JP2023507110A - Ｉｌｔ３結合剤及びその使用方法 - Google Patents

Ｉｌｔ３結合剤及びその使用方法 Download PDF

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Abstract

本開示は、ヒトＩＬＴ３を含めたＩＬＴ３に特異的に結合する結合剤、例えば、抗体、ならびに該結合剤を含む組成物、及びそれらの使用方法を提供する。本開示はまた、該結合剤をコードする関連するポリヌクレオチド及びベクターならびに該結合剤を含む細胞も提供する。【選択図】なし

Description

関連出願の相互参照
本出願は、２０１９年１２月１９日に出願された米国仮出願第６２／９５０，４３４号の優先権の利益を主張するものであり、その内容は、参照により全体として本明細書に組み込まれる。
本開示は、概して、免疫グロブリン様転写物３（ＩＬＴ３）に結合する薬剤、特にヒトＩＬＴ３に結合する抗体、及び該ＩＬＴ３結合剤を含む組成物、ならびに該薬剤及び組成物を使用する方法に関する。
免疫療法の基礎は、自然免疫反応及び適応免疫反応の両方を含めた免疫系の操作及び／または調節である。免疫療法の一般目標は、「外来物質」、例えば、病原体または腫瘍細胞に対する免疫反応を制御することによって疾患を治療することである。しかしながら、場合によっては、免疫療法は、体内に通常存在するタンパク質、分子、及び／または組織に対する異常な免疫反応から生じ得る自己免疫疾患を治療するために使用される。免疫療法には、特定の免疫反応を誘導もしくは増強するための方法または特定の免疫反応を阻害または低減する方法が含まれ得る。
免疫系は、Ｔ細胞、Ｂ細胞、ナチュラルキラー細胞、抗原提示細胞、樹状細胞、単球、及びマクロファージが挙げられるがこれらに限定されない、多数の細胞型で構成される非常に複雑な系である。これらの細胞は、それらの相互作用及び反応を制御するための複雑かつ繊細な系を備えている。該細胞は、活性化及び抑制の両機構ならびにフィードバックループを使用して反応を抑制し、無制御免疫反応の悪影響（例えば、自己免疫疾患またはサイトカインストーム）を認めない。
免疫系の抑制機構のいくつかは、白血球Ｉｇ様受容体（ＬＩＬＲ）ファミリーのタンパク質を使用する。白血球Ｉｇ様受容体サブファミリーＢ（ＬＩＬＲＢ）は、細胞外Ｉｇ様ドメイン及び細胞質免疫受容抑制性チロシンモチーフ（ＩＴＩＭ）を有するＩ型膜貫通型糖タンパク質のグループである。このＩＴＩＭを含む受容体のグループには、５つのメンバー、すなわち、ＬＩＬＲＢ１（ＣＤ８５Ｊ、ＬＩＲ１、ＩＬＴ２とも呼ばれる）、ＬＩＬＲＢ２（ＣＤ８５Ｄ、ＬＩＲ２、ＩＬＴ４とも呼ばれる）、ＬＩＬＲＢ３（ＣＤ８５Ａ、ＬＩＲ３、ＩＬＴ５とも呼ばれる）、ＬＩＬＲＢ４（ＣＤ８５Ｋ、ＬＩＲ５、ＩＬＴ３とも呼ばれる）、及びＬＩＬＲＢ５（ＣＤ８５Ｃ、ＬＩＲ８とも呼ばれる）が含まれる。これらのＬＩＬＲＢ（ＩＬＴ）の多くの生物学的機能及び臨床的意義はまだ調査中である。
がんの免疫監視の概念は、免疫系が腫瘍細胞を認識し、免疫反応を開始し、腫瘍の発生及び／または成長を抑制することができるという理論に基づいている。しかしながら、多くのがん性細胞は、免疫系を回避するための機構を発達させ、及び／または正常な抑制機構を乗っ取り、腫瘍を無抑制に成長させることができることは明らかである。がん／腫瘍免疫療法（がん免疫療法）は、免疫系を活性化及び／または増強して、がん／腫瘍細胞に対するより効果的な攻撃を達成し、がん／腫瘍細胞の死滅を増加させること及び／またはがん／腫瘍成長を抑制することができる新たな新規薬剤の開発に焦点を当てている。
本開示は、免疫グロブリン様転写物３（ＩＬＴ３）に結合する薬剤を提供する。ＬＩＬＲＢファミリーのメンバーは、出版物では多くの名前で呼ばれているが、本明細書では、「ＩＬＴ３」（ＬＩＬＲＢ４）という用語を使用する。該薬剤としては、ポリペプチド、例えば、ＩＬＴ３に特異的に結合する抗体が挙げられるが、これらに限定されない。該薬剤は、本明細書では「ＩＬＴ３結合剤」と呼ばれることがある。本開示は、ＩＬＴ３結合剤を製造及び使用する方法を提供する。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、ＩＬＴ３活性を阻害する。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、免疫反応を増強する。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、免疫細胞の抑制を逆転する。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、併用療法で使用される。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、少なくとも１つのさらなる治療薬と組み合わせて使用される。
本開示はまた、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤を含む組成物を提供する。いくつかの実施形態では、本開示は、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤を含む医薬組成物を提供する。ＩＬＴ３結合剤をコードするポリヌクレオチド及び／またはベクターを提供する。本明細書に記載のポリヌクレオチド及び／またはベクターを含む細胞もまた提供する。本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤を含むまたは産生する細胞を提供する。本明細書に記載の結合剤を製造する方法もまた提供する。
１つの態様では、本開示は、ヒトＩＬＴ３に結合し、フィブロネクチンに対するヒトＩＬＴ３の結合を阻害する抗体を特徴とする。場合によっては、この抗体は、以下の特性の１つ以上（例えば、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、または１２）を任意の組み合わせまたは配列で有する：ｃｙｎｏ ＩＬＴ３にも結合する；ＩＬＴ２、ＩＬＴ４、ＩＬＴ５、及びＬＩＬＲＢ５には結合しないか、またはわずかに結合するのみである（ＩＬＴ３と比較して）；ＬＩＬＲＡ１、ＬＩＬＲＡ２、ＬＩＬＲＡ４、ＬＩＬＲＡ５、及びＬＩＬＲＡ６には結合しないか、またはわずかに結合するのみである（ＩＬＴ３と比較して）；ＩＬＴ３アンタゴニストである；ＩＬＴ３活性を阻害する；ＩＬＴ３を発現する細胞のＩＬＴ３シグナル伝達を阻害する；ＩＬＴ３のＡＰＯＥへの結合を阻害する；ＩＬＴ３のＣＮＴＦＲに対する結合を阻害する；ＩＬＴ３が誘導する骨髄細胞の抑制を阻害する；ＩＬＴ３が誘導する骨髄細胞活性の抑制を阻害する；ＩＬＴ３を発現する骨髄細胞におけるＦｃＲ活性を回復する；及びＩＬＴ３を発現する骨髄細胞におけるケモカイン産生を回復する。場合によっては、この抗体は、ヒトＩＬＴ３に対するＫＤが、１μＭ～１ｐＭ、１ｎＭ～１ｐＭ、または１００ｎＭ～１ｐＭである（例えば、Ｂｉａｃｏｒｅによる評価）。場合によっては、この抗体は、ヒトＩｇＧ１定常領域を含む。場合によっては、この抗体は、ヒトカッパ軽鎖定常領域を含む。場合によっては、この抗体は、ヒトＩｇＧ１定常領域及びヒトカッパ軽鎖定常領域を含む。ある特定の場合には、該ヒトＩｇＧ１定常領域は、Ｆｃエフェクター機能を低減または排除する１つ以上の変異を含む。ある特定の場合には、該ヒトＩｇＧ１定常領域は、エフェクター機能を低減するＮ２９７Ｇの変異を含む。場合によっては、この抗体は、ＩＬＴ３結合抗体断片である。
１つの態様では、本開示は、ＩＬＴ３に結合する薬剤を提供する。いくつかの実施形態では、薬剤は、ヒトＩＬＴ３に結合する。いくつかの実施形態では、薬剤はカニクイザル（「ｃｙｎｏ」）ＩＬＴ３に結合する。いくつかの実施形態では、薬剤は、ヒトＩＬＴ３及びｃｙｎｏ ＩＬＴ３に結合する。いくつかの実施形態では、薬剤は、配列番号２、配列番号３、配列番号４、及び／または配列番号５に結合する。いくつかの実施形態では、薬剤は、配列番号７、配列番号８、配列番号９、及び／または配列番号１０に結合する。いくつかの実施形態では、薬剤は抗体である。いくつかの実施形態では、薬剤は、ヒトＩＬＴ３に結合する抗体である。いくつかの実施形態では、薬剤は、ｃｙｎｏ ＩＬＴ３に結合する抗体である。いくつかの実施形態では、薬剤は、ヒトＩＬＴ３及びｃｙｎｏ ＩＬＴ３に結合する抗体である。
いくつかの実施形態では、薬剤は、ＩＬＴ３の細胞外ドメイン内に結合する。いくつかの実施形態では、薬剤は、配列番号１のアミノ酸２２～２５９内に結合する。いくつかの実施形態では、薬剤は、配列番号１のアミノ酸２７～１１８内に結合する。いくつかの実施形態では、薬剤は、配列番号１のアミノ酸１２４～２１８内に結合する。いくつかの実施形態では、薬剤は、配列番号１のアミノ酸２７～２１８内に結合する。いくつかの実施形態では、薬剤は、配列番号１のアミノ酸１２４～２５９内に結合する。いくつかの実施形態では、薬剤は、ＩＬＴ３の細胞外ドメイン内のコンフォメーションエピトープに結合する。いくつかの実施形態では、薬剤は、ＩＬＴ３のＩｇ様Ｃ２型ドメインの１つ（例えば、Ｄ１またはＤ２ドメイン）内のコンフォメーションエピトープに結合する。いくつかの実施形態では、薬剤は、２つのＩＬＴ３のＩｇ様Ｃ２型ドメイン（Ｄ１及びＤ２ドメイン）内のコンフォメーションエピトープに結合する。いくつかの実施形態では、薬剤は、ＩＬＴ３のＤ２ステム領域内のコンフォメーションエピトープに結合する。いくつかの実施形態では、薬剤は、ＩＬＴ３のＤ１ドメインとＤ２ドメインとの間（例えば、Ｄ１ドメインとＤ２ドメインとの間の接合部）に位置するコンフォメーションエピトープに結合する。
１つの態様では、本開示は、ヒトＩＬＴ３に結合し、以下の特性の少なくとも１つ以上を有する薬剤を提供する：（ｉ）ｃｙｎｏ ＩＬＴ３に結合する、（ｉｉ）ヒト及びｃｙｎｏ ＩＬＴ３に結合する、（ｉｉｉ）ＩＬＴ２、ＩＬＴ４、ＩＬＴ５、及びＬＩＬＲＢ５には結合しない、（ｉｖ）ＬＩＬＲＡ１、ＬＩＬＲＡ２、ＬＩＬＲＡ４、ＬＩＬＲＡ５、及びＬＩＬＲＡ６には結合しない、（ｖ）ＩＬＴ３アンタゴニストである、（ｖｉ）ＩＬＴ３活性を阻害する、（ｖｉｉ）ＩＬＴ３を発現する細胞におけるＩＬＴ３シグナル伝達を阻害する、（ｖｉｉｉ）ＩＬＴ３のＡＰＯＥに対する結合を阻害する、（ｉｘ）ＩＬＴ３のフィブロネクチンに対する結合を阻害する、（ｘ）ＩＬＴ３のＣＮＴＦＲに対する結合を阻害する、（ｘｉ）ＩＬＴ３が誘導する骨髄細胞の抑制を阻害する、（ｘｉｉ）ＩＬＴ３が誘導する骨髄細胞活性の抑制を阻害する、（ｘｉｉｉ）ＩＬＴ３を発現する骨髄細胞におけるＦｃＲ活性を回復する、及び（ｘｉｖ）ＩＬＴ３を発現する骨髄細胞におけるケモカイン産生を回復または増加させる。いくつかの実施形態では、該骨髄細胞は、単球である。いくつかの実施形態では、該骨髄細胞は、マクロファージである。いくつかの実施形態では、該骨髄細胞は、樹状細胞である。いくつかの実施形態では、該骨髄細胞は、寛容原性樹状細胞である。いくつかの実施形態では、該骨髄細胞は、抗原提示細胞（ＡＰＣ）である。
１つの態様では、本開示は、ヒトＩＬＴ３に特異的に結合する薬剤を提供する。いくつかの実施形態では、本開示は、ＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）を提供し、該結合剤は、以下を含む：（ａ）アミノ酸配列ＧＦＴＦＳＳＹＧＭＳ（配列番号２７）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＴＩＳＧＧＧＳＹＴＮＹＰＤＳＶＫＧ（配列番号２８）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＲＥＷＲＭＴＬＹＡＭＤＹ（配列番号２９）または１つの置換（例えば、５位のメチオニンから別のアミノ酸（例えば、チロシン））を有する配列番号２９を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに（ｂ）アミノ酸配列ＲＡＳＥＳＶＤＳＹＧＮＳＦＭＨ（配列番号３０）または１つもしくは２つの置換（例えば、７位のアスパラギン酸から別のアミノ酸（例えば、グルタミン酸）及び／または１１位のアスパラギンから別のアミノ酸（例えば、セリン））を有する配列番号３０を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＬＴＳＮＬＥＳ（配列番号３１）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、ならびにアミノ酸配列ＱＱＮＮＥＤＰＦＴ（配列番号３２）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域。いくつかの実施形態では、該ＩＬＴ３結合剤は、配列番号２７～３２と実質的に同一のアミノ酸配列を有する重鎖及び軽鎖可変領域ＣＤＲを含む。いくつかの実施形態では、該ＩＬＴ３結合剤は、アミノ酸配列ＧＦＴＦＳＳＹＧＭＳ（配列番号２７）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＴＩＳＧＧＧＳＹＴＮＹＰＤＳＶＫＧ（配列番号２８）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＲＥＷＲＹＴＬＹＡＭＤＹ（配列番号１０５）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびにアミノ酸配列ＲＡＳＥＳＶＥＳＹＧＳＳＦＭＨ（配列番号１０６）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＬＴＳＮＬＥＳ（配列番号３１）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＱＱＮＮＥＤＰＦＴ（配列番号３２）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、該ＩＬＴ３結合剤は、配列番号２７、２８、１０５、１０６、３１及び３２と実質的に同一のアミノ酸配列を有する重鎖及び軽鎖可変領域ＣＤＲを含む。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）は、（ａ）配列番号１１１（５Ａ７）または配列番号１２３（Ｈｚ５Ａ７．ｖ５）に対して少なくとも８０％の配列同一性を有する重鎖可変領域、及び／または（ｂ）配列番号１１２（５Ａ７）または配列番号１２４（Ｈｚ５Ａ７．ｖ５）に対して少なくとも８０％の配列同一性を有する軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１１１に対して、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％の配列同一性を有する重鎖可変領域、及び／または配列番号１１２に対して、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％の配列同一性を有する軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１２３に対して、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％の配列同一性を有する重鎖可変領域、及び／または配列番号１２４に対して、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％の配列同一性を有する軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１１１の重鎖可変領域及び／または配列番号１１２の軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、該ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１１１の重鎖可変領域及び配列番号１１２の軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１２３の重鎖可変領域及び／または配列番号１２４の軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１２３の重鎖可変領域及び配列番号１２４の軽鎖可変領域を含む。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）は、配列番号１１１のアミノ酸配列から重鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３及び／または配列番号１１２のアミノ酸配列から軽鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１２３のアミノ酸配列から重鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３及び／または配列番号１２４のアミノ酸配列から軽鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）は、配列番号１１１のアミノ酸配列からのＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３と実質的に同一のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３及び／または配列番号１１２のアミノ酸配列からのＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３と実質的に同一のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１２３のアミノ酸配列からのＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３と実質的に同一のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３及び／または配列番号１２４のアミノ酸配列からのＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３と実質的に同一のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３を含む。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）は、配列番号１１１のアミノ酸配列から重鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３を含む重鎖可変領域及び／または配列番号１１２のアミノ酸配列から軽鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１２３のアミノ酸配列から重鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３を含む重鎖可変領域及び／または配列番号１２４のアミノ酸配列から軽鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）は、配列番号１１１のアミノ酸配列からのＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３と実質的に同一のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３を含む重鎖可変領域及び／または配列番号１１２のアミノ酸配列からのＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３と実質的に同一のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１２３のアミノ酸配列からのＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３と実質的に同一のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３を含む重鎖可変領域及び／または配列番号１２４のアミノ酸配列からのＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３と実質的に同一のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１２６の重鎖及び／または配列番号１２８の軽鎖を含む抗体である。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１２６の重鎖及び配列番号１２８の軽鎖を含む抗体である。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１２６のアミノ酸配列を含む重鎖及び配列番号１２８のアミノ酸配列を含む軽鎖を含むモノクローナル抗体である。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、Ｈｚ５Ａ７．ｖ５のＶＨ ＣＤＲ及び配列番号１２６と少なくとも７０％（例えば、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％）同一のアミノ酸配列を有する重鎖、及び／またはＨｚ５Ａ７．ｖ５のＶＬ ＣＤＲ及び配列番号１２８と少なくとも７０％（例えば、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％）同一のアミノ酸配列を有する軽鎖を含む抗体である。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１２６と少なくとも７０％（例えば、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％）同一のアミノ酸配列を有する重鎖、及び配列番号１２８と少なくとも７０％（例えば、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％）同一のアミノ酸配列を有する軽鎖を含む抗体である。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１２６と少なくとも７０％（例えば、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％）同一のアミノ酸配列を有する重鎖、及び配列番号１２８と少なくとも７０％（例えば、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％）同一のアミノ酸配列を有する軽鎖を含むモノクローナル抗体である。
いくつかの実施形態では、配列番号１５６～１６０のいずれか１つに記載のＨｚ４８Ａ６の重鎖可変領域または配列番号１６２～１６３のいずれか１つに記載のＨｚ４５Ｇ１０の重鎖可変領域は、配列番号１２９に追加される。ある特定の実施形態では、配列番号１５６～１６０のいずれか１つに記載のＨｚ４８Ａ６の重鎖可変領域または配列番号１６２～１６３のいずれか１つに記載のＨｚ４５Ｇ１０の重鎖可変領域は、エフェクター機能を排除するためにＮ２９７Ｇの変異が配列番号１２９に導入されることを除いて、配列番号１２９に追加される。
いくつかの実施形態では、配列番号１６１に記載のＨｚ４８Ａ６の軽鎖可変領域または配列番号１６４に記載のＨｚ４５Ｇ１０の軽鎖可変領域は、配列番号１３５に追加される。他の実施形態では、配列番号１６１に記載のＨｚ４８Ａ６の軽鎖可変領域または配列番号１６４に記載のＨｚ４５Ｇ１０の軽鎖可変領域は、配列番号１３６に追加される。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）は、（ａ）アミノ酸配列ＧＦＳＬＴＳＹＧＶＨ（配列番号１１）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＶＩＷＰＧＧＴＩＮＹＮＳＡＬＭＳ（配列番号１２）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＤＫＹＤＧＧＷＦＡＹ（配列番号１３）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または（ｂ）アミノ酸配列ＫＡＳＱＮＶＲＴＡＶＡ（配列番号１４）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＬＡＳＮＲＨＴ（配列番号１５）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＬＱＨＬＮＹＰＬＴ（配列番号１６）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、該ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１１～１６と実質的に同一のアミノ酸配列を有する重鎖及び軽鎖可変領域ＣＤＲを含む。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１０９に対して、少なくとも８０％（例えば、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％）の同一性を有する重鎖可変領域、及び／または配列番号１１０に対して、少なくとも８０％（例えば、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％）の同一性を有する軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、該ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１０９の重鎖可変領域及び／または配列番号１１０の軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１０９の重鎖可変領域及び配列番号１１０の軽鎖可変領域を含む。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１０９のアミノ酸配列から重鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３及び／または配列番号１１０のアミノ酸配列から軽鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）は、配列番号１０９のアミノ酸配列からのＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３と実質的に同一のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３及び／または配列番号１１０のアミノ酸配列からのＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３と実質的に同一のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３を含む。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１０９のアミノ酸配列から重鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３を含む重鎖可変領域及び／または配列番号１１０のアミノ酸配列から軽鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）は、配列番号１０９のアミノ酸配列からのＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３と実質的に同一のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３を含む重鎖可変領域及び／または配列番号１１０のアミノ酸配列からのＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３と実質的に同一のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）は、（ａ）アミノ酸配列ＧＹＴＦＴＤＹＮＭＤ（配列番号４３）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＹＩＹＰＮＮＧＧＴＧＹＮＱＫＦＮＳ（配列番号４４）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＳＰＹＹＤＹＶＧＳＹＡＭＤＹ（配列番号４５）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または（ｂ）アミノ酸配列ＴＡＳＳＳＶＳＳＳＹＬＨ（配列番号４６）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＳＴＳＮＬＡＳ（配列番号４７）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＨＱＹＨＲＳＰＲＴ（配列番号４８）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、該ＩＬＴ３結合剤は、配列番号４３～４８と実質的に同一のアミノ酸配列を有する重鎖及び軽鎖可変領域ＣＤＲを含む。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１１３に対して、少なくとも８０％（例えば、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％）の同一性を有する重鎖可変領域、及び／または配列番号１１４に対して、少なくとも８０％（例えば、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％）の同一性を有する軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、該ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１１３の重鎖可変領域及び／または配列番号１１４の軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１１３の重鎖可変領域及び配列番号１１４の軽鎖可変領域を含む。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１１３のアミノ酸配列から重鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３及び／または配列番号１１４のアミノ酸配列から軽鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）は、配列番号１１３のアミノ酸配列からのＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３と実質的に同一のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３及び／または配列番号１１４のアミノ酸配列からのＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３と実質的に同一のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３を含む。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１１３のアミノ酸配列から重鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３を含む重鎖可変領域及び／または配列番号１１４のアミノ酸配列から軽鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）は、配列番号１１３のアミノ酸配列からのＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３と実質的に同一のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３を含む重鎖可変領域及び／または配列番号１１４のアミノ酸配列からのＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３と実質的に同一のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）は、（ａ）アミノ酸配列ＧＹＴＦＴＤＹＮＭＤ（配列番号４３）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＹＩＹＰＳＮＧＧＴＧＹＮＱＫＦＫＳ（配列番号５９）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＶＰＹＹＤＹＬＹＹＹＡＭＤＹ（配列番号６０）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または（ｂ）アミノ酸配列ＲＡＳＳＳＶＳＦＭＨ（配列番号６１）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＡＴＳＮＬＡＳ（配列番号６２）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＱＱＷＳＴＮＰＹＭＹＴ（配列番号６３）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、該ＩＬＴ３結合剤は、配列番号４３、５９、６０、６１、６２、及び６３と実質的に同一のアミノ酸配列を有する重鎖及び軽鎖可変領域ＣＤＲを含む。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１１５に対して、少なくとも８０％（例えば、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％）の同一性を有する重鎖可変領域、及び／または配列番号１１６に対して、少なくとも８０％（例えば、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％）の同一性を有する軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、該ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１１５の重鎖可変領域及び／または配列番号１１６の軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１１５の重鎖可変領域及び配列番号１１６の軽鎖可変領域を含む。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１１５のアミノ酸配列から重鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３及び／または配列番号１１６のアミノ酸配列から軽鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）は、配列番号１１５のアミノ酸配列からのＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３と実質的に同一のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３及び／または配列番号１１６のアミノ酸配列からのＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３と実質的に同一のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３を含む。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１１５のアミノ酸配列から重鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３を含む重鎖可変領域及び／または配列番号１１６のアミノ酸配列から軽鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）は、配列番号１１５のアミノ酸配列からのＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３と実質的に同一のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３を含む重鎖可変領域及び／または配列番号１１６のアミノ酸配列からのＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３と実質的に同一のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）は、（ａ）アミノ酸配列ＧＦＴＦＳＤＹＧＭＨ（配列番号７１）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＹＩＦＳＧＳＳＴＩＹＹＡＤＴＶＫＧ（配列番号７２）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＡＤＧＲＧＡＭＤＹ（配列番号７３）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域を含む重鎖可変領域、及び／または（ｂ）アミノ酸配列ＲＡＳＱＤＩＳＫＦＬＮ（配列番号７４）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＹＴＳＲＬＨＳ（配列番号７５）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＱＱＧＮＴＬＰＷＴ（配列番号７６）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、該ＩＬＴ３結合剤は、配列番号７１～７６と実質的に同一のアミノ酸配列を有する重鎖及び軽鎖可変領域ＣＤＲを含む。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１１７に対して、少なくとも８０％（例えば、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％）の同一性を有する重鎖可変領域、及び／または配列番号１１８に対して、少なくとも８０％（例えば、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％）の同一性を有する軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１６２に対して、少なくとも８０％（例えば、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％）の同一性を有する重鎖可変領域、及び／または配列番号１６４に対して、少なくとも８０％（例えば、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％）の同一性を有する軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１６３に対して、少なくとも８０％（例えば、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％）の同一性を有する重鎖可変領域、及び／または配列番号１６４に対して、少なくとも８０％（例えば、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％）の同一性を有する軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、該ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１１７の重鎖可変領域及び／または配列番号１１８の軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１１７の重鎖可変領域及び配列番号１１８の軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、該ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１６２の重鎖可変領域及び／または配列番号１６４の軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１６２の重鎖可変領域及び配列番号１６４の軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、該ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１６３の重鎖可変領域及び／または配列番号１６４の軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１６３の重鎖可変領域及び配列番号１６３の軽鎖可変領域を含む。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１１７のアミノ酸配列から重鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３及び／または配列番号１１８のアミノ酸配列から軽鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）は、配列番号１１７のアミノ酸配列からのＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３と実質的に同一のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３及び／または配列番号１１８のアミノ酸配列からのＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３と実質的に同一のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３を含む。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１１７のアミノ酸配列から重鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３を含む重鎖可変領域及び／または配列番号１１８のアミノ酸配列から軽鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）は、配列番号１１７のアミノ酸配列からのＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３と実質的に同一のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３を含む重鎖可変領域及び／または配列番号１１８のアミノ酸配列からのＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３と実質的に同一のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）は、（ａ）アミノ酸配列ＧＦＴＦＳＳＹＧＭＳ（配列番号２７）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＴＩＳＳＧＧＴＹＴＦＹＰＤＳＶＫＧ（配列番号８７）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＲＧＷＬＬＨＹＹＡＭＤＹ（配列番号８８）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または（ｂ）アミノ酸配列ＲＰＳＥＳＶＤＳＦＧＮＳＦＭＨ（配列番号８９）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＬＳＳＫＬＥＳ（配列番号９０）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＱＱＨＮＥＤＰＦＴ（配列番号９１）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、該ＩＬＴ３結合剤は、配列番号２７、８７、８８、８９、９０及び９１と実質的に同一のアミノ酸配列を有する重鎖及び軽鎖可変領域ＣＤＲを含む。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１１９に対して、少なくとも８０％（例えば、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％）の同一性を有する重鎖可変領域、及び／または配列番号１２０に対して、少なくとも８０％（例えば、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％）の同一性を有する軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１５６に対して、少なくとも８０％（例えば、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％）の同一性を有する重鎖可変領域、及び／または配列番号１６１に対して、少なくとも８０％（例えば、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％）の同一性を有する軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１５７に対して、少なくとも８０％（例えば、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％）の同一性を有する重鎖可変領域、及び／または配列番号１６１に対して、少なくとも８０％（例えば、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％）の同一性を有する軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１５８に対して、少なくとも８０％（例えば、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％）の同一性を有する重鎖可変領域、及び／または配列番号１６１に対して、少なくとも８０％（例えば、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％）の同一性を有する軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１５９に対して、少なくとも８０％（例えば、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％）の同一性を有する重鎖可変領域、及び／または配列番号１６１に対して、少なくとも８０％（例えば、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％）の同一性を有する軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１６０に対して、少なくとも８０％（例えば、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％）の同一性を有する重鎖可変領域、及び／または配列番号１６１に対して、少なくとも８０％（例えば、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％）の同一性を有する軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、該ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１１９の重鎖可変領域及び／または配列番号１２０の軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１１９の重鎖可変領域及び配列番号１２０の軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、該ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１５６の重鎖可変領域及び／または配列番号１６１の軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１５６の重鎖可変領域及び配列番号１６１の軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、該ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１５７の重鎖可変領域及び／または配列番号１６１の軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１５７の重鎖可変領域及び配列番号１６１の軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、該ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１５８の重鎖可変領域及び／または配列番号１６１の軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１５８の重鎖可変領域及び配列番号１６１の軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、該ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１５９の重鎖可変領域及び／または配列番号１６１の軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１５９の重鎖可変領域及び配列番号１６１の軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、該ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１６０の重鎖可変領域及び／または配列番号１６１の軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１６０の重鎖可変領域及び配列番号１６１の軽鎖可変領域を含む。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１１９のアミノ酸配列から重鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３及び／または配列番号１２０のアミノ酸配列から軽鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）は、配列番号１１９のアミノ酸配列からのＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３と実質的に同一のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３及び／または配列番号１２０のアミノ酸配列からのＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３と実質的に同一のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３を含む。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１１９のアミノ酸配列から重鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３を含む重鎖可変領域及び／または配列番号１２０のアミノ酸配列から軽鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）は、配列番号１１９のアミノ酸配列からのＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３と実質的に同一のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３を含む重鎖可変領域及び／または配列番号１２０のアミノ酸配列からのＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３と実質的に同一のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）は、（ａ）アミノ酸配列ＧＦＴＦＳＤＹＧＭＨ（配列番号７１）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＹＩＳＴＧＩＩＴＶＹＹＡＤＴＶＫＧ（配列番号９９）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＡＤＧＲＧＡＭＤＹ（配列番号７３）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または（ｂ）アミノ酸配列ＲＡＳＱＤＩＳＮＦＬＮ（配列番号１００）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＹＴＳＲＬＨＳ（配列番号７５）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＱＱＧＮＴＬＰＷＴ（配列番号７６）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、該ＩＬＴ３結合剤は、配列番号７１、９９、７３、１００、７５、及び７６と実質的に同一のアミノ酸配列を有する重鎖及び軽鎖可変領域ＣＤＲを含む。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１２１に対して、少なくとも８０％（例えば、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％）の同一性を有する重鎖可変領域、及び／または配列番号１２２に対して、少なくとも８０％（例えば、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、もしくは少なくとも９９％）の同一性を有する軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、該ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１２１の重鎖可変領域及び／または配列番号１２２の軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１２１の重鎖可変領域及び配列番号１２２の軽鎖可変領域を含む。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１２１のアミノ酸配列から重鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３及び／または配列番号１２２のアミノ酸配列から軽鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）は、配列番号１２１のアミノ酸配列からのＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３と実質的に同一のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３及び／または配列番号１２２のアミノ酸配列からのＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３と実質的に同一のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３を含む。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１２１のアミノ酸配列から重鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３を含む重鎖可変領域及び／または配列番号１２２のアミノ酸配列から軽鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）は、配列番号１２１のアミノ酸配列からのＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３と実質的に同一のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３を含む重鎖可変領域及び／または配列番号１２２のアミノ酸配列からのＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３と実質的に同一のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。
本開示の別の態様では、本明細書に提供するのは、ＩＬＴ３に対する結合をめぐって本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤のいずれかと競合する結合剤（例えば、抗体）である。いくつかの実施形態では、本明細書に提供するのは、ＩＬＴ３に対する結合をめぐって参照抗体と競合する薬剤であり、該参照抗体は、（ａ）アミノ酸配列ＧＦＴＦＳＳＹＧＭＳ（配列番号２７）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＴＩＳＧＧＧＳＹＴＮＹＰＤＳＶＫＧ（配列番号２８）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＲＥＷＲＭＴＬＹＡＭＤＹ（配列番号２９）またはＲＥＷＲＹＴＬＹＡＭＤＹ（配列番号１０５）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに（ｂ）アミノ酸配列ＲＡＳＥＳＶＤＳＹＧＮＳＦＭＨ（配列番号３０）またはＲＡＳＥＳＶＥＳＹＧＳＳＦＭＨ（配列番号１０６）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＬＴＳＮＬＥＳ（配列番号３１）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＱＱＮＮＥＤＰＦＴ（配列番号３２）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供するのは、ＩＬＴ３に対する結合をめぐって参照抗体と競合する結合剤であり、該参照抗体は、（ａ）アミノ酸配列ＧＦＴＦＳＳＹＧＭＳ（配列番号２７）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＴＩＳＧＧＧＳＹＴＮＹＰＤＳＶＫＧ（配列番号２８）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＲＥＷＲＭＴＬＹＡＭＤＹ（配列番号２９）またはＲＥＷＲＹＴＬＹＡＭＤＹ（配列番号１０５）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに（ｂ）アミノ酸配列ＲＡＳＥＳＶＤＳＹＧＮＳＦＭＨ（配列番号３０）またはＲＡＳＥＳＶＥＳＹＧＳＳＦＭＨ（配列番号１０６）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＬＴＳＮＬＥＳ（配列番号３１）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＱＱＮＮＥＤＰＦＴ（配列番号３２）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含み、該参照抗体と競合する薬剤は、（ａ）アミノ酸配列ＧＦＴＦＳＳＹＧＭＳ（配列番号２７）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＴＩＳＳＧＧＴＹＴＦＹＰＤＳＶＫＧ（配列番号８７）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＲＧＷＬＬＨＹＹＡＭＤＹ（配列番号８８）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３、ならびに（ｂ）アミノ酸配列ＲＰＳＥＳＶＤＳＦＧＮＳＦＭＨ（配列番号８９）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＬＳＳＫＬＥＳ（配列番号９０）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＱＱＨＮＥＤＰＦＴ（配列番号９１）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む。
前述の態様及び実施形態の各々のいくつかの実施形態、ならびに本明細書に記載の他の態様及び実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、抗体である。いくつかの実施形態では、該抗体は、モノクローナル抗体である。いくつかの実施形態では、該抗体は、ヒト化抗体である。いくつかの実施形態では、該抗体は、ヒト抗体である。いくつかの実施形態では、該抗体は、キメラ抗体である（すなわち、該抗体の可変領域は１つの種に由来し、該抗体の定常領域は異なる種に由来する）。いくつかの実施形態では、該抗体は、全抗体またはインタクトな抗体である。いくつかの実施形態では、該抗体は、二重特異性抗体または多重特異性抗体である。いくつかの実施形態では、該抗体は、少なくとも１つの抗原結合部位を含む抗体断片である。いくつかの実施形態では、該抗体または抗体断片は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、ｓｃＦｖ、（ｓｃＦｖ）２、単鎖抗体、二重可変領域抗体、単一可変領域抗体、線状抗体、ダイアボディ、ナノボディ、またはＶ領域抗体である。いくつかの実施形態では、該抗体は、ＩｇＧ抗体である。いくつかの実施形態では、該抗体は、ＩｇＧ１抗体、ＩｇＧ２抗体、ＩｇＧ３抗体、またはＩｇＧ４抗体である。いくつかの実施形態では、該抗体は、カッパ軽鎖を含む。いくつかの実施形態では、該抗体は、ラムダ軽鎖を含む。
前述の態様及び実施形態の各々のいくつかの実施形態、ならびに本明細書に記載の他の態様及び実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、半減期を延長する部分に（直接または間接的に）結合する。
前述の態様及び実施形態の各々のいくつかの実施形態、ならびに本明細書に記載の他の態様及び実施形態では、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤は、ＩＬＴ３のアンタゴニストである。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、ＩＬＴ３活性を阻害する。いくつかの実施形態では、該ＩＬＴ３結合剤は、アンタゴニスト抗体である。いくつかの実施形態では、該ＩＬＴ３結合剤は、ＩＬＴ３が誘導する免疫細胞抑制を阻害する抗体である。いくつかの実施形態では、該ＩＬＴ３結合剤は、ＩＬＴ３が誘導する骨髄細胞抑制を阻害する抗体である。いくつかの実施形態では、該ＩＬＴ３結合剤は、寛容原性樹状細胞を再活性化する抗体である。
別の態様では、本開示は、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤を含む組成物を提供する。いくつかの実施形態では、組成物は、本明細書に記載の抗ＩＬＴ３抗体を含む。いくつかの実施形態では、組成物は、本明細書に記載のモノクローナル抗ＩＬＴ３抗体を含む。いくつかの実施形態では、組成物は、３Ａ３、５Ａ７、Ｈｚ５Ａ７．ｖ５、１２Ａ１２、１６Ｃ５、４５Ｇ１０、４８Ａ６、Ｈｚ４５Ｇ１０、Ｈｚ４８Ａ６、及び５３Ｆ１０からなる群から選択される抗ＩＬＴ３抗体を含む。
別の態様では、本開示は、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤及び医薬的に許容される担体を含む医薬組成物を提供する。いくつかの実施形態では、医薬組成物は、本明細書に記載の抗ＩＬＴ３抗体及び医薬的に許容される担体を含む。いくつかの実施形態では、医薬組成物は、本明細書に記載のモノクローナル抗ＩＬＴ３抗体及び医薬的に許容される担体を含む。いくつかの実施形態では、医薬組成物は、３Ａ３、５Ａ７、Ｈｚ５Ａ７．ｖ５、１２Ａ１２、１６Ｃ５、４５Ｇ１０、４８Ａ６、Ｈｚ４５Ｇ１０、Ｈｚ４８Ａ６、及び５３Ｆ１０からなる群から選択される抗ＩＬＴ３抗体ならびに医薬的に許容される担体を含む。いくつかの実施形態では、医薬組成物は、３Ａ３、５Ａ７、Ｈｚ５Ａ７．ｖ５、１２Ａ１２、１６Ｃ５、４５Ｇ１０、４８Ａ６、Ｈｚ４５Ｇ１０（実施例１５に記載の２つのヒト化Ｈｚ４５Ｇ１０抗体のいずれか）、Ｈｚ４８Ａ６（実施例１５に記載の５つのヒト化Ｈｚ４８Ａ６抗体のいずれか）、及び５３Ｆ１０からなる群から選択される抗ＩＬＴ３抗体のＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２、及びＶＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域ならびに３Ａ３、５Ａ７、Ｈｚ５Ａ７．ｖ５、１２Ａ１２、１６Ｃ５、４５Ｇ１０、４８Ａ６、Ｈｚ４５Ｇ１０（実施例１５に記載の２つのヒト化Ｈｚ４５Ｇ１０抗体のいずれか）、Ｈｚ４８Ａ６（実施例１５に記載の５つのヒト化Ｈｚ４８Ａ６抗体のいずれか）、及び５３Ｆ１０からなる群から選択される抗ＩＬＴ３抗体のＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２、及びＶＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗ＩＬＴ３抗体、ならびに医薬的に許容される担体を含む。
前述の態様の各々のいくつかの実施形態、ならびに本明細書の他の場所に記載の他の態様及び／または実施形態では、該ＩＬＴ３結合剤は、単離される。いくつかの実施形態では、該ＩＬＴ３結合剤は、実質的に純粋である。
別の態様では、本開示は、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤をコードする１つ以上のポリヌクレオチドを含むポリヌクレオチドを提供する。いくつかの実施形態では、該１つ以上のポリヌクレオチド（複数可）は単離される。いくつかの実施形態では、ベクターは、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤をコードする１つ以上のポリヌクレオチドを含む。いくつかの実施形態では、単離された細胞は、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤をコードする１つ以上のポリヌクレオチドを含む。いくつかの実施形態では、単離された細胞は、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤をコードする１つ以上のポリヌクレオチドを含むベクターを含む。いくつかの実施形態では、細胞は、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤を含む。いくつかの実施形態では、細胞は、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤を産生する。いくつかの実施形態では、該細胞は、モノクローナル細胞株である。いくつかの実施形態では、該細胞は、ハイブリドーマである。
別の態様では、本開示は、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤を使用する方法を提供する。いくつかの実施形態では、方法は、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤を含む組成物を使用することを含む。いくつかの実施形態では、方法は、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤を含む医薬組成物を使用することを含む。
いくつかの実施形態では、リガンド及び／または結合パートナーに対するＩＬＴ３の結合を妨害、阻害、または遮断する方法を提供する。いくつかの実施形態では、細胞の混合物に含まれるフィブロネクチンに対するＩＬＴ３の結合を妨害、阻害、または遮断する方法は、該細胞を、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤と接触させることを含む。いくつかの実施形態では、細胞の混合物に含まれるＡＰＯＥに対するＩＬＴ３の結合を妨害、阻害、または遮断する方法は、該細胞を、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤と接触させることを含む。いくつかの実施形態では、細胞の混合物に含まれるＣＮＴＦＲに対するＩＬＴ３の結合を妨害、阻害、または遮断する方法は、該細胞を、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤と接触させることを含む。
いくつかの実施形態では、対象におけるフィブロネクチンに対するＩＬＴ３の結合を妨害、阻害、または遮断する方法は、該対象に対して、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤の有効量を投与することを含む。いくつかの実施形態では、対象におけるＡＰＯＥに対するＩＬＴ３の結合を妨害、阻害、または遮断する方法は、該対象に対して、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤の有効量を投与することを含む。いくつかの実施形態では、対象におけるＣＮＴＦＲに対するＩＬＴ３の結合を妨害、阻害、または遮断する方法は、該対象に対して、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤の有効量を投与することを含む。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３活性を妨害、阻害、または遮断する方法を提供する。いくつかの実施形態では、細胞の混合物におけるフィブロネクチンが誘導するＩＬＴ３活性を妨害、阻害、または遮断する方法は、該細胞を、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤と接触させることを含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３が誘導する骨髄細胞の抑制を妨害、阻害、または遮断する方法は、該細胞を、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤と接触させることを含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３が誘導する骨髄細胞活性の抑制を妨害、阻害、または遮断する方法は、該細胞を、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤と接触させることを含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３が誘導する骨髄細胞活性の抑制を妨害、阻害、または遮断する方法は、該骨髄細胞におけるＦｃＲ活性を回復させる。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３が誘導する骨髄活性の抑制を妨害、阻害、または遮断する方法は、該骨髄細胞におけるケモカイン／サイトカイン産生を回復させる。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３が誘導する骨髄細胞活性の抑制を妨害、阻害、または遮断する方法は、細胞増殖活性を回復させる。いくつかの実施形態では、該骨髄細胞は、単球である。いくつかの実施形態では、該骨髄細胞は、マクロファージである。いくつかの実施形態では、該骨髄細胞は、樹状細胞である。いくつかの実施形態では、該骨髄細胞は、寛容原性樹状細胞である。いくつかの実施形態では、該骨髄細胞は、ＡＰＣである。
いくつかの実施形態では、対象におけるフィブロネクチンが誘導するＩＬＴ３活性を妨害、阻害、または遮断する方法は、該対象に対して、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤の有効量を投与することを含む。いくつかの実施形態では、対象におけるＩＬＴ３が誘導する骨髄細胞の抑制を妨害、阻害、または遮断する方法は、該対象に対して、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤の有効量を投与することを含む。いくつかの実施形態では、対象におけるＩＬＴ３が誘導する骨髄細胞活性の抑制を妨害、阻害、または遮断する方法は、該対象に対して、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤の有効量を投与することを含む。いくつかの実施形態では、対象におけるＩＬＴ３が誘導する骨髄細胞活性の抑制を妨害、阻害、または遮断する方法は、骨髄細胞におけるＦｃＲ活性を回復させ、及び／または骨髄細胞におけるケモカイン／サイトカイン産生を回復させる。いくつかの実施形態では、該骨髄細胞は、単球である。いくつかの実施形態では、該骨髄細胞は、マクロファージである。いくつかの実施形態では、該骨髄細胞は、樹状細胞である。いくつかの実施形態では、該骨髄細胞は、寛容原性樹状細胞である。いくつかの実施形態では、該骨髄細胞は、抗原提示細胞（ＡＰＣ）である。
いくつかの実施形態では、対象におけるがんの治療方法は、該対象に対して、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤の治療有効量を投与することを含む。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤の投与により、例えば、ＩＬＴ３とフィブロネクチン、ＡＰＯＥまたはＣＮＴＦＲ間の相互作用が遮断されることによって、腫瘍関連抑制性骨髄細胞が刺激／活性化され、免疫反応、例えば、抗腫瘍Ｔ細胞反応が増加し、ひいては、該対象におけるがん／腫瘍に対する免疫反応が活性化される。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤の投与により、抑制性腫瘍微小環境におけるＩＬＴ３とフィブロネクチンとの間の相互作用が遮断され、骨髄細胞、例えば、寛容原性樹状細胞が再プログラム化／刺激される。結果として、これにより、該骨髄細胞によるＴ細胞動員ケモカインの分泌が増加し、該腫瘍微小環境において骨髄細胞がＴ細胞の増殖及びサイトカイン分泌を誘導する能力が増加する。いくつかの実施形態では、該がんは、乳癌、肺癌、頭頸部癌、結腸直腸癌、前立腺癌、皮膚癌、メラノーマ、胃癌（ｓｔｏｍａｃｈ ｃａｎｃｅｒ）、胃癌（ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｎｃｅｒ）、腸癌、子宮頸癌、子宮癌、子宮内膜癌、膀胱癌、脳癌、食道癌、肝臓癌、腎臓癌、または精巣癌である。いくつかの実施形態では、該がんは、膵臓癌である。いくつかの実施形態では、該がんは、卵巣癌である。いくつかの実施形態では、該がんは、肉腫である。いくつかの実施形態では、該がんは、血液癌である。いくつかの実施形態では、該がんは、骨髄性白血病である。いくつかの実施形態では、該骨髄性のがんは、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）である。いくつかの実施形態では、該骨髄性のがんは、慢性骨髄性白血病である。いくつかの実施形態では、該がんは、骨髄異形成症候群である。骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）は、骨髄の未熟な血球が成熟しないため、健康な血球にならないがんのグループである。いくつかの実施形態では、骨髄異形成症候群は、ＡＭＬに発展する。いくつかの実施形態では、該がんまたは該がんが存在する微小環境は、フィブロネクチンが豊富である。いくつかの実施形態では、該がんまたは該がんが存在する微小環境は、非がん性の対応部分よりフィブロネクチンの発現が高い。いくつかの実施形態では、該がんの腫瘍微小環境は、フィブロネクチンの発現レベルが高い。いくつかの実施形態では、該がんは、ＩＬＴ３を発現する。いくつかの実施形態では、該がんは、ＩＬＴ３を発現するある特定のタイプのＢ細胞白血病またはリンパ腫である。
いくつかの実施形態では、対象における腫瘍成長を阻害する方法は、該対象に対して、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤の治療有効量を投与することを含む。いくつかの実施形態では、対象における腫瘍または腫瘍細胞に対する免疫反応を増大または増強する方法は、該対象に対して、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤の治療有効量を投与することを含む。いくつかの実施形態では、対象における腫瘍または腫瘍細胞に対する持続的または長期にわたる免疫反応を活性化または増強する方法は、該対象に対して、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤の治療有効量を投与することを含む。いくつかの実施形態では、対象における腫瘍再発または腫瘍再成長を阻害する方法は、該対象に対して、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤の治療有効量を投与することを含む。いくつかの実施形態では、対象における腫瘍再発または腫瘍再成長を阻害する持続的または長期にわたる免疫を誘導する方法は、該対象に対して、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤の治療有効量を投与することを含む。いくつかの実施形態では、該腫瘍は、膵臓腫瘍、***腫瘍、肺腫瘍、頭頸部腫瘍、結腸直腸腫瘍、前立腺腫瘍、皮膚腫瘍、メラノーマ腫瘍、胃腫瘍（ｓｔｏｍａｃｈ ｔｕｍｏｒ）、胃腫瘍（ｇａｓｔｒｉｃ ｔｕｍｏｒ）、腸腫瘍、卵巣腫瘍、頸部腫瘍、子宮腫瘍、子宮内膜腫瘍、膀胱腫瘍、脳腫瘍、食道腫瘍、肝臓腫瘍、腎臓腫瘍、精巣腫瘍、肉腫、または血液腫瘍である。いくつかの実施形態では、該腫瘍は、骨髄異形成症候群から生じる。いくつかの実施形態では、該腫瘍は、ＩＬＴ３を発現する。いくつかの実施形態では、該腫瘍は、ＩＬＴ３を発現するある特定のタイプのＢ細胞白血病またはリンパ腫である。
いくつかの実施形態では、腫瘍を有する対象において、骨髄細胞を、例えば、腫瘍微小環境で活性化する方法は、該対象に対して、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤の治療有効量を投与することを含む。いくつかの実施形態では、該骨髄細胞は、初代樹状細胞または寛容原性樹状細胞である。いくつかの実施形態では、該骨髄細胞は、単球またはマクロファージである。いくつかの実施形態では、対象における寛容原性樹状細胞を再活性化する方法は、該対象に対して、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤の治療有効量を投与することを含む。いくつかの実施形態では、該寛容原性樹状細胞は、腫瘍微小環境に見出される。
さらに別の態様では、本開示は、ヒト対象におけるがんを治療する方法を提供する。該方法は、該ヒト対象に対して、本明細書に記載の抗体または医薬組成物の治療有効量を投与することを含む。場合によっては、該がんまたは該がんが存在する微小環境は、フィブロネクチンが豊富である。いくつかの実施形態では、該がんまたは該がんが存在する微小環境は、非がん性の対応部分よりフィブロネクチンの発現が高い。いくつかの実施形態では、該がんの腫瘍微小環境は、フィブロネクチンの発現レベルが高い。いくつかの実施形態では、該がんは、ＩＬＴ３を発現する。ある特定の場合には、該がんは、膵臓癌、乳癌、肺癌、頭頸部癌、結腸直腸癌、前立腺癌、皮膚癌、メラノーマ、胃癌（ｓｔｏｍａｃｈ ｃａｎｃｅｒ）、胃癌（ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｎｃｅｒ）、腸癌、卵巣癌、子宮頸癌、子宮癌、子宮内膜癌、膀胱癌、脳癌、食道癌、肝臓癌、腎臓癌、肉腫もしくは精巣癌、血液癌、骨髄性白血病、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病、または骨髄異形成症候群である。
本明細書に記載の方法のいずれかのいくつかの実施形態では、該ＩＬＴ３結合剤は、併用療法の一部として対象に投与される。いくつかの実施形態では、該併用療法は、少なくとも１つのさらなる治療薬を含む。
別の態様では、本開示は、本明細書に記載の結合剤または抗体及び抗ＰＤ－１抗体を含む組み合わせを提供する。別の態様では、本開示は、ヒトＩＬＴ－３とフィブロネクチンとの間の相互作用を阻害するための手段及び抗ＰＤ－１抗体を含む組み合わせを提供する。ＩＬＴ－３とフィブロネクチンとの間の相互作用を阻害するための手段は、本明細書に記載の抗体である。
別の態様では、本開示は、本明細書に記載の抗体及び医薬的に許容される担体を含む医薬組成物を特徴とする。がんの治療用の薬剤の製造における、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）の使用もまた開示する。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤の使用は、がんの治療用である。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤の使用は、腫瘍増殖の阻害用である。
別の態様では、本開示は、ヒトＩＬＴ３とフィブロネクチンとの間の相互作用を阻害するための手段、及び医薬的に許容される担体を含む医薬組成物を特徴とする。場合によっては、ヒトＩＬＴ３とフィブロネクチンとの間の相互作用を阻害するための手段は、抗ヒトＩＬＴ３抗体である。ある特定の場合には、該抗体は、重鎖可変領域のＶＨ－ＣＤＲ１、ＶＨ－ＣＤＲ２、及びＶＨ－ＣＤＲ３ならびに軽鎖可変領域のＶＬ－ＣＤＲ１、ＶＬ－ＣＤＲ２、及びＶＬ－ＣＤＲ３を含み、該重鎖可変領域及び軽鎖可変領域は、それぞれ、以下のアミノ酸配列を含む：配列番号１２３及び１２４、配列番号１５６及び１６１、配列番号１５７及び１６１、配列番号１５８及び１６１、配列番号１５９及び１６１、配列番号１６０及び１６１、配列番号１６２及び１６４、または配列番号１６３及び１６４。場合によっては、該抗体は、重鎖可変領域のＶＨ－ＣＤＲ１、ＶＨ－ＣＤＲ２、及びＶＨ－ＣＤＲ３ならびに軽鎖可変領域のＶＬ－ＣＤＲ１、ＶＬ－ＣＤＲ２、及びＶＬ－ＣＤＲ３を含み、該重鎖可変領域及び軽鎖可変領域は、それぞれ、以下のアミノ酸配列を含む：配列番号１２３及び１２４、配列番号１５６及び１６１、配列番号１５７及び１６１、配列番号１５８及び１６１、配列番号１５９及び１６１、配列番号１６０及び１６１、配列番号１６２及び１６４、または配列番号１６３及び１６４。
前述の態様及び実施形態の各々のいくつかの実施形態、ならびに本明細書に記載の他の態様及び実施形態では、該対象は、ヒトである。
本開示の態様または実施形態がマルクーシュ群または他の選択肢の集団に関して記載される場合、本開示は、全体として記載される群全体だけでなく、個別に該群の各メンバー及び該主群のすべての可能な下位群、ならびに該群の１つ以上のメンバーを欠く該主群もまた包含する。本開示はまた、特許請求される開示における該群のメンバーのいずれかの１つ以上の明確な除外もまた想定している。
抗ＩＬＴ３抗体及びＬＩＬＲＢ発現細胞によるＦＡＣＳスクリーニングの代表的な結果を示す。
抗ＩＬＴ３抗体及びＬＩＬＲＡ発現細胞によるＦＡＣＳスクリーニングの代表的な結果を示す。
レポーター細胞アッセイ－ＩＬＴ３とＬＸ－２細胞の相互作用。ＬＸ－２細胞のバルク培養物を、基本培地または活性化培地で３日間培養した。処理及び未処理のＬＸ－２細胞を回収し、洗浄した。２ｘ１０５個のＬＸ－２細胞を、（ｉ）受容体を含まないレポーター細胞、（ｉｉ）Ｂ７－Ｈ４細胞外ドメインを含むレポーター細胞、または（ｉｉｉ）ＩＬＴ３細胞外ドメインを含むレポーター細胞を含む４ｘ１０５個のレポーター細胞と共培養した。細胞を、１０％ＦＢＳを含むＲＰＭＩ１６４０中、３７℃で終夜インキュベートした。これらのレポーター細胞は、分析時にＬＸ－２細胞と区別するために、ＣｅｌｌＴｒａｃｋｅｒ Ｄｅｅｐ Ｒｅｄで予め染色した。翌日、レポーター細胞をＦＡＣＳによってＧＦＰ発現についてアッセイした。
免疫沈降及びゲル電気泳動を使用したＩＬＴ３リガンドの同定。免疫沈降は、プロテインＧダイナビーズを製造業者の指示に従って使用して行った。１０μｇのＩＬＴ３ＥＣＤ－Ｆｃまたは対照のヒトＦｃを、５０μｌの磁性ダイナビーズに４℃で３０分間結合させた。上清を除去し、未処理または活性化ＬＸ－２細胞からのタンパク質溶解物を加えた。各処理条件について、約６１５μｇのタンパク質を含む溶解物をダイナビーズ複合体に加え、穏やかに回転させながら４℃で終夜インキュベートした。タンパク質溶解物を除去し、ダイナビーズを２００μｌの溶解緩衝液で３回、１回の洗浄あたり５分間洗浄した。タンパク質ローディング緩衝液、還元剤、及び溶解緩衝液を１５：４：１の比で含む５０μｌの溶出緩衝液をダイナビーズに加えた。タンパク質を９５℃で５分間溶出し、サンプル（各タンパク質溶出液１０μｌ）をポリアクリルアミド電気泳動ゲルで泳動した。目的のバンドを同定するため、ＰｌｕｓＯｎｅ Ｓｉｌｖｅｒ染色キット（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）を製造業者の指示に従って使用し、銀染色分析を行った。ゲルを、Ｇｅｌ Ｄｏｃ（商標）ＥＺシステム（Ｂｉｏ－Ｒａｄ）を使用して画像化した。
レポーター細胞アッセイ－ＩＬＴ３とフィブロネクチンの相互作用。９６ウェルＭａｘｉｓｏｒｐ（Ｎｕｎｃ）プレートを、５μｇ／ｍＬのヒトＦｃタンパク質（Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ）、血漿由来フィブロネクチン（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）、または組み換えフィブロネクチン（Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ）を含むＰＢＳで、室温にて２時間コーティングした。プレートをＰＢＳで２回洗浄した後、１０％ＦＢＳを含むＲＰＭＩ１６４０でブロックした。Ｂ７－Ｈ４細胞外ドメイン、ＬＡＩＲ１細胞外ドメイン、またはＩＬＴ３細胞外ドメインを発現するＮＦＡＴ－ＧＦＰレポーター細胞（本明細書では実施例５に記載）（１ｘ１０５細胞／ウェル）をコーティングしたウェルに加え、それらのプレートを３７℃で終夜インキュベートした。細胞をＦＡＣＳによりＧＦＰ発現についてアッセイし、非活性化レポーター細胞と比較した。
ＩＬＴ３とフィブロネクチンの相互作用の抗体阻害。９６ウェルＭａｘｉｓｏｒｐプレートを、５μｇ／ｍＬの血漿由来フィブロネクチンを含むＰＢＳで室温にて１時間コーティングした。コーティング後、アイソタイプ対照抗体、抗ＩＬＴ３抗体１６Ｃ５、抗フィブロネクチン抗体Ｆ１４（ウサギモノクローナル抗体）、または抗フィブロネクチン抗体ＰＡ５（ウサギポリクローナル抗体）を最終濃度５または２０μｇ／ｍＬでそのウェルに加えた。ＩＬＴ３細胞外ドメインを発現するＮＦＡＴ－ＧＦＰレポーター細胞（１ｘ１０５細胞／ウェル）をそのウェルに加え、それらのプレートを３７℃で終夜インキュベートした。細胞をＦＡＣＳによりＧＦＰ発現についてアッセイし、非活性化レポーター細胞と比較した。
ＩＬＴ３とフィブロネクチンの相互作用の抗体阻害。９６ウェルＭａｘｉｓｏｒｐプレートを、５μｇ／ｍＬの血漿由来フィブロネクチンで室温にて１時間コーティングした。コーティング後、アイソタイプ対照抗体、抗ＩＬＴ３抗体１６Ｃ５、または抗ＩＬＴ３抗体ｃｈ５Ａ７を、６６ｎＭ～．０００２ｎＭに及ぶ６倍希釈でそのウェルに加えた。次に、ＩＬＴ３細胞外ドメインを発現するＮＦＡＴ－ＧＦＰレポーター細胞（１ｘ１０５細胞／ウェル）をそのウェルに加え、それらのプレートを３７℃で終夜インキュベートした。細胞をＦＡＣＳによりＧＦＰ発現についてアッセイし、非活性化レポーター細胞と比較した。
フィブロネクチン構造の代表的な図である。
フィブロネクチンのＩＬＴ３結合部位を特定するためのレポーター細胞アッセイ。９６ウェルＭａｘｉｓｏｒｐプレートを、完全長フィブロネクチンまたはフィブロネクチン断片でコーティングした。これらのプレートを室温で２時間インキュベートした。プレートをＰＢＳで２回洗浄した後、１０％ＦＢＳを含むＲＰＭＩ１６４０でブロックした。ＩＬＴ３細胞外ドメインを発現するＮＦＡＴ－ＧＦＰレポーター細胞（１ｘ１０５細胞／ウェル）をそのウェルに加え、それらのプレートを３７℃で終夜インキュベートした。細胞をＦＡＣＳによりＧＦＰ発現についてアッセイし、非活性化レポーター細胞と比較した。
フィブロネクチンのＩＬＴ３結合部位を同定するためのレポーター細胞アッセイ。フィブロネクチン断片を調製し、完全長フィブロネクチンも同様に、９６ウェルＭａｘｉｓｏｒｐプレートにコーティングした。これらのプレートを室温で２時間インキュベートした。プレートをＰＢＳで２回洗浄した後、１０％ＦＢＳを含むＲＰＭＩ１６４０でブロックした。ＩＬＴ３細胞外ドメインを発現するＮＦＡＴ－ＧＦＰレポーター細胞（１ｘ１０５細胞／ウェル）をそのウェルに加え、それらのプレートを３７℃で終夜インキュベートした。細胞をＦＡＣＳによりＧＦＰ発現についてアッセイし、非活性化レポーター細胞と比較した。
ＴＨＰ－１細胞におけるＦｃＲが誘導する活性化。９６ウェルＭａｘｉｓｏｒｐプレートを、フィブロネクチン５μｇ／ｍＬならびに抗ＫＬＨ抗体０、１、５、及び１０μｇ／ｍＬで同時にコーティングした。プレートを室温で２時間インキュベートし、ＰＢＳで２回洗浄し、１０％ＦＢＳを含むＲＰＭＩ１６４０でブロックした。ＴＨＰ－１またはＴＨＰ－１ ＩＬＴ３－ＫＯ細胞（２ｘ１０５細胞／ウェル）をこれらのウェルに加え、それらのプレートを３７℃で終夜インキュベートした。無細胞培養上清を回収し、ＩＬ－８をＬｉｍｉｎｅｘアッセイによって測定した。ＩＬ－８を、ＦｃＲ刺激なしのＴＨＰ－１細胞のものに対して正規化した。
ＴＨＰ－１細胞におけるＦｃＲが誘導する活性化。図１２Ａ．９６ウェルＭａｘｉｓｏｒｐプレートを、フィブロネクチン及び抗ＫＬＨ抗体で同時にコーティングした。プレートを室温で２時間インキュベートし、洗浄し、１０％ＦＢＳを含むＲＰＭＩ１６４０でブロックした。ＴＨＰ－１またはＴＨＰ－１ ＩＬＴ３－ＫＯ細胞（２ｘ１０５細胞／ウェル）を、抗ＩＬＴ３抗体１６Ｃ５（５μｇ／ｍＬ）または抗ＫＬＨ抗体の存在下、それらのウェルに加えた。それらのプレートを３７℃で終夜インキュベートし、無細胞培養上清を回収し、ＩＬ－８をＬｉｍｉｎｅｘアッセイによって測定した。図１２Ｂ．ヒト単球を、凍結保存末梢血単核細胞から単離した。樹状細胞を生成するため、単球を２ｘ１０６細胞／ｍＬにて、ヒトＧＭ－ＣＳＦ及びヒトＩＬ－４を含むＸ－ＶＩＶＯ（商標）１５培地にプレーティングし、５～７日間培養した。９６ウェルＭａｘｉｓｏｒｐプレートを、フィブロネクチン及び抗ＫＬＨ抗体で同時にコーティングした。プレートを室温で２時間インキュベートし、洗浄し、１０％ＦＢＳを含むＲＰＭＩ１６４０でブロックした。樹状細胞（２ｘ１０５細胞／ウェル）を、抗ＩＬＴ３抗体１６Ｃ５または抗ＫＬＨ抗体の存在下、それらのウェルに加えた。これらのプレートを３７℃で終夜インキュベートし、無細胞培養上清を回収し、ＴＮＦ－αをＬｕｍｉｎｅｘアッセイによって測定した。図１２Ｃ．９６ウェルＭａｘｉｓｏｒｐプレートをフィブロネクチン及び抗ＫＬＨ抗体でコーティングした。プレートを室温で１時間インキュベートし、ＰＢＳで洗浄し、Ｘ－ＶＩＶＯ（商標）１５培地で３０分間ブロックした。樹状細胞を洗浄し、Ｘ－ＶＩＶＯ（商標）１５培地に再懸濁し、抗ＩＬＴ３抗体１６Ｃ５、抗ＩＬＴ３抗体ｃｈ５Ａ７、または対照抗ＫＬＨ抗体と室温で２０分間インキュベートした。細胞をコーティングしたウェルにプレーティングし（７ｘ１０４細胞／ウェル）、終夜インキュベートした。２４時間後、ＬｕｍｉｎｅｘアッセイによるＴＮＦα産生の測定のために培地を回収した。
ＴＨＰ－１細胞におけるＦｃＲが誘導する活性化。Ｎｕｎｃ Ｍａｘｉｓｏｒｐプレートを、ヒトフィブロネクチン及び抗ＫＬＨ抗体で室温にて２時間、同時にコーティングした。プレートをＸ－ＶＩＶＯ（商標）１５培地で３０分間ブロックした後、細胞及び試験抗体を添加した。ＴＨＰ－１ Ｄｕａｌ（商標）ＫＩ－ｍＳＴＩＮＧレポーター細胞を含むＸ－ＶＩＶＯ（商標）１５培地（２ｘ１０６細胞／ｍＬ）を、１：１の比で対照抗体、抗ＩＬＴ３抗体１６Ｃ５、または抗ＩＬＴ３抗体ｃｈ５Ａ７と混合した。その混合物を３０分間インキュベートし、１００μＬ／ウェルでプレートに播種し、そのプレートを終夜インキュベートした。レポーター活性を、２５μＬの培養上清と１００μＬのＱｕａｎｔｉ－Ｂｌｕｅ ＳＥＡＰ基質を混合し、そのサンプルを３７℃で２時間インキュベートし、６２０ｎｍでの吸光度を読み取ることによって測定した。
内因的に発現されたフィブロネクチンに対するＩＬＴ３の結合。Ｄｅｔｒｏｉｔ５５１細胞をポリ－Ｄ－リジンでコーティングした３８４ウェルプレートに６ｘ１０３細胞／ウェルでプレーティングし、２日間インキュベートした。単分子層をＭｇ２＋及びＣａ２＋を含むＨＢＳＳですすいだ。ＩＬＴ３－ＥＣＤ－Ｆｃを、抗ＩＬＴ３抗体１６Ｃ５、抗ＩＬＴ３抗体ｃｈ５Ａ７、または対照抗ＫＬＨ抗体の存在下、これらのウェルに加えた。これらの抗体は、ＩＬＴ３－ＥＣＤ－Ｆｃを含む培地で３倍連続希釈した（６６ｎＭ～０．２７ｎＭの範囲）。細胞を室温で１時間インキュベートした後、ＨＢＳＳで３回洗浄し、３．７％ホルマリンで１０分間固定した。単分子層をＰＢＳですすぎ、１％ＢＳＡを含むＰＢＳでブロックした後、Ｈｏｅｃｈｓｔ染色剤及び市販のポリクローナル抗ＩＬＴ３抗体で染色した。ＡｌｅｘａＦｌｕｏｒ ６４７コンジュゲートウサギ抗ヤギＦｃ二次抗体を加え、細胞を画像化し、ＣｅｌｌＩｎｓｉｇｈｔイメージングシステムを使用して蛍光レベルを定量化した。
抗ＩＬＴ３抗体が樹状細胞によるケモカイン産生に与える影響。マクロファージ遊走アッセイを、Ｉｎｃｕｃｙｔｅ（登録商標）Ｚｏｏｍ Ｌｉｖｅ－Ｃｅｌｌ分析システムを使用して行った。Ｉｎｃｕｃｙｔｅ Ｃｌｅａｒ－Ｖｉｅｗ ９６ウェル走化性プレート（Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ）の膜を、５０μｇ／ｍＬのＭａｔｒｉｇｅｌ（登録商標）（１０％ＦＢＳを含むＸ－ＶＩＶＯ（商標）１５培地で希釈）で３７℃にて３０分間、続いて室温で３０分間プレコートした。マクロファージ（５ｘ１０３細胞／ウェル）をこの走化性プレートの上側チャンバーに加え、下側チャンバーを樹状細胞由来の馴化培地で満たした。位相差画像を１時間ごとに２４時間キャプチャし、データをＩｎｃｕｃｙｔｅ分析ソフトウェアを使用して分析した。
Ａ～Ｂは、同種異系ＭＬＲアッセイを示す。
Ａ～Ｂは、抗ＩＬＴ３抗体が樹状細胞からのサイトカイン産生に与える影響を示す。
Ａ～Ｂは、抗ＩＬＴ３抗体が寛容化樹状細胞に与える影響を示す。
抗ＰＤ－１抗体と組み合わせた抗ＩＬＴ３抗体を用いた同種異系ＭＬＲアッセイを示す。
Ａ～Ｂは、抗ＩＬＴ３抗体が、初代マクロファージにおいてフィブロネクチンが媒介するＦｃＲシグナル伝達及びＴＮＦ－α産生の阻害を逆転させたことを示している。
Ａ～Ｂは、抗ＩＬＴ３抗体が、ＩＬ１０分極化マクロファージにおいてフィブロネクチンが媒介するＦｃＲシグナル伝達の阻害及びＩＬ－６産生を逆転させたことを示している。
抗ＩＬＴ３抗体が、カニクイザルＩＬＴ３を発現するＴＨＰ－１細胞におけるフィブロネクチンが媒介するＦｃＲシグナル伝達の阻害（ＮＦ－ｋＢレポーター活性）を逆転させたことを示している。
抗ＩＬＴ３抗体が、カニクイザル単球由来の樹状細胞においてフィブロネクチン（ＦＮ）が媒介するＭＩＰ－１α産生の阻害を逆転させたことを示している。＊はＰ＜０．００１を示す。
抗ＩＬＴ３抗体が、カニクイザル単球由来の樹状細胞においてフィブロネクチン（ＦＮ）が媒介するＦｃＲシグナル伝達の阻害及びＩＬ－８産生を逆転させたことを示している。＊はＰ＜０．０１を示す。
ヒト化マウスモデルにおける抗ＩＬＴ３抗体の抗腫瘍活性。
本開示は、免疫グロブリン様転写物３（ＩＬＴ３）に結合するポリペプチド、例えば、抗体が挙げられるがこれらに限定されない新規な薬剤を提供する。該ＩＬＴ３結合剤としては、ポリペプチド、抗体（その抗原結合断片を含む）、足場タンパク質、及びヘテロ二量体分子が挙げられるがこれらに限定されない。ＩＬＴ３結合剤としては、ＩＬＴ３活性のアンタゴニスト、ＩＬＴ３活性の阻害剤、及び／またはＩＬＴ３の抑制活性を阻害する薬剤が挙げられるがこれらに限定されない。関連するポリペプチド、ポリヌクレオチド、ベクター、該薬剤を含む組成物、該関連するポリヌクレオチドまたはベクターを含む細胞、及び該薬剤を製造する方法もまた提供する。該新規なＩＬＴ３結合剤の使用方法もまた提供する。
Ｉ．定義
本出願がより完全に理解され得るように、いくつかの定義を以下に示す。かかる定義は、文法的に同等のものを包含することを意図している。
「抗体」という用語は、最も広い意味で使用され、例えば、インタクトな免疫グロブリン、及び抗原結合部分を含む抗体断片を含む。従来の抗体の構造単位は、通常、四量体を含む。各四量体は、通常、２本の同一のポリペプチド鎖の対から構成され、各対は、１本の「軽」鎖（通常は約２５ｋＤａの分子量を有する）及び１本の「重」鎖（通常は約５０～７０ｋＤａの分子量を有する）を有する。ヒト軽鎖は、カッパ軽鎖及びラムダ軽鎖に分類される。本発明は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、及びＩｇＧ４が挙げられるがこれらに限定されないいくつかのサブクラスを有するＩｇＧクラスに一般に基づく抗体または抗体断片（抗体単量体）に関する。一般に、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２及びＩｇＧ４は、ＩｇＧ３よりも頻繁に使用される。ＩｇＧは、異なるアロタイプを有することに留意されたい。すべてのＩｇＧアロタイプを本発明に使用することができる。例えば、ＩｇＧ１は、３５６（ＤまたはＥ）及び３５８（ＬまたはＭ）に多型を有する。本明細書に示す配列は、３５６Ｅ／３５８Ｍアロタイプを使用するが、他のアロタイプが本明細書に含まれている。当業者には理解されるように、相補性決定領域（ＣＤＲ）の正確な付番及び配置は、付番方式によって異なり得る。しかしながら、可変重鎖及び／または可変軽鎖配列の開示は、関連する（固有の）ＣＤＲの開示を含むことを理解されたい。従って、各可変重鎖領域（ＶＨ）の開示は、ＶＨＣＤＲ（例えば、ＶＨＣＤＲ１、ＶＨＣＤＲ２及びＶＨＣＤＲ３）の開示であり、各可変軽鎖領域（ＶＬ）の開示は、ＶＬＣＤＲ（例えば、ＶＬＣＤＲ１、ＶＬＣＤＲ２及びＶＬＣＤＲ３）の開示である。
ＣＤＲの付番の有用な比較は、以下の通りである。Ｌａｆｒａｎｃ ｅｔ ａｌ．，Ｄｅｖ．Ｃｏｍｐ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２７（１）：５５－７７（２００３）を参照されたい：
Figure 2023507110000001
タンパク質配列に関する「アミノ酸配列同一性パーセント（％）」、「配列同一性パーセント（％）」または「同一性パーセント（％）」は、配列をアラインさせ、必要に応じてギャップを導入して、最大配列同一性パーセントを達成した後の、いずれの保存的置換も配列同一性の一部と見なさない、特定の（親）配列中のアミノ酸残基と同一の候補配列中のアミノ酸残基の百分率と定義される。アミノ酸配列同一性パーセントを決定する目的のためのアライメントは、当技術分野における技術の範囲内である種々の方式で、例えば、公開されているコンピュータソフトウェア、例えば、ＢＬＡＳＴ、ＢＬＡＳＴ－２、ＡＬＩＧＮ、またはＭｅｇａｌｉｇｎ（ＤＮＡＳＴＡＲ）ソフトウェアを使用して達成することができる。当業者には、比較される配列の全長にわたって最大のアライメントを達成するために必要な任意のアルゴリズムを含めたアライメントを測定するために適切なパラメータを決定することができる。ある特定のプログラムは、参照により本明細書に組み込まれる米国公開第２０１６０２４４５２５号のパラグラフ［０２７９］～［０２８０］に概説されているＡＬＩＧＮ－２プログラムである。核酸配列に適切な別のアライメントは、Ｓｍｉｔｈ ａｎｄ Ｗａｔｅｒｍａｎ，Ａｄｖａｎｃｅｓ ｉｎ Ａｐｐｌｉｅｄ Ｍａｔｈｅｍａｔｉｃｓ，２：４８２－４８９（１９８１）のローカルホモロジーアルゴリズムによって提供される。このアルゴリズムは、Ｄａｙｈｏｆｆ，Ａｔｌａｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ａｎｄ Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ，Ｍ．Ｏ．Ｄａｙｈｏｆｆ ｅｄ．，５ ｓｕｐｐｌ．３：３５３－３５８，Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｄ．Ｃ．，ＵＳＡによって開発され、Ｇｒｉｂｓｋｏｖ，Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．１４（６）：６７４５－６７６３（１９８６）によって正規化されるスコア行列を使用することにより、アミノ酸配列に適用することができる。
本明細書で使用される「Ｆｃ」または「Ｆｃ領域」または「Ｆｃドメイン」とは、第一の定常領域免疫グロブリンドメイン（例えば、ＣＨ１）及び場合によってはヒンジの一部を除く抗体の定常領域を含むポリペプチドを意味する。ＩｇＧの場合、該Ｆｃドメインは、免疫グロブリンドメインＣＨ２及びＣＨ３（Ｃγ２及びＣγ３）、ならびにＣＨ１（Ｃγ１）とＣＨ２（Ｃγ２）との間の下部ヒンジ領域を含む。該Ｆｃ領域の境界は変化する可能性があるが、ヒトＩｇＧ重鎖Ｆｃ領域は通常、そのカルボキシル末端に残基Ｃ２２６またはＰ２３０を含むように定義される。この付番は、Ｋａｂａｔにおけるのと同じＥＵインデックスに従う。従って、ＩｇＧとの関連で、「ＣＨ」ドメインは次の通りである：「ＣＨ１」は、Ｋａｂａｔにおけるのと同じＥＵインデックスに従って１１８～２１５位を指す。「ヒンジ」とは、Ｋａｂａｔにおけるのと同じＥＵインデックスに従って２１６～２３０位を指す。「ＣＨ２」は、Ｋａｂａｔにおけるのと同じＥＵインデックスに従って２３１～３４０位を指し、「ＣＨ３」は、Ｋａｂａｔにおけるのと同じＥＵインデックスに従って３４１～４４７位を指す。従って、「Ｆｃドメイン」には、－ＣＨ２－ＣＨ３ドメイン、及び任意にヒンジドメイン（ヒンジ－ＣＨ２－ＣＨ３）が含まれる。いくつかの実施形態では、以下にさらに十分に説明するように、アミノ酸修飾が該Ｆｃ領域に行われ、例えば、１つ以上のＦｃγＲ受容体または該ＦｃＲｎ受容体に対する結合が変更される。
本明細書で使用される、「骨髄細胞」とは、単球、マクロファージ、及び樹状細胞が挙げられるがこれらに限定されない骨髄起源を有する任意の細胞を指す。
ＣＤＲのアミノ酸配列に関して本明細書で使用される、「実質的に同一」とは、該ＣＤＲ配列における少なくとも１つのアミノ酸修飾（例えば、１、２、３、４、５、または６個のアミノ酸修飾）を指し、この場合、該ＣＤＲ配列の修飾と残りの５つのＣＤＲの組み合わせは（この５つのＣＤＲのいずれか１つ以上でのさらなる修飾の有無にかかわらず）、得られる抗原結合ドメインの親和性（例えば、ＢｉａｃｏｒｅシステムのＳＰＲ技術によって測定されるＫＤ）を、元の６つのＣＤＲを含む抗原結合ドメインと比較して５０倍を超えては変更しない。
ＩＩ．ＩＬＴ３結合剤
ヒトＩＬＴ３（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ番号Ｑ８ＮＨＪ６）及びカニクイザル（「ｃｙｎｏ」）ＩＬＴ３（ＮＣＢＩ参照番号ＸＰ＿０１５２９７１９８）のアミノ酸（ａａ）配列は、本明細書ではそれぞれ、配列番号１及び配列番号６として提供される。本明細書で使用される、ＩＬＴ３のアミノ酸位置への言及は、シグナル配列を含めたアミノ酸配列の付番を指す。
ＩＬＴ３は、予測分子量約４７ｋＤａのＩ型一回膜貫通タンパク質である。ＩＬＴ３は、骨髄抗原提示細胞、例えば、正常な単球、マクロファージ、及び樹状細胞で主に発現することが観察されている。ＩＬＴ３は、２つのＩｇ様Ｃ２型ドメインを含む細胞外ドメイン、膜貫通ドメイン、及び３つのＩＴＩＭドメインを含む長い細胞質ドメインを特徴とする（例えば、Ｃｅｌｌａ ｅｔ ａｌ．，１９９７，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．，１８５：１７４３－１７５１参照）。この２つのＩｇ様Ｃ２型ドメインは、本明細書ではドメイン１（Ｄ１）及びドメイン２（Ｄ２）と呼ばれることがある。Ｄ１は、該タンパク質のＮ末端部分に位置し、Ｄ２は、該膜貫通領域に最も近接している。ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ内で特徴づけられるように、ヒトＩＬＴ３は、４４８アミノ酸（ａａ）のタンパク質であり、そのシグナル配列は、ａａ１～２１であり、細胞外ドメインは、ａａ２２～２５９であり、膜貫通領域は、ａａ２６０～２８０であり、細胞質ドメインは、ａａ２８１～４４８である。細胞外ドメイン内では、Ｄ１は、ａａ２７～１８８であり、Ｄ２は、ａａ１２４～２１８であり、「ステム領域」は、ａａ２１９～２５９である。細胞質ドメインの場合、ＩＴＩＭは、ａａ３５８～３６３、４１０～４１５、及び４４０～４４５である。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、ＩＬＴ３またはＩＬＴ３の断片に結合する。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３の断片は、細胞外ドメインを含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３の断片は、Ｉｇ様Ｃ２型ドメインの１つ（例えば、Ｄ１またはＤ２）を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３の断片は、Ｉｇ様Ｃ２型ドメインの両方（例えば、Ｄ１－Ｄ２）を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３の断片は、Ｉｇ様Ｃ２型ドメインの両方及びステム領域（例えば、Ｄ１－Ｄ２－ステム）を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３の断片は、Ｉｇ様Ｃ２型ドメインの１つ及びステム領域（例えば、Ｄ１－ステムまたはＤ２－ステム）を含む。いくつかの実施形態では、該ヒトＩＬＴ３の細胞外ドメインは、配列番号１のアミノ酸２２～２５９を含む。いくつかの実施形態では、ヒトＩＬＴ３のＤ１は、配列番号１のアミノ酸２７～１１８を含む。いくつかの実施形態では、ヒトＩＬＴ３のＤ２は、配列番号１のアミノ酸１２４～２１８を含む。いくつかの実施形態では、ヒトＩＬＴ３のＤ１－Ｄ２は、配列番号１のアミノ酸２７～２１８を含む。いくつかの実施形態では、ヒトＩＬＴ３のＤ１－Ｄ２－ステムは、配列番号１のアミノ酸２７～２５９を含む。いくつかの実施形態では、ヒトＩＬＴ３のＤ２－ステムは、配列番号１のアミノ酸１２４～２５９を含む。いくつかの実施形態では、ヒトＩＬＴ３の断片は、配列番号３のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ヒトＩＬＴ３の断片は、配列番号４のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ヒトＩＬＴ３の断片は、配列番号５のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ヒトＩＬＴ３の断片は、配列番号４及び配列番号５のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ｃｙｎｏ ＩＬＴ３の細胞外ドメインは、配列番号６のアミノ酸２２～２５９を含む。いくつかの実施形態では、ｃｙｎｏ ＩＬＴ３のＤ１は、配列番号６のアミノ酸２７～１１８を含む。いくつかの実施形態では、ｃｙｎｏ ＩＬＴ３のＤ２は、配列番号６のアミノ酸１２４～２１８を含む。いくつかの実施形態では、ｃｙｎｏ ＩＬＴ３のＤ１－Ｄ２は、配列番号６のアミノ酸２７～２１８を含む。いくつかの実施形態では、ｃｙｎｏ ＩＬＴ３のＤ１－Ｄ２－ステムは、配列番号６のアミノ酸２７～２５９を含む。いくつかの実施形態では、ｃｙｎｏ ＩＬＴ３のＤ２－ステムは、配列番号６のアミノ酸１２４～２５９を含む。いくつかの実施形態では、ｃｙｎｏ ＩＬＴ３の断片は、配列番号８のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ｃｙｎｏ ＩＬＴ３の断片は、配列番号９のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ｃｙｎｏ ＩＬＴ３の断片は、配列番号１０のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ｃｙｎｏ ＩＬＴ３の断片は、配列番号９及び配列番号１０のアミノ酸配列を含む。ＩＬＴ３（例えば、ヒトＩＬＴ３またはｃｙｎｏ ＩＬＴ３）のドメインは、当業者によって異なって定義される場合があり、それ故、任意のＩＬＴ３ドメインまたは領域のＮ末端アミノ酸及びＣ末端アミノ酸は、１、２、３、４、５、またはそれ以上のアミノ酸残基が異なり得ることが理解される。
本開示は、ＩＬＴ３に結合する薬剤（例えば、抗体）を提供する。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、ＩＬＴ３の断片に結合する。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、ＩＬＴ３の特定の領域内に結合する。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、ＩＬＴ３の細胞外ドメイン内に結合する。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、ＩＬＴ３のＤ１ドメイン内に結合する。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、ＩＬＴ３のＤ２ドメイン内に結合する。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、ＩＬＴ３のＤ２－ステム領域内に結合する。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、ＩＬＴ３のＤ１ドメインとＤ２ドメインとの間の接合部内に結合する。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、ＩＬＴ３のエピトープに結合する。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、ＩＬＴ３のコンフォメーションエピトープに結合する。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、他のヒトＬＩＬＲＢタンパク質（例えば、ＩＬＴ２、ＩＬＴ４、ＩＬＴ５、またはＬＩＬＲＢ５）には結合しない。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、ヒトＬＩＬＲＡタンパク質（例えば、ＬＩＬＲＡ１、ＬＩＬＲＡ２、ＬＩＬＲＡ４、ＬＩＬＲＡ５、またはＬＩＬＲＡ６）には結合しない。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、ヒトＩＬＴ３に結合する。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、ｃｙｎｏ ＩＬＴ３に結合する。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、ヒトＩＬＴ３及びｃｙｎｏ ＩＬＴ３に結合する。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１に結合する。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号２に結合する。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１のアミノ酸２２～２５９内に結合する。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１のアミノ酸２７～１１８内に結合する。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１のアミノ酸１２４～２１８内に結合する。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１のアミノ酸１２４～２５９内に結合する。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１のアミノ酸２７～２１８内に結合する。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号３に結合する。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号４に結合する。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号５に結合する。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号４及び配列番号５を含むＩＬＴ３の断片に結合する。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号６に結合する。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号７に結合する。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号６のアミノ酸２２～２５９内に結合する。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号６のアミノ酸２７～１１８内に結合する。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号６のアミノ酸１２４～２１８内に結合する。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号６のアミノ酸２７～２１８内に結合する。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号８に結合する。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号９に結合する。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１０に結合する。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号９及び配列番号１０を含むＩＬＴ３の断片に結合する。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号２のアミノ酸配列を含むポリペプチドに結合する。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号３のアミノ酸配列を含むポリペプチドに結合する。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号４のアミノ酸配列を含むポリペプチドに結合する。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号５のアミノ酸配列を含むポリペプチドに結合する。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号４のアミノ酸配列及び配列番号５のアミノ酸配列を含むポリペプチドに結合する。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号７のアミノ酸配列を含むポリペプチドに結合する。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号８のアミノ酸配列を含むポリペプチドに結合する。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号９のアミノ酸配列を含むポリペプチドに結合する。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１０のアミノ酸配列を含むポリペプチドに結合する。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号９のアミノ酸配列及び配列番号１０のアミノ酸配列を含むポリペプチドに結合する。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号２内のアミノ酸を含むエピトープに結合する。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号３内のアミノ酸を含むエピトープに結合する。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号４内のアミノ酸を含むエピトープに結合する。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号５内のアミノ酸を含むエピトープに結合する。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号４及び配列番号５内のアミノ酸を含むエピトープに結合する。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号７内のアミノ酸を含むエピトープに結合する。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号８内のアミノ酸を含むエピトープに結合する。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号９内のアミノ酸を含むエピトープに結合する。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１０内のアミノ酸を含むエピトープに結合する。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号９及び配列番号１０内のアミノ酸を含むエピトープに結合する。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、ヒトＩＬＴ３に結合し、以下の特性の少なくとも１つ以上を有する：（ｉ）ｃｙｎｏ ＩＬＴ３に結合する、（ｉｉ）ヒト及びｃｙｎｏ ＩＬＴ３に結合する、（ｉｉｉ）ＩＬＴ２、ＩＬＴ４、ＩＬＴ５、及びＬＩＬＲＢ５には結合しない、（ｉｖ）ＬＩＬＲＡ１、ＬＩＬＲＡ２、ＬＩＬＲＡ４、ＬＩＬＲＡ５、及びＬＩＬＲＡ６には結合しない、（ｖ）ＩＬＴ３アンタゴニストである、（ｖｉ）ＩＬＴ３活性を阻害する、（ｖｉｉ）ＩＬＴ３を発現する細胞におけるＩＬＴ３シグナル伝達を阻害する、（ｖｉｉｉ）ＩＬＴ３のＡＰＯＥに対する結合を阻害する、（ｉｘ）ＩＬＴ３のフィブロネクチンに対する結合を阻害する、（ｘ）ＩＬＴ３のＣＮＴＦＲに対する結合を阻害する、（ｘｉ）ＩＬＴ３が誘導する骨髄細胞の抑制を阻害する、（ｘｉｉ）ＩＬＴ３が誘導する骨髄細胞活性の抑制を阻害する、（ｘｉｉｉ）ＩＬＴ３を発現する骨髄細胞におけるＦｃＲ活性を回復する、及び（ｘｉｖ）ＩＬＴ３を発現する骨髄細胞のケモカインに反応する能力を回復する。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、抗体である。いくつかの実施形態では、該抗体は、組み換え抗体である。いくつかの実施形態では、該抗体は、モノクローナル抗体である。いくつかの実施形態では、該抗体は、キメラ抗体である。いくつかの実施形態では、該抗体は、ヒト化抗体である。いくつかの実施形態では、該抗体は、ヒト抗体である。いくつかの実施形態では、該抗体は、ＩｇＧ抗体である。いくつかの実施形態では、該抗体は、ＩｇＧ１抗体である。いくつかの実施形態では、該抗体は、ＩｇＧ２抗体である。いくつかの実施形態では、該抗体は、ＩｇＧ３抗体である。いくつかの実施形態では、該抗体は、ＩｇＧ４抗体である。いくつかの実施形態では、該抗体は、ＩｇＧの重鎖を含む。いくつかの実施形態では、該抗体は、ＩｇＧ１の重鎖を含む。いくつかの実施形態では、該抗体は、ＩｇＧ２の重鎖を含む。いくつかの実施形態では、該抗体は、ＩｇＧ４の重鎖を含む。いくつかの実施形態では、該抗体は、カッパ軽鎖を含む。いくつかの実施形態では、該抗体は、カッパ軽鎖定常領域を含む。いくつかの実施形態では、該抗体は、ラムダ軽鎖を含む。いくつかの実施形態では、該抗体は、ラムダ軽鎖定常領域を含む。いくつかの実施形態では、該抗体は、抗原結合部位を含む抗体断片である。いくつかの実施形態では、該抗体は、ｓｃＦｖである。いくつかの実施形態では、該抗体は、ジスルフィドで連結されたｓｃＦｖである。いくつかの実施形態では、該抗体は、ジスルフィドで連結されたｓｃ（Ｆｖ）２である。いくつかの実施形態では、該抗体は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、またはＦ（ａｂ）２抗体である。いくつかの実施形態では、該抗体は、ダイアボディである。いくつかの実施形態では、該抗体は、ナノボディである。いくつかの実施形態では、該抗体は、単一特異性抗体である。いくつかの実施形態では、該抗体は、二重特異性抗体である。いくつかの実施形態では、該抗体は、多重特異性抗体である。いくつかの実施形態では、該抗体は、一価抗体である。いくつかの実施形態では、該抗体は、多価抗体である。いくつかの実施形態では、該抗体は、二価抗体である。いくつかの実施形態では、該抗体は、四価抗体である。
いくつかの実施形態では、該抗体は、単離される。いくつかの実施形態では、該抗体は、実質的に純粋である。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、ポリクローナル抗体である。ポリクローナル抗体は、当業者に既知の任意の方法によって調製することができる。いくつかの実施形態では、ポリクローナル抗体は、動物（例えば、ウサギ、ラット、マウス、ヤギ、ロバ）を、目的の抗原（例えば、精製ペプチド断片、組み換えタンパク質、または融合タンパク質）で、複数の皮下または腹腔内注射を使用して免疫化することによって産生される。いくつかの実施形態では、該抗原は、キーホールリンペットヘモシアニン（ＫＬＨ）、血清アルブミン、ウシサイログロブリン、またはダイズトリプシンインヒビター等の担体にコンジュゲートされる。該抗原（担体タンパク質の有無にかかわらない）は、滅菌生理食塩水で希釈され、通常はアジュバント（例えば、完全または不完全フロイントアジュバント）と混合され、安定なエマルジョンが形成される。一定期間後、該免疫化動物から（例えば、血液または腹水から）ポリクローナル抗体が回収される。いくつかの実施形態では、該ポリクローナル抗体は、血清または腹水から、アフィニティークロマトグラフィー、イオン交換クロマトグラフィー、ゲル電気泳動、及び／または透析が挙げられるがこれらに限定されない当技術分野で標準的な方法に従って精製される。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、モノクローナル抗体である。モノクローナル抗体は、当業者に既知の任意の方法によって調製することができる。いくつかの実施形態では、モノクローナル抗体は、当業者に既知のハイブリドーマ法を使用して調製される。例えば、ハイブリドーマ法を使用して、マウス、ラット、ウサギ、ハムスター、または他の適切な宿主動物を、上記のように免疫化する。いくつかの実施形態では、リンパ球がインビトロで免疫化される。いくつかの実施形態では、該免疫抗原は、ヒトタンパク質またはその断片である。いくつかの実施形態では、該免疫抗原は、マウスタンパク質またはその断片である。いくつかの実施形態では、該免疫抗原は、ｃｙｎｏタンパク質またはその断片である。
免疫化に続いて、リンパ球が単離され、適切な骨髄腫細胞株と、例えば、ポリエチレングリコールを使用して融合される。ハイブリドーマ細胞は、当技術分野で既知の特殊培地を使用して選択され、融合していないリンパ球及び骨髄腫細胞は、この選択過程で残らない。選択した抗原に対して特異的なモノクローナル抗体を産生するハイブリドーマは、免疫沈降、イムノブロッティング、ならびにインビトロ結合アッセイ（例えば、フローサイトメトリー、ＦＡＣＳ、ＥＬＩＳＡ、ＳＰＲ（例えば、Ｂｉａｃｏｒｅ）、及びラジオイムノアッセイ）が挙げられるがこれらに限定されない様々な方法で特定され得る。所望の特異性、親和性、及び／または活性を有する抗体を産生するハイブリドーマ細胞が特定された後、当該クローンは、限界希釈技術によってサブクローニングされ得る。いくつかの実施形態では、ハイスループット法を使用して、単一細胞ハイブリドーマ細胞をプレートに分配する。これらのハイブリドーマは、標準的な方法を使用したインビトロ培養で、または動物の腹水腫瘍としてインビボで増殖させることができる。モノクローナル抗体は、アフィニティークロマトグラフィー、イオン交換クロマトグラフィー、ゲル電気泳動、及び透析が挙げられるがこれらに限定されない当技術分野で標準的な方法に従って当該培地または腹水から精製することができる。
いくつかの実施形態では、モノクローナル抗体は、当業者に既知の組み換えＤＮＡ技術を使用して製造される。例えば、抗体をコードするポリヌクレオチドは、成熟Ｂ細胞またはハイブリドーマ細胞から、例えば、ＲＴ－ＰＣＲによって、当該抗体の重鎖及び軽鎖をコードする遺伝子を特異的に増幅するオリゴヌクレオチドプライマーを使用して単離され、それらの配列は、標準的な技術を使用して決定される。単離された該重鎖及び軽鎖をコードするポリヌクレオチドはその後、適切な発現ベクターにクローニングされ、これが、宿主細胞、例えば、それ以外には免疫グロブリンタンパク質を産生しないＥ．ｃｏｌｉ、サルＣＯＳ細胞、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞、または骨髄腫細胞にトランスフェクトされた際にモノクローナル抗体を産生する。
いくつかの実施形態では、組み換えモノクローナル抗体は、所望の種の可変ドメインまたはＣＤＲを発現するファージディスプレイライブラリーから単離される。ファージライブラリーのスクリーニングは、当技術分野で既知の様々な技術によって達成され得る。
いくつかの実施形態では、モノクローナル抗体は、組み換えＤＮＡ技術を使用して修飾され、別の抗体が生成される。いくつかの実施形態では、マウスモノクローナル抗体の軽鎖及び重鎖の定常ドメインは、ヒト抗体の定常領域の代わりに用いられ、キメラ抗体が生成される。いくつかの実施形態では、該定常領域は、切断または除去され、モノクローナル抗体の所望の抗体断片が生成される。いくつかの実施形態では、該可変領域（複数可）の部位特異的または高密度突然変異誘発を使用して、モノクローナル抗体の特異性及び親和性が最適化される。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、ヒト化抗体である。ヒト化抗体を生成する様々な方法が当技術分野で既知である。いくつかの実施形態では、ヒト化抗体は、非ヒト起源から導入された１つ以上のアミノ酸残基を含む。いくつかの実施形態では、ヒト化は、１つ以上の非ヒトＣＤＲ配列を、ヒト抗体の対応するＣＤＲ配列の代わりに用いることによって行われる。いくつかの実施形態では、該ヒト化抗体は、非ヒト抗体（例えば、マウス抗体）の６つのＣＤＲすべてを、ヒト抗体の対応するＣＤＲの代わりに用いることによって構築される。
ヒト化抗体を生成するために使用するヒト重鎖可変領域及び／または軽鎖可変領域の選択は、様々な要因に基づいて、当技術分野で既知の様々な方法によって行われ得る。いくつかの実施形態では、「最良適合」法は、非ヒト（例えば、げっ歯類）抗体の可変領域の配列が、既知のヒト可変領域配列のライブラリー全体に対してスクリーニングされる場合に使用される。非ヒト（例えば、げっ歯類）配列のものに最も類似しているヒト配列が、ヒト化抗体のヒト可変領域フレームワークとして選択される。いくつかの実施形態では、軽鎖または重鎖の特定の下位群の全ヒト抗体のコンセンサス配列に由来する特定の可変領域フレームワークが、該可変領域フレームワークとして選択される。いくつかの実施形態では、該可変領域フレームワーク配列は、最も豊富なヒトサブクラスのコンセンサス配列に由来する。いくつかの実施形態では、ヒト生殖系列遺伝子は、該可変領域フレームワーク配列の供給源として使用される。
ヒト化に関する他の方法としては、ヒト生殖系列フレームワークへのＣＤＲの直接導入として説明される「超ヒト化」と呼ばれる方法、「抗体の人間らしさ」の測定基準に基づくヒトストリング含有量（Ｈｕｍａｎ Ｓｔｒｉｎｇ Ｃｏｎｔｅｎｔ（ＨＳＣ））と呼ばれる方法、ヒト化バリアントの大規模なライブラリー（ファージ、リボソーム、及び酵母ディスプレイライブラリーを含む）の生成に基づく方法、ならびにフレームワーク領域のシャフリングに基づく方法が挙げられるがこれらに限定されない。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、ヒト抗体である。ヒト抗体は、当技術分野で既知の様々な技術を使用して調製することができる。いくつかの実施形態では、ヒト抗体は、インビトロで免疫化された不死化ヒトＢリンパ球から生成される。いくつかの実施形態では、ヒト抗体は、免疫化された個体から単離されたリンパ球から生成される。いずれの場合も、標的抗原に対する抗体を産生する細胞を生成及び単離することができる。いくつかの実施形態では、ヒト抗体は、ヒト抗体を発現するファージライブラリーから選択される。別の方法として、ファージディスプレイ技術を使用して、非免疫化ヒトドナーに由来する免疫グロブリン可変領域遺伝子レパートリーから、インビトロでヒト抗体及び抗体断片を産生してもよい。抗体ファージライブラリーの生成及び使用のための技術は、当技術分野で周知である。抗体が同定された後、鎖シャフリング及び部位特異的突然変異誘発法が挙げられるがこれらに限定されない当技術分野で既知の親和性成熟戦略を使用して、高親和性ヒト抗体を生成してもよい。いくつかの実施形態では、ヒト抗体は、ヒト免疫グロブリン遺伝子座を含むトランスジェニックマウスで産生される。免疫化後、これらのマウスは、内因性免疫グロブリン産生がない限り、ヒト抗体の完全なレパートリーを産生することができる。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、抗体断片である。本明細書で使用される、「抗体断片」という用語は、抗体の一部及び一般に抗原結合部位を含むインタクトな抗体以外の分子を指す。抗体断片の例としては、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、単鎖抗体分子（例えば、ｓｃＦｖ）、ジスルフィドで連結されたｓｃＦｖ（ｄｓｓｃＦｖ）、ナノボディ、ダイアボディ、トリボディ、テトラボディ、ミニボディ、デュアル可変ドメイン抗体（ＤＶＤ）、シングル可変ドメイン抗体（例えば、ラクダ抗体）、及び抗体断片から形成される多重特異性抗体が挙げられるがこれらに限定されない。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、ｓｃＦｖ抗体である。いくつかの実施形態では、該ｓｃＦｖは、ジスルフィドで連結されたｓｃＦｖ（ｄｓｓｃＦｖ）であり、これは、該ｓｃＦｖの軽鎖可変領域と重鎖可変領域との間に操作されたジスルフィド結合を含むｓｃＦｖである。いくつかの実施形態では、該ジスルフィド結合は、該ｓｃＦｖ分子の安定性を増加させる。いくつかの実施形態では、該ジスルフィド結合は、該ｓｃＦｖ分子の熱安定性を増加させる。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、Ｆｖである。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、Ｆａｂである。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、Ｆ（ａｂ’）２である。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、Ｆ（ａｂ’）である。
抗体断片は、インタクトな抗体のタンパク質分解が挙げられるがこれに限定されない様々な技術によって製造され得る。本明細書に記載の抗体断片は、当技術分野で既知の組み換え技術（例えば、Ｅ．ｃｏｌｉまたはファージ発現）を使用して産生され得る。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、二重特異性抗体である。二重特異性抗体は、少なくとも２つの異なる抗原またはエピトープを認識し、結合することができる。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、多重特異性抗体である。多重特異性抗体は、少なくとも３つの異なる抗原またはエピトープを認識し、結合することができる。該異なるエピトープは、同じ分子内（例えば、ＩＬＴ３上の２つ以上のエピトープ）にある場合もあれば、異なる分子上（例えば、ＩＬＴ３の１つのエピトープ及びＩＬＴ３以外の１つ以上の標的（複数可）上の残りのエピトープ（複数可））にある場合もある。いくつかの実施形態では、二重特異性または多重特異性抗体は、個々の抗体または２つ以上の抗体の組み合わせと比較して、高い効力を有する。いくつかの実施形態では、二重特異性または多重特異性抗体は、個々の抗体または２つ以上の抗体の組み合わせと比較して、低い毒性を有する。当業者には、任意の治療薬が固有の薬物動態（ＰＫ）（例えば、循環半減期）を有し得ることが知られている。いくつかの実施形態では、二重特異性または多重特異性抗体は、２つ以上の活性結合剤のＰＫを同期させる能力を有する。この場合、該２つ以上の個々の結合剤は、異なるＰＫプロファイルを有する。いくつかの実施形態では、二重特異性または多重特異性抗体は、対象（例えば、ヒト）の共通領域（例えば、組織）に２つ以上の薬剤の作用を集中させる能力を有する。いくつかの実施形態では、二重特異性または多重特異性抗体は、共通標的（例えば、特定の細胞型）に２つ以上の薬剤の作用を集中させる能力を有する。いくつかの実施形態では、二重特異性または多重特異性抗体は、複数の生物学的経路または機能に２つ以上の薬剤の作用を標的化する能力を有する。いくつかの実施形態では、二重特異性または多重特異性抗体は、２つ以上の異なる細胞を標的とし、それらを緊密にする能力を有する。
いくつかの実施形態では、二重特異性または多重特異性抗体は、減少した毒性及び／または副作用を有する。いくつかの実施形態では、二重特異性または多重特異性抗体は、２つ以上の個々の抗体の混合物または単剤としての抗体と比較して、毒性及び／または副作用が少ない。いくつかの実施形態では、二重特異性または多重特異性抗体は、増加した治療指数を有する。いくつかの実施形態では、二重特異性または多重特異性抗体は、２つ以上の個々の抗体の混合物または単剤としての抗体と比較して、治療指数が高い。
二重特異性または多重特異性抗体を製造するための多くの技術が当業者に既知である。いくつかの実施形態では、二重特異性または多重特異性抗体は、２つの重鎖間の界面の一部であるアミノ酸に修飾を有する重鎖定常領域を含む。これらの修飾は、ヘテロ二量体の形成を促進し、一般にホモ二量体の形成を低減または排除するために行われる。いくつかの実施形態では、該二重特異性または多重特異性抗体は、ノブ－イントゥ－ホール（ＫＩＨ）戦略を使用して生成される。いくつかの実施形態では、該二重特異性または多重特異性抗体は、同一の重鎖間にジスルフィド結合を形成することができないバリアントヒンジ領域を含む（例えば、ホモ二量体形成を減少させる）。いくつかの実施形態では、該二重特異性または多重特異性抗体は、静電相互作用に変化をもたらすアミノ酸の変化を伴う重鎖を含む。いくつかの実施形態では、該二重特異性または多重特異性抗体は、疎水性／親水性相互作用に変化をもたらすアミノ酸の変化を伴う重鎖を含む。
いくつかの実施形態では、該二重特異性または多重特異性抗体は、インタクトな抗体の場合もあれば、抗原結合部位を含む抗体断片の場合もある。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、ＩＬＴ３に結合する抗体である。いくつかの実施形態では、抗ＩＬＴ３抗体は、ヒトＩＬＴ３に結合する。いくつかの実施形態では、抗ＩＬＴ３抗体は、ｃｙｎｏ ＩＬＴ３に結合する。いくつかの実施形態では、抗ＩＬＴ３抗体は、ヒトＩＬＴ３及びｃｙｎｏ ＩＬＴ３に結合する。いくつかの実施形態では、抗ＩＬＴ３抗体は、ＩＬＴ３エピトープに結合する。いくつかの実施形態では、抗ＩＬＴ３抗体は、ヒトＩＬＴ３の細胞外ドメイン内のＩＬＴ３エピトープに結合する。いくつかの実施形態では、抗ＩＬＴ３抗体は、ｃｙｎｏ ＩＬＴ３の細胞外ドメイン内のＩＬＴ３エピトープに結合する。いくつかの実施形態では、抗ＩＬＴ３抗体は、配列番号１のアミノ酸２２～２５９内の少なくとも１つのアミノ酸を含むエピトープに結合する。いくつかの実施形態では、抗ＩＬＴ３抗体は、配列番号１のアミノ酸２２～１２０内の少なくとも１つのアミノ酸を含むエピトープに結合する。いくつかの実施形態では、抗ＩＬＴ３抗体は、配列番号１のアミノ酸２７～１１８内の少なくとも１つのアミノ酸を含むエピトープに結合する。いくつかの実施形態では、抗ＩＬＴ３抗体は、配列番号１のアミノ酸１２１～２５９内の少なくとも１つのアミノ酸を含むエピトープに結合する。いくつかの実施形態では、抗ＩＬＴ３抗体は、配列番号１のアミノ酸１２４～２１８内の少なくとも１つのアミノ酸を含むエピトープに結合する。いくつかの実施形態では、抗ＩＬＴ３抗体は、配列番号１のアミノ酸１２４～２５９内の少なくとも１つのアミノ酸を含むエピトープに結合する。いくつかの実施形態では、抗ＩＬＴ３抗体は、配列番号３内のアミノ酸を含むエピトープに結合する。いくつかの実施形態では、抗ＩＬＴ３抗体は、配列番号４内のアミノ酸を含むエピトープに結合する。いくつかの実施形態では、抗ＩＬＴ３抗体は、配列番号５内のアミノ酸を含むエピトープに結合する。いくつかの実施形態では、抗ＩＬＴ３抗体は、配列番号４及び配列番号５内のアミノ酸を含むエピトープに結合する。いくつかの実施形態では、該エピトープは、コンフォメーションエピトープである。いくつかの実施形態では、該エピトープは、線状エピトープである。
いくつかの実施形態では、抗ＩＬＴ３抗体は、ヒトＩＬＴ３の細胞外ドメイン内で結合をめぐって第二の薬剤と競合する。いくつかの実施形態では、抗ＩＬＴ３抗体は、ｃｙｎｏ ＩＬＴ３の細胞外ドメイン内で結合をめぐって第二の薬剤と競合する。いくつかの実施形態では、抗ＩＬＴ３抗体は、配列番号１のアミノ酸２２～２５９内で結合をめぐって第二の薬剤と競合する。いくつかの実施形態では、抗ＩＬＴ３抗体は、配列番号１のアミノ酸２２～１２０内で結合をめぐって第二の薬剤と競合する。いくつかの実施形態では、抗ＩＬＴ３抗体は、配列番号１のアミノ酸２７～１１８内で結合をめぐって第二の薬剤と競合する。いくつかの実施形態では、抗ＩＬＴ３抗体は、配列番号１のアミノ酸１２１～２５９内で結合をめぐって第二の薬剤と競合する。いくつかの実施形態では、抗ＩＬＴ３抗体は、配列番号１のアミノ酸１２４～２１８内で結合をめぐって第二の薬剤と競合する。いくつかの実施形態では、抗ＩＬＴ３抗体は、配列番号１のアミノ酸１２４～２５９内で結合をめぐって第二の薬剤と競合する。いくつかの実施形態では、抗ＩＬＴ３抗体は、配列番号３のアミノ酸配列内で結合をめぐって第二の薬剤と競合する。いくつかの実施形態では、抗ＩＬＴ３抗体は、配列番号４のアミノ酸配列内で結合をめぐって第二の薬剤と競合する。いくつかの実施形態では、抗ＩＬＴ３抗体は、配列番号５のアミノ酸配列内で結合をめぐって第二の薬剤と競合する。いくつかの実施形態では、抗ＩＬＴ３抗体は、配列番号４及び配列番号５のアミノ酸配列内で結合をめぐって第二の薬剤と競合する。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、本明細書に記載の抗ＩＬＴ３抗体である。いくつかの実施形態では、該ＩＬＴ３結合剤は、本明細書に記載の抗ＩＬＴ３抗体のバリアントである。いくつかの実施形態では、該ＩＬＴ３抗体のバリアントは、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤の１つ以上の結合特性を保持している。いくつかの実施形態では、抗ＩＬＴ３抗体のバリアントは、１～３０個のアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、該抗ＩＬＴ３抗体のバリアントは、１～２５個のアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、該抗ＩＬＴ３抗体のバリアントは、１～２０個のアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、該抗ＩＬＴ３抗体のバリアントは、１～１５個のアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、該抗ＩＬＴ３抗体のバリアントは、１～１０個のアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、該抗ＩＬＴ３抗体のバリアントは、１～５個のアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、該抗ＩＬＴ３抗体のバリアントは、１～３個のアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、該アミノ酸置換（複数可）は、該抗体のＣＤＲ内にある。いくつかの実施形態では、該アミノ酸置換（複数可）は、該抗体のＣＤＲ内にはない。いくつかの実施形態では、該アミノ酸置換（複数可）は、該抗体のフレームワーク領域内にある。いくつかの実施形態では、該アミノ酸置換（複数可）は、保存的アミノ酸置換である。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤の１つ以上の結合特性を保持しながら、本明細書に記載の抗体のＣＤＲ内に１つ以上（例えば、１、２、３、４、５、または６等）のアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、該アミノ酸置換は、保存的置換である。いくつかの実施形態では、ＣＤＲは、１つのアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、ＣＤＲは、２つのアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、ＣＤＲは、３つのアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、ＣＤＲは、４つのアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、該ＣＤＲは、重鎖可変領域ＣＤＲ１である。いくつかの実施形態では、該ＣＤＲは、重鎖可変領域ＣＤＲ２である。いくつかの実施形態では、該ＣＤＲは、重鎖可変領域ＣＤＲ３である。いくつかの実施形態では、該ＣＤＲは、軽鎖可変領域ＣＤＲ１である。いくつかの実施形態では、該ＣＤＲは、軽鎖可変領域ＣＤＲ２である。いくつかの実施形態では、該ＣＤＲは、軽鎖可変領域ＣＤＲ３である。いくつかの実施形態では、かかる６つのＣＤＲの１つ以上は、６つ以下のアミノ酸置換を有する。いくつかの実施形態では、該置換は、ヒト化プロセスの一部として行われる。いくつかの実施形態では、該置換は、生殖細胞系列ヒト化プロセスの一部として行われる。いくつかの実施形態では、該置換は、親和性成熟プロセスの一部として行われる。いくつかの実施形態では、該置換は、最適化プロセスの一部として行われる。
抗体のＣＤＲは、当業者によって様々な方法／方式を使用して定義される。これらの方式及び／または定義は、長年にわたって開発及び改良されており、それらとしては、Ｋａｂａｔ、Ｃｈｏｔｈｉａ、ＩＭＧＴ、ＡｂＭ、及びＣｏｎｔａｃｔが挙げられる。Ｋａｂａｔの定義は、配列変化に基づいており、一般に使用されている。Ｃｈｏｔｈｉａの定義は、構造ループ領域の位置に基づいている。ＩＭＧＴ方式は、可変ドメインの構造内の配列変化及び位置に基づいている。ＡｂＭの定義は、ＫａｂａｔとＣｈｏｔｈｉａとの間の折衷である。Ｃｏｎｔａｃｔの定義は、利用可能な抗体の結晶構造の分析に基づいている。例示的な方式は、ＫａｂａｔとＣｈｏｔｈｉａの組み合わせである。ソフトウェアプログラム（例えば、ａｂＹｓｉｓ）が利用可能であり、抗体配列の分析及びＣＤＲの決定で当業者に知られている。
本明細書で定義される特定のＣＤＲ配列は、一般に、Ｋａｂａｔ及びＣｈｏｔｈｉａの定義（例示的な定義）の組み合わせに基づいている。しかしながら、特定の抗体の重鎖可変領域ＣＤＲ（複数可）及び／または軽鎖可変領域ＣＤＲ（複数可）への言及は、当業者に既知のすべてのＣＤＲの定義を包含することが理解されよう。
いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗ＩＬＴ３抗体は、Ｋａｂａｔの定義に基づく抗体３Ａ３、５Ａ７、Ｈｚ５Ａ７、１２Ａ１２、１６Ｃ５、４５Ｇ１０、４８Ａ６、または５３Ｆ１０の６つのＣＤＲを含む。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗ＩＬＴ３抗体は、Ｃｈｏｔｈｉａの定義に基づく抗体３Ａ３、５Ａ７、Ｈｚ５Ａ７、１２Ａ１２、１６Ｃ５、４５Ｇ１０、４８Ａ６、または５３Ｆ１０の６つのＣＤＲを含む。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗ＩＬＴ３抗体は、ＡｂＭの定義に基づく抗体３Ａ３、５Ａ７、Ｈｚ５Ａ７、１２Ａ１２、１６Ｃ５、４５Ｇ１０、４８Ａ６、または５３Ｆ１０の６つのＣＤＲを含む。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗ＩＬＴ３抗体は、ＩＭＧＴの定義に基づく抗体３Ａ３、５Ａ７、Ｈｚ５Ａ７、１２Ａ１２、１６Ｃ５、４５Ｇ１０、４８Ａ６、または５３Ｆ１０の６つのＣＤＲを含む。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗ＩＬＴ３抗体は、Ｃｏｎｔａｃｔの定義に基づく抗体３Ａ３、５Ａ７、Ｈｚ５Ａ７、１２Ａ１２、１６Ｃ５、４５Ｇ１０、４８Ａ６、または５３Ｆ１０の６つのＣＤＲを含む。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗ＩＬＴ３抗体は、例示的な定義に基づく抗体３Ａ３、５Ａ７、Ｈｚ５Ａ７、１２Ａ１２、１６Ｃ５、４５Ｇ１０、４８Ａ６、または５３Ｆ１０の６つのＣＤＲを含む。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、本明細書に記載の抗体のいずれか１つの１、２、３、４、５、及び／または６つのＣＤＲを含む抗ＩＬＴ３抗体である。いくつかの実施形態では、抗ＩＬＴ３抗体は、（ｉ）表１から１、２、及び／または３つの重鎖可変領域ＣＤＲを含む重鎖可変領域、及び／または（ｉｉ）表１から１、２、及び／または３つの軽鎖可変領域ＣＤＲを含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗ＩＬＴ３抗体は、（ｉ）表２から１、２、及び／または３つの重鎖可変領域ＣＤＲを含む重鎖可変領域、及び／または（ｉｉ）表２から１、２、及び／または３つの軽鎖可変領域ＣＤＲを含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗ＩＬＴ３抗体は、（ｉ）表３から１、２、及び／または３つの重鎖可変領域ＣＤＲを含む重鎖可変領域、及び／または（ｉｉ）表３から１、２、及び／または３つの軽鎖可変領域ＣＤＲを含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗ＩＬＴ３抗体は、（ｉ）表４から１、２、及び／または３つの重鎖可変領域ＣＤＲを含む重鎖可変領域、及び／または（ｉｉ）表４から１、２、及び／または３つの軽鎖可変領域ＣＤＲを含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗ＩＬＴ３抗体は、（ｉ）表５から１、２、及び／または３つの重鎖可変領域ＣＤＲを含む重鎖可変領域、及び／または（ｉｉ）表５から１、２、及び／または３つの軽鎖可変領域ＣＤＲを含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗ＩＬＴ３抗体は、（ｉ）表６から１、２、及び／または３つの重鎖可変領域ＣＤＲを含む重鎖可変領域、及び／または（ｉｉ）表６から１、２、及び／または３つの軽鎖可変領域ＣＤＲを含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗ＩＬＴ３抗体は、（ｉ）表７から１、２、及び／または３つの重鎖可変領域ＣＤＲを含む重鎖可変領域、及び／または（ｉｉ）表７から１、２、及び／または３つの軽鎖可変領域ＣＤＲを含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗ＩＬＴ３抗体は、（ｉ）表８から１、２、及び／または３つの重鎖可変領域ＣＤＲを含む重鎖可変領域、及び／または（ｉｉ）表８から１、２、及び／または３つの軽鎖可変領域ＣＤＲを含む軽鎖可変領域を含む。
いくつかの実施形態では、抗ＩＬＴ３抗体は、（ｉ）表１から３つの重鎖可変領域ＣＤＲを含む重鎖可変領域、及び（ｉｉ）表１から３つの軽鎖可変領域ＣＤＲを含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗ＩＬＴ３抗体は、（ｉ）表２から３つの重鎖可変領域ＣＤＲを含む重鎖可変領域、及び（ｉｉ）表２から３つの軽鎖可変領域ＣＤＲを含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗ＩＬＴ３抗体は、（ｉ）表３から３つの重鎖可変領域ＣＤＲを含む重鎖可変領域、及び（ｉｉ）表３から３つの軽鎖可変領域ＣＤＲを含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗ＩＬＴ３抗体は、（ｉ）表４から３つの重鎖可変領域ＣＤＲを含む重鎖可変領域、及び（ｉｉ）表４から３つの軽鎖可変領域ＣＤＲを含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗ＩＬＴ３抗体は、（ｉ）表５から３つの重鎖可変領域ＣＤＲを含む重鎖可変領域、及び（ｉｉ）表５から３つの軽鎖可変領域ＣＤＲを含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗ＩＬＴ３抗体は、（ｉ）表６から３つの重鎖可変領域ＣＤＲを含む重鎖可変領域、及び（ｉｉ）表６から３つの軽鎖可変領域ＣＤＲを含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗ＩＬＴ３抗体は、（ｉ）表７から３つの重鎖可変領域ＣＤＲを含む重鎖可変領域、及び（ｉｉ）表７から３つの軽鎖可変領域ＣＤＲを含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗ＩＬＴ３抗体は、（ｉ）表８から３つの重鎖可変領域ＣＤＲを含む重鎖可変領域、及び（ｉｉ）表８から３つの軽鎖可変領域ＣＤＲを含む軽鎖可変領域を含む。


