JP2017063617A - Culture apparatus - Google Patents
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Abstract
Description
この発明は、シャーレ等の培養容器の周囲に対して温度制御された気体を供給するための培養装置に関する。 The present invention relates to a culture apparatus for supplying a temperature-controlled gas around a culture container such as a petri dish.
細胞、組織、細菌、微生物等の生体試料や生体標本(以下、単に「試料」と言う)に対して、電気生理実験や顕微鏡観察を実行するときには、試料を含む空間内を温度制御された気体でパージする必要がある。このような気体としては、例えば、5%の二酸化炭素を含有する、摂氏37度に加熱された空気が使用される。 When performing electrophysiological experiments and microscopic observations on biological samples and specimens (hereinafter simply referred to as “samples”) such as cells, tissues, bacteria, and microorganisms, gas whose temperature is controlled in the space containing the samples Need to be purged. As such a gas, for example, air heated to 37 degrees Celsius containing 5% carbon dioxide is used.
特許文献1には、複数種のガスボンベからガス混合室内に供給されたガスを加熱した上でチャンバーに供給するとともに、チャンバー内にガスの検出器を設け、温度制御および濃度制御された混合ガスをガス混合室とチャンバー間で循環させるようにした顕微鏡観察用培養装置が開示されている。 In Patent Document 1, the gas supplied from a plurality of types of gas cylinders to the gas mixing chamber is heated and then supplied to the chamber. A gas detector is provided in the chamber, and the temperature-controlled and concentration-controlled mixed gas is supplied. A culture apparatus for microscopic observation that is circulated between a gas mixing chamber and a chamber is disclosed.
このように気体を循環使用する場合には、気体の消費量を小さくすることができるという効果がある。しかしながら、循環使用される気体中に雑菌や粉塵等が混入した場合には、実験または観察結果に悪影響を与えるという問題が生ずる。また、循環使用される気体中に外部から空気が混入した場合には、気体の濃度が変化することになり、この場合においても、実験または観察結果に悪影響を与えるという問題が生ずる。 Thus, when the gas is circulated and used, the gas consumption can be reduced. However, when germs, dust, etc. are mixed in the circulating gas, there arises a problem that the experiment or observation result is adversely affected. Further, when air is mixed into the circulating gas from the outside, the concentration of the gas changes, and even in this case, there is a problem that the experiment or observation result is adversely affected.
この発明は上記課題を解決するためになされたものであり、気体を循環利用する場合においても、培養容器の周囲に温度制御された気体を清浄な状態で供給することが可能な培養装置を提供することを目的とする。 The present invention has been made to solve the above problems, and provides a culture apparatus capable of supplying a temperature-controlled gas in a clean state around the culture vessel even when the gas is circulated and used. The purpose is to do.
請求項1に記載の発明は、培養容器の周囲に温度制御された気体を供給するための培養装置であって、気体の導入口と排出口とを備え、前記培養容器を囲むインキュベータと、
前記インキュベータにおける導入口と排出口とに接続された気体の循環路と、前記気体の循環路中に気体を導入する気体導入部と、前記気体の循環路中から気体を排出する気体排出部と、前記気体の循環路中に配設されたポンプと、前記気体の循環路中に配設された加熱器と、前記気体の循環路中に配設されたバッファチャンバーと、前記バッファチャンバー内の気体の圧力を検出する圧力センサと、を備えたことを特徴とする。
The invention according to claim 1 is a culture apparatus for supplying a temperature-controlled gas around the culture container, comprising an inlet and a gas inlet, and an incubator surrounding the culture container;
A gas circulation path connected to the inlet and the outlet in the incubator; a gas introduction section for introducing gas into the gas circulation path; and a gas discharge section for discharging gas from the gas circulation path. A pump disposed in the gas circulation path; a heater disposed in the gas circulation path; a buffer chamber disposed in the gas circulation path; And a pressure sensor for detecting the pressure of the gas.
請求項2に記載の発明は、請求項1に記載の発明において、前記気体導入部は、前記気体の循環路に対して気体の供給源を接続するための気体導入用切替弁を有するとともに、前記気体排出部は、前記気体の循環路を、流量調整部材を介して大気に開放するための気体排出用切替弁を有し、前記圧力センサによる前記バッファチャンバー内の気体の圧力に基づいて、前記気体導入用切替弁と前記気体排出用切替弁を駆動する制御部をさらに備える。 The invention according to claim 2 is the invention according to claim 1, wherein the gas introduction part has a gas introduction switching valve for connecting a gas supply source to the gas circulation path, The gas discharge unit has a gas discharge switching valve for opening the gas circulation path to the atmosphere via a flow rate adjusting member, and based on the pressure of the gas in the buffer chamber by the pressure sensor, The apparatus further includes a controller that drives the gas introduction switching valve and the gas discharge switching valve.
