JP2019523009A - C末端切断型フィブリリン−1の発現をもたらす変異を有するマウス - Google Patents
C末端切断型フィブリリン−1の発現をもたらす変異を有するマウス Download PDFInfo
- Publication number
- JP2019523009A JP2019523009A JP2019504976A JP2019504976A JP2019523009A JP 2019523009 A JP2019523009 A JP 2019523009A JP 2019504976 A JP2019504976 A JP 2019504976A JP 2019504976 A JP2019504976 A JP 2019504976A JP 2019523009 A JP2019523009 A JP 2019523009A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- fbn1
- human mammal
- protein
- sequence
- mutation
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Ceased
Links
- 230000035772 mutation Effects 0.000 title claims abstract description 165
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 title claims description 51
- 102000005867 Fibrillin-1 Human genes 0.000 title claims description 22
- 108010030229 Fibrillin-1 Proteins 0.000 title claims description 22
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 title description 84
- 101100119832 Mus musculus Fbn1 gene Proteins 0.000 claims abstract description 304
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 claims abstract description 191
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 claims abstract description 68
- 206010053547 Congenital generalised lipodystrophy Diseases 0.000 claims abstract description 30
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 24
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 claims abstract description 23
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 22
- 208000025500 Hutchinson-Gilford progeria syndrome Diseases 0.000 claims abstract description 20
- 208000007932 Progeria Diseases 0.000 claims abstract description 20
- 238000012216 screening Methods 0.000 claims abstract description 16
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims abstract description 9
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 276
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 271
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims description 198
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 claims description 183
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 claims description 182
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims description 167
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims description 167
- 108020005004 Guide RNA Proteins 0.000 claims description 163
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 131
- 230000008439 repair process Effects 0.000 claims description 127
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 79
- 108020004705 Codon Proteins 0.000 claims description 73
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 claims description 69
- 230000007017 scission Effects 0.000 claims description 69
- 210000000577 adipose tissue Anatomy 0.000 claims description 44
- 238000012217 deletion Methods 0.000 claims description 44
- 210000001161 mammalian embryo Anatomy 0.000 claims description 44
- 210000000593 adipose tissue white Anatomy 0.000 claims description 41
- 230000037430 deletion Effects 0.000 claims description 41
- 238000003780 insertion Methods 0.000 claims description 41
- 230000037431 insertion Effects 0.000 claims description 41
- 230000037396 body weight Effects 0.000 claims description 39
- 230000037433 frameshift Effects 0.000 claims description 34
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 claims description 31
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims description 31
- 101100119831 Homo sapiens FBN1 gene Proteins 0.000 claims description 30
- 238000012239 gene modification Methods 0.000 claims description 30
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims description 28
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims description 28
- 210000003486 adipose tissue brown Anatomy 0.000 claims description 22
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 claims description 21
- 206010022489 Insulin Resistance Diseases 0.000 claims description 19
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 claims description 18
- 230000001976 improved effect Effects 0.000 claims description 17
- UFTFJSFQGQCHQW-UHFFFAOYSA-N triformin Chemical compound O=COCC(OC=O)COC=O UFTFJSFQGQCHQW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 17
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 claims description 16
- 235000021588 free fatty acids Nutrition 0.000 claims description 16
- 150000005830 nonesterified fatty acids Chemical class 0.000 claims description 16
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 claims description 15
- 102000004961 Furin Human genes 0.000 claims description 13
- 108090001126 Furin Proteins 0.000 claims description 13
- 230000037406 food intake Effects 0.000 claims description 11
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 claims description 10
- 101800000522 Asprosin Proteins 0.000 claims description 9
- 102100031509 Fibrillin-1 Human genes 0.000 claims description 9
- 235000012631 food intake Nutrition 0.000 claims description 9
- 231100000221 frame shift mutation induction Toxicity 0.000 claims description 9
- 230000037323 metabolic rate Effects 0.000 claims description 9
- 238000004321 preservation Methods 0.000 claims description 9
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 claims description 7
- 230000004580 weight loss Effects 0.000 claims description 7
- 235000013305 food Nutrition 0.000 claims description 6
- 210000003141 lower extremity Anatomy 0.000 claims description 6
- 102000006437 Proprotein Convertases Human genes 0.000 claims description 5
- 108010044159 Proprotein Convertases Proteins 0.000 claims description 5
- 230000005017 genetic modification Effects 0.000 claims description 5
- 235000013617 genetically modified food Nutrition 0.000 claims description 5
- 230000037436 splice-site mutation Effects 0.000 claims description 5
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 claims description 5
- 230000006378 damage Effects 0.000 claims description 4
- 229940046166 oligodeoxynucleotide Drugs 0.000 claims description 4
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 claims description 3
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 claims description 3
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 claims description 3
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 claims description 3
- 101000958041 Homo sapiens Musculin Proteins 0.000 claims description 2
- 102000046949 human MSC Human genes 0.000 claims description 2
- 230000008030 elimination Effects 0.000 claims 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 claims 1
- 230000032050 esterification Effects 0.000 claims 1
- 238000005886 esterification reaction Methods 0.000 claims 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 abstract description 12
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 abstract description 5
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 abstract description 3
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 abstract description 3
- 230000001627 detrimental effect Effects 0.000 abstract description 2
- 230000003090 exacerbative effect Effects 0.000 abstract description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 abstract description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 223
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 222
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 156
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 156
- 101710163270 Nuclease Proteins 0.000 description 119
- 108700028369 Alleles Proteins 0.000 description 77
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 66
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 62
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 60
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 58
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 58
- 108091033409 CRISPR Proteins 0.000 description 55
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 52
- 239000000463 material Substances 0.000 description 50
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 50
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 45
- 230000005782 double-strand break Effects 0.000 description 44
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 42
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 42
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 42
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 40
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 36
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 32
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 30
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 29
- 108010008532 Deoxyribonuclease I Proteins 0.000 description 28
- 102000007260 Deoxyribonuclease I Human genes 0.000 description 28
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 28
- 108091028113 Trans-activating crRNA Proteins 0.000 description 25
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 25
- 229920002477 rna polymer Polymers 0.000 description 25
- 210000002257 embryonic structure Anatomy 0.000 description 22
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 22
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 description 20
- NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 2,3-bis(butanoylsulfanyl)propyl butanoate Chemical compound CCCC(=O)OCC(SC(=O)CCC)CSC(=O)CCC NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 19
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 19
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 19
- 238000002744 homologous recombination Methods 0.000 description 16
- 230000006801 homologous recombination Effects 0.000 description 16
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 16
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 16
- 101000846893 Homo sapiens Fibrillin-1 Proteins 0.000 description 15
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 15
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 15
- 230000006780 non-homologous end joining Effects 0.000 description 15
- 108700024394 Exon Proteins 0.000 description 14
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 14
- 235000009200 high fat diet Nutrition 0.000 description 14
- 230000010354 integration Effects 0.000 description 14
- 235000021127 solid diet Nutrition 0.000 description 14
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 12
- 230000034431 double-strand break repair via homologous recombination Effects 0.000 description 12
- 102000053556 human FBN1 Human genes 0.000 description 12
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 12
- 230000004568 DNA-binding Effects 0.000 description 11
