JP2015099095A - ３次元イムノクロマトグラフィ方式を用いた検査診断用シート、検査診断用デバイス、および標的物の検出方法 - Google Patents

Abstract

【課題】量産性に優れ、簡便な３次元イムノクロマトグラフィ方式を用いた検査診断用シートを提供する。【解決手段】シート状の基材１０ａを貫通する少なくとも１つの注入口２６ａと、基材１０ａの一方の面に第１試薬部２０ａ、第２試薬部２２ａおよび検査部２４ａとが形成されている試薬部形成領域シート４８と、基材１０ｃの一方の面に第１流路部１４ａと、第２流路部１６ａと、第３流路部１８ａとが形成されている流路部形成領域シート４６と、基材１０ｂの両面に両面テープ１２ａ，１２ｂが形成され、両面テープ１２ａ、基材１０ｂおよび両面テープ１２ｂを貫通する複数の開口部が形成されている接着部形成領域シート４４とを重ね合わせると、注入口２６ａから第１試薬部２０ａ、第２試薬部２２ａを経る検査部２４ａまでの流路が形成されるようになっている、３次元イムノクロマトグラフィ方式を用いた検査診断用シート。【選択図】図１

Description

本発明は、３次元イムノクロマトグラフィ方式を用いた検査診断用シート、検査診断用デバイス、およびそれらを用いた標的物の検出方法に関する。

イムノクロマトグラフィは、毛細管現象により標的分子がメンブレン上を移動する際、固相化された捕捉分子と標的分子の複合体が形成され、最終的には標識色素で標識された標的分子を目視で確認する測定方法である。

最近になり、多検体、多項目の同時検査が可能になるイムノクロマトグラフィとして、例えば、特許文献１では、３次元マイクロ流体経路を利用した３次元紙マイクロ検査診断用チップが提案されている。

特許文献１の３次元紙マイクロ検査診断用チップは、上部パーツ、中間部パーツおよび下部パーツをそれぞれ作製した後、貼り合わせることにより製造される。また、各パーツにおける孔および流路は、不織布等に光硬化樹脂を含浸させた後、フォトレジスト法により孔および流路以外の部分を硬化させ、非硬化部分を除去する方法や、不織布等に印刷法等により孔および流路以外の部分にワックス等を含浸させた後に硬化させる方法等により形成される。

しかし、上記のような流路形成方法では、不織布等に光硬化樹脂やワックス等を含浸させる際に、所定の孔および流路以外の部分に光硬化樹脂やワックス等が拡散して、所望の形状に加工するのが困難であること等により、量産性に劣る。

国際公開第２０１２／１０５７２１号パンフレット

本発明の目的は、量産性に優れ、簡便な３次元イムノクロマトグラフィ方式を用いた検査診断用シート、検査診断用デバイス、およびそれらを用いた標的物の検出方法を提供することにある。

本発明は、
シート状の基材を貫通する少なくとも１つの注入口と、その基材の一方の面に前記注入口に対応する組の少なくとも１つの試薬部および検査部とが形成されている少なくとも１つの試薬部形成領域シートと、
シート状の基材の一方の面に前記注入口に対応する組の少なくとも２つの流路部が形成されている少なくとも１つの流路部形成領域シートと、
第１接着部がシート状の基材の一方の面に、第２接着部がそのシート状の基材の他方の面に形成され、前記第１接着部、前記基材および前記第２接着部を貫通する前記注入口に対応する組の複数の開口部が形成されている少なくとも１つの接着部形成領域シートと、
を有し、
前記試薬部形成領域シートと、前記流路部形成領域シートと、前記接着部形成領域シートとを重ね合わせると、前記開口部のいずれかを介して、前記注入口と、前記流路部と、前記試薬部と、前記検査部とが連通され、前記注入口から前記試薬部を経る前記検査部までの流路が形成されるようになっている、３次元イムノクロマトグラフィ方式を用いた検査診断用シートである。

また、本発明は、
シート状の基材の一端部または中間部がそれぞれ、
前記基材を貫通する少なくとも１つの注入口と、前記基材の一方の面に前記注入口に対応する組の少なくとも１つの試薬部および検査部とが形成されている試薬部形成領域、
前記基材の一方の面に前記注入口に対応する組の少なくとも２つの流路部が形成されている流路部形成領域、
となっており、
前記基材の他端部が、
第１接着部が一方の面に、第２接着部が他方の面に形成され、前記第１接着部、前記基材および前記第２接着部を貫通する前記注入口に対応する組の複数の開口部が形成されている接着部形成領域、
となっており、
前記基材の他端部が前記第１接着部を挟むように前記中間部の一方の面側に折りたたまれ、前記基材の一端部が前記第２接着部を挟むように前記中間部の一方の面側に折りたたまれると、前記開口部のいずれかを介して、前記注入口と、前記流路部と、前記試薬部と、前記検査部とが連通され、前記注入口から前記試薬部を経る前記検査部までの流路が形成されるようになっている、３次元イムノクロマトグラフィ方式を用いた検査診断用シートである。

また、本発明は、
シート状の基材の一端部または他端部がそれぞれ、
前記基材を貫通する少なくとも１つの注入口と、前記基材の一方の面に前記注入口に対応する組の少なくとも１つの試薬部および検査部とが形成されている試薬部形成領域、
前記基材の他方の面に前記注入口に対応する組の少なくとも２つの流路部が形成されている流路部形成領域、
となっており、
前記基材の中間部が、
第１接着部が一方の面に、第２接着部が他方の面に形成され、前記第１接着部、前記基材および前記第２接着部を貫通する前記注入口に対応する組の複数の開口部が形成されている接着部形成領域、
となっており、
前記基材の一端部が前記第１接着部を挟むように前記中間部の一方の面側に折りたたまれ、前記基材の他端部が前記第２接着部を挟むように前記中間部の他方の面側に折りたたまれると、前記開口部のいずれかを介して、前記注入口と、前記流路部と、前記試薬部と、前記検査部とが連通され、前記注入口から前記試薬部を経る前記検査部までの流路が形成されるようになっている、３次元イムノクロマトグラフィ方式を用いた検査診断用シートである。

また、前記検査診断用シートにおいて、前記検査部の吸水力が、前記流路部および前記試薬部の吸水力より大きいことが好ましい。

また、本発明は、
シート状の基材を貫通する少なくとも１つの注入口と、その基材の一方の面に前記注入口に対応する組の少なくとも１つの試薬部および検査部とが形成されている少なくとも１つの試薬部形成領域シートと、
シート状の基材の一方の面に前記注入口に対応する組の少なくとも２つの流路部が形成されている少なくとも１つの流路部形成領域シートと、
第１接着部がシート状の基材の一方の面に、第２接着部がそのシート状の基材の他方の面に形成され、前記第１接着部、前記基材および前記第２接着部を貫通する前記注入口に対応する組の複数の開口部が形成されている少なくとも１つの接着部形成領域シートと、
が重ね合わされて、前記開口部のいずれかを介して、前記注入口と、前記流路部と、前記試薬部と、前記検査部とが連通され、前記注入口から前記試薬部を経る前記検査部までの流路が形成されている、３次元イムノクロマトグラフィ方式を用いた検査診断用デバイスである。

また、本発明は、
シート状の基材の一端部または中間部がそれぞれ、
前記基材を貫通する少なくとも１つの注入口と、前記基材の一方の面に前記注入口に対応する組の少なくとも１つの試薬部および検査部とが形成されている試薬部形成領域、
前記基材の一方の面に前記注入口に対応する組の少なくとも２つの流路部が形成されている流路部形成領域、
となっており、
前記基材の他端部が、
第１接着部が一方の面に、第２接着部が他方の面に形成され、前記第１接着部、前記基材および前記第２接着部を貫通する前記注入口に対応する組の複数の開口部が形成されている接着部形成領域、
となっている検査診断用シートが、前記基材の他端部が前記第１接着部を挟むように前記中間部の一方の面側に折りたたまれ、前記基材の一端部が前記第２接着部を挟むように前記中間部の一方の面側に折りたたまれて、前記開口部のいずれかを介して、前記注入口と、前記第１流路部と、前記第１試薬部と、前記第２流路部と、前記第２試薬部と、前記第３流路部と、前記検査部とが連通され、前記注入口から前記第１試薬部、前記第２試薬部を経る前記検査部までの流路が形成されている、３次元イムノクロマトグラフィ方式を用いた検査診断用デバイスである。

