JP2015051932A - Manufacturing method of chlorogenic acid - Google Patents

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Abstract

PROBLEM TO BE SOLVED: To provide a manufacturing method of chlorogenic acid capable of obtaining, in a high yield, a high-purity chlorogenic acid even from a raw material having a high lipid content.SOLUTION: The provided manufacturing method of chlorogenic acid includes a step of obtaining a liquid extract by contacting at least one type selected from the group consisting of sunflower seeds and oil extraction residues thereof with a solvent selected from the group consisting of water, alcohol, and a water-alcohol liquid mixture, a step of contacting the liquid extract with an aluminum salt and then recovering the generated solid matter, a step of dissolving the solid matter into acidic water, a step of mixing the acidic water into which the solid matter has been dissolved with a solvent having a specific permittivity of below 3 at 25°C, then separating aqueous and organic phases, and recovering the aqueous phase, and a step of mixing the recovered aqueous phase with a solvent having a specific permittivity of at least 3 at 25°C and phase-separable from water into two layers, then separating aqueous and organic phases, and recovering the organic phase.

Description

本発明は、クロロゲン酸の製造方法に関する。   The present invention relates to a method for producing chlorogenic acid.

クロロゲン酸は、抗酸化作用、血圧改善作用、血糖値の上昇抑制作用等の種々の生理活性を有することから、近年、医薬品、化粧品、健康食品、食品添加物等の原料として期待されている。   Chlorogenic acid has been expected as a raw material for pharmaceuticals, cosmetics, health foods, food additives and the like in recent years because it has various physiological activities such as an antioxidant action, an action to improve blood pressure, and an action to suppress an increase in blood glucose level.

クロロゲン酸は、ヒマワリの種子、コーヒー豆、さつまいもの葉、ヨモギの葉、杜仲の葉、スイカズラの花等に含まれていることが知られている。従来、クロロゲン酸は、これらを原材料として、熱水抽出、エタノール抽出等によりクロロゲン酸を含む抽出物を得た後、溶媒を留去させ、粉末化するという方法により得ていた。しかしながら、かかる方法では、低純度のクロロゲン酸しか得ることができず、また、その収率も低いものであった。クロロゲン酸は、その純度が高いほど、医薬品、食品等への応用が期待できる。そのため、クロロゲン酸を高純度かつ高収率で得る技術が所望され、検討されている。   It is known that chlorogenic acid is contained in sunflower seeds, coffee beans, sweet potato leaves, mugwort leaves, tochu leaves, honeysuckle flowers and the like. Conventionally, chlorogenic acid has been obtained by a method in which an extract containing chlorogenic acid is obtained by hot water extraction, ethanol extraction or the like using these as raw materials, and then the solvent is distilled off to form powder. However, in this method, only low-purity chlorogenic acid can be obtained, and the yield is low. As the purity of chlorogenic acid increases, it can be expected to be applied to pharmaceuticals, foods and the like. Therefore, a technique for obtaining chlorogenic acid with high purity and high yield is desired and studied.

例えば、スイカズラ及び杜仲から抽出したクロロゲン酸を含む抽出液に明礬等を添加した後、pHを1〜4.5に調整し、形成された不純物のアルミニウム錯体を除去する工程(工程1)、不純物のアルミニウム錯体を除去した溶液のpHを4.5〜7に調整し、形成されたクロロゲン酸のアルミニウム錯体を単離する工程(工程2)、単離されたクロロゲン酸のアルミニウム錯体を酸性水に溶解させた後、有機溶媒を用いてクロロゲン酸を抽出する工程(工程3)、及びクロロゲン酸を含む有機溶媒を濃縮し、晶析して、クロロゲン酸を得る工程(工程4)を含むクロロゲン酸の製造方法が報告されている(例えば、特許文献1参照)。   For example, after adding alum or the like to an extract containing chlorogenic acid extracted from honeysuckle and Tochu, pH is adjusted to 1 to 4.5 to remove the formed aluminum complex of impurities (Step 1), impurities The pH of the solution from which the aluminum complex was removed was adjusted to 4.5 to 7, and the formed aluminum complex of chlorogenic acid was isolated (step 2), and the isolated aluminum complex of chlorogenic acid was converted to acidic water. Chlorogenic acid including a step of extracting chlorogenic acid using an organic solvent after dissolution (step 3) and a step of concentrating and crystallizing the organic solvent containing chlorogenic acid to obtain chlorogenic acid (step 4) Has been reported (for example, see Patent Document 1).

中国特許出願公開第102675106号公報Chinese Patent Application No. 102675106

しかしながら、特許文献1に記載されたクロロゲン酸の製造方法は、スイカズラの花や杜仲の葉のような相対的に脂質の含有量が少ないものを原材料とする場合には、ある程度純度の高いクロロゲン酸を得ることができるのに対して、ヒマワリの種子やコーヒー豆のような脂質の含有量が多いものを原材料とする場合には、クロロゲン酸の純度及び収率が低くなるという問題があった。   However, the method for producing chlorogenic acid described in Patent Document 1 is a chlorogenic acid having a certain degree of purity when a raw material is a material having a relatively low lipid content such as honeysuckle flowers or Tochu leaves. On the other hand, when the raw material is high in lipid content such as sunflower seeds or coffee beans, there is a problem that the purity and yield of chlorogenic acid are lowered.

本発明者が、その原因について検討したところ、特許文献1に記載されたクロロゲン酸の製造方法では、工程1において、低pH条件でアルミニウム錯体を形成する脂質等の不純物を除去することを意図しているが、この条件では、クロロゲン酸についてもアルミニウム錯体を形成する場合があり、クロロゲン酸が除去されてしまうことがある。また、ヒマワリの種子等の脂質の含有量が多い原材料を使用した場合には、工程1では、脂質を十分に取り除くことができない。そのため、工程2においてpHを上げると、工程1で取り除くことができなかった脂質のアルミニウム錯体と、クロロゲン酸のアルミニウム錯体と、が形成されることになり、最終的にクロロゲン酸の純度及び収率が低くなるということを見出した。   The present inventor examined the cause, and in the method for producing chlorogenic acid described in Patent Document 1, in Step 1, it was intended to remove impurities such as lipids forming an aluminum complex under low pH conditions. However, under these conditions, chlorogenic acid may also form an aluminum complex, and chlorogenic acid may be removed. In addition, when a raw material having a high lipid content such as sunflower seeds is used, in Step 1, the lipid cannot be sufficiently removed. Therefore, when the pH is raised in step 2, an aluminum complex of lipid that could not be removed in step 1 and an aluminum complex of chlorogenic acid are formed, and finally the purity and yield of chlorogenic acid Found that it is lower.

本発明は、上記のような事情に鑑みてなされたものであり、脂質の含有量が多い原材料からでも高純度のクロロゲン酸を高収率で得ることができるクロロゲン酸の製造方法を提供することを目的とする。   The present invention has been made in view of the above circumstances, and provides a method for producing chlorogenic acid capable of obtaining high-purity chlorogenic acid in a high yield even from raw materials having a high lipid content. With the goal.

上記の課題を解決するための具体的な手段は、以下の通りである。   Specific means for solving the above-described problems are as follows.

<1> ヒマワリの種子及びその搾油残渣からなる群より選ばれる少なくとも1種と、水、アルコール、及び水とアルコールとの混合液からなる群より選ばれる溶媒と、を接触させ、抽出液を得る工程、上記抽出液とアルミニウム塩とを接触させた後、生成した固形物を回収する工程、上記固形物を酸性水に溶解させる工程、上記固形物が溶解された酸性水と、25℃における比誘電率が3未満の溶媒と、を混合した後、水相と有機相とを分離させ、水相を回収する工程、及び、上記回収した水相と、25℃における比誘電率が3以上であって、かつ、水と2層に相分離可能な溶媒と、を混合した後、水相と有機相とを分離させ、有機相を回収する工程を含むクロロゲン酸の製造方法である。   <1> An extract is obtained by contacting at least one selected from the group consisting of sunflower seeds and oil extraction residues thereof and a solvent selected from the group consisting of water, alcohol, and a mixture of water and alcohol. A step, a step of recovering the produced solid after contacting the extract and the aluminum salt, a step of dissolving the solid in acidic water, an acidic water in which the solid is dissolved, and a ratio at 25 ° C. After mixing a solvent having a dielectric constant of less than 3, the aqueous phase and the organic phase are separated to recover the aqueous phase, and the recovered aqueous phase has a relative dielectric constant of 3 or more at 25 ° C. A method for producing chlorogenic acid comprising the steps of mixing water and a solvent capable of phase separation into two layers, separating the aqueous phase and the organic phase, and recovering the organic phase.