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いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、本明細書に記載の抗体由来の重鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３及び／または軽鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、本明細書に記載の抗体由来の重鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３ならびに軽鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、本明細書に記載の抗体由来の（ａ）重鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに（ｂ）軽鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、抗体５Ａ７由来の重鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３及び／または軽鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３、そのヒト化型、またはそのバリアントを含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、抗体５Ａ７由来の重鎖可変領域ＣＤＲ１、重鎖可変領域ＣＤＲ２、及び重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域を含む。他の実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、抗体５Ａ７由来の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及び軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。ある特定の実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、抗体５Ａ７由来の（ａ）重鎖可変領域ＣＤＲ１、重鎖可変領域ＣＤＲ２、重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに（ｂ）軽鎖可変領域ＣＤＲ１、軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及び軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、抗体５Ａ７のヒト化型（例えば、Ｈｚ５Ａ７）である。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、抗体５Ａ７またはヒト化５Ａ７のバリアント（例えば、Ｈｚ５Ａ７．ｖ５）である。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、抗体Ｈｚ５Ａ７．ｖ５由来の重鎖可変領域ＣＤＲ１、重鎖可変領域ＣＤＲ２、及び重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域を含む。他の実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、抗体Ｈｚ５Ａ７．ｖ５由来の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及び軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。ある特定の実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、抗体Ｈｚ５Ａ７．ｖ５由来の（ａ）重鎖可変領域ＣＤＲ１、重鎖可変領域ＣＤＲ２、重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに（ｂ）軽鎖可変領域ＣＤＲ１、軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及び軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、抗体３Ａ３由来の重鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３及び／または軽鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３、そのヒト化型、またはそのバリアントを含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、抗体３Ａ３由来の重鎖可変領域ＣＤＲ１、重鎖可変領域ＣＤＲ２、及び重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域を含む。他の実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、抗体３Ａ３由来の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及び軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。ある特定の実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、抗体３Ａ３由来の（ａ）重鎖可変領域ＣＤＲ１、重鎖可変領域ＣＤＲ２、重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに（ｂ）軽鎖可変領域ＣＤＲ１、軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及び軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、抗体３Ａ３のヒト化型である。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、抗体３Ａ３のバリアントである。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、抗体１２Ａ１２由来の重鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３及び／または軽鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３、そのヒト化型、またはそのバリアントを含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、抗体１２Ａ１２由来の重鎖可変領域ＣＤＲ１、重鎖可変領域ＣＤＲ２、及び重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域を含む。他の実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、抗体１２Ａ１２由来の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及び軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。ある特定の実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、抗体１２Ａ１２由来の（ａ）重鎖可変領域ＣＤＲ１、重鎖可変領域ＣＤＲ２、重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに（ｂ）軽鎖可変領域ＣＤＲ１、軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及び軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、抗体１２Ａ１２のヒト化型である。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、抗体１２Ａ１２のバリアントである。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、抗体１６Ｃ５由来の重鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３及び／または軽鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３、そのヒト化型、またはそのバリアントを含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、抗体１６Ｃ５由来の重鎖可変領域ＣＤＲ１、重鎖可変領域ＣＤＲ２、及び重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域を含む。他の実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、抗体１６Ｃ５由来の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及び軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。ある特定の実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、抗体１６Ｃ５由来の（ａ）重鎖可変領域ＣＤＲ１、重鎖可変領域ＣＤＲ２、重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに（ｂ）軽鎖可変領域ＣＤＲ１、軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及び軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、抗体１６Ｃ５のヒト化型である。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、抗体１６Ｃ５のバリアントである。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、抗体４５Ｇ１０由来の重鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３及び／または軽鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３、そのヒト化型、またはそのバリアントを含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、抗体４５Ｇ１０由来の重鎖可変領域ＣＤＲ１、重鎖可変領域ＣＤＲ２、及び重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域を含む。他の実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、抗体４５Ｇ１０由来の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及び軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。ある特定の実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、抗体４５Ｇ１０由来の（ａ）重鎖可変領域ＣＤＲ１、重鎖可変領域ＣＤＲ２、重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに（ｂ）軽鎖可変領域ＣＤＲ１、軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及び軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、抗体４５Ｇ１０のヒト化型である。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、抗体４５Ｇ１０のバリアントである。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、抗体４８Ａ６由来の重鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３及び／または軽鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３、そのヒト化型、またはそのバリアントを含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、抗体４８Ａ６由来の重鎖可変領域ＣＤＲ１、重鎖可変領域ＣＤＲ２、及び重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域を含む。他の実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、抗体４８Ａ６由来の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及び軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。ある特定の実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、抗体４８Ａ６由来の（ａ）重鎖可変領域ＣＤＲ１、重鎖可変領域ＣＤＲ２、重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに（ｂ）軽鎖可変領域ＣＤＲ１、軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及び軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、抗体４８Ａ６のヒト化型である。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、抗体４８Ａ６のバリアントである。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、抗体５３Ｆ１０由来の重鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３及び／または軽鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３、そのヒト化型、またはそのバリアントを含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、抗体５３Ｆ１０由来の重鎖可変領域ＣＤＲ１、重鎖可変領域ＣＤＲ２、及び重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域を含む。他の実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、抗体５３Ｆ１０由来の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及び軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。ある特定の実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、抗体５３Ｆ１０由来の（ａ）重鎖可変領域ＣＤＲ１、重鎖可変領域ＣＤＲ２、重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに（ｂ）軽鎖可変領域ＣＤＲ１、軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及び軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、抗体５３Ｆ１０のヒト化型である。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、抗体５３Ｆ１０のバリアントである。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）は、（ａ）アミノ酸配列ＧＦＴＦＳＳＹＧＭＳ（配列番号２７）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＴＩＳＧＧＧＳＹＴＮＹＰＤＳＶＫＧ（配列番号２８）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＲＥＷＲＭＴＬＹＡＭＤＹ（配列番号２９）もしくはＲＥＷＲＹＴＬＹＡＭＤＹ（配列番号１０５）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびにアミノ酸配列ＲＡＳＥＳＶＤＳＹＧＮＳＦＭＨ（配列番号３０）もしくはＲＡＳＥＳＶＥＳＹＧＳＳＦＭＨ（配列番号１０６）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＬＴＳＮＬＥＳ（配列番号３１）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＱＱＮＮＥＤＰＦＴ（配列番号３２）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域、（ｂ）アミノ酸配列ＧＦＴＦＳＳＹ（配列番号３３）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＳＧＧＧＳＹ（配列番号３４）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＲＥＷＲＭＴＬＹＡＭＤＹ（配列番号２９）もしくはＲＥＷＲＹＴＬＹＡＭＤＹ（配列番号１０５）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびにアミノ酸配列ＲＡＳＥＳＶＤＳＹＧＮＳＦＭＨ（配列番号３０）もしくはＲＡＳＥＳＶＥＳＹＧＳＳＦＭＨ（配列番号１０６）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＬＴＳＮＬＥＳ（配列番号３１）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＱＱＮＮＥＤＰＦＴ（配列番号３２）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域、（ｃ）アミノ酸配列ＧＦＴＦＳＳＹＧＭＳ（配列番号２７）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＴＩＳＧＧＧＳＹＴＮ（配列番号３５）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＲＥＷＲＭＴＬＹＡＭＤＹ（配列番号２９）もしくはＲＥＷＲＹＴＬＹＡＭＤＹ（配列番号１０５）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびにアミノ酸配列ＲＡＳＥＳＶＤＳＹＧＮＳＦＭＨ（配列番号３０）もしくはＲＡＳＥＳＶＥＳＹＧＳＳＦＭＨ（配列番号１０６）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＬＴＳＮＬＥＳ（配列番号３１）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＱＱＮＮＥＤＰＦＴ（配列番号３２）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域、（ｄ）アミノ酸配列ＳＹＧＭＳ（配列番号３６）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＴＩＳＧＧＧＳＹＴＮＹＰＤＳＶＫＧ（配列番号２８）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＲＥＷＲＭＴＬＹＡＭＤＹ（配列番号２９）もしくはＲＥＷＲＹＴＬＹＡＭＤＹ（配列番号１０５）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびにアミノ酸配列ＲＡＳＥＳＶＤＳＹＧＮＳＦＭＨ（配列番号３０）もしくはＲＡＳＥＳＶＥＳＹＧＳＳＦＭＨ（配列番号１０６）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＬＴＳＮＬＥＳ（配列番号３１）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＱＱＮＮＥＤＰＦＴ（配列番号３２）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域、または（ｅ）アミノ酸配列ＳＳＹＧＭＳ（配列番号３７）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＷＶＡＴＩＳＧＧＧＳＹＴＮ（配列番号３８）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＡＲＲＥＷＲＭＴＬＹＡＭＤ（配列番号３９）もしくはＡＲＲＥＷＲＹＴＬＹＡＭＤ（配列番号１０７）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびにアミノ酸配列ＤＳＹＧＮＳＦＭＨＷＹ（配列番号４０）もしくはＥＳＹＧＳＳＦＭＨＷＹ（配列番号１０８）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＬＬＩＹＬＴＳＮＬＥ（配列番号４１）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＱＱＮＮＥＤＰＦ（配列番号４２）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）は、（ａ）アミノ酸配列ＧＦＴＦＳＳＹＧＭＳ（配列番号２７）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＴＩＳＧＧＧＳＹＴＮＹＰＤＳＶＫＧ（配列番号２８）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＲＥＷＲＭＴＬＹＡＭＤＹ（配列番号２９）もしくはＲＥＷＲＹＴＬＹＡＭＤＹ（配列番号１０５）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び／または（ｂ）アミノ酸配列ＲＡＳＥＳＶＤＳＹＧＮＳＦＭＨ（配列番号３０）もしくはＲＡＳＥＳＶＥＳＹＧＳＳＦＭＨ（配列番号１０６）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＬＴＳＮＬＥＳ（配列番号３１）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＱＱＮＮＥＤＰＦＴ（配列番号３２）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、該ＩＬＴ３結合剤は、アミノ酸配列ＧＦＴＦＳＳＹＧＭＳ（配列番号２７）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＴＩＳＧＧＧＳＹＴＮＹＰＤＳＶＫＧ（配列番号２８）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＲＥＷＲＭＴＬＹＡＭＤＹ（配列番号２９）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、該ＩＬＴ３結合剤は、アミノ酸配列ＧＦＴＦＳＳＹＧＭＳ（配列番号２７）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＴＩＳＧＧＧＳＹＴＮＹＰＤＳＶＫＧ（配列番号２８）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＲＥＷＲＹＴＬＹＡＭＤＹ（配列番号１０５）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、該ＩＬＴ３結合剤は、アミノ酸配列ＲＡＳＥＳＶＤＳＹＧＮＳＦＭＨ（配列番号３０）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＬＴＳＮＬＥＳ（配列番号３１）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＱＱＮＮＥＤＰＦＴ（配列番号３２）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、該ＩＬＴ３結合剤は、アミノ酸配列ＲＡＳＥＳＶＥＳＹＧＳＳＦＭＨ（配列番号１０６）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＬＴＳＮＬＥＳ（配列番号３１）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＱＱＮＮＥＤＰＦＴ（配列番号３２）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、該ＩＬＴ３結合剤は、（ａ）アミノ酸配列ＧＦＴＦＳＳＹＧＭＳ（配列番号２７）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＴＩＳＧＧＧＳＹＴＮＹＰＤＳＶＫＧ（配列番号２８）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＲＥＷＲＭＴＬＹＡＭＤＹ（配列番号２９）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに（ｂ）アミノ酸配列ＲＡＳＥＳＶＤＳＹＧＮＳＦＭＨ（配列番号３０）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＬＴＳＮＬＥＳ（配列番号３１）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＱＱＮＮＥＤＰＦＴ（配列番号３２）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、該ＩＬＴ３結合剤は、（ａ）アミノ酸配列ＧＦＴＦＳＳＹＧＭＳ（配列番号２７）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＴＩＳＧＧＧＳＹＴＮＹＰＤＳＶＫＧ（配列番号２８）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＲＥＷＲＹＴＬＹＡＭＤＹ（配列番号１０５）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに（ｂ）アミノ酸配列ＲＡＳＥＳＶＥＳＹＧＳＳＦＭＨ（配列番号１０６）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＬＴＳＮＬＥＳ（配列番号３１）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＱＱＮＮＥＤＰＦＴ（配列番号３２）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。
ある特定の実施形態では、ＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）は、（ａ）アミノ酸配列ＧＦＴＦＳＳＹＧＭＳ（配列番号２７）、または１、２、３、４、５、もしくは６つのアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＴＩＳＧＧＧＳＹＴＮＹＰＤＳＶＫＧ（配列番号２８）、または１、２、３、４、５、もしくは６つのアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＲＥＷＲＭＴＬＹＡＭＤＹ（配列番号２９）、ＲＥＷＲＹＴＬＹＡＭＤＹ（配列番号１０５）、または１、２、３、４、５、もしくは６つのアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに（ｂ）アミノ酸配列ＲＡＳＥＳＶＤＳＹＧＮＳＦＭＨ（配列番号３０）、ＲＡＳＥＳＶＥＳＹＧＳＳＦＭＨ（配列番号１０６）、または１、２、３、４、５、もしくは６つのアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＬＴＳＮＬＥＳ（配列番号３１）、または１、２、３、４、５、もしくは６つのアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＱＱＮＮＥＤＰＦＴ（配列番号３２）、または１、２、３、４、５、もしくは６つのアミノ酸置換を含むそのバリアントを含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）は、当該ＣＤＲ配列内の脱アミド化を低減するように修飾された１つ以上の重鎖可変領域ＣＤＲまたは軽鎖可変領域ＣＤＲを含む。脱アミド化とは、アミノ酸アスパラギン（ＡｓｎもしくはＮ）またはグルタミン（ＧｌｎもしくはＱ）の側鎖のアミド官能基が除去されるか、または別の官能基に変換される化学反応である。一般に、アスパラギンは、アスパラギン酸またはイソアスパラギン酸に変換され、グルタミンは、グルタミン酸またはポリグルタミン酸に変換される。場合によっては、脱アミド化によってポリペプチドの構造、機能、及び／または安定性が変化する可能性があり、生物活性が低下する可能性がある。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗体の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及び／またはＣＤＲ３は、脱アミド化を低減するように修飾される。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗体の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及び／またはＣＤＲ３は、脱アミド化を低減するように修飾される。抗体５Ａ７、３Ａ３、Ｈｚ５Ａ７、１２Ａ１２、１６Ｃ５、４５Ｇ１０、４８Ａ６、または５３Ｆ１０の重鎖可変領域ＣＤＲ及び軽鎖可変領域ＣＤＲのいずれか１つを修飾し、脱アミド化を低減することができる。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）は、異性化を低減するように修飾された１つ以上の重鎖可変領域ＣＤＲまたは軽鎖可変領域ＣＤＲを含む。異性化とは、化合物がその異性体、すなわち、同じ化学組成であるが異なる構造またはコンフィギュレーションを有し、物理的及び化学的特性が異なる可能性のある形態のいずれかに変換される化学過程である。研究によって、ＣＤＲ内のアスパラギン酸（ＡｓｐまたはＤ）の異性化は、抗体の結合及び／または安定性に影響を与える可能性があることが示されている。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗体の重鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及び／またはＣＤＲ３は、異性化を低減するように修飾される。いくつかの実施形態では、該軽鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及び／またはＣＤＲ３は、異性化を低減するように修飾される。抗体５Ａ７、３Ａ３、Ｈｚ５Ａ７、１２Ａ１２、１６Ｃ５、４５Ｇ１０、４８Ａ６、または５３Ｆ１０の重鎖可変領域ＣＤＲ及び軽鎖可変領域ＣＤＲのいずれか１つを修飾し、異性化を低減することができる。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）は、酸化を低減するように修飾された１つ以上の重鎖可変領域ＣＤＲまたは軽鎖可変領域ＣＤＲを含む。酸化とは、酸素が原子に付加される化学過程であり、例えば、メチオニンは、その硫黄原子に酸素を付加することによってメチオニンスルホキシドに変換される。１つ以上のアミノ酸の酸化は、タンパク質の物理的及び化学的特性に潜在的に影響を与え得る。研究によって、ＣＤＲ内のメチオニン（ＭｅｔまたはＭ）の酸化は、抗体の結合及び／または安定性に影響を与える可能性があることが示されている。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗体の重鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及び／またはＣＤＲ３は、酸化（例えば、メチオニンの酸化）を低減するように修飾される。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗体の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及び／またはＣＤＲ３は、酸化（例えば、メチオニンの酸化）を低減するように修飾される。抗体５Ａ７、３Ａ３、Ｈｚ５Ａ７、１２Ａ１２、１６Ｃ５、４５Ｇ１０、４８Ａ６、または５３Ｆ１０の重鎖可変領域ＣＤＲ及び軽鎖可変領域ＣＤＲのいずれか１つを修飾し、メチオニンの酸化を低減することができる。
いくつかの実施形態では、抗ＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）は、抗体５Ａ７の重鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、配列番号１１１の配列に対して少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有する重鎖可変領域、ならびに抗体５Ａ７の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、配列番号１１２の配列に対して少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有する軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、抗ＩＬＴ３結合剤は、抗体Ｈｚ５Ａ７．ｖ５の重鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、配列番号１２３の配列に対して少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有する重鎖可変領域、ならびに抗体Ｈｚ５Ａ７．ｖ５の軽鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、配列番号１２４の配列に対して少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有する軽鎖可変領域を含む。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）は、配列番号１１１の配列に対して少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９７％、または少なくとも９９％の同一性を有する重鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１１２の配列に対して少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９７％、または少なくとも９９％の同一性を有する軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１２３の配列に対して少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９７％、または少なくとも９９％の同一性を有する重鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１２４の配列に対して少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９７％、または少なくとも９９％の同一性を有する軽鎖可変領域を含む。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）は、配列番号１１１のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１１２のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１２３のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１２４のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）は、配列番号１１１に対して少なくとも８０％の配列同一性を有する重鎖可変領域及び配列番号１１２に対して少なくとも８０％の配列同一性を有する軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１１１に対して少なくとも９０％の配列同一性を有する重鎖可変領域及び配列番号１１２に対して少なくとも９０％の配列同一性を有する軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１１１に対して少なくとも９５％の配列同一性を有する重鎖可変領域及び配列番号１１２に対して少なくとも９５％の配列同一性を有する軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１１１のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号１１２のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）は、配列番号１２３に対して少なくとも８０％の配列同一性を有する重鎖可変領域及び配列番号１２４に対して少なくとも８０％の配列同一性を有する軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１２３に対して少なくとも９０％の配列同一性を有する重鎖可変領域及び配列番号１２４に対して少なくとも９０％の配列同一性を有する軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１２３に対して少なくとも９５％の配列同一性を有する重鎖可変領域及び配列番号１２４に対して少なくとも９５％の配列同一性を有する軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１２３のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号１２４のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。
ある特定の実施形態では、ＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）は、ＧＦＴＦＳＳＹＧＭＳ（配列番号２７）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、ＴＩＳＧＧＧＳＹＴＮＹＰＤＳＶＫＧ（配列番号２８）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、ＲＥＷＲＹＴＬＹＡＭＤＹ（配列番号１０５）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびにＲＡＳＥＳＶＥＳＹＧＳＳＦＭＨ（配列番号１０６）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、ＬＴＳＮＬＥＳ（配列番号３１）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びＱＱＮＮＥＤＰＦＴ（配列番号３２）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含み、該重鎖可変領域は、配列番号１２３の配列に対して少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９７％の同一性を含み、該軽鎖可変領域は、配列番号１２４の配列に対して少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９７％の同一性を含む。
ある特定の実施形態では、ＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）は、ＧＦＴＦＳＳＹＧＭＳ（配列番号２７）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、ＴＩＳＧＧＧＳＹＴＮＹＰＤＳＶＫＧ（配列番号２８）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、ＲＥＷＲＹＴＬＹＡＭＤＹ（配列番号１０５）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖、ならびにＲＡＳＥＳＶＥＳＹＧＳＳＦＭＨ（配列番号１０６）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、ＬＴＳＮＬＥＳ（配列番号３１）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びＱＱＮＮＥＤＰＦＴ（配列番号３２）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖を含み、該重鎖は、配列番号１２６の配列に対して少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９７％、または１００％の同一性を含み、該軽鎖は、配列番号１２８の配列に対して少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９７％、または１００％の同一性を含む。ある特定の実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、ＧＦＴＦＳＳＹＧＭＳ（配列番号２７）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、ＴＩＳＧＧＧＳＹＴＮＹＰＤＳＶＫＧ（配列番号２８）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、ＲＥＷＲＹＴＬＹＡＭＤＹ（配列番号１０５）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖、ならびにＲＡＳＥＳＶＥＳＹＧＳＳＦＭＨ（配列番号１０６）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、ＬＴＳＮＬＥＳ（配列番号３１）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びＱＱＮＮＥＤＰＦＴ（配列番号３２）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖を含み、該重鎖は、配列番号１２６の配列に対して少なくとも９５％の同一性を含み、該軽鎖は、配列番号１２８の配列に対して少なくとも９５％の同一性を含む。ある特定の実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、（ａ）配列番号１２６のアミノ酸を含む重鎖ならびに（ｂ）ＲＡＳＥＳＶＥＳＹＧＳＳＦＭＨ（配列番号１０６）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、ＬＴＳＮＬＥＳ（配列番号３１）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びＱＱＮＮＥＤＰＦＴ（配列番号３２）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖を含み、該軽鎖は、配列番号１２８の配列に対して少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９７％、または１００％の同一性を含む。ある特定の実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、（ａ）ＧＦＴＦＳＳＹＧＭＳ（配列番号２７）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、ＴＩＳＧＧＧＳＹＴＮＹＰＤＳＶＫＧ（配列番号２８）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、ＲＥＷＲＹＴＬＹＡＭＤＹ（配列番号１０５）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖であって、配列番号１２６の配列に対して少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９７％、または１００％の同一性を含む重鎖、ならびに（ｂ）配列番号１２８のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１２６のアミノ酸配列を含む重鎖及び配列番号１２８のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む抗体である。
いくつかの実施形態では、該ＩＬＴ３結合剤は、抗体５Ａ７である。いくつかの実施形態では、該ＩＬＴ３結合剤は、抗体Ｈｚ５Ａ７．ｖ５である。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）は、（ａ）アミノ酸配列ＧＦＳＬＴＳＹＧＶＨ（配列番号１１）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＶＩＷＰＧＧＴＩＮＹＮＳＡＬＭＳ（配列番号１２）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＤＫＹＤＧＧＷＦＡＹ（配列番号１３）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびにアミノ酸配列ＫＡＳＱＮＶＲＴＡＶＡ（配列番号１４）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＬＡＳＮＲＨＴ（配列番号１５）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＬＱＨＬＮＹＰＬＴ（配列番号１６）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域、（ｂ）アミノ酸配列ＧＦＳＬＴＳＹ（配列番号１７）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＷＰＧＧＴ（配列番号１８）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＤＫＹＤＧＧＷＦＡＹ（配列番号１３）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびにアミノ酸配列ＫＡＳＱＮＶＲＴＡＶＡ（配列番号１４）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＬＡＳＮＲＨＴ（配列番号１５）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＬＱＨＬＮＹＰＬＴ（配列番号１６）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域、（ｃ）アミノ酸配列ＧＦＳＬＴＳＹＧＶＨ（配列番号１１）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＶＩＷＰＧＧＴＩＮ（配列番号１９）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＤＫＹＤＧＧＷＦＡＹ（配列番号１３）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびにアミノ酸配列ＫＡＳＱＮＶＲＴＡＶＡ（配列番号１４）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＬＡＳＮＲＨＴ（配列番号１５）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＬＱＨＬＮＹＰＬＴ（配列番号１６）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域、（ｄ）アミノ酸配列ＳＹＧＶＨ（配列番号２０）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＶＩＷＰＧＧＴＩＮＹＮＳＡＬＭＳ（配列番号１２）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＤＫＹＤＧＧＷＦＡＹ（配列番号１３）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびにアミノ酸配列ＫＡＳＱＮＶＲＴＡＶＡ（配列番号１４）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＬＡＳＮＲＨＴ（配列番号１５）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＬＱＨＬＮＹＰＬＴ（配列番号１６）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域、または（ｅ）アミノ酸配列ＴＳＹＧＶＨ（配列番号２１）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＷＬＧＶＩＷＰＧＧＴＩＮ（配列番号２２）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＡＳＤＫＹＤＧＧＷＦＡ（配列番号２３）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびにアミノ酸配列ＲＴＡＶＡＷＹ（配列番号２４）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＡＬＩＹＬＡＳＮＲＨ（配列番号２５）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＬＱＨＬＮＹＰＬ（配列番号２６）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、アミノ酸配列ＧＦＳＬＴＳＹＧＶＨ（配列番号１１）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＶＩＷＰＧＧＴＩＮＹＮＳＡＬＭＳ（配列番号１２）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＤＫＹＤＧＧＷＦＡＹ（配列番号１３）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、アミノ酸配列ＫＡＳＱＮＶＲＴＡＶＡ（配列番号１４）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＬＡＳＮＲＨＴ（配列番号１５）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＬＱＨＬＮＹＰＬＴ（配列番号１６）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、（ａ）アミノ酸配列ＧＦＳＬＴＳＹＧＶＨ（配列番号１１）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＶＩＷＰＧＧＴＩＮＹＮＳＡＬＭＳ（配列番号１２）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＤＫＹＤＧＧＷＦＡＹ（配列番号１３）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに（ｂ）アミノ酸配列ＫＡＳＱＮＶＲＴＡＶＡ（配列番号１４）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＬＡＳＮＲＨＴ（配列番号１５）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＬＱＨＬＮＹＰＬＴ（配列番号１６）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１０９の配列に対して少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９７％、または少なくとも９９％の同一性を有する重鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１１０の配列に対して少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９７％、または少なくとも９９％の同一性を有する軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１０９のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１１０のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１０９に対して少なくとも８０％の配列同一性を有する重鎖可変領域及び配列番号１１０に対して少なくとも８０％の配列同一性を有する軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１０９に対して少なくとも９０％の配列同一性を有する重鎖可変領域及び配列番号１１０に対して少なくとも９０％の配列同一性を有する軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１０９に対して少なくとも９５％の配列同一性を有する重鎖可変領域及び配列番号１１０に対して少なくとも９５％の配列同一性を有する軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１０９のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号１１０のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。
いくつかの実施形態では、該ＩＬＴ３結合剤は、抗体３Ａ３である。いくつかの実施形態では、該ＩＬＴ３結合剤は、抗体３Ａ３のヒト化型である。いくつかの実施形態では、該ＩＬＴ３結合剤は、抗体３Ａ３のバリアントまたはヒト化された抗体３Ａ３である。
ある特定の実施形態では、ＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）は、（ａ）アミノ酸配列ＧＹＴＦＴＤＹＮＭＤ（配列番号４３）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＹＩＹＰＮＮＧＧＴＧＹＮＱＫＦＮＳ（配列番号４４）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＳＰＹＹＤＹＶＧＳＹＡＭＤＹ（配列番号４５）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびにアミノ酸配列ＴＡＳＳＳＶＳＳＳＹＬＨ（配列番号４６）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＳＴＳＮＬＡＳ（配列番号４７）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＨＱＹＨＲＳＰＲＴ（配列番号４８）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域、（ｂ）アミノ酸配列ＧＹＴＦＴＤＹ（配列番号４９）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＹＰＮＮＧＧ（配列番号５０）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＳＰＹＹＤＹＶＧＳＹＡＭＤＹ（配列番号４５）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびにアミノ酸配列ＴＡＳＳＳＶＳＳＳＹＬＨ（配列番号４６）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＳＴＳＮＬＡＳ（配列番号４７）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＨＱＹＨＲＳＰＲＴ（配列番号４８）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域、（ｃ）アミノ酸配列ＧＹＴＦＴＤＹＮＭＤ（配列番号４３）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＹＩＹＰＮＮＧＧＴＧ（配列番号５１）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＳＰＹＹＤＹＶＧＳＹＡＭＤＹ（配列番号４５）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびにアミノ酸配列ＴＡＳＳＳＶＳＳＳＹＬＨ（配列番号４６）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＳＴＳＮＬＡＳ（配列番号４７）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＨＱＹＨＲＳＰＲＴ（配列番号４８）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域、（ｄ）アミノ酸配列ＤＹＮＭＤ（配列番号５２）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＹＩＹＰＮＮＧＧＴＧＹＮＱＫＦＮＳ（配列番号４４）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＳＰＹＹＤＹＶＧＳＹＡＭＤＹ（配列番号４５）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびにアミノ酸配列ＴＡＳＳＳＶＳＳＳＹＬＨ（配列番号４６）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＳＴＳＮＬＡＳ（配列番号４７）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＨＱＹＨＲＳＰＲＴ（配列番号４８）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域、または（ｅ）アミノ酸配列ＴＤＹＮＭＤ（配列番号５３）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＷＩＧＹＩＹＰＮＮＧＧＴＧ（配列番号５４）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＡＳＳＰＹＹＤＹＶＧＳＹＡＭＤ（配列番号５５）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびにアミノ酸配列ＳＳＳＹＬＨＷＹ（配列番号５６）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＬＷＩＹＳＴＳＮＬＡ（配列番号５７）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＨＱＹＨＲＳＰＲ（配列番号５８）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、アミノ酸配列ＧＹＴＦＴＤＹＮＭＤ（配列番号４３）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＹＩＹＰＮＮＧＧＴＧＹＮＱＫＦＮＳ（配列番号４４）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＳＰＹＹＤＹＶＧＳＹＡＭＤＹ（配列番号４５）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、アミノ酸配列ＴＡＳＳＳＶＳＳＳＹＬＨ（配列番号４６）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＳＴＳＮＬＡＳ（配列番号４７）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＨＱＹＨＲＳＰＲＴ（配列番号４８）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、（ａ）アミノ酸配列ＧＹＴＦＴＤＹＮＭＤ（配列番号４３）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＹＩＹＰＮＮＧＧＴＧＹＮＱＫＦＮＳ（配列番号４４）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＳＰＹＹＤＹＶＧＳＹＡＭＤＹ（配列番号４５）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに（ｂ）アミノ酸配列ＴＡＳＳＳＶＳＳＳＹＬＨ（配列番号４６）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＳＴＳＮＬＡＳ（配列番号４７）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＨＱＹＨＲＳＰＲＴ（配列番号４８）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１１３の配列に対して少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９７％、または少なくとも９９％の同一性を有する重鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１１４の配列に対して少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９７％、または少なくとも９９％の同一性を有する軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１１３のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１１４のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１１３に対して少なくとも８０％の配列同一性を有する重鎖可変領域及び配列番号１１４に対して少なくとも８０％の配列同一性を有する軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１１３に対して少なくとも９０％の配列同一性を有する重鎖可変領域及び配列番号１１４に対して少なくとも９０％の配列同一性を有する軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１１３に対して少なくとも９５％の配列同一性を有する重鎖可変領域及び配列番号１１４に対して少なくとも９５％の配列同一性を有する軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１１３のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号１１４のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。
いくつかの実施形態では、該ＩＬＴ３結合剤は、抗体１２Ａ１２である。いくつかの実施形態では、該ＩＬＴ３結合剤は、抗体１２Ａ１２のヒト化型である。いくつかの実施形態では、該ＩＬＴ３結合剤は、抗体１２Ａ１２のバリアントまたはヒト化された抗体１２Ａ１２である。
ある特定の実施形態では、ＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）は、（ａ）アミノ酸配列ＧＹＴＦＴＤＹＮＭＤ（配列番号４３）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＹＩＹＰＳＮＧＧＴＧＹＮＱＫＦＫＳ（配列番号５９）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＶＰＹＹＤＹＬＹＹＹＡＭＤＹ（配列番号６０）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびにアミノ酸配列ＲＡＳＳＳＶＳＦＭＨ（配列番号６１）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＡＴＳＮＬＡＳ（配列番号６２）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＱＱＷＳＴＮＰＹＭＹＴ（配列番号６３）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域、（ｂ）アミノ酸配列ＧＹＴＦＴＤＹ（配列番号４９）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＹＰＳＮＧＧ（配列番号６４）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＶＰＹＹＤＹＬＹＹＹＡＭＤＹ（配列番号６０）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびにアミノ酸配列ＲＡＳＳＳＶＳＦＭＨ（配列番号６１）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＡＴＳＮＬＡＳ（配列番号６２）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＱＱＷＳＴＮＰＹＭＹＴ（配列番号６３）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域、（ｃ）アミノ酸配列ＧＹＴＦＴＤＹＮＭＤ（配列番号４３）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＹＩＹＰＳＮＧＧＴＧ（配列番号６５）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＶＰＹＹＤＹＬＹＹＹＡＭＤＹ（配列番号６０）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびにアミノ酸配列ＲＡＳＳＳＶＳＦＭＨ（配列番号６１）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＡＴＳＮＬＡＳ（配列番号６２）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＱＱＷＳＴＮＰＹＭＹＴ（配列番号６３）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域、（ｄ）アミノ酸配列ＤＹＮＭＤ（配列番号５２）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＹＩＹＰＳＮＧＧＴＧＹＮＱＫＦＫＳ（配列番号５９）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＶＰＹＹＤＹＬＹＹＹＡＭＤＹ（配列番号６０）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびにアミノ酸配列ＲＡＳＳＳＶＳＦＭＨ（配列番号６１）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＡＴＳＮＬＡＳ（配列番号６２）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＱＱＷＳＴＮＰＹＭＹＴ（配列番号６３）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域、または（ｅ）アミノ酸配列ＴＤＹＮＭＤ（配列番号５３）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＷＩＧＹＩＹＰＳＮＧＧＴＧ（配列番号６６）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＡＲＶＰＹＹＤＹＬＹＹＹＡＭＤ（配列番号６７）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびにアミノ酸配列ＳＦＭＨＷＹ（配列番号６８）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＰＷＩＹＡＴＳＮＬＡ（配列番号６９）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＱＱＷＳＴＮＰＹＭＹ（配列番号７０）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、アミノ酸配列ＧＹＴＦＴＤＹＮＭＤ（配列番号４３）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＹＩＹＰＳＮＧＧＴＧＹＮＱＫＦＫＳ（配列番号５９）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＶＰＹＹＤＹＬＹＹＹＡＭＤＹ（配列番号６０）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、アミノ酸配列ＲＡＳＳＳＶＳＦＭＨ（配列番号６１）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＡＴＳＮＬＡＳ（配列番号６２）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＱＱＷＳＴＮＰＹＭＹＴ（配列番号６３）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、（ａ）アミノ酸配列ＧＹＴＦＴＤＹＮＭＤ（配列番号４３）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＹＩＹＰＳＮＧＧＴＧＹＮＱＫＦＫＳ（配列番号５９）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＶＰＹＹＤＹＬＹＹＹＡＭＤＹ（配列番号６０）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに（ｂ）アミノ酸配列ＲＡＳＳＳＶＳＦＭＨ（配列番号６１）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＡＴＳＮＬＡＳ（配列番号６２）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＱＱＷＳＴＮＰＹＭＹＴ（配列番号６３）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１１５の配列に対して少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９７％、または少なくとも９９％の同一性を有する重鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１１６の配列に対して少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９７％、または少なくとも９９％の同一性を有する軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１１５のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１１６のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１１５に対して少なくとも８０％の配列同一性を有する重鎖可変領域及び配列番号１１６に対して少なくとも８０％の配列同一性を有する軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１１５に対して少なくとも９０％の配列同一性を有する重鎖可変領域及び配列番号１１６に対して少なくとも９０％の配列同一性を有する軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１１５に対して少なくとも９５％の配列同一性を有する重鎖可変領域及び配列番号１１６に対して少なくとも９５％の配列同一性を有する軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１１５のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号１１６のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。
いくつかの実施形態では、該ＩＬＴ３結合剤は、抗体１６Ｃ５である。いくつかの実施形態では、該ＩＬＴ３結合剤は、抗体１６Ｃ５のヒト化型である。いくつかの実施形態では、該ＩＬＴ３結合剤は、抗体１６Ｃ５のバリアントまたはヒト化された抗体１６Ｃ５である。
ある特定の実施形態では、ＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）は、（ａ）アミノ酸配列ＧＦＴＦＳＤＹＧＭＨ（配列番号７１）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＹＩＦＳＧＳＳＴＩＹＹＡＤＴＶＫＧ（配列番号７２）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＡＤＧＲＧＡＭＤＹ（配列番号７３）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびにアミノ酸配列ＲＡＳＱＤＩＳＫＦＬＮ（配列番号７４）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＹＴＳＲＬＨＳ（配列番号７５）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＱＱＧＮＴＬＰＷＴ（配列番号７６）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域、（ｂ）アミノ酸配列ＧＦＴＦＳＤＹ（配列番号７７）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＦＳＧＳＳＴ（配列番号７８）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＡＤＧＲＧＡＭＤＹ（配列番号７３）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびにアミノ酸配列ＲＡＳＱＤＩＳＫＦＬＮ（配列番号７４）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＹＴＳＲＬＨＳ（配列番号７５）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＱＱＧＮＴＬＰＷＴ（配列番号７６）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域、（ｃ）アミノ酸配列ＧＦＴＦＳＤＹＧＭＨ（配列番号７１）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＹＩＦＳＧＳＳＴＩＹ（配列番号７９）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＡＤＧＲＧＡＭＤＹ（配列番号７３）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびにアミノ酸配列ＲＡＳＱＤＩＳＫＦＬＮ（配列番号７４）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＹＴＳＲＬＨＳ（配列番号７５）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＱＱＧＮＴＬＰＷＴ（配列番号７６）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域、（ｄ）アミノ酸配列ＤＹＧＭＨ（配列番号８０）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＹＩＦＳＧＳＳＴＩＹＹＡＤＴＶＫＧ（配列番号７２）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＡＤＧＲＧＡＭＤＹ（配列番号７３）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびにアミノ酸配列ＲＡＳＱＤＩＳＫＦＬＮ（配列番号７４）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＹＴＳＲＬＨＳ（配列番号７５）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＱＱＧＮＴＬＰＷＴ（配列番号７６）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域、または（ｅ）アミノ酸配列ＳＤＹＧＭＨ（配列番号８１）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＷＶＡＹＩＦＳＧＳＳＴＩＹ（配列番号８２）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＡＲＡＤＧＲＧＡＭＤ（配列番号８３）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびにアミノ酸配列ＳＫＦＬＮＷＹ（配列番号８４）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＬＬＩＹＹＴＳＲＬＨ（配列番号８５）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＱＱＧＮＴＬＰＷ（配列番号８６）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、アミノ酸配列ＧＦＴＦＳＤＹＧＭＨ（配列番号７１）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＹＩＦＳＧＳＳＴＩＹＹＡＤＴＶＫＧ（配列番号７２）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＡＤＧＲＧＡＭＤＹ（配列番号７３）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、アミノ酸配列ＲＡＳＱＤＩＳＫＦＬＮ（配列番号７４）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＹＴＳＲＬＨＳ（配列番号７５）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＱＱＧＮＴＬＰＷＴ（配列番号７６）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、（ａ）アミノ酸配列ＧＦＴＦＳＤＹＧＭＨ（配列番号７１）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＹＩＦＳＧＳＳＴＩＹＹＡＤＴＶＫＧ（配列番号７２）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＡＤＧＲＧＡＭＤＹ（配列番号７３）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに（ｂ）アミノ酸配列ＲＡＳＱＤＩＳＫＦＬＮ（配列番号７４）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＹＴＳＲＬＨＳ（配列番号７５）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＱＱＧＮＴＬＰＷＴ（配列番号７６）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１１７の配列に対して少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９７％、または少なくとも９９％の同一性を有する重鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１１８の配列に対して少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９７％、または少なくとも９９％の同一性を有する軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１１７のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１１８のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１１７に対して少なくとも８０％の配列同一性を有する重鎖可変領域及び配列番号１１８に対して少なくとも８０％の配列同一性を有する軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１１７に対して少なくとも９０％の配列同一性を有する重鎖可変領域及び配列番号１１８に対して少なくとも９０％の配列同一性を有する軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１１７に対して少なくとも９５％の配列同一性を有する重鎖可変領域及び配列番号１１８に対して少なくとも９５％の配列同一性を有する軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１１７のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号１１８のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１６２～１６３から選択される配列に対して少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９７％、または少なくとも９９％の同一性を有する重鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１６４の配列に対して少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９７％、または少なくとも９９％の同一性を有する軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１６２～１６３から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１６４のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１６２～１６３から選択されるアミノ酸配列に対して、少なくとも８０％（例えば、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９７％、または少なくとも９９％）の配列同一性を有する重鎖可変領域、及び配列番号１６４に対して、少なくとも８０％（例えば、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９７％、または少なくとも９９％）の配列同一性を有する軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１６２のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号１６４のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１６３のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号１６４のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。
いくつかの実施形態では、該ＩＬＴ３結合剤は、抗体４５Ｇ１０である。いくつかの実施形態では、該ＩＬＴ３結合剤は、抗体４５Ｇ１０のヒト化型である。いくつかの実施形態では、該ＩＬＴ３結合剤は、抗体４５Ｇ１０のバリアントまたはヒト化された抗体４５Ｇ１０である。
ある特定の実施形態では、ＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）は、（ａ）アミノ酸配列ＧＦＴＦＳＳＹＧＭＳ（配列番号２７）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＴＩＳＳＧＧＴＹＴＦＹＰＤＳＶＫＧ（配列番号８７）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＲＧＷＬＬＨＹＹＡＭＤＹ（配列番号８８）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびにアミノ酸配列ＲＰＳＥＳＶＤＳＦＧＮＳＦＭＨ（配列番号８９）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＬＳＳＫＬＥＳ（配列番号９０）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＱＱＨＮＥＤＰＦＴ（配列番号９１）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域、（ｂ）アミノ酸配列ＧＦＴＦＳＳＹ（配列番号３３）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＳＳＧＧＴＹ（配列番号９２）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＲＧＷＬＬＨＹＹＡＭＤＹ（配列番号８８）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびにアミノ酸配列ＲＰＳＥＳＶＤＳＦＧＮＳＦＭＨ（配列番号８９）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＬＳＳＫＬＥＳ（配列番号９０）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＱＱＨＮＥＤＰＦＴ（配列番号９１）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域、（ｃ）アミノ酸配列ＧＦＴＦＳＳＹＧＭＳ（配列番号２７）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＴＩＳＳＧＧＴＹＴＦ（配列番号９３）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＲＧＷＬＬＨＹＹＡＭＤＹ（配列番号８８）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびにアミノ酸配列ＲＰＳＥＳＶＤＳＦＧＮＳＦＭＨ（配列番号８９）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＬＳＳＫＬＥＳ（配列番号９０）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＱＱＨＮＥＤＰＦＴ（配列番号９１）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域、（ｄ）アミノ酸配列ＳＹＧＭＳ（配列番号３６）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＴＩＳＳＧＧＴＹＴＦＹＰＤＳＶＫＧ（配列番号８７）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＲＧＷＬＬＨＹＹＡＭＤＹ（配列番号８８）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびにアミノ酸配列ＲＰＳＥＳＶＤＳＦＧＮＳＦＭＨ（配列番号８９）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＬＳＳＫＬＥＳ（配列番号９０）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＱＱＨＮＥＤＰＦＴ（配列番号９１）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域、または（ｅ）アミノ酸配列ＳＳＹＧＭＳ（配列番号３７）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＷＶＡＴＩＳＳＧＧＴＹＴＦ（配列番号９４）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＡＲＲＧＷＬＬＨＹＹＡＭＤ（配列番号９５）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびにアミノ酸配列ＤＳＦＧＮＳＦＭＨＷＦ（配列番号９６）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＬＬＩＹＬＳＳＫＬＥ（配列番号９７）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＱＱＨＮＥＤＰＦ（配列番号９８）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、アミノ酸配列ＧＦＴＦＳＳＹＧＭＳ（配列番号２７）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＴＩＳＳＧＧＴＹＴＦＹＰＤＳＶＫＧ（配列番号８７）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＲＧＷＬＬＨＹＹＡＭＤＹ（配列番号８８）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、アミノ酸配列ＲＰＳＥＳＶＤＳＦＧＮＳＦＭＨ（配列番号８９）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＬＳＳＫＬＥＳ（配列番号９０）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＱＱＨＮＥＤＰＦＴ（配列番号９１）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、（ａ）アミノ酸配列ＧＦＴＦＳＳＹＧＭＳ（配列番号２７）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＴＩＳＳＧＧＴＹＴＦＹＰＤＳＶＫＧ（配列番号８７）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＲＧＷＬＬＨＹＹＡＭＤＹ（配列番号８８）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに（ｂ）アミノ酸配列ＲＰＳＥＳＶＤＳＦＧＮＳＦＭＨ（配列番号８９）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＬＳＳＫＬＥＳ（配列番号９０）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＱＱＨＮＥＤＰＦＴ（配列番号９１）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１１９の配列に対して少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９７％、または少なくとも９９％の同一性を有する重鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１２０の配列に対して少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９７％、または少なくとも９９％の同一性を有する軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１１９のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１２０のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１１９に対して少なくとも８０％の配列同一性を有する重鎖可変領域及び配列番号１２０に対して少なくとも８０％の配列同一性を有する軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１１９に対して少なくとも９０％の配列同一性を有する重鎖可変領域及び配列番号１２０に対して少なくとも９０％の配列同一性を有する軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１１９に対して少なくとも９５％の配列同一性を有する重鎖可変領域及び配列番号１２０に対して少なくとも９５％の配列同一性を有する軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１１９のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号１２０のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１５６～１６０から選択される配列に対して少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９７％、または少なくとも９９％の同一性を有する重鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１６１の配列に対して少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９７％、または少なくとも９９％の同一性を有する軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１５６～１６０から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１６１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１５６～１６０から選択されるアミノ酸配列に対して、少なくとも８０％（例えば、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９７％、または少なくとも９９％）の配列同一性を有する重鎖可変領域、及び配列番号１６１に対して、少なくとも８０％（例えば、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９７％、または少なくとも９９％）の配列同一性を有する軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１５６のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号１６１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１５７のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号１６１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１５８のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号１６１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１５９のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号１６１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１６０のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号１６１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。
いくつかの実施形態では、該ＩＬＴ３結合剤は、抗体４８Ａ６である。いくつかの実施形態では、該ＩＬＴ３結合剤は、抗体４８Ａ６のヒト化型である。いくつかの実施形態では、該ＩＬＴ３結合剤は、抗体４８Ａ６のバリアントまたはヒト化された抗体４８Ａ６である。
ある特定の実施形態では、ＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）は、（ａ）アミノ酸配列ＧＦＴＦＳＤＹＧＭＨ（配列番号７１）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＹＩＳＴＧＩＩＴＶＹＹＡＤＴＶＫＧ（配列番号９９）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＡＤＧＲＧＡＭＤＹ（配列番号７３）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびにアミノ酸配列ＲＡＳＱＤＩＳＮＦＬＮ（配列番号１００）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＹＴＳＲＬＨＳ（配列番号７５）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＱＱＧＮＴＬＰＷＴ（配列番号７６）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域、（ｂ）アミノ酸配列ＧＦＴＦＳＤＹ（配列番号７７）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＳＴＧＩＩＴ（配列番号１０１）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＡＤＧＲＧＡＭＤＹ（配列番号７３）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびにアミノ酸配列ＲＡＳＱＤＩＳＮＦＬＮ（配列番号１００）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＹＴＳＲＬＨＳ（配列番号７５）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＱＱＧＮＴＬＰＷＴ（配列番号７６）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域、（ｃ）アミノ酸配列ＧＦＴＦＳＤＹＧＭＨ（配列番号７１）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＹＩＳＴＧＩＩＴＶＹ（配列番号１０２）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＡＤＧＲＧＡＭＤＹ（配列番号７３）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびにアミノ酸配列ＲＡＳＱＤＩＳＮＦＬＮ（配列番号１００）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＹＴＳＲＬＨＳ（配列番号７５）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＱＱＧＮＴＬＰＷＴ（配列番号７６）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域、（ｄ）アミノ酸配列ＤＹＧＭＨ（配列番号８０）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＹＩＳＴＧＩＩＴＶＹＹＡＤＴＶＫＧ（配列番号９９）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＡＤＧＲＧＡＭＤＹ（配列番号７３）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびにアミノ酸配列ＲＡＳＱＤＩＳＮＦＬＮ（配列番号１００）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＹＴＳＲＬＨＳ（配列番号７５）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＱＱＧＮＴＬＰＷＴ（配列番号７６）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域、または（ｅ）アミノ酸配列ＳＤＹＧＭＨ（配列番号８１）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＷＶＡＹＩＳＴＧＩＩＴＶＹ（配列番号１０３）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＡＲＡＤＧＲＧＡＭＤ（配列番号８３）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびにアミノ酸配列ＳＮＦＬＮＷＹ（配列番号１０４）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＬＬＩＹＹＴＳＲＬＨ（配列番号８５）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＱＱＧＮＴＬＰＷ（配列番号８６）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、アミノ酸配列ＧＦＴＦＳＤＹＧＭＨ（配列番号７１）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＹＩＳＴＧＩＩＴＶＹＹＡＤＴＶＫＧ（配列番号９９）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＡＤＧＲＧＡＭＤＹ（配列番号７３）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域を含む重鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、アミノ酸配列ＲＡＳＱＤＩＳＮＦＬＮ（配列番号１００）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＹＴＳＲＬＨＳ（配列番号７５）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＱＱＧＮＴＬＰＷＴ（配列番号７６）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、（ａ）アミノ酸配列ＧＦＴＦＳＤＹＧＭＨ（配列番号７１）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＹＩＳＴＧＩＩＴＶＹＹＡＤＴＶＫＧ（配列番号９９）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＡＤＧＲＧＡＭＤＹ（配列番号７３）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに（ｂ）アミノ酸配列ＲＡＳＱＤＩＳＮＦＬＮ（配列番号１００）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＹＴＳＲＬＨＳ（配列番号７５）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＱＱＧＮＴＬＰＷＴ（配列番号７６）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１２１の配列に対して少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９７％、または少なくとも９９％の同一性を有する重鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１２２の配列に対して少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９７％、または少なくとも９９％の同一性を有する軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１２１のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１２２のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１２１に対して少なくとも８０％の配列同一性を有する重鎖可変領域及び配列番号１２２に対して少なくとも８０％の配列同一性を有する軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１２１に対して少なくとも９０％の配列同一性を有する重鎖可変領域及び配列番号１２２に対して少なくとも９０％の配列同一性を有する軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１２１に対して少なくとも９５％の配列同一性を有する重鎖可変領域及び配列番号１２２に対して少なくとも９５％の配列同一性を有する軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１２１のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号１２２のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。
いくつかの実施形態では、該ＩＬＴ３結合剤は、抗体５３Ｆ１０である。いくつかの実施形態では、該ＩＬＴ３結合剤は、抗体５３Ｆ１０のヒト化型である。いくつかの実施形態では、該ＩＬＴ３結合剤は、抗体５３Ｆ１０のバリアントまたはヒト化された抗体５３Ｆ１０である。
本明細書に提供するのは、ＩＬＴ３に対する結合をめぐって本明細書に記載の結合剤（例えば、抗体）の１つ以上と競合する薬剤である。いくつかの実施形態では、薬剤は、ＩＬＴ３に対する結合をめぐって本明細書に記載の抗体の１つ以上と競合する。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗体の１つ以上と競合する薬剤は、抗体である。いくつかの実施形態では、薬剤は、本明細書に記載の抗体の１つと同じエピトープに結合する。いくつかの実施形態では、薬剤は、本明細書に記載の抗体の１つが結合するエピトープと重複するエピトープに結合する。本明細書に記載の抗体と競合するか、または当該抗体と同じエピトープに結合する抗体及び抗原結合断片は、同様の機能特性を示すことが期待される。
いくつかの実施形態では、薬剤（例えば、抗体）は、ヒトＩＬＴ３に対する結合をめぐって参照抗体と競合し、該参照抗体は、（ａ）アミノ酸配列ＧＦＴＦＳＳＹＧＭＳ（配列番号２７）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＴＩＳＧＧＧＳＹＴＮＹＰＤＳＶＫＧ（配列番号２８）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＲＥＷＲＭＴＬＹＡＭＤＹ（配列番号２９）またはＲＥＷＲＹＴＬＹＡＭＤＹ（配列番号１０５）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに（ｂ）アミノ酸配列ＲＡＳＥＳＶＤＳＹＧＮＳＦＭＨ（配列番号３０）またはＲＡＳＥＳＶＥＳＹＧＳＳＦＭＨ（配列番号１０６）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＬＴＳＮＬＥＳ（配列番号３１）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＱＱＮＮＥＤＰＦＴ（配列番号３２）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、薬剤（例えば、抗体）は、ヒトＩＬＴ３に対する結合をめぐって参照抗体と競合し、該参照抗体は、（ａ）アミノ酸配列ＧＦＴＦＳＳＹＧＭＳ（配列番号２７）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＴＩＳＧＧＧＳＹＴＮＹＰＤＳＶＫＧ（配列番号２８）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＲＥＷＲＭＴＬＹＡＭＤＹ（配列番号２９）またはＲＥＷＲＹＴＬＹＡＭＤＹ（配列番号１０５）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに（ｂ）アミノ酸配列ＲＡＳＥＳＶＤＳＹＧＮＳＦＭＨ（配列番号３０）またはＲＡＳＥＳＶＥＳＹＧＳＳＦＭＨ（配列番号１０６）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＬＴＳＮＬＥＳ（配列番号３１）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＱＱＮＮＥＤＰＦＴ（配列番号３２）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含み、該競合する薬剤は、アミノ酸配列ＧＦＴＦＳＳＹＧＭＳ（配列番号２７）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＴＩＳＳＧＧＴＹＴＦＹＰＤＳＶＫＧ（配列番号８７）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＲＧＷＬＬＨＹＹＡＭＤＹ（配列番号８８）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域を含む重鎖可変領域、ならびにアミノ酸配列ＲＰＳＥＳＶＤＳＦＧＮＳＦＭＨ（配列番号８９）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＬＳＳＫＬＥＳ（配列番号９０）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＱＱＨＮＥＤＰＦＴ（配列番号９１）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。
いくつかの実施形態では、薬剤（例えば、抗体）は、ヒトＩＬＴ３に対する結合をめぐって参照抗体と競合し、該参照抗体は、（ａ）アミノ酸配列ＧＦＳＬＴＳＹＧＶＨ（配列番号１１）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＶＩＷＰＧＧＴＩＮＹＮＳＡＬＭＳ（配列番号１２）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＤＫＹＤＧＧＷＦＡＹ（配列番号１３）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに（ｂ）アミノ酸配列ＫＡＳＱＮＶＲＴＡＶＡ（配列番号１４）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＬＡＳＮＲＨＴ（配列番号１５）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＬＱＨＬＮＹＰＬＴ（配列番号１６）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、薬剤（例えば、抗体）は、ヒトＩＬＴ３に対する結合をめぐって参照抗体と競合し、該参照抗体は、（ａ）アミノ酸配列ＧＹＴＦＴＤＹＮＭＤ（配列番号４３）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＹＩＹＰＮＮＧＧＴＧＹＮＱＫＦＮＳ（配列番号４４）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＳＰＹＹＤＹＶＧＳＹＡＭＤＹ（配列番号４５）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、及び（ｂ）アミノ酸配列ＴＡＳＳＳＶＳＳＳＹＬＨ（配列番号４６）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＳＴＳＮＬＡＳ（配列番号４７）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＨＱＹＨＲＳＰＲＴ（配列番号４８）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、薬剤（例えば、抗体）は、ヒトＩＬＴ３に対する結合をめぐって参照抗体と競合し、該参照抗体は、（ａ）アミノ酸配列ＧＹＴＦＴＤＹＮＭＤ（配列番号４３）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＹＩＹＰＳＮＧＧＴＧＹＮＱＫＦＫＳ（配列番号５９）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＶＰＹＹＤＹＬＹＹＹＡＭＤＹ（配列番号６０）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに（ｂ）アミノ酸配列ＲＡＳＳＳＶＳＦＭＨ（配列番号６１）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＡＴＳＮＬＡＳ（配列番号６２）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＱＱＷＳＴＮＰＹＭＹＴ（配列番号６３）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、薬剤（例えば、抗体）は、ヒトＩＬＴ３に対する結合をめぐって参照抗体と競合し、該参照抗体は、（ａ）アミノ酸配列ＧＦＴＦＳＤＹＧＭＨ（配列番号７１）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＹＩＦＳＧＳＳＴＩＹＹＡＤＴＶＫＧ（配列番号７２）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＡＤＧＲＧＡＭＤＹ（配列番号７３）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに（ｂ）アミノ酸配列ＲＡＳＱＤＩＳＫＦＬＮ（配列番号７４）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＹＴＳＲＬＨＳ（配列番号７５）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＱＱＧＮＴＬＰＷＴ（配列番号７６）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、薬剤（例えば、抗体）は、ヒトＩＬＴ３に対する結合をめぐって参照抗体と競合し、該参照抗体は、（ａ）アミノ酸配列ＧＦＴＦＳＳＹＧＭＳ（配列番号２７）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＴＩＳＳＧＧＴＹＴＦＹＰＤＳＶＫＧ（配列番号８７）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＲＧＷＬＬＨＹＹＡＭＤＹ（配列番号８８）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに（ｂ）アミノ酸配列ＲＰＳＥＳＶＤＳＦＧＮＳＦＭＨ（配列番号８９）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＬＳＳＫＬＥＳ（配列番号９０）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＱＱＨＮＥＤＰＦＴ（配列番号９１）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。いくつかの実施形態では、薬剤（例えば、抗体）は、ヒトＩＬＴ３に対する結合をめぐって参照抗体と競合し、該参照抗体は、（ａ）アミノ酸配列ＧＦＴＦＳＤＹＧＭＨ（配列番号７１）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＹＩＳＴＧＩＩＴＶＹＹＡＤＴＶＫＧ（配列番号９９）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＡＤＧＲＧＡＭＤＹ（配列番号７３）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに（ｂ）アミノ酸配列ＲＡＳＱＤＩＳＮＦＬＮ（配列番号１００）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＹＴＳＲＬＨＳ（配列番号７５）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＱＱＧＮＴＬＰＷＴ（配列番号７６）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤は、当該抗体の定常領域の少なくとも１つ以上が修飾または削除されている抗体を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、３つの重鎖定常領域（ＣＨ１、ＣＨ２またはＣＨ３）のうちの１つ以上及び／または軽鎖定常領域（ＣＬ）に対して１つ以上の修飾を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、ヒンジ領域に対して１つ以上の修飾を含む。いくつかの実施形態では、該修飾抗体の重鎖定常領域は、少なくとも１つのヒト定常領域を含む。いくつかの実施形態では、該修飾抗体の重鎖定常領域は、複数のヒト定常領域を含む。いくつかの実施形態では、該定常領域に対する修飾は、１つ以上の領域に１つ以上アミノ酸の付加、欠失、または置換を含む。いくつかの実施形態では、１つ以上の領域が、修飾抗体の定常領域から部分的または完全に削除される。いくつかの実施形態では、ＣＨ２ドメイン全体が抗体から除去されている（ΔＣＨ２構築物）。いくつかの実施形態では、１つ以上の領域が、修飾抗体のヒンジ領域から部分的または完全に削除される。いくつかの実施形態では、削除された定常領域は、短いアミノ酸スペーサーで置き換えられ、これにより、欠けている定常領域によって通常付与される分子の柔軟性が部分的に提供される。いくつかの実施形態では、削除されたヒンジ領域は、短いアミノ酸スペーサーで置き換えられ、これにより、欠けているヒンジ領域によって通常付与される分子の柔軟性が部分的に提供される。いくつかの実施形態では、修飾抗体は、当該抗体のヒンジ領域に直接融合されているＣＨ３ドメインを含む。いくつかの実施形態では、修飾抗体は、ヒンジ領域と修飾ＣＨ２及び／またはＣＨ３ドメインとの間に挿入されているペプチドスペーサーを含む。
抗体の定常領域（複数可）がいくつかのエフェクター機能を媒介し、これらのエフェクター機能が抗体のアイソタイプに応じて変化し得ることが当技術分野で知られている。例えば、ＩｇＧまたはＩｇＭ抗体のＦｃ領域への補体のＣ１成分の結合（抗原に結合）により、補体系が活性化される。補体の活性化は、細胞病原体のオプソニン作用及び溶解に重要である。補体の活性化はまた、炎症反応も刺激し、自己免疫過敏性にも関与し得る。さらに、抗体のＦｃ領域は、Ｆｃ受容体（ＦｃＲ）を発現する細胞に結合することができる。ＩｇＧ（ガンマ受容体）、ＩｇＥ（イプシロン受容体）、ＩｇＡ（アルファ受容体）及びＩｇＭ（ミュー受容体）を含めた、抗体の異なるクラスに特異的な複数のＦｃ受容体が存在する。細胞表面上のＦｃ受容体への抗体の結合により、抗体被覆粒子の貪食及び破壊、免疫複合体のクリアランス、キラー細胞による抗体被覆標的細胞の溶解（抗体依存性細胞傷害またはＡＤＣＣと呼ばれる）、炎症性メディエーターの放出、胎盤通過、及び免疫グロブリン産生の制御を含めた複数の重要かつ多様な生物反応が引き起こされる。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）は、バリアントＦｃ領域を含む。ヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、及びＩｇＧ４のＦｃ領域のアミノ酸配列は、当業者に既知である（例えば、代表的なヒトＩｇＧ１領域は配列番号１２９である）。一部の例では、アミノ酸変異を有するＦｃ領域が自然抗体で同定されている。いくつかの実施形態では、バリアントＦｃ領域は、天然のＦｃ領域と比較して、特定のアミノ酸位置での置換を用いて操作される。バリアントＦｃ領域は、当技術分野で周知であり、配列番号１３０、配列番号１３１、配列番号１３２、配列番号１３３、及び配列番号１３４を含むがこれらに限定されない。
いくつかの実施形態では、修飾抗体（例えば、修飾Ｆｃ領域を含む）は、エフェクター機能の変更をもたらし、これが次に、該抗体の生物学的プロファイルに影響を与える。例えば、いくつかの実施形態では、定常領域の欠失または不活性化（点突然変異または他の手段を介する）により、修飾抗体の循環時のＦｃ受容体結合が減少する。いくつかの実施形態では、定常領域の修飾により、抗体の血清半減期が延長される。いくつかの実施形態では、定常領域の修飾により、抗体の血清半減期が短縮される。いくつかの実施形態では、定常領域の修飾により、抗体のＡＤＣＣ及び／または補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）が低減または除去される。いくつかの実施形態では、ヒトＩｇＧ１のＦｃ領域における特定のアミノ酸を対応するＩｇＧ２またはＩｇＧ４残基で置換することにより、修飾抗体におけるエフェクター機能（例えば、ＡＤＣＣ及びＣＤＣ）が低下する。いくつかの実施形態では、修飾抗体は、１つ以上のエフェクター機能を有さない。いくつかの実施形態では、修飾抗体は、いかなる検出可能なエフェクター機能も有さない（例えば、「エフェクターレス」抗体）。いくつかの実施形態では、修飾抗体は、ＡＤＣＣ活性及び／またはＣＤＣ活性を有さない。いくつかの実施形態では、修飾抗体は、Ｆｃ受容体及び／または補体因子に結合しない。いくつかの実施形態では、修飾抗体は、エフェクター機能（複数可）を有さない。いくつかの実施形態では、定常領域の修飾により、抗体のＡＤＣＣ及び／またはＣＤＣが増加または増強される。いくつかの実施形態では、該定常領域は、ジスルフィド結合またはオリゴ糖部分を排除するように修飾される。いくつかの実施形態では、該定常領域は、１つ以上のアミノ酸を付加／置換して、１つ以上の細胞毒素、オリゴ糖、または炭水化物結合部位を提供するように修飾される。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）は、配列番号１２６のアミノ酸配列に対して少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％の同一性を有する重鎖を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）は、配列番号１２８のアミノ酸配列に対して少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％の同一性を有する軽鎖を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１２６のアミノ酸配列に対して少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％の同一性を有する重鎖及び配列番号１２８のアミノ酸配列に対して少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％の同一性を有する軽鎖を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１２６のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の同一性を有する重鎖を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１２８のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の同一性を有する軽鎖を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１２６のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の同一性を有する重鎖及び配列番号１２８のアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の同一性を有する軽鎖を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１２６のアミノ酸配列を含む重鎖を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１２８のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１２６のアミノ酸配列を含む重鎖及び配列番号１２８のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１２６の重鎖及び／または配列番号１２８の軽鎖を含む抗体である。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１２６の重鎖を含む抗体である。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１２８の軽鎖を含む抗体である。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、配列番号１２６の重鎖及び配列番号１２８の軽鎖を含む抗体である。
本明細書に記載の抗体の定常領域に対する修飾は、周知の生化学的または分子工学的技術を使用して行われ得る。いくつかの実施形態では、抗体バリアントは、適切なヌクレオチド変化をコードＤＮＡに導入することによって、及び／または所望の抗体またはポリペプチドの合成によって調製される。これらの工学技術を使用して抗体を修飾することにより、当該修飾抗体の構造、結合活性、及び他の所望の特性を実質的に維持しながら、特定の配列または領域によって提供される活性またはエフェクター機能を妨害することが可能になり得る。
本開示は、さらに、本明細書に記載の組み換え、モノクローナル、キメラ、ヒト化、及びヒト抗体、またはそれらの抗体断片に実質的に相同である追加のバリアント及び同等物を包含する。いくつかの実施形態では、当該抗体の結合親和性を改善することが望ましい。いくつかの実施形態では、特異性、熱安定性、発現レベル、エフェクター機能（複数可）、グリコシル化、免疫原性、及び／または溶解性が挙げられるがこれらに限定されない当該抗体の生物学的特性を調節することが望ましい。当業者には、アミノ酸の変化により、グリコシル化部位の数もしくは位置の変更または膜アンカー特性の変更等、抗体の翻訳後プロセスが変化する場合があることが理解されよう。
変異は、自然抗体またはポリペプチド配列と比較してアミノ酸配列に変化をもたらす抗体またはポリペプチドをコードする１つ以上のヌクレオチドの置換、欠失、または挿入であり得る。いくつかの実施形態では、アミノ酸置換は、類似の構造的及び／または化学的特性を有する別のアミノ酸による１つのアミノ酸の置換、例えば、ロイシンのセリンによる置換（すなわち、保存的アミノ酸置換）の結果である。いくつかの実施形態では、該置換、欠失、または挿入としては、親分子に対して、２５個未満のアミノ酸置換、２０個未満のアミノ酸置換、１５個未満のアミノ酸置換、１０個未満のアミノ酸置換、５個未満のアミノ酸置換、４個未満のアミノ酸置換、３個未満のアミノ酸置換、または２個未満のアミノ酸置換が挙げられる。いくつかの実施形態では、生物学的に有用な及び／または関連するアミノ酸配列の変異は、該配列に体系的に挿入、欠失、または置換を行い、得られるバリアントタンパク質の活性を親抗体と比較して調べることによって特定される。
いくつかの実施形態では、バリアントは、該抗体またはポリペプチドのアミノ末端及び／またはカルボキシル末端でのアミノ酸残基の付加を含み得る。付加的なアミノ酸残基の長さは、１残基から１００残基以上に及び得る。いくつかの実施形態では、バリアントは、Ｎ末端メチオニル残基を含む。いくつかの実施形態では、該バリアントは、融合タンパク質を創出するための付加的なポリペプチド／タンパク質を含む。いくつかの実施形態では、バリアントは、検出可能であるように操作され、検出可能な標識及び／またはタンパク質（例えば、蛍光タグ、蛍光タンパク質、または酵素）を含み得る。
いくつかの実施形態では、抗体の適切なコンフォメーションの維持に関与しないシステイン残基を置換または削除することにより、該抗体の特性が調節され、例えば、酸化安定性が改善され、及び／または異常なジスルフィド架橋が阻止される。逆に、いくつかの実施形態では、１つ以上のシステイン残基を付加することにより、ジスルフィド結合（複数可）が創出され、安定性が改善される。
いくつかの実施形態では、本開示の抗体は「脱免疫化」されている。抗体の脱免疫化は、一般に、該抗体の結合親和性または他の所望の活性を著しく低下させることなく、Ｔ細胞エピトープ（既知または予測）の除去をもたらす特定のアミノ酸変異（例えば、置換、欠失、付加）を導入することからなる。
本明細書に記載のバリアント抗体またはポリペプチドは、部位特異的突然変異誘発、アラニンスキャニング突然変異誘発、及びＰＣＲ突然変異誘発が挙げられるがこれらに限定されない当技術分野で既知の方法を使用して生成され得る。
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤は、化学的に修飾される。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、グリコシル化、アセチル化、ペグ化、リン酸化、アミド化、既知の保護／ブロッキング基による誘導体化、タンパク質分解切断、及び／または細胞リガンドもしくは他のタンパク質に対する結合によって化学的に修飾される抗ＩＬＴ３抗体である。多数の化学的修飾のいずれかが、既知の技術によって行われ得る。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、抗体断片（例えば、ｓｃＦｖ、Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ’）２、またはＦ（ａｂ’））であり、該抗体断片は（直接的または間接的に）、Ｆｃ領域またはそのバリアント、ヒト血清アルブミン、免疫グロブリンのＣＨ３ドメイン、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ＰＥＧ模倣物、ＸＴＥＮ（登録商標）、血清アルブミン、ポリシアル酸、Ｎ－（２－ヒドロキシプロピル）メタクリルアミド、またはデキストランが挙げられるがこれらに限定されない半減期を延長する部分に結合する。
本開示は、非免疫グロブリン骨格上に構築されたＩＬＴ３結合剤を包含し、該結合剤は、本明細書に開示する抗ＩＬＴ３抗体と同じエピトープまたは本質的に同じエピトープに結合する。いくつかの実施形態では、非免疫グロブリン系の結合剤は、競合的結合アッセイにおいて本明細書に記載の抗ＩＬＴ３抗体と競合する薬剤である。いくつかの実施形態では、代替的なＩＬＴ３結合剤は、足場タンパク質を含む。一般に、足場タンパク質は、それらの骨格の構造に基づいて（１）α－ヘリックスからなる足場、（２）わずかな二次構造または不規則なα－ヘリックス及びβ－シート構造を有する小さい足場、ならびに（３）主にβ－シートからなる足場の３群の１つに割り当てることができる。足場タンパク質としては、リポカリン足場に基づくアンチカリン、ヒトフィブロネクチン３型の１０番目のドメインに基づくアドネクチン、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓプロテインＡのＩｇ結合領域のＢドメインに基づくアフィボディ、アンキリンリピートドメインタンパク質に基づくｄａｒｐｉｎ、ヒトＦｙｎプロテインキナーゼのＳＨ３ドメインに基づくフィノマー、Ｓｕｌｆｏｌｏｂｕｓ ａｃｉｄｏｃａｌｄａｒｉｕｓ由来のＳａｃ７ｄに基づくアフィチン、ヒトγ－Ｂ－クリスタリンまたはヒトユビキチンに基づくアフィリン、膜受容体タンパク質のＡドメインに基づくアビマー、安定した３０アミノ酸の逆平行β－ストランドタンパク質フォールドに基づくノッチン（システインノットミニタンパク質）、ならびに３つのジスルフィド結合及び３つのループを含む構造に基づくＫｕｎｉｔｚドメイン阻害剤足場が挙げられるがこれらに限定されない。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、表１に示す重鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３ならびに軽鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３を含む操作された足場タンパク質を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、アミノ酸配列ＧＦＳＬＴＳＹＧＶＨ（配列番号１１）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＶＩＷＰＧＧＴＩＮＹＮＳＡＬＭＳ（配列番号１２）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、アミノ酸配列ＤＫＹＤＧＧＷＦＡＹ（配列番号１３）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３、アミノ酸配列ＫＡＳＱＮＶＲＴＡＶＡ（配列番号１４）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＬＡＳＮＲＨＴ（配列番号１５）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＬＱＨＬＮＹＰＬＴ（配列番号１６）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む操作された足場タンパク質を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、抗体３Ａ３由来の重鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３ならびに軽鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３を含む操作された足場タンパク質を含む。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、表２に示す重鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３ならびに軽鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３を含む操作された足場タンパク質を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、アミノ酸配列ＧＦＴＦＳＳＹＧＭＳ（配列番号２７）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＴＩＳＧＧＧＳＹＴＮＹＰＤＳＶＫＧ（配列番号２８）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、アミノ酸配列ＲＥＷＲＭＴＬＹＡＭＤＹ（配列番号２９）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３、アミノ酸配列ＲＡＳＥＳＶＤＳＹＧＮＳＦＭＨ（配列番号３０）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＬＴＳＮＬＥＳ（配列番号３１）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＱＱＮＮＥＤＰＦＴ（配列番号３２）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む操作された足場タンパク質を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、抗体５Ａ７由来の重鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３ならびに軽鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３を含む操作された足場タンパク質を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、表８に示す重鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３ならびに軽鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３を含む操作された足場タンパク質を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、アミノ酸配列ＧＦＴＦＳＳＹＧＭＳ（配列番号２７）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＴＩＳＧＧＧＳＹＴＮＹＰＤＳＶＫＧ（配列番号２８）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、アミノ酸配列ＲＥＷＲＹＴＬＹＡＭＤＹ（配列番号１０５）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３、アミノ酸配列ＲＡＳＥＳＶＥＳＹＧＳＳＦＭＨ（配列番号１０６）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＬＴＳＮＬＥＳ（配列番号３１）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＱＱＮＮＥＤＰＦＴ（配列番号３２）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む操作された足場タンパク質を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、抗体Ｈｚ５Ａ７．ｖ５由来の重鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３ならびに軽鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３を含む操作された足場タンパク質を含む。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、表３に示す重鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３ならびに軽鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３を含む操作された足場タンパク質を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、アミノ酸配列ＧＹＴＦＴＤＹＮＭＤ（配列番号４３）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＹＩＹＰＮＮＧＧＴＧＹＮＱＫＦＮＳ（配列番号４４）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、アミノ酸配列ＳＰＹＹＤＹＶＧＳＹＡＭＤＹ（配列番号４５）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３、アミノ酸配列ＴＡＳＳＳＶＳＳＳＹＬＨ（配列番号４６）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＳＴＳＮＬＡＳ（配列番号４７）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＨＱＹＨＲＳＰＲＴ（配列番号４８）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む操作された足場タンパク質を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、抗体１２Ａ１２由来の重鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３ならびに軽鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３を含む操作された足場タンパク質を含む。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、表４に示す重鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３ならびに軽鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３を含む操作された足場タンパク質を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、アミノ酸配列ＧＹＴＦＴＤＹＮＭＤ（配列番号４３）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＹＩＹＰＳＮＧＧＴＧＹＮＱＫＦＫＳ（配列番号５９）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、アミノ酸配列ＶＰＹＹＤＹＬＹＹＹＡＭＤＹ（配列番号６０）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３、アミノ酸配列ＲＡＳＳＳＶＳＦＭＨ（配列番号６１）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＡＴＳＮＬＡＳ（配列番号６２）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＱＱＷＳＴＮＰＹＭＹＴ（配列番号６３）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む操作された足場タンパク質を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、抗体１６Ｃ５由来の重鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３ならびに軽鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３を含む操作された足場タンパク質を含む。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、表５に示す重鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３ならびに軽鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３を含む操作された足場タンパク質を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、アミノ酸配列ＧＦＴＦＳＤＹＧＭＨ（配列番号７１）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＹＩＦＳＧＳＳＴＩＹＹＡＤＴＶＫＧ（配列番号７２）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、アミノ酸配列ＡＤＧＲＧＡＭＤＹ（配列番号７３）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３、アミノ酸配列ＲＡＳＱＤＩＳＫＦＬＮ（配列番号７４）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＹＴＳＲＬＨＳ（配列番号７５）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＱＱＧＮＴＬＰＷＴ（配列番号７６）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む操作された足場タンパク質を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、抗体４５Ｇ１０由来の重鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３ならびに軽鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３を含む操作された足場タンパク質を含む。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、表６に示す重鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３ならびに軽鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３を含む操作された足場タンパク質を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、アミノ酸配列ＧＦＴＦＳＳＹＧＭＳ（配列番号２７）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＴＩＳＳＧＧＴＹＴＦＹＰＤＳＶＫＧ（配列番号８７）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、アミノ酸配列ＲＧＷＬＬＨＹＹＡＭＤＹ（配列番号８８）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３、アミノ酸配列ＲＰＳＥＳＶＤＳＦＧＮＳＦＭＨ（配列番号８９）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＬＳＳＫＬＥＳ（配列番号９０）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＱＱＨＮＥＤＰＦＴ（配列番号９１）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む操作された足場タンパク質を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、抗体４８Ａ６由来の重鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３ならびに軽鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３を含む操作された足場タンパク質を含む。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、表７に示す重鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３ならびに軽鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３を含む操作された足場タンパク質を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、アミノ酸配列ＧＦＴＦＳＤＹＧＭＨ（配列番号７１）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＹＩＳＴＧＩＩＴＶＹＹＡＤＴＶＫＧ（配列番号９９）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、アミノ酸配列ＡＤＧＲＧＡＭＤＹ（配列番号７３）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３、アミノ酸配列ＲＡＳＱＤＩＳＮＦＬＮ（配列番号１００）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＹＴＳＲＬＨＳ（配列番号７５）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＱＱＧＮＴＬＰＷＴ（配列番号７６）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む操作された足場タンパク質を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、抗体５３Ｆ１０由来の重鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３ならびに軽鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３を含む操作された足場タンパク質を含む。
いくつかの実施形態では、組成物は、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤を含む。いくつかの実施形態では、組成物は、本明細書に記載の抗ＩＬＴ３抗体を含む。いくつかの実施形態では、組成物は、本明細書に記載のモノクローナル抗ＩＬＴ３抗体を含む。
いくつかの実施形態では、医薬組成物は、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤及び医薬的に許容される担体を含む。いくつかの実施形態では、医薬組成物は、本明細書に記載の抗ＩＬＴ３抗体及び医薬的に許容される担体を含む。いくつかの実施形態では、組成物は、本明細書に記載のモノクローナル抗ＩＬＴ３抗体及び医薬的に許容される担体を含む。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、単離される。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、実質的に純粋である。
