JP2017532981A - 破壊された過敏感反応ボックスを有するエリシターペプチド及びその使用 - Google Patents
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Abstract
Description
本発明は、破壊された過敏感反応ボックスを有する新規のエリシターペプチド、ならびに成長増進、病害抵抗、害虫または昆虫抵抗、及びストレス抵抗を特に含む活性な植物反応を誘導するためのそれらの使用に関する。
ハーピンタンパク質の同定及び単離は、感染がどのように植物と相互作用するかを理解することを試みているCornell Universityでの基礎研究に由来した。防御の第一線は、過敏感反応(HR)という、感染部位での限局性植物細胞死である。細胞死は、病原体の移動に対して物理的バリアを生じ、一部の植物では、死細胞は、侵入病原体に対して毒性な化合物を放出し得る。研究によって、病原細菌はおそらく、HRの開始を担う単一の因子を有することが示されていた。Cornell大学における研究の基本的な目的は、HRの誘発を担う特定の細菌タンパク質を同定することであった。その標的タンパク質は、過敏感反応及び病原性(Hypersensitive Response and Pathogenicity;hrp)遺伝子クラスターと呼ばれる一群の細菌遺伝子の1つによってコードされることが分かっている。セイヨウナシ及びリンゴにおいて火傷病の原因となる細菌エルウィニア・アミロボーラ(Erwinia amylovora)(Ea)におけるhrpクラスターが分析され、ある種の植物においてHRを誘発する単一のタンパク質が同定された。このタンパク質は、ハーピン(後には、ハーピンEa)という名称を与えられ、対応する遺伝子は、hrpNと指定された。これは、あらゆる細菌種から同定されたそのようなタンパク質及び遺伝子の最初の例であった。
のアミノ酸配列を有する単離されたペプチドに関し、ここで、
前記ペプチドは、システイン及びメチオニンを含まず;
2、3、7、8、12、及び13位の各Xは、任意選択であり、かつ、存在する場合には任意のアミノ酸であり;
4、9、及び14位の各Xは、任意のアミノ酸であり;
1、5、6、10、11、15、及び16位のJ残基の1〜3個が、非疎水性アミノ酸またはAであり、かつJ残基の他の全てが、L、I、V、またはFであり、かつ、前記ペプチドは、植物組織に適用されたときに、活性な植物反応を誘導するが過敏感反応を誘導しない。
(SEQ ID NO:2、修飾P1/P4コンセンサス)のアミノ酸配列を有する単離されたペプチドに関し、ここで、
1位のXは、任意選択であり、かつS、N、D、イソD、G、A、またはSであり得;
2位のXは、任意選択であり、かつQ、E、g−グルタマート、G、A、またはSであり得;
8位のXは、Q、E、g−グルタマート、G、A、またはSであり;
9位のXは、M、L、I、F、もしくはV、または非疎水性アミノ酸であり;
10位のXは、任意選択であり、かつDまたはイソDであり得;
11位のXは、Q、E、g−グルタマート、G、A、またはSであり;
12位のXは、M、L、I、もしくはF、または非疎水性アミノ酸であり;
13位のXは、M、L、もしくはI、または非疎水性アミノ酸であり;
14位のXは、任意選択であり、かつ任意の親水性アミノ酸、好ましくはS、T、D、イソD、K、またはQ、及び任意選択でAまたはCであり得;
15位のXは、Q、E、g−グルタマート、G、A、S、K、またはIであり;
16位のXは、M、L、I、V、もしくはF、または非疎水性アミノ酸であり;
17位のXは、M、L、I、A、もしくはV、または非疎水性アミノ酸であり;
18位のXは、Q、E、g−グルタマート、G、A、S、M、T、またはKであり;
19位のXは、A、D、イソD、S、V、T、K、R、E、H、またはGであり;
20位のXは、M、L、またはIであり;
21位のXは、M、L、I、V、S、もしくはFであるか、またはセリン以外の非疎水性アミノ酸であり;
22位のXは、Q、E、g−グルタマート、G、A、Sであり;
23位のXは、P、Q、E、g−グルタマート、G、A、またはSであり;かつ
9、12、13、16、17、及び20位の残基の少なくとも1つは非疎水性アミノ酸であるか、または21位の残基はセリン以外の非疎水性アミノ酸であり、かつ、前記ペプチドは、植物組織に適用されたときに、活性な植物反応を誘導するが過敏感反応を誘導しない。
(SEQ ID NO:3、修飾P4コンセンサス)のアミノ酸配列を有する単離されたペプチドに関し、ここで、
2位のXは、Q、E、g−グルタマート、G、A、またはSであり;
8位のXは、Q、E、g−グルタマート、G、A、またはSであり;
9位のXは、M、S、L、A、I、V、もしくはFであるか、またはセリン以外の非疎水性アミノ酸であり;
11位のXは、Q、E、g−グルタマート、G、A、またはSであり;
12位のXは、L、I、もしくはF、または非疎水性アミノ酸であり;
13位のXは、L、A、I、V、もしくはF、または非疎水性アミノ酸であり;
14位のXは、任意の親水性アミノ酸であり;
15位のXは、Q、E、g−グルタマート、G、A、S、K、またはIであり;
16位のXは、L、A、I、V、M、もしくはF、または非疎水性アミノ酸であり;
17位のXは、M、I、S、もしくはFであるか、またはセリン以外の非疎水性アミノ酸であり;
18位のXは、Q、E、g−グルタマート、G、A、またはSであり;
20位のXは、M、L、I、V、もしくはF、または非疎水性アミノ酸であり;
21位のXは、M、L、もしくはF、または非疎水性アミノ酸であり;かつ
22位のXは、Q、E、g−グルタマート、G、A、またはSであり;
9、12、13、16、20、及び21位の残基の1個は、非疎水性アミノ酸もしくはAであるか、または17位の残基はセリン以外の非疎水性アミノ酸であり、かつ、前記ペプチドは、植物組織に適用されたときに、活性な植物反応を誘導するが過敏感反応を誘導しない。
(SEQ ID NO:4、修飾P1コンセンサス)のアミノ酸配列を有する単離されたペプチドに関し、ここで、
1位のXは、N、D、イソD、G、A、またはSであり;
2位のXは、Q、E、g−グルタマート、G、A、またはSであり;
8位のXは、Q、E、g−グルタマート、G、A、またはSであり;
11位のXは、Q、E、g−グルタマート、G、A、またはSであり;
15位のXは、Q、E、g−グルタマート、G、A、またはSであり;
18位のXは、M、T、K、E、g−グルタマート、G、A、またはSであり;
22位のXは、Q、E、g−グルタマート、G、A、またはSであり;
23位のXは、Q、E、g−グルタマート、G、A、またはSであり;
9、12、13、16、17、20、及び21位のJは、これらの位置のアミノ酸のうちの1つが非疎水性アミノ酸またはAであることを除いては、L、V、I、及びFから選択される疎水性アミノ酸であり、前記ペプチドは、植物組織に適用されたときに、活性な植物反応を誘導するが過敏感反応を誘導しない。
(i)3位のXが、N、D、またはイソDであり;
6位のXが、Q、E、g−グルタマート、G、A、またはSであり;
8位のXが、N、D、またはイソDであり;
15位のXが、任意選択であり、かつ任意のアミノ酸であり得;
18位のXが、M、E、g−グルタマート、G、A、S、T、またはKであり;
22位のXが、任意選択であり、かつQ、E、g−グルタマート、G、A、またはSであり得;かつ
9、12、13、16、17、20、及び21位のJは、これらの位置のアミノ酸のうちの少なくとも1つが非疎水性アミノ酸またはAであることを除いては、L、V、I、及びFから選択される疎水性アミノ酸である、
(SEQ ID NO:5、修飾P15b/P20コンセンサス)、
あるいは
(ii)7位のXが、任意選択であり、かつ任意のアミノ酸であり得;
10位のXが、M、E、g−グルタマート、G、A、S、T、またはKであり;
14位のXが、任意選択であり、かつQ、E、g−グルタマート、G、A、またはSであり得;かつ
1、4、5、8、9、12、及び13位のJが、これらの位置のアミノ酸のうちの少なくとも1つが非疎水性アミノ酸またはAであることを除いては、L、V、I、及びFから選択される疎水性アミノ酸である、
(SEQ ID NO:6、修飾P15/20minコンセンサス)
のアミノ酸配列を有する単離されたペプチドに関し、かつ
前記ペプチドは、植物組織に適用されたときに、活性な植物反応を誘導するが過敏感反応を誘導しない。
(SEQ ID NO:7、修飾P6/6aコンセンサス)のアミノ酸配列を有する単離されたペプチドに関し、ここで、
6位のXは、Q、E、g−グルタマート、G、A、またはSであり;
9位のXは、M、E、g−グルタマート、G、A、S、T、またはKであり;
10位のXは、HまたはNであり;
14位のXは、E、g−グルタマート、D、またはイソDであり;
17位のXは、Q、E、g−グルタマート、G、A、またはSであり;
19位のXは、Q、E、g−グルタマート、G、A、またはSであり;かつ
4、7、8、11、12、15、及び16位のJは、これらの位置のアミノ酸のうちの少なくとも1つが非疎水性アミノ酸またはAであることを除いては、L、V、I、M、及びFから選択される疎水性アミノ酸であり、前記ペプチドは、植物組織に適用されたときに、活性な植物反応を誘導するが過敏感反応を誘導しない。
(i)1位のXが、Q、N、D、E、g−グルタマート、イソD、またはSであり得;
2位のXが、D、E、g−グルタマート、イソDであり得;
3位のXが、P、D、E、イソD、またはg−グルタマートであり得;
4位のXが、M、A、S、D、E、イソD、またはg−グルタマートであり得
5位のXが、Q、E、またはg−グルタマートであり得;
6位のXが、A、E、またはg−グルタマートであり得;
8位のXが、M、L、E、Q、D、N、G、A、S、イソD、またはg−グルタマートであり得;
9位のXが、Q、N、E、D、G、A、S、イソD、またはg−グルタマートであり得;
12位のXが、Q、N、E、D、G、A、S、イソD、またはg−グルタマートであり得;
13位のXが、Q、N、E、D、G、A、S、イソD、またはg−グルタマートであり得;
16位のXが、K、Q、N、E、D、R、G、A、またはSであり得;かつ
7、10、11、14、15、17、及び18位のJが、これらの位置のアミノ酸のうちの少なくとも1つが非疎水性アミノ酸またはAであることを除いては、L、V、I、及びFから選択される疎水性アミノ酸である、
(SEQ ID NO:8、修飾P14dコンセンサス)、あるいは
(ii)2位のXが、M、L、E、Q、D、N、G、A、S、イソD、またはg−グルタマートであり得;
3位のXが、Q、N、E、D、G、A、S、イソD、またはg−グルタマートであり得;
6位のXが、Q、N、E、D、G、A、S、イソD、またはg−グルタマートであり得;
7位のXが、Q、N、E、D、G、A、S、イソD、またはg−グルタマートであり得;
10位のXが、K、Q、N、E、D、R、G、A、またはSであり得;かつ
1、4、5、8、9、11、及び12位のJが、これらの位置のアミノ酸のうちの少なくとも1つが非疎水性アミノ酸またはAであることを除いては、L、V、I、及びFから選択される疎水性アミノ酸である、
(SEQ ID NO:9、修飾P14d minコンセンサス)
のアミノ酸配列を有する単離されたペプチドに関し、ここで、前記ペプチドは、植物組織に適用されたときに、活性な植物反応を誘導するが過敏感反応を誘導しない。
(i)2位のXが、Q、N、E、g−グルタマート、D、イソD、T、S、A、またはGであり得;
3位のXが、K、Q、N、E、g−グルタマート、D、イソD、T、S、A、またはGであり得;
6位のXが、K、Q、N、E、g−グルタマート、D、イソD、T、S、A、またはGであり得;
9位のXが、E、g−グルタマート、D、イソD、Q、N、T、S、A、またはGであり得;
10位のXが、A、G、S、T、E、g−グルタマート、D、イソD、Q、またはNであり得;かつ
1、4、5、7、8、10、及び11位のJが、これらの位置のアミノ酸のうちの少なくとも1つが非疎水性アミノ酸またはAであることを除いては、L、V、I、F、及びMから選択される疎水性アミノ酸である、
(SEQ ID NO:10、修飾P25コンセンサス)、あるいは
(ii)2位のXが、T、S、A、G、D、イソD、E、g−グルタマート、Q、またはNであり得;
3位のXが、G、T、S、A、D、イソD、E、g−グルタマート、Q、またはNであり得;
6位のXが、Q、N、E、g−グルタマート、D、イソD、T、S、A、またはGであり得;
7位のXが、K、Q、N、E、g−グルタマート、D、イソD、T、S、A、またはGであり得;
10位のXが、K、Q、N、E、g−グルタマート、D、イソD、T、S、A、またはGであり得;
13位のXが、E、g−グルタマート、D、イソD、Q、N、T、S、A、またはGであり得;
14位のXが、A、G、S、T、E、g−グルタマート、D、イソD、Q、またはNであり得;
1、4、5、8、9、11、12、及び15位のJが、これらの位置のアミノ酸のうちの少なくとも1つが非疎水性アミノ酸またはAであることを除いては、L、V、I、F、及びMから選択される疎水性アミノ酸であり;かつ16位のJが、任意選択であり、かつL、V、I、及びFから選択される疎水性アミノ酸である、
(SEQ ID NO:11、修飾P25コンセンサス)
のアミノ酸配列を有する単離されたペプチドに関し、ここで、前記ペプチドは、植物組織に適用されたときに、活性な植物反応を誘導するが過敏感反応を誘導しない。
(i)1位のXが、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはQ、S、E、g−グルタマート、A、T、G、D、イソD、N、K、またはRであり得;
2位のXが、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはQ、S、E、g−グルタマート、A、T、G、D、イソD、N、K、またはRであり得;
3位のXが、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはP、Q、S、E、g−グルタマート、A、T、G、D、イソD、N、K、またはRであり得;
4位のXが、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはI、Q、S、E、g−グルタマート、A、T、G、D、N、イソD、K、またはRであり得;
5位のXが、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはD、イソD、S、E、g−グルタマート、A、T、G、N、Q、K、またはRであり得;
6位のXが、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはR、Q、S、E、g−グルタマート、A、T、G、D、イソD、N、またはKであり得;
7位のXが、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはQ、S、E、g−グルタマート、A、T、G、D、イソD、N、K、またはRであり得;
8位のXが、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはT、Q、S、E、g−グルタマート、A、G、D、イソD、N、K、またはRであり得;
