ＡＳＯＩＬ７Ｒ－００５およびＩＬ７Ｒ－００６はｓＩＬ７Ｒの分泌を低減させ、したがって、以下、本明細書において集合的に抗ｓＩＬ７ＲＡＳＯと称する。このような結果に基づき、これらのＩＬ７ＲＡＳＯは自己免疫（抗ｓＩＬ７ＲＡＳＯ）およびがん（プロｓＩＬ７ＲＡＳＯ）において潜在的治療有用性を有する。このような結果は、プロｓＩＬ７ＲＡＳＯであるＩＬ７Ｒ－００１およびＩＬ７Ｒ－００４がヒトＣＤ４^＋Ｔ細胞におけるｓＩＬ７Ｒ発現を有効に増大させ、それによりがん免疫療法の治療薬の有効性エンドポイントを満たすことを示す。

ヒト初代ＣＤ４^＋Ｔ細胞の表面上におけるｍＩＬ７Ｒの発現はＴ細胞の発生および生存において中心的役割を果たし（Ｆｒｙ，Ｔ．Ｊ．，ａｎｄＭａｃｋａｌｌ，Ｃ．Ｌ．（２００５）．ＴｈｅｍａｎｙｆａｃｅｓｏｆＩＬ－７：ｆｒｏｍｌｙｍｐｈｏｐｏｉｅｓｉｓｔｏｐｅｒｉｐｈｅｒａｌＴｃｅｌｌｍａｉｎｔｅｎａｎｃｅ．Ｊｏｕｒｎａｌｏｆｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ１７４，６５７１－６５７６；Ｍａｚｚｕｃｃｈｅｌｌｉ，Ｒ．，ａｎｄＤｕｒｕｍ，Ｓ．Ｋ．（２００７）．Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ－７ｒｅｃｅｐｔｏｒｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ：ｉｎｔｅｌｌｉｇｅｎｔｄｅｓｉｇｎ．ＮａｔＲｅｖＩｍｍｕｎｏｌ７，１４４－１５４）、これは、マウスでのＩＬ７Ｒノックアウトおよびヒトでの機能喪失変異において観察されるリンパ球減少症および重度の免疫不全によって証明される（Ｍａｒａｓｋｏｖｓｋｙ，Ｅ．，Ｔｅｅｐｅ，Ｍ．，Ｍｏｒｒｉｓｓｅｙ，Ｐ．Ｊ．，Ｂｒａｄｄｙ，Ｓ．，Ｍｉｌｌｅｒ，Ｒ．Ｅ．，Ｌｙｎｃｈ，Ｄ．Ｈ．，ａｎｄＰｅｓｃｈｏｎ，Ｊ．Ｊ．（１９９６）．ＩｍｐａｉｒｅｄｓｕｒｖｉｖａｌａｎｄｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｉｎＩＬ－７ｒｅｃｅｐｔｏｒ－ｄｅｆｉｃｉｅｎｔｐｅｒｉｐｈｅｒａｌＴｃｅｌｌｓ．Ｊｏｕｒｎａｌｏｆｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ１５７，５３１５－５３２３；Ｐｅｓｃｈｏｎ，Ｊ．Ｊ．，Ｍｏｒｒｉｓｓｅｙ，Ｐ．Ｊ．，Ｇｒａｂｓｔｅｉｎ，Ｋ．Ｈ．，Ｒａｍｓｄｅｌｌ，Ｆ．Ｊ．，Ｍａｒａｓｋｏｖｓｋｙ，Ｅ．，Ｇｌｉｎｉａｋ，Ｂ．Ｃ．，Ｐａｒｋ，Ｌ．Ｓ．，Ｚｉｅｇｌｅｒ，Ｓ．Ｆ．，Ｗｉｌｌｉａｍｓ，Ｄ．Ｅ．，Ｗａｒｅ，Ｃ．Ｂ．，ｅｔａｌ．（１９９４）．Ｅａｒｌｙｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｅｘｐａｎｓｉｏｎｉｓｓｅｖｅｒｅｌｙｉｍｐａｉｒｅｄｉｎｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ７ｒｅｃｅｐｔｏｒ－ｄｅｆｉｃｉｅｎｔｍｉｃｅ．ＪＥｘｐＭｅｄ１８０，１９５５－１９６０；Ｐｕｅｌ，Ａ．，Ｚｉｅｇｌｅｒ，Ｓ．Ｆ．，Ｂｕｃｋｌｅｙ，Ｒ．Ｈ．，ａｎｄＬｅｏｎａｒｄ，Ｗ．Ｊ．（１９９８）．ＤｅｆｅｃｔｉｖｅＩＬ７ＲｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｉｎＴ（－）Ｂ（＋）ＮＫ（＋）ｓｅｖｅｒｅｃｏｍｂｉｎｅｄｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ．Ｎａｔｕｒｅｇｅｎｅｔｉｃｓ２０，３９４－３９７；Ｒｏｉｆｍａｎ，Ｃ．Ｍ．，Ｚｈａｎｇ，Ｊ．，Ｃｈｉｔａｙａｔ，Ｄ．，ａｎｄＳｈａｒｆｅ，Ｎ．（２０００）．Ａｐａｒｔｉａｌｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙｏｆｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ－７ＲａｌｐｈａｉｓｓｕｆｆｉｃｉｅｎｔｔｏａｂｒｏｇａｔｅＴ－ｃｅｌｌｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｎｄｃａｕｓｅｓｅｖｅｒｅｃｏｍｂｉｎｅｄｉｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ．Ｂｌｏｏｄ９６，２８０３－２８０７）。したがって、ｍＩＬ７Ｒの発現および／または機能を大幅に阻害する治療薬は、広範な免疫抑制を引き起こし、これは患者を重篤な感染症およびがんのリスクにさらす可能性があることが推定される。これは、抗ｓＩＬ７ＲＡＳＯでは、ｍＩＬ７Ｒ発現を低減させることなくｓＩＬ７Ｒ発現が低減されると推定されるため問題とならない。実際、抗ｓＩＬ７ＲＡＳＯであるＩＬ７Ｒ－００５およびＩＬ７Ｒ－００６は初代ＣＤ４^＋Ｔ細胞におけるｍＩＬ７Ｒの細胞表面発現を低減させず（図５－Ｃ）、したがって、これらのＡＳＯでは免疫抑制が回避される。ＡＳＯＩＬ７Ｒ－００５およびＩＬ７Ｒ－００６は、免疫抑制と関連している副作用を低減させることにより多発性硬化症および自己免疫に対するより安全な処置をもたらすための優れた候補である。

プロｓＩＬ７ＲＡＳＯ、ＩＬ７Ｒ－００１およびＩＬ７Ｒ－００４で処理された初代ＣＤ４^＋Ｔ細胞におけるｍＩＬ７Ｒの細胞表面発現は、対照ＡＳＯで処理されたＴ細胞と比べて約３０％（１．４倍）低減された（図５－Ｃ）。この低減は、マウスにおいてＩＬ７Ｒのヘテロ接合性ノックアウトが許容されるため許容範囲である。

実施例６：プロｓＩＬ７ＲＡＳＯはＭＳ関連ＳＮＰｒｓ６８９７９３２によって引き起こされるエクソン６のミススプライシングを表現型模写し、がん免疫学における応用の潜在的可能性を有する
この実施例において、本発明者らは、ＡＳＯＩＬ７Ｒ－００１およびＩＬ７Ｒ－００４がｓＩＬ７Ｒ発現を増大させてＴ細胞誘導性自己反応性を駆動し、抗がん免疫を高め得るかどうかを試験した。この試験を行なうため、本発明者らは、ＳＮＰｒｓ６８９７９３２はｓＩＬ７Ｒ発現のカギとなる決定因子である、ｓＩＬ７ＲはＴ細胞活性、特に自己反応性Ｔ細胞のアクチベーターである、およびがん細胞に対する免疫反応は本質的に自己反応性であるという知識の下に着手した。したがって、ＡＳＯＩＬ７Ｒ－００１およびＩＬ７Ｒ－００４が抗がん免疫を高めるために使用され得るかどうかを試験するため、本発明者らは、ｓＩＬ７Ｒが、ｒｓ６８９７９３２のリスク‘Ｃ’対立遺伝子がホモ接合性である個体において観察されるレベルまたはそれより高いレベルまで上昇する必要があるという前提の下に着手した。これは、このような個体が自己反応性の素因を有するからである。この試験を行なうため、本発明者らは、プロｓＩＬ７ＲＡＳＯＩＬ７Ｒ－００１およびＩＬ７Ｒ－００４ならびにｒｓ６８９７９３２のリスク‘Ｃ’対立遺伝子（Ｃレポーター）または防御的‘Ｔ’対立遺伝子（Ｔレポーター）いずれかを担持する型のＧＦＰ－ＩＬ７Ｒレポーターを使用した。比較のため、本発明者らは、ＣレポーターまたはＴレポーターのいずれかを発現するＨｅＬａ細胞株をＡＳＯ－Ｃｔｒｌで安定的にトランスフェクトし；自己反応性について高い傾向（Ｃレポーター）または低い傾向（Ｔレポーター）を有する個体におけるエクソン６排除レベルを模倣する条件を作出した。ＳＮＰの効果（Ｃ対Ｔ）を示すと、ＡＳＯ－Ｃｔｒｌで処理した細胞でのＲＴ－ＰＣＲ解析により、エクソン６は、Ｔレポーター細胞株（５４．４％）よりＣレポーター細胞株において有意に高い頻度（７８．０％）で排除されることがわかった（図６－Ａ）。最後に、本発明者らは、Ｔレポーターを安定的に発現するＨｅＬａ細胞株をＩＬ７Ｒ－００１またはＩＬ７Ｒ－００４でトランスフェクトし、これらのＡＳＯがエクソン６排除を、ＡＳＯ－ＣｔｒｌでトランスフェクトしたＣレポーター細胞株で観察されたものと同様のレベルまで促進させ得るかどうかを調べた。結果は、プロｓＩＬ７ＲＡＳＯＩＬ７Ｒ－００１およびＩＬ７Ｒ－００４がＴレポーター細胞株においてエクソン６排除をＣレポーター細胞株で観察されたものより高いレベルまで促進させ、それぞれ９１．５％および８８．３％の排除が達成されたことを示す（図６－Ａ）。レポーターによるＧＦＰ発現はｓＩＬ７Ｒの代理であるため、本発明者らはまた、ＧＦＰ発現に対するＡＳＯの効果も調べた。ＩＬ７Ｒ－００１およびＩＬ７Ｒ－００４で処理されたＴレポーター細胞におけるＧＦＰ発現はＡＳＯ－Ｃｔｒｌで処理されたＣレポーター細胞の場合より有意に高かった（約１．４倍）（図６－Ｂ）。このような結果により、プロｓＩＬ７ＲＡＳＯＩＬ７Ｒ－００１およびＩＬ７Ｒ－００４はＩＬ７Ｒエクソン６排除を、自己反応性の高い素因を有する個体で観察されるものより上のレベルまで促進させ得ることがわかった。プロｓＩＬ７ＲＡＳＯＩＬ７Ｒ－００１およびＩＬ７Ｒ－００４は抗がん免疫を追加刺激するための良好な候補となり得ることが強く主張される。

