JP2015504177A - 成形されたビームを用いた定量用非線形光学顕微鏡 - Google Patents
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Abstract
Description
−“Two-photon excitation fluorescence microscopy with a high depth of field using an axicon”; Pascal Dufour et al., Applied Optics/vol. 45, No. 36/ 20 December 2006;
−“Scanning two photon fluorescence microscopy with extended depth of field”; E. J. Botcherby et al., Optics Communications 268 (2006) 253-260;
−“Rapid three-dimensional isotropic imaging of living cells using Bessel beam plane illumination”; Thomas A Planchon et al., Nature Methods/vol.8 No.5/May 2011;及び
−“Two-photon microscopy with simultaneous standard and extended depth of field using a tunable acoustic gradient-index lens”; Nicolas Olivier et al., Optics Letters/vol.34, No.11/June 1, 2009。
−パルスレーザービームの光源、
−前記パルスレーザービームの空間的な特性を変調する空間的な光変調器、
−前記変調されたビームを、標本を有する所望のスライドに誘導する対物レンズ、及び
−前記標本から発せられるシグナルを収集する検出手段。
−白色光の光源
−白色光をスライドに誘導する集光器、及び
−スライドから発せられる白色光より像を生成するカメラ
−アキシコンレンズ又はコニカルレンズ
−回折素子
−液晶変調器、及び
−変調が可能な、音響型の液体レンズ。
−繊維状コラーゲン固有の二次高調波発生(SHG)シグナルを使用したコラーゲンの定量的な像の生成への応用、
−三次高調波発生(THG)、干渉性反ストークスラマン散乱(CARS)、誘導ラマン散乱(SRS)及び/又は四波混合(FWM)を使用した組織中の脂質含有量に関する定量的な像の生成、及び
−二光子又は三光子励起蛍光シグナルを使用した、細胞内又は細胞外の、例えばエラスチン等の、定量的な像の生成。
又は他の空間的な光変調器であって、ベッセル型に成形することができるものを備える。
Claims (14)
- パルスレーザービーム(3)の光源(2)、
前記パルスレーザービームの空間的な特性を変調する空間的な光変調器(4)、
前記変調されたビーム(5)を、標本(7)を有する所望のスライド(8)に誘導する対物レンズ(6)、及び
前記標本から発せられるシグナルを収集する検出手段(9,10):
を備える非線形光学顕微鏡であって、
前記空間的な光変調器(4)は、前記対物レンズ(6)で集束させた後に、軸に沿って伸長され、かつ一の横方向又は二つの横方向に拘束されたビームを生ずるように、対物レンズ(6)の後ろ側の瞳(rear pupil)上で前記パルスレーザービーム(3)の強度及び/又は位相を変調するものであり、かつ、
前記スライド(8)は、組織学的なスライド用の走査機構の動力化されたステージ上に載置されることを特徴とする、
非線形光学顕微鏡。 - 前記変調されたビームは、前記対物レンズ(6)の後ろ側の瞳(rear pupil)上において環構造の強度分布を有する形状で形成されたベッセルビーム(5)であることを特徴とする、
請求項1に記載の顕微鏡。 - 前記スライド用の走査機構は、
白色光の光源(11)と、
前記白色光を前記スライド(8)に誘導する集光器(12)と、
前記スライド(8)から発せられる前記白色光より像を生成するカメラ(13)と、を備えることを特徴とする、
請求項1又は2に記載の顕微鏡。 - 伝播するシグナルを検出するために、パルスレーザービーム(3)の伝播に関して、前記検出手段(9,10)は前記スライド(8)の下流に設置される集光器(12)及び検出器(10)を備えることを特徴とする、
請求項1−3のいずれかに記載の顕微鏡。 - 前記検出手段(9,10)は、スライド(8)から反射してくるシグナルを検出するために配置される検出器(9)を備えることを特徴とする、
請求項1−4のいずれかに記載の顕微鏡。 - 前記対物レンズ及び前記集光器(6,12)は、前記スライド(8)の両側にそれぞれ配置されることを特徴とする、
請求項3−5のいずれかに記載の顕微鏡。 - 前記対物レンズ(6)の開口数は0.5より大きいことを特徴とする、
請求項1−6のいずれかに記載の顕微鏡。 - 前記パルスレーザービーム(3)はフェムト秒のパルス列であることを特徴とする、
請求項1−7のいずれかに記載の顕微鏡。 - 前記パルスレーザービームは約10MHzよりも大きい繰り返し頻度を有し、かつ数百ミリワットの出力を有することを特徴とする、
請求項1−8のいずれかに記載の顕微鏡。 - 前記空間的な光変調器(4)はアキシコン、回折素子、液晶変調器、及び変調が可能な液体レンズから選ばれる素子を備えることを特徴とする、
請求項1−9のいずれかに記載の顕微鏡 - 前記レーザービームの掃引手段をさらに備えることを特徴とする、
請求項1−10のいずれかに記載の顕微鏡。 - 繊維状コラーゲン固有の二次高調波発生(SHG)シグナルを使用することでコラーゲンの定量的な像を生成するための、
請求項1−11のいずれかに記載の顕微鏡の応用。 - 三次高調波発生(THG)、干渉性反ストークスラマン散乱(CARS)、誘導ラマン散乱(SRS)及び/又は四波混合(FWM)を使用することで組織中の脂質含有量に関する定量的な像を生成するための、
請求項1−11のいずれかに記載の顕微鏡の応用。 - 二光子又は三光子励起蛍光シグナルを使用することで細胞内又は細胞外の定量的な像を生成するための、
請求項1−11のいずれかに記載の顕微鏡の応用。
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