また、本発明は、
シート状の基材の一端部または他端部がそれぞれ、
前記基材を貫通する少なくとも１つの注入口と、前記基材の一方の面に前記注入口に対応する組の少なくとも１つの試薬部および検査部とが形成されている試薬部形成領域、
前記基材の他方の面に前記注入口に対応する組の少なくとも２つの流路部が形成されている流路部形成領域、
となっており、
前記基材の中間部が、
第１接着部が一方の面に、第２接着部が他方の面に形成され、前記第１接着部、前記基材および前記第２接着部を貫通する前記注入口に対応する組の複数の開口部が形成されている接着部形成領域、
となっている検査診断用シートが、前記基材の一端部が前記第１接着部を挟むように前記中間部の一方の面側に折りたたまれ、前記基材の他端部が前記第２接着部を挟むように前記中間部の他方の面側に折りたたまれて、前記開口部のいずれかを介して、前記注入口と、前記第１流路部と、前記第１試薬部と、前記第２流路部と、前記第２試薬部と、前記第３流路部と、前記検査部とが連通され、前記注入口から前記第１試薬部、前記第２試薬部を経る前記検査部までの流路が形成されている、３次元イムノクロマトグラフィ方式を用いた検査診断用デバイスである。

また、前記検査診断用デバイスにおいて、前記検査部の吸水力が、前記流路部および前記試薬部の吸水力より大きいことが好ましい。

また、本発明は、前記検査診断用シートにより構成した検査診断用デバイスを用いて、標的物を検出する標的物の検出方法である。

本発明によれば、量産性に優れ、簡便な３次元イムノクロマトグラフィ方式を用いた検査診断用シート、検査診断用デバイス、およびそれらを用いた標的物の検出方法が提供される。

本発明の実施形態に係る検査診断用シートの一例を示す概略構成図であり、（ａ）が上面図、（ｂ）が側面図である。 本発明の実施形態に係る検査診断用シートにおける接着部形成領域の断面を示す概略図である。 本発明の実施形態に係る検査診断用シートにおける流路形成領域の断面を示す概略図である。 本発明の実施形態に係る検査診断用シートにより構成した検査診断用デバイスの構成の一例を示す概略側面図である。 本発明の実施形態に係る検査診断用シートの他の例を示す概略構成図であり、（ａ）が上面図、（ｂ）が側面図である。 本発明の実施形態に係る検査診断用シートの使用方法の一例を示す概略図である。 本発明の実施形態に係る検査診断用シートにより構成した検査診断用デバイスの構成の一例を示す概略側面図である。 本発明の実施形態に係る検査診断用シートにより構成した検査診断用デバイスを用いた検査診断方法の一例を示す概略図である。 本発明の実施形態に係る検査診断用シートの他の例を示す概略構成図であり、（ａ）が上面図、（ｂ）が側面図である。 本発明の実施形態に係る検査診断用シートの使用方法の他の例を示す概略図である。 本発明の実施形態に係る検査診断用シートの他の例を示す概略構成図であり、（ａ）が上面図、（ｂ）が側面図である。 本発明の実施形態に係る検査診断用シートの使用方法の他の例を示す概略図である。 本発明の実施形態におけるミオイノシトールの検出の反応系の一例を示す図である。

本発明の実施の形態について以下説明する。本実施形態は本発明を実施する一例であって、本発明は本実施形態に限定されるものではない。

本発明の実施形態に係る検査診断用シートの一例の概略を図１に示し、その構成について説明する。検査診断用シート１は、シート状の基材１０ａを貫通する２つのサンプル注入口２６ａ，２６ｂと、その基材１０ａの一方の面に形成された、第１試薬部２０ａ，２０ｂと、第２試薬部２２ａ，２２ｂと、検査部２４ａ，２４ｂとを有する試薬部形成領域シート４８と；シート上の基材１０ｂの一方の面の少なくとも一部に形成された第１接着部としての両面テープ１２ａと、他方の面の少なくとも一部に形成された第２接着部としての両面テープ１２ｂと、両面テープ１２ａ、基材１０ｂおよび両面テープ１２ｂを貫通し、長手方向に所定の間隔で一列に並んだ、サンプル注入口２６ａに対応する一組の複数の開口部３０ａ，３２ａ，３４ａ，３６ａ，３８ａ，４０ａ，４２ａと、サンプル注入口２６ｂに対応するもう一組の複数の開口部３０ｂ，３２ｂ，３４ｂ，３６ｂ，３８ｂ，４０ｂ，４２ｂと、を有する接着部形成領域シート４４と；シート状の基材１０ｃの一方の面の少なくとも一部に形成された、サンプル注入口２６ａに対応する第１流路部１４ａ、第２流路部１６ａおよび第３流路部１８ａと、サンプル注入口２６ｂに対応する第１流路部１４ｂ、第２流路部１６ｂおよび第３流路部１８ｂと、を有する流路形成領域シート４６とを含む。

検査診断用シート１は、試薬部形成領域シート４８と、接着部形成領域シート４４と、流路形成領域シート４６とが接着部形成領域シート４４を挟んで重ね合わせられると、開口部３０ａ，３２ａ，３４ａ，３６ａ，３８ａ，４０ａを介して、サンプル注入口２６ａと、第１流路部１４ａと、第１試薬部２０ａと、第２流路部１６ａと、第２試薬部２２ａと、第３流路部１８ａと、検査部２４ａとが連通され、サンプル注入口２６ａから第１試薬部２０ａ、第２試薬部２２ａを経る検査部２４ａまでの流路が形成され、開口部３０ｂ，３２ｂ，３４ｂ，３６ｂ，３８ｂ，４０ｂを介して、サンプル注入口２６ｂと、第１流路部１４ｂと、第１試薬部２０ｂと、第２流路部１６ｂと、第２試薬部２２ｂと、第３流路部１８ｂと、検査部２４ｂとが連通され、サンプル注入口２６ｂから第１試薬部２０ｂ、第２試薬部２２ｂを経る検査部２４ｂまでの流路が形成されるようになっている。図１の例に限らず、開口部のいずれかを介して、少なくとも１つの注入口と、少なくとも２つの流路部と、少なくとも１つの試薬部と、少なくとも１つの検査部とが連通され、少なくとも１つの注入口から少なくとも１つの試薬部を経る少なくとも１つの検査部までの流路が形成されるようになっていればよい。

検査診断用シート１が糖尿病検査診断用シートとして用いられる場合、例えば、第１試薬部２０にはＡＴＰ等のグルコース消去試薬が含まれ、第２試薬部２２にはＮＡＤ等の補酵素が含まれ、検査部２４にはミオイノシトールデヒドロゲナーゼおよびＮＴＢ等の発色基質が含まれる。

検査診断用シート１における接着部形成領域４４の拡大断面図を図２に示す。基材１０の一方の面側には両面テープ１２ａが貼られ、基材１０の他方の面側には両面テープ１２ｂが貼られている。両面テープ１２ａは、両面テープ基材５０ａの両面に接着層５２ａ，５４ａを有し、接着層５２ａにより基材１０の一方の面に接着され、接着層５４ａには剥離紙５６ａを備える。同様に、両面テープ１２ｂは、両面テープ基材５０ｂの両面に接着層５２ｂ，５４ｂを有し、接着層５２ｂにより基材１０の他方の面に接着され、接着層５４ｂには剥離紙５６ｂを備える。

検査診断用シート１における流路形成領域４６の一部の拡大断面図を図３に示す。基材１０の一方の面側には、強弱両面テープ５８により不織布等の第１流路部１４が接着されている。強弱両面テープ５８は、基材１０側の接着層が弱接着層６４となっており、不織布側の接着層が強接着層６２となっている。強弱両面テープ５８の基材１０側の弱接着層６４は、第１流路部１４ａ側の強接着層６２よりも粘着力が低い。第２流路部１６および第３流路部１８についても同様の構成である。また、試薬部形成領域４８における第１試薬部２０、第２試薬部２２、検査部２４についても同様の構成である。

