JP2019218280A - Bathing composition - Google Patents
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Abstract
Description
本技術は、非経口的組成物、例えば入浴用組成物及び非経口的伝播用組成物に関する。 The present technology relates to parenteral compositions, such as bathing compositions and parenteral delivery compositions.
古くから腸内細菌叢は我々の健康と密接なかかわりあいを持つことが知られている。動物の腸内で有益な働きをする微生物（善玉菌）をプロバイオティクスと呼んでいる。一般的に「プロバイオティクス」とは、動物に良い影響を与える微生物（善玉菌）又はそれらを含む製品若しくは食品等のことをいう。このプロバイオティクスを、積極的に摂取して腸内環境を整えることで、病気の発生抑制、健康増進等の効果を期待している。 Intestinal flora has long been known to be closely related to our health. Microorganisms (good bacteria) that play a beneficial role in the intestines of animals are called probiotics. In general, “probiotics” refers to microorganisms (good bacteria) that have a good effect on animals, or products or foods containing them. By proactively taking this probiotic and preparing the intestinal environment, it is expected to have the effects of suppressing the occurrence of disease and promoting health.
そして、腸内環境を整えるために、プロバイオティクス入りのヨーグルトや乳酸菌飲料又は食物繊維やオリゴ糖が含まれる食品等を摂取することが一般的である。しかし、プロバイオティクスは生きたまま腸内に到達することが難しく、到達させるための技術が検討されたり、到達しやすいように生残率が高い細菌の探索が行われている。
また、腸内環境改善のための別のアプローチとして、腸内のプロバイオティクスを増殖促進させて腸内環境を改善させることも検討されており、腸内のプロバイオティクスを増殖促進させるための物質（すなわち、プレバイオティクス）の探索が行われている。例えば、特許文献１には、重量平均分子量が１００００〜３０００００であり、かつ還元糖量が０．１２〜２．０に調整された寒天を含有することを特徴とする乳酸菌増殖促進剤が開示されている。
Then, in order to prepare an intestinal environment, it is common to ingest yogurt or lactic acid bacteria beverages containing probiotics or foods containing dietary fiber or oligosaccharides. However, it is difficult for probiotics to reach the intestine alive, and techniques for reaching them are being studied, and bacteria with a high survival rate are being searched for easy access.
As another approach to improving the intestinal environment, studies have been conducted on improving the intestinal environment by promoting the growth of intestinal probiotics. A search for substances (ie, prebiotics) is underway. For example, Patent Literature 1 discloses a lactic acid bacteria growth promoter comprising agar having a weight average molecular weight of 10,000 to 300,000 and a reducing sugar amount adjusted to 0.12 to 2.0. ing.
本技術は、腸内環境を改善できる技術を提供することを主な目的とする。 The main purpose of the present technology is to provide a technology that can improve the intestinal environment.
ところで、我々の腸内細菌叢の由来やその定着メカニズムは、一部の細菌を除いてほとんど明らかにされていない。
乳幼児は、母親の産道を通る際にビフィズス菌等の腸内細菌を受け継ぐことが知られている（非特許文献１）が、乳幼児の腸内細菌は成長とともに大きな変化を遂げ、産まれて間もなく定着した腸内細菌が生涯を通じて棲息しているわけではない（非特許文献２）。さらに、最近の研究から、母子間には該当しない父子間や夫婦間でも一部の腸内細菌を共有していることが明らかとなった（非特許文献３）。
また、環境には様々な細菌が棲息していることから、大気中に含まれるものや手に付着したもの等が鼻腔・口腔内から侵入し腸内細菌叢を形成するという想定も考えられる。しかしながら、ビフィズス菌等の腸内細菌は通性嫌気性細菌であるものがほとんどであることから、長時間好気条件で生存することは不可能である。
By the way, the origin of our intestinal flora and the mechanism of its establishment are hardly clarified except for some bacteria.
Infants and infants are known to inherit intestinal bacteria such as bifidobacteria when passing through the mother's birth canal (Non-Patent Document 1). However, intestinal bacteria in infants undergo large changes with growth and become established soon after birth. Intestinal bacteria that have lived are not inhabited throughout their lives (Non-Patent Document 2). Furthermore, recent research has revealed that some intestinal bacteria are shared between fathers and sons and between married couples, which do not fall between mothers and children (Non-Patent Document 3).
In addition, since various bacteria inhabit the environment, it is conceivable that it is assumed that substances contained in the atmosphere and those attached to hands invade from the nasal cavity and oral cavity to form intestinal flora. However, most of intestinal bacteria such as bifidobacteria are facultative anaerobic bacteria, so that it is impossible to survive for a long time under aerobic conditions.
プロバイオティクスを含むヨーグルト等の経口摂取による腸内環境改善が、簡便で安全性も高いことから、一般的なアプローチの手法であり、如何に口から腸内に到達させるかの技術が研究開発されている。
ところが、本発明者らは、プロバイオティクスの動物間の伝播経路について、鋭意研究を進めていたところ、日本人特有の文化であるお風呂によって腸内細菌が伝播していることを偶然にも気がついた。さらに検討した結果、本発明者は、生菌であるプロバイオティクスを混ぜた水にヒト等の動物を水浴させることで腸内細菌叢が変化して腸内環境を改善できることを新たに見出した。
斯様にして、本発明者らは、簡便でありながら腸内環境を改善でき、かつ安全性も高い新たな技術を偶然にも発見し、本発明を完成させた。
Improving the intestinal environment by oral ingestion of yogurt and other substances containing probiotics is a simple and highly safe approach, so this is a general approach, and research and development on how to reach the intestine from the mouth through the mouth Have been.
However, the present inventors have been eagerly studying the transmission route of probiotics between animals, and by coincidence, the fact that intestinal bacteria are transmitted by a bath, a culture unique to Japanese people, happened to occur. noticed. As a result of further studies, the present inventors have newly found that by incubating an animal such as a human in water mixed with probiotics, which is a viable bacterium, the intestinal flora can be changed and the intestinal environment can be improved. .
In this way, the present inventors have accidentally discovered a new technique that can improve the intestinal environment while being simple and highly safe, and have completed the present invention.
本明細書において「水浴する」とは、少なくともお尻（特に肛門周辺部）を水に浸ける又は少なくともお尻（特に肛門周辺部）に水を接触させることをいい、例えば、沐浴、水浴び、入浴等が挙げられ、当該水の温度は特に限定されない。
本明細書において、「肛門周辺部」とは、「肛門及びその周辺部」のことをいう。
本発明は以下のとおりである。
In the present specification, “bathing” refers to immersing at least the buttocks (particularly, the periphery of the anus) in water or contacting at least the buttocks (particularly, the periphery of the anus) with water, for example, bathing, bathing, and bathing. Etc., and the temperature of the water is not particularly limited.
In this specification, the “peripheral part of the anus” refers to the “anus and its peripheral part”.
The present invention is as follows.
本技術は、生菌であるプロバイオティクスを含む入浴用組成物又は非侵襲性非経口的伝播用組成物を提供するものである。
本技術は、生菌であるプロバイオティクスを使用する水浴方法又は非侵襲性非経口的伝播方法を提供するものである。
また、本技術は、ビフィドバクテリウム・ロンガム ＮＩＴＥ ＢＰ−０２７２５、及び／若しくは、ビフィドバクテリウム・ロンガム ＮＩＴＥ ＢＰ−０２７０６、又は、当該ロンガム若しくは当該ロンガム培養物を含む組成物を提供するものである。
前記プロバイオティクスが、乳酸菌及び／又はビフィドバクテリウム属細菌であってもよい。
前記乳酸菌が、ラクトバチルス属細菌であってもよい。
前記プロバイオティクスが、
ラクトバチルス・アシドフィルス、ラクトバチルス・パラカゼイ、ラクトバチルス・ラムノーサス、ラクトバチルス・ガセリ、ラクトバチルス・ヘルベティカス、ビフィドバクテリウム・ロンガム、ビフィドバクテリウム・ブレーベ、ビフィドバクテリウム・シュードカテナラタム、及びビフィドバクテリウム・ビフィダムからなる群から選ばれる１種又は２種以上であってもよい。
前記プロバイオティクスが、ラクトバチルス・アシドフィルス ＮＩＴＥ ＢＰ−０１６９５、ラクトバチルス・パラカゼイ ＮＩＴＥ ＢＰ−０１６３３、 ラクトバチルス・ガセリ ＮＩＴＥ ＢＰ−０１６６９、ラクトバチルス・ヘルベティカス ＮＩＴＥ ＢＰ−０１６７１、ビフィドバクテリウム・ロンガム ＮＩＴＥ ＢＰ−０２６２１、ビフィドバクテリウム・ロンガム ＮＩＴＥ ＢＰ−０２７２５、ビフィドバクテリウム・ロンガム ＮＩＴＥ ＢＰ−０２７０６、ビフィドバクテリウム・ブレーベ ＮＩＴＥ ＢＰ−０２６２２、 ビフィドバクテリウム・シュードカテナラタム ＤＳＭ２０４３８、ビフィドバクテリウム・ビフィダム ＪＣＭ１２５４、及びビフィドバクテリウム・ロンガム ＪＣＭ１２１７からなる群から選ばれる１種又は２種以上であってもよい。
前記プロバイオティクスが、細菌培養物であってもよい。
前記組成物が、プロバイオティクスを腸内に伝播させるためであってもよい。
前記組成物が、腸内環境改善に用いられてもよい。
The present technology provides a composition for bathing or a composition for non-invasive parenteral transmission containing a probiotic which is a living bacterium.
The present technology provides a water bath method or a non-invasive parenteral transmission method using probiotics that are live bacteria.
The present technology also provides a composition comprising Bifidobacterium longum NITE BP-02725 and / or Bifidobacterium longum NITE BP-02706, or the longam or the longum culture. is there.
The probiotics may be lactic acid bacteria and / or Bifidobacterium bacteria.
The lactic acid bacterium may be a Lactobacillus bacterium.
Said probiotics,
Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus paracasei, Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus gasseri, Lactobacillus helveticus, Bifidobacterium longum, Bifidobacterium breve, Bifidobacterium pseudocatenaratam, and One or two or more selected from the group consisting of Bifidobacterium bifidum may be used.
The probiotics may be Lactobacillus acidophilus NITE BP-016995, Lactobacillus paracasei NITE BP-01633, Lactobacillus gasseri NITE BP-01669, Lactobacillus helveticus NITE BP-01671, Bifidobacterium longum B. -02621, Bifidobacterium longum NITE BP-02725, Bifidobacterium longum NITE BP-02706, Bifidobacterium breve NITE BP-02622, Bifidobacterium pseudocatenaratum DSM20438, Bifidobacterium One or two selected from the group consisting of Umm Bifidum JCM1254 and Bifidobacterium longum JCM1217 It may be a top.
The probiotic may be a bacterial culture.
The composition may be for transmitting a probiotic into the intestine.
The composition may be used for improving the intestinal environment.
本明細書において「入浴用組成物」は少なくとも水浴するための組成物をいい、当該組成物を用いて水浴するときの水温は特に限定されないが、望ましくは２０℃〜４５℃、さらに望ましくは３０℃〜４２℃が好ましい。明細書において「入浴用組成物」は、沐浴剤、入浴剤、浴用剤とも表現することが可能であり、当該入浴用組成物の使用目的は特に限定されず、非治療目的（例えば健康増進、美容目的等）であってもよく、また化粧品、医薬部外品としても用いてもよい。
本明細書において、「非侵襲性非経口的伝播」として、例えば、お尻（特に肛門周辺部）の皮膚表面に非侵襲的にあるモノを接触させて腸内に伝播させることができること等が挙げられる。当該非侵襲性非経口的伝播用組成物として、例えば、お尻洗浄ケア用品、お尻洗浄剤、浴用剤、入浴剤、沐浴剤等が挙げられる。
本明細書において、「非侵襲性」とは皮膚内又は体内に器具や剤の挿入を必要としないことをいう。
In the present specification, “bathing composition” refers to a composition for at least bathing, and the water temperature when bathing with the composition is not particularly limited, but is preferably 20 ° C. to 45 ° C., and more preferably 30 ° C. C. to 42 C. are preferred. In the specification, the “bath composition” can also be expressed as a bath agent, a bath agent, a bath agent, and the purpose of use of the bath composition is not particularly limited, and it can be used for non-therapeutic purposes (for example, health promotion, Cosmetics) or may be used as cosmetics or quasi-drugs.
As used herein, the term "non-invasive parenteral transmission" refers to, for example, the fact that a non-invasive object can be brought into contact with the skin surface of the buttocks (particularly, the area around the anus) and transmitted to the intestine. No. Examples of the non-invasive composition for parenteral transmission include buttocks-care products, buttocks, bath preparations, bath preparations, bath preparations, and the like.
As used herein, "non-invasive" means that no instrument or agent needs to be inserted into the skin or body.
本技術によれば、腸内環境を改善できる技術を提供することができる。なお、ここに記載された効果は、必ずしも限定されるものではなく、本技術中に記載されたいずれかの効果であってもよい。 According to the present technology, a technology capable of improving the intestinal environment can be provided. Note that the effects described here are not necessarily limited, and may be any of the effects described in the present technology.
以下、本技術を実施するための好適な実施形態について説明する。なお、以下に説明する実施形態は、本技術の代表的な実施形態の一例を示したものであり、これにより本技術の範囲が狭く解釈されることはない。尚、本明細書において百分率は特に断りのない限り質量による表示である。 Hereinafter, a preferred embodiment for carrying out the present technology will be described. The embodiment described below is an example of a typical embodiment of the present technology, and the range of the present technology is not interpreted as being narrow. In addition, in this specification, the percentage is represented by mass unless otherwise specified.
本技術は、生菌であるプロバイオティクスを含む非経口的組成物（より好適には、入浴用組成物、非侵襲性非経口的伝播用組成物）を提供するものである。また、本技術は、プロバイオティクスを非経口的に使用する方法（より好適には、水浴方法、非侵襲性非経口的伝播方法等）を提供するものである。
本技術では、プロバイオティクスでありかつ生菌であることが好ましい。
本技術は、プロバイオティクスをお尻（特に肛門周辺部）の皮膚に接触させることで、プロバイオティクスを動物に伝播させることができ、さらに伝播された動物の腸内環境を改善させることができる。
一般的に「プロバイオティクス」とは動物に良い影響を与える微生物（以下、「善玉菌」ともいう）又はそれらを含む製品若しくは食品等をいう。
本技術では、この「プロバイオティクス」を用いることができる。本技術では、安全性の観点から、飲食品に利用可能な善玉菌が好ましい。プロバイオティクスを用いることにより、腸内細菌叢及び腸内環境を整えることができ、病気の発生抑制、健康増進等を行うことができる。
なお、本発明において、「プロバイオティクス」は生菌であることが好ましい。生菌として使用する場合は、本発明のプロバイオティクスを培養後、得られた培養物をそのまま用いてもよく、希釈又は濃縮して用いてもよく、培養物から回収した菌体を用いてもよい。生菌の場合は、菌液凍結法、スプレードライ法、凍結乾燥法、オイルドロップ法で処理して本発明の組成物として用いることが出来る。
The present technology provides a parenteral composition (more preferably, a bathing composition and a non-invasive parenteral transmission composition) containing a probiotic which is a living bacterium. The present technology also provides a method of using a probiotic parenterally (more preferably, a water bath method, a non-invasive parenteral transmission method, and the like).
In the present technology, it is preferable that the microorganism is a probiotic and a living bacterium.
This technology allows the probiotics to be transmitted to animals by contacting the probiotics with the skin of the hips (particularly around the anus), and further improves the intestinal environment of the transmitted animals. it can.
Generally, “probiotics” refers to microorganisms that have a good effect on animals (hereinafter, also referred to as “good bacteria”), or products or foods containing them.
In the present technology, this “probiotic” can be used. In the present technology, from the viewpoint of safety, good bacteria that can be used in foods and drinks are preferable. By using probiotics, the intestinal flora and the intestinal environment can be prepared, and the occurrence of diseases, the promotion of health, and the like can be performed.
In the present invention, “probiotics” are preferably viable bacteria. When used as a viable cell, after culturing the probiotic of the present invention, the resulting culture may be used as it is, or may be used after dilution or concentration, using the cells recovered from the culture. Is also good. In the case of a viable cell, it can be used as a composition of the present invention after being treated by a bacterial solution freezing method, a spray drying method, a freeze drying method, or an oil drop method.
本技術の適用対象は、動物であれば特に限定されず、ヒト若しくは非ヒト動物（例えば、イヌ、ネコ、ネズミ、マウス、ウシ、ブタ、ヒツジ、ウマ等の哺乳類）に使用してもよく、ヒト及びペットが好ましく、より好ましくは、伝播効率の観点から、ヒトである。
さらに本技術の適用対象は、乳酸菌、ビフィズス菌を摂取することにより腸内環境を整えたい方に投与することが好ましく、高齢者、中年層、乳幼児、男女関わらず投与することが出来る。さらに適用対象としては、経口からの投与が困難な対象、例えば乳児、新生児に使用出来ることが好ましい。乳児、新生児の場合は、沐浴剤として使用することも可能である。
The application target of the present technology is not particularly limited as long as it is an animal, and may be used for humans or non-human animals (eg, mammals such as dogs, cats, mice, mice, cows, pigs, sheep, and horses). Humans and pets are preferred, and humans are more preferred from the viewpoint of transmission efficiency.
Furthermore, the subject to which the present technology is applied is preferably administered to those who want to prepare an intestinal environment by ingesting lactic acid bacteria and bifidobacteria, and can be administered to elderly people, middle-aged people, infants, and men and women. Further, as an application target, it is preferable that the composition can be used for a subject to which oral administration is difficult, for example, an infant or a newborn. In the case of infants and newborns, it can be used as a bath.