<2> 上記アルミニウム塩が、硫酸アルミニウム、硫酸カリウムアルミニウム、硫酸カリウムアルミニウム水和物、硫酸アンモニウムアルミニウム、及び硫酸アンモニウムアルミニウム水和物からなる群より選ばれる少なくとも1種である<1>に記載のクロロゲン酸の製造方法である。   <2> The chlorogenic acid according to <1>, wherein the aluminum salt is at least one selected from the group consisting of aluminum sulfate, potassium aluminum sulfate, potassium aluminum sulfate hydrate, ammonium aluminum sulfate, and ammonium aluminum sulfate hydrate. It is a manufacturing method.

<3> 上記酸性水のpHが、1〜3の範囲内である<1>又は<2>に記載のクロロゲン酸の製造方法である。   <3> The method for producing chlorogenic acid according to <1> or <2>, wherein the acidic water has a pH within a range of 1 to 3.

<4> 上記25℃における比誘電率が3以上であって、かつ、水と2層に相分離可能な溶媒が、酢酸エチル、酢酸ブチル、及びメチルエチルケトンからなる群より選ばれる少なくとも1種の溶媒である<1>〜<3>のいずれか1つに記載のクロロゲン酸の製造方法である。   <4> At least one solvent selected from the group consisting of ethyl acetate, butyl acetate, and methyl ethyl ketone, wherein the relative permittivity at 25 ° C. is 3 or more and the solvent is phase-separable into water and two layers. The method for producing chlorogenic acid according to any one of <1> to <3>.

<5> 上記回収した有機相を濃縮し、結晶を生成させる工程を含む<1>〜<4>のいずれか1つに記載のクロロゲン酸の製造方法である。   <5> The method for producing chlorogenic acid according to any one of <1> to <4>, which includes a step of concentrating the recovered organic phase and generating crystals.

本明細書において「〜」を用いて表される数値範囲は、「〜」の前後に記載される数値を下限値及び上限値として含む範囲を意味する。   In the present specification, a numerical range represented by using “to” means a range including numerical values described before and after “to” as a lower limit value and an upper limit value.

本明細書において、組成物中の各成分の量について言及する場合、組成物中に各成分に該当する物質が複数存在する場合には、特に断らない限り、組成物中に存在する複数の物質の合計量を意味する。   In this specification, when referring to the amount of each component in the composition, when there are a plurality of substances corresponding to each component in the composition, a plurality of substances present in the composition unless otherwise specified. Means the total amount.

本明細書において「工程」との語は、独立した工程だけではなく、他の工程と明確に区別できない場合であっても、その工程の所期の目的が達成される場合には、本用語に含まれる。   In this specification, the term “process” is not only an independent process, but also the term used when the intended purpose of the process is achieved even when it cannot be clearly distinguished from other processes. include.

本発明によれば、脂質の含有量が多い原材料からでも高純度のクロロゲン酸を高収率で得ることができるクロロゲン酸の製造方法を提供することができる。   ADVANTAGE OF THE INVENTION According to this invention, the manufacturing method of the chlorogenic acid which can obtain highly purified chlorogenic acid with a high yield even from the raw material with much content of lipid can be provided.

以下、本発明の具体的な実施形態について詳細に説明するが、本発明は、以下の実施形態に何ら限定されるものではなく、本発明の目的の範囲内において、適宜変更を加えて実施することができる。   Hereinafter, specific embodiments of the present invention will be described in detail. However, the present invention is not limited to the following embodiments, and may be implemented with appropriate modifications within the scope of the object of the present invention. be able to.

[クロロゲン酸の製造方法]
本発明のクロロゲン酸の製造方法は、ヒマワリの種子及びその搾油残渣からなる群より選ばれる少なくとも1種と、水、アルコール、及び水とアルコールとの混合液からなる群より選ばれる溶媒と、を接触させ、抽出液を得る工程(以下、適宜、「工程(A)」と称する。)、上記抽出液とアルミニウム塩とを接触させた後、生成した固形物を回収する工程(以下、適宜、「工程(B)」と称する。)、上記固形物を酸性水に溶解させる工程(以下、適宜、「工程(C)」と称する。)、上記固形物が溶解された酸性水と、25℃における比誘電率が3未満の溶媒と、を混合した後、水相と有機相とを分離させ、水相を回収する工程(以下、適宜、「工程(D)」と称する。)、及び、上記回収した水相と、25℃における比誘電率が3以上であって、かつ、水と2層に相分離可能な溶媒と、を混合した後、水相と有機相とを分離させ、有機相を回収する工程(以下、適宜、「工程(E)」と称する。)を含むことを特徴とする。
本発明のクロロゲン酸の製造方法によれば、脂質の含有量が多い原材料からでも、高純度なクロロゲン酸を高収率で得ることができる。
[Method for producing chlorogenic acid]
The method for producing chlorogenic acid of the present invention comprises at least one selected from the group consisting of sunflower seeds and oil residue thereof, and a solvent selected from the group consisting of water, alcohol, and a mixture of water and alcohol. A step of contacting the extract to obtain an extract (hereinafter referred to as “step (A)” as appropriate), a step of recovering the produced solid after contacting the extract with an aluminum salt (hereinafter, appropriately) Referred to as “step (B)”), a step of dissolving the solid in acidic water (hereinafter referred to as “step (C)” as appropriate), acidic water in which the solid was dissolved, and 25 ° C. And a solvent having a relative dielectric constant of less than 3 after mixing, separating the aqueous phase from the organic phase, and recovering the aqueous phase (hereinafter referred to as “step (D)” as appropriate), and The recovered water phase and a relative dielectric constant at 25 ° C. of 3 or more And after mixing water and a solvent capable of phase separation into two layers, separating the aqueous phase and the organic phase, and recovering the organic phase (hereinafter referred to as “step (E)” as appropriate) It is characterized by including.
According to the method for producing chlorogenic acid of the present invention, high-purity chlorogenic acid can be obtained in high yield even from raw materials having a high lipid content.

本発明の作用機構は明確ではないが、本発明者は、以下の如く推測している。
従来法、例えば、上述の特許文献1に記載された方法では、工程1において、低pH条件でアルミニウム錯体を形成する脂質等の不純物を除去することを意図しているが、クロロゲン酸についてもアルミニウム錯体を形成する場合がある。そのため、クロロゲン酸が除去されてしまうことがある。また、工程1では、ヒマワリの種子等の脂質の含有量が多い原材料を使用した場合に、脂質を十分に取り除くことができない。そのため、工程2において、クロロゲン酸のアルミニウム錯体とともに、工程1で取り除くことができなかった脂質のアルミニウム錯体が形成されることになり、最終的にクロロゲン酸の純度及び収率が低いものとなっている。
Although the action mechanism of the present invention is not clear, the present inventor presumes as follows.
In the conventional method, for example, the method described in Patent Document 1 described above, in Step 1, it is intended to remove impurities such as lipids that form an aluminum complex under a low pH condition. A complex may be formed. Therefore, chlorogenic acid may be removed. Further, in Step 1, when a raw material having a high lipid content such as sunflower seeds is used, the lipid cannot be sufficiently removed. Therefore, in Step 2, together with the aluminum complex of chlorogenic acid, an aluminum complex of lipid that could not be removed in Step 1 is formed, and finally the purity and yield of chlorogenic acid are low. Yes.

これに対して、本発明のクロロゲン酸の製造方法では、工程(A)において、ヒマワリの種子及びその搾油残渣からなる群より選ばれる少なくとも1種(以下、適宜、「ヒマワリの種子等」と称する。)と、水、アルコール、及び水とアルコールとの混合液からなる群より選ばれる溶媒と、を接触させることで、クロロゲン酸及び不純物(脂質、糖質、水溶性タンパク質、無機分等)を含む抽出液を得ることができる。ここでは、ヒマワリの種子等に含まれる食物繊維や水不溶性タンパク質が残渣として分離される。   On the other hand, in the method for producing chlorogenic acid of the present invention, in step (A), at least one selected from the group consisting of sunflower seeds and oil residue (hereinafter referred to as “sunflower seeds etc.” as appropriate). ) And a solvent selected from the group consisting of water, alcohol, and a mixture of water and alcohol, chlorogenic acid and impurities (lipid, carbohydrate, water-soluble protein, inorganic content, etc.) An extract containing it can be obtained. Here, dietary fiber and water-insoluble protein contained in sunflower seeds and the like are separated as residues.

