JP2015010070A - Melanin decomposition accelerator and melanosome protein decomposition accelerator - Google Patents
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Abstract
Description
本発明は、フェルラ酸およびフェルラ酸誘導体からなる群より洗濯される少なくとも1種を有効成分として含有するメラニン分解促進剤およびメラノソームタンパク質分解剤に関する。 The present invention relates to a melanin degradation accelerator and a melanosome proteolytic agent containing as an active ingredient at least one member washed from the group consisting of ferulic acid and a ferulic acid derivative.
メラニンは、ヒトを含む動物、植物、原生動物、また一部の菌類、真正細菌において形成される色素である。脊椎動物では、メラニン大半が皮膚の表皮最下層の基底層や毛髪の毛母などにあるメラノサイト(色素細胞)で生成され、一部は網膜色素上皮細胞で生成される。
メラノサイト内では、メラノソームと呼ばれる顆粒中でメラニンが合成され、その後、メラノソームは、周囲のケラチノサイト(表皮細胞)へ輸送される。メラニンは、細胞核のDNAを破壊する紫外線を吸収し、皮膚ガンのリスクを減らす、医学上重要な印紙である。しかしながら、皮膚内でメラニンが過剰に生成される現象はしばしば起こり、これがクスミ、シミ、ソバカスなど、美容上の大きな問題となる。
Melanin is a pigment formed in animals including humans, plants, protozoa, and some fungi and eubacteria. In vertebrates, most of the melanin is produced by melanocytes (pigment cells) in the basal layer at the bottom of the epidermis of the skin and the hair matrix of the hair, and part is produced by retinal pigment epithelial cells.
Within melanocytes, melanin is synthesized in granules called melanosomes, which are then transported to the surrounding keratinocytes (epidermal cells). Melanin is a medically important stamp that absorbs ultraviolet rays that destroy the DNA of the cell nucleus and reduces the risk of skin cancer. However, a phenomenon in which melanin is excessively generated in the skin often occurs, and this becomes a major cosmetic problem such as kusumi, blemishes, and freckles.
現在知られているクスミ、シミ、ソバカスなどの対策としては、紫外線をサンスクリーン剤で遮光する方法、メラニン生合成を阻害する、またはメラニン生合成を促す情報伝達物質を抑制する物質を適用する方法などが知られている。
しかしながら、これらの方法は予防手段としては有効だが、一旦できてしまったシミ、ソバカスに対する根本的な改善手段にはなり得ない。シミ部位では、表皮基底層に過剰のメラニンが蓄積しており、この蓄積メラニンは、新陳代謝機構においても必ずしも排出されるものではない。このような背景から、当業界では基底層に蓄積しているメラニンを減少させることのできる「メラニン分解促進剤」が新規美白剤として強く望まれている。
The currently known countermeasures for Kusumi, stains, buckwheat, etc. include a method of shielding ultraviolet rays with a sunscreen agent, a method of applying a substance that inhibits melanin biosynthesis, or a substance that suppresses an information transmission substance that promotes melanin biosynthesis. Etc. are known.
However, these methods are effective as a preventive measure, but cannot be a fundamental improvement measure for once-stained spots and freckles. At the spot site, excess melanin is accumulated in the basal layer of the epidermis, and this accumulated melanin is not necessarily excreted even in the metabolic mechanism. Against this background, the “melanin degradation promoter” that can reduce the melanin accumulated in the basal layer is strongly desired as a new whitening agent in the industry.
一方、フェルラ酸は、米などのさまざまな植物に含まれている物質で、抗酸化作用、紫外線吸収作用、防黴作用、抗菌作用、血糖値効果作用などの数多くの作用を呈することが知られ、フェルラ酸を含む化粧料についても報告されている(特許文献1)。
また、フェルラ酸誘導体の1種であるオリザノールについて、乾燥肌に対して活性があり、ふけやかゆみを抑える成分として報告されている(特許文献2)。
Ferulic acid, on the other hand, is a substance contained in various plants such as rice, and is known to exhibit many actions such as antioxidant action, ultraviolet light absorption action, antifungal action, antibacterial action, and blood sugar level effect action. A cosmetic containing ferulic acid has also been reported (Patent Document 1).
Moreover, about oryzanol which is 1 type of a ferulic acid derivative, it is active with respect to dry skin, and it is reported as a component which suppresses a dandruff and itching (patent document 2).
しかしながら、フェルラ酸およびフェルラ酸誘導体からなる群より選ばれる少なくとも1種が、単独でメラニン分解促進作用、メラノソームタンパク質の分解作用を示すことについては、従来知られていない。
本発明の目的は、フェルラ酸およびフェルラ酸誘導体からなる群より選ばれる少なくとも1種の新たな用途を提供することである。
また、本発明の目的は、新規なメラニン分解促進剤およびメラノソームタンパク質分解剤に基づく種々の新規な生理活性剤を提供することである。
However, it has not been conventionally known that at least one selected from the group consisting of ferulic acid and a ferulic acid derivative alone exhibits a melanin degradation promoting action and a melanosomal protein degradation action.
An object of the present invention is to provide at least one new application selected from the group consisting of ferulic acid and ferulic acid derivatives.
Another object of the present invention is to provide various novel bioactive agents based on novel melanin degradation promoters and melanosome protein degradation agents.
本発明者らは、フェルラ酸およびフェルラ酸誘導体からなる群より選ばれる少なくとも1種が優れたメラニン分解促進効果を奏するとの知見を得た。また、本発明者らは、フェルラ酸およびフェルラ酸誘導体からなる群より選ばれる少なくとも1種がメラノソームタンパク質の分解効果を有するとの知見を得た。本発明は、このような新しい知見に基づいて達成されたものである。
本発明は以下のとおりである。
[1] フェルラ酸およびフェルラ酸誘導体からなる群より選ばれる少なくとも1種を有効成分として含有するメラニン分解促進剤。
[2] [1]に記載のメラニン分解促進剤を含有する化粧料。
[3] フェルラ酸およびフェルラ酸誘導体からなる群より選ばれる少なくとも1種を有効成分として含有するメラノソームタンパク質分解促進剤。
[4] [3]に記載のメラノソームタンパク質分解促進剤を含有する化粧料。
The present inventors have obtained the knowledge that at least one selected from the group consisting of ferulic acid and ferulic acid derivatives has an excellent melanin decomposition promoting effect. In addition, the present inventors have obtained knowledge that at least one selected from the group consisting of ferulic acid and ferulic acid derivatives has an effect of degrading melanosome proteins. The present invention has been achieved based on such new findings.
The present invention is as follows.
[1] A melanin degradation accelerator containing as an active ingredient at least one selected from the group consisting of ferulic acid and ferulic acid derivatives.
[2] A cosmetic containing the melanin degradation accelerator according to [1].
[3] A melanosome protein degradation accelerator containing as an active ingredient at least one selected from the group consisting of ferulic acid and ferulic acid derivatives.
[4] A cosmetic containing the melanosome protein degradation promoter according to [3].
本発明によれば、フェルラ酸およびフェルラ酸誘導体からなる群より選ばれる少なくとも1種の新たな用途を提供することができる。
また、本発明によれば、新規なメラニン分解促進剤およびメラノソームタンパク質分解促進剤に基づく種々の新規な生理活性剤を提供することができる。
According to the present invention, at least one new application selected from the group consisting of ferulic acid and ferulic acid derivatives can be provided.
Moreover, according to this invention, the various novel bioactive agent based on a novel melanin degradation promoter and a melanosome protein degradation promoter can be provided.