検査診断用シート１は、図２に示す両面テープ１２ａの剥離紙５６ａ，５６ｂを剥離した後、図４に示すように、試薬部形成領域シート４８と、接着部形成領域シート４４と、流路形成領域シート４６とを接着部形成領域シート４４を挟んで重ね合わせ、試薬部形成領域シート４８の第１試薬部２０、第２試薬部２２、検査部２４の表面と両面テープ１２ｂの接着層５４ｂとを接合し、流路形成領域シート４６の第１流路部１４、第２流路部１６、第３流路部１８の表面と両面テープ１２ａの接着層５４ａとを接合し、検査診断用デバイス３を作製する。

図４の例では検査診断用デバイス３は１つの試薬部形成領域シート４８と１つの接着部形成領域シート４４と１つの流路形成領域シート４６とを重ね合わせた構造となっているが、２つ以上の試薬部形成領域シート４８と２つ以上の接着部形成領域シート４４と２つ以上の流路形成領域シート４６とを重ね合わせた多層構造としてもよい。これにより、１つのデバイスで複数の処理を行うことができる。

本発明の実施形態に係る検査診断用シートの他の例の概略を図５に示し、その構成について説明する。検査診断用シート２は、シート状の基材１０と、基材１０の長手方向を例えば約３等分等に分割した一端部の試薬部形成領域４８に形成された、基材１０を貫通する２つのサンプル注入口２６ａ，２６ｂと、基材１０の他端部の接着部形成領域４４の一方の面の少なくとも一部に形成された第１接着部としての両面テープ１２ａと、接着部形成領域４４の他方の面の少なくとも一部に形成された第２接着部としての両面テープ１２ｂと、接着部形成領域４４に形成された、両面テープ１２ａ、基材１０および両面テープ１２ｂを貫通し、長手方向に所定の間隔で一列に並んだ、サンプル注入口２６ａに対応する一組の複数の開口部３０ａ，３２ａ，３４ａ，３６ａ，３８ａ，４０ａ，４２ａと、サンプル注入口２６ｂに対応するもう一組の複数の開口部３０ｂ，３２ｂ，３４ｂ，３６ｂ，３８ｂ，４０ｂ，４２ｂと、基材１０の中間部の流路形成領域４６の一方の面の少なくとも一部に形成された、サンプル注入口２６ａに対応する第１流路部１４ａ、第２流路部１６ａおよび第３流路部１８ａと、サンプル注入口２６ｂに対応する第１流路部１４ｂ、第２流路部１６ｂおよび第３流路部１８ｂと、を有する。さらに、基材１０の一端部の試薬部形成領域４８の一方の面に、第１試薬部２０ａ，２０ｂと、第２試薬部２２ａ，２２ｂと、検査部２４ａ，２４ｂとを有する。

検査診断用シート２は、基材１０の他端部が第１接着部１２ａを挟むように中間部の一方の面側に折りたたまれ、基材１０の一端部が第２接着部１２ｂを挟むように中間部の一方の面側に折りたたまれると、開口部３０ａ，３２ａ，３４ａ，３６ａ，３８ａ，４０ａを介して、サンプル注入口２６ａと、第１流路部１４ａと、第１試薬部２０ａと、第２流路部１６ａと、第２試薬部２２ａと、第３流路部１８ａと、検査部２４ａとが連通され、サンプル注入口２６ａから第１試薬部２０ａ、第２試薬部２２ａを経る検査部２４ａまでの流路が形成され、開口部３０ｂ，３２ｂ，３４ｂ，３６ｂ，３８ｂ，４０ｂを介して、サンプル注入口２６ｂと、第１流路部１４ｂと、第１試薬部２０ｂと、第２流路部１６ｂと、第２試薬部２２ｂと、第３流路部１８ｂと、検査部２４ｂとが連通され、サンプル注入口２６ｂから第１試薬部２０ｂ、第２試薬部２２ｂを経る検査部２４ｂまでの流路が形成されるようになっている。図５の例に限らず、開口部のいずれかを介して、少なくとも１つの注入口と、少なくとも２つの流路部と、少なくとも１つの試薬部と、少なくとも１つの検査部とが連通され、少なくとも１つの注入口から少なくとも１つの試薬部を経る少なくとも１つの検査部までの流路が形成されるようになっていればよい。

本実施形態に係る検査診断用シート２は、１枚のシート上に少なくとも１つのサンプル注入口２６（図１の例では２つのサンプル注入口２６ａ，２６ｂ）、少なくとも１つの第１流路部１４（図１の例では２つの第１流路部１４ａ，１４ｂ）、少なくとも１つの第２流路部１６（図１の例では２つの第２流路部１６ａ，１６ｂ）、少なくとも１つの第３流路部１８（図１の例では２つの第３流路部１８ａ，１８ｂ）、第１接着部としての両面テープ１２ａ、第２接着部としての両面テープ１２ｂ、および少なくとも１組の複数の開口部３０，３２，３４，３６，３８，４０，４２（図１の例では２組の開口部３０ａ，３２ａ，３４ａ，３６ａ，３８ａ，４０ａ，４２ａと、開口部３０ｂ，３２ｂ，３４ｂ，３６ｂ，３８ｂ，４０ｂ，４２ｂ）が形成されており、後述するように単に折りたたむだけで、３次元イムノクロマトグラフィ方式を用いた検査診断用デバイスを構成することができる。本実施形態に係る検査診断用シート２は、連続的に製造することが可能であり、量産性に非常に優れる。

検査診断用シート２は、例えば、シート状の基材１０の一端部の試薬部形成領域４８に基材１０を貫通するサンプル注入口２６を形成する注入口形成工程と、中間部の流路形成領域４６の一方の面の少なくとも一部に第１流路部１４、第２流路部１６、第３流路部１８を形成する流路部形成工程と、他端部の接着部形成領域４４の一方の面の少なくとも一部に第１接着部として両面テープ１２ａを貼り付ける第１接着部形成工程と、接着部形成領域４４の他方の面の少なくとも一部に第２接着部として両面テープ１２ｂを貼り付ける第２接着部形成工程と、接着部形成領域４４に両面テープ１２ａ、基材１０および両面テープ１２ｂを貫通する複数の開口部３０，３２，３４，３６，３８，４０，４２を形成する開口部形成工程と、基材１０の一端部の試薬部形成領域４８に、第１試薬部２０、第２試薬部２２を形成する試薬部形成工程と、検査部２４を形成する検査部形成工程と、各試薬部および検査部に試薬等を塗布する塗布工程とを含む方法により得られる。検査診断用シート１の製造方法はこれに限定されない。また、これらの工程の順序については、目的の検査診断用シート２が得られる限り、特に制限はない。

流路部形成工程において、シート状の基材１０の長手方向を約３等分した中間部の流路形成領域４６の一方の面の一部に強弱両面テープ５８を用いて不織布等を貼り付ける。強弱両面テープ５８は、基材１０側の接着層を弱接着層とし、不織布側の接着層を強接着層とすればよい。

流路形成領域４８において、例えば図５（ａ）のような形状となるように、基材１０と強弱両面テープ５８の弱接着層６４との界面まで打ち抜き加工を行い、流路部以外の部分の不織布を強弱両面テープ５８の弱接着層６４から剥離して第１流路部１４、第２流路部１６、第３流路部１８を形成する。

同様にして、試薬部形成工程において、試薬部形成領域４８に、第１試薬部２０、第２試薬部２２を形成し、検査部形成工程において、検査部２４を形成する。

その後、塗布工程において、例えば、第１試薬部２０、第２試薬部２２にそれぞれ所定の試薬等を塗布し、検査部２４に所定の発色基質等を塗布する。また、第１試薬部２０、第２試薬部２２、検査部２４を形成して、検査診断用シート２を製造しておき、検査診断前に、例えば、第１試薬部２０、第２試薬部２２に試薬等を塗布し、検査部２４に発色基質等を塗布してもよい。

第１接着部形成工程および第２接着部形成工程において、基材１０の他端部の接着部形成領域４４の両方の面に両面テープ１２ａ，１２ｂをそれぞれ貼り付ける。ここで、両面テープ１２ａ，１２ｂの表面側の剥離紙は装着したままとする。