工程(B)では、クロロゲン酸及び不純物(脂質、糖質、水溶性タンパク質、無機分等)とアルミニウム塩とを接触させることで、クロロゲン酸のアルミニウム錯体及び脂質(例えば、遊離の脂肪酸)のアルミニウム錯体が形成される。これらのアルミニウム錯体は、固形分として回収することができるため、アルミニウム錯体を形成しない不純物については、工程(B)において取り除くことができる。   In the step (B), chlorogenic acid and impurities (lipid, saccharide, water-soluble protein, inorganic component, etc.) and aluminum salt are brought into contact with each other, whereby chlorogenic acid aluminum complex and lipid (eg, free fatty acid) aluminum are contacted. A complex is formed. Since these aluminum complexes can be recovered as a solid content, impurities that do not form an aluminum complex can be removed in step (B).

工程(C)では、固形分として回収したクロロゲン酸のアルミニウム錯体及び脂質のアルミニウム錯体を酸性水に溶解させることにより脱保護し、クロロゲン酸及び脂質に戻す。   In step (C), the aluminum complex of chlorogenic acid and the aluminum complex of lipid recovered as solids are dissolved in acidic water to return to chlorogenic acid and lipid.

工程(D)では、クロロゲン酸、脂質、及びアルミニウム錯体を形成していた脂質以外の不純物が溶解された酸性水と、25℃における比誘電率が3未満の溶媒と、を混合した後、水相と有機相とに分離させることで、クロロゲン酸を含む水相と脂質を含む有機相とを得ることができる。この段階で、クロロゲン酸と脂質とを分離させることで、脂質が多く含まれる原材料を使用した場合でも、効果的に脂質を取り除くことができる。   In the step (D), after mixing acidic water in which impurities other than lipids forming chlorogenic acid, lipid, and aluminum complex were dissolved, and a solvent having a relative dielectric constant at 25 ° C. of less than 3, By separating into a phase and an organic phase, an aqueous phase containing chlorogenic acid and an organic phase containing lipid can be obtained. By separating chlorogenic acid and lipid at this stage, the lipid can be effectively removed even when a raw material containing a large amount of lipid is used.

工程(E)では、工程(D)で得られたクロロゲン酸を含む水相と、25℃における比誘電率が3以上であって、かつ、水と2層に相分離可能な溶媒と、を混合した後、水相と有機相とに分離させることで、クロロゲン酸を含む溶媒相を得ることができる。水相には、残存する水溶性の不純物が含まれており、この水相を除去することで、最終的には、高純度なクロロゲン酸を高収率で得ることができる。   In the step (E), an aqueous phase containing the chlorogenic acid obtained in the step (D) and a solvent having a relative dielectric constant of 3 or more at 25 ° C. and capable of phase separation into water and two layers. After mixing, a solvent phase containing chlorogenic acid can be obtained by separating into an aqueous phase and an organic phase. The aqueous phase contains residual water-soluble impurities. By removing this aqueous phase, high-purity chlorogenic acid can be finally obtained in a high yield.

また、本発明のクロロゲン酸の製造方法によれば、不純物を除去する方法として、クロロゲン酸自体の構造を変更するような化学反応を経る工程を含まない。すなわち、本発明のクロロゲン酸の製造方法では、アルミニウム錯体を形成させた後、アルミニウムイオンを脱保護するという、クロロゲン酸自体の構造が変更されない方法を採用しているので、副生成物が生じる懸念がない。そのため、最終的に得られるクロロゲン酸は、安全性が高く、食品用途に好適なものとなる。   Further, according to the method for producing chlorogenic acid of the present invention, the method for removing impurities does not include a step of undergoing a chemical reaction that changes the structure of chlorogenic acid itself. That is, the method for producing chlorogenic acid of the present invention employs a method in which the structure of chlorogenic acid itself is not changed, in which aluminum ions are deprotected after forming an aluminum complex. There is no. Therefore, the finally obtained chlorogenic acid has high safety and is suitable for food use.

以下、本発明におけるクロロゲン酸について説明した後、本発明のクロロゲン酸の製造方法に含まれる各工程について、具体的に説明する。   Hereinafter, after describing chlorogenic acid in the present invention, each step included in the method for producing chlorogenic acid of the present invention will be specifically described.

本発明において、「クロロゲン酸」とは、クロロゲン酸、クロロゲン酸の異性体、及びクロロゲン酸の誘導体(以下、適宜、「クロロゲン酸類」と称する。)を包含する意味で用いられる。
クロロゲン酸類は、下記一般式(1)で表される化合物群の総称であり、式(1−1)で表されるキナ酸の4つの水酸基の1個〜3個が、式(1−2)で表されるカフェ酸部分構造とエステル結合してなる化合物であり、式(1−1)で表されるキナ酸部にカルボキシル基を有する。
なお、クロロゲン酸の誘導体としては、例えば、下記一般式(1)で表される構造において、Rが水素原子以外、例えば、メチル基等のアルキル基である化合物などが挙げられ、このような誘導体も、本発明の製造方法により得ることができる。
本発明の製造方法において得られるクロロゲン酸としては、下記一般式(1)におけるR、R、R、及びRが水素であり、かつ、Rが下記式(1−2)で表されるカフェ酸部分構造である化合物が主成分となる。
In the present invention, “chlorogenic acid” is used to include chlorogenic acid, isomers of chlorogenic acid, and derivatives of chlorogenic acid (hereinafter, appropriately referred to as “chlorogenic acids”).
Chlorogenic acids are a general term for a group of compounds represented by the following general formula (1). One to three of the four hydroxyl groups of quinic acid represented by the formula (1-1) are represented by the formula (1-2). ) And a caffeic acid partial structure represented by an ester bond, and has a carboxyl group in the quinic acid portion represented by the formula (1-1).
Examples of the derivative of chlorogenic acid include compounds in which R 5 is other than a hydrogen atom, for example, an alkyl group such as a methyl group in the structure represented by the following general formula (1). Derivatives can also be obtained by the production method of the present invention.
As chlorogenic acid obtained in the production method of the present invention, R 1 , R 2 , R 3 , and R 5 in the following general formula (1) are hydrogen, and R 4 is represented by the following formula (1-2). A compound having a caffeic acid partial structure represented is a main component.

一般式(1)中、R、R、R、及びRは、それぞれ独立に、水素原子又は式(1−2)で示される部分構造を表し、R、R、R、及びRのうち、1個〜3個は、式(1−2)で表される部分構造である。Rは、水素原子又はメチル基を表す。 In General Formula (1), R 1 , R 2 , R 3 , and R 4 each independently represent a hydrogen atom or a partial structure represented by Formula (1-2), and R 1 , R 2 , R 3 , And R 4 are partial structures represented by the formula (1-2). R 5 represents a hydrogen atom or a methyl group.

<工程(A)>
工程(A)は、ヒマワリの種子及びその搾油残渣からなる群より選ばれる少なくとも1種と、水、アルコール、及び水とアルコールとの混合液からなる群より選ばれる溶媒と、を接触させ、抽出液を得る工程である。工程(A)では、ヒマワリの種子等からクロロゲン酸及び不純物(脂質、糖質、水溶性タンパク質、無機分等)を含む抽出液を得ることができる。食物繊維、水不溶性タンパク質等の不純物については、残渣として取り除くことができる。
<Process (A)>
In the step (A), at least one selected from the group consisting of sunflower seeds and oil extraction residues thereof is contacted with a solvent selected from the group consisting of water, alcohol, and a mixture of water and alcohol, and extracted. This is a step of obtaining a liquid. In the step (A), an extract containing chlorogenic acid and impurities (lipid, carbohydrate, water-soluble protein, inorganic component, etc.) can be obtained from sunflower seeds and the like. Impurities such as dietary fiber and water-insoluble protein can be removed as a residue.

本発明のクロロゲン酸の製造方法では、原材料として、ヒマワリの種子及びその搾油残渣からなる群より選ばれる少なくとも1種を使用する。ヒマワリの種子及びその搾油残渣には、クロロゲン酸が多く含まれているが、脂質も多く含まれている。
本発明における「ヒマワリの種子」とは、キク科、ヒマワリ属に属するヒマワリ(学名:Helianthus annuus L.)の痩果(そうか)と呼ばれるものをいう。
In the method for producing chlorogenic acid of the present invention, at least one selected from the group consisting of sunflower seeds and oil residue thereof is used as a raw material. Sunflower seeds and oil residue thereof are rich in chlorogenic acid, but also rich in lipids.
The term “sunflower seed” in the present invention refers to what is called the fruit of a sunflower (scientific name: Helianthus annuus L.) belonging to the family Asteraceae and the genus Sunflower.