本発明のメラニン分解促進剤およびメラノソームタンパク質分解促進剤は、それぞれ、フェルラ酸およびフェルラ酸誘導体からなる群より選ばれる少なくとも1種を有効成分とする生理活性剤である。
なお、本明細書では、特に断らない限り、メラニン分解促進剤およびメラノソームタンパク質分解促進剤を「生理活性剤」と総称する。
本明細書では、特に断らない限り、紫外線や老化によって生じる皮膚の黒化を予防または回復させること、メラニンの過剰産生による日焼け、シミまたはソバカスといった皮膚の色調変化または色素変化を予防または回復させること、皮膚本来の色調を維持すること、本来の肌の色を白くすること等の効果を、「美白効果」と総称する。
本明細書において「工程」との語は、独立した工程だけではなく、他の工程と明確に区別できない場合であってもその工程の所期の目的が達成されれば、本用語に含まれる。
また本明細書において「〜」は、その前後に記載される数値をそれぞれ最小値および最大値として含む範囲を示すものとする。
さらに本明細書において組成物中の各成分の量は、組成物中に各成分に該当する物質が複数存在する場合、特に断らない限り、組成物中に存在する当該複数の物質の合計量を意味する。
以下、本発明について説明する。
The melanin degradation promoter and melanosome protein degradation promoter of the present invention are bioactive agents each having at least one selected from the group consisting of ferulic acid and ferulic acid derivatives as active ingredients.
In the present specification, unless otherwise specified, melanin degradation promoters and melanosome protein degradation promoters are collectively referred to as “bioactive agents”.
In this specification, unless otherwise specified, prevention or recovery of skin darkening caused by ultraviolet rays or aging, prevention or recovery of skin color change or pigment change such as sunburn, spots or freckles due to excessive production of melanin The effects such as maintaining the original color tone of the skin and whitening the original skin color are collectively referred to as “whitening effect”.
In this specification, the term “process” is not limited to an independent process, and is included in the term if the intended purpose of the process is achieved even when it cannot be clearly distinguished from other processes. .
In the present specification, “to” indicates a range including the numerical values described before and after the values as a minimum value and a maximum value, respectively.
Furthermore, in this specification, the amount of each component in the composition is the total amount of the plurality of substances present in the composition unless there is a specific indication when there are a plurality of substances corresponding to each component in the composition. means.
The present invention will be described below.
本発明にかかる整理活性剤は、フェルラ酸およびフェルラ酸誘導体からなる群より選ばれる少なくとも1種を、有効成分として単独で含有することによりメラニン分解効果を示すことができる。ここで、単独とは、フェルラ酸およびフェルラ酸誘導体からなる群より選ばれる少なくとも1種が、他の有効成分との相互作用などによらず単独でメラニン分解効果などを奏し得ることを意味するものであり、好ましくはフェルラ酸およびフェルラ酸誘導体からなる群より選ばれる少なくとも1種のみが有効成分としてメラニン分解効果などを奏し得ることを意味する。 The organizing activator according to the present invention can exhibit a melanin decomposing effect by containing at least one selected from the group consisting of ferulic acid and ferulic acid derivatives alone as an active ingredient. Here, the term “single” means that at least one selected from the group consisting of ferulic acid and ferulic acid derivatives can exhibit melanin decomposing effects independently regardless of interaction with other active ingredients. Preferably, it means that only at least one selected from the group consisting of ferulic acid and ferulic acid derivatives can exert a melanin decomposing effect as an active ingredient.
本発明にかかる生理活性剤において有効成分となるフェルラ酸は、植物の細胞壁などに存在する有機化合物である。化学式はC10H10O4で表される。 Ferulic acid, which is an active ingredient in the bioactive agent according to the present invention, is an organic compound that exists in the cell wall of plants. The chemical formula is represented by C 10 H 10 O 4 .
フェルラ酸は、一般的に用いられている合成物および天然物成分由来の抽出物などとして用いることができる。また、フェルラ酸は市販品を使用することができる。 Ferulic acid can be used as an extract derived from commonly used synthetic and natural product components. In addition, commercially available ferulic acid can be used.
本発明にかかる生理活性剤において有効成分となるフェルラ酸誘導体としては、フェルラ酸メチル、フェルラ酸エチル、フェルラ酸プロピル、フェルラ酸イソプロピル、フェルラ酸ブチル、フェルラ酸2−メチルブチル、フェルラ酸n−ヘキシル、フェルラ酸ヘプチル、フェルラ酸2−エチルヘキシル、フェルラ酸n−オクチル、フェルラ酸n−ノニル、フェルラ酸n−ウンデシル、フェルラ酸n−ドデシル、フェルラ酸n−ヘキサデシルおよびオリザノールなどが挙げられ、好ましくはオリザノールである。
オリザノールは、米糠などの脂質に含有される、フェルラ酸とステロールとが縮合したフェルラ酸エステルである。
As the ferulic acid derivative as an active ingredient in the bioactive agent according to the present invention, methyl ferulate, ethyl ferulate, propyl ferulate, isopropyl ferulate, butyl ferulate, 2-methylbutyl ferulate, n-hexyl ferulate, Examples include heptyl ferulate, 2-ethylhexyl ferulate, n-octyl ferulate, n-nonyl ferulate, n-undecyl ferulate, n-dodecyl ferulate, n-hexadecyl ferulate and oryzanol, preferably oryzanol. is there.
Oryzanol is a ferulic acid ester condensed with ferulic acid and sterol, contained in lipids such as rice bran.
オリザノールは、一般的に用いられている合成物および天然物成分由来の抽出物などとして用いることができる。また、オリザノールは市販品を使用することができる。 Oryzanol can be used as an extract derived from commonly used synthetic and natural product components. Oryzanol can use a commercial item.
本発明にかかる生理活性剤は、フェルラ酸およびフェルラ酸誘導体からなる群より選ばれる少なくとも1種を有効成分として含有することにより、基底層のケラチノサイト内に蓄積しているメラニンを分解することができる。それによって、美白効果を得ることができる。そのため、整理活性剤またはこれを含有する化粧料を、皮膚に付与することにより、メラニンの過剰産生に起因する色素斑(たとえば老人性色素斑(シミ)、雀卵斑(ソバカス)、肝斑、炎症後色素沈着、母斑など)の予防または治療の効果が期待できる。 The bioactive agent according to the present invention can decompose melanin accumulated in keratinocytes of the basal layer by containing as an active ingredient at least one selected from the group consisting of ferulic acid and ferulic acid derivatives. . Thereby, a whitening effect can be obtained. Therefore, pigmentation spots (for example, senile pigment spots (spots), sparrow eggs spots (sobacas), liver spots, etc.) caused by excessive production of melanin by applying a sorter active agent or a cosmetic containing the same to the skin. It can be expected to prevent or treat post-inflammation pigmentation, nevi, etc.).