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 11
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 11
- 210000000287 oocyte Anatomy 0.000 description 11
- 230000005783 single-strand break Effects 0.000 description 11
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 10
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 10
- 108091005461 Nucleic proteins Proteins 0.000 description 10
- 108010017070 Zinc Finger Nucleases Proteins 0.000 description 10
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 description 10
- 210000004940 nucleus Anatomy 0.000 description 10
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 9
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 9
- 238000000520 microinjection Methods 0.000 description 9
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 9
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 9
- 108010072151 Agouti Signaling Protein Proteins 0.000 description 8
- 102000006822 Agouti Signaling Protein Human genes 0.000 description 8
- 241000484025 Cuniculus Species 0.000 description 8
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 8
- 230000006798 recombination Effects 0.000 description 8
- 238000005215 recombination Methods 0.000 description 8
- 108091079001 CRISPR RNA Proteins 0.000 description 7
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 7
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 7
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 7
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 7
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 7
- 235000018977 lysine Nutrition 0.000 description 7
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 7
- 210000000472 morula Anatomy 0.000 description 7
- 238000007481 next generation sequencing Methods 0.000 description 7
- 238000003753 real-time PCR Methods 0.000 description 7
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 7
- 108091008146 restriction endonucleases Proteins 0.000 description 7
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 7
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 7
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 6
- 102000040650 (ribonucleotides)n+m Human genes 0.000 description 6
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 6
- 241000699800 Cricetinae Species 0.000 description 6
- -1 Csm2 Proteins 0.000 description 6
- 101100495054 Mus musculus Ccndbp1 gene Proteins 0.000 description 6
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 6
- 108700008625 Reporter Genes Proteins 0.000 description 6
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 6
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 6
- 230000006870 function Effects 0.000 description 6
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 6
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 6
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 6
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 6
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 6
- 230000008569 process Effects 0.000 description 6
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 6
- 230000009278 visceral effect Effects 0.000 description 6
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 5
- 102000004533 Endonucleases Human genes 0.000 description 5
- 108010042407 Endonucleases Proteins 0.000 description 5
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 108091092195 Intron Proteins 0.000 description 5
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 5
- 108010077850 Nuclear Localization Signals Proteins 0.000 description 5
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 5
- 241000282898 Sus scrofa Species 0.000 description 5
- 108010073062 Transcription Activator-Like Effectors Proteins 0.000 description 5
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 5
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 210000004436 artificial bacterial chromosome Anatomy 0.000 description 5
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 description 5
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 5
- 238000004520 electroporation Methods 0.000 description 5
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 5
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 5
- 108010054624 red fluorescent protein Proteins 0.000 description 5
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 5
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 5
- 108091005957 yellow fluorescent proteins Proteins 0.000 description 5
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 4
- 108010043121 Green Fluorescent Proteins Proteins 0.000 description 4
- 102000004144 Green Fluorescent Proteins Human genes 0.000 description 4
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 4
- 208000001826 Marfan syndrome Diseases 0.000 description 4
- 208000009869 Neu-Laxova syndrome Diseases 0.000 description 4
- 108700026226 TATA Box Proteins 0.000 description 4
- 108010067022 Type III Site-Specific Deoxyribonucleases Proteins 0.000 description 4
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 4
- 210000001106 artificial yeast chromosome Anatomy 0.000 description 4
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 4
- 230000002457 bidirectional effect Effects 0.000 description 4
- 210000002459 blastocyst Anatomy 0.000 description 4
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 4
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 4
- 230000008859 change Effects 0.000 description 4
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 4
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 4
- 238000005265 energy consumption Methods 0.000 description 4
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 description 4
- 210000003414 extremity Anatomy 0.000 description 4
- 108091006047 fluorescent proteins Proteins 0.000 description 4
- 102000034287 fluorescent proteins Human genes 0.000 description 4
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 4
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 4
- 102000054766 genetic haplotypes Human genes 0.000 description 4
- 210000004602 germ cell Anatomy 0.000 description 4
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 4
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 4
- 230000002641 glycemic effect Effects 0.000 description 4
- 230000013632 homeostatic process Effects 0.000 description 4
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 4
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 4
- 241000894007 species Species 0.000 description 4
- 238000012453 sprague-dawley rat model Methods 0.000 description 4
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 4
- 210000004003 subcutaneous fat Anatomy 0.000 description 4
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 4
- 230000002103 transcriptional effect Effects 0.000 description 4
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 4
- 239000013585 weight reducing agent Substances 0.000 description 4
- 210000004340 zona pellucida Anatomy 0.000 description 4
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 3
- 241000282994 Cervidae Species 0.000 description 3
- 206010010356 Congenital anomaly Diseases 0.000 description 3
- 230000033616 DNA repair Effects 0.000 description 3
- 108010053770 Deoxyribonucleases Proteins 0.000 description 3
- 102000016911 Deoxyribonucleases Human genes 0.000 description 3
- 206010058314 Dysplasia Diseases 0.000 description 3
- 108091005941 EBFP Proteins 0.000 description 3
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 3
- 101000860092 Francisella tularensis subsp. novicida (strain U112) CRISPR-associated endonuclease Cas12a Proteins 0.000 description 3
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 3
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 3
- 206010049287 Lipodystrophy acquired Diseases 0.000 description 3
- 108010085220 Multiprotein Complexes Proteins 0.000 description 3
- 102000007474 Multiprotein Complexes Human genes 0.000 description 3
- 101100385413 Neurospora crassa (strain ATCC 24698 / 74-OR23-1A / CBS 708.71 / DSM 1257 / FGSC 987) csm-3 gene Proteins 0.000 description 3
- 108020004485 Nonsense Codon Proteins 0.000 description 3
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 3
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 3
- 238000002105 Southern blotting Methods 0.000 description 3
- 108091081024 Start codon Proteins 0.000 description 3
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 3
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 3
- 230000004075 alteration Effects 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 230000000692 anti-sense effect Effects 0.000 description 3
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 3
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 3
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108091005948 blue fluorescent proteins Proteins 0.000 description 3
- 108010082025 cyan fluorescent protein Proteins 0.000 description 3
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 3
- 210000001840 diploid cell Anatomy 0.000 description 3
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 3
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 3
- 108010048367 enhanced green fluorescent protein Proteins 0.000 description 3
- 230000001815 facial effect Effects 0.000 description 3
- 108010021843 fluorescent protein 583 Proteins 0.000 description 3
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 3
- 239000005090 green fluorescent protein Substances 0.000 description 3
- UYTPUPDQBNUYGX-UHFFFAOYSA-N guanine Chemical compound O=C1NC(N)=NC2=C1N=CN2 UYTPUPDQBNUYGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 3
- 208000006132 lipodystrophy Diseases 0.000 description 3
- 244000144972 livestock Species 0.000 description 3
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 3
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 3
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 3
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 3
- 210000003470 mitochondria Anatomy 0.000 description 3
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 3
- 230000037434 nonsense mutation Effects 0.000 description 3
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 3
- HMFHBZSHGGEWLO-UHFFFAOYSA-N pentofuranose Chemical group OCC1OC(O)C(O)C1O HMFHBZSHGGEWLO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 3
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 3
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 3
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 3
- 238000012207 quantitative assay Methods 0.000 description 3
- 230000004044 response Effects 0.000 description 3