原材料として、ヒマワリの種子を使用する場合には、クロロゲン酸の抽出を容易にする観点から、ヒマワリの種子を粉砕機等により適当な粒子に粉砕することが好ましい。   When using sunflower seeds as a raw material, it is preferable to pulverize the sunflower seeds into suitable particles with a pulverizer or the like from the viewpoint of facilitating extraction of chlorogenic acid.

ヒマワリの種子等と接触させる溶媒、いわゆる抽出溶媒は、水、アルコール、及び水とアルコールとの混合液からなる群より選ばれ、抽出効率の観点からは、水とアルコールとの混合液が好ましい。
アルコールとしては、例えば、エタノール、メタノール、イソプロピルアルコール等が挙げられる。アルコールは、2種以上を混合して用いてもよい。最終的に得られるクロロゲン酸を食品、化粧品、医薬品等に使用する場合には、安全性の観点から、アルコールは、エタノールであることが好ましい。
また、抽出溶媒として、水とアルコールとの混合溶媒を用いる場合には、水とアルコールとの質量比(水/アルコール)は、1/10〜10/1であることが好ましい。
The solvent to be contacted with sunflower seeds, so-called extraction solvent, is selected from the group consisting of water, alcohol, and a mixture of water and alcohol. From the viewpoint of extraction efficiency, a mixture of water and alcohol is preferred.
Examples of the alcohol include ethanol, methanol, isopropyl alcohol and the like. Two or more kinds of alcohols may be mixed and used. When the finally obtained chlorogenic acid is used in foods, cosmetics, pharmaceuticals and the like, the alcohol is preferably ethanol from the viewpoint of safety.
Moreover, when using the mixed solvent of water and alcohol as an extraction solvent, it is preferable that mass ratio (water / alcohol) of water and alcohol is 1/10-10/1.

ヒマワリの種子等と上記溶媒とを接触させて、抽出液を得る方法としては、特に限定されるものではなく、例えば、上記溶媒中に、ヒマワリの種子の粉砕物やヒマワリの種子の搾油残渣を入れ、加熱還流した後、固液分離を行なうことにより、抽出液を得る方法、ヒマワリの種子の粉砕物やヒマワリの種子の搾油残渣等を充填したカラムに、常圧又は加圧条件下で、常温又は高温で、上記溶媒を通液させることにより、抽出液を得る方法等が挙げられる。
加熱還流後の固液分離の方法は、特に限定されるものではなく、例えば、濾過(例えば、吸引濾過、加圧濾過等)、遠心分離、圧搾等の方法が挙げられる。
A method for obtaining an extract by bringing sunflower seeds and the like into contact with the above solvent is not particularly limited. For example, in the above solvent, sunflower seed pulverized material or sunflower seed oil extraction residue Put into a column filled with sunflower seed pulverized material or sunflower seed oil extraction residue, etc. Examples thereof include a method of obtaining an extract by passing the solvent at room temperature or high temperature.
The method of solid-liquid separation after heating to reflux is not particularly limited, and examples thereof include filtration (for example, suction filtration, pressure filtration, etc.), centrifugation, squeezing, and the like.

ヒマワリの種子等と上記溶媒とを接触させる際の温度、いわゆる抽出温度は、溶媒の種類に応じて、適宜、選択される。例えば、上記溶媒が水である場合には、抽出効率の観点から、10℃〜100℃であることが好ましく、30℃〜100℃であることがより好ましい。また、例えば、上記溶媒がアルコールである場合には、抽出効率の観点から、10℃〜90℃であることが好ましく、30℃〜90℃であることがより好ましい。さらに、例えば、上記溶媒が水とアルコールとの混合液(質量比:水/アルコール=50/50)である場合には、抽出効率の観点から、10℃〜100℃であることが好ましく、30℃〜90℃であることがより好ましい。
ヒマワリの種子等と上記溶媒とを接触させる時間、いわゆる抽出時間は、溶媒の種類、抽出温度等に応じて、適宜、選択される。一般には、抽出時間は1時間〜24時間である。
ヒマワリの種子等に接触させる上記溶媒の量は、ヒマワリの種子等に対して、質量比で3倍〜50倍であることが好ましく、5倍〜20倍であることがより好ましい。
The temperature at which the sunflower seeds and the like are brought into contact with the above solvent, the so-called extraction temperature, is appropriately selected according to the type of the solvent. For example, when the solvent is water, it is preferably 10 ° C. to 100 ° C., more preferably 30 ° C. to 100 ° C. from the viewpoint of extraction efficiency. For example, when the said solvent is alcohol, it is preferable that it is 10 to 90 degreeC from a viewpoint of extraction efficiency, and it is more preferable that it is 30 to 90 degreeC. Furthermore, for example, when the solvent is a mixed liquid of water and alcohol (mass ratio: water / alcohol = 50/50), from the viewpoint of extraction efficiency, the temperature is preferably 10 ° C. to 100 ° C., 30 More preferably, the temperature is from 0C to 90C.
The time during which the sunflower seeds and the like are brought into contact with the solvent, so-called extraction time, is appropriately selected according to the type of solvent, the extraction temperature, and the like. Generally, the extraction time is 1 hour to 24 hours.
The amount of the solvent to be brought into contact with sunflower seeds and the like is preferably 3 to 50 times, more preferably 5 to 20 times in terms of mass ratio with respect to sunflower seeds and the like.

<工程(B)>
工程(B)は、上記工程(A)で得た抽出液とアルミニウム塩とを接触させた後、生成した固形物を回収する工程である。工程(B)では、クロロゲン酸及び不純物(例えば、脂質、糖質、水溶性タンパク質、無機分等)を含む抽出液と、アルミニウム塩と、を接触させた後、好ましくは、pHを4.5〜8とすることで、クロロゲン酸のカルボン酸部位及びフェノール部位の少なくとも一方が解離し、クロロゲン酸のアルミニウム錯体が形成されるとともに、脂質(例えば、遊離の脂肪酸)のアルミニウム錯体が形成される。これらのアルミニウム錯体は、固形物として沈殿するため、固液分離することで、アルミニウム錯体を形成しない不純物を取り除くことができる。
<Process (B)>
The step (B) is a step of recovering the generated solid after contacting the extract obtained in the step (A) with an aluminum salt. In the step (B), after bringing the extract containing chlorogenic acid and impurities (for example, lipid, saccharide, water-soluble protein, inorganic content, etc.) into contact with the aluminum salt, the pH is preferably 4.5. By setting it to -8, at least one of the carboxylic acid moiety and the phenol moiety of chlorogenic acid is dissociated to form an aluminum complex of chlorogenic acid and an aluminum complex of lipid (for example, free fatty acid). Since these aluminum complexes are precipitated as solids, impurities that do not form aluminum complexes can be removed by solid-liquid separation.

アルミニウム塩としては、例えば、硫酸アルミニウム、硫酸カリウムアルミニウム、硫酸カリウムアルミニウム水和物、硫酸アンモニウムアルミニウム、硫酸アンモニウムアルミニウム水和物、硫酸ナトリウムアルミニウム、硫酸ナトリウムアルミニウム水和物等が挙げられる。これらのアルミニウム塩は、1種単独で用いても2種以上を併用してもよい。本発明におけるアルミニウム塩は、入手及び価格の観点から、硫酸アルミニウム、硫酸カリウムアルミニウム、硫酸カリウムアルミニウム水和物、硫酸アンモニウムアルミニウム、及び硫酸アンモニウムアルミニウム水和物からなる群より選ばれる少なくとも1種であることが好ましく、硫酸アルミニウム、硫酸カリウムアルミニウム十二水和物、及び硫酸アンモニウムアルミニウム十二水和物からなる群より選ばれる少なくとも1種であることがより好ましく、硫酸カリウムアルミニウム十二水和物及び硫酸アンモニウムアルミニウム十二水和物からなる群より選ばれる少なくとも1種であることが更に好ましく、硫酸カリウムアルミニウム十二水和物であることが特に好ましい。   Examples of the aluminum salt include aluminum sulfate, potassium aluminum sulfate, potassium aluminum sulfate hydrate, ammonium aluminum sulfate, ammonium aluminum sulfate hydrate, sodium aluminum sulfate, sodium aluminum sulfate hydrate and the like. These aluminum salts may be used alone or in combination of two or more. The aluminum salt in the present invention is at least one selected from the group consisting of aluminum sulfate, potassium aluminum sulfate, potassium aluminum sulfate hydrate, ammonium aluminum sulfate, and ammonium aluminum sulfate hydrate from the viewpoint of availability and price. More preferably, it is at least one selected from the group consisting of aluminum sulfate, potassium aluminum sulfate dodecahydrate, and ammonium aluminum sulfate dodecahydrate, and potassium aluminum sulfate dodecahydrate and ammonium aluminum sulfate dodecahydrate. More preferably, it is at least one selected from the group consisting of dihydrates, and potassium aluminum sulfate dodecahydrate is particularly preferable.

