JP2015136647A - Separation container kit - Google Patents
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Abstract
Description
本発明は、分離容器キットに関する。 The present invention relates to a separation container kit.
***からの***の分離、血液からの血球の分離等には、例えば、密度勾配を利用した遠心分離法が広く採用されている。前記密度遠心勾配法は、例えば、以下のようにして行うことができる。まず、遠沈管にパーコールを入れ、前記パーコールに、***試料を重層し、遠心分離を行う。これによって密度勾配が形成され、***は、沈降して最下層に分離される。そこで、前記遠沈管の内部にピペットを挿入し、前記ピペットの先端を前記最下層まで到達させ、吸引することにより、前記***を回収できる。しかしながら、前記ピペットを、前記遠沈管の上部から挿入し、その先端を前記最下層まで移動させることから、前記パーコールの中層付近に存在する成分が前記ピペットに付着する。このため、採取した***サンプル中に、不要な成分が混入するという問題がある。そこで、このような問題を回避するための分離容器の開発が進められている（特許文献１）。 For separation of sperm from semen, separation of blood cells from blood, and the like, for example, a centrifugal separation method using a density gradient is widely employed. The density centrifugal gradient method can be performed, for example, as follows. First, percoll is put into a centrifuge tube, and a semen sample is overlaid on the percoll, followed by centrifugation. This creates a density gradient and the sperm settles and separates into the bottom layer. Therefore, the sperm can be collected by inserting a pipette into the centrifuge tube, allowing the tip of the pipette to reach the lowest layer, and sucking. However, since the pipette is inserted from the upper part of the centrifuge tube and its tip is moved to the lowermost layer, components existing in the vicinity of the middle layer of Percoll adhere to the pipette. For this reason, there exists a problem that an unnecessary component mixes in the extract | collected sperm sample. Therefore, development of a separation container for avoiding such a problem is underway (Patent Document 1).
本発明者は、このような不要成分の混入を防止する分離容器として、外容器と内容器とから構成される新たな分離容器を開発するに到っている。前記分離容器は、上端および下端が開口した筒状の内容器と、上端が開口し、下端が閉口した有底筒状の外容器とを有する。この分離容器は、例えば、まず、前記外容器の内部に前記内容器を挿入し、前記内容器の内部に前記パーコール液を導入し、前記パーコール液に***試料を重層して、遠心分離機にセットして、遠心分離を行う。これにより、前記内容器に重層された***中の***が沈降し、前記内容器の下端の開口部から前記外容器に***が導入される。遠心後、前記内容器の上端開口部にキャップを装着して、前記内容器の内部を液密状態にすれば、前記内容器内のパーコール液および***試料が漏れることなく、前記外容器から前記内容器を取り出すことができる。前記外容器には、沈降した***が存在することから、前述のように、不純物を含有する前記パーコール液にピペットを挿入することなく、***を回収できる。 The present inventor has developed a new separation container composed of an outer container and an inner container as a separation container for preventing such unnecessary components from being mixed. The separation container includes a cylindrical inner container having an upper end and a lower end opened, and a bottomed cylindrical outer container having an upper end opened and a lower end closed. This separation container is, for example, firstly inserted the inner container into the outer container, introduces the Percoll solution into the inner container, overlays a semen sample on the Percoll solution, and puts it in a centrifuge. Set and centrifuge. As a result, sperm in the semen layered on the inner container settles, and sperm is introduced into the outer container from the opening at the lower end of the inner container. After centrifugation, if a cap is attached to the upper end opening of the inner container to make the inside of the inner container liquid-tight, the Percoll solution and semen sample in the inner container will not leak and the The inner container can be taken out. Since the outer container contains settled sperm, as described above, sperm can be collected without inserting a pipette into the Percoll solution containing impurities.
しかしながら、前記内容器に前記キャップを装着して、前記遠心分離機から前記キャップを把持して取り出した場合、前記内容器のみが保持され、前記外容器が抜け落ちてしまう。また、前記外容器が、キャップが装着されていない開放系の状態で、前記遠心分離機内に残されると、開放系の状態では、前記外容器内に沈降した***が汚染されるおそれもある。 However, when the cap is attached to the inner container and the cap is gripped and taken out from the centrifuge, only the inner container is held and the outer container falls off. In addition, if the outer container is left in the centrifuge in an open state without a cap attached, the sperm settled in the outer container may be contaminated in the open state.
そこで、本発明は、例えば、取扱い中において、外容器の抜け落ちを防止し、また、前記外容器の内部の汚染を防止可能な分離容器キットの提供を目的とする。 Therefore, an object of the present invention is to provide a separation container kit capable of preventing the outer container from falling off during handling and preventing contamination inside the outer container.
前記目的を達成するために、本発明の分離容器キットは、液体試料から分離対象物を分離するための分離容器キットであって、
分離容器およびキャップを含み、
前記分離容器は、
内容器および外容器を含み、
前記内容器は、
上端および下端が開口した筒状であり、
前記外容器は、
上端が開口し、下端が閉口した有底筒状であり、
前記内容器および前記外容器は、
それぞれの上下方向を揃えた状態で、前記外容器の内部に前記内容器を挿入可能であり、
前記キャップは、
前記内容器の上端開口部および前記外容器の上端開口部を覆う大きさであり、
前記内容器の上端開口部に対する第１嵌合部を含み、
前記第１嵌合部は、前記内容器の上端開口部に嵌合することで、前記内容器の内部を液密状態にでき、
前記内容器と前記外容器とは、下記（１）および（２）のいずれかによって、嵌合できることを特徴とする。
（１）前記キャップが、さらに、前記外容器の上端開口部に対する第２嵌合部を含み、前記キャップが前記第１嵌合部で前記内容器と嵌合した状態において、前記キャップが前記第２嵌合部で前記外容器と嵌合できる。
（２）前記外容器が、前記内容器と嵌合する第３嵌合部を含み、前記キャップが前記第１嵌合部で前記内容器と嵌合した状態において、前記外容器が前記第３嵌合物で前記内容器と嵌合できる。
To achieve the above object, the separation container kit of the present invention is a separation container kit for separating a separation object from a liquid sample,
Including a separation container and a cap,
The separation container is
Including inner and outer containers,
The inner container is
It has a cylindrical shape with an open top and bottom,
The outer container is
It is a bottomed cylinder with an open top and a closed bottom,
The inner container and the outer container are
With the respective vertical directions aligned, the inner container can be inserted into the outer container,
The cap is
It is a size that covers the upper end opening of the inner container and the upper end opening of the outer container,
Including a first fitting portion with respect to the upper end opening of the inner container;
The first fitting portion can be fitted into the upper end opening of the inner container to make the inside of the inner container liquid-tight,
The inner container and the outer container can be fitted by any one of the following (1) and (2).
