JP2023545784A

JP2023545784A - Ｊａｋキナーゼ阻害剤としての小分子化合物及びその用途

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Publication number: JP2023545784A
Application number: JP2023521674A
Authority: JP
Inventors: 文奎方; 冠群李; 雨▲ティン▼ 蔡; 翔潘; 文浩朱; ▲楊▼ 汪; ▲増▼全王
Original assignee: 特科▲羅▼生物科技（成都）有限公司
Priority date: 2020-10-09
Filing date: 2021-09-24
Publication date: 2023-10-31
Also published as: CN112159394B; CN112159394A; TW202214599A; EP4219480A1; US20230406842A1; KR20240004212A; WO2022073425A1; TWI780943B

Abstract

本発明は、下記式（Ｉ）で表される化合物、又はその立体異性体、幾何異性体、互変異性体、水和物、溶媒和物、及び薬学的に許容される塩又はプロドラッグである小分子化合物を提供し、ここで、Ｒ₁～Ｒ₅はそれぞれ独立してＣ又はＮから選択され；Ｒは、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、置換ヘテロシクロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール又は置換ヘテロアリールから選択される。本発明による小分子化合物は、ＪＡＫキナーゼを阻害することができ、特に、ＪＡＫ１／Ｔｙｋ２二重阻害剤及びＴｙｋ２特異的阻害剤として阻害することができる。

Description

［本出願の相互参照］
本発明は、２０２０年１０月９日に提出された出願番号ＣＮ２０２０１１０７２６９９．４及び発明の名称「ＪＡＫキナーゼ阻害剤としての小分子化合物及びその用途」の特許出願の優先権を主張するものである。

［技術分野］
本発明は、小分子化合物の分野に属し、特に、関節リウマチ、潰瘍性大腸炎及び全身性エリテマトーデスなどの自己免疫疾患、又は乾癬、湿疹、白斑及び円形脱毛症などの関連する炎症性皮膚疾患を予防又は治療、緩和するために用いられる小分子化合物に関する。

ＪＡＫ（ヤヌスキナーゼ、Janus Kinase）は、細胞内非受容体型チロシンキナーゼのファミリーであり、ＪＡＫ１、ＪＡＫ２、ＪＡＫ３、及びＴｙｋ２の４つのメンバーが含まれる。ＪＡＫ－ＳＴＡＴ（ＳｉｇｎａｌＴｒａｎｓｄｕｃｅｒａｎｄＡｃｔｉｖａｔｏｒｏｆＴｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎｐｒｏｔｅｉｎｓ、転写タンパク質のシグナル伝達物質及び活性化因子）シグナル伝達経路は、炎症性サイトカインと受容体との組み合わせによって引き起こされるシグナルの細胞内伝達の主要な経路である。多くの証拠は、ＪＡＫ－ＳＴＡＴシグナル伝達経路が多くの疾患、特に関節リウマチ、エリテマトーデス、炎症性腸疾患、多発性硬化症、シェーグレン症候群、乾癬、円形脱毛症及び白斑などの自己免疫疾患、喘息、アレルギー性鼻炎、アレルギー性結膜炎、アトピー性皮膚炎、湿疹などのアレルギー疾患などの病因において不可欠な推進的役割を果たしていることを示している。したがって、ＪＡＫキナーゼ活性、特にＪＡＫ１、ＴＹＫ２キナーゼ活性を阻害するための高効率の小分子の使用は、炎症反応に関与するサイトカイン媒介シグナル伝達経路を遮断し、それによって炎症を抑制し、自己免疫性及び／又はアレルギー性炎症性疾患を効果的に治療することができる。

異なる炎症性疾患の発症過程において、Ｔ細胞はウイルス又は細菌感染などの異なる炎症誘発因子によって異なる方向に分化し、Ｔｈ１、Ｔｈ２、Ｔｈ１７などのＴ細胞サブセットを生成し、これらのＴ細胞はそれに応じて様々なサイトカインを生成する。例えば、ウイルス感染による急性炎症に関連するＴｈ１細胞はＩＦＮγ、ＩＬ－２を生成し、アレルギーに関連するＴｈ２細胞はＩＬ－４、ＩＬ－５、ＩＬ－１３を生成し、自己免疫に関連するＴｈ１７細胞はＩＬ－１７、ＩＬ－１２、ＩＬ－２１、ＩＬ－２２、ＩＬ－２３を生成し、これらのサイトカインは細胞表面の受容体に結合し、細胞内のＪＡＫを介して炎症シグナルを伝達して、疾患の病理学的過程を推進する。さらに重要なのは、病因が不明な多くの炎症性疾患は、異なる段階又は同じ段階に複数のＴ細胞サブセットが関与する複雑なメカニズムが公開されている。つまり、複数のＪＡＫ経路が関与しており、ＪＡＫを標的とした炎症性疾患の治療薬の開発に新たな用件を提示している。

いくつかの研究では、ＪＡＫ１阻害剤がＴｈ２系アレルギー性炎症を特異的に阻害できることが報告されているが、ＪＡＫ１及び／又はＴＹＫ２阻害剤の効果的な阻害に関する報告はほとんどない。しかし、ＪＡＫ１／Ｔｙｋ２二重阻害剤及びＴｙｋ２阻害剤は、特に自己免疫異常が病因となる炎症性疾患において、より広い臨床的展望があると考えている。さらに、より多くの炎症性疾患、特に炎症性皮膚疾患の病因には複数のＪＡＫが関与している可能性があるため、ＪＡＫ１及びＴｙｋ２の強力な単一又は二重阻害剤を開発することは非常に重要であり、特に皮膚疾患のための外用治療において、強力な阻害剤は優れた治療効果を発揮するほか、体系的な投薬による副作用を回避することができるが、これは同時に強力な活性阻害を必要とする。

本発明の目的は、高効率のＪＡＫ１／Ｔｙｋ２二重阻害剤及びＴｙｋ２特異的阻害剤を得て、異なる炎症性疾患の標的治療を提供することにある。例えば、ＪＡＫ１／Ｔｙｋ２二重阻害剤は、ＳＬＥ、白斑、ＩＢＤ及び湿疹及び他の炎症性疾患に適している可能性があり、Ｔｙｋ２特異的阻害剤は、関節リウマチ、乾癬、円形脱毛症などの治療により適している同時に、ＪＡＫ２の阻害によって引き起こされる造血阻害及び凝固異常を克服できる可能性がある。また、炎症性皮膚疾患などの外用に適したＪＡＫファミリーの阻害剤を、病因及び症状に応じて特性の異なるものを選択し、疾患に介入して症状を抑制することにより、良好な治療効果を得ることができる。

上記目的を達成するために、一態様において、本発明は、下記式Ｉで表される化合物、又はその立体異性体、幾何異性体、互変異性体、水和物、溶媒和物、及び薬学的に許容される塩又はプロドラッグである小分子化合物を提供する。

ここで、
Ｒ₁～Ｒ₅はそれぞれ独立してＣ又はＮから選択され、
Ｒは、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、置換ヘテロシクロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール又は置換ヘテロアリールから選択される。

一実施形態において、Ｒ₁～Ｒ₅のうち最大２つがＮである。

別の実施形態において、Ｒは、以下に示す式IIによって表される構造を有する。

ここで、
Ｒ₆はＣ又はＮから選択され、
Ｒ₇は、水素、ハロゲン、アルキル、アミノ、アミド、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール又はヘテロアリールから選択され、
Ｒ₈は、水素、アルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール又はヘテロアリールから選択される。

別の実施形態において、Ｒ₇及びＲ₈は、それぞれ独立して、水素、アルキル又はシクロアルキルから選択される。

別の実施形態において、Ｒは、以下に示す式IIIによって表される構造を有する。

ここで、
Ｒ₉はＣ又はＮから選択され、
Ｒ₁₀は、水素、ハロゲン、アルキル、アミノ、アミド、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール又はヘテロアリールから選択され、
Ｒ₁₁は、水素、アルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール又はヘテロアリールから選択される。