請求項3に記載の発明は、請求項2に記載の発明において、前記制御部は、前記圧力センサにより検出したバッファチャンバー内の気体の圧力が設定値以下となったときに、前記気体導入用切替弁を切り替えて前記気体の循環路を前記気体の供給源と接続するとともに、前記気体排出用切替弁を切り替えて前記気体の循環路を前記流量調整部材を介して大気に開放する。 According to a third aspect of the present invention, in the second aspect of the present invention, when the gas pressure in the buffer chamber detected by the pressure sensor is equal to or lower than a set value, the control unit is configured to introduce the gas. A switching valve is switched to connect the gas circulation path to the gas supply source, and the gas discharge switching valve is switched to open the gas circulation path to the atmosphere via the flow rate adjusting member.
請求項4に記載の発明は、請求項3に記載の発明において、前記流量調整部材は、前記気体排出用切替弁を介して大気中に排出される気体の流量を調整する流量調整弁である。 According to a fourth aspect of the present invention, in the third aspect of the invention, the flow rate adjusting member is a flow rate adjusting valve that adjusts a flow rate of the gas discharged into the atmosphere via the gas discharge switching valve. .
請求項5に記載の発明は、請求項1から請求項4のいずれかに記載の発明において、前記加熱器は、耐熱性を有する管状体の内部にヒータを備え、前記管状体内を通過する気体を加熱する流体加熱器から構成され、当該流体加熱器は、前記気体の循環路における前記インキュベータの気体の導入口に配設される。 According to a fifth aspect of the present invention, in the invention according to any one of the first to fourth aspects of the present invention, the heater includes a heater inside a tubular body having heat resistance, and a gas that passes through the tubular body. The fluid heater is disposed at the gas inlet of the incubator in the gas circulation path.
請求項6に記載の発明は、請求項1から請求項5のいずれかに記載の発明において、前記インキュベータは、前記培養容器の側方を囲む気密空間を形成する構成を有するとともに、前記培養容器の上面または前記培養容器の底面の少なくとも一方に対して加熱された気体を噴出するための気体噴出機構をさらに備える。 The invention according to claim 6 is the invention according to any one of claims 1 to 5, wherein the incubator has a configuration forming an airtight space surrounding a side of the culture vessel, and the culture vessel And a gas ejection mechanism for ejecting heated gas to at least one of the upper surface of the culture vessel and the bottom surface of the culture vessel.
請求項1から請求項4に記載の発明によれば、気体の循環路内を大気圧より高圧に維持することが可能となり、循環使用される気体中に雑菌や粉塵あるいは空気が混入することを防止することができる。このため、気体を循環利用する場合においても、培養容器の周囲に温度制御された所望の濃度の気体を清浄な状態で供給することが可能となる。このとき、バッファチャンバーと圧力センサとの作用により、ポンプの脈動等が生じた場合においても、気体の循環路内における気体の圧力を所定の値に維持することが可能となる。 According to the first to fourth aspects of the invention, the inside of the gas circulation path can be maintained at a pressure higher than the atmospheric pressure, and various germs, dust, or air can be mixed in the circulating gas. Can be prevented. For this reason, even when the gas is circulated and used, it is possible to supply a gas having a desired concentration controlled in temperature around the culture vessel in a clean state. At this time, even when pump pulsation or the like occurs due to the action of the buffer chamber and the pressure sensor, the gas pressure in the gas circulation path can be maintained at a predetermined value.
請求項5に記載の発明によれば、気体の循環路におけるインキュベータの気体導入部に配設された流体加熱器の作用により、インキュベータ内に短時間で所定の温度のガスを供給することが可能となる。 According to the fifth aspect of the present invention, a gas at a predetermined temperature can be supplied into the incubator in a short time by the action of the fluid heater disposed in the gas introduction part of the incubator in the gas circulation path. It becomes.