一般的に言えば、抗原抗体相互作用は非共有結合かつ可逆的であり、水素結合、疎水性相互作用、静電力及びファンデルワールス力の組み合わせによって形成される。抗原抗体複合体の強度を説明する場合、親和性（ａｆｆｉｎｉｔｙ）及び／またはアビディティ（ａｖｉｄｉｔｙ）という用語が一般に使用される。抗体のその抗原に対する結合は可逆的なプロセスであり、結合の親和性は通常、平衡解離定数（ＫＤ）として報告される。ＫＤは、抗体の解離速度（ｋｏｆｆ）（その抗原からどれだけ速く解離するか）と抗体の会合速度（ｋｏｎ）（その抗原にどれだけ速く結合するか）の比である。いくつかの実施形態では、ＫＤ値は、特定の抗体／抗原相互作用のｋｏｎとｋｏｆｆの比を測定し、次いでこれらの値の比を使用してＫＤ値を計算することによって決定される。ＫＤ値は、個々の抗体／抗原相互作用の強さを評価及びランク付けするために使用され得る。抗体のＫＤが低いほど、その標的に対する抗体の親和性は高い。いくつかの実施形態では、親和性は、ＢｉａｃｏｒｅシステムにてＳＰＲ技術を使用して測定される。アビディティは、抗体抗原複合体の全体的な強度の尺度を与える。これは、３つの主要なパラメータ、すなわち、（ｉ）標的に対する抗体の親和性、（ｉｉ）抗体及び抗原の両方の価数、ならびに（ｉｉｉ）相互作用する部分の構造配置に依存する。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）は、ＩＬＴ３に解離定数（ＫＤ）１μＭ以下、１００ｎＭ以下、４０ｎＭ以下、２０ｎＭ以下、１０ｎＭ以下、１ｎＭ以下、０．１ｎＭ以下、５０ｐＭ以下、１０ｐＭ以下、または１ｐＭ以下で結合する。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、ＩＬＴ３にＫＤ約２０ｎＭ以下で結合する。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、ＩＬＴ３にＫＤ１０ｎＭ以下で結合する。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、ＩＬＴ３にＫＤ５ｎＭ以下で結合する。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、ＩＬＴ３にＫＤ３ｎＭ以下で結合する。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、ＩＬＴ３にＫＤ２ｎＭ以下で結合する。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、ＩＬＴ３にＫＤ１ｎＭ以下で結合する。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、ＩＬＴ３にＫＤ０．５ｎＭ以下で結合する。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、ＩＬＴ３にＫＤ０．１ｎＭ以下で結合する。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、ＩＬＴ３にＫＤ５０ｐＭ以下で結合する。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、ＩＬＴ３にＫＤ２５ｐＭ以下で結合する。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、ＩＬＴ３にＫＤ１０ｐＭ以下で結合する。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、ＩＬＴ３にＫＤ１ｐＭ以下で結合する。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、ＩＬＴ３にＫＤ０．０１ｎＭ～２．５ｎＭで結合する。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、ＩＬＴ３にＫＤ０．１ｎＭ～５ｎＭで結合する。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、ＩＬＴ３にＫＤ１ｎＭ～５ｎＭで結合する。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３に対する結合剤の解離定数は、Ｂｉａｃｏｒｅチップに固定化されたＩＬＴ３タンパク質及びチップ上に流される結合剤を使用して決定される解離定数である。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３に対する結合剤の解離定数は、Ｂｉａｃｏｒｅチップ上で抗ヒトＩｇＧ抗体によって捕捉された結合剤及び該チップ上に流される可溶性ＩＬＴ３を使用して決定される解離定数である。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）は、ＩＬＴ３に半数効果濃度（ＥＣ５０）１μＭ以下、１００ｎＭ以下、４０ｎＭ以下、２０ｎＭ以下、１０ｎＭ以下、１ｎＭ以下、または０．１ｎＭ以下で結合する。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、ヒトＩＬＴ３にＥＣ５０が１μＭ以下、１００ｎＭ以下、４０ｎＭ以下、２０ｎＭ以下、１０ｎＭ以下、１ｎＭ以下、または０．１ｎＭ以下で結合する。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、ｃｙｎｏ ＩＬＴ３及び／またはヒトＩＬＴ３にＥＣ５０が４０ｎＭ以下、２０ｎＭ以下、１０ｎＭ以下、１ｎＭ以下、または０．１ｎＭ以下で結合する。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、ＩＬＴ３にＥＣ５０が０．１ｎＭ～約３ｎＭ、０．１ｎＭ～２ｎＭ、０．１ｎＭ～１ｎＭ、０．５ｎＭ～３ｎＭ、０．５ｎＭ～２ｎＭ、または０．５ｎＭ～１ｎＭで結合する。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、ヒトＩＬＴ３に結合し、以下の特性の少なくとも１つ以上を有する：（ｉ）ｃｙｎｏ ＩＬＴ３に結合する、（ｉｉ）ヒト及びｃｙｎｏ ＩＬＴ３に結合する、（ｉｉｉ）ＩＬＴ２、ＩＬＴ４、ＩＬＴ５、及びＬＩＬＲＢ５には結合しない、（ｉｖ）ＬＩＬＲＡ１、ＬＩＬＲＡ２、ＬＩＬＲＡ４、ＬＩＬＲＡ５、及びＬＩＬＲＡ６には結合しない、（ｖ）ＩＬＴ３アンタゴニストである、（ｖｉ）ＩＬＴ３活性を阻害する、（ｖｉｉ）ＩＬＴ３を発現する細胞におけるＩＬＴ３シグナル伝達を阻害する、（ｖｉｉｉ）ＩＬＴ３のＡＰＯＥに対する結合を阻害する、（ｉｘ）ＩＬＴ３のフィブロネクチンに対する結合を阻害する、（ｘ）ＩＬＴ３のＣＮＴＦＲに対する結合を阻害する、（ｘｉ ＩＬＴ３が誘導する骨髄細胞の抑制を阻害する、（ｘｉｉ）ＩＬＴ３が誘導する骨髄細胞活性の抑制を阻害する、（ｘｉｉｉ）ＩＬＴ３を発現する骨髄細胞におけるＦｃＲ活性を回復する、及び（ｘｉｖ）ＩＬＴ３を発現する骨髄細胞のケモカインに反応する能力及び／またはケモカインを産生する能力を回復する。
本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）は、当技術分野で既知の任意の適切な方法で製造され得る。かかる方法は、直接タンパク質合成法から、ポリペプチド配列をコードするＤＮＡ配列を構築し、それらの配列を適切な宿主で発現させる方法に及ぶ。いくつかの実施形態では、ＤＮＡ配列は、目的の野生型タンパク質をコードするＤＮＡ配列を単離または合成することによって組み換え技術を使用して構築される。任意に、該配列は、部位特異的突然変異誘発によって突然変異を起こし、その機能的バリアントが提供され得る。いくつかの実施形態では、目的のポリペプチドをコードするＤＮＡ配列は、オリゴヌクレオチドシンセサイザーを使用した化学合成によって構築される。オリゴヌクレオチドは、所望のポリペプチドのアミノ酸配列に基づいて、及び目的の組み換えポリペプチドが産生される宿主細胞での好適なコドン選択に基づいて設計され得る。標準的な方法を適用して、単離された目的のポリペプチドをコードするポリヌクレオチド配列を合成することができる。例えば、完全なアミノ酸配列を使用して、逆翻訳された遺伝子を構築することができる。さらに、単離された特定のポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含むＤＮＡオリゴマーを合成することができる。例えば、所望のポリペプチドの部分をコードするいくつかの小さいオリゴヌクレオチドを合成し、その後ライゲーションすることができる。個々のオリゴヌクレオチドは、通常、相補的アセンブリのための５’または３’オーバーハングを含む。
アセンブルされた（合成、部位特異的突然変異誘発、または別の方法によって）後、目的の特定のポリペプチドをコードするポリヌクレオチド配列は、発現ベクターに挿入され、所望の宿主で当該タンパク質を発現させるために適切な発現制御配列に作動可能に連結され得る。適切なアセンブリは、ヌクレオチド配列決定、制限酵素マッピング、及び／または適切な宿主内での生物活性のあるポリペプチドの発現によって確認され得る。
いくつかの実施形態では、組み換え発現ベクターは、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤をコードするＤＮＡを増幅及び発現するために使用される。例えば、組み換え発現ベクターは、哺乳類、微生物、ウイルスまたは昆虫遺伝子由来の適切な転写及び／または翻訳調節要素に作動可能に連結された、ＩＬＴ３結合剤、例えば、抗ＩＬＴ３抗体、またはその抗原結合断片の１つ以上のポリペプチド鎖（複数可）をコードする合成またはｃＤＮＡ由来のＤＮＡ断片を有する複製可能なＤＮＡ構築物であり得る。転写単位は、一般に、（１）遺伝子発現において調節的役割を有する遺伝要素（複数可）、例えば、転写プロモーターまたはエンハンサー、（２）ｍＲＮＡに転写されタンパク質に翻訳される構造またはコード配列、ならびに（３）適切な転写及び翻訳の開始及び終止配列のアセンブリを含む。調節要素は、転写を制御するためのオペレーター配列を含み得る。通常は複製起点によって付与される宿主で複製する能力、及び形質転換体の認識を容易にするための選択遺伝子をさらに組み込むことができる。ＤＮＡ領域は、互いに機能的に関連している場合、「作動可能に連結」されている。例えば、シグナルペプチド（分泌リーダー）に対するＤＮＡは、ポリペプチドの分泌に関与する前駆体として発現される場合、該ポリペプチドに対するＤＮＡに作動可能に連結されているか、プロモーターは、コード配列の転写を制御する場合、該コード配列に作動可能に連結されているか、またはリボソーム結合部位は、翻訳を可能にするように配置されている場合、コード配列に作動可能に連結されている。いくつかの実施形態では、酵母発現系での使用を意図された構造要素は、宿主細胞による翻訳されたタンパク質の細胞外分泌を可能にするリーダー配列を含む。いくつかの実施形態では、組み換えタンパク質がリーダーまたは輸送配列なしで発現される状況において、ポリペプチドは、Ｎ末端メチオニン残基を含み得る。この残基は、任意に、その後、発現された組み換えタンパク質から切断され、最終生成物が提供され得る。
発現制御配列及び発現ベクターの選択は、一般に、宿主の選択に依存する。多種多様な発現宿主／ベクターの組み合わせが使用され得る。真核生物宿主のために有用な発現ベクターとしては、例えば、ＳＶ４０、ウシ乳頭腫ウイルス、アデノウイルス、及びサイトメガロウイルス由来の発現制御配列を含むベクターが挙げられる。細菌宿主に有用な発現ベクターとしては、既知の細菌プラスミド、例えば、ｐＣＲ１、ｐＢＲ３２２、ｐＭＢ９及びそれらの派生体を含めたＥ．ｃｏｌｉ由来のプラスミド、ならびにより広宿主域プラスミド、例えば、Ｍ１３及び他の糸状一本鎖ＤＮＡファージが挙げられる。
いくつかの実施形態では、本開示のＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）は、１つ以上のベクターから発現される。いくつかの実施形態では、重鎖可変領域は、１つのベクターによって発現され、軽鎖可変領域は、第二のベクターによって発現される。いくつかの実施形態では、重鎖可変領域及び軽鎖可変領域は、１つのベクターによって発現される。いくつかの実施形態では、ベクターは、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤の重鎖可変領域をコードする。いくつかの実施形態では、ベクターは、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤の軽鎖可変領域をコードする。いくつかの実施形態では、ベクターは、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤の重鎖可変領域及び軽鎖可変領域をコードする。いくつかの実施形態では、重鎖ポリペプチドは、１つのベクターによって発現され、軽鎖ポリペプチドは、第二のベクターによって発現される。いくつかの実施形態では、重鎖ポリペプチド及び軽鎖ポリペプチドは、１つのベクターによって発現される。いくつかの実施形態では、ベクターは、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤の重鎖ポリペプチドをコードする。いくつかの実施形態では、ベクターは、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤の軽鎖ポリペプチドをコードする。いくつかの実施形態では、ベクターは、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤の重鎖ポリペプチド及び軽鎖ポリペプチドをコードする。
抗原または免疫原として使用するためのＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）またはＩＬＴ３タンパク質もしくはその断片の発現に適した宿主細胞としては、適切なプロモーターの制御下にある原核生物、酵母細胞、昆虫細胞、または高等真核細胞が挙げられる。原核生物としては、グラム陰性菌またはグラム陽性菌、例えば、Ｅ．ｃｏｌｉまたはＢａｃｉｌｌｕｓが挙げられる。高等真核細胞としては、本明細書に記載の哺乳類起源の樹立細胞株が挙げられる。無細胞翻訳系も使用され得る。細菌、真菌、酵母、及び哺乳類の細胞宿主で使用するために適切なクローニングベクター及び発現ベクター、ならびに抗体産生を含めたタンパク質産生の方法は、当技術分野で周知である。
組み換えポリペプチドを発現させるために、様々な哺乳類培養系が使用され得る。哺乳類細胞での組み換えタンパク質の発現は、これらのタンパク質が一般に正しく折りたたまれ、適切に修飾され、かつ生物学的に機能するという理由で望ましい場合がある。適切な哺乳類宿主細胞株の例としては、ＣＯＳ－７（サル腎臓由来）、Ｌ－９２９（マウス線維芽細胞由来）、Ｃ１２７（マウス乳腺腫瘍由来）、３Ｔ３（マウス線維芽細胞由来）、ＣＨＯ（チャイニーズハムスター卵巣由来）、ＨｅＬａ（ヒト子宮頸がん由来）、ＢＨＫ（ハムスター腎線維芽細胞由来）、ＨＥＫ－２９３（ヒト胎児腎臓由来）細胞株及びそれらのバリアントが挙げられるがこれらに限定されない。哺乳類発現ベクターは、非転写要素、例えば、複製起点、発現される遺伝子に連結された適切なプロモーター及びエンハンサー、ならびに他の５’または３’フランキング非転写配列、ならびに５’または３’非翻訳配列、例えば、必要なリボソーム結合部位、ポリアデニル化部位、スプライスドナー及びアクセプター部位、ならびに転写終止配列を含み得る。
昆虫細胞培養系（例えば、バキュロウイルス）での組み換えタンパク質の発現もまた、正しく折りたたまれた生物学的に機能するタンパク質を産生するための堅牢な方法を提供する。昆虫細胞において異種タンパク質を産生するためのバキュロウイルス系は、当業者に周知である。
従って、本開示は、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤を含む細胞を提供する。いくつかの実施形態では、該細胞は、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤を産生する。いくつかの実施形態では、該細胞は、抗体を産生する。いくつかの実施形態では、該細胞は、ヒトＩＬＴ３に結合する抗体を産生する。いくつかの実施形態では、該細胞は、ｃｙｎｏ ＩＬＴ３に結合する抗体を産生する。いくつかの実施形態では、該細胞は、ヒトＩＬＴ３及びｃｙｎｏ ＩＬＴ３に結合する抗体を産生する。いくつかの実施形態では、該細胞は、５Ａ７と呼ばれる抗体を産生する。いくつかの実施形態では、該細胞は、Ｈｚ５Ａ７と呼ばれる抗体５Ａ７のヒト化型を産生する。いくつかの実施形態では、該細胞は、Ｈｚ５Ａ７のバリアント、例えば、Ｈｚ５Ａ７．ｖ５を生成する。いくつかの実施形態では、該細胞は、３Ａ３と呼ばれる抗体を産生する。いくつかの実施形態では、該細胞は、１２Ａ１２と呼ばれる抗体を産生する。いくつかの実施形態では、該細胞は、１６Ｃ５と呼ばれる抗体を産生する。いくつかの実施形態では、該細胞は、４５Ｇ１０と呼ばれる抗体を産生する。いくつかの実施形態では、該細胞は、Ｈｚ４５Ｇ１０と呼ばれる抗体４５Ｇ１０のヒト化型を産生する。いくつかの実施形態では、該細胞は、４８Ａ６と呼ばれる抗体を産生する。いくつかの実施形態では、該細胞は、Ｈｚ４８Ａ６と呼ばれる抗体４８Ａ６のヒト化型を産生する。いくつかの実施形態では、該細胞は、５３Ｆ１０と呼ばれる抗体を産生する。いくつかの実施形態では、該細胞は、原核細胞（例えば、Ｅ．ｃｏｌｉ）である。いくつかの実施形態では、該細胞は、真核細胞である。いくつかの実施形態では、該細胞は、哺乳類細胞である。いくつかの実施形態では、該細胞は、ハイブリドーマ細胞である。
宿主細胞によって産生されたタンパク質は、任意の適切な方法に従って精製され得る。標準的な方法としては、クロマトグラフィー（例えば、イオン交換、アフィニティー、及びサイジングカラムクロマトグラフィー）、遠心分離、溶解度差、またはタンパク質精製のための任意の他の標準的な技術が挙げられる。アフィニティータグ、例えば、ヘキサヒスチジン（Ｈｉｓ６、配列番号１５４）、マルトース結合ドメイン、インフルエンザコート配列、及びグルタチオン－Ｓ－トランスフェラーゼをタンパク質に結合させ、適切なアフィニティーカラムを通すことによって容易に精製され得る。免疫グロブリンを精製するために使用されるアフィニティークロマトグラフィー法としては、プロテインＡ、プロテインＧ、及びプロテインＬクロマトグラフィーを挙げることができるがこれらに限定されない。単離されたタンパク質は、タンパク質分解、サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）、質量分析（ＭＳ）、核磁気共鳴（ＮＭＲ）、等電点電気泳動（ＩＥＦ）、高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）、及びｘ線結晶学が挙げられるがこれらに限定されない技術を使用して物理的に特徴づけることができる。単離されたタンパク質の純度は、ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、ＳＥＣ、キャピラリーゲル電気泳動、ＩＥＦ、及びキャピラリー等電点電気泳動法（ｃＩＥＦ）が挙げられるがこれらに限定されない、当業者に既知の技術を使用して決定することができる。
いくつかの実施形態では、組み換えタンパク質を培地に分泌する発現系からの上清が、第一に市販のタンパク質濃縮フィルター、例えば、Ａｍｉｃｏｎ（登録商標）またはＭｉｌｌｉｐｏｒｅ Ｐｅｌｌｉｃｏｎ（登録商標）限外濾過装置を使用して濃縮される。濃縮ステップに続いて、濃縮物は、適切な精製マトリックスに適用され得る。いくつかの実施形態では、陰イオン交換樹脂、例えば、ペンダントジエチルアミノエチル（ＤＥＡＥ）基を有するマトリックスまたは基剤が使用される。マトリックスは、アクリルアミド、アガロース、デキストラン、セルロース、またはタンパク質精製で一般に使用される他のタイプであり得る。いくつかの実施形態では、陽イオン交換ステップが使用される。適切なカチオン交換体としては、スルホプロピル基またはカルボキシメチル基を含む様々な不溶性マトリックスが挙げられる。いくつかの実施形態では、セラミックヒドロキシアパタイト（ＣＨＴ）が挙げられるがこれに限定されないヒドロキシアパタイト媒体が使用される。いくつかの実施形態では、疎水性ＲＰ－ＨＰＬＣ媒体、例えば、ペンダントメチルまたは他の脂肪族基を有するシリカゲルを使用する１つ以上の逆相ＨＰＬＣステップが、組み換えタンパク質をさらに精製するために使用される。いくつかの実施形態では、組み換えタンパク質をそれらの疎水性に基づいて分離するために疎水性相互作用クロマトグラフィー（ＨＩＣ）が使用される。ＨＩＣは、いくつかの他の技術よりも変性の少ない条件下で操作する条件及びマトリックスを使用するため、生物活性を維持しながらタンパク質を精製するための有用な分離技術である。前述の精製ステップのいくつかまたはすべてを、様々な組み合わせで使用して、均一な組み換えタンパク質を提供することができる。
本開示のＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）は、当技術分野で既知の様々なアッセイによって、それらの物理的／化学的特性及び／または生物活性について分析され得る。いくつかの実施形態では、抗ＩＬＴ３抗体は、ＩＬＴ３（例えば、ヒトＩＬＴ３及び／またはｃｙｎｏ ＩＬＴ３）に結合する能力について試験される。結合アッセイとしては、ＳＰＲ（例えば、Ｂｉａｃｏｒｅ）、ＥＬＩＳＡ、及びＦＡＣＳが挙げられるがこれらに限定されない。いくつかの実施形態では、抗ＩＬＴ３抗体は、フィブロネクチン、ＡＰＯＥ、及び／またはＣＮＴＦＲに対する結合を阻害、低減、または遮断する能力について試験される。さらに、抗体は、溶解性、安定性、熱安定性、粘度、発現レベル、発現品質、及び／または精製効率について評価され得る。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３に対して生成されたモノクローナル抗体は、個々の抗体がそれぞれ認識するエピトープに基づいて、「エピトープビニング」として知られるプロセスで分類される。一般に、抗体は、ペアワイズコンビナトリアル方式で試験され、互いに競合する抗体はビンにまとめられる。例えば、プレミックスビニングアッセイでは、一次抗体が表面に固定化され、二次抗体と抗原のプレミックス溶液が固定化された一次抗体上に流される。タンデムでは、抗原は表面に固定化され、２種の抗体が固定化された抗原上に流され、結合を競合する。これらの技術を使用して、互いに遮断する抗体が同定され得る。他の抗体と比較して、各抗体に対する競合的遮断プロファイルが創出される。その遮断の結果により、各抗体が配置されるビンが決定される。エピトープビニングのハイスループット法は当技術分野で既知であり、短期間に多数の抗体のスクリーニング及び特徴づけを可能にする。同様のエピトープに結合する抗体は、多くの場合、同様の機能及び／または能力を共有する。逆に、異なるエピトープに結合する抗体は、異なる機能活性を有し得る。
いくつかの実施形態では、エピトープビンは、３Ａ３、５Ａ７、１２Ａ１２、１６Ｃ５、４５Ｇ１０、４８Ａ６、及び５３Ｆ１０からなる群から少なくとも１つの抗体を含む。いくつかの実施形態では、エピトープビンは、少なくとも抗体５Ａ７及び４８Ａ６を含む。いくつかの実施形態では、エピトープビンは、少なくとも抗体１２Ａ１２及び１６Ｃ５を含む。いくつかの実施形態では、エピトープビンは、少なくとも抗体４５Ｇ１０及び５３Ｆ１０を含む。いくつかの実施形態では、エピトープビンは、少なくとも抗体１２Ａ１２及び１６Ｃ５を含む。
エピトープマッピングは、抗体（または他の結合剤）が結合する標的タンパク質／抗原上の結合部位またはエピトープを特定するプロセスである。標的タンパク質上のエピトープをマッピングするための様々な方法が当技術分野で既知である。これらの方法としては、（ｉ）ショットガン突然変異誘発、部位特異的突然変異誘発、及びアラニンスキャニングが挙げられるがこれらに限定されない突然変異誘発、（ｉｉ）ドメインまたは断片スキャニング、（ｉｉｉ）ペプチドスキャニング（例えば、Ｐｅｐｓｃａｎテクノロジー）、（ｉｖ）ファージディスプレイ、微生物ディスプレイ、及びリボソーム／ｍＲＮＡディスプレイが挙げられるがこれらに限定されないディスプレイ法、（ｖ）タンパク質分解及び質量分析を含む方法、（ｖｉ）アミド水素／重水素交換を含む方法、ならびに（ｖｉｉ）Ｘ線結晶学及びＮＭＲが挙げられるがこれらに限定されない構造決定が挙げられる。
いくつかの実施形態では、精製された抗ＩＬＴ３抗体は、Ｎ末端配列決定、アミノ酸分析、ＨＰＬＣ、質量分析、示差走査蛍光定量（ＤＳＦ）、ナノＤＳＦ、キャピラリー等電点電気泳動（ｃＩＥＦ）、イオン交換クロマトグラフィー、及びパパイン消化が挙げられるがこれらに限定されないアッセイによって特徴づけられる。
免疫細胞機能を特徴づけるインビトロアッセイとしては、細胞活性化アッセイ（例えば、細胞増殖アッセイ）、細胞傷害性Ｔ細胞（ＣＴＬ）アッセイ、混合リンパ球反応（ＭＬＲ）アッセイ、サイトカイン／ケモカイン産生アッセイ、ＦｃＲ結合アッセイ、及び細胞遊走アッセイが挙げられるがこれらに限定されない。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３活性に影響を与える抗ＩＬＴ３抗体を同定するためのアッセイを提供する。「ＩＬＴ３活性に影響を与えるまたは影響を与えること」には、例えば、ＩＬＴ３活性を阻害、低減、遮断、拮抗、抑制、及び／または妨害することが含まれ得る。ＩＬＴ３は一般に負の調節因子／阻害分子として作用するため、いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３活性を阻害、低減、遮断、拮抗、抑制、及び／または妨害することにより、ＩＬＴ３が誘導する生物学的機能（例えば、活性化シグナル）の抑制が解除される。本明細書に記載の通り、ＩＬＴ３は、骨髄細胞、例えば、単球、マクロファージ、樹状細胞（ＤＣ）、及び骨髄ＡＰＣで発現される。ＩＬＴ３は、抑制性骨髄細胞、例えば、寛容原性樹状細胞（ｔｏｌＤＣ）及び骨髄由来抑制細胞（ＭＤＳＣ）で高度に発現される。ＩＬＴ３活性またはＩＬＴ３シグナル伝達活性としては、骨髄細胞の抑制、骨髄細胞活性の抑制、及び腫瘍関連骨髄細胞の抑制が挙げられるがこれらに限定されない。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３活性を阻害、低減、遮断、拮抗、抑制、及び／または妨害することにより、ＩＬＴ３が誘導する活性化シグナルの抑制が解除される。いくつかの実施形態では、抗ＩＬＴ３抗体は、ＩＬＴ３のシグナル伝達を阻害する。いくつかの実施形態では、抗ＩＬＴ３抗体は、ＩＬＴ３のシグナル伝達を阻害し、それにより、ＩＬＴ３が誘導する抑制効果が逆転される。いくつかの実施形態では、抗ＩＬＴ３抗体は、ＩＬＴ３が誘導する消滅シグナルを阻害する。
いくつかの実施形態では、抗ＩＬＴ３抗体は、ＩＬＴ３のシグナル伝達経路を妨害する。いくつかの実施形態では、抗ＩＬＴ３抗体は、ＩＬＴ３のシグナル伝達経路を妨害し、骨髄細胞を活性化する。いくつかの実施形態では、抗ＩＬＴ３抗体は、ＩＬＴ３のシグナル伝達経路を妨害し、骨髄ＡＰＣを活性化する。いくつかの実施形態では、抗ＩＬＴ３抗体は、ＩＬＴ３のシグナル伝達経路を妨害し、樹状細胞を活性化する。いくつかの実施形態では、抗ＩＬＴ３抗体は、ＩＬＴ３のシグナル伝達経路を妨害し、ｔｏｌＤＣを活性化または再活性化する。いくつかの実施形態では、抗ＩＬＴ３抗体は、ＩＬＴ３のシグナル伝達経路を妨害し、ｔｏｌＤＣが刺激（例えば、ＬＰＳ）に反応する能力を回復させる。いくつかの実施形態では、抗ＩＬＴ３抗体は、ＩＬＴ３のシグナル伝達経路を妨害し、初代樹状細胞を活性化する。
いくつかの実施形態では、「阻害すること」、「低減すること」、「遮断すること」、「拮抗すること」、「抑制すること」、及び「妨害すること」という用語は、該ＩＬＴ３結合剤による処理をしない場合のレベル及び／または活性に対する。いくつかの実施形態では、「阻害すること」、「低減すること」、「遮断すること」、「拮抗すること」、「抑制すること」、及び「妨害すること」という用語は、該ＩＬＴ３結合剤による処理前のレベル及び／または活性に対する。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３活性を阻害する抗ＩＬＴ３抗体は、抗体３Ａ３である。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３活性を阻害する抗ＩＬＴ３抗体は、抗体５Ａ７である。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３活性を阻害する抗ＩＬＴ３抗体は、抗体Ｈｚ５Ａ７．ｖ５である。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３活性を阻害する抗ＩＬＴ３抗体は、抗体１２Ａ１２である。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３活性を阻害する抗ＩＬＴ３抗体は、抗体１６Ｃ５である。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３活性を阻害する抗ＩＬＴ３抗体は、抗体４５Ｇ１０である。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３活性を阻害する抗ＩＬＴ３抗体は、抗体４８Ａ６である。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３活性を阻害する抗ＩＬＴ３抗体は、抗体５３Ｆ１０である。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３活性を阻害する抗ＩＬＴ３抗体は、抗体Ｈｚ４５Ｇ１０である。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３活性を阻害する抗ＩＬＴ３抗体は、抗体Ｈｚ４８Ａ６である。
本開示はまた、本明細書に記載の抗ＩＬＴ３抗体を含むコンジュゲートを提供する。いくつかの実施形態では、該抗体は、第２の分子に結合する。いくつかの実施形態では、該抗体は、細胞毒性薬または部分にコンジュゲートされる。いくつかの実施形態では、該抗体は、ＡＤＣ（抗体薬物複合体）を形成するために細胞毒性薬にコンジュゲートされる。いくつかの実施形態では、該細胞毒性薬は、メトトレキサート、アドリアマイシン／ドキソルビシン、メルファラン、マイトマイシンＣ、クロラムブシル、デュオカルマイシン、ダウノルビシン、ピロロベンゾジアゼピン（ＰＢＤ）、または他の挿入剤が挙げられるがこれらに限定されない化学療法薬である。いくつかの実施形態では、該細胞毒性薬は、オーリスタチン、マイタンシノイド（例えば、ＤＭ１及びＤＭ４）、ならびにツブリシンが挙げられるがこれらに限定されない微小管阻害剤である。いくつかの実施形態では、該細胞毒性薬は、細菌、真菌、植物、もしくは動物起源の酵素活性のある毒素またはその断片であり、ジフテリアＡ鎖、ジフテリア毒素の非結合活性断片、外毒素Ａ鎖、リシンＡ鎖、アブリンＡ鎖、モデシンＡ鎖、アルファ－サルシン、Ａｌｅｕｒｉｔｅｓ ｆｏｒｄｉｉタンパク質、ジアンシンタンパク質、Ｐｈｙｔｏｌａｃａ ａｍｅｒｉｃａｎａタンパク質（ＰＡＰＩ、ＰＡＰＩＩ、及びＰＡＰ－Ｓ）、Ｍｏｍｏｒｄｉｃａ ｃｈａｒａｎｔｉａ阻害剤、クルシン、クロチン、Ｓａｐａｏｎａｒｉａ ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ阻害剤、ゲロニン、ミトゲリン、レストリクトシン、フェノマイシン、エノマイシン、及びトリコテセン類を含むがこれらに限定されない。いくつかの実施形態では、抗体は、１つ以上の小分子毒素、例えば、カリケアマイシン、マイタンシノイド、トリコテン（ｔｒｉｃｈｏｔｈｅｎｅ）、及びＣＣ１０６５にコンジュゲートされる。これらの毒素のいずれか１つの誘導体は、該誘導体が親分子の細胞傷害活性を保持している限り、使用され得る。
本明細書に記載の抗ＩＬＴ３抗体を含むコンジュゲートは、当技術分野で既知の任意の適切な方法を使用して製造され得る。いくつかの実施形態では、コンジュゲートは、様々な二官能性タンパク質カップリング剤、例えば、Ｎ－スクシンイミジル－３－（２－ピリジルジチオール（ｐｙｒｉｄｙｉｄｉｔｈｉｏｌ））プロピオネート（ＳＰＤＰ）、イミノチオラン（ＩＴ）、イミドエステルの二官能性誘導体（アジプイミド酸ジメチルＨＣｌ等）、活性エステル（スベリン酸ジスクシンイミジル等）、アルデヒド（グルタルアルデヒド等）、ビス－アジド化合物（ビス（ｐ－アジドベンゾイル）ヘキサンジアミン等）、ビス－ジアゾニウム誘導体（ビス－（ｐ－ジアゾニウムベンゾイル）－エチレンジアミン等）、ジイソシアネート（トルエン２，６－ジイソシアネート等）、及びビス－活性フッ素化合物（１，５－ジフルオロ－２，４－ジニトロベンゼン等）を使用して製造される。
いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗ＩＬＴ３抗体は、該抗体が診断及び／または検出に使用されるようにする検出可能な物質または分子にコンジュゲートされる。いくつかの実施形態では、腫瘍または腫瘍微小環境における免疫細胞を観察するために標識された抗ＩＬＴ３抗体が使用される。いくつかの実施形態では、腫瘍または腫瘍微小環境における免疫細胞を処理後に観察するために標識された抗ＩＬＴ３抗体が使用される。検出可能な物質としては、酵素、例えば、西洋ワサビペルオキシダーゼ、アルカリホスファターゼ、ベータ－ガラクトシダーゼ、及びアセチルコリンエステラーゼ、補欠分子族、例えば、ビオチン及びフラビン（複数可）、蛍光物質、例えば、ウンベリフェロン、フルオレセイン、フルオレセインイソチオシアネート（ＦＩＴＣ）、ローダミン、テトラメチルローダミンイソチオシアネート（ＴＲＩＴＣ）、ジクロロトリアジニルアミンフルオレセイン、ダンシルクロリド、シアニン（Ｃｙ３）、及びフィコエリトリン、生物発光物質、例えば、ルシフェラーゼ、放射性物質、例えば、２１２Ｂｉ、１４Ｃ、５７Ｃｏ、５１Ｃｒ、６７Ｃｕ、１８Ｆ、６８Ｇａ、６７Ｇａ、１５３Ｇｄ、１５９Ｇｄ、６８Ｇｅ、３Ｈ、１６６Ｈｏ、１３１Ｉ、１２５Ｉ、１２３Ｉ、１２１Ｉ、１１５Ｉｎ、１１３Ｉｎ、１１２Ｉｎ、１１１Ｉｎ、１４０Ｌａ、１７７Ｌｕ、５４Ｍｎ、９９Ｍｏ、３２Ｐ、１０３Ｐｄ、１４９Ｐｍ、１４２Ｐｒ、１８６Ｒｅ、１８８Ｒｅ、１０５Ｒｈ、９７Ｒｕ、３５Ｓ、４７Ｓｃ、７５Ｓｅ、１５３Ｓｍ、１１３Ｓｎ、１１７Ｓｎ、８５Ｓｒ、９９ｍＴｃ、２０１Ｔｉ、１３３Ｘｅ、９０Ｙ、６９Ｙｂ、１７５Ｙｂ、６５Ｚｎ、陽電子放出金属、及び磁性金属イオンを挙げることができるがこれらに限定されない。
いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗ＩＬＴ３抗体は、イムノアッセイに使用される。イムノアッセイは当業者に既知であり、ＥＬＩＳＡ、ＳＰＲ（例えば、Ｂｉａｃｏｒｅ）、ＦＡＣＳ、及び免疫組織化学（ＩＨＣ）を含むがこれらに限定されない。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の抗ＩＬＴ３抗体は、組織サンプルまたは腫瘍サンプルで使用される。
本明細書に記載の抗ＩＬＴ３抗体はまた、抗体ヘテロコンジュゲートを形成するために第二の抗体にコンジュゲートされ得る。
本明細書に記載の抗ＩＬＴ３抗体は、固体支持体に結合され得る。かかる固体支持体としては、ガラス、セルロース、ポリアクリルアミド、ナイロン、ポリスチレン、ポリ塩化ビニル、またはポリプロピレンが挙げられるがこれらに限定されない。いくつかの実施形態では、固定化された抗ＩＬＴ３抗体は、イムノアッセイに使用される。いくつかの実施形態では、固定化された抗ＩＬＴ３抗体は、標的抗原の精製に使用される。
ＩＩＩ ポリヌクレオチド
いくつかの実施形態では、本開示は、本明細書に記載のポリペプチド（例えば、ＩＬＴ３結合剤）をコードするポリヌクレオチドを含むポリヌクレオチドを包含する。「ポリペプチドをコードするポリヌクレオチド」という用語は、ポリペプチドのコード配列のみを含むポリヌクレオチド、ならびにさらなるコード配列及び／または非コード配列を含むポリヌクレオチドを包含する。本開示のポリヌクレオチドは、ＲＮＡの形態の場合もあればＤＮＡの形態の場合もある。ＤＮＡとしては、ｃＤＮＡ、ゲノムＤＮＡ、及び合成ＤＮＡが挙げられ、二本鎖でも一本鎖でもよく、一本鎖の場合、コード鎖でも非コード（アンチセンス）鎖でもよい。
いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチドは、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）の重鎖可変領域及び／または軽鎖可変領域をコードするポリヌクレオチドを含む。いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチドは、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤の重鎖可変領域をコードするポリヌクレオチドを含む。いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチドは、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤の軽鎖可変領域をコードするポリヌクレオチドを含む。いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチドは、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤の重鎖可変領域をコードするポリヌクレオチド及び該ＩＬＴ３結合剤の軽鎖可変領域をコードするポリヌクレオチドを含む。
いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチドは、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）の重鎖及び／または軽鎖をコードするポリヌクレオチドを含む。いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチドは、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤の重鎖をコードするポリヌクレオチドを含む。いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチドは、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤の軽鎖をコードするポリヌクレオチドを含む。いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチドは、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤の重鎖をコードするポリヌクレオチド及び該ＩＬＴ３結合剤の軽鎖をコードするポリヌクレオチドを含む。
いくつかの実施形態では、該ポリヌクレオチドは、配列番号１０９～１２８からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含む。いくつかの実施形態では、該ポリヌクレオチドは、配列番号１０９のアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含む。いくつかの実施形態では、該ポリヌクレオチドは、配列番号１１０のアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含む。いくつかの実施形態では、該ポリヌクレオチドは、配列番号１１１のアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含む。いくつかの実施形態では、該ポリヌクレオチドは、配列番号１１２のアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含む。いくつかの実施形態では、該ポリヌクレオチドは、配列番号１１３のアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含む。いくつかの実施形態では、該ポリヌクレオチドは、配列番号１１４のアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含む。いくつかの実施形態では、該ポリヌクレオチドは、配列番号１１５のアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含む。いくつかの実施形態では、該ポリヌクレオチドは、配列番号１１６のアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含む。いくつかの実施形態では、該ポリヌクレオチドは、配列番号１１７のアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含む。いくつかの実施形態では、該ポリヌクレオチドは、配列番号１１８のアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含む。いくつかの実施形態では、該ポリヌクレオチドは、配列番号１１９のアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含む。いくつかの実施形態では、該ポリヌクレオチドは、配列番号１２０のアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含む。いくつかの実施形態では、該ポリヌクレオチドは、配列番号１２１のアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含む。いくつかの実施形態では、該ポリヌクレオチドは、配列番号１２２のアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含む。いくつかの実施形態では、該ポリヌクレオチドは、配列番号１２３のアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含む。いくつかの実施形態では、該ポリヌクレオチドは、配列番号１２４のアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含む。いくつかの実施形態では、該ポリヌクレオチドは、配列番号１２５のアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含む。いくつかの実施形態では、該ポリヌクレオチドは、配列番号１２６のアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含む。いくつかの実施形態では、該ポリヌクレオチドは、配列番号１２７のアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含む。いくつかの実施形態では、該ポリヌクレオチドは、配列番号１２８のアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含む。
いくつかの実施形態では、該ポリヌクレオチドは、配列番号１０９～１２８からなる群から選択される複数のアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含む。いくつかの実施形態では、該ポリヌクレオチドは、（ｉ）配列番号１０９のアミノ酸配列を含むポリペプチド及び（ｉｉ）配列番号１１０のアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含む。いくつかの実施形態では、該ポリヌクレオチドは、（ｉ）配列番号１１１のアミノ酸配列を含むポリペプチド及び（ｉｉ）配列番号１１２のアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含む。いくつかの実施形態では、該ポリヌクレオチドは、（ｉ）配列番号１１３のアミノ酸配列を含むポリペプチド及び（ｉｉ）配列番号１１４のアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含む。いくつかの実施形態では、該ポリヌクレオチドは、（ｉ）配列番号１１５のアミノ酸配列を含むポリペプチド及び（ｉｉ）配列番号１１６のアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含む。いくつかの実施形態では、該ポリヌクレオチドは、（ｉ）配列番号１１７のアミノ酸配列を含むポリペプチド及び（ｉｉ）配列番号１１８のアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含む。いくつかの実施形態では、該ポリヌクレオチドは、（ｉ）配列番号１１９のアミノ酸配列を含むポリペプチド及び（ｉｉ）配列番号１２０のアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含む。いくつかの実施形態では、該ポリヌクレオチドは、（ｉ）配列番号１２１のアミノ酸配列を含むポリペプチド及び（ｉｉ）配列番号１２２のアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含む。いくつかの実施形態では、該ポリヌクレオチドは、（ｉ）配列番号１２３のアミノ酸配列を含むポリペプチド及び（ｉｉ）配列番号１２４のアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含む。いくつかの実施形態では、該ポリヌクレオチドは、（ｉ）配列番号１２５のアミノ酸配列を含むポリペプチド及び（ｉｉ）配列番号１２７のアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含む。いくつかの実施形態では、該ポリヌクレオチドは、（ｉ）配列番号１２６のアミノ酸配列を含むポリペプチド及び（ｉｉ）配列番号１２８のアミノ酸配列を含むポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを含む。
本開示はまた、本明細書に記載のポリヌクレオチドのバリアントを提供し、該バリアントは、例えば、ポリペプチドの断片、アナログ、及び／または誘導体をコードする。いくつかの実施形態では、本開示は、本明細書に記載のポリペプチドをコードするポリヌクレオチドに対して少なくとも８０％同一、少なくとも８５％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９５％同一、及びいくつかの実施形態では、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一のヌクレオチド配列を有するポリヌクレオチドを含むポリヌクレオチドを提供する。
いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチドは、配列番号１０９～１２８からなる群から選択されるアミノ酸配列をコードするポリヌクレオチドに対して少なくとも８０％同一、少なくとも８５％同一、少なくとも９０％同一、少なくとも９５％同一、及びいくつかの実施形態では、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一のヌクレオチド配列を有するポリヌクレオチドを含む。同様に提供するのは、配列番号１０９～１２８からなる群から選択されるアミノ酸配列をコードするポリヌクレオチドにハイブリダイズするポリヌクレオチドを含むポリヌクレオチドである。いくつかの実施形態では、該ハイブリダイゼーションは、当業者に既知の高ストリンジェンシー条件下で行われる。
本明細書で使用される、「ポリヌクレオチド配列に対して少なくとも９５％同一のヌクレオチド配列を有するポリヌクレオチド」という句は、該ポリヌクレオチド配列が、参照ヌクレオチド配列の１００ヌクレオチドあたり最大５つの点突然変異を含むことができることを除いて、該ポリヌクレオチドのヌクレオチド配列が参照配列に対して同一であることを意味することを意図している。換言すれば、参照ヌクレオチド配列に対して少なくとも９５％同一のヌクレオチド配列を有するポリヌクレオチドを得るには、該参照配列のヌクレオチドの最大５％を削除または別のヌクレオチドで置換してもよいか、またはいくつかのヌクレオチドを、該参照配列の全ヌクレオチドの最大５％まで該参照配列に挿入してもよい。当業者には、他の「％同一」の記述、例えば、９０％同一または８５％同一に対して、適切な計算がなされることが理解される。これらの参照配列の突然変異は、該参照ヌクレオチド配列の５’もしくは３’末端位置またはそれら末端位置間の任意の場所で、該参照配列のヌクレオチド間で個別に散在して、または該参照配列内で１つ以上の連続した群で生じ得る。
ポリヌクレオチドバリアントは、コード領域、非コード領域、またはその両方に変化を含むことができる。いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチドバリアントは、サイレント置換、付加、または欠失を生じるがコードされたポリペプチドの特性または活性を変更しない変化を含む。いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチドバリアントは、（遺伝暗号の縮重のために）ポリペプチドのアミノ酸配列に変化をもたらさないサイレント置換を含む。いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチドバリアントは、そのコドンによってコードされるアミノ酸を変化させるコドンに１つ以上（例えば、１、２、または３つ）の置換を含む１つ以上の変異コドンを含む。コドンに１つ以上の置換を導入するための方法は、当業者に既知であり、ＰＣＲ突然変異誘発及び部位特異的突然変異誘発を含むがこれらに限定されない。ポリヌクレオチドバリアントは、様々な理由で、例えば、特定の宿主に対するコドン発現を最適化するため（例えば、ヒトｍＲＮＡのコドンを、細菌宿主、例えば、Ｅ．ｃｏｌｉが好むものに変更するため）に産生される場合がある。いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチドバリアントは、該配列の非コード領域またはコード領域に少なくとも１つのサイレント突然変異を含む。
いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチドバリアントは、コードされるポリペプチドの発現（または発現レベル）を調節または変更するために産生される。いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチドバリアントは、コードされるポリペプチドの発現を高めるために産生される。いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチドバリアントは、コードされるポリペプチドの発現を低下させるために産生される。いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチドバリアントは、コードされるポリペプチドの発現が親ポリヌクレオチド配列と比較して高い。いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチドバリアントは、コードされるポリペプチドの発現が親ポリヌクレオチド配列と比較して低い。
いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチドは、宿主細胞からのポリペプチドの発現及び分泌を助けるポリヌクレオチドに同じリーディングフレームで融合されたポリペプチド（例えば、抗体）のコード配列を含む。いくつかの実施形態では、該発現及び分泌を助けるポリヌクレオチドは、ポリペプチドの輸送を制御するための分泌配列として機能するリーダー配列である。いくつかの実施形態では、該ポリペプチドは、宿主細胞によって切断されて該ポリペプチドの「成熟」形態を形成するリーダー配列を有する。
いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチドは、マーカーまたはタグ配列に同じリーディングフレームで融合されたポリペプチド（例えば、抗体）のコード配列を含む。例えば、いくつかの実施形態では、マーカー配列は、ヘキサヒスチジンタグ（ＨＩＳタグ、配列番号１５４）であり、それにより、該マーカーに融合されたポリペプチドの効率的な精製が可能になる。いくつかの実施形態では、マーカー配列は、哺乳類宿主が使用される場合、インフルエンザの血球凝集素タンパク質に由来する血球凝集素（ＨＡ）タグである。いくつかの実施形態では、該マーカー配列は、ＦＬＡＧ（商標）タグである。いくつかの実施形態では、マーカーは、他のマーカーまたはタグと組み合わせて使用され得る。
いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチドは単離される。いくつかの実施形態では、ポリヌクレオチドは、実質的に純粋である。
本明細書に記載のポリヌクレオチドの各々を含むベクター及び細胞もまた提供する。いくつかの実施形態では、ベクター（例えば、発現ベクター）は、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）をコードするポリヌクレオチド分子を含む。いくつかの実施形態では、ベクターは、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤の一部であるポリペプチドをコードするポリヌクレオチド分子を含む。いくつかの実施形態では、細胞は、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤をコードするポリヌクレオチド分子を含むベクターを含む。いくつかの実施形態では、細胞は、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤の一部であるポリペプチドをコードするポリヌクレオチド分子を含むベクターを含む。いくつかの実施形態では、細胞は、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤をコードするポリヌクレオチド分子を含む。いくつかの実施形態では、細胞は、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤をコードする１つ以上のポリヌクレオチドを含む。いくつかの実施形態では、細胞は、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤をコードする単一のポリヌクレオチドを含む。いくつかの実施形態では、細胞は、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤の重鎖可変領域をコードする第一のポリヌクレオチド及び本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤の軽鎖可変領域をコードする第二のポリヌクレオチドを含む。いくつかの実施形態では、細胞は、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤の重鎖可変領域及び軽鎖可変領域をコードするポリヌクレオチドを含む。いくつかの実施形態では、細胞は、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤の重鎖をコードする第一のポリヌクレオチド及び本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤の軽鎖をコードする第二のポリヌクレオチドを含む。いくつかの実施形態では、細胞は、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤の重鎖及び軽鎖をコードするポリヌクレオチドを含む。いくつかの実施形態では、細胞は、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤をコードする１つ以上のベクターを含む。いくつかの実施形態では、細胞は、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤をコードするベクターを含む。いくつかの実施形態では、細胞は、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤の重鎖可変領域をコードする第一のベクター及び本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤の軽鎖可変領域をコードする第二のベクターを含む。いくつかの実施形態では、細胞は、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤の重鎖可変領域及び軽鎖可変領域をコードする単一のベクターを含む。いくつかの実施形態では、細胞は、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤の重鎖をコードする第一のベクター及び本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤の軽鎖をコードする第二のベクターを含む。いくつかの実施形態では、細胞は、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤の重鎖及び軽鎖をコードする単一のベクターを含む。
ＩＶ．結合剤の製造方法
本開示は、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）を製造する方法を提供する。いくつかの実施形態では、方法は、ＩＬＴ３結合剤の重鎖及び／または軽鎖を含む細胞を提供すること、該結合剤の発現を可能にする条件下で該細胞を培養すること、及び該結合剤を単離することを含む。いくつかの実施形態では、方法は、さらに、該結合剤を精製することを含む。いくつかの実施形態では、方法は、さらに、該結合剤を医薬組成物として製剤化することを含む。いくつかの実施形態では、細胞は、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤の重鎖可変領域及び軽鎖可変領域をコードする１つ以上のベクターを含む。いくつかの実施形態では、細胞は、該ＩＬＴ３結合剤の重鎖可変領域をコードする第一のベクター及び該ＩＬＴ３結合剤の軽鎖可変領域をコードする第二のベクターを含む。他の実施形態では、細胞は、該ＩＬＴ３結合剤の重鎖可変領域及び軽鎖可変領域をコードするベクターを含む。いくつかの実施形態では、細胞は、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤の重鎖及び軽鎖をコードする１つ以上のベクターを含む。いくつかの実施形態では、細胞は、該ＩＬＴ３結合剤の重鎖をコードする第一のベクター及び該ＩＬＴ３結合剤の軽鎖をコードする第二のベクターを含む。他の実施形態では、細胞は、該ＩＬＴ３結合剤の重鎖及び軽鎖をコードするベクターを含む。いくつかの実施形態では、細胞は、該ＩＬＴ３結合剤の重鎖及び軽鎖をコードする１つ以上のポリヌクレオチドを含む。いくつかの実施形態では、細胞は、該ＩＬＴ３結合剤の重鎖をコードする第一のポリヌクレオチド及び該ＩＬＴ３結合剤の軽鎖をコードする第二のポリヌクレオチドを含む。他の実施形態では、細胞は、該ＩＬＴ３結合剤の重鎖及び軽鎖をコードするポリヌクレオチドを含む。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤をコードするポリヌクレオチドは、細胞に一過性にトランスフェクトされる。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤をコードするポリヌクレオチドは、細胞に安定にトランスフェクトされる。
いくつかの実施形態では、該ＩＬＴ３結合剤は、少なくとも１つの抗原結合部位を含む抗体断片であり、該方法は、抗ＩＬＴ３抗体の断片を含む細胞を提供すること、該抗体断片の発現を可能にする条件下で該細胞をインキュベートすること、及び該抗体断片を単離することを含む。ある特定の実施形態では、該細胞は、本明細書に記載の抗体断片をコードするベクターを含む。ある特定の実施形態では、該細胞は、本明細書に記載の抗体断片をコードするポリヌクレオチドを含む。いくつかの実施形態では、該方法は、該抗体断片を精製することを含む。ある特定の実施形態では、該抗体断片は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、ｓｃＦｖ、（ｓｃＦｖ）２、単鎖抗体、二重可変領域抗体、ダイアボディ、またはナノボディである。
いくつかの実施形態では、該ＩＬＴ３結合剤は、ｓｃＦｖであり、該方法は、該ｓｃＦｖを含む細胞を提供すること、該ｓｃＦｖの発現を可能にする条件下で該細胞をインキュベートすること、及び該ｓｃＦｖを単離することを含む。ある特定の実施形態では、該細胞は、該ｓｃＦｖをコードする本明細書に記載のベクターを含む。ある特定の実施形態では、該細胞は、該ｓｃＦｖをコードする本明細書に記載のポリヌクレオチドを含む。いくつかの実施形態では、該方法は、該ｓｃＦｖを精製することを含む。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤を製造するために使用される細胞は、細菌細胞（例えば、Ｅ．ｃｏｌｉ）である。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤を製造するために使用される細胞は、酵母細胞（例えば、Ｐｉｃｈｉａ ｐａｓｔｏｒｉｓ）である。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤を製造するために使用される細胞は、哺乳類細胞、例えば、ＣＨＯ細胞またはＨＥＫ２９３細胞である。
いくつかの実施形態では、シグナル配列は、細胞からの本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤の発現のため（例えば、シグナル配列を発現されるペプチドに融合することによって）使用される。この目的のために、任意の適切なシグナル配列が使用され得る。例えば、抗体の重鎖及び軽鎖を発現させるため、ＩｇＧカッパ軽鎖シグナルペプチド配列または自然抗体のシグナルペプチドを該重鎖及び軽鎖配列に融合させることができる。
Ｖ．ＩＬＴ３リガンド
本開示は、新たに同定されたヒトＩＬＴ３に対するリガンドとしてフィブロネクチンを提供する。毛様体神経栄養因子受容体（ＣＮＴＦＲ）もまた、ＩＬＴ３の結合パートナーであることが分かった。最近になって、ＩＬＴ３に対するいくつかのリガンドが同定され、これらには、ＣＤ１６６（活性化白血球細胞接着分子、ＡＬＣＡＭとも呼ばれる）、アポリポタンパク質Ｅ（ＡＰＯＥ）、及びペプチダーゼインヒビター１６（ＰＩ１６）が含まれる（Ｘｕ ｅｔ ａｌ．，２０１８，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，２００：１２０７－１２１９、Ｄｅｎｇ ｅｔ ａｌ．，２０１８，Ｎａｔｕｒｅ，５６２：６０５－６０９、国際公開第ＷＯ２０１８／０８９３００号）。現在のところ、これらのタンパク質のすべてがＩＬＴ３リガンドとして生物学的に機能するかどうかについては合意がないと思われ、これらの異なる相互作用の各々の関連性をさらに理解するための研究が行われている。
ヒトフィブロネクチン（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ番号Ｐ０２７５１）及びヒトＣＮＴＦＲ－アルファ（ＵｎｉＰｒｏＫＢ番号Ｐ２６９９２）のアミノ酸（ａａ）配列を、それぞれ、配列番号１３８及び配列番号１４８として本明細書に提供する。ヒトフィブロネクチンには少なくとも１７の異なるアイソフォームが存在し、ＵｎｉＰｒｏｔＫＢは、その標準配列として配列番号１３８を記載している。本明細書で使用される、これらタンパク質のアミノ酸位置への言及は、シグナル配列を含めたアミノ酸配列の付番を指す。
フィブロネクチン（ＦＮ）は通常、Ｃ末端付近でジスルフィド結合の対によって共有結合により連結された２つのほぼ同一の約２５０ｋＤａのサブユニットで構成される二量体として存在する。各モノマーは、Ｉ型、ＩＩ型及びＩＩＩ型の３種類の繰り返し単位（ＦＮリピートと呼ばれる）を含む。ＦＮは、１２個のＩ型リピート、２個のＩＩ型リピート、及び１５～１７個のＩＩＩ型リピートを含み、これらを合わせると、当該フィブロネクチン配列の約９０％を占める。フィブロネクチン構造の表現については、図８を参照されたい。Ｉ型及びＩＩ型リピートは、ドメイン内のジスルフィド結合の存在によって安定化される一方、ＩＩＩ型ドメインは、構造的に不安定であり、機械的アンフォールディングが起こりやすい。フィブロネクチンは、２０個ものバリアントを生成し得る単一のプレｍＲＮＡの選択的スプライシングから生じる複数の形態で存在し得る。
フィブロネクチンは、肝臓によって合成される血漿タンパク質であり、ほとんどの組織で細胞依存性の重合を受けて線維状の細胞外マトリックスになる。常在間質細胞による血漿由来及び局所合成の両方が、組織マトリックスを構成するフィブロネクチンに寄与する。
フィブロネクチンは、少なくとも１２個のインテグリン受容体ファミリーのメンバーのリガンドである。フィブロネクチンは、インテグリンを介して細胞表面に結合することに加えて、多種多様な機能活性を有する。それは、ヘパリン、コラーゲン／ゼラチン、及びフィブリンを含めたいくつかの他のタンパク質に結合する。これらの相互作用は、フィブロネクチン内のいくつかの異なる構造的及び機能的ドメインならびに該フィブロネクチンリピート群によって媒介される。多くの他のフィブロネクチンドメインの生物学的役割は、特徴づけられておらず、及び／または十分に理解されていない。
本明細書に開示するように、フィブロネクチンは、ＩＬＴ３のリガンドとして同定された。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）は、フィブロネクチンに対するＩＬＴ３の結合を阻害、妨害、または遮断する。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤は、ＩＬＴ３とフィブロネクチンとの相互作用を遮断する。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤は、ＩＬＴ３のフィブロネクチンに対する結合を阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤は、ＩＬＴ３とフィブロネクチンとの機能的相互作用を遮断または阻害する。
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）は、配列番号１３８または１３９に対するＩＬＴ３の結合を阻害、妨害、または遮断する。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）は、フィブロネクチンのＮ末端領域（シグナル配列／ペプチドを含まない）に対するＩＬＴ３の結合を阻害、妨害、または遮断する。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）は、フィブロネクチンのヘパリン結合ドメイン及びコラーゲン結合ドメインに対するＩＬＴ３の結合を阻害、妨害、または遮断する。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）は、フィブロネクチンのヘパリン結合ドメインに対するＩＬＴ３の結合を阻害、妨害、または遮断する。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）は、フィブロネクチンのＩ型リピート１～５に対するＩＬＴ３の結合を阻害、妨害、または遮断する。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）は、フィブロネクチンのＩ型リピート１～４に対するＩＬＴ３の結合を阻害、妨害、または遮断する。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）は、フィブロネクチンのＩ型リピート１～３に対するＩＬＴ３の結合を阻害、妨害、または遮断する。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）は、フィブロネクチンのＩ型リピート１～２に対するＩＬＴ３の結合を阻害、妨害、または遮断する。いずれのドメインの境界も正確には分かっておらず、ＦＮのドメイン及び／またはリピートを画定するために本明細書で使用されるアミノ酸は、ＵｎｉＰｒｏｔＫＢからの情報に基づいている。従って、任意のドメイン及び／またはリピートの境界は、本明細書に記載されているものとは異なる場合がある。
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）は、配列番号１３８のアミノ酸３２～６０８に対するＩＬＴ３の結合を阻害、妨害、または遮断する。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）は、配列番号１３８のアミノ酸３２～２８０に対するＩＬＴ３の結合を阻害、妨害、または遮断する。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）は、配列番号１３８のアミノ酸３２～３００に対するＩＬＴ３の結合を阻害、妨害、または遮断する。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）は、配列番号１３８のアミノ酸３２～２２８に対するＩＬＴ３の結合を阻害、妨害、または遮断する。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）は、配列番号１３８のアミノ酸３２～１８２に対するＩＬＴ３の結合を阻害、妨害、または遮断する。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）は、配列番号１３８のアミノ酸３２～１３８に対するＩＬＴ３の結合を阻害、妨害、または遮断する。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）は、配列番号１３８のアミノ酸３２～２９０に対するＩＬＴ３の結合を阻害、妨害、または遮断する。
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）は、フィブロネクチンが誘導するＩＬＴ３活性を阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤は、フィブロネクチンが誘導するＩＬＴ３の抑制活性を阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤は、フィブロネクチンが誘導するＩＬＴ３の骨髄細胞の抑制を阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤は、フィブロネクチンが誘導するＩＬＴ３の骨髄細胞活性の抑制を阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤は、フィブロネクチンが誘導するＩＬＴ３のＡＰＣの抑制を阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤は、フィブロネクチンが誘導するＩＬＴ３のＡＰＣ活性の抑制を阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤は、フィブロネクチンが誘導するＩＬＴ３の樹状細胞の抑制を阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤は、フィブロネクチンが誘導するＩＬＴ３の樹状細胞活性の抑制を阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤は、フィブロネクチンが誘導するＩＬＴ３のマクロファージの抑制を阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤は、フィブロネクチンが誘導するＩＬＴ３のマクロファージ活性の抑制を阻害する。いくつかの実施形態では、樹状細胞、ＡＰＣ、単球、及びマクロファージが挙げられるがこれらに限定されない該骨髄細胞は、腫瘍関連細胞である。いくつかの実施形態では、樹状細胞、ＡＰＣ、単球及びマクロファージが挙げられるがこれらに限定されない該骨髄細胞は、腫瘍微小環境に存在する。いくつかの実施形態では、樹状細胞、ＡＰＣ、単球及びマクロファージが挙げられるがこれらに限定されない該骨髄細胞は、腫瘍内に存在する。
本明細書に開示するように、ＣＮＴＦＲ－アルファは、ＩＬＴ３のリガンドとして同定された。ＣＮＴＦＲ－アルファは、毛様体神経栄養因子に結合することが知られている三部分ＣＮＴＦＲ複合体の一部である。ＣＮＴＦＲ－アルファサブユニットは膜結合タンパク質であり、グリコシルホスファチジルイノシトール（ＧＰＩ）結合によって細胞膜に固定されている。この受容体は、該複合体の補助受容体成分なしではシグナル伝達能力を有さない。他の２つの成分は、ｇｐ１３０及び白血病抑制因子受容体（ＬＩＦＲ）ベータであり、これが該複合体のシグナル伝達能力を提供する（Ｓｔａｈｌ ｅｔ ａｌ．，１９９４，Ｊ．Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌ．，２５：１４５４－１４６６）。ＣＮＴＦＲへのＩＬＴ３結合の生物学的関連性はまだ研究中である。
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤は、ＣＮＴＦＲ－アルファに対するＩＬＴ３の結合を阻害、妨害、または遮断する。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤は、ＩＬＴ３とＣＮＴＦＲ－アルファの相互作用を遮断する。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤は、ＩＬＴ３のＣＮＴＦＲ－アルファに対する結合を阻害する。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤は、ＣＮＴＦＲ－アルファに対するＩＬＴ３の結合を阻害、妨害、または遮断し、該ＣＮＴＦＲ複合体のシグナル伝達を調節する。
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤は、ＣＮＴＦＲ－アルファの成熟形態に対するＩＬＴ３の結合を阻害、妨害、または遮断する。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤は、ＣＮＴＦＲ－アルファのＩｇ様Ｃ２型ドメインに対するＩＬＴ３の結合を阻害、妨害、または遮断する。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤は、ＣＮＴＦＲ－アルファのＦＮのＩＩＩ型ドメインの一方または両方（すなわち、ＦＮのＩＩＩ型ドメイン１、ＦＮのＩＩＩ型ドメイン２、またはＦＮのＩＩＩ型ドメイン１及び２）に対するＩＬＴ３の結合を阻害、妨害、または遮断する。
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤は、配列番号１４９または配列番号１５０に対するＩＬＴ３の結合を阻害、妨害、または遮断する。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤は、配列番号１４８のアミノ酸２３～３４２に対するＩＬＴ３の結合を阻害、妨害、または遮断する。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤は、配列番号１４８のアミノ酸２３～１０４に対するＩＬＴ３の結合を阻害、妨害、または遮断する。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤は、配列番号１４８のアミノ酸１０５～２０５に対するＩＬＴ３の結合を阻害、妨害、または遮断する。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤は、配列番号１４８のアミノ酸２０６～３０６に対するＩＬＴ３の結合を阻害、妨害、または遮断する。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤は、配列番号１４８のアミノ酸２３～３０６に対するＩＬＴ３の結合を阻害、妨害、または遮断する。
ＶＩ．使用方法及び医薬組成物
本開示のＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）は、治療的治療法、例えば、がんの治療が挙げられるがこれらに限定されない様々な用途に有用である。いくつかの実施形態では、治療的治療法は、がんに対する免疫療法を含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、がんまたはがん細胞に対する免疫反応を活性化、促進、増大、及び／または増強するために有用である。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、腫瘍または腫瘍細胞に対する免疫反応を活性化、促進、増大、及び／または増強するために有用である。該使用方法は、インビトロ法の場合も、エキソビボ法の場合も、インビボ法の場合もある。
本開示は、ＩＬＴ３のフィブロネクチンに対する結合を妨害、阻害、または遮断する方法を提供する。いくつかの実施形態では、フィブロネクチンに対するＩＬＴ３の結合を妨害、阻害、または遮断する方法は、細胞を、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤と接触させることを含む。いくつかの実施形態では、フィブロネクチンに対するＩＬＴ３の結合を妨害、阻害、または遮断する方法は、細胞を、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤と接触させることを含み、該方法により、フィブロネクチンが誘導するＩＬＴ３活性が妨害、阻害、または遮断される。いくつかの実施形態では、フィブロネクチンに対するＩＬＴ３の結合を妨害、阻害、または遮断する方法は、細胞を、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤と接触させることを含み、該方法により、ＩＬＴ３が誘導する骨髄細胞の抑制が妨害、阻害、または遮断される。いくつかの実施形態では、フィブロネクチンに対するＩＬＴ３の結合を妨害、阻害、または遮断する方法は、細胞を、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤と接触させることを含み、該方法により、ＩＬＴ３が誘導する骨髄細胞活性の抑制が妨害、阻害、または遮断される。いくつかの実施形態では、フィブロネクチンに対するＩＬＴ３の結合を妨害、阻害、または遮断する方法により、（ｉ）骨髄細胞におけるＦｃＲシグナル伝達活性が回復し、（ｉｉ）骨髄細胞によるケモカイン産生が回復し、及び／または（ｉｉｉ）免疫細胞（例えば、Ｔ細胞）の増殖及び／または活性が回復する。いくつかの実施形態では、該骨髄細胞は、単球である。いくつかの実施形態では、該骨髄細胞は、マクロファージである。いくつかの実施形態では、該骨髄細胞は、樹状細胞である。いくつかの実施形態では、該骨髄細胞は、ｔｏｌＤＣである。いくつかの実施形態では、該骨髄細胞は、ＡＰＣである。
本開示は、対象におけるフィブロネクチンに対するＩＬＴ３の結合を妨害、阻害、または遮断する方法を提供する。いくつかの実施形態では、対象におけるフィブロネクチンに対するＩＬＴ３の結合を妨害、阻害、または遮断する方法は、該対象に対して、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）の有効量を投与することを含む。いくつかの実施形態では、対象におけるフィブロネクチンが誘導するＩＬＴ３活性を妨害、阻害、または遮断する方法は、該対象に対して、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤の有効量を投与することを含む。いくつかの実施形態では、対象におけるＩＬＴ３が誘導する骨髄細胞の抑制を妨害、阻害、または遮断する方法は、該対象に対して、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤の有効量を投与することを含む。いくつかの実施形態では、対象におけるＩＬＴ３が誘導する骨髄細胞活性の抑制を妨害、阻害、または遮断する方法は、該対象に対して、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤の有効量を投与することを含む。いくつかの実施形態では、対象におけるＩＬＴ３が誘導する抗原提示細胞活性の抑制を妨害、阻害、または遮断する方法により、（ｉ）骨髄細胞におけるＦｃＲ活性が回復し、（ｉｉ）骨髄細胞によるケモカイン産生が回復し、及び／または（ｉｉｉ）免疫細胞（例えば、Ｔ細胞）の増殖及び／または活性が回復する。いくつかの実施形態では、該骨髄細胞は、単球である。いくつかの実施形態では、該骨髄細胞は、マクロファージである。いくつかの実施形態では、該骨髄細胞は、樹状細胞である。いくつかの実施形態では、該骨髄細胞は、ｔｏｌＤＣである。いくつかの実施形態では、該骨髄細胞は、ＡＰＣである。
本開示は、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）を使用して、対象における免疫反応を活性化するための方法を提供する。いくつかの実施形態では、本開示は、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤を使用して、対象における免疫反応を促進するための方法を提供する。いくつかの実施形態では、本開示は、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤を使用して、対象における免疫反応を増大させるための方法を提供する。いくつかの実施形態では、本開示は、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤を使用して、対象における免疫反応を増強するための方法を提供する。いくつかの実施形態では、該免疫反応の活性化、促進、増大、及び／または増強は、骨髄細胞を刺激することを含む。いくつかの実施形態では、該免疫反応の活性化、促進、増大、及び／または増強は、単球を刺激することを含む。いくつかの実施形態では、該免疫反応の活性化、促進、増大、及び／または増強は、マクロファージを刺激することを含む。いくつかの実施形態では、該免疫反応の活性化、促進、増大、及び／または増強は、樹状細胞を刺激することを含む。いくつかの実施形態では、該免疫反応の活性化、促進、増大、及び／または増強は、ＡＰＣを刺激することを含む。いくつかの実施形態では、該免疫反応の活性化、促進、増大、及び／または増強は、ｔｏｌＤＣを刺激することを含む。いくつかの実施形態では、該免疫反応の活性化、促進、増大、及び／または増強は、ｔｏｌＤＣを再活性化することを含む。いくつかの実施形態では、該免疫反応の活性化、促進、増大、及び／または増強は、細胞性免疫を増大することを含む。いくつかの実施形態では、該免疫反応の活性化、促進、増大、及び／または増強は、エフェクターＴ細胞活性を増大することを含む。いくつかの実施形態では、該免疫反応の活性化、促進、増大、及び／または増強は、ＣＴＬ活性を増大することを含む。いくつかの実施形態では、該免疫反応の活性化、促進、増大、及び／または増強は、Ｔｒｅｇの抑制活性を阻害または低減することを含む。いくつかの実施形態では、該免疫反応の活性化、促進、増大、及び／または増強は、ＭＤＳＣの抑制活性を阻害または低減することを含む。いくつかの実施形態では、該免疫反応は、抗原刺激の結果である。いくつかの実施形態では、該抗原刺激は、腫瘍細胞である。いくつかの実施形態では、該抗原刺激は、がんである。
本開示はまた、細胞におけるＩＬＴ３のシグナル伝達を妨害及び／または阻害する方法を提供し、該方法は、該細胞を、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤の有効量と接触させることを含む。いくつかの実施形態では、細胞におけるＩＬＴ３のシグナル伝達を妨害及び／または阻害する方法は、該細胞を、有効量の抗体３Ａ３、抗体５Ａ７、抗体１２Ａ１２、抗体１６Ｃ５、抗体４５Ｇ１０、抗体４８Ａ６、もしくは抗体５３Ｆ１０、またはそれらのヒト化型と接触させることを含む。いくつかの実施形態では、細胞におけるＩＬＴ３のシグナル伝達を妨害及び／または阻害する方法は、該細胞を、有効量の抗体Ｈｚ５Ａ７．ｖ５と接触させることを含む。いくつかの実施形態では、細胞におけるＩＬＴ３のシグナル伝達を妨害及び／または阻害する方法は、該細胞を、有効量の抗体Ｈｚ４５Ｇ１０と接触させることを含む。いくつかの実施形態では、細胞におけるＩＬＴ３のシグナル伝達を妨害及び／または阻害する方法は、該細胞を、有効量の抗体Ｈｚ４８Ａ６と接触させることを含む。いくつかの実施形態では、本開示は、細胞におけるＩＬＴ３のシグナル伝達を妨害及び／または阻害するための薬剤の製造または調製における本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤の使用を提供する。ある特定の実施形態では、該細胞は、骨髄細胞である。いくつかの実施形態では、該骨髄細胞は、単球である。いくつかの実施形態では、該骨髄細胞は、マクロファージである。いくつかの実施形態では、該骨髄細胞は、樹状細胞である。いくつかの実施形態では、該骨髄細胞は、ｔｏｌＤＣである。いくつかの実施形態では、該骨髄細胞は、抗原提示細胞である。ある特定の実施形態では、該方法は、該細胞を該薬剤と接触させるステップが、治療有効量のＩＬＴ３結合剤を対象に投与することを含むインビボ法である。いくつかの実施形態では、該方法は、インビトロまたはエキソビボ法である。
本開示はまた、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤を使用した腫瘍の成長を阻害するための方法を提供する。いくつかの実施形態では、該腫瘍の成長を阻害する方法は、抗体３Ａ３、抗体５Ａ７、抗体１２Ａ１２、抗体１６Ｃ５、抗体４５Ｇ１０、抗体４８Ａ６、もしくは抗体５３Ｆ１０、またはそれらのヒト化型を使用することを含む。いくつかの実施形態では、該腫瘍の成長を阻害する方法は、抗体Ｈｚ５Ａ７．ｖ５を使用することを含む。いくつかの実施形態では、該腫瘍の成長を阻害する方法は、抗体Ｈｚ４５Ｇ１０を使用することを含む。いくつかの実施形態では、該腫瘍の成長を阻害する方法は、抗体Ｈｚ４８Ａ６を使用することを含む。ある特定の実施形態では、該腫瘍の成長を阻害する方法は、細胞混合物を、インビトロでＩＬＴ３結合剤と接触させることを含む。例えば、免疫細胞（例えば、寛容原性樹状細胞）と混合された不死化細胞株またはがん細胞株を、ＩＬＴ３に結合する試験薬剤が添加された培地で培養する。いくつかの実施形態では、腫瘍細胞は、患者のサンプル、例えば、組織生検、胸水、または血液サンプル等から単離され、免疫細胞（例えば、ｔｏｌＤＣ）と混合され、ＩＬＴ３に結合する試験薬剤が添加された培地で培養される。いくつかの実施形態では、本開示は、腫瘍または腫瘍細胞の成長を阻害するための薬剤の製造または調製における本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤の使用を提供する。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、エフェクター免疫細胞の活性を増大、促進、及び／または増強する。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、腫瘍細胞の成長を阻害する。
いくつかの実施形態では、腫瘍の成長を阻害する方法は、該腫瘍及び／または腫瘍微小環境を、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤とインビボで接触させることを含む。ある特定の実施形態では、腫瘍及び／または腫瘍微小環境とＩＬＴ３結合剤の接触は、動物モデルにおいて行われる。例えば、試験薬剤は、腫瘍を有するマウスに投与され得る。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、マウスにおける免疫細胞の活性を増大、促進、及び／または増強する。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、腫瘍の成長を阻害する。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、腫瘍を退行させる。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、動物への腫瘍細胞の導入と同時にまたはその直後に、腫瘍の成長を防止するために投与される（「予防モデル」）。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、腫瘍が特定のサイズに成長した後、または「定着」した後に、治療のために投与される（「治療モデル」）。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、ヒトＩＬＴ３を発現するトランスジェニック動物（例えば、トランスジェニックマウス）に投与され、該トランスジェニック動物は、ヒト細胞に由来する腫瘍を有する。
いくつかの実施形態では、腫瘍成長を阻害する方法は、対象に対して、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）の治療有効量を投与することを含む。ある特定の実施形態では、該対象は、ヒトである。いくつかの実施形態では、対象における腫瘍または腫瘍細胞に対する免疫反応を増大または増強する方法は、該対象に対して、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤の治療有効量を投与することを含む。いくつかの実施形態では、対象における腫瘍または腫瘍細胞に対する持続的または長期にわたる免疫反応を活性化または増強する方法は、該対象に対して、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤の治療有効量を投与することを含む。いくつかの実施形態では、対象における腫瘍再発または腫瘍再成長を阻害する方法は、該対象に対して、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤の治療有効量を投与することを含む。いくつかの実施形態では、対象における腫瘍再発または腫瘍再成長を阻害する持続的または長期にわたる免疫を誘導する方法は、該対象に対して、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤の治療有効量を投与することを含む。本明細書に記載の方法のいくつかの実施形態では、該腫瘍は、固形腫瘍である。いくつかの実施形態では、該腫瘍は、膵臓腫瘍、***腫瘍、肺腫瘍、頭頸部腫瘍、結腸直腸腫瘍、前立腺腫瘍、皮膚腫瘍、メラノーマ腫瘍、胃腫瘍（ｓｔｏｍａｃｈ ｔｕｍｏｒ）、胃腫瘍（ｇａｓｔｒｉｃ ｔｕｍｏｒ）、腸腫瘍、卵巣腫瘍、頸部腫瘍、子宮腫瘍、子宮内膜腫瘍、膀胱腫瘍、脳腫瘍、食道腫瘍、肝臓腫瘍、腎臓腫瘍、または精巣腫瘍である。いくつかの実施形態では、該腫瘍は、膵臓腫瘍である。いくつかの実施形態では、該腫瘍は、卵巣腫瘍である。いくつかの実施形態では、該腫瘍は、***腫瘍である。いくつかの実施形態では、該腫瘍は、子宮腫瘍である。ある特定の実施形態では、該対象は、腫瘍を有するか、または該対象は、腫瘍が少なくとも部分的に除去されている。
いくつかの実施形態では、本開示は、腫瘍または腫瘍細胞の成長を阻害するための薬剤の製造または調製における本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤の使用を提供する。いくつかの実施形態では、該腫瘍の成長を阻害する方法は、対象に対して、治療有効量の抗体３Ａ３、抗体５Ａ７、抗体１２Ａ１２、抗体１６Ｃ５、抗体４５Ｇ１０、抗体４８Ａ６、もしくは抗体５３Ｆ１０、またはそれらのヒト化型を投与することを含む。いくつかの実施形態では、該腫瘍の成長を阻害する方法は、対象に対して、治療有効量の抗体Ｈｚ５Ａ７．ｖ５を投与することを含む。いくつかの実施形態では、該腫瘍の成長を阻害する方法は、対象に対して、治療有効量の抗体Ｈｚ４８Ａ６を投与することを含む。いくつかの実施形態では、該腫瘍の成長を阻害する方法は、対象に対して、治療有効量の抗体Ｈｚ４５Ｇ１０を投与することを含む。
本開示は、がんを治療する方法を提供する。いくつかの実施形態では、がんを治療する方法は、対象に対して、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤の治療有効量を投与することを含む。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、ＩＬＴ３に結合し、がんの成長を阻害または低減する。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、ヒトのＩＬＴ３発現細胞に結合し、がんに対する免疫反応を増強し、該がんの成長を阻害または低減する。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、ヒトのＩＬＴ３発現細胞に結合し、ｔｏｌＤＣを再活性化し、がんに対する免疫反応を増強し、該がんの成長を阻害または低減する。ある特定の実施形態では、該対象は、ヒトである。ある特定の実施形態では、該対象は、がん性腫瘍を有する。ある特定の実施形態では、該対象は、腫瘍が少なくとも部分的に除去されている。
いくつかの実施形態では、本開示は、がんの治療のための薬剤の製造または調製における本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤の使用を提供する。
本明細書に記載の方法のいくつかの実施形態では、該がんは、膵臓癌、乳癌、肺癌、頭頸部癌、結腸直腸癌、前立腺癌、皮膚癌、メラノーマ、胃癌（ｓｔｏｍａｃｈ ｃａｎｃｅｒ）、胃癌（ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｎｃｅｒ）、腸癌、卵巣癌、子宮頸癌、子宮癌、子宮内膜癌、膀胱癌、脳癌、食道癌、肝臓癌、腎臓癌、または精巣癌である。いくつかの実施形態では、該がんは、肉腫である。いくつかの実施形態では、該がんは、ＩＬＴ３を発現する。
いくつかの実施形態では、該がんは、血液癌である。いくつかの実施形態では、該がんは、骨髄性白血病である。いくつかの実施形態では、該骨髄性のがんは、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）である。いくつかの実施形態では、該骨髄性のがんは、慢性骨髄性白血病である。いくつかの実施形態では、該がんは、ＩＬＴ３を発現するある特定のタイプのＢ細胞白血病またはリンパ腫である。いくつかの実施形態では、該がんは、骨髄異形成症候群である。骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）は、骨髄の未熟な血球が成熟しないため、健康な血球にならないがんのグループである。いくつかの実施形態では、骨髄異形成症候群は、ＡＭＬに発展する。
いくつかの実施形態では、対象におけるがんの治療方法は、該対象に対して、治療有効量の抗体３Ａ３、抗体５Ａ７、抗体１２Ａ１２、抗体１６Ｃ５、抗体４５Ｇ１０、抗体４８Ａ６、もしくは抗体５３Ｆ１０、またはそれらのヒト化型を投与することを含む。いくつかの実施形態では、対象におけるがんの治療方法は、該対象に対して、治療有効量の抗体Ｈｚ５Ａ７．ｖ５を投与することを含む。いくつかの実施形態では、対象におけるがんの治療方法は、該対象に対して、治療有効量の抗体Ｈｚ４８Ａ６を投与することを含む。いくつかの実施形態では、対象におけるがんの治療方法は、該対象に対して、治療有効量の抗体Ｈｚ４５Ｇ１０を投与することを含む。
いくつかの実施形態では、本開示は、腫瘍微小環境で骨髄細胞を活性化する方法を提供する。いくつかの実施形態では、腫瘍を有する対象において、腫瘍微小環境で骨髄細胞を活性化する方法は、該対象に対して、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤の治療有効量を投与することを含む。いくつかの実施形態では、該骨髄細胞は、初代樹状細胞またはｔｏｌＤＣである。いくつかの実施形態では、該骨髄細胞は、単球である。いくつかの実施形態では、該骨髄細胞は、マクロファージである。いくつかの実施形態では、該骨髄細胞は、ＡＰＣである。いくつかの実施形態では、本開示は、対象におけるｔｏｌＤＣを再活性化する方法を提供し、該方法は、該対象に対して、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤の治療有効量を投与することを含む。いくつかの実施形態では、該ｔｏｌＤＣは、腫瘍微小環境に見出される。
本明細書に記載の方法のいくつかの実施形態では、該ＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）は、抗体５Ａ７の重鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３ならびに軽鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３を含む。本明細書に記載の方法のいくつかの実施形態では、該ＩＬＴ３結合剤は、抗体Ｈｚ５Ａ７．ｖ５の重鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３ならびに軽鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３を含む。
本明細書に記載の方法のいくつかの実施形態では、該抗ＩＬＴ３抗体は、（ａ）アミノ酸配列ＧＦＴＦＳＳＹＧＭＳ（配列番号２７）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＴＩＳＧＧＧＳＹＴＮＹＰＤＳＶＫＧ（配列番号２８）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＲＥＷＲＭＴＬＹＡＭＤＹ（配列番号２９）またはＲＥＷＲＹＴＬＹＡＭＤＹ（配列番号１０５）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに（ｂ）アミノ酸配列ＲＡＳＥＳＶＤＳＹＧＮＳＦＭＨ（配列番号３０）またはＲＡＳＥＳＶＥＳＹＧＳＳＦＭＨ（配列番号１０６）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＬＴＳＮＬＥＳ（配列番号３１）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＱＱＮＮＥＤＰＦＴ（配列番号３２）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。本明細書に記載の方法のいくつかの実施形態では、該抗ＩＬＴ３抗体は、（ａ）アミノ酸配列ＧＦＴＦＳＳＹＧＭＳ（配列番号２７）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＴＩＳＧＧＧＳＹＴＮＹＰＤＳＶＫＧ（配列番号２８）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＲＥＷＲＭＴＬＹＡＭＤＹ（配列番号２９）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに（ｂ）アミノ酸配列ＲＡＳＥＳＶＤＳＹＧＮＳＦＭＨ（配列番号３０）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＬＴＳＮＬＥＳ（配列番号３１）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＱＱＮＮＥＤＰＦＴ（配列番号３２）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。本明細書に記載の方法のいくつかの実施形態では、該抗ＩＬＴ３抗体は、（ａ）アミノ酸配列ＧＦＴＦＳＳＹＧＭＳ（配列番号２７）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＴＩＳＧＧＧＳＹＴＮＹＰＤＳＶＫＧ（配列番号２８）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＲＥＷＲＹＴＬＹＡＭＤＹ（配列番号１０５）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに（ｂ）アミノ酸配列ＲＡＳＥＳＶＥＳＹＧＳＳＦＭＨ（配列番号１０６）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＬＴＳＮＬＥＳ（配列番号３１）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＱＱＮＮＥＤＰＦＴ（配列番号３２）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。
本明細書に記載の方法のいくつかの実施形態では、該抗ＩＬＴ３抗体は、（ａ）配列番号１１１の重鎖可変領域及び（ｂ）配列番号１１２の軽鎖可変領域を含む。本明細書に記載の方法のいくつかの実施形態では、該抗ＩＬＴ３抗体は、（ａ）配列番号１２３の重鎖可変領域及び（ｂ）配列番号１２４の軽鎖可変領域を含む。
本明細書に記載の方法のいくつかの実施形態では、該抗ＩＬＴ３抗体は、配列番号１２６の重鎖を含む。本明細書に記載の方法のいくつかの実施形態では、該抗ＩＬＴ３抗体は、配列番号１２８の軽鎖を含む。本明細書に記載の方法のいくつかの実施形態では、該抗ＩＬＴ３抗体は、配列番号１２６の重鎖及び配列番号１２８の軽鎖を含む。本明細書に記載の方法のいくつかの実施形態では、該抗ＩＬＴ３抗体は、５Ａ７のヒト化型である。本明細書に記載の方法のいくつかの実施形態では、該抗ＩＬＴ３抗体は、Ｈｚ５Ａ７．ｖ５である。
本明細書に記載の方法のいくつかの実施形態では、該ＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）は、抗体３Ａ３または３Ａ３のヒト化型の重鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３ならびに軽鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３を含む。
本明細書に記載の方法のいくつかの実施形態では、該抗ＩＬＴ３抗体は、（ａ）アミノ酸配列ＧＦＳＬＴＳＹＧＶＨ（配列番号１１）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＶＩＷＰＧＧＴＩＮＹＮＳＡＬＭＳ（配列番号１２）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＤＫＹＤＧＧＷＦＡＹ（配列番号１３）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに（ｂ）アミノ酸配列ＫＡＳＱＮＶＲＴＡＶＡ（配列番号１４）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＬＡＳＮＲＨＴ（配列番号１５）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＬＱＨＬＮＹＰＬＴ（配列番号１６）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。
本明細書に記載の方法のいくつかの実施形態では、該抗ＩＬＴ３抗体は、配列番号１０９の重鎖可変領域及び配列番号１１０の軽鎖可変領域を含む。本明細書に記載の方法のいくつかの実施形態では、該抗ＩＬＴ３抗体は、配列番号１０９のポリペプチドを含む。本明細書に記載の方法のいくつかの実施形態では、該抗ＩＬＴ３抗体は、配列番号１１０のポリペプチドを含む。本明細書に記載の方法のいくつかの実施形態では、該抗ＩＬＴ３抗体は、配列番号１０９のポリペプチド及び配列番号１１０のポリペプチドを含む。
本明細書に記載の方法のいくつかの実施形態では、該抗ＩＬＴ３抗体は、抗体３Ａ３である。本明細書に記載の方法のいくつかの実施形態では、該抗ＩＬＴ３抗体は、抗体３Ａ３のヒト化型である。本明細書に記載の方法のいくつかの実施形態では、該抗ＩＬＴ３抗体は、抗体３Ａ３のバリアントまたはヒト化３Ａ３のバリアントである。
本明細書に記載の方法のいくつかの実施形態では、該ＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）は、抗体１２Ａ１２または１２Ａ１２のヒト化型の重鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３ならびに軽鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３を含む。
本明細書に記載の方法のいくつかの実施形態では、該抗ＩＬＴ３抗体は、（ａ）アミノ酸配列ＧＹＴＦＴＤＹＮＭＤ（配列番号４３）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＹＩＹＰＮＮＧＧＴＧＹＮＱＫＦＮＳ（配列番号４４）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＳＰＹＹＤＹＶＧＳＹＡＭＤＹ（配列番号４５）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに（ｂ）アミノ酸配列ＴＡＳＳＳＶＳＳＳＹＬＨ（配列番号４６）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＳＴＳＮＬＡＳ（配列番号４７）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＨＱＹＨＲＳＰＲＴ（配列番号４８）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。
本明細書に記載の方法のいくつかの実施形態では、該抗ＩＬＴ３抗体は、配列番号１１３の重鎖可変領域及び配列番号１１４の軽鎖可変領域を含む。本明細書に記載の方法のいくつかの実施形態では、該抗ＩＬＴ３抗体は、配列番号１１３のポリペプチドを含む。本明細書に記載の方法のいくつかの実施形態では、該抗ＩＬＴ３抗体は、配列番号１１４のポリペプチドを含む。本明細書に記載の方法のいくつかの実施形態では、該抗ＩＬＴ３抗体は、配列番号１１３のポリペプチド及び配列番号１１４のポリペプチドを含む。
本明細書に記載の方法のいくつかの実施形態では、該抗ＩＬＴ３抗体は、抗体１２Ａ１２である。本明細書に記載の方法のいくつかの実施形態では、該抗ＩＬＴ３抗体は、抗体１２Ａ１２のヒト化型である。本明細書に記載の方法のいくつかの実施形態では、該抗ＩＬＴ３抗体は、抗体１２Ａ１２のバリアントまたはヒト化１２Ａ１２のバリアントである。
本明細書に記載の方法のいくつかの実施形態では、該ＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）は、抗体１６Ｃ５または１６Ｃ５のヒト化型の重鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３ならびに軽鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３を含む。
本明細書に記載の方法のいくつかの実施形態では、該抗ＩＬＴ３抗体は、（ａ）アミノ酸配列ＧＹＴＦＴＤＹＮＭＤ（配列番号４３）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＹＩＹＰＳＮＧＧＴＧＹＮＱＫＦＫＳ（配列番号５９）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＶＰＹＹＤＹＬＹＹＹＡＭＤＹ（配列番号６０）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに（ｂ）アミノ酸配列ＲＡＳＳＳＶＳＦＭＨ（配列番号６１）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＡＴＳＮＬＡＳ（配列番号６２）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＱＱＷＳＴＮＰＹＭＹＴ（配列番号６３）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。
本明細書に記載の方法のいくつかの実施形態では、該抗ＩＬＴ３抗体は、配列番号１１５の重鎖可変領域及び配列番号１１６の軽鎖可変領域を含む。本明細書に記載の方法のいくつかの実施形態では、該抗ＩＬＴ３抗体は、配列番号１１５のポリペプチドを含む。本明細書に記載の方法のいくつかの実施形態では、該抗ＩＬＴ３抗体は、配列番号１１６のポリペプチドを含む。本明細書に記載の方法のいくつかの実施形態では、該抗ＩＬＴ３抗体は、配列番号１１５のポリペプチド及び配列番号１１６のポリペプチドを含む。
本明細書に記載の方法のいくつかの実施形態では、該抗ＩＬＴ３抗体は、抗体１６Ｃ５である。本明細書に記載の方法のいくつかの実施形態では、該抗ＩＬＴ３抗体は、抗体１６Ｃ５のヒト化型である。本明細書に記載の方法のいくつかの実施形態では、該抗ＩＬＴ３抗体は、抗体１６Ｃ５のバリアントまたはヒト化１６Ｃ５のバリアントである。
本明細書に記載の方法のいくつかの実施形態では、該ＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）は、抗体４５Ｇ１０または４５Ｇ１０のヒト化型の重鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３ならびに軽鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３を含む。
本明細書に記載の方法のいくつかの実施形態では、該抗ＩＬＴ３抗体は、（ａ）アミノ酸配列ＧＦＴＦＳＤＹＧＭＨ（配列番号７１）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＹＩＦＳＧＳＳＴＩＹＹＡＤＴＶＫＧ（配列番号７２）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＡＤＧＲＧＡＭＤＹ（配列番号７３）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに（ｂ）アミノ酸配列ＲＡＳＱＤＩＳＫＦＬＮ（配列番号７４）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＹＴＳＲＬＨＳ（配列番号７５）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＱＱＧＮＴＬＰＷＴ（配列番号７６）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。
本明細書に記載の方法のいくつかの実施形態では、該抗ＩＬＴ３抗体は、配列番号１１７の重鎖可変領域及び配列番号１１８の軽鎖可変領域を含む。本明細書に記載の方法のいくつかの実施形態では、該抗ＩＬＴ３抗体は、配列番号１１７のポリペプチドを含む。本明細書に記載の方法のいくつかの実施形態では、該抗ＩＬＴ３抗体は、配列番号１１８のポリペプチドを含む。本明細書に記載の方法のいくつかの実施形態では、該抗ＩＬＴ３抗体は、配列番号１１７のポリペプチド及び配列番号１１８のポリペプチドを含む。
本明細書に記載の方法のいくつかの実施形態では、該抗ＩＬＴ３抗体は、抗体４５Ｇ１０である。本明細書に記載の方法のいくつかの実施形態では、該抗ＩＬＴ３抗体は、抗体４５Ｇ１０のヒト化型である。本明細書に記載の方法のいくつかの実施形態では、該抗ＩＬＴ３抗体は、抗体４５Ｇ１０のバリアントまたはヒト化４５Ｇ１０のバリアントである。
本明細書に記載の方法のいくつかの実施形態では、該ＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）は、抗体４８Ａ６または４８Ａ６のヒト化型の重鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３ならびに軽鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３を含む。
本明細書に記載の方法のいくつかの実施形態では、該抗ＩＬＴ３抗体は、（ａ）アミノ酸配列ＧＦＴＦＳＳＹＧＭＳ（配列番号２７）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＴＩＳＳＧＧＴＹＴＦＹＰＤＳＶＫＧ（配列番号８７）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＲＧＷＬＬＨＹＹＡＭＤＹ（配列番号８８）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに（ｂ）アミノ酸配列ＲＰＳＥＳＶＤＳＦＧＮＳＦＭＨ（配列番号８９）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＬＳＳＫＬＥＳ（配列番号９０）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＱＱＨＮＥＤＰＦＴ（配列番号９１）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。
本明細書に記載の方法のいくつかの実施形態では、該抗ＩＬＴ３抗体は、配列番号１１９の重鎖可変領域及び配列番号１２０の軽鎖可変領域を含む。本明細書に記載の方法のいくつかの実施形態では、該抗ＩＬＴ３抗体は、配列番号１１９のポリペプチドを含む。本明細書に記載の方法のいくつかの実施形態では、該抗ＩＬＴ３抗体は、配列番号１２０のポリペプチドを含む。本明細書に記載の方法のいくつかの実施形態では、該抗ＩＬＴ３抗体は、配列番号１１９のポリペプチド及び配列番号１２０のポリペプチドを含む。
本明細書に記載の方法のいくつかの実施形態では、該抗ＩＬＴ３抗体は、抗体４８Ａ６である。本明細書に記載の方法のいくつかの実施形態では、該抗ＩＬＴ３抗体は、抗体４８Ａ６のヒト化型である。本明細書に記載の方法のいくつかの実施形態では、該抗ＩＬＴ３抗体は、抗体４８Ａ６のバリアントまたはヒト化４８Ａ６のバリアントである。
本明細書に記載の方法のいくつかの実施形態では、該ＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）は、抗体５３Ｆ１０または５３Ｆ１０のヒト化型の重鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３ならびに軽鎖可変領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３を含む。
本明細書に記載の方法のいくつかの実施形態では、該抗ＩＬＴ３抗体は、（ａ）アミノ酸配列ＧＦＴＦＳＤＹＧＭＨ（配列番号７１）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＹＩＳＴＧＩＩＴＶＹＹＡＤＴＶＫＧ（配列番号９９）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＡＤＧＲＧＡＭＤＹ（配列番号７３）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに（ｂ）アミノ酸配列ＲＡＳＱＤＩＳＮＦＬＮ（配列番号１００）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＹＴＳＲＬＨＳ（配列番号７５）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＱＱＧＮＴＬＰＷＴ（配列番号７６）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む。
本明細書に記載の方法のいくつかの実施形態では、該抗ＩＬＴ３抗体は、配列番号１２１の重鎖可変領域及び配列番号１２２の軽鎖可変領域を含む。本明細書に記載の方法のいくつかの実施形態では、該抗ＩＬＴ３抗体は、配列番号１２１のポリペプチドを含む。本明細書に記載の方法のいくつかの実施形態では、該抗ＩＬＴ３抗体は、配列番号１２２のポリペプチドを含む。本明細書に記載の方法のいくつかの実施形態では、該抗ＩＬＴ３抗体は、配列番号１２１のポリペプチド及び配列番号１２２のポリペプチドを含む。
本明細書に記載の方法のいくつかの実施形態では、該抗ＩＬＴ３抗体は、抗体５３Ｆ１０である。本明細書に記載の方法のいくつかの実施形態では、該抗ＩＬＴ３抗体は、抗体５３Ｆ１０のヒト化型である。本明細書に記載の方法のいくつかの実施形態では、該抗ＩＬＴ３抗体は、抗体５３Ｆ１０のバリアントまたはヒト化５３Ｆ１０のバリアントである。
本明細書に記載の方法のいくつかの実施形態では、方法は、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）を、少なくとも１つのさらなる治療薬または治療的療法と組み合わせて投与することを含む。２種以上の治療薬による治療では、必須ではないが、多くの場合、異なる作用機序で作用する薬剤が使用される。異なる作用機序を有する薬剤を使用する併用療法は、相加効果をもたらす場合もあれば、相乗効果をもたらす場合もある。併用療法は、各薬剤が単剤療法で使用されるより低い用量を可能にする場合があり、それにより、中毒性副作用が低下する、及び／または該薬剤（複数可）の治療指数が増加する場合がある。併用療法は、薬剤に対する耐性が発現する可能性を減少させ得る。
記載の方法のいくつかの実施形態では、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）と少なくとも１つのさらなる治療薬の組み合わせにより、相加的または相乗的効果がもたらされる。いくつかの実施形態では、該併用療法は、該ＩＬＴ３結合剤の治療指数の増加をもたらす。いくつかの実施形態では、該併用療法は、該さらなる治療薬（複数可）の治療指数の増加をもたらす。いくつかの実施形態では、該併用療法は、該ＩＬＴ３結合剤の毒性及び／または副作用の減少をもたらす。いくつかの実施形態では、該併用療法は、該さらなる治療薬（複数可）の毒性及び／または副作用の減少をもたらす。いくつかの実施形態では、併用療法は、免疫反応に影響を与える（例えば、該反応を増強または活性化する）治療薬及び、該腫瘍／がん細胞に影響を与える（例えば、阻害または殺傷する）治療薬を含む。
本明細書に記載の方法のいくつかの実施形態では、併用治療は、１つのさらなる治療薬または２つ以上のさらなる治療薬を含む。
有用なクラスの治療薬としては、抗チューブリン薬、オーリスタチン、ＤＮＡマイナーグルーブバインダー、ＤＮＡ複製阻害剤、アルキル化剤（例えば、白金錯体、例えば、シスプラチン、モノ（白金）、ビス（白金）及び三核白金錯体ならびにカルボプラチン）、アントラサイクリン、抗生物質、葉酸代謝拮抗薬、代謝拮抗薬、化学療法増感剤、デュオカルマイシン、エトポシド、フッ化ピリミジン、イオノフォア、レキシトロプシン、ニトロソウレア、プラチノール、プリン代謝拮抗薬、ピューロマイシン、放射線増感剤、ステロイド、タキサン、トポイソメラーゼ阻害剤、ビンカアルカロイド等が挙げられるがこれらに限定されない。いくつかの実施形態では、該第二の治療薬は、アルキル化剤、代謝拮抗薬、有糸***阻害薬、トポイソメラーゼ阻害剤、または血管新生阻害剤である。
本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤と組み合わせて投与され得る治療薬には、化学療法薬が含まれる。従って、いくつかの実施形態では、該方法または治療は、本開示のＩＬＴ３結合剤を化学療法薬と組み合わせて、または化学療法薬のカクテルと組み合わせて投与することを含む。
本開示に有用な化学療法薬としては、アルキル化剤、例えば、チオテパ及びシクロホスファミド（ＣＹＴＯＸＡＮ）、アルキルスルホネート、例えば、ブスルファン、インプロスルファン及びピポスルファン、アジリジン、例えば、ベンゾドパ、カルボコン、メツレドパ、及びウレドパ、エチレンイミン及びメチルメラミン、例えば、アルトレタミン、トリエチレンメラミン、トリエチレンホスホルアミド、トリエチレンチオホスホルアミド、及びトリメチロールメラミン、ナイトロジェンマスタード、例えば、クロラムブシル、クロルナファジン、コロホスファミド（ｃｈｏｌｏｐｈｏｓｐｈａｍｉｄｅ）、エストラムスチン、イホスファミド、メクロレタミン、メクロレタミンオキシド塩酸塩、メルファラン、ノベムビキン（ｎｏｖｅｍｂｉｃｈｉｎ）、フェネステリン、プレドニムスチン、トロホスファミド、ウラシルマスタード、ニトロソウレア、例えば、カルムスチン、クロロゾトシン、ホテムスチン、ロムスチン、ニムスチン、ラニムスチン、抗生物質、例えば、アクラシノマイシン、アクチノマイシン、アントラマイシン、アザセリン、ブレオマイシン、カクチノマイシン、カリチアマイシン、カラビシン（ｃａｒａｂｉｃｉｎ）、カミノマイシン（ｃａｍｉｎｏｍｙｃｉｎ）、カルジノフィリン、クロモマイシン、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、デトルビシン、６－ジアゾ－５－オキソ－Ｌ－ノルロイシン、ドキソルビシ、エピルビシン、エソルビシン、イダルビシン、マルセロマイシン、マイトマイシン、ミコフェノール酸、ノガラマイシン、オリボマイシン、ペプロマイシン、ポトフィロマイシン（ｐｏｔｆｉｒｏｍｙｃｉｎ）、ピューロマイシン、クエラマイシン、ロドルビシン、ストレプトニグリン、ストレプトゾシン、ツベルシジン、ウベニメクス、ジノスタチン、ゾルビシン、代謝拮抗薬、例えば、メトトレキサート及び５－フルオロウラシル（５－ＦＵ）、葉酸アナログ、例えば、デノプテリン、メトトレキサート、プテロプテリン、トリメトレキサート、プリンアナログ、例えば、フルダラビン、６－メルカプトプリン、チアミプリン、チオグアニン、ピリミジンアナログ、例えば、アンシタビン、アザシチジン、６－アザウリジン、カルモフール、シトシンアラビノシド、ジデオキシウリジン、ドキシフルリジン、エノシタビン、フロクスウリジン、５－ＦＵ、アンドロゲン、例えば、カルステロン、プロピオン酸ドロモスタノロン、エピチオスタノール、メピチオスタン、テストラクトン、抗副腎薬、例えば、アミノグルテチミド、ミトタン、トリロスタン、葉酸補充薬、例えば、フォリン酸、アセグラトン、アルドホスファミドグリコシド、アミノレブリン酸、アムサクリン、ベストラブシル、ビサントレン、エダトラキサート、デフォファミン、デメコルシン、ジアジクオン、エルホルミチン、エリプチニウムアセテート、エトグルシド、硝酸ガリウム、ヒドロキシ尿素、レンチナン、ロニダミン、ミトグアゾン、ミトキサントロン、モピダモール、ニトラクリン、ペントスタチン、フェナメット、ピラルビシン、ポドフィリン酸、２－エチルヒドラジド、プロカルバジン、ＰＳＫ、ラゾキサン、シゾフィラン（ｓｉｚｏｆｕｒａｎ）、スピロゲルマニウム、テヌアゾン酸、トリアジコン、２，２’，２’’－トリクロロトリエチルアミン、ウレタン、ビンデシン、ダカルバジン、マンノムスチン、ミトブロニトール、ミトラクトール、ピポブロマン、ガシトシン、アラビノシド（Ａｒａ－Ｃ）、タキソイド、例えば、パクリタキセル（ＴＡＸＯＬ）及びドセタキセル（ＴＡＸＯＴＥＲＥ）、クロラムブシル、ゲムシタビン、６－チオグアニン、メルカプトプリン、白金アナログ、例えば、シスプラチン及びカルボプラチン、ビンブラスチン、白金、エトポシド（ＶＰ－１６）、イホスファミド、マイトマイシンＣ、ミトキサントロン、ビンクリスチン、ビノレルビン、ナベルビン、ノバントロン、テニポシド、ダウノマイシン、アミノプテリン、イバンドロネート、ＣＰＴ １１、トポイソメラーゼ阻害剤ＲＦＳ ２０００、ジフルオロメチルオルニチン（ＤＭＦＯ）、レチノイン酸、エスペラミシン、カペシタビン（ＸＥＬＯＤＡ）、ならびに上記のいずれかの医薬的に許容される塩、酸または誘導体が挙げられるがこれらに限定されない。
化学療法薬としてはまた、腫瘍に対するホルモン作用を調節または阻害するように作用する抗ホルモン剤、例えば、抗エストロゲン薬、例えば、タモキシフェン、ラロキシフェン、アロマターゼを阻害する４（５）－イミダゾール、４－ヒドロキシタモキシフェン、トリオキシフェン、ケオキシフェン、ＬＹ１１７０１８、オナプリストン、及びトレミフェン（ＦＡＲＥＳＴＯＮ）等、ならびに抗アンドロゲン薬、例えば、フルタミド、ニルタミド、ビカルタミド、ロイプロリド、及びゴセレリン、ならびに上記のいずれかの医薬的に許容される塩、酸または誘導体が挙げられる。
本明細書に記載の方法のある特定の実施形態では、該化学療法薬は、トポイソメラーゼ阻害剤である。トポイソメラーゼ阻害剤は、トポイソメラーゼ酵素（例えば、トポイソメラーゼＩまたはＩＩ）の作用を妨害する化学療法薬である。トポイソメラーゼ阻害剤としては、ドキソルビシンＨＣｌ、クエン酸ダウノルビシン、ミトキサントロンＨＣｌ、アクチノマイシンＤ、エトポシド、トポテカンＨＣｌ、テニポシド（ＶＭ－２６）、及びイリノテカン、ならびにこれらのいずれかの医薬的に許容される塩、酸、または誘導体が挙げられるがこれらに限定されない。いくつかの実施形態では、該さらなる治療薬は、イリノテカンである。
いくつかの実施形態では、該化学療法薬は、代謝拮抗薬である。代謝拮抗薬は、正常な生化学反応に必要な代謝物に類似しているが、細胞の１つ以上の正常な機能、例えば、細胞***を妨害するほど異なった構造を有する化学物質である。代謝拮抗薬としては、ゲムシタビン、フルオロウラシル、カペシタビン、メトトレキサートナトリウム、ラリトレキセド、ペメトレキセド、テガフール、シトシンアラビノシド、チオグアニン、５－アザシチジン、６－メルカプトプリン、アザチオプリン、６－チオグアニン、ペントスタチン、リン酸フルダラビン、及びクラドリビン、ならびにこれらのいずれかの医薬的に許容される塩、酸、または誘導体が挙げられるがこれらに限定されない。ある特定の実施形態では、該さらなる治療薬は、ゲムシタビンである。
本明細書に記載の方法のある特定の実施形態では、該化学療法薬は、有糸***阻害薬であり、チューブリンに結合する薬剤を含むがこれらに限定されない。いくつかの実施形態では、該薬剤は、タキサンである。ある特定の実施形態では、該薬剤は、パクリタキセルもしくはドセタキセル、またはパクリタキセルもしくはドセタキセルの医薬的に許容される塩、酸、もしくは誘導体である。ある特定の実施形態では、該薬剤は、パクリタキセル（ＴＡＸＯＬ）、ドセタキセル（ＴＡＸＯＴＥＲＥ）、アルブミン結合パクリタキセル（ｎａｂ－パクリタキセル、ＡＢＲＡＸＡＮＥ）、ＤＨＡ－パクリタキセル、またはＰＧ－パクリタキセルである。ある特定の代替的な実施形態では、該有糸***阻害薬は、ビンカアルカロイド、例えば、ビンクリスチン、ビンブラスチン、ビノレルビン、もしくはビンデシン、またはそれらの医薬的に許容される塩、酸、もしくは誘導体を含む。いくつかの実施形態では、該有糸***阻害薬は、キネシンＥｇ５の阻害剤またはオーロラＡもしくはＰｌｋｌ等の有糸***キナーゼの阻害剤である。ある特定の実施形態では、該さらなる治療薬は、パクリタキセルである。ある特定の実施形態では、該さらなる治療薬は、ｎａｂ－パクリタキセルである。
本明細書に記載の方法のいくつかの実施形態では、さらなる治療薬は、小分子等の薬剤を含む。例えば、治療は、本開示のＩＬＴ３結合剤と、ＥＧＦＲ、ＨＥＲ２（ＥｒｂＢ２）、及び／またはＶＥＧＦが挙げられるがこれらに限定されない腫瘍関連抗原に対する阻害剤として作用する小分子との併用投与を含み得る。いくつかの実施形態では、本開示のＩＬＴ３結合剤は、ゲフィチニブ（ＩＲＥＳＳＡ）、エルロチニブ（ＴＡＲＣＥＶＡ）、スニチニブ（ＳＵＴＥＮＴ）、ラパタニブ、バンデタニブ（ＺＡＣＴＩＭＡ）、ＡＥＥ７８８、ＣＩ－１０３３、セディラニブ（ＲＥＣＥＮＴＩＮ）、ソラフェニブ（ＮＥＸＡＶＡＲ）、及びパゾパニブ（ＧＷ７８６０３４Ｂ）からなる群から選択されるプロテインキナーゼ阻害剤と組み合わせて投与される。いくつかの実施形態では、さらなる治療薬は、ｍＴＯＲ阻害剤を含む。
本明細書に記載の方法のいくつかの実施形態では、さらなる治療薬は、生体分子、例えば、抗体を含む。例えば、治療は、本開示のＩＬＴ３結合剤と、ＥＧＦＲ、ＨＥＲ２／ＥｒｂＢ２、及び／またはＶＥＧＦに結合する抗体が挙げられるがこれらに限定されない腫瘍関連抗原に対する抗体との併用投与を含み得る。
ある特定の実施形態では、該さらなる治療薬は、血管新生阻害剤である抗体（例えば、抗ＶＥＧＦまたはＶＥＧＦ受容体抗体）である。ある特定の実施形態では、該さらなる治療薬は、ベバシズマブ（ＡＶＡＳＴＩＮ）、ラムシルマブ、トラスツズマブ（ＨＥＲＣＥＰＴＩＮ）、ペルツズマブ（ＯＭＮＩＴＡＲＧ）、パニツムマブ（ＶＥＣＴＩＢＩＸ）、ニモツズマブ、ザルツムマブ、またはセツキシマブ（ＥＲＢＩＴＵＸ）である。
本明細書に記載の方法のいくつかの実施形態では、該さらなる治療薬は、免疫反応を調節する抗体である。いくつかの実施形態では、該さらなる治療薬は、抗ＰＤ－１抗体、抗ＰＤ－Ｌ１抗体、抗ＰＤ－Ｌ２抗体、抗ＣＴＬＡ－４抗体、または抗ＴＩＧＩＴ抗体である。
さらに、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤による治療は、他の生体分子、例えば、１つ以上のサイトカイン（例えば、リンホカイン、インターロイキン、腫瘍壊死因子、及び／または成長因子）との併用治療を含む場合もあれば、腫瘍の外科的切除、がん細胞の除去、または治療を行う医師が必要と見なす任意の他の治療法を伴う場合もある。いくつかの実施形態では、該さらなる治療薬は、免疫療法薬である。
本明細書に記載の方法のいくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、アドレノメデュリン（ＡＭ）、アンジオポエチン（Ａｎｇ）、ＢＭＰ、ＢＤＮＦ、ＥＧＦ、エリスロポエチン（ＥＰＯ）、ＦＧＦ、ＧＤＮＦ、Ｇ－ＣＳＦ、ＧＭ－ＣＳＦ、ＧＤＦ９、ＨＧＦ、ＨＤＧＦ、ＩＧＦ、遊走刺激因子、ミオスタチン（ＧＤＦ－８）、ＮＧＦ、ニューロトロフィン、ＰＤＧＦ、トロンボポエチン、ＴＧＦ－ａ、ＴＧＦ－β、ＴＮＦ－ａ、ＶＥＧＦ、ＰＩＧＦ、ＩＬ－１、ＩＬ－２、ＩＬ－３、ＩＬ－４、ＩＬ－５、ＩＬ－６、ＩＬ－７、ＩＬ－１２、ＩＬ－１５、及びＩＬ－１８からなる群から選択される成長因子と組み合わせられる。
本明細書に記載の方法のいくつかの実施形態では、該さらなる治療薬は、免疫療法薬である。いくつかの実施形態では、該免疫療法薬は、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）、マクロファージコロニー刺激因子（Ｍ－ＣＳＦ）、顆粒球コロニー刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ）、インターロイキン３（ＩＬ－３）、インターロイキン１２（ＩＬ－１２）、インターロイキン１（ＩＬ－１）、インターロイキン２（ＩＬ－２）、Ｂ７－１（ＣＤ８０）、Ｂ７－２（ＣＤ８６）、４－１ＢＢリガンド、抗ＣＤ３抗体、抗ＣＴＬＡ－４抗体、抗ＴＩＧＩＴ抗体、抗ＰＤ－１抗体、抗ＰＤ－Ｌ１抗体、抗ＬＡＧ－３抗体、及び抗ＴＩＭ－３抗体からなる群から選択される。
本明細書に記載の方法のいくつかの実施形態では、免疫療法薬は、ＰＤ－１活性のモジュレーター、ＰＤ－Ｌ１活性のモジュレーター、ＰＤ－Ｌ２活性のモジュレーター、ＣＴＬＡ－４活性のモジュレーター、ＣＤ２８活性のモジュレーター、ＣＤ８０活性のモジュレーター、ＣＤ８６活性のモジュレーター、４－１ＢＢ活性のモジュレーター、ＯＸ４０活性のモジュレーター、ＫＩＲ活性のモジュレーター、Ｔｉｍ－３活性のモジュレーター、ＬＡＧ３活性のモジュレーター、ＣＤ２７活性のモジュレーター、ＣＤ４０活性のモジュレーター、ＧＩＴＲ活性のモジュレーター、ＴＩＧＩＴ活性のモジュレーター、ＣＤ２０活性のモジュレーター、ＣＤ９６活性のモジュレーター、ＩＤＯ１活性のモジュレーター、サイトカイン、ケモカイン、インターフェロン、インターロイキン、リンホカイン、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）ファミリーのメンバー、及び免疫刺激オリゴヌクレオチドからなる群から選択される。
本明細書に記載の方法のいくつかの実施形態では、免疫療法薬は、ＰＤ－１アンタゴニスト、ＰＤ－Ｌ１アンタゴニスト、ＰＤ－Ｌ２アンタゴニスト、ＣＴＬＡ－４アンタゴニスト、ＣＤ８０アンタゴニスト、ＣＤ８６アンタゴニスト、ＫＩＲアンタゴニスト、Ｔｉｍ－３アンタゴニスト、ＬＡＧ３アンタゴニスト、ＴＩＧＩＴアンタゴニスト、ＣＤ２０アンタゴニスト、ＣＤ９６アンタゴニスト、及び／またはＩＤＯ１アンタゴニストからなる群から選択される。
本明細書に記載の方法のいくつかの実施形態では、該ＰＤ－１アンタゴニストは、ＰＤ－１に特異的に結合する抗体である。いくつかの実施形態では、該ＰＤ－１に結合する抗体は、ペムブロリズマブ（ＫＥＹＴＲＵＤＡ、ＭＫ－３４７５）、ピジリズマブ（ＣＴ－０１１）、ニボルマブ（ＯＰＤＩＶＯ、ＢＭＳ－９３６５５８、ＭＤＸ－１１０６）、ＭＥＤＩ０６８０（ＡＭＰ－５１４）、ＲＥＧＮ２８１０、ＢＧＢ－Ａ３１７、ＰＤＲ－００１、またはＳＴＩ－Ａ１１１０である。いくつかの実施形態では、該ＰＤ－１に結合する抗体は、ＰＣＴ公開第ＷＯ２０１４／１７９６６４号に記載されており、例えば、ＡＰＥ２０５８、ＡＰＥ１９２２、ＡＰＥ１９２３、ＡＰＥ１９２４、ＡＰＥ１９５０、もしくはＡＰＥ１９６３として識別される抗体、またはこれらの抗体のいずれかのＣＤＲ領域を含む抗体である。他の実施形態では、該ＰＤ－１アンタゴニストは、ＰＤ－Ｌ２、例えば、ＡＭＰ－２２４を含む融合タンパク質である。他の実施形態では、該ＰＤ－１アンタゴニストは、ペプチド阻害剤、例えば、ＡＵ Ｐ－１２である。
いくつかの実施形態では、該ＰＤ－Ｌ１アンタゴニストは、ＰＤ－Ｌ１に特異的に結合する抗体である。いくつかの実施形態では、該ＰＤ－Ｌ１に結合する抗体は、アテゾリズマブ（ＴＥＣＥＮＴＲＩＱ、ＲＧ７４４６、ＭＰＤＬ３２８０Ａ）、ＭＥＤＩ４７３６、ＢＭＳ－９３６５５９（ＭＤＸ－１１０５）、アベルマブ（ＢＡＶＥＮＣＩＯ、ＭＳＢ００１０７１８Ｃ）、デュルバルマブ（ＩＭＦＩＮＺＩ）、ＫＤ０３３、ＫＤ０３３の抗体部分、またはＳＴＩ－Ａ１０１４である。いくつかの実施形態では、該ＰＤ－Ｌ１に結合する抗体は、ＰＣＴ公開第ＷＯ２０１４／０５５８９７号に記載されており、例えば、Ａｂ－１４、Ａｂ－１６、Ａｂ－３０、Ａｂ－３１、Ａｂ－４２、Ａｂ－５０、Ａｂ－５２、もしくはＡｂ－５５、またはこれらの抗体のいずれかのＣＤＲ領域を含む抗体である。
いくつかの実施形態では、該ＣＴＬＡ－４アンタゴニストは、ＣＴＬＡ－４に特異的に結合する抗体である。いくつかの実施形態では、該ＣＴＬＡ－４に結合する抗体は、イピリムマブ（ＹＥＲＶＯＹ）またはトレメリムマブ（ＣＰ－６７５，２０６）である。いくつかの実施形態では、該ＣＴＬＡ－４アンタゴニストは、ＣＴＬＡ－４融合タンパク質、例えば、ＫＡＨＲ－１０２である。
いくつかの実施形態では、該ＬＡＧ３アンタゴニストは、ＬＡＧ３に特異的に結合する抗体である。いくつかの実施形態では、該ＬＡＧ３に結合する抗体は、ＩＭＰ７０１、ＩＭＰ７３１、ＢＭＳ－９８６０１６、ＬＡＧ５２５、及びＧＳＫ２８３１７８１である。いくつかの実施形態では、該ＬＡＧ３アンタゴニストは、可溶性ＬＡＧ３受容体、例えば、ＩＭＰ３２１を含む。
いくつかの実施形態では、該ＫＩＲアンタゴニストは、ＫＩＲに特異的に結合する抗体である。いくつかの実施形態では、該ＫＩＲに結合する抗体は、リリルマブである。
いくつかの実施形態では、免疫療法薬は、ＣＤ２８アゴニスト、４－１ＢＢアゴニスト、ＯＸ４０アゴニスト、ＣＤ２７アゴニスト、ＣＤ８０アゴニスト、ＣＤ８６アゴニスト、ＣＤ４０アゴニスト、及びＧＩＴＲアゴニストからなる群から選択される。
いくつかの実施形態では、該ＯＸ４０アゴニストは、ＯＸ４０リガンド、またはそのＯＸ４０結合部分を含む。例えば、該ＯＸ４０アゴニストは、ＭＥＤＩ６３８３であり得る。いくつかの実施形態では、該ＯＸ４０アゴニストは、ＯＸ４０に特異的に結合する抗体である。いくつかの実施形態では、該ＯＸ４０に結合する抗体は、ＭＥＤＩ６４６９、ＭＥＤＩ０５６２、またはＭＯＸＲ０９１６（ＲＧ７８８８）である。いくつかの実施形態では、該ＯＸ４０アゴニストは、ＯＸ４０リガンドを発現することができるベクター（例えば、発現ベクターまたはウイルス、例えば、アデノウイルス）である。いくつかの実施形態では、該ＯＸ４０発現ベクターは、デルタ－２４－ＲＧＤＯＸまたはＤＮＸ２４０１である。
いくつかの実施形態では、該４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）アゴニストは、結合分子、例えば、アンチカリンである。いくつかの実施形態では、該アンチカリンは、ＰＲＳ－３４３である。いくつかの実施形態では、該４－１ＢＢアゴニストは、４－１ＢＢに特異的に結合する抗体である。いくつかの実施形態では、４－１ＢＢに結合する抗体は、ＰＦ－２５６６（ＰＦ－０５０８２５６６）またはウレルマブ（ＢＭＳ－６６３５１３）である。
いくつかの実施形態では、該ＣＤ２７アゴニストは、ＣＤ２７に特異的に結合する抗体である。いくつかの実施形態では、該ＣＤ２７に結合する抗体は、バルリルマブ（ＣＤＸ－１１２７）である。
いくつかの実施形態では、該ＧＩＴＲアゴニストは、ＧＩＴＲリガンドまたはそのＧＩＴＲ結合部分を含む。いくつかの実施形態では、該ＧＩＴＲアゴニストは、ＧＩＴＲに特異的に結合する抗体である。いくつかの実施形態では、ＧＩＴＲに結合する抗体は、ＴＲＸ５１８、ＭＫ－４１６６、またはＩＮＢＲＸ－１１０である。
いくつかの実施形態では、免疫療法薬としては、サイトカイン、例えば、ケモカイン、インターフェロン、インターロイキン、リンホカイン、及び腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）ファミリーのメンバーが挙げられるがこれらに限定されない。いくつかの実施形態では、免疫療法薬としては、免疫刺激オリゴヌクレオチド、例えば、ＣｐＧジヌクレオチドが挙げられる。
いくつかの実施形態では、免疫療法薬としては、抗ＰＤ－１抗体、抗ＰＤ－Ｌ１抗体、抗ＰＤ－Ｌ２抗体、抗ＣＴＬＡ－４抗体、抗ＣＤ２８抗体、抗ＣＤ８０抗体、抗ＣＤ８６抗体、抗４－１ＢＢ抗体、抗ＯＸ４０抗体、抗ＫＩＲ抗体、抗Ｔｉｍ－３抗体、抗ＬＡＧ３抗体、抗ＣＤ２７抗体、抗ＣＤ４０抗体、抗ＧＩＴＲ抗体、抗ＴＩＧＩＴ抗体、抗ＣＤ２０抗体、抗ＣＤ９６抗体、または抗ＩＤＯ１抗体が挙げられるがこれらに限定されない。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤による治療は、該さらなる治療薬の投与前、投与と同時、または投与後に行われ得る。いくつかの実施形態では、併用投与としては、単一の医薬製剤での、もしくは別々の製剤を使用した同時投与、またはいずれの順序もよいが通常はすべての活性薬剤がそれらの生物活性を発揮することができる期間内での連続投与が挙げられる。いくつかの実施形態では、薬剤の調製及び／またはさらなる治療薬の投薬スケジュールは、製造業者の指示に従うか、または当業者によって経験的に決定される。
本明細書に記載の方法のいくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）は、併用療法の一部として対象（例えば、ヒト）に投与される。
本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）と少なくとも１つのさらなる治療薬との組み合わせは、任意の順序でまたは同時に投与され得ることが理解されよう。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、以前に治療薬による治療を受けたことがある対象に投与される。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤及び第二の治療薬は、実質的に同時にまたは同時に投与される。例えば、対象は、第二の治療薬（例えば、化学療法薬）による一連の治療を受けている間に、ＩＬＴ３結合剤を投与され得る。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、第二の治療薬による治療から１年以内に投与される。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、第二の治療薬による任意の治療から１０、８、６、４、または２か月以内に投与される。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、第二の治療薬による任意の治療から４、３、２、または１週間以内に投与される。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤は、第二の治療薬による任意の治療から５、４、３、２、または１日以内に投与される。さらに、２つ（またはそれ以上）の薬剤または治療が、数時間または数分以内に（すなわち、実質的に同時に）対象に投与され得ることが理解されよう。
疾患の治療に関して、本開示のＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）の適切な投与量は、治療される障害または疾患、該障害または疾患の重症度及び経過、該障害または疾患の反応性、該薬剤が治療目的で投与されるか予防目的で投与されるか、薬歴、患者の病歴等によって決まる。ＩＬＴ３結合剤は、１度だけ投与される、数日から数ヶ月続く一連の治療にわたって投与される、または治癒がもたらされるまで、もしくは病態の縮小が達成されるまで投与される場合がある。
本開示は、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤を含む組成物を提供する。本開示はまた、本明細書に記載のＩＬＴ３結合剤及び医薬的に許容される媒体を含む医薬組成物を提供する。
製剤は、保管及び使用のため、精製された本開示の抗体または薬剤を、医薬的に許容される媒体（例えば、担体または賦形剤）と混合することによって調製される。当業者には、一般に、医薬的に許容される担体、賦形剤、及び／または安定剤が、製剤または医薬組成物の不活性成分であると見なされる。
適切な医薬的に許容される媒体としては、非毒性緩衝剤、例えば、リン酸、クエン酸、及び他の有機酸、塩、例えば、塩化ナトリウム、アスコルビン酸及びメチオニンを含めた抗酸化剤、保存剤、例えば、塩化オクタデシルジメチルベンジルアンモニウム、塩化ヘキサメトニウム、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、フェノール、ブチルまたはベンジルアルコール、アルキルパラベン、例えば、メチルまたはプロピルパラベン、カテコール、レゾルシノール、シクロヘキサノール、３－ペンタノール、及びｍ－クレゾール、低分子量ポリペプチド（例えば、約１０アミノ酸残基未満）、タンパク質、例えば、血清アルブミン、ゼラチン、または免役グロブリン、親水性ポリマー、例えば、ポリビニルピロリドン、アミノ酸、例えば、グリシン、グルタミン、アスパラギン、ヒスチジン、アルギニン、またはリジン、炭水化物、例えば、単糖、二糖、グルコース、マンノース、またはデキストリン、キレート剤、例えば、ＥＤＴＡ、糖、例えば、スクロース、マンニトール、トレハロースまたはソルビトール、塩形成対イオン、例えば、ナトリウム、金属錯体、例えば、Ｚｎ－タンパク質複合体、及び非イオン性界面活性剤、例えば、ＴＷＥＥＮまたはポリエチレングリコールが挙げられるがこれらに限定されない。（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ，２２ｎｄ Ｅｄｉｔｉｏｎ，２０１２，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｐｒｅｓｓ，Ｌｏｎｄｏｎ．）。いくつかの実施形態では、該製剤は、水溶液の形態である。いくつかの実施形態では、該製剤は、凍結乾燥形態または別の乾燥形態で保存される。
本開示の結合剤は、標的細胞／組織への送達に適切な任意の形態に製剤化され得る。いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）は、リポソーム、マイクロ粒子、マイクロカプセル、アルブミン小球体、マイクロエマルジョン、ナノ粒子、ナノカプセル、またはマクロエマルジョンとして製剤化され得る。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）は、リポソームで製剤化される。リポソームの生成方法は当業者に既知である。例えば、いくつかのリポソームは、ホスファチジルコリン、コレステロール、及びＰＥＧ誘導体化ホスファチジルエタノールアミン（ＰＥＧ－ＰＥ）を含む脂質組成物を用いた逆相蒸発法により生成され得る。
いくつかの実施形態では、ＩＬＴ３結合剤（例えば、抗体）は、持続放出製剤として製剤化される。適切な持続放出製剤の例としては、薬剤を含む固体疎水性ポリマーの半透性マトリックスが挙げられ、これらのマトリックスは、成形物品（例えば、フィルムまたはマイクロカプセル）の形態である。持続放出マトリックスとしては、ポリエステル、ヒドロゲル、例えば、ポリ（２－ヒドロキシエチル－メタクリレート）またはポリ（ビニルアルコール）、ポリラクチド、Ｌ－グルタミン酸と７エチル－Ｌ－グルタメートのコポリマー、非分解性エチレン－酢酸ビニル、分解性乳酸－グリコール酸コポリマー、例えば、ＬＵＰＲＯＮ ＤＥＰＯＴ（商標）（乳酸－グリコール酸コポリマー及び酢酸ロイプロリドから構成される注射可能な小球体）、イソ酪酸酢酸スクロース、及びポリ－Ｄ－（－）－３－ヒドロキシ酪酸が挙げられるがこれらに限定されない。
本開示の医薬組成物または製剤は、局所または全身治療のいずれかのための様々な方法で投与され得る。投与は、表皮もしくは経皮パッチ、軟膏、ローション、クリーム、ゲル、ドロップ、坐薬、スプレー、液体及び粉末によって局所的に、ネブライザーによるもの、気管内、及び鼻腔内を含めた粉末もしくはエアロゾルの吸入もしくは吹送によって肺内に、経口で、または、静脈内、動脈内、腫瘍内、皮下、腹腔内、筋肉内（例えば、注射または注入）、もしくは頭蓋内（例えば、髄腔内または脳室内）を含めた非経口で行われ得る。
実施例１
抗体の生成
抗ＩＬＴ３抗体を、免疫原としてヒトＩＬＴ３の細胞外ドメイン（ｈｕＩＬＴ３－ＥＣＤ）及び／またはｃｙｎｏ ＩＬＴ３の細胞外ドメイン（ｃｙｎｏＩＬＴ３－ＥＣＤ）を使用して生成した。ヒトＩＬＴ３の細胞外領域（配列番号１のａａ２２～２５９）またはｃｙｎｏ ＩＬＴ３の細胞外領域（配列番号６のａａ２２～２５９）を含む組み換え構築物を生成し、哺乳類細胞で発現させた。マウスをｈｕＩＬＴ３－ＥＣＤ及び／またはｃｙｎｏＩＬＴ３－ＥＣＤタンパク質で免疫化し、高力価を誘導するために数回ブーストした。免疫化マウスから採血し、抗体価をＥＬＩＳＡ及びＦＡＣＳによって測定した。リンパ球の単細胞懸濁液を、適切な高さの抗体化を有することが特定された免疫化マウスの脾臓及びリンパ節から得た。リンパ球を、標準的な方法（例えば、電気融合）によってマウス骨髄腫細胞と融合させた。細胞を、ＨＡＴ含有選択培地中９６ウェルプレートに分散させた。
実施例２
抗体のスクリーニング
ＥＬＩＳＡアッセイを使用して、ヒトＩＬＴ３及びヒトＬＩＬＲＡ１、２、４～６に対して抗体をスクリーニングした。ヒトＩＬＴ３に結合するが、ヒトＬＩＬＲＡ１，２，４～６タンパク質には結合しない抗体を選択した。これらの抗体を、ＨＥＫ－２９３Ｔ細胞で発現したヒトＩＬＴ３及びｃｙｎｏ ＩＬＴ３への結合についてＦＡＣＳで再スクリーニングした。ヒト及びｃｙｎｏ ＩＬＴ３の両方に結合する抗体を選択した。この抗体のサブセットを、ヒトＬＩＬＲＢ１～５（それぞれ、ＩＬＴ２、ＩＬＴ４、ＩＬＴ５、ＩＬＴ３、及びＬＩＬＲＢ５）、ｃｙｎｏ ＬＩＬＲＢ５、及びヒトＬＩＬＲＡ１、２、４～６に対してＦＡＣＳでスクリーニングした。ＦＡＣＳスクリーニングでは、各抗体をヒトＩＬＴ３、ｃｙｎｏ ＩＬＴ３、ＬＩＬＲＡタンパク質の１つ、またはＬＩＬＲＢタンパク質の１つを発現する細胞と４℃で３０分間インキュベートした。洗浄後、それらの細胞を標識抗マウスＦｃ抗体とともに４℃で３０分間インキュベートした。洗浄後、細胞をフローサイトメーターで分析した。代表的な抗体の結果を図１Ａ～１Ｆ及び２Ａ～２Ｅに示す。抗体を、ヒトＩＬＴ３、ｃｙｎｏ ＩＬＴ３への結合、他のＬＩＬＲＢタンパク質への結合がないか制限されている、及びＬＩＬＲＡタンパク質への結合がないか制限されているという基準で選択した。例えば、抗体１１Ａ１は、ヒトＬＩＬＲＢ２、ＬＩＬＲＡ１、ＬＩＬＲＡ２、ＬＩＬＲＡ４及びＬＩＬＲＡ５に結合することが観察されたため、さらなる試験には選択しなかった。
実施例３
抗ヒトＩＬＴ３抗体の結合特性
ヒトＩＬＴ３及びｃｙｎｏ ＩＬＴ３に対する抗ＩＬＴ３抗体の結合親和性を、Ｂｉａｃｏｒｅシステム（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ ＬｉｆｅＳｃｉｅｎｃｅｓ）を使用して測定した。簡潔には、抗Ｆｃ抗体（Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ）を、アミンカップリング試薬（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ ＬｉｆｅＳｃｉｅｎｃｅｓ）を使用してＣＭ５チップの４つのフローセルすべてに固定化した。抗体を、フローセル１を参照として使用して、フローセル２、３、及び４にキャプチャした。３．３～１０ｎＭに及ぶ濃度のヒトまたはｃｙｎｏ ＩＬＴ３－ＥＣＤを、流速５０μＬ／分で３７℃にて注入した。反応速度データを経時的に収集し、同時グローバルフィット方程式を使用してフィットを行い、各抗体の親和性定数（ＫＤ値）を得た。
結合データを表９に示す。
Figure 2023507110000010
ヒトＩＬＴ３の細胞外ドメイン上での抗ＩＬＴ３抗体の結合部位も評価した（データは示さず）。３Ａ３は、ＩＬＴ３のＤ２ドメイン内またはＤ１ドメインとＤ２ドメインとの間の接合部内のコンフォメーションエピトープに結合する。１６Ｃ５は、ＩＬＴ３のＤ１ドメイン内のコンフォメーションエピトープに結合する。１２Ａ１２は、ＩＬＴ３のＤ２ドメイン内またはＤ１ドメインとＤ２ドメインとの間の接合部内のコンフォメーションエピトープに結合する。５Ａ７は、ＩＬＴ３のＤ２ドメイン内またはＤ１ドメインとＤ２ドメインとの間の接合部内のコンフォメーションエピトープに結合する。４８Ａ６は、ＩＬＴ３のＤ２ドメイン内またはＤ１ドメインとＤ２ドメインとの間の接合部内のコンフォメーションエピトープに結合する。４５Ｇ１０は、ＩＬＴ３のＤ２ドメイン内またはＤ１ドメインとＤ２ドメインとの間の接合部内のコンフォメーションエピトープに結合する。５３Ｆ１０は、ＩＬＴ３のＤ２ドメイン内またはＤ１ドメインとＤ２ドメインとの間の接合部内のコンフォメーションエピトープに結合する。
ヒトＩＬＴ３の細胞外ドメイン上の抗ＩＬＴ３抗体間の競合的結合も行った。表１０は、いくつかの抗ＩＬＴ３抗体がＩＬＴ３の重複または部分的に重複するエピトープに結合し、いくつかの抗ＩＬＴ３抗体がＩＬＴ３の異なるエピトープに結合することを示している。「ｙｅｓ」は、ＩＬＴ３の細胞外ドメインへの２抗体間での競合的結合を示す。「ｐａｒｔｉａｌ」は、ＩＬＴ３の細胞外ドメインへの２抗体間での部分的な競合的結合を示す。「Ｎｏ」は、ＩＬＴ３の細胞外ドメインへの２抗体間での競合的結合がないことを示す。「ＮＤ」は、利用可能なデータがないことを示す。