本発明にかかる生理活性剤またはこれを含有する化粧料を組成物の形態で用いる場合、当該組成物におけるフェルラ酸およびフェルラ酸誘導体からなる群より選ばれる少なくとも1種の含有量は、剤型によって異なる。
一般に組成物の全質量に対して、フェルラ酸およびフェルラ酸誘導体からなる群より選ばれる少なくとも1種の含有量としては、たとえば、組成物の全質量に対して、特に限定されることはないが、0.00001質量%〜10質量%であることが好ましく、0.00004質量%〜0.4質量%であることがより好ましい。フェルラ酸およびフェルラ酸誘導体からなる群より選ばれる少なくとも1種の含有量は、組成物の全質量に対して、0.0004質量%〜0.1質量%であることがさらに好ましい。
フェルラ酸およびフェルラ酸誘導体からなる群より選ばれる少なくとも1種の含有量が0.00001質量%以上であれば、十分な美白効果を得ることができるため好ましい。また、フェルラ酸およびフェルラ酸誘導体からなる群より選ばれる少なくとも1種の含有量が10質量%以下であれば、組成物中でフェルラ酸およびフェルラ酸誘導体からなる群より選ばれる少なくとも1種が析出するなどの問題も生じないため好ましい。
また、皮膚浸透を考慮したうえでの十分な美白効果およびフェルラ酸およびフェルラ酸誘導体からなる群より選ばれる少なくとも1種の溶解性の観点から、フェルラ酸およびフェルラ酸誘導体からなる群より選ばれる少なくとも1種の含有量は、組成物の全質量に対して、0.0004質量%〜0.4質量%であることがより好ましい。
When the physiologically active agent according to the present invention or a cosmetic containing the same is used in the form of a composition, at least one content selected from the group consisting of ferulic acid and a ferulic acid derivative in the composition depends on the dosage form. Different.
Generally, the content of at least one selected from the group consisting of ferulic acid and a ferulic acid derivative with respect to the total mass of the composition is not particularly limited, for example, with respect to the total mass of the composition 0.00001% by mass to 10% by mass, and more preferably 0.00004% by mass to 0.4% by mass. The content of at least one selected from the group consisting of ferulic acid and ferulic acid derivatives is more preferably 0.0004% by mass to 0.1% by mass with respect to the total mass of the composition.
If the content of at least one selected from the group consisting of ferulic acid and ferulic acid derivatives is 0.00001% by mass or more, it is preferable because a sufficient whitening effect can be obtained. Further, if the content of at least one selected from the group consisting of ferulic acid and a ferulic acid derivative is 10% by mass or less, at least one selected from the group consisting of ferulic acid and a ferulic acid derivative is precipitated in the composition. This is preferable because problems such as
From the viewpoint of sufficient whitening effect taking into account skin penetration and at least one solubility selected from the group consisting of ferulic acid and ferulic acid derivatives, at least selected from the group consisting of ferulic acid and ferulic acid derivatives The content of one kind is more preferably 0.0004% by mass to 0.4% by mass with respect to the total mass of the composition.
本発明にかかる生理活性剤またはこれを含有する化粧料の形態には特に制限はない。組成物の形態としては、具体的には、オイル組成物、乳化組成物、粉末組成物などが挙げられる。オイル組成物、乳化組成物、粉末組成物は、公知の方法に従い調製することができる。
また、本発明の化粧料の形態には特に制限はなく、化粧水(ローション)、美容液(エッセンス)、クリーム、乳液などの化粧料を例示することができる。これらのいずれも通常の方法で調製することができ、たとえば乳液などの場合、水相および油相をそれぞれ加熱溶解し、乳化分散して冷却することで製造することができる。
There is no restriction | limiting in particular in the form of the bioactive agent concerning this invention, or the cosmetics containing this. Specifically as a form of a composition, an oil composition, an emulsion composition, a powder composition etc. are mentioned. The oil composition, emulsion composition, and powder composition can be prepared according to a known method.
Moreover, there is no restriction | limiting in particular in the form of the cosmetics of this invention, Cosmetics, such as lotion (lotion), a cosmetic liquid (essence), cream, and milky lotion, can be illustrated. Any of these can be prepared by an ordinary method. For example, in the case of an emulsion, the aqueous phase and the oil phase can be dissolved by heating, emulsified and dispersed, and then cooled.
本発明にかかる生理活性剤またはこれを含有する化粧料は、経口的または非経口的に投与することができるが、効果発現の観点から、非経口的に投与することが好ましい。具体的には、フェルラ酸およびフェルラ酸誘導体からなる群より選ばれる少なくとも1種を直接皮膚へ投与可能な局所投与が好ましく、経皮投与がより好ましい。 The physiologically active agent according to the present invention or a cosmetic containing the same can be administered orally or parenterally, but is preferably administered parenterally from the viewpoint of effect expression. Specifically, local administration capable of directly administering to the skin at least one selected from the group consisting of ferulic acid and ferulic acid derivatives is preferred, and transdermal administration is more preferred.
本発明にかかる生理活性剤またはこれを含有する化粧料は、フェルラ酸およびフェルラ酸誘導体からなる群より選ばれる少なくとも1種の他に組成物の形態、目的などに応じて他の成分を含むことができる。他の成分は、適宜選択することができ、好適な例としては、機能性油性成分、乳化剤、その他の添加成分などが挙げられる。 The bioactive agent according to the present invention or a cosmetic containing the same contains other components depending on the form and purpose of the composition in addition to at least one selected from the group consisting of ferulic acid and ferulic acid derivatives. Can do. Other components can be selected as appropriate, and preferred examples include functional oily components, emulsifiers, and other additive components.
(機能性油性成分)
機能性油性成分としては、水性媒体に溶解せず、油性媒体に溶解する油溶性成分であれば、特に限定はなく、目的に応じた物性や機能性を有するものを適宜選択して使用することができる。機能性油性成分としては、紫外線吸収剤、抗炎症剤(フェルラ酸およびフェルラ酸誘導体以外)、保湿剤、毛髪保護剤、細胞賦活剤、エモリエント剤、角質溶解剤、帯電防止剤、脂溶性ビタミン剤、メタ簿リックシンドローム改善剤、降圧剤、鎮静剤などとして使用されているものが挙げられる。
ここで、機能性油性成分とは、生体において所望の生理学的作用の発揮が期待され得る油性成分を意味する。
(Functional oil component)
The functional oily component is not particularly limited as long as it is an oil-soluble component that does not dissolve in an aqueous medium but dissolves in an oily medium, and those having physical properties and functionality according to the purpose are appropriately selected and used. Can do. Functional oily ingredients include UV absorbers, anti-inflammatory agents (other than ferulic acid and ferulic acid derivatives), moisturizers, hair protecting agents, cell activators, emollients, keratolytic agents, antistatic agents, fat-soluble vitamins And those used as meta-bookline syndrome improving agents, antihypertensive agents, sedatives, and the like.
Here, the functional oily component means an oily component that can be expected to exhibit a desired physiological action in a living body.
(その他の添加成分)
上記成分の他、医薬品、機能性食品、化粧品などの分野において通常用いられる添加成分を、組成物に、その形態に応じて適宜含有させてもよい。他の添加成分は、その特性によって、油溶性または水溶性の添加成分として、組成物に含有させることができる。
(Other additive components)
In addition to the above components, additive components usually used in the fields of pharmaceuticals, functional foods, cosmetics and the like may be appropriately added to the composition according to the form. The other additive component can be contained in the composition as an oil-soluble or water-soluble additive component depending on its characteristics.