(1) The cap further includes a second fitting portion with respect to an upper end opening of the outer container, and the cap is fitted with the inner container at the first fitting portion. Two fitting parts can be fitted to the outer container.
(2) In a state where the outer container includes a third fitting portion that fits with the inner container, and the cap is fitted with the inner container at the first fitting portion, the outer container is the third fitting portion. The fitting can be fitted to the inner container.
本発明の分離容器キットによれば、前記キャップと前記内容器と前記外容器とが、それぞれ嵌合によって一体化される。このため、例えば、前記キャップを把持することによって、前記内容器だけでなく、前記外容器も同時に扱うことが可能であり、前記外容器のみが抜け落ちることを防止できる。また、例えば、遠心分離後、遠心分離機内で、前記外容器のみが開放状態で放置されることがない。このため、例えば、遠心分離後、前記遠心分離機から前記内容器と前記外容器とを同時に取り出した後、前記外容器から前記内容器を取り出して、すぐに、前記外容器を密封して、汚染を防ぐことも可能である。このため、本発明は、***や血球等の分離において、非常に有用なツールといえる。 According to the separation container kit of the present invention, the cap, the inner container, and the outer container are integrated by fitting. For this reason, for example, by gripping the cap, not only the inner container but also the outer container can be handled at the same time, and only the outer container can be prevented from falling off. For example, after centrifugation, only the outer container is not left open in the centrifuge. For this reason, for example, after centrifugation, after the inner container and the outer container are simultaneously taken out from the centrifuge, the inner container is taken out from the outer container, and immediately, the outer container is sealed, It is also possible to prevent contamination. For this reason, the present invention can be said to be a very useful tool in the separation of sperm, blood cells and the like.
本発明の分離容器キットは、前述のように、液体試料から分離対象物を分離するための分離容器キットであって、
分離容器およびキャップを含み、
前記分離容器は、
内容器および外容器を含み、
前記内容器は、
上端および下端が開口した筒状であり、
前記外容器は、
上端が開口し、下端が閉口した有底筒状であり、
前記内容器および前記外容器は、
それぞれの上下方向を揃えた状態で、前記外容器の内部に前記内容器を挿入可能であり、
前記キャップは、
前記内容器の上端開口部および前記外容器の上端開口部を覆う大きさであり、
前記内容器の上端開口部に対する第１嵌合部を含み、
前記第１嵌合部は、前記内容器の上端開口部に嵌合することで、前記内容器の内部を液密状態にでき、
前記内容器と前記外容器とは、下記（１）および（２）のいずれかによって、嵌合できることを特徴とする。
（１）前記キャップが、さらに、前記外容器の上端開口部に対する第２嵌合部を含み、前記キャップが前記第１嵌合部で前記内容器と嵌合した状態において、前記キャップが前記第２嵌合部で前記外容器と嵌合できる。
（２）前記外容器が、前記内容器と嵌合する第３嵌合部を含み、前記キャップが前記第１嵌合部で前記内容器と嵌合した状態において、前記外容器が前記第３嵌合物で前記内容器と嵌合できる。
The separation container kit of the present invention is a separation container kit for separating a separation object from a liquid sample as described above,
Including a separation container and a cap,
The separation container is
Including inner and outer containers,
The inner container is
It has a cylindrical shape with an open top and bottom,
The outer container is
It is a bottomed cylinder with an open top and a closed bottom,
The inner container and the outer container are
With the respective vertical directions aligned, the inner container can be inserted into the outer container,
The cap is
It is a size that covers the upper end opening of the inner container and the upper end opening of the outer container,
Including a first fitting portion with respect to the upper end opening of the inner container;
The first fitting portion can be fitted into the upper end opening of the inner container to make the inside of the inner container liquid-tight,
The inner container and the outer container can be fitted by any one of the following (1) and (2).
(1) The cap further includes a second fitting portion with respect to an upper end opening of the outer container, and the cap is fitted with the inner container at the first fitting portion. Two fitting parts can be fitted to the outer container.
(2) In a state where the outer container includes a third fitting portion that fits with the inner container, and the cap is fitted with the inner container at the first fitting portion, the outer container is the third fitting portion. The fitting can be fitted to the inner container.
本発明において、「嵌合」は、例えば、差し込みによる嵌合（挿嵌）、ねじ作用による嵌合（螺合）等の意味も含む。 In the present invention, “fitting” includes meanings such as fitting by insertion (insertion), fitting by screw action (screwing), and the like.
本発明の分離容器キットは、前記（１）と（２）のいずれの形態であってもよい。 The separation container kit of the present invention may be in any form of (1) and (2).
前記（１）の形態の場合、例えば、前記キャップは、円状基板、第１環状壁および第２環状壁を含み、前記円状基板の一方の表面において、同心円状に、内側に前記第１環状壁、外側に前記第２環状壁が形成され、前記第１環状壁が、前記第１嵌合部であり、前記第２環状壁が、前記第２嵌合部である。このように、前記キャップが、前記内容器に対する第１嵌合部と前記外容器に対する第２嵌合部とを有することで、前記キャップを把持した際に、前記内容器だけでなく、前記外容器についても、一体として取り扱うことができる。 In the case of the form (1), for example, the cap includes a circular substrate, a first annular wall, and a second annular wall, and concentrically on one surface of the circular substrate, the first inward. The second annular wall is formed outside the annular wall, the first annular wall is the first fitting portion, and the second annular wall is the second fitting portion. Thus, when the cap has the first fitting portion with respect to the inner container and the second fitting portion with respect to the outer container, when the cap is gripped, not only the inner container but also the outer The container can also be handled as a unit.