Figure 2023507110000011
実施例４
抗ＩＬＴ３抗体の配列分析
代表的な抗体３Ａ３、５Ａ７、１２Ａ１２、１６Ｃ５、４５Ｇ１０、４８Ａ６、及び５３Ｆ１０を配列決定した。その重鎖可変領域及び軽鎖可変領域のアミノ酸配列を本明細書に開示し、表１１にまとめる。
Figure 2023507110000012
個々の抗体の重鎖及び軽鎖可変領域ＣＤＲは、表１～７に及び配列番号１１～１０４として開示されている。
実施例５
ＩＬＴ３リガンドのスクリーニング
ＩＬＴ３のリガンド（複数可）を特定する過程で、約１００細胞株をスクリーニングした。免疫グロブリンＦｃ領域に融合したＩＬＴ３細胞外ドメイン（配列番号１のアミノ酸２２～２５９）を含む構築物を生成した（ＩＬＴ３ＥＣＤ－Ｆｃ）。このＩＬＴ３ＥＣＤ－Ｆｃ構築物を使用して、細胞株への結合を評価した。以前の社内試験では、ＣＮＴＦＲがＩＬＴ３の結合パートナーであることが示唆され、ＬＸ－２を以前のこの観察を追跡調査するために細胞株のパネルに含めた。ＬＸ－２は、重要な生物学的特徴を保持する接着性ヒト肝星細胞株である。以下は、例示的な細胞株としてＬＸ－２を使用するスクリーニングアッセイの簡潔な説明である。ＬＸ－２細胞を、１０％ＦＢＳ及び１％ペニシリン／ストレプトマイシンを含むＤＭＥＭ中、３８４ウェルのポリ－Ｄ－リジンコーティングプレート（Ｇｒｅｎｉｅｒ）に播種した。ＴＧＦ－β（Ｐｅｐｒｏｔｅｃｈ）をウェルの一部に１０ｎｇ／ｍＬ加え、ＬＸ－２細胞を活性化した。２日後、細胞を、Ｍｇ２＋及びＣａ２＋を含むハンクス緩衝生理食塩水（ＨＢＳＳ）で３回洗浄し、ウェルあたり約１０μＬの緩衝液を残した。次に、細胞（未処理及びＴＧＦ－β処理）をＤＭＥＭ中、ＩＬＴ３ＥＣＤ－Ｆｃ（１０μｇ／ｍＬの濃度でウェルあたり１０μＬ）とともに室温で３０分間インキュベートした。ＡｌｅｘａＦｌｕｏｒ ６４７コンジュゲートヤギ抗ヒトＦｃ抗体（１：５００希釈、Ｊａｃｋｓｏｎ ＩｍｍｕｎｏＲｅｓｅａｒｃｈ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）及びＨｏｅｃｈｓｔ染色剤（２．５μＭ、ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）をウェルに加えた。３０分間のインキュベーション後、細胞を洗浄し、３．７％ホルマリンで固定し、その後再度洗浄し、ＣｅｌｌＩｎｓｉｇｈｔ装置（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）で１０倍の画像を取得した。
これらの結果は、ＩＬＴ３ＥＣＤ－Ｆｃが活性化されたＬＸ－２細胞に結合し、基本／未処理のＬＸ－２細胞には結合しなかったことを示した。細胞の生存率は、基本細胞及び活性化細胞では同等であった。これらの結果は、活性化されたＬＸ－２細胞がＩＬＴ３のリガンドを発現していることを示唆した。
実施例６
ＬＸ－２細胞との相互作用によるレポーター細胞の活性化
ＩＬＴ３のＬＸ－２細胞への結合が機能的相互作用であるかどうかを調べるため、ＬＸ－２細胞を、安定したレポーター系及び目的の細胞表面受容体を発現する細胞（「レポーター細胞」）と共培養した。このキメラ受容体系では、目的の受容体の細胞外ドメイン、例えば、ＩＬＴ３が、アダプタータンパク質ＤＡＰ１２と会合するＰＩＬＲβの膜貫通／細胞内ドメインと融合される。このキメラ受容体がリガンドに結合することによって活性化されると、ＤＡＰ１２はリン酸化され、ＧＦＰ発現を駆動するＮＦＡＴ応答性プロモーターを活性化する（例えば、Ｄｅｎｇ ｅｔ ａｌ．，２０１４，Ｂｌｏｏｄ，１２４：９２４－９３５参照）。ＬＸ－２細胞のバルク培養物を、基本培地（上記のＤＭＥＭ）または活性化培地（上記のＤＭＥＭ＋ＴＧＦ－β）で３日間培養した。処理及び未処理のＬＸ－２細胞を回収し、洗浄した。２ｘ１０５個のＬＸ－２細胞を、（ｉ）受容体を含まない、（ｉｉ）Ｂ７－Ｈ４細胞外ドメインを含む、または（ｉｉｉ）ＩＬＴ３細胞外ドメインを含む４ｘ１０５個のレポーター細胞と共培養した。細胞を、１０％ＦＢＳを含むＲＰＭＩ１６４０中、３７℃で終夜インキュベートした。これらのレポーター細胞は、分析時にＬＸ－２細胞と区別するために、ＣｅｌｌＴｒａｃｋｅｒ Ｄｅｅｐ Ｒｅｄ（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ）で予め染色した。翌日、レポーター細胞をＦＡＣＳによってＧＦＰ発現についてアッセイした。
図３に示すように、ＧＦＰの発現は、ＩＬＴ３がレポーター細胞の表面に、活性化ＬＸ－２細胞の存在下でのみ発現した場合にのみ誘導された。これらの結果は、ＩＬＴ３が活性化ＬＸ－２細胞の細胞表面の潜在的なリガンドに結合しただけでなく、その相互作用が生物学的に機能したことを示唆している。
実施例７
ＩＬＴ３リガンドとしてのフィブロネクチンの同定
免疫沈降法及び質量分析法を使用し、ＩＬＴ３の結合パートナーを特定した。簡潔には、ＬＸ－２細胞を、１５０ｍｍ３の組織培養皿にて基本培地または活性化培地に２．５ｘ１０６細胞で播種し、３日間インキュベートした。培地を除去し、細胞を、ＨＡＬＴ（商標）プロテアーゼ及び阻害剤カクテル（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ）を添加した１００μｌの細胞溶解緩衝液（Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）中で溶解した。溶解物を＞１６，０００ＲＣＦで４℃にて１０分間の遠心分離により清澄化し、上清を新しいマイクロフュージチューブに移した。清澄化された溶解物のタンパク質濃度を、ビシンコニン酸（ＢＣＡ）アッセイ（Ｐｉｅｒｃｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）を使用して定量化した。
免疫沈降は、プロテインＧダイナビーズ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ／ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を使用し、製造業者の指示に従って行った。簡潔には、１０μｇのＩＬＴ３ＥＣＤ－Ｆｃまたは対照のヒトＦｃを、５０μｌの磁性ダイナビーズに４℃で３０分間結合させた。上清を除去し、未処理または活性化ＬＸ－２細胞からのタンパク質溶解物を加えた。各処理条件について、約６１５μｇのタンパク質を含む溶解物をダイナビーズ複合体（ＩＬＴ３ＥＣＤ－ＦｃダイナビーズまたはＦｃダイナビーズ）に加え、穏やかに回転させながら４℃で終夜インキュベートした。タンパク質溶解物を除去し、ダイナビーズを２００μｌの溶解緩衝液で３回、１回の洗浄あたり５分間洗浄した。タンパク質ローディング緩衝液、還元剤、及び溶解緩衝液を１５：４：１の比で含む５０μｌの溶出緩衝液をダイナビーズに加えた。タンパク質を９５℃で５分間溶出し、サンプル（各タンパク質溶出液１０μｌ）をポリアクリルアミド電気泳動ゲルで泳動した。目的のバンドを同定するため、ＰｌｕｓＯｎｅ Ｓｉｌｖｅｒ染色キット（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）を製造業者の指示に従って使用し、銀染色分析を行った。ゲルを、Ｇｅｌ Ｄｏｃ（商標）ＥＺシステム（Ｂｉｏ－Ｒａｄ）を使用して画像化した。
図４に示すように、ＩＬＴ３ＥＣＤ－Ｆｃのダイナビーズ複合体及び活性化ＬＸ－２細胞溶解物から溶出されたタンパク質サンプルに特有のバンドが観察された（２６０ＭＷマーカー付近のボックス内）。
残りの４０μｌの溶出液のゲル電気泳動を行い、そのゲルをＢｉｏ－Ｓａｆｅ Ｃｏｏｍａｓｓｉｅ Ｓｔａｉｎ（Ｂｉｏ－Ｒａｄ）で染色した。その特有のバンド及び同じサイズの他のサンプルからの対照バンドに対応するゲルバンドを生物学的安全キャビネット内で切除し、ゲル片を小断片にスライスした。ゲル片を５０％アセトニトリル及び２００ｍＭ重炭酸アンモニウム中で洗浄し、１００％アセトニトリル中で１０分間インキュベートし、ＳｐｅｅｄＶａｃ真空濃縮器で乾燥した。２５ｍＭトリス（２－カルボキシエチル）ホスフィン（ＴＣＥＰ）及び５０ｍＭヨードアセトアミドとの連続インキュベーションにより、ゲル片中のタンパク質を還元及びアルキル化した。ゲル片を洗浄し、再度アセトニトリルとともにインキュベートし、３７℃にて終夜トリプシン消化（５０ｍＭ重炭酸アンモニウム中２０μｇ／ｍｌ、ｐＨ８．０）を行った。
消化されたサンプルを、質量分析に供した。簡潔には、ペプチドを、ＵｌｔｉＭａｔｅ（商標）ＲＳＬＣｎａｎｏ ＬＣシステム（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）に接続したＥＡＳＹ－Ｓｐｒａｙ（商標）ＰｅｐＭａｐＣ１８カラムで分離した。ペプチドを、１３５分かけて２％～３２％のアセトニトリルの勾配でカラムから溶出させ、Ｏｒｂｉｔｒａｐ Ｖｅｌｏｓ Ｐｒｏ（商標）質量分析計に注入した。タンデム質量分析による液体クロマトグラフィー（ＬＣ－ＭＳ／ＭＳ）データを上位１０法を使用して収集し、ＭＳデータを分解能６０，０００にて、ｍ／ｚ２００～２０００で収集した。ＭＳ／ＭＳデータを、ダイナミックエクスクルージョン、モノアイソトピックプリカーサー選択、及び電荷状態スクリーニングをイオントラップで有効にして収集した。一価のペプチドを除外した。ｒａｗファイルを、ＰＥＡＫＳ Ｘプロテオミクスソフトウェア（Ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ Ｓｏｌｕｔｉｏｎｓ）でヒトタンパク質のデータベースに対して検索して分析した。ＰＥＡＫＳプログラムでは、タンパク質を、－１０ｌｏｇｐ設定２０及び誤発見率（ＦＤＲ）１．５％以下で同定した。ヒットを総ペプチド数によってランク付けし、実験サンプルで検出されたがコントロールでは検出されなかったヒットをスクリーニングした。ヒットをさらに、細胞外及び膜貫通タンパク質についてスクリーニングした。意外にも、この特有のバンドはフィブロネクチンとして同定された。ＩＬＴ３ＥＣＤ－Ｆｃ及び活性化ＬＸ－２細胞からのサンプルで同定されたフィブロネクチンに対するペプチド数は３０６であったのに対して、（１）ＩＬＴ３ＥＣＤ－Ｆｃ及び基本ＬＸ－２細胞からのサンプルのフィブロネクチンに対するペプチドは１１１であり、（２）対照Ｆｃ及び活性化ＬＸ－２細胞からのサンプルのフィブロネクチンに対するペプチドは１５であり、（３）対照Ｆｃ及び基本ＬＸ－２細胞からのサンプルのフィブロネクチンに対するペプチドは１であった。これは、明らかに、ＩＬＴ３ＥＣＤ－Ｆｃ＋活性化ＬＸ－２細胞サンプルでのフィブロネクチンペプチドの濃縮を示した。
さらなる試験により、ＩＬＴ３ＥＣＤ－Ｆｃ結合が、フィブロネクチンノックアウトＬＸ－２細胞株では、細胞が活性化されているかどうかにかかわらず、検出できないことが分かった。これらの結果は、さらにフィブロネクチンがＩＬＴ３のリガンドであるという結論を裏付けた。
ＩＬＴ３のフィブロネクチンに対する結合は、Ｂｉａｃｏｒｅで評価した。ヒト血漿フィブロネクチンを、標準的なアミンカップリング化学を使用して、ＣＭ５センサーチップ表面（フローセル２）に固定化した。ＩＶ型コラーゲンをフローセル３に固定化し、対照として使用した。ヒトＩＬＴ３ＥＣＤ－ＦｃまたはヒトＬＡＩＲ１ＥＣＤ－Ｆｃを、両方の表面に異なる濃度（１２５～４０００ｎＭ）で流速５０μＬ／分で３７℃にて注入した。反応速度データを経時的に収集し、同時グローバルフィット方程式を使用してフィットを行い、各抗体の親和性定数（ＫＤ値）を得た。
ＩＬＴ３は、少なくとも５μＭのＫＤでフィブロネクチンに結合し、コラーゲンＩＶには検出可能なレベルで結合しなかった。対照的に、ＬＡＩＲ１は、少なくとも５μＭのＫＤでコラーゲンＩＶに結合し、フィブロネクチンには結合しなかった。
実施例８
ＩＬＴ３とフィブロネクチンの相互作用によるレポーター細胞の活性化
フィブロネクチンに対するＩＬＴ３の結合が機能的相互作用であるかどうかを調べるため、ＩＬＴ３ＥＣＤを発現するレポーター細胞をフィブロネクチンとともにインキュベートした。９６ウェルＭａｘｉｓｏｒｐ（Ｎｕｎｃ）プレートを、５μｇ／ｍＬのヒトＦｃタンパク質（Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ）、血漿由来フィブロネクチン（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）、または組み換えフィブロネクチン（Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ）を含むＰＢＳで、室温にて２時間コーティングした。プレートをＰＢＳで２回洗浄した後、１０％ＦＢＳを含むＲＰＭＩ１６４０でブロックした。Ｂ７－Ｈ４細胞外ドメイン、ＬＡＩＲ１細胞外ドメイン、またはＩＬＴ３細胞外ドメインを発現するＮＦＡＴ－ＧＦＰレポーター細胞（本明細書では実施例５に記載）（１ｘ１０５細胞／ウェル）をコーティングしたウェルに加え、それらのプレートを３７℃で終夜インキュベートした。細胞をＦＡＣＳによりＧＦＰ発現についてアッセイし、非活性化レポーター細胞と比較した。
図５に示すように、フィブロネクチンとともに培養したＩＬＴ３を発現する細胞（血漿由来または組み換えのいずれか）のみが、ＧＦＰ発現で実証される通り、このレポーター系を活性化することが可能であった。これらの結果は、フィブロネクチンとともに培養したＢ７－Ｈ４またはＬＡＩＲ１発現細胞に反応したＧＦＰ発現がなかったということで、フィブロネクチンとの相互作用がＩＬＴ３に特異的であることを示した。
追跡試験では、９６ウェルＭａｘｉｓｏｒｐ（Ｎｕｎｃ）プレートを、５μｇ／ｍＬの血漿由来フィブロネクチン（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）ＰＢＳ溶液を用いて室温で１時間コーティングした。コーティング後、アイソタイプ対照抗体、抗ＩＬＴ３抗体１６Ｃ５、抗フィブロネクチン抗体Ｆ１４（Ａｂｃａｍ製ウサギモノクローナル抗体）、または抗フィブロネクチン抗体ＰＡ５（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ製ウサギポリクローナル抗体）を最終濃度５または２０μｇ／ｍＬでそのウェルに加えた。次に、ＩＬＴ３細胞外ドメインを発現するＮＦＡＴ－ＧＦＰレポーター細胞（１ｘ１０５細胞／ウェル）をそのウェルに加え、それらのプレートを３７℃で終夜インキュベートした。細胞をＦＡＣＳによりＧＦＰ発現についてアッセイし、非活性化レポーター細胞と比較した。
図６に示すように、抗ＩＬＴ３抗体１６Ｃ５ならびに抗フィブロネクチン抗体Ｆ１４及びＰＡ５は、レポーター細胞でのＧＦＰの発現を減少させた。２つの異なる濃度の対照抗体は、ＩＬＴ３とフィブロネクチンとの間の相互作用によるＧＦＰの発現を阻害しなかった。
別の試験を、抗ＩＬＴ３抗体１６Ｃ５及びｃｈ５Ａ７（マウス重鎖可変領域及び軽鎖可変領域ならびにヒトＦｃドメインを含むキメラ５Ａ７）を使用して行った。上記のように、９６ウェルＭａｘｉｓｏｒｐプレートを、５μｇ／ｍＬの血漿由来フィブロネクチンを用いて室温で１時間コーティングした。コーティング後、アイソタイプ対照抗体、抗ＩＬＴ３抗体１６Ｃ５、または抗ＩＬＴ３抗体ｃｈ５Ａ７を、６６ｎＭ～．０００２ｎＭに及ぶ６倍希釈でそのウェルに加えた。次に、ＩＬＴ３細胞外ドメインを発現するＮＦＡＴ－ＧＦＰレポーター細胞（１ｘ１０５細胞／ウェル）をそのウェルに加え、それらのプレートを３７℃で終夜インキュベートした。細胞をＦＡＣＳによりＧＦＰ発現についてアッセイし、非活性化レポーター細胞と比較した。
図７に示すように、抗ＩＬＴ３抗体１６Ｃ５及びｃｈ５Ａ７は、ＧＦＰ発現の低下によって評価される通り、ＩＬＴ３とフィブロネクチンの相互作用を阻害した。対照的に、対照抗体はＧＦＰ発現に影響を与えなかった。
これらの結果は、抗ＩＬＴ３抗体がＩＬＴ３とフィブロネクチンとの間の相互作用を遮断し得ること、及び重要なことには、その相互作用から生じる生物活性を遮断し得ることを実証している。
実施例９
フィブロネクチン上のＩＬＴ３結合部位の同定
ヒトフィブロネクチンの代表的な略図を図８に示す。ＩＬＴ３がフィブロネクチンに結合した場所を特定するための試験を行った。９６ウェルＭａｘｉｓｏｒｐ（Ｎｕｎｃ）プレートを、５μｇ／ｍＬのヒトＦｃタンパク質（Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ）、血漿由来フィブロネクチン（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）、組み換えフィブロネクチン（Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ）、または以下のフィブロネクチン断片：７０ｋＤａのフィブロネクチン断片（Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ）、３０ｋＤａのフィブロネクチン断片（Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ）、４５ｋＤａのフィブロネクチン断片（Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ）、断片２（配列番号１３８のａａ６０７～１２６５、Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ）、断片３（配列番号１３８のａａ１２６６～１９０８、Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ）、または断片４（配列番号１３８のａａ１９１３～２４７７、Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ）を用いてコーティングした。これらのプレートを室温で２時間インキュベートした。プレートをＰＢＳで２回洗浄した後、１０％ＦＢＳを含むＲＰＭＩ１６４０でブロックした。ＩＬＴ３細胞外ドメインを発現するＮＦＡＴ－ＧＦＰレポーター細胞（１ｘ１０５細胞／ウェル）をそのウェルに加え、それらのプレートを３７℃で終夜インキュベートした。細胞をＦＡＣＳによりＧＦＰ発現についてアッセイし、非活性化レポーター細胞と比較した。
図９に示すように、７０ｋＤａ及び３０ｋＤａのフィブロネクチン断片（ならびに完全長フィブロネクチン）のみが、ＧＦＰ発現で実証される通り、ＩＬＴ３発現細胞におけるこのレポーター系を活性化することが可能であった。活性化のレベルは、等モル濃度の完全長フィブロネクチンより断片のほうが高かった。ヘパリン／フィブリン結合ドメインを包含するＮ末端領域（３０ｋＤａ断片、Ｉ型ＦＮモジュール１～５）は、最も高いレベルのＧＦＰ活性を誘発した。
フィブロネクチンのＩＬＴ３結合部位がより詳細に定義され得るかどうかを確認するため、さらなる試験を行った。（ｉ）Ｉ型ＦＮモジュール１～４（配列番号１３８のａａ３２～２２８）、（ｉｉ）Ｉ型ＦＮモジュール２～５（配列番号１３８のａａ９３～２９０）、（ｉｉｉ）Ｉ型ＦＮモジュール１～３（配列番号１３８のａａ３２～１８２）、（ｉｖ）Ｉ型ＦＮモジュール２～４（配列番号１３８のａａ９３～２２８）、（ｖ）Ｉ型ＦＮモジュール３～５（配列番号１３８のａａ１３９～２９０）、（ｖｉ）Ｉ型ＦＮモジュール１～２（配列番号１３８のａａ３２～１３８）、（ｖｉｉ）Ｉ型ＦＮモジュール２～３（配列番号１３８のａａ９３～１８２）、（ｖｉｉｉ）Ｉ型ＦＮモジュール３～４（配列番号１３８のａａ１３９～２２８）、（ｉｘ）Ｉ型ＦＮモジュール４～５（配列番号１３８のａａ１８３～２９０）、７０ｋＤａ断片（配列番号１３８のａａ３２～６０８）、３０ｋＤａ断片（配列番号１３８のａａ３２～２９０）、及び４５ｋＤａ断片（配列番号１３８のａａ２９１～６０８）からなるフィブロネクチン断片を調製した。上記のように、９６ウェルＭａｘｉｓｏｒｐ（Ｎｕｎｃ）プレートを、４０ｎＭのフィブロネクチン断片及び完全長フィブロネクチンを用いてコーティングした。これらのプレートを室温で２時間インキュベートした。プレートをＰＢＳで２回洗浄した後、１０％ＦＢＳを含むＲＰＭＩ１６４０でブロックした。ＩＬＴ３細胞外ドメインを発現するＮＦＡＴ－ＧＦＰレポーター細胞（１ｘ１０５細胞／ウェル）をそのウェルに加え、それらのプレートを３７℃で終夜インキュベートした。細胞をＦＡＣＳによりＧＦＰ発現についてアッセイし、非活性化レポーター細胞と比較した。
これらの試験で、Ｉ型ＦＮモジュール１がこのレポーターアッセイにおける活性に必要であることが示された（図１０）。本発明者らは、Ｉ型ＦＮモジュール１がフィブロネクチンに対するＩＬＴ３の結合及びその結果としての活性に必要であるが、他のモジュールもまた、ＩＬＴ３／フィブロネクチン相互作用に関与していると考える。
実施例１０
ＩＬＴ３とフィブロネクチンの相互作用のインビトロアッセイ
ＴＨＰ－１は、急性単球性白血病細胞から樹立されたヒト単球細胞株であり、ＡＴＣＣから得た。これらの細胞は、Ｆｃ受容体を介して活性化される単球において、ＩＬＴ３によって調節されるシグナル伝達経路を調べるために使用されている（Ｌｕ ｅｔ ａｌ．，２００９，ＪＢＣ，２８４：３４８３９－３４８４８）。単球の活性化は、細胞表面でのＦｃＲの架橋によって達成される可能性があり、この架橋は、サイトカイン産生、例えば、ＴＮＦ－α及び／またはＩＬ－８をもたらす。研究によると、ＩＬＴ３は、単球におけるＦｃＲが媒介するサイトカイン産生の強力な阻害剤であることが分かっている。ＴＨＰ－１細胞を、骨髄細胞におけるＩＬＴ３とフィブロネクチンの相互作用を調べるためのアッセイの一部として使用した。野生型ＴＨＰ－１細胞（ＴＨＰ－１）に加えて、ＩＬＴ３ノックアウトＴＨＰ－１細胞株（ＴＨＰ－１ ＩＬＴ３－ＫＯ）を生成した。
９６ウェルＭａｘｉｓｏｒｐ（Ｎｕｎｃ）プレートを、フィブロネクチン５μｇ／ｍＬ（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）ならびにエフェクターレス抗ＫＬＨ抗体０、１、５、及び１０μｇ／ｍＬで同時にコーティングした。プレートを室温で２時間インキュベートし、ＰＢＳで２回洗浄し、１０％ＦＢＳを含むＲＰＭＩ１６４０でブロックした。ＴＨＰ－１またはＴＨＰ－１ ＩＬＴ３－ＫＯ細胞（２ｘ１０５細胞／ウェル）をウェルに加え、それらのプレートを３７℃で終夜インキュベートした。抗ＫＬＨ抗体は、ＦｃＲに結合し、ＴＨＰ－１及びＴＨＰ－１ ＩＬＴ３－ＫＯ細胞を活性化してサイトカインを産生する。フィブロネクチンの有無及びＩＬＴ３との相互作用は、このアッセイで評価することができる。無細胞培養上清を回収し、ＩＬ－８をＬｕｍｉｎｅｘアッセイ（ＰｒｏｃａｒｔａＰｌｅｘシステム、ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）によって測定した。場合によっては、ＩＬ－８を、ＦｃＲ刺激なしのＴＨＰ－１細胞のものに対して正規化した。
図１１に示すように、ＴＨＰ－１細胞及びＩＬＴ３を欠くＴＨＰ－１細胞（ＴＨＰ－１ ＩＬＴ３－ＫＯ細胞）の両方で、抗ＫＬＨ抗体は、用量依存的に単球を活性化することが可能である。対照的に、ＩＬ－８産生によって評価される抗ＫＬＨ抗体によるＴＨＰ－１細胞の活性化は、細胞表面でのフィブロネクチンとＩＬＴ３の相互作用によって阻害される。ＩＬ－８産生によって評価される抗ＫＬＨ抗体によるＴＨＰ－１細胞の活性化は、フィブロネクチンとＩＬＴ３の両方が存在し、相互作用が可能な場合にのみ阻害される（すなわち、ＴＨＰ－１ ＩＬＴ３－ＫＯ細胞及びフィブロネクチンによる阻害はない）。
これらの結果は、ＩＬＴ３が、フィブロネクチンの存在下で骨髄細胞におけるＦｃＲ活性化の阻害を誘導することを示している。
追跡試験を抗ＩＬＴ３抗体の存在下で行った。９６ウェルＭａｘｉｓｏｒｐ（Ｎｕｎｃ）プレートを、フィブロネクチン５μｇ／ｍＬ（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）及びエフェクターレス抗ＫＬＨ抗体５μｇ／ｍＬで同時にコーティングした。プレートを室温で２時間インキュベートし、ＰＢＳで２回洗浄し、１０％ＦＢＳを含むＲＰＭＩ１６４０でブロックした。ＴＨＰ－１またはＴＨＰ－１ ＩＬＴ３ＫＯ細胞（２ｘ１０５細胞／ウェル）を、抗ＩＬＴ３抗体１６Ｃ５（エフェクターレス、５μｇ／ｍＬ）または抗ＫＬＨ抗体（エフェクターレス、５μｇ／ｍＬ）の存在下、それらのウェルに加えた。それらのプレートを３７℃で終夜インキュベートし、無細胞培養上清を回収し、ＩＬ－８をＬｉｍｉｎｅｘアッセイによって測定した。
図１２Ａに示すように、ＴＨＰ－１細胞のＦｃＲ活性化のＩＬＴ３／フィブロネクチンが誘導する阻害は、抗ＩＬＴ３抗体１６Ｃ５によって抑制または遮断される。言い換えれば、抗ＩＬＴ３抗体は、ＩＬＴ３とフィブロネクチンの相互作用の阻害を逆転することができた。
同様の実験を、初代ヒト樹状細胞で設定した。ヒト単球を、Ｍｉｌｔｅｎｙｉ Ｍｏｎｏｃｙｔｅ Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ Ｋｉｔを使用し、製造業者の指示に従って負の選択により凍結保存末梢血単核細胞から単離した。樹状細胞を生成するため、単球を、２ｘ１０６細胞／ｍＬにて、５０ｎｇ／ｍＬの組み換えヒトＧＭ－ＣＳＦ及び５０ｎｇ／ｍＬの組み換えヒトＩＬ－４（ともにＰｅｐｒｏｔｅｃｈ）を含むＸ－ＶＩＶＯ（商標）１５培地（Ｌｏｎｚａ）にプレーティングし、５～７日間培養した。上記の通り、９６ウェルＭａｘｉｓｏｒｐ（Ｎｕｎｃ）プレートを、フィブロネクチン５μｇ／ｍＬ（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）及びエフェクターレス抗ＫＬＨ抗体５μｇ／ｍＬで同時にコーティングした。プレートを室温で２時間インキュベートし、ＰＢＳで２回洗浄し、１０％ＦＢＳを含むＲＰＭＩ１６４０でブロックした。樹状細胞（２ｘ１０５細胞／ウェル）を、抗ＩＬＴ３抗体１６Ｃ５（エフェクターレス、５μｇ／ｍＬ）または抗ＫＬＨ抗体（エフェクターレス、５μｇ／ｍＬ）の存在下、それらのウェルに加えた。それらのプレートを３７℃で終夜インキュベートし、無細胞培養上清を回収し、ＴＮＦ－αをＬｉｍｉｎｅｘアッセイによって測定した。
図１２Ｂは、ＩＬＴ３／フィブロネクチンが誘導するＦｃＲ活性化の抑制が初代樹状細胞で観察されることを示している。重要なことに、これらの結果は、例示的な抗ＩＬＴ３抗体（例えば、抗体１６Ｃ５）が、この抑制を阻害することが可能であることを示している。
さらなる試験を、抗ＩＬＴ３抗体１６Ｃ５及びｃｈ５Ａ７で行った。先のアッセイで観察されたように、抗ＩＬＴ３抗体１６Ｃ５及びｃｈ５Ａ７は、ＦｃＲシグナル伝達によって活性化された樹状細胞によるＴＮＦ－α産生のフィブロネクチンが媒介する抑制を逆転させた（図１２Ｃ）。
同様の試験を、ＮＦκＢ－ＳＥＡＰレポーター（ＩｎｖｉｖｏＧｅｎ）を含むＴＨＰ－１ Ｄｕａｌ（商標）ＫＩ－ｍＳＴＩＮＧ細胞で行った。Ｎｕｎｃ Ｍａｘｉｓｏｒｐプレートを、ヒトフィブロネクチン及びエフェクターレス抗ＫＬＨ抗体（各々５μｇ／ｍＬ）で室温にて２時間、同時にコーティングした。プレートをＸ－ＶＩＶＯ（商標）１５培地（Ｌｏｎｚａ）で３０分間ブロックした後、細胞及び試験抗体を添加した。ＴＨＰ－１レポーター細胞を含むＸ－ＶＩＶＯ（商標）１５培地（２ｘ１０６細胞／ｍＬ）を、１：１の比で対照抗体、抗ＩＬＴ３抗体１６Ｃ５、または抗ＩＬＴ３抗体ｃｈ５Ａ７と混合した。その混合物を３０分間インキュベートし、１００μＬ／ウェルでプレートに播種し、そのプレートを終夜インキュベートした。レポーター活性を、２５μＬの培養上清と１００μＬのＱｕａｎｔｉ－Ｂｌｕｅ ＳＥＡＰ基質（ＩｎｖｉｖｏＧｅｎ）を混合し、そのサンプルを３７℃で２時間インキュベートし、６２０ｎｍでの吸光度を読み取ることによって測定した。
このレポーターは、ＴＨＰ－１細胞の表面での抗ＫＬＨ抗体とＦｃＲの相互作用によって活性化され、ＦｃＲシグナル伝達経路の活性化及び分泌型胚アルカリホスフェート（ｓｅｃｒｅｔｅｄ ｅｍｂｒｙｏｎｉｃ ａｌｋａｌｉｎｅ ｐｈｏｓｐｈａｔｅ）（ＳＥＡＰ）の産生をもたらす。ＴＨＰ－１細胞表面のＩＬＴ３がフィブロネクチンと相互作用すると、ＦｃＲシグナル伝達が抑制され、ＳＥＡＰ産生が減少する。抗ＩＬＴ３抗体１６Ｃ５及びｃｈ５Ａ７は、ＩＬＴ３／フィブロネクチン相互作用を遮断し、抑制を逆転させた（図１３）。
Ｄｅｔｒｏｉｔ５５１細胞株は、正常な胎児組織から樹立されたヒトの皮膚線維芽細胞で構成されている。これらの細胞は、内因的に産生されたフィブロネクチンを表面の受容体に結合して有する。Ｄｅｔｒｏｉｔ５５１細胞により、フィブロネクチンが細胞表面に自然に存在し、アッセイプレートに付着しないインビトロアッセイが可能になる。Ｄｅｔｒｏｉｔ５５１細胞をポリ－Ｄ－リジンでコーティングした３８４ウェルプレートに６ｘ１０３細胞／ウェル（Ｇｒｅｉｎｅｒ）でプレーティングし、２日間インキュベートした。単分子層を、Ｍｇ２＋及びＣａ２＋を含むＨＢＳＳですすぎ、約１０μＬ／ウェルを残した。ＩＬＴ３－ＥＣＤ－Ｆｃを、抗ＩＬＴ３抗体１６Ｃ５、抗ＩＬＴ３抗体ｃｈ５Ａ７、または対照抗ＫＬＨ抗体の存在下、これらのウェルに加えた（最終濃度１μｇ／ｍＬ）。これらの抗体は、ＩＬＴ３－ＥＣＤ－Ｆｃを含む培地で３倍連続希釈した（６６ｎＭ～０．２７ｎＭの範囲）。細胞を室温で１時間インキュベートした後、ＨＢＳＳで３回洗浄し、３．７％ホルマリンで１０分間固定した。単分子層をＰＢＳですすぎ、１％ＢＳＡを含むＰＢＳでブロックした後、Ｈｏｅｃｈｓｔ染色剤（２．５μＭ）及び市販のポリクローナル抗ＩＬＴ３抗体（Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ）で染色した。ＡｌｅｘａＦｌｕｏｒ ６４７コンジュゲートウサギ抗ヤギＦｃ二次抗体（Ｊａｃｋｓｏｎ ＩｍｍｕｎｏＲｅｓｅａｒｃｈ Ｌａｂｓ）を加え、細胞を画像化し、ＣｅｌｌＩｎｓｉｇｈｔイメージングシステムを使用して蛍光レベルを定量化した。
図１４に示すように、抗ＩＬＴ３抗体は、フィブロネクチン発現細胞に対するＩＬＴ３－ＥＣＤの結合を遮断した。
実施例１１
抗ＩＬＴ３抗体が樹状細胞によるケモカイン産生に与える影響
初代ヒト単球を、Ｍｉｌｔｅｎｙｉ Ｍｏｎｏｃｙｔｅ Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ Ｋｉｔを使用し、製造業者の指示に従って負の選択により凍結保存末梢血単核細胞から単離した。マクロファージの分化のために、単球を、１００ｎｇ／ｍＬの組み換えヒトＭ－ＣＳＦ（Ｐｅｐｒｏｔｅｃｈ）を含むＸ－ＶＩＶＯ（商標）１５培地（Ｌｏｎｚａ）に２ｘ１０６細胞／ｍＬでプレーティングした。２～３日後、新鮮なＭ－ＣＳＦをこの培地に加えた。さらに２～３日後、マクロファージ細胞を洗浄し、こすり取って回収する。
樹状細胞馴化培地（走化性因子として使用）を以下のように生成した。樹状細胞を生成するため、ヒト単球を、２ｘ１０６細胞／ｍＬにて、５０ｎｇ／ｍＬの組み換えヒトＧＭ－ＣＳＦ及び５０ｎｇ／ｍＬの組み換えヒトＩＬ－４（ともにＰｅｐｒｏｔｅｃｈ）を含むＸ－ＶＩＶＯ（商標）１５培地（Ｌｏｎｚａ）にプレーティングし、５～７日間培養した。これらの単球由来樹状細胞を回収し、１ｘ１０６細胞／ｍＬにて、フィブロネクチンでコーティングされたＭａｘｉｓｏｒｐプレート（１０μｇ／ｍＬ）に、抗ＫＬＨ抗体または抗ＩＬＴ３抗体（１０μｇ／ｍＬ）の存在下プレーティングし、２日間インキュベートした。この馴化培地を回収し、本明細書に記載の遊走アッセイに使用した。
マクロファージ遊走アッセイを、Ｉｎｃｕｃｙｔｅ（登録商標）Ｚｏｏｍ Ｌｉｖｅ－Ｃｅｌｌ分析システム（Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ）を使用して行った。Ｉｎｃｕｃｙｔｅ Ｃｌｅａｒ－Ｖｉｅｗ ９６ウェル走化性プレート（Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ）の膜を、５０μｇ／ｍＬのＭａｔｒｉｇｅｌ（登録商標）（１０％ＦＢＳを含むＸ－ＶＩＶＯ（商標）１５培地で希釈）で３７℃にて３０分間、続いて室温で３０分間プレコートした。マクロファージ（５ｘ１０３細胞／ウェル）をこの走化性プレートの上側チャンバーに加え、下側チャンバーを樹状細胞由来の馴化培地（本明細書に記載のもの）で満たした。位相差画像を１時間ごとに２４時間キャプチャし、データをＩｎｃｕｃｙｔｅ分析ソフトウェアを使用して分析した。
図１５に示すように、マクロファージは、フィブロネクチンで処理された樹状細胞からの馴化培地に反応して遊走することはなかった。対照的に、高い割合のマクロファージが、抗ＩＬＴ３抗体の存在下フィブロネクチンで処理された樹状細胞からの馴化培地に反応して遊走した。
これらの結果は、抗ＩＬＴ３抗体による樹状細胞でのフィブロネクチン／ＩＬＴ３相互作用の阻害または遮断が、樹状細胞によるケモカイン／化学誘引物質の産生を増加させることを示している。ケモカイン産生の増加により、マクロファージの遊走が増加する。これにより、抗ＩＬＴ３抗体が、免疫反応の部位へのマクロファージ及び他の免疫細胞の動員の増加を補助することにより、免疫反応を増強するのに効果的である可能性があることが示唆される。
実施例１２
同種異系混合リンパ球反応（ＭＬＲ）アッセイ
寛容原性ＤＣを、本明細書に記載の通りに生成し、４ｘ１０５細胞／ｍＬで再懸濁した。簡潔には、寛容原性ＤＣ（ｔｏｌＤＣ）を生成するため、単球をＧＭ－ＣＳＦ及びＩＬ－４で５日間処理した後、１０ｎＭのデキサメタゾン及び１００ｎＭのビタミンＤ３（１α，２５－ジヒドロキシビタミンＤ３）（ともにＳｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ製）でさらに２日間処理して寛容化した。ＬＸ－２細胞（野生型またはフィブロネクチンノックアウト）を、２５μｇ／ｍＬのマイトマイシンＣ（Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ）で３７℃にて１時間処理し、洗浄し、１ｘ１０５細胞／ｍＬで再懸濁した。同種異系Ｔ細胞を、末梢血単球から負の選択によってＭｉｌｔｅｎｙｉ Ｔ細胞単離キットを使用して精製し、２ｘ１０６細胞／ｍＬで再懸濁した。抗ＩＬＴ３抗体１６Ｃ５、抗ＩＬＴ３抗体ｃｈ５Ａ７、または対照抗体（５０μＬ）を、９６ウェルの丸底プレートのウェルに添加した。混合リンパ球反応（ＭＬＲ）アッセイを、各細胞型（Ｔ細胞、ｔｏｌＤＣ、及びＬＸ－２細胞）を５０μＬ添加することにより、最終Ｔ細胞：ｔｏｌＤＣ：ＬＸ－２細胞比２０：２：１に設定した。プレートを５日間インキュベートした後、無細胞培養上清を回収した。サイトカインレベルを、Ｌｕｍｉｎｅｘアッセイ（ＰｒｏｃａｒｔａＰｌｅｘシステム、ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を使用して測定した。この培地を、濃度１μＣｉ／ｍＬでトリチウム化チミジン（３Ｈ－チミジン、Ｐｅｒｋｉｎ－Ｅｌｍｅｒ）を含む新鮮な培地と交換した。さらなる１８時間のインキュベーション後、Ｔｏｍｔｅｃセルハーベスターを使用して細胞をフィルターに回収し、ＭｉｃｒｏＢｅｔａ２マイクロプレートリーダーで３Ｈ－チミジンの取り込みをカウントした。
このアッセイでは、マイトマイシンＣで処理したＬＸ－２細胞がフィブロネクチン源として機能し、増殖することはできない。ＬＸ－２細胞が存在しない場合（すなわち、フィブロネクチンなし）、Ｔ細胞は樹状細胞によって活性化され増殖する。ＬＸ－２細胞の存在下では、Ｔ細胞の活性化が抑制され、増殖が減少または排除される。
図１６Ａ及び１６Ｂに示すように、抗ＩＬＴ３抗体１６Ｃ５及びｃｈ５Ａ７は、フィブロネクチンが媒介する同種異系ＭＬＲの抑制を用量依存的に逆転させる。抗ＩＬＴ３抗体の活性は、フィブロネクチンの存在に依存する。すなわち、フィブロネクチンが存在しない場合、抗ＩＬＴ３抗体の存在下でＭＬＲ活性の抑制が逆転することはない（データは示さず）。
実施例１３
抗ＩＬＴ３抗体が樹状細胞に与える影響
樹状細胞を、本明細書に記載の通りに生成した。９６ウェルＭａｘｉｓｏｒｐプレート（Ｎｕｎｃ）を、フィブロネクチン（５μｇ／ｍＬ）でコーティングし、室温で１時間インキュベートし、ＰＢＳで洗浄し、Ｘ－ＶＩＶＯ（商標）１５培地（Ｌｏｎｚａ）で３０分間ブロックした。樹状細胞を、２ｘ１０５細胞／ウェルにて、抗ＩＬＴ３抗体ｃｈ５Ａ７、抗ＩＬＴ３抗体Ｈｚ５Ａ７．ｖ５、抗ＩＬＴ３抗体４５Ｇ１０、または対照抗体の存在下プレーティングし、終夜インキュベートした。抗体濃度は、１０μｇ／ｍＬ～０．１２８ｎｇ／ｍＬまでの５倍希釈であった。４８時間後、Ｌｕｍｉｎｅｘアッセイ（ＰｒｏｃａｒｔａＰｌｅｘシステム、ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）によるＭＩＰ－１αの測定のために培地を回収した。
図１７Ａに示すように、抗ＩＬＴ３抗体ｃｈ５Ａ７及びＨｚ５Ａ７．ｖ５は、樹状細胞によって産生されるＭＩＰ－１αのレベルを増加させた。図１７Ｂは、抗体４５Ｇ１０を含めた同様の結果を示している。
樹状細胞を、本明細書に記載の通りに生成した。その樹状細胞を、２０ｎｇ／ｍＬの組み換えヒトＩＬ－１０（Ｐｅｐｒｏｔｅｃｈ）で処理することによって寛容化した。その細胞を、ＩＬ－１０及びＬＰＳ（２μｇ／ｍＬ、Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ）を含む培地で、さらに抗ＩＬＴ３抗体１６Ｃ５、抗ＩＬＴ３抗体ｃｈ５Ａ７、抗ＩＬＴ３抗体４５Ｇ１０、または対照抗ＫＬＨ抗体の存在下、９６ウェルの平底プレートに２ｘ１０５細胞／ウェルにてプレーティングし、４８時間インキュベートした。抗体濃度は、５μｇ／ｍＬ～１．６ｎｇ／ｍＬまでの５倍希釈であった。Ｌｕｍｉｎｅｘアッセイ（ＰｒｏｃａｒｔａＰｌｅｘシステム、ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）によるＴＮＦ－αの測定のために培地を回収した。
図１８Ａに示すように、抗ＩＬＴ３抗体１６Ｃ５及びｃｈ５Ａ７は、ＴＮＦ－αの産生によって評価される通り、ＩＬ－１０寛容化樹状細胞のＬＰＳに反応する能力を回復することができた。これらの結果により、抗体ｃｈ５Ａ７が１６Ｃ５よりも強力な抗体である可能性があることが示唆される。図１８Ｂは、抗ＩＬＴ３抗体ｃｈ５Ａ７及び４５Ｇ１０での同様の試験の結果を示している。他の試験では、抗ＩＬＴ３抗体ｃｈ５Ａ７が、ＩＬ－１０寛容化樹状細胞の第二の刺激分子ＣＤ４０Ｌに反応する能力を回復することも可能なことが示された（データは示さず）。
実施例１４
抗ＰＤ－１抗体と組み合わせた抗ＩＬＴ３抗体の存在下での同種異系ＭＬＲ
単球由来樹状細胞を、末梢血単球から本明細書に記載の通りに生成した。これらの細胞を回収し、抗ＫＬＨ抗体または抗ＩＬＴ３抗体の存在下、組み換えヒトＩＬ－１０（５０ｎｇ／ｍＬ）で４８時間寛容化した。同種異系Ｔ細胞を、末梢血単球から負の選択によってＭｉｌｔｅｎｙｉ Ｔ細胞単離キットを使用して精製した。ＭＬＲアッセイのため、Ｔ細胞及び寛容化樹状細胞を、抗ＫＬＨ抗体、抗ＩＬＴ３抗体ｃｈ５Ａ７、抗ＰＤ－１抗体（ペムブロリズマブ）、または抗ＩＬＴ３抗体ｃｈ５Ａ７と抗ＰＤ－１の組み合わせ（すべての抗体は各々１μｇ／ｍＬ）の存在下、Ｔ細胞のＩＤＣに対する比５：１で混合した。５日後、Ｌｕｍｉｎｅｘアッセイ（ＰｒｏｃａｒｔａＰｌｅｘシステム、ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）によるＩＦＮ－γの測定のために培地を回収した。
図１９に示すように、抗ＩＬＴ３抗体ｃｈ５Ａ７は、Ｔ細胞でのＩＦＮ－γ産生の増加によって示される通り、ＩＬ－１０寛容化樹状細胞における反応の抑制を逆転させた。この効果は、抗ＩＬＴ３抗体を抗ＰＤ－１抗体と組み合わせて使用した場合に２倍を超えて高くなった。
実施例１５
ヒト化抗体の生成
本明細書に記載の抗体特性データ及びさらなる試験に基づいて、抗体５Ａ７、４８Ａ６、４５Ｇ１０がヒト化用に選択された。抗体を当業者に既知の方法でヒト化し、ヒト化抗体を本明細書ではＨｚ５Ａ７、Ｈｚ４８Ａ６及びＨｚ４５Ｇ１０と呼んだ。
抗体５Ａ７は、重鎖可変領域ＣＤＲ３、
Figure 2023507110000013
 に望ましくないメチオニンを有していた。ヒト化プロセス中に、この重鎖可変領域ＣＤＲ３を再操作してこのメチオニンを除去し、チロシンを挿入することで、
Figure 2023507110000014
 を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を得た。さらに、抗体５Ａ７が、潜在的な異性化部位を軽鎖可変領域のＣＤＲ１、
Figure 2023507110000015
 に及び潜在的な脱アミド化部位を軽鎖可変領域のＣＤＲ１、
Figure 2023507110000016
 に有することが分かった。ヒト化プロセス中に、この軽鎖可変領域ＣＤＲ１を再操作してこの異性化部位及び脱アミド化部位を除去することで、
Figure 2023507110000017
 を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１を得た。これらの改変すべてを含むこのＨｚ５Ａ７バリアントを、Ｈｚ５Ａ７．ｖ５と呼ぶ。Ｈｚ５Ａ７．ｖ５の重鎖可変配列は、配列番号１２３のアミノ酸配列を含み、Ｈｚ５Ａ７．ｖ５の軽鎖可変配列は、配列番号１２４のアミノ酸配列を含む。ＣＤＲは表８に開示されている。
抗体Ｈｚ５Ａ７．ｖ５の重鎖配列は、定常領域にＮ２９７Ｇの変異を含み、これがＦｃエフェクター機能を排除する。抗体Ｈｚ５Ａ７．ｖ５の重鎖配列は、配列番号１２５及び配列番号１２６（それぞれ、シグナル配列あり及びなし）として示され、抗体Ｈｚ５Ａ７．ｖ５の軽鎖配列は、配列番号１２７及び配列番号１２８（それぞれ、シグナル配列あり及びなし）として示される。
４８Ａ６のいくつかのヒト化バリアントを生成した。これらは、Ｂ０／Ｃ２、Ｂ１／Ｃ２、Ｃ０／Ｃ２、Ｃ１／Ｃ２、及びＣ２／Ｃ２ Ｈｚ４８Ａ６抗体を含む。抗体Ｈｚ４８Ａ６のＢ０／Ｃ２は、配列番号１５６のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域（Ｂ０）、及び配列番号１６１のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域（Ｃ２）を含み、抗体Ｈｚ４８Ａ６のＢ１／Ｃ２は、配列番号１５７のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域（Ｂ１）、及び配列番号１６１のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域（Ｃ２）を含み、抗体Ｈｚ４８Ａ６のＣ０／Ｃ２は、配列番号１５８のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域（Ｃ０）、及び配列番号１６１のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域（Ｃ２）を含み、抗体Ｈｚ４８Ａ６のＣ１／Ｃ２は、配列番号１５９のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域（Ｃ１）、及び配列番号１６１のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域（Ｃ２）を含み、抗体Ｈｚ４８Ａ６のＣ２／Ｃ２は、配列番号１６０のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域（Ｃ２）、及び配列番号１６１のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域（Ｃ２）を含む。抗体Ｈｚ４８Ａ６のＣＤＲは、４８Ａ６の６つのＣＤＲと同じであり、それらは表６に示されている。
４５Ｇ１０の２種のヒト化バリアントを生成した。これらは、Ａ２／Ａ４及びＢ１／Ａ４のＨｚ４５Ｇ１０抗体を含む。抗体Ｈｚ４５Ｇ１０のＡ２／Ａ４は、配列番号１６２のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域（Ａ２）、及び配列番号１６４のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域（Ａ４）を含み、抗体Ｈｚ４５Ｇ１０のＢ１／Ａ４は、配列番号１６３のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域（Ｂ１）、及び配列番号１６４のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域（Ａ４）を含む。抗体Ｈｚ４５Ｇ１０のＣＤＲは、４５Ｇ１０の６つのＣＤＲと同じであり、それらは表５に示されている。
実施例１６
ヒト化抗体の特性
ヒトＩＬＴ３及びｃｙｎｏ ＩＬＴ３に対するＨｚ５Ａ７．ｖ５の結合親和性を、本明細書に記載のＢｉａｃｏｒｅシステムを使用して測定し、親キメラ５Ａ７（ｃｈ５Ａ７）抗体及びＣＤＲ修飾なしのヒト化５Ａ７（Ｈｚ５Ａ７．ｖ１）の結合親和性と比較した（表１２参照）。
Figure 2023507110000018
抗体Ｈｚ５Ａ７．ｖ５は、３７℃でのヒトＩＬＴ３に対する結合親和性が２．８ｘ１０－１０Ｍであったのと比較して、親抗体ｃｈ５Ａ７の結合親和性は、５．７ｘ１０－１０Ｍであった。さらに、抗体Ｈｚ５Ａ７．ｖ５は、３７℃でのｃｙｎｏ ＩＬＴ３に対する結合親和性が７．０ｘ１０－１０Ｍであったのと比較して、親抗体ｃｈ５Ａ７の結合親和性は、２．４ｘ１０－９Ｍであった。
これらの結果により、抗体５Ａ７のヒト化プロセス、ならびに重鎖可変領域のＣＤＲ３内のメチオニン、軽鎖可変領域のＣＤＲ１内の潜在的な異性化部位、及び軽鎖可変領域のＣＤＲ１内の潜在的な脱アミド化部位の除去が、ヒトＩＬＴ３及びｃｙｎｏ ＩＬＴ３に対する結合親和性に大きな影響を与えなかったことが示された。
ヒトＩＬＴ３及びｃｙｎｏ ＩＬＴ３に対する様々なＨｚ４８Ａ６及びＨｚ４５Ｇ１０抗体の結合親和性も同様に、本明細書に記載のＢｉａｃｏｒｅシステムを使用して測定した。重鎖可変領域及び軽鎖可変領域ならびにヒトＦｃドメインの様々な組み合わせを含むヒト化抗体を調べ、親キメラ抗体（マウス４８Ａ６重鎖及び軽鎖可変領域ならびにヒトＦｃドメインを含む４８Ａ６キメラ、またはマウス４５Ｇ１０の重鎖及び軽鎖可変領域ならびにヒトＦｃドメインを含む４５Ｇ１０キメラ）の結合親和性と比較した。
Ｂ０（配列番号１５６）、Ｂ１（配列番号１５７）、Ｃ０（配列番号１５８）、Ｃ１（配列番号１５９）及びＣ２（配列番号１６０）から選択される重鎖可変領域ならびに軽鎖可変領域Ｃ２（配列番号１６１）を含むヒト化４８Ａ６（Ｈｚ４８Ａ６）抗体の結合親和性を表１３に示す。
Figure 2023507110000019
Ａ２（配列番号１６２）及びＢ１（配列番号１６３）から選択される重鎖可変領域ならびに軽鎖可変領域Ａ４（配列番号１６４）を含むヒト化４５Ｇ１０（Ｈｚ４５Ｇ１０）抗体の結合親和性を表１４に示す。
Figure 2023507110000020
実施例１７
抗ＩＬＴ３抗体がマクロファージに与える影響
マクロファージを、初代ヒト単球から生成し、記載の通りに分極化させた。Ｍａｘｉｓｏｒｐプレート（Ｎｕｎｃ）を、抗ＫＬＨ及びヒトフィブロネクチン（ＦＣ０１０１、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）（各５μｇ／ｍＬ）で室温にて１時間コーティングし、次いでＰＢＳで洗浄し、Ｘ－Ｖｉｖｏ １５培地で３０分間ブロックした。抗ＩＬＴ３抗体がマクロファージに与える影響をアッセイするため、細胞を洗浄し、Ｘ－Ｖｉｖｏ １５培地に再懸濁し、指定の抗体と室温で２０分間インキュベートした後、コーティングしたウェルにプレーティングし（体積１００μＬ中、７ｘ１０４細胞／ウェル）、終夜インキュベートした。２４時間後、Ｌｕｍｉｎｅｘアッセイ（ＰｒｏｃａｒｔａＰｌｅｘシステム、ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）によるサイトカイン分泌の評価のために培地を回収した。
図２０Ａ及び２０Ｂに示すように、未分極化（Ｍ０）マクロファージは、Ｆｃ受容体（ＦｃＲ）を介して抗ＫＬＨで刺激され、ＴＮＦ－αを分泌した。フィブロネクチンの存在下では、マクロファージによるＴＮＦ－α分泌は阻害された。マクロファージにおけるフィブロネクチンが誘導するＴＮＦ－α産生の阻害は、抗ＩＬＴ３抗体（例えば、ｈｚ５Ａ７．ｖ５）によって遮断された。これは、ＩＬＴ３とフィブロネクチンとの間の相互作用を遮断し、ＴＮＦ－αの分泌を回復させた。従って、本明細書に記載の抗ＩＬＴ３抗体は、マクロファージにおけるＦｃＲシグナル伝達のフィブロネクチンが媒介する阻害を遮断し、フィブロネクチンの存在下でのマクロファージによるＦｃＲ駆動性サイトカイン産生を増加させる。
図２１Ａ及び２１Ｂに示すように、ＩＬ－１０分極化（Ｍ２ｃ）マクロファージは、Ｆｃ受容体（ＦｃＲ）を介して抗ＫＬＨで刺激され、わずかなＩＬ－６を分泌した。フィブロネクチンの存在下では、マクロファージによるＩＬ－６分泌が増加した。マクロファージにおけるフィブロネクチンが誘導するＩＬ－６産生の増加は、抗ＩＬＴ３抗体（例えば、ｈｚ５Ａ７．ｖ５）によって遮断された。これは、ＩＬＴ３とフィブロネクチンとの間の相互作用を遮断し、ＩＬ－６の産生を阻害した。従って、本明細書に記載の抗ＩＬＴ３抗体は、マクロファージにおけるＦｃＲシグナル伝達のフィブロネクチンが媒介する阻害を遮断する。
実施例１８
抗ＩＬＴ３抗体がカニクイザルＩＬＴ３を発現する細胞に与える影響
レポーター細胞株を、カニクイザルＩＬＴ３を発現するために生成した。ＴＨＰ－１デュアルＫＩ－ｍＳＴＩＮＧレポーター細胞（Ｉｎｖｉｖｏｇｅｎ）を使用し、そこからＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ９ベースの遺伝子編集によりヒトＩＬＴ３を削除した。次いでその細胞に、ｐＢＡＢＥｐｕｒｏベクターにカニクイザルＩＬＴ３を含むレトロウイルスを安定して感染させた。Ｎｕｎｃ Ｍａｘｉｓｏｒｐプレートを、ヒトフィブロネクチン及び抗ＫＬＨ抗体で室温にて２時間、同時にコーティングし、その後Ｘ－Ｖｉｖｏ １５培地で３０分間、室温にてブロックした。そのカニクイザルＩＬＴ３発現レポーター細胞をＸ－Ｖｉｖｏ １５培地に再懸濁し（１．５ｘ１０６細胞／ｍＬ）、連続希釈の対照抗体または抗ＩＬＴ３抗体ｃｈ５Ａ７を含む培地と１：１比で混合した。その混合物を３０分間インキュベートし、その後１００μＬ／ウェルでプレートに播種した。次に、その混合物をプレートで終夜インキュベートした後、この細胞からのＮＦ－ｋＢレポーター活性を測定した。レポーター活性を測定するため、２５μＬの培養上清を１００μＬのＱｕａｎｔｉ－Ｂｌｕｅ ＳＥＡＰ基質と混合し、３７℃で２時間インキュベートした。吸光度を６２０ｎｍで読み取った。
図２２に示すように、抗ＩＬＴ３抗体（例えば、ｈｚ５Ａ７．ｖ５）は、ｃｙｎｏ ＩＬＴ３とフィブロネクチンとの間の相互作用を遮断することにより、ＴＨＰ－１におけるＮＦ－ｋＢレポーター活性のフィブロネクチンが媒介する阻害を逆転させた。
実施例１９
抗ＩＬＴ３抗体が初代カニクイザル樹状細胞に与える影響
単球を、凍結保存カニクイザルＰＢＭＣから正の選択により、非ヒト霊長類ＣＤ１４マイクロビーズ（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ Ｂｉｏｔｅｃ）を用いて単離し、ヒト単球由来樹状細胞（ＤＣ）に関して記載の通り、ヒトＧＭ－ＣＳＦ及びＩＬ－４との５日間の処理により、単球由来ＤＣに分化させた。Ｍａｘｉｓｏｒｐプレート（Ｎｕｎｃ）を、ＰＢＳまたはフィブロネクチン（５μｇ／ｍＬ）で室温にて１時間コーティングし、次いでＰＢＳで洗浄し、Ｘ－Ｖｉｖｏ １５培地（Ｌｏｎｚａ）で室温にて３０分間ブロックした。この樹状細胞を、２μｇ／ｍＬの抗ＫＬＨ（対照抗体）または抗ＩＬＴ３抗体ｃｈ５Ａ７の存在下、２ｘ１０５細胞／ウェルでプレーティングし、終夜培養した。細胞培地を２４時間後に回収し、ＭＩＰ－１α濃度をＰｒｏｃａｒｔａＰｌｅｘシステム（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を使用したＬｕｍｉｎｅｘアッセイによって測定した。図２３に示すように、フィブロネクチンは、カニクイザル単球由来のＤＣにおけるＭＩＰ－１α分泌を減少させ、この減少は、ｃｙｎｏ ＩＬＴ３とフィブロネクチンとの間の相互作用を遮断するｃｈ５Ａ７によって取り返された。
別の実験で、ＤＣを本明細書に記載の通り初代カニクイザル単球から生成した。Ｍａｘｉｓｏｒｐプレート（Ｎｕｎｃ）を、抗ＫＬＨ及びヒトフィブロネクチン（ＦＣ０１０１、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）（各５μｇ／ｍＬ）で室温にて１時間コーティングし、次いでＰＢＳで洗浄し、Ｘ－Ｖｉｖｏ １５培地で３０分間ブロックした。そのＤＣをＸ－Ｖｉｖｏ １５培地に再懸濁し、抗ＫＬＨまたは抗ＩＬＴ３ ｃｈ５Ａ７と室温で２０分間インキュベートした後、終夜培養のためコーティングしたウェルにプレーティングした（体積１００μＬ中、７ｘ１０４細胞／ウェル）。２４時間培養後、Ｌｕｍｉｎｅｘアッセイ（ＰｒｏｃａｒｔａＰｌｅｘシステム、ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を使用したＤＣによるＩＬ－８分泌の評価のため、その培養上清を回収した。図２４に示すように、フィブロネクチンは、カニクイザル単球由来のＤＣからのＩＬ－８分泌を減少させ、この減少は、ｃｙｎｏ ＩＬＴ３とフィブロネクチンとの間の相互作用を遮断するｃｈ５Ａ７によって取り返された。
実施例２０
ヒト化マウスモデルにおける抗ＩＬＴ３抗体の抗腫瘍活性
すべての動物処置は、動物実験委員会（ＩＡＣＵＣ）によって承認された動物実験プロトコル（ＮＧＭ－２７－２０１７）のもとで行った。ＮＣＩ－Ｈ２００９肺腺癌細胞（ＡＴＣＣ）を、１０％ＦＢＳ及び１％ペニシリン／ストレプトマイシンを含むＲＰＭＩ１６４０で増殖させた。ＮＳＧマウスの左脇腹に、３ｘ１０６個のＮＣＩ－Ｈ２００９腫瘍細胞を皮下注射した。腫瘍細胞の移植から７～１０日後、各マウスに４ｘ１０６個の初代ヒトＰＢＭＣを尾静脈から注射した。腫瘍の成長は、ノギスを使用して週２回測定した。腫瘍が体積約５０ｍｍ３に達した後、マウスを週２回、１０ｍｇ／ｋｇの対照抗ＫＬＨ抗体または抗ＩＬＴ３抗体４８Ａ６で腹腔内注射により処理した（合計３回）。腫瘍を週２回観察及び測定した。腫瘍が体積約２０００ｍｍ３に達した後、マウスを屠殺した。
図２５に示すように、抗ＩＬＴ３抗体４８Ａ６は、このマウスモデルで腫瘍成長を有意に阻害した。
前述の本開示は、理解を明確にする目的で例示及び実施例によって多少詳しく説明されているが、該説明及び実施例は、本開示の範囲を限定するものとして解釈されるべきではない。本明細書に記載の本開示の実施形態は、単に例示的なものであることが意図されており、当業者には、本明細書に記載の特定の手順に対する多くの均等物が認識されよう。すべてのかかる均等物は、本開示の範囲内であると見なされ、該実施形態に含まれる。
本明細書に引用されるすべての刊行物、特許、特許出願、インターネットサイト、ならびにポリヌクレオチド及びポリペプチド配列の両方を含めた受託番号／データベースの配列は、すべての目的のため、各刊行物、特許、特許出願、インターネットサイト、または受託番号／データベースの配列が、具体的にかつ個別にそのように参照により組み込まれると示されたものと同程度まで、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
以下は、本出願に開示される配列である。ＣＤＲ配列は、表１～４に記載されている。
Figure 2023507110000021
 予測シグナル配列を含まないヒトＩＬＴ３アミノ酸配列（配列番号２）
ＱＡＧＰＬＰＫＰＴＬＷＡＥＰＧＳＶＩＳＷＧＮＳＶＴＩＷＣＱＧＴＬＥＡＲＥＹＲＬＤＫＥＥＳＰＡＰＷＤＲＱＮＰＬＥＰＫＮＫＡＲＦＳＩＰＳＭＴＥＤＹＡＧＲＹＲＣＹＹＲＳＰＶＧＷＳＱＰＳＤＰＬＥＬＶＭＴＧＡＹＳＫＰＴＬＳＡＬＰＳＰＬＶＴＳＧＫＳＶＴＬＬＣＱＳＲＳＰＭＤＴＦＬＬＩＫＥＲＡＡＨＰＬＬＨＬＲＳＥＨＧＡＱＱＨＱＡＥＦＰＭＳＰＶＴＳＶＨＧＧＴＹＲＣＦＳＳＨＧＦＳＨＹＬＬＳＨＰＳＤＰＬＥＬＩＶＳＧＳＬＥＤＰＲＰＳＰＴＲＳＶＳＴＡＡＧＰＥＤＱＰＬＭＰＴＧＳＶＰＨＳＧＬＲＲＨＷＥＶＬＩＧＶＬＶＶＳＩＬＬＬＳＬＬＬＦＬＬＬＱＨＷＲＱＧＫＨＲＴＬＡＱＲＱＡＤＦＱＲＰＰＧＡＡＥＰＥＰＫＤＧＧＬＱＲＲＳＳＰＡＡＤＶＱＧＥＮＦＣＡＡＶＫＮＴＱＰＥＤＧＶＥＭＤＴＲＱＳＰＨＤＥＤＰＱＡＶＴＹＡＫＶＫＨＳＲＰＲＲＥＭＡＳＰＰＳＰＬＳＧＥＦＬＤＴＫＤＲＱＡＥＥＤＲＱＭＤＴＥＡＡＡＳＥＡＰＱＤＶＴＹＡＱＬＨＳＦＴＬＲＱＫＡＴＥＰＰＰＳＱＥＧＡＳＰＡＥＰＳＶＹＡＴＬＡＩＨ