たとえば、その他の添加成分としては、グリセリン、1,3−ブチレングリコールなどの多価アルコール;グルコース、加糖、乳糖、麦芽糖、ショ糖、ペクチン、カッパーカラギーナン、ローカストビーンガム、グアーガム、ヒドロキシプロピルグアガム、キサンタンガム、カラヤガム、タマリンド種子多糖、アラビアガム、トラガカントガム、ヒアルロン酸、ヒアルロン酸ナトリウム、コンドロイチン硫酸ナトリウム、デキストリンなどの単糖類または多糖類;ソルビトール、マンニトール、マルチトール、ラクトース。マルトトリイトール、キシリトールなどの糖アルコール;塩化ナトリウム、硫酸ナトリウムなどの無機塩;カゼイン、アルブミン、メチル化コラーゲン、加水分解コラーゲン、水溶性コラーゲン、ゼラチンなどの分子量5000超のタンパク質;グリシン、バリン、ロイシン、イソロイシン、セリン、スレオニン、アスパラギン酸、グルタミン酸、シスチン、メチオニン、リジン、ヒドロキシリジン、アルギニン、ヒスチジン、フェニルアラニン、チロシン、トリプトファン、プロリン、ヒドロキシプロリン、アセチルヒドロキシプロリンなどのアミノさんおよびそれらの誘導体;カルボキシビニルポリマー、ポリアクリル酸ナトリウム、ポリビニルアルコール、ポリエチレングリコール、酸化エチレン・酸化プロピレンブロック共重合体などの合成高分子;ヒドロキシエチルセルロース、メチルセルロースなどの水溶性セルロース誘導体;などを挙げることができ、その機能に基づいて、たとえば機能性成分、賦形剤、粘度調整剤、ラジカル捕捉剤などとして含んでもよい。
その他、pH調整剤、pH緩衝剤、防腐剤、香料、着色剤など、通常、その用途で使用される他の添加物を併用することができる。
For example, other additive components include polyhydric alcohols such as glycerin and 1,3-butylene glycol; glucose, sugar added, lactose, maltose, sucrose, pectin, copper carrageenan, locust bean gum, guar gum, hydroxypropyl guar gum, xanthan gum Monosaccharides or polysaccharides such as, gum karaya, tamarind seed polysaccharide, gum arabic, gum tragacanth, hyaluronic acid, sodium hyaluronate, sodium chondroitin sulfate, dextrin; sorbitol, mannitol, maltitol, lactose. Sugar alcohols such as maltotriitol and xylitol; inorganic salts such as sodium chloride and sodium sulfate; proteins with a molecular weight of over 5000 such as casein, albumin, methylated collagen, hydrolyzed collagen, water-soluble collagen, and gelatin; glycine, valine, and leucine Amino and their derivatives such as isoleucine, serine, threonine, aspartic acid, glutamic acid, cystine, methionine, lysine, hydroxylysine, arginine, histidine, phenylalanine, tyrosine, tryptophan, proline, hydroxyproline, acetylhydroxyproline; carboxyvinyl Polymer, sodium polyacrylate, polyvinyl alcohol, polyethylene glycol, ethylene oxide / propylene oxide block copolymer Synthetic water polymers such as hydroxyethylcellulose and water-soluble cellulose derivatives such as methylcellulose, and the like. Based on their functions, they may be included as functional components, excipients, viscosity modifiers, radical scavengers, and the like. .
In addition, other additives usually used for the application such as a pH adjuster, a pH buffer, a preservative, a fragrance, and a colorant can be used in combination.
以下、本発明を実施例にて詳細に説明する。しかしながら、本発明は実施例に何ら限定されるものではない。 Hereinafter, the present invention will be described in detail with reference to examples. However, the present invention is not limited to the examples.
実施例1:メラノソームタンパク(gp100)分解促進作用の評価
(1)ヒト膣黒色腫(HMV-II)の培養
ヒト膣黒色腫(HMV-II)を10体積% Fetal Bovine Serum(GIBCO社製)および1質量%Penicillin-Streptomycin(GIBCO社製)含有HamF12培地(SIGMA社製)でT225フラスコに8000 cells/cm2で播種し1週間37℃のCO2インキュベーターで培養した。T225フラスコから細胞を回収し、10体積%Fetal Bovine Serum(GIBCO社製)および1質量%Penicillin-Streptomycin(GIBCO社製)含有DMEM/F12、GlutaMAX(登録商標)培地(GIBCO社製)でHYPER Flask(登録商標)に播種し1週間37℃のCO2インキュベーターで培養した。細胞を回収し、-80℃で保存した。
Example 1: Evaluation of melanosome protein (gp100) degradation promoting action (1) Culture of human vaginal melanoma (HMV-II) 10% by volume of human vaginal melanoma (HMV-II) Fetal Bovine Serum (GIBCO) and A 1% by mass Penicillin-Streptomycin (GIBCO) -containing HamF12 medium (SIGMA) was seeded in a T225 flask at 8000 cells / cm 2 and cultured in a CO 2 incubator at 37 ° C. for 1 week. Cells were collected from the T225 flask, and HYPER Flask in DMEM / F12, GlutaMAX (registered trademark) medium (GIBCO) containing 10% by volume Fetal Bovine Serum (GIBCO) and 1% by weight Penicillin-Streptomycin (GIBCO) (Registered trademark) was seeded and cultured in a CO 2 incubator at 37 ° C. for 1 week. Cells were harvested and stored at -80 ° C.
(2)メラノソームの抽出
ヒト膣黒色腫(HMV-II)2×108細胞に細胞破砕液(0.1 M Tris,1質量% IgepalCA630, 0.01 質量%SDS, pH 7.5)4 mLを加えボルテックスを5秒行い、氷上でピペッティングを行い破砕した。氷上で10分放置し再度ピペッティングを行いさらに10分放置した。細胞破砕液を遠心し(1000 G、10分)、上清を回収し再度遠心した(20000 G、10 分)。沈殿をPBSで洗浄し遠心(20000 G、10 分)により回収し、PBS 100mLに懸濁しメラノソーム抽出ペレットを調製した。
(2) Extraction of melanosomes Human vaginal melanoma (HMV-II) 2 × 10 8 cells with 4 mL of cell lysate (0.1 M Tris, 1% by mass IgepalCA630, 0.01% by mass SDS, pH 7.5) and vortex for 5 seconds And pipetting on ice to break. The plate was left on ice for 10 minutes, pipetted again and left for another 10 minutes. The cell lysate was centrifuged (1000 G, 10 minutes), and the supernatant was collected and centrifuged again (20000 G, 10 minutes). The precipitate was washed with PBS, collected by centrifugation (20000 G, 10 minutes), and suspended in 100 mL of PBS to prepare a melanosome extracted pellet.
(3)メラノソーム貪食ケラチノサイトの調製
ヒト表皮ケラチノサイト(HaCaT)を10 体積%Fetal Bovine Serum(GIBCO社製)および1質量% Penicillin-Streptomycin-Glutamine(GIBCO社製)含有DMEM培地(GIBCO社製)でT225フラスコに6500 cells/cm2で播種し4日間培養した。(2)で調整したメラノソーム抽出ペレットを添加し18時間培養した。培養後、PBSで洗浄しトリプシンを5mL加え5分間37度でインキュベートした。DMEM培地を5mL加えピペッティングし遠沈管に移し、室温300 Gで遠心分離した。上清を捨て沈殿した細胞をDMEM培地でほぐし、これをメラノソーム貪食ケラチノサイトの懸濁液とした。
(3) Preparation of melanosome-phagocytic keratinocytes T225 human epidermis keratinocytes (HaCaT) in a DMEM medium (GIBCO) containing 10% by volume Fetal Bovine Serum (GIBCO) and 1% by weight Penicillin-Streptomycin-Glutamine (GIBCO). The flask was seeded at 6500 cells / cm 2 and cultured for 4 days. The melanosome extracted pellet prepared in (2) was added and cultured for 18 hours. After culturing, the plate was washed with PBS, added with 5 mL of trypsin, and incubated at 37 ° C. for 5 minutes. 5 mL of DMEM medium was added and pipetted, transferred to a centrifuge tube, and centrifuged at 300 G at room temperature. The supernatant cells were discarded and the precipitated cells were loosened with DMEM medium, which was used as a suspension of melanosome-phagocytosed keratinocytes.