前記（１）の形態において、前記第１嵌合部および前記第２嵌合部の嵌合状態は、それぞれ、特に制限されない。具体例として、例えば、前記第１環状壁（第１嵌合部）は、前記内容器の前記開口部に対して内嵌合し、前記第２環状壁（第２嵌合部）は、例えば、前記外容器の前記開口部に対して外嵌合する。 In the form (1), the fitting states of the first fitting portion and the second fitting portion are not particularly limited. As a specific example, for example, the first annular wall (first fitting portion) is internally fitted to the opening of the inner container, and the second annular wall (second fitting portion) is, for example, The outer fitting is performed with respect to the opening of the outer container.
前記（２）の形態の場合、例えば、前記キャップは、前記（１）の形態と同様に、円状基板および第１環状壁を含み、前記円状基板の一方の表面において、前記第１環状壁が形成され、前記第１環状壁が、前記第１嵌合部である。 In the case of the form (2), for example, the cap includes a circular substrate and a first annular wall as in the form (1), and the first annular shape is formed on one surface of the circular substrate. A wall is formed, and the first annular wall is the first fitting portion.
前記外容器の前記第３嵌合部は、例えば、前記外容器と前記内容器とが嵌合できればよく、その形態は、特に制限されない。 The third fitting portion of the outer container is not particularly limited as long as the outer container and the inner container can be fitted, for example.
具体例として、前記外容器は、例えば、前記内容器を前記外容器に挿入した状態において、前記内容器の外周直径よりも大きい内周直径の領域を含み、前記領域が、前記第３嵌合部である。 As a specific example, the outer container includes, for example, a region having an inner peripheral diameter larger than the outer peripheral diameter of the inner container in a state where the inner container is inserted into the outer container, and the region is the third fitting. Part.
また、その他の具体例として、例えば、前記外容器が前記第３嵌合部を含み、前記内容器が前記第３嵌合部と対応する第４嵌合部を含み、前記第３嵌合部と前記第４嵌合部とが、雄ネジと雌ネジとの組合せであってもよい。前記第３嵌合部と前記第４嵌合部との組合せは、例えば、爪によるロック機構等でもよい。 As another specific example, for example, the outer container includes the third fitting portion, the inner container includes a fourth fitting portion corresponding to the third fitting portion, and the third fitting portion. The fourth fitting portion may be a combination of a male screw and a female screw. The combination of the third fitting portion and the fourth fitting portion may be, for example, a claw lock mechanism.
本発明の分離容器キットにおいて、前記外容器および前記内容器は、それぞれ筒状であればよいが、特に、円筒状が好ましい。 In the separation container kit of the present invention, each of the outer container and the inner container may be cylindrical, but a cylindrical shape is particularly preferable.
前記外容器および前記内容器は、前記外容器の内部に前記内容器を挿入可能であればよく、形状等は、特に制限されない。 The outer container and the inner container are not particularly limited as long as the inner container can be inserted into the outer container.
前記内容器の外周面と前記外容器の内周面は、それぞれ、対応する係止部を有することが好ましい。このような形態とすることで、例えば、前記外容器の内部に前記内容器を挿入する際、互いの係止部を接触させることで、前記外容器と前記内容器とを係止可能である。 It is preferable that the outer peripheral surface of the inner container and the inner peripheral surface of the outer container each have a corresponding locking portion. By adopting such a configuration, for example, when the inner container is inserted into the outer container, the outer container and the inner container can be locked by bringing the locking portions into contact with each other. .
前記内容器は、その上部の外周面に、突起部を有することが好ましく、前記突起部は、環状突起部であることがより好ましい。前記環状突起部は、その外周面の直径が、前記外容器の上端の内周面の直径よりも大きいことが好ましい。このような形態とすることで、例えば、前記外容器の内部に前記内容器を挿入する際、前記環状突起部の底面が、前記外容器の開口部の端面に接触することで、前記内容器の挿入位置を固定可能である。 The inner container preferably has a protrusion on the outer peripheral surface of the upper part, and the protrusion is more preferably an annular protrusion. It is preferable that a diameter of the outer peripheral surface of the annular protrusion is larger than a diameter of the inner peripheral surface of the upper end of the outer container. By adopting such a form, for example, when the inner container is inserted into the outer container, the bottom surface of the annular protrusion comes into contact with the end surface of the opening of the outer container, so that the inner container The insertion position can be fixed.
以下に、本発明の例として、前記（１）の形態を、図１〜図３を用いて説明する。なお、本発明は、この例示には制限されない。各図は、それぞれ同一箇所には同一符号を付している。 Below, the form of said (1) is demonstrated using FIGS. 1-3 as an example of this invention. In addition, this invention is not restrict | limited to this illustration. In each figure, the same reference numerals are assigned to the same portions.
図１は、分離容器の一例を示す概略図であり、（Ａ）は、外容器の断面図、（Ｂ）は、内容器の断面図、（Ｃ）は、外容器の内部に内容器を挿入した分離容器の断面図である。図２は、キャップの一例を示す概略図であり、（Ａ）は、キャップの平面図、（Ｂ）は、前記（Ａ）のキャップのＩ−Ｉ方向断面図であり、（Ｃ）は、下方向からの斜視図であり、（Ｄ）は、上方向からの斜視図である。図３は、前記キャップを装着した分離容器の一例であり、（Ａ）は、キャップを嵌合した分離容器の断面図であり、（Ｂ）は、キャップを嵌合した内容器の断面図であり、（Ｃ）は、キャップを嵌合した外容器の断面図である。 FIG. 1 is a schematic view showing an example of a separation container, (A) is a cross-sectional view of an outer container, (B) is a cross-sectional view of an inner container, and (C) is an inner container inside the outer container. It is sectional drawing of the inserted separation container. FIG. 2 is a schematic view showing an example of a cap, (A) is a plan view of the cap, (B) is a cross-sectional view in the II direction of the cap of (A), and (C) is It is a perspective view from a lower direction, (D) is a perspective view from an upper direction. FIG. 3 is an example of a separation container fitted with the cap, (A) is a sectional view of the separation container fitted with the cap, and (B) is a sectional view of the inner container fitted with the cap. Yes, (C) is a cross-sectional view of an outer container fitted with a cap.