ヒトＩＬＴ３細胞外ドメイン（ａａ２２～２５９）（配列番号３）
ＱＡＧＰＬＰＫＰＴＬＷＡＥＰＧＳＶＩＳＷＧＮＳＶＴＩＷＣＱＧＴＬＥＡＲＥＹＲＬＤＫＥＥＳＰＡＰＷＤＲＱＮＰＬＥＰＫＮＫＡＲＦＳＩＰＳＭＴＥＤＹＡＧＲＹＲＣＹＹＲＳＰＶＧＷＳＱＰＳＤＰＬＥＬＶＭＴＧＡＹＳＫＰＴＬＳＡＬＰＳＰＬＶＴＳＧＫＳＶＴＬＬＣＱＳＲＳＰＭＤＴＦＬＬＩＫＥＲＡＡＨＰＬＬＨＬＲＳＥＨＧＡＱＱＨＱＡＥＦＰＭＳＰＶＴＳＶＨＧＧＴＹＲＣＦＳＳＨＧＦＳＨＹＬＬＳＨＰＳＤＰＬＥＬＩＶＳＧＳＬＥＤＰＲＰＳＰＴＲＳＶＳＴＡＡＧＰＥＤＱＰＬＭＰＴＧＳＶＰＨＳＧＬＲＲＨＷＥ