別の実施形態において、Ｒ₁₀及びＲ₁₁は、それぞれ独立して、水素、アルキル又はシクロアルキルから選択される。

別の実施形態において、前記アルキル基はメチル、エチル、プロピル又はイソプロピルであり、前記シクロアルキル基はシクロプロピル、シクロブチル又はシクロプロピルメチルである。

別の態様において、本発明は、さらにＪＡＫキナーゼの阻害における上記小分子化合物の用途を提供する。

別の態様において、本発明は、さらにＪＡＫ関連自己免疫疾患及び免疫関連炎症性皮膚疾患を予防又は治療するための医薬品の調製における上記小分子化合物の用途を提供する。

一実施形態において、前記自己免疫疾患は、関節リウマチ、強直性脊椎炎、潰瘍性大腸炎、クローン病、全身性エリテマトーデス、皮膚筋炎、多発性硬化症、Ｉ型糖尿病、シェーグレン症候群、及び血管炎のうちの少なくとも１つから選択される。

別の実施形態において、前記免疫関連炎症性皮膚疾患は、アトピー性皮膚炎、湿疹、円形脱毛症、乾癬、白斑、扁平苔癬、光沢苔癬、硬化性苔癬、脂肪織炎、座瘡、及び化膿性汗腺炎のうちの少なくとも１つからなる選択される。

本発明の作用及び効果は以下のとおりである：
本発明は、ＪＡＫキナーゼのタンパク質構造、特にＴｙｋ２のタンパク質構造にしたがって、小分子化合物の意図的かつ合理的な設計を行った。合成された化合物は、最初にＪＡＫキナーゼの生物化学的活性について試験され、ＩＣ₅₀によってＳＡＲ（構造活性相関（structure-activity relationship））を確立し、また２００ｎＭ未満のＩＣ₅₀を有する強力な阻害剤について細胞学的試験を実施し、化合物の選択性を決定した。具体的な活性実験データを参照すると、本発明に関与する化合物が良好なＪＡＫキナーゼ活性及び細胞生物学的活性の阻害能力を有することが分かる。

以下、本発明の具体的な実施形態について詳細に説明する。ここに記載された具体的な実施形態は、本発明の説明及び解釈のためにのみ使用され、本発明を限定することを意図していないことを理解されたい。

本明細書に開示される範囲のエンドポイント及び任意の値も、該正確な範囲又は値に限定されず、これらの範囲又は値は、これらの範囲又は値に近づく値を含むということを理解されたい。数値範囲の場合、各範囲のエンドポイント間、各範囲のエンドポイントと個々のポイント値との間、及び個々のポイント値の間を互いに組み合わせて、１つ以上の新しい数値範囲を取得することが可能であり、これらの数値範囲は本明細書に具体的に開示されていると見なされるべきである。

本発明を詳細に説明する前に、本明細書で使用される用語は、特定の実施形態を説明するものであり、本発明の範囲を限定することを意図せず、本発明の範囲は添付の特許請求の範囲によってのみ定義されることを理解されたい。本明細書に記載の本発明をより完全に理解できるようにするために、以下の用語が用いられ、それらの定義を以下のとおりである。特に明記しない限り、ここで使用されるすべての技術用語及び科学用語は、本発明が属する技術分野の当業者によって一般的に理解されるものと同じ意味を有する。

一態様において、本発明は、下記式Ｉで表される化合物、又はその立体異性体、幾何異性体、互変異性体、水和物、溶媒和物、及び薬学的に許容される塩又はプロドラッグである小分子化合物を提供する。

ここで、
Ｒ₁～Ｒ₄はそれぞれ独立してＣ又はＮから選択され、
Ｒは、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、置換ヘテロシクロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール又は置換ヘテロアリールから選択される。

即ち、Ｒ₁、Ｒ₂、Ｒ₃、Ｒ₄及びＲ₅は、Ｃ又はＮからそれぞれ独立して選択され得る。好ましい実施形態では、Ｒ₁～Ｒ₅の最大３つ（即ち、０、１、２又は３）がＮであってもよい。好ましい実施形態では、Ｒ₁～Ｒ₅の最大２つ（即ち、０、１又は２）がＮであってもよい。別の好ましい実施形態では、Ｒ₁～Ｒ₅の最大１つ（即ち、０又は１）がＮであってもよい。

本発明によれば、好ましい実施形態において、Ｒは、以下に示す式IIによって表される構造を有し得る。

ここで、
Ｒ₆はＣ又はＮから選択されてもよく、
Ｒ₇は、水素、ハロゲン、アルキル、アミノ、アミド、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール又はヘテロアリールから選択されてもよく、
Ｒ₈は、水素、アルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール又はヘテロアリールから選択されてもよい。

より好ましい実施形態において、Ｒ₇及びＲ₈は、それぞれ独立して、水素、アルキル又はシクロアルキルから選択されてもよく、さらに、前記アルキルはメチル、エチル、プロピル又はイソプロピルであってもよく、前記シクロアルキルはシクロプロピル、シクロブチル又はシクロプロピルメチルであってもよい。

例えば、具体的な実施形態において、Ｒ₆はＣであり、Ｒ₇は水素であり、Ｒ₈はエチルである。この場合、Ｒは以下に示す構造を有することができる。

例えば、具体的な実施形態において、Ｒ₆はＮであり、Ｒ₇はメチルであり、Ｒ₈はメチルである。この場合、Ｒは以下に示す構造を有することができる。

例えば、具体的な実施形態において、Ｒ₆はＣであり、Ｒ₇はメチルであり、Ｒ₈はエチルである。この場合、Ｒは以下に示す構造を有することができる。

例えば、具体的な実施形態において、Ｒ₆はＮであり、Ｒ₇はメチルであり、Ｒ₈は水素である。この場合、Ｒは以下に示す構造を有することができる。

本発明によれば、別の好ましい実施形態において、Ｒは、以下に示す式IIIによって表される構造を有する。

より好ましい実施形態において、Ｒ₁₀及びＲ₁₁は、それぞれ独立して、水素、アルキル又はシクロアルキルから選択され、さらに、前記アルキル基はメチル、エチル、プロピル又はイソプロピルであり、前記シクロアルキル基はシクロプロピル、シクロブチル又はシクロプロピルメチルである。

例えば、具体的な実施形態において、Ｒ₉はＮであり、Ｒ₁₀は水素であり、Ｒ₁₁はメチルである。この場合、Ｒは以下に示す構造を有することができる。

本発明によれば、別の好ましい実施形態において、Ｒはさらに以下に示す構造を有することができる。

本明細書で使用される「薬学的に許容される」という用語は、本発明による化合物の生物学的活性又は特性に影響を与えず、比較的非毒性である物質を意味する。即ち、該物質は、生物学的不良反応を引き起こしたり、組成物に含まれる成分のいずれと望ましくない形で相互作用したりすることなく、個体に投与することが可能である。本発明において、「薬学的に許容される塩」には、無機塩及び有機塩が含まれ、前記有機塩には、アンモニウム、リチウム、ナトリウム、カリウム、セシウム、カルシウム、マグネシウム、銅、アルミニウム、亜鉛、バリウム又は第４級アンモニウム塩が含まれるが、これらに限定されなく；前記無機塩には、アルギニン、ｔｅｒｔ－ブチルアミン、ジメチルアミン、ジエタノールアミン、エタノールアミン、エチレンジアミン、イミダゾール、リジン、メチルアミン、ピリジン、ピリジンカルボン酸エステル、ピペラジン、トリエチルアミン、トリエタノールアミン、トリメチルアミン又は尿素塩が含まれるが、これらに限定されない。

別の態様において、本発明はＪＡＫキナーゼを阻害するための、特にＪＡＫ１／Ｔｙｋ２二重阻害剤及びＴｙｋ２特異的阻害剤としての上記小分子化合物の用途を提供する。

別の態様において、本発明は、さらに自己免疫疾患及び免疫関連炎症性皮膚疾患を予防又は治療するための医薬品の調製における上記小分子化合物の用途を提供する。研究により、これらの疾患の病因はいずれもＪＡＫシグナル伝達の調節不全に関連していることが明らかとなっている。