9位のXが、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはI、Q、S、E、g−グルタマート、A、T、G、D、イソD、N、K、またはRであり得;
10位のXが、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはE、g−グルタマート、Q、S、A、T、G、D、イソD、N、K、またはRであり得;
11位のXが、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはQ、S、E、g−グルタマート、A、T、G、D、イソD、N、K、またはRであり得;
13位のXが、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはA、S、T、G、D、イソD、E、g−グルタマート、Q、N、K、またはRであり得;
14位のXが、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはQ、A、S、T、G、D、イソD、E、g−グルタマート、N、K、またはRであり得;
17位のXが、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはA、S、T、G、D、イソD、E、g−グルタマート、Q、N、K、またはRであり得;
18位のXが、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはQ、A、S、T、G、D、イソD、E、g−グルタマート、N、K、またはRであり得;
21位のXが、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはK、A、S、T、G、D、イソD、E、g−グルタマート、Q、N、またはRであり得;
22位のXが、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはS、A、T、G、D、イソD、E、g−グルタマート、Q、N、K、またはRであり得;
25位のXが、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはS、A、T、G、D、イソD、E、g−グルタマート、Q、N、K、またはRであり得;
26位のXが、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはP、S、A、T、G、D、イソD、E、g−グルタマート、Q、N、K、またはRであり得;
27位のXが、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはQ、S、A、T、G、D、イソD、E、g−グルタマート、N、K、またはRであり得;
12、15、16、19、20、23、及び24位のJが、これらの位置のアミノ酸のうちの少なくとも1つが非疎水性アミノ酸またはAであることを除いては、L、V、I、F、及びMから選択される疎水性アミノ酸である、
(SEQ ID NO:12、修飾P17/18)、あるいは
(ii)2位のXが、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはA、S、T、G、D、イソD、E、g−グルタマート、Q、N、K、またはRであり得;
3位のXが、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはQ、A、S、T、G、D、イソD、E、g−グルタマート、N、K、またはRであり得;
6位のXが、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはA、S、T、G、D、イソD、E、g−グルタマート、Q、N、K、またはRであり得;
7位のXが、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはQ、A、S、T、G、D、イソD、E、g−グルタマート、N、K、またはRであり得;
10位のXが、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはK、A、S、T、G、D、イソD、E、g−グルタマート、Q、N、またはRであり得;
11位のXが、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはS、A、T、G、D、イソD、E、g−グルタマート、Q、N、K、またはRであり得;かつ
1、4、5、8、9、12、及び13位のJが、これらの位置のアミノ酸のうちの少なくとも1つが非疎水性アミノ酸またはAであることを除いては、L、V、I、F、及びMから選択される疎水性アミノ酸である、
(SEQ ID NO:13、修飾P17/18minコンセンサス)
のアミノ酸配列を有する単離されたペプチドに関し、ここで、前記ペプチドは、植物組織に適用されたときに、活性な植物反応を誘導するが過敏感反応を誘導しない。
(SEQ ID NO:14、修飾P19コンセンサス)のアミノ酸配列を有する単離されたペプチドに関し、ここで、
1位のXは、任意選択であり、L、I、V、F、またはMであり得;
3位のXは、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはK、A、S、T、G、D、イソD、E、g−グルタマート、Q、N、またはRであり得;
4位のXは、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはA、S、T、G、D、イソD、E、g−グルタマート、Q、N、K、またはRであり得;
7位のXは、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはK、A、S、T、G、D、イソD、E、g−グルタマート、Q、N、またはRであり得;
10位のXは、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはA、S、T、G、D、イソD、E、g−グルタマート、Q、N、K、またはRであり得;
11位のXは、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはR、A、S、T、G、D、イソD、E、g−グルタマート、Q、N、またはKであり得;かつ
2、5、6、8、9、12、及び13位のJは、これらの位置のアミノ酸のうちの少なくとも1つが非疎水性アミノ酸またはAであることを除いては、L、V、I、F、及びMから選択される疎水性アミノ酸であり、前記ペプチドは、植物組織に適用されたときに、活性な植物反応を誘導するが過敏感反応を誘導しない。
(SEQ ID NO:126、P3ミニマム(minimum))のアミノ酸配列を含む単離されたペプチドに関し、ここで、
3位のXは、任意の親水性アミノ酸、好ましくはK、A、S、T、G、D、イソD、E、g−グルタマート、Q、N、またはRであり;
6位のXは、任意の親水性アミノ酸、好ましくはK、A、S、T、G、D、イソD、E、g−グルタマート、Q、N、またはRであり;
7位のXは、任意の親水性アミノ酸、好ましくはK、A、S、T、G、D、イソD、E、g−グルタマート、Q、N、またはRであり;かつ
Z1及びZ2の一方が存在し、ただし好ましくは両方ではなく、Z1は、LXX−を含み、ここで各Xは、親水性アミノ酸、好ましくはK、A、S、T、G、D、イソD、E、g−グルタマート、Q、N、またはRであり、かつZ2は、−XXLFを含み、ここで各Xは、親水性アミノ酸、好ましくはK、A、S、T、G、D、イソD、E、g−グルタマート、Q、N、またはRである。
のアミノ酸配列を有する単離されたペプチドに関し、ここで、前記ペプチドは、システイン及びメチオニンを含まず;2、3、6、7位の各Xは、任意のアミノ酸であり、かつ前記ペプチドは、植物組織に適用されたときに、活性な植物反応を誘導するが過敏感反応を誘導しない。
からなる群から選択される単離されたペプチドに関する。また、これらのペプチドの1つを、精製タグ、溶解性タグ、または本発明の第1から第12及び第14の態様の1つによる第2のペプチドの1つまたは複数と共に含む融合タンパク質も、本発明のこの態様に包含される。
本発明の一態様は、次の特質:生化学的シグナル伝達の改変;成長の促進;病原体抵抗性;及び/または生物的もしくは非生物的ストレス抵抗性:のうちの1つまたは複数をもたらす、過敏感反応ではないが活性な植物反応を促進する能力を有する新規のペプチドに関する。
のアミノ酸配列を含み、ここで、前記ペプチドは、システイン及びメチオニンを含まず、2、3、7、8、12、及び13位の各Xは、任意選択であり、かつ、存在する場合には任意のアミノ酸であり、4、9、及び14位の各X残基は、任意のアミノ酸であり、1、5、6、10、11、15、及び16位のJ残基の1〜3個が、非疎水性アミノ酸またはAであり(好ましくは、Aが存在する場合、1、5、6、10、15、または16位のうちの1つに存在する)、かつJ残基の他の全てが、L、I、V、またはFであり(好ましくはL、I、またはV);かつ前記ペプチドは、植物組織に適用されたときに、活性な植物反応を誘導するが過敏感反応を誘導しない。
を含まず、かつこれからなるものではない。これらのペプチドは、それぞれ、その全体が参照によって本明細書に組み込まれる、Haapalainen et al.,“Functional Mapping of Harpin HrpZ of Pseudomonas syringae Reveals the Sites Responsible for Protein Oligomerization,Lipid Interactions,and Plant Defence Induction,” Mol.Plant Pathol.12(2):151−66(2011)において同定されている。
表3では、ペプチドは、イタリック活字体によって示されている溶解性タグSEEEEEを含む。表3に示されている配列を含むがこの特定の溶解性タグを欠失する(または異なる溶解性タグを有する)ペプチドも、本明細書において企図される。
表4では、ペプチドは、イタリック活字体によって示されている溶解性タグSEEEEEを含む。表4に示されている配列を含むがこの特定の溶解性タグを欠失する(または異なる溶解性タグを有する)ペプチドも、本明細書において企図される。
表5では、ペプチドは、イタリック活字体によって示されている溶解性タグSEEEEEを含む。表5に示されている配列を含むがこの特定の溶解性タグを欠失する(または異なる溶解性タグを有する)ペプチドも、本明細書において企図される。
表6では、いくつかのペプチドは、イタリック活字体によって示されている、ポリEセグメントが3〜7個のGlu(E)残基を含有する溶解性タグS−ポリEを含む。表6に示されている配列を含むがこの特定の溶解性タグを欠失する(または異なる溶解性タグを有する)ペプチドも、本明細書において企図される。
(SEQ ID NO:2、修飾P1/P4コンセンサス)のアミノ酸配列を有する単離されたペプチドに関し、ここで、
1位のXは、任意選択であり、かつS、N、D、イソD、G、A、またはSであり得;
2位のXは、任意選択であり、かつQ、E、g−グルタマート、G、A、またはSであり得;
8位のXは、Q、E、g−グルタマート、G、A、またはSであり;
9位のXは、M、L、I、F、もしくはV、または非疎水性アミノ酸であり;
10位のXは、任意選択であり、かつDまたはイソDであり得;
11位のXは、Q、E、g−グルタマート、G、A、またはSであり;
12位のXは、M、L、I、もしくはF、または非疎水性アミノ酸であり;
13位のXは、M、L、もしくはI、または非疎水性アミノ酸であり;
14位のXは、任意選択であり、かつ任意の親水性アミノ酸、S、T、D、イソD、K、またはQ、任意選択でAまたはCであり得;
15位のXは、Q、E、g−グルタマート、G、A、S、K、またはIであり;
16位のXは、M、L、I、V、もしくはF、または非疎水性アミノ酸であり;
17位のXは、M、L、I、A、もしくはV、または非疎水性アミノ酸であり;
18位のXは、Q、E、g−グルタマート、G、A、S、M、T、またはKであり;
19位のXは、A、D、イソD、S、V、T、K、R、E、H、またはGであり;
20位のXは、M、L、またはIであり;
21位のXは、M、L、I、V、S、もしくはFであるか、またはセリン以外の非疎水性アミノ酸であり;
22位のXは、Q、E、g−グルタマート、G、A、Sであり;
23位のXは、P、Q、E、g−グルタマート、G、A、またはSであり;かつ
9、12、13、16、17、及び20位の残基の少なくとも1つは、非疎水性アミノ酸であるか、または21位の残基はセリン以外の非疎水性アミノ酸であり、かつ前記ペプチドは、植物組織に適用されたときに、活性な植物反応を誘導するが過敏感反応を誘導しない。
(SEQ ID NO:3、修飾P4コンセンサス)のアミノ酸配列を有し、ここで、
2位のXは、Q、E、g−グルタマート、G、A、またはSであり;
8位のXは、Q、E、g−グルタマート、G、A、またはSであり;
9位のXは、M、S、L、A、I、V、もしくはFであるか、またはセリン以外の非疎水性アミノ酸であり;
11位のXは、Q、E、g−グルタマート、G、A、またはSであり;
12位のXは、L、I、もしくはF、または非疎水性アミノ酸であり;
13位のXは、L、A、I、V、もしくはF、または非疎水性アミノ酸であり;
14位のXは、任意の親水性アミノ酸であり;
15位のXは、Q、E、g−グルタマート、G、A、S、K、またはIであり;
16位のXは、L、A、I、V、M、もしくはF、または非疎水性アミノ酸であり;
17位のXは、M、I、S、もしくはFであるか、またはセリン以外の非疎水性アミノ酸であり;
18位のXは、Q、E、g−グルタマート、G、A、またはSであり;
20位のXは、M、L、I、V、もしくはF、または非疎水性アミノ酸であり;
21位のXは、M、L、もしくはF、または非疎水性アミノ酸であり;かつ
22位のXは、Q、E、g−グルタマート、G、A、またはSであり;
9、12、13、16、20、及び21位の残基の1個は、非疎水性アミノ酸もしくはAであるか、または17位の残基はセリン以外の非疎水性アミノ酸であり、前記ペプチドは、植物組織に適用されたときに、活性な植物反応を誘導するが過敏感反応を誘導しない。好ましくは、9、12、13、16、20、及び21位の残基の1〜4個、3個以下、2個以下、もしくは正確には1個が、非疎水性アミノ酸であるか、または17位の残基が、セリン以外の非疎水性アミノ酸である。
(SEQ ID NO:4、修飾P1コンセンサス)のアミノ酸配列を有し、ここで、
1位のXは、N、D、イソD、G、A、またはSであり;
2位のXは、Q、E、g−グルタマート、G、A、またはSであり;
8位のXは、Q、E、g−グルタマート、G、A、またはSであり;
11位のXは、Q、E、g−グルタマート、G、A、またはSであり;
15位のXは、Q、E、g−グルタマート、G、A、またはSであり;
18位のXは、M、T、K、E、g−グルタマート、G、A、またはSであり;
22位のXは、Q、E、g−グルタマート、G、A、またはSであり;
23位のXは、Q、E、g−グルタマート、G、A、またはSであり;かつ