(4)細胞播種・薬剤添加
メラノソーム貪食ケラチノサイトを10 体積%Fetal Bovine Serum(GIBCO社製)および1質量%Penicillin-Streptomycin-Glutamine(GIBCO社製)含有DMEM培地(GIBCO社製)で12穴プレートに50000 cells/cm2、96穴プレートに32000 cells/cm2になるように播種し3時間培養した。前培養後、DMSOを用いて1μM、10μM、100μM、1000μMの濃度に調製したフェルラ酸(株式会社岡安商店製)またはオリザノール(株式会社岡安商店製)をそれぞれ培地に対して1質量%添加し、2日間培養を行った。
(4) Cell seeding / drug addition Melanosome-phagocytic keratinocytes in a 12-well plate with 10% by volume Fetal Bovine Serum (GIBCO) and 1% by weight Penicillin-Streptomycin-Glutamine (GIBCO) DMEM medium (GIBCO) 50000 cells / cm 2, and seeded cultured for 3 hours so as to 32000 cells / cm 2 in 96 well plates. After pre-culture, 1% by mass of ferulic acid (manufactured by Okayasu Co., Ltd.) or oryzanol (manufactured by Okayasu Co., Ltd.) prepared to a concentration of 1 μM, 10 μM, 100 μM, and 1000 μM using DMSO is added to the medium Culture was performed for 2 days.
(5)細胞生存率試験
被験物質溶液を添加し培養した96穴プレートについて、細胞をPBSで洗浄した後、培地100 μLとCell Counting Kit-8溶液(DOJINDO社製)10 μLを加え、37℃のCO2インキュベーターで1時間保温した。その後、450 nm(対照600 nm)における吸光度を測定し生細胞数の指標とした。被験物質を添加しない場合の生細胞数を100として、フェルラ酸またはオリザノールを添加した場合の細胞生存率(%)を求めた。
(5) Cell viability test For 96-well plates cultured with the test substance solution added, after washing the cells with PBS, add 100 μL of medium and 10 μL of Cell Counting Kit-8 solution (manufactured by DOJINDO) at 37 ° C. Incubated for 1 hour in a CO 2 incubator. Thereafter, the absorbance at 450 nm (control 600 nm) was measured and used as an index of the number of living cells. The cell viability (%) when ferulic acid or oryzanol was added was determined with the number of viable cells when no test substance was added being 100.
(6)メラノソームタンパク(gp100)の定量
被験物質溶液を添加し48時間培養した12穴プレートについて、細胞をPBSで洗浄した後、トリプシン200μLを加え5分間37℃インキュベートした。DMEM培地を200μL加えピペッティングし、96穴ディープウェルプレートに移し室温300 Gで遠心分離した。上清を捨て沈殿した細胞をPBSで洗浄し再度300 Gで遠心分離した。
4質量%パラホルムアルデヒドで固定した後(室温、15 分)、メタノールで固定し(44℃、30分)、1質量%BSA (Bovine Serum Albumin)溶液で1時間ブロッキングした。TPBSで1回洗浄後、Can Get Signal(登録商標) immunostain(solution A)で一次抗体を終濃度2 μg/mLになるように希釈し50 μLを加え懸濁し一晩4℃で反応させた。TPBSで2回洗浄後、二次抗体を終濃度2μg/mLになるように希釈し50μLを加え懸濁し1時間室温で反応させた。TPBSで2回洗浄後、TPBSを100μL加えU字96穴プレートに移し、BD(登録商標) FACSCalibur(登録商標)付随High Throughput Samplerを用い測定し、蛍光強度積算値を求めた。
(6) Quantification of melanosome protein (gp100) About the 12-well plate which added the test substance solution and culture | cultivated for 48 hours, after wash | cleaning a cell with PBS, trypsin 200microliter was added and incubated at 37 degreeC for 5 minutes. 200 μL of DMEM medium was added and pipetted, transferred to a 96-well deep well plate and centrifuged at 300 G at room temperature. The supernatant was discarded and the precipitated cells were washed with PBS and centrifuged again at 300 G.
After fixing with 4% by mass paraformaldehyde (room temperature, 15 minutes), it was fixed with methanol (44 ° C., 30 minutes) and blocked with 1% by mass BSA (Bovine Serum Albumin) solution for 1 hour. Can Get Signal (registered trademark) after washing once with TPBS The primary antibody was diluted with immunostain (solution A) to a final concentration of 2 μg / mL, 50 μL was added, suspended, and reacted overnight at 4 ° C. After washing twice with TPBS, the secondary antibody was diluted to a final concentration of 2 μg / mL, suspended by adding 50 μL, and allowed to react at room temperature for 1 hour. After washing twice with TPBS, 100 μL of TPBS was added, transferred to a U-shaped 96-well plate, and measured using a BD (registered trademark) FACSCalibur (registered trademark) -attached High Throughput Sampler to obtain an integrated fluorescence intensity value.
一次抗体:Anti-Melanoma Associated Anigen 100+/7kDa antibody [NKI/beteb](ab34165: abcam社製)
二次抗体:Alexa 488 Goat Anti-Mouse IgG2b(A-21141: life technologies社製)
Primary antibody: Anti-Melanoma Associated Anigen 100 + / 7 kDa antibody [NKI / beteb] (ab34165: manufactured by abcam)
Secondary antibody: Alexa 488 Goat Anti-Mouse IgG2b (A-21141: life technologies)
(7)データの解析
(6)で求めた蛍光強度積算値に(5)で求めた細胞生存率を積算し補正を行い、メラノソームタンパクであるgp100のタンパク量とした。
(7) Analysis of data The fluorescence intensity integrated value obtained in (6) was added to the cell viability obtained in (5) for correction to obtain the protein amount of gp100, which is a melanosomal protein.
図1、2より、フェルラ酸、オリザノールの濃度依存的にgp100量の減少することを見出した。この結果、フェルラ酸、オリザノールはケラチノサイト内において、メラノソームタンパクであるgp100の分解を促進する作用を持つことが明らかとなった。また、オリザノールはフェルラ酸に比べて高いメラニン分解効果を有することがわかった。 1 and 2, it was found that the amount of gp100 decreased depending on the concentrations of ferulic acid and oryzanol. As a result, it has been clarified that ferulic acid and oryzanol have an action of promoting the degradation of gp100 which is a melanosome protein in keratinocytes. It was also found that oryzanol has a higher melanin decomposing effect than ferulic acid.
実施例2:細胞内メラニン分解促進効果の評価
(1)メラノソーム貪食ケラチノサイトの調製
ヒト表皮ケラチノサイト(HaCaT)を10 体積% Fetal Bovine Serum(GIBCO社製)および1質量% Penicillin-Streptomycin-Glutamine(GIBCO社製)含有DMEM培地(GIBCO社製)でT225フラスコに6500 cells/cm2で播種し4日間培養した。実施例1の(2)で調整したメラノソーム抽出ペレットを添加し18時間培養した。培養後、PBSで洗浄しトリプシンを5 mL加え5分間37℃でインキュベートした。DMEM培地を5 mL加えピペッティングし遠沈管に移し、室温300Gで遠心分離した。上清を捨て沈殿した細胞をDMEM培地でほぐし、これをメラノソーム貪食ケラチノサイトの懸濁液とした。
Example 2: Evaluation of intracellular melanin degradation promoting effect (1) Preparation of melanosome-phagocytic keratinocytes Human epidermal keratinocytes (HaCaT) were 10% by volume Fetal Bovine Serum (GIBCO) and 1% by weight Penicillin-Streptomycin-Glutamine (GIBCO) The T225 flask was seeded at 6500 cells / cm 2 in a DMEM medium (manufactured by GIBCO) and cultured for 4 days. The melanosome extraction pellet prepared in Example 1 (2) was added and cultured for 18 hours. After culturing, the plate was washed with PBS, added with 5 mL of trypsin, and incubated at 37 ° C. for 5 minutes. 5 mL of DMEM medium was added and pipetted, transferred to a centrifuge tube, and centrifuged at 300 G at room temperature. The supernatant cells were discarded and the precipitated cells were loosened with DMEM medium, which was used as a suspension of melanosome-phagocytosed keratinocytes.