実施例７：標的細胞へのエクスビボ送達およびＡＳＯＩＬ７Ｒ－００１の開発
本発明者らは次に、プロｓＩＬ７ＲＡＳＯがヒト初代Ｔ細胞におけるｓＩＬ７Ｒ発現をエクスビボで、トランスフェクション方法を必要とすることなく修飾する能力を調べた。これは、トランスフェクションなしでのＴ細胞へのＡＳＯの送達が困難な作業であるため重要である。この目的のため、本発明者らは、いろいろな化学修飾によって修飾しておいた、またはヒト初代Ｔ細胞における送達および活性をエクスビボで改善し得る部分にコンジュゲートさせておいたＡＳＯＩＬ７Ｒ－００１をスクリーニングした。この目的のため、修飾型もしくはコンジュゲート型のＡＳＯ、ＡＳＯ－ＣｔｒｌまたはＩＬ７Ｒ－００１を培地に添加し、ＡＳＯがトランスフェクション方法の使用なしでＴ細胞内に進入（細胞内に補助なしで進入）できるかどうかを調べた。この研究により、本発明者らは、モルフォリノＡＳＯＩＬ７Ｒ－００１にコンジュゲートさせた場合はヒト初代Ｔ細胞におけるＩＬ７Ｒエクソン６排除を大きく促進させることができるが、コンジュゲート型ＡＳＯ－Ｃｔｒｌはそうではない送達部分を同定した（データ表示なし）。したがって、コンジュゲート型ＡＳＯＩＬ７Ｒ－００１は、トランスフェクションを必要とすることなくエクスビボでＴ細胞内に効率的に進入することが明らかになった。したがって、本発明者らは、天然の細胞機構によってＴ細胞に進入し、トランスフェクションを必要としないＡＳＯを得ることができたことを示し、これを裸送達と称する。

本発明者らは、コンジュゲートされた送達部分を有するＡＳＯＩＬ７Ｒ－００１を、エクスビボでのヒト初代ＣＤ４^＋Ｔ細胞内への裸送達によるさらなる機能試験における使用のために選択した。本発明者らが実施した最初の試験は、ＡＳＯＩＬ７Ｒ－００１の最小有効濃度（ＭＥＣ）を調べるための用量応答試験であった。この試験をヒト初代ＣＤ４^＋Ｔ細胞における裸送達によって実施した後、エクソン６のスプライシングを変調するためのこの細胞の有効性をアセスメントした。本発明者らはまた、潜在的細胞毒性も調べた。本発明者らは、細胞に対して有害な毒性効果を引き起こすことなく（図７－Ｂ）エクソン６排除を５０％まで増大させることができる濃度がどこであるかを調べようとしていた（図７－Ａ、黒矢印）。本発明者らは、ＩＬ７Ｒ－００１のこの最小有効濃度（ＭＥＣ）が０．５μＭであることを見出した。本発明者らは次に、ＭＥＣのＩＬ７Ｒ－００１がエクソン６排除を有効に増大させ（図７－Ｃ）、ｓＩＬ７Ｒの分泌を２．５倍増大させ（図７－Ｄ）、ｍＩＬ７Ｒの細胞表面発現の低減は最小限である（データ表示なし）ことを確認した。このような結果は、エクソン６排除およびｓＩＬ７Ｒ発現を約３倍に促進させることによって多発性硬化症における自己反応性を駆動するＩＬ７Ｒにおける多発性硬化症のリスクＳＮＰｒｓ６８９７９３２の効果を模倣している。

次に、本発明者らは、Ｔ細胞機能に対するＡＳＯＩＬ７Ｒ－００１によるｓＩＬ７Ｒレベルの上昇の効果を調べた。ｓＩＬ７Ｒは、ＩＬ７の利用能および活性を増強することによって自己反応性を駆動することが示されているため（Ｌｕｎｄｓｔｒｏｍ，Ｗ．，Ｈｉｇｈｆｉｌｌ，Ｓ．，Ｗａｌｓｈ，Ｓ．Ｔ．，Ｂｅｑ，Ｓ．，Ｍｏｒｓｅ，Ｅ．，Ｋｏｃｋｕｍ，Ｉ．，Ａｌｆｒｅｄｓｓｏｎ，Ｌ．，Ｏｌｓｓｏｎ，Ｔ．，Ｈｉｌｌｅｒｔ，Ｊ．，ａｎｄＭａｃｋａｌｌ，Ｃ．Ｌ．（２０１３）．ＳｏｌｕｂｌｅＩＬ７ＲａｌｐｈａｐｏｔｅｎｔｉａｔｅｓＩＬ－７ｂｉｏａｃｔｉｖｉｔｙａｎｄｐｒｏｍｏｔｅｓａｕｔｏｉｍｍｕｎｉｔｙ．ＰｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓｏｆｔｈｅＮａｔｉｏｎａｌＡｃａｄｅｍｙｏｆＳｃｉｅｎｃｅｓｏｆｔｈｅＵｎｉｔｅｄＳｔａｔｅｓｏｆＡｍｅｒｉｃａ１１０，Ｅ１７６１－１７７０）、この試験では、Ｔ細胞におけるＩＬ７シグナル伝達に対するＩＬ７Ｒ－００１機能の効果を調べた。対照ＡＳＯ（ＡＳＯ－Ｃｔｒｌ）と比較し、本発明者らは、ＡＳＯＩＬ７Ｒ－００１の投与によって引き起こされるｓＩＬ７Ｒの分泌の増大によりＩＬ７の利用能の向上がもたらされ（図７－Ｅ）、ＩＬ７誘導性遺伝子ＢＣＬ２およびＣＩＳＨの発現増大がもたらされる（図７－Ｆ）ことを見出した。このような結果により、ＡＳＯＩＬ７Ｒ－００１はｓＩＬ７Ｒを増やすことによってＩＬ７シグナル伝達を増強することが示された。

実施例８：Ｔ細胞機能に対するＩＬ７Ｒ－００１の効果
本発明者らは、ＡＳＯＩＬ７Ｒ－００１によるＩＬ７の増強の持続期間を調べた。これは、ＩＬ７処理後５日間のＢＣＬ２発現を測定することによって行なった。結果により、ＡＳＯＩＬ７Ｒ－００１によって促進されたＢＣＬ２発現は処理後５日間維持されることが示された（図８－Ａ）。これは、ＡＳＯＩＬ７Ｒ－００１によるＩＬ７の持続性の増強を示す。本発明者らはさらに、ＡＳＯＩＬ７Ｒ－００１処理によって誘導された５日間にわたる高値レベルのｓＩＬ７Ｒ（図８－Ｂ）により、エクスビボでのヒト初代ＣＤ４^＋Ｔ細胞の生存の向上がもたらされる（図８－Ｃ）ことを示した。このような結果は、がんの処置のためにＴ細胞活性を向上させるＡＳＯＩＬ７Ｒ－００１の潜在能の裏付けとなる。

最後に、本明細書の態様を、具体的な実施形態に言及することによって強調したが、当業者には、開示したこのような実施形態は本明細書に開示の主題の原理の実例を示したにすぎないことが容易に認識されることは理解されよう。したがって、本開示の主題は、本明細書に記載された特定の方法論、プロトコルおよび／または試薬などになんら限定されないことを理解されたい。そのため、本開示の主題に対する種々の修正もしくは変更または本開示の主題の構成の代替は、本明細書の趣旨から逸脱することなく本明細書における教示に従って行なわれ得る。最後に、本明細書における使用している専門用語は、特定の実施形態を説明する目的のためにすぎず、特許請求の範囲によってのみ規定される本発明の範囲を制限することを意図するものではない。したがって、本発明は、図示および記載のとおりのことに厳密に限定されるものでない。

本発明を実施するための本発明者らが知っているベストモードを含む本発明の特定の実施形態を本明細書において記載している。もちろん、記載のこのような実施形態に対する変形例は、前述の説明を読むと当業者には自明であろう。本発明者は、当業者が適宜、かかる変形例を使用することを予想しており、本発明者らは、本発明が本明細書に具体的に記載されたものと別の様式で実施されることを意図している。したがって、本発明は、本明細書に添付の特許請求の範囲に記載された主題の、適用可能な法律で許容されるあらゆる修正例および均等物を含む。さらに、本明細書において特に記載のない限り、または本文と明白に矛盾しない限り、考えられ得るあらゆる変形例における上記の実施形態の任意の組合せが本発明に包含される。

本発明の択一的な実施形態、要素または工程の群分けは限定と解釈されるべきでない。各群の構成員が個々に、または本明細書に開示の他の群の構成員との任意の組合せで言及され、請求項に記載されている場合もあり得る。群の１つまたはそれより多くの構成員が便宜および／または特許性の理由で群に包含され得るか、または群から削除され得ることが予想される。任意のかかる包含または削除が起こる場合、本明細書は、修正された群を含み、したがって、添付の特許請求の範囲で使用されているすべてのマーカッシュの群の文章化した記述がなされているとみなす。

特に記載のない限り、本明細書および特許請求の範囲で使用している特徴、項目、量、パラメータ、特性、期間などを示すすべての数は、すべての場合で、用語「約」によって修飾されていると理解されたい。本明細書において使用する場合、用語「約」は、これで修飾された特徴、項目、量、パラメータ、特性または期間が、記載の特徴、項目、量、パラメータ、パラメータ、特性または期間の値の上下１０パーセントのプラスマイナスの範囲を包含していることを意味する。したがって、そうでないと記載していない限り、本明細書および添付の特許請求の範囲に示された数値パラメータは、変動し得る近似値である。最低限でも、特許請求の範囲の範囲に対する均等論の適用を制限する試みとしてでなく、各数値表示は少なくとも、報告された有効数字の数に鑑みて、通常の丸め手法を適用することによって解釈されたい。本発明の広い範囲を示す数値範囲および値が近似値であるとはいえ、具体例に示された該数値範囲および値は、可能な限り正確に報告している。しかしながら、数値範囲または値はいずれも、それぞれの試験測定値でみられる標準偏差によって必然的に生じる一定の誤差を内在的に含む。本明細書における値の数値範囲の記載は、その範囲内に含まれる個々の各数値を個々に記載する省略方法であることを意図しているにすぎない。本明細書において特に記載のない限り、数値範囲の個々の各値は、あたかも本明細書に個々に記載されているかのごとく本明細書に組み込まれる。

本明細書において挙げた刊行物および特許出願はすべて、本発明が関係する当業者の技術水準を示すものである。刊行物および特許出願はすべて、引用によりあたかも個々の各刊行物、特許または特許出願が参照により組み入れられて具体的に個々に示されているのと同程度に本明細書に組み込まれる。