前記プロバイオティクスは、乳酸菌（好適にはラクトバチルス属細菌）及び／又はビフィドバクテリウム属細菌が好ましい。さらに、本技術は、以下のような乳酸菌及びビフィドバクテリウム属細菌（以下、「ビフィズス菌」ともいう。）の例示の群から選ばれる１種又は２種以上について適用することが可能である。 The probiotics are preferably lactic acid bacteria (preferably Lactobacillus bacteria) and / or Bifidobacterium bacteria. Furthermore, the present technology can be applied to one or more selected from the group consisting of the following lactic acid bacteria and bacteria of the genus Bifidobacterium (hereinafter also referred to as "bifidobacteria"). .
本技術における前記乳酸菌は特に限定されないが、好適にはラクトバチルス（Lactobacillus）属、ラクトコッカス（Lactococcus）属、ストレプトコッカス（Streptococcus）属の細菌である。
当該乳酸菌として、より具体的な例を挙げれば、ラクトバチルス・カゼイ（Lactobacillus casei）；ラクトバチルス・パラカゼイ（Lactobacillus paracasei）；ラクトバチルス・ラムノーサス（Lactobacillus rhamnosus）；ラクトバチルス・ガセリ（Lactobacillus gasseri）；ラクトバチルス・アシドフィルス（Lactobacillus acidophilus）；ラクトバチルス・ラクティス・サブスピーシーズ・ラクティス（Lactococcus lactis subsp. lactis）；ラクトバチルス・ラクティス・サブスピーシーズ・クレモリス（Lactococcus lactis subsp. cremoris）；ラクトバチルス・ブルガリカス（Lactobacillus bulgaricus）；ラクトバチルス・サリバリウス（Lactobacillus salivarius）；ラクトバチルス・ファーメンタム（Lactobacillus fermentum）；ラクトバチルス・ブレビス（Lactobacillus brevis）；ラクトバチルス・イエンセン（Lactobacillus jensenii）；ラクトバチルス・ジョンソニー（Lactobacillus johnsonii）；ラクトバチルス・プランタラム（Lactobacillus plantarum）；ラクトバチルス・ロイテリ（Lactobacillus reuteri）；ラクトバチルス・ヘルベティカス（Lactobacillus helveticus）；ラクトバチルス・デルリュッキー・サブスピーシーズ・ブルガリカス（Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus）；ストレプトコッカス・サーモフィリス（Streptococcus thermophilus）等が挙げられる。
このうち好ましい例として、ラクトバチルス・アシドフィルス、ラクトバチルス・ラムノーサス、ラクトバチルス・パラカゼイ、ラクトバチルス・ガセリ、及びラクトバチルス・ヘルベティカス等が挙げられる。
前記乳酸菌からなる群から１種又は２種以上を選択し、単独で又は複数組み合わせて本技術のプロバイオティクスとして使用してもよい。
The lactic acid bacterium in the present technology is not particularly limited, but is preferably a bacterium belonging to the genus Lactobacillus, the genus Lactococcus, or the genus Streptococcus.
Lactobacillus casei (Lactobacillus casei); Lactobacillus paracasei (Lactobacillus paracasei); Lactobacillus rhamnosus (Lactobacillus rhamnosus); Lactobacillus gasseri (Lactobacillus gasseri); Lactobacillus acidophilus; Lactococcus lactis subsp. Lactis; Lactococcus lactis subsp. Cremoris; Lactobacillus bulgaricus; Lactobacillus salivarius; Lactobacillus fermentum; Lactobacillus brevis; Lactobacillus jensen ( Lactobacillus jensenii); Lactobacillus johnsonii; Lactobacillus plantarum; Lactobacillus reuteri; Lactobacillus helveticus; Lactobacillus helveticus; Lactobacillus helveticus; Bulgaricus; Lactobacillus delbrueckii subsp. Bulgaricus; Streptococcus thermophilus, and the like.
Preferred examples thereof include Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus paracasei, Lactobacillus gasseri, and Lactobacillus helveticus.
One or more selected from the group consisting of the lactic acid bacteria may be used alone or in combination as a probiotic of the present technology.
本技術における前記ビフィドバクテリウム（Bifidobacterium）属細菌は特に限定されない。当該ビフィドバクテリウム属細菌として、より具体的な例を挙げれば、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガム（Bifidobacterium longum subsp. longum）；ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティス（Bifidobacterium longum subsp. infantis）；ビフィドバクテリウム・ブレーベ（Bifidobacterium breve）；ビフィドバクテリウム・ビフィダム（Bifidobacterium bifidum）；ビフィドバクテリウム・シュードカテナラタム（Bifidobacterium pseudocatenulatum）；ビフィドバクテリウム・アニマリス・サブスピーシーズ・アニマリス（Bifidobacterium animalis subsp. animalis）；ビフィドバクテリウム・アニマリス・サブスピーシーズ・ラクティス（Bifidobacterium animalis subsp.lactis）；ビフィドバクテリウム・アドレセンティス（Bifidobacterium adolescentis）等が挙げられる。
このうち好ましい例として、ビフィドバクテリウム・ロンガム、ビフィドバクテリウム・ブレーベ、ビフィドバクテリウム・シュードカテナラタム、及びビフィドバクテリウム・ビフィダム等が挙げられる。
当該ビフィドバクテリウム・ロンガムは、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガム、及びビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティス等が挙げられるが、このうち、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガムが好適である。
前記ビフィズス菌からなる群から１種又は２種以上を選択し、単独で又は複数組み合わせて本技術のプロバイオティクスとして使用してもよい。
The bacteria belonging to the genus Bifidobacterium in the present technology are not particularly limited. More specific examples of the Bifidobacterium genus include Bifidobacterium longum subsp. Longum; Bifidobacterium longum subsp. Longum, and Bifidobacterium longum subsp. Longum. (Bifidobacterium longum subsp. Infantis); Bifidobacterium breve; Bifidobacterium bifidum; Bifidobacterium pseudocatenulatum; Bifidobacterium animalis・ Bifidobacterium animalis subsp. Animalis; Bifidobacterium animalis subsp. Lactis; Bifidobacterium adolescen tis).
Of these, preferred examples include Bifidobacterium longum, Bifidobacterium breve, Bifidobacterium pseudocatenaratam, and Bifidobacterium bifidum.
Examples of the Bifidobacterium longum include Bifidobacterium longum subspecies longum and Bifidobacterium longum subspecies longifants, among which Bifidobacterium longum. -Subspecies longum is preferred.
One or more kinds may be selected from the group consisting of the bifidobacteria and used alone or in combination as a probiotic of the present technology.
前記プロバイオティクス（好適には乳酸菌及び／又はビフィズス菌）のうち、ラクトバチルス・アシドフィルス、ラクトバチルス・パラカゼイ、ラクトバチルス・ラムノーサス、ラクトバチルス・ガセリ、及びラクトバチルス・ヘルベティカス、並びに、ビフィドバクテリウム・ロンガム、及びビフィドバクテリウム・ブレーベ、ビフィドバクテリウム・シュードカテナラタム、及びビフィドバクテリウム・ビフィダムからなる群から選ばれる１種又は２種以上の細菌が、好ましい。これらは、伝播性及び非侵襲的・非経口的での腸内環境改善の観点から、好ましい。当該種類の細菌は、長時間の生残率が高いので、長時間伝播性を維持することができる。また、当該種類の細菌であれば、一般的な一人あたりの入浴時間（５〜３０分程度）の間、伝播能を維持でき、より良好に水浴時の伝播性を向上させることが可能である。 Among the probiotics (preferably lactic acid bacteria and / or bifidobacteria), Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus paracasei, Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus gasseri, Lactobacillus helveticus, and Bifidobacterium Longum and one or more bacteria selected from the group consisting of Bifidobacterium breve, Bifidobacterium pseudocatenaratam, and Bifidobacterium bifidum are preferred. These are preferred from the viewpoints of transmissibility and noninvasive / parenteral improvement of the intestinal environment. This kind of bacteria has a high long-term survival rate, and can maintain long-term transmissibility. In addition, if the bacterium is of this type, it is possible to maintain the transmissibility during a general bathing time per person (about 5 to 30 minutes), and it is possible to more appropriately improve the transmissibility during bathing. .
さらに、前記プロバイオティクスの例示のうち、ラクトバチルス・アシドフィルス、ラクトバチルス・パラカゼイ、ラクトバチルス・ラムノーサス、ラクトバチルス・ガセリ、及びラクトバチルス・ヘルベティカス、並びに、ビフィドバクテリウム・ロンガム（より好適には、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガム）、及びビフィドバクテリウム・ブレーベからなる群から選ばれる１種又は２種以上の細菌が好適である。当該種類の細菌はより長時間生残するので、長時間の伝播性を維持できる。
このうち、より長時間の伝播性維持の観点から、前記ラクトバチルス属細菌のうちラクトバチルス・アシドフィルス、ラクトバチルス・パラカゼイ、ラクトバチルス・ラムノーサス、及びラクトバチルス・ヘルベティカスが好適であり、前記ビフィズス菌のうちビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガム、及び／又はビフィドバクテリウム・ブレーベが好適である。これらラクトバチルス属細菌及びビフィズス菌からなる群から１種又は２種以上を選択し、単独で又は複数組み合わせて本発明のプロバイオティクスとして使用してもよい。
Further, among the examples of the probiotics, Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus paracasei, Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus gasseri, Lactobacillus helveticus, and Bifidobacterium longum (more preferably , Bifidobacterium longum subspecies longum), and one or more bacteria selected from the group consisting of Bifidobacterium breve. The bacteria of this type survive for a longer period of time, so that long-term transmission can be maintained.
Among them, Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus paracasei, Lactobacillus rhamnosus, and Lactobacillus helveticus among the bacteria of the genus Lactobacillus are preferable from the viewpoint of maintaining the transmissibility for a longer time, and the Bifidobacterium Among them, Bifidobacterium longum subspecies longum and / or Bifidobacterium breve are preferred. One or more selected from the group consisting of the Lactobacillus bacteria and the Bifidobacterium may be used alone or in combination as a probiotic of the present invention.
本技術におけるプロバイオティクスとして使用できる菌株は特に限定されない。当該プロバイオティクスは、市販の製品に善玉菌として含まれる有用な菌株、微生物株保存機関でカルチャー・コレクションとして保存されている菌株、ブダペスト条約に基づく国際寄託機関で受託菌として保存されている菌株、将来見出される有用な菌株等が挙げられる。
当該プロバイオティクスに使用可能な菌株として、例えば、後述する（１）〜（１４）の菌株が挙げられ、これらを単独で又は複数組み合わせて使用することができる。
Strains that can be used as probiotics in the present technology are not particularly limited. The probiotic is a useful strain contained as a good bacterium in a commercially available product, a strain stored as a culture collection in a microorganism strain preservation institution, and a strain stored as a deposit in a depositary institution based on the Budapest Treaty. And useful strains to be found in the future.
Examples of strains that can be used for the probiotics include the strains (1) to (14) described below, and these can be used alone or in combination.
さらに、本技術におけるプロバイオティクスのうち、より良好な伝播性維持及び非侵襲的で非経口的により良好に腸内環境改善可能の観点から、本技術における非経口的組成物としてより好適に使用可能な菌株として、
前記乳酸菌からは、例えば、
ラクトバチルス・アシドフィルス ＮＩＴＥ ＢＰ−０１６９５、
ラクトバチルス・パラカゼイ ＮＩＴＥ ＢＰ−０１６３３、
ラクトバチルス・ラムノーサス ＬＣＳ７４２、
ラクトバチルス・ガセリ ＮＩＴＥ ＢＰ−０１６６９、及び
ラクトバチルス・ヘルベティカス ＮＩＴＥ ＢＰ−０１６７１、並びに、
前記ビフィズス菌からは、例えば、
ビフィドバクテリウム・ロンガム ＮＩＴＥ ＢＰ−０２６２１、
ビフィドバクテリウム・ロンガム ＮＩＴＥ ＢＰ−０２７２５、
ビフィドバクテリウム・ロンガム ＮＩＴＥ ＢＰ−０２７０６、
ビフィドバクテリウム・ブレーベ ＮＩＴＥ ＢＰ−０２６２２、
ビフィドバクテリウム・シュードカテナラタム ＤＳＭ２０４３８、
ビフィドバクテリウム・ビフィダム ＪＣＭ１２５４、及び
ビフィドバクテリウム・ロンガム ＪＣＭ１２１７；
からなる群から選ばれる１種又は２種以上のものが好ましい。
Furthermore, among the probiotics of the present technology, from the viewpoint of better maintenance of transmissibility and non-invasive and better parenteral improvement of the intestinal environment, it is more preferably used as a parenteral composition in the present technology. Possible strains include:
From the lactic acid bacteria, for example,
Lactobacillus acidophilus NITE BP-016995,
Lactobacillus paracasei NITE BP-01633,
Lactobacillus rhamnosus LCS742,
Lactobacillus gasseri NITE BP-01669, and Lactobacillus helveticus NITE BP-01671, and
From the bifidobacteria, for example,
Bifidobacterium longum NITE BP-02621,
Bifidobacterium longum NITE BP-02725,
Bifidobacterium longum NITE BP-02706,
Bifidobacterium breve NITE BP-02622,
Bifidobacterium pseudocatenaratum DSM20438,
Bifidobacterium bifidum JCM1254, and Bifidobacterium longum JCM1217;
One or more selected from the group consisting of
さらに前記乳酸菌のうち、長時間の伝播性維持の観点から、好適には、ラクトバチルス・アシドフィルス ＮＩＴＥ ＢＰ−０１６９５、ラクトバチルス・パラカゼイ ＮＩＴＥ ＢＰ−０１６３３、ラクトバチルス・ラムノーサス ＬＣＳ７４２、及びラクトバチルス・ヘルベティカス ＮＩＴＥ ＢＰ−０１６７１である。
よりさらに好適には、ラクトバチルス・アシドフィルス ＮＩＴＥ ＢＰ−０１６９５、ラクトバチルス・パラカゼイ ＮＩＴＥ ＢＰ−０１６３３、及びラクトバチルス・ラムノーサス ＬＣＳ７４２である。
これらからなる群から１種又は２種以上を選択し、単独で又は複数組み合わせて浴用プロバイオティクスとして使用してもよい。
Further, among the lactic acid bacteria, from the viewpoint of maintaining long-term transmission properties, Lactobacillus acidophilus NITE BP-01695, Lactobacillus paracasei NITE BP-01633, Lactobacillus rhamnosus LCS742, and Lactobacillus helveticus NITE are preferred. BP-01671.
Even more preferably, Lactobacillus acidophilus NITE BP-016995, Lactobacillus paracasei NITE BP-01633, and Lactobacillus rhamnosus LCS742.
One or more selected from the group consisting of these may be used alone or in combination as a bath probiotic.
さらに前記ビフィズス菌のうち、長時間の伝播性維持の観点から、好適には、ビフィドバクテリウム・ロンガム ＮＩＴＥ ＢＰ−０２６２１、ビフィドバクテリウム・ロンガム ＮＩＴＥ ＢＰ−０２７２５、ビフィドバクテリウム・ロンガム ＮＩＴＥ ＢＰ−０２７０６、及びビフィドバクテリウム・ブレーベ ＮＩＴＥ ＢＰ−０２６２２である。
よりさらに好適には、ビフィドバクテリウム・ロンガム ＮＩＴＥ ＢＰ−０２７２５、及びビフィドバクテリウム・ロンガム ＮＩＴＥ ＢＰ−０２７０６である。
これらからなる群から１種又は２種以上を選択し、単独で又は複数組み合わせて浴用プロバイオティクスとして使用してもよい。
Further, among the aforementioned Bifidobacteria, from the viewpoint of maintaining long-term transmissivity, preferably, Bifidobacterium longum NITE BP-02621, Bifidobacterium longum NITE BP-02725, and Bifidobacterium longum NITE BP-02706 and Bifidobacterium breve NITE BP-02622.
Even more preferably, Bifidobacterium longum NITE BP-02725 and Bifidobacterium longum NITE BP-02706.
One or more selected from the group consisting of these may be used alone or in combination as a bath probiotic.
（１）ラクトバチルス・アシドフィルス ＮＩＴＥ ＢＰ−０１６９５（受託番号：NITE BP-01695）（受託日：２０１３年８月２３日）、受託先：〒２９２−０８１８ 日本国千葉県木更津市かずさ鎌足２−５−８ １２２号室、独立行政法人 製品評価技術基盤機構 特許微生物寄託センター（ＮＰＭＤ）。当該菌株（受託番号：NITE BP-01695）は、ブダペスト条約に基づき国際寄託されている。当該菌株（受託番号：NITE BP-01695）は、ラクトバチルス・アシドフィルス細菌と同定され、ブダペスト条約に基づき国際寄託されている。 (1) Lactobacillus acidophilus NITE BP-016995 (Accession No .: NITE BP-01695) (Acceptance date: August 23, 2013), Entrustee: 2-Kazumasa Kazusa, Kisarazu-shi, Chiba, Japan 292-0818 Japan 5-8 Room 122, National Institute of Technology and Evaluation, Patent Microorganisms Depositary Center (NPMD). The strain (accession number: NITE BP-01695) has been deposited internationally under the Budapest Treaty. The strain (Accession number: NITE BP-01695) has been identified as a Lactobacillus acidophilus bacterium and has been deposited internationally under the Budapest Treaty.