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 3
- 229910052594 sapphire Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000010980 sapphire Substances 0.000 description 3
- 210000005253 yeast cell Anatomy 0.000 description 3
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 3
- BZTDTCNHAFUJOG-UHFFFAOYSA-N 6-carboxyfluorescein Chemical compound C12=CC=C(O)C=C2OC2=CC(O)=CC=C2C11OC(=O)C2=CC=C(C(=O)O)C=C21 BZTDTCNHAFUJOG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KDCGOANMDULRCW-UHFFFAOYSA-N 7H-purine Chemical compound N1=CNC2=NC=NC2=C1 KDCGOANMDULRCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LRFVTYWOQMYALW-UHFFFAOYSA-N 9H-xanthine Chemical compound O=C1NC(=O)NC2=C1NC=N2 LRFVTYWOQMYALW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108020000946 Bacterial DNA Proteins 0.000 description 2
- 101710201279 Biotin carboxyl carrier protein Proteins 0.000 description 2
- 241000283726 Bison Species 0.000 description 2
- 241000237519 Bivalvia Species 0.000 description 2
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 2
- 241000132536 Cirsium Species 0.000 description 2
- 108700010070 Codon Usage Proteins 0.000 description 2
- 102220605874 Cytosolic arginine sensor for mTORC1 subunit 2_D10A_mutation Human genes 0.000 description 2
- 208000013558 Developmental Bone disease Diseases 0.000 description 2
- 241000283086 Equidae Species 0.000 description 2
- 101150062966 FBN1 gene Proteins 0.000 description 2
- 208000001362 Fetal Growth Retardation Diseases 0.000 description 2
- 206010070531 Foetal growth restriction Diseases 0.000 description 2
- ZHNUHDYFZUAESO-UHFFFAOYSA-N Formamide Chemical compound NC=O ZHNUHDYFZUAESO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010070675 Glutathione transferase Proteins 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101710154606 Hemagglutinin Proteins 0.000 description 2
- 102100029100 Hematopoietic prostaglandin D synthase Human genes 0.000 description 2
- 241001272567 Hominoidea Species 0.000 description 2
- 206010023509 Kyphosis Diseases 0.000 description 2
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 2
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 2
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 2
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000003263 MASS syndrome Diseases 0.000 description 2
- 102100025169 Max-binding protein MNT Human genes 0.000 description 2
- 101710093908 Outer capsid protein VP4 Proteins 0.000 description 2
- 101710135467 Outer capsid protein sigma-1 Proteins 0.000 description 2
- 108091081548 Palindromic sequence Proteins 0.000 description 2
- 208000005107 Premature Birth Diseases 0.000 description 2
- 206010036590 Premature baby Diseases 0.000 description 2
- 101710176177 Protein A56 Proteins 0.000 description 2
- 230000004570 RNA-binding Effects 0.000 description 2
- 241000700157 Rattus norvegicus Species 0.000 description 2
- 241000700584 Simplexvirus Species 0.000 description 2
- 206010072610 Skeletal dysplasia Diseases 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 241000193996 Streptococcus pyogenes Species 0.000 description 2
- 241000187191 Streptomyces viridochromogenes Species 0.000 description 2
- 241000203587 Streptosporangium roseum Species 0.000 description 2
- 238000010459 TALEN Methods 0.000 description 2
- 102000002933 Thioredoxin Human genes 0.000 description 2
- 201000008982 Thoracic Aortic Aneurysm Diseases 0.000 description 2
- 108010043645 Transcription Activator-Like Effector Nucleases Proteins 0.000 description 2
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Natural products CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 2
- 201000005928 Weill-Marchesani syndrome Diseases 0.000 description 2
- 210000001015 abdomen Anatomy 0.000 description 2
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 2
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 2
- 210000004102 animal cell Anatomy 0.000 description 2
- 208000007474 aortic aneurysm Diseases 0.000 description 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 2
- 244000309464 bull Species 0.000 description 2
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 2
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 2
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 2
- 102000021178 chitin binding proteins Human genes 0.000 description 2
- 108091011157 chitin binding proteins Proteins 0.000 description 2
- 210000003763 chloroplast Anatomy 0.000 description 2
- 235000020639 clam Nutrition 0.000 description 2
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 2
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 2
- 230000001086 cytosolic effect Effects 0.000 description 2
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 2
- 230000010339 dilation Effects 0.000 description 2
- 238000006471 dimerization reaction Methods 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 108010050663 endodeoxyribonuclease CreI Proteins 0.000 description 2
- 108010026638 endodeoxyribonuclease FokI Proteins 0.000 description 2
- 230000007159 enucleation Effects 0.000 description 2
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 210000002744 extracellular matrix Anatomy 0.000 description 2
- 210000003054 facial bone Anatomy 0.000 description 2
- 208000003457 familial thoracic 1 aortic aneurysm Diseases 0.000 description 2
- 208000030941 fetal growth restriction Diseases 0.000 description 2
- 238000001917 fluorescence detection Methods 0.000 description 2
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 2
- 102000054767 gene variant Human genes 0.000 description 2
- 230000014101 glucose homeostasis Effects 0.000 description 2
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000004554 glutamine Nutrition 0.000 description 2
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 2
- 239000000185 hemagglutinin Substances 0.000 description 2
- 210000000688 human artificial chromosome Anatomy 0.000 description 2
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 2
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 2
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 2
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000001596 intra-abdominal fat Anatomy 0.000 description 2
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 2
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 2
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 2
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 description 2
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 2
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 2
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 2
- 230000008775 paternal effect Effects 0.000 description 2
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 2
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 2
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 2
- 230000008488 polyadenylation Effects 0.000 description 2
- 210000001236 prokaryotic cell Anatomy 0.000 description 2
- 102000005912 ran GTP Binding Protein Human genes 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- 125000006850 spacer group Chemical group 0.000 description 2
- 238000010381 tandem affinity purification Methods 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 108060008226 thioredoxin Proteins 0.000 description 2
- 229940094937 thioredoxin Drugs 0.000 description 2
- 108091006107 transcriptional repressors Proteins 0.000 description 2
- 238000003151 transfection method Methods 0.000 description 2
- 208000001072 type 2 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 2
- 210000004291 uterus Anatomy 0.000 description 2
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 2
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 2
- 230000003442 weekly effect Effects 0.000 description 2
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- ISMWWJGHELLJIL-JEDNCBNOSA-N (2s)-2-amino-3-(1h-imidazol-5-yl)propanoic acid;nickel Chemical compound [Ni].OC(=O)[C@@H](N)CC1=CNC=N1 ISMWWJGHELLJIL-JEDNCBNOSA-N 0.000 description 1
- YMHOBZXQZVXHBM-UHFFFAOYSA-N 2,5-dimethoxy-4-bromophenethylamine Chemical compound COC1=CC(CCN)=C(OC)C=C1Br YMHOBZXQZVXHBM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DJQYYYCQOZMCRC-UHFFFAOYSA-N 2-aminopropane-1,3-dithiol Chemical compound SCC(N)CS DJQYYYCQOZMCRC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BFSVOASYOCHEOV-UHFFFAOYSA-N 2-diethylaminoethanol Chemical compound CCN(CC)CCO BFSVOASYOCHEOV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KQPKMEYBZUPZGK-UHFFFAOYSA-N 4-[(4-azido-2-nitroanilino)methyl]-5-(hydroxymethyl)-2-methylpyridin-3-ol Chemical compound CC1=NC=C(CO)C(CNC=2C(=CC(=CC=2)N=[N+]=[N-])[N+]([O-])=O)=C1O KQPKMEYBZUPZGK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000007910 Acaryochloris marina Species 0.000 description 1
- 241001135192 Acetohalobium arabaticum Species 0.000 description 1
- 241000093740 Acidaminococcus sp. Species 0.000 description 1
- 241001464929 Acidithiobacillus caldus Species 0.000 description 1
- 241000605222 Acidithiobacillus ferrooxidans Species 0.000 description 1
- 241000640374 Alicyclobacillus acidocaldarius Species 0.000 description 1
- 102000002260 Alkaline Phosphatase Human genes 0.000 description 1
- 108020004774 Alkaline Phosphatase Proteins 0.000 description 1
- 241000190857 Allochromatium vinosum Species 0.000 description 1
- 241000147155 Ammonifex degensii Species 0.000 description 1
- 108091023037 Aptamer Proteins 0.000 description 1
- 241000620196 Arthrospira maxima Species 0.000 description 1
- 240000002900 Arthrospira platensis Species 0.000 description 1
- 235000016425 Arthrospira platensis Nutrition 0.000 description 1
- 241001495183 Arthrospira sp. Species 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000906059 Bacillus pseudomycoides Species 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 102100026189 Beta-galactosidase Human genes 0.000 description 1
- 108010045123 Blasticidin-S deaminase Proteins 0.000 description 1
- 108700016947 Bos taurus structural-GP Proteins 0.000 description 1
- 241000823281 Burkholderiales bacterium Species 0.000 description 1
- 101150018129 CSF2 gene Proteins 0.000 description 1
- 101150069031 CSN2 gene Proteins 0.000 description 1
- 102000000584 Calmodulin Human genes 0.000 description 1
- 108010041952 Calmodulin Proteins 0.000 description 1
- 241001496650 Candidatus Desulforudis Species 0.000 description 1
- 241001040999 Candidatus Methanoplasma termitum Species 0.000 description 1
- 208000002177 Cataract Diseases 0.000 description 1
- 241000579895 Chlorostilbon Species 0.000 description 1
- 108020004638 Circular DNA Proteins 0.000 description 1
