JP2016515814A - 増大したレバウジオシドd含量を有するステビア属植物 - Google Patents
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Abstract
Description
レバウジオシドA、B、C、D、E、F、MおよびNは、それぞれrebA、rebB、rebC、rebD、rebE(又はRE)、rebF、rebM(又はRM)およびrebNと表記される。
高rebD含量を有する植物は、rebDおよびrebA/(rebA+ステビオシド)が図3において示されるようにプロットされた場合に、異なる集団を形成することが見出され得る。このような植物は、精製されたrebDおよび他のレバウジオシド類を得るために望ましいだけでなく、rebDおよび他のグリコシド類(rebA、rebE、rebM、およびrebNが挙げられるがこれらに限定されない)を含む組成物を得るためにも望ましい。このような組成物は、低カロリー甘味料として、食物産業において有用である。この組成物は、有益には、ある個体に対して、ステビオシドなどの、苦い構成要素又は望ましくない味/後味を有する構成要素を、限定的な量でしか含まなくてもよい。
1.1種以上のステビア属植物又はステビア属品種であって、上記1種以上の植物又は上記品種の葉(例えば、発芽3〜4か月後に収穫された葉)が、乾燥したステビア属の葉の約0.5重量%より多いrebDを含む、上記1種以上のステビア属植物又はステビア属品種。
中国およびアルゼンチン(AR)から回収されたステビア属生殖細胞質を、高、中程度および低rebAおよびrebD含量に基づいて、3つの遺伝子群に分類した。各群から4つの系統を選択し、別個のテントに保存した(テント1:高rebAおよびrebD植物、テント2:中程度rebAおよびrebD植物、およびテント3:低rebAおよびrebD植物;表1を参照されたい)。種子は、温室内に入れた各テントにおいて、一般のイエバエ(ムスカ・ドメスティカ(Musca domestica))を花粉媒介者として用いて産生した。
実施例2(A部)葉抽出
ステビア属植物から収穫した葉を、約68℃にて24時間にわたって乾燥させ、分析するまでインタクトなまま保存する。葉を挽き、乾燥葉粉末にする。10mlの水を、蓋をした15mLのチューブ内の0.1gの葉粉末を加える。混合して葉粉末を濡らした後、サンプルを、50℃の湯浴に1時間置き、15分毎に混合する。サンプルを、0.45 μmナイロンフィルターを通して濾過し、液体クロマトグラフィー容器内に入れる。
上の2Aからの濾過サンプルを、UV−可視光検出器(Waters 2487二重波長又は均等物)を備えた高速液体クロマトグラフィー(HPLC)システム(Waters 2695又は均等物)に加熱しながら入れた。分析のために、HPLCに、250mm×4.6mm、5μm C18カラム(Capcell pak MGII、Shiseido Co.Ltd.又は均等物)およびガードカラム(Phenomenex,C18 4×2.0mm、P/N AJ0−4286インサート又は均等物を備えたPhenomenex,KJ0−4282)を供給した。サンプルを水中で調製し、以下の表において示される勾配溶出方法によって分析した。
親植物のグリコシド含量(各親単離物を異なる2回で評価した表5を参照されたい)および実施例1における交配スキームによって開発された選択された子孫を、実施例2に概説した方法を用いてHPLCによって分析する。水分について修正した乾燥葉のグリコシドの重量に基づき0.5%より高いrebDを含む植物を、高rebD植物であるとみなす。高rebD植物のサブセットは、0.5%を超えるrebDを含み、0.8(又は80%の百分率として表す)を超えるrebA(rebA+ステビオシド)比を有する。高rebDに加え、以下で記載する植物は、高レベルのより高級なグリコシド、例えばrebNを含み得る。このような植物は、0.5%より多くのrebD、並びに合わせて0.4%のrebE+rebN+rebM、並びにより高い全グルコシド含量を含む。