（２）ラクトバチルス・パラカゼイ ＮＩＴＥ ＢＰ−０１６３３（受託番号：NITE BP-01633）（受託日：２０１３年６月６日）、受託先：〒２９２−０８１８ 日本国千葉県木更津市かずさ鎌足２−５−８ １２２号室、独立行政法人 製品評価技術基盤機構 特許微生物寄託センター（ＮＰＭＤ）。当該菌株（受託番号：NITE BP-01633）は、ラクトバチルス・パラカゼイ細菌と同定され、ブダペスト条約に基づき国際寄託されている。
(2) Lactobacillus paracasei NITE BP-01633 (Accession number: NITE BP-01633) (Acceptance date: June 6, 2013), Entrustee: 2- Kazusa Kamasa, Kisarazu-shi, Chiba, Japan 292-0818 Japan 5-8 Room 122, National Institute of Technology and Evaluation, Patent Microorganisms Depositary Center (NPMD). The strain (accession number: NITE BP-01633) has been identified as a Lactobacillus paracasei bacterium and has been deposited internationally under the Budapest Treaty.
（３）ラクトバチルス・ガセリ ＮＩＴＥ ＢＰ−０１６６９（受託番号：NITE BP-01669）（受託日：２０１３年７月２９日）、受託先：〒２９２−０８１８ 日本国千葉県木更津市かずさ鎌足２−５−８ １２２号室、独立行政法人 製品評価技術基盤機構 特許微生物寄託センター（ＮＰＭＤ）。当該菌株（受託番号：NITE BP-01669）は、ラクトバチルス・ガセリ細菌と同定され、ブダペスト条約に基づき国際寄託されている。 (3) Lactobacillus gasseri NITE BP-01669 (Accession number: NITE BP-01669) (Acceptance date: July 29, 2013), Entrustee: 2-Kazusa Kamasa, Kisarazu-shi, Chiba, Japan 292-0818 Japan 5-8 Room 122, National Institute of Technology and Evaluation, Patent Microorganisms Depositary Center (NPMD). The strain (accession number: NITE BP-01669) has been identified as a Lactobacillus gasseri bacterium and has been deposited internationally under the Budapest Treaty.
（４）ラクトバチルス・ヘルベティカス ＮＩＴＥ ＢＰ−０１６７１（受託番号：NITE BP-01671）、（受託日：２０１３年７月２９日）、受託先：〒２９２−０８１８ 日本国千葉県木更津市かずさ鎌足２−５−８ １２２号室、独立行政法人 製品評価技術基盤機構 特許微生物寄託センター（ＮＰＭＤ）。当該菌株（受託番号：NITE BP-01671）は、ラクトバチルス・ヘルベティカス細菌と同定され、ブダペスト条約に基づき国際寄託されている。 (4) Lactobacillus helveticus NITE BP-01671 (Accession number: NITE BP-01671), (Acceptance date: July 29, 2013), Entrustee: 2 Kazusa-Kamasa, Kisarazu-shi, Chiba, Japan 292-0818 Japan -5-8 Room 122, National Institute of Technology and Evaluation, Patent Microorganisms Depositary Center (NPMD). The strain (Accession number: NITE BP-01671) has been identified as a Lactobacillus helveticus bacterium and has been deposited internationally under the Budapest Treaty.
（５）ビフィドバクテリウム・ロンガム ＮＩＴＥ ＢＰ−０２６２１（受託番号：NITE BP-02621）（ATCC BAA-999／BB536）（受託日：２０１８年１月２６日）、受託先：〒２９２−０８１８ 日本国千葉県木更津市かずさ鎌足２−５−８ １２２号室、独立行政法人 製品評価技術基盤機構 特許微生物寄託センター（ＮＰＭＤ）。当該菌株（受託番号：NITE BP-02621）は、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガム細菌と同定され、ブダペスト条約に基づき国際寄託されている。また、当該菌株は、森永乳業株式会社から市販品（ＢＢ５３６）として入手可能である。
また、ビフィドバクテリウム・ロンガムＮＩＴＥ ＢＰ−０２６２１（ＢＢ５３６）菌株と同一の菌株であるビフィドバクテリウム・ロンガム ＡＴＣＣ ＢＡＡ−９９９菌株は、米国の保存機関であるAmerican Type Culture Collection（ＡＴＣＣ）（10801 University Boulevard, Manassas, VA 20110 USA）に、ＡＴＣＣ ＢＡＡ−９９９の受託番号で寄託されている。
(5) Bifidobacterium longum NITE BP-02621 (Accession number: NITE BP-02621) (ATCC BAA-999 / BB536) (Accession date: January 26, 2018), Accession: $ 292-0818 Japan Room No. 122, 2-5-8 Kazusa-Kamashita, Kisarazu-shi, Chiba Pref. National Institute of Technology and Evaluation Patent Microorganisms Depositary Center (NPMD). The strain (Accession number: NITE BP-02621) has been identified as Bifidobacterium longum subspecies longum bacteria and has been deposited internationally under the Budapest Treaty. The strain is available from Morinaga Milk Industry Co., Ltd. as a commercial product (BB536).
Further, Bifidobacterium longum ATCC BAA-999, which is the same strain as Bifidobacterium longum NITE BP-02621 (BB536), is an American Type Culture Collection (ATCC) (10801). University Boulevard, Manassas, VA 20110 USA) under accession number ATCC BAA-999.
（６）ビフィドバクテリウム・ブレーベ ＮＩＴＥ ＢＰ−０２６２２（受託番号：NITE BP-02622）（M-16V）（受託日：２０１８年１月２６日）、受託先：〒２９２−０８１８ 日本国千葉県木更津市かずさ鎌足２−５−８ １２２号室、独立行政法人 製品評価技術基盤機構 特許微生物寄託センター（ＮＰＭＤ）。当該菌株（受託番号：NITE BP-02622）は、ビフィドバクテリウム・ブレーベ細菌として同定され、ブダペスト条約に基づき国際寄託されている。また、当該細菌は、森永乳業株式会社から市販品（Ｍ−１６Ｖ）として入手可能である。 (6) Bifidobacterium breve NITE BP-02622 (Accession number: NITE BP-02622) (M-16V) (Acceptance date: January 26, 2018), Acceptance address: Chiba, Japan Room 2-5-8 Kazusa-Kamashita, Kisarazu-shi, National Institute of Technology and Evaluation Patent Microorganisms Depositary Center (NPMD). The strain (accession number: NITE BP-02622) has been identified as Bifidobacterium breve bacteria and has been deposited internationally under the Budapest Treaty. The bacterium is available as a commercial product (M-16V) from Morinaga Milk Industry Co., Ltd.
（７）ビフィドバクテリウム・ロンガム ＮＩＴＥ ＢＰ−０２７２５（受託番号：NITE BP-02725）（受託日：２０１８年５月１８日）、受託先：〒２９２−０８１８ 日本国千葉県木更津市かずさ鎌足２−５−８ １２２号室、独立行政法人 製品評価技術基盤機構 特許微生物寄託センター（ＮＰＭＤ）。当該菌株（受託番号：NITE BP-02725）は、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガム細菌と同定され、ブダペスト条約に基づき国際寄託されている。 (7) Bifidobacterium longum NITE BP-02725 (Accession number: NITE BP-02725) (Acceptance date: May 18, 2018), Acceptance address: Kazusa Kamatari, Kisarazu-shi, Chiba, Japan 292-0818 Japan 2-5-8 Room 122, National Institute of Technology and Evaluation, Patent Microorganisms Depositary Center (NPMD). This strain (Accession number: NITE BP-02725) has been identified as Bifidobacterium longum subspecies longum bacteria and has been deposited internationally under the Budapest Treaty.
（８）ビフィドバクテリウム・ロンガム ＮＩＴＥ ＢＰ−０２７０６（受託番号：NITE BP-02706）（受託日：２０１８年５月７日）、受託先：〒２９２−０８１８ 日本国千葉県木更津市かずさ鎌足２−５−８ １２２号室、独立行政法人 製品評価技術基盤機構 特許微生物寄託センター（ＮＰＭＤ）。当該菌株（受託番号：NITE BP-02706）は、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガム細菌と同定され、ブダペスト条約に基づき国際寄託されている。 (8) Bifidobacterium longum NITE BP-02706 (Accession number: NITE BP-02706) (Acceptance date: May 7, 2018), Entrustee: Kazusa Kamatari, Kisarazu-shi, Chiba, Japan 292-0818 Japan 2-5-8 Room 122, National Institute of Technology and Evaluation, Patent Microorganisms Depositary Center (NPMD). The strain (accession number: NITE BP-02706) has been identified as Bifidobacterium longum subspecies longum bacteria and has been deposited internationally under the Budapest Treaty.
（９）ビフィドバクテリウム・シュードカテナラタム ＤＳＭ２０４３８（Bifidobacterium pseudocatenulatum DSM20438）、微生物株保存機関：ＤＳＭＺ(German Collection of Microorganisms and Cell Cultures)（Inhoffenstr.7B, D38124 Braunschweig, GERMANY）；Catalogue of microorganisms（２０１８年５月１日検索）：URL: https://www.dsmz.de/catalogues/details/culture/DSM-20438.html。 (9) Bifidobacterium pseudocatenulatum DSM20438, DSMZ (German Collection of Microorganisms and Cell Cultures) (Inhoffenstr. 7B, D38124 Braunschweig, GERMANY); Catalogue of microorganisms (2018) URL: https://www.dsmz.de/catalogues/details/culture/DSM-20438.html.
（１０）ビフィドバクテリウム・ビフィダム ＪＣＭ１２５４（Bifidobacterium bifidum JCM1254）、微生物株保存機関：ＪＣＭ（Japan Collection of Microorganisms）（住所：3050074 茨城県つくば市高野台3-1-1 国立研究開発法人 理化学研究所 バイオリソースセンター 微生物材料開発室）；JCM 微生物株オンラインカタログ（２０１８年５月１日検索）、URL: http://www.jcm.riken.jp/cgi-bin/jcm/jcm_number?JCM=1254。 (10) Bifidobacterium bifidum JCM1254 (Bifidobacterium bifidum JCM1254), Microorganism strain preservation organization: Japan Collection of Microorganisms (JCM) (Address: 3050074 3-1-1 Takanodai, Tsukuba-shi, Ibaraki RIKEN BioResource Center, Microbial Materials Development Section); JCM Microorganism strain online catalog (searched on May 1, 2018), URL: http://www.jcm.riken.jp/cgi-bin/jcm/jcm_number?JCM=1254.
（１１）ビフィドバクテリウム・ロンガム ＪＣＭ１２１７（Bifidobacterium longum subsp. longum JCM1217）、微生物株保存機関：ＪＣＭ（Japan Collection of Microorganisms）（住所：3050074 茨城県つくば市高野台3-1-1 国立研究開発法人 理化学研究所 バイオリソースセンター 微生物材料開発室）；JCM 微生物株オンラインカタログ（２０１８年５月１日検索）、URL:http://www.jcm.riken.go.jp/cgi-bin/jcm/jcm_number?JCM=1217。 (11) Bifidobacterium longum JCM1217 (Bifidobacterium longum subsp. Longum JCM1217), Microorganism strain preservation organization: JCM (Japan Collection of Microorganisms) (Address: 3-1-1 Takanodai, Tsukuba-shi, Ibaraki 3050074, Japan) RIKEN BioResource Center, Microbial Material Development Section); JCM Microorganism Strain Online Catalog (searched on May 1, 2018), URL: http://www.jcm.riken.go.jp/cgi-bin/jcm/jcm_number? JCM = 1217.
（１２） ビフィドバクテリウム・ブレーベ ＦＥＲＭ ＢＰ−１１１７５（受託番号：FERM BP-11175）（受託日：２００９年８月２５日）、受託先：〒２９２−０８１８ 日本国千葉県木更津市かずさ鎌足２−５−８、独立行政法人産業技術総合研究所特許生物寄託センター（現 独立行政法人製品評価技術基盤機構（ＮＩＴＥ）特許生物寄託センター（ＩＰＯＤ）（ＮＩＴＥ−ＩＰＯＤ）。当該菌株（受託番号：FERM BP-11175））は、ビフィドバクテリウム・ブレーベ細菌と同定され、ブダペスト条約に基づき国際寄託されている。 (12) Bifidobacterium breve FERM BP-11175 (Accession number: FERM BP-11175) (Accession date: August 25, 2009), Accession: Kazusa Kamatari, Kisarazu-shi, Chiba, Japan 292-0818 Japan 2-5-8, Patent Organism Depositary, National Institute of Advanced Industrial Science and Technology (currently, National Institute of Technology and Evaluation (NITE) Patent Organism Depositary Center (IPOD)) (NITE-IPOD). FERM BP-11175)) has been identified as Bifidobacterium breve bacteria and has been deposited internationally under the Budapest Treaty.
（１３）ビフィドバクテリウム・インファンティス ＮＩＴＥ ＢＰ−０２６２３（受託番号：NITE BP-02623）（M-63）（受託日：２０１８年１月２６日）、受託先：〒２９２−０８１８ 日本国千葉県木更津市かずさ鎌足２−５−８ １２２号室、独立行政法人 製品評価技術基盤機構 特許微生物寄託センター（ＮＰＭＤ）。当該菌株（受託番号：NITE BP-02623）菌株は、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティス細菌と同定され、ブダペスト条約に基づき国際寄託されている。また、当該菌株は、森永乳業株式会社から市販品（Ｍ−６３）として入手可能である。
当該ビフィドバクテリウム・インファンティスＮＩＴＥ ＢＰ−０２６２３（Ｍ−６３）菌株と同一の菌株であるビフィドバクテリウム・インファンティス ＢＣＣＭ ＬＭＧ２３７２８菌株は、ベルギーの保存機関であるBelgian Coordinated Collections of Microorganisms（ＢＣＣＭ）（231, avenue Louise,1050 Brussels）に、ＢＣＣＭ ＬＭＧ２３７２８の受託番号で寄託されている。
(13) Bifidobacterium infantis NITE BP-02623 (Accession number: NITE BP-02623) (M-63) (Accession date: January 26, 2018), Accession: $ 292-0818 Japan Room No. 122, No. 2-5-8 Kazusa-Kamashita, Kisarazu-shi, Chiba Prefecture, Patent Microorganisms Depositary Center (NPMD), National Institute of Technology and Evaluation. The strain (Accession number: NITE BP-02623) has been identified as Bifidobacterium longum subspecies infantis bacteria and has been deposited internationally under the Budapest Treaty. The strain is available from Morinaga Milk Industry Co., Ltd. as a commercial product (M-63).
Bifidobacterium infantis BCCM LMG23728 strain, which is the same strain as the Bifidobacterium infantis NITE BP-02623 (M-63) strain, is a Belgian Coordinated Collections of Microorganisms (Belgium). (BCCM) (231, avenue Louise, 1050 Brussels) under the accession number BCCM LMG23728.
（１４）ラクトバチルス・ラムノーサス LCS742は、森永乳業株式会社より市販品（LCS-742）として入手可能である（例えば、特表2009-522280参照）。 (14) Lactobacillus rhamnosus LCS742 is available as a commercial product (LCS-742) from Morinaga Milk Products Co., Ltd. (see, for example, JP-T-2009-522280).
なお、上述の菌株は、上記寄託菌株に制限されず、同寄託菌株と実質的に同質の菌株であってもよい。実質的に同質の菌株とは、同じ属種に分類される菌株であって、本件寄託菌株と同程度以上の非侵襲的で非経口的な伝播能を有する菌株を意味する。さらに、本件菌株は、非侵襲的で非経口的な伝播により腸内環境の改善能を有するものが好適である。また、本件菌株は水温２５〜４０℃で少なくとも３０分以上１０％以上生残できる能力を有することが好適である。また、日本の水道法では蛇口において残留塩素濃度０．１ｍｇ／Ｌ以上に定められ、蛇口において味や臭いの観点から１ｍｇ／Ｌ以下を確保し、安全で美味しい水の観点から０．４ｍｇ／Ｌ以下とされている。このため、本件菌株は耐塩性を有するものが好適である。当該耐塩性として少なくとも水中の残留塩素濃度０．０５ｍｇ／Ｌ程度以上で生残するものが好適である。
また、実質的に同質の菌株とは、一致し、かつ好ましくは上記寄託菌株と同一の菌学的性質を有する。さらに本件菌株は、本技術の効果が損なわれない限り、本件寄託菌株又はそれと実質的に同質の菌株から、変異処理、遺伝子組換え、自然変異株の選択等によって育種された菌株であってもよい。当該変異処理、遺伝子組換え、自然変異株の選択は、公知の方法を利用して行えば良い。
In addition, the above-mentioned strain is not limited to the deposited strain, and may be a strain substantially the same as the deposited strain. Substantially the same strain refers to a strain classified into the same genus, and a strain having non-invasive and parenteral transmission ability equal to or higher than that of the deposited strain. Further, it is preferable that the strain has an ability to improve the intestinal environment by non-invasive and parenteral transmission. Further, it is preferable that the present strain has the ability to survive at least 30 minutes or more and 10% or more at a water temperature of 25 to 40 ° C. In addition, the water supply law in Japan sets the residual chlorine concentration at the faucet to 0.1 mg / L or more, secures 1 mg / L or less at the faucet from the viewpoint of taste and smell, and 0.4 mg / L from the viewpoint of safe and delicious water. It is as follows. For this reason, the strain of the present invention preferably has salt tolerance. Those that survive at least with a residual chlorine concentration of about 0.05 mg / L or more in water are preferable as the salt resistance.
A strain of substantially the same quality is identical and preferably has the same bacteriological properties as the deposited strain. Furthermore, as long as the effect of the present technology is not impaired, the strain may be a strain bred from the deposited strain or a strain substantially the same as the deposited strain by mutation treatment, genetic recombination, selection of a natural mutant, or the like. Good. The mutation treatment, the gene recombination, and the selection of the spontaneous mutant may be performed by using a known method.