9、12、13、16、17、20、及び21位のJは、これらの位置のアミノ酸のうちの1つが非疎水性アミノ酸またはAであることを除いては、L、V、I、及びFから選択される疎水性アミノ酸であり、前記ペプチドは、植物組織に適用されたときに、活性な植物反応を誘導するが過敏感反応を誘導しない。好ましくは、9、12、13、16、17、20、及び21位の残基の1〜4個、3個以下、2個以下、または正確には1個が、非疎水性アミノ酸またはAである。一実施形態では、J残基の1個以下がAであり、好ましくは、A残基は、9、12、13、16、20、及び21位のうちの1つにあり;残りのJ残基の1または2個が、任意選択で非疎水性アミノ酸であり、かつ他の全てのJ残基が、L、I、V、またはFである。特定の実施形態では、J残基の1個以下がAであり、好ましくは、A残基は、9、12、13、16、20、及び21位のうちの1つにあり;他の全てのJ残基が、L、I、V、またはFである。
(i)3位のXは、N、D、またはイソDであり;
6位のXが、Q、E、g−グルタマート、G、A、またはSであり;
8位のXが、N、D、またはイソDであり;
15位のXが、任意選択であり、かつ任意のアミノ酸であり得;
18位のXが、M、E、g−グルタマート、G、A、S、T、またはKであり;
22位のXが、任意選択であり、かつQ、E、g−グルタマート、G、A、またはSであり得;かつ
9、12、13、16、17、20、及び21位のJが、これらの位置のアミノ酸の少なくとも1つが非疎水性アミノ酸であることを除いては、L、V、I、F、及びAから選択される疎水性アミノ酸である、
(SEQ ID NO:5、修飾P15b/P20コンセンサス)、あるいは
(ii)7位のXが、任意選択であり、かつ任意のアミノ酸であり得;
10位のXが、M、E、g−グルタマート、G、A、S、T、またはKであり;
14位のXが、任意選択であり、かつQ、E、g−グルタマート、G、A、またはSであり得;かつ
1、4、5、8、9、12、及び13位のJが、これらの位置のアミノ酸のうちの少なくとも1つが非疎水性アミノ酸またはAであることを除いては、L、V、I、及びFから選択される疎水性アミノ酸である、
(SEQ ID NO:6、修飾P15/20minコンセンサス)
のアミノ酸配列を有する単離されたペプチドに関し、かつ
前記ペプチドは、植物組織に適用されたときに、活性な植物反応を誘導するが過敏感反応を誘導しない。好ましくは、SEQ ID NO:5の9、12、13、16、17、20、及び21位の残基の1〜4個、3個以下、2個以下、または正確には1個が、非疎水性アミノ酸またはAであり;SEQ ID NO:6の1、4、5、8、9、12、及び13位の残基の1〜4個、3個以下、2個以下、または正確には1個が、非疎水性アミノ酸またはAである。一実施形態では、J残基の1個以下がAであり、好ましくは、A残基は、SEQ ID NO:5の9、12、13、16、20、及び21位、またはSEQ ID NO:6の1、4、5、8、12、及び13位のうちの1つにあり;残りのJ残基の1または2個が、任意選択で非疎水性アミノ酸であり、かつ他の全てのJ残基が、L、I、V、またはFである。特定の実施形態では、J残基の1個以下がAであり、好ましくは、A残基は、SEQ ID NO:5の9、12、13、16、20、及び21位、またはSEQ ID NO:6の1、4、5、8、12、及び13位のうちの1つにあり;他の全てのJ残基が、L、I、V、またはFである。
(SEQ ID NO:7、修飾P6/6aコンセンサス)のアミノ酸配列を有する単離されたペプチドに関し、ここで、
6位のXは、Q、E、g−グルタマート、G、A、またはSであり;
9位のXは、M、E、g−グルタマート、G、A、S、T、またはKであり;
10位のXは、HまたはNであり;
14位のXは、E、g−グルタマート、D、またはイソDであり;
17位のXは、Q、E、g−グルタマート、G、A、またはSであり;
19位のXは、Q、E、g−グルタマート、G、A、またはSであり;かつ
4、7、8、11、12、15、及び16位のJは、これらの位置のアミノ酸のうちの少なくとも1つが非疎水性アミノ酸またはAであることを除いては、L、V、I、M、及びFから選択される疎水性アミノ酸であり、
ここで、前記ペプチドは、植物組織に適用されたときに、活性な植物反応を誘導するが過敏感反応を誘導しない。好ましくは、4、7、8、11、12、15、及び16位の残基の1〜4個、3個以下、2個以下、または正確には1個が、非疎水性アミノ酸またはAである。一実施形態では、J残基の1個以下がAであり、好ましくは、A残基は、SEQ ID NO:7の4、7、8、11、15、及び16位のうちの1つにあり;残りのJ残基の1または2個が、任意選択で非疎水性アミノ酸であり、かつ他の全てのJ残基が、L、I、V、M、またはFである。特定の実施形態では、J残基の1個以下がAであり、好ましくは、A残基は、SEQ ID NO:7の4、7、8、11、15、及び16位のうちの1つにあり;他の全てのJ残基が、L、I、V、M、またはFである。
(i)1位のXが、Q、N、D、E、g−グルタマート、イソD、またはSであり得;
2位のXが、D、E、g−グルタマート、イソDであり得;
3位のXが、P、D、E、イソD、またはg−グルタマートであり得;
4位のXが、M、A、S、D、E、イソD、またはg−グルタマートであり得
5位のXが、Q、E、またはg−グルタマートであり得;
6位のXが、A、E、またはg−グルタマートであり得;
8位のXが、M、L、E、Q、D、N、G、A、S、イソD、またはg−グルタマートであり得;
9位のXが、Q、N、E、D、G、A、S、イソD、またはg−グルタマートであり得;
12位のXが、Q、N、E、D、G、A、S、イソD、またはg−グルタマートであり得;
13位のXが、Q、N、E、D、G、A、S、イソD、またはg−グルタマートであり得;
16位のXが、K、Q、N、E、D、R、G、A、またはSであり得;かつ
7、10、11、14、15、17、及び18位のJが、これらの位置のアミノ酸の少なくとも1つが非疎水性アミノ酸またはAであることを除いては、L、V、I、及びFから選択される疎水性アミノ酸である、
(SEQ ID NO:8、修飾P14dコンセンサス)、あるいは
(ii)2位のXが、M、L、E、Q、D、N、G、A、S、イソD、またはg−グルタマートであり得;
3位のXが、Q、N、E、D、G、A、S、イソD、またはg−グルタマートであり得;
6位のXが、Q、N、E、D、G、A、S、イソD、またはg−グルタマートであり得;
7位のXが、Q、N、E、D、G、A、S、イソD、またはg−グルタマートであり得;
10位のXが、K、Q、N、E、D、R、G、A、またはSであり得;かつ
1、4、5、8、9、11、及び12位のJが、これらの位置のアミノ酸のうちの少なくとも1つが非疎水性アミノ酸またはAであることを除いては、L、V、I、及びFから選択される疎水性アミノ酸である、
(SEQ ID NO:9、修飾P14d minコンセンサス)
のアミノ酸配列を有するペプチドに関し、ここで、前記ペプチドは、植物組織に適用されたときに、活性な植物反応を誘導するが過敏感反応を誘導しない。好ましくは、SEQ ID NO:8の7、10、11、14、15、17、及び18位の残基の1〜4個、3個以下、2個以下、または正確には1個が、非疎水性アミノ酸またはAであり;SEQ ID NO:9の1、4、5、8、9、11、及び12位の残基の1〜4個、3個以下、2個以下、または正確には1個が、非疎水性アミノ酸またはAである。一実施形態では、J残基の1個以下がAであり、好ましくは、A残基は、SEQ ID NO:8の7、10、11、14、17、及び18位またはSEQ ID NO:9の1、4、5、8、11、及び12位のうちの1つにあり;残りのJ残基の1または2個が、任意選択で非疎水性アミノ酸であり、かつ他の全てのJ残基が、L、I、V、またはFである。特定の実施形態では、J残基の1個以下がAであり、好ましくは、A残基は、SEQ ID NO:8の7、10、11、14、17、及び18位またはSEQ ID NO:9の1、4、5、8、11、及び12位のうちの1つにあり;他の全てのJ残基が、L、I、V、またはFである。
(i)2位のXが、Q、N、E、g−グルタマート、D、イソD、T、S、A、またはGであり得;
3位のXが、K、Q、N、E、g−グルタマート、D、イソD、T、S、A、またはGであり得;
6位のXが、K、Q、N、E、g−グルタマート、D、イソD、T、S、A、またはGであり得;
9位のXが、E、g−グルタマート、D、イソD、Q、N、T、S、A、またはGであり得;
10位のXは、A、G、S、T、E、g−グルタマート、D、イソD、Q、またはNであり得;かつ
1、4、5、7、8、10、及び11位のJが、これらの位置のアミノ酸のうちの少なくとも1つが非疎水性アミノ酸またはAであることを除いては、L、V、I、F、及びMから選択される疎水性アミノ酸である、
(SEQ ID NO:10、修飾P25コンセンサス)、あるいは
(ii)2位のXが、T、S、A、G、D、イソD、E、g−グルタマート、Q、またはNであり得;
3位のXが、G、T、S、A、D、イソD、E、g−グルタマート、Q、またはNであり得;
6位のXが、Q、N、E、g−グルタマート、D、イソD、T、S、A、またはGであり得;
7位のXが、K、Q、N、E、g−グルタマート、D、イソD、T、S、A、またはGであり得;
10位のXが、K、Q、N、E、g−グルタマート、D、イソD、T、S、A、またはGであり得;
13位のXが、E、g−グルタマート、D、イソD、Q、N、T、S、A、またはGであり得;
14位のXが、A、G、S、T、E、g−グルタマート、D、イソD、Q、またはNであり得;
1、4、5、8、9、11、12、及び15位のJが、これらの位置のアミノ酸のうちの少なくとも1つが非疎水性アミノ酸またはAであることを除いては、L、V、I、F、及びMから選択される疎水性アミノ酸であり;かつ
16位のJが、任意選択であり、L、V、I、及びFから選択される疎水性アミノ酸である、
(SEQ ID NO:11、修飾P25コンセンサス)
のアミノ酸配列を有するペプチドに関し、ここで、前記ペプチドは、植物組織に適用されたときに、活性な植物反応を誘導するが過敏感反応を誘導しない。好ましくは、SEQ ID NO:10の1、4、5、7、8、10、及び11位の残基の1〜4個、3個以下、2個以下、または正確には1個が、非疎水性アミノ酸であり、SEQ ID NO:11の1、4、5、8、9、11、12、15、及び16位の残基の1〜4個、3個以下、2個以下、または正確には1個が、非疎水性アミノ酸である。一実施形態では、J残基の1個以下がAであり、好ましくは、A残基は、SEQ ID NO:10の1、4、5、7、10、及び11位、またはSEQ ID NO:11の1、4、5、8、11、12、15、及び16位のうちの1つにあり;残りのJ残基の1または2個が、任意選択で非疎水性アミノ酸であり、かつ他の全てのJ残基が、L、I、V、またはFである。特定の実施形態では、J残基の1個以下がAであり、好ましくは、A残基は、SEQ ID NO:10の1、4、5、7、10、及び11位、またはSEQ ID NO:11の1、4、5、8、11、12、15、及び16位のうちの1つにあり;他の全てのJ残基が、L、I、V、またはFである。
(i)1位のXが、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはQ、S、E、g−グルタマート、A、T、G、D、イソD、N、K、またはRであり得;
2位のXが、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはQ、S、E、g−グルタマート、A、T、G、D、イソD、N、K、またはRであり得;
3位のXが、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはP、Q、S、E、g−グルタマート、A、T、G、D、イソD、N、K、またはRであり得;
4位のXが、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはI、Q、S、E、g−グルタマート、A、T、G、D、N、イソD、K、またはRであり得;
5位のXが、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはD、イソD、S、E、g−グルタマート、A、T、G、N、Q、K、またはRであり得;
6位のXが、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはR、Q、S、E、g−グルタマート、A、T、G、D、イソD、N、またはKであり得;
7位のXが、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはQ、S、E、g−グルタマート、A、T、G、D、イソD、N、K、またはRであり得;
8位のXが、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはT、Q、S、E、g−グルタマート、A、G、D、イソD、N、K、またはRであり得;
9位のXが、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはI、Q、S、E、g−グルタマート、A、T、G、D、イソD、N、K、またはRであり得;
10位のXが、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはE、g−グルタマート、Q、S、A、T、G、D、イソD、N、K、またはRであり得;
11位のXが、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはQ、S、E、g−グルタマート、A、T、G、D、イソD、N、K、またはRであり得;
13位のXが、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはA、S、T、G、D、イソD、E、g−グルタマート、Q、N、K、またはRであり得;
14位のXが、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはQ、A、S、T、G、D、イソD、E、g−グルタマート、N、K、またはRであり得;
17位のXが、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはA、S、T、G、D、イソD、E、g−グルタマート、Q、N、K、またはRであり得;
18位のXが、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはQ、A、S、T、G、D、イソD、E、g−グルタマート、N、K、またはRであり得;
21位のXが、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはK、A、S、T、G、D、イソD、E、g−グルタマート、Q、N、またはRであり得;
22位のXが、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはS、A、T、G、D、イソD、E、g−グルタマート、Q、N、K、またはRであり得;