本明細書で使用される「治療」という用語は、治療方案による治療薬の任意の投与によって前記治療方案が所望の効果、即ち、発症の一部又は完全な軽減、改善、緩和、阻害、遅延、重症度の低下、及び／又は特定の疾患、障害及び／又は病症の１つ又は複数の症状又は特徴の発生率の低下を達成することを意味する。いくつかの実施形態において、治療方案による治療剤の投与は、所望の効果の達成に関連する。そのような治療は、関連する疾患、障害、及び／又は病症を示さない被験者、及び／又は疾患、障害、及び／又は病症の初期徴候のみを示す被験者を対象としてもよい。代替的又は追加的に、そのような治療は、関連する疾患、障害及び／又は病症の１つ又は複数の識別された徴候を示す被験者を対象としてもよい。いくつかの実施形態において、治療は、関連する疾患、障害、及び／又は病症と診断された被験者を対象としてもよい。いくつかの実施形態において、治療は、関連する疾患、障害、及び／又は病症の発症リスクの増加と統計的に関連する１つ又は複数の感染しやすい素因を有する被験者を対象としてもよい。

本発明によれば、上記用途により調製される医薬品は、有効量の本発明による小分子化合物、及び薬学的に許容される賦形剤、担体又は希釈剤を含んでもよい。

本明細書で使用される「有効量」、「治療有効量」又は「薬学的有効量」という用語は、任意の薬物治療に適した適切な利益／リスク比で、治療対象に治療効果を与える治療薬の量を意味する。そのような治療効果は、客観的（即ち、いくつかの試験又は標記によって測定可能）でもよく、又は主観的（即ち、被験者からの指示又は感じた効果）でもよい。いくつかの実施形態において、「治療有効量」とは、疾患に関連する症状を改善し、疾患の発症を予防又は遅延させ、及び／又は疾患の症状の重症度又は頻度を低下させることなどによって、関連する疾患又は病症を効果的に治療、改善又は予防（例えば、発症の遅延）し、及び／又は検出可能な治療効果又は予防効果を示す、治療薬又は組成物の量を意味する。

当業者は、投与される前記小分子化合物の治療有効量が、被験者及び疾患の性質及び重症度、被験者の身体的状態、治療方案（例えば、第２治療薬の使用の有無）、及び選択された投与経路に応じて変化することを認識するだろう。適切な投与量は、当業者によって容易に決定され得る。一方、該薬物の個々の投与の最適な回数及び間隔は、治療される病状の性質及び程度、投与の形態、経路及び部位、治療される特定の被験者の年齢及び病状によって決定され、且つ、最終的には医師によって適切な投与量が決定される。この投与量は、必要に応じて複数回繰り返してもよく、副作用が発生した場合は、通常の臨床診療に従って、投与の量及び／又は頻度を変更又は減少してもよい。

本発明において、「薬学的に許容される賦形剤、担体又は希釈剤」には、関連する政府管理部門によって、ヒト又は家畜のための使用に許容可能と承認された、任意の補助剤、担体、賦形剤、流動促進剤、甘味料、希釈剤、保存剤、染料／着色剤、香味剤、界面活性剤、湿潤剤、分散剤、懸濁剤、安定剤、等張剤、溶剤又は乳化剤などが含まれるが、これらに限定されない。

本発明によれば、さらに、上記用途により調製される医薬品は、本発明による小分子化合物を有効成分として含有する以外に、自己免疫疾患及び免疫関連炎症性皮膚疾患の予防又は治療のために使用可能な薬剤を他の有効成分として含有してもよい。前記薬剤の実施例では、ビタミンＤ誘導体、ビタミンＡ誘導体、グルココルチコイド、カルシニューリン阻害剤、非ステロイド系抗炎症剤等が挙げられるが、これらに限定されない。該薬剤が複数の有効成分を含有する場合、各有効成分は、医師の判断に従って、同時、順次又は別々に投与されてもよい。

一方、本発明の小分子化合物は、経口、経皮、皮下、鼻腔内、静脈内、筋肉内、くも膜下腔内、領域又は局所（例えば、粘膜）などの様々な経路によって患者に投与することができる。任意の場合における最適な投与経路は、被験者及び疾患の性質及び重症度、及び被験者の身体的状態などによって決定される。一実施形態において、本発明の小分子化合物は、静脈内投与を可能とする。別の実施形態において、本発明の小分子化合物は、経口投与を可能とする。したがって、異なる投与形態によって、本発明による医薬品は、異なる剤形に調製することができる。例えば、一実施形態において、前記医薬品は、錠剤、カプセル剤、丸薬、顆粒剤、ネブライザー剤、スプレー剤、又は注射剤として調製することができる。

研究を通じて、本発明の小分子化合物又はそれにより調製された医薬品が、ＪＡＫ関連自己免疫疾患及び免疫関連炎症性皮膚疾患の予防又は治療に使用される場合に優れた効果を発揮できることを発見した。具体的には、前記自己免疫疾患には、関節リウマチ、強直性脊椎炎、潰瘍性大腸炎、クローン病、全身性エリテマトーデス、皮膚筋炎、多発性硬化症、Ｉ型糖尿病、シェーグレン症候群、及び血管炎などが含まれるが、これらに限定されず；前記免疫関連炎症性皮膚疾患には、アトピー性皮膚炎、湿疹、円形脱毛症、乾癬又は白斑、扁平苔癬、光沢苔癬、硬化萎縮性苔癬、脂肪織炎、座瘡及び化膿性汗腺炎などが含まれるが、これらに限定されない。

以下、実施例を通じて、本発明の特定の小分子化合物の効果について詳細に説明する。

＜実施例１：化合物１の一般的な合成方法（ＴＤＭ－１８０９７３）＞
ステップ１：化合物１ｃ（２－クロロ－４－（１Ｈ－ピロール－３－イル）ピリミジン）の調製
２５０ｍＬの３口フラスコに、化合物１ａ（２ｇ、１３．４３ｍｍｏｌ）、化合物１ｂ（４．６９ｇ、１３．４３ｍｍｏｌ）、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（９４０ｍｇ、１．０８ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（３．７ｇ、２６．８５ｍｍｏｌ）、ジオキサン（１２０ｍＬ）及び水（１２０ｍｌ）を添加する。反応液を数回窒素置換した後、温度を８０℃に上げて４５分間反応させ、ＬＣＭＳ［Ｍ＋Ｈ］⁺＝１８０で、反応完了が検出される。後処理：反応液を濃縮乾固し、得られた粗生成物をカラム［溶離液：（ＥＡ／ＰＥ）＝０～３０％］に通して、黄色固体の目的化合物（化合物１ｃ、１．１３ｇ、収率４６．８６％）を得る。
LCMS [M+1]⁺ = 180。

ステップ２：化合物１ｅ（３－（３－（２－クロロピリミジン－４－イル）－１Ｈ－ピロール－１－イル）－３－（シアノメチル）アゼチジン－１－カルボン酸ターシャリーブチルエステル）の調製
化合物１ｃ（１．２３ｇ、６．８８ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（１００ｍｌ）溶液に、化合物１ｄ（１．４７ｇ、７．５６ｍｍｏｌ）、１，８－ジアザビシクロウンデカ－７－エン（７１０ｍｇ、４．６８ｍｍｏｌ）を添加し、反応液を７０℃まで昇温させ、２時間攪拌する。ＬＣＭＳ［Ｍ＋Ｈ］⁺＝３７４で、反応完了が検出される。後処理：反応液を濃縮乾固し、得られた粗生成物をカラム［溶離液：（ＥＡ／ＰＥ）＝０～３０％］に通して、黄色固体の目的化合物（化合物１ｅ、２．０８５ｇ、収率８１．０９％）を得る。
LCMS [M+H]⁺ = 374。