本技術に用いられるプロバイオティクスは、乳酸菌及びビフィズス菌等の公知の培養方法を利用して増殖させて得ることができる。この培養方法にて得られた培養物を又は培養物から回収した菌体を本技術の有効成分として使用することも可能である。本技術の効果を損なわない限り、培養後に加熱、凍結乾燥等の種々の追加操作を行ってもよい。当該培養物又は菌体は、コーティング、包装やカプセル充填等の加工を行ってもよく、また、形態として例えば、固体（例えば、菌粉末、錠剤等）、半固体（包装等）又は液体（例えば、カプセル剤等）等のいずれでもよく、使用時に水に溶けやすい形態が好ましい。 The probiotics used in the present technology can be obtained by multiplying using known culture methods such as lactic acid bacteria and bifidobacteria. A culture obtained by this culture method or a cell recovered from the culture can also be used as an active ingredient of the present technology. As long as the effects of the present technology are not impaired, various additional operations such as heating and freeze-drying may be performed after the culture. The culture or cells may be processed by coating, packaging, capsule filling, or the like, and may be in the form of, for example, a solid (eg, bacterial powder, tablet, etc.), a semi-solid (packaging, etc.) or a liquid (eg, , Capsules, etc.), and is preferably in a form easily soluble in water when used.
前記乳酸菌の培養方法は、当該乳酸菌の培養に通常用いられる方法を適宜利用して行えばよく、例えば、培養温度は２５〜４５℃でよく、３０〜４２℃で、特に３７〜４２℃であることが好ましい。
前記ビフィズス菌の培養方法は、当該ビフィズス菌の培養に通常用いられる方法を適宜利用して行えばよく、例えば、培養温度は３０〜５０℃でよく、３５〜４５℃であることが好ましい。
また乳酸菌及び／又はビフィズス菌の培養は嫌気条件下で行うことが好ましく、例えば、炭酸ガス等の嫌気ガスを通気しながら培養することができる。また、液体静置培養等の微好気条件下で培養してもよい。
また、乳酸菌及び／又はビフィズス菌を増殖させるための培養に用いられる培地として、例えば、乳酸菌及び／又はビフィズス菌の培養に通常用いられる培地を、必要により適宜修正して、用いることができる。すなわち、炭素源としては、例えば、ガラクトース、グルコース、フルクトース、マンノース、セロビオース、マルトース、ラクトース、スクロース、トレハロース、デンプン、デンプン加水分解物、廃糖蜜等の糖類を資化性に応じて使用できる。窒素源としては、例えば、アンモニア、硫酸アンモニウム、塩化アンモニウム、硝酸アンモニウムなどのアンモニウム塩類や硝酸塩類を使用できる。また、無機塩類としては、例えば、塩化ナトリウム、塩化カリウム、硫酸カリウム、硫酸マグネシウム、塩化カルシウム、硝酸カルシウム、塩化マンガン、硫酸第一鉄等を用いることができる。また、ペプトン、大豆粉、脱脂大豆粕、肉エキス、酵母エキス等の有機成分を用いてもよい。また、調製済みの培地としては、例えばＭＲＳ培地を好適に用いることができる。
The method for culturing the lactic acid bacterium may be performed by appropriately using a method usually used for culturing the lactic acid bacterium. For example, the culture temperature may be 25 to 45 ° C, 30 to 42 ° C, and particularly 37 to 42 ° C. Is preferred.
The method for culturing the bifidobacterium may be performed by appropriately using a method usually used for culturing the bifidobacterium. For example, the culture temperature is 30 to 50 ° C, and preferably 35 to 45 ° C.
The cultivation of lactic acid bacteria and / or bifidobacteria is preferably performed under anaerobic conditions. For example, culturing can be performed while passing anaerobic gas such as carbon dioxide gas. Moreover, you may culture under microaerobic conditions, such as a liquid stationary culture.
In addition, as a medium used for culture for growing lactic acid bacteria and / or bifidobacteria, for example, a medium usually used for culture of lactic acid bacteria and / or bifidobacteria can be used with appropriate modification as needed. That is, as the carbon source, for example, saccharides such as galactose, glucose, fructose, mannose, cellobiose, maltose, lactose, sucrose, trehalose, starch, starch hydrolyzate, molasses and the like can be used according to the assimilation property. As the nitrogen source, for example, ammonium salts such as ammonia, ammonium sulfate, ammonium chloride and ammonium nitrate and nitrates can be used. As the inorganic salts, for example, sodium chloride, potassium chloride, potassium sulfate, magnesium sulfate, calcium chloride, calcium nitrate, manganese chloride, ferrous sulfate and the like can be used. Further, organic components such as peptone, soy flour, defatted soybean meal, meat extract, and yeast extract may be used. Further, as the prepared medium, for example, an MRS medium can be suitably used.
前記乳酸菌及び／又はビフィズス菌として、培養後、得られた培養物をそのまま用いてもよく、希釈又は濃縮して用いてもよく、培養物から回収した菌体を用いてもよい。また、本技術の効果を損なわない限り、培養後に加熱、及び凍結乾燥等の種々の追加操作を行うことができる。
なお、本技術で使用される菌体又は本技術の組成物の製造のために使用される菌体は、伝播性の観点から生菌であるが、本技術の効果を損なわない範囲内で培養物又は組成物中に死菌が含まれていてもよい。
As the lactic acid bacteria and / or bifidobacteria, after culturing, the obtained culture may be used as it is, may be used after dilution or concentration, or may be cells recovered from the culture. In addition, various additional operations such as heating and freeze-drying can be performed after the culture, as long as the effects of the present technology are not impaired.
The cells used in the present technology or the cells used for production of the composition of the present technology are viable from the viewpoint of spreadability, but cultured within a range that does not impair the effects of the present technology. A dead bacterium may be contained in the product or composition.
後記〔実施例〕に示すように、本技術のプロバイオティクスは、水浴により又はお尻（特に肛門周辺部）の皮膚に接触させることにより、動物の腸内に伝播する作用を有する。これにより、本技術のプロバイオティクスは、水浴により又は非侵襲的非経口的な接触により、動物の腸内細菌叢を良好に変化させる作用（好適には、腸内細菌叢において、使用したプロバイオティクスの腸内細菌叢割合を高める作用等）及び／又は腸内環境を改善する作用を有する。水浴又は非侵襲的非経口的な接触により腸内に伝播が可能な本技術のプロバイオティクスは、健康増進、食生活改善、腸内環境改善、腸内感染予防・治療等の目的に使用することも可能である。 As shown in the following [Example], the probiotics of the present technology have an action of transmitting into the intestine of animals by bathing in water or by contacting the skin of the hips (particularly, the area around the anus). Thus, the probiotics of the present technology have the effect of favorably altering the intestinal flora of animals, preferably by water bathing or non-invasive parenteral contact (preferably, the probiotics used in the intestinal flora). It has an effect of improving the intestinal microbiota ratio of the biotics, etc.) and / or improving the intestinal environment. Probiotics of this technology, which can be transmitted to the intestine by water bath or non-invasive parenteral contact, are used for the purpose of promoting health, improving diet, improving intestinal environment, preventing and treating intestinal infection, etc. It is also possible.
本技術のプロバイオティクスは、非経口的組成物（より好適には、入浴用組成物又は非侵襲性非経口的伝播用組成物）等の有効成分として含有させることができ、水浴（好適には湯浴）に利用できるもの又はお尻に非侵襲的に接触できるものが好適である。本技術は、浴用、入浴用、非経口的伝播用、非侵襲性伝播用、お尻への非侵襲的接触のため等の各種製剤又は各種組成物でもよい。
また、本技術のプロバイオティクスは、腸内環境のバランスの崩れ、腸内細菌叢の悪玉菌の割合の増加又は善玉菌の減少等に関連して生じる各種症状又は疾患の予防方法、改善方法及び治療方法のために、浴用、非経口的伝播用又は非侵襲的伝播用の組成物の有効成分として使用することも可能である。
The probiotics of the present technology can be contained as an active ingredient such as a parenteral composition (more preferably, a bathing composition or a non-invasive parenteral transmission composition), and a water bath (preferably It is preferable to use one that can be used for hot water bathing or one that can non-invasively contact the buttocks. The technology may be in various formulations or compositions for bathing, bathing, parenteral transmission, non-invasive transmission, non-invasive contact to the hips, and the like.
Further, the probiotic of the present technology is a method for preventing or improving various symptoms or diseases caused in relation to an imbalance of the intestinal environment, an increase in the ratio of bad bacteria in the intestinal flora or a decrease in good bacteria, and the like. And for therapeutic methods, it can also be used as an active ingredient in bath, parenteral or non-invasive compositions.
そして、本技術のプロバイオティクスは、上述のような腸内環境のバランスの崩れ等の予防、改善及び／又は治療のために、ヒト用若しくは動物用の非経口的組成物（入浴用組成物、非侵襲性非経口的伝播用組成物等）の有効成分として使用することができる。本技術のプロバイオティクスは、そのままで非経口的組成物（より好適には、入浴用組成物、非侵襲性非経口的伝播用組成物）として使用してもよいし、さらに当該プロバイオティクス以外の入浴剤成分、保湿剤成分又は洗浄剤成分等の任意成分を配合した非経口的組成物（より好適には、入浴用組成物、非侵襲性非経口的伝播用組成物）として使用してもよい。また、本技術のプロバイオティクスは、上述した各種製剤又は各種組成物（例えば、入浴用組成物、非侵襲性非経口的伝播用組成物等）の製造のために使用することができる。 In addition, the probiotics of the present technology are useful for preventing, improving, and / or treating the above-mentioned intestinal environment imbalance, such as human or animal parenteral compositions (bath compositions). , Non-invasive parenteral transmission compositions, etc.). The probiotic of the present technology may be used as it is as a parenteral composition (more preferably, a bathing composition, a composition for non-invasive parenteral transmission), and further, the probiotic may be used. It is used as a parenteral composition (more preferably, a bathing composition or a non-invasive parenteral transmission composition) containing optional components such as a bathing agent component, a humectant component or a cleaning agent component other than the above. You may. Further, the probiotics of the present technology can be used for the production of the above-mentioned various preparations or various compositions (for example, bathing compositions, non-invasive parenteral transmission compositions, and the like).
本技術は、治療目的使用であっても、非治療目的使用であってもよい。
「非治療目的」とは、医療行為、すなわち、治療による人体への処置行為を含まない概念である。例えば、健康増進、生活習慣病予防（例えば、境界領域の予備軍）等が挙げられる。
「予防」とは、適用対象における疾患若しくは症状の発症の防止や遅延、又は適用対象の疾患若しくは症状の危険性の低下をいう。
「改善」とは、疾患、症状又は状態の好転；悪化の防止又は遅延；進行の逆転、防止又は遅延をいう。
The technology may be for therapeutic or non-therapeutic use.
“Non-therapeutic purpose” is a concept that does not include medical practice, that is, treatment of the human body by treatment. For example, there are health promotion, lifestyle-related disease prevention (for example, a reserve army in a boundary area), and the like.
“Prevention” refers to preventing or delaying the onset of a disease or condition in a subject, or reducing the risk of a disease or condition in a subject.
"Improvement" refers to improvement of a disease, symptom or condition; prevention or delay of deterioration; reversal, prevention or delay of progression.
また、本技術の非経口的組成物（より好適には入浴用組成物、非侵襲性非経口的伝播用組成物）の有効成分として、市販品のプロバイオティクスを使用してもよい。
市販品のプロバイオティクスとして、例えば、ビオフェルミン配合散（商品名；ビオフェルミン製薬社製）、ビオフェルミン錠剤（商品名；ビオフェルミン製薬社製）、ビオフェルミンＲ（商品名；ビオフェルミン製薬社製）、ビオフェルミンＳ（商品名；ビオフェルミン製薬社製）、ラクトミン（商品名；丸石製薬社製）、ラックビー（商品名；興和創薬社製）、ラックビーＲ（商品名；興和製薬社製）、ミヤＢＭ（商品名；ミヤイリサン製薬社製）、ビオスミン（商品名；武田薬品工業社製）、ビオスリー（商品名；新亜製薬社製）、レニベンＳ（商品名；わかもと製薬社製）、エンテロン−Ｒ（商品名；味の素ファルマ社製）、ＢＬ整腸薬Ｓ（商品名；ヤクルト社製）、ビフィズス菌末ＢＢ５３６（商品名；森永乳業社製）等が挙げられる。これらを単独で又は２種以上組み合わせて使用してもよい。
Further, a commercially available probiotic may be used as an active ingredient of the parenteral composition of the present technology (more preferably, a bathing composition and a non-invasive parenteral transmission composition).
As commercially available probiotics, for example, biofermin compounded powder (trade name; manufactured by Biofermin Pharmaceutical Co., Ltd.), biofermin tablets (trade name; manufactured by Biofermin Pharmaceutical Co., Ltd.), Biofermin R (trade name; manufactured by Biofermin Pharmaceutical Co., Ltd.), Biofermin S ( Trade name: Biofermin Pharmaceutical Co., Ltd., Lactamine (trade name; Maruishi Pharmaceutical Co., Ltd.), Lac Bee (trade name; Kowa Pharmaceutical Co., Ltd.), Lac Bee R (trade name; Kowa Pharmaceutical Co., Ltd.), MiyaBM (trade name; Miyairisan Pharmaceutical Co., Ltd.), Biosmin (trade name; manufactured by Takeda Pharmaceutical Co., Ltd.), Biosley (trade name; manufactured by Shinya Pharmaceutical Co., Ltd.), Reniben S (trade name; manufactured by Wakamoto Pharmaceutical Co., Ltd.), Enteron-R (trade name: Ajinomoto Pharma Inc.), BL intestinal medicine S (trade name; manufactured by Yakult), Bifidobacterium powder BB536 (trade name; manufactured by Morinaga Milk Industry Co., Ltd.), and the like. That. These may be used alone or in combination of two or more.
本技術の非経口的組成物は、上記有効成分であるプロバイオティクスを、薬学的に又は食品学的に許容される任意成分を適宜用いて製造することができる。
本技術の非経口的組成物は、生菌の生残率及び皮膚への低刺激性の観点から、ｐＨ４〜７であるのが好ましく、当該範囲になるようにｐＨ調整剤等で適宜調整してもよい。
The parenteral composition of the present technology can be produced by appropriately using the probiotic, which is the above-mentioned active ingredient, with any pharmaceutically or food acceptable ingredient.
The parenteral composition of the present technology preferably has a pH of 4 to 7 from the viewpoint of the survival rate of viable bacteria and low irritation to the skin, and is appropriately adjusted with a pH adjuster or the like so as to fall within the above range. May be.
前記任意成分として、有機酸又はその塩、無機酸又はその塩、保湿成分、洗浄成分、結合剤、安定剤、ｐＨ調整剤、生薬／植物エキス／ビタミン類等の薬効成分、多糖／蛋白／アミノ酸／酵素類、アルコール類、水溶性高分子類、香料、染料／色素／顔料、洗浄剤等を配合することができる。
前記有機酸又はその塩として、例えば、安息香酸、クエン酸、フマル酸、酒石酸、ピロリドンカルボン酸、コハク酸、リンゴ酸やその塩等が挙げられる。
前記無機酸又はその塩として、例えば、リン酸二水素ナトリウム、硝酸カリウム、硝酸ナトリウム、硝酸カルシウム、硝酸アルミニウム、ポリリン酸ナトリウム、塩化ナトリウム、塩化カルシウム、塩化アンモニウム、硝酸鉄燐酸ナトリウム、チオ硫酸ナトリウム、炭酸ナトリウム、硼酸、メタ珪酸、無水珪酸等が挙げられる。これらのうち、コハク酸、リン酸二水素ナトリウム、塩化カルシウムが好ましい。
前記保湿成分として、グリセリン、プロピレングリコール、ソルビトール等水溶性多価アルコール等が挙げられる。
前記洗浄成分として、界面活性剤（例えば、両性界面活性剤、陰イオン界面活性剤、陽イオン界面活性剤、非イオン界面活性剤の１種又は２種以上）、殺菌剤、防腐剤、キレート剤、電解質等が挙げられる。
As the optional components, organic acids or salts thereof, inorganic acids or salts thereof, moisturizing components, washing components, binders, stabilizers, pH adjusters, medicinal components such as crude drugs / plant extracts / vitamins, polysaccharides / proteins / amino acids / Enzymes, alcohols, water-soluble polymers, fragrances, dyes / pigments / pigments, detergents and the like.
Examples of the organic acids or salts thereof include benzoic acid, citric acid, fumaric acid, tartaric acid, pyrrolidone carboxylic acid, succinic acid, malic acid and salts thereof.
As the inorganic acid or a salt thereof, for example, sodium dihydrogen phosphate, potassium nitrate, sodium nitrate, calcium nitrate, aluminum nitrate, sodium polyphosphate, sodium chloride, calcium chloride, ammonium chloride, sodium nitrate iron phosphate, sodium thiosulfate, carbonic acid Examples include sodium, boric acid, metasilicic acid, and silicic anhydride. Of these, succinic acid, sodium dihydrogen phosphate and calcium chloride are preferred.
Examples of the moisturizing component include water-soluble polyhydric alcohols such as glycerin, propylene glycol, and sorbitol.
Surfactants (for example, one or more of amphoteric surfactants, anionic surfactants, cationic surfactants and nonionic surfactants), bactericides, preservatives, chelating agents , Electrolytes and the like.
また、前記非経口的組成物の形態は、液状、半液状、粉状又は固形状のいずれでもよいが、錠剤、散剤、顆粒剤等の固形状が長期保存の点で好ましい。固形状の場合、使用時に水に溶かし、プロバイオティクスを含む水溶液として使用してもよい。
当該剤の剤形として、固体（例えば錠、クリーム等）、液体、フィルムシート状等が挙げられ、また当該組成物を、不織布や織布等の基材シートに含ませたシート形態でもよい。
The form of the parenteral composition may be liquid, semi-liquid, powdery or solid, but solids such as tablets, powders and granules are preferred from the viewpoint of long-term storage. When it is solid, it may be dissolved in water at the time of use and used as an aqueous solution containing probiotics.