25位のXが、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはS、A、T、G、D、イソD、E、g−グルタマート、Q、N、K、またはRであり得;
26位のXが、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはP、S、A、T、G、D、イソD、E、g−グルタマート、Q、N、K、またはRであり得;
27位のXが、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはQ、S、A、T、G、D、イソD、E、g−グルタマート、N、K、またはRであり得;かつ
12、15、16、19、20、23、及び24位のJが、これらの位置のアミノ酸のうちの少なくとも1つが非疎水性アミノ酸またはAであることを除いては、L、V、I、F、及びMから選択される疎水性アミノ酸である、
(SEQ ID NO:12、修飾P17/18)、
あるいは
(ii)2位のXが、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはA、S、T、G、D、イソD、E、g−グルタマート、Q、N、K、またはRであり得;
3位のXが、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはQ、A、S、T、G、D、イソD、E、g−グルタマート、N、K、またはRであり得;
6位のXが、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはA、S、T、G、D、イソD、E、g−グルタマート、Q、N、K、またはRであり得;
7位のXが、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはQ、A、S、T、G、D、イソD、E、g−グルタマート、N、K、またはRであり得;
10位のXが、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはK、A、S、T、G、D、イソD、E、g−グルタマート、Q、N、またはRであり得;
11位のXが、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはS、A、T、G、D、イソD、E、g−グルタマート、Q、N、K、またはRであり得;かつ
1、4、5、8、9、12、及び13位のJが、これらの位置のアミノ酸のうちの少なくとも1つが非疎水性アミノ酸またはAであることを除いては、L、V、I、F、及びMから選択される疎水性アミノ酸である、
(SEQ ID NO:13、修飾P17/18minコンセンサス)
のアミノ酸配列を有するに関し、ここで、前記ペプチドは、植物組織に適用されたときに、活性な植物反応を誘導するが過敏感反応を誘導しない。好ましくは、SEQ ID NO:12の12、15、16、19、20、23、及び24位の残基の1〜4個、3個以下、2個以下、または正確には1個が、非疎水性アミノ酸またはAであり;SEQ ID NO:13の1、4、5、8、9、12、及び13の残基の1〜4個、3個以下、2個以下、または正確には1個が、非疎水性アミノ酸またはAである。一実施形態では、J残基の1個以下がAであり、好ましくは、A残基は、SEQ ID NO:12の12、15、16、19、23、及び24位、またはSEQ ID NO:13の1、4、5、8、12、及び13位のうちの1つにあり;残りのJ残基の1または2個が、任意選択で非疎水性アミノ酸であり、かつ他の全てのJ残基が、L、I、V、F、またはMである。特定の実施形態では、J残基の1個以下がAであり、好ましくは、A残基は、SEQ ID NO:12の12、15、16、19、23、及び24位、またはSEQ ID NO:13の1、4、5、8、12、及び13位のうちの1つにあり;他の全てのJ残基が、L、I、V、F、またはMである。
表13では、ペプチドは、イタリック活字体によって示されている溶解性タグSEEEEEを含む。表13に示されている配列を含むがこの特定の溶解性タグを欠失する(または異なる溶解性タグを有する)ペプチドも、本明細書において企図される。
(SEQ ID NO:14、修飾P19コンセンサス)のアミノ酸配列を有するペプチドに関し、ここで、
1位のXは、任意選択であり、かつL、I、V、F、またはMであり得;
3位のXは、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはK、A、S、T、G、D、イソD、E、g−グルタマート、Q、N、またはRであり得;
4位のXは、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはA、S、T、G、D、イソD、E、g−グルタマート、Q、N、K、またはRであり得;
7位のXは、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはK、A、S、T、G、D、イソD、E、g−グルタマート、Q、N、またはRであり得;
10位のXは、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはA、S、T、G、D、イソD、E、g−グルタマート、Q、N、K、またはRであり得;
11位のXは、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはR、A、S、T、G、D、イソD、E、g−グルタマート、Q、N、またはKであり得;かつ
2、5、6、8、9、12、及び13位のJは、これらの位置のアミノ酸のうちの少なくとも1つが非疎水性アミノ酸またはAであることを除いては、L、V、I、F、及びMから選択される疎水性アミノ酸であり、
ここで、前記ペプチドは、植物組織に適用されたときに、活性な植物反応を誘導するが過敏感反応を誘導しない。好ましくは、2、5、6、8、9、12、及び13位の残基の1〜4個、3個以下、2個以下、または正確には1個が、非疎水性アミノ酸である。一実施形態では、J残基の1個以下がAであり、好ましくは、A残基は、SEQ ID NO:14の2、5、6、8、12、及び13位のうちの1つにあり;残りのJ残基の1または2個が、任意選択で非疎水性アミノ酸であり、かつ他の全てのJ残基が、L、I、V、F、またはMである。特定の実施形態では、J残基の1個以下がAであり、好ましくは、A残基は、SEQ ID NO:14の2、5、6、8、12、及び13位のうちの1つにあり;他の全てのJ残基が、L、I、V、F、またはMである。
表14では、ペプチドは、イタリック活字体によって示されている溶解性タグSEEEEEを含む。表14に示されている配列を含むがこの特定の溶解性タグを欠失する(または異なる溶解性タグを有する)ペプチドも、本明細書において企図される。
(SEQ ID NO:126、P3ミニマム)のアミノ酸配列を含む単離されたペプチドに関し、ここで、
3位のXは、任意の親水性アミノ酸、好ましくはK、A、S、T、G、D、イソD、E、g−グルタマート、Q、N、またはRであり;
6位のXは、任意の親水性アミノ酸、好ましくはK、A、S、T、G、D、イソD、E、g−グルタマート、Q、N、またはRであり;
7位のXは、任意の親水性アミノ酸、好ましくはK、A、S、T、G、D、イソD、E、g−グルタマート、Q、N、またはRであり;かつ
Z1及びZ2の一方が存在し、ただし好ましくは両方ではなく、Z1はLXX−を含み、ここで各Xは、親水性アミノ酸、好ましくはK、A、S、T、G、D、イソD、E、g−グルタマート、Q、N、またはRであり、かつ、Z2は−XXLFを含み、ここで各Xは親水性アミノ酸、好ましくはK、A、S、T、G、D、イソD、E、g−グルタマート、Q、N、またはRであり、
ここで、前記ペプチドは、植物組織に適用されたときに、活性な植物反応を誘導するが過敏感反応を誘導しない。
表15では、ペプチドは、イタリック活字体によって示されている溶解性タグSEEE、SEEEE、及びSEEEEEEを含む。表15に示されている配列を含むがこの特定の溶解性タグを欠失する(または異なる溶解性タグを有する)ペプチドも、本明細書において企図される。
のアミノ酸配列を有する単離されたペプチドに関し、ここで、前記ペプチドは、システイン及びメチオニンを含まず;2、3、6、7位の各Xは、任意のアミノ酸であり、かつ前記ペプチドは、植物組織に適用されたときに、活性な植物反応を誘導するが過敏感反応を誘導しない。
のアミノ酸配列を含まず、ここで、2、3、6、7、10、11位の各Xは、任意のアミノ酸である。
表16では、ペプチドは、イタリック活字体によって示されている溶解性タグSEEEE及びSEEEEEを含む。表15に示されている配列を含むがこの特定の溶解性タグを欠失する(または異なる溶解性タグを有する)ペプチドも、本明細書において企図される。
その全体が参照によって本明細書に組み込まれるWei、Science 257:85−88(1992)において記載されているとおりに、タバコにおけるHRを試験した。簡単には、ペプチドを水溶液中に500μg/mlの濃度で溶解した。等体積の水を用いて、4回の系列希釈を行って、500、250、125、62.5、31.25μg/mlペプチド溶液でペプチドサンプルを得た。ニコチアナ・タバカム(Nicotiana tabacum)栽培品種キサンティ(xanthi)植物を5〜7週齢(開花前)で使用した。葉を、中央部の葉のパネルで、つまようじを用いて軽く穿刺した。次いで、ペプチド溶液を、無針シリンジを介して創傷部に注入して、そのパネルに満たした。各ペプチドサンプルを、2つの異なる植物の葉に注入した。葉を観察し、続いての48時間にわたって、プログラム細胞死の典型的な病変である萎れ及び褐変についてスコアリングした。
過酸化水素に関する鉄−キシレノールオレンジ錯体アッセイ法(Gay et al.,Analytical Biochemistry 273:149−55(1999)、その全体が参照によって本明細書に組み込まれる)を使用して、植物の葉組織による過酸化物産生を測定した。簡単には、試薬Aを、水によって1mLの総体積で、10mgの硫酸第一鉄アンモニウムを133uLの硫酸と混合することによって調製した。試薬Bを、80mlの水中、2gのソルビトールを9.34mgのキシレノールオレンジと混合することによって調製した。1M塩酸を、溶液が黄色に変わるまでゆっくりと添加した。次いで、溶液を100mLの総体積まで水によって希釈し、暗色瓶において4℃で保存した。
シュート(地上)及び根(地下)への成長資源の分配に対する生物学的効果について、ペプチドを試験した。脱イオン水100mlの総体積で、ペプチドを0.2、2、または5μg/mlで溶解した。次いで、トウモロコシまたはダイズ種子をそのペプチド溶液に1時間にわたって浸漬した。未処理対照(UTC)植物を脱イオン水に浸漬した。底部に十字のマークを入れ、その底部を同等の四半分に分割して、透明なプラスチック製300ml飲料用カップ(Solo(登録商標)、Dart Container Corporation)を植付けのために準備した。次いで、そのカップに、1/4インチまでふるいにかけしたSunshine Mix #1土壌(SunGro Horticulture)を充填した。その土壌に水100mlを加えた。次いで、土壌の上部に種子を軽く押し込むことによって、処理した種子を植え付けた。次いで、種子を追加の粗い土壌50mlで覆った。種子を発芽させ、12〜14日間にわたって成長させた。
ダイズ種子(または示したトウモロコシ種子)を温室施設のフラット(flat)内で、セル1つ当たり種子2つでフラットに植え付けた。その種子を発芽させ、小さい方の植物を摘み取り、セル1つ当たり1つの植物を残した。第1の本葉が完全に開き、かつ第2の葉が開き始めたら、植物を最初に高さについて測定した。これを、最も高い葉を上に伸ばし、土壌までの距離を測定することによって行った。ペプチドを、指示濃度(下記表21)で水に溶解した。次いで、液体が葉から滴下するまで、広く入手可能なスプレーボトルを使用して葉面散布することで、植物を処理した。植物14個のフラット6個のそれぞれを条件ごとに処理した(ペプチドまたは対照)。表記した未処理の対照植物を水でスプレーした。植物を14日間にわたって成長させた。植物の高さを再び測定し、元の高さと比較して、成長を定量化した。最後に、シュート(全ての地上部材料)を取り除くことによって植物を採取した。いくつかの実験では、これを採取の際に秤量して、新鮮質量(水の重量を含む)を決定した。次いで、シュートを70℃で72時間にわたって乾燥させ、乾燥生物量を決定するために秤量した。この方法は、上記の実施例3と同様の尺度(成長)を使用しているが、処理方法は異なる(種子浸漬対葉面散布)。結果として、実験結果は不定になる場合がある。
タバコにおいて、ペプチドをタバコモザイクウイルス(TMV)に対する抵抗性の誘導について試験した。簡単には、1群当たり3つの6〜8週齢のタバコ植物を選択した(サンプル及び対照)。植物の一番下の葉を覆い、植物に、水(陰性対照)、ペプチド、またはプロアクト(Proact)(陽性対照)の溶液を噴霧した。葉が十分に湿って、葉からの液体の滴下が示されるまで、スプレーを適用した。次いで、植物を乾燥させ、葉の覆いを外した。
Claims (192)
- 100個未満のアミノ酸長であるかまたは12〜50個のアミノ酸長である、請求項1に記載の単離されたペプチド。
- (i)水または水溶液に溶解された場合に安定していること、(ii)殺生物剤を含有する水性緩衝液に溶解された場合に、化学的分解に対して抵抗性を有すること、(iii)水中または水溶液中約0.1%超の溶解度
のうちの1つまたは複数を特徴とする、請求項1に記載の単離されたペプチド。 - 1、5、6、10、11、15、及び16位のJの2個以下が非疎水性である、請求項1に記載の単離されたペプチド。
- 1、5、6、10、11、15、及び16位のJの1個以下が非疎水性である、請求項1に記載の単離されたペプチド。
- 2及び3位のXの1個が存在しないか、7及び8位のXの1個が存在しないか、または2及び3位のXの1個と7及び8位のXの1個の両方が存在しない、請求項1に記載の単離されたペプチド。
- 2、3、7、及び8位の各Xが存在する、請求項1に記載の単離されたペプチド。
- 12位、13位、または両方の位置のXが存在しない、請求項1または7に記載の単離されたペプチド。
- 12位のXが存在する、請求項1または8に記載の単離されたペプチド。
- 12及び13位のXが存在する、請求項1に記載の単離されたペプチド。
- 2、3、7、8、及び12位の各Xが、存在する場合には、G、A、S、T、D、イソD、E、g−グルタマート、Q、N、K、Rからなる群から選択され;かつ
4、9、及び13位の各Xが、G、A、S、T、D、イソD、E、g−グルタマート、Q、N、K、Rからなる群から選択される、請求項1に記載の単離されたペプチド。 - 前記ペプチドによって誘導された前記活性な植物反応が、過酸化物誘導、成長の増進、病原体抵抗、害虫抵抗、及び生物的または非生物的ストレス抵抗からなる群から選択される、請求項1に記載の単離されたペプチド。
- SEQ ID NO:19〜46のうちの1つのアミノ酸配列を含む、請求項1に記載の単離されたペプチド。
- SEQ ID NO:19〜46のうちの1つのアミノ酸配列から本質的になる、請求項14に記載の単離されたペプチド。
- SEQ ID NO:19〜46のうちの1つのアミノ酸配列からなる、請求項14に記載の単離されたペプチド。