語「ａ」または「ａｎ」の使用は、特許請求の範囲および／または本明細書における用語「ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ（～を含む）」との関連において使用する場合、「ｏｎｅ（１つ）」を意味し得るが、「ｏｎｅｏｒｍｏｒｅ（１つまたはそれより多く）」、「ａｔｌｅａｓｔｏｎｅ（少なくとも１つ）」および「ｏｎｅｏｒｍｏｒｅｔｈａｎｏｎｅ（１つまたは１つより多く）」の意味とも一致する。特許請求の範囲における用語「ｏｒ（または／もしくは）」の使用は、選択肢のみを示すか、または選択肢が相互に排他的であることを明示していない限り、「ａｎｄ／ｏｒ（および／または）」を意味するために使用しているが、本開示は、選択肢のみおよび「ａｎｄ／ｏｒ」を示す定義をサポートしている。本出願全体を通して、用語「約”は、値が、デバイスの誤差、値を測定するために使用される方法または試験される被験体間に存在する多様性の内在的変動性を含むことを示すために使用される。

本明細書および請求項（１つまたは複数）において使用する場合、語「ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ（～を含む）」（およびｃｏｍｒｉｓｉｎｇの任意の形態、例えば「ｃｏｍｐｒｉｓｅ」および「ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ」）、「ｈａｖｉｎｇ（～を有する）」（およびｈａｖｉｎｇの任意の形態、例えば「ｈａｖｅ」および「ｈａｓ」）、「ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ（～を含む）」（およびｉｎｃｌｕｄｉｎｇの任意の形態、例えば「ｉｎｃｌｕｄｅｓ」および「ｉｎｃｌｕｄｅ」）または「ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ（～を含む）」（およびｃｏｎｔａｉｎｉｎｇの任意の形態、例えば「ｃｏｎｔａｉｎｓ」および「ｃｏｎｔａｉｎ」）は包含的またはオープンエンドであり、記載されていないさらなる要素または方法工程を排除しない。本明細書において提供する任意の組成物および方法の実施形態において、「ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ」は「ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙｏｆ（本質的に～からなる）「または「ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇｏｆ（～からなる）」で置き換えられ得る。本明細書において使用する場合、語句「ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙｏｆ」は、明記された完全体（ｉｎｔｅｇｅｒ）（１つもしくは複数）または工程ならびに請求項に記載の発明の特徴または機能に実質的に影響しないものが要件である。本明細書において使用する場合、用語「ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ」は、記載の完全体（例えば特長、要素、特徴、特性、方法／プロセス工程もしくは限定）または完全体の群（例えば、特長（１つもしくは複数）、要素（１つもしくは複数）、特徴（１つもしくは複数）、特性（１つもしくは複数）、方法／プロセス工程または限定（１つもしくは複数））の存在のみを示すために使用される。

用語「または（もしくは）その組合せ」は、本明細書において使用する場合、この用語の前に記載の項目のあらゆる並べ換えおよび組合せを示す。例えば、「Ａ、Ｂ、Ｃまたはその組合せ」は：Ａ、Ｂ、Ｃ、ＡＢ、ＡＣ、ＢＣまたはＡＢＣのうちの少なくとも１つ、特定の状況において順序が重要であればＢＡ、ＣＡ、ＣＢ、ＣＢＡ、ＢＣＡ、ＡＣＢ、ＢＡＣまたはＣＡＢも包含していることを意図する。この例を続けると、１つまたはそれより多くの項目または表現の繰り返し、例えばＢＢ、ＡＡＡ、ＡＢ、ＢＢＣ、ＡＡＡＢＣＣＣＣ、ＣＢＢＡＡＡ、ＣＡＢＡＢＢなどを含む組合せも明白に含まれる。当業者には、本文からそうでないことが明白でない限り、典型的には、任意の組合せの項目または表現の数に制限はないことが理解されよう。

本明細書において使用する場合、「限定されないが」、「約」、「実質的な」または「実質的に」などの近似の語は、これで修飾されている場合、必ずしも絶対または完全でないが当業者がその状態が存在の指定を正当化するのに充分に近いとみなされ得ると理解される状態を示す。記載内容が変動し得る程度は、どれだけ大きく変化が起こり得、それでもなお、当業者が修飾された特長を未修飾の特長の必要とされる特徴および能力をなお有すると認識されるかに依存する。一般に、だが先の論考を受けるが、近似の語、例えば「約」によって修飾されている本明細書における数値は、記載の値から少なくとも±１、２、３、４、５、６、７、１０、１２または１５％変動してもよい。

本明細書において開示し、請求項に記載した組成物および／または方法はすべて、必要以上に実験を行なうことなく本開示に鑑みて作製および実施することができる。本発明の組成物および方法を好ましい実施形態に関して説明したが、当業者には、本発明の思想、趣旨および範囲から逸脱することなく、本明細書に記載の組成物および／または方法に対して、ならびに本明細書に記載の方法の工程または工程順において変形が適用され得ることは自明であろう。当業者に自明のかかる同様の置き換えおよび修飾はすべて、添付の特許請求の範囲によって規定される本発明の趣旨、範囲および思想に含まれるとみなす。

特許庁および本明細書に対して発行される任意の特許の任意の読み手が本明細書に添付の特許請求の範囲を解釈するのを手助けするため、語「ｍｅａｎｓｆｏｒ（～のための手段）」または「ｓｔｅｐｆｏｒ（～のための肯定）」が具体的な請求項において明白に使用されていない限り、本出願日に存在するため、出願人は、添付の特許請求の範囲がなんら３５Ｕ．Ｓ．Ｃ．§ １１２のパラグラフ６またはＡＩＡ３５Ｕ．Ｓ．Ｃ．§ １１２パラグラフ（ｆ）あるいは同等のものを求めることを意図していないことに留意することを望む。

各請求項について、各従属項は、先の請求項に請求項の用語または要素の適正な先行の根拠が示されていない限り、独立項および１つ１つの請求項の先の各従属項の両方に従属し得る。