Examples of the dosage form of the agent include a solid (for example, a tablet and a cream), a liquid, a film sheet, and the like, and a sheet form in which the composition is included in a base sheet such as a nonwoven fabric or a woven fabric.
また、本技術の非侵襲性非経口的伝播用組成物として、例えば、お尻の洗浄剤、お尻の洗浄ケア用品、貼付剤等が挙げられ、当該洗浄剤又は洗浄ケア用品の形態として、液体、固体、半固体、洗浄シート等が挙げられる。
例えば、お尻洗浄剤は、例えば、お尻洗浄装置（例えば、便座タイプ等）の洗浄水（例えば水道水等）と混合して使用することができ、またそのままお尻洗浄に使用することができ、またスプレー式として使用することもできる。
洗浄シートは、基材シートに本技術のプロバイオティクスを含ませたものが好ましい。当該洗浄シートは、ウエットシート又はドライシートの何れでもよく、お尻洗浄の観点から洗浄時にウェット状態で使用できる洗浄シートが好ましい。
前記基材シートとして、拭き取りの際に含浸液の保持安定性の観点から、パルプ、コットン、レーヨン、キュプラ、リヨセル等のセルロースの親水性繊維から選ばれる繊維で構成されるもの（不織布又は織布）が好ましい。
Further, as the non-invasive parenteral transmission composition of the present technology, for example, buttocks cleaning agent, buttocks cleaning care products, patches and the like, as a form of the cleaning agent or cleaning care products, Examples include liquids, solids, semi-solids, and cleaning sheets.
For example, the buttocks cleaning agent can be used by mixing it with, for example, washing water (for example, tap water) of a buttocks washing device (for example, toilet seat type), and can also be used for ass washing as it is. It can also be used as a spray type.
The cleaning sheet is preferably a sheet in which the probiotic of the present technology is included in the base sheet. The cleaning sheet may be either a wet sheet or a dry sheet, and is preferably a cleaning sheet that can be used in a wet state at the time of cleaning from the viewpoint of ass cleaning.
The base sheet is made of a fiber selected from hydrophilic fibers of cellulose such as pulp, cotton, rayon, cupra, and lyocell from the viewpoint of holding stability of the impregnating liquid during wiping (nonwoven fabric or woven fabric). Is preferred.
本技術におけるプロバイオティクスの含有量は、剤形、用法、対象者年齢、性別及びその他条件等によって適宜設定される。
本技術のプロバイオティクスの含有量は特に限定されず、前記組成物中に、好ましくは生菌として０．１〜１０質量％、より好ましくは１〜１０質量％になるように添加することが好ましい。
また、前記プロバイオティクスの含有量（生菌）は、前記組成物中に、好ましくは生菌として２．５×１０7〜２．５×１０11ＣＦＵ／ｇ、より好ましくは２．５×１０9〜２．５×１０11ＣＦＵ／ｇである。なお、ＣＦＵは、Ｃｏｌｏｎｙ ＦｏｒｍｉｎｇＵｎｉｔ（コロニー形成単位）を意味するものである。
The content of probiotics in the present technology is appropriately set depending on the dosage form, usage, age of the subject, gender, other conditions, and the like.
The content of the probiotic of the present technology is not particularly limited, and may be added to the composition so as to be preferably 0.1 to 10% by mass, more preferably 1 to 10% by mass as viable bacteria. preferable.
Further, the content (live bacteria) of the probiotics in the composition is preferably 2.5 × 10 7 to 2.5 × 10 11 CFU / g, more preferably 2.5 × 10 11 CFU / g as live bacteria. It is 10 < 9 > -2.5 * 10 < 11 > CFU / g. CFU means Colony Forming Unit (colony forming unit).
本技術の方法は、プロバイオティクスを対象者に対して非経口的に使用する方法であり、より好適には入浴方法及び非侵襲性非経口的伝播方法である。好適な接触部位は、お尻（より具体的には肛門周辺部）の皮膚表面である。
本技術のプロバイオティクスの使用量は特に限定されず、水１Ｌに対し、好ましくは生菌として０．１〜１０質量％、より好ましくは１〜１０質量％になるように添加することが好ましい。
また、前記プロバイオティクスの使用量（生菌）は、水１Ｌに対し、好ましくは２．５×１０7〜２．５×１０11ＣＦＵ／ｇ、より好ましくは２．５×１０9〜２．５×１０11ＣＦＵ／ｇである。なお、ＣＦＵは、Ｃｏｌｏｎｙ ＦｏｒｍｉｎｇＵｎｉｔ（コロニー形成単位）を意味するものである。
The method of the present technology is a method of using a probiotic parenterally to a subject, more preferably a bathing method and a non-invasive parenteral transmission method. A preferred contact site is the skin surface of the buttocks (more specifically, the perianal area).
The amount of the probiotic used in the present technology is not particularly limited, and it is preferable to add the probiotic so as to be 0.1 to 10% by mass, more preferably 1 to 10% by mass, as viable bacteria, to 1 L of water. .
The amount of the probiotic used (viable bacteria) is preferably 2.5 × 10 7 to 2.5 × 10 11 CFU / g, more preferably 2.5 × 10 9 to 2 × 1 L of water. 0.5 × 10 11 CFU / g. CFU means Colony Forming Unit (colony forming unit).
本技術において、使用温度は特に限定されず、対象者が接触可能な温度が好適である。当該使用温度として、好ましくは４〜４５℃程度であり、より好ましくは、細菌の生残性及び体感温度の観点から、２５〜４０℃である。
本技術において、水を使用する場合、冷水〜温水（４〜４５℃程度）が好ましく、より好ましくは２５〜４０℃である。
また、本技術において入浴の場合、通常入浴温度である３０〜４５℃程度が、入浴時の伝播性が高まる観点から、好適である。通常の入浴温度であれば軽度の運動のように血流が増え代謝が好転することもあるので、本技術において、好適な２５〜４５℃（より好適には３０〜４２℃）の湯温が好ましく、この湯温であれば腸内環境の改善も図りやすいという利点がある。
In the present technology, the use temperature is not particularly limited, and a temperature at which the subject can contact is suitable. The use temperature is preferably about 4 to 45 ° C., and more preferably 25 to 40 ° C. from the viewpoint of the survival of the bacteria and the sensible temperature.
In the present technology, when water is used, cold water to warm water (about 4 to 45 ° C.) is preferable, and more preferably 25 to 40 ° C.
In addition, in the case of bathing in the present technology, a bathing temperature of about 30 to 45 ° C., which is usually a bathing temperature, is preferable from the viewpoint of increasing the propagation property during bathing. At normal bathing temperature, blood flow may increase and metabolism may improve as in the case of mild exercise. Therefore, in the present technology, a suitable hot water temperature of 25 to 45 ° C (more preferably 30 to 42 ° C) is used. Preferably, this hot water temperature has the advantage that the intestinal environment can be easily improved.
本技術の方法は、お尻（特に肛門周辺部）の皮膚表面に非侵襲的に接触させることで本技術の効果を得ることができる。本技術の方法として、例えば、お尻を洗浄すること、お尻を拭き取ること、お尻に噴霧又は塗布すること、入浴すること等が挙げられる。
また、本技術の入浴方法であれば、身体（少なくともお尻）を水に浸けることでよいので、各自の体調に応じて、水量及び水に浸ける部位を適宜調整することも可能である。また、本技術のプロバイオティクスは安全性が高く、少量でも効果を得ることができるので、乳幼児を対象とした水浴（例えば、沐浴、入浴等）に適している。
また、本技術の方法は、非侵襲的な接触でよいので老若男女を問わず、また高齢者及び乳幼児、ペット等のような介護や育児等のお尻のケアが必要な動物に対してより好適である。当該「お尻のケア」として、例えば、***後の洗浄、肌汚れの洗浄等が挙げられる。
また、本技術の使用回数又は使用間隔は特に限定されず、１日１回でも複数回でもよいが、プロバイオティクスが腸内に伝播し維持しやすいように複数回使用することが望ましい。
本技術で水浴する場合、例えば、１日１回の水浴でもよく、１日のうち複数回に分けて水浴してもよく、毎日継続して水浴することが望ましい。
According to the method of the present technology, the effect of the present technology can be obtained by non-invasively contacting the skin surface of the buttocks (especially, the anal periphery). The method of the present technology includes, for example, washing the hips, wiping the hips, spraying or applying the hips, bathing, and the like.
In addition, according to the bathing method of the present technology, since the body (at least the buttocks) may be immersed in water, it is also possible to appropriately adjust the amount of water and the part immersed in water according to the physical condition of each person. In addition, the probiotics of the present technology are highly safe and can obtain an effect even in a small amount, and thus are suitable for water bathing (for example, bathing and bathing) for infants.
In addition, the method of the present technology can be used for non-invasive contact, regardless of age and gender, for the elderly and for animals such as infants, pets, etc. that need nursing care or child care. It is suitable. The “care of the buttocks” includes, for example, washing after excretion, washing of skin stains, and the like.
Further, the number of uses or the use interval of the present technology is not particularly limited, and may be once or more than once a day. However, it is preferable to use the probiotics a plurality of times so that the probiotics can be easily propagated and maintained in the intestine.
In the case of bathing with the present technology, for example, the bathing may be performed once a day or may be performed a plurality of times a day, and it is desirable to continue bathing every day.
本技術の対象者は特に限定されない。本技術の用法は、上述のように、老若男女を問わず簡便に安全に行うことができるので、本技術の対象者として乳幼児及び高齢者が好適である。
対象者が乳幼児の場合、例えば、帝王切開の乳幼児の場合には、母親の産道を通る際にビフィズス菌等の腸内細菌を受け継ぐこと（非特許文献１）ができないため、乳幼児用ミルクに乳酸菌及び／又はビフィズス菌を配合している。また、乳幼児用ミルクに乳酸菌及び／又はビフィズス菌を配合することが、腸内環境を整える上で好ましいとされている。また、離乳食以降ではビフィズス菌が半減し腸内バランスが崩れやすいとされている。
また、対象者が中高年や高齢者の場合、例えば、健康を維持する上で、腸内環境の改善が重要とされるが、老化や虚弱等によって腸内細菌叢におけるプロバイオティクスの善玉菌の割合が低下し、腸内環境は悪化しやすいとされている。
しかし、本技術であれば非侵襲的にお尻に接触させることで、上述のような腸内環境等の問題点に関して予防、治療又は改善することができ、また簡便及び安全の観点でも良好であり、本技術を用いることで乳幼児や高齢者等の腸内環境を改善又は整えること等が可能である。
The subject of the present technology is not particularly limited. As described above, since the usage of the present technology can be performed easily and safely regardless of age and gender, infants and elderly people are suitable as subjects of the present technology.
When the subject is an infant, for example, a Caesarian section infant, it is not possible to inherit intestinal bacteria such as bifidobacteria when passing through the mother's birth canal (Non-Patent Document 1). And / or Bifidobacterium. It is said that it is preferable to mix lactic acid bacteria and / or bifidobacteria with infant milk in order to prepare an intestinal environment. In addition, it is said that after the baby food, bifidobacteria are reduced by half, and the intestinal balance is easily broken.
In addition, when the subject is middle-aged or elderly, for example, it is important to improve the intestinal environment in order to maintain health, but due to aging and weakness, the good bacteria of probiotics in the intestinal flora are It is said that the ratio decreases and the intestinal environment is likely to deteriorate.
However, by contacting the hips non-invasively with the present technology, it is possible to prevent, treat or improve the above-mentioned problems such as the intestinal environment, etc. In addition, it is possible to improve or prepare the intestinal environment of infants and the elderly by using the present technology.
本技術の別の側面として、本発明者は、後記〔実施例〕に示すように、水浴時のプロバイオティクスの腸内伝播に優れている新規なビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガム菌を新たに２つ見出した。当該新規なビフィドバクテリウム・ロンガム菌は、ビフィドバクテリウム・ロンガム ＮＩＴＥ ＢＰ−０２７２５、及び／又は、ビフィドバクテリウム・ロンガム ＮＩＴＥ ＢＰ−０２７０６である。当該ロンガム菌は、生菌又は死菌の何れでも良いが、腸内伝播又は腸内細菌叢改善の観点から、生菌が好適である。
本技術の新規なビフィドバクテリウム・ロンガム菌は、ビフィズス菌に属するので、プロバイオティクス効果（例えば、腸内細菌叢の改善、腸内環境の改善、整腸作用等）を期待することができ、プロバイオティクス用組成物として含有させることができる。
本技術の新規なビフィドバクテリウム・ロンガム菌は、上述のとおり、公知のビフィズス菌の培養方法を利用して菌体又はその培養物を製造することが可能である。
本技術の新規なビフィドバクテリウム・ロンガム菌は、プロバイオティクスであるので、そのまま用いることが可能であり、又は生理的、医薬品的若しくは飲食品的に許容される通常の担体若しくは希釈剤等と共に混合して用いることもできる。
従って、本技術の新規なビフィドバクテリウム・ロンガム菌は、安全性が高いので、医薬品、飲食品、飼料等の幅広い用途の製品に使用でき、各種組成物（例えば、医薬品組成物、飲食品組成物、入浴用組成物、お尻の洗浄ケア用品等）に有効成分として含有させることもできる。これらの組成物又は製品は、各用途に適合した任意成分を適宜用い、各用途に適合した公知の製造方法によって、製造することができる。
また、本技術の新規なビフィドバクテリウム・ロンガム菌は、これら各種製剤又は各種組成物等の製造のために使用することができる。また、本技術は、プロバイオティクス用の新規なビフィドバクテリウム・ロンガム菌又は当該ロンガム菌培養物として使用することも可能である。
本技術の新規なビフィドバクテリウム・ロンガム菌の適用対象は、動物であれば特に限定されず、ヒト若しくは非ヒト動物（例えば、イヌ、ネコ、ネズミ、マウス等の哺乳類）に使用してもよく、ヒト及びペットが好ましく、より好ましくは、ヒトである。
本技術の新規なビフィドバクテリウム・ロンガム菌は、剤形、用法及び用量、適用症状又は疾患、対象者（年齢、性別等）等により適宜設定されてもよい。
As another aspect of the present technology, the present inventors have proposed a novel Bifidobacterium longum subspecies longum that is excellent in intestinal transmission of probiotics during water bathing, as described in Examples below. Two new bacteria were found. The new Bifidobacterium longum bacteria is Bifidobacterium longum NITE BP-02725 and / or Bifidobacterium longum NITE BP-02706. The longum bacteria may be either live or dead, but live bacteria are preferred from the viewpoint of intestinal transmission or improvement of intestinal flora.
Since the novel Bifidobacterium longum bacterium of the present technology belongs to Bifidobacterium, it can be expected to have a probiotic effect (for example, improvement of intestinal flora, improvement of intestinal environment, intestinal regulation, etc.). And can be contained as a composition for probiotics.
As described above, the novel Bifidobacterium longum bacterium of the present technology can produce cells or a culture thereof using a known method for culturing Bifidobacteria.
The novel Bifidobacterium longum bacterium of the present technology is a probiotic and can be used as it is, or can be used as a normal carrier or diluent which is physiologically, pharmaceutically or food and beverage acceptable. Can also be used as a mixture.
Therefore, the novel Bifidobacterium longum bacterium of the present technology is highly safe and can be used for products for a wide range of uses such as pharmaceuticals, foods and drinks, feeds, etc., and various compositions (for example, pharmaceutical compositions, foods and drinks) Compositions, bath compositions, buttocks care products, etc.) as active ingredients. These compositions or products can be produced by a known production method suitable for each use, using an arbitrary component suitable for each use.
In addition, the novel Bifidobacterium longum bacterium of the present technology can be used for production of these various preparations, various compositions, and the like. The present technology can also be used as a novel Bifidobacterium longum fungus for probiotics or a culture of the longum fungus.
The application target of the novel Bifidobacterium longum bacterium of the present technology is not particularly limited as long as it is an animal, and may be used for humans or non-human animals (eg, mammals such as dogs, cats, rats, and mice). Often, humans and pets are preferred, more preferably humans.
The novel Bifidobacterium longum bacterium of the present technology may be appropriately set depending on the dosage form, usage and dose, applicable symptoms or diseases, subjects (age, sex, etc.), and the like.
本技術の新規なビフィドバクテリウム・ロンガム菌株の含有量は、各種組成物の態様によって適宜設定されるが、通常、組成物中に、１×１０6〜１×１０12ｃｆｕ／ｇ又は１×１０6〜１×１０12ｃｆｕ／ｍＬの範囲内であることが好ましく、１×１０7〜１×１０11ｃｆｕ／ｇ又は１×１０7〜１×１０11ｃｆｕ／ｍＬの範囲内であることがより好ましい。
本技術の新規なビフィドバクテリウム・ロンガム菌株の使用量は、飲食品組成物の態様によって適宜設定されるが、通常、組成物中に、１×１０6〜１×１０12ｃｆｕ／ｇ又は１×１０6〜１×１０12ｃｆｕ／ｍＬの範囲内であることが好ましく、１×１０7〜１×１０11ｃｆｕ／ｇ又は１×１０7〜１×１０11ｃｆｕ／ｍＬの範囲内であることがより好ましい。
The content of the novel Bifidobacterium longum strain of the present technology is appropriately set depending on the embodiment of various compositions, but usually, 1 × 10 6 to 1 × 10 12 cfu / g or 1% in the composition. is preferably × 10 6 to 1 × range of 10 12 cfu / mL, is in the range of 1 × 10 7 ~1 × 10 11 cfu / g or 1 × 10 7 ~1 × 10 11 cfu / mL Is more preferable.
The amount of the novel Bifidobacterium longum strain used in the present technology is appropriately set depending on the embodiment of the food or drink composition, but usually 1 × 10 6 to 1 × 10 12 cfu / g or it is preferably in the range of 1 × 10 6 ~1 × 10 12 cfu / mL, in the range of 1 × 10 7 ~1 × 10 11 cfu / g or 1 × 10 7 ~1 × 10 11 cfu / mL More preferably, there is.