Ｎ末端ドメインを含まないヒトＩＬＴ３Ｉｇ様Ｃ２型ドメイン１アミノ酸配列（ａａ２７～１１８）（配列番号４）
ＰＫＰＴＬＷＡＥＰＧＳＶＩＳＷＧＮＳＶＴＩＷＣＱＧＴＬＥＡＲＥＹＲＬＤＫＥＥＳＰＡＰＷＤＲＱＮＰＬＥＰＫＮＫＡＲＦＳＩＰＳＭＴＥＤＹＡＧＲＹＲＣＹＹＲＳＰＶＧＷＳＱＰＳＤＰＬＥＬＶＭＴ

ヒトＩＬＴ３Ｉｇ様Ｃ２型ドメイン２アミノ酸配列（ａａ１２４～２１８）（配列番号５）
ＰＴＬＳＡＬＰＳＰＬＶＴＳＧＫＳＶＴＬＬＣＱＳＲＳＰＭＤＴＦＬＬＩＫＥＲＡＡＨＰＬＬＨＬＲＳＥＨＧＡＱＱＨＱＡＥＦＰＭＳＰＶＴＳＶＨＧＧＴＹＲＣＦＳＳＨＧＦＳＨＹＬＬＳＨＰＳＤＰＬＥＬＩＶＳ