上記抽出液と接触させるアルミニウム塩の量は、クロロゲン酸のアルミニウム錯体を形成させるために十分な量であれば、特に限定されるものではなく、過剰であってもよい。通常、上記アルミニウム塩の量は、抽出液中のクロロゲン酸類の質量に対して、質量比で1倍〜100倍であり、2倍〜50倍であることが好ましい。   The amount of the aluminum salt brought into contact with the extract is not particularly limited as long as it is a sufficient amount to form an aluminum complex of chlorogenic acid, and may be excessive. Usually, the amount of the aluminum salt is 1 to 100 times and preferably 2 to 50 times in terms of mass ratio to the mass of chlorogenic acids in the extract.

上記抽出液とアルミニウム塩とを接触させる方法としては、特に限定されるものではなく、例えば、上記抽出液にアルミニウム塩を添加し、室温(25℃)下で撹拌する方法等が挙げられる。
クロロゲン酸のアルミニウム錯体の形成を促進させる観点から、上記抽出液とアルミニウム塩とを接触させた後、溶液のpHを4.5〜8に調整することが好ましく、5〜7に調整することがより好ましい。また、クロロゲン酸のアルミニウム錯体及び脂質のアルミニウム錯体の固形物としての析出を促進させる観点から、上記pHの調整後、溶液の温度を20℃以下にすることが好ましい。
pHの調整は、例えば、塩基性物質の添加により行なうことができる。塩基性物質としては、例えば、水酸化ナトリウム、水酸化カルシウム、水酸化カリウム、アンモニア等が挙げられる。
生成した固形物を回収する方法としては、特に限定されるものではなく、従来公知の固液分離方法を採用することができ、例えば、濾過(例えば、吸引濾過、加圧濾過等)、遠心分離等が挙げられる。
The method of bringing the extract into contact with the aluminum salt is not particularly limited, and examples thereof include a method in which an aluminum salt is added to the extract and stirred at room temperature (25 ° C.).
From the viewpoint of promoting the formation of an aluminum complex of chlorogenic acid, it is preferable to adjust the pH of the solution to 4.5 to 8, and to 5 to 7 after contacting the extract and the aluminum salt. More preferred. Further, from the viewpoint of promoting precipitation as a solid of an aluminum complex of chlorogenic acid and an aluminum complex of lipid, it is preferable to adjust the temperature of the solution to 20 ° C. or less after adjusting the pH.
The pH can be adjusted, for example, by adding a basic substance. Examples of the basic substance include sodium hydroxide, calcium hydroxide, potassium hydroxide, ammonia and the like.
The method for recovering the produced solid matter is not particularly limited, and a conventionally known solid-liquid separation method can be employed. For example, filtration (for example, suction filtration, pressure filtration, etc.), centrifugation Etc.

<工程(C)>
工程(C)は、上記工程(B)で回収した固形物を酸性水に溶解させる工程である。工程(C)では、固形分として回収したクロロゲン酸のアルミニウム錯体及び脂質のアルミニウム錯体を酸性水に溶解させることにより脱保護し、クロロゲン酸及び脂質に戻す。
<Process (C)>
Step (C) is a step of dissolving the solid collected in the step (B) in acidic water. In step (C), the aluminum complex of chlorogenic acid and the aluminum complex of lipid recovered as solids are dissolved in acidic water to return to chlorogenic acid and lipid.

上記工程(B)で回収した固形物を溶解させる酸性水のpHは、アルミニウムイオンの脱保護を促進させる観点から、1〜4の範囲内であることが好ましく、1〜3の範囲内であることがより好ましい。
酸性水としては、例えば、塩酸、硫酸、硝酸、酢酸等の酸性の水溶液が挙げられ、クロロゲン酸類の安定性の観点から、塩酸及び硫酸が好ましい。
酸性水の量は、クロロゲン酸のアルミニウム錯体及び脂質のアルミニウム錯体の全てを脱保護して、クロロゲン酸及び脂質に戻すために十分な量であれば、特に限定されるものではなく、過剰であってもよい。通常、上記酸性水の量は、上記工程(B)で回収した固形物に対して、質量比で2倍〜1000倍であり、5倍〜500倍であることが好ましい。
The pH of the acidic water for dissolving the solid recovered in the step (B) is preferably in the range of 1 to 4 and in the range of 1 to 3, from the viewpoint of promoting deprotection of aluminum ions. It is more preferable.
Examples of acidic water include acidic aqueous solutions such as hydrochloric acid, sulfuric acid, nitric acid, and acetic acid, and hydrochloric acid and sulfuric acid are preferred from the viewpoint of the stability of chlorogenic acids.
The amount of acidic water is not particularly limited as long as it is sufficient to deprotect all of the aluminum complex of chlorogenic acid and the aluminum complex of lipid and return to chlorogenic acid and lipid. May be. Usually, the amount of the acidic water is 2 to 1000 times, and preferably 5 to 500 times in terms of mass ratio with respect to the solid recovered in the step (B).

<工程(D)>
工程(D)は、上記工程(C)で得た、上記工程(B)で回収した固形物が溶解された酸性水と、25℃における比誘電率が3未満の溶媒と、を混合した後、水相と有機相とを分離させ、水相を回収する工程である。工程(D)では、クロロゲン酸、脂質、及びアルミニウム錯体を形成していた脂質以外の不純物が溶解された酸性水と、25℃における比誘電率が3未満の溶媒と、を混合した後、水相と有機相とを分離させることで、クロロゲン酸を含む水相と脂質を含む有機相とを得ることができる。
本発明のクロロゲン酸の製造方法では、上記工程(B)で、クロロゲン酸と脂質とを錯体形成により他の不純物から分離させた後、上記工程(C)で、脱保護によりクロロゲン酸と脂質とに戻し、この工程(D)で、特定の溶媒により脂質を抽出することにより、脂質を効率良く取り除くことができる。その結果、脂質の含有量が多い原材料を使用した場合でも、高純度のクロロゲン酸を得ることができる。
なお、工程(D)は、1回行なってもよいし、更に分離した水相に25℃における比誘電率が3未満の溶媒を添加して抽出する操作を、繰り返して行なってもよい。工程(D)を行なう回数は、好ましくは1回〜10回であり、より好ましくは1回〜5回である。
<Process (D)>
In the step (D), after mixing the acidic water obtained in the step (C) in which the solid recovered in the step (B) is dissolved and the solvent having a relative dielectric constant of less than 3 at 25 ° C. In this step, the aqueous phase and the organic phase are separated and the aqueous phase is recovered. In the step (D), after mixing acidic water in which impurities other than lipids forming chlorogenic acid, lipid, and aluminum complex were dissolved, and a solvent having a relative dielectric constant at 25 ° C. of less than 3, By separating the phase and the organic phase, an aqueous phase containing chlorogenic acid and an organic phase containing lipid can be obtained.
In the method for producing chlorogenic acid of the present invention, in step (B), chlorogenic acid and lipid are separated from other impurities by complex formation, and then in step (C), chlorogenic acid and lipid are separated by deprotection. In this step (D), the lipid can be efficiently removed by extracting the lipid with a specific solvent. As a result, even when a raw material having a high lipid content is used, high purity chlorogenic acid can be obtained.
The step (D) may be performed once, or the operation of adding a solvent having a relative dielectric constant of less than 3 at 25 ° C. to the separated aqueous phase for extraction may be repeated. The number of times of performing the step (D) is preferably 1 to 10 times, more preferably 1 to 5 times.