- SEQ ID NO:47〜68及び164のうちの1つのアミノ酸配列を含む、請求項1に記載の単離されたペプチド。
- SEQ ID NO:47〜68またはSEQ ID NO:164のうちの1つのアミノ酸配列から本質的になる、請求項17に記載の単離されたペプチド。
- SEQ ID NO:47〜68またはSEQ ID NO:164のうちの1つのアミノ酸配列からなる、請求項17に記載の単離されたペプチド。
- SEQ ID NO:69〜84のうちの1つのアミノ酸配列を含む、請求項1に記載の単離されたペプチド。
- SEQ ID NO:69〜84のうちの1つのアミノ酸配列から本質的になる、請求項20に記載の単離されたペプチド。
- SEQ ID NO:69〜84のうちの1つのアミノ酸配列からなる、請求項20に記載の単離されたペプチド。
- SEQ ID NO:85〜98のうちの1つのアミノ酸配列を含む、請求項1に記載の単離されたペプチド。
- SEQ ID NO:85〜98のうちの1つのアミノ酸配列から本質的になる、請求項23に記載の単離されたペプチド。
- SEQ ID NO:85〜98のうちの1つのアミノ酸配列からなる、請求項23に記載の単離されたペプチド。
- SEQ ID NO:99〜112のうちの1つのアミノ酸配列を含む、請求項1に記載の単離されたペプチド。
- SEQ ID NO:99〜112のうちの1つのアミノ酸配列から本質的になる、請求項26に記載の単離されたペプチド。
- SEQ ID NO:99〜112のうちの1つのアミノ酸配列からなる、請求項26に記載の単離されたペプチド。
- SEQ ID NO:113、114、117〜123、127、133〜138、140〜142、144、145、148〜150、及び153〜155のうちの1つのアミノ配列を含む、単離されたペプチド。
- SEQ ID NO:113、114、117〜123、127、133〜138、140〜142、144、145、148〜150、及び153〜155のうちの1つのアミノ酸配列から本質的になる、請求項29に記載の単離されたペプチド。
- SEQ ID NO:113、114、117〜123、127、133〜138、140〜142、144、145、148〜150、及び153〜155のうちの1つのアミノ酸配列からなる、請求項29に記載の単離されたペプチド。
- (SEQ ID NO:2、修飾P1/P4コンセンサス)のアミノ酸配列を含む単離されたペプチドであって、ここで、
1位のXが、任意選択であり、かつS、N、D、イソD、G、A、またはSであり得;
2位のXが、任意選択であり、かつQ、E、g−グルタマート、G、A、またはSであり得;
8位のXが、Q、E、g−グルタマート、G、A、またはSであり;
9位のXが、M、L、I、F、もしくはV、または非疎水性アミノ酸であり;
10位のXが、任意選択であり、かつDまたはイソDであり得;
11位のXが、Q、E、g−グルタマート、G、A、またはSであり;
12位のXが、M、L、I、もしくはF、または非疎水性アミノ酸であり;
13位のXが、M、L、もしくはI、または非疎水性アミノ酸であり;
14位のXが、任意選択であり、かつ任意の親水性アミノ酸であり得;
15位のXが、Q、E、g−グルタマート、G、A、S、K、またはIであり;
16位のXが、M、L、I、V、もしくはF、または非疎水性アミノ酸であり;
17位のXが、M、L、I、A、もしくはV、または非疎水性アミノ酸であり;
18位のXが、Q、E、g−グルタマート、G、A、S、M、T、またはKであり;
19位のXが、A、D、イソD、S、V、T、K、R、E、H、またはGであり;
20位のXが、M、L、またはIであり;
21位のXが、M、L、I、V、S、もしくはFであるか、またはセリン以外の非疎水性アミノ酸であり;
22位のXが、Q、E、g−グルタマート、G、A、Sであり;
23位のXが、P、Q、E、g−グルタマート、G、A、またはSであり;かつ
9、12、13、16、17、及び20位の残基の少なくとも1つが、非疎水性アミノ酸であるか、または21位の残基が、セリン以外の非疎水性アミノ酸であり、かつ
前記ペプチドが、植物組織に適用されたときに、活性な植物反応を誘導するが過敏感反応を誘導しない、
前記単離されたペプチド。 - (SEQ ID NO:3 修飾P4コンセンサス)のアミノ酸配列を含む単離されたペプチドであって、ここで、
2位のXが、Q、E、g−グルタマート、G、A、またはSであり;
8位のXが、Q、E、g−グルタマート、G、A、またはSであり;
9位のXが、M、S、L、A、I、V、もしくはFであるか、またはセリン以外の非疎水性アミノ酸であり;
11位のXが、Q、E、g−グルタマート、G、A、またはSであり;
12位のXが、L、I、もしくはF、または非疎水性アミノ酸であり;
13位のXが、L、A、I、V、もしくはF、または非疎水性アミノ酸であり;
14位のXが、任意の親水性アミノ酸であり;
15位のXが、Q、E、g−グルタマート、G、A、S、K、またはIであり;
16位のXが、L、A、I、V、M、もしくはF、または非疎水性アミノ酸であり;
17位のXが、M、I、S、もしくはFであるか、またはセリン以外の非疎水性アミノ酸であり;
18位のXが、Q、E、g−グルタマート、G、A、またはSであり;
20位のXが、M、L、I、V、もしくはF、または非疎水性アミノ酸であり;
21位のXが、M、L、もしくはF、または非疎水性アミノ酸であり;かつ
22位のXが、Q、E、g−グルタマート、G、A、またはSであり、
9、12、13、16、20、及び21位の残基の1個が、非疎水性アミノ酸もしくはAであるか、または17位の残基が、セリン以外の非疎水性アミノ酸であり、かつ
前記ペプチドが、植物組織に適用されたときに、活性な植物反応を誘導するが過敏感反応を誘導しない、
前記単離されたペプチド。 - SEQ ID NO:48〜56、58、59、61、及び161〜163のうちの1つのアミノ酸配列を含む、請求項33に記載の単離されたペプチド。
- SEQ ID NO:48〜56、58、59、61、及び161〜163のうちの1つのアミノ酸配列から本質的になる、請求項34に記載の単離されたペプチド。
- SEQ ID NO:48〜56、58、59、61、及び161〜163のうちの1つのアミノ酸配列からなる、請求項34に記載の単離されたペプチド。
- (SEQ ID NO:4、修飾P1コンセンサス)のアミノ酸配列を含む単離されたペプチドであって、ここで、
1位のXが、N、D、イソD、G、A、またはSであり;
2位のXが、Q、E、g−グルタマート、G、A、またはSであり;
8位のXが、Q、E、g−グルタマート、G、A、またはSであり;
11位のXが、Q、E、g−グルタマート、G、A、またはSであり;
15位のXが、Q、E、g−グルタマート、G、A、またはSであり;
18位のXが、M、T、K、E、g−グルタマート、G、A、またはSであり;
22位のXが、Q、E、g−グルタマート、G、A、またはSであり;
23位のXが、Q、E、g−グルタマート、G、A、またはSであり;
9、12、13、16、17、20、及び21位のJが、これらの位置のアミノ酸のうちの1つが非疎水性アミノ酸またはAであることを除いては、L、V、I、及びFから選択される疎水性アミノ酸であり、
前記ペプチドが、植物組織に適用されたときに、活性な植物反応を誘導するが過敏感反応を誘導しない、
前記単離されたペプチド。 - SEQ ID NO:164及び166〜179のうちの1つのアミノ酸配列を含む、請求項37に記載の単離されたペプチド。
- SEQ ID NO:164及び166〜179のうちの1つのアミノ酸配列から本質的になる、請求項37に記載の単離されたペプチド。
- SEQ ID NO:164及び166〜179のうちの1つのアミノ酸配列からなる、請求項37に記載の単離されたペプチド。
- (i)3位のXが、N、D、またはイソDであり;
6位のXが、Q、E、g−グルタマート、G、A、またはSであり;
8位のXが、N、D、またはイソDであり;
15位のXが、任意選択であり、かつ任意のアミノ酸であり得;
18位のXが、M、E、g−グルタマート、G、A、S、T、またはKであり;
22位のXが、任意選択であり、かつQ、E、g−グルタマート、G、A、またはSであり得;かつ
9、12、13、16、17、20、及び21位のJが、これらの位置のアミノ酸のうちの少なくとも1つが非疎水性アミノ酸またはAであることを除いては、L、V、I、及びFから選択される疎水性アミノ酸である、
(SEQ ID NO:5、修飾P15b/P20コンセンサス)、
あるいは
(ii)7位のXが、任意選択であり、かつ任意のアミノ酸であり得;
10位のXが、M、E、g−グルタマート、G、A、S、T、またはKであり;
14位のXが、任意選択であり、かつQ、E、g−グルタマート、G、A、またはSであり得;かつ
1、4、5、8、9、12、及び13位のJが、これらの位置のアミノ酸のうちの少なくとも1つが非疎水性アミノ酸またはAであることを除いては、L、V、I、及びFから選択される疎水性アミノ酸である、
(SEQ ID NO:6、修飾P15/20minコンセンサス)
のアミノ酸配列を含み、かつ
植物組織に適用されたときに、活性な植物反応を誘導するが過敏感反応を誘導しない、単離されたペプチド。 - SEQ ID NO:180〜193のうちの1つのアミノ酸配列を含む、請求項41に記載の単離されたペプチド。
- SEQ ID NO:180〜193のうちの1つのアミノ酸配列から本質的になる、請求項42に記載の単離されたペプチド。
- SEQ ID NO:180〜193のうちの1つのアミノ酸配列からなる、請求項42に記載の単離されたペプチド。
- (SEQ ID NO:7、修飾P6/6aコンセンサス)のアミノ酸配列を含む単離されたペプチドであって、ここで、
6位のXが、Q、E、g−グルタマート、G、A、またはSであり;
9位のXが、M、E、g−グルタマート、G、A、S、T、またはKであり;
10位のXが、HまたはNであり;
14位のXが、E、g−グルタマート、D、またはイソDであり;
17位のXが、Q、E、g−グルタマート、G、A、またはSであり;
19位のXが、Q、E、g−グルタマート、G、A、またはSであり;かつ
4、7、8、11、12、15、及び16位のJが、これらの位置のアミノ酸のうちの少なくとも1つが非疎水性アミノ酸またはAであることを除いては、L、V、I、M、及びFから選択される疎水性アミノ酸であり、
前記ペプチドが、植物組織に適用されたときに、活性な植物反応を誘導するが過敏感反応を誘導しない、
前記単離されたペプチド。 - SEQ ID NO:194〜207のうちの1つのアミノ酸配列を含む、請求項45に記載の単離されたペプチド。
- SEQ ID NO:194〜207のうちの1つのアミノ酸配列から本質的になる、請求項45に記載の単離されたペプチド。
- SEQ ID NO:194〜207のうちの1つのアミノ酸配列からなる、請求項45に記載の単離されたペプチド。
- (i)1位のXが、Q、N、D、E、g−グルタマート、イソD、またはSであり得;
2位のXが、D、E、g−グルタマート、イソDであり得;
3位のXが、P、D、E、イソD、またはg−グルタマートであり得;
4位のXが、M、A、S、D、E、イソD、またはg−グルタマートであり得;
5位のXが、Q、E、またはg−グルタマートであり得;
6位のXが、A、E、またはg−グルタマートであり得;
8位のXが、M、L、E、Q、D、N、G、A、S、イソD、またはg−グルタマートであり得;
9位のXが、Q、N、E、D、G、A、S、イソD、またはg−グルタマートであり得;
12位のXが、Q、N、E、D、G、A、S、イソD、またはg−グルタマートであり得;
13位のXが、Q、N、E、D、G、A、S、イソD、またはg−グルタマートであり得;
16位のXが、K、Q、N、E、D、R、G、A、またはSであり得;かつ
7、10、11、14、15、17、及び18位のJが、これらの位置のアミノ酸のうちの少なくとも1つが非疎水性アミノ酸またはAであることを除いては、L、V、I、及びFから選択される疎水性アミノ酸である、
(SEQ ID NO:8、修飾P14dコンセンサス)、あるいは
(ii)2位のXが、M、L、E、Q、D、N、G、A、S、イソD、またはg−グルタマートであり得;
3位のXが、Q、N、E、D、G、A、S、イソD、またはg−グルタマートであり得;
6位のXが、Q、N、E、D、G、A、S、イソD、またはg−グルタマートであり得;
7位のXが、Q、N、E、D、G、A、S、イソD、またはg−グルタマートであり得;
10位のXが、K、Q、N、E、D、R、G、A、またはSであり得;かつ
1、4、5、8、9、11、及び12位のJが、これらの位置のアミノ酸のうちの少なくとも1つが非疎水性アミノ酸またはAであることを除いては、L、V、I、及びFから選択される疎水性アミノ酸である、
(SEQ ID NO:9、修飾P14d minコンセンサス)
のアミノ酸配列を含み、
植物組織に適用されたときに、活性な植物反応を誘導するが過敏感反応を誘導しない、単離されたペプチド。 - SEQ ID NO:208〜221のうちの1つのアミノ酸配列を含む、請求項49に記載の単離されたペプチド。
- SEQ ID NO:208〜221のうちの1つのアミノ酸配列から本質的になる、請求項49に記載の単離されたペプチド。
- SEQ ID NO:208〜221のうちの1つのアミノ酸配列からなる、請求項49に記載の単離されたペプチド。
- (i)2位のXが、Q、N、E、g−グルタマート、D、イソD、T、S、A、またはGであり得;
3位のXが、K、Q、N、E、g−グルタマート、D、イソD、T、S、A、またはGであり得;
6位のXが、K、Q、N、E、g−グルタマート、D、イソD、T、S、A、またはGであり得;
9位のXが、E、g−グルタマート、D、イソD、Q、N、T、S、A、またはGであり得;
10位のXが、A、G、S、T、E、g−グルタマート、D、イソD、Q、またはNであり得;かつ
1、4、5、7、8、10、及び11位のJが、これらの位置のアミノ酸のうちの少なくとも1つが非疎水性アミノ酸またはAであることを除いては、L、V、I、F、及びMから選択される疎水性アミノ酸である、
(SEQ ID NO:10、修飾P25コンセンサス)、あるいは
(ii)2位のXが、T、S、A、G、D、イソD、E、g−グルタマート、Q、またはNであり得;
3位のXが、G、T、S、A、D、イソD、E、g−グルタマート、Q、またはNであり得;
6位のXが、Q、N、E、g−グルタマート、D、イソD、T、S、A、またはGであり得;
7位のXが、K、Q、N、E、g−グルタマート、D、イソD、T、S、A、またはGであり得;
10位のXが、K、Q、N、E、g−グルタマート、D、イソD、T、S、A、またはGであり得;
13位のXが、E、g−グルタマート、D、イソD、Q、N、T、S、A、またはGであり得;
14位のXが、A、G、S、T、E、g−グルタマート、D、イソD、Q、またはNであり得;
1、4、5、8、9、11、12、及び15位のJが、これらの位置のアミノ酸のうちの少なくとも1つが非疎水性アミノ酸またはAであることを除いては、L、V、I、F、及びMから選択される疎水性アミノ酸であり;かつ