開口部形成工程において、例えば図５（ａ）のような形状となるように、例えば、接着部形成領域４４において基材１０と表裏の両面テープ１２ａ，１２ｂを貫通させる打ち抜き加工を行い、開口部３０，３２，３４，３６，３８，４０，４２を形成する。開口部３０は、後述するように基材１０を折りたたんだ際にサンプル注入口２６に連通するように形成位置が決められる。

注入口形成工程において、例えば、基材１０の他端部の試薬部形成領域４８において基材１０を貫通させる打ち抜き加工を行い、サンプル注入口２６を形成する。サンプル注入口２６は、後述するように基材１０を折りたたんだ際に開口部３０に連通するように形成位置が決められる。

流路部形成工程、試薬部形成工程、検査部形成工程における不織布等の貼り付け、および第１接着部形成工程および第２接着部形成工程における両面テープ１２ａ，１２ｂの貼り付けは、例えば、ロール・ツー・ロール方式で行うことができる。ロール状に巻いた基材の一方の面に、ロール状に巻いた両面テープおよび不織布を貼り合わせ、同時に他方の面にロール状に巻いた両面テープを貼り合わせてから、再びロールに巻き取ればよい。このような方法は、貼り合わせの際の位置ずれが少なく、量産性に非常に優れる。

検査診断用シート２の使用方法の一例の概略を図６に示す。図２に示す両面テープ１２ａの剥離紙５６ａを剥離した後、図６に示すように、基材１０の他端部の接着部形成領域４４側を両面テープ１２ａを挟むように中間部の一方の面側に折りたたみ、第１流路部１４、第２流路部１６、第３流路部１８の表面と両面テープ１２ａの接着層５４ａとを接合する。次に、両面テープ１２ｂの剥離紙５６ｂを剥離した後、一端部の試薬部形成領域４８側を両面テープ１２ｂを挟むように中間部の一方の面側に折りたたみ、第１試薬部２０、第２試薬部２２、検査部２４の表面と両面テープ１２ｂの接着層５４ｂとを接合し、検査診断用デバイス４を作製する。

このようにして、サンプル注入口２６と連通された第１流路部１４と、第２流路部１６とを連通するように開口部３２および開口部３４を介した第１試薬部２０と、第２流路部１６と、第３流路部１８とを連通するように開口部３６および開口部３８を介した第２試薬部２２と、第３流路部１８に連通するように開口部４０を介した検査部２４と、を有する検査診断用デバイス４が得られる。

図７に、図５に示す検査診断用シート２を用いて作製した検査診断用デバイスの模式側面図を示す。図７に示すように、基材１０の接着部形成領域４４側が両面テープ１２ａを挟むように中間部の一方の面側に折りたたまれ、試薬部形成領域４８側が両面テープ１２ｂを挟むように中間部の一方の面側に折りたたまれると、サンプル注入口２６と開口部３０と第１流路部１４とが連通され、サンプル注入口２６から第１流路部１４、第１試薬部２０、第２流路部１６、第２試薬部２２、第３流路部１８を経て、検査部２４までの流路が形成されることになる。

検査診断用デバイス３，４が糖尿病検査診断用デバイスとして用いられる場合、サンプル注入口２６はサンプルを注入する場所であり、第１試薬部２０および第２試薬部２２にはＡＴＰ等のグルコース消去試薬およびＮＡＤ等の補酵素が含まれ、検査部２４にはミオイノシトールデヒドロゲナーゼ等の脱水素酵素およびＮＴＢ等の発色基質が含まれる。

図８に、本実施形態に係る検査診断用シートを用いて構成した検査診断用デバイスを用いた糖尿尿検査診断方法の一例を示し、図１３に、糖尿病検査診断の反応系の一例を示す。図８に示すように、尿等を必要に応じて適切な処理を行った後に、サンプルとしてサンプル注入口２６から注入され、サンプルは、第１試薬部２０および第２試薬部２２においてヘキソキナーゼ等のグルコース消去試薬およびＮＡＤ等の補酵素と混合され、サンプル中のグルコースがグルコース消去試薬により消去され、グルコース−６−リン酸となる。次に、検査部２４において、サンプル中にミオイノシトール（ＭＩ）が含まれる場合、ミオイノシトールがミオイノシトールデヒドロゲナーゼ（ＭＩＤＨ）等の脱水素酵素によりミオイノソースに変換されるとともに、ＮＡＤからＮＡＤＨが生成され、ジアホラーゼ（ＤＩ）およびＮＡＤＨがＮＴＢ等の発色基質を還元し、ＮＴＢＨ_２（ホルマザン色素）等の色素が生成し、目視可能となる。

複数の経路を有することによって、多種類のサンプルの検査を同時に行うことが可能となる。また、複数の経路のうち少なくとも１つを対照サンプル用として用いてもよい。図１，５の例では、反応経路の数は、サンプル注入口２６ａから第１流路部１４ａ、第１試薬部２０ａ、第２流路部１６ａ、第２試薬部２２ａ、第３流路部１８ａを経て、検査部２４ａまでの経路と、サンプル注入口２６ｂから第１流路部１４ｂ、第１試薬部２０ｂ、第２流路部１６ｂ、第２試薬部２２ｂ、第３流路部１８ｂを経て、検査部２４ｂまでの経路の２つであるが、１つ以上であればよく、サンプル数等に応じて適宜変更すればよい。

基材１０，１０ａ，１０ｂ，１０ｃとしては、特に制限はないが、例えば、樹脂フィルム、金属箔等の耐水性薄膜シートが挙げられ、加工性等の点から樹脂フィルム（シート）が好ましい。樹脂フィルム（シート）としては、例えば、ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）フィルム、ポリ塩化ビニルフィルム、ポリオレフィンフィルム、ポリカーボネートフィルム、合成紙等が挙げられるが、特にこれらに限定されるものではない。これらのうち、特に、打ち抜き性、剛度、コスト、保存安定性等の観点から、ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）フィルムを用いることが好ましい。

基材１０，１０ａ，１０ｂ，１０ｃの厚みは、特に制限はないが、例えば、１０μｍ〜２５０μｍの範囲が好ましく、特に２５μｍ〜１００μｍの範囲がより好ましい。

第１流路部１４、第２流路部１６、第３流路部１８、第１試薬部２０、第２試薬部２２、検査部２４を構成する部材としては、液透過性（浸透性）のものであればよく、特に制限はないが、例えば、不織布、濾紙、印刷用紙、和紙、布、発泡体、ニット等が挙げられ、加工適性と、適度な液浸透性、コスト等の観点から不織布が好ましい。

第１流路部１４、第２流路部１６、第３流路部１８、第１試薬部２０、第２試薬部２２、検査部２４の厚みは、特に制限はないが、例えば、５０μｍ〜１０００μｍとすればよく、流路部および試薬部は、５０μｍ〜５００μｍ、検査部は２００μｍ〜１０００μｍとすればよい。

第１流路部１４、第２流路部１６、第３流路部１８、第１試薬部２０、第２試薬部２２、検査部２４の幅は、特に制限はないが、例えば、１ｍｍ〜１０ｍｍとすればよい。

図１，５の例では、流路部の数は、第１流路部１４、第２流路部１６、第３流路部１８の３つであり、試薬部の数は、第１試薬部２０、第２試薬部２２の２つであるが、流路部の数は少なくとも２つであり、試薬部の数は少なくとも１つであり、検査部の数は１つであればよく、用いる反応系等に応じて適宜変更すればよい。

本実施形態において、検査部２４の吸水力が、流路部（第１流路部１４、第２流路部１６、第３流路部１８）、試薬部（第１試薬部２０および第２試薬部２２）の吸水力より大きいことが好ましい。ここで、吸水力は、不織布を水に浸漬させて浸漬前後の重量差（ｇ）を測定し、体積（μＬ）に変換したものである。検査部２４の吸水力は、１００μＬ以上であることが好ましく、第１流路部１４、第２流路部１６、第３流路部１８、第１試薬部２０および第２試薬部２２の吸水力は、１０μＬ以上６０μＬ以上であることが好ましい。検査部２４の吸水力が、第１流路部１４、第２流路部１６、第３流路部１８、第１試薬部２０および第２試薬部２２の吸水力より小さい、または等しいと、サンプルが検査部２４まで到達しにくくなり、また、検査部からの逆流が発生する場合がある。