Claims

がんの処置を、それを必要とする被験体において行なう方法であって：エクソン６のスプライシングに影響を及ぼすインターロイキン－７受容体（ＩＬ７Ｒ）プレｍＲＮＡの配列に特異的に結合するオリゴヌクレオチドを含む組成物を有効量で投与することを含み、前記オリゴヌクレオチドはＩＬ７ＲプレｍＲＮＡのエクソン６排除を増大させ、ＩＬ７Ｒの可溶性アイソフォーム（ｓＩＬ７Ｒ）の発現を増大させるものである方法。
前記オリゴヌクレオチドがアンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳＯ）またはスプライス変調アンチセンスオリゴヌクレオチド（ＳＭ－ＡＳＯ）である、請求項１に記載の方法。
前記オリゴヌクレオチドが、表３の配列番号１４もしくは配列番号１７または表４の標的の配列番号１４もしくは配列番号１７と少なくとも７０、７５、８０、８４、８５、８８、９２、９３、９４、９５もしくは９６％の相補性を有するオリゴヌクレオチドから選択される、請求項１に記載の方法。
前記組成物中のオリゴヌクレオチドが、エクソン内スプライシング促進配列（ＥＳＥ）および／またはイントロン内スプライシング促進配列（ＩＳＥ）からなる群のうちの少なくとも１つにおけるＩＬ７ＲプレｍＲＮＡ内の配列に特異的に結合し、それによりエクソン６排除を増大させ、ｓＩＬ７Ｒの発現を増大させる、請求項１に記載の方法。
前記組成物中のオリゴヌクレオチドが、ＩＬ７ＲプレｍＲＮＡ上のイントロン－エクソンスプライス部位、分岐点配列および／またはポリピリミジントラクトの配列に特異的に結合し、それによりエクソン６排除を増大させ、ｓＩＬ７Ｒの発現を増大させる、請求項１に記載の方法。
前記オリゴヌクレオチド内の少なくとも１個またはそれより多くのヌクレオチドが：１つまたはそれより多くのホスホロチオエート、ホスホロジチオエート、ホスホジエステル、メチルホスホネート、ホスホロアミデート、メチルホスホネート、ホスホトリエステル、ホスホロアリデート、モルフォリノ、アミデートカルバメート、カルボキシメチル、アセトアミデート、ポリアミド、スルホネート、スルホンアミド、スルファメート、ホルムアセタール、チオホルムアセタールおよび／またはアルキルシリル置換、一部または完全修飾骨格、例えば完全修飾糖リン酸骨格、ロック核酸骨格、ペプチド性骨格、ホスホトリエステル骨格、ホスホロアミデート骨格、シロキサン骨格、カルボキシメチルエステル骨格、アセトアミデート骨格、カルバメート骨格、チオエーテル骨格、架橋メチレンホスホネート骨格、ホスホロチオエート骨格、メチルホスホネート骨格、アルキルホスホネート骨格、リン酸エステル骨格、アルキルホスホノチオエート骨格、ホスホロジチオエート骨格、カーボネート骨格、リン酸トリエステル骨格、カルボキシメチルエステル骨格、メチルホスホロチオエート骨格、ホスホロジチオエート骨格、ｐ－エトキシ結合を有する骨格、糖修飾、例えば２’－Ｏ－メチル（２’－Ｏ－メチルヌクレオチド）、２’－Ｏ－メチルオキシエトキシ（２’－Ｏ－ＭＯＥ）、２’－Ｏ－アルキル修飾糖部分または二環性糖部分、ヌクレオチド模倣物、ペプチド核酸（ＰＮＡ）、モルフォリノ核酸、シクロヘキセニル核酸、アンヒドロヘキシトール核酸、グリコール核酸、トレオース核酸およびロック核酸（ＬＮＡ）ならびに前述のもののいずれかの２つ以上の組合せから選択される（１）リボースもしくは他の糖単位、（２）塩基または（３）骨格の修飾または置換を含む天然に存在しない修飾を含む。別の態様では、前記オリゴヌクレオチド内の少なくとも１個またはそれより多くのヌクレオチドが、ヌクレオチド塩基に対する天然に存在しない修飾を含む、請求項１に記載の方法。
前記オリゴヌクレオチドが、表３のＳＭ－ＡＳＯのＳＥＱＩＤ（ＳＭ－ＡＳＯの配列番号：１４～５０）のうちの任意のものもしくはその一部分の単独もしくは組合せのいずれか、またはＩＬ７ＲＲＮＡ内の標的の完全配列と少なくとも７０、７５、８０、８４、８５、８８、９２、９３、９４、９５もしくは９６％の相補性を有するオリゴヌクレオチドから選択される、請求項１に記載の方法。
前記オリゴヌクレオチドが、表４の標的ＳＥＱＩＤ（標的配列番号：１４～５０）のうちの任意のものもしくはその一部分の単独もしくは組合せのいずれか、またはＩＬ７ＲＲＮＡ内の標的の完全配列と少なくとも７０、７５、８０、８４、８５、８８、９２、９３、９４、９５もしくは９６％の相補性を有するオリゴヌクレオチドを標的化する、請求項１に記載の方法。
前記組成物が薬学的に許容され得る賦形剤、塩または担体をさらに含む、請求項１に記載の方法。
前記がんが従来の免疫療法に対して低奏効を示すもの（非限定的な例として、胃がん、頭頸部扁平上皮癌、肝細胞癌、卵巣がん、小細胞肺がん、トリプルネガティブ乳がん、尿路上皮がん）である、請求項１に記載の方法。
ＳＭ－ＡＳＯとがんの処置に有効な１種類またはそれより多くの活性薬剤、例えば限定されないが、免疫チェックポイント阻害剤、治療用抗体、従来の化学療法または治療用放射線との併用療法を提供することをさらに含む、請求項１に記載の方法。
アンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳＯ）またはスプライス変調アンチセンスオリゴヌクレオチド（ＳＭ－ＡＳＯ）であり、エクソン６のスプライシングに影響を及ぼすインターロイキン７受容体（ＩＬ７Ｒ）のプレｍＲＮＡ内の配列に特異的に結合するオリゴヌクレオチドを含む組成物であって、前記オリゴヌクレオチドはＩＬ７ＲプレｍＲＮＡのエクソン６排除を増大させ、ＩＬ７Ｒの可溶性アイソフォーム（ｓＩＬ７Ｒ）の発現を増大させるものである、組成物。
前記オリゴヌクレオチドがアンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳＯ）またはスプライス変調アンチセンスオリゴヌクレオチド（ＳＭ－ＡＳＯ）である、請求項１２に記載の組成物。
前記オリゴヌクレオチドが、表３の配列番号１４もしくは配列番号１７または表４の配列番号１４もしくは配列番号１７と少なくとも７０、７５、８０、８４、８５、８８、９２、９３、９４、９５もしくは９６％の相補性を有する配列から選択される、請求項１２に記載の方法。
がんを処置するための投与に適合されている、請求項１２に記載の組成物。
薬学的に許容され得る賦形剤、塩または担体をさらに含む、請求項１２に記載の組成物。
前記障害が、ある型のがんである、請求項１２に記載の組成物。
がんの処置に有効な１種類またはそれより多くの活性薬剤、例えば限定されないが、免疫チェックポイント阻害剤（例えば、ニボルマブ）、治療用抗体（例えば、ハーセプチン）、従来の化学療法（例えば、タキソール）または治療用放射線とのＳＭ－ＡＳＯの併用療法をさらに含む、請求項１２に記載の組成物。
（１）リボースもしくは他の糖単位、（２）塩基または（３）骨格の修飾を含むように修飾されている、請求項１２または１３に記載の組成物。
１つまたはそれより多くのホスホロチオエート、ホスホロジチオエート、ホスホジエステル、メチルホスホネート、ホスホロアミデート、メチルホスホネート、ホスホトリエステル、ホスホロアリデート、モルフォリノ、アミデートカルバメート、カルボキシメチル、アセトアミデート、ポリアミド、スルホネート、スルホンアミド、スルファメート、ホルムアセタール、チオホルムアセタール、アルキルシリル置換、ペプチド、細胞膜透過性ペプチド、抗体、ナノボディ、ラクダ部、抗体可変領域、小分子および／またはオリゴヌクレオチドの安定性、分布もしくは特定の組織への送達を促進させるか、あるいは促進させ得るリガンド（例えば、タンパク質、脂質、糖鎖）を含むリン酸基修飾を有するヌクレオチドを有するように修飾されている、請求項１２または１３に記載の組成物。
糖修飾、例えば２’－Ｏ－メチル（２’－Ｏ－メチルヌクレオチド）および２’－Ｏ－メチルオキシエトキシ（２’－Ｏ－ＭＯＥ）、２’－Ｏ－アルキル修飾糖部分または二環性糖部分ならびにヌクレオチド模倣物、例えば限定されないが、ペプチド核酸（ＰＮＡ）、モルフォリノ核酸、シクロヘキセニル核酸、アンヒドロヘキシトール核酸、グリコール核酸、トレオース核酸およびロック核酸（ＬＮＡ）、ならびに一部または完全修飾骨格、例えば完全修飾糖リン酸骨格、ロック核酸骨格、ペプチド性骨格、ホスホトリエステル骨格、ホスホロアミデート骨格、シロキサン骨格、カルボキシメチルエステル骨格、アセトアミデート骨格、カルバメート骨格、チオエーテル骨格、架橋メチレンホスホネート骨格、ホスホロチオエート骨格、メチルホスホネート骨格、アルキルホスホネート骨格、リン酸エステル骨格、アルキルホスホノチオエート骨格、ホスホロジチオエート骨格、カーボネート骨格、リン酸トリエステル骨格、カルボキシメチルエステル骨格、メチルホスホロチオエート骨格、ホスホロジチオエート骨格、ｐ－エトキシ結合を有する骨格ならびに前述のもののいずれかの２つ以上の組合せによって修飾されている、請求項１２または１３に記載の組成物。
腫瘍のサイズが例えば少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％縮小する、請求項１２に記載の組成物。
腫瘍のサイズが例えば約５％～約１００％、約１０％～約１００％、約２０％～約１００％、約３０％～約１００％、約４０％～約１００％、約５０％～約１００％、約６０％～約１００％、約７０％～約１００％、約８０％～約１００％、約１０％～約９０％、約２０％～約９０％、約３０％～約９０％、約４０％～約９０％、約５０％～約９０％、約６０％～約９０％、約７０％～約９０％、約１０％～約８０％、約２０％～約８０％、約３０％～約８０％、約４０％～約８０％、約５０％～約８０％または約６０％～約８０％、約１０％～約７０％、約２０％～約７０％、約３０％～約７０％、約４０％～約７０％または約５０％～約７０％縮小する、請求項１２に記載の組成物。