実施例1からのガンマ線突然変異誘発によって産生された幾つかのステビア属植物を、多交雑して、種子を産生した。多交雑した植物からの種子を、実施例1に記載したものと同じ方法を用いて第2のガンマ線誘発突然変異誘発に供し、次いで、発芽させて植物を産生した。第2突然変異誘発に供した選択植物からの葉を、実施例2および3に記載したように乾燥させて分析した。葉のグリコシド含量を、表7に挙げる。
Claims (19)
- 1種以上のステビア属植物又はステビア属品種であって、前記1種以上の植物又は前記品種の葉が、乾燥したステビア属の葉の約0.5重量%より多いrebDを含む、前記1種以上のステビア属植物又はステビア属品種。
- 前記1種以上の植物又は前記品種の葉は、乾燥重量の約0.5重量%、0.55重量%、0.6重量%、0.65重量%、0.7重量%、0.75重量%、0.8重量%、0.85重量%、0.9重量%、0.95重量%、1重量%、1.05重量%若しくは1.1重量%よりも大きいか又はこれに等しいrebD含量、又は約0.5重量%〜約1重量%、約1.0重量%〜約1.5重量%、又は約1.5重量%〜約2.0重量%のrebD含量を有する請求項1に記載の1種以上のステビア属植物又はステビア属品種。
- 前記1種以上の植物は、乾燥重量の15重量%、14重量%、13重量%、12重量%、11.5重量%、11重量%、10重量%、9重量%、8重量%、7重量%、6.5重量%、6重量%、5.5重量%、5.25重量%、5重量%、4.75重量%又は4.6重量%未満であるrebA含量を有する、請求項1又は2に記載の1種以上のステビア属植物。
- rebA含量が、乾燥重量の約4重量%、4.2重量%、4.4重量%、4.5重量%、5重量%、5.25重量%又は5.5重量%よりも多い、請求項1又は2に記載の1種以上のステビア属植物。
- ステビオシド含量が、乾燥重量の約0.65重量%、0.70重量%、0.75重量%、0.80重量%、0.85重量%、0.90重量%、0.92重量%、0.93重量%、0.94重量%又は1.29重量%未満である、請求項1又は2に記載の1種以上のステビア属植物。
- ステビオシド含量が、乾燥重量の約0.3重量%、0.35重量%又は0.4重量%より多い、請求項1又は2に記載の1種以上のステビア属植物。
- rebA/(rebA+ステビオシド)比が、約0.65、0.70、0.75、0.80、0.85、0.90、0.92、0.93、0.94又は0.95より高く、且つ前記比は1未満である、請求項1又は2に記載の1種以上のステビア属植物。
- rebA/(rebA+ステビオシド)比が、約0.85、0.90、0.92、0.93、0.94又は0.95より高く、且つ前記比は1未満である、請求項1又は2に記載の1種以上のステビア属植物。
- (RebE+RebM+RebN)の合計が、乾燥重量の約0.4重量%、0.5重量%又は0.6重量%より多い、請求項1又は2に記載の1種以上のステビア属植物。
- 請求項1又は2に記載の1種以上のステビア属植物由来の種子。
- 請求項1又は2に記載の植物由来の組織。
- 請求項1又は2に記載の植物の葉、幹、苗条又は細胞。
- 請求項1又は2に記載の植物の種子、組織、葉、幹又は細胞を含む組成物であって、前記種子、組織、葉、幹又は細胞は、収穫、乾燥、粉末化、凍結乾燥、化学的破砕、機械的破砕、又は物理的破砕されている、組成物。
- 請求項13に記載の組成物を含む、食物又は飲料に甘味付与するための組成物。
- 前記組成物は、1.5%未満のステビオシドを含む、請求項13に記載の組成物。
- 請求項13に記載の組成物を調製することを含む、rebDを含み且つ必要に応じてrebAを含む組成物を調製するプロセス。
- rebD、および請求項1又は2に記載の植物から調製されたことを同定するために充分な遺伝物質を含む抽出物であって、前記抽出物は、必要に応じて、rebA、rebC、rebFの任意の1以上を含む、前記抽出物。
- 請求項17に記載の抽出物を含む、甘味料組成物。
- 請求項1又は2に記載の1種以上の高rebD植物を含む品種。
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