(2)細胞培養
メラノソーム貪食ケラチノサイトを2×106cellsをT75フラスコに播種し、10体積% Fetal Bovine Serum(GIBCO社製)および1質量%Penicillin-Streptomycin-Glutamine(GIBCO社製)含有DMEM培地(GIBCO社製)で6時間培養した。
<コントロールの作製>
PBSで洗浄しトリプシンを2 mL加え5分間37℃でインキュベートした。DMEM培地を4 mL加えピペッティングし遠沈管に移し、室温300Gで遠心分離した。沈殿した細胞をコントロールとした。
<サンプルの作製>
DMEM培地を交換後、DMSOを用いて1μM、10μM、100μM、1000μMの濃度に調製したフェルラ酸またはオリザノールを培地に対して1質量%添加し、18時間培養した。PBSで洗浄しトリプシンを2 mL加え5分間37℃でインキュベートした。DMEM培地を4 mL加えピペッティングし遠沈管に移し、室温300Gで遠心分離した。上清を捨て沈殿した細胞をサンプルとした。
(2) Cell culture 2 × 10 6 cells of melanosome-phagocytic keratinocytes are seeded in a T75 flask, and DMEM medium containing 10% by volume Fetal Bovine Serum (GIBCO) and 1% by weight Penicillin-Streptomycin-Glutamine (GIBCO) (GIBCO) for 6 hours.
<Preparation of control>
After washing with PBS, 2 mL of trypsin was added and incubated at 37 ° C. for 5 minutes. 4 mL of DMEM medium was added, pipetted, transferred to a centrifuge tube, and centrifuged at 300 G at room temperature. Precipitated cells were used as a control.
<Preparation of sample>
After exchanging the DMEM medium, 1% by mass of ferulic acid or oryzanol prepared to a concentration of 1 μM, 10 μM, 100 μM, and 1000 μM using DMSO was added to the medium and cultured for 18 hours. After washing with PBS, 2 mL of trypsin was added and incubated at 37 ° C. for 5 minutes. 4 mL of DMEM medium was added, pipetted, transferred to a centrifuge tube, and centrifuged at 300 G at room temperature. The supernatant cells were discarded and the precipitated cells were used as samples.
(2)細胞内メラニンの定量
(1)で作製した細胞ペレットに100μLの水を加えピペッティングを行い、1 mLのエーテル / エタノール = 1 / 1溶液を加えボルテックスを行った。遠心分離後(4℃、300 G、 3分)、上清を除去し一晩乾燥させた。乾燥した細胞塊に、10体積%ジメチルスルホキシドを含有する1 mol / L水酸化ナトリウム水溶液500 μLを加え80度で30分間加温し、溶解させ、400 nmの吸光度を測定した。
(2) Quantification of intracellular melanin 100 μL of water was added to the cell pellet prepared in (1), pipetting was performed, and 1 mL of ether / ethanol = 1/1 solution was added and vortexed. After centrifugation (4 ° C., 300 G, 3 minutes), the supernatant was removed and dried overnight. To the dried cell mass, 500 μL of 1 mol / L sodium hydroxide aqueous solution containing 10% by volume dimethyl sulfoxide was added, heated at 80 ° C. for 30 minutes, dissolved, and the absorbance at 400 nm was measured.
図3、4より、フェルラ酸、オリザノールの濃度依存的に細胞内のメラニン量が減少することが見出された。この結果、フェルラ酸、オリザノールはケラチノサイト内において、メラニン色素自体の分解を促進する作用を持つことが明らかとなった。また、オリザノールは特に、低濃度で高いメラニン分解効果が得られることがわかった。 3 and 4, it was found that the amount of intracellular melanin decreased depending on the concentration of ferulic acid and oryzanol. As a result, it has been clarified that ferulic acid and oryzanol have an action of promoting the degradation of the melanin pigment itself in keratinocytes. In addition, it was found that oryzanol has a particularly high melanin decomposition effect at a low concentration.
実施例3:化粧水の調製
以下の処方に従って、常法により化粧水を調製する。以下の数値は処方の全質量に対する質量%を意味する。
<組成> (質量%)
フェルラ酸 0.01
アルブチン 1.0
グリチルリチン酸ジカリウム 1.0
ジプロピレングリコール 5.0
ポリオキシエチレンメチルグルコシド 1.0
グリセリン 5.0
1,3−ブチレングリコール 6.5
ポリエチレングリコール1540 1.2
ヒアルロン酸ナトリウム 0.1
エタノール 12.0
フェノキシエタノール 0.15
リン酸L−アスコルビルマグネシウム 1.0
グリセリンモノ2−エチルヘキシルエーテル 0.2
モノオレイン酸ポリグリセリル 0.05
ショ糖ステアリン酸エステル 0.05
クエン酸 0.05
クエン酸ナトリウム 0.1
コラーゲン 1.0
N−アセチル−L−ヒドロキシプロリン 1.0
水溶性コラーゲン液 1.0
加水分解コラーゲン(魚由来) 1.0
海藻エキス 0.5
ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油 0.2
天然ビタミンE 0.2
アスタキサンチン液 0.1
大豆リン脂質 0.5
ツボクサエキス 0.01
グライカシル2000※ 0.2
トマト抽出液 0.01
精製水 残量
※グライカシル2000(ロンザ株式会社製)は、ブチルカルバミン酸ヨウ化プロピニル(6%)とシクロデキストリンを含有する。
Example 3: Preparation of lotion Toner lotion is prepared by a conventional method according to the following formulation. The following numerical value means the mass% with respect to the total mass of prescription.
<Composition> (mass%)
Ferulic acid 0.01
Arbutin 1.0
Dipotassium glycyrrhizinate 1.0
Dipropylene glycol 5.0
Polyoxyethylene methyl glucoside 1.0
Glycerin 5.0
1,3-butylene glycol 6.5
Polyethylene glycol 1540 1.2
Sodium hyaluronate 0.1
Ethanol 12.0
Phenoxyethanol 0.15
L-ascorbyl magnesium phosphate 1.0
Glycerin mono 2-ethylhexyl ether 0.2
Polyglyceryl monooleate 0.05
Sucrose stearate 0.05
Citric acid 0.05
Sodium citrate 0.1
Collagen 1.0
N-acetyl-L-hydroxyproline 1.0
Water-soluble collagen solution 1.0
Hydrolyzed collagen (derived from fish) 1.0
Seaweed extract 0.5
Polyoxyethylene hydrogenated castor oil 0.2
Natural vitamin E 0.2
Astaxanthin solution 0.1
Soy phospholipid 0.5
Camellia extract 0.01
Glycasil 2000 * 0.2
Tomato extract 0.01
Purified water remaining amount * Glykacil 2000 (Lonza Co., Ltd.) contains propynyl iodide (6%) and cyclodextrin.