請求項6に記載の発明によれば、培養容器に対して加熱された気体を噴出することにより、培養容器およびその収納物の温度低下を防止することが可能となる。 According to invention of Claim 6, it becomes possible to prevent the temperature fall of a culture container and its storage thing by ejecting the heated gas with respect to a culture container.
以下、この発明の実施の形態を図面に基づいて説明する。図1は、この発明に係る培養装置の概要図である。 Hereinafter, embodiments of the present invention will be described with reference to the drawings. FIG. 1 is a schematic view of a culture apparatus according to the present invention.
この培養装置は、気体供給源52から供給された気体を加熱および循環しながら、試料100(後述する図6参照)を収納したシャーレ15の外周部に供給するためのものである。ここで、気体供給源52としては、例えば、5%の二酸化炭素を含有する空気を気体として供給するものが使用される。この気体供給源52は、気体を大気圧以上に加圧した状態で供給するための調圧装置を備える。なお、この気体供給源52のかわりに、工場等に設置された気体供給管等を使用してもよい。
This culture apparatus is for supplying the gas supplied from the
ここで、例えば、心筋細胞、神経細胞等の試料100に対して細胞培養等を実行してこれを顕微鏡観察するときには、摂氏37度に加熱された5%の二酸化炭素を含有する空気中に、試料100を設置して、観察することが好ましい。このため、この発明に係る培養装置は、気体供給源52から供給された気体を、摂氏37度まで加熱した上で、試料100が設置されたシャーレ15が設置されるインキュベータ10に供給する構成を有する。
Here, for example, when cell culture or the like is performed on the
この培養装置は、シャーレ15を囲む構造を有するインキュベータ10と、このインキュベータ10における導入口31と排出口33とに接続された気体の循環路51とを備える。この気体の循環路51には、気体供給源52に接続された三方電磁弁53と、流量調整弁54と、流量計55と、加湿機構56と、滅菌フィルター57と、流体加熱器71と、バッファチャンバー61と、ダイヤフラムポンプ等の循環ポンプ62と、気体排出管77に接続された三方電磁弁63とが配設されている。なお、この明細書に述べる気体の循環路51とは、単なる配管のみではなく、そこに配設された機器をも含む気体の循環流路全体をも含む概念である。
The culture apparatus includes an
三方電磁弁53は、気体供給源52から供給される5%の二酸化炭素を含有する空気を気体の循環路51に導入する状態と、この気体供給源52を気体の循環路51から切り離して、気体の循環路51中において気体を循環させる状態とを切り替え得る構成となっている。
The three-
また加湿機構56は、容器に水等の液体が貯留された構成を有し、流量計55側から供給された気体がこの液体中にバブリングされる構成を有する。この加湿機構56の作用により、気体の循環路中を循環する気体が、細胞培養に適した湿度となるまで加湿される。
The
バッファチャンバー61は、例えば、1リットル程度の容積を有し、気体の循環路51中を循環する気体を一時的に貯留する構成となっている。このバッファチャンバー61内の気体の圧力は、圧力センサ60により測定される。循環ポンプ62の作用により気体の循環路51中を循環する気体には、循環ポンプ62の動作に起因する脈動が発生する。しかしながら、このバッファチャンバー61の作用により、この脈動の作用を軽減し、圧力センサ60により気体の循環路51内を循環する気体の圧力を正確に測定することが可能となる。また、このバッファチャンバー61の作用により、気体の循環路51からわずかな気体の漏洩が生じた場合においても、気体の循環路51中の気体の圧力変動を小さなものとすることが可能となる。このバッファチャンバー61としては、単なる気密構造を備えたチャンバーを採用してもよく、アキュムレータ等の蓄圧作用を有するものを採用してもよい。なお、このバッファチャンバー61としては、1リットル以上の気体を収納し得るものを採用することが好ましい。
The
三方電磁弁63は、気体の循環路51中を循環する気体を、流量調整弁64を介して気体排出管77に排出する状態と、流量調整弁64および気体排出管77を気体の循環路51から切り離して、気体の循環路51中において気体を循環させる状態とを切り替え得る構成となっている。なお、この流量調整弁64は、所謂、スピコン(スピードコントローラ)と呼称されるものである。但し、流量調整弁64のかわりに、圧力調整弁やリリーフ弁を使用してもよい。