25℃における比誘電率が3未満の溶媒としては、例えば、ヘキサン(比誘電率:1.9)、ヘプタン(比誘電率:1.9)、シクロヘキサン(比誘電率:2.0)、トルエン(比誘電率:2.4)、p−キシレン(比誘電率:2.3)等が挙げられ、これらの中でもヘキサンが好ましい。25℃における比誘電率が3未満の溶媒は、1種単独で用いても2種以上を併用してもよい。また、比誘電率が3未満の溶媒は、比誘電率が3未満の溶媒と比誘電率が3以上の溶媒とを混合して得られた、比誘電率が3未満の溶媒であってもよい。
なお、比誘電率については、改訂5版化学便覧基礎編II(日本化学会編、丸善)619ページに詳細が記載されており、各溶媒の比誘電率の数値については、同文献に記載された表の数値等が参照できる。
Examples of the solvent having a relative dielectric constant of less than 3 at 25 ° C. include hexane (relative dielectric constant: 1.9), heptane (relative dielectric constant: 1.9), cyclohexane (relative dielectric constant: 2.0), and toluene. (Dielectric constant: 2.4), p-xylene (relative dielectric constant: 2.3), and the like. Among these, hexane is preferable. A solvent having a relative dielectric constant of less than 3 at 25 ° C. may be used alone or in combination of two or more. The solvent having a relative dielectric constant of less than 3 may be a solvent having a relative dielectric constant of less than 3 obtained by mixing a solvent having a relative dielectric constant of less than 3 and a solvent having a relative dielectric constant of 3 or more. Good.
The relative dielectric constant is described in detail on page 619 of the Revised 5th edition of the Chemical Handbook Basic Edition II (Chemical Society of Japan, Maruzen). The values of the relative dielectric constant of each solvent are described in the same document. You can refer to the values in the table.

比誘電率が3未満の溶媒の量は、上記固形物が溶解された酸性水から脂質を抽出するために十分な量であれば、特に限定されるものではなく、過剰であってもよい。通常、比誘電率が3未満の溶媒の量は、工程(D)1回あたり、上記固形物が溶解された酸性水に対して、質量比で0.1倍〜10倍であり、0.2倍〜50倍であることが好ましい。   The amount of the solvent having a relative dielectric constant of less than 3 is not particularly limited as long as it is an amount sufficient for extracting lipid from the acidic water in which the solid matter is dissolved, and may be excessive. Usually, the amount of the solvent having a relative dielectric constant of less than 3 is 0.1 to 10 times in mass ratio with respect to the acidic water in which the solid matter is dissolved per step (D). It is preferably 2 to 50 times.

<工程(E)>
工程(E)は、上記工程(D)で回収した水相と、25℃における比誘電率が3以上であって、かつ、水と2層に相分離可能な溶媒と、を混合した後、水相と有機相とを分離させ、有機相を回収する工程である。工程(E)では、上記工程(D)で回収したクロロゲン酸を含む水相と、25℃における比誘電率が3以上であって、かつ、水と2層に相分離可能な溶媒と、を混合した後、水相と有機相とに分離させることで、クロロゲン酸を含む溶媒相を得ることができる。水相には、残存する水溶性の不純物が含まれており、この水相を除去することで、純度の高いクロロゲン酸を得ることができる。
なお、この工程(E)は、1回行なってもよいし、更に分離した水相に25℃における比誘電率が3以上であって、かつ、水と2層に相分離可能な溶媒を添加して抽出する操作を、繰り返して行なってもよい。工程(E)を行なう回数は、好ましくは1回〜10回であり、より好ましくは1回〜5回である。
<Process (E)>
In the step (E), the aqueous phase recovered in the step (D) is mixed with a solvent having a relative dielectric constant of 3 or more at 25 ° C. and water and a phase-separable solvent in two layers. In this step, the aqueous phase and the organic phase are separated and the organic phase is recovered. In the step (E), an aqueous phase containing the chlorogenic acid recovered in the step (D) and a solvent having a relative dielectric constant of 3 or more at 25 ° C. and capable of phase separation into two layers. After mixing, a solvent phase containing chlorogenic acid can be obtained by separating into an aqueous phase and an organic phase. The aqueous phase contains residual water-soluble impurities, and high purity chlorogenic acid can be obtained by removing the aqueous phase.
In addition, this process (E) may be performed once, and a solvent having a relative dielectric constant of 3 or more at 25 ° C. and capable of phase separation in two layers is added to the separated aqueous phase. The extraction operation may be repeated. The number of times of performing the step (E) is preferably 1 to 10 times, more preferably 1 to 5 times.

25℃における比誘電率が3以上であって、かつ、水と2層に相分離可能な溶媒としては、例えば、酢酸エチル(比誘電率:6.1)、酢酸ブチル(比誘電率:5.0)、メチルエチルケトン(比誘電率:18.6)、塩化メチレン(比誘電率:8.9)、クロロホルム(比誘電率:4.8)、ジエチルエーテル(比誘電率:4.3)、テトラヒドロフラン(比誘電率:7.5)等が挙げられ、これらの中でも、抽出効率の観点から、酢酸エチル、酢酸ブチル、及びメチルエチルケトンからなる群より選ばれる少なくとも1種の溶媒が好ましく、酢酸エチルがより好ましい。25℃における比誘電率が3以上であって、かつ、水と2層に相分離可能な溶媒は、1種単独で用いても2種以上を併用してもよい。また、比誘電率が3以上の溶媒は、比誘電率が3以上の溶媒と比誘電率が3未満の溶媒とを混合して得られた、比誘電率が3以上の溶媒であってもよい。ここで、「水と2層に相分離可能な溶媒」とは、水との質量比が1:1となるように混合した後、25℃で10分間静置した場合に、水と2層に相分離していることが、目視にて確認できる溶媒をいう。   Examples of the solvent having a relative dielectric constant of 3 or more at 25 ° C. and capable of phase separation into water and two layers include ethyl acetate (relative dielectric constant: 6.1) and butyl acetate (relative dielectric constant: 5). 0.0), methyl ethyl ketone (relative permittivity: 18.6), methylene chloride (relative permittivity: 8.9), chloroform (relative permittivity: 4.8), diethyl ether (relative permittivity: 4.3), Tetrahydrofuran (dielectric constant: 7.5) and the like are mentioned, and among these, from the viewpoint of extraction efficiency, at least one solvent selected from the group consisting of ethyl acetate, butyl acetate, and methyl ethyl ketone is preferable. More preferred. A solvent having a relative dielectric constant at 25 ° C. of 3 or more and capable of phase separation into water and two layers may be used alone or in combination of two or more. The solvent having a relative dielectric constant of 3 or more may be a solvent having a relative dielectric constant of 3 or more obtained by mixing a solvent having a relative dielectric constant of 3 or more and a solvent having a relative dielectric constant of less than 3. Good. Here, the “solvent capable of phase separation into water and two layers” is a mixture of water and two layers when mixed at a mass ratio of 1: 1 with water and allowed to stand at 25 ° C. for 10 minutes. A solvent that can be visually confirmed to be phase-separated.

比誘電率が3以上であって、かつ、水と2層に相分離可能な溶媒の量は、上記工程(D)で回収したクロロゲン酸を含む水相からクロロゲン酸を抽出するために十分な量であれば、特に限定されるものではなく、過剰であってもよい。比誘電率が3以上であって、かつ、水と2層に相分離可能な溶媒の量は、工程(E)1回あたり、上記工程(D)で回収したクロロゲン酸を含む水相に対して、質量比で0.1倍〜100倍であり、0.2倍〜50倍であることが好ましい。   The relative permittivity is 3 or more, and the amount of water and the solvent that can be phase-separated into two layers is sufficient to extract chlorogenic acid from the aqueous phase containing chlorogenic acid recovered in the step (D). The amount is not particularly limited and may be excessive. The relative dielectric constant is 3 or more, and the amount of the solvent that can be phase-separated into water and two layers is the amount of the aqueous phase containing chlorogenic acid recovered in the step (D) per step (E). The mass ratio is 0.1 to 100 times, and preferably 0.2 to 50 times.

工程(E)では、抽出効率の観点から、上記工程(D)で回収した水相に、塩を添加した後、25℃における比誘電率が3以上であって、かつ、水と2層に相分離可能な溶媒と混合することが好ましい。塩としては、例えば、塩化ナトリウム(食塩)、塩化カリウム、臭化ナトリウム、硫酸ナトリウム等が挙げられる。これらの中でも、安価である点において、塩化ナトリウム(食塩)が好ましい。   In step (E), from the viewpoint of extraction efficiency, after adding salt to the aqueous phase recovered in step (D) above, the relative dielectric constant at 25 ° C. is 3 or more, and water and two layers It is preferable to mix with a phase-separable solvent. Examples of the salt include sodium chloride (salt), potassium chloride, sodium bromide, sodium sulfate and the like. Among these, sodium chloride (salt) is preferable because it is inexpensive.