本技術の新規なビフィドバクテリウム・ロンガム菌は、経口投与及び非経口投与のいずれでもよい。非経口投与としては、例えば、水浴、注射（血液、皮膚、筋肉等）、直腸投与、吸入等が挙げられ、当該新規なロンガム菌は水浴でもプロバイオティクス効果が得られる観点において有利である。経口投与の場合は、経口摂取でもよい。
本技術の投与方法に応じて、適宜所望の剤形に製剤化することができる。例えば、経口投与の場合、散剤、顆粒剤、錠剤、カプセル剤等の固形製剤；溶液剤、シロップ剤、懸濁剤、乳剤等の液剤等に製剤化することができる。また、非経口投与の場合、入浴用組成物、座剤、噴霧剤、貼付剤、軟膏剤、注射剤等に製剤化することができる。また、前記製剤担体としては、剤形に応じて、各種有機又は無機の担体を用いることができる。固形製剤の場合の担体としては、例えば、賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、安定剤、矯味矯臭剤等が挙げられる。
The novel Bifidobacterium longum bacteria of the present technology may be administered orally or parenterally. Parenteral administration includes, for example, water bath, injection (blood, skin, muscle, etc.), rectal administration, inhalation, and the like. The novel longum bacteria are advantageous in that a probiotic effect can be obtained even in a water bath. In the case of oral administration, it may be taken orally.
It can be suitably formulated into a desired dosage form according to the administration method of the present technology. For example, in the case of oral administration, it can be formulated into solid preparations such as powders, granules, tablets and capsules; and liquid preparations such as solutions, syrups, suspensions and emulsions. In the case of parenteral administration, it can be formulated into a bath composition, suppository, spray, patch, ointment, injection and the like. In addition, various organic or inorganic carriers can be used as the pharmaceutical carrier depending on the dosage form. Carriers in the case of solid preparations include, for example, excipients, binders, disintegrants, lubricants, stabilizers, flavoring agents and the like.
本技術の新規なビフィドバクテリウム・ロンガム菌を含有する組成物として、例えば飲食品組成物等を挙げることができる。本技術の新規なビフィドバクテリウム・ロンガム菌は、発酵飲食品（例えば、発酵乳（ヨーグルト、チーズ等）等）に使用することができる。
本技術の飲食品組成物は、プロバイオティクス等の用途（保健用途を含む）が表示された飲食品として提供・販売されることが可能である。また、飲食品の摂取対象として、「ビフィズス菌と暮らす生活を望む方」、「腸内環境を改善したい方」、「お腹の調子を整えたい方」、「良好な腸内環境を形成したい方」等と表示して提供・販売されることが可能である。
「表示」行為には、需要者に対して前記用途を知らしめるための全ての行為が含まれ、前記用途を想起・類推させうるような表現であれば、表示の目的、表示の内容、表示する対象物・媒体等の如何に拘わらず、全て本発明の「表示」行為に該当する。
As a composition containing the novel Bifidobacterium longum bacterium of the present technology, for example, a food and drink composition and the like can be mentioned. The novel Bifidobacterium longum bacterium of the present technology can be used for fermented foods and drinks (eg, fermented milk (yogurt, cheese, etc.)).
The food and drink composition of the present technology can be provided and sold as food and drink on which uses (including health uses) such as probiotics are indicated. In addition, as a target of eating and drinking food, those who want to live with Bifidobacterium, those who want to improve the intestinal environment, those who want to adjust their stomach, and those who want to create a good intestinal environment And the like can be provided and sold.
The “display” action includes all actions for notifying the user of the use, and if the expression is such that the use can be recalled or analogized, the purpose of the display, the content of the display, and the display Regardless of the object, medium, etc. to be performed, they all fall under the “display” act of the present invention.
また、「表示」は、需要者が上記用途を直接的に認識できるような表現により行われることが好ましい。具体的には、飲食品に係る商品又は商品の包装に前記用途を記載したものを譲渡し、引き渡し、譲渡若しくは引き渡しのために展示し、輸入する行為、商品に関する広告、価格表若しくは取引書類に上記用途を記載して展示し、若しくは頒布し、又はこれらを内容とする情報に上記用途を記載して電磁気的（インターネット等）方法により提供する行為等が挙げられる。 In addition, “display” is preferably performed in an expression that allows the consumer to directly recognize the use. To be specific, transfer, transfer, display for transfer or delivery, and import, product-related advertisements, price lists, or transaction documents The above-mentioned use may be described and exhibited or distributed, or the use may be described in information containing the above-mentioned use and provided by an electromagnetic (such as the Internet) method.
一方、表示内容としては、行政等によって認可された表示（例えば、行政が定める各種制度に基づいて認可を受け、そのような認可に基づいた態様で行う表示等）であることが好ましい。また、そのような表示内容を、包装、容器、カタログ、パンフレット、ＰＯＰ等の販売現場における宣伝材、その他の書類等へ付することが好ましい。 On the other hand, the display content is preferably a display approved by the government or the like (for example, a display that is approved based on various systems determined by the government and is performed in a form based on such approval). Further, it is preferable to attach such display contents to advertising materials at a sales site, such as packaging, containers, catalogs, pamphlets, and POPs, and other documents.
また、「表示」には、健康食品、機能性食品、経腸栄養食品、特別用途食品、保健機能食品、特定保健用食品、栄養機能食品、機能性表示食品、医薬用部外品等としての表示も挙げられる。この中でも特に、消費者庁によって認可される表示、例えば、特定保健用食品、栄養機能食品、若しくは機能性表示食品に係る制度、又はこれらに類似する制度にて認可される表示等が挙げられる。具体的には、特定保健用食品としての表示、条件付き特定保健用食品としての表示、身体の構造や機能に影響を与える旨の表示、疾病リスク減少表示、科学的根拠に基づいた機能性の表示等を挙げることができ、より具体的には、健康増進法に規定する特別用途表示の許可等に関する内閣府令（平成二十一年八月三十一日内閣府令第五十七号）に定められた特定保健用食品としての表示（特に保健の用途の表示）及びこれに類する表示が典型的な例である。 In addition, `` labeling '' includes health foods, functional foods, enteral nutrition foods, special purpose foods, health functional foods, specified health foods, nutritional functional foods, functionally labeled foods, quasi-drugs, etc. An indication is also given. Among them, particularly, a label approved by the Consumer Affairs Agency, for example, a label approved by a system related to a food for specified health use, a nutritionally functional food, or a functionally labeled food, or a system similar thereto is exemplified. Specifically, labeling as a food for specified health use, labeling as a food for specified health use with a condition, indicating that it affects the structure and function of the body, indicating that the disease risk has been reduced, and providing functional evidence based on scientific evidence Labeling, etc., and more specifically, Cabinet Office Ordinance on the Permission of Special Use Labeling prescribed in the Health Promotion Act (August 31, 2001 Cabinet Office Ordinance No. 57) The labeling as a specified health food (particularly, labeling of health use) and a label similar thereto are typical examples.
また、本技術は、以下の構成を採用することも可能である。
〔１〕
生菌であるプロバイオティクス又は当該培養物を含む入浴用組成物又は非侵襲性非経口的伝播用組成物。当該非侵襲性非経口的伝播用組成物として、お尻洗浄ケア用品（例えば、お尻洗浄剤、お尻の洗浄シート等）が好適である。
前記プロバイオティクスが、乳酸菌及び／又はビフィドバクテリウム属細菌であることが好適である。前記乳酸菌が、ラクトバチルス属細菌であることが好適である。
〔２〕
生菌であるプロバイオティクスを使用する、又は当該プロバイオティクス若しくは当該培養物含有の入浴用組成物を使用する、水浴方法。
〔３〕
生菌であるプロバイオティクスを使用する、又は当該プロバイオティクス若しくは当該培養物含有の非侵襲性非経口的伝播用組成物を使用する、非侵襲性非経口的伝播方法。
〔４〕
入浴のための、生菌であるプロバイオティクス又は当該培養物；又はその使用。
〔５〕
非侵襲性非経口的伝播のための、生菌であるプロバイオティクス又は当該培養物；又はその使用。
〔６〕
前記〔１〕記載の組成物を製造するための、生菌であるプロバイオティクス又は当該培養物の使用。
〔７〕
前記〔１〕〜〔６〕が、プロバイオティクスを腸内に伝播させるためであることが好適である。
〔８〕
前記〔１〕〜〔６〕が、腸内環境改善用であることが好適である。
〔９〕
前記〔１〕〜〔６〕のプロバイオティクスが、ラクトバチルス・アシドフィルス、ラクトバチルス・パラカゼイ、ラクトバチルス・ラムノーサス、ラクトバチルス・ガセリ、及び、ラクトバチルス・ヘルベティカス、並びに、ビフィドバクテリウム・ロンガム、ビフィドバクテリウム・ブレーベ、ビフィドバクテリウム・シュードカテナラタム、及び、ビフィドバクテリウム・ビフィダム、からなる群から選ばれる１種又は２種以上であることが好適である。
〔１０〕
前記〔１〕〜〔６〕のプロバイオティクスが、
ラクトバチルス・アシドフィルス ＮＩＴＥ ＢＰ−０１６９５、
ラクトバチルス・パラカゼイ ＮＩＴＥ ＢＰ−０１６３３、
ラクトバチルス・ラムノーサス ＬＣＳ７４２ 、
ラクトバチルス・ガセリ ＮＩＴＥ ＢＰ−０１６６９、
ラクトバチルス・ヘルベティカス ＮＩＴＥ ＢＰ−０１６７１、
ビフィドバクテリウム・ロンガム ＮＩＴＥ ＢＰ−０２６２１、
ビフィドバクテリウム・ロンガム ＮＩＴＥ ＢＰ−０２７２５、
ビフィドバクテリウム・ロンガム ＮＩＴＥ ＢＰ−０２７０６、
ビフィドバクテリウム・ブレーベ ＮＩＴＥ ＢＰ−０２６２２、
ビフィドバクテリウム・シュードカテナラタム ＤＳＭ２０４３８、
ビフィドバクテリウム・ビフィダム ＪＣＭ１２５４、及び、
ビフィドバクテリウム・ロンガム ＪＣＭ１２１７、からなる群から選ばれる１種又は２種以上であることが好適である。
Further, the present technology may employ the following configurations.
[1]
A bathing composition or a composition for non-invasive parenteral transmission comprising a probiotic which is a viable bacterium or the culture. As the non-invasive composition for parenteral transmission, buttocks care products (for example, buttocks cleaners and buttocks washing sheets) are suitable.
It is preferable that the probiotics are lactic acid bacteria and / or bacteria of the genus Bifidobacterium. It is preferable that the lactic acid bacterium is a bacterium belonging to the genus Lactobacillus.
[2]
A water bath method using a probiotic that is a viable bacterium, or using a bathing composition containing the probiotic or the culture.
[3]
A non-invasive parenteral transmission method using a probiotic that is a live bacterium, or using a composition for non-invasive parenteral transmission containing the probiotic or the culture.
[4]
A probiotic which is a viable bacterium or a culture thereof for bathing; or use thereof.
[5]
A live probiotic or culture thereof for non-invasive parenteral transmission; or use thereof.
[6]
Use of a probiotic which is a viable bacterium or the culture for producing the composition according to the above [1].
[7]
It is preferable that the above [1] to [6] are for propagating the probiotics into the intestine.
[8]
It is preferable that the above [1] to [6] are for improving the intestinal environment.
[9]
The probiotic of [1] to [6] is Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus paracasei, Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus gasseri, and Lactobacillus helveticus, and Bifidobacterium longum, It is preferable to use one or more selected from the group consisting of Bifidobacterium breve, Bifidobacterium pseudocatenaratam, and Bifidobacterium bifidum.
[10]
The probiotics of the above [1] to [6],
Lactobacillus acidophilus NITE BP-016995,
Lactobacillus paracasei NITE BP-01633,
Lactobacillus rhamnosus LCS742,
Lactobacillus gasseri NITE BP-01669,
Lactobacillus helveticus NITE BP-01671,
Bifidobacterium longum NITE BP-02621,
Bifidobacterium longum NITE BP-02725,
Bifidobacterium longum NITE BP-02706,
Bifidobacterium breve NITE BP-02622,
Bifidobacterium pseudocatenaratum DSM20438,
Bifidobacterium bifidum JCM1254, and
Bifidobacterium longum JCM1217 is preferably one or more selected from the group consisting of.
〔１１〕
ビフィドバクテリウム・ロンガム ＮＩＴＥ ＢＰ−０２７２５、及び／若しくは、ビフィドバクテリウム・ロンガム ＮＩＴＥ ＢＰ−０２７０６、又は、当該ロンガム菌若しくは当該ロンガム培養物を含む組成物。
〔１２〕
前記〔１１〕の組成物が、プロバイオティクスを腸内に伝播させるためのものである、及び／又は、腸内環境改善用であることが好適である。
〔１３〕
ビフィドバクテリウム・ロンガム ＮＩＴＥ ＢＰ−０２７２５、及び／又は、ビフィドバクテリウム・ロンガム ＮＩＴＥ ＢＰ−０２７０６を使用する、プロバイオティクス向上方法、腸内環境改善方法又は整腸方法。
〔１４〕
プロバイオティクスのための、ビフィドバクテリウム・ロンガム ＮＩＴＥ ＢＰ−０２７２５、及び／若しくは、ビフィドバクテリウム・ロンガム ＮＩＴＥ ＢＰ−０２７０６、又は、当該ロンガム菌若しくは当該ロンガム培養物、又はこれらの使用。前記プロバイオティクスが、好適には腸内改善のため又は整腸のためである。
〔１５〕
前記〔１１〕又は〔１２〕記載の組成物を製造するためのビフィドバクテリウム・ロンガム ＮＩＴＥ ＢＰ−０２７２５、及び／又は、ビフィドバクテリウム・ロンガム ＮＩＴＥ ＢＰ−０２７０６の使用。
[11]
A composition comprising the Bifidobacterium longum NITE BP-02725 and / or the Bifidobacterium longum NITE BP-02706, or the longum fungus or the longum culture.
[12]
It is preferable that the composition [11] is for transmitting a probiotic into the intestine and / or for improving the intestinal environment.
[13]
Use of Bifidobacterium longum NITE BP-02725 and / or Bifidobacterium longum NITE BP-02706 to improve a probiotic, intestinal environment, or intestinal method.
[14]
Bifidobacterium longum NITE BP-02725 and / or Bifidobacterium longum NITE BP-02706 for probiotics, or the longum or longum culture, or use thereof. The probiotics are preferably for intestinal improvement or for bowel control.
[15]
Use of Bifidobacterium longum NITE BP-02725 and / or Bifidobacterium longum NITE BP-02706 for producing the composition according to [11] or [12].
以下、実施例、試験、製造例等に基づいて本技術をさらに詳細に説明する。なお、以下に説明する実施例等は、本技術の代表的な実施例等の一例を示したものであり、これにより本技術の範囲が狭く解釈されることはない。 Hereinafter, the present technology will be described in more detail based on examples, tests, production examples, and the like. Note that the embodiments and the like described below are examples of typical embodiments and the like of the present technology, and the scope of the present technology is not construed as being narrow.
〔試験１〕
本発明者らは腸内細菌の伝播経路について鋭意研究を進めたところ、日本人特有の文化であるお風呂が、その腸内細菌の伝播経路であることを突き止めた。
一緒にお風呂に入る４家族について、全員が入浴した３０分以内に浴槽内のお湯を３リットル回収し、ビフィズス菌選択培地であるＴＯＳプロピオン酸培地（ヤクルト社製）と混釈、３７度４８時間培養を行った。得られたコロニー数は表１の通りであり、浴槽内のお湯が少なくとも一時的に腸内細菌の温床になっていることが示された。
[Test 1]
The present inventors have conducted intensive studies on the transmission route of intestinal bacteria, and have found that bath, which is a culture unique to Japanese people, is the transmission route of intestinal bacteria.
For 4 families who take a bath together, within 30 minutes when all members took a bath, 3 liters of hot water in the bathtub was collected, and mixed with TOS propionic acid medium (manufactured by Yakult), a selective medium for bifidobacteria, at 37 ° 48. Culture was performed for hours. The number of obtained colonies is as shown in Table 1, and it was shown that the hot water in the bathtub was at least temporarily a hotbed of intestinal bacteria.
併せて家族全員から糞便を回収し、適宜生理食塩水で嫌気的に希釈した後、ＴＯＳプロピオン酸培地に塗布、３７度４８時間培養を行った。浴槽水及び糞便から得られたコロニーを液体ＭＲＳ培地で３７度１６時間培養した。培養後、DNeasy Blood & Tissue kit(QIAGEN社製)にてDNA抽出を行い、そのあとそれぞれの菌株についてNextera XT DNA Sample Preparation Kit(イルミナ社製)でライブラリー調整後、Miseq(イルミナ社製)を用いてシークエンスを行い、得られたfastqファイルをCLC genomics workbenchでアセンブルを行い、ドラフトゲノムを得た。
得られた菌株が同一であるかを判断するために、４７菌種のビフィズス菌ゲノム（表２）及び得られたドラフトゲノムを用いて非特許文献３の方法に従い、すべてのビフィズス菌株が保有していた２１７遺伝子を選抜（以下、「コアゲノム」ともいう）、これらコアゲノムの塩基配列を比較した。
例として家族３から分離されたビフィズス菌ロンガム種の結果を、表３に示す。浴槽から分離された菌株と同一の菌株が父親及び息子の腸内（糞便）からも分離された。この結果は、浴槽内のお湯が家族内での腸内細菌伝播経路になっていることを示唆するものである。
この結果は、プロバイオティクスを含む水に浴することでプロバイオティクスが腸内に伝播ができることを示唆するものである。さらに、このことは、プロバイオティクスを非経口的で非侵襲的にお尻に接触させることでプロバイオティクスが腸内に伝播できることも示唆するものである。このことから、プロバイオティクスの腸内伝播目的に、プロバイオティクスをお尻のケア用品に使用することも可能である。
At the same time, feces were collected from the whole family, appropriately anaerobically diluted with physiological saline, applied to a TOS propionic acid medium, and cultured at 37 ° C. for 48 hours. Colonies obtained from bath water and feces were cultured at 37 ° C. for 16 hours in a liquid MRS medium. After cultivation, DNA extraction was performed using DNeasy Blood & Tissue kit (manufactured by QIAGEN) .After that, for each strain, after library adjustment using Nextera XT DNA Sample Preparation Kit (manufactured by Illumina), Miseq (manufactured by Illumina) was used. The resulting fastq file was assembled using the CLC genomics workbench to obtain a draft genome.