The three-
インキュベータ10における導入口31と排出口33との間には、加熱気体の導入口32が形成されている。この加熱気体の導入口32には、流体加熱器71と同様の流体加熱器72が配設されている。この流体加熱器72は、流量計58および送風ポンプ59を介して、外気の導入管76と接続されている。後述するように、送風ポンプ59の作用により外気の導入管76から取り込まれた空気は、流体加熱器72により加熱された上で、シャーレ15の上面および下面に噴出される。
Between the
なお、インキュベータ10における導入口31内には、気体の循環路51中を流れる気体の温度を測定するための温度センサ38が配設されている。
A
図2は、流体加熱器71の構成を示す部分断面斜視図である。
FIG. 2 is a partial cross-sectional perspective view showing the configuration of the
図1におけるインキュベータ10の導入口31に接続された流体加熱器71は、耐熱性を有する金属製の管状体93の内部にヒータ92と、このヒータ92の温度を測定する温度センサ91とを備える。管状体93における入口部95より管状体93の内部に侵入したガスは、管状体93内を通過する間にヒータ92により加熱され、管状体93の先端部に形成された孔部96より噴出する。この流体加熱器71は、後述する制御部80により制御され、そこを通過する気体を、摂氏37度程度の低温から、摂氏200度程度の高温までの範囲において、短時間の間に昇温することが可能となっている。
A
なお、インキュベータ10における加熱気体の導入口32に接続された流体加熱器72も、図2に示す流体加熱器71と同様の構成を有する。
The
この実施形態に係る培養装置においては、インキュベータ10およびこのインキュベータ10に接続された流体加熱器71、72と、その他の構成とは、1メートル以上の長さを有する管路により接続されている。このため、インキュベータ10等を顕微鏡のステージ上に載置し、その他の構成を顕微鏡が配置されたテーブルの下に設置することが可能となる。このため、顕微鏡観察等を好適に実行することが可能となる。
In the culture apparatus according to this embodiment, the
図3は、この発明に係る培養装置の制御系を示すブロック図である。 FIG. 3 is a block diagram showing a control system of the culture apparatus according to the present invention.
この発明に係る培養装置は、論理演算を実行するCPU、装置の制御に必要な動作プログラムが格納されたROM、制御時にデータ等が一時的にストアされるRAM等から構成され、装置全体を制御する制御部80を備える。この制御部80は、上述した温度センサ38、圧力センサ60、流量計55、流量計58、三方電磁弁53、三方電磁弁63、循環ポンプ62および送風ポンプ59と各々接続されており、これらから信号を受け、これらを駆動制御する。なお、流量計55、58として制御部80に接続されたデジタル式のものを使用するかわりに、アナログ式の流量計を使用してもよい。
The culture apparatus according to the present invention includes a CPU that executes logical operations, a ROM that stores an operation program necessary for controlling the apparatus, a RAM that temporarily stores data during control, and the like, and controls the entire apparatus. A
また、この制御部80は、温度調節器73を介して流体加熱器71と接続されており、インキュベータ10の導入口31に配設された温度センサ38または流体加熱器71における温度センサ91により測定した温度に基づいて流体加熱器71におけるヒータ92を駆動制御する。さらに、この制御部80は、温度調節器74を介して流体加熱器72と接続されており、流体加熱器72における温度センサにより測定した温度に基づいて流体加熱器72におけるヒータを駆動制御する。
Further, the
次に、上述したインキュベータ10の構成について説明する。図4は、インキュベータ10の斜視図である。図5は、インキュベータ10の分解斜視図である。図6は、インキュベータ10を顕微鏡の対物レンズ102とともに示す縦断面図である。図7は、インキュベータ10における気体の流れを示す説明図である。
Next, the configuration of the