実施例4:美容液の調製
以下の処方に従って、常法により美容液を調製する。以下の数値は処方の全質量に対する質量%を意味する。
<組成> (質量%)
フェルラ酸 0.01
グリチルリチン酸ジカリウム 1.0
ジプロピレングリコール 5.0
トリメチルグリシン 1.0
パラオキシ安息香酸メチル 0.1
ピロ亜硫酸ナトリウム 0.05
グリセリン 5.0
1,3−ブチレングリコール 6.5
キサンタンガム 1.2
アルカリゲネスレタースB−16ポリマー 0.1
エタノール 12.0
フェノキシエタノール 0.5
リン酸L−アスコルビルマグネシウム 3.0
グリセリンモノ2−エチルヘキシルエーテル 1.0
モノオレイン酸ポリグリセリル 0.05
ショ糖ステアリン酸エステル 0.05
クエン酸 0.05
クエン酸ナトリウム 0.1
コラーゲン 1.0
N−アセチル−L−ヒドロキシプロリン 1.0
水溶性コラーゲン液 1.0
加水分解コラーゲン(魚由来) 1.0
加水分解酵母エキス溶液 0.05
酵母エキス 0.05
ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油 0.2
天然ビタミンE 0.03
アスタキサンチン液 0.1
大豆リン脂質 0.4
ツボクサエキス 0.01
水溶性ツボクサエキス 0.03
精製水 残量
Example 4: Preparation of cosmetic liquid A cosmetic liquid is prepared by a conventional method according to the following formulation. The following numerical value means the mass% with respect to the total mass of prescription.
<Composition> (mass%)
Ferulic acid 0.01
Dipotassium glycyrrhizinate 1.0
Dipropylene glycol 5.0
Trimethylglycine 1.0
Methyl paraoxybenzoate 0.1
Sodium pyrosulfite 0.05
Glycerin 5.0
1,3-butylene glycol 6.5
Xanthan gum 1.2
Alkaline Genes Letters B-16 Polymer 0.1
Ethanol 12.0
Phenoxyethanol 0.5
L-ascorbyl magnesium phosphate 3.0
Glycerin mono 2-ethylhexyl ether 1.0
Polyglyceryl monooleate 0.05
Sucrose stearate 0.05
Citric acid 0.05
Sodium citrate 0.1
Collagen 1.0
N-acetyl-L-hydroxyproline 1.0
Water-soluble collagen solution 1.0
Hydrolyzed collagen (derived from fish) 1.0
Hydrolyzed yeast extract solution 0.05
Yeast extract 0.05
Polyoxyethylene hydrogenated castor oil 0.2
Natural vitamin E 0.03
Astaxanthin solution 0.1
Soy phospholipid 0.4
Camellia extract 0.01
Water-soluble camellia extract 0.03
Purified water remaining
実施例5:クリームの調製
以下の処方に従って、常法によりクリームを調製する。以下の数値は処方の全質量に対する質量%を意味する。
<組成> (質量%)
フェルラ酸 0.01
アルブチン 1.0
グリチルリチン酸ジカリウム 1.0
1,2−ペンタンジール 1.0
ジプロピレングリコール 5.0
ポリエチレングリコール6000 1.0
ヒアルロン酸ナトリウム 0.5
トリメチルグリシン 0.5
グリセリン 1.0
1,3−ブチレングリコール 5.0
キサンタンガム 0.15
アクリル酸・メタクリル酸アルキル共重合体 0.05
スクワラン 0.5
シア脂 1.0
サラシミツロウ 0.5
ベヘニルアルコール 0.5
親油型モノステアリン酸グリセリル 1.0
イソステアリン酸ポリオキシエチレングリセリル 0.5
メチルポリシロキサン 2.0
アクリル酸ナトリウム・アクロイルジメチルタウリン酸ナトリウム共重合体 0.05
コラーゲン 1.0
N−アセリル−L−ヒドロキシプロリン 1.0
水溶性コラーゲン液 1.0
加水分解コラーゲン(魚由来) 1.0
加水分解酵母エキス溶液 0.05
酵母エキス 0.05
ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油 0.2
天然ビタミンE 0.02
アスタキサンチン液 0.1
大豆リン脂質 0.5
ツボクサエキス 0.01
精製水 残量
Example 5: Preparation of cream A cream is prepared by a conventional method according to the following formulation. The following numerical value means the mass% with respect to the total mass of prescription.
<Composition> (mass%)
Ferulic acid 0.01
Arbutin 1.0
Dipotassium glycyrrhizinate 1.0
1,2-pentanezil 1.0
Dipropylene glycol 5.0
Polyethylene glycol 6000 1.0
Sodium hyaluronate 0.5
Trimethylglycine 0.5
Glycerin 1.0
1,3-butylene glycol 5.0
Xanthan gum 0.15
Acrylic acid / alkyl methacrylate copolymer 0.05
Squalane 0.5
Shea fat 1.0
White beeswax 0.5
Behenyl alcohol 0.5
Lipophilic glyceryl monostearate 1.0
Polyoxyethylene glyceryl isostearate 0.5
Methylpolysiloxane 2.0
Sodium acrylate / acroyldimethylsodium taurate copolymer 0.05
Collagen 1.0
N-Acetyl-L-hydroxyproline 1.0
Water-soluble collagen solution 1.0
Hydrolyzed collagen (derived from fish) 1.0
Hydrolyzed yeast extract solution 0.05
Yeast extract 0.05
Polyoxyethylene hydrogenated castor oil 0.2
Natural vitamin E 0.02
Astaxanthin solution 0.1
Soy phospholipid 0.5
Camellia extract 0.01
Purified water remaining
実施例6:パック化粧料の調製
以下の処方に従って、常法によりパック化粧料を調製する。以下の数値は処方の全質量に対する質量%を意味する。
<組成> (質量%)
フェルラ酸 0.01
アルブチン 1.0
グリチルリチン酸ジカリウム 1.0
1,2−ペンタンジオール 1.0
ジプロピレングリコール 5.0
1,3−ブチレングリコール 5.0
ヒドロキシエチルセルロース 0.15
キサンタンガム 0.1
グリセリン 1.0
エタノール 3.0
クエン酸 0.12
水酸化ナトリウム 0.05
コラーゲン 1.0
N−アセチル−L−ヒドロキシプロリン 1.0
水溶性コラーゲン液 1.0
加水分解コラーゲン(魚由来) 1.0
加水分解酵母エキス溶液 0.05
ボタンエキス 0.05
リン酸L−アスコルビルマグネシウム 1.0
ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油 0.2
天然ビタミンE 0.02
アスタキサンチン液 0.1
大豆リン脂質 0.5
ツボクサエキス 0.01
水溶性ツボクサエキス 0.05
不織布 1シート
Example 6: Preparation of a pack cosmetic A pack cosmetic is prepared by a conventional method according to the following formulation. The following numerical value means the mass% with respect to the total mass of prescription.