ステップ３：化合物１ｆ（２－（３－（３－（２－クロロピリミジン－４－イル）－１Ｈ－ピロール－１－イル）アゼチジン－３－イル）アセトニトリル）の調製
化合物１ｅ（１．６ｇ、４．３ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（１２８ｍｌ）溶液に、トリフルオロ酢酸（２５．６ｍｌ）を加え、反応液を室温で１時間撹拌する。ＬＣＭＳ［Ｍ＋Ｈ］⁺＝２７４で、反応完了が検出される。後処理：反応溶液を氷浴下でトリエチルアミンで中和し、濃縮乾固し、得られた粗生成物をカラム［溶離液：（Ｄ／Ｍ＝１０／１）：ＤＣＭ＝０～５０％］通して、黄色固体の目的化合物（化合物１ｆ、９５０ｍｇ、収率８９．７％）を得る。
LCMS [M+H]⁺ = 274。

ステップ４：化合物１ｈ（（Ｓ）－２－（３－（３－（２－クロロピリミジン－４－イル）－１Ｈ－ピロール－１－イル）－１－（２，２－ジフルオロシクロプロパン－１－カルボニル）アゼチジン－３－イル））の調製
化合物１ｆ（１ｇ、３．６５ｍｍｏｌ）のＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（１００ｍｌ）溶液に、２－（７－アザベンゾトリアゾール）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスファート（２．７８ｇ、７．３ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（５ｇ、７．３ｍｍｏｌ）及び化合物１ｇ（４５０ｍｇ、３．６５ｍｍｏｌ）を添加する。反応液を室温で１時間撹拌し、ＬＣＭＳ［Ｍ＋Ｈ⁺＝３７８で、反応完了が検出される。後処理：反応液を濃縮乾固し、得られた粗生成物をカラム［溶離液：（ＥＡ／ＰＥ）＝０～５０％］に通して、黄色固体の目的化合物（化合物１ｈ、１１２０ｍｇ、収率８１．１６％）を得る。
LCMS[ M+H]⁺ = 378。

ステップ５：化合物１（（Ｓ）－４－（（４－（１－（３－（シアノメチル）－１－（２，２－ジフルオロシクロプロパン－１－カルボニル）アゼチジン－３－イル）－１Ｈ－ピロール－）３－イル）ピリミジン－２－イル）アミノ）－Ｎ－エチルベンズアミド）の調製
化合物１ｈ（１２０ｍｇ、０．３１７ｍｍｏｌ）のｎ－ブタノール（２０ｍｌ）溶液に、化合物１ｉ（１０４ｍｇ、０．６４ｍｍｏｌ）及びｐ－トルエンスルホン酸一水和物（１２０．８ｍｇ、０．６４ｍｍｏｌ）を添加する。反応溶液を１１０℃に昇温させ、２時間撹拌し、ＬＣＭＳ［Ｍ＋Ｈ］⁺＝５０６で、反応完了が検出される。後処理：反応液を濃縮乾固し、白色固体の目的化合物（化合物１、２９ｍｇ、収率１８．１％）を得る。
LCMS［M+H⁺ = 506.2。
¹H NMR（400 MHz、DMSO）δ 9.71（s、1H）、8.41（d、J = 5.3 Hz、1H）、8.25（t、J = 5.5 Hz、1H）、7.95 - 7.86（m、3H）、7.79（d, J = 8.8 Hz、2H）、7.25 - 7.10（m、2H）、6.84（dd、J = 2.9、1.6 Hz、1H）、4.71（ddd、J = 52.1、41.5、9.6 Hz、2H）、4.48 - 4.19（m、2H）、3.60（s、2H）、3.30 - 3.22（m、2H）、2.79（dq、J = 13.2、8.8 Hz、1H）、2.00 - 1.84（m、2H）、1.12（t, J = 7.2 Hz、3H）。

＜実施例２：化合物２の一般的な合成方法（ＴＤＭ－１８０９７５）＞
ステップ１：化合物２ｂ（３－メチル－５－ニトロピコリルアミド）の調製
化合物２ａ（３ｇ、１８．４ｍｍｏｌ）及び濃硫酸（１８ｍｌ）の混合溶液を、８０℃まで加熱し、２５分間攪拌する。ＬＣＭＳ［Ｍ＋Ｈ］⁺＝１８２で、反応完了が検出される。後処理：反応液を室温まで冷却し、氷水（１００ｍｌ）に注ぎ、炭酸ナトリウムでｐＨを中性に調整し、混合液を酢酸エチル（３×１００ｍｌ）で３回抽出し、有機相を合わせ、飽和食塩水で洗浄、無水硫酸ナトリウムで乾燥、吸引ろ過、濃縮、乾燥して、黄色の目的化合物（化合物２ｂ、３．３３ｇ、収率９４．２％）を得る。
LCMS［M+1］⁺ = 182。

ステップ２：化合物２ｃ（５－アミノ－３－メチルピコリルアミド）の調製
窒素保護下で、化合物２ｂ（３．１４ｇ、１７．３３ｍｍｏｌ）のメタノール（１５０ｍｌ）溶液に、パラジウム炭素（１０％、３００ｍｇ）を添加し、真空下で数回水素置換し、反応液を室温で水素バルーン下で２時間攪拌する。ＬＣＭＳ［Ｍ＋Ｈ］⁺＝１５２で、反応完了が検出される。後処理：反応液を濾過してパラジウム炭素を除去し、濾液を濃縮乾固し、得られた粗生成物を再結晶して、白色固体の目的化合物（化合物２ｃ、２．３ｇ、収率８７．８％）を得る。
LCMS [M+1] ⁺ = 152。

ステップ３：化合物２（（Ｓ）－５－（（４－（１－（３－（シアノメチル）－１－（２，２－ジフルオロシクロプロパン－１－カルボニル）アゼチジン－３－イル）－１Ｈ－ピロール－）３－イル）ピリミジン－２－イル）アミノ）－３－メチルピリジンアミド）の調製
化合物２ｄ（１５０ｍｇ、０．３９７ｍｍｏｌ）のｎ－ブタノール（１５ｍｌ）溶液に、化合物２ｃ（１２０ｍｇ、０．７９ｍｍｏｌ）及びｐ－トルエンスルホン酸一水和物（１５１ｍｇ、０．７９ｍｍｏｌ）を添加する。反応液を１１０℃まで加熱し、７時間攪拌し、ＬＣＭＳ［Ｍ＋Ｈ］⁺＝４９３で、反応完了が検出される。後処理：反応液を濃縮乾固し、残留物を水及び酢酸エチル（３×３０ｍｌ）で抽出し、有機相を合わせ、飽和食塩水で洗浄、無水硫酸ナトリウムで乾燥、吸引ろ過、乾燥して、粗生成物を調製してオフホワイトの固体の目的化合物（化合物２、７．９ｍｇ、収率４．０４％）を得る。
LCMS［M+H］⁺ = 493.2。
¹H NMR（400 MHz、DMSO）δ 9.89（s、1H）、8.80（s、1H）、8.44（d、J = 5.3 Hz、1H）、8.32（s、1H）、7.89（d、J = 21.0） Hz、2H）、7.26 ～ 7.15（m、3H）、6.84（dd、J = 2.9、1.6 Hz、1H）、4.71（ddd、J = 53.5、41.8、9.6 Hz、2H）、4.46 ～ 4.24（m、 2H）、3.58（d、J = 16.7 Hz、2H）、2.78（dt、J = 11.7、8.9 Hz、1H）、2.61（s、3H）、2.00 - 1.84（m、2H）。

＜実施例３：化合物３の一般的な合成方法（ＴＤＭ－１８０９７６）＞
ステップ１：化合物３ｂ（エチル３－メチル－５－ニトロリノレエート）の調製
０℃のエタノール（１６０ｍｌ）溶液に、濃硫酸（４０ｍｌ）をゆっくりと添加し、反応液に化合物３ａ（４ｇ、２４．５ｍｍｏｌ）をバッチで加え、反応液を加熱還流させ、７２時間攪拌する。ＬＣＭＳ［Ｍ＋Ｈ］⁺＝２１１で、反応完了が検出される。後処理：反応液を室温に冷却し、水（５０ｍｌ）に注ぎ、酢酸エチル（３×５０ｍＬ）で３回抽出し、有機相を合わせ、飽和食塩水で洗浄、無水硫酸ナトリウムで乾燥、吸引ろ過、濃縮乾固して、黄色の目的化合物（化合物３ｂ、３．７３ｇ、収率７２．５６％）を得る。
LCMS［M+1］⁺ = 211。