両面テープ１２ａ，１２ｂ、強弱両面テープ５８としては、上記の通り、両面テープ基材５０ａ，５０ｂ、強弱両面テープ基材６０の両面に接着層を有するものが用いられる。強弱両面テープ５８としては、上記の通り、強弱両面テープ基材６０の一方の面に弱接着層、他方の面に強接着層を有するものが用いられ、基材側の弱接着層は、流路部側の強接着層よりも粘着力が低い。両面テープ基材５０ａ，５０ｂ、強弱両面テープ基材６０としては、例えば、ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）フィルム、ポリ塩化ビニルフィルム、ポリオレフィンフィルム等が挙げられ、加工性、耐水性、コスト等の観点からポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）フィルムが好ましい。

接着層、弱接着層および強接着層としては、特に制限はないが、アクリル系、ゴム系、ウレタン系、シリコーン系、ポリエステル系等の粘着剤が挙げられ、接着性、加工性、汚染性等の観点からアクリル系の粘着剤が好ましい。

接着層および強接着層の粘着力としては、特に制限はないが、例えば、３Ｎ／１０ｍｍ以上とすればよく、好ましくは４Ｎ／１０ｍｍ〜１０Ｎ／１０ｍｍの範囲とすればよい。弱接着層の粘着力としては、特に制限はないが、例えば、０．１Ｎ／１０ｍｍ〜３Ｎ／１０ｍｍの範囲とすればよく、好ましくは０．５Ｎ／１０ｍｍ〜２．０Ｎ／１０ｍｍの範囲とすればよい。強弱両面テープ５８の強接着層の粘着力および弱接着層の粘着力を上記範囲とすることにより、不織布等の打ち抜き加工後の流路部以外の部分の不織布の剥離を、強弱両面テープ１６の弱接着層において良好に行うことができる。接着層の粘着力は、ＪＩＳ Ｚ０２３７に示される方法により測定することができる。

両面テープ基材および強弱両面テープ基材の厚みは、特に制限はないが、例えば、１０μｍ〜２５０μｍの範囲とすればよく、好ましくは２０μｍ〜１２０μｍの範囲とすればよい。接着層、弱接着層および強接着層の厚みは、特に制限はないが、例えば、５μｍ〜１５０μｍの範囲とすればよく、好ましくは１０μｍ〜８０μｍの範囲とすればよい。

本実施形態に係る検査診断用シートおよび検査診断用デバイスは、例えば、ミオイノシトールを標的物とした糖尿病の検査診断、ＥＬＩＳＡ等に用いることができる。例えば、試薬部で標的分子と捕捉分子との複合体が形成され、検査部で複合体が標識色素で標識されることにより、標的分子を目視で確認することができる。

本実施形態に係る検査診断用シートおよび検査診断用デバイスを糖尿病の検査診断に用いる場合、グルコース消去試薬としては、例えば、ヘキソキナーゼ、ＡＤＰ−ヘキソキナーゼ等が挙げられる。

第１試薬部２０へのグルコース消去試薬の添加量としては、サンプル中のグルコースを消去可能な量であればよく、特に制限はない。

第２試薬部２２への補酵素としては、例えば、ＮＡＤ、チオ−ＮＡＤ等のＮＡＤ誘導体等が挙げられる。

補酵素の添加量としては、特に制限はないが、例えば、０．０１ｍｇ〜０．５ｍｇの範囲とすればよい。

発色基質としては、例えば、ＮＴＢ（ニトロテトラゾリウムブルー）、ＷＳＴ−１，３，４，５，８，９，１０，１１（Ｗａｔｅｒ Ｓｏｌｕｂｌｅ Ｔｅｔｒａｚｏｌｉｕｍ Ｓａｌｔｓ：ｉｎｔｅｒｃｈｉｍ製）等のテトラゾリウム塩等が挙げられ、目視のしやすさ等の観点からＮＴＢが好ましい。

検査部２４への脱水素酵素としては、例えば、ミオイノシトールデヒドロゲナーゼ、ジアホラーゼ等が挙げられる。脱水素酵素の添加濃度としては、特に制限はないが、例えば、０〜２０Ｕ（対照の場合は０Ｕ）の範囲とすればよい。

検査部２４への発色基質の添加量としては、特に制限はないが、例えば、０．０１ｍｇ〜０．８ｍｇの範囲とすればよい。

試薬部、検査部には、親水性を調整するために、界面活性剤を含んでもよい。界面活性剤としては、例えば、アニオン性界面活性剤、カチオン性界面活性剤、ノニオン性界面活性剤、両性界面活性剤が挙げられ、具体的には、Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ−１００、ＴＷＥＥＮ２０等が挙げられる。

本実施形態で用いられるサンプルは、検査対象である尿、血液、唾液、汗等の生物学的流体等を必要に応じて適切な処理を行った後に、サンプルとして使用するものをいう。検査を簡便に行うことができる等の点から、尿が好ましい。

本発明の実施形態に係る検査診断用シートの他の例の概略構成を図９に示す。検査診断用シート５は、シート状の基材１０と、基材１０の長手方向を例えば約３等分等に分割した中間部の試薬部形成領域４８に形成された、基材１０を貫通する２つのサンプル注入口２６ａ，２６ｂと、基材１０の他端部の接着部形成領域４４の一方の面の少なくとも一部に形成された第１接着部としての両面テープ１２ａと、接着部形成領域４４の他方の面の少なくとも一部に形成された第２接着部としての両面テープ１２ｂと、接着部形成領域４４に形成された、両面テープ１２ａ、基材１０および両面テープ１２ｂを貫通し、長手方向に所定の間隔で一列に並んだ、サンプル注入口２６ａに対応する一組の複数の開口部３０ａ，３２ａ，３４ａ，３６ａ，３８ａ，４０ａ，４２ａと、サンプル注入口２６ｂに対応するもう一組の複数の開口部３０ｂ，３２ｂ，３４ｂ，３６ｂ，３８ｂ，４０ｂ，４２ｂと、基材１０の一端部の流路形成領域４６の一方の面の少なくとも一部に形成された、サンプル注入口２６ａに対応する第１流路部１４ａ、第２流路部１６ａおよび第３流路部１８ａと、サンプル注入口２６ｂに対応する第１流路部１４ｂ、第２流路部１６ｂおよび第３流路部１８ｂと、を有する。さらに、基材１０の中間部の試薬部形成領域４８の一方の面に、第１試薬部２０ａ，２０ｂと、第２試薬部２２ａ，２２ｂと、検査部２４ａ，２４ｂとを有する。

検査診断用シート５は、基材１０の他端部が第１接着部１２ａを挟むように中間部の一方の面側に折りたたまれ、基材１０の一端部が第２接着部１２ｂを挟むように中間部の一方の面側に折りたたまれると、開口部３０ａ，３２ａ，３４ａ，３６ａ，３８ａ，４０ａを介して、サンプル注入口２６ａと、第１流路部１４ａと、第１試薬部２０ａと、第２流路部１６ａと、第２試薬部２２ａと、第３流路部１８ａと、検査部２４ａとが連通され、サンプル注入口２６ａから第１試薬部２０ａ、第２試薬部２２ａを経る検査部２４ａまでの流路が形成され、開口部３０ｂ，３２ｂ，３４ｂ，３６ｂ，３８ｂ，４０ｂを介して、サンプル注入口２６ｂと、第１流路部１４ｂと、第１試薬部２０ｂと、第２流路部１６ｂと、第２試薬部２２ｂと、第３流路部１８ｂと、検査部２４ｂとが連通され、サンプル注入口２６ｂから第１試薬部２０ｂ、第２試薬部２２ｂを経る検査部２４ｂまでの流路が形成されるようになっている。