このインキュベータ(Incubator)10は、蓋体15aおよび本体15bからなるシャーレ15に貯留された培養液101内の試料100(図6参照)に対して気体を供給することにより、試料100を一定の状態に維持するためのものである。このインキュベータ10は、下部保持部材19と、下部本体18と、オーリング17と、下部パッキング16と、上部パッキング14と、上部本体13と、上部保持部材12と、上蓋11とから構成される。
The
下部本体18は、シャーレ15を取り囲む形状を有し、シャーレ15の外径より小さな下部開口部が形成されている。この下部本体18には、上述したように、気体の導入口31と、気体の排出口33と、加熱気体の導入口32とが形成されている。気体の導入口31および排出口33は、図1および図7に示すように、気体の循環路51と、シャーレ15の外周部の領域とを連通している。一方、加熱気体の導入口32は、図4および図6に示す連通孔34に連通している。
The lower
上部本体13は、シャーレ15を取り囲む形状を有し、シャーレ15の外径より小さな上部開口部が形成されている。下部本体18の上部に形成された凹部内に配設されるオーリング17は、上部本体13の下面と当接することにより、下部本体18と上部本体13との間を気密状態とする。下部本体18の上面と上部本体13の下面とは傾斜面から構成され、下部本体18と上部本体13とを、オーリング17を介して組み合わせることにより、シャーレ15を囲う略円筒形状が構成される。
The
この下部本体18の上面に配設された下部パッキング16は、下部本体18における下部開口部を取り囲む形状を有する。この下部パッキング16は、シャーレ15における本体15bの下面と当接することにより、下部本体18とシャーレ15との間を気密状態とする。また、上部本体13の下面に配設された上部パッキング14は、上部本体13における上部開口部を取り囲む形状を有する。この上部パッキング14は、シャーレ15における蓋体15aの上面と当接することにより、上部本体13とシャーレ15との間を気密状態とする。
The
上蓋11は、透光性を有する材質より構成される。一方、上部保持部材12および下部保持部材19は、金属より構成される。上蓋11と上部保持部材12とは、上蓋11のネジ孔23および上部保持部材12のネジ孔24を利用して、上部本体13にネジ止めされる。なお、上部保持部材12および下部保持部材19を、樹脂製としてもよい。
The
図4および図5に示すように、上部保持部材12には、「パチン錠」や「スナップ錠」とも呼称される固定部材20のレバー21が配設されている。一方、下部保持部材19には、固定部材20のフック22が配設されている。これらのレバー21およびフック22からなる固定部材20の作用により、上部保持部材12および下部保持部材19が、互いに近接する方向に移動した後、固定される。これにより、下部本体18、下部パッキング16、オーリング17、上部本体13および上部パッキング14と、シャーレ15とにより、シャーレ15の側方を囲む気密空間39が形成される。
As shown in FIGS. 4 and 5, the upper holding
図1および図7に示すように、下部本体18における気体の導入口31より導入された気体は、シャーレ15の外周部の気密空間39を通過した後、排出口33より排出される。このとき、シャーレ15における蓋体15aと本体15bとの間には、一定の隙間が形成されている。このため、シャーレ15の外周部の気密空間39に供給された気体は、シャーレ15の内部にも侵入する。このため、試料100は、培養液101を介して、この気体により加熱される。
As shown in FIGS. 1 and 7, the gas introduced from the
一方、図6に示すように、下部本体18における加熱気体の導入口32から連通孔34に供給された加熱気体は、気体噴出部を構成する下部本体18と下部保持部材19との間の空間36よりシャーレ15の下面に噴出するとともに、同じく気体噴出部を構成する上部本体13と上部保持部材12との間の空間35よりシャーレ15の上面に噴出する。このとき、シャーレ15の蓋体15aと上部本体13との間は上部パッキング14により気密状態とされており、シャーレ15の本体15bと下部本体18との間は下部パッキング16により気密状態とされている。このため、加熱気体の導入口32から供給された加熱気体がシャーレ15の内部に侵入することはない。
On the other hand, as shown in FIG. 6, the heated gas supplied from the
次に、以上のような培養装置を使用して顕微鏡観察等を実行するときの動作について説明する。 Next, an operation when performing microscopic observation or the like using the culture apparatus as described above will be described.