16位のJが、任意選択であり、かつL、V、I、及びFから選択される疎水性アミノ酸である、
(SEQ ID NO:11、修飾P25コンセンサス)
のアミノ酸配列を含み、
植物組織に適用されたときに、活性な植物反応を誘導するが過敏感反応を誘導しない、単離されたペプチド。 - SEQ ID NO:222〜239のうちの1つのアミノ酸配列を含む、請求項53に記載の単離されたペプチド。
- SEQ ID NO:222〜239のうちの1つのアミノ酸配列から本質的になる、請求項53に記載の単離されたペプチド。
- SEQ ID NO:222〜239のうちの1つのアミノ酸配列から本質的になる、請求項53に記載の単離されたペプチド。
- (i)1位のXが、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはQ、S、E、g−グルタマート、A、T、G、D、イソD、N、K、またはRであり得;
2位のXが、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはQ、S、E、g−グルタマート、A、T、G、D、イソD、N、K、またはRであり得;
3位のXが、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはP、Q、S、E、g−グルタマート、A、T、G、D、イソD、N、K、またはRであり得;
4位のXが、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはI、Q、S、E、g−グルタマート、A、T、G、D、N、イソD、K、またはRであり得;
5位のXが、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはD、イソD、S、E、g−グルタマート、A、T、G、N、Q、K、またはRであり得;
6位のXが、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはR、Q、S、E、g−グルタマート、A、T、G、D、イソD、N、またはKであり得;
7位のXが、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはQ、S、E、g−グルタマート、A、T、G、D、イソD、N、K、またはRであり得;
8位のXが、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはT、Q、S、E、g−グルタマート、A、G、D、イソD、N、K、またはRであり得;
9位のXが、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはI、Q、S、E、g−グルタマート、A、T、G、D、イソD、N、K、またはRであり得;
10位のXが、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはE、g−グルタマート、Q、S、A、T、G、D、イソD、N、K、またはRであり得;
11位のXが、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはQ、S、E、g−グルタマート、A、T、G、D、イソD、N、K、またはRであり得;
13位のXが、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはA、S、T、G、D、イソD、E、g−グルタマート、Q、N、K、またはRであり得;
14位のXが、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはQ、A、S、T、G、D、イソD、E、g−グルタマート、N、K、またはRであり得;
17位のXが、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはA、S、T、G、D、イソD、E、g−グルタマート、Q、N、K、またはRであり得;
18位のXが、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはQ、A、S、T、G、D、イソD、E、g−グルタマート、N、K、またはRであり得;
21位のXが、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはK、A、S、T、G、D、イソD、E、g−グルタマート、Q、N、またはRであり得;
22位のXが、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはS、A、T、G、D、イソD、E、g−グルタマート、Q、N、K、またはRであり得;
25位のXが、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはS、A、T、G、D、イソD、E、g−グルタマート、Q、N、K、またはRであり得;
26位のXが、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはP、S、A、T、G、D、イソD、E、g−グルタマート、Q、N、K、またはRであり得;
27位のXが、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはQ、S、A、T、G、D、イソD、E、g−グルタマート、N、K、またはRであり得;かつ
12、15、16、19、20、23、及び24位のJが、これらの位置のアミノ酸のうちの少なくとも1つが非疎水性アミノ酸またはAであることを除いては、L、V、I、F、及びMから選択される疎水性アミノ酸である、
(SEQ ID NO:12、修飾P17/18)、
あるいは
(ii)2位のXが、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはA、S、T、G、D、イソD、E、g−グルタマート、Q、N、K、またはRであり得;
3位のXが、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはQ、A、S、T、G、D、イソD、E、g−グルタマート、N、K、またはRであり得;
6位のXが、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはA、S、T、G、D、イソD、E、g−グルタマート、Q、N、K、またはRであり得;
7位のXが、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはQ、A、S、T、G、D、イソD、E、g−グルタマート、N、K、またはRであり得;
10位のXが、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはK、A、S、T、G、D、イソD、E、g−グルタマート、Q、N、またはRであり得;
11位のXが、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはS、A、T、G、D、イソD、E、g−グルタマート、Q、N、K、またはRであり得;かつ
1、4、5、8、9、12、及び13位のJが、これらの位置のアミノ酸のうちの少なくとも1つが非疎水性アミノ酸またはAであることを除いては、L、V、I、F、及びMから選択される疎水性アミノ酸である、
(SEQ ID NO:13、修飾P17/18minコンセンサス)
のアミノ酸配列を含み、
植物組織に適用されたときに、活性な植物反応を誘導するが過敏感反応を誘導しない、単離されたペプチド。 - SEQ ID NO:12またはSEQ ID NO:13のアミノ酸配列から本質的になる、請求項57に記載の単離されたペプチド。
- SEQ ID NO:12またはSEQ ID NO:13のアミノ酸配列からなる、請求項57に記載の単離されたペプチド。
- (SEQ ID NO:14、修飾P19コンセンサス)のアミノ酸配列を含む単離されたペプチドであって、ここで、
1位のXが、任意選択であり、かつL、I、V、F、またはMであり得;
3位のXが、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはK、A、S、T、G、D、イソD、E、g−グルタマート、Q、N、またはRであり得;
4位のXが、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはA、S、T、G、D、イソD、E、g−グルタマート、Q、N、K、またはRであり得;
7位のXが、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはK、A、S、T、G、D、イソD、E、g−グルタマート、Q、N、またはRであり得;
10位のXが、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはA、S、T、G、D、イソD、E、g−グルタマート、Q、N、K、またはRであり得;
11位のXが、任意のアミノ酸、ただし、好ましくはR、A、S、T、G、D、イソD、E、g−グルタマート、Q、N、またはKであり得;かつ
2、5、6、8、9、12、及び13位のJが、これらの位置のアミノ酸のうちの少なくとも1つが非疎水性アミノ酸またはAであることを除いては、L、V、I、F、及びMから選択される疎水性アミノ酸であり、
前記ペプチドが、植物組織に適用されたときに、活性な植物反応を誘導するが過敏感反応を誘導しない、
前記単離されたペプチド。 - SEQ ID NO:14のアミノ酸配列から本質的になる、請求項60に記載の単離されたペプチド。
- SEQ ID NO:14のアミノ酸配列からなる、請求項60に記載の単離されたペプチド。
- 100個未満のアミノ酸長であるかまたは12〜50個のアミノ酸長である、請求項63に記載の単離されたペプチド。
- 2、3、6、及び7位の1つまたは複数におけるXが、非疎水性アミノ酸である、請求項63に記載の単離されたペプチド。
- 2、3、6、及び7位の各々におけるXが、非疎水性アミノ酸である、請求項63に記載の単離されたペプチド。
- 2、3、6、及び7位の各々におけるXが、G、A、S、T、D、イソD、E、g−グルタマート、Q、N、K、及びRからなる群から独立に選択される、請求項63に記載の単離されたペプチド。
- SEQ ID NO:115、124、128〜132、139、143、146、147、151、152、及び160のうちの1つのアミノ酸配列を含む、請求項63に記載の単離されたペプチド。
- SEQ ID NO:115、124、128〜132、139、143、146、147、151、152、及び160のうちの1つのアミノ酸配列から本質的になる、請求項63に記載の単離されたペプチド。
- SEQ ID NO:115、124、128〜132、139、143、146、147、151、152、及び160のうちの1つのアミノ酸配列からなる、請求項63に記載の単離されたペプチド。
- Z1が存在する、請求項72に記載の単離されたペプチド。
- Z2が存在する、請求項72に記載の単離されたペプチド。
- Z1またはZ2における各Xが、K、A、S、T、G、D、イソD、E、g−グルタマート、Q、N、及びRから独立に選択される、請求項73または74に記載の単離されたペプチド。
- 3、6、及び7位のXが、K、A、S、T、G、D、イソD、E、g−グルタマート、Q、N、及びRから独立に選択される、請求項72に記載の単離されたペプチド。
- 12〜50個のアミノ酸長である、請求項72に記載の単離されたペプチド。
- SEQ ID NO:156〜159のうちの1つのアミノ酸配列を含む、請求項72に記載の単離されたペプチド。
- SEQ ID NO:156〜159のうちの1つのアミノ酸配列から本質的になる、請求項63に記載の単離されたペプチド。
- SEQ ID NO:156〜159のうちの1つのアミノ酸配列からなる、請求項63に記載の単離されたペプチド。
- (i)水または水溶液に溶解された場合に安定していること、(ii)殺生物剤を含有する水性緩衝液に溶解された場合に、化学的分解に対して抵抗性を有すること、(iii)水中または水溶液中約0.1%超の溶解度
のうちの1つまたは複数を特徴とする、請求項32から80のいずれか一項に記載の単離されたペプチド。 - 前記ペプチドによって誘導された前記活性な植物反応が、過酸化物誘導、成長の増進、病原体抵抗、生物的または非生物的ストレス抵抗、及び生化学的シグナル伝達の改変からなる群から選択される、請求項32から80のいずれか一項に記載の単離されたペプチド。
- 少なくとも90%純粋である、請求項1から82のいずれか一項に記載の単離されたペプチド。
- ペプチド結合を介して前記アミノ酸配列にカップリングしている第2のアミノ酸配列を含む融合ポリペプチドである、請求項1から14、17、20、23、26、29、32から34、37、38、41、42、45、46、49、50、53、54、57、60、63、66から69、及び72から78のいずれか一項に記載の単離されたペプチド。
- 前記第2のアミノ酸配列が精製タグを含む、請求項84に記載の単離されたペプチド。
- 前記第2のアミノ酸配列が、前記精製タグと前記アミノ酸配列との間に切断可能なリンカー配列をさらに含む、請求項85に記載の単離されたペプチド。
- 前記ペプチドの第2のアミノ酸配列に連結された前記ペプチドの第1のアミノ酸配列を含む融合ポリペプチドである、請求項84に記載の単離されたペプチド。
- 前記第2のアミノ酸配列が、N末端またはC末端親水性アミノ酸配列を含む、請求項84に記載の単離されたペプチド。
- 前記親水性アミノ酸配列が、複数のGlu(E)アミノ酸残基を含む、請求項88に記載の単離されたペプチド。
- 一緒に連続して連結された複数のアミノ酸配列を含み、前記複数のアミノ酸配列のそれぞれが、請求項1から14、17、20、23、26、29、32から34、37、38、41、42、45、46、49、50、53、54、57、60、63、66から69、及び72から78のいずれか一項に記載のペプチドを含む、融合ポリペプチド。
- 前記複数のアミノ酸配列が、切断可能なリンカー配列によって一緒に連結されている、請求項90に記載の融合ポリペプチド。
- 前記複数のアミノ酸配列がそれぞれ、精製タグ、N末端もしくはC末端親水性アミノ酸配列、またはその両方を含む、請求項90に記載の融合ポリペプチド。
- 請求項1から89のいずれか一項に記載の1種もしくは複数種のペプチドまたは請求項90から92のいずれか一項に記載の融合ポリペプチドと担体とを含む、組成物。
- 清澄化された細胞抽出物である、請求項93に記載の組成物。
- 肥料、除草剤、殺虫剤、殺真菌剤、殺線虫剤、殺菌剤、生物学的接種物、植物調節物質、及びそれらの混合物からなる群から選択される添加剤をさらに含む、請求項93に記載の組成物。
- 前記殺虫剤が、ネオニコチド殺虫剤、オルガノフォスファート殺虫剤、ピレスロイド殺虫剤、大環状ラクトン殺虫剤、カルバマート殺虫剤、ジアミド殺虫剤、アベルメクチン殺虫剤、キチン合成阻害物質、またはそれらの任意の組合せである、請求項95に記載の組成物。
- 前記殺真菌剤が、ストロビルリン殺真菌剤、トリアゾール殺真菌剤、コハク酸デヒドロゲナーゼ殺真菌剤、フェニルアミド殺真菌剤、フェニルピロール殺真菌剤、フタルイミド殺真菌剤、ジチオカルバマート殺真菌剤、ベンゾイミダゾール殺真菌剤、またはそれらの任意の組合せである、請求項95に記載の組成物。