ステップ２：化合物３ｃ（３－メチル－５－ニトロリノール酸）の調製
化合物３ｂ（４．２ｇ、２０．０３ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（２００ｍｌ）溶液に、１Ｎ水酸化ナトリウム（１２０ｍｌ、１２０．１６ｍｍｏｌ）溶液を添加し、反応液を室温で１時間撹拌し、ＬＣＭＳ［Ｍ＋Ｈ］⁺＝１８３で、反応完了が検出される。後処理：反応液を氷水（３０ｍｌ）にゆっくりと注ぎ、水相をジクロロメタン（２×１５ｍＬ）で２回抽出し、水相を１Ｎ希塩酸でｐＨ＝５～６に調整し、酢酸エチル（３×１５ｍＬ）で３回抽出し、有機相を合わせ、飽和食塩水で洗浄、無水硫酸ナトリウムで乾燥、吸引濾過、濃縮乾固し、粗生成物を再結晶して、黄色固体の目的化合物（化合物３ｃ、３．０ｇ、収率８２．１９％）を得る。
LCMS [M+1] ⁺ = 183。

ステップ３：化合物３ｅ（Ｎ，３－ジメチル－５－ニトロリノレアミド）の調製
化合物３ｃ（３．０ｇ、１６．４８ｍｍｏｌ）のＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（１００ｍｌ）溶液に、２－（７－アザベンゾトリアゾール）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスファート（１０．０３ｇ、２６．３７ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（７．５ｇ、５７．６８ｍｍｏｌ）及び化合物３ｄ（２．２６ｇ、３２．９６ｍｍｏｌ）を添加する。反応液を室温で１時間撹拌し、ＬＣＭＳ［Ｍ＋Ｈ］⁺＝１９６で、反応完了が検出される。後処理：反応液を濃縮乾固し、得られた粗生成物をカラム［溶離液：（ＥＡ／ＰＥ）＝０～３０％］に通し、粗生成物を再結晶して、黄色固体の目的化合物（化合物３ｅ、３．０ｇ、収率９３．７５％）を得る。
LCMS [M+1] ⁺ = 196。

ステップ４：化合物３ｆ（５－アミノ－Ｎ，３－ジメチルピリジンカルボキサミド）の調製
窒素保護下で、化合物３ｅ（３．５ｇ、１７．９ｍｍｏｌ）のメタノール（２００ｍｌ）溶液に、パラジウム炭素（１０％、３５０ｍｇ）を加え、真空下で数回水素置換し、反応液を室温で水素バルーン下で２時間攪拌する。ＬＣＭＳ［Ｍ＋Ｈ］⁺＝１６６で、反応完了が検出される。後処理：反応液を濾過し、パラジウム炭素を除去し、ろ液を濃縮乾固し、得られた粗生成物をカラム［溶離液：（Ｄ／Ｍ＝１０／１）：ＤＣＭ＝０～１０％］に通し、再結晶して、黄色固体の目的化合物（化合物３ｆ、１．８ｇ、収率６０．８７％）を得る。
LCMS [M+1] ⁺ = 166。

ステップ５：化合物３（（Ｓ）－５－（（４－（１－（３－（シアノメチル）－１－（２，２－ジフルオロシクロプロパン－１－カルボニル）アゼチジン－３－イル）－１Ｈ－ピロール－３－イル）ピリミジン－２－イル）アミノ）－Ｎ，３－ジメチルピリジンカルボン酸アミド）の調製
化合物３ｇ（１５０ｍｇ、０．４０ｍｍｏｌ）のｎ－ブタノール（３５ｍｌ）溶液に、化合物３ｆ（１３１．２ｍｇ、０．７９ｍｍｏｌ）及びｐ－トルエンスルホン酸一水和物（１５１．０３ｍｇ、０．７９ｍｍｏｌ）を添加する。反応液を１１０℃まで加熱し、７時間攪拌し、ＬＣＭＳ［Ｍ＋Ｈ］⁺＝５０７で、反応完了が検出される。後処理：反応液を濃縮乾固し、残留物を水及び酢酸エチル（３×３０ｍｌ）で抽出し、有機相を合わせ、飽和食塩水で洗浄、無水硫酸ナトリウムで乾燥、吸引濾過、乾燥し、粗生成物を調製して、オフホワイトの固体の目的化合物（化合物３、６．８ｍｇ、収率３．３８％）を得る。
LCMS［M+1］⁺ = 507.2。
¹H NMR（400 MHz、DMSO）δ 9.88（s、1H）、8.82（d、J = 2.3 Hz、1H）、8.45（dd、J = 8.9、4.8 Hz、2H）、8.30（s、1H）、7.91（s、1H）、7.32 - 7.10（m、2H）、6.83（dd、J = 2.9、1.6 Hz、1H）、4.71（ddd、J = 53.5、41.7、9.6 Hz, 2H）、4.48 - 4.19（ m、2H）、3.60（s、2H）、2.82 - 2.70（m、4H）、2.61（s、3H）、1.97 - 1.85（m、2H）。

＜実施例４：化合物４の一般的な合成方法（ＴＤＭ－１８０９７８）＞

ステップ１：化合物４（（Ｓ）－４－（（４－（１－（３－（シアノメチル）－１－（２，２－ジフルオロシクロプロパン－１－カルボニル）アゼチジン－３－イル）－１Ｈ－ピロール－）３－イル）ピリミジン－２－イル）アミノ）－Ｎ－エチル－２－メチルベンズアミド）の調製
同様の方法の調製により化合物４（オフホワイトの固体、１６．８ｍｇ、収率４．３％）を得る。
¹H NMR（400 MHz、DMSO）δ 9.52（s、1 H）、8.38（d、J = 5.2 Hz、1H）、8.05（t、J = 5.6 Hz、1H）、7.87（t、J = 1.8 Hz、1H）、7.74（d、J = 2.5 Hz、1H）、7.69（d、J = 8.5 Hz、1H）、7.29（d、J = 8.4 Hz、1H）、7.23 - 7.14（m、1H）、7.10（dd、J = 5.2、3.8 Hz、1H）、6.83（dd、J = 2.9、1.6 Hz、1H）、4.71（ddd、J = 53.1、42.0、9.6 Hz、2H）、4.48 - 4.19（m、2H）、3.60（s、2H）、3.26 - 3.17（m、2H）、2.79（dd、J = 12.3、9.6 Hz、1H）、2.34（d、J = 13.1 Hz、3H）、1.93（dd、J = 17.3、9.3 Hz）、2H）、1.11（t、J = 7.2 Hz、3H）。
LCMS [M+H] ⁺ =520.2。

＜実施例５：化合物５の一般的な合成方法（ＴＤＭ－１８０９９６）＞

ステップ１：化合物５（２－１－（（Ｓ）－２，２－ジフルオロシクロプロパン－１－カルボニル）－３－（３－（２－（（６－（１－ヒドロキシプロパン－２－塩基）ピリジン－３－イル）アミノ）ピリミジン－４－イル）－１Ｈ－ピロール－１－イル）アゼチジン－３－イル）アセトニトリル）の調製
同様の方法の調製により化合物５（オフホワイトの固体、１９．２ｍｇ、収率７．３５％）を得る。
¹H NMR（401 MHz、DMSO）δ 9.50（s、1H）、8.81（d、J = 2.5 Hz、1H）、8.36（d、J = 5.3 Hz、1H）、8.21（d、J = 8.5 Hz、1H）、8.15（s、1H）、7.87（s、1H）、7.17（dd、J = 8.3、5.6 Hz、2H）、7.10（dd、J = 5.2、4.0 Hz、1H）、6.81（dd、J = 2.8、1.6 Hz、1H）、4.75（dt、J = 18.0、9.6 Hz、2H）、4.58（d、J = 9.5 Hz、1H）、4.42（dd、J = 10.6、5.9 Hz、1H）、4.36 - 4.21（m、1H）、3.68 - 3.57（m、3H）、3.48（dd、J = 10.2、7.0 Hz、1H）、2.90（dd、J = 13.7、 6.9 Hz、1H）、2.83 - 2.72（m、1H）、1.99 - 1.81（m、2H）、1.19（d、J = 6.9 Hz、3H）。
LCMS [M+H]⁺ =494.2。