Figure 2023507110000022
 予測シグナル配列を含まないＣｙｎｏ ＩＬＴ３アミノ酸配列（配列番号７）
ＱＡＧＰＬＰＫＰＴＶＷＡＥＰＧＳＶＩＳＷＧＳＰＶＴＩＷＣＱＧＴＬＤＡＱＥＹＨＬＤＫＥＧＳＰＡＰＷＤＴＱＮＰＬＥＰＲＮＫＡＫＦＳＩＰＳＭＴＱＨＹＡＧＲＹＲＣＹＹＨＳＨＰＤＷＳＥＤＳＤＰＬＤＬＶＭＴＧＡＹＳＫＰＩＬＳＶＬＰＳＰＬＶＴＳＧＥＳＶＴＬＬＣＱＳＱＳＰＭＤＴＦＬＬＦＫＥＧＡＡＨＰＬＰＲＬＲＳＱＨＧＡＱＬＨＷＡＥＦＰＭＧＰＶＴＳＶＨＧＧＴＹＲＣＩＳＳＲＳＦＳＨＹＬＬＳＲＰＳＤＰＶＥＬＴＶＬＧＳＬＥＳＰＳＰＳＰＴＲＳＩＳＡＡＡＧＰＥＤＱＳＬＭＰＴＧＳＤＰＱＳＧＬＲＲＨＷＥＶＬＩＧＶＬＶＶＳＩＬＬＬＳＬＶＦＦＬＬＬＱＨＷＲＱＧＫＨＲＴＳＡＱＲＱＡＤＦＱＲＰＰＧＡＡＥＰＥＰＫＤＧＧＬＱＲＲＳＲＰＡＡＤＶＱＧＥＮＰＮＡＡＭＫＤＴＱＰＥＤＧＶＥＬＤＳＲＱＲＰＨＤＥＤＰＱＡＶＴＹＡＲＶＫＨＳＧＰＲＲＥＭＡＳＰＰＳＰＬＳＥＥＦＬＤＴＫＤＴＱＡＥＥＤＲＱＭＤＴＱＡＡＴＳＥＡＰＱＤＶＴＹＡＱＬＱＳＬＴＬＲＲＥＡＴＥＰＰＰＰＱＫＲＥＰＳＡＥＰＳＶＹＡＴＬＡＩＨ

Ｃｙｎｏ ＩＬＴ３細胞外ドメイン（ａａ２２～２５９）（配列番号８）
ＱＡＧＰＬＰＫＰＴＶＷＡＥＰＧＳＶＩＳＷＧＳＰＶＴＩＷＣＱＧＴＬＤＡＱＥＹＨＬＤＫＥＧＳＰＡＰＷＤＴＱＮＰＬＥＰＲＮＫＡＫＦＳＩＰＳＭＴＱＨＹＡＧＲＹＲＣＹＹＨＳＨＰＤＷＳＥＤＳＤＰＬＤＬＶＭＴＧＡＹＳＫＰＩＬＳＶＬＰＳＰＬＶＴＳＧＥＳＶＴＬＬＣＱＳＱＳＰＭＤＴＦＬＬＦＫＥＧＡＡＨＰＬＰＲＬＲＳＱＨＧＡＱＬＨＷＡＥＦＰＭＧＰＶＴＳＶＨＧＧＴＹＲＣＩＳＳＲＳＦＳＨＹＬＬＳＲＰＳＤＰＶＥＬＴＶＬＧＳＬＥＳＰＳＰＳＰＴＲＳＩＳＡＡＡＧＰＥＤＱＳＬＭＰＴＧＳＤＰＱＳＧＬＲＲＨＷＥ

Ｎ末端ドメインを含まないＣｙｎｏ ＩＬＴ３Ｉｇ様Ｃ２型ドメイン１アミノ酸配列（ａａ２７～１１８）（配列番号９）
ＰＫＰＴＶＷＡＥＰＧＳＶＩＳＷＧＳＰＶＴＩＷＣＱＧＴＬＤＡＱＥＹＨＬＤＫＥＧＳＰＡＰＷＤＴＱＮＰＬＥＰＲＮＫＡＫＦＳＩＰＳＭＴＱＨＹＡＧＲＹＲＣＹＹＨＳＨＰＤＷＳＥＤＳＤＰＬＤＬＶＭＴ

Ｎ末端ドメインを含まないＣｙｎｏ ＩＬＴ３Ｉｇ様Ｃ２型ドメイン２アミノ酸配列（ａａ１２４～２１８）（配列番号１０）
ＰＩＬＳＶＬＰＳＰＬＶＴＳＧＥＳＶＴＬＬＣＱＳＱＳＰＭＤＴＦＬＬＦＫＥＧＡＡＨＰＬＰＲＬＲＳＱＨＧＡＱＬＨＷＡＥＦＰＭＧＰＶＴＳＶＨＧＧＴＹＲＣＩＳＳＲＳＦＳＨＹＬＬＳＲＰＳＤＰＶＥＬＴＶＬ

３Ａ３重鎖可変領域アミノ酸配列（配列番号１０９）
ＱＶＱＬＫＥＳＧＰＧＬＶＡＰＳＱＳＬＳＩＴＣＴＶＳＧＦＳＬＴＳＹＧＶＨＷＶＲＱＰＰＧＫＧＬＥＷＬＧＶＩＷＰＧＧＴＩＮＹＮＳＡＬＭＳＲＬＳＩＳＫＤＮＳＫＳＱＶＦＬＫＬＮＳＬＱＴＤＤＴＡＭＹＹＣＡＳＤＫＹＤＧＧＷＦＡＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＡ

３Ａ３軽鎖可変領域アミノ酸配列（配列番号１１０）
ＤＩＶＭＴＱＳＱＫＦＭＳＴＳＶＧＤＲＶＳＩＴＣＫＡＳＱＮＶＲＴＡＶＡＷＹＱＱＫＰＧＱＳＰＥＡＬＩＹＬＡＳＮＲＨＴＧＶＰＤＲＦＴＧＳＧＳＧＴＤＦＳＬＳＩＳＮＶＱＳＥＤＬＡＤＹＦＣＬＱＨＬＮＹＰＬＴＦＧＳＧＴＫＬＥＩＫ

５Ａ７重鎖可変領域アミノ酸配列（配列番号１１１）
ＥＶＫＬＶＥＳＧＧＧＬＶＫＰＧＧＳＬＫＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＳＹＧＭＳＷＶＲＱＴＰＥＫＲＬＥＷＶＡＴＩＳＧＧＧＳＹＴＮＹＰＤＳＶＫＧＲＬＴＩＳＲＤＮＡＫＫＮＬＹＬＥＭＳＳＬＲＳＥＤＴＡＬＹＹＣＡＲＲＥＷＲＭＴＬＹＡＭＤＹＷＧＱＧＴＳＶＴＶＳＳ

５Ａ７軽鎖可変領域アミノ酸配列（配列番号１１２）
ＮＩＶＬＴＱＳＰＡＳＬＡＶＳＬＧＱＲＡＴＩＳＣＲＡＳＥＳＶＤＳＹＧＮＳＦＭＨＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＫＬＬＩＹＬＴＳＮＬＥＳＧＶＰＡＲＦＳＧＳＧＳＲＴＤＦＴＬＴＩＤＰＶＥＡＤＤＡＡＴＹＹＣＱＱＮＮＥＤＰＦＴＦＧＳＧＴＫＬＥＩＫ

１２Ａ１２重鎖可変領域アミノ酸配列（配列番号１１３）
ＥＶＱＬＱＱＳＧＰＥＬＶＫＰＧＡＳＶＫＩＳＣＫＡＳＧＹＴＦＴＤＹＮＭＤＷＶＫＱＳＨＧＫＳＬＥＷＩＧＹＩＹＰＮＮＧＧＴＧＹＮＱＫＦＮＳＫＡＴＬＴＶＤＫＳＳＳＴＡＹＭＥＬＨＳＬＴＳＥＤＳＡＶＹＹＣＡＳＳＰＹＹＤＹＶＧＳＹＡＭＤＹＷＧＱＧＴＳＶＴＶＳＳ

１２Ａ１２軽鎖可変領域アミノ酸配列（配列番号１１４）
ＱＩＶＬＴＱＳＰＡＩＭＳＡＳＬＧＥＲＶＴＭＴＣＴＡＳＳＳＶＳＳＳＹＬＨＷＹＱＱＫＰＧＳＳＰＫＬＷＩＹＳＴＳＮＬＡＳＧＶＰＡＲＦＳＧＳＧＳＧＴＳＹＳＬＴＩＳＳＭＥＡＥＤＡＡＴＹＹＣＨＱＹＨＲＳＰＲＴＦＧＧＧＴＫＬＥＩＫ

１６Ｃ５重鎖可変領域アミノ酸配列（配列番号１１５）
ＥＶＱＬＱＱＳＧＰＥＬＶＫＰＧＡＳＶＫＩＳＣＫＡＳＧＹＴＦＴＤＹＮＭＤＷＶＫＱＳＨＧＫＳＬＥＷＩＧＹＩＹＰＳＮＧＧＴＧＹＮＱＫＦＫＳＫＡＴＬＴＶＤＫＳＳＮＴＡＹＭＥＬＨＳＬＴＳＥＤＳＡＶＹＹＣＡＲＶＰＹＹＤＹＬＹＹＹＡＭＤＹＷＧＱＧＴＳＶＴＶＳＳ

１６Ｃ５軽鎖可変領域アミノ酸配列（配列番号１１６）
ＱＩＶＬＳＱＳＰＡＩＬＳＡＳＰＧＥＫＶＴＭＡＣＲＡＳＳＳＶＳＦＭＨＷＹＱＱＫＰＧＳＳＰＱＰＷＩＹＡＴＳＮＬＡＳＧＶＰＡＲＦＳＧＳＧＳＧＴＳＹＳＬＴＩＳＲＶＥＡＥＤＡＡＴＹＹＣＱＱＷＳＴＮＰＹＭＹＴＦＧＧＧＴＫＬＥＩＫ
４５Ｇ１０重鎖可変領域アミノ酸配列（配列番号１１７）
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＫＰＧＧＳＬＫＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＤＹＧＭＨＷＶＲＱＡＰＥＫＧＬＥＷＶＡＹＩＦＳＧＳＳＴＩＹＹＡＤＴＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＴＬＦＬＱＭＴＳＬＲＳＥＤＴＡＭＹＹＣＡＲＡＤＧＲＧＡＭＤＹＷＧＱＧＴＳＶＴＶＳＳ

４５Ｇ１０軽鎖可変領域アミノ酸配列（配列番号１１８）
ＤＶＱＭＴＱＴＴＳＳＬＳＡＳＬＧＤＲＶＴＩＳＣＲＡＳＱＤＩＳＫＦＬＮＷＹＱＱＫＰＤＧＴＶＴＬＬＩＹＹＴＳＲＬＨＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＹＳＬＴＩＳＮＬＤＱＥＤＩＡＴＹＦＣＱＱＧＮＴＬＰＷＴＦＧＧＧＴＫＬＥＩＫ

４８Ａ６重鎖可変領域アミノ酸配列（配列番号１１９）
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＤＬＭＫＰＧＧＳＬＫＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＳＹＧＭＳＷＶＲＱＴＰＤＫＲＬＥＷＶＡＴＩＳＳＧＧＴＹＴＦＹＰＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＴＬＹＬＱＭＳＳＬＫＳＥＤＴＡＭＹＹＣＡＲＲＧＷＬＬＨＹＹＡＭＤＹＷＧＱＧＴＳＶＴＶＳＳ

４８Ａ６軽鎖可変領域アミノ酸配列（配列番号１２０）
ＮＩＶＬＴＱＳＰＡＳＬＡＶＳＬＧＱＲＡＴＩＳＣＲＰＳＥＳＶＤＳＦＧＮＳＦＭＨＷＦＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＹＬＳＳＫＬＥＳＧＶＰＡＲＦＳＧＳＧＳＲＴＤＦＴＬＴＩＤＰＶＥＡＤＤＡＡＴＹＹＣＱＱＨＮＥＤＰＦＴＦＧＳＧＴＫＬＥＩＫ

５３Ｆ１０重鎖可変領域アミノ酸配列（配列番号１２１）
ＥＶＱＶＶＥＳＧＧＧＬＶＫＰＧＧＳＬＫＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＤＹＧＭＨＷＶＲＱＡＰＥＫＧＬＥＷＶＡＹＩＳＴＧＩＩＴＶＹＹＡＤＴＶＫＧＲＦＴＭＳＲＤＮＡＫＮＴＬＦＬＱＭＴＳＬＲＳＥＤＴＡＩＹＹＣＡＲＡＤＧＲＧＡＭＤＹＷＧＱＧＴＳＶＩＶＳＳ

５３Ｆ１０軽鎖可変領域アミノ酸配列（配列番号１２２）
ＤＩＱＭＴＱＴＴＳＳＬＳＡＳＬＧＤＲＶＴＩＳＣＲＡＳＱＤＩＳＮＦＬＮＷＹＱＱＫＰＤＧＴＶＴＬＬＩＹＹＴＳＲＬＨＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＹＳＬＴＩＳＮＬＥＱＥＤＦＡＴＹＦＣＱＱＧＮＴＬＰＷＴＦＧＧＧＴＫＬＥＩＫ
Ｈｚ５Ａ７．ｖ５重鎖可変領域アミノ酸配列（配列番号１２３）
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＳＹＧＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＴＩＳＧＧＧＳＹＴＮＹＰＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＳＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＲＥＷＲＹＴＬＹＡＭＤＹＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳ

Ｈｚ５Ａ７．ｖ５軽鎖可変領域アミノ酸配列（配列番号１２４）
ＤＩＱＬＴＱＳＰＳＦＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＥＳＶＥＳＹＧＳＳＦＭＨＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＬＴＳＮＬＥＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＥＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＮＮＥＤＰＦＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫ
Figure 2023507110000023
 シグナル配列を含まないＨｚ５Ａ７．ｖ５重鎖アミノ酸配列（配列番号１２６）
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＳＹＧＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＴＩＳＧＧＧＳＹＴＮＹＰＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＳＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＲＥＷＲＹＴＬＹＡＭＤＹＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＫＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＧＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ

Figure 2023507110000024
 シグナル配列を含まないＨｚ５Ａ７．ｖ５軽鎖アミノ酸配列（配列番号１２８）
ＤＩＱＬＴＱＳＰＳＦＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＥＳＶＥＳＹＧＳＳＦＭＨＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＬＴＳＮＬＥＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＥＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＮＮＥＤＰＦＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ

ヒトＩｇＧ１定常領域（配列番号１２９）
ＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＫＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ

ヒトＩｇＧ１定常領域Ｅ２３３Ａ／Ｌ２３５Ａ（配列番号１３０）
ＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＫＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＡＬＡＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ

ヒトＩｇＧ１定常領域Ｌ２３４Ａ／Ｌ２３５Ａ（配列番号１３１）
ＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＫＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＡＡＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ

ヒトＩｇＧ１定常領域Ｌ２３４Ａ／Ｌ２３５Ａ／Ｐ３２９Ｇ（配列番号１３２）
ＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＫＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＡＡＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＧＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ

ヒトＩｇＧ１定常領域Ｎ２９７Ｇ（配列番号１３３）
ＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＫＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＧＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ

ヒトＩｇＧ１定常領域Ｎ２９７Ｇ／Ｈ３１０Ａ（配列番号１３４）
ＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＫＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＧＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＡＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ

ヒトカッパ軽鎖定常領域（配列番号１３５）
ＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ

ヒトラムダ軽鎖定常領域（配列番号１３６）
ＧＱＰＫＡＡＰＳＶＴＬＦＰＰＳＳＥＥＬＱＡＮＫＡＴＬＶＣＬＩＳＤＦＹＰＧＡＶＴＶＡＷＫＡＤＳＳＰＶＫＡＧＶＥＴＴＴＰＳＫＱＳＮＮＫＹＡＡＳＳＹＬＳＬＴＰＥＱＷＫＳＨＲＳＹＳＣＱＶＴＨＥＧＳＴＶＥＫＴＶＡＰＴＥＣＳ

Ｎ末端ドメインを含まないヒトＩＬＴ３Ｉｇ様Ｃ２型Ｄ１及びＤ２アミノ酸配列（ａａ２７～２１８）（配列番号１３７）
ＱＡＧＰＬＰＫＰＴＬＷＡＥＰＧＳＶＩＳＷＧＮＳＶＴＩＷＣＱＧＴＬＥＡＲＥＹＲＬＤＫＥＥＳＰＡＰＷＤＲＱＮＰＬＥＰＫＮＫＡＲＦＳＩＰＳＭＴＥＤＹＡＧＲＹＲＣＹＹＲＳＰＶＧＷＳＱＰＳＤＰＬＥＬＶＭＴＧＡＹＳＫＰＴＬＳＡＬＰＳＰＬＶＴＳＧＫＳＶＴＬＬＣＱＳＲＳＰＭＤＴＦＬＬＩＫＥＲＡＡＨＰＬＬＨＬＲＳＥＨＧＡＱＱＨＱＡＥＦＰＭＳＰＶＴＳＶＨＧＧＴＹＲＣＦＳＳＨＧＦＳＨＹＬＬＳＨＰＳＤＰＬＥＬＩＶＳ
Figure 2023507110000025
Figure 2023507110000026
予測シグナル配列を含むヒトフィブロネクチン（配列番号１３９）
ＱＡＱＱＭＶＱＰＱＳＰＶＡＶＳＱＳＫＰＧＣＹＤＮＧＫＨＹＱＩＮＱＱＷＥＲＴＹＬＧＮＡＬＶＣＴＣＹＧＧＳＲＧＦＮＣＥＳＫＰＥＡＥＥＴＣＦＤＫＹＴＧＮＴＹＲＶＧＤＴＹＥＲＰＫＤＳＭＩＷＤＣＴＣＩＧＡＧＲＧＲＩＳＣＴＩＡＮＲＣＨＥＧＧＱＳＹＫＩＧＤＴＷＲＲＰＨＥＴＧＧＹＭＬＥＣＶＣＬＧＮＧＫＧＥＷＴＣＫＰＩＡＥＫＣＦＤＨＡＡＧＴＳＹＶＶＧＥＴＷＥＫＰＹＱＧＷＭＭＶＤＣＴＣＬＧＥＧＳＧＲＩＴＣＴＳＲＮＲＣＮＤＱＤＴＲＴＳＹＲＩＧＤＴＷＳＫＫＤＮＲＧＮＬＬＱＣＩＣＴＧＮＧＲＧＥＷＫＣＥＲＨＴＳＶＱＴＴＳＳＧＳＧＰＦＴＤＶＲＡＡＶＹＱＰＱＰＨＰＱＰＰＰＹＧＨＣＶＴＤＳＧＶＶＹＳＶＧＭＱＷＬＫＴＱＧＮＫＱＭＬＣＴＣＬＧＮＧＶＳＣＱＥＴＡＶＴＱＴＹＧＧＮＳＮＧＥＰＣＶＬＰＦＴＹＮＧＲＴＦＹＳＣＴＴＥＧＲＱＤＧＨＬＷＣＳＴＴＳＮＹＥＱＤＱＫＹＳＦＣＴＤＨＴＶＬＶＱＴＲＧＧＮＳＮＧＡＬＣＨＦＰＦＬＹＮＮＨＮＹＴＤＣＴＳＥＧＲＲＤＮＭＫＷＣＧＴＴＱＮＹＤＡＤＱＫＦＧＦＣＰＭＡＡＨＥＥＩＣＴＴＮＥＧＶＭＹＲＩＧＤＱＷＤＫＱＨＤＭＧＨＭＭＲＣＴＣＶＧＮＧＲＧＥＷＴＣＩＡＹＳＱＬＲＤＱＣＩＶＤＤＩＴＹＮＶＮＤＴＦＨＫＲＨＥＥＧＨＭＬＮＣＴＣＦＧＱＧＲＧＲＷＫＣＤＰＶＤＱＣＱＤＳＥＴＧＴＦＹＱＩＧＤＳＷＥＫＹＶＨＧＶＲＹＱＣＹＣＹＧＲＧＩＧＥＷＨＣＱＰＬＱＴＹＰＳＳＳＧＰＶＥＶＦＩＴＥＴＰＳＱＰＮＳＨＰＩＱＷＮＡＰＱＰＳＨＩＳＫＹＩＬＲＷＲＰＫＮＳＶＧＲＷＫＥＡＴＩＰＧＨＬＮＳＹＴＩＫＧＬＫＰＧＶＶＹＥＧＱＬＩＳＩＱＱＹＧＨＱＥＶＴＲＦＤＦＴＴＴＳＴＳＴＰＶＴＳＮＴＶＴＧＥＴＴＰＦＳＰＬＶＡＴＳＥＳＶＴＥＩＴＡＳＳＦＶＶＳＷＶＳＡＳＤＴＶＳＧＦＲＶＥＹＥＬＳＥＥＧＤＥＰＱＹＬＤＬＰＳＴＡＴＳＶＮＩＰＤＬＬＰＧＲＫＹＩＶＮＶＹＱＩＳＥＤＧＥＱＳＬＩＬＳＴＳＱＴＴＡＰＤＡＰＰＤＴＴＶＤＱＶＤＤＴＳＩＶＶＲＷＳＲＰＱＡＰＩＴＧＹＲＩＶＹＳＰＳＶＥＧＳＳＴＥＬＮＬＰＥＴＡＮＳＶＴＬＳＤＬＱＰＧＶＱＹＮＩＴＩＹＡＶＥＥＮＱＥＳＴＰＶＶＩＱＱＥＴＴＧＴＰＲＳＤＴＶＰＳＰＲＤＬＱＦＶＥＶＴＤＶＫＶＴＩＭＷＴＰＰＥＳＡＶＴＧＹＲＶＤＶＩＰＶＮＬＰＧＥＨＧＱＲＬＰＩＳＲＮＴＦＡＥＶＴＧＬＳＰＧＶＴＹＹＦＫＶＦＡＶＳＨＧＲＥＳＫＰＬＴＡＱＱＴＴＫＬＤＡＰＴＮＬＱＦＶＮＥＴＤＳＴＶＬＶＲＷＴＰＰＲＡＱＩＴＧＹＲＬＴＶＧＬＴＲＲＧＱＰＲＱＹＮＶＧＰＳＶＳＫＹＰＬＲＮＬＱＰＡＳＥＹＴＶＳＬＶＡＩＫＧＮＱＥＳＰＫＡＴＧＶＦＴＴＬＱＰＧＳＳＩＰＰＹＮＴＥＶＴＥＴＴＩＶＩＴＷＴＰＡＰＲＩＧＦＫＬＧＶＲＰＳＱＧＧＥＡＰＲＥＶＴＳＤＳＧＳＩＶＶＳＧＬＴＰＧＶＥＹＶＹＴＩＱＶＬＲＤＧＱＥＲＤＡＰＩＶＮＫＶＶＴＰＬＳＰＰＴＮＬＨＬＥＡＮＰＤＴＧＶＬＴＶＳＷＥＲＳＴＴＰＤＩＴＧＹＲＩＴＴＴＰＴＮＧＱＱＧＮＳＬＥＥＶＶＨＡＤＱＳＳＣＴＦＤＮＬＳＰＧＬＥＹＮＶＳＶＹＴＶＫＤＤＫＥＳＶＰＩＳＤＴＩＩＰＥＶＰＱＬＴＤＬＳＦＶＤＩＴＤＳＳＩＧＬＲＷＴＰＬＮＳＳＴＩＩＧＹＲＩＴＶＶＡＡＧＥＧＩＰＩＦＥＤＦＶＤＳＳＶＧＹＹＴＶＴＧＬＥＰＧＩＤＹＤＩＳＶＩＴＬＩＮＧＧＥＳＡＰＴＴＬＴＱＱＴＡＶＰＰＰＴＤＬＲＦＴＮＩＧＰＤＴＭＲＶＴＷＡＰＰＰＳＩＤＬＴＮＦＬＶＲＹＳＰＶＫＮＥＥＤＶＡＥＬＳＩＳＰＳＤＮＡＶＶＬＴＮＬＬＰＧＴＥＹＶＶＳＶＳＳＶＹＥＱＨＥＳＴＰＬＲＧＲＱＫＴＧＬＤＳＰＴＧＩＤＦＳＤＩＴＡＮＳＦＴＶＨＷＩＡＰＲＡＴＩＴＧＹＲＩＲＨＨＰＥＨＦＳＧＲＰＲＥＤＲＶＰＨＳＲＮＳＩＴＬＴＮＬＴＰＧＴＥＹＶＶＳＩＶＡＬＮＧＲＥＥＳＰＬＬＩＧＱＱＳＴＶＳＤＶＰＲＤＬＥＶＶＡＡＴＰＴＳＬＬＩＳＷＤＡＰＡＶＴＶＲＹＹＲＩＴＹＧＥＴＧＧＮＳＰＶＱＥＦＴＶＰＧＳＫＳＴＡＴＩＳＧＬＫＰＧＶＤＹＴＩＴＶＹＡＶＴＧＲＧＤＳＰＡＳＳＫＰＩＳＩＮＹＲＴＥＩＤＫＰＳＱＭＱＶＴＤＶＱＤＮＳＩＳＶＫＷＬＰＳＳＳＰＶＴＧＹＲＶＴＴＴＰＫＮＧＰＧＰＴＫＴＫＴＡＧＰＤＱＴＥＭＴＩＥＧＬＱＰＴＶＥＹＶＶＳＶＹＡＱＮＰＳＧＥＳＱＰＬＶＱＴＡＶＴＮＩＤＲＰＫＧＬＡＦＴＤＶＤＶＤＳＩＫＩＡＷＥＳＰＱＧＱＶＳＲＹＲＶＴＹＳＳＰＥＤＧＩＨＥＬＦＰＡＰＤＧＥＥＤＴＡＥＬＱＧＬＲＰＧＳＥＹＴＶＳＶＶＡＬＨＤＤＭＥＳＱＰＬＩＧＴＱＳＴＡＩＰＡＰＴＤＬＫＦＴＱＶＴＰＴＳＬＳＡＱＷＴＰＰＮＶＱＬＴＧＹＲＶＲＶＴＰＫＥＫＴＧＰＭＫＥＩＮＬＡＰＤＳＳＳＶＶＶＳＧＬＭＶＡＴＫＹＥＶＳＶＹＡＬＫＤＴＬＴＳＲＰＡＱＧＶＶＴＴＬＥＮＶＳＰＰＲＲＡＲＶＴＤＡＴＥＴＴＩＴＩＳＷＲＴＫＴＥＴＩＴＧＦＱＶＤＡＶＰＡＮＧＱＴＰＩＱＲＴＩＫＰＤＶＲＳＹＴＩＴＧＬＱＰＧＴＤＹＫＩＹＬＹＴＬＮＤＮＡＲＳＳＰＶＶＩＤＡＳＴＡＩＤＡＰＳＮＬＲＦＬＡＴＴＰＮＳＬＬＶＳＷＱＰＰＲＡＲＩＴＧＹＩＩＫＹＥＫＰＧＳＰＰＲＥＶＶＰＲＰＲＰＧＶＴＥＡＴＩＴＧＬＥＰＧＴＥＹＴＩＹＶＩＡＬＫＮＮＱＫＳＥＰＬＩＧＲＫＫＴＤＥＬＰＱＬＶＴＬＰＨＰＮＬＨＧＰＥＩＬＤＶＰＳＴＶＱＫＴＰＦＶＴＨＰＧＹＤＴＧＮＧＩＱＬＰＧＴＳＧＱＱＰＳＶＧＱＱＭＩＦＥＥＨＧＦＲＲＴＴＰＰＴＴＡＴＰＩＲＨＲＰＲＰＹＰＰＮＶＧＥＥＩＱＩＧＨＩＰＲＥＤＶＤＹＨＬＹＰＨＧＰＧＬＮＰＮＡＳＴＧＱＥＡＬＳＱＴＴＩＳＷＡＰＦＱＤＴＳＥＹＩＩＳＣＨＰＶＧＴＤＥＥＰＬＱＦＲＶＰＧＴＳＴＳＡＴＬＴＧＬＴＲＧＡＴＹＮＶＩＶＥＡＬＫＤＱＱＲＨＫＶＲＥＥＶＶＴＶＧＮＳＶＮＥＧＬＮＱＰＴＤＤＳＣＦＤＰＹＴＶＳＨＹＡＶＧＤＥＷＥＲＭＳＥＳＧＦＫＬＬＣＱＣＬＧＦＧＳＧＨＦＲＣＤＳＳＲＷＣＨＤＮＧＶＮＹＫＩＧＥＫＷＤＲＱＧＥＮＧＱＭＭＳＣＴＣＬＧＮＧＫＧＥＦＫＣＤＰＨＥＡＴＣＹＤＤＧＫＴＹＨＶＧＥＱＷＱＫＥＹＬＧＡＩＣＳＣＴＣＦＧＧＱＲＧＷＲＣＤＮＣＲＲＰＧＧＥＰＳＰＥＧＴＴＧＱＳＹＮＱＹＳＱＲＹＨＱＲＴＮＴＮＶＮＣＰＩＥＣＦＭＰＬＤＶＱＡＤＲＥＤＳＲＥ