図１（Ａ）に示すように、外容器１０は、上端に開口部１０４を有する有底の円筒状であり、本体部１０１、テーパー部１０２および先端部１０３から構成される。図１（Ｂ）に示すように、内容器１１は、上端の開口部１１４および下端の開口部１１３を含み、本体部１１１、テーパー部１１２から構成され、本体部１１１の上部の外周面に、環状突起部１１５を有する。環状突起部１１５は、例えば、内容器１１の把持部となる。そして、図１（Ｃ）に示すように、外容器１０の内部に、内容器１１が挿入される。内容器１１の環状突起部１１５は、その下面が、外容器１０の開口部１０４の端面に接触するため、外容器１０内への内容器１１の挿入位置が固定化できる。図１（Ｃ）において、外容器１０に内容器１１を挿入した際、外容器の先端部１０３であって、内容器１１の下端よりも下方向の領域は、収容部１０５となる。収容部１０５は、例えば、後述するように、内容器１１内からの沈殿物を収容できる。
As shown in FIG. 1A, the
図２（Ａ）〜（Ｄ）に示すように、キャップ２０は、円状基板２４、第１環状壁２１、第２環状壁２２および把持部２３を有する。円状基板２４の下表面において、同心円状に、内側に第１環状壁２１、外側に第２環状壁２２が形成され、円状基板２４の上表面において、把持部２３が形成されている。そして、円状基板２４の下面においては、第１環状壁２１と第２環状壁２２との間に、環状溝が形成される。第１環状壁２１は、内容器１１に対する第１嵌合部２１であり、第２環状壁２２は、外容器１０に対する第２嵌合部２２である。
As shown in FIGS. 2A to 2D, the
内容器１１および外容器１０を備える分離容器１に対するキャップ２０の装着について、以下に説明する。図３（Ａ）は、外容器１０の内部に内容器１１を挿入した分離容器に対するキャップの装着を示す。キャップ２０の第１環状壁２１を、内容器１１の開口部１１４に挿入する。この際、キャップ２０の第１環状壁２１の外周面と内容器１１の上側端部の内周面とを接触させて、キャップ２０の第１環状壁２１を内容器１１に内嵌合させる。キャップ２０の装着により、内容器１１の内部は、液密状態となる。また、キャップ２０は、内容器１１への嵌合とともに、外容器１０とも嵌合させる。具体的には、キャップ２０の第２環状壁２２の内周面と外容器１０の上側端部の外周面とを接触させて、キャップ２０の第２環状壁を外容器１０に外嵌合させる。キャップ２０の装着により、外容器１０は、内容器１１と間接的に一体化されることになる。このため、キャップ２０の把持部２３を把持することで、内容器１１だけでなく、外容器１０も同時に取り扱うことができる。
The mounting | wearing of the
図３（Ｂ）は、内容器１１に対するキャップの装着を示し、図３（Ａ）における内容器１１およびキャップ２０と同様の状態である。図３（Ｃ）は、外容器１０に対するキャップ２０の装着を示し、図３（Ａ）における外容器およびキャップ２０と同様の状態である。
FIG. 3B shows attachment of the cap to the
各部材の大きさは、特に制限されず、例えば、外容器１０への内容器１１の挿入、キャップ２０の外容器１０および内容器１１への嵌合が可能であればよい。各部材の大きさを、以下に例示する。本発明において、「軸方向」とは、内容器１１、外容器１０およびキャップ２０の軸方向であって、上下方向を意味し、「垂直方向」とは、前記軸方向に対して垂直の方向を意味し、「高さ」とは、前記軸方向の長さをいい、「直径」とは、前記垂直方向の断面における直径を意味する。
The size of each member is not particularly limited as long as the
外容器１０の大きさは、例えば、以下の条件が例示できる。全体の容量は、例えば、０．５〜１００ｍＬであり、好ましくは１．０〜５０ｍＬである。外容器１０全体の内部の高さは、例えば、３０〜２００ｍｍであり、好ましくは５０〜１２０ｍｍである。本体部１０１の高さは、例えば、８０〜１２０ｍｍであり、好ましくは１０５〜１１５ｍｍである。テーパー部１０２の高さは、例えば、５〜２０ｍｍであり、好ましくは１０〜１５ｍｍである。先端部１０３の高さは、例えば、５〜１５ｍｍであり、好ましくは８〜１２ｍｍである。開口部１０４の内周の直径は、例えば、１０〜２０ｍｍであり、好ましくは１３〜１５ｍｍである。テーパー部１０２の上端の内周の直径は、例えば、８〜１８ｍｍであり、好ましくは１０〜１３ｍｍである。収容部１０５の上端の内周の直径は、例えば、５〜１５ｍｍであり、好ましくは６〜７ｍｍである。収容部１０５の容量は、例えば、０．１〜０．５ｍＬであり、好ましくは０．２〜０．４ｍＬである。収容部１０５の内部の高さは、例えば、４〜１０ｍｍであり、好ましくは５〜８ｍｍである。
Examples of the size of the
内容器１１の大きさは、例えば、以下の条件が例示できる。全体の容量は、例えば、０．３〜１００ｍＬであり、好ましくは０．５〜５０ｍＬである。内容器１１全体の高さは、例えば、６０〜１００ｍｍであり、好ましくは８０〜９０ｍｍである。本体部１１１の高さは、例えば、５０〜９０ｍｍであり、好ましくは６０〜７０ｍｍである。テーパー部１１２の高さは、例えば、５〜３０ｍｍであり、好ましくは１０〜２０ｍｍである。上端の開口部１１４の内周の直径は、例えば、５〜２０ｍｍであり、好ましくは１０〜１４ｍｍである。環状突起部１１５の外周直径は、例えば、１０〜２０ｍｍであり、好ましくは１３〜１５ｍｍである。テーパー部１１２の上端の外周の直径は、例えば、８〜１８ｍｍであり、好ましくは１０〜１５ｍｍである。テーパー部１１２の下端の外周の直径、すなわち、下端の開口部１１３の外周の直径は、例えば、３〜８ｍｍであり、好ましくは４〜７ｍｍである。下端の開口部１１３の内周の直径は、例えば、２〜７ｍｍであり、好ましくは３〜６ｍｍである。
Examples of the size of the