- 108091005960 Citrine Proteins 0.000 description 1
- 241000193163 Clostridioides difficile Species 0.000 description 1
- 241000193155 Clostridium botulinum Species 0.000 description 1
- 108010051219 Cre recombinase Proteins 0.000 description 1
- 241000065716 Crocosphaera watsonii Species 0.000 description 1
- 101150074775 Csf1 gene Proteins 0.000 description 1
- 230000004544 DNA amplification Effects 0.000 description 1
- 108700020911 DNA-Binding Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000052510 DNA-Binding Proteins Human genes 0.000 description 1
- 102000004163 DNA-directed RNA polymerases Human genes 0.000 description 1
- 206010011906 Death Diseases 0.000 description 1
- 241000702421 Dependoparvovirus Species 0.000 description 1
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 1
- 206010059866 Drug resistance Diseases 0.000 description 1
- 241001269524 Dura Species 0.000 description 1
- 208000009701 Embryo Loss Diseases 0.000 description 1
- 101100162704 Emericella nidulans I-AniI gene Proteins 0.000 description 1
- 101000889905 Enterobacteria phage RB3 Intron-associated endonuclease 3 Proteins 0.000 description 1
- 101000889904 Enterobacteria phage T4 Defective intron-associated endonuclease 3 Proteins 0.000 description 1
- 101000889900 Enterobacteria phage T4 Intron-associated endonuclease 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000889899 Enterobacteria phage T4 Intron-associated endonuclease 2 Proteins 0.000 description 1
- 101001091269 Escherichia coli Hygromycin-B 4-O-kinase Proteins 0.000 description 1
- 241000206602 Eukaryota Species 0.000 description 1
- 241000326311 Exiguobacterium sibiricum Species 0.000 description 1
- 102000010834 Extracellular Matrix Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010037362 Extracellular Matrix Proteins Proteins 0.000 description 1
- 208000003929 Familial Partial Lipodystrophy Diseases 0.000 description 1
- 241000192016 Finegoldia magna Species 0.000 description 1
- 241000589601 Francisella Species 0.000 description 1
- 241000589602 Francisella tularensis Species 0.000 description 1
- 241000589599 Francisella tularensis subsp. novicida Species 0.000 description 1
- 241000588088 Francisella tularensis subsp. novicida U112 Species 0.000 description 1
- 101150106478 GPS1 gene Proteins 0.000 description 1
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 1
- KOSRFJWDECSPRO-WDSKDSINSA-N Glu-Glu Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O KOSRFJWDECSPRO-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 108060003760 HNH nuclease Proteins 0.000 description 1
- 102000029812 HNH nuclease Human genes 0.000 description 1
- 241000700721 Hepatitis B virus Species 0.000 description 1
- 108091027305 Heteroduplex Proteins 0.000 description 1
- MAJYPBAJPNUFPV-BQBZGAKWSA-N His-Cys Chemical compound SC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 MAJYPBAJPNUFPV-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- 102000008157 Histone Demethylases Human genes 0.000 description 1
- 108010074870 Histone Demethylases Proteins 0.000 description 1
- 102000003964 Histone deacetylase Human genes 0.000 description 1
- 108090000353 Histone deacetylase Proteins 0.000 description 1
- 101000744174 Homo sapiens DNA-3-methyladenine glycosylase Proteins 0.000 description 1
- 101001111984 Homo sapiens N-acylneuraminate-9-phosphatase Proteins 0.000 description 1
- 241000713772 Human immunodeficiency virus 1 Species 0.000 description 1
- 208000015580 Increased body weight Diseases 0.000 description 1
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 1
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 1
- 108020004684 Internal Ribosome Entry Sites Proteins 0.000 description 1
- 108010025815 Kanamycin Kinase Proteins 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 241001112693 Lachnospiraceae Species 0.000 description 1
- 241000448224 Lachnospiraceae bacterium MA2020 Species 0.000 description 1
- 241000689670 Lachnospiraceae bacterium ND2006 Species 0.000 description 1
- 241000186673 Lactobacillus delbrueckii Species 0.000 description 1
- 108091026898 Leader sequence (mRNA) Proteins 0.000 description 1
- 241000713666 Lentivirus Species 0.000 description 1
- 241001148627 Leptospira inadai Species 0.000 description 1
- 108060001084 Luciferase Proteins 0.000 description 1
- 239000005089 Luciferase Substances 0.000 description 1
- 241001134698 Lyngbya Species 0.000 description 1
- 241000282560 Macaca mulatta Species 0.000 description 1
- 101710175625 Maltose/maltodextrin-binding periplasmic protein Proteins 0.000 description 1
- 241000501784 Marinobacter sp. Species 0.000 description 1
- 241000204639 Methanohalobium Species 0.000 description 1
- 108060004795 Methyltransferase Proteins 0.000 description 1
- 241000179980 Microcoleus Species 0.000 description 1
- 241000192710 Microcystis aeruginosa Species 0.000 description 1
- 241000190928 Microscilla marina Species 0.000 description 1
- 241001193016 Moraxella bovoculi 237 Species 0.000 description 1
- 206010068052 Mosaicism Diseases 0.000 description 1
- 241000711408 Murine respirovirus Species 0.000 description 1
- 241000699660 Mus musculus Species 0.000 description 1
- 101100219625 Mus musculus Casd1 gene Proteins 0.000 description 1
- 101000846892 Mus musculus Fibrillin-1 Proteins 0.000 description 1
- 241000282339 Mustela Species 0.000 description 1
- 102100023906 N-acylneuraminate-9-phosphatase Human genes 0.000 description 1
- 108010049175 N-substituted Glycines Proteins 0.000 description 1
- 241000167285 Natranaerobius thermophilus Species 0.000 description 1
- 229930193140 Neomycin Natural products 0.000 description 1
- 241000919925 Nitrosococcus halophilus Species 0.000 description 1
- 241001515112 Nitrosococcus watsonii Species 0.000 description 1
- 241000203619 Nocardiopsis dassonvillei Species 0.000 description 1
- 108700026244 Open Reading Frames Proteins 0.000 description 1
- 241000192520 Oscillatoria sp. Species 0.000 description 1
- 238000002944 PCR assay Methods 0.000 description 1
- 101150049281 PRM1 gene Proteins 0.000 description 1
- 241000142651 Pelotomaculum thermopropionicum Species 0.000 description 1
- 108010088535 Pep-1 peptide Proteins 0.000 description 1
- 108010067902 Peptide Library Proteins 0.000 description 1
- 241000983938 Petrotoga mobilis Species 0.000 description 1
- 241001599925 Polaromonas naphthalenivorans Species 0.000 description 1
- 241001472610 Polaromonas sp. Species 0.000 description 1
- 108091036407 Polyadenylation Proteins 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- 241000878522 Porphyromonas crevioricanis Species 0.000 description 1
- 241001135241 Porphyromonas macacae Species 0.000 description 1
- 241000605861 Prevotella Species 0.000 description 1
- 241001302521 Prevotella albensis Species 0.000 description 1
- 241001135219 Prevotella disiens Species 0.000 description 1
- 241000288906 Primates Species 0.000 description 1
- 101710149951 Protein Tat Proteins 0.000 description 1
- 241000519590 Pseudoalteromonas Species 0.000 description 1
- 102000009572 RNA Polymerase II Human genes 0.000 description 1
- 108010009460 RNA Polymerase II Proteins 0.000 description 1
- 102000014450 RNA Polymerase III Human genes 0.000 description 1
- 108010078067 RNA Polymerase III Proteins 0.000 description 1
- 108020005067 RNA Splice Sites Proteins 0.000 description 1
- 230000006819 RNA synthesis Effects 0.000 description 1
- 101100047461 Rattus norvegicus Trpm8 gene Proteins 0.000 description 1
- 108010091086 Recombinases Proteins 0.000 description 1
- 102000018120 Recombinases Human genes 0.000 description 1
- 102000006382 Ribonucleases Human genes 0.000 description 1
- 108010083644 Ribonucleases Proteins 0.000 description 1
- 108091028664 Ribonucleotide Proteins 0.000 description 1
- 108020004422 Riboswitch Proteins 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- 238000012300 Sequence Analysis Methods 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108020004682 Single-Stranded DNA Proteins 0.000 description 1
- 241000191967 Staphylococcus aureus Species 0.000 description 1
- 108010090804 Streptavidin Proteins 0.000 description 1
- 241000194022 Streptococcus sp. Species 0.000 description 1
- 241000194020 Streptococcus thermophilus Species 0.000 description 1
- 101001091268 Streptomyces hygroscopicus Hygromycin-B 7''-O-kinase Proteins 0.000 description 1
- 241001518258 Streptomyces pristinaespiralis Species 0.000 description 1
- 241000192560 Synechococcus sp. Species 0.000 description 1
- 201000009594 Systemic Scleroderma Diseases 0.000 description 1
- 206010042953 Systemic sclerosis Diseases 0.000 description 1
- 101710137500 T7 RNA polymerase Proteins 0.000 description 1
- 101710192266 Tegument protein VP22 Proteins 0.000 description 1
- 241000270666 Testudines Species 0.000 description 1
- 241000206213 Thermosipho africanus Species 0.000 description 1
- 108091036066 Three prime untranslated region Proteins 0.000 description 1
- 102000006601 Thymidine Kinase Human genes 0.000 description 1
- 108020004440 Thymidine kinase Proteins 0.000 description 1
- 108700009124 Transcription Initiation Site Proteins 0.000 description 1
- 108091023040 Transcription factor Proteins 0.000 description 1
- 102000040945 Transcription factor Human genes 0.000 description 1
- 108700019146 Transgenes Proteins 0.000 description 1
- 108090000848 Ubiquitin Proteins 0.000 description 1
- 102000044159 Ubiquitin Human genes 0.000 description 1
- 108091023045 Untranslated Region Proteins 0.000 description 1
- 241000545067 Venus Species 0.000 description 1
- 241000251539 Vertebrata <Metazoa> Species 0.000 description 1
- 108700005077 Viral Genes Proteins 0.000 description 1
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 1
- 210000001766 X chromosome Anatomy 0.000 description 1
- 210000002593 Y chromosome Anatomy 0.000 description 1
- 241001673106 [Bacillus] selenitireducens Species 0.000 description 1
- 241001531273 [Eubacterium] eligens Species 0.000 description 1
- 108020002494 acetyltransferase Proteins 0.000 description 1
- 102000005421 acetyltransferase Human genes 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 125000003295 alanine group Chemical group N[C@@H](C)C(=O)* 0.000 description 1
- KOSRFJWDECSPRO-UHFFFAOYSA-N alpha-L-glutamyl-L-glutamic acid Natural products OC(=O)CCC(N)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(O)=O KOSRFJWDECSPRO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 1
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 1
- 238000000137 annealing Methods 0.000 description 1
- 102000025171 antigen binding proteins Human genes 0.000 description 1