個体に投与される前記組成物の量が少なくとも５ｎｇ、少なくとも１０ｎｇ、少なくとも１５ｎｇ、少なくとも２０ｎｇ、少なくとも２５ｎｇ、少なくとも３０ｎｇ、少なくとも３５ｎｇ、少なくとも４０ｎｇ、少なくとも４５ｎｇ、少なくとも５０ｎｇ、少なくとも５５ｎｇ、少なくとも６０ｎｇ、少なくとも６５ｎｇ、少なくとも７０ｎｇ、少なくとも７５ｎｇ、少なくとも８０ｎｇ、少なくとも８５ｎｇ、少なくとも９０ｎｇ、少なくとも９５ｎｇ、または少なくとも１００ｎｇ、または少なくとも２００ｎｇ、または少なくとも３００ｎｇ、または少なくとも４００ｎｇ、または少なくとも５００ｎｇ、または少なくとも６００ｎｇ、または少なくとも７００ｎｇ、または少なくとも８００ｎｇ、または少なくとも９００ｎｇ、少なくとも５ｍｇ、少なくとも１０ｍｇ、少なくとも１５ｍｇ、少なくとも２０ｍｇ、少なくとも２５ｍｇ、少なくとも３０ｍｇ、少なくとも３５ｍｇ、少なくとも４０ｍｇ、少なくとも４５ｍｇ、少なくとも５０ｍｇ、少なくとも５５ｍｇ、少なくとも６０ｍｇ、少なくとも６５ｍｇ、少なくとも７０ｍｇ、少なくとも７５ｍｇ、少なくとも８０ｍｇ、少なくとも８５ｍｇ、少なくとも９０ｍｇ、少なくとも９５ｍｇまたは少なくとも１００ｍｇの組成物である。この実施形態の他の態様において、本明細書に開示のＡＳＯまたはＳＭ－ＡＳＯは例えば少なくとも５ｎｇ、少なくとも１０ｎｇ、少なくとも１５ｎｇ、少なくとも２０ｎｇ、少なくとも２５ｎｇ、少なくとも３０ｎｇ、少なくとも３５ｎｇ、少なくとも４０ｎｇ、少なくとも４５ｎｇ、少なくとも５０ｎｇ、少なくとも５５ｎｇ、少なくとも６０ｎｇ、少なくとも６５ｎｇ、少なくとも７０ｎｇ、少なくとも７５ｎｇ、少なくとも８０ｎｇ、少なくとも８５ｎｇ、少なくとも９０ｎｇ、少なくとも９５ｎｇ、または少なくとも１００ｎｇ、または少なくとも２００ｎｇ、または少なくとも３００ｎｇ、または少なくとも４００ｎｇ、または少なくとも５００ｎｇ、または少なくとも６００ｎｇ、または少なくとも７００ｎｇ、または少なくとも８００ｎｇ、または少なくとも９００ｎｇ、少なくとも５ｍｇ、少なくとも１０ｍｇ、少なくとも２０ｍｇ、少なくとも２５ｍｇ、少なくとも５０ｍｇ、少なくとも７５ｍｇ、少なくとも１００ｍｇ、少なくとも２００ｍｇ、少なくとも３００ｍｇ、少なくとも４００ｍｇ、少なくとも５００ｍｇ、少なくとも６００ｍｇ、少なくとも７００ｍｇ、少なくとも８００ｍｇ、少なくとも９００ｍｇ、少なくとも１，０００ｍｇ、少なくとも１，１００ｍｇ、少なくとも１，２００ｍｇ、少なくとも１，３００ｍｇ、少なくとも１，４００ｍｇまたは少なくとも１，５００ｍｇの前記組成物であり得る、請求項１２に記載の組成物。
個体に投与される前記組成物の量が約５ｎｇ～約１００ｎｇ、約１０ｎｇ～約１００ｎｇ、約５０ｎｇ～約１５０ｎｇ、約１００ｎｇ～約２５０ｎｇ、約１５０ｎｇ～約３５０ｎｇ、約２５０ｎｇ～約５００ｎｇ、約３５０ｎｇ～約６００ｎｇ、約５００ｎｇ～約７５０ｎｇ、約６００ｎｇ～約９００ｎｇ、約７５０ｎｇ～約１，０００ｎｇ、約８５０ｎｇ～約１，２００ｎｇ、ｏｒ約１，０００ｎｇ～約１，５００ｎｇ、約５ｍｇ～約１００ｍｇ、約１０ｍｇ～約１００ｍｇ、約５０ｍｇ～約１５０ｍｇ、約１００ｍｇ～約２５０ｍｇ、約１５０ｍｇ～約３５０ｍｇ、約２５０ｍｇ～約５００ｍｇ、約３５０ｍｇ～約６００ｍｇ、約５００ｍｇ～約７５０ｍｇ、約６００ｍｇ～約９００ｍｇ、約７５０ｍｇ～約１，０００ｍｇ、約８５０ｍｇ～約１，２００ｍｇまたは約１，０００ｍｇ～約１，５００ｍｇである、請求項１２に記載の組成物。
ＳＭ－ＡＳＯが約１０ｎｇ～約２５０ｎｇ、約１０ｎｇ～約５００ｎｇ、約１０ｎｇ～約７５０ｎｇ、約１０ｎｇ～約１，０００ｎｇ、約１０ｎｇ～約１，５００ｎｇ、約５０ｎｇ～約２５０ｎｇ、約５０ｎｇ～約５００ｎｇ、約５０ｎｇ～約７５０ｎｇ、約５０ｎｇ～約１，０００ｎｇ、約５０ｎｇ～約１，５００ｎｇ、約１００ｎｇ～約２５０ｎｇ、約１００ｎｇ～約５００ｎｇ、約１００ｎｇ～約７５０ｎｇ、約１００ｎｇ～約１，０００ｎｇ、約１００ｎｇ～約１，５００ｎｇ、約２００ｎｇ～約５００ｎｇ、約２００ｎｇ～約７５０ｎｇ、約２００ｎｇ～約１，０００ｎｇ、約２００ｎｇ～約１，５００ｎｇ、約５ｎｇ～約１，５００ｎｇ、約５ｎｇ～約１，０００ｎｇ、ｏｒ約５ｎｇ～約２５０ｎｇ、１０ｍｇ～約２５０ｍｇ、約１０ｍｇ～約５００ｍｇ、約１０ｍｇ～約７５０ｍｇ、約１０ｍｇ～約１，０００ｍｇ、約１０ｍｇ～約１，５００ｍｇ、約５０ｍｇ～約２５０ｍｇ、約５０ｍｇ～約５００ｍｇ、約５０ｍｇ～約７５０ｍｇ、約５０ｍｇ～約１，０００ｍｇ、約５０ｍｇ～約１，５００ｍｇ、約１００ｍｇ～約２５０ｍｇ、約１００ｍｇ～約５００ｍｇ、約１００ｍｇ～約７５０ｍｇ、約１００ｍｇ～約１，０００ｍｇ、約１００ｍｇ～約１，５００ｍｇ、約２００ｍｇ～約５００ｍｇ、約２００ｍｇ～約７５０ｍｇ、約２００ｍｇ～約１，０００ｍｇ、約２００ｍｇ～約１，５００ｍｇ、約５ｍｇ～約１，５００ｍｇ、約５ｍｇ～約１，０００ｍｇまたは約５ｍｇ～約２５０ｍｇの範囲である、請求項１２に記載の組成物。
ＳＭ－ＡＳＯを溶解させるのに充分な量の溶媒、エマルジョンおよび他の希釈剤を含む、請求項１２に記載の組成物。
ＳＭ－ＡＳＯが少なくとも０．００００１ｍｇ／ｍＬ、少なくとも０．０００１ｍｇ／ｍＬ、少なくとも０．００１ｍｇ／ｍＬ、少なくとも０．０１ｍｇ／ｍＬ、少なくとも０．１ｍｇ／ｍＬ、少なくとも１ｍｇ／ｍＬ、少なくとも１０ｍｇ／ｍＬ、少なくとも２５ｍｇ／ｍＬ、少なくとも５０ｍｇ／ｍＬ、少なくとも１００ｍｇ／ｍＬ、少なくとも２００ｍｇ／ｍＬ、少なくとも５００ｍｇ／ｍＬ、少なくとも７００ｍｇ／ｍＬ、少なくとも１，０００ｍｇ／ｍＬまたは少なくとも１，２００ｍｇ／ｍＬの濃度である、請求項１２に記載の組成物。
ＳＭ－ＡＳＯが最大で１，０００ｎｇ／ｍＬ、最大で１，１００ｎｇ／ｍＬ、最大で１，２００ｎｇ／ｍＬ、最大で１，３００ｎｇ／ｍＬ、最大で１，４００ｎｇ／ｍＬ、最大で１，５００ｎｇ／ｍＬ、最大で２，０００ｎｇ／ｍＬ、最大で２，０００ｎｇ／ｍＬ、または最大で３，０００ｎｇ／ｍＬ、最大で１，０００ｍｇ／ｍＬ、最大で１，１００ｍｇ／ｍＬ、最大で１，２００ｍｇ／ｍＬ、最大で１，３００ｍｇ／ｍＬ、最大で１，４００ｍｇ／ｍＬ、最大で１，５００ｍｇ／ｍＬ、最大で２，０００ｍｇ／ｍＬ、最大で２，０００ｍｇ／ｍＬ、または最大で３，０００ｍｇ／ｍＬの濃度である、請求項１２に記載の組成物。
ＳＭ－ＡＳＯが約０．００００１ｎｇ／ｍＬ～約３，０００ｎｇ／ｍＬ、約０．０００１ｎｇ／ｍＬ～約３，０００ｎｇ／ｍＬ、約０．０１ｎｇ／ｍＬ～約３，０００ｎｇ／ｍＬ、約０．１ｎｇ／ｍＬ～約３，０００ｎｇ／ｍＬ、約１ｎｇ／ｍＬ～約３，０００ｎｇ／ｍＬ、約２５０ｎｇ／ｍＬ～約３，０００ｎｇ／ｍＬ、約５００ｎｇ／ｍＬ～約３，０００ｎｇ／ｍＬ、約７５０ｎｇ／ｍＬ～約３，０００ｎｇ／ｍＬ、約１，０００ｎｇ／ｍＬ～約３，０００ｎｇ／ｍＬ、約１００ｎｇ／ｍＬ～約２，０００ｎｇ／ｍＬ、約２５０ｎｇ／ｍＬ～約２，０００ｎｇ／ｍＬ、約５００ｎｇ／ｍＬ～約２，０００ｎｇ／ｍＬ、約７５０ｎｇ／ｍＬ～約２，０００ｎｇ／ｍＬ、約１，０００ｎｇ／ｍＬ～約２，０００ｎｇ／ｍＬ、約１００ｎｇ／ｍＬ～約１，５００ｎｇ／ｍＬ、約２５０ｎｇ／ｍＬ～約１，５００ｎｇ／ｍＬ、約５００ｎｇ／ｍＬ～約１，５００ｎｇ／ｍＬ、約７５０ｎｇ／ｍＬ～約１，５００ｎｇ／ｍＬ、約１，０００ｎｇ／ｍＬ～約１，５００ｎｇ／ｍＬ、約１００ｎｇ／ｍＬ～約１，２００ｎｇ／ｍＬ、約２５０ｎｇ／ｍＬ～約１，２００ｎｇ／ｍＬ、約５００ｎｇ／ｍＬ～約１，２００ｎｇ／ｍＬ、約７５０ｎｇ／ｍＬ～約１，２００ｎｇ／ｍＬ、約１，０００ｎｇ／ｍＬ～約１，２００ｎｇ／ｍＬ、約１００ｎｇ／ｍＬ～約１，０００ｎｇ／ｍＬ、約２５０ｎｇ／ｍＬ～約１，０００ｎｇ／ｍＬ、約５００ｎｇ／ｍＬ～約１，０００ｎｇ／ｍＬ、約７５０ｎｇ／ｍＬ～約１，０００ｎｇ／ｍＬ、約１００ｎｇ／ｍＬ～約７５０ｎｇ／ｍＬ、約２５０ｎｇ／ｍＬ～約７５０ｎｇ／ｍＬ、約５００ｎｇ／ｍＬ～約７５０ｎｇ／ｍＬ、約１００ｎｇ／ｍＬ～約５００ｎｇ／ｍＬ、約２５０ｎｇ／ｍＬ～約５００ｎｇ／ｍＬ、約０．００００１ｎｇ／ｍＬ～約０．０００１ｎｇ／ｍＬ、約０．００００１ｎｇ／ｍＬ～約０．００１ｎｇ／ｍＬ、約０．００００１ｎｇ／ｍＬ～約０．０１ｎｇ／ｍＬ、約０．００００１ｎｇ／ｍＬ～約０．１ｎｇ／ｍＬ、約０．００００１ｎｇ／ｍＬ～約１ｎｇ／ｍＬ、約０．００１ｎｇ／ｍＬ～約０．０１ｎｇ／ｍＬ、約０．００１ｎｇ／ｍＬ～約０．１ｎｇ／ｍＬ、約０．００１ｎｇ／ｍＬ～約１ｎｇ／ｍＬ、約０．００１ｎｇ／ｍＬ～約１０ｎｇ／ｍＬ、または約０．００１ｎｇ／ｍＬ～約１００ｎｇ／ｍＬ、約０．００００１ｍｇ／ｍＬ～約３，０００ｍｇ／ｍＬ、約０．０００１ｍｇ／ｍＬ～約３，０００ｍｇ／ｍＬ、約０．０１ｍｇ／ｍＬ～約３，０００ｍｇ／ｍＬ、約０．１ｍｇ／ｍＬ～約３，０００ｍｇ／ｍＬ、約１ｍｇ／ｍＬ～約３，０００ｍｇ／ｍＬ、約２５０ｍｇ／ｍＬ～約３，０００ｍｇ／ｍＬ、約５００ｍｇ／ｍＬ～約３，０００ｍｇ／ｍＬ、約７５０ｍｇ／ｍＬ～約３，０００ｍｇ／ｍＬ、約１，０００ｍｇ／ｍＬ～約３，０００ｍｇ／ｍＬ、約１００ｍｇ／ｍＬ～約２，０００ｍｇ／ｍＬ、約２５０ｍｇ／ｍＬ～約２，０００ｍｇ／ｍＬ、約５００ｍｇ／ｍＬ～約２，０００ｍｇ／ｍＬ、約７５０ｍｇ／ｍＬ～約２，０００ｍｇ／ｍＬ、約１，０００ｍｇ／ｍＬ～約２，０００ｍｇ／ｍＬ、約１００ｍｇ／ｍＬ～約１，５００ｍｇ／ｍＬ、約２５０ｍｇ／ｍＬ～約１，５００ｍｇ／ｍＬ、約５００ｍｇ／ｍＬ～約１，５００ｍｇ／ｍＬ、約７５０ｍｇ／ｍＬ～約１，５００ｍｇ／ｍＬ、約１，０００ｍｇ／ｍＬ～約１，５００ｍｇ／ｍＬ、約１００ｍｇ／ｍＬ～約１，２００ｍｇ／ｍＬ、約２５０ｍｇ／ｍＬ～約１，２００ｍｇ／ｍＬ、約５００ｍｇ／ｍＬ～約１，２００ｍｇ／ｍＬ、約７５０ｍｇ／ｍＬ～約１，２００ｍｇ／ｍＬ、約１，０００ｍｇ／ｍＬ～約１，２００ｍｇ／ｍＬ、約１００ｍｇ／ｍＬ～約１，０００ｍｇ／ｍＬ、約２５０ｍｇ／ｍＬ～約１，０００ｍｇ／ｍＬ、約５００ｍｇ／ｍＬ～約１，０００ｍｇ／ｍＬ、約７５０ｍｇ／ｍＬ～約１，０００ｍｇ／ｍＬ、約１００ｍｇ／ｍＬ～約７５０ｍｇ／ｍＬ、約２５０ｍｇ／ｍＬ～約７５０ｍｇ／ｍＬ、約５００ｍｇ／ｍＬ～約７５０ｍｇ／ｍＬ、約１００ｍｇ／ｍＬ～約５００ｍｇ／ｍＬ、約２５０ｍｇ／ｍＬ～約５００ｍｇ／ｍＬ、約０．００００１ｍｇ／ｍＬ～約０．０００１ｍｇ／ｍＬ、約０．００００１ｍｇ／ｍＬ～約０．００１ｍｇ／ｍＬ、約０．００００１ｍｇ／ｍＬ～約０．０１ｍｇ／ｍＬ、約０．００００１ｍｇ／ｍＬ～約０．１ｍｇ／ｍＬ、約０．００００１ｍｇ／ｍＬ～約１ｍｇ／ｍＬ、約０．００１ｍｇ／ｍＬ～約０．０１ｍｇ／ｍＬ、約０．００１ｍｇ／ｍＬ～約０．１ｍｇ／ｍＬ、約０．００１ｍｇ／ｍＬ～約１ｍｇ／ｍＬ、約０．００１ｍｇ／ｍＬ～約１０ｍｇ／ｍＬ、または約０．００１ｍｇ／ｍＬ～約１００ｍｇ／ｍＬの濃度である、請求項１２に記載の組成物。