<その他の工程>
本発明のクロロゲン酸の製造方法は、上記工程(A)〜工程(E)以外に、本発明の効果を損なわない範囲において、必要に応じて、その他の工程を含んでいてもよい。
例えば、上記工程(E)で回収した有機相を濃縮し、結晶を生成させる工程等を含んでいてもよい。
回収した有機相を濃縮し、結晶を生成させる方法は、いわゆる濃縮晶析と呼ばれる方法であり、既知の手順により行なうことができる。例えば、回収した有機相に、無水硫酸ナトリウム、無水硫酸マグネシウム等の乾燥剤を添加し、水分を除去した後、濾過等により水分が除去された有機相を回収し、減圧又は常圧にて濃縮することにより、結晶を生成させる。このような濃縮晶析操作によれば、目的とするクロロゲン酸を固体の形態で得ることができる。
なお、得られた結晶に対しては、目的に応じて、更に再結晶やカラムクロマトグラフィー等による精製などの後処理を行なってもよい。
<Other processes>
The method for producing chlorogenic acid of the present invention may include other steps as necessary within the range not impairing the effects of the present invention, in addition to the above steps (A) to (E).
For example, it may include a step of concentrating the organic phase recovered in the step (E) to generate crystals.
The method of concentrating the recovered organic phase to produce crystals is a method called so-called concentrated crystallization, and can be performed by a known procedure. For example, a desiccant such as anhydrous sodium sulfate or anhydrous magnesium sulfate is added to the recovered organic phase to remove moisture, and then the organic phase from which moisture has been removed by filtration or the like is collected and concentrated under reduced pressure or normal pressure As a result, crystals are formed. According to such a concentration crystallization operation, the target chlorogenic acid can be obtained in a solid form.
The obtained crystal may be further subjected to post-treatment such as recrystallization or purification by column chromatography depending on the purpose.

[クロロゲン酸]
本発明の製造方法によって得られるクロロゲン酸は、高い純度を有している。また、本発明の製造方法は、クロロゲン酸自体の構造を変更するような化学反応を経る工程を含まないことから、副生成物が生じる懸念がなく、得られるクロロゲン酸は安全性が高い。したがって、本発明の製造方法によって得られるクロロゲン酸は、医薬品、化粧品等に好適に用いることできるほか、非常に高い安全性が求められる食品(例えば、健康食品、食品添加物等)に、特に有用である。
[Chlorogenic acid]
The chlorogenic acid obtained by the production method of the present invention has high purity. Moreover, since the manufacturing method of this invention does not include the process which passes through the chemical reaction which changes the structure of chlorogenic acid itself, there is no fear that a by-product produces and the obtained chlorogenic acid is high safety. Therefore, the chlorogenic acid obtained by the production method of the present invention can be suitably used for pharmaceuticals, cosmetics, etc., and is particularly useful for foods that require very high safety (for example, health foods, food additives, etc.). It is.

以下、本発明を実施例により更に具体的に説明するが、本発明はその主旨を越えない限り、以下の実施例に限定されるものではない。   EXAMPLES Hereinafter, the present invention will be described more specifically with reference to examples. However, the present invention is not limited to the following examples unless it exceeds the gist thereof.

[実施例1]
水250mLとエタノール250mLとの混合溶媒に、ヒマワリの搾油残渣50gを添加し、窒素雰囲気下で2時間、90℃にて加熱還流した。室温まで冷却した後、吸引濾過し、更に、残渣を水100mLとエタノール100mLとの混合溶媒で洗浄し、抽出液507gを得た。この抽出液中のクロロゲン酸の含有量は、1.14gであった。
得られた抽出液456gに、硫酸カリウムアルミニウム十二水和物5.46gを水50mLに溶解させて得られた溶液を添加した。室温(25℃)で10分間撹拌した後、10%水酸化ナトリウム水溶液を滴下して、pHを6に調整した。pH調整後の溶液を、室温(25℃)で10分間撹拌した後、5℃になるまで氷冷した。氷冷後、吸引濾過により固形分を濾別し、水洗した。
水洗後の固形分を、1%塩酸水溶液(pH:1)250mLに溶解させた後、ヘキサン(25℃における比誘電率:1.9)250mLを加えた。室温(25℃)で10分間撹拌した後、分液し、水相を回収した。
回収した水相に食塩を添加した後、酢酸エチル(25℃における比誘電率:6.0)250mlを加えて、室温(25℃)で10分間撹拌し、分液し、有機相を回収する操作を5回繰り返した。
回収した有機相に無水硫酸ナトリウムを添加し、水分を除去した後、吸引濾過により、濾液を回収した。回収した濾液に対して、減圧にて濃縮晶析を行ない、834mgの結晶を得た。
得られた結晶のH−NMR測定を行なったところ、その主成分がクロロゲン酸であることが確認された。
H−NMR(DO:300MHz)7.51(d,1H)、7.09(d,1H)、7.03(d,1H)、6.87(d,1H)、6.24(d,1H)、5.26〜5.15(m,1H)、4.22〜4.15(m,1H)、3.85〜3.76(m,1H)、2.22〜1.94(m,4H)。
得られた結晶のクロロゲン酸としての純度は92.5%であり、収率は75.3%であった。
[Example 1]
50 g of sunflower oil residue was added to a mixed solvent of 250 mL of water and 250 mL of ethanol, and the mixture was heated to reflux at 90 ° C. for 2 hours under a nitrogen atmosphere. After cooling to room temperature, suction filtration was performed, and the residue was further washed with a mixed solvent of 100 mL of water and 100 mL of ethanol to obtain 507 g of an extract. The content of chlorogenic acid in this extract was 1.14 g.
A solution obtained by dissolving 5.46 g of potassium aluminum sulfate dodecahydrate in 50 mL of water was added to 456 g of the obtained extract. After stirring at room temperature (25 ° C.) for 10 minutes, a 10% aqueous sodium hydroxide solution was added dropwise to adjust the pH to 6. The solution after pH adjustment was stirred at room temperature (25 ° C.) for 10 minutes and then ice-cooled to 5 ° C. After cooling with ice, the solid content was separated by suction filtration and washed with water.
The solid content after washing with water was dissolved in 250 mL of a 1% aqueous hydrochloric acid solution (pH: 1), and then 250 mL of hexane (relative dielectric constant at 25 ° C .: 1.9) was added. After stirring at room temperature (25 ° C.) for 10 minutes, the mixture was separated and the aqueous phase was recovered.
After adding sodium chloride to the recovered aqueous phase, 250 ml of ethyl acetate (relative permittivity at 25 ° C .: 6.0) is added, and the mixture is stirred at room temperature (25 ° C.) for 10 minutes and separated to recover the organic phase. The operation was repeated 5 times.
Anhydrous sodium sulfate was added to the recovered organic phase to remove moisture, and the filtrate was recovered by suction filtration. The collected filtrate was concentrated and crystallized under reduced pressure to obtain 834 mg of crystals.
When the 1 H-NMR measurement of the obtained crystal was performed, it was confirmed that the main component was chlorogenic acid.
1 H-NMR (D 2 O: 300 MHz) 7.51 (d, 1H), 7.09 (d, 1H), 7.03 (d, 1H), 6.87 (d, 1H), 6.24 (D, 1H), 5.26-5.15 (m, 1H), 4.22-4.15 (m, 1H), 3.85-3.76 (m, 1H), 2.22-1 .94 (m, 4H).
The purity of the obtained crystals as chlorogenic acid was 92.5%, and the yield was 75.3%.

[実施例2]
実施例1において、抽出液に、硫酸カリウムアルミニウム十二水和物5.46gを水50mLに溶解させて得られた溶液を添加したところを、硫酸カリウムアルミニウム十二水和物5.46gの代わりに、硫酸アルミニウム3.94gを用いたこと以外は、実施例1と同様にして、816mgの結晶を得た。
得られた結晶のH−NMR測定を行なったところ、その主成分がクロロゲン酸であることが確認された。
得られた結晶のクロロゲン酸としての純度は91.1%であり、収率は72.5%であった。
[Example 2]
In Example 1, a solution obtained by dissolving 5.46 g of potassium aluminum sulfate dodecahydrate in 50 mL of water was added to the extract, instead of 5.46 g of potassium aluminum sulfate dodecahydrate. In addition, 816 mg of crystals were obtained in the same manner as in Example 1 except that 3.94 g of aluminum sulfate was used.
When the 1 H-NMR measurement of the obtained crystal was performed, it was confirmed that the main component was chlorogenic acid.
The purity of the obtained crystals as chlorogenic acid was 91.1%, and the yield was 72.5%.