検査診断用シート５の使用方法の一例の概略を図１０に示す。図２に示す両面テープ１２ａの剥離紙５６ａを剥離した後、図１０に示すように、基材１０の他端部の接着部形成領域４４側を両面テープ１２ａを挟むように中間部の一方の面側に折りたたみ、第１試薬部２０、第２試薬部２２、検査部２４の表面と両面テープ１２ａの接着層５４ａとを接合する。次に、両面テープ１２ｂの剥離紙５６ｂを剥離した後、一端部の流路形成領域４６側を両面テープ１２ｂを挟むように中間部の一方の面側に折りたたみ、第１流路部１４、第２流路部１６、第３流路部１８の表面と両面テープ１２ｂの接着層５４ｂとを接合し、検査診断用デバイス７を作製する。

このようにして、サンプル注入口２６と連通された第１流路部１４と、第２流路部１６とを連通するように開口部３２および開口部３４を介した第１試薬部２０と、第２流路部１６と、第３流路部１８とを連通するように開口部３６および開口部３８を介した第２試薬部２２と、第３流路部１８に連通するように開口部４０を介した検査部２４と、を有する検査診断用デバイス７が得られる。

基材１０の接着部形成領域４４側が両面テープ１２ａを挟むように中間部の一方の面側に折りたたまれ、流路形成領域４６側が両面テープ１２ｂを挟むように中間部の一方の面側に折りたたまれると、サンプル注入口２６と開口部３０と第１流路部１４とが連通され、サンプル注入口２６から第１流路部１４、第１試薬部２０、第２流路部１６、第２試薬部２２、第３流路部１８を経て、検査部２４までの流路が形成されることになる。

本発明の実施形態に係る検査診断用シートの他の例の概略構成を図１１に示す。検査診断用シート９は、シート状の基材１０と、基材１０の長手方向を例えば約３等分等に分割した一端部の試薬部形成領域４８に形成された、基材１０を貫通する２つのサンプル注入口２６ａ，２６ｂと、基材１０の中間部の接着部形成領域４４の一方の面の少なくとも一部に形成された第１接着部としての両面テープ１２ａと、接着部形成領域４４の他方の面の少なくとも一部に形成された第２接着部としての両面テープ１２ｂと、接着部形成領域４４に形成された、両面テープ１２ａ、基材１０および両面テープ１２ｂを貫通し、長手方向に所定の間隔で一列に並んだ、サンプル注入口２６ａに対応する一組の複数の開口部３０ａ，３２ａ，３４ａ，３６ａ，３８ａ，４０ａ，４２ａと、サンプル注入口２６ｂに対応するもう一組の複数の開口部３０ｂ，３２ｂ，３４ｂ，３６ｂ，３８ｂ，４０ｂ，４２ｂと、基材１０の他端部の流路形成領域４６の他方の面の少なくとも一部に形成された、サンプル注入口２６ａに対応する第１流路部１４ａ、第２流路部１６ａおよび第３流路部１８ａと、サンプル注入口２６ｂに対応する第１流路部１４ｂ、第２流路部１６ｂおよび第３流路部１８ｂと、を有する。さらに、基材１０の一端部の試薬部形成領域４８の一方の面に、第１試薬部２０ａ，２０ｂと、第２試薬部２２ａ，２２ｂと、検査部２４ａ，２４ｂとを有する。

検査診断用シート９は、基材１０の他端部が第１接着部１２ｂを挟むように中間部の他方の面側に折りたたまれ、基材１０の一端部が第２接着部１２ａを挟むように中間部の一方の面側に折りたたまれると、開口部３０ａ，３２ａ，３４ａ，３６ａ，３８ａ，４０ａを介して、サンプル注入口２６ａと、第１流路部１４ａと、第１試薬部２０ａと、第２流路部１６ａと、第２試薬部２２ａと、第３流路部１８ａと、検査部２４ａとが連通され、サンプル注入口２６ａから第１試薬部２０ａ、第２試薬部２２ａを経る検査部２４ａまでの流路が形成され、開口部３０ｂ，３２ｂ，３４ｂ，３６ｂ，３８ｂ，４０ｂを介して、サンプル注入口２６ｂと、第１流路部１４ｂと、第１試薬部２０ｂと、第２流路部１６ｂと、第２試薬部２２ｂと、第３流路部１８ｂと、検査部２４ｂとが連通され、サンプル注入口２６ｂから第１試薬部２０ｂ、第２試薬部２２ｂを経る検査部２４ｂまでの流路が形成されるようになっている。

検査診断用シート９の使用方法の一例の概略を図１２に示す。図２に示す両面テープ１２ｂの剥離紙５６ｂを剥離した後、図１２に示すように、基材１０の他端部の流路形成領域４６側を両面テープ１２ｂを挟むように中間部の他方の面側に折りたたみ、第１流路部１４、第２流路部１６、第３流路部１８の表面と両面テープ１２ｂの接着層５４ｂとを接合する。次に、両面テープ１２ａの剥離紙５６ａを剥離した後、一端部の試薬部形成領域４８側を両面テープ１２ａを挟むように中間部の一方の面側に折りたたみ、第１試薬部２０、第２試薬部２２、検査部２４の表面と両面テープ１２ａの接着層５４ａとを接合し、検査診断用デバイス１１を作製する。

このようにして、サンプル注入口２６と連通された第１流路部１４と、第２流路部１６とを連通するように開口部３２および開口部３４を介した第１試薬部２０と、第２流路部１６と、第３流路部１８とを連通するように開口部３６および開口部３８を介した第２試薬部２２と、第３流路部１８に連通するように開口部４０を介した検査部２４と、を有する検査診断用デバイス１１が得られる。

基材１０の流路形成領域４６側が両面テープ１２ｂを挟むように中間部の他方の面側に折りたたまれ、試薬部形成領域４８側が両面テープ１２ａを挟むように中間部の一方の面側に折りたたまれると、サンプル注入口２６と開口部３０と第１流路部１４とが連通され、サンプル注入口２６から第１流路部１４、第１試薬部２０、第２流路部１６、第２試薬部２２、第３流路部１８を経て、検査部２４までの流路が形成されることになる。なお、折りたたみの順序に特に制限はなく、試薬部形成領域４８側が両面テープ１２ａを挟むように中間部の一方の面側に折りたたまれてから、基材１０の流路形成領域４６側が両面テープ１２ｂを挟むように中間部の他方の面側に折りたたまれてもよい。

図５に示す糖尿病検査診断用シート２、図７に示す糖尿病検査診断用シート５、図９に示す糖尿病検査診断用シート９の構成によれば、折りたたむだけで簡便に検査診断用デバイスを作製することができる。また、開口部と、流路部、試薬部、検査部との位置合わせを容易に行うことができる。

本実施形態に係る検査診断用シート、検査診断用デバイス、および標的物の検出方法によれば、簡便に標的物を検出することができる。

以下、実施例および比較例を挙げ、本発明をより具体的に詳細に説明するが、本発明は、以下の実施例に限定されるものではない。

（実施例１）
＜３次元検査診断用シートの作製＞
基材１０としてＰＥＴフィルム（厚み：５０μｍ、長さ：２２８ｍｍ、幅：３９ｍｍ）を用い、基材１０の長手方向を約３等分した中間部の流路形成領域４６の一方の面の一部に強弱両面テープ５８（基材材質：ＰＥＴ、基材厚み：２５μｍ、強接着層材質：アクリル系粘着剤、強接着層粘着力：７．０Ｎ／１０ｍｍ、強接着層厚み：２５μｍ、弱接着層材質：アクリル系粘着剤、弱接着層粘着力：１．０Ｎ／１０ｍｍ、弱接着層厚み：２５μｍ、長さ：２２８ｍｍ、幅：３９ｍｍ）を用いて、不織布（材質：セルロース１００％、吸水力：４０μＬ）を貼り付けた。強弱両面テープ５８は、基材１０側の接着層を弱接着層とし、不織布側の接着層を強接着層とした。