キャップ部２０の大きさは、例えば、以下の条件が例示できる。円状基板２４は、外周直径が、例えば、１０〜２５ｍｍであり、好ましくは１５〜２２ｍｍであり、厚みが、例えば、０．１〜５．０ｍｍであり、好ましくは０．５〜３．０ｍｍである。第１環状壁２１は、外周直径が、例えば、５〜２１ｍｍであり、好ましくは１０〜１５ｍｍであり、内周直径が、例えば、４〜２０ｍｍであり、好ましくは９〜１４ｍｍであり、高さが、例えば、１〜１０ｍｍであり、好ましくは２〜８ｍｍであり、第２環状壁２２は、外周直径が、例えば、１１〜２５ｍｍであり、好ましくは１５〜２２ｍｍであり、内周直径が、例えば、１０〜２２ｍｍであり、好ましくは１３〜１６ｍｍであり、高さが、例えば、１〜１０ｍｍであり、好ましくは２〜８ｍｍである。第１環状壁２１と第２環状壁２２との間の環状溝の幅、つまり、第１環状壁２１の外周面と第２環状壁２２の内周面との距離は、例えば、０．５〜５ｍｍであり、好ましくは０．８〜３ｍｍである。把持部２３は、外周直径が、例えば、１５〜３５ｍｍであり、好ましくは１６〜２４ｍｍであり、内周直径が、例えば、１１〜２５ｍｍであり、好ましくは１５〜２２ｍｍであり、高さが、例えば、１〜１０ｍｍであり、好ましくは２〜８ｍｍである。
The size of the
外容器１０に内容器１１を挿入し、且つ、キャップ２０を第２嵌合部２２で外容器１０に外嵌合し、キャップ２０を第１嵌合部２１で内容器１１に内嵌合した場合、外容器１０とキャップ２０の第２嵌合部２２との接触面は、例えば、高さが、１ｍｍ以上であることが好ましい。
The
また、外容器１０は、例えば、キャップ１０の装着が完了したことを確認するための目印を有してもよい。前記目印は、例えば、外容器１０への印刷等による表記でもよいし、突起または段差等の物理的な目印でもよい。外容器１０における前記目印の部位は、特に制限されないが、例えば、外容器１０と内容器１１とにキャップ２０が完全に装着された際に、キャップ２０の最下面が位置する部位付近であり、具体的には、キャップ２０の完全な装着によって、キャップで隠れる部位でもよいし、キャップの最下面との境に見える部位でもよい。
Further, the
このように、外容器１０に目印を有する形態について、一例を、図４に示す。図４は、図３（Ａ）に示す外容器１０の内部に内容器１１が挿入され、キャップが装着された分離容器において、外容器１０が、その外周面に、目印として段差を有する形態の概略図である。図４において、図３（Ａ）と同一箇所には同一符号を付している。図４に示すように、外容器１０は、その外周面に、段差４０を有する。段差４０は、外容器１０および内容器１１に、キャップ２０が完全に装着された際、キャップ２０の最下面に対応する位置に設けられている。この形態によれば、例えば、キャップ２０を外容器１０および内容器１１の上方向から装着し、キャップ２０の最下面が段差４０の位置に到達するまで、キャップ２０を押し込むことで、完全な装着が可能となる。この場合、押し込みの位置を視覚的に確認するのみでよく、例えば、外容器１０および内容器１１への嵌合状態を触感により判断する手間を省くことができる。
An example of the form having the mark on the
各部材を形成するための材料は、特に制限されない。前記材料は、例えば、合成樹脂材料、金属材料、ガラス材料等があげられる。これらの中でも、例えば、成形性、組立性、必要に応じて接着性等の材料の加工性；添加物の試料への溶出等の衛生面；視認性等の機能性；コスト面等の観点から、前記合成樹脂材料が好ましい。前記材料は、例えば、フッ素樹脂、ポリプロピレン、ポリエチレン、ポリカーボネート、ポリエステル、ポリウレタン、ポリメチルペンテン、メタクリル、ＡＢＳ（アクリロニトリル・ブタジエン・スチレン共重合体）、ＰＥＴ（ポリエチレンテレフタレート）、ポリ塩化ビニル、シリコーン、エチレン酢酸ビニル共重合体、合成ゴム、各種エラストマー等の合成樹脂があげられ、これらの中でも、フッ素樹脂、ポリプロピレン、ポリエチレン、ポリカーボネートが好ましい。前記フッ素樹脂は、例えば、疎水性フッ素樹脂が好ましく、特に、ポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）が好ましい。 The material for forming each member is not particularly limited. Examples of the material include synthetic resin materials, metal materials, and glass materials. Among these, for example, formability, assemblability, workability of materials such as adhesiveness as necessary; hygiene aspects such as elution of additives into samples; functionality such as visibility; The synthetic resin material is preferable. Examples of the material include fluorine resin, polypropylene, polyethylene, polycarbonate, polyester, polyurethane, polymethylpentene, methacryl, ABS (acrylonitrile / butadiene / styrene copolymer), PET (polyethylene terephthalate), polyvinyl chloride, silicone, and ethylene. Synthetic resins such as vinyl acetate copolymer, synthetic rubber and various elastomers can be mentioned. Among these, fluororesin, polypropylene, polyethylene and polycarbonate are preferable. For example, the fluororesin is preferably a hydrophobic fluororesin, and particularly preferably polytetrafluoroethylene (PTFE).
つぎに、図１〜図３に基づいて、本実施形態の分離容器キットを用いて、遠心分離により、***を含む試料から***を分離する方法を説明する。 Next, a method for separating sperm from a sample containing sperm by centrifugation using the separation container kit of this embodiment will be described with reference to FIGS.