この培養装置を起動させたときには、インキュベータ10と、三方電磁弁53と、流量調整弁54と、流量計55と、加湿機構56と、滅菌フィルター57と、流体加熱器71と、バッファチャンバー61と、循環ポンプ62と、三方電磁弁63とを含む気体の循環路51内には、通常の空気が充満している。このため、三方電磁弁53を切り替えて、気体供給源52から供給される5%の二酸化炭素を含有する空気を気体の循環路51に導入する状態とするとともに、三方電磁弁63を切り替えて、気体の循環路51中を循環する気体を、流量調整弁64を介して気体排出管77に排出する状態とする。この状態で数十秒が経過することにより、気体の循環路51中が5%の二酸化炭素を含有する空気に入れ替わることとなる。
When this culture apparatus is activated, the
また、これと並行して、送風ポンプ59を介して外気の導入管76から流体加熱器72に外気を送風し、加熱された空気をシャーレ15の上面および下面に噴出する。このときの加熱された空気の流量は、流量計58により測定される。このときの加熱された空気の流量は、例えば、毎分12リットルである。これにより、シャーレ15内の培養液101の温度を所定の温度に昇温させた上で所定の温度に維持することが可能となる。このときの気体の温度は、流体加熱器72の温度センサにより測定される。そして、制御部80は、シャーレ15の上面および下面に噴出される気体の温度が適正な温度となるように、温度調整器74を介して、流体加熱器72のヒータを制御する。
In parallel with this, outside air is blown from the outside
この加熱された気体の噴出は、顕微鏡観察等が終了するまで継続される。但し、シャーレ15および培養液101の温度が上昇した後は、加熱された空気の噴出を停止してもよい。
This ejection of the heated gas is continued until the microscopic observation is completed. However, after the temperature of the
次に、流量調整弁64を絞る。これにより、気体の循環路51に供給される気体の量が、気体の循環路51から排出される気体の量より多くなることから、気体の循環路51内の圧力が上昇する。そして、圧力センサ60によりバッファチャンバー61内の圧力、すなわち、気体の循環路51内を循環する気体の圧力を測定する。この気体の循環路51中の圧力が大気圧より設定値ΔPだけ高くなったときに、三方電磁弁53を切り替えて、気体供給源52を気体の循環路51から切り離して気体の循環路51中において気体を循環させる状態とするとともに、三方電磁弁63を切り替えて、流量調整弁64および気体排出管77を気体の循環路51から切り離して気体の循環路51中において気体を循環させる状態とする。
Next, the flow
このときの設定値ΔPは、0.5キロパスカルから10キロパスカルとすることが好ましく、4キロパスカルから7キロパスカルとすることがより好ましい。ΔPがこれより小さくなった場合には、気体の循環路51内に雑菌や粉塵あるいは空気が混入する可能性がある。また、ΔPがこれより大きくなった場合には、シャーレ15が内圧により損傷を受ける可能性がある。
The set value ΔP at this time is preferably 0.5 kilopascals to 10 kilopascals, and more preferably 4 kilopascals to 7 kilopascals. When ΔP becomes smaller than this, there is a possibility that germs, dust or air may be mixed in the
この状態において、循環ポンプ62の作用により、気体の循環路51内において気体を循環させる。このときには、気体の流量は流量計55により測定され、流量調整弁54により、その流量が、例えば、毎分1.8リットル〜2リットル程度となるように調整される。
In this state, the gas is circulated in the
流量を調整された気体は、加湿機構56により加湿され、滅菌フィルター57により雑菌を確実に除去された上で流体加熱器71に送られる。そして、気体の温度が摂氏37度まで昇温された後、この気体がインキュベータ10におけるシャーレ15の側方を囲む気密空間39に供給される。この気体の一部は、シャーレ15内にも侵入する。
The gas whose flow rate is adjusted is humidified by the
このときの気体の温度は、温度センサ38により測定される。そして、制御部80は、気体の循環路51を流れる気体の温度が正確に摂氏37度となるように、温度調整器73を介して、流体加熱器71のヒータ92を制御する。このとき、気体の循環路51にはバッファチャンバー61が配設されていることから、気体の循環路51を流れる気体の総量が大きなものとなっていることから、気体の総量が小さい場合に比べて、気体の温度の変動幅を小さなものとすることが可能となる。
The temperature of the gas at this time is measured by the
なお、温度センサ38により測定した気体の温度により流体加熱器71のヒータ92を制御するかわりに、温度センサ38を省略し、流体加熱器71における温度センサ91により検出された温度に基づいてヒータ92を制御することにより、気体の温度を所定の温度に維持するようにしてもよい。
Instead of controlling the
この状態において、顕微鏡観察等を実行する。顕微鏡観察等を継続して実行した場合には、気体の漏洩により、気体の循環路51を流れる気体の圧力が徐々に低下する。気体の循環路51中の圧力と大気圧との差が設定値(例えば、0.5キロパスカル)より小さくなった場合には、再度、三方電磁弁53を切り替えて、気体供給源52から供給される5%の二酸化炭素を含有する空気を気体の循環路51に導入する状態とするとともに、三方電磁弁63を切り替えて、気体の循環路51中を循環する気体を、流量調整弁64を介して気体排出管77に排出する状態とする。
In this state, microscopic observation or the like is executed. When microscopic observation or the like is continuously performed, the pressure of the gas flowing through the