＜実施例６：化合物６の一般的な合成方法（ＴＤＭ－１８０９８２）＞
ステップ１：化合物６ｃ（３－（シアノメチル）－３－（４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）－１Ｈ－ピラゾール－１－の調製）イル）アゼチジン－１－カルボン酸ｔｅｒｔ－ブチルエステル）の調製
室温下で、化合物６ａ（２ｇ、１０．３ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（４０ｍＬ）混合物に、化合物６ｂ（２ｇ、１０．３ｍｍｏｌ）及び１，８－ジアザビシクロウンデク－７－エン（１ｍＬ、１０．３ｍｍｏｌ）を加え、混合物を７０℃まで加熱し、一晩攪拌する。反応終了後、混合物を減圧濃縮し、残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（石油エーテル／酢酸エチル＝０％～５０％）で精製して、白色固体の目的化合物（化合物６ｃ、２．４２ｇ、収率６０．５％）を得る。
LCMS [M - C₄H₉ ]⁺ = 333.2。

ステップ２：化合物６ｅ（３－（４－（２－クロロピリミジン－４－イル）－１Ｈ－ピラゾール－１－イル）－３－（シアノメチル）アゼチジン－１－カルボン酸ｔｅｒｔ－ブチルエステル）の調製
化合物６ｄ（２．１３ｇ、５．４８６ｍｍｏｌ）、化合物６ｃ（１．３１ｇ、８．７７７ｍｍｏｌ）、炭酸ナトリウム（１．１６ｇ、１０．９７２ｍｍｏｌ）、１，１’－ビスジフェニルホスフィノフェロセンジクロロパラジウム（４０１ｍｇ、０．５４９ｍｍｏｌ）の混合物に、ジオキサン（１２０ｍｌ）及び水（２０ｍｌ）を加え、窒素置換を数回行った後、８０℃に昇温させて１時間攪拌する。混合物を減圧濃縮し、残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（石油エーテル／酢酸エチル＝０％～４２％）で精製して、淡黄色固体の目的化合物（化合物６ｅ、１．６７ｇ、収率８１．２％）を得る。
LCMS[M+H]⁺ = 375。

ステップ３：化合物６ｆ（２－（３－（４－（２－クロロピリミジン－４－イル）－１Ｈ－ピラゾール－１－イル）アゼチジン－３－イル）アセトニトリル）の調製
化合物６ｅ（１．４ｇ、３．７３５ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（８０ｍｌ）溶液に、トリフルオロ酢酸（１６ｍｌ）を滴下し、混合物を室温で１時間撹拌する。反応終了後、混合物に水を加えて、水酸化ナトリウム水溶液で中和し、ジクロロメタン（８０ｍｌ×３）で抽出し、有機層を合わせ、飽和食塩水（１００ｍｌ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾液を減圧濃縮し、残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ジクロロメタン／１０％メタノールを含むジクロロメタン溶液＝０％～１００％）で精製し、白色固体の目的化合物（化合物６ｆ、５７１．１ｍｇ、収率５５．７％）を得る。
LCMS[M+H]⁺ = 275。

ステップ４：化合物６ｈ（（Ｓ）－２－（３－（４－（２－クロロピリミジン－４－イル）－１Ｈ－ピラゾール－１－イル）－１－（２，２－ジフルオロシクロプロパン－１－カルボニル））アゼチジン－３－イル）アセトニトリル）の調製
化合物６ｇ（２９３．３ｍｇ、２．４０３ｍｍｏｌ）のＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（３０ｍｌ）溶液に、２－（７－アザベンゾトリアゾール）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスファート（９１３．７ｍｇ、２．４０３ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（７７６．２ｍｇ、３．００３ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を５分間攪拌した後、化合物６ｆ（５５０ｍｇ、２．００２ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で１時間攪拌する。反応終了後、水を加えて酢酸エチル（５０ｍｌ×３）で抽出し、有機層を合わせて水（５０ｍＬ×３）及び飽和食塩水（５０ｍｌ）で洗浄し、ナトリウムで乾燥し、ろ液を減圧濃縮し、残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（石油エーテル／酢酸エチル＝０％～５０％）で精製し、白色固体の目的化合物（化合物６ｈ、５６６ｍｇ、収率７４．６％）を得る。
LCMS[M+H]⁺ = 379。

ステップ５：化合物６（（Ｓ）－４－（（４－（１－（３－（シアノメチル）－１－（２，２－ジフルオロシクロプロパン－１－カルボニル）アゼチジン－３－イル）－１Ｈ－ピラゾール－４－イル）ピリミジン－２－イル）アミノ）－Ｎ－エチルベンズアミド）の調製
化合物６ｈ（５０ｍｇ、０．１３２ｍｍｏｌ）のｎ－ブタノール（５ｍｌ）溶液に、化合物６ｉ（４３．４ｍｇ、０．２６４ｍｍｏｌ）及びｐ－トルエンスルホン酸一水和物（５０．２ｍｇ、０．２６４ｍｍｏｌ）を添加する。得られた混合物を１１０℃まで加熱し、３時間攪拌する。混合物を減圧濃縮し、残渣を分取ＨＰＬＣ（ギ酸）で精製し、白色固体の目的化合物ＴＤＭ－１８０９８２（化合物６、１１．４ｍｇ、収率１７．１％）を得る。
LCMS[M+H]⁺ = 507.2。
¹H NMR（400 MHz、DMSO）δ 9.85（s、1H）、8.86（d、J = 4.6 Hz、1H）、8.51（d、J = 5.2 Hz、1H）、8.32（s、1H）、8.27（t、J = 5.5 Hz、1H）、7.90（d、J = 8.8 Hz、2H）、7.81（d、J = 8.8 Hz、2H）、7.23（dd、J = 5.2、1.4 Hz、1H）、4.86（dd、J = 35.3、9.6 Hz、1H）、4.67（dd、J = 41.8、9.6 Hz、1H）、4.51（t、J = 9.9 Hz、1H）、4.31（t、J = 10.2 Hz、1H）、3.72（d、J = 2.8 Hz、2H）、3.30 - 3.23（m、2H）、2.90 - 2.74（m、1H）、1.92（qd、J = 11.0、7.4 Hz、2H）、1.12（t、J = 7.2Hz、3H）。

＜実施例７：化合物７の一般的な合成方法（ＴＤＭ－１８０９８３）＞

ステップ１：化合物７（（Ｓ）－５－（（４－（４－（４－（２，２－ジフルオロシクロプロパン－１－カルボキサミド）フェニル）ピリミジン－２－イル）アミノ）－Ｎ，３－ジメチルピリジンアミド）の調製
同様の方法の調製により化合物７（白色固体、１２．７ｍｇ、収率１４．５％）を得る。
¹H NMR（400 MHz、DMSO）δ 9.66（s、1H）、8.84（d、J = 4.2 Hz、1H）、8.49（d、J = 5.2 Hz、1H）、8.30（s、1H）、8.06（t、J=5.6Hz、1H）、7.73 - 7.65（m、2H）、7.34 - 7.27（m、1H）、7.19（dd、J=5.1、1.9Hz、1H）、4.84（dd、J=34.2、9.6Hz）、1H）、4.66（dd、J = 42.4、9.5 Hz、1H）、4.49（t、J = 10.3 Hz、1H）、4.30（t、J = 10.2 Hz、1H）、3.72（d、J = 1.8 Hz、2H）、3.27 - 3.16（m、2H）、2.82（ddd、J = 19.2、12.0、9.0 Hz、1H）、2.36（s、3H）、2.00 - 1.85（m、2H）、1.11（t、J = 7.2 Hz、3H）。
LCMS[M+H]⁺ =521.1。