まず、図１（Ｃ）に示すように、外容器１０の内部に内容器１１を配置する。この際、内容器１１の環状突起部１１５の下面が、外容器１０の開口部１０４の端面に接触している。
First, as shown in FIG. 1C, the
つぎに、内容器１１の内部に、遠心処理液を注入する。内容器１１の下端は、開口部１１３を有する。このため、内容器１１に注入された前記遠心処理液は、開口部１１３を通じて、外容器１０の収容部１０５に導入される。前記遠心処理液の量は、特に制限されず、外容器１０および内容器１１の大きさに応じて適宜決定できる。前記遠心処理液は、例えば、１〜１０ｍＬであり、好ましくは２〜５ｍＬである。
Next, a centrifuge processing liquid is injected into the
つぎに、内容器１１の内部に、***を含む試料を導入する。前記試料は、内容器１１の内部における前記遠心処理液に、重層することが好ましい。
Next, a sample containing sperm is introduced into the
そして、図３（Ａ）に示すように、内容器１１と外容器１０とに、キャップ２０を装着する。具体的には、内容器１１の開口部１１４に、キャップ２０の第１環状壁２１を挿入し、内嵌合により、内容器１１の内部を液密状態にし、外容器１０の開口部１０４の外周に、キャップ２０の第２環状壁２２を外嵌合させる。なお、図において、遠心処理液等の液体は、図示しない（以下、同様）。そして、分離容器１を遠心分離機にセットし、遠心分離に供する。遠心分離の条件は、特に制限されず、例えば、１０００Ｇ（１０００×９．８０６６５ｍ／ｓ２）で２０〜３０分間の条件である。遠心分離によって、前記試料から***が分離され、内容器１１の開口部１１３から、外容器１０の収容部１０５に、***が沈殿する。
Then, as shown in FIG. 3A, a
遠心後、図３（Ａ）に示すように、内容器１１と外容器１０とにキャップ２０を装着したまま状態で、キャップ２０の把持部２３を把持して、遠心分離機から取り出す。そして、内容器１１にキャップ２０を装着したままの状態で、外容器１０に対するキャップ２０の外嵌合を解除し、内容器１１を外容器１０から取り出す。内容器１１の内部には、前記試料の不要物が含まれる。しかしながら、キャップ２０の装着により、内容器１１の内部は液密状態となっている。このため、内容器１１の内部から液体が漏れることなく、外容器１０から内容器１１を取り出すことができる。そして、外容器１０の収容部１０５に、沈殿した***を含む前記遠心処理液が回収される。
After centrifuging, as shown in FIG. 3 (A), with the
そして、図３（Ｃ）に示すように、外容器１０の開口部１０４に、キャップ２０の第２環状壁２２を外嵌合する。これによって、外容器１０の内部が液密状態および気密状態となる。このため、例えば、外部からの不純物の混入等が防止でき、また、移動も容易となる。キャップ２０は、例えば、遠心分離の際に使用したキャップ２０でもよいし、新たなキャップ２０でもよい。
Then, as shown in FIG. 3C, the second
前記遠心処理液は、特に制限されず、例えば、試料および分離対象物の種類に応じて適宜決定できる。前記遠心処理液は、例えば、密度勾配担体、培地、緩衝液等があげられる。前記密度勾配担体は、例えば、比重調整剤ということもできる。前記密度勾配担体は、特に制限されず、例えば、パーコール、修飾コロイドシリカ、ショ糖重合体、フィコール等があげられる。前記パーコールは、通常、ポリビニルピロリドン皮膜を持つコロイド状シリカゾルである。前記パーコールは、例えば、エンドトキシンを除去した後、前記培地を添加して等張化したパーコールが好ましい。パーコールの濃度は、特に制限されず、例えば、９０〜９８％が好ましい。前記培地は、例えば、分離対象物が***の場合、ＨＥＰＥＳ含有液等があげられる。 The centrifugal treatment liquid is not particularly limited, and can be appropriately determined according to, for example, the type of the sample and the separation object. Examples of the centrifugation solution include a density gradient carrier, a medium, a buffer solution, and the like. The density gradient carrier can also be referred to as a specific gravity adjusting agent, for example. The density gradient carrier is not particularly limited, and examples thereof include percoll, modified colloidal silica, sucrose polymer, and ficoll. The percoll is usually a colloidal silica sol having a polyvinylpyrrolidone film. The percoll is preferably, for example, percoll that is made isotonic by removing the endotoxin and then adding the medium. The concentration of Percoll is not particularly limited, and is preferably 90 to 98%, for example. Examples of the medium include a HEPES-containing solution when the separation target is sperm.
本実施形態の分離容器キットは、例えば、さらに、スイムアップ法にも適用できる。まず、外容器１０から内容器１１を取り出した後、外容器１０に、未使用の新たな内容器１１を配置する。新たな内容器１１には、予め、***が遊泳可能な液体を充填しておくことが好ましい。この際、内容器１１の開口部１１４に、未使用のキャップ２０を内嵌合することが好ましい。キャップ２０の挿入によって、液密状態を維持できるため、前記液体が開口部１１３から漏れることなく、内容器１１を外容器１０に配置可能である。この状態で放置する。運動性を示す***は、放置の間に、外容器１０の収容部１０５から、内容器１１の開口部１１３を通じて、内容器１１の内部にスイムアップしてくる。このため、運動性を示す***のみを内容器１１に移動させ、回収できる。
For example, the separation container kit of the present embodiment can also be applied to a swim-up method. First, after removing the
放置後、内容器１１に、再度、キャップ２０を装着して、内部の液密性を保持した状態で、内容器１１を外容器１０から取り出す。これによって、内容器１１により、運動性を示す***のみを回収できる。また、取出した内容器１１の内部の***は、例えば、内容器１１からキャップ２０を取り外して液密性を解除し、前記内部から液体を導出させ、他の容器に回収してもよい。
After leaving, the
遠心分離は、通常、遠心ローター等の遠心分離機に分離容器をセットして行われる。この際、セットした本実施形態の分離容器１と、前記遠心ローターとの間に隙間が生じる場合、前記分離容器１にアジャスターを装着してもよい。 Centrifugation is usually performed by setting a separation container in a centrifuge such as a centrifugal rotor. At this time, when a gap is generated between the set separation container 1 of the present embodiment and the centrifugal rotor, an adjuster may be attached to the separation container 1.