そして、圧力センサ60により測定したバッファチャンバー61内の気体の圧力、すなわち、気体の循環路51中の圧力が大気圧より設定値ΔPだけ高くなったときに、再度、三方電磁弁53を切り替えて、気体供給源52を気体の循環路51から切り離して気体の循環路51中において気体を循環させる状態とするとともに、三方電磁弁63を切り替えて、流量調整弁64および気体排出管77を気体の循環路51から切り離して気体の循環路51中において気体を循環させる状態とする。このような動作を、顕微鏡観察等が完了するまで繰り返す。
When the pressure of the gas in the
これにより、顕微鏡観察等を実行する場合に、シャーレ15に対して、シャーレ15の側方を囲む気密空間39から摂氏37度に正確に温度制御された気体を供給することが可能となる。このときには、気体の循環路51内を大気圧より高圧に維持することにより、循環使用される気体中に雑菌や粉塵あるいは空気が混入することを防止することができる。このため、気体を循環利用する場合においても、シャーレ15の周囲に温度制御された所望の濃度の気体を清浄な状態で供給することが可能となる。このとき、バッファチャンバー61と圧力センサ60との作用により、循環ポンプ62に起因する脈動等が生じた場合においても、気体の循環路51内における気体の圧力を所定の値に維持することが可能となる。
Thereby, when performing microscopic observation etc., it becomes possible to supply the
このとき、インキュベータ10における下部本体18には下部開口部が形成されており、シャーレ15における本体15bの下面は外部に露出している。このため、顕微鏡の対物レンズ102をシャーレ15の下面に接近させることが可能となる。従って、シャーレ15内の試料100を顕微鏡により好適に観察することが可能となる。
At this time, a lower opening is formed in the
また、インキュベータ10における上部本体13には、上部開口部が形成されていることから、シャーレ15内の試料100を上方から照明し、あるいは、観察することが可能となる。そして、この上部開口部は、透光性を有する上蓋11により覆われていることから、シャーレ15の上面に雑菌や粉塵が落下して付着することを防止することができ、シャーレ15の汚染を防止することが可能となる。
In addition, since the
顕微鏡観察等が終了したときには、シャーレ15をインキュベータ10から取り外す。ここで、このインキュベータ10においては、下部本体18の上面と上部本体13の下面とは傾斜面から構成され、下部本体18と上部本体13とを、オーリング17を介して組み合わせることにより、シャーレ15を囲う構成となっている。このため、このインキュベータ10からシャーレ15を取り出すときには、上部本体13を下部本体18上から除去した後、シャーレ15の側面を把持することが可能となる。このため、シャーレ15の取り出しを容易に実行することが可能となる。
When the microscope observation or the like is completed, the
なお、上述した実施形態においては、下部本体18における加熱気体の導入口32から連通孔34に供給された加熱気体を、シャーレ15の上下両面に噴出させているが、シャーレ15の上面または下面の少なくとも一方に噴出すればよい。しかしながら、試料100を浸漬させた培養液101はシャーレ15の底部に貯留されることから、加熱気体を少なくともシャーレ15の下面に噴出することが好ましい。
In the above-described embodiment, the heated gas supplied from the heated
また、上述した実施形態においては、培養容器としてシャーレ15を使用した場合について説明したが、培養容器としては、例えば、ウエルプレート等を使用してもよい。
In the above-described embodiment, the case where the
10 インキュベータ
11 上蓋
12 上部保持部材
13 上部本体
14 上部パッキング
15 シャーレ
16 下部パッキング
17 オーリング
18 下部本体
19 下部保持部材
20 固定部材
21 レバー
22 フック
31 導入口
32 加熱気体の導入口
33 排出口
38 温度センサ
51 気体の循環路
52 気体供給源
53 三方電磁弁
55 流量計
58 流量計
59 送風ポンプ
60 圧力センサ
61 バッファチャンバー
62 循環ポンプ
63 三方電磁弁
64 流量調整弁
71 流体加熱器
72 流体加熱器
73 温度調節器
74 温度調節器
76 外気の導入管
77 気体排出管
80 制御部
100 試料
101 培養液
102 対物レンズ
DESCRIPTION OF
Claims (6)
気体の導入口と排出口とを備え、前記培養容器を囲むインキュベータと、
前記インキュベータにおける導入口と排出口とに接続された気体の循環路と、
前記気体の循環路中に気体を導入する気体導入部と、
前記気体の循環路中から気体を排出する気体排出部と、
前記気体の循環路中に配設されたポンプと、
前記気体の循環路中に配設された加熱器と、
前記気体の循環路中に配設されたバッファチャンバーと、
前記バッファチャンバー内の気体の圧力を検出する圧力センサと、
を備えたことを特徴とする培養装置。 A culture apparatus for supplying a temperature-controlled gas around a culture container,
An incubator comprising a gas inlet and outlet and surrounding the culture vessel;
A gas circulation path connected to the inlet and outlet in the incubator;
A gas introduction part for introducing gas into the gas circulation path;
A gas discharger for discharging gas from the gas circulation path;
A pump disposed in the gas circulation path;
A heater disposed in the gas circulation path;
A buffer chamber disposed in the gas circulation path;
A pressure sensor for detecting the pressure of the gas in the buffer chamber;
A culture apparatus comprising:
前記気体導入部は、前記気体の循環路に対して気体の供給源を接続するための気体導入用切替弁を有するとともに、
前記気体排出部は、前記気体の循環路を、流量調整部材を介して大気に開放するための気体排出用切替弁を有し、