前記組成物の投与により、がんと関連している症状が少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％少なくとも９５％または少なくとも１００％低減される、請求項１に記載の方法。
前記組成物の投与により、がんと関連している症状が約１０％～約１００％、約１０％～約９０％、約１０％～約８０％、約１０％～約７０％、約１０％～約６０％、約１０％～約５０％、約１０％～約４０％、約２０％～約１００％、約２０％～約９０％、約２０％～約８０％、約２０％～約２０％、約２０％～約６０％、約２０％～約５０％、約２０％～約４０％、約３０％～約１００％、約３０％～約９０％、約３０％～約８０％、約３０％～約７０％、約３０％～約６０％または約３０％～約５０％低減される、請求項１に記載の方法。
前記オリゴヌクレオチドまたはＳＭ－ＡＳＯの有効量が少なくとも０．００１ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも０．０１ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも０．１ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも１．０ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも５．０ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも１０ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも１５ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも２０ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも２５ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも３０ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも３５ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも４０ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも４５ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも５０ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも１００ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも１５０ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも２００ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも２５０ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも３００ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも３５０ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも４００４５０ｍｇ／ｋｇ／日または少なくとも５００ｍｇ／ｋｇ／日である、請求項１２に記載の組成物。
前記オリゴヌクレオチドまたはＳＭ－ＡＳＯの有効量が約０．００１ｍｇ／ｋｇ／日～約１０ｍｇ／ｋｇ／日、約０．００１ｍｇ／ｋｇ／日～約１５ｍｇ／ｋｇ／日、約０．００１ｍｇ／ｋｇ／日～約２０ｍｇ／ｋｇ／日、約０．００１ｍｇ／ｋｇ／日～約２５ｍｇ／ｋｇ／日、約０．００１ｍｇ／ｋｇ／日～約３０ｍｇ／ｋｇ／日、約０．００１ｍｇ／ｋｇ／日～約３５ｍｇ／ｋｇ／日、約０．００１ｍｇ／ｋｇ／日～約４０ｍｇ／ｋｇ／日、約０．００１ｍｇ／ｋｇ／日～約４５ｍｇ／ｋｇ／日、約０．００１ｍｇ／ｋｇ／日～約５０ｍｇ／ｋｇ／日、約０．００１ｍｇ／ｋｇ／日～約７５ｍｇ／ｋｇ／日または約０．００１ｍｇ／ｋｇ／日～約１００ｍｇ／ｋｇ／日である、請求項１２に記載の組成物。
前記オリゴヌクレオチドまたはＳＭ－ＡＳＯの有効量が約０．０１ｍｇ／ｋｇ／日～約１０ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０１ｍｇ／ｋｇ／日～約１５ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０１ｍｇ／ｋｇ／日～約２０ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０１ｍｇ／ｋｇ／日～約２５ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０１ｍｇ／ｋｇ／日～約３０ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０１ｍｇ／ｋｇ／日～約３５ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０１ｍｇ／ｋｇ／日～約４０ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０１ｍｇ／ｋｇ／日～約４５ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０１ｍｇ／ｋｇ／日～約５０ｍｇ／ｋｇ／日、約０．０１ｍｇ／ｋｇ／日～約７５ｍｇ／ｋｇ／日または約０．０１ｍｇ／ｋｇ／日～約１００ｍｇ／ｋｇ／日である。この実施形態のさらに他の態様において、本明細書に開示のＡＳＯまたはＳＭ－ＡＳＯの有効量は例えば約０．１ｍｇ／ｋｇ／日～約１０ｍｇ／ｋｇ／日、約０．１ｍｇ／ｋｇ／日～約１５ｍｇ／ｋｇ／日、約０．１ｍｇ／ｋｇ／日～約２０ｍｇ／ｋｇ／日、約０．１ｍｇ／ｋｇ／日～約２５ｍｇ／ｋｇ／日、約０．１ｍｇ／ｋｇ／日～約３０ｍｇ／ｋｇ／日、約０．１ｍｇ／ｋｇ／日～約３５ｍｇ／ｋｇ／日、約０．１ｍｇ／ｋｇ／日～約４０ｍｇ／ｋｇ／日、約０．１ｍｇ／ｋｇ／日～約４５ｍｇ／ｋｇ／日、約０．１ｍｇ／ｋｇ／日～約５０ｍｇ／ｋｇ／日、約０．１ｍｇ／ｋｇ／日～約７５ｍｇ／ｋｇ／日または約０．１ｍｇ／ｋｇ／日～約１００ｍｇ／ｋｇ／日の範囲であり得る、請求項１２に記載の組成物。
前記被験体がヒト、イヌ、ネコ、トリ、ウシ、ウマ、ヒツジ、ヤギ、爬虫類、サルおよび他の動物であり、飼養化されているか否かに関わらない、請求項１に記載の方法。
前記がんが良性もしくは悪性、腫瘍、充実性またはその他である、請求項１に記載の方法。
投薬が単回用量または連続投薬である、請求項１に記載の方法。
用量分が１日１回、１日２回、１日３回、数日毎に１回、週１回または月１回で投与される、請求項４１に記載の方法。
前記がんに苦しんでいる個体においてがん細胞の数または腫瘍サイズが、同じ処置を受けていない患者と比べて少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％低減される、請求項１に記載の方法。
前記がんに苦しんでいる個体においてがん細胞の数または腫瘍サイズが、同じ処置を受けていない患者と比べて約１０％～約１００％、約２０％～約１００％、約３０％～約１００％、約４０％～約１００％、約５０％～約１００％、約６０％～約１００％、約７０％～約１００％、約８０％～約１００％、約１０％～約９０％、約２０％～約９０％、約３０％～約９０％、約４０％～約９０％、約５０％～約９０％、約６０％～約９０％、約７０％～約９０％、約１０％～約８０％、約２０％～約８０％、約３０％～約８０％、約４０％～約８０％、約５０％～約８０％または約６０％～約８０％、約１０％～約７０％、約２０％～約７０％、約３０％～約７０％、約４０％～約７０％または約５０％～約７０％低減される、請求項１に記載の方法。
ＳＭ－ＡＳＯが２時間、３時間、４時間、５時間、６時間、７時間、８時間、９時間、１０時間、１１時間、１２時間、１３時間、１４時間、１５時間、１６時間、１７時間、１８時間、１９時間、２０時間、２１時間、２２時間、２３時間、１日、２日間、３日間、４日間、５日間、６日間、７日間、１週間、２週間、３週間、４週間、１ヶ月間、２ヶ月間、３ヶ月間、４ヶ月間またはそれより長い半減期を有する、請求項１２に記載の組成物。
ＳＭ－ＡＳＯの投与期間が１日、２日間、３日間、４日間、５日間、６日間、７日間、８日間、９日間、１０日間、１１日間、１２日間、１３日間、１４日間、３週間、４週間、５週間、６週間、７週間、８週間、９週間、１０週間、１１週間、１２週間、４ヶ月間、５ヶ月間、６ヶ月間、７ヶ月間、８ヶ月間、９ヶ月間、１０ヶ月間、１１ヶ月間、１２ヶ月間であるか、またはそれより長い、請求項１２に記載の組成物。