また、本発明において、前記キャップは、例えば、さらに、使用時の軸方向において、前記内容器に内嵌合する前記第１環状壁の外周面の下方領域が、前記外周面の上方領域よりも小さい直径であることが好ましい。このような形状であれば、前記キャップの外周面の下方領域と上方領域とで、それぞれ、内容器に装着した際、嵌合力が「下方領域＜上方領域」という関係になる。このため、例えば、前記分離容器セットを、滅菌処理したり、輸送したり、繰り返して使用した場合でも、全体としての嵌合力の低下を防止できる。 In the present invention, for example, in the axial direction when the cap is used, the lower region of the outer peripheral surface of the first annular wall that is internally fitted in the inner container is more than the upper region of the outer peripheral surface. A small diameter is preferred. With such a shape, the lower region and the upper region of the outer peripheral surface of the cap have a relationship of “lower region <upper region” when the fitting force is attached to the inner container. For this reason, for example, even when the separation container set is sterilized, transported, or repeatedly used, it is possible to prevent a decrease in the overall fitting force.
また、前記キャップは、例えば、さらに、前記外容器に外嵌合する前記第２環状壁の内周面に、軸方向中心に向かって突起部（凸部）を有してもよい。前記キャップにおける前記凸部は、例えば、前記内周面において、周方向全体に形成されてもよく、部分的に形成されてもよく、好ましくは前者である。他方、前記キャップを装着する外容器は、例えば、前記キャップを装着した際に、前記キャップの凸部が接触する領域よりも、上方向であって、外周面に突起部（凸部）を有することが好ましい。前記外容器における前記凸部は、例えば、前記外周面において、周方向全体に形成されてもよく、部分的に形成されてもよく、好ましくは前者である。このような形状であれば、前記キャップを前記外容器に外嵌合した際、前者の凸部が、後者の凸部と咬合するため、取り扱い時に、装着が確実に行われていることを、触感的に確認できる。 In addition, the cap may further include, for example, a protrusion (convex portion) toward the axial center on the inner peripheral surface of the second annular wall that is externally fitted to the outer container. The convex portion in the cap may be formed, for example, in the entire circumferential direction on the inner peripheral surface, or may be partially formed, and is preferably the former. On the other hand, the outer container to which the cap is attached has a protruding portion (convex portion) on the outer peripheral surface that is above the region where the convex portion of the cap contacts when the cap is attached, for example. It is preferable. For example, the convex portion in the outer container may be formed in the entire circumferential direction on the outer peripheral surface, or may be partially formed, and is preferably the former. If it is such a shape, when the cap is externally fitted to the outer container, the former convex portion is engaged with the latter convex portion, so that the mounting is reliably performed during handling, Tactile confirmation is possible.
前記実施形態において、本発明の分離容器キットの用途として、試料からの***の分離を例示したが、これは一例であって、本発明は、この用途に限定されない。本発明の分離容器キットを、試料からの***の分離に用いる場合、その分離方法は、特に制限されず、例えば、密度勾配遠心法、スイムアップ法等に適用できる。この他にも、例えば、細胞小器官の分離、ＤＮＡまたはＲＮＡの分離、血液の特定成分（例えば、赤血球、単核球、血漿）の分離等にも使用可能である。前記試料は、特に制限されず、前記分離対象物を含む試料があげられ、具体例としては、***、血液等があげられる。 In the said embodiment, although isolation | separation of the sperm from a sample was illustrated as a use of the separation container kit of this invention, this is an example and this invention is not limited to this use. When the separation container kit of the present invention is used for separating sperm from a sample, the separation method is not particularly limited, and can be applied to, for example, a density gradient centrifugation method, a swim-up method, and the like. In addition to this, for example, separation of organelles, separation of DNA or RNA, separation of specific components of blood (for example, erythrocytes, mononuclear cells, plasma) can be used. The sample is not particularly limited, and examples include a sample containing the separation object, and specific examples include semen and blood.
本発明の分離容器キットによれば、前記キャップと前記内容器と前記外容器とが、それぞれ嵌合によって一体化される。このため、例えば、前記キャップを把持することによって、前記内容器だけでなく、前記外容器も同時に扱うことが可能であり、前記外容器のみが抜け落ちることを防止できる。また、例えば、遠心分離後、遠心分離機内で、前記外容器のみが開放状態で放置されることがない。このため、例えば、遠心分離後、前記遠心分離機から前記内容器と前記外容器とを同時に取り出した後、前記外容器から前記内容器を取り出して、すぐに、前記外容器を密封して、汚染を防ぐことも可能である。このため、本発明は、***や血球等の分離において、非常に有用なツールといえる。 According to the separation container kit of the present invention, the cap, the inner container, and the outer container are integrated by fitting. For this reason, for example, by gripping the cap, not only the inner container but also the outer container can be handled at the same time, and only the outer container can be prevented from falling off. For example, after centrifugation, only the outer container is not left open in the centrifuge. For this reason, for example, after centrifugation, after the inner container and the outer container are simultaneously taken out from the centrifuge, the inner container is taken out from the outer container, and immediately, the outer container is sealed, It is also possible to prevent contamination. For this reason, the present invention can be said to be a very useful tool in the separation of sperm, blood cells and the like.