- 108091000831 antigen binding proteins Proteins 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 150000001491 aromatic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 229940011019 arthrospira platensis Drugs 0.000 description 1
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 1
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 1
- 229940009098 aspartate Drugs 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 229940049706 benzodiazepine Drugs 0.000 description 1
- 150000001557 benzodiazepines Chemical class 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 108010005774 beta-Galactosidase Proteins 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 1
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 1
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 101150055766 cat gene Proteins 0.000 description 1
- 229920006317 cationic polymer Polymers 0.000 description 1
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 description 1
- 210000004671 cell-free system Anatomy 0.000 description 1
- 108091092328 cellular RNA Proteins 0.000 description 1
- 230000030570 cellular localization Effects 0.000 description 1
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 description 1
- 238000010382 chemical cross-linking Methods 0.000 description 1
- 239000013611 chromosomal DNA Substances 0.000 description 1
- 239000011035 citrine Substances 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 239000002131 composite material Substances 0.000 description 1
- 108091036078 conserved sequence Proteins 0.000 description 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 1
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 101150055601 cops2 gene Proteins 0.000 description 1
- 238000012937 correction Methods 0.000 description 1
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 1
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 1
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001186 cumulative effect Effects 0.000 description 1
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 description 1
- 125000000151 cysteine group Chemical group N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 description 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 1
- 239000000412 dendrimer Substances 0.000 description 1
- 229920000736 dendritic polymer Polymers 0.000 description 1
- 239000005547 deoxyribonucleotide Substances 0.000 description 1
- 125000002637 deoxyribonucleotide group Chemical group 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 1
- 230000005584 early death Effects 0.000 description 1
- 210000003981 ectoderm Anatomy 0.000 description 1
- 230000002526 effect on cardiovascular system Effects 0.000 description 1
- 239000010976 emerald Substances 0.000 description 1
- 229910052876 emerald Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000001900 endoderm Anatomy 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 230000004049 epigenetic modification Effects 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 230000005713 exacerbation Effects 0.000 description 1
- 210000001808 exosome Anatomy 0.000 description 1
- HJUFTIJOISQSKQ-UHFFFAOYSA-N fenoxycarb Chemical compound C1=CC(OCCNC(=O)OCC)=CC=C1OC1=CC=CC=C1 HJUFTIJOISQSKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004720 fertilization Effects 0.000 description 1
- 102000013370 fibrillin Human genes 0.000 description 1
- 108060002895 fibrillin Proteins 0.000 description 1
- 229940118764 francisella tularensis Drugs 0.000 description 1
- 230000004545 gene duplication Effects 0.000 description 1
- 235000003869 genetically modified organism Nutrition 0.000 description 1
- 210000001654 germ layer Anatomy 0.000 description 1
- 108010055341 glutamyl-glutamic acid Proteins 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 230000009931 harmful effect Effects 0.000 description 1
- 150000002391 heterocyclic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 238000012165 high-throughput sequencing Methods 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 150000002466 imines Chemical class 0.000 description 1
- 238000007901 in situ hybridization Methods 0.000 description 1
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 239000012212 insulator Substances 0.000 description 1
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 1
- 230000017730 intein-mediated protein splicing Effects 0.000 description 1
- 229940043355 kinase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- 230000004807 localization Effects 0.000 description 1
- 125000003588 lysine group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 210000003794 male germ cell Anatomy 0.000 description 1
- 241001515942 marmosets Species 0.000 description 1
- 230000008774 maternal effect Effects 0.000 description 1
- 230000013011 mating Effects 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 230000021121 meiosis Effects 0.000 description 1
- 210000003716 mesoderm Anatomy 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 229910021645 metal ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 1
- 210000001724 microfibril Anatomy 0.000 description 1
- 230000025608 mitochondrion localization Effects 0.000 description 1
- 108091005601 modified peptides Proteins 0.000 description 1
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 1
- 229960004927 neomycin Drugs 0.000 description 1
- 210000000633 nuclear envelope Anatomy 0.000 description 1
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 1
- 125000000371 nucleobase group Chemical group 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 210000003463 organelle Anatomy 0.000 description 1
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 description 1
- 210000003101 oviduct Anatomy 0.000 description 1
- VYNDHICBIRRPFP-UHFFFAOYSA-N pacific blue Chemical compound FC1=C(O)C(F)=C2OC(=O)C(C(=O)O)=CC2=C1 VYNDHICBIRRPFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010033675 panniculitis Diseases 0.000 description 1
- 230000035699 permeability Effects 0.000 description 1
- 238000002823 phage display Methods 0.000 description 1
- RGCLLPNLLBQHPF-HJWRWDBZSA-N phosphamidon Chemical compound CCN(CC)C(=O)C(\Cl)=C(/C)OP(=O)(OC)OC RGCLLPNLLBQHPF-HJWRWDBZSA-N 0.000 description 1
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 description 1
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 1
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003757 phosphotransferase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000004962 physiological condition Effects 0.000 description 1
- 239000013600 plasmid vector Substances 0.000 description 1
- 108010011110 polyarginine Proteins 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 102000054765 polymorphisms of proteins Human genes 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 230000004481 post-translational protein modification Effects 0.000 description 1
- 230000002028 premature Effects 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 230000000750 progressive effect Effects 0.000 description 1
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 1
- 108020001580 protein domains Proteins 0.000 description 1
- 230000004850 protein–protein interaction Effects 0.000 description 1
- 108010045647 puromycin N-acetyltransferase Proteins 0.000 description 1
- 150000003230 pyrimidines Chemical class 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- 108700018661 rat Fbn1 Proteins 0.000 description 1
- 230000022532 regulation of transcription, DNA-dependent Effects 0.000 description 1
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 1
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 1
- 238000010839 reverse transcription Methods 0.000 description 1
- 239000002336 ribonucleotide Substances 0.000 description 1
- 125000002652 ribonucleotide group Chemical group 0.000 description 1
- 102220010903 rs398122831 Human genes 0.000 description 1
- 102220089960 rs876657410 Human genes 0.000 description 1
- 238000007480 sanger sequencing Methods 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 1
- 238000002741 site-directed mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 238000003153 stable transfection Methods 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 1
- 230000004960 subcellular localization Effects 0.000 description 1
- 230000000153 supplemental effect Effects 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 1
- 238000012353 t test Methods 0.000 description 1
- MPLHNVLQVRSVEE-UHFFFAOYSA-N texas red Chemical compound [O-]S(=O)(=O)C1=CC(S(Cl)(=O)=O)=CC=C1C(C1=CC=2CCCN3CCCC(C=23)=C1O1)=C2C1=C(CCC1)C3=[N+]1CCCC3=C2 MPLHNVLQVRSVEE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000005026 transcription initiation Effects 0.000 description 1
- 108091006106 transcriptional activators Proteins 0.000 description 1
- 238000003146 transient transfection Methods 0.000 description 1
- 230000005945 translocation Effects 0.000 description 1
- 150000003626 triacylglycerols Chemical class 0.000 description 1
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- 241000701161 unidentified adenovirus Species 0.000 description 1
- 241001430294 unidentified retrovirus Species 0.000 description 1
- 210000005166 vasculature Anatomy 0.000 description 1
- 108700026220 vif Genes Proteins 0.000 description 1
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000037303 wrinkles Effects 0.000 description 1
- 229940075420 xanthine Drugs 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- A01K67/00—Rearing or breeding animals, not otherwise provided for; New or modified breeds of animals
- A01K67/027—New or modified breeds of vertebrates
- A01K67/0275—Genetically modified vertebrates, e.g. transgenic
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K49/00—Preparations for testing in vivo
- A61K49/0004—Screening or testing of compounds for diagnosis of disorders, assessment of conditions, e.g. renal clearance, gastric emptying, testing for diabetes, allergy, rheuma, pancreas functions
- A61K49/0008—Screening agents using (non-human) animal models or transgenic animal models or chimeric hosts, e.g. Alzheimer disease animal model, transgenic model for heart failure
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/78—Connective tissue peptides, e.g. collagen, elastin, laminin, fibronectin, vitronectin or cold insoluble globulin [CIG]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- A01K2217/00—Genetically modified animals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- A01K2217/00—Genetically modified animals
- A01K2217/05—Animals comprising random inserted nucleic acids (transgenic)
- A01K2217/054—Animals comprising random inserted nucleic acids (transgenic) inducing loss of function