- 前記殺線虫剤がカルバマート殺線虫剤である、請求項95に記載の組成物。
- 前記殺菌剤が、ジクロロフェン及びベンジルアルコールヘミホルマール殺菌剤、イソチアゾリノン殺菌剤、またはそれらの組合せである、請求項95に記載の組成物。
- 生物学的接種物が、ブラディリゾビウム(Bradyrhizobium)属、バチルス(Bacillus)属、ストレプトマイセス(Streptomyces)属、トリコデルマ(Trichoderma)属、パスツリア(Pasteuria)属、またはそれらの任意の組合せである、請求項95に記載の組成物。
- ペプチドp4−14s−9a(SEQ ID NO:57)、p41−4s−12d(SEQ ID NO:59)、p14(SEQ ID NO:113)、p14a(SEQ ID NO:114)、p14−22E,26E(SEQ ID NO:23)、p1−29(SEQ ID NO:130)、p4−14S−16S(SEQ ID NO:55)の1種または複数種、ならびに
クロチアニジン、クロチアニジン及びバチルス・フィルムス(Bacillus firmus)の組合せ、イミジクロプリド、またはイミジクロプリド及びバチルス・フィルムスの組合せ
を含む、請求項95に記載の組成物。 - ペプチドp4−14s−9a(SEQ ID NO:57)、p41−4s−12d(SEQ ID NO:59)、p14(SEQ ID NO:113)、p14a(SEQ ID NO:114)、p14−22E,26E(SEQ ID NO:23)、p1−29(SEQ ID NO:130)、p4−14S−16S(SEQ ID NO:55)の1種または複数種、ならびに
チアメトキサム;チアメトキサム、メフェノキサム、及びフルジオキシニルの組合せ;チアメトキサム、メフェノキサム、フルジオキシニル、及びアゾキシストロビンの組合せ;チアメトキサム及びアバメクチンの組合せ;チアメトキサム、アバメクチン、及びパスツリア殺線虫剤の組合せ;またはチアメトキサム、メフェノキサム、フルジオキシニル、アゾキシストロビン、チアベンダゾール、及びアバメクチンの組合せ
を含む、請求項95に記載の組成物。 - ペプチドp4−14s−9a(SEQ ID NO:57)、p41−4s−12d(SEQ ID NO:59)、p14(SEQ ID NO:113)、p14a(SEQ ID NO:114)、p14−22E,26E(SEQ ID NO:23)、p1−29(SEQ ID NO:130)、p4−14S−16S(SEQ ID NO:55)の1種または複数種、ならびに
ブラディリゾビウム属、バチルス属、及びそれらの組合せを含む生物学的接種物
を含む、請求項95に記載の組成物。 - 前記担体が水性担体である、請求項93に記載の組成物。
- 前記水性担体が、殺菌剤、プロテアーゼ阻害物質、非イオン性界面活性剤、またはそれらの組合せの1種または複数種をさらに含む、請求項104に記載の組成物。
- 前記担体が、微粒子形態の固体担体である、請求項93に記載の組成物。
- 前記固体担体が乾燥粉末である、請求項106に記載の組成物。
- 一緒に連続して連結された複数のアミノ酸配列を含み、前記アミノ酸配列のうちの1つが、請求項108に記載のペプチドを含み、かつ前記アミノ酸配列のうちの別の1つが、請求項1から14、17、20、23、26、29、32から34、37、38、41、42、45、46、49、50、53、54、57、60、63、66から69、72から78、及び108のいずれか一項に記載のペプチドまたは溶解性もしくは精製タグを含む、融合ポリペプチド。
- 請求項108に記載の1種もしくは複数種のペプチドまたは請求項109に記載の融合ポリペプチドと担体とを含む、組成物。
- 有効量の、請求項1から89及び108のいずれか一項に記載の単離されたペプチド、請求項90から92及び109のいずれか一項に記載の融合ポリペプチド、または請求項93から107及び110のいずれか一項に記載の組成物を、植物もしくは植物種子にまたは前記植物が成長している場所もしくは成長すると予測される場所に適用すること
を含み、前記適用が病害抵抗性を付与するために有効である、植物に病害抵抗性を付与する方法。 - 前記病害が、ウイルス性病害、細菌性病害、または真菌性病害である、請求項111に記載の方法。
- 前記適用することが植物を用いて実施される、請求項111に記載の方法。
- 前記植物が、少なくとも1種の除草剤に対して耐性を有する、請求項113に記載の方法。
- 前記適用することが植物種子を用いて実施され、前記方法が、前記ペプチドまたは前記組成物で処理された前記種子を天然土壌また合成土壌に植え付けること、及び、前記土壌に植え付けた前記種子から植物を繁殖させることをさらに含む、請求項111に記載の方法。
- 前記適用することが、前記植物が成長している場所または成長すると予測される場所で実施される、請求項111に記載の方法。
- 前記植物が、それぞれその天然形態または遺伝的に改変された形態の農業用植物、造林用植物、観賞植物、及び園芸用植物から選択される、請求項111に記載の方法。
- 前記植物が遺伝的に改変された植物である、請求項111に記載の方法。
- 処理する前記植物が、アルファルファ、リンゴ、アプリコット、アスパラガス、アボカド、バナナ、オオムギ、マメ、ブナ(ファーグス(Fagus)種)、ベゴニア、カバノキ、ブラックベリー、ブルーベリー、キャベツ、クスノキ(camphor)、キャノーラ、ニンジン、トウゴマ、サクラ、ニッケイ、柑橘類、ココア豆、コーヒー、トウモロコシ、綿、キュウリ、ウリ、ユーカリ、モミ、亜麻、飼料ビート、フクシア、ニンニク、フウロソウ、ブドウ、ラッカセイ、***、ホップ、ザイフリボク、ジュンセア(juncea)(セイヨウカラシナ(Brassica juncea))、黄麻、レンズマメ、レタス、アマニ、メロン、マスタード、オーク、オートムギ、アブラヤシ、アブラナ、オリーブ、タマネギ、パプリカ、エンドウ、モモ、セイヨウナシ、ペラルゴニウム、コショウ、ペチュニア、マツ(ピヌス(Pinus)種)、ポプラ(ポプルス(Populus)種)、仁果類、ジャガイモ、セイヨウアブラナ、ラズベリー、イネ、ゴムノキ、ライ麦、モロコシ、ダイズ、ホウレンソウ、トウヒ、カボチャ、イチゴ、テンサイ、サトウキビ、ヒマワリ、チャノキ、チークノキ、タバコ、トマト、ライコムギ、芝生、スイカ、コムギ、及びヤナギ(サリクス(Salix)種)からなる群から選択される、請求項111に記載の方法。
- 有効量の、請求項1から89及び108のいずれか一項に記載の単離されたペプチド、請求項90から92及び109のいずれか一項に記載の融合ポリペプチド、または請求項93から107及び110のいずれか一項に記載の組成物を、植物もしくは植物種子にまたは前記植物が成長している場所もしくは成長すると予測される場所に適用すること
を含み、前記適用が植物成長を増進させるために有効である、植物成長を増進させる方法。 - 成長の増進が、植物活力の向上、植物重量の増加、生物量の増加、植物1個当たりの花数の増加、より多い穀物及び/または果実の収量、より多い分げつまたは側枝(side shoot)、より大きな葉、シュート成長の増大、タンパク質含量の増加、油含量の増加、デンプン含量の増加、色素含量の増加、クロロフィル含量の増加、ならびにそれらの組合せを含む、請求項120に記載の方法。
- 前記適用することが植物を用いて実施される、請求項120に記載の方法。
- 前記植物が、少なくとも1種の除草剤に対して耐性を有する、請求項122に記載の方法。
- 前記適用することが植物種子を用いて実施され、前記方法が、前記ペプチドまたは前記組成物で処理された前記種子を天然土壌または合成土壌に植え付けること、及び、前記土壌に植え付けた前記種子から植物を繁殖させることをさらに含む、請求項120に記載の方法。
- 前記適用することが、前記植物が成長している場所または成長すると予測される場所で実施される、請求項120に記載の方法。
- 前記植物が、それぞれその天然形態または遺伝的に改変された形態の農業用植物、造林用植物、観賞植物、及び園芸用植物から選択される、請求項120に記載の方法。
- 前記植物が遺伝的に改変された植物である、請求項120に記載の方法。
- 処理する前記植物が、アルファルファ、リンゴ、アプリコット、アスパラガス、アボカド、バナナ、オオムギ、マメ、ブナ(ファーグス種)、ベゴニア、カバノキ、ブラックベリー、ブルーベリー、キャベツ、クスノキ、キャノーラ、ニンジン、トウゴマ、サクラ、ニッケイ、柑橘類、ココア豆、コーヒー、トウモロコシ、綿、キュウリ、ウリ、ユーカリ、モミ、亜麻、飼料ビート、フクシア、ニンニク、フウロソウ、ブドウ、ラッカセイ、***、ホップ、ザイフリボク、ジュンセア(セイヨウカラシナ)、黄麻、レンズマメ、レタス、アマニ、メロン、マスタード、オーク、オートムギ、アブラヤシ、アブラナ、オリーブ、タマネギ、パプリカ、エンドウ、モモ、セイヨウナシ、ペラルゴニウム、コショウ、ペチュニア、マツ(ピヌス種)、ポプラ(ポプルス種)、仁果類、ジャガイモ、セイヨウアブラナ、ラズベリー、イネ、ゴムノキ、ライ麦、モロコシ、ダイズ、ホウレンソウ、トウヒ、カボチャ、イチゴ、テンサイ、サトウキビ、ヒマワリ、チャノキ、チークノキ、タバコ、トマト、ライコムギ、芝生、スイカ、コムギ、及びヤナギ(サリクス種)からなる群から選択される、請求項120に記載の方法。
- 有効量の、請求項1から89及び108のいずれか一項に記載の単離されたペプチド、請求項90から92及び109のいずれか一項に記載の融合ポリペプチド、または請求項93から107及び110のいずれか一項に記載の組成物を、植物もしくは植物種子にまたは前記植物が成長している場所もしくは成長すると予測される場所に適用すること
を含み、前記適用が、昆虫、クモ類、線虫、雑草、及びそれらの組合せからなる群から選択される生物的ストレス因子に対する植物の耐性及び抵抗性を増大させるために有効である、生物的ストレスに対する植物の耐性及び抵抗性を増大させる方法。 - 前記適用することが植物を用いて実施される、請求項129に記載の方法。
- 前記植物が、少なくとも1種の除草剤に対して耐性を有する、請求項130に記載の方法。
- 前記適用することが植物種子を用いて実施され、前記方法が、前記ペプチドまたは前記組成物で処理された前記種子を天然土壌また合成土壌に植え付けること、及び前記土壌に植え付けた前記種子から植物を繁殖させることをさらに含む、請求項129に記載の方法。
- 前記適用することが、前記植物が成長している場所または成長すると予測される場所で実施される、請求項129に記載の方法。
- 前記植物が、それぞれその天然形態または遺伝的に改変された形態の農業用植物、造林用植物、観賞植物、及び園芸用植物から選択される、請求項129に記載の方法。
- 前記植物が遺伝的に改変された植物である、請求項129に記載の方法。
- 処理する前記植物が、アルファルファ、リンゴ、アプリコット、アスパラガス、アボカド、バナナ、オオムギ、マメ、ブナ(ファーグス種)、ベゴニア、カバノキ、ブラックベリー、ブルーベリー、キャベツ、クスノキ、キャノーラ、ニンジン、トウゴマ、サクラ、ニッケイ、柑橘類、ココア豆、コーヒー、トウモロコシ、綿、キュウリ、ウリ、ユーカリ、モミ、亜麻、飼料ビート、フクシア、ニンニク、フウロソウ、ブドウ、ラッカセイ、***、ホップ、ザイフリボク、ジュンセア(セイヨウカラシナ)、黄麻、レンズマメ、レタス、アマニ、メロン、マスタード、オーク、オートムギ、アブラヤシ、アブラナ、オリーブ、タマネギ、パプリカ、エンドウ、モモ、セイヨウナシ、ペラルゴニウム、コショウ、ペチュニア、マツ(ピヌス種)、ポプラ(ポプルス種)、仁果類、ジャガイモ、セイヨウアブラナ、ラズベリー、イネ、ゴムノキ、ライ麦、モロコシ、ダイズ、ホウレンソウ、トウヒ、カボチャ、イチゴ、テンサイ、サトウキビ、ヒマワリ、チャノキ、チークノキ、タバコ、トマト、ライコムギ、芝生、スイカ、コムギ、及びヤナギ(サリクス種)からなる群から選択される、請求項129に記載の方法。
- 有効量の、請求項1から89及び108のいずれか一項に記載の単離されたペプチド、請求項90から92及び109のいずれか一項に記載の融合ポリペプチド、または請求項93から107及び110のいずれか一項に記載の組成物を、植物もしくは植物種子にまたは前記植物が成長している場所もしくは成長すると予測される場所に適用すること
を含み、前記適用が、塩ストレス、水ストレス、オゾンストレス、重金属ストレス、低温ストレス、高温ストレス、栄養ストレス、及びそれらの組合せからなる群から選択される非生物的ストレス因子に対する前記植物の耐性を増大させるために有効である、非生物的ストレスに対する植物の耐性を増大させる方法。 - 前記適用することが植物を用いて実施される、請求項137に記載の方法。
- 前記植物が、少なくとも1種の除草剤に対して耐性を有する、請求項138に記載の方法。
- 前記適用することが植物種子を用いて実施され、前記方法が、前記ペプチドまたは前記組成物で処理された前記種子を天然土壌また合成土壌に植え付けること、及び前記土壌に植え付けた前記種子から植物を繁殖させることをさらに含む、請求項137に記載の方法。
- 前記適用することが、前記植物が成長している場所または成長すると予測される場所で実施される、請求項137に記載の方法。
- 前記植物が、それぞれその天然形態または遺伝的に改変された形態の農業用植物、造林用植物、観賞植物、及び園芸用植物から選択される、請求項137に記載の方法。
- 前記植物が遺伝的に改変された植物である、請求項137に記載の方法。
- 処理する前記植物が、アルファルファ、リンゴ、アプリコット、アスパラガス、アボカド、バナナ、オオムギ、マメ、ブナ(ファーグス種)、ベゴニア、カバノキ、ブラックベリー、ブルーベリー、キャベツ、クスノキ、キャノーラ、ニンジン、トウゴマ、サクラ、ニッケイ、柑橘類、ココア豆、コーヒー、トウモロコシ、綿、キュウリ、ウリ、ユーカリ、モミ、亜麻、飼料ビート、フクシア、ニンニク、フウロソウ、ブドウ、ラッカセイ、***、ホップ、ザイフリボク、ジュンセア(セイヨウカラシナ)、黄麻、レンズマメ、レタス、アマニ、メロン、マスタード、オーク、オートムギ、アブラヤシ、アブラナ、オリーブ、タマネギ、パプリカ、エンドウ、モモ、セイヨウナシ、ペラルゴニウム、コショウ、ペチュニア、マツ(ピヌス種)、ポプラ(ポプルス種)、仁果類、ジャガイモ、セイヨウアブラナ、ラズベリー、イネ、ゴムノキ、ライ麦、モロコシ、ダイズ、ホウレンソウ、トウヒ、カボチャ、イチゴ、テンサイ、サトウキビ、ヒマワリ、チャノキ、チークノキ、タバコ、トマト、ライコムギ、芝生、スイカ、コムギ、及びヤナギ(サリクス種)からなる群から選択される、請求項137に記載の方法。
- 有効量の、請求項1から89及び108のいずれか一項に記載の単離されたペプチド、請求項90から92及び109のいずれか一項に記載の融合ポリペプチド、または請求項93から107及び110のいずれか一項に記載の組成物を、植物にまたは前記植物が成長している場所に適用すること
を含み、前記適用が観賞植物から取り出された切り出し部分に乾燥抵抗性を付与するために有効である、前記観賞植物から取り出された切り出し部分に乾燥抵抗性を付与する方法。 - 前記適用することが観賞植物を用いて実施される、請求項145に記載の方法。
- 前記適用することが、前記観賞植物が成長している場所で実施される、請求項145に記載の方法。