前記圧力センサによる前記バッファチャンバー内の気体の圧力に基づいて、前記気体導入用切替弁と前記気体排出用切替弁を駆動する制御部をさらに備える培養装置。 The culture apparatus according to claim 1,
The gas introduction part has a gas introduction switching valve for connecting a gas supply source to the gas circulation path,
The gas discharge unit has a gas discharge switching valve for opening the gas circulation path to the atmosphere via a flow rate adjusting member,
A culture apparatus further comprising a control unit that drives the gas introduction switching valve and the gas discharge switching valve based on the pressure of the gas in the buffer chamber by the pressure sensor.
前記制御部は、前記圧力センサにより検出したバッファチャンバー内の気体の圧力が設定値以下となったときに、前記気体導入用切替弁を切り替えて前記気体の循環路を前記気体の供給源と接続するとともに、前記気体排出用切替弁を切り替えて前記気体の循環路を前記流量調整部材を介して大気に開放する培養装置。 The culture apparatus according to claim 2, wherein
The control unit switches the gas introduction switching valve to connect the gas circulation path to the gas supply source when the gas pressure in the buffer chamber detected by the pressure sensor becomes a set value or less. In addition, a culture apparatus that switches the gas discharge switching valve to open the gas circulation path to the atmosphere via the flow rate adjusting member.
前記流量調整部材は、前記気体排出用切替弁を介して大気中に排出される気体の流量を調整する流量調整弁である培養装置。 The culture apparatus according to claim 3,
The culture apparatus, wherein the flow rate adjusting member is a flow rate adjusting valve that adjusts a flow rate of gas discharged into the atmosphere via the gas discharge switching valve.
前記加熱器は、耐熱性を有する管状体の内部にヒータを備え、前記管状体内を通過する気体を加熱する流体加熱器から構成され、
当該流体加熱器は、前記気体の循環路における前記インキュベータの気体の導入口に配設される培養装置。 In the culture apparatus in any one of Claims 1-4,
The heater includes a heater inside a tubular body having heat resistance, and includes a fluid heater that heats a gas passing through the tubular body,
The fluid heater is a culture apparatus disposed at a gas inlet of the incubator in the gas circulation path.
前記インキュベータは、前記培養容器の側方を囲む気密空間を形成する構成を有するとともに、
前記培養容器の上面または前記培養容器の底面の少なくとも一方に対して加熱された気体を噴出するための気体噴出機構をさらに備える培養装置。
In the culture apparatus in any one of Claims 1-5,
The incubator has a configuration that forms an airtight space surrounding the side of the culture vessel,
A culture apparatus further comprising a gas ejection mechanism for ejecting heated gas to at least one of the upper surface of the culture vessel or the bottom surface of the culture vessel.
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JP2015189248A JP2017063617A (en) | 2015-09-28 | 2015-09-28 | Culture apparatus |
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Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE102018204675A1 (en) | 2017-03-28 | 2018-10-04 | Ngk Insulators, Ltd. | Process for producing a honeycomb structure |
WO2020017022A1 (en) * | 2018-07-20 | 2020-01-23 | 株式会社島津製作所 | Shaking device and analysis method |
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2015
- 2015-09-28 JP JP2015189248A patent/JP2017063617A/en active Pending
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