- A01K2217/056—Animals comprising random inserted nucleic acids (transgenic) inducing loss of function due to mutation of coding region of the transgene (dominant negative)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- A01K2227/00—Animals characterised by species
- A01K2227/10—Mammal
- A01K2227/105—Murine
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- A01K2267/00—Animals characterised by purpose
- A01K2267/03—Animal model, e.g. for test or diseases
- A01K2267/0306—Animal model for genetic diseases
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Environmental Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biodiversity & Conservation Biology (AREA)
- Animal Husbandry (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
Description
本出願は、2016年7月29日に出願された米国特許出願第62/368,924号の利益を主張するものであり、これは、あらゆる目的のために全体が本明細書に参照により組み込まれる。
500041SEQLIST.txtファイルに記載の配列表は、184キロバイトであり、2017年7月28日に作成され、本明細書で参照により組み込まれる。
本明細書で互換的に使用される「タンパク質」、「ポリペプチド」、及び「ペプチド」という用語は、コードされたアミノ酸及びコードされていないアミノ酸、ならびに化学的または生化学的に改変または誘導体化されたアミノ酸を含む任意の長さのポリマー形態のアミノ酸を含む。この用語は、改変ペプチド骨格を有するポリペプチドなどの、改変されているポリマーも含む。
I.概要
本発明は、先天性リポジストロフィーを伴う新生児早老症候群(NPSCL)をモデル化するための、Fbn1遺伝子における変異を含む非ヒト動物を提供する。このような非ヒト動物モデルを作製する方法もまた提供される。非ヒト動物モデルは、NPSCLの抑制もしくは低減またはNPSCL様症状の改善における活性について化合物をスクリーニングすることに、あるいは、NPSCLの促進もしくは悪化において潜在に有害な活性について化合物をスクリーニングすることに、ならびにNPSCLの機序ならびに潜在的に新しい治療及び診断標的についての洞察を提供するために、使用することができる。
Fbn1遺伝子に変異を含む非ヒト動物(例えば、ラットまたはマウスなどの非ヒト哺乳動物)が本明細書に提供される。このような非ヒト動物は、先天性リポジストロフィーを伴う新生児早老症候群(NPSCL)をモデル化し、NPSCL様症状(例えば、先天性リポジストロフィー様症状)を示す。
新生児早老症候群(NPS)は、主に顔及び四肢に影響を及ぼす先天性の部分的リポジストロフィーを特徴とする。あらゆる目的のために本明細書に全体が参照により組み込まれるO’Neill et al.(2007)Am.J.Med.Gen.A.143A:1421−1430。先天性リポジストロフィーを伴う新生児早老症候群(NPSCL)、マルファン様−早老症候群、またはマルファン様−早老症−リポジストロフィー(MPL)症候群とも呼ばれる。それは、主に顔及び四肢に影響を及ぼす皮下脂肪組織の低減による先天性の極端な薄さを特徴とする。Hou et al.(2009)Pediatrics and Neonatology 50:102−109及びO’Neill et al.(2007)Am.J.Med.Gen.A.143A:1421−1430(これらのそれぞれは、あらゆる目的のために本明細書に全体が参照により組み込まれる)を参照のこと。表現型は通常、出生時及び出生前でさえも、皮下脂肪の不足に起因する薄い皮膚及び目立った脈管構造を伴う子宮内発育遅延として明らかである。O’Neill et al.(2007)。患者は、全ての年齢で、肥満度指数(BMI)で、年齢に対して標準以下のいくつかの標準偏差を示す。O’Neill et al.(2007)。NPS患者は、顔面形成異常の特徴及び皮下脂肪の低減に起因して早老症のように見えるが、白内障、毛髪の早期白髪化、またはインスリン抵抗性などの真の早老症の通常の特徴を有さない。O’Neill et al.(2007)。患者は正常な空腹時血漿中グルコース及びインスリンレベルを有し得、それらは、正常なインスリン感受性及びグルコース処理を有することを示唆する。O’Neill et al.(2007)。
NPSCLは、ヒトのFBN1遺伝子の変異と関連している。例えば、Takenouchi et al.(2013)Am.J.Med.Genet.Part A 161A:3057−3062;Graul−Neumann et al.(2010)Am.J.Med.Genet.A.152A(11):2749−2755;Goldblatt et al.(2011)Am.J.Med.Genet.A 155A(4):717−720;Horn and Robinson(2011)Am.J.Med.Genet.A.155A(4);721−724;Jacquinet et al.(2014)Eur.J.Med.Genet.57(5):203−234;及びRomere et al.(2016)Cell 165(3):566−579(これらのそれぞれは、あらゆる目的のために本明細書に全体が参照により組み込まれる)を参照のこと。FBN1は、弾性及び非弾性細胞外マトリックスにおけるミクロフィブリルの主な構成成分である構造糖タンパク質フィブリリン−1をコードする65のコードエクソン(合計66のエクソン)を有する230kbの遺伝子である。プロフィブリリン−1は、2871アミノ酸長のプロタンパク質として翻訳され、これは、プロテアーゼフリンによりC末端で切断される。これは、成熟フィブリリン−1(細胞外マトリックス構成成分)に加えて、140アミノ酸長のC末端切断産物(すなわち、アスプロシン)を生成する。例示的なヒトフィブリリン−1配列は、UniProtアクセッション番号P35555が割り当てられる。
本明細書に開示のように、任意の好適な非ヒト動物が、NPSCLのモデルとして使用することができる。このような非ヒト動物は、好ましくは、齧歯動物(例えば、ラット、マウス、及びハムスター)などの哺乳動物である。他の非ヒト哺乳動物としては、例えば、非ヒト霊長類、サル、類人猿、ネコ、イヌ、ウサギ、ウマ、雄牛、シカ、バイソン、家畜(例えば、雌牛、早期去勢牛などのウシ種;ヒツジ、ヤギなどのヒツジ種;ならびにブタ及びイノシシなどブタ種)が挙げられる。「非ヒト」という用語は、ヒトを除外する。
A.細胞におけるFbn1変異の生成
ヌクレアーゼ物質及び/または外因性修復テンプレートの使用により、細胞(例えば、多能性細胞または1細胞期胚)内のゲノムのFbn1遺伝子を改変するための種々の方法が提供される。方法は、in vitro、ex vivo、またはin vivoで生じ得る。ヌクレアーゼ物質は、単独で、または外因性修復テンプレートと組み合わせて使用することができる。あるいは、外因性修復テンプレートは、単独で、またはヌクレアーゼ物質と組み合わせて使用することができる。
所望の認識配列へのニックまたは二本鎖破断を誘導する任意のヌクレアーゼ物質は、本明細書に開示の方法及び組成物に使用することができる。天然に存在するまたは天然ヌクレアーゼ物質は、ヌクレアーゼ物質が所望の認識配列においてニックまたは二本鎖破断を誘導する限り用いることができる。あるいは、改変または操作されたヌクレアーゼ物質を使用することができる。「操作されたヌクレアーゼ物質」は、所望の認識配列においてニックまたは二本鎖破断を特異的に認識及び誘導するように天然型から操作された(改変または誘導された)ヌクレアーゼを含む。従って、操作されたヌクレアーゼ物質は、天然の、天然に存在するヌクレアーゼ物質から誘導することができ、またはそれは、人工的に生成もしくは合成することができる。操作されたヌクレアーゼは、認識配列のニックまたは二本鎖破断を誘導することができ、例えば、認識配列は、天然の(未操作または未改変)ヌクレアーゼ物質により認識されている配列ではない。ヌクレアーゼ物質の改変は、タンパク質切断剤のわずか1アミノ酸、または核酸切断剤の1ヌクレオチドとし得る。認識配列または他のDNAにおいてニックまたは二本鎖破断を産生することは、本明細書では、認識配列または他のDNAを「切断すること(cutting)」または「切断すること(cleaving)」と称することができる。
本明細書に開示の方法は、細胞内のゲノムを改変するために、Clustered Regularly Interspersed Short Palindromic Repeats(CRISPR)/CRISPR関連(Cas)システムまたはこのようなシステムの構成要素を利用し得る。CRISPR−Casシステムは、転写物及びCas遺伝子の発現に関与するか、またはその活性を導く他の要素を含む。CRISPR−Casシステムは、I型、II型、またはIII型システムとし得る。あるいは、CRISPR/Casシステムは、例えば、V型システム(例えば、サブタイプV−AまたはサブタイプV−B)とし得る。本明細書に開示の方法及び組成物は、核酸の部位特異的切断のためにCRISPR複合体(Casタンパク質と複合体化したガイドRNA(gRNA)を含む)を利用することによりCRISPR−Casシステムを用い得る。
Casタンパク質は一般に、ガイドRNA(gRNA、以下により詳細に記載される)と相互作用し得る少なくとも1つのRNA認識または結合ドメインを含む。Casタンパク質は、ヌクレアーゼドメイン(例えば、DNaseまたはRNaseドメイン)、DNA結合ドメイン、ヘリカーゼドメイン、タンパク質−タンパク質相互作用ドメイン、二量体化ドメイン、及び他のドメインも含み得る。ヌクレアーゼドメインは、核酸分子の共有結合の破断を含む核酸切断のための触媒活性を有する。切断は、平滑末端または付着末端を生成し得、それは、一本鎖または二本鎖とし得る。例えば、野生型Cas9タンパク質は通常、平滑切断産物を生成するであろう。あるいは、野生型Cpf1タンパク質(例えば、FnCpf1)は、5−ヌクレオチドの5’オーバーハングを有する切断産物をもたらす可能性があり、切断は、非標的鎖上のPAM配列から18番目の塩基対の後ろで、且つ標的鎖上の23番目の後ろで生じる。Casタンパク質は、Fbn1遺伝子の二本鎖破断(例えば、平滑末端を有する二本鎖破断)を生成するための完全な切断活性を有し得るか、またはそれは、Fbn1遺伝子の一本鎖破断を生成するニッカーゼとし得る。
「ガイドRNA」または「gRNA」は、Casタンパク質(例えば、Cas9タンパク質)に結合し、且つCasタンパク質を標的DNA(例えば、Fbn1遺伝子)内の特定の場所への標的化するRNA分子である。ガイドRNAは、2つのセグメント:「DNA標的化セグメント」及び「タンパク質結合セグメント」を含み得る。「セグメント」は、RNAにおけるヌクレオチドの連続したストレッチなどの分子のセクションまたは領域を含む。一部のgRNAは、2つの別々のRNA分子:「アクチベーターRNA」(例えば、tracrRNA)及び「ターゲッターRNA」(例えば、CRISPR RNAまたはcrRNA)を含む。他のgRNAは、「単一分子gRNA」、「単一ガイドRNA」、または「sgRNA」とも呼ばれ得る単一RNA分子(単一RNAポリヌクレオチド)である。例えば、WO2013/176772、WO2014/065596、WO2014/089290、WO2014/093622、WO2014/099750、WO2013/142578、及びWO2014/131833(これらのそれぞれは、あらゆる目的のために本明細書に全体が参照により組み込まれる)を参照のこと。Cas9の場合、例えば、単一ガイドRNAは、(例えば、リンカーを介して)tracrRNAに融合したcrRNAを含み得る。Cpf1の場合、例えば、crRNAのみが、切断を達成するのに必要とされる。「ガイドRNA」及び「gRNA」という用語は、二分子gRNA及び単分子gRNAの両方を含む。
「ガイドRNA認識配列」という用語は、結合に十分な条件が存在するという条件で、gRNAのDNA標的化セグメントが結合するであろう標的DNA(例えば、Fbn1遺伝子)に存在する核酸配列を含む。例えば、ガイドRNA認識配列は、ガイドRNAが相補性を有するように設計される配列を含み、ガイドRNA認識配列及びDNA標的化配列の間のハイブリダイゼーションは、CRISPR複合体の形成を促進する。完全な相補性は、必ずしも必要ではない。但し、ハイブリダイゼーションを引き起こし、且つCRISPR複合体の形成を促進するのに十分な相補性が存在する。ガイドRNA認識配列は、以下により詳細に記載されるCasタンパク質の切断部位も含む。ガイドRNA認識配列は、例えば、ミトコンドリアまたは葉緑体などの、細胞の核もしくは細胞質中に、または細胞の小器官内に、位置し得る任意のポリヌクレオチドを含み得る。
本明細書に開示の方法及び組成物は、ヌクレアーゼ物質を用いるFbn1遺伝子の切断後に、Fbn1遺伝子を改変する外因性修復テンプレートを利用し得る。例えば、細胞は、1細胞期胚とし得、外因性修復テンプレートは、長さが5kb未満とし得る。1細胞期胚以外の細胞型では、外因性修復テンプレート(例えば、標的化ベクター)は、より長いものとし得る。例えば、1細胞期胚以外の細胞型では、外因性修復テンプレートは、本明細書の他の箇所に記載されているように、大きい標的化ベクター(LTVEC)(例えば、少なくとも10kbの長さを有するか、または合計が少なくとも10kbの5’及び3’ホモロジーアームを有する標的化ベクター)とし得る。ヌクレアーゼ物質と組み合わせて外因性修復テンプレートを使用することは、相同性指向修復を促進することによりFbn1遺伝子内に、より正確な改変をもたらし得る。
一部の外因性修復テンプレートは、(例えば、Fbn1遺伝子の)標的ゲノム遺伝子座でのCasタンパク質媒介切断により生成される1つ以上のオーバーハングと相補的な5’末端及び/または3’末端に短い一本鎖領域を有する。これらのオーバーハングは、5’及び3’ホモロジーアームと呼ぶこともできる。例えば、一部の外因性修復テンプレートは、標的ゲノム遺伝子座の5’及び/または3’標的配列でのCasタンパク質媒介切断により生成される1つ以上のオーバーハングと相補的な5’末端及び/または3’末端に短い一本鎖領域を有する。このような一部の外因性修復テンプレートは、5’末端のみに、または3’末端のみに、相補的領域を有する。例えば、このような一部の外因性修復テンプレートは、標的ゲノム遺伝子座の5’標的配列に生成されるオーバーハングに相補的な5’末端のみで、または標的ゲノム遺伝子座の3’標的配列に生成されるオーバーハングに相補的な3’末端のみで、相補的領域を有する。他のこのような外因性修復テンプレートは、5’末端及び3’末端の両方に相補的領域を有する。例えば、このような他の外因性修復テンプレートは、例えば、標的ゲノム遺伝子座でのCas媒介切断により生成される第1及び第2のオーバーハングにそれぞれ相補的な5’末端及び3’末端の両方に、相補的領域を有する。例えば、外因性修復テンプレートが二本鎖である場合、一本鎖相補的領域は、修復テンプレートの上鎖の5’末端及び修復テンプレートの下鎖の5’末端から伸びて、各端に5’オーバーハングを生成し得る。あるいは、一本鎖相補的領域は、修復テンプレートの上鎖の3’末端から及びテンプレートの下鎖の3’末端から伸びて、3’オーバーハングを生成し得る。
一部の外因性修復テンプレートは、ホモロジーアームを含む。外因性修復テンプレートが、核酸インサートも含む場合、ホモロジーアームは、核酸インサートに隣接することができる。言及を容易にするために、ホモロジーアームは、本明細書では5’及び3’(すなわち、上流及び下流)ホモロジーアームと呼ばれる。この用語は、外因性修復テンプレート内の核酸インサートに対するホモロジーアームの相対位置に関する。5’及び3’ホモロジーアームは、本明細書で、それぞれ「5’標的配列」及び「3’標的配列」と呼ばれるFbn1遺伝子内の領域に対応する。
細胞のゲノムを接触させることは、1つ以上のヌクレアーゼ物質またはヌクレアーゼ物質をコードする核酸(例えば、1つ以上のCasタンパク質または1つ以上のCasタンパク質をコードする核酸、及び1つ以上のガイドRNAまたは1つ以上のガイドRNAをコードする核酸(すなわち、1つ以上のCRISPR RNA及び1つ以上のtracrRNA)、及び/または1つ以上の外因性修復テンプレートを細胞に導入することを含み得る。但し、細胞が1細胞期胚である場合、例えば、外因性修復テンプレートは、長さが5kb未満であり得る。細胞のゲノムを接触させること(すなわち、細胞を接触させること)は、上記構成要素のうちの1つのみ、構成要素のうちの1つ以上、または構成要素のうちの全てを、細胞に導入することを含み得る。「導入すること」は、配列が細胞の内部に接近するように、核酸またはタンパク質を細胞に提示すことを含む。導入することは、任意の手段により達成することができ、構成成分のうちの1つ以上(例えば、構成成分のうちの2つ、または構成成分の全て)は、細胞に、同時または任意の組み合わせで逐次的に導入することができる。例えば、外因性修復テンプレートは、ヌクレアーゼ物質の導入前に導入することができるか、またはヌクレアーゼ物質の導入後に導入することができる(例えば、外因性修復テンプレートは、ヌクレアーゼ物質の導入の約1、2、3、4、8、12、24、36、48、または72時間前または後に、投与することができる)。例えば、US2015/0240263及びUS2015/0110762(これらのそれぞれは、あらゆる目的のために本明細書に全体が参照により組み込まれる)を参照のこと。
種々の種類の標的遺伝子改変は、本明細書に記載の方法を使用して導入することができる。このような標的改変としては、例えば、1つ以上のヌクレオチドの付加、1つ以上のヌクレオチドの欠失、1つ以上のヌクレオチドの置換、点変異、目的のポリヌクレオチドもしくはその一部のノックアウト、目的のポリヌクレオチドもしくはその一部のノックイン、内因性核酸配列の異種核酸配列、外因性核酸配列、相同核酸配列、もしくはオルソログの核酸配列との置換、ドメインスワップ、エクソンスワップ、イントロンスワップ、制御配列スワップ、遺伝子スワップ、またはそれらの組み合わせを含み得る。例えば、少なくとも1、2、3、4、5、7、8、9、10またはそれ以上のヌクレオチドは、標的ゲノム改変を形成するように変化させる(例えば、欠失させるか、挿入するか、または置換する)ことができる。欠失、挿入、または置換は、本明細書の他の箇所に開示されているように、任意のサイズであり得る。例えば、Wang et al.(2013)Cell 153:910−918;Mandalos et al.(2012)PLOS ONE 7:e45768:1−9;及びWang et al.(2013)Nat Biotechnol.31:530−532(これらのそれぞれは、あらゆる目的のために本明細書に全体が参照により組み込まれる)を参照のこと。
本明細書で開示されている方法は、改変Fbn1遺伝子を有する細胞を同定することをさらに含み得る。種々の方法は、欠失または挿入などの標的遺伝子改変を有する細胞を同定するために使用することができる。このような方法は、Fbn1遺伝子において標的遺伝子改変を有する1つの細胞を同定することを含み得る。スクリーニングは、改変ゲノム遺伝子座を有するこのような細胞を同定するために行うことができる。
遺伝子改変された非ヒト動物は、本明細書に開示の種々の方法を用いて生成することができる。本明細書に記載の方法を含む、遺伝子改変生物を産生するための任意の簡便な方法またはプロトコールは、このような遺伝子改変非ヒト動物を産生するのに適する。胚性幹(ES)細胞などの多能性細胞を遺伝子改変することから始まるこのような方法は一般に、(1)本明細書に記載の方法を使用する1細胞期胚ではない多能性細胞のゲノムを改変すること;(2)遺伝子改変多能性細胞を同定または選択すること;(3)遺伝子改変多能性細胞を宿主胚に導入すること;ならびに(4)代理母に遺伝子改変多能性細胞を含む宿主胚を移植及び懐胎すること、を含む。次に、代理母は、標的遺伝子改変を含み、且つ生殖系列を介して標的遺伝子改変を送達することが可能なF0世代の非ヒト動物を産生し得る。遺伝子改変されたゲノム遺伝子座を有する動物は、本明細書に記載されるように、対立遺伝子改変(MOA)アッセイを介して同定することができる。ドナー細胞は、胚盤胞期または前桑実胚期(すなわち、4細胞期または8細胞期)などの、任意の段階で宿主胚に導入することができる。生殖系列を介して遺伝子改変を伝達することが可能な後代が生成される。多能性細胞は、本明細書の他の箇所で考察されるように、例えば、ES細胞(例えば、齧歯動物ES細胞、マウスES細胞、またはラットES細胞)とし得る。例えば、あらゆる目的のために本明細書に全体が参照により組み込まれる米国特許第7,294,754号を参照のこと。
本明細書で提供される方法は、非ヒト動物、ならびに非ヒト動物由来の細胞及び胚を用いる。このような非ヒト動物は、好ましくは、齧歯動物(例えば、ラット、マウス、及びハムスター)などの哺乳動物である。他の非ヒト哺乳動物としては、例えば、非ヒト霊長類、サル、類人猿、ネコ、イヌ、ウサギ、ウマ、雄牛、シカ、バイソン、家畜(例えば、雌牛、早期去勢牛などのウシ種;ヒツジ、ヤギなどのヒツジ種;ならびにブタ及びイノシシなどブタ種)が挙げられる。「非ヒト」という用語は、ヒトを除外する。
本明細書に記載のFbn1変異を有する非ヒト動物は、先天性リポジストロフィーを伴う新生児早老症候群(NPSCL)を抑制するか、もしくは低減させること、またはNPSCL様症状(例えば、先天性リポジストロフィー様症状)を改善することに潜在的に有用な活性について化合物をスクリーニングすること、あるいは、NPSCLを促進するか、または悪化させるのに潜在的に有害な活性について化合物をスクリーニングすること、に使用することができる。NPSCLを抑制もしくは低減する活性、またはNPSCL様症状を改善する活性を有する化合物は、NPSCLに対する治療薬または予防薬として潜在的に有用である。NPSCLを促進または悪化させる活性を有する化合物は、有毒であると同定されており、治療薬として、またはそれらがヒトと接触し得る他の状況において(例えば、食品、農業、建設、または給水において)避けるべきである。
添付の配列表に列挙されたヌクレオチド及びアミノ酸配列は、ヌクレオチド塩基についての標準的な文字の略語、及びアミノ酸についての3文字のコードを使用して示される。ヌクレオチド配列は、配列の5’末端で開始すること及び前方へ(すなわち、各行で左から右に)3’末端に進むことの標準的な規則に従う。各ヌクレオチド配列の一方の鎖のみが示されているが、相補鎖は、表示されている鎖への任意の言及により含まれると理解される。アミノ酸配列は、配列のアミノ末端から開始すること及び前方へ(すなわち、各行で左から右に)カルボキシ末端に進むことの標準的な規則に従う。
変異型Fbn1マウス対立遺伝子を生成して、ヒト変異型FBN1対立遺伝子を再現した。参照配列としてNM_007993.2を使用すると、変異は、c.8213_8214delinsACTである。c.8212及び8213の間にAを挿入し、c.8214でG>T置換を行うことにより生成されたこの変異は、Fbn1の最後から2番目のエクソンに早期終止コドンをもたらす。変異型対立遺伝子は、MAID8501として示されている。図1を参照のこと。変異は、最後から2番目のエクソンの最後の50ヌクレオチド以内に存在し、ナンセンス変異依存mRNA分解機構(NMD)を脱出して、変異型切断型プロフィブリリンタンパク質の発現をもたらすと予測される。