- 前記観賞植物が遺伝的に改変された観賞植物である、請求項145に記載の方法。
- 処理する前記植物が、ブナ(ファーグス種)、ベゴニア、カバノキ、ハボタン(ornamental cabbage)、モミ、フクシア、ニンニク、フウロソウ、オーク、観賞用タマネギ、ペラルゴニウム、ペチュニア、マツ(ピヌス種)、ポプラ(ポプルス種)、ヒマワリ、チークノキ、タバコ、芝生、及びヤナギ(サリクス種)からなる群から選択される、請求項145に記載の方法。
- 有効量の、請求項1から89及び108のいずれか一項に記載の単離されたペプチド、請求項90から92及び109のいずれか一項に記載の融合ポリペプチド、または請求項93から107及び110のいずれか一項に記載の組成物を、果実もしくは野菜を含む植物にまたは前記植物が成長している場所に適用すること、または
有効量の前記単離されたペプチドもしくは前記組成物を、収穫された果実もしくは野菜に適用すること
を含み、
前記適用が前記果実または前記野菜に収穫後病害抵抗性または収穫後乾燥抵抗性を付与するために有効である、果実または野菜に収穫後病害抵抗性または収穫後乾燥抵抗性を付与する方法。 - 前記適用することが植物を用いて実施される、請求項150に記載の方法。
- 前記植物が、少なくとも1種の除草剤に対して耐性を有する、請求項151に記載の方法。
- 前記適用することが、前記植物が成長している場所で実施される、請求項150に記載の方法。
- 前記適用することが、収穫された果実または野菜を用いて実施される、請求項150に記載の方法。
- 前記植物が遺伝的に改変された植物である、請求項150に記載の方法。
- 前記植物が、リンゴ、アプリコット、アスパラガス、アボカド、バナナ、ブラックベリー、ブルーベリー、キャベツ、ニンジン、サクラ、柑橘類、トウモロコシ、キュウリ、ウリ、飼料ビート、ニンニク、ブドウ、ザイフリボク、ジュンセア(セイヨウカラシナ)、レタス、メロン、マスタード、オリーブ、タマネギ、エンドウ、モモ、セイヨウナシ、コショウ、仁果類、ジャガイモ、セイヨウアブラナ、ラズベリー、ホウレンソウ、カボチャ、イチゴ、テンサイ、サトウキビ、チャノキ、トマト、ライコムギ、及びスイカからなる群から選択される、請求項150に記載の方法。
- 有効量の、請求項1から89及び108のいずれか一項に記載の単離されたペプチド、請求項90から92及び109のいずれか一項に記載の融合ポリペプチド、または請求項93から107及び110のいずれか一項に記載の組成物を、果実もしくは野菜を含む植物にまたは前記植物が成長している場所に適用すること、または
有効量の前記単離されたペプチドもしくは前記組成物を、収穫された果実もしくは野菜に適用すること
を含み、
前記適用が果実または野菜の成熟の寿命を延ばすために有効である、果実または野菜の成熟の寿命を延ばす方法。 - 前記適用することが植物を用いて実施される、請求項157に記載の方法。
- 前記植物が、少なくとも1種の除草剤に対して耐性を有する、請求項157に記載の方法。
- 前記適用することが、前記植物が成長している場所で実施される、請求項157に記載の方法。
- 前記適用することが、収穫された果実または野菜を用いて実施される、請求項157に記載の方法。
- 前記植物が遺伝的に改変された植物である、請求項157に記載の方法。
- 前記植物が、リンゴ、アプリコット、アスパラガス、アボカド、バナナ、ブラックベリー、ブルーベリー、キャベツ、ニンジン、サクラ、柑橘類、トウモロコシ、キュウリ、ウリ、飼料ビート、ニンニク、ブドウ、ザイフリボク、ジュンセア(セイヨウカラシナ)、レタス、メロン、マスタード、オリーブ、タマネギ、エンドウ、モモ、セイヨウナシ、コショウ、仁果類、ジャガイモ、セイヨウアブラナ、ラズベリー、ホウレンソウ、カボチャ、イチゴ、テンサイ、サトウキビ、チャノキ、トマト、ライコムギ、及びスイカからなる群から選択される、請求項157に記載の方法。
- 有効量の、請求項1から89及び108のいずれか一項に記載の単離されたペプチド、請求項90から92及び109のいずれか一項に記載の融合ポリペプチド、または請求項93から107及び110のいずれか一項に記載の組成物を、植物もしくは植物種子にまたは前記植物が成長している場所もしくは成長すると予測される場所に適用すること
を含み、前記適用が植物生化学的シグナル伝達をモジュレートするために有効である、植物生化学的シグナル伝達をモジュレートする方法。 - 前記植物生化学的シグナル伝達が、酸化窒素産生、過酸化物産生、または二次代謝産物の誘導;エチレンシグナル伝達経路のアゴニストモジュレーション、及びエチレン応答遺伝子発現の誘導;サリチル酸シグナル伝達経路のアゴニストモジュレーション、及びサリチル酸応答遺伝子発現の誘導;アブシジン酸経路のアゴニストモジュレーション、及びアブシジン酸応答遺伝子発現の誘導;ジベレリンシグナル伝達経路のアゴニストモジュレーション、及びジベレリン応答遺伝子発現の誘導;ジャスモン酸シグナル伝達のアンタゴニストモジュレーション、及びジャスモン酸応答遺伝子の発現の阻害;プロテアーゼ阻害物質発現の誘導;植物組織における活性酸素種産生の誘導;免疫関連ペプチド及び抗微生物ペプチドの産生の誘導;ならびにエキスパンシンの遺伝子発現及び産生の誘導からなる群から選択される、請求項164に記載の方法。
- 請求項1から89及び108のいずれか一項に記載のポリペプチドの単離されたペプチドまたは請求項90から92及び109のいずれか一項に記載の融合ポリペプチドをコードする第1の核酸分子と、前記第1の核酸分子に作動可能にカップリングしたプロモーターとして有効な(promoter−effective)核酸分子とを含む、DNAコンストラクト。
- 請求項166に記載のDNAコンストラクトを含む、組換え発現ベクター。
- 請求項166に記載のDNAコンストラクトを含む、組換え宿主細胞。
- 植物プロトプラストである、請求項168に記載の組換え宿主細胞。
- 細菌である、請求項168に記載の組換え宿主細胞。
- 請求項168に記載の組換え宿主細胞を含む、形質転換植物。
- 請求項168に記載の組換え宿主細胞を含む、形質転換植物種子。
- 請求項166に記載のDNAコンストラクトを含む、形質転換植物。
- 請求項166に記載のDNAコンストラクトを含む、形質転換植物種子。
- 請求項166に記載のDNAコンストラクトを用いて形質転換された形質転換植物を提供すること;及び
前記DNAコンストラクトが前記ペプチドまたは前記融合ポリペプチドを発現して病害抵抗性を付与することを可能にするために有効な条件下で、前記植物を成長させること
を含む、植物に病害抵抗性を付与する方法。 - 請求項166に記載のDNAコンストラクトを用いて形質転換された形質転換植物を提供すること;及び
前記DNAコンストラクトが前記ペプチドまたは前記融合ポリペプチドを発現して植物成長を増進させることを可能にするために有効な条件下で、前記植物を成長させること
を含む、植物成長を増進させる方法。 - 請求項166に記載のDNAコンストラクトを用いて形質転換された形質転換植物を提供すること;及び
前記DNAコンストラクトが前記ペプチドまたは前記融合ポリペプチドを発現して病害抵抗性を付与することを可能にするために有効な条件下で、前記植物を成長させること
を含む、植物に病害抵抗性を付与する方法。 - 請求項166に記載のDNAコンストラクトを用いて形質転換された形質転換植物を提供すること;ならびに
前記DNAコンストラクトが前記ペプチドまたは前記融合ポリペプチドを発現して昆虫、クモ類、線虫、雑草、及びそれらの組合せからなる群から選択される生物的ストレス因子に対する前記植物の耐性及び抵抗性を増大させることを可能にするために有効な条件下で、前記植物を成長させること
を含む、生物的ストレスに対する植物の耐性及び抵抗性を増大させる方法。 - 請求項166に記載のDNAコンストラクトを用いて形質転換された形質転換植物を提供すること;ならびに
前記DNAコンストラクトが前記ペプチドまたは前記融合ポリペプチドを発現して塩ストレス、水ストレス、オゾンストレス、重金属ストレス、低温ストレス、高温ストレス、栄養ストレス、及びそれらの組合せからなる群から選択される非生物的ストレス因子に対する前記植物の耐性を増大させることを可能にするために有効な条件下で、前記植物を成長させること
を含む、非生物的ストレスに対する植物の耐性を増大させる方法。 - 請求項166に記載のDNAコンストラクトを用いて形質転換された形質転換観賞植物を提供すること;及び
前記DNAコンストラクトが前記ペプチドまたは前記融合ポリペプチドを発現して前記形質転換観賞植物から取り出された切り出し部分に乾燥抵抗性を付与することを可能にするために有効な条件下で、前記植物を成長させること
を含む、観賞植物から取り出された切り出し部分に乾燥抵抗性を付与する方法。 - 請求項166に記載のDNAコンストラクトを用いて形質転換された形質転換植物を提供すること;及び
前記DNAコンストラクトが前記ペプチドまたは前記融合ポリペプチドを発現して前記形質転換植物から採られた果実または野菜に収穫後病害抵抗性または収穫後乾燥抵抗性を付与することを可能にするために有効な条件下で、前記植物を成長させること
を含む、果実または野菜に収穫後病害抵抗性または収穫後乾燥抵抗性を付与する方法。 - 請求項166に記載のDNAコンストラクトを用いて形質転換された形質転換植物を提供すること;及び
前記DNAコンストラクトが前記ペプチドまたは前記融合ポリペプチドを発現して前記形質転換植物から採られた果実または野菜についての成熟の寿命を延ばすことを可能にするために有効な条件下で、前記植物を成長させること
を含む、果実または野菜の成熟の寿命を延ばす方法。 - 請求項166に記載のDNAコンストラクトを用いて形質転換された形質転換植物種子を提供すること;
前記形質転換植物種子を土壌に植え付けること;及び
前記DNAコンストラクトが前記ペプチドまたは前記融合ポリペプチドを発現して病害抵抗性を付与することを可能にするために、前記形質転換植物種子から形質転換植物を繁殖させること
を含む、植物に病害抵抗性を付与する方法。 - 請求項166に記載のDNAコンストラクトを用いて形質転換された形質転換植物種子を提供すること;
前記形質転換植物種子を土壌に植え付けること;及び
前記DNAコンストラクトが前記ペプチドまたは前記融合ポリペプチドを発現して植物成長を増進させることを可能にするために、前記形質転換植物種子から形質転換植物を繁殖させること
を含む、植物成長を増進させる方法。 - 請求項166に記載のDNAコンストラクトを用いて形質転換された形質転換植物種子を提供すること;
前記形質転換植物種子を土壌に植え付けること;及び
前記DNAコンストラクトが前記ペプチドまたは前記融合ポリペプチドを発現して病害抵抗性を付与することを可能にするために、前記形質転換植物種子から形質転換植物を繁殖させること
を含む、植物に病害抵抗性を付与する方法。 - 請求項166に記載のDNAコンストラクトを用いて形質転換された形質転換植物種子を提供すること;
前記形質転換植物種子を土壌に植え付けること;及び
前記DNAコンストラクトが前記ペプチドまたは前記融合ポリペプチドを発現して昆虫、クモ類、線虫、雑草、及びそれらの組合せからなる群から選択される生物的ストレス因子に対する前記植物の耐性及び抵抗性を増大させることを可能にするために、前記形質転換植物種子から形質転換植物を繁殖させること
を含む、生物的ストレスに対する植物の耐性及び抵抗性を増大させる方法。 - 請求項166に記載のDNAコンストラクトを用いて形質転換された形質転換植物種子を提供すること;
前記形質転換植物種子を土壌に植え付けること;及び
前記DNAコンストラクトが前記ペプチドまたは前記融合ポリペプチドを発現して塩ストレス、水ストレス、オゾンストレス、重金属ストレス、低温ストレス、高温ストレス、栄養ストレス、及びそれらの組合せからなる群から選択される非生物的ストレス因子に対する前記植物の耐性を増大させることを可能にするために、前記形質転換植物種子から形質転換植物を繁殖させること
を含む、非生物的ストレスに対する植物の耐性を増大させる方法。 - 請求項166に記載のDNAコンストラクトを用いて形質転換された形質転換観賞植物種子を提供すること;
前記形質転換観賞植物種子を土壌に植え付けること;及び
前記DNAコンストラクトが前記ペプチドまたは前記融合ポリペプチドを発現して形質転換観賞植物から取り出された切り出し部分に乾燥抵抗性を付与することを可能にするために、前記形質転換観賞植物種子から前記形質転換観賞植物を繁殖させること
を含む、観賞植物から取り出された切り出し部分に乾燥抵抗性を付与する方法。 - 請求項166に記載のDNAコンストラクトを用いて形質転換された形質転換植物種子を提供すること;
前記形質転換植物種子を土壌に植え付けること;及び
前記DNAコンストラクトが前記ペプチドまたは前記融合ポリペプチドを発現して形質転換植物から採られた果実または野菜に収穫後病害抵抗性または収穫後乾燥抵抗性を付与することを可能にするために、前記形質転換植物種子から前記形質転換植物を繁殖させること
を含む、果実または野菜に収穫後病害抵抗性または収穫後乾燥抵抗性を付与する方法。 - 請求項166に記載のDNAコンストラクトを用いて形質転換された形質転換植物種子を提供すること;
前記形質転換植物種子を土壌に植え付けること;及び
前記DNAコンストラクトが前記ペプチドまたは前記融合ポリペプチドを発現して形質転換植物から採られた果実または野菜についての成熟の寿命を延ばすことを可能にするために、前記形質転換植物種子から前記形質転換植物を繁殖させること
を含む、果実または野菜の成熟の寿命を延ばす方法。 - 請求項166に記載のDNAコンストラクトを用いて形質転換された形質転換植物種子を提供すること;
前記形質転換植物種子を土壌に植え付けること;及び
前記DNAコンストラクトが前記ペプチドまたは前記融合ポリペプチドを発現して植物生化学的シグナル伝達をモジュレートすることを可能にするために、前記形質転換植物種子から形質転換植物を繁殖させること
を含む、植物生化学的シグナル伝達をモジュレートする方法。 - 前記植物生化学的シグナル伝達が、酸化窒素産生、過酸化物産生、または二次代謝産物の誘導;エチレンシグナル伝達経路のアゴニストモジュレーション、及びエチレン応答遺伝子発現の誘導;サリチル酸シグナル伝達経路のアゴニストモジュレーション、及びサリチル酸応答遺伝子発現の誘導;アブシジン酸経路のアゴニストモジュレーション、及びアブシジン酸応答遺伝子発現の誘導;ジベレリンシグナル伝達経路のアゴニストモジュレーション、及びジベレリン応答遺伝子発現の誘導;ジャスモン酸シグナル伝達のアンタゴニストモジュレーション、及びジャスモン酸応答遺伝子の発現の阻害;プロテアーゼ阻害物質発現の誘導;植物組織における活性酸素種産生の誘導;免疫関連ペプチド及び抗微生物ペプチドの産生の誘導;ならびにエキスパンシンの遺伝子発現及び産生の誘導からなる群から選択される、請求項191に記載の方法。
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US201462058535P | 2014-10-01 | 2014-10-01 | |
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