[比較例1]
水250mLとエタノール250mLとの混合溶媒に、ヒマワリの搾油残渣50gを添加し、窒素雰囲気下で2時間、90℃にて加熱還流した。室温まで冷却した後、吸引濾過し、更に、残渣を水100mLとエタノール100mLとの混合溶媒で洗浄し、抽出液507gを得た。この抽出液中のクロロゲン酸の含有量は、1.14gであった。
得られた抽出液456gに、濃塩酸2mlを加え、pHを3に調整した。pH調整後の溶液に、硫酸カリウムアルミニウム十二水和物5.46gを水50mLに溶解させて得られた溶液を添加した。pHを2.5に調整した後、室温(25℃)で1時間撹拌した。撹拌後、吸引濾過により固形分を濾別し、エタノール20mlで洗浄した。得られた濾液に、10%水酸化ナトリウム水溶液を滴下して、pHを6に調整した。pH調整後の溶液を、室温(25℃)で1時間撹拌した後、5℃になるまで氷冷した。氷冷後、吸引濾過により固形分を濾別し、水洗した。
水洗後の固形分を、1%塩酸水溶液(pH:1)250mLに溶解させた後、食塩を添加した。その後、酢酸エチル(25℃における比誘電率:6.0)250mlを加えて、室温(25℃)で10分間撹拌し、分液し、有機相を回収する操作を5回繰り返した。
回収した有機相に無水硫酸ナトリウムを添加し、水分を除去した後、吸引濾過により、濾液を回収した。回収した濾液に対して、減圧にて濃縮晶析を行ない、710mgの結晶を得た。
得られた結晶のH−NMR測定を行なったところ、その主成分がクロロゲン酸であることが確認された。
得られた結晶のクロロゲン酸としての純度は78.0%であり、収率は54.0%であった。
[Comparative Example 1]
50 g of sunflower oil residue was added to a mixed solvent of 250 mL of water and 250 mL of ethanol, and the mixture was heated to reflux at 90 ° C. for 2 hours under a nitrogen atmosphere. After cooling to room temperature, suction filtration was performed, and the residue was further washed with a mixed solvent of 100 mL of water and 100 mL of ethanol to obtain 507 g of an extract. The content of chlorogenic acid in this extract was 1.14 g.
2 ml of concentrated hydrochloric acid was added to 456 g of the obtained extract to adjust the pH to 3. To the solution after pH adjustment, a solution obtained by dissolving 5.46 g of potassium aluminum sulfate dodecahydrate in 50 mL of water was added. After adjusting pH to 2.5, it stirred at room temperature (25 degreeC) for 1 hour. After stirring, the solid content was separated by suction filtration and washed with 20 ml of ethanol. To the obtained filtrate, 10% aqueous sodium hydroxide solution was added dropwise to adjust the pH to 6. The solution after pH adjustment was stirred at room temperature (25 ° C.) for 1 hour, and then ice-cooled to 5 ° C. After cooling with ice, the solid content was separated by suction filtration and washed with water.
The solid content after washing with water was dissolved in 250 mL of a 1% aqueous hydrochloric acid solution (pH: 1), and then sodium chloride was added. Thereafter, 250 ml of ethyl acetate (relative dielectric constant at 25 ° C .: 6.0) was added, stirred for 10 minutes at room temperature (25 ° C.), separated, and the organic phase was recovered five times.
Anhydrous sodium sulfate was added to the recovered organic phase to remove moisture, and the filtrate was recovered by suction filtration. The collected filtrate was concentrated and crystallized under reduced pressure to obtain 710 mg of crystals.
When the 1 H-NMR measurement of the obtained crystal was performed, it was confirmed that the main component was chlorogenic acid.
The purity of the obtained crystals as chlorogenic acid was 78.0%, and the yield was 54.0%.

〔抽出液中のクロロゲン酸の定量〕
抽出液中のクロロゲン酸の定量は、UV検出器を備えた逆相の高速液体クロマトグラフィー(HPLC)による絶対検量線法により行なった。検量線は、上記HPLCと同様の条件により、標準クロロゲン酸(和光純薬工業(株)製)を用いて作成した。
[Quantification of chlorogenic acid in the extract]
Chlorogenic acid in the extract was quantified by an absolute calibration curve method by reversed-phase high-performance liquid chromatography (HPLC) equipped with a UV detector. The calibration curve was prepared using standard chlorogenic acid (manufactured by Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) under the same conditions as in the above HPLC.

〔クロロゲン酸の純度測定〕
結晶のクロロゲン酸としての純度は、UV検出器を備えた逆相の高速液体クロマトグラフィー(HPLC)により測定した。上記〔抽出液中のクロロゲン酸の定量〕と同様にして、絶対検量線法により結晶中のクロロゲン酸量を測定し、結晶の重量に対する結晶中のクロロゲン酸量の割合(結晶中のクロロゲン酸量/結晶の重量×100)を算出し、得られた値を純度(%)とした。
[Purity measurement of chlorogenic acid]
The purity of the crystals as chlorogenic acid was measured by reverse phase high performance liquid chromatography (HPLC) equipped with a UV detector. In the same manner as in [Quantitative determination of chlorogenic acid in the extract], the amount of chlorogenic acid in the crystal was measured by the absolute calibration method, and the ratio of the amount of chlorogenic acid in the crystal to the weight of the crystal (the amount of chlorogenic acid in the crystal) / Weight of crystal × 100) was calculated, and the obtained value was defined as purity (%).

Claims (5)

ヒマワリの種子及びその搾油残渣からなる群より選ばれる少なくとも1種と、水、アルコール、及び水とアルコールとの混合液からなる群より選ばれる溶媒と、を接触させ、抽出液を得る工程、
前記抽出液とアルミニウム塩とを接触させた後、生成した固形物を回収する工程、
前記固形物を酸性水に溶解させる工程、
前記固形物が溶解された酸性水と、25℃における比誘電率が3未満の溶媒と、を混合した後、水相と有機相とを分離させ、水相を回収する工程、及び、
前記回収した水相と、25℃における比誘電率が3以上であって、かつ、水と2層に相分離可能な溶媒と、を混合した後、水相と有機相とを分離させ、有機相を回収する工程を含むクロロゲン酸の製造方法。
Contacting at least one selected from the group consisting of sunflower seeds and oil extraction residues thereof with a solvent selected from the group consisting of water, alcohol, and a mixture of water and alcohol, to obtain an extract;
A step of recovering the produced solid after contacting the extract with the aluminum salt;
Dissolving the solid in acidic water;
A step of mixing the acidic water in which the solid is dissolved and a solvent having a relative dielectric constant of less than 3 at 25 ° C., separating the aqueous phase from the organic phase, and recovering the aqueous phase; and
The recovered aqueous phase and a relative dielectric constant at 25 ° C. of 3 or more and water and a solvent capable of phase separation in two layers are mixed, and then the aqueous phase and the organic phase are separated, and organic A method for producing chlorogenic acid comprising a step of recovering a phase.
前記アルミニウム塩が、硫酸アルミニウム、硫酸カリウムアルミニウム、硫酸カリウムアルミニウム水和物、硫酸アンモニウムアルミニウム、及び硫酸アンモニウムアルミニウム水和物からなる群より選ばれる少なくとも1種である請求項1に記載のクロロゲン酸の製造方法。   The method for producing chlorogenic acid according to claim 1, wherein the aluminum salt is at least one selected from the group consisting of aluminum sulfate, potassium aluminum sulfate, potassium aluminum sulfate hydrate, ammonium aluminum sulfate, and ammonium aluminum sulfate hydrate. . 前記酸性水のpHが、1〜3の範囲内である請求項1又は請求項2に記載のクロロゲン酸の製造方法。   The method for producing chlorogenic acid according to claim 1 or 2, wherein the acidic water has a pH within a range of 1 to 3. 前記25℃における比誘電率が3以上であって、かつ、水と2層に相分離可能な溶媒が、酢酸エチル、酢酸ブチル、及びメチルエチルケトンからなる群より選ばれる少なくとも1種の溶媒である請求項1〜請求項3のいずれか1項に記載のクロロゲン酸の製造方法。   The solvent having a relative dielectric constant of 3 or more at 25 ° C. and capable of phase separation into water and two layers is at least one solvent selected from the group consisting of ethyl acetate, butyl acetate, and methyl ethyl ketone. The manufacturing method of the chlorogenic acid of any one of Claims 1-3. 前記回収した有機相を濃縮し、結晶を生成させる工程を含む請求項1〜請求項4のいずれか1項に記載のクロロゲン酸の製造方法。   The manufacturing method of the chlorogenic acid of any one of Claims 1-4 including the process of concentrating the collect | recovered organic phase and producing | generating a crystal | crystallization.
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Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
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CN106349074A (en) * 2016-08-30 2017-01-25 宁夏沃福百瑞枸杞产业股份有限公司 Method for extracting chlorogenic acid in Chinese wolfberry via microwave-assisted ultrasonic
CN110156604A (en) * 2019-06-21 2019-08-23 普洱学院 A kind of extracting method of yellow fruit eggplant Content of Chlorogenic Acid

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