別の実験では、ヒトc.8155_8156del Fbn1対立遺伝子に対応する変異型Fbn1対立遺伝子を生成するように、ガイドRNA配列及びドナー配列を設計して、これは、p.Lys2719の17コドン下流の後続の早期終止コドンでフレームシフトを引き起こす、コードエクソン64(最後から2番目のエクソン)における2塩基対の欠失を有する。予測された変異型対立遺伝子は、MAID8502として示される。図3を参照のこと。
Claims (52)
- ゲノムが変異を含むフィブリリン−1(Fbn1)遺伝子を含む非ヒト哺乳動物であって、前記遺伝子の発現が、前記非ヒト哺乳動物に新生児早老症候群の1つ以上の先天性リポジストロフィー様症状を発症させるC末端切断型Fbn1タンパク質をもたらす、前記非ヒト哺乳動物。
- 前記非ヒト哺乳動物が、前記変異についてヘテロ接合型である、請求項1に記載の非ヒト哺乳動物。
- 前記Fbn1遺伝子が、前記非ヒト哺乳動物に対して内因性のFbn1プロモーターを含む、先行請求項のいずれかに記載の非ヒト哺乳動物。
- 前記変異が、フレームシフト変異である、先行請求項のいずれかに記載の非ヒト哺乳動物。
- 前記変異が、早期終止コドンをもたらす、先行請求項のいずれかに記載の非ヒト哺乳動物。
- 前記早期終止コドンが、前記Fbn1遺伝子の最後から2番目のエクソンまたは最終エクソンに存在する、請求項5に記載の非ヒト哺乳動物。
- 前記早期終止コドンが、前記Fbn1遺伝子の最終エクソン内であるか、または最後のエクソン−エクソン接合部の約55塩基対未満上流にある、請求項6に記載の非ヒト哺乳動物。
- 前記変異が、最後から2番目のエクソンがスキップされるようになるスプライス部位変異である、先行請求項のいずれかに記載の非ヒト哺乳動物。
- 前記変異が、最後のコードエクソンに早期終止コドンを生じる、先行請求項のいずれかに記載の非ヒト哺乳動物。
- 前記変異が、フリンファミリーのプロタンパク質転換酵素に対する塩基性アミノ酸認識配列を破壊する、先行請求項のいずれかに記載の非ヒト哺乳動物。
- 前記変異が、プロフィブリリン−1のアスプロシンのC末端切断産物の破壊または除去をもたらす、先行請求項のいずれかに記載の非ヒト哺乳動物。
- 前記C末端切断型Fbn1タンパク質が、正荷電C末端を有する、先行請求項のいずれかに記載の非ヒト哺乳動物。
- 前記C末端切断型Fbn1タンパク質が配列番号30と最適にアラインされる時、前記C末端切断型Fbn1タンパク質が、配列番号30に記載の野生型マウスFbn1タンパク質のアミノ酸2700〜2790、アミノ酸2710〜2780、アミノ酸2720〜2770、アミノ酸2730〜2760、またはアミノ酸2737〜2755の位置に相当する位置で切断される、先行請求項のいずれかに記載の非ヒト哺乳動物。
- 前記C末端切断型Fbn1タンパク質が配列番号30と最適にアラインされる時、前記最後のアミノ酸が配列番号30に記載の野生型マウスFbn1タンパク質のアミノ酸2737、アミノ酸2738、またはアミノ酸2755に対応する位置に存在するように、前記C末端切断型Fbn1タンパク質が切断される、請求項13に記載の非ヒト哺乳動物。
- 前記C末端切断型Fbn1タンパク質が、配列番号8、42、43、45、46、または47に記載の配列からなるC末端を有する、先行請求項のいずれかに記載の非ヒト哺乳動物。
- 前記C末端切断型Fbn1タンパク質が配列番号30と最適にアラインされる時、前記最後のアミノ酸が配列番号30に記載の野生型マウスFbn1タンパク質のアミノ酸2737に対応する位置に存在するように、前記C末端切断型Fbn1タンパク質が切断され、且つ、前記C末端切断型Fbn1タンパク質の前記C末端が配列番号43または46に記載の配列からなる、請求項13〜15のいずれか1項に記載の非ヒト哺乳動物。
- 前記C末端切断型Fbn1タンパク質が配列番号30と最適にアラインされる時、前記最後のアミノ酸が配列番号30に記載の野生型マウスFbn1タンパク質のアミノ酸2738に対応する位置に存在するように、前記C末端切断型Fbn1タンパク質が切断され、且つ、前記C末端切断型Fbn1タンパク質の前記C末端が配列番号8または45に記載の配列からなる、請求項13〜15のいずれか1項に記載の非ヒト哺乳動物。
- 前記C末端切断型Fbn1タンパク質が配列番号30と最適にアラインされる時、前記最後のアミノ酸が配列番号30に記載の野生型マウスFbn1タンパク質のアミノ酸2755に対応する位置に存在するように、前記C末端切断型Fbn1タンパク質が切断され、且つ、前記C末端切断型Fbn1タンパク質の前記C末端が配列番号42または47に記載の配列からなる、請求項13〜15のいずれか1項に記載の非ヒト哺乳動物。
- 前記変異が、最後から2番目のエクソンに存在する、先行請求項のいずれかに記載の非ヒト哺乳動物。
- 前記変異した最後から2番目のエクソンが配列番号26、27、または28と最適にアラインされる時、前記Fbn1遺伝子の前記変異した最後から2番目のエクソンが、配列番号25に記載の野生型マウスFbn1の最後から2番目のエクソン配列に対して、配列番号26、27、または28における変異に対応する変異を含む、請求項19に記載の非ヒト哺乳動物。
- 前記Fbn1遺伝子の全部または一部が、欠失しており、且つオーソログヒトFBN1遺伝子配列と置換されている、先行請求項のいずれかに記載の非ヒト哺乳動物。
- 前記変異が、オーソログヒトFBN1遺伝子配列に位置する、請求項21に記載の非ヒト哺乳動物。
- 前記オーソログヒトFBN1遺伝子配列が、内因性非ヒト哺乳動物Fbn1遺伝子座に位置する、請求項21または22に記載の非ヒト哺乳動物。
- 前記変異したFbn1遺伝子によりコードされた前記C末端切断型Fbn1タンパク質が、配列番号31、32、または33に記載の配列からなる、先行請求項のいずれかに記載の非ヒト哺乳動物。
- 前記非ヒト哺乳動物が、齧歯動物である、先行請求項のいずれかに記載の非ヒト哺乳動物。
- 前記齧歯動物が、ラットまたはマウスである、請求項25に記載の非ヒト哺乳動物。
- 前記齧歯動物が、マウスである、請求項26に記載の非ヒト哺乳動物。
- 前記変異が、−1フレームシフトを引き起こして、エクソン64の3’末端またはエクソン65の5’末端に早期終止コドンをもたらす、前記内因性マウスFbn1遺伝子のエクソン64における挿入または欠失を含む、請求項27に記載の非ヒト哺乳動物。
- 前記変異が、−1フレームシフトを引き起こして、エクソン65の5’末端に早期終止コドンをもたらす、エクソン64における挿入を含む、請求項28に記載の非ヒト哺乳動物。
- 前記変異を含む前記Fbn1遺伝子が配列番号20と最適にアラインされる時、前記挿入が配列番号20に記載の野生型マウスFbn1コード配列の8179位に対応する位置及び8180位に対応する位置の間に存在し、及び/または前記変異を含む前記Fbn1遺伝子が配列番号20と最適にアラインされる時、前記早期終止コドンが配列番号20に記載の野生型マウスFbn1コード配列の8241位に対応する位置に存在する、請求項29に記載の非ヒト哺乳動物。
- 前記変異が、−1フレームシフトを引き起こして、エクソン64の3’末端に早期終止コドンをもたらす、エクソン64における挿入または欠失を含む、請求項28に記載の非ヒト哺乳動物。
- 前記変異を含む前記Fbn1遺伝子が配列番号20と最適にアラインされる時、前記変異が配列番号20に記載の野生型マウスFbn1コード配列の8209位に対応する位置及び8210位に対応する位置の間に挿入を含み、及び/または前記変異を含む前記Fbn1遺伝子が配列番号20と最適にアラインされる時、前記早期終止コドンが配列番号20に記載の野生型マウスFbn1コード配列の8214位に対応する位置に存在する、請求項31に記載の非ヒト哺乳動物。
- 前記変異を含む前記Fbn1遺伝子が配列番号20と最適にアラインされる時、前記変異が配列番号20に記載の野生型マウスFbn1コード配列の8161位に対応する位置で開始する欠失を含み、及び/または前記変異を含む前記Fbn1遺伝子が配列番号20と最適にアラインされる時、前記早期終止コドンが配列番号20に記載の野生型マウスFbn1コード配列中の8214位に対応する位置に存在する、請求項31に記載の非ヒト哺乳動物。
- 前記C末端切断型Fbn1タンパク質が、正荷電C末端を有する、請求項28〜33のいずれか1項に記載の非ヒト哺乳動物。
- 症状が、以下の:体重の減少、除脂肪量の減少、体脂肪量の減少、体重で正規化された白色脂肪組織の減少、体重で正規化された褐色脂肪組織の保存を伴う白色脂肪組織の減少、体脂肪率の減少、体重で正規化された摂食量の増加、及び後弯の増加、のうちの1つ以上を含む、先行請求項のいずれかに記載の非ヒト哺乳動物。
- 前記非ヒト哺乳動物が、以下の:代謝率の増加、インスリン感受性の改善、正常な耐糖能、正常な血清中コレステロールレベル、正常な血清中トリグリセリドレベル、及び正常な血清中非エステル化脂肪酸レベル、のうちの1つ以上を有する、請求項34に記載の非ヒト哺乳動物。
- 前記症状が、体重で正規化された白色脂肪組織の減少、ならびに、インスリン感受性の改善、正常な耐糖能、正常な血清中コレステロールレベル、正常な血清中トリグリセリドレベル、及び正常な血清中非エステル化脂肪酸レベルのうちの少なくとも1つを含む、請求項35に記載の非ヒト哺乳動物。
- 前記症状が、体重で正規化された白色脂肪組織の減少及びインスリン感受性の改善を含む、請求項36に記載の非ヒト哺乳動物。
- 請求項1〜38のいずれか1項に記載の非ヒト哺乳動物を作製する方法であって、
(a)1細胞期胚ではない非ヒト哺乳動物多能性細胞のゲノムを、
(i)Cas9タンパク質、及び
(ii)前記Fbn1遺伝子の標的ゲノム遺伝子座内の第1のガイドRNA認識配列にハイブリダイゼーションする第1のガイドRNA、と接触させること、を含み、前記Fbn1遺伝子が、前記C末端切断型Fbn1タンパク質をもたらす前記変異を含むように改変され、
さらに、前記方法が、(b)前記改変非ヒト哺乳動物多能性細胞を、宿主胚に導入すること、及び
(c)前記宿主胚を代理母に移植して、前記Fbn1遺伝子が前記C末端切断型Fbn1タンパク質をもたらす前記変異を含むように改変される遺伝子改変F0世代非ヒト哺乳動物を産生すること、を含み、前記変異が、前記F0世代非ヒト哺乳動物の先天性リポジストロフィー様症状を生じる、前記方法。 - 前記多能性細胞が、胚性幹(ES)細胞である、請求項39に記載の方法。
- 請求項1〜38のいずれか1項に記載の非ヒト哺乳動物を作製する方法であって、
(a)非ヒト哺乳動物の1細胞期胚の前記ゲノムを、
(i)Cas9タンパク質、及び
(ii)前記Fbn1遺伝子の標的ゲノム遺伝子座内の第1のガイドRNA認識配列にハイブリダイゼーションする第1のガイドRNA、と接触させること、を含み、前記Fbn1遺伝子が、前記C末端切断型Fbn1タンパク質をもたらす前記変異を含むように改変され;
さらに、方法が、(b)前記改変非ヒト哺乳動物1細胞期胚を代理母に移植して、前記Fbn1遺伝子が前記C末端切断型Fbn1タンパク質をもたらす前記変異を含むように改変される遺伝子改変F0世代非ヒト哺乳動物を産生すること、を含み、前記変異が、前記F0世代非ヒト哺乳動物の先天性リポジストロフィー様症状を生じる、前記方法。 - ステップ(a)が、前記Fbn1遺伝子の前記標的ゲノム遺伝子座内の第2のガイドRNA認識配列にハイブリダイゼーションする第2のガイドRNAと、前記非ヒト哺乳動物多能性細胞または前記非ヒト1細胞期胚の前記ゲノムを接触させることをさらに含む、請求項39〜41のいずれか1項に記載の方法。
- 前記方法が、ステップ(a)の後に、且つステップ(b)の前に、改変非ヒト哺乳動物多能性細胞または改変非ヒト哺乳動物1細胞期胚を選択することをさらに含み、前記改変非ヒト哺乳動物多能性細胞または改変非ヒト1細胞期胚が、前記C末端切断型Fbn1タンパク質をもたらす前記変異についてヘテロ接合型である、請求項39〜42のいずれか1項に記載の方法。
- 前記接触ステップ(a)が、前記標的ゲノム遺伝子座の5’標的配列にハイブリダイゼーションする5’ホモロジーアーム及び前記標的ゲノム遺伝子座で3’標的配列にハイブリダイゼーションする3’ホモロジーアームを含む外因性修復テンプレートと、前記ゲノムを接触させることをさらに含む、請求項39〜43のいずれか1項に記載の方法。
- 前記外因性修復テンプレートが、5’ホモロジーアーム及び3’ホモロジーアームに隣接する核酸インサートをさらに含む、請求項44に記載の方法。
- 前記核酸インサートが、前記標的ゲノム遺伝子座に相同またはオーソロガスである、請求項45に記載の方法。
- 前記外因性修復テンプレートが、長さが約50ヌクレオチド〜約1kbである、請求項44〜46のいずれか1項に記載の方法。
- 前記外因性修復テンプレートが、長さが約80ヌクレオチド〜約200ヌクレオチドである、請求項47に記載の方法。
- 前記外因性修復テンプレートが、一本鎖オリゴデオキシヌクレオチドである、請求項44〜48のいずれか1項に記載の方法。
- 先天性リポジストロフィー様症状を改善するための活性について化合物をスクリーニングする方法であって、
(a)請求項1〜38のいずれか1項に記載の対象非ヒト哺乳動物を、前記化合物と接触させること、及び
(b)前記化合物と接触していない対照非ヒト哺乳動物に対して、前記対象非ヒト哺乳動物の先天性リポジストロフィー様症状の存在を決定すること、を含み、前記対照非ヒト哺乳動物が、前記対象非ヒト哺乳動物と同じFbn1変異を含み、
先天性リポジストロフィー様症状を改善するための活性が、前記対照非ヒト哺乳動物と比較した、前記対象非ヒト哺乳動物における先天性リポジストロフィー様症状の出現の減少により同定される、前記方法。 - 前記症状が、以下の:体重の減少、除脂肪量の減少、体脂肪量の減少、体重で正規化された白色脂肪組織の減少、体重で正規化された褐色脂肪組織の保存を伴う白色脂肪組織の減少、体脂肪率の減少、体重で正規化された摂食量の増加、及び後弯の増加、のうちの1つ以上を含む、請求項50に記載の方法。
- 前記症状が、体重で正規化された白色脂肪組織の減少を含む、請求項51に記載の方法。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US201662368924P | 2016-07-29 | 2016-07-29 | |
US62/368,924 | 2016-07-29 | ||
PCT/US2017/044409 WO2018023014A1 (en) | 2016-07-29 | 2017-07-28 | Mice comprising mutations resulting in expression of c-truncated fibrillin-1 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2019523009A true JP2019523009A (ja) | 2019-08-22 |
Family
ID=59656182
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2019504976A Ceased JP2019523009A (ja) | 2016-07-29 | 2017-07-28 | C末端切断型フィブリリン−1の発現をもたらす変異を有するマウス |
Country Status (14)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US10548302B2 (ja) |
EP (1) | EP3490373B1 (ja) |
JP (1) | JP2019523009A (ja) |
KR (1) | KR20190041476A (ja) |
CN (1) | CN109803530A (ja) |
AU (1) | AU2017302657A1 (ja) |
BR (1) | BR112019001783A2 (ja) |
CA (1) | CA3031206A1 (ja) |
ES (1) | ES2965134T3 (ja) |
IL (1) | IL264434A (ja) |
MX (1) | MX2019001211A (ja) |
RU (1) | RU2721125C1 (ja) |
SG (1) | SG11201901305YA (ja) |
WO (1) | WO2018023014A1 (ja) |
Families Citing this family (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2019523009A (ja) | 2016-07-29 | 2019-08-22 | リジェネロン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッドRegeneron Pharmaceuticals, Inc. | C末端切断型フィブリリン−1の発現をもたらす変異を有するマウス |
CN109486944A (zh) * | 2018-12-27 | 2019-03-19 | 中国医学科学院北京协和医院 | 基因突变作为诊断mpls标志物的应用 |
CN111296364B (zh) * | 2019-10-27 | 2022-06-24 | 上海莱士血液制品股份有限公司 | 一种基因改造的小鼠动物模型基因改造方法及其应用 |
US11895994B2 (en) | 2019-10-27 | 2024-02-13 | Shanghai Raas Blood Products Co., Ltd. | Humanized knock-in mouse expressing human Protein C |
CA3162639A1 (en) * | 2019-11-05 | 2021-05-14 | Versiti Blood Research Institute Foundation, Inc. | A murine model of fetal/neonatal alloimmune thrombocytopenia |
KR102356676B1 (ko) * | 2020-12-10 | 2022-02-07 | 서울대학교 산학협력단 | 아스프로신을 포함하는 췌장암 진단용 바이오마커 및 이의 이용 |
Family Cites Families (72)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5723286A (en) | 1990-06-20 | 1998-03-03 | Affymax Technologies N.V. | Peptide library and screening systems |
EP0773227A1 (en) | 1991-09-18 | 1997-05-14 | Affymax Technologies N.V. | Diverse collections of oligomers in use to prepare drugs, diagnostic reagents, pesticides or herbicides |
WO1994008051A1 (en) | 1992-10-01 | 1994-04-14 | The Trustees Of Columbia University In The City Of New York | Complex combinatorial chemical libraries encoded with tags |
US5523226A (en) | 1993-05-14 | 1996-06-04 | Biotechnology Research And Development Corp. | Transgenic swine compositions and methods |
BR9407947A (pt) | 1993-11-02 | 1996-11-26 | Affymax Tech Nv | Processo para sintetizar moléculas diversas em uma pluralidade de substratos e uma coleçao molecular etiquetade para realizaçao reaçoes de copulaçao em contas em paralelo para triar uma coleçao molecular etiquetada para detectar a presença de um ou mais diferentes etiquetas e para determinar a sequência de síntese aparelho para reaçoes de copulaçao paralelas em suportes sólidos bloco de alinhamento ótico para uso com um detector ótico sistemas de distribuiçao para distribuir reagentes dispositiv |
WO1995030642A1 (en) | 1994-05-06 | 1995-11-16 | Pharmacopeia, Inc. | Combinatorial dihydrobenzopyran library |
US5663046A (en) | 1994-06-22 | 1997-09-02 | Pharmacopeia, Inc. | Synthesis of combinatorial libraries |
WO1999005266A2 (en) | 1997-07-26 | 1999-02-04 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Trans-species nuclear transfer |
US6599692B1 (en) | 1999-09-14 | 2003-07-29 | Sangamo Bioscience, Inc. | Functional genomics using zinc finger proteins |
US20030104526A1 (en) | 1999-03-24 | 2003-06-05 | Qiang Liu | Position dependent recognition of GNN nucleotide triplets by zinc fingers |
US7105348B2 (en) | 2000-10-31 | 2006-09-12 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Methods of modifying eukaryotic cells |
US6586251B2 (en) | 2000-10-31 | 2003-07-01 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Methods of modifying eukaryotic cells |
US6596541B2 (en) | 2000-10-31 | 2003-07-22 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Methods of modifying eukaryotic cells |
US20050144655A1 (en) | 2000-10-31 | 2005-06-30 | Economides Aris N. | Methods of modifying eukaryotic cells |
AU2884102A (en) | 2000-12-07 | 2002-06-18 | Sangamo Biosciences Inc | Regulation of angiogenesis with zinc finger proteins |