前記がんが、リンパ腫（例えば、ホジキンリンパ腫（ＨＬ）、非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）およびあらゆる亜型）、原発性縦隔大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、白血病（例えば、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、Ｔ細胞白血病およびあらゆる亜型、Ｂ細胞白血病およびあらゆる亜型）、結腸直腸がん、肝臓がん（例えば、肝細胞癌（ＨＣＣ）、胆管癌（胆管がん）および肝芽腫）、肝細胞癌（ＨＣＣ）、黒色腫、肺がん（例えば、小細胞肺がん（ＳＣＬＣ）および非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）、腺癌、扁平上皮（類表皮）癌および大細胞（未分化）癌、非小細胞肺がん（ＮＳＣＬＣ）（扁平上皮または非扁平上皮）、小細胞肺がん、腎臓がん、腎細胞癌、食道の扁平上皮癌、頭頸部がん（例えば、扁平上皮または非扁平上皮）、頭頸部の扁平上皮癌、尿路上皮癌、子宮頸がん、皮膚扁平上皮癌、子宮内膜癌、胃（ｇａｓｔｒｉｃ）（胃（ｓｔｏｍａｃｈ））がんまたは胃食道接合部がん、食道がん（例えば、扁平上皮癌および腺癌）、メルケル細胞癌、高頻度マイクロサテライト不安定性（ＭＳＩ－Ｈ）またはミスマッチ修復欠損（ｄＭＭＲ）がん、充実性腫瘍（例えば、腫瘍遺伝子変異量高スコア（ＴＭＢ－Ｈ）または転移性がん）、結腸直腸がん（例えば、転移性の高頻度マイクロサテライト不安定性（ＭＳＩ－Ｈ）またはミスマッチ修復欠損（ｄＭＭＲ）がん）、トリプルネガティブ乳がん、トリプルポジティブ乳がん、脳のがん（例えば、星状細胞腫、上衣細胞腫、神経膠腫、髄膜腫、髄芽細胞腫、神経芽細胞腫）、膀胱がん、小児がん（例えば、急性リンパ性白血病、脳のがん、神経芽細胞腫、非ホジキンリンパ腫、ホジキンリンパ腫、甲状腺癌、精巣胚細胞腫瘍）、多発性骨髄腫、卵巣がん、膵がん、前立腺がん、肉腫（例えば、骨肉腫、軟骨肉腫、脂肪肉腫および平滑筋肉腫）、皮膚がん（例えば、基底細胞癌（ＢＣＣ）、扁平上皮癌（ＳＣＣ）、黒色腫、メルケル細胞癌（ＭＣＣ）およびカポジ肉腫（ＫＳ））、胃がんならびに子宮（子宮内膜）がんのうちの１つまたはそれより多くである、請求項１に記載の方法。
がんを処置するための治療有効量のＳＭ－ＡＳＯ。
がんを処置するための治療有効用量のＳＭ－ＡＳＯ。
ＳＭ－ＡＳＯが個別の投薬形態で投与される、請求項４５または４６に記載のＳＭ－ＡＳＯ。
カプセル剤または錠剤である、請求項４７に記載の個別の投薬形態。
ＳＭ－ＡＳＯを含む組成物であってＳＭ－ＡＳＯがカプセル剤、表または他の固形もしくは液状の形態として投与される組成物。
ＳＭ－ＡＳＯを含む組成物、パッケージングをＳＭ－ＡＳＯの使用のための使用説明書とともに備えているキット。
ビン、キャニスター、ブリスターパック、バイアル、チューブまたは他の密閉容器を備えている、請求項５０に記載のキット。
局所送達または全身送達のいずれかのために製剤化される、請求項１２に記載の組成物。
経表面、経腸、親、膣内、肛門経由、鼻経由、接眼、口腔内、皮下、静脈内、筋肉内、腹腔内または経口で投与される、請求項１２に記載の組成物。
吸入される、請求項１２に記載の組成物。
吸入が、加圧式（ＰＤＩ）または他の定量吸入器（ＭＤＩ）における使用のための液状プロペラント中のエールゾル剤によるものである、請求項５４に記載の組成物。
経腸または非経口投与に適した液状製剤が液剤、シロップ剤、エリキシル剤、分散剤、エマルジョンおよび懸濁剤、例えば限定されないが、静脈内投与に使用されるものである、請求項５３に記載の組成物。
経腸または非経口投与のための固形製剤がカプセル剤、錠剤、丸剤、トローチ剤、ロゼンジ剤、吸入または滅菌された注射用の液剤もしくは懸濁剤への再構成に適した粉末剤および顆粒剤である、請求項５３に記載の組成物。
吸入用製剤中のＳＭ－ＡＳＯの治療有効量が約０．０００１％（ｗ／ｖ）～約６０％（ｗ／ｖ）、約０．００１％（ｗ／ｖ）～約４０．０％（ｗ／ｖ）または約０．０１％（ｗ／ｖ）～約２０．０％（ｗ／ｖ）である、請求項５３に記載の組成物。
吸入用製剤中のＳＭ－ＡＳＯの治療有効量が約０．０００１％（ｗ／ｗ）～約６０％（ｗ／ｗ）、約０．００１％（ｗ／ｗ）～約４０．０％（ｗ／ｗ）または約０．０１％（ｗ／ｗ）～約２０．０％（ｗ／ｗ）、請求項５４に記載の組成物。
ＳＭ－ＡＳＯの組成物であって、水性担体、非水性担体、希釈剤および溶媒を含む組成物。
充填剤または増量剤、結合剤、保湿剤、崩壊剤、溶解遅延剤、吸収促進剤、湿潤剤、吸着剤、滑沢剤および緩衝剤から選択される少なくとも１種類の不活性な慣用的な賦形剤を含む固形投薬形態の状態である、請求項４５または４６に記載のＳＭ－ＡＳＯ。
半固形製剤の状態である、請求項４５または４６に記載のＳＭ－ＡＳＯ。
前記半固形製剤が軟膏、クリーム剤、膏薬またはゲル剤である、請求項６２に記載のＳＭ－ＡＳＯ。
半固形製剤の状態のＳＭ－ＡＳＯが約０．０００１％（ｗ／ｖ）～約６０％（ｗ／ｖ）、約０．００１％（ｗ／ｖ）～約４０．０％（ｗ／ｖ）または約０．０１％（ｗ／ｖ）～約２０．０％（ｗ／ｖ）の濃度である、請求項６２に記載のＳＭ－ＡＳＯ。
半固形製剤の状態のＳＭ－ＡＳＯが約０．０００１％（ｗ／ｗ）～約６０％（ｗ／ｗ）、約０．００１％（ｗ／ｗ）～約４０．０％（ｗ／ｗ）または約０．０１％（ｗ／ｗ）～約２０．０％（ｗ／ｗ）の濃度である、請求項６２に記載のＳＭ－ＡＳＯ。
前記液状製剤が水性または非水性の担体、希釈剤、懸濁化剤、油および溶媒のうちの少なくとも１種類を含む、請求項５９に記載の液状製剤。
液状製剤の状態のＳＭ－ＡＳＯが約０．０００１％（ｗ／ｖ）～約６０％（ｗ／ｖ）、約０．００１％（ｗ／ｖ）～約４０．０％（ｗ／ｖ）または約０．０１％（ｗ／ｖ）～約２０．０％（ｗ／ｖ）の濃度である、請求項６６に記載のＳＭ－ＡＳＯ。
処置により前記がんが反転される緩和される、その発症が遅延される、その進行が抑止される、および／または前記がんが予防される、請求項１に記載の方法。
ｓＩＬ７Ｒの発現を調節するためのＳＭ－ＡＳＯを含む組成物。
ＳＭ－ＡＳＯが、がんを処置するために被験体に投与される、請求項６９に記載の組成物。
ＳＭ－ＡＳＯがｓＩＬ７Ｒ発現を増大させる、請求項６９に記載の組成物。
前記処置ががん免疫療法である、請求項７０に記載の組成物。
細胞内へのＳＭ－ＡＳＯの裸送達を含む方法。
前記細胞がＴ細胞である、請求項７３に記載の方法。
前記Ｔ細胞がＣＤ４^＋Ｔ細胞である、請求項７４に記載の方法。
前記細胞がヒト由来である、請求項７３～７５に記載の方法。
がんの処置を、それを必要とする被験体において行なう方法であって：エクソン６のスプライシングに影響を及ぼすインターロイキン－７受容体（ＩＬ７Ｒ）プレｍＲＮＡの配列に特異的に結合するオリゴヌクレオチドを含む組成物を有効量で投与することを含み、前記オリゴヌクレオチドはＩＬ７ＲプレｍＲＮＡ内におけるエクソン６の含有を低減させ、ＩＬ７Ｒの可溶性アイソフォーム（ｓＩＬ７Ｒ）の発現を増大させるものである方法。
前記オリゴヌクレオチドがアンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳＯ）またはスプライス変調アンチセンスオリゴヌクレオチド（ＳＭ－ＡＳＯ）である、請求項７７に記載の方法。
前記組成物中のオリゴヌクレオチドが、エクソン内スプライシング促進配列（ＥＳＥ）および／またはイントロン内スプライシング促進配列（ＩＳＥ）からなる群のうちの少なくとも１つにおけるＩＬ７ＲプレｍＲＮＡ内の配列に特異的に結合し、それによりエクソン６の含有が低減され、ｓＩＬ７Ｒの発現が増大する、請求項７７に記載の方法。
前記組成物中のオリゴヌクレオチドが、ＩＬ７ＲプレｍＲＮＡ上のイントロン－エクソンスプライス部位、分岐点配列および／またはポリピリミジントラクトの配列に特異的に結合する、請求項７７に記載の方法。
前記オリゴヌクレオチド内の前記少なくとも１個またはそれより多くのヌクレオチドが：１つまたはそれより多くのホスホロチオエート、ホスホロジチオエート、ホスホジエステル、メチルホスホネート、ホスホロアミデート、メチルホスホネート、ホスホトリエステル、ホスホロアリデート、モルフォリノ、アミデートカルバメート、カルボキシメチル、アセトアミデート、ポリアミド、スルホネート、スルホンアミド、スルファメート、ホルムアセタール、チオホルムアセタールおよび／またはアルキルシリル置換、一部または完全修飾骨格、例えば完全修飾糖リン酸骨格、ロック核酸骨格、ペプチド性骨格、ホスホトリエステル骨格、ホスホロアミデート骨格、シロキサン骨格、カルボキシメチルエステル骨格、アセトアミデート骨格、カルバメート骨格、チオエーテル骨格、架橋メチレンホスホネート骨格、ホスホロチオエート骨格、メチルホスホネート骨格、アルキルホスホネート骨格、リン酸エステル骨格、アルキルホスホノチオエート骨格、ホスホロジチオエート骨格、カーボネート骨格、リン酸トリエステル骨格、カルボキシメチルエステル骨格、メチルホスホロチオエート骨格、ホスホロジチオエート骨格、ｐ－エトキシ結合を有する骨格、糖修飾、例えば２’－Ｏ－メチル（２’－Ｏ－メチルヌクレオチド）、２’－Ｏ－メチルオキシエトキシ（２’－Ｏ－ＭＯＥ）、２’－Ｏ－アルキル修飾糖部分または二環性糖部分、ヌクレオチド模倣物、ペプチド核酸（ＰＮＡ）、モルフォリノ核酸、シクロヘキセニル核酸、アンヒドロヘキシトール核酸、グリコール核酸、トレオース核酸およびロック核酸（ＬＮＡ）ならびに前述のもののいずれかの２つ以上の組合せから選択される（１）リボースもしくは他の糖単位、（２）塩基または（３）骨格の修飾または置換を含む天然に存在しない修飾を含む。別の態様では、前記オリゴヌクレオチド内の少なくとも１個またはそれより多くのヌクレオチドが、ヌクレオチド塩基に対する天然に存在しない修飾を含む、請求項７７に記載の方法。
前記オリゴヌクレオチドが、表２のＳＥＱＩＤ（配列番号：１４～５０）のうちのいずれか、もしくはその一部分の単独もしくは組合せのいずれか、またはＩＬ７ＲＲＮＡ内の標的の完全配列において少なくとも７０、７５、８０、８４、８５、８８、９２、９３、９４、９５もしくは９６％の同一性を有する配列から選択される、請求項７７に記載の方法。