In order to determine whether or not the obtained strains are the same, all the Bifidobacterium strains were retained according to the method of Non-Patent Document 3 using 47 species of Bifidobacterium genome (Table 2) and the obtained draft genome. 217 genes were selected (hereinafter, also referred to as “core genome”), and the nucleotide sequences of these core genomes were compared.
As an example, the results for Bifidobacterium longum species isolated from Family 3 are shown in Table 3. The same strain as that isolated from the bath was also isolated from the intestines (feces) of the father and son. This result suggests that hot water in the bathtub is a route of intestinal bacterial transmission in families.
This result suggests that probiotics can be transmitted to the intestine by bathing in water containing the probiotics. In addition, this suggests that probiotics can be transmitted into the intestine by contacting the probiotics parenterally and non-invasively with the buttocks. For this reason, it is also possible to use probiotics in care products for hips for the purpose of intestinal transmission of probiotics.
〔試験２〕
次に、浴槽内で伝播する可能性がより高い菌株を選別するため、４０℃の温湯での生残性を調査した。
表４及び５に記載の菌株は、上述した各保存機関等から入手できる。
複数のビフィズス菌株・乳酸菌株についてＭＲＳ培地にて３７℃１６時間培養後、４０℃の温湯で１０万倍に希釈した培養液を４０℃保温し、３０分後の細菌の生残性を確認した。その結果、試験に供したすべてのビフィズス菌が生存していた。さらに、３時間後の細菌の生残性を確認した。結果を表４及び表５に示す。乳酸菌は試験に供したすべての菌株で生存が確認されたが、ビフィズス菌は、菌株によっては３時間で死滅した。しかし、一部は高い生残性を示す菌株も存在することが明らかとなった。平均的な入浴時間は約３０分程度と云われているので、４０℃で３０分程度の生残性があれば浴槽内での伝播は可能と考える。なお、ビフィドバクテリウム・ロンガム ＪＣＭ１２１７も同様に３０分後の生残性の確認を行ったが、生残率９５．１％であった。
[Test 2]
Next, in order to select strains that are more likely to be transmitted in the bathtub, survival in 40 ° C. hot water was investigated.
The strains described in Tables 4 and 5 can be obtained from the above-mentioned storage institutions and the like.
After culturing a plurality of bifidobacteria strains and lactic acid bacteria strains in an MRS medium at 37 ° C. for 16 hours, a culture solution diluted 100,000-fold with hot water at 40 ° C. was kept at 40 ° C., and the viability of the bacteria was confirmed after 30 minutes. . As a result, all the bifidobacteria subjected to the test survived. Furthermore, the survival of bacteria after 3 hours was confirmed. The results are shown in Tables 4 and 5. Lactic acid bacteria survived in all strains tested, but bifidobacteria died in 3 hours depending on the strain. However, it was clarified that some strains exhibited high viability. Since the average bathing time is said to be about 30 minutes, it is considered that propagation in the bathtub is possible if there is a survivability of about 30 minutes at 40 ° C. The survival of Bifidobacterium longum JCM1217 was similarly confirmed after 30 minutes, and the survival rate was 95.1%.
〔試験３〕
実際に浴槽内のビフィズス菌が伝播するかを確認した。市販のビフィズス菌ＢＢ５３６菌末（森永乳業社製）を浴槽内に２包（１．０×１０１１ ｃｆｕ）に投入後軽く攪拌し、普段通り入浴を行った。なお、ＢＢ５３６菌株は、Ｂ．ロンガム ＮＩＴＥ ＢＰ−０２６２１と同じ菌株である。
被験者から入浴前、入浴２日後の糞便を回収し、非特許文献２に示す方法で糞便から腸内細菌全体のＤＮＡを抽出、ＢＢ５３６特異的プライマー（特開２００６−０８１４２９号公報）を用いてＰＣＲを行った。結果、試験前からＢＢ５３６は検出されなかったが、入浴翌日の便からはビフィズス菌ＢＢ５３６が検出された。
[Test 3]
It was confirmed whether bifidobacteria in the bathtub actually spread. Two commercially available bifidobacterium BB536 bacteria powder (manufactured by Morinaga Milk Industry Co., Ltd.) were charged into a bathtub in two packets (1.0 × 10 11 cfu), and the mixture was gently stirred and bathed as usual. In addition, BB536 strain is B. It is the same strain as Longum NITE BP-02621.
The feces before bathing and two days after bathing were collected from the subject, DNA of whole intestinal bacteria was extracted from feces by the method described in Non-Patent Document 2, and PCR was performed using a BB536-specific primer (JP-A-2006-08429). Was done. As a result, BB536 was not detected before the test, but Bifidobacterium BB536 was detected from the stool on the day after bathing.
〔試験４〕新規ビフィズス菌株（Bifidobacterium longum subsp. longum菌株）の取得
日本国内にてお風呂場から採集したサンプルを滅菌した０．８５％生理食塩水で希釈し、下記組成のDifcoTM Lactobacilli MRS Agar（Becton Deckinson and Company）に塗布し、３０℃で嫌気培養した。
〔DifcoTMLactobacilli MRS Agar〕 プロテオースペプトンＮｏ．３ １０．０ｇ；牛肉エキス １０．０ｇ；酵母エキス ５．０ｇ；デキストロース ２０．０ｇ；ポリソルベート８０ １．０ｇ；クエン酸アンモニウム ２．０ｇ；酢酸ナトリウム ５．０ｇ；硫酸マグネシウム ０．１ｇ；硫酸マンガン ０．０５ｇ；リン酸二カリウム ２．０ｇ；寒天 １５．０ｇ；精製水 １０００ｍＬ；ｐＨ６．５±０．２を１２１℃で１５分滅菌後、シャーレに分注して平板とした。
[Test 4] Acquisition of a novel Bifidobacterium longum subsp. Longum strain A sample collected from a bathroom in Japan was diluted with sterilized 0.85% saline, and Difco ™ Lactobacilli MRS Agar having the following composition was used. (Becton Deckinson and Company) and anaerobically cultured at 30 ° C.
[Difco ™ Lactobacilli MRS Agar] Proteose Peptone No. 3 10.0 g; beef extract 10.0 g; yeast extract 5.0 g; dextrose 20.0 g; polysorbate 80 1.0 g; ammonium citrate 2.0 g; sodium acetate 5.0 g; magnesium sulfate 0.1 g; manganese sulfate 0 0.05 g; dipotassium phosphate 2.0 g; agar 15.0 g; purified water 1000 mL; pH 6.5 ± 0.2 was sterilized at 121 ° C. for 15 minutes, and dispensed into petri dishes to form plates.
そして得られたコロニーの中で、塗布標本の顕微鏡観察によりグラム陽性かつ桿菌もしくは不定桿菌である菌を釣菌した。これらの菌を、ＢＬ寒天培地（栄研化学社）に画線塗布し、前記と同様の方法で嫌気培養を反復し、純粋単離された菌株を複数得た。
〔ＢＬ寒天培地〕 肉エキス ３．０ｇ；肝臓エキス ５．０ｇ；酵母エキス ５．０ ｇ；ペプトン １５．０ｇ；ソイペプトン ３．０ｇ；可溶性デンプン ０．５ｇ；ブドウ糖 １０．０ｇ；リン酸二カリウム １．０ｇ；リン酸一カリウム １．０ｇ；硫酸マグネシウム ０．２ｇ；塩化ナトリウム ０．０１ｇ；硫酸マンガン ０．００６７４ｇ；Ｌ−システイン塩酸塩 ０．５ｇ；硫化第一鉄 ０．０１ｇ；ポリソルベート８０ １．０ｇ；寒天 １５．０ｇ；精製水 １０００ｍＬ；ｐＨ ７．２±０．２を、１２１℃で１５分滅菌後、５０℃に冷却し、５％（Ｖ／Ｖ）馬無菌脱繊血を加え、シャーレに分注して平板とした。
Then, among the obtained colonies, bacteria that were gram-positive and bacilli or indefinite bacilli were picked by microscopic observation of the coated specimen. These bacteria were streaked on a BL agar medium (Eiken Chemical Co., Ltd.), and anaerobic culture was repeated in the same manner as described above to obtain a plurality of purely isolated bacterial strains.
[BL agar medium] Meat extract 3.0 g; liver extract 5.0 g; yeast extract 5.0 g; peptone 15.0 g; soy peptone 3.0 g; soluble starch 0.5 g; glucose 10.0 g; dipotassium phosphate 1 1.0 g; monopotassium phosphate 1.0 g; magnesium sulfate 0.2 g; sodium chloride 0.01 g; manganese sulfate 0.00674 g; L-cysteine hydrochloride 0.5 g; ferrous sulfide 0.01 g; 0 g; agar 15.0 g; purified water 1000 mL; pH 7.2 ± 0.2, sterilized at 121 ° C. for 15 minutes, cooled to 50 ° C., and added 5% (V / V) sterile horse-derived blood. Dispensed into petri dishes to make flat plates.
さらに、この複数得られた菌株から、上述の表４及び５に示すように、４０℃の温湯中で３０分保存後に生残率７０％以上及び３時間保存後に生残率が５０％以上のビフィズス菌を探索した。この結果、上述の２菌株を得ることができた。当該２菌株の同定は、以下のようにして行った。 Furthermore, as shown in Tables 4 and 5 above, a survival rate of 70% or more after storage for 30 minutes in hot water at 40 ° C. and a survival rate of 50% or more after storage for 3 hours, as shown in Tables 4 and 5, above. Bifidobacterium was searched. As a result, the above two strains were obtained. The two strains were identified as follows.
純粋単離された菌株群（当該菌株のゲノムＤＮＡの塩基配列）から、タカラバイオ社製Bacterial 16sRNA DNA PCR kitを用いて、そのプロトコールに従ってＰＣＲに用いるサンプルＤＮＡ液を調製し、このサンプルＤＮＡ液を用いてＰＣＲにて当該１６ＳｒＲＮＡ遺伝子を増幅し、ＤＮＡ増幅産物を得、これよりこれら菌株の１６ＳｒＲＮＡ遺伝子配列を決定した。
この塩基配列情報に基づき、ＮＣＢＩ（National Center for Biotechnology Information、国立バイオテクノロジー情報センター）の国際塩基配列データベース（Genbank）上で、ＢＬＡＳＴ（Basic Local Alignment Search Tool、http://blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi）による１６ＳリボソーマルＲＮＡ（１６ＳｒＲＮＡ）遺伝子配列の全長についての相同性検索を行った結果、本２菌株は、Bifidobacterium longum subsp. longum JCM 1217と最も高い相同性（98.6％以上）を示したので、Bifidobacterium longum subsp. longum菌株とした。なお、これら菌株はグラム陽性であった。
これら２菌株は、独立行政法人 製品評価技術基盤機構 特許微生物寄託センター（ＮＰＭＤ）（住所：〒２９２−０８１８ 日本国千葉県木更津市かずさ鎌足２−５−８）に、それぞれ、Bifidobacterium longum MCLONBATH1（受託番号：NITE BP-02725）株（受託日：：２０１８年５月１８日）、及びBifidobacterium longum MCLONBATH2（受託番号：NITE BP-02706）株（受託日：２０１８年５月７日）として、国際寄託した。
これら２菌株は、上述のとおりBifidobacterium longum subsp. longumと同定され、このときの相同性は、前記ロンガム NITE BP-02725では99.6％であり、前記ロンガム NITE BP-02706では99.8％であった。
A sample DNA solution to be used for PCR was prepared from the purely isolated strain group (base sequence of the genomic DNA of the strain) using Bacterial 16sRNA DNA PCR kit manufactured by Takara Bio Inc. according to the protocol, and this sample DNA solution was used. The 16S rRNA gene was amplified by PCR to obtain a DNA amplification product, from which the 16S rRNA gene sequence of these strains was determined.
On the basis of this nucleotide sequence information, BLAST (Basic Local Alignment Search Tool, http: //blast.ncbi.nlm.) On the international base sequence database (Genbank) of NCBI (National Center for Biotechnology Information). nih.gov/Blast.cgi), a homology search was performed on the full length of the 16S ribosomal RNA (16S rRNA) gene sequence. As a result, the two strains showed the highest homology (98.6% or more) with Bifidobacterium longum subsp. longum JCM 1217. ) Was designated as Bifidobacterium longum subsp. Longum strain. These strains were Gram-positive.
These two strains were transferred to the National Institute of Technology and Evaluation, Patent Microorganisms Depositary Center (NPMD) (address: 2-5-8, Kazusa-Kamashita, Kisarazu-shi, Chiba, Japan 292-0818, Japan), respectively, for Bifidobacterium longum MCLONBATH1 ( Accession number: NITE BP-02725) (Deposit date: May 18, 2018) and Bifidobacterium longum MCLONBATH2 (Accession number: NITE BP-02706) strain (Accession date: May 7, 2018) Deposited.
As described above, these two strains were identified as Bifidobacterium longum subsp. Longum, and the homology at this time was 99.6% for the longum NITE BP-02725 and 99.8% for the longum NITE BP-02706.
なお、ビフィドバクテリウム・ロンガム ＮＩＴＥ ＢＰ−０２７２５及びビフィドバクテリウム・ロンガム ＮＩＴＥ ＢＰ−０２７０６の１６ＳｒＤＮＡ遺伝子配列は、それぞれ、表７に配列番号１、表８に配列番号２として示す。 The 16S rDNA gene sequences of Bifidobacterium longum NITE BP-02725 and Bifidobacterium longum NITE BP-02706 are shown as SEQ ID NO: 1 in Table 7 and SEQ ID NO: 2 in Table 8, respectively.
［製造例１：入浴用組成物又は入浴用組成物用菌末］
ラクトバチルス・アシドフィルス ＮＩＴＥ ＢＰ−０１６９５、ラクトバチルス・パラカゼイ ＮＩＴＥ ＢＰ−０１６３３、ラクトバチルス・ラムノーサス ＬＣＳ７４２、ラクトバチルス・ガセリ ＮＩＴＥ ＢＰ−０１６６９、及び ラクトバチルス・ヘルベティカス ＮＩＴＥ ＢＰ−０１６７１、並びに ビフィドバクテリウム・ロンガム ＮＩＴＥ ＢＰ−０２６２１、ビフィドバクテリウム・ロンガム ＮＩＴＥ ＢＰ−０２７２５、ビフィドバクテリウム・ロンガム ＮＩＴＥ ＢＰ−０２７０６、ビフィドバクテリウム・ブレーベ ＮＩＴＥ ＢＰ−０２６２２、ビフィドバクテリウム・シュードカテナラタム ＤＳＭ２０４３８、ビフィドバクテリウム・ビフィダム ＪＣＭ１２５４、及び、ビフィドバクテリウム・ロンガム ＪＣＭ１２１７；から少なくとも１種又は２種をＭＲＳ液体培地３ｍＬに添加し、３７℃で１６時間嫌気培養し、培養液を濃縮し、被覆剤等を添加し、凍結乾燥を行い、該細菌の凍結乾燥粉末（菌末）を得る。
前記被覆剤等として、澱粉、乳蛋白消化物／ＨＰＭＣ、アルギン酸Ｎａ、炭酸Ｃａ、リン酸Ｃａ、カラメル色素等を用いる。
[Production Example 1: Bath composition or bacterial powder for bath composition]
Lactobacillus acidophilus NITE BP-016995, Lactobacillus paracasei NITE BP-01633, Lactobacillus rhamnosus LCS742, Lactobacillus gasseri NITE BP-01669, and Lactobacillus helveticus NITE BP-0167 NITE BP-02621, Bifidobacterium longum NITE BP-02725, Bifidobacterium longum NITE BP-02706, Bifidobacterium breve NITE BP-02622, Bifidobacterium pseudocatenaratum DSM 20438, Fidobacterium bifidum JCM1254 and Bifidobacterium longum JCM1217; At least one or two of them are added to 3 mL of MRS liquid medium, anaerobically cultured at 37 ° C. for 16 hours, the culture solution is concentrated, a coating agent is added, freeze-drying is performed, and a freeze-dried powder of the bacteria (bacterium) is added. End).
Starch, milk protein digest / HPMC, Na alginate, Ca carbonate, Ca phosphate, caramel pigment, etc. are used as the coating agent and the like.