１ 分離容器
１０ 外容器
１１ 内容器
１０１、１１１ 本体部
１０２、１１２ テーパー部
１０３ 先端部
１０４、１１３、１１４ 開口部
１０５ 収容部
１１５ 環状突起部
２０ キャップ
２１ 第１環状壁（第１嵌合部）
２２ 第２環状壁（第２嵌合部）
２３ 把持部
２４ 円状基板
４０ 段差
DESCRIPTION OF SYMBOLS 1
22 2nd annular wall (2nd fitting part)
23
Claims (10)
分離容器およびキャップを含み、
前記分離容器は、
内容器および外容器を含み、
前記内容器は、
上端および下端が開口した筒状であり、
前記外容器は、
上端が開口し、下端が閉口した有底筒状であり、
前記内容器および前記外容器は、
それぞれの上下方向を揃えた状態で、前記外容器の内部に前記内容器を挿入可能であり、
前記キャップは、
前記内容器の上端開口部および前記外容器の上端開口部を覆う大きさであり、
前記内容器の上端開口部に対する第１嵌合部を含み、
前記第１嵌合部は、前記内容器の上端開口部に嵌合することで、前記内容器の内部を液密状態にでき、
前記内容器と前記外容器とは、下記（１）および（２）のいずれかによって、嵌合できることを特徴とする分離容器キット。
（１）前記キャップが、さらに、前記外容器の上端開口部に対する第２嵌合部を含み、前記キャップが前記第１嵌合部で前記内容器と嵌合した状態において、前記キャップが前記第２嵌合部で前記外容器と嵌合できる。
（２）前記外容器が、前記内容器と嵌合する第３嵌合部を含み、前記キャップが前記第１嵌合部で前記内容器と嵌合した状態において、前記外容器が前記第３嵌合物で前記内容器と嵌合できる。 A separation container kit for separating an object to be separated from a liquid sample,
Including a separation container and a cap,
The separation container is
Including inner and outer containers,
The inner container is
It has a cylindrical shape with an open top and bottom,
The outer container is
It is a bottomed cylinder with an open top and a closed bottom,
The inner container and the outer container are
With the respective vertical directions aligned, the inner container can be inserted into the outer container,
The cap is
It is a size that covers the upper end opening of the inner container and the upper end opening of the outer container,
Including a first fitting portion with respect to the upper end opening of the inner container;
The first fitting portion can be fitted into the upper end opening of the inner container to make the inside of the inner container liquid-tight,
The separation container kit, wherein the inner container and the outer container can be fitted by any one of the following (1) and (2).
(1) The cap further includes a second fitting portion with respect to an upper end opening of the outer container, and the cap is fitted with the inner container at the first fitting portion. Two fitting parts can be fitted to the outer container.
(2) In a state where the outer container includes a third fitting portion that fits with the inner container, and the cap is fitted with the inner container at the first fitting portion, the outer container is the third fitting portion. The fitting can be fitted to the inner container.
前記キャップは、円状基板、第１環状壁および第２環状壁を含み、
前記円状基板の一方の表面において、同心円状に、内側に前記第１環状壁、外側に前記第２環状壁が形成され、
前記第１環状壁が、前記第１嵌合部であり、
前記第２環状壁が、前記第２嵌合部である、請求項１記載の分離容器キット。 In the above (1),
The cap includes a circular substrate, a first annular wall, and a second annular wall;
On one surface of the circular substrate, concentrically, the first annular wall is formed inside, and the second annular wall is formed outside,
The first annular wall is the first fitting portion;
The separation container kit according to claim 1, wherein the second annular wall is the second fitting portion.
前記第２環状壁は、前記外容器の前記開口部に対して外嵌合する、
請求項２記載の分離容器キット。 The first annular wall is internally fitted to the opening of the inner container;
The second annular wall is externally fitted to the opening of the outer container;
The separation container kit according to claim 2.
前記キャップは、円状基板および第１環状壁を含み、
前記円状基板の一方の表面において、前記第１環状壁が形成され、
前記第１環状壁が、前記第１嵌合部であり、
前記内容器を前記外容器に挿入した状態において、前記外容器が、前記内容器の外周直径よりも大きい内周直径の領域を含み、前記領域が、前記第３嵌合部である、請求項１記載の分離容器キット。 In (2) above,
The cap includes a circular substrate and a first annular wall;
On one surface of the circular substrate, the first annular wall is formed,
The first annular wall is the first fitting portion;
The outer container includes a region having an inner peripheral diameter larger than an outer peripheral diameter of the inner container in a state where the inner container is inserted into the outer container, and the region is the third fitting portion. The separation container kit according to 1.
前記キャップは、円状基板および第１環状壁を含み、
前記円状基板の一方の表面において、前記第１環状壁が形成され、
前記第１環状壁が、前記第１嵌合部であり、
前記外容器が前記第３嵌合部を含み、前記内容器が前記第３嵌合部と対応する第４嵌合部を含み、前記第３嵌合部と前記第４嵌合部とが、雄ネジと雌ネジとの組合せである、請求項１記載の分離容器キット。 In (2) above,
The cap includes a circular substrate and a first annular wall;
On one surface of the circular substrate, the first annular wall is formed,
The first annular wall is the first fitting portion;
The outer container includes the third fitting part, the inner container includes a fourth fitting part corresponding to the third fitting part, and the third fitting part and the fourth fitting part include: The separation container kit according to claim 1, which is a combination of a male screw and a female screw.
前記第２環状壁は、前記外容器の前記開口部に対して外嵌合する、請求項４または５記載の分離容器キット。 The first annular wall is internally fitted to the opening of the inner container;
The separation container kit according to claim 4 or 5, wherein the second annular wall is externally fitted to the opening of the outer container.
前記外容器の内部に前記内容器を挿入する際、互いの係止部を接触させることで、前記外容器と前記内容器とを係止可能である、請求項１から６のいずれか一項に記載の分離容器キット。 The outer peripheral surface of the inner container and the inner peripheral surface of the outer container each include a corresponding locking portion,
When the inner container is inserted into the outer container, the outer container and the inner container can be locked by bringing the locking portions into contact with each other. A separation container kit according to 1.
前記環状突起部は、その外周面の直径が、前記外容器の上端の内周面の直径よりも大きく、
前記外容器の内部に前記内容器を挿入する際、前記環状突起部の底面が、前記外容器の開口部の端面に接触することで、前記内容器の挿入位置を固定可能である、請求項１から７のいずれか一項に記載の分離容器キット。 The outer peripheral surface of the upper part of the inner container includes an annular protrusion,
The annular protrusion has an outer peripheral diameter greater than the inner peripheral diameter of the upper end of the outer container,
The insertion position of the inner container can be fixed by inserting the inner container into the outer container so that the bottom surface of the annular protrusion comes into contact with the end surface of the opening of the outer container. The separation container kit according to any one of 1 to 7.
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