＜実施例８：化合物８の一般的な合成方法（ＴＤＭ－１８０９８５）＞
ステップ１：化合物８（（Ｓ）－５－（（４－（１－（３－（シアノメチル）－１－（２，２－ジフルオロシクロプロパン－１－カルボニル）アゼチジン－３－イル）－１Ｈ－ピラゾール－４－イル）ピリミジン－２－イル）アミノ）－Ｎ，３－ジメチルピリジンカルボン酸アミド）の調製
化合物８ａ（８０ｍｇ、０．２５８ｍｍｏｌ）のｎ－ブタノール（８ｍＬ）溶液に、化合物８ｂ（８５ｍｇ、０．５１７ｍｍｏｌ）及びｐ－トルエンスルホン酸一水和物（９８ｍｇ、０．５１７ｍｍｏｌ）を加える。得られた混合物を１１５℃まで加熱し、一晩撹拌する。反応終了後、室温まで冷却し、水を加え、酢酸エチル（３０ｍｌ×３）で抽出し、有機層を合わせ、飽和食塩水（５０ｍｌ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、ろ液を減圧濃縮し、残渣を分取ＨＰＬＣ（ギ酸）で精製し、オフホワイト固体の目的化合物ＴＤＭ－１８０９８５（化合物８、１０．２ｍｇ、収率６．２％）を得る。
LCMS [M+H]⁺ =508.2。
¹H NMR（400 MHz、DMSO）δ 10.01（s、1H）、8.88（d、J = 4.5 Hz、1H）、8.81（d、J = 2.3 Hz、1H）、8.55（d、J = 5.2 Hz、1H）、8.46（d、J = 4.8 Hz、1H）、8.30（s、1H）、8.27（d、J = 2.1 Hz、1H）、7.28（dd、J = 5.2、1.9 Hz、1H）、4.85（dd、J = 33.3、9.6 Hz、1H）、4.67（dd、J = 42.3、9.6 Hz、1H）、4.49（t、J = 10.4 Hz、1H）、4.31（t、J = 10.3 Hz、1H）、3.72（s、2H）、2.89 - 2.74（m、4H）、2.61（s、3H）、2.01 - 1.84（m、2H）。

＜実施例９：化合物９の一般的な合成方法（ＴＤＭ－１８０９８６）＞

ステップ１：化合物９（（Ｓ）－５－（（４－（１－（３－（シアノメチル）－１－（２，２－ジフルオロシクロプロパン－１－カルボニル）アゼチジン－３－イル）－１Ｈ－ピラゾール－４－イル）ピリミジン－２－イル）アミノ）－３－メチルピリジンアミド）の調製
同様の方法の調整により化合物９（オフホワイトの固体、１０．７ｍｇ、収率８．４％）を得る。
¹H NMR（400 MHz、DMSO）δ 10.03（s、1H）、8.88（d、J = 4.4Hz、1H）、8.80（d、J = 2.0Hz、1H）、8.55（d、J = 5.2Hz、1H）、8.29（d、J = 11.4 Hz、2H）、7.87（s、1H）、7.38 - 7.16（m、2H）、4.85（dd、J = 33.3、9.6 Hz、1H）、4.67（dd、J = 42.5、9.6 Hz、1H）、4.49（t、J = 10.4 Hz、1H）、4.31（t、J = 10.2 Hz、1H）、3.72（s、2H）、2.90 - 2.75（m、1H）、2.61（s、3H）、1.94（d、J = 8.0 Hz、2H）。
LCMS[M+H ]⁺ = 494.3。

＜実施例１０：化合物１０の一般的な合成方法（ＴＤＭ－１８０９９０）＞
ステップ１：化合物１０（２－（１－（（Ｓ）－２，２－ジフルオロシクロプロパン－１－カルボニル）－３－（４－（２－（（（６－（１－ヒドロキシプロパン－２－イル））ピリジン））－３－イル）アミノ）ピリミジン－４－イル）－１Ｈ－ピラゾール－１－イル）アゼチジン－３－イル）アセトニトリル）の調製
化合物１０ａ（１９０ｍｇ、０．５０２ｍｍｏｌ）、化合物１０ｂ（１５３ｍｇ、１．００３ｍｍｏｌ）、酢酸パラジウム（１１．４ｍｇ、０．０５０ｍｍｏｌ）、４，５－ビス（ジフェニルホスフィン）－９，９－ジメチルキサンテン（５８．１ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ）及び炭酸セシウム（４６１ｍｇ、１．５０６ｍｍｏｌ）の混合物に、ジオキサン（４０ｍＬ）を加える。混合物をアルゴンで数回置換し、混合物を１００℃まで加熱し、１時間攪拌する。反応終了後、反応物に水（６０ｍＬ）を加え、酢酸エチル（６０ｍＬ×３）で抽出し、有機層を合わせ、水（１００ｍＬ）及び飽和食塩水（１００ｍＬ×２）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾液を減圧濃縮し、残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（石油エーテル／酢酸エチル＝０％～７０％）及び分取ＨＰＬＣ（ギ酸）で精製し、白色固体の目的化合物ＴＤＭ－１８０９９０（化合物１０、７６．６ｍｇ、収率３０．９％）を得る。
LCMS [M+H]⁺ = 495.2。
¹H NMR（400 MHz、DMSO）δ 9.65（s、1H）、8.85（d、J = 4.3Hz、1H）、8.79（s、1H）、8.47（d、J = 5.2Hz、1H）、8.29（s、1H）、8.21（dt、J = 8.5、2.9 Hz、1H）、8.17（s、1H）、7.19（dd、J = 10.2、5.1 Hz、2H）、4.85（dd、J = 33.3、9.6 Hz、1H）、4.66（dd、J = 42.4、9.6Hz、2H）、4.50（t、J = 11.0Hz、1H）、4.30（t、J = 10.2Hz、1H）、3.71（d、J = 2.8Hz、2H）、3.63（dd、J = 10.2、6.6Hz、1H）、3.49（dd、J=10.2、7.0Hz、1H）、2.90（dt、J=12.7、6.4Hz、1H）、2.81（ddd、J=13.2、10.4、6.2Hz、1H）、2.00 - 1.86（m、2H）、1.20（d、J = 6.9 Hz、3H）。

試験例１．ＪＡＫキナーゼの小分子阻害剤の酵素活性阻害アッセイ
実験プログラム
１．試薬の調製
キナーゼ反応緩衝液：キナーゼ反応緩衝液を準備し、成分は次のとおりである：５０ｍＭＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．５、１ｍＭＥＧＴＡ、１０ｍＭＭｇＣｌ₂、２ｍＭＤＴＴ、０．０１％Ｔｗｅｅｎ２０。

１Ｘアッセイ緩衝液：アッセイ緩衝液を準備し、脱イオン水９：１で１０Ｘアッセイ緩衝液を１Ｘに希釈する。

４Ｘキナーゼ溶液：キナーゼ反応緩衝液で、ＪＡＫキナーゼを４Ｘの最終濃度（ＪＡＫ１：８０ｎＭ、ＪＡＫ２／ＪＡＫ３／Ｔｙｋ２：４ｎＭ）に希釈する。

４Ｘ基質溶液：キナーゼ反応緩衝液で、ＵＬｉｇｈｔ（商標）－ＪＡＫ（Ｔｙｒ１０２３）基質を２００ｎＭ（最終濃度：５０ｎＭ）に希釈する。

４ＸＡＴＰ溶液：キナーゼ反応緩衝液で、ＡＴＰを４Ｘの最終濃度（ＪＡＫ１：１６０μＭ、ＪＡＫ２／ＪＡＫ３／Ｔｙｋ２：４０μＭ）に希釈する。

４Ｘ試験用化合物溶液：ＤＭＳＯで試験用化合物を１０ｍＭストック液に溶解し、３倍勾配で希釈して必要な濃度に調製し、各化合物に１０個の濃度ポイントを設定し、試験用化合物の最終濃度範囲は１０μＭ－０．５ｎＭである。