前記オリゴヌクレオチドが、表２のＳＥＱＩＤ（配列番号：１４～５０）のうちのいずれか、またはその一部分を標的化する、請求項７７に記載の方法。
前記組成物が薬学的に許容され得る賦形剤、塩または担体をさらに含む、請求項７７に記載の方法。
前記がんが従来の免疫療法に対して低奏効を示すもの（肝細胞癌）である、請求項７７に記載の方法。
ＳＭ－ＡＳＯとがんの処置に有効な１種類またはそれより多くの活性薬剤、例えば限定されないが、免疫チェックポイント阻害剤、治療用抗体、従来の化学療法または治療用放射線との併用療法を提供することをさらに含む、請求項７７に記載の方法。
アンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳＯ）またはスプライス変調アンチセンスオリゴヌクレオチド（ＳＭ－ＡＳＯ）であり、エクソン６のスプライシングに影響を及ぼすインターロイキン７受容体（ＩＬ７Ｒ）のプレｍＲＮＡ内の配列に特異的に結合するオリゴヌクレオチドを含む組成物であって、ＳＭ－ＡＳＯはＩＬ７ＲプレｍＲＮＡ内におけるエクソン６の含有を低減させ、ＩＬ７Ｒの可溶性アイソフォーム（ｓＩＬ７Ｒ）の発現を増大させる組成物。
前記組成物中のオリゴヌクレオチドが、エクソン内スプライシング促進配列（ＥＳＥ）および／またはイントロン内スプライシング促進配列（ＩＳＥ）からなる群のうちの少なくとも１つにおけるＩＬ７ＲプレｍＲＮＡ内の配列に特異的に結合し、それによりＩＬ７ＲプレｍＲＮＡ内におけるエクソン６の含有が低減され、ｓＩＬ７Ｒの発現が増大する、請求項８７に記載の方法。
前記組成物中のオリゴヌクレオチドが、ＩＬ７ＲプレｍＲＮＡ上のイントロン－エクソンスプライス部位、分岐点配列および／またはポリピリミジントラクトの配列に特異的に結合する、請求項８７に記載の方法。
前記オリゴヌクレオチド内の前記少なくとも１個またはそれより多くのヌクレオチドが：１つまたはそれより多くのホスホロチオエート、ホスホロジチオエート、ホスホジエステル、メチルホスホネート、ホスホロアミデート、メチルホスホネート、ホスホトリエステル、ホスホロアリデート、モルフォリノ、アミデートカルバメート、カルボキシメチル、アセトアミデート、ポリアミド、スルホネート、スルホンアミド、スルファメート、ホルムアセタール、チオホルムアセタールおよび／またはアルキルシリル置換、一部または完全修飾骨格、例えば完全修飾糖リン酸骨格、ロック核酸骨格、ペプチド性骨格、ホスホトリエステル骨格、ホスホロアミデート骨格、シロキサン骨格、カルボキシメチルエステル骨格、アセトアミデート骨格、カルバメート骨格、チオエーテル骨格、架橋メチレンホスホネート骨格、ホスホロチオエート骨格、メチルホスホネート骨格、アルキルホスホネート骨格、リン酸エステル骨格、アルキルホスホノチオエート骨格、ホスホロジチオエート骨格、カーボネート骨格、リン酸トリエステル骨格、カルボキシメチルエステル骨格、メチルホスホロチオエート骨格、ホスホロジチオエート骨格、ｐ－エトキシ結合を有する骨格、糖修飾、例えば２’－Ｏ－メチル（２’－Ｏ－メチルヌクレオチド）、２’－Ｏ－メチルオキシエトキシ（２’－Ｏ－ＭＯＥ）、２’－Ｏ－アルキル修飾糖部分または二環性糖部分、ヌクレオチド模倣物、ペプチド核酸（ＰＮＡ）、モルフォリノ核酸、シクロヘキセニル核酸、アンヒドロヘキシトール核酸、グリコール核酸、トレオース核酸およびロック核酸（ＬＮＡ）ならびに前述のもののいずれかの２つ以上の任意の組合せから選択される（１）リボースもしくは他の糖単位、（２）塩基または（３）骨格の修飾または置換を含む天然に存在しない修飾を含む、請求項８７に記載の方法。
前記オリゴヌクレオチド内の前記少なくとも１個またはそれより多くのヌクレオチドが、ヌクレオチド塩基に対する天然に存在しない修飾を含む、請求項８７に記載の方法。
前記オリゴヌクレオチドが、
表２のＳＥＱＩＤ（配列番号：１４～５０）のうちのいずれか、もしくはその一部分の単独もしくは組合せのいずれか、またはＩＬ７ＲＲＮＡ内の標的の完全配列において少なくとも７０、７５、８０、８４、８５、８８、９２、９３、９４、９５もしくは９６％の同一性を有する配列から選択される、請求項８７に記載の方法。
前記オリゴヌクレオチドが、表２のＳＥＱＩＤ（配列番号：１４～５０）のうちのいずれかを全体または部分的のいずれかで標的化する。別の態様では、前記組成物が薬学的に許容され得る賦形剤、塩または担体をさらに含む、請求項８７に記載の方法。
前記組成物が、がんを処置するための投与に適合されている、請求項８７８７に記載の方法。
インターロイキン－７受容体（ＩＬ７Ｒ）プレｍＲＮＡにおけるエクソン６の含有を低減させる方法であって：エクソン６のスプライシングに影響を及ぼすインターロイキン－７受容体（ＩＬ７Ｒ）プレｍＲＮＡ内の配列に特異的に結合するスプライス変調アンチセンスオリゴヌクレオチド（ＳＭ－ＡＳＯ）を接触させることを含み、ＳＭ－ＡＳＯはＩＬ７ＲプレｍＲＮＡ内におけるエクソン６の含有を低減させ、ＩＬ７Ｒの可溶性アイソフォーム（ｓＩＬ７Ｒ）の発現を増大させる方法。
前記組成物中のオリゴヌクレオチドが、エクソン内スプライシング促進配列（ＥＳＥ）および／またはイントロン内スプライシング促進配列（ＩＳＥ）からなる群のうちの少なくとも１つにおけるＩＬ７ＲプレｍＲＮＡ内の配列に特異的に結合し、それによりＩＬ７ＲプレｍＲＮＡ内におけるエクソン６の含有が低減され、ｓＩＬ７Ｒの発現が増大する、請求項９５に記載の方法。
前記組成物中のＳＭ－ＡＳＯが、ＩＬ７ＲプレｍＲＮＡ上のイントロン－エクソンスプライス部位、分岐点配列および／またはポリピリミジントラクトの配列に特異的に結合する、請求項９５に記載の方法。
ＳＭ－ＡＳＯ内の前記少なくとも１個またはそれより多くのヌクレオチドが：１つまたはそれより多くのホスホロチオエート、ホスホロジチオエート、ホスホジエステル、メチルホスホネート、ホスホロアミデート、メチルホスホネート、ホスホトリエステル、ホスホロアリデート、モルフォリノ、アミデートカルバメート、カルボキシメチル、アセトアミデート、ポリアミド、スルホネート、スルホンアミド、スルファメート、ホルムアセタール、チオホルムアセタールおよび／またはアルキルシリル置換、一部または完全修飾骨格、例えば完全修飾糖リン酸骨格、ロック核酸骨格、ペプチド性骨格、ホスホトリエステル骨格、ホスホロアミデート骨格、シロキサン骨格、カルボキシメチルエステル骨格、アセトアミデート骨格、カルバメート骨格、チオエーテル骨格、架橋メチレンホスホネート骨格、ホスホロチオエート骨格、メチルホスホネート骨格、アルキルホスホネート骨格、リン酸エステル骨格、アルキルホスホノチオエート骨格、ホスホロジチオエート骨格、カーボネート骨格、リン酸トリエステル骨格、カルボキシメチルエステル骨格、メチルホスホロチオエート骨格、ホスホロジチオエート骨格、ｐ－エトキシ結合を有する骨格、糖修飾、例えば２’－Ｏ－メチル（２’－Ｏ－メチルヌクレオチド）、２’－Ｏ－メチルオキシエトキシ（２’－Ｏ－ＭＯＥ）、２’－Ｏ－アルキル修飾糖部分または二環性糖部分、ヌクレオチド模倣物、ペプチド核酸（ＰＮＡ）、モルフォリノ核酸、シクロヘキセニル核酸、アンヒドロヘキシトール核酸、グリコール核酸、トレオース核酸およびロック核酸（ＬＮＡ）ならびに前述のもののいずれかの２つ以上の任意の組合せから選択される（１）リボースもしくは他の糖単位、（２）塩基または（３）骨格の修飾または置換を含む天然に存在しない修飾を含む。別の態様では、ＳＭ－ＡＳＯ内の少なくとも１個またはそれより多くのヌクレオチドが、ヌクレオチド塩基に対する天然に存在しない修飾を含む、請求項９５に記載の方法。
ＳＭ－ＡＳＯが、ＩＬ７Ｒのエクソン５－エクソン７の境界を標的化することにより、エクソン６が欠損しているＩＬ７ＲｍＲＮＡの安定性を高める、請求項９５に記載の方法。
ＳＭ－ＡＳＯが、エクソン６が欠損しているＩＬ７ＲｍＲＮＡの翻訳を促進させる、請求項９５に記載の方法。
ＳＭ－ＡＳＯが、表２の任意のＳＥＱＩＤもしくはその一部分の単独もしくは組合せのいずれか、またはＩＬ７ＲＲＮＡ内の標的の完全配列において少なくとも７０、７５、８０、８４、８５、８８、９２、９３、９４、９５もしくは９６％の同一性を有する配列から選択される、請求項９５に記載の方法。
前記オリゴヌクレオチドが表２の任意のＳＥＱＩＤを標的化する、請求項９５に記載の方法。
前記組成物が薬学的に許容され得る賦形剤、塩または担体をさらに含む、請求項９５に記載の方法。
前記障害が、ある型のがんである、請求項９５に記載の方法。
インターロイキン－７受容体（ＩＬ７Ｒ）プレｍＲＮＡにおけるエクソン６の含有を低減させるための組成物であって、前記方法が：エクソン６のスプライシングに影響を及ぼすインターロイキン－７受容体（ＩＬ７Ｒ）プレｍＲＮＡ内の配列に特異的に結合するスプライス変調アンチセンスオリゴヌクレオチド（ＳＭ－ＡＳＯ）を接触させることを含み、ＳＭ－ＡＳＯはＩＬ７ＲプレｍＲＮＡ内におけるエクソン６の含有を低減させ、ＩＬ７Ｒの可溶性アイソフォーム（ｓＩＬ７Ｒ）の発現を増大させる組成物。
前記組成物が、がんの処置に有効な１種類またはそれより多くの活性薬剤、例えば限定されないが、免疫チェックポイント阻害剤（例えば、ニボルマブ）、治療用抗体（例えば、ハーセプチン）、従来の化学療法（例えば、タキソール）または治療用放射線とのＳＭ－ＡＳＯの併用療法をさらに含む、請求項１０５に記載の方法。
アンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳＯ）またはスプライス変調アンチセンスオリゴヌクレオチド（ＳＭ－ＡＳＯ）であり、エクソン６のスプライシングに影響を及ぼすインターロイキン－７受容体（ＩＬ７Ｒ）プレｍＲＮＡ内の配列に特異的に結合するオリゴヌクレオチドを含む核酸を発現するベクターであって、ＳＭ－ＡＳＯはＩＬ７ＲプレｍＲＮＡ内におけるエクソン６の含有を低減させ、ＩＬ７Ｒの可溶性アイソフォーム（ｓＩＬ７Ｒ）の発現を増大させるベクター。
前記ベクターがウイルスベクターまたはプラスミドである、請求項９５に記載の方法。