AU2002225187A1 (en) | 2001-01-22 | 2002-07-30 | Sangamo Biosciences, Inc. | Zinc finger polypeptides and their use |
AU2002243645A1 (en) | 2001-01-22 | 2002-07-30 | Sangamo Biosciences, Inc. | Zinc finger proteins for dna binding and gene regulation in plants |
AUPR451401A0 (en) | 2001-04-20 | 2001-05-24 | Monash University | A method of nuclear transfer |
WO2003087341A2 (en) | 2002-01-23 | 2003-10-23 | The University Of Utah Research Foundation | Targeted chromosomal mutagenesis using zinc finger nucleases |
ATE372379T1 (de) | 2002-03-15 | 2007-09-15 | Cellectis | Hybride and einzelkettige meganukleasen und deren anwendungen |
US20030232410A1 (en) | 2002-03-21 | 2003-12-18 | Monika Liljedahl | Methods and compositions for using zinc finger endonucleases to enhance homologous recombination |
US7612250B2 (en) | 2002-07-29 | 2009-11-03 | Trustees Of Tufts College | Nuclear transfer embryo formation method |
CA2497913C (en) | 2002-09-05 | 2014-06-03 | California Institute Of Technology | Use of chimeric nucleases to stimulate gene targeting |
WO2004031346A2 (en) | 2002-09-06 | 2004-04-15 | Fred Hutchinson Cancer Research Center | Methods and compositions concerning designed highly-specific nucleic acid binding proteins |
US20060248603A1 (en) | 2002-12-27 | 2006-11-02 | Applied Research Systems Ars Holding N.V. | Novel fibrillin-like polypeptides |
US8409861B2 (en) | 2003-08-08 | 2013-04-02 | Sangamo Biosciences, Inc. | Targeted deletion of cellular DNA sequences |
US7888121B2 (en) | 2003-08-08 | 2011-02-15 | Sangamo Biosciences, Inc. | Methods and compositions for targeted cleavage and recombination |
EP1591521A1 (en) | 2004-04-30 | 2005-11-02 | Cellectis | I-Dmo I derivatives with enhanced activity at 37 degrees C and use thereof |
US20060063231A1 (en) | 2004-09-16 | 2006-03-23 | Sangamo Biosciences, Inc. | Compositions and methods for protein production |
CA2827654C (en) | 2004-10-19 | 2019-04-02 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Method for generating an animal homozygous for a genetic modification |
WO2006097784A1 (en) | 2005-03-15 | 2006-09-21 | Cellectis | I-crei meganuclease variants with modified specificity, method of preparation and uses thereof |
EP1863909B2 (en) | 2005-03-15 | 2014-09-10 | Cellectis | I-crei meganuclease variants with modified specificity, method of preparation and uses thereof |
CN101117633B (zh) | 2006-08-03 | 2011-07-20 | 上海交通大学附属儿童医院 | 一种细胞核移植方法 |
BRPI0720048A8 (pt) | 2006-12-14 | 2023-02-07 | Dow Agrosciences Llc | Proteínas de dedo de zinco não-canônicas otimizadas |
KR20100120226A (ko) | 2008-04-11 | 2010-11-12 | 유티씨 파워 코포레이션 | 매니폴드 섬프를 갖는 바이폴라 플레이트 및 연료 전지 |
EP2206723A1 (en) | 2009-01-12 | 2010-07-14 | Bonas, Ulla | Modular DNA-binding domains |
US20110239315A1 (en) | 2009-01-12 | 2011-09-29 | Ulla Bonas | Modular dna-binding domains and methods of use |
CA2755192C (en) | 2009-03-20 | 2018-09-11 | Sangamo Biosciences, Inc. | Modification of cxcr4 using engineered zinc finger proteins |
US8772008B2 (en) | 2009-05-18 | 2014-07-08 | Sangamo Biosciences, Inc. | Methods and compositions for increasing nuclease activity |
RU2425880C2 (ru) * | 2009-07-30 | 2011-08-10 | Учреждение Российской академии наук Институт общей генетики им. Н.И. Вавилова РАН | Способ получения трансгенных мышей |
US20120178647A1 (en) | 2009-08-03 | 2012-07-12 | The General Hospital Corporation | Engineering of zinc finger arrays by context-dependent assembly |
US8354389B2 (en) | 2009-08-14 | 2013-01-15 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | miRNA-regulated differentiation-dependent self-deleting cassette |
PL2494047T3 (pl) | 2009-10-29 | 2017-05-31 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Allele wielofunkcyjne |
HUE041436T2 (hu) | 2009-12-10 | 2019-05-28 | Univ Minnesota | Tal-effektor-közvetített DNS-módosítás |
US9637739B2 (en) | 2012-03-20 | 2017-05-02 | Vilnius University | RNA-directed DNA cleavage by the Cas9-crRNA complex |
WO2013141680A1 (en) | 2012-03-20 | 2013-09-26 | Vilnius University | RNA-DIRECTED DNA CLEAVAGE BY THE Cas9-crRNA COMPLEX |
DK3401400T3 (da) | 2012-05-25 | 2019-06-03 | Univ California | Fremgangsmåder og sammensætninger til rna-styret mål-dna-modifikation og til rna-styret transskriptionsmodulering |
WO2014033644A2 (en) | 2012-08-28 | 2014-03-06 | Novartis Ag | Methods of nuclease-based genetic engineering |
CN116064532A (zh) | 2012-10-23 | 2023-05-05 | 基因工具股份有限公司 | 用于切割靶dna的组合物及其用途 |
KR101844123B1 (ko) | 2012-12-06 | 2018-04-02 | 시그마-알드리치 컴퍼니., 엘엘씨 | Crispr-기초된 유전체 변형과 조절 |
ES2883590T3 (es) | 2012-12-12 | 2021-12-09 | Broad Inst Inc | Suministro, modificación y optimización de sistemas, métodos y composiciones para la manipulación de secuencias y aplicaciones terapéuticas |
US8697359B1 (en) | 2012-12-12 | 2014-04-15 | The Broad Institute, Inc. | CRISPR-Cas systems and methods for altering expression of gene products |
EP2931899A1 (en) | 2012-12-12 | 2015-10-21 | The Broad Institute, Inc. | Functional genomics using crispr-cas systems, compositions, methods, knock out libraries and applications thereof |
ES2741951T3 (es) | 2012-12-17 | 2020-02-12 | Harvard College | Modificación por ingeniería genética del genoma humano guiada por ARN |
WO2014130706A1 (en) | 2013-02-20 | 2014-08-28 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Genetic modification of rats |
EP2922393B2 (en) | 2013-02-27 | 2022-12-28 | Helmholtz Zentrum München - Deutsches Forschungszentrum für Gesundheit und Umwelt (GmbH) | Gene editing in the oocyte by cas9 nucleases |
EP2970986B1 (en) | 2013-03-15 | 2020-05-06 | The General Hospital Corporation | Rna-guided targeting of genetic and epigenomic regulatory proteins to specific genomic loci |
CN115261411A (zh) | 2013-04-04 | 2022-11-01 | 哈佛学院校长同事会 | 利用CRISPR/Cas***的基因组编辑的治疗性用途 |
KR20200136508A (ko) | 2013-04-16 | 2020-12-07 | 리제너론 파마슈티칼스 인코포레이티드 | 랫트 게놈의 표적화된 변형 |
WO2014182700A1 (en) | 2013-05-10 | 2014-11-13 | Sangamo Biosciences, Inc. | Delivery methods and compositions for nuclease-mediated genome engineering |
EP3011033B1 (en) | 2013-06-17 | 2020-02-19 | The Broad Institute, Inc. | Functional genomics using crispr-cas systems, compositions methods, screens and applications thereof |
US9957526B2 (en) | 2013-10-17 | 2018-05-01 | Sangamo Therapeutics, Inc. | Delivery methods and compositions for nuclease-mediated genome engineering |
WO2015065964A1 (en) | 2013-10-28 | 2015-05-07 | The Broad Institute Inc. | Functional genomics using crispr-cas systems, compositions, methods, screens and applications thereof |
EP3077412B1 (en) * | 2013-12-02 | 2023-01-04 | Baylor College of Medicine | Identification of a new polypeptide hormone for maintenance of optimal body weight and blood glucose |
CA2933433C (en) | 2013-12-11 | 2020-11-17 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Methods and compositions for the targeted modification of a genome |
JP6606088B2 (ja) | 2014-02-24 | 2019-11-13 | サンガモ セラピューティクス, インコーポレイテッド | ヌクレアーゼ媒介性標的化組み込みのための方法および組成物 |
EA039693B1 (ru) | 2014-06-16 | 2022-02-28 | Дзе Джонс Хопкинс Юниверсити | Композиции и способы для экспрессии рнк-проводников crispr с использованием промотора h1 |
RU2707911C2 (ru) | 2014-06-23 | 2019-12-02 | Регенерон Фармасьютикалз, Инк. | Опосредованная нуклеазой сборка днк |
WO2015200805A2 (en) | 2014-06-26 | 2015-12-30 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Methods and compositions for targeted genetic modifications and methods of use |
US11254933B2 (en) | 2014-07-14 | 2022-02-22 | The Regents Of The University Of California | CRISPR/Cas transcriptional modulation |
CA3176380A1 (en) | 2014-11-21 | 2016-05-26 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Methods and compositions for targeted genetic modification using paired guide rnas |
JP2019523009A (ja) | 2016-07-29 | 2019-08-22 | リジェネロン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッドRegeneron Pharmaceuticals, Inc. | C末端切断型フィブリリン−1の発現をもたらす変異を有するマウス |
-
2017
- 2017-07-28 JP JP2019504976A patent/JP2019523009A/ja not_active Ceased
- 2017-07-28 AU AU2017302657A patent/AU2017302657A1/en not_active Abandoned
- 2017-07-28 ES ES17754528T patent/ES2965134T3/es active Active
- 2017-07-28 US US15/663,410 patent/US10548302B2/en active Active
- 2017-07-28 CA CA3031206A patent/CA3031206A1/en not_active Abandoned
- 2017-07-28 WO PCT/US2017/044409 patent/WO2018023014A1/en unknown
- 2017-07-28 EP EP17754528.2A patent/EP3490373B1/en active Active
- 2017-07-28 SG SG11201901305YA patent/SG11201901305YA/en unknown
- 2017-07-28 MX MX2019001211A patent/MX2019001211A/es unknown
- 2017-07-28 RU RU2019105783A patent/RU2721125C1/ru active
- 2017-07-28 KR KR1020197005701A patent/KR20190041476A/ko not_active Application Discontinuation
- 2017-07-28 CN CN201780058672.XA patent/CN109803530A/zh active Pending
- 2017-07-28 BR BR112019001783-6A patent/BR112019001783A2/pt not_active Application Discontinuation
-
2019
- 2019-01-23 IL IL264434A patent/IL264434A/en unknown
- 2019-12-17 US US16/717,597 patent/US11730150B2/en active Active
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
IL264434A (en) | 2019-02-28 |
AU2017302657A1 (en) | 2019-02-14 |
CA3031206A1 (en) | 2018-02-01 |
CN109803530A (zh) | 2019-05-24 |
MX2019001211A (es) | 2019-09-16 |
ES2965134T3 (es) | 2024-04-11 |
EP3490373A1 (en) | 2019-06-05 |
US11730150B2 (en) | 2023-08-22 |
KR20190041476A (ko) | 2019-04-22 |
SG11201901305YA (en) | 2019-03-28 |
US20180027782A1 (en) | 2018-02-01 |
BR112019001783A2 (pt) | 2019-05-07 |
EP3490373B1 (en) | 2023-10-25 |
US10548302B2 (en) | 2020-02-04 |
EP3490373C0 (en) | 2023-10-25 |
WO2018023014A1 (en) | 2018-02-01 |
RU2721125C1 (ru) | 2020-05-18 |
US20200107527A1 (en) | 2020-04-09 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
AU2021201239B2 (en) | Methods and compositions for targeted genetic modifications and methods of use | |
JP7095066B2 (ja) | 単一ステップの複数標的化を通じた標的化された遺伝子修飾のための方法及び組成物 | |
US11730150B2 (en) | Fibrillin-1 mutations for modeling neonatal progeroid syndrome with congenital lipodystrophy | |
NZ765592B2 (en) | Methods and compositions for targeted genetic modifications and methods of use | |
NZ765592A (en) | Methods and compositions for targeted genetic modifications and methods of use |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20190607 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20200701 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20200925 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821 Effective date: 20200925 |
|
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20210224 |
|
A045 | Written measure of dismissal of application [lapsed due to lack of payment] |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A045 Effective date: 20210726 |