４Ｘ酵素反応停止溶液：１Ｘアッセイ緩衝液でＥＤＴＡを４０ｍＭ（ＥＤＴＡ最終濃度：１０ｍＭ）に溶解する。

４Ｘアッセイ抗体溶液：１Ｘアッセイ緩衝液でＥｕ標識アッセイ抗体（抗リン酸化チロシン（ＰＴ６６））を８ｎＭ（抗体の最終濃度：２ｎＭ）に希釈する。

２．実験プロセス
２．５μＬの４Ｘキナーゼ溶液及び希釈済の異なる濃度の４Ｘ試験用化合物溶液２．５μＬを、３８４マイクロウェルプレートに順に加え、濃度ごとに２つの複製ウェルを設定し、同時に酵素溶液のブランク対照群及び陰性対照群（ＤＭＳＯ群）を設定する。３８４ウェルプレートを振とうし、酵素と化合物とを混合し、１０００ｒｐｍで１分間遠心分離し、室温で６０分間インキュベートする。２．５μＬの４Ｘ基質溶液を３８４ウェルプレートに加え、１０００ｒｐｍで１分間遠心分離する。２．５μＬの４ＸＡＴＰ溶液を３８４ウェルプレートに加え、１０００ｒｐｍで１分間遠心分離して酵素反応を開始する。ＪＡＫ１は室温で２時間、ＪＡＫ２／ＪＡＫ３／Ｔｙｋ２は室温で１時間反応する。ＪＡＫ１反応の各成分の最終濃度は、ＪＡＫ１：２０ｎＭ、基質：５０ｎＭ、ＡＴＰ：４０ｕＭであり、試験用化合物の最終濃度範囲は、１０μＭ～０．５ｎＭである。ＪＡＫ２／ＪＡＫ３／Ｔｙｋ２反応の各成分の最終濃度は、ＪＡＫ２：１ｎＭ、基質：５０ｎＭ、ＡＴＰ：１０μＭであり、試験用化合物の最終濃度範囲は：１０μＭ～０．５ｎＭである。酵素反応完了後、３８４ウェルプレートの各ウェルに、５μＬの４Ｘ酵素反応停止液を加え、１０００ｒｐｍで１分間遠心分離し、室温で５分間インキュベートする。３８４ウェルプレートの各ウェルに、５μＬの４Ｘアッセイ抗体溶液を加え（アッセイ抗体の最終濃度は２ｎＭ）、１０００ｒｐｍで１分間遠心分離し、室温で１時間インキュベートする。抗体のインキュベーション後、Ｅｎｖｉｓｉｏｎプレートリーダーにより各ウェルのシグナル値を測定する。

３．データ分析
酵素溶液のブランク対照群を阻害率１００％、陰性対照群（ＤＭＳＯ群）を阻害率０％として、各濃度に対応する阻害率を算出する。ＧｒａｐｈＰａｄＰｒｉｓｍソフトウェアによって、アッセイ化合物の濃度の対数及び対応するパーセント阻害率に対して非線形回帰分析が実行され、アッセイ化合物の半数阻害濃度（ＩＣ₅₀）が得られる。実施例１～１０の化合物により得られた実験結果を以下の表１に示す。

上記表１の結果から分かるように、本出願の化合物は、酵素活性データに優れ、上記具体的な化合物について測定した半数阻害濃度が低く、特にＴｙｋ２、ＪＡＫ１及びＪＡＫ２の場合は、基本的に０．０１～約０．１μＭに達し、特に化合物ＴＤＭ－１８０９７３、ＴＤＭ－１８０９７５、ＴＤＭ－１８０９７６及びＴＤＭ－１８０９７８では、半数阻害濃度がすべて約０．０１μＭである。したがって、上記実験により、本出願の小分子化合物がＪＡＫファミリーへの強い標的性及び優れた酵素活性を有する化合物であり、ＪＡＫ１／Ｔｙｋ２二重阻害剤及びＴｙｋ２特異的阻害剤として使用可能ということが証明された。

以上、本発明の好ましい実施形態について詳細に説明したが、本発明は上記実施形態の具体的な内容に限定されるものではなく、本発明の技術的思想の範囲内で本発明の技術的解決策について種々な簡単な変更を加えることが可能であり、これらの簡単な変更はすべて本発明の保護範囲に属する。

更に留意されたいのは、上記具体的な実施形態に記載された種々な具体的な技術的特徴は、矛盾しない限り、任意の適切な方法で組み合わせることが可能であり、不必要な重複を避けるために、本発明は様々な可能な組み合わせの形態について別途説明しない。

また、本発明による様々な異なる実施形態の間も任意の組み合わせが可能であり、本発明の趣旨に反しない限り、それらも同様に本発明の開示内容として見なされるべきである。

一態様において、本発明は、下記式Ｉで表される化合物、又はその立体異性体、幾何異性体、互変異性体、水和物、溶媒和物、及び薬学的に許容される塩又はプロドラッグである小分子化合物を提供する。
ここで、
Ｒ₁～Ｒ₅はそれぞれ独立してＣ又はＮから選択され、
Ｒは、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、置換ヘテロシクロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール又は置換ヘテロアリールから選択される。

Claims

下記式Ｉで表される化合物、又はその立体異性体、幾何異性体、互変異性体、水和物、溶媒和物、及び薬学的に許容される塩又はプロドラッグである、ことを特徴とする、小分子化合物：

ここで、
Ｒ₁～Ｒ₅はそれぞれ独立してＣ又はＮから選択され、
Ｒは、シクロアルキル、置換シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、置換ヘテロシクロアルキル、アリール、置換アリール、ヘテロアリール又は置換ヘテロアリールから選択される。
Ｒ₁～Ｒ₅のうち最大２つがＮである、ことを特徴とする、請求項１に記載の小分子化合物。
Ｒは、以下に示す式IIによって表される構造を有する、ことを特徴とする、請求項１に記載の小分子化合物：

ここで、
Ｒ₆はＣ又はＮから選択され、
Ｒ₇は、水素、ハロゲン、アルキル、アミノ、アミド、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール又はヘテロアリールから選択され、
Ｒ₈は、水素、アルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール又はヘテロアリールから選択される。
Ｒ₇及びＲ₈は、それぞれ独立して、水素、アルキル又はシクロアルキルから選択される、ことを特徴とする、請求項３に記載の小分子化合物。
Ｒは、以下に示す式IIIによって表される構造を有する、ことを特徴とする、請求項１に記載の小分子化合物：

ここで、
Ｒ₉はＣ又はＮから選択され、
Ｒ₁₀は、水素、ハロゲン、アルキル、アミノ、アミド、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール又はヘテロアリールから選択され、
Ｒ₁₁は、水素、アルキル、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール又はヘテロアリールから選択される。
Ｒ₁₀及びＲ₁₁は、それぞれ独立して、水素、アルキル又はシクロアルキルから選択される、ことを特徴とする、請求項５に記載の小分子化合物。
前記アルキル基はメチル、エチル、プロピル又はイソプロピルであり、前記シクロアルキル基はシクロプロピル、シクロブチル又はシクロプロピルメチルである、ことを特徴とする、請求項４又は６に記載の小分子化合物。
ＪＡＫキナーゼの阻害における、請求項１～７のいずれか一項に記載の小分子化合物の用途。
疾患の病因がいずれもＪＡＫシグナル伝達の調節不全に関連している、自己免疫疾患及び免疫関連炎症性皮膚疾患を予防又は治療するための医薬品の調製における、請求項１～７のいずれか一項に記載の小分子化合物の用途。
前記自己免疫疾患は、関節リウマチ、強直性脊椎炎、潰瘍性大腸炎、クローン病、全身性エリテマトーデス、皮膚筋炎、多発性硬化症、Ｉ型糖尿病、シェーグレン症候群、及び血管炎のうちの少なくとも１つから選択される、請求項９に記載の用途。
前記免疫関連炎症性皮膚疾患は、アトピー性皮膚炎、湿疹、円形脱毛症、乾癬、白斑、扁平苔癬、光沢苔癬、硬化性苔癬、脂肪織炎、座瘡、及び化膿性汗腺炎のうちの少なくとも１つからなる選択される、請求項９に記載の用途。