基材１０の長手方向を約３等分した一端部の試薬部形成領域４８の一方の面の一部に強弱両面テープ５８（基材材質：ＰＥＴ、基材厚み：２５μｍ、強接着層材質：アクリル系粘着剤、強接着層粘着力：７．０Ｎ／１０ｍｍ、強接着層厚み：２５μｍ、弱接着層材質：アクリル系粘着剤、弱接着層粘着力：１．０Ｎ／１０ｍｍ、弱接着層厚み：２５μｍ、長さ：２２８ｍｍ、幅：３９ｍｍ）を用いて、約２／３の領域に試薬部となる不織布（材質：セルロース１００％、吸水力：４０μＬ）を貼り付け、端部側約１／３の領域に検査部となる不織布（材質：セルロース１００％、吸水力：１２０μＬ）を貼り付けた。強弱両面テープ５８は、基材１０側の接着層を弱接着層とし、不織布側の接着層を強接着層とした。

基材１０の他端部の接着部形成領域４４の両方の面に両面テープ１２ａ，１２ｂ（基材材質：ＰＥＴ、基材厚み：２５μｍ、接着層材質：アクリル系粘着剤、接着層粘着力：７．０Ｎ／１０ｍｍ、接着層厚み：２５μｍ、長さ：７６ｍｍ、幅：３９ｍｍ）をそれぞれ貼り付けた。両面テープ１２ａ，１２ｂの表面側の剥離紙は装着したままとした。なお、接着層の粘着力は、ＪＩＳ Ｚ０２３７に示される方法により測定した。

次に、図５のような形状となるように、流路形成領域４６において基材１０と強弱両面テープ５８の弱接着層との界面まで打ち抜き加工を行い、流路部以外の部分の不織布を強弱両面テープ５８の弱接着層から剥離して、三組の第１流路部（厚み：１５０μｍ、長さ：１５ｍｍ、幅：５ｍｍ）、三組の第２流路部（厚み：１５０μｍ、長さ：１４ｍｍ、幅：５ｍｍ）、三組の第３流路部（厚み：１５０μｍ、長さ：１４ｍｍ、幅：５ｍｍ）を形成した。

また、図５のような形状となるように、試薬部形成領域４８において基材１０と強弱両面テープ５８の弱接着層との界面まで打ち抜き加工を行い、試薬部、検査部以外の部分の不織布を強弱両面テープ５８の弱接着層から剥離して、三組の第１試薬部（厚み：１５０μｍ、長さ：１５ｍｍ、幅：５ｍｍ）、三組の第２試薬部（厚み：１５０μｍ、長さ：１５ｍｍ、幅：５ｍｍ）、三組の検査部（厚み：３００μｍ、長さ：２０ｍｍ、幅：８ｍｍ）を形成した。

図５のような形状となるように、接着部形成領域４４において基材１０と表裏の両面テープ１２ａ，１２ｂを貫通させる打ち抜き加工を行い、長手方向に所定の間隔で一列に並んだ三組の７つの開口部３０，３２，３４，３６，３８，４０，４２を形成した。また、同様にして、基材１０の一端部の試薬部形成領域４８において基材１０を貫通させる打ち抜き加工を行い、３つのサンプル注入口２６を形成した。開口部３０，３２，３４，３６，３８，４０を介して、３経路のサンプル注入口２６と、第１流路部１４と、第１試薬部２０と、第２流路部１６と、第２試薬部２２と、第３流路部１８と、検査部２４とが、基材１０を折りたたんだ際にそれぞれ互いに連通するように形成位置を決めた。

ミオイノシトールの検出には、ミオイノシトールデヒドロゲナーゼ（ＭＩＤＨ）や補酵素であるＮＡＤ、発色基質であるＮＴＢを用いた反応系を使用した。まず、第１試薬部２０および第２試薬部２２においてヘキソキナーゼ等によりグルコースが消去され、グルコース−６−リン酸となり、ＮＡＤと混合され、検査部２４において、サンプル中にミオイノシトール（ＭＩ）が含まれる場合、ミオイノシトールがミオイノシトールデヒドロゲナーゼ（ＭＩＤＨ）によりミオイノソースに変換されるとともに、ＮＡＤからＮＡＤＨが生成され、ジアホラーゼ（ＤＩ）およびＮＡＤＨがＮＴＢを還元し、ＮＴＢＨ_２（ホルマザン色素）が生成し、目視可能となる。

第１試薬部２０および第２試薬部２２にヘキソキナーゼ（ＨＫＩＩＩ）を０．０８５ｍｇ、ＡＤＰヘキソキナーゼ（ＨＫＰＩＩ）を０．１５ｍｇ、ＮＡＤを０．０６ｍｇ塗布し、検査部２４にミオイノシトールデヒドロゲナーゼ（ＭＩＤＨ）を０〜５ＵおよびＤＩを０．３Ｕ、ＮＴＢを０．０５ｍｇとなるように塗布した。このようにして、糖尿病の検査診断用シート１を作製した。

なお、不織布の吸水力は、「ＪＩＳ Ｌ １９０７ 繊維製品の吸水性試験方法」を参考にし、以下の方法で評価した。

不織布から１０ｍｍ×２０ｍｍの試験片を採取し、試験片の短辺の一方を保持した状態で水中に５ｍｍ程度１０秒間浸漬した後、直ぐに取り出し、浸漬前後の重量差（ｇ）を測定する。測定後、下記の式により単位を重さ（ｇ）から体積（μＬ）に変換し、１０回の平均値を吸水力とした。
水を吸収した体積＝重量差÷比重（ただし、比重は温度補正した値を用いる）

各種の不織布について上記方法で吸水力を評価し、吸水力の高い不織布（材質：セルロース１００％、吸水力：１２０μＬ）を検査部２４用の不織布とし、吸水力が検査部２４より低い不織布（材質：セルロース１００％、吸水力：４０μＬ）を第１流路部１４、第１試薬部２０、第２流路部１６、第２試薬部２２、第３流路部１８用の不織布として選定した。この組み合わせにすることにより、サンプル展開から検査部まで２分以内に到達し、逆流（放置後２時間）も見られなかった。

＜３次元検査診断用デバイスの作製＞
図６と同様にして、上記のように作製した検査診断用シート１を、両面テープ１２ａの剥離紙を剥離した後、基材１０の他端部の接着部形成領域４４側を両面テープ１２ａを挟むように中間部の一方の面側に折りたたみ、第１流路部１４、第２流路部１６および第３流路部１８の表面と両面テープ１２ａの接着層とを接合した。次に、両面テープ１２ｂの剥離紙を剥離した後、基材１０の一端部の試薬部形成領域４８側を両面テープ１２ｂを挟むように中間部の一方の面側に折りたたみ、第１試薬部２０、第２試薬部２２、検査部２４の表面と両面テープ１２ｂの接着層５４ｂとを接合し、検査診断用デバイス３を作製した。これにより、開口部３０，３２，３４，３６，３８，４０を介して、サンプル注入口２６と、第１流路部１４と、第１試薬部２０と、第２流路部１６と、第２試薬部２２と、第３流路部１８と、検査部２４とが連通され、サンプル注入口２６から第１流路部１４、第１試薬部２０、第２流路部１６、第２試薬部２２、第３流路部１８を経て、検査部２４までの流路が形成されることになる。

＜３次元検査診断用デバイスを用いたＭＩの測定＞
サンプルとしてミオイノシトール（ＭＩ）の濃度が５０，２００μＭであるミオイノシトールの水溶液を展開させた。

その結果、５０μＭのミオイノシトールを展開させたものでは約３分で弱いシグナルが得られ、２００μＭのミオイノシトールを展開させたものでは約３分で明確なシグナルが得られた。

このように、ミオイノシトールの検出を行うことができたため、簡易的な糖尿病の検査診断用シートおよび検査診断用デバイスとして適用できることがわかった。

１，２，５，９ 検査診断用シート、３，４，７，１１ 検査診断用デバイス、１０，１０ａ，１０ｂ，１０ｃ 基材、１２ａ，１２ｂ 両面テープ、１４，１４ａ，１４ｂ 第１流路部、１６，１６ａ，１６ｂ 第２流路部、１８，１８ａ，１８ｂ 第３流路部、２０，２０ａ，２０ｂ 第１試薬部、２２，２２ａ，２２ｂ 第２試薬部、２４，２４ａ，２４ｂ 検査部、２６ａ，２６ｂ サンプル注入口、３０，３０ａ，３０ｂ，３２，３２ａ，３２ｂ，３４，３４ａ，３４ｂ，３６，３６ａ，３６ｂ，３８，３８ａ，３８ｂ，４０，４０ａ，４０ｂ，４２，４２ａ，４２ｂ 開口部、４４ 接着部形成領域シート（接着部形成領域）、４６ 流路形成領域シート（流路形成領域）、４８ 試薬部形成領域シート（試薬部形成領域）、５０ａ，５０ｂ 両面テープ基材、５２ａ，５２ｂ，５４ａ，５４ｂ 接着層、５６ａ，５６ｂ 剥離紙、５８ 強弱両面テープ、６０ 強弱両面テープ基材、６２ 強接着層、６４ 弱接着層。