ヘパリン結合ドメイン及びコラーゲン結合ドメインを含むヒトフィブロネクチン断片（約７０ｋＤａ断片）（配列番号１４０）
ＱＡＱＱＭＶＱＰＱＳＰＶＡＶＳＱＳＫＰＧＣＹＤＮＧＫＨＹＱＩＮＱＱＷＥＲＴＹＬＧＮＡＬＶＣＴＣＹＧＧＳＲＧＦＮＣＥＳＫＰＥＡＥＥＴＣＦＤＫＹＴＧＮＴＹＲＶＧＤＴＹＥＲＰＫＤＳＭＩＷＤＣＴＣＩＧＡＧＲＧＲＩＳＣＴＩＡＮＲＣＨＥＧＧＱＳＹＫＩＧＤＴＷＲＲＰＨＥＴＧＧＹＭＬＥＣＶＣＬＧＮＧＫＧＥＷＴＣＫＰＩＡＥＫＣＦＤＨＡＡＧＴＳＹＶＶＧＥＴＷＥＫＰＹＱＧＷＭＭＶＤＣＴＣＬＧＥＧＳＧＲＩＴＣＴＳＲＮＲＣＮＤＱＤＴＲＴＳＹＲＩＧＤＴＷＳＫＫＤＮＲＧＮＬＬＱＣＩＣＴＧＮＧＲＧＥＷＫＣＥＲＨＴＳＶＱＴＴＳＳＧＳＧＰＦＴＤＶＲＡＡＶＹＱＰＱＰＨＰＱＰＰＰＹＧＨＣＶＴＤＳＧＶＶＹＳＶＧＭＱＷＬＫＴＱＧＮＫＱＭＬＣＴＣＬＧＮＧＶＳＣＱＥＴＡＶＴＱＴＹＧＧＮＳＮＧＥＰＣＶＬＰＦＴＹＮＧＲＴＦＹＳＣＴＴＥＧＲＱＤＧＨＬＷＣＳＴＴＳＮＹＥＱＤＱＫＹＳＦＣＴＤＨＴＶＬＶＱＴＲＧＧＮＳＮＧＡＬＣＨＦＰＦＬＹＮＮＨＮＹＴＤＣＴＳＥＧＲＲＤＮＭＫＷＣＧＴＴＱＮＹＤＡＤＱＫＦＧＦＣＰＭＡＡＨＥＥＩＣＴＴＮＥＧＶＭＹＲＩＧＤＱＷＤＫＱＨＤＭＧＨＭＭＲＣＴＣＶＧＮＧＲＧＥＷＴＣＩＡＹＳＱＬＲＤＱＣＩＶＤＤＩＴＹＮＶＮＤＴＦＨＫＲＨＥＥＧＨＭＬＮＣＴＣＦＧＱＧＲＧＲＷＫＣＤＰＶＤＱＣＱＤＳＥＴＧＴＦＹＱＩＧＤＳＷＥＫＹＶＨＧＶＲＹＱＣＹＣＹＧＲＧＩＧＥＷＨＣＱＰＬＱＴＹＰＳＳ

ヘパリン結合ドメインを含むヒトフィブロネクチン断片（約３０ｋＤａ断片）（配列番号１４１）
ＱＡＱＱＭＶＱＰＱＳＰＶＡＶＳＱＳＫＰＧＣＹＤＮＧＫＨＹＱＩＮＱＱＷＥＲＴＹＬＧＮＡＬＶＣＴＣＹＧＧＳＲＧＦＮＣＥＳＫＰＥＡＥＥＴＣＦＤＫＹＴＧＮＴＹＲＶＧＤＴＹＥＲＰＫＤＳＭＩＷＤＣＴＣＩＧＡＧＲＧＲＩＳＣＴＩＡＮＲＣＨＥＧＧＱＳＹＫＩＧＤＴＷＲＲＰＨＥＴＧＧＹＭＬＥＣＶＣＬＧＮＧＫＧＥＷＴＣＫＰＩＡＥＫＣＦＤＨＡＡＧＴＳＹＶＶＧＥＴＷＥＫＰＹＱＧＷＭＭＶＤＣＴＣＬＧＥＧＳＧＲＩＴＣＴＳＲＮＲＣＮＤＱＤＴＲＴＳＹＲＩＧＤＴＷＳＫＫＤＮＲＧＮＬＬＱＣＩＣＴＧＮＧＲＧＥＷＫＣＥＲ

コラーゲン結合ドメインを含むヒトフィブロネクチン断片（約４５ｋＤａ断片）（配列番号１４２）
ＨＴＳＶＱＴＴＳＳＧＳＧＰＦＴＤＶＲＡＡＶＹＱＰＱＰＨＰＱＰＰＰＹＧＨＣＶＴＤＳＧＶＶＹＳＶＧＭＱＷＬＫＴＱＧＮＫＱＭＬＣＴＣＬＧＮＧＶＳＣＱＥＴＡＶＴＱＴＹＧＧＮＳＮＧＥＰＣＶＬＰＦＴＹＮＧＲＴＦＹＳＣＴＴＥＧＲＱＤＧＨＬＷＣＳＴＴＳＮＹＥＱＤＱＫＹＳＦＣＴＤＨＴＶＬＶＱＴＲＧＧＮＳＮＧＡＬＣＨＦＰＦＬＹＮＮＨＮＹＴＤＣＴＳＥＧＲＲＤＮＭＫＷＣＧＴＴＱＮＹＤＡＤＱＫＦＧＦＣＰＭＡＡＨＥＥＩＣＴＴＮＥＧＶＭＹＲＩＧＤＱＷＤＫＱＨＤＭＧＨＭＭＲＣＴＣＶＧＮＧＲＧＥＷＴＣＩＡＹＳＱＬＲＤＱＣＩＶＤＤＩＴＹＮＶＮＤＴＦＨＫＲＨＥＥＧＨＭＬＮＣＴＣＦＧＱＧＲＧＲＷＫＣＤＰＶＤＱＣＱＤＳＥＴＧＴＦＹＱＩＧＤＳＷＥＫＹＶＨＧＶＲＹＱＣＹＣＹＧＲＧＩＧＥＷＨＣＱＰＬＱＴＹＰＳＳ

Ｉ型リピート１を含むヒトフィブロネクチン断片（配列番号１４３）
ＰＧＣＹＤＮＧＫＨＹＱＩＮＱＱＷＥＲＴＹＬＧＮＡＬＶＣＴＣＹＧＧＳＲＧＦＮＣＥＳＫＰＥＡ

Ｉ型リピート２を含むヒトフィブロネクチン断片（配列番号１４４）
ＥＴＣＦＤＫＹＴＧＮＴＹＲＶＧＤＴＹＥＲＰＫＤＳＭＩＷＤＣＴＣＩＧＡＧＲＧＲＩＳＣＴＩＡ

Ｉ型リピート３を含むヒトフィブロネクチン断片（配列番号１４５）
ＮＲＣＨＥＧＧＱＳＹＫＩＧＤＴＷＲＲＰＨＥＴＧＧＹＭＬＥＣＶＣＬＧＮＧＫＧＥＷＴＣＫＰＩ

Ｉ型リピート４を含むヒトフィブロネクチン断片（配列番号１４６）
ＡＥＫＣＦＤＨＡＡＧＴＳＹＶＶＧＥＴＷＥＫＰＹＱＧＷＭＭＶＤＣＴＣＬＧＥＧＳＧＲＩＴＣＴＳＲ

Ｉ型リピート５を含むヒトフィブロネクチン断片（配列番号１４７）
ＮＲＣＮＤＱＤＴＲＴＳＹＲＩＧＤＴＷＳＫＫＤＮＲＧＮＬＬＱＣＩＣＴＧＮＧＲＧＥＷＫＣＥＲＨ
Figure 2023507110000027
 予測シグナル配列を含まないヒトＣＮＴＦＲ－アルファ（配列番号１４９）
ＱＲＨＳＰＱＥＡＰＨＶＱＹＥＲＬＧＳＤＶＴＬＰＣＧＴＡＮＷＤＡＡＶＴＷＲＶＮＧＴＤＬＡＰＤＬＬＮＧＳＱＬＶＬＨＧＬＥＬＧＨＳＧＬＹＡＣＦＨＲＤＳＷＨＬＲＨＱＶＬＬＨＶＧＬＰＰＲＥＰＶＬＳＣＲＳＮＴＹＰＫＧＦＹＣＳＷＨＬＰＴＰＴＹＩＰＮＴＦＮＶＴＶＬＨＧＳＫＩＭＶＣＥＫＤＰＡＬＫＮＲＣＨＩＲＹＭＨＬＦＳＴＩＫＹＫＶＳＩＳＶＳＮＡＬＧＨＮＡＴＡＩＴＦＤＥＦＴＩＶＫＰＤＰＰＥＮＶＶＡＲＰＶＰＳＮＰＲＲＬＥＶＴＷＱＴＰＳＴＷＰＤＰＥＳＦＰＬＫＦＦＬＲＹＲＰＬＩＬＤＱＷＱＨＶＥＬＳＤＧＴＡＨＴＩＴＤＡＹＡＧＫＥＹＩＩＱＶＡＡＫＤＮＥＩＧＴＷＳＤＷＳＶＡＡＨＡＴＰＷＴＥＥＰＲＨＬＴＴＥＡＱＡＡＥＴＴＴＳＴＴＳＳＬＡＰＰＰＴＴＫＩＣＤＰＧＥＬＧＳＧＧＧＰＳＡＰＦＬＶＳＶＰＩＴＬＡＬＡＡＡＡＡＴＡＳＳＬＬＩ

ヒトＣＮＴＦＲ－アルファ－成熟型（配列番号１５０）
ＱＲＨＳＰＱＥＡＰＨＶＱＹＥＲＬＧＳＤＶＴＬＰＣＧＴＡＮＷＤＡＡＶＴＷＲＶＮＧＴＤＬＡＰＤＬＬＮＧＳＱＬＶＬＨＧＬＥＬＧＨＳＧＬＹＡＣＦＨＲＤＳＷＨＬＲＨＱＶＬＬＨＶＧＬＰＰＲＥＰＶＬＳＣＲＳＮＴＹＰＫＧＦＹＣＳＷＨＬＰＴＰＴＹＩＰＮＴＦＮＶＴＶＬＨＧＳＫＩＭＶＣＥＫＤＰＡＬＫＮＲＣＨＩＲＹＭＨＬＦＳＴＩＫＹＫＶＳＩＳＶＳＮＡＬＧＨＮＡＴＡＩＴＦＤＥＦＴＩＶＫＰＤＰＰＥＮＶＶＡＲＰＶＰＳＮＰＲＲＬＥＶＴＷＱＴＰＳＴＷＰＤＰＥＳＦＰＬＫＦＦＬＲＹＲＰＬＩＬＤＱＷＱＨＶＥＬＳＤＧＴＡＨＴＩＴＤＡＹＡＧＫＥＹＩＩＱＶＡＡＫＤＮＥＩＧＴＷＳＤＷＳＶＡＡＨＡＴＰＷＴＥＥＰＲＨＬＴＴＥＡＱＡＡＥＴＴＴＳＴＴＳＳＬＡＰＰＰＴＴＫＩＣＤＰＧＥＬＧＳ

Ｉｇ様Ｃ２型ドメインを含むヒトＣＮＴＦＲ－アルファ断片（配列番号１５１）
ＱＲＨＳＰＱＥＡＰＨＶＱＹＥＲＬＧＳＤＶＴＬＰＣＧＴＡＮＷＤＡＡＶＴＷＲＶＮＧＴＤＬＡＰＤＬＬＮＧＳＱＬＶＬＨＧＬＥＬＧＨＳＧＬＹＡＣＦＨＲＤＳＷＨＬＲＨＱＶＬＬＨ

ＦＮＩＩＩ型ドメイン１を含むヒトＣＮＴＦＲ－アルファ断片（配列番号１５２）
ＰＰＲＥＰＶＬＳＣＲＳＮＴＹＰＫＧＦＹＣＳＷＨＬＰＴＰＴＹＩＰＮＴＦＮＶＴＶＬＨＧＳＫＩＭＶＣＥＫＤＰＡＬＫＮＲＣＨＩＲＹＭＨＬＦＳＴＩＫＹＫＶＳＩＳＶＳＮＡＬＧＨＮＡＴＡＩＴＦＤＥＦＴＩＶＫＰＤＰＰＥＮＶＶＡＲＰＶＰＳＮＰＲＲＬＥＶＴ

ＦＮＩＩＩ型ドメイン２を含むヒトＣＮＴＦＲ－アルファ断片（配列番号１５３）
ＷＱＴＰＳＴＷＰＤＰＥＳＦＰＬＫＦＦＬＲＹＲＰＬＩＬＤＱＷＱＨＶＥＬＳＤＧＴＡＨＴＩＴＤＡＹＡＧＫＥＹＩＩＱＶＡＡＫＤＮＥＩＧＴＷＳＤＷＳＶＡＡＨＡＴＰＷＴＥＥＰ

ヘキサヒスチジンペプチドタグ（配列番号１５４）
ＨＨＨＨＨＨ

ステムアミノ酸配列を含むヒトＩＬＴ３ドメイン２（ａａ１２４～２５９）（配列番号１５５）
ＰＴＬＳＡＬＰＳＰＬＶＴＳＧＫＳＶＴＬＬＣＱＳＲＳＰＭＤＴＦＬＬＩＫＥＲＡＡＨＰＬＬＨＬＲＳＥＨＧＡＱＱＨＱＡＥＦＰＭＳＰＶＴＳＶＨＧＧＴＹＲＣＦＳＳＨＧＦＳＨＹＬＬＳＨＰＳＤＰＬＥＬＩＶＳＧＳＬＥＤＰＲＰＳＰＴＲＳＶＳＴＡＡＧＰＥＤＱＰＬＭＰＴＧＳＶＰＨＳＧＬＲＲＨＷＥ

Ｈｚ４８Ａ６重鎖可変領域アミノ酸配列
ＨＣ－Ｂ０（配列番号１５６）
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＳＹＧＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＴＩＳＳＧＧＴＹＴＦＹＰＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＳＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＲＧＷＬＬＨＹＹＡＭＤＹＷＧＱＧＴＳＶＴＶＳＳ
ＨＣ－Ｂ１（配列番号１５７）
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＭＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＳＹＧＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＴＩＳＳＧＧＴＹＴＦＹＰＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＳＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＲＧＷＬＬＨＹＹＡＭＤＹＷＧＱＧＴＳＶＴＶＳＳ
ＨＣ－Ｃ０（配列番号１５８）
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＳＹＧＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＧＴＩＳＳＧＧＴＹＴＦＹＰＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＲＧＷＬＬＨＹＹＡＭＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
ＨＣ－Ｃ１（配列番号１５９）
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＳＹＧＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＴＩＳＳＧＧＴＹＴＦＹＰＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＲＧＷＬＬＨＹＹＡＭＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
ＨＣ－Ｃ２（配列番号１６０）
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＭＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＳＹＧＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＴＩＳＳＧＧＴＹＴＦＹＰＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＲＧＷＬＬＨＹＹＡＭＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ

Ｈｚ４８Ａ６軽鎖可変領域アミノ酸配列
ＬＣ－Ｃ２（配列番号１６１）
ＤＩＱＬＴＱＳＰＳＦＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＰＳＥＳＶＤＳＦＧＮＳＦＭＨＷＦＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＬＳＳＫＬＥＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＥＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＨＮＥＤＰＦＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫ

Ｈｚ４５Ｇ１０重鎖可変領域アミノ酸配列
ＨＣ－Ａ２（配列番号１６２）
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＤＹＧＭＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＹＩＦＳＧＳＳＴＩＹＹＡＤＴＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＳＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＡＤＧＲＧＡＭＤＹＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳ
ＨＣ－Ｂ１（配列番号１６３）
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＫＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＤＹＧＭＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＹＩＦＳＧＳＳＴＩＹＹＡＤＴＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＳＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＡＤＧＲＧＡＭＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ

Ｈｚ４５Ｇ１０軽鎖可変領域アミノ酸配列
ＬＣ－Ａ４（配列番号１６４）
ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＤＩＳＫＦＬＮＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＹＴＳＲＬＨＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＦＴＩＳＳＬＱＰＥＤＩＡＴＹＦＣＱＱＧＮＴＬＰＷＴＦＧＧＧＴＫＬＥＩＫ

Claims (131)

  1. ヒト免疫グロブリン様転写物３（ＩＬＴ３）に特異的に結合する結合剤であって、
    （ａ）ＧＦＴＦＳＳＹＧＭＳ（配列番号２７）と同一または実質的に同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、ＴＩＳＧＧＧＳＹＴＮＹＰＤＳＶＫＧ（配列番号２８）と同一または実質的に同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びＲＥＷＲＭＴＬＹＡＭＤＹ（配列番号２９）またはＲＥＷＲＹＴＬＹＡＭＤＹ（配列番号１０５）と同一または実質的に同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
    （ｂ）ＲＡＳＥＳＶＤＳＹＧＮＳＦＭＨ（配列番号３０）またはＲＡＳＥＳＶＥＳＹＧＳＳＦＭＨ（配列番号１０６）と同一または実質的に同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、ＬＴＳＮＬＥＳ（配列番号３１）と同一または実質的に同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びＱＱＮＮＥＤＰＦＴ（配列番号３２）と同一または実質的に同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、前記結合剤。
  2. 請求項１に記載の結合剤であって、
    （ａ）前記重鎖可変領域が、アミノ酸配列ＧＦＴＦＳＳＹＧＭＳ（配列番号２７）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＴＩＳＧＧＧＳＹＴＮＹＰＤＳＶＫＧ（配列番号２８）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＲＥＷＲＭＴＬＹＡＭＤＹ（配列番号２９）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含み、
    （ｂ）前記軽鎖可変領域が、アミノ酸配列ＲＡＳＥＳＶＤＳＹＧＮＳＦＭＨ（配列番号３０）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＬＴＳＮＬＥＳ（配列番号３１）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＱＱＮＮＥＤＰＦＴ（配列番号３２）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む、前記結合剤。
  3. 前記重鎖可変領域が、配列番号１１１に対して少なくとも８０％の配列同一性を有する、請求項１～２のいずれか１項に記載の結合剤。
  4. 前記軽鎖可変領域が、配列番号１１２に対して少なくとも８０％の配列同一性を有する、請求項１～３のいずれか１項に記載の結合剤。
  5. 前記重鎖可変領域が、配列番号１１１に対して少なくとも８０％の配列同一性を有し、前記軽鎖可変領域が、配列番号１１２に対して少なくとも８０％の配列同一性を有する、請求項１～４のいずれか１項に記載の結合剤。
  6. 前記重鎖可変領域が、配列番号１１１に対して少なくとも９０％の配列同一性を有する、請求項１～５のいずれか１項に記載の結合剤。
  7. 前記軽鎖可変領域が、配列番号１１２に対して少なくとも９０％の配列同一性を有する、請求項１～６のいずれか１項に記載の結合剤。
  8. 前記重鎖可変領域が、配列番号１１１に対して少なくとも９０％の配列同一性を有し、前記軽鎖可変領域が、配列番号１１２に対して少なくとも９０％の配列同一性を有する、請求項１～７のいずれか１項に記載の結合剤。
  9. 前記重鎖可変領域が、配列番号１１１のアミノ酸配列を含む、請求項１～８のいずれか１項に記載の結合剤。
  10. 前記軽鎖可変領域が、配列番号１１２のアミノ酸配列を含む、請求項１～９のいずれか１項に記載の結合剤。
  11. 前記重鎖可変領域が、配列番号１１１のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域が、配列番号１１２のアミノ酸配列を含む、請求項１～１０のいずれか１項に記載の結合剤。
  12. 請求項１に記載の結合剤であって、
    （ａ）前記重鎖可変領域が、アミノ酸配列ＧＦＴＦＳＳＹＧＭＳ（配列番号２７）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＴＩＳＧＧＧＳＹＴＮＹＰＤＳＶＫＧ（配列番号２８）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＲＥＷＲＹＴＬＹＡＭＤＹ（配列番号１０５）を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含み、
    （ｂ）前記軽鎖可変領域が、アミノ酸配列ＲＡＳＥＳＶＥＳＹＧＳＳＦＭＨ（配列番号１０６）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、アミノ酸配列ＬＴＳＮＬＥＳ（配列番号３１）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びアミノ酸配列ＱＱＮＮＥＤＰＦＴ（配列番号３２）を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む、前記結合剤。
  13. 前記重鎖可変領域が、配列番号１２３に対して少なくとも８０％の配列同一性を有する、請求項１または１２に記載の結合剤。
  14. 軽鎖可変領域が、配列番号１２４に対して少なくとも８０％の配列同一性を有する、請求項１、１２及び１３のいずれか１項に記載の結合剤。
  15. 前記重鎖可変領域が、配列番号１２３に対して少なくとも８０％の配列同一性を有し、前記軽鎖可変領域が、配列番号１２４に対して少なくとも８０％の配列同一性を有する、請求項１及び１２～１４のいずれか１項に記載の結合剤。
  16. 重鎖可変領域が、配列番号１２３に対して少なくとも９０％の配列同一性を有する、請求項１及び１１～１５のいずれか１項に記載の結合剤。
  17. 前記軽鎖可変領域が、配列番号１２４に対して少なくとも９０％の配列同一性を有する、請求項１及び１１～１６のいずれか１項に記載の結合剤。
  18. 前記重鎖可変領域が、配列番号１２３に対して少なくとも９０％の配列同一性を有し、前記軽鎖可変領域が、配列番号１２４に対して少なくとも９０％の配列同一性を有する、請求項１及び１１～１７のいずれか１項に記載の結合剤。
  19. 前記重鎖可変領域が、配列番号１２３のアミノ酸配列を含む、請求項１及び１１～１８のいずれか１項に記載の結合剤。
  20. 前記軽鎖可変領域が、配列番号１２４のアミノ酸配列を含む、請求項１及び１１～１９のいずれか１項に記載の結合剤。
  21. 前記重鎖可変領域が、配列番号１２３のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域が、配列番号１２４のアミノ酸配列を含む、請求項１及び１１～２０のいずれか１項に記載の結合剤。
  22. ヒトＩＬＴ３に特異的に結合する結合剤であって、配列番号１１１のアミノ酸配列からＶＨ－ＣＤＲ１、ＶＨ－ＣＤＲ２、及びＶＨ－ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域ならびに配列番号１１２のアミノ酸配列からＶＬ－ＣＤＲ１、ＶＬ－ＣＤＲ２、及びＶＬ－ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、前記結合剤。
  23. ヒトＩＬＴ３に特異的に結合する結合剤であって、配列番号１２３のアミノ酸配列からＶＨ－ＣＤＲ１、ＶＨ－ＣＤＲ２、及びＶＨ－ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域ならびに配列番号１２４のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域からＶＬ－ＣＤＲ１、ＶＬ－ＣＤＲ２、及びＶＬ－ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、前記結合剤。
  24. 抗体である、請求項１～２３のいずれか１項に記載の結合剤。
  25. モノクローナル抗体である、請求項１～２４のいずれか１項に記載の結合剤。
  26. キメラ抗体である、請求項１～２５のいずれか１項に記載の結合剤。
  27. ヒト化抗体である、請求項１～２５のいずれか１項に記載の結合剤。
  28. 二重特異性抗体または多重特異性抗体である、請求項１～２７のいずれか１項に記載の結合剤。
  29. 少なくとも１つの抗原結合部位を含む抗体断片である、請求項１～２３のいずれか１項に記載の結合剤。
  30. 前記抗体断片が、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、ｓｃＦｖ、（ｓｃＦｖ）２、単鎖抗体、二重可変領域抗体、ダイアボディ、またはナノボディである、請求項２９に記載の結合剤。
  31. ＩｇＧ１抗体、任意にヒトＩｇＧ１抗体、及びさらに任意にエフェクター機能が低下しているかまたはエフェクター機能がないヒトＩｇＧ１抗体である、請求項１～２８のいずれか１項に記載の結合剤。
  32. ＩｇＧ２抗体、任意にヒトＩｇＧ２抗体である、請求項１～２８のいずれか１項に記載の結合剤。
  33. ＩｇＧ４抗体、任意にヒトＩｇＧ４抗体である、請求項１～２８のいずれか１項に記載の結合剤。
  34. カッパ軽鎖定常領域、任意にヒトカッパ軽鎖定常領域を含む、請求項１～２８または３１～３３のいずれか１項に記載の結合剤。
  35. ラムダ軽鎖定常領域、任意にヒトラムダ軽鎖定常領域を含む、請求項１～２８または３１～３３のいずれか１項に記載の結合剤。
  36. ヒトＩＬＴ３に特異的に結合する抗体であって、配列番号１２６のアミノ酸配列を含む重鎖及び配列番号１２８のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む、前記抗体。
  37. ヒト免疫グロブリン様転写物３（ＩＬＴ３）に特異的に結合する結合剤であって、
    （ａ）ＧＦＳＬＴＳＹＧＶＨ（配列番号１１）と同一または実質的に同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、ＶＩＷＰＧＧＴＩＮＹＮＳＡＬＭＳ（配列番号１２）と同一または実質的に同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びＤＫＹＤＧＧＷＦＡＹ（配列番号１３）と同一または実質的に同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
    （ｂ）ＫＡＳＱＮＶＲＴＡＶＡ（配列番号１４）と同一または実質的に同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、ＬＡＳＮＲＨＴ（配列番号１５）と同一または実質的に同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びＬＱＨＬＮＹＰＬＴ（配列番号１６）と同一または実質的に同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、前記結合剤。
  38. 前記重鎖可変領域が、配列番号１０９に対して少なくとも８０％の同一性を有し、前記軽鎖可変領域が、配列番号１１０に対して少なくとも８０％の同一性を有する、請求項３７に記載の結合剤。
  39. 前記重鎖可変領域が、配列番号１０９のアミノ酸配列を有し、前記軽鎖可変領域が、配列番号１１０のアミノ酸配列を有する、請求項３８に記載の結合剤。
  40. ＩＬＴ３に特異的に結合する結合剤であって、配列番号１０９のアミノ酸配列からＶＨ－ＣＤＲ１、ＶＨ－ＣＤＲ２、及びＶＨ－ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに配列番号１１０のアミノ酸配列からＶＬ－ＣＤＲ１、ＶＬ－ＣＤＲ２、及びＶＬ－ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、前記結合剤。
  41. ヒト免疫グロブリン様転写物３（ＩＬＴ３）に特異的に結合する結合剤であって、
    （ａ）ＧＹＴＦＴＤＹＮＭＤ（配列番号４３）と同一または実質的に同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、ＹＩＹＰＮＮＧＧＴＧＹＮＱＫＦＮＳ（配列番号４４）と同一または実質的に同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びＳＰＹＹＤＹＶＧＳＹＡＭＤＹ（配列番号４５）と同一または実質的に同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
    （ｂ）ＴＡＳＳＳＶＳＳＳＹＬＨ（配列番号４６）と同一または実質的に同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、ＳＴＳＮＬＡＳ（配列番号４７）と同一または実質的に同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びＨＱＹＨＲＳＰＲＴ（配列番号４８）と同一または実質的に同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、前記結合剤。
  42. 前記重鎖可変領域が、配列番号１１３に対して少なくとも８０％の同一性を有し、前記軽鎖可変領域が、配列番号１１４に対して少なくとも８０％の同一性を有する、請求項４１に記載の結合剤。
  43. 前記重鎖可変領域が、配列番号１１３のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域が、配列番号１１４のアミノ酸配列を含む、請求項４２に記載の結合剤。
  44. ＩＬＴ３に特異的に結合する結合剤であって、配列番号１１３のアミノ酸配列からＶＨ－ＣＤＲ１、ＶＨ－ＣＤＲ２、及びＶＨ－ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域ならびに配列番号１１４のアミノ酸配列からＶＬ－ＣＤＲ１、ＶＬ－ＣＤＲ２、及びＶＬ－ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、前記結合剤。
  45. ヒト免疫グロブリン様転写物３（ＩＬＴ３）に特異的に結合する結合剤であって、
    （ａ）ＧＹＴＦＴＤＹＮＭＤ（配列番号４３）と同一または実質的に同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、ＹＩＹＰＳＮＧＧＴＧＹＮＱＫＦＫＳ（配列番号５９）と同一または実質的に同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びＶＰＹＹＤＹＬＹＹＹＡＭＤＹ（配列番号６０）と同一または実質的に同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
    （ｂ）ＲＡＳＳＳＶＳＦＭＨ（配列番号６１）と同一または実質的に同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、ＡＴＳＮＬＡＳ（配列番号６２）と同一または実質的に同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びＱＱＷＳＴＮＰＹＭＹＴ（配列番号６３）と同一または実質的に同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、前記結合剤。
  46. 前記重鎖可変領域が、配列番号１１５に対して少なくとも８０％の同一性を有し、前記軽鎖可変領域が、配列番号１１６に対して少なくとも８０％の同一性を有する、請求項４５に記載の結合剤。
  47. 前記重鎖可変領域が、配列番号１１５のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域が、配列番号１１６のアミノ酸配列を含む、請求項４６に記載の結合剤。
  48. ヒトＩＬＴ３に特異的に結合する結合剤であって、配列番号１１５のアミノ酸配列からＶＨ－ＣＤＲ１、ＶＨ－ＣＤＲ２、及びＶＨ－ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域ならびに配列番号１１６のアミノ酸配列からＶＬ－ＣＤＲ１、ＶＬ－ＣＤＲ２、及びＶＬ－ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、前記結合剤。
  49. ヒト免疫グロブリン様転写物３（ＩＬＴ３）に特異的に結合する結合剤であって、
    （ａ）ＧＦＴＦＳＤＹＧＭＨ（配列番号７１）と同一または実質的に同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、ＹＩＦＳＧＳＳＴＩＹＹＡＤＴＶＫＧ（配列番号７２）と同一または実質的に同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びＡＤＧＲＧＡＭＤＹ（配列番号７３）と同一または実質的に同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
    （ｂ）ＲＡＳＱＤＩＳＫＦＬＮ（配列番号７４）と同一または実質的に同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、ＹＴＳＲＬＨＳ（配列番号７５）と同一または実質的に同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びＱＱＧＮＴＬＰＷＴ（配列番号７６）と同一または実質的に同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、前記結合剤。
  50. 前記重鎖可変領域が、配列番号１１７に対して少なくとも８０％の同一性を有し、かつ前記軽鎖可変領域が、配列番号１１８に対して少なくとも８０％の同一性を有する、前記重鎖可変領域が、配列番号１６２に対して少なくとも８０％の同一性を有し、かつ前記軽鎖可変領域が、配列番号１６４に対して少なくとも８０％の同一性を有する、または前記重鎖可変領域が、配列番号１６３に対して少なくとも８０％の同一性を有し、かつ前記軽鎖可変領域が、配列番号１６４に対して少なくとも８０％の同一性を有する、請求項４９に記載の結合剤。
  51. 前記重鎖可変領域が、配列番号１１７のアミノ酸配列を含み、かつ前記軽鎖可変領域が、配列番号１１８のアミノ酸配列を含む、重鎖可変領域が、配列番号１６２のアミノ酸配列を含み、かつ前記軽鎖可変領域が、配列番号１６４のアミノ酸配列を含む、または、前記重鎖可変領域が、配列番号１６３のアミノ酸配列を含み、かつ前記軽鎖可変領域が、配列番号１６４のアミノ酸配列を含む、請求項５０に記載の結合剤。
  52. ヒトＩＬＴ３に特異的に結合する結合剤であって、配列番号１１７のアミノ酸配列からＶＨ－ＣＤＲ１、ＶＨ－ＣＤＲ２、及びＶＨ－ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域ならびに配列番号１１８のアミノ酸配列からＶＬ－ＣＤＲ１、ＶＬ－ＣＤＲ２、及びＶＬ－ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、前記結合剤。
  53. ヒト免疫グロブリン様転写物３（ＩＬＴ３）に特異的に結合する結合剤であって、
    （ａ）ＧＦＴＦＳＳＹＧＭＳ（配列番号２７）と同一または実質的に同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、ＴＩＳＳＧＧＴＹＴＦＹＰＤＳＶＫＧ（配列番号８７）と同一または実質的に同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びＲＧＷＬＬＨＹＹＡＭＤＹ（配列番号８８）と同一または実質的に同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
    （ｂ）ＲＰＳＥＳＶＤＳＦＧＮＳＦＭＨ（配列番号８９）と同一または実質的に同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、ＬＳＳＫＬＥＳ（配列番号９０）と同一または実質的に同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びＱＱＨＮＥＤＰＦＴ（配列番号９１）と同一または実質的に同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、前記結合剤。
  54. 前記重鎖可変領域が、配列番号１１９に対して少なくとも８０％の同一性を有し、かつ前記軽鎖可変領域が、配列番号１２０に対して少なくとも８０％の同一性を有する、前記重鎖可変領域が、配列番号１５６に対して少なくとも８０％の同一性を有し、かつ前記軽鎖可変領域が、配列番号１６１に対して少なくとも８０％の同一性を有する、前記重鎖可変領域が、配列番号１５７に対して少なくとも８０％の同一性を有し、かつ前記軽鎖可変領域が、配列番号１６１に対して少なくとも８０％の同一性を有する、前記重鎖可変領域が、配列番号１５８に対して少なくとも８０％の同一性を有し、かつ前記軽鎖可変領域が、配列番号１６１に対して少なくとも８０％の同一性を有する、前記重鎖可変領域が、配列番号１５９に対して少なくとも８０％の同一性を有し、かつ前記軽鎖可変領域が、配列番号１６１に対して少なくとも８０％の同一性を有する、または前記重鎖可変領域が、配列番号１６０に対して少なくとも８０％の同一性を有し、かつ前記軽鎖可変領域が、配列番号１６１に対して少なくとも８０％の同一性を有する、請求項５３に記載の結合剤。
  55. 前記重鎖可変領域が、配列番号１１９のアミノ酸配列を含み、かつ前記軽鎖可変領域が、配列番号１２０のアミノ酸配列を含む、前記重鎖可変領域が、配列番号１５６のアミノ酸配列を含み、かつ前記軽鎖可変領域が、配列番号１６１のアミノ酸配列を含む、前記重鎖可変領域が、配列番号１５７のアミノ酸配列を含み、かつ前記軽鎖可変領域が、配列番号１６１のアミノ酸配列を含む、前記重鎖可変領域が、配列番号１５８のアミノ酸配列を含み、かつ前記軽鎖可変領域が、配列番号１６１のアミノ酸配列を含む、前記重鎖可変領域が、配列番号１５９のアミノ酸配列を含み、かつ前記軽鎖可変領域が、配列番号１６１のアミノ酸配列を含む、または前記重鎖可変領域が、配列番号１６０のアミノ酸配列を含み、かつ前記軽鎖可変領域が、配列番号１６１のアミノ酸配列を含む、請求項５４に記載の結合剤。
  56. ヒトＩＬＴ３に特異的に結合する結合剤であって、配列番号１１９のアミノ酸配列からＶＨ－ＣＤＲ１、ＶＨ－ＣＤＲ２、及びＶＨ－ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域ならびに配列番号１２０のアミノ酸配列からＶＬ－ＣＤＲ１、ＶＬ－ＣＤＲ２、及びＶＬ－ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、前記結合剤。
  57. ヒト免疫グロブリン様転写物３（ＩＬＴ３）に特異的に結合する結合剤であって、
    （ａ）ＧＦＴＦＳＤＹＧＭＨ（配列番号７１）と同一または実質的に同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、ＹＩＳＴＧＩＩＴＶＹＹＡＤＴＶＫＧ（配列番号９９）と同一または実質的に同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びＡＤＧＲＧＡＭＤＹ（配列番号７３）と同一または実質的に同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
    （ｂ）ＲＡＳＱＤＩＳＮＦＬＮ（配列番号１００）と同一または実質的に同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ１、ＹＴＳＲＬＨＳ（配列番号７５）と同一または実質的に同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びＱＱＧＮＴＬＰＷＴ（配列番号７６）と同一または実質的に同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、前記結合剤。
  58. 前記重鎖可変領域が、配列番号１２１に対して少なくとも８０％の同一性を有し、前記軽鎖可変領域が、配列番号１２２に対して少なくとも８０％の同一性を有する、請求項５７に記載の結合剤。
  59. 前記重鎖可変領域が、配列番号１２１のアミノ酸配列を含み、前記軽鎖可変領域が、配列番号１２２のアミノ酸配列を含む、請求項５８に記載の結合剤。
  60. ヒトＩＬＴ３に特異的に結合する結合剤であって、配列番号１２１のアミノ酸配列からＶＨ－ＣＤＲ１、ＶＨ－ＣＤＲ２、及びＶＨ－ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域ならびに配列番号１２２のアミノ酸配列からＶＬ－ＣＤＲ１、ＶＬ－ＣＤＲ２、及びＶＬ－ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、前記結合剤。
  61. 抗体である、請求項３７～６０のいずれか１項に記載の結合剤。
  62. モノクローナル抗体である、請求項３７～６１のいずれか１項に記載の結合剤。
  63. キメラ抗体である、請求項３７～６２のいずれか１項に記載の結合剤。
  64. ヒト化抗体である、請求項３７～６２のいずれか１項に記載の結合剤。
  65. 二重特異性抗体または多重特異性抗体である、請求項３７～６４のいずれか１項に記載の結合剤。
  66. 少なくとも１つの抗原結合部位を含む抗体断片である、請求項３７～６０のいずれか１項に記載の結合剤。
  67. 前記抗体断片が、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、ｓｃＦｖ、（ｓｃＦｖ）２、単鎖抗体、二重可変領域抗体、ダイアボディ、またはナノボディである、請求項６６に記載の結合剤。
  68. ＩｇＧ１抗体、任意にヒトＩｇＧ１抗体、及びさらに任意にエフェクター機能が低下しているかまたはエフェクター機能がないヒトＩｇＧ１抗体である、請求項３７～６５のいずれか１項に記載の結合剤。
  69. ＩｇＧ２抗体、任意にヒトＩｇＧ２抗体である、請求項３７～６５のいずれか１項に記載の結合剤。
  70. ＩｇＧ４抗体、任意にヒトＩｇＧ４抗体である、請求項３７～６５のいずれか１項に記載の結合剤。
  71. カッパ軽鎖定常領域、任意にヒトカッパ軽鎖定常領域を含む、請求項３７～６５または６８～７０のいずれか１項に記載の結合剤。
  72. ラムダ軽鎖定常領域、任意にヒトラムダ軽鎖定常領域を含む、請求項３７～６５または６８～７０のいずれか１項に記載の結合剤。
  73. ヒトＩＬＴ３の細胞外ドメインに結合する、請求項１～７２のいずれか１項に記載の結合剤または抗体。
  74. ヒトＩＬＴ３のＤ２ドメインまたはＤ１ドメインとＤ２ドメインの接合部に結合する、請求項１～７２のいずれか１項に記載の結合剤または抗体。
  75. 以下の特性の１つ以上を有する、請求項１～７４のいずれか１項に記載の結合剤または抗体：
    （ｉ）ｃｙｎｏ ＩＬＴ３に結合する、
    （ｉｉ）ヒト及びｃｙｎｏ ＩＬＴ３に結合する、
    （ｉｉｉ）ＩＬＴ２、ＩＬＴ４、ＩＬＴ５、及びＬＩＬＲＢ５には結合しない、
    （ｉｖ）ＬＩＬＲＡ１、ＬＩＬＲＡ２、ＬＩＬＲＡ４、ＬＩＬＲＡ５、及びＬＩＬＲＡ６には結合しない、
    （ｖ）ＩＬＴ３アンタゴニストである、
    （ｖｉ）ＩＬＴ３活性を阻害する、
    （ｖｉｉ）ＩＬＴ３を発現する細胞においてＩＬＴ３シグナル伝達を阻害する、
    （ｖｉｉｉ）ＩＬＴ３のＡＰＯＥに対する結合を阻害する、
    （ｉｘ）ＩＬＴ３のフィブロネクチンに対する結合を阻害する、
    （ｘ）ＩＬＴ３のＣＮＴＦＲに対する結合を阻害する、
    （ｘｉ）ＩＬＴ３が誘導する骨髄細胞の抑制を阻害する、
    （ｘｉｉ）ＩＬＴ３が誘導する骨髄細胞活性の抑制を阻害する、
    （ｘｉｉｉ）ＩＬＴ３を発現する骨髄細胞におけるＦｃＲ活性を回復する、及び
    （ｘｉｖ）ＩＬＴ３を発現する骨髄細胞におけるケモカイン産生を回復する。
  76. 前記結合剤が、半減期を延長する部分に結合する、請求項１～７５のいずれか１項に記載の結合剤または抗体。
  77. ヒトＩＬＴ３に対する結合をめぐって請求項１～７６のいずれか１項に記載の結合剤と競合する抗体。
  78. 請求項１～７７のいずれか１項に記載の結合剤または抗体及び医薬的に許容される担体を含む医薬組成物。
  79. 請求項３６に記載の抗体及び医薬的に許容される担体を含む医薬組成物。
  80. 請求項１～７６のいずれか１項に記載の結合剤をコードする単離されたポリヌクレオチド（複数可）。
  81. 請求項３６に記載の抗体をコードする単離されたポリヌクレオチド（複数可）。
  82. 請求項８０または請求項８１に記載のポリヌクレオチド（複数可）を含むベクター（複数可）。
  83. 請求項８０または請求項８１に記載のポリヌクレオチドを含む単離された細胞。
  84. 請求項８２に記載のベクター（複数可）を含む単離された細胞。
  85. 請求項１～７６のいずれか１項に記載の結合剤を産生する単離された細胞。
  86. ヒト免疫グロブリン様転写物３（ＩＬＴ３）に特異的に結合する抗体であって、
    （ａ）ＧＦＴＦＳＳＹＧＭＳ（配列番号２７）と同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ１、ＴＩＳＧＧＧＳＹＴＮＹＰＤＳＶＫＧ（配列番号２８）と同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域ＣＤＲ２、及びＲＥＷＲＭＴＬＹＡＭＤＹ（配列番号２９）と１つのアミノ酸置換を除いて同一のアミノ酸配列であって、任意に、前記置換が、配列番号２９の５位のメチオニンの置換である、前記アミノ酸配列を含む、重鎖可変領域ＣＤＲ３を含む重鎖可変領域、ならびに
    （ｂ）ＲＡＳＥＳＶＤＳＹＧＮＳＦＭＨ（配列番号３０）と１つまたは２つのアミノ酸置換を除いて同一または実質的に同一のアミノ酸配列であって、任意に、前記置換が、配列番号３０の７位のアスパラギン酸の置換及び／または１１位のアスパラギンの置換である、前記アミノ酸配列を含む、軽鎖可変領域ＣＤＲ１、ＬＴＳＮＬＥＳ（配列番号３１）と同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ２、及びＱＱＮＮＥＤＰＦＴ（配列番号３２）と同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域ＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む、前記抗体。
  87. 細胞の混合物に含まれるフィブロネクチンに対するＩＬＴ３の結合を妨害、阻害、または遮断する方法であって、前記細胞を、請求項１～７７のいずれか１項に記載の結合剤または抗体と接触させることを含む、前記方法。
  88. 細胞の混合物におけるフィブロネクチンが誘導するＩＬＴ３活性を妨害、阻害、または遮断する方法であって、前記細胞を、請求項１～７７のいずれか１項に記載の結合剤または抗体と接触させることを含む、前記方法。
  89. ＩＬＴ３が誘導する骨髄細胞の抑制を妨害、阻害、または遮断する方法であって、前記骨髄細胞を、請求項１～７７のいずれか１項に記載の結合剤または抗体と接触させることを含む、前記方法。
  90. ＩＬＴ３が誘導する骨髄細胞活性の抑制を妨害、阻害、または遮断する方法であって、前記骨髄細胞を、請求項１～７７のいずれか１項に記載の結合剤または抗体と接触させることを含む、前記方法。
  91. 請求項９０に記載の方法であって、
    （ｉ）ＩＬＴ３を発現する前記骨髄細胞におけるＦｃＲ活性を回復させ、
    （ｉｉ）ＩＬＴ３を発現する前記骨髄細胞によるケモカイン産生を回復させ、及び／または
    （ｉｉｉ）免疫細胞（例えば、Ｔ細胞）の増殖及び／または活性を回復させる、前記方法。
  92. 対象におけるフィブロネクチンに対するＩＬＴ３の結合を妨害、阻害、または遮断する方法であって、前記対象に対して、請求項１～７７のいずれか１項に記載の結合剤または抗体の有効量を投与することを含む、前記方法。
  93. 対象におけるフィブロネクチンが誘導するＩＬＴ３活性を妨害、阻害、または遮断する方法であって、前記対象に対して、請求項１～７７のいずれか１項に記載の結合剤または抗体の有効量を投与することを含む、前記方法。
  94. 対象におけるＩＬＴ３が誘導する骨髄細胞の抑制を妨害、阻害、または遮断する方法であって、前記対象に対して、請求項１～７７のいずれか１項に記載の結合剤または抗体の有効量を投与することを含む、前記方法。
  95. 対象におけるＩＬＴ３が誘導する骨髄細胞活性の抑制を妨害、阻害、または遮断する方法であって、前記対象に対して、請求項１～７７のいずれか１項に記載の結合剤または抗体の有効量を投与することを含む、前記方法。
  96. 請求項９５に記載の方法であって、
    （ｉ）ＩＬＴ３を発現する前記骨髄細胞におけるＦｃＲ活性を回復させ、及び／または
    （ｉｉ）ＩＬＴ３を発現する前記骨髄細胞におけるケモカイン／サイトカイン産生を回復させる、前記方法。
  97. 対象におけるがんの治療方法であって、前記対象に対して、請求項１～７７のいずれか１項に記載の結合剤または抗体の治療有効量を投与することを含む、前記方法。
  98. 前記がんが、膵臓癌、乳癌、肺癌、頭頸部癌、結腸直腸癌、前立腺癌、皮膚癌、メラノーマ、胃癌（ｓｔｏｍａｃｈ ｃａｎｃｅｒ）、胃癌（ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｎｃｅｒ）、腸癌、卵巣癌、子宮頸癌、子宮癌、子宮内膜癌、膀胱癌、脳癌、食道癌、肝臓癌、腎臓癌、肉腫または精巣癌である、請求項９７に記載の方法。
  99. 前記がんが血液癌である、請求項９７に記載の方法。
  100. 前記がんが、骨髄性白血病、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病、または骨髄異形成症候群である、請求項９７に記載の方法。
  101. 対象における腫瘍成長の阻害方法であって、前記対象に対して、請求項１～７７のいずれか１項に記載の結合剤または抗体の治療有効量を投与することを含む、前記方法。
  102. 対象における腫瘍または腫瘍細胞に対する免疫反応を増加または増強させる方法であって、前記対象に対して、請求項１～７７のいずれか１項に記載の結合剤または抗体の治療有効量を投与することを含む、前記方法。
  103. 対象における腫瘍または腫瘍細胞に対する持続的または長期にわたる免疫反応を活性化または増強させる方法であって、前記対象に対して、請求項１～７７のいずれか１項に記載の結合剤または抗体の治療有効量を投与することを含む、前記方法。
  104. 対象における腫瘍再発または腫瘍再成長を阻害する方法であって、前記対象に対して、請求項１～７７のいずれか１項に記載の結合剤または抗体の治療有効量を投与することを含む、前記方法。
  105. 対象における腫瘍再発または腫瘍再成長を阻害する持続的または長期にわたる免疫を誘導する方法であって、前記対象に対して、請求項１～７７のいずれか１項に記載の結合剤または抗体の治療有効量を投与することを含む、前記方法。
  106. 前記腫瘍が、膵臓腫瘍、***腫瘍、肺腫瘍、頭頸部腫瘍、結腸直腸腫瘍、前立腺腫瘍、皮膚腫瘍、メラノーマ腫瘍、胃腫瘍（ｓｔｏｍａｃｈ ｔｕｍｏｒ）、胃腫瘍（ｇａｓｔｒｉｃ ｔｕｍｏｒ）、腸腫瘍、卵巣腫瘍、頸部腫瘍、子宮腫瘍、子宮内膜腫瘍、膀胱腫瘍、脳腫瘍、食道腫瘍、肝臓腫瘍、腎臓腫瘍、肉腫または精巣腫瘍である、請求項１０１～１０５のいずれか１項に記載の方法。
  107. 腫瘍を有する対象における腫瘍微小環境での骨髄細胞を活性化する方法であって、前記対象に対して、請求項１～７７のいずれか１項に記載の結合剤または抗体の治療有効量を投与することを含む、前記方法。
  108. 前記骨髄細胞が、初代樹状細胞または寛容原性樹状細胞である、請求項１０７に記載の方法。
  109. 前記骨髄細胞が、単球またはマクロファージである、請求項１０７に記載の方法。
  110. 対象における寛容原性樹状細胞を再活性化する方法であって、前記対象に対して、請求項１～７７のいずれか１項に記載の結合剤または抗体の治療有効量を投与することを含む、前記方法。
  111. 前記寛容原性樹状細胞が、腫瘍微小環境に見出される、請求項１１０に記載の方法。
  112. 前記結合剤または抗体が、併用療法の一部として投与され、任意に、前記併用療法が抗ＰＤ－１抗体を含む、請求項９２～１１１のいずれか１項に記載の方法。
  113. 前記併用療法が、少なくとも１つのさらなる治療薬を含む、請求項１１２に記載の方法。
  114. 前記対象が、ヒトである、請求項９２～１１３のいずれか１項に記載の方法。
  115. がんの治療のための、請求項１～７７のいずれか１項に記載の結合剤または抗体の使用。
  116. がんの治療のための薬剤の製造における、請求項１～７７のいずれか１項に記載の結合剤または抗体の使用。
  117. 請求項１～７７のいずれか１項に記載の結合剤または抗体を製造する方法であって、
    （ａ）請求項８３～８６のいずれか１項に記載の細胞を培養すること、及び
    （ｂ）前記結合剤または抗体を単離することを含む、前記方法。
  118. さらに、前記結合剤または抗体を精製することを含む、請求項１１７に記載の方法。
  119. さらに、前記結合剤または抗体を医薬組成物として製剤化することを含む、請求項１１７または請求項１１８に記載の方法。
  120. ヒトＩＬＴ３に結合し、ヒトＩＬＴ３のフィブロネクチンに対する結合を阻害する抗体であって、任意に、以下の特性の１つ以上を有する、前記抗体：
    （ｉ）ｃｙｎｏ ＩＬＴ３にも結合する、
    （ｉｉ）ＩＬＴ２、ＩＬＴ４、ＩＬＴ５、及びＬＩＬＲＢ５には結合しないか、または（ＩＬＴ３と比較して）わずかに結合するのみである、
    （ｉｉｉ）ＬＩＬＲＡ１、ＬＩＬＲＡ２、ＬＩＬＲＡ４、ＬＩＬＲＡ５、及びＬＩＬＲＡ６には結合しないか、または（ＩＬＴ３と比較して）わずかに結合するのみである、
    （ｉｖ）ＩＬＴ３アンタゴニストである、
    （ｖ）ＩＬＴ３活性を阻害する、
    （ｖｉ）ＩＬＴ３を発現する細胞のＩＬＴ３シグナル伝達を阻害する、
    （ｖｉｉ）ＩＬＴ３のＡＰＯＥへの結合を阻害する、
    （ｖｉｉｉ）ＩＬＴ３のＣＮＴＦＲに対する結合を阻害する、
    （ｉｘ）ＩＬＴ３が誘導する骨髄細胞の抑制を阻害する、
    （ｘ）ＩＬＴ３が誘導する骨髄細胞活性の抑制を阻害する、
    （ｘｉ）ＩＬＴ３を発現する骨髄細胞におけるＦｃＲ活性を回復する、及び
    （ｘｉｉ）ＩＬＴ３を発現する骨髄細胞におけるケモカイン産生を回復する。
  121. ヒトＩＬＴ３に対するＫＤが、Ｂｉａｃｏｒｅによって評価して、１μＭ～１ｐＭである、請求項１２０に記載の抗体。
  122. ヒトＩｇＧ１定常領域及びヒトカッパ軽鎖定常領域を含む、請求項１２０に記載の抗体。
  123. 前記ヒトＩｇＧ１定常領域が、エフェクター機能を低減または排除する１つ以上の変異を含む、請求項１２２に記載の抗体。
  124. 請求項１２０～１２３のいずれか１項に記載の抗体、及び医薬的に許容される担体を含む医薬組成物。
  125. ヒト対象におけるがんの治療方法であって、前記対象に対して、請求項１２０～１２３のいずれか１項に記載の抗体または請求項１２４に記載の医薬組成物の治療有効量を投与することを含み、任意に、前記がんが、高レベルのフィブロネクチンを発現するがん、ＩＬＴ３を発現するがん、膵臓癌、乳癌、肺癌、頭頸部癌、結腸直腸癌、前立腺癌、皮膚癌、メラノーマ、胃癌（ｓｔｏｍａｃｈ ｃａｎｃｅｒ）、胃癌（ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｎｃｅｒ）、腸癌、卵巣癌、子宮頸癌、子宮癌、子宮内膜癌、膀胱癌、脳癌、食道癌、肝臓癌、腎臓癌、肉腫もしくは精巣癌、血液癌、骨髄性白血病、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病、または骨髄異形成症候群である、前記方法。
  126. （ａ）ヒトＩＬＴ３とフィブロネクチンとの間の相互作用を阻害するための手段、及び
    （ｂ）医薬的に許容される担体を含む、医薬組成物。
  127. 前記ヒトＩＬＴ３とフィブロネクチンとの間の相互作用を阻害するための手段が、抗ヒトＩＬＴ３抗体である、請求項１２６に記載の医薬組成物。
  128. 前記抗体が、重鎖可変領域のＶＨ－ＣＤＲ１、ＶＨ－ＣＤＲ２、及びＶＨ－ＣＤＲ３ならびに軽鎖可変領域のＶＬ－ＣＤＲ１、ＶＬ－ＣＤＲ２、及びＶＬ－ＣＤＲ３を含み、前記重鎖可変領域及び前記軽鎖可変領域が、それぞれ、以下のアミノ酸配列を含む、請求項１２７に記載の医薬組成物：
    （ｉ）配列番号１２３及び１２４、
    （ｉｉ）配列番号１５６及び１６１、
    （ｉｉｉ）配列番号１５７及び１６１、
    （ｉｖ）配列番号１５８及び１６１、
    （ｖ）配列番号１５９及び１６１、
    （ｖｉ）配列番号１６０及び１６１、
    （ｖｉｉ）配列番号１６２及び１６４、または
    （ｖｉｉ）配列番号１６３及び１６４。
  129. 前記抗体が、それぞれ、以下のアミノ酸配列を含む前記重鎖可変領域及び前記軽鎖可変領域を含む、請求項１２８に記載の医薬組成物：
    （ｉ）配列番号１２３及び１２４、
    （ｉｉ）配列番号１５６及び１６１、
    （ｉｉｉ）配列番号１５７及び１６１、
    （ｉｖ）配列番号１５８及び１６１、
    （ｖ）配列番号１５９及び１６１、
    （ｖｉ）配列番号１６０及び１６１、
    （ｖｉｉ）配列番号１６２及び１６４、または
    （ｖｉｉ）配列番号１６３及び１６４。
  130. 請求項１～７７または１２０～１２３のいずれか１項に記載の結合剤または抗体及び抗ＰＤ－１抗体を含む組み合わせ。
  131. ヒトＩＬＴ３とフィブロネクチンとの間の相互作用を阻害するための手段及び抗ＰＤ－１抗体を含む組み合わせ。
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