［製造例２：非侵襲性非経口的伝播用組成物又は当該伝播用菌末］
ラクトバチルス・アシドフィルス ＮＩＴＥ ＢＰ−０１６９５、ラクトバチルス・パラカゼイ ＮＩＴＥ ＢＰ−０１６３３、ラクトバチルス・ラムノーサス ＬＣＳ７４２、ラクトバチルス・ガセリ ＮＩＴＥ ＢＰ−０１６６９、及び、ラクトバチルス・ヘルベティカス ＮＩＴＥ ＢＰ−０１６７１、並びに、ビフィドバクテリウム・ロンガム ＮＩＴＥ ＢＰ−０２６２１、ビフィドバクテリウム・ロンガム ＮＩＴＥ ＢＰ−０２７２５、ビフィドバクテリウム・ロンガム ＮＩＴＥ ＢＰ−０２７０６、ビフィドバクテリウム・ブレーベ ＮＩＴＥ ＢＰ−０２６２２、ビフィドバクテリウム・シュードカテナラタム ＤＳＭ２０４３８、ビフィドバクテリウム・ビフィダム ＪＣＭ１２５４、及び、ビフィドバクテリウム・ロンガム ＪＣＭ１２１７；から少なくとも１種又は２種をＭＲＳ液体培地３ｍＬに添加し、３７℃で１６時間嫌気培養し、培養液を濃縮し、被覆剤等を添加し、凍結乾燥を行い、該細菌の凍結乾燥粉末（製造例２の菌末）を得る。
前記被覆剤等として、澱粉、乳蛋白消化物／ＨＰＭＣ、アルギン酸Ｎａ、炭酸Ｃａ、リン酸Ｃａ、カラメル色素等を用いる。
前記製造例２の菌末を、温水洗浄便座の洗浄水に混入させて、菌を含む洗浄水でお尻（肛門周辺部）を洗浄する。
前記製造例２の菌末を、お尻洗浄ケア用品（例えば、洗浄液、含水シート、吸収シート等）として用いる。前記菌末をお尻洗浄ケア用品に付着させて、菌末含有のお尻洗浄ケア用品を作製し、これを用いてお尻を拭く。
[Production Example 2: Non-invasive composition for parenteral transmission or bacterial powder for transmission]
Lactobacillus acidophilus NITE BP-016995, Lactobacillus paracasei NITE BP-01633, Lactobacillus rhamnosus LCS742, Lactobacillus gasseri NITE BP-01669, and Lactobacillus helveticus NITE BP-011・ Longam NITE BP-02621, Bifidobacterium longum NITE BP-02725, Bifidobacterium longum NITE BP-02706, Bifidobacterium breve NITE BP-02622, Bifidobacterium pseudocatenaratum DSM20438 Bifidobacterium bifidum JCM1254 and Bifidobacterium longum JCM1217; At least one or two of them are added to 3 mL of MRS liquid medium, anaerobically cultured at 37 ° C. for 16 hours, the culture solution is concentrated, a coating agent is added, freeze-drying is performed, and a freeze-dried powder of the bacteria ( The bacterial powder of Production Example 2) is obtained.
Starch, milk protein digest / HPMC, Na alginate, Ca carbonate, Ca phosphate, caramel pigment, etc. are used as the coating agent and the like.
The bacterial powder of Production Example 2 is mixed into the washing water of the warm water washing toilet seat, and the buttocks (peripheral part of the anus) are washed with the washing water containing the bacteria.
The bacterial powder of Production Example 2 is used as an ass cleaning care product (for example, a cleaning solution, a water-containing sheet, an absorbent sheet, etc.). The bacterial powder is adhered to the ass cleaning and care product to prepare a ass cleaning and care product containing the bacterial powder, and the ass is wiped using this.
［製造例３：新規菌株を有する入浴用組成物又は飲食品］
ラクトバチルス・アシドフィルス ＮＩＴＥ ＢＰ−０１６９５、ラクトバチルス・パラカゼイ ＮＩＴＥ ＢＰ−０１６３３、ラクトバチルス・ラムノーサス ＬＣＳ７４２、ラクトバチルス・ガセリ ＮＩＴＥ ＢＰ−０１６６９、及び、ラクトバチルス・ヘルベティカス ＮＩＴＥ ＢＰ−０１６７１、並びに、ビフィドバクテリウム・ロンガム ＮＩＴＥ ＢＰ−０２６２１、ビフィドバクテリウム・ロンガム ＮＩＴＥ ＢＰ−０２７２５、ビフィドバクテリウム・ロンガム ＮＩＴＥ ＢＰ−０２７０６、ビフィドバクテリウム・ブレーベ ＮＩＴＥ ＢＰ−０２６２２、ビフィドバクテリウム・シュードカテナラタム ＤＳＭ２０４３８、ビフィドバクテリウム・ビフィダム ＪＣＭ１２５４、及び、ビフィドバクテリウム・ロンガム ＪＣＭ１２１７の少なくとも種又は２種をＭＲＳ液体培地３ｍＬに添加し、３７℃で１６時間嫌気培養し、培養液を濃縮し、被覆剤等を添加し、凍結乾燥を行い、該細菌の凍結乾燥粉末（菌末）を得る。なお、被覆剤等は、前記製造例１で使用した被覆剤等を用いることができる。
前記末は、入浴用組成物として、浴槽内に、４０℃の湯２０Ｌ当たり菌の使用量１×１０９〜１×１０１２ＣＦＵで添加し、撹拌し、入浴を行う。より良好に腸内環境の改善効果が期待できる。
また、前記菌末はビフィズス菌であるので食することが可能である。例えば、乳タンパク質濃縮物の乾燥粉末と（ＭＰＣ４８０、フォンテラ社製、タンパク質含量８０質量％、カゼインタンパク質：ホエイタンパク質＝約８：２）を均一に混合して、組成物を得る。当該組成物２０ｇを２００ｇの水に溶かし、腸内改善用飲食品を得ることができる。また、前記菌株をスターターとして使用し、公知の発酵食品の製造方法を利用して、腸内改善用の発酵飲食品（発酵乳）を得ることもできる。
[Production Example 3: Bath composition or food or beverage having novel strain]
Lactobacillus acidophilus NITE BP-01695, Lactobacillus paracasei NITE BP-01633, Lactobacillus rhamnosus LCS742, Lactobacillus gasseri NITE BP-01669, and Lactobacillus helveticus NITE BP-0101・ Longam NITE BP-02621, Bifidobacterium longum NITE BP-02725, Bifidobacterium longum NITE BP-02706, Bifidobacterium breve NITE BP-02622, Bifidobacterium pseudocatenaratum DSM20438 Of Bifidobacterium bifidum JCM1254 and Bifidobacterium longum JCM1217 At least one or more species are added to 3 mL of MRS liquid medium, anaerobically cultured at 37 ° C. for 16 hours, the culture solution is concentrated, a coating agent is added, freeze-dried, and a lyophilized powder of the bacterium is added. End). Note that the coating agent and the like used in Production Example 1 can be used as the coating agent and the like.
The powder is added as a bathing composition in a bathtub at a used amount of bacteria of 1 × 10 9 to 1 × 10 12 CFU per 20 L of hot water at 40 ° C., followed by stirring and bathing. A better effect of improving the intestinal environment can be expected.
Further, since the bacterial powder is a bifidobacterium, it can be eaten. For example, a composition is obtained by uniformly mixing a dry powder of a milk protein concentrate and (MPC480, manufactured by Fonterra, protein content of 80% by mass, casein protein: whey protein = about 8: 2). By dissolving 20 g of the composition in 200 g of water, a food or drink for improving intestines can be obtained. In addition, a fermented food or drink (fermented milk) for intestinal improvement can be obtained by using the above-mentioned strain as a starter and utilizing a known method for producing a fermented food.
（１）ラクトバチルス・アシドフィルス NITE BP-01695（受託番号：NITE BP-01695）（受託日：２０１３年８月２３日）、受託先：〒２９２−０８１８ 日本国千葉県木更津市かずさ鎌足２−５−８ １２２号室、独立行政法人 製品評価技術基盤機構 特許微生物寄託センター（ＮＰＭＤ）。
（２）ラクトバチルス・パラカゼイ NITE BP-01633（受託番号：NITE BP-01633）（受託日：２０１３年６月６日）、受託先：〒２９２−０８１８ 日本国千葉県木更津市かずさ鎌足２−５−８ １２２号室、独立行政法人 製品評価技術基盤機構 特許微生物寄託センター（ＮＰＭＤ）。
（３）ラクトバチルス・ガセリ ＮＩＴＥ ＢＰ−０１６６９（受託番号：NITE BP-01669））（受託日：２０１３年７月２９日）、受託先：〒２９２−０８１８ 日本国千葉県木更津市かずさ鎌足２−５−８ １２２号室、独立行政法人 製品評価技術基盤機構 特許微生物寄託センター（ＮＰＭＤ）。
（４）ラクトバチルス・ヘルベティカス ＮＩＴＥ ＢＰ−０１６７１（受託番号：NITE BP-01671）、（受託日：２０１３年７月２９日）、受託先：〒２９２−０８１８ 日本国千葉県木更津市かずさ鎌足２−５−８ １２２号室、独立行政法人 製品評価技術基盤機構 特許微生物寄託センター（ＮＰＭＤ）。
（５）ビフィドバクテリウム・ロンガム ＮＩＴＥ ＢＰ−０２６２１（受託番号：NITE BP-02621）（ATCC BAA-999／BB536）（受託日：２０１８年１月２６日）、受託先：〒２９２−０８１８ 日本国千葉県木更津市かずさ鎌足２−５−８ １２２号室、独立行政法人 製品評価技術基盤機構 特許微生物寄託センター（ＮＰＭＤ）。
（６）ビフィドバクテリウム・ブレーベ ＮＩＴＥ ＢＰ−０２６２２（受託番号：NITE BP-02622）（M-16V）（受託日：２０１８年１月２６日）、受託先：〒２９２−０８１８ 日本国千葉県木更津市かずさ鎌足２−５−８ １２２号室、独立行政法人 製品評価技術基盤機構 特許微生物寄託センター（ＮＰＭＤ）。
（７）ビフィドバクテリウム・ロンガム ＮＩＴＥ ＢＰ−０２７２５（受託番号：NITE BP-０２７２５）（受託日：２０１８年５月１８日）、受託先：〒２９２−０８１８ 日本国千葉県木更津市かずさ鎌足２−５−８ １２２号室、独立行政法人 製品評価技術基盤機構 特許微生物寄託センター（ＮＰＭＤ）。
（８）ビフィドバクテリウム・ロンガム ＮＩＴＥ ＢＰ−０２７０６（受託番号：NITE BP-０２７０６）（受託日：２０１８年５月７日）、受託先：〒２９２−０８１８ 日本国千葉県木更津市かずさ鎌足２−５−８ １２２号室、独立行政法人 製品評価技術基盤機構 特許微生物寄託センター（ＮＰＭＤ）。
（９）ビフィドバクテリウム・シュードカテナラタム ＤＳＭ２０４３８（Bifidobacterium pseudocatenulatum DSM20438）、微生物株保存機関：ＤＳＭＺ(German Collection of Microorganisms and Cell Cultures)（Inhoffenstr.7B, D38124 Braunschweig, GERMANY）；Catalogue of microorganisms（２０１８年５月１日検索）：URL: https://www.dsmz.de/catalogues/details/culture/DSM-20438.html
（１０）ビフィドバクテリウム・ビフィダム ＪＣＭ１２５４（Bifidobacterium bifidum JCM1254）、微生物株保存機関：ＪＣＭ（Japan Collection of Microorganisms）（住所：3050074 茨城県つくば市高野台3-1-1 国立研究開発法人 理化学研究所 バイオリソースセンター 微生物材料開発室）；JCM 微生物株オンラインカタログ（２０１８年５月１日検索）、URL: http://www.jcm.riken.jp/cgi-bin/jcm/jcm_number?JCM=1254
（１１）ビフィドバクテリウム・ロンガム ＪＣＭ１２１７（Bifidobacterium longum subsp. longum JCM1217）、微生物株保存機関：ＪＣＭ（Japan Collection of Microorganisms）（住所：3050074 茨城県つくば市高野台3-1-1 国立研究開発法人 理化学研究所 バイオリソースセンター 微生物材料開発室）；JCM 微生物株オンラインカタログ（２０１８年５月１日検索）、URL:http://www.jcm.riken.go.jp/cgi-bin/jcm/jcm_number?JCM=1217
（１２） ビフィドバクテリウム・ブレーベ ＦＥＲＭ ＢＰ−１１１７５（受託番号：FERM BP-11175）（受託日：２００９年８月２５日）、受託先：〒２９２−０８１８ 日本国千葉県木更津市かずさ鎌足２−５−８、独立行政法人産業技術総合研究所特許生物寄託センター（現 独立行政法人製品評価技術基盤機構（ＮＩＴＥ）特許生物寄託センター（ＩＰＯＤ）（ＮＩＴＥ−ＩＰＯＤ）。
（１３）ビフィドバクテリウム・インファンティス ＮＩＴＥ ＢＰ−０２６２３（受託番号：NITE BP-02623）（受託日：２０１８年１月２６日）、受託先：〒２９２−０８１８ 日本国千葉県木更津市かずさ鎌足２−５−８ １２２号室、独立行政法人 製品評価技術基盤機構 特許微生物寄託センター（ＮＰＭＤ）。
(1) Lactobacillus acidophilus NITE BP-01695 (Accession number: NITE BP-01695) (Acceptance date: August 23, 2013), Entrustee: 2-Kazumasa Kazusa, Kisarazu-shi, Chiba, Japan 292-0818 Japan 5-8 Room 122, National Institute of Technology and Evaluation, Patent Microorganisms Depositary Center (NPMD).
(2) Lactobacillus paracasei NITE BP-01633 (Accession number: NITE BP-01633) (Acceptance date: June 6, 2013), Entrustee: 2 Kazusa Kazusa, Kisarazu-shi, Chiba, Japan 292-0818 Japan 5-8 Room 122, National Institute of Technology and Evaluation, Patent Microorganisms Depositary Center (NPMD).
(3) Lactobacillus gasseri NITE BP-01669 (Accession number: NITE BP-01669)) (Acceptance date: July 29, 2013), Entrustee: 2 Kazusa Kamashita, Kisarazu-shi, Chiba, Japan 292-0818 Japan -5-8 Room 122, National Institute of Technology and Evaluation, Patent Microorganisms Depositary Center (NPMD).
(4) Lactobacillus helveticus NITE BP-01671 (Accession number: NITE BP-01671), (Acceptance date: July 29, 2013), Acceptance address: Kazusa Kamashita 2, Kisarazu-shi, Chiba, Japan 292-0818 Japan -5-8 Room 122, National Institute of Technology and Evaluation, Patent Microorganisms Depositary Center (NPMD).
(5) Bifidobacterium longum NITE BP-02621 (Accession number: NITE BP-02621) (ATCC BAA-999 / BB536) (Accession date: January 26, 2018), Accession: $ 292-0818 Japan Room No. 122, 2-5-8 Kazusa-Kamashita, Kisarazu-shi, Chiba Pref. National Institute of Technology and Evaluation Patent Microorganisms Depositary Center (NPMD).
(6) Bifidobacterium breve NITE BP-02622 (Accession number: NITE BP-02622) (M-16V) (Acceptance date: January 26, 2018), Acceptance address: Chiba, Japan Room 2-5-8 Kazusa-Kamashita, Kisarazu-shi, National Institute of Technology and Evaluation Patent Microorganisms Depositary Center (NPMD).
(7) Bifidobacterium longum NITE BP-02725 (Accession number: NITE BP-02725) (Acceptance date: May 18, 2018), Acceptance address: Kazusa Kamatari, Kisarazu-shi, Chiba, Japan 292-0818 Japan 2-5-8 Room 122, National Institute of Technology and Evaluation, Patent Microorganisms Depositary Center (NPMD).
(8) Bifidobacterium longum NITE BP-02706 (Accession number: NITE BP-02706) (Acceptance date: May 7, 2018), Acceptance address: Kazusa Kamatari, Kisarazu-shi, Chiba, Japan 292-0818 Japan 2-5-8 Room 122, National Institute of Technology and Evaluation, Patent Microorganisms Depositary Center (NPMD).
(9) Bifidobacterium pseudocatenulatum DSM20438, DSMZ (German Collection of Microorganisms and Cell Cultures) (Inhoffenstr. 7B, D38124 Braunschweig, GERMANY); Catalogue of microorganisms (2018) URL: https://www.dsmz.de/catalogues/details/culture/DSM-20438.html
(10) Bifidobacterium bifidum JCM1254 (Bifidobacterium bifidum JCM1254), Microorganism strain preservation organization: Japan Collection of Microorganisms (JCM) (address: 3050074 3-1-1 Takanodai, Tsukuba-shi, Ibaraki RIKEN BioResource Center, Microbial Materials Development Section); JCM Microorganism strain online catalog (searched on May 1, 2018), URL: http://www.jcm.riken.jp/cgi-bin/jcm/jcm_number?JCM=1254
(11) Bifidobacterium longum JCM1217 (Bifidobacterium longum subsp. Longum JCM1217), Microorganism strain preservation institution: Japan Collection of Microorganisms (JCM) (Address: 3050074 Takanodai, Tsukuba, Ibaraki, Japan) RIKEN BioResource Center, Microbial Material Development Section); JCM Microorganism Strain Online Catalog (searched on May 1, 2018), URL: http://www.jcm.riken.go.jp/cgi-bin/jcm/jcm_number? JCM = 1217
(12) Bifidobacterium breve FERM BP-11175 (Accession number: FERM BP-11175) (Acceptance date: August 25, 2009), Entrustee: Kazusa Kamatari, Kisarazu-shi, Chiba, Japan 292-0818 Japan 2-5-8, National Institute of Advanced Industrial Science and Technology (AIST) Patent Organism Depositary Center (currently the National Institute of Technology and Evaluation (NITE) Patent Organism Depositary Center (IPOD) (NITE-IPOD).
(13) Bifidobacterium infantis NITE BP-02623 (Accession number: NITE BP-02623) (Accession date: January 26, 2018), Acceptance address: Kazusa, Kisarazu-shi, Chiba, Japan 292-0818 Japan 2-5-8 Kamatari Room 122, National Institute of Technology and Evaluation, Patent Microorganisms Depositary Center (NPMD).
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A composition comprising the Bifidobacterium longum according to claim 11 and / or a culture of the Bifidobacterium longum.
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Legal Events
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