Claims (9)

1. シート状の基材を貫通する少なくとも１つの注入口と、その基材の一方の面に前記注入口に対応する組の少なくとも１つの試薬部および検査部とが形成されている少なくとも１つの試薬部形成領域シートと、
   シート状の基材の一方の面に前記注入口に対応する組の少なくとも２つの流路部が形成されている少なくとも１つの流路部形成領域シートと、
   第１接着部がシート状の基材の一方の面に、第２接着部がそのシート状の基材の他方の面に形成され、前記第１接着部、前記基材および前記第２接着部を貫通する前記注入口に対応する組の複数の開口部が形成されている少なくとも１つの接着部形成領域シートと、
   を有し、
   前記試薬部形成領域シートと、前記流路部形成領域シートと、前記接着部形成領域シートとを重ね合わせると、前記開口部のいずれかを介して、前記注入口と、前記流路部と、前記試薬部と、前記検査部とが連通され、前記注入口から前記試薬部を経る前記検査部までの流路が形成されるようになっていることを特徴とする、３次元イムノクロマトグラフィ方式を用いた検査診断用シート。
2. シート状の基材の一端部または中間部がそれぞれ、
   前記基材を貫通する少なくとも１つの注入口と、前記基材の一方の面に前記注入口に対応する組の少なくとも１つの試薬部および検査部とが形成されている試薬部形成領域、
   前記基材の一方の面に前記注入口に対応する組の少なくとも２つの流路部が形成されている流路部形成領域、
   となっており、
   前記基材の他端部が、
   第１接着部が一方の面に、第２接着部が他方の面に形成され、前記第１接着部、前記基材および前記第２接着部を貫通する前記注入口に対応する組の複数の開口部が形成されている接着部形成領域、
   となっており、
   前記基材の他端部が前記第１接着部を挟むように前記中間部の一方の面側に折りたたまれ、前記基材の一端部が前記第２接着部を挟むように前記中間部の一方の面側に折りたたまれると、前記開口部のいずれかを介して、前記注入口と、前記流路部と、前記試薬部と、前記検査部とが連通され、前記注入口から前記試薬部を経る前記検査部までの流路が形成されるようになっていることを特徴とする、３次元イムノクロマトグラフィ方式を用いた検査診断用シート。
3. シート状の基材の一端部または他端部がそれぞれ、
   前記基材を貫通する少なくとも１つの注入口と、前記基材の一方の面に前記注入口に対応する組の少なくとも１つの試薬部および検査部とが形成されている試薬部形成領域、
   前記基材の他方の面に前記注入口に対応する組の少なくとも２つの流路部が形成されている流路部形成領域、
   となっており、
   前記基材の中間部が、
   第１接着部が一方の面に、第２接着部が他方の面に形成され、前記第１接着部、前記基材および前記第２接着部を貫通する前記注入口に対応する組の複数の開口部が形成されている接着部形成領域、
   となっており、
   前記基材の一端部が前記第１接着部を挟むように前記中間部の一方の面側に折りたたまれ、前記基材の他端部が前記第２接着部を挟むように前記中間部の他方の面側に折りたたまれると、前記開口部のいずれかを介して、前記注入口と、前記流路部と、前記試薬部と、前記検査部とが連通され、前記注入口から前記試薬部を経る前記検査部までの流路が形成されるようになっていることを特徴とする、３次元イムノクロマトグラフィ方式を用いた検査診断用シート。
4. 請求項１〜３のいずれか１項に記載の検査診断用シートであって、
   前記検査部の吸水力が、前記流路部および前記試薬部の吸水力より大きいことを特徴とする、３次元イムノクロマトグラフィ方式を用いた検査診断用シート。
5. シート状の基材を貫通する少なくとも１つの注入口と、その基材の一方の面に前記注入口に対応する組の少なくとも１つの試薬部および検査部とが形成されている少なくとも１つの試薬部形成領域シートと、
   シート状の基材の一方の面に前記注入口に対応する組の少なくとも２つの流路部が形成されている少なくとも１つの流路部形成領域シートと、
   第１接着部がシート状の基材の一方の面に、第２接着部がそのシート状の基材の他方の面に形成され、前記第１接着部、前記基材および前記第２接着部を貫通する前記注入口に対応する組の複数の開口部が形成されている少なくとも１つの接着部形成領域シートと、
   が重ね合わされて、前記開口部のいずれかを介して、前記注入口と、前記流路部と、前記試薬部と、前記検査部とが連通され、前記注入口から前記試薬部を経る前記検査部までの流路が形成されていることを特徴とする、３次元イムノクロマトグラフィ方式を用いた検査診断用デバイス。
6. シート状の基材の一端部または中間部がそれぞれ、
   前記基材を貫通する少なくとも１つの注入口と、前記基材の一方の面に前記注入口に対応する組の少なくとも１つの試薬部および検査部とが形成されている試薬部形成領域、
   前記基材の一方の面に前記注入口に対応する組の少なくとも２つの流路部が形成されている流路部形成領域、
   となっており、
   前記基材の他端部が、
   第１接着部が一方の面に、第２接着部が他方の面に形成され、前記第１接着部、前記基材および前記第２接着部を貫通する前記注入口に対応する組の複数の開口部が形成されている接着部形成領域、
   となっている検査診断用シートが、前記基材の他端部が前記第１接着部を挟むように前記中間部の一方の面側に折りたたまれ、前記基材の一端部が前記第２接着部を挟むように前記中間部の一方の面側に折りたたまれて、前記開口部のいずれかを介して、前記注入口と、前記第１流路部と、前記第１試薬部と、前記第２流路部と、前記第２試薬部と、前記第３流路部と、前記検査部とが連通され、注入口から前記第１試薬部、前記第２試薬部を経る前記検査部までの流路が形成されていることを特徴とする、３次元イムノクロマトグラフィ方式を用いた検査診断用デバイス。
7. シート状の基材の一端部または他端部がそれぞれ、
   前記基材を貫通する少なくとも１つの注入口と、前記基材の一方の面に前記注入口に対応する組の少なくとも１つの試薬部および検査部とが形成されている試薬部形成領域、
   前記基材の他方の面に前記注入口に対応する組の少なくとも２つの流路部が形成されている流路部形成領域、
   となっており、
   前記基材の中間部が、
   第１接着部が一方の面に、第２接着部が他方の面に形成され、前記第１接着部、前記基材および前記第２接着部を貫通する前記注入口に対応する組の複数の開口部が形成されている接着部形成領域、
   となっている検査診断用シートが、前記基材の一端部が前記第１接着部を挟むように前記中間部の一方の面側に折りたたまれ、前記基材の他端部が前記第２接着部を挟むように前記中間部の他方の面側に折りたたまれて、前記開口部のいずれかを介して、前記注入口と、前記第１流路部と、前記第１試薬部と、前記第２流路部と、前記第２試薬部と、前記第３流路部と、前記検査部とが連通され、前記注入口から前記第１試薬部、前記第２試薬部を経る前記検査部までの流路が形成されていることを特徴とする、３次元イムノクロマトグラフィ方式を用いた検査診断用デバイス。
8. 請求項５〜７のいずれか１項に記載の検査診断用デバイスであって、
   前記検査部の吸水力が、前記流路部および前記試薬部の吸水力より大きいことを特徴とする、３次元イムノクロマトグラフィ方式を用いた検査診断用デバイス。
9. 請求項１〜４のいずれか１項に記載の検査診断用シートにより構成した検査診断用デバイスを用いて、標的物を検出することを特徴とする標的物の検出方法。

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