<Composition> (mass%)
Ferulic acid 0.01
Arbutin 1.0
Dipotassium glycyrrhizinate 1.0
1,2-pentanediol 1.0
Dipropylene glycol 5.0
1,3-butylene glycol 5.0
Hydroxyethyl cellulose 0.15
Xanthan gum 0.1
Glycerin 1.0
Ethanol 3.0
Citric acid 0.12
Sodium hydroxide 0.05
Collagen 1.0
N-acetyl-L-hydroxyproline 1.0
Water-soluble collagen solution 1.0
Hydrolyzed collagen (derived from fish) 1.0
Hydrolyzed yeast extract solution 0.05
Button extract 0.05
L-ascorbyl magnesium phosphate 1.0
Polyoxyethylene hydrogenated castor oil 0.2
Natural vitamin E 0.02
Astaxanthin solution 0.1
Soy phospholipid 0.5
Camellia extract 0.01
Water-soluble camellia extract 0.05
Non-woven fabric 1 sheet
実施例7:油中水型日焼け止め化粧料の調製
以下の処方に従って、常法により油中水型日焼け止め化粧料を調製する。以下の数値は処方の全質量に対する質量%を意味する。
<組成> (質量%)
フェルラ酸 0.01
シクロペンタシロキサン 40.0
ジメチコン 8.0
エタノール 3.0
PEG−9ポリジメチルシロキシエチルジメチコン 5.0
ポリメチルシルセスキオキサン 4.0
ブチレングリコール 3.0
(アクリル酸ブチル/ジメタクリル酸グリコール)クロスポリマー 1.0
セスキオレイン酸ソルビタン 0.25
マイカ 0.5
フェノキシエタノール 0.3
クエン酸ナトリウム 0.1
グリチルリチン酸ジカリウム 0.1
ツボクサエキス 0.1
酸化チタン 8.0
t−ブトキシベンゾイルメタン 2.5
水酸化アルミニウム 2.4
イソステアリン酸 1.5
精製水 残量
Example 7: Preparation of water-in-oil type sunscreen cosmetics A water-in-oil type sunscreen cosmetic is prepared according to the following formulation by a conventional method. The following numerical value means the mass% with respect to the total mass of prescription.
<Composition> (mass%)
Ferulic acid 0.01
Cyclopentasiloxane 40.0
Dimethicone 8.0
Ethanol 3.0
PEG-9 polydimethylsiloxyethyl dimethicone 5.0
Polymethylsilsesquioxane 4.0
Butylene glycol 3.0
(Butyl acrylate / dimethacrylate glycol) cross polymer 1.0
Sorbitan sesquioleate 0.25
Mica 0.5
Phenoxyethanol 0.3
Sodium citrate 0.1
Dipotassium glycyrrhizinate 0.1
Camellia extract 0.1
Titanium oxide 8.0
t-Butoxybenzoylmethane 2.5
Aluminum hydroxide 2.4
Isostearic acid 1.5
Purified water remaining
実施例8:水中油型日焼け止め化粧料の調製
以下の処方に従って、常法により水中油型日焼け止め化粧料を調製する。以下の数値は処方の全質量に対する質量%を意味する。
<組成> (質量%)
フェルラ酸 0.01
シクロペンタシロキサン 1.0
エタノール 10.0
イソノナン酸イソドデシル 8.0
メトキシ桂皮酸エチルヘキシル 6.0
1,3−ブチレングリコール 3.0
(アクリル酸ヒドロキシエチル/アクリロイルジメチルNa)コポリマー 1.0
(アクリル酸ブチル/ジメタクリル酸グリコール)クロスコポリマー 0.5
マイカ 0.5
ジポリヒドロキシステアリン酸PEG−30 0.5
フェノキシエタノール 0.3
キサンタンガム 0.05
グリチルリチン酸ジカリウム 0.1
ツボクサエキス 0.1
酸化チタン 5.0
t−ブトキシジベンゾイルメタン 2.5
水酸化アルミニウム 1.0
イソステアリン酸 0.5
精製水 残量
Example 8: Preparation of oil-in-water sunscreen cosmetics An oil-in-water sunscreen cosmetic is prepared by a conventional method according to the following formulation. The following numerical value means the mass% with respect to the total mass of prescription.
<Composition> (mass%)
Ferulic acid 0.01
Cyclopentasiloxane 1.0
Ethanol 10.0
Isododecyl isononanoate 8.0
Ethylhexyl methoxycinnamate 6.0
1,3-butylene glycol 3.0
(Hydroxyethyl acrylate / acryloyldimethyl Na) copolymer 1.0
(Butyl acrylate / dimethacrylate glycol) cross copolymer 0.5
Mica 0.5
Dipolyhydroxystearic acid PEG-30 0.5
Phenoxyethanol 0.3
Xanthan gum 0.05
Dipotassium glycyrrhizinate 0.1
Camellia extract 0.1
Titanium oxide 5.0
t-Butoxydibenzoylmethane 2.5
Aluminum hydroxide 1.0
Isostearic acid 0.5
Purified water remaining
実施例9:化粧水の調製
以下の処方に従って、常法により化粧水を調製する。以下の数値は処方の全質量に対する質量%を意味する。
<組成> (質量%)
オリザノール 0.01
アルブチン 1.0
グリチルリチン酸ジカリウム 1.0
ジプロピレングリコール 5.0
ポリオキシエチレンメチルグルコシド 1.0
グリセリン 5.0
1,3−ブチレングリコール 6.5
ポリエチレングリコール1540 1.2
ヒアルロン酸ナトリウム 0.1
エタノール 12.0
フェノキシエタノール 0.15
リン酸L−アスコルビルマグネシウム 1.0
グリセリンモノ2−エチルヘキシルエーテル 0.2
モノオレイン酸ポリグリセリル 0.05
ショ糖ステアリン酸エステル 0.05
クエン酸 0.05
クエン酸ナトリウム 0.1
コラーゲン 1.0
N−アセチル−L−ヒドロキシプロリン 1.0
水溶性コラーゲン液 1.0
加水分解コラーゲン(魚由来) 1.0
海藻エキス 0.5
ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油 0.2
天然ビタミンE 0.2
アスタキサンチン液 0.1
大豆リン脂質 0.5
ツボクサエキス 0.01
グライカシル2000※ 0.2
トマト抽出液 0.01
精製水 残量
※グライカシル2000(ロンザ株式会社製)は、ブチルカルバミン酸ヨウ化プロピニル(6%)とシクロデキストリンを含有する。
Example 9: Preparation of lotion Toner lotion is prepared by a conventional method according to the following formulation. The following numerical value means the mass% with respect to the total mass of prescription.
<Composition> (mass%)
Oryzanol 0.01
Arbutin 1.0
Dipotassium glycyrrhizinate 1.0
Dipropylene glycol 5.0
Polyoxyethylene methyl glucoside 1.0
Glycerin 5.0
1,3-butylene glycol 6.5
Polyethylene glycol 1540 1.2
Sodium hyaluronate 0.1
Ethanol 12.0
Phenoxyethanol 0.15
L-ascorbyl magnesium phosphate 1.0
Glycerin mono 2-ethylhexyl ether 0.2
Polyglyceryl monooleate 0.05
Sucrose stearate 0.05
Citric acid 0.05
Sodium citrate 0.1
Collagen 1.0
N-acetyl-L-hydroxyproline 1.0
Water-soluble collagen solution 1.0
Hydrolyzed collagen (derived from fish) 1.0
Seaweed extract 0.5
Polyoxyethylene hydrogenated castor oil 0.2
Natural vitamin E 0.2
Astaxanthin solution 0.1
Soy phospholipid 0.5
Camellia extract 0.01
Glycasil 2000 * 0.2
Tomato extract 0.01
Purified water remaining amount * Glykacil 2000 (Lonza Co., Ltd.) contains propynyl iodide (6%) and cyclodextrin.
実施例10:美容液の調製
以下の処方に従って、常法により美容液を調製する。以下の数値は処方の全質量に対する質量%を意味する。
<組成> (質量%)
オリザノール 0.01
グリチルリチン酸ジカリウム 1.0
ジプロピレングリコール 5.0
トリメチルグリシン 1.0
パラオキシ安息香酸メチル 0.1
ピロ亜硫酸ナトリウム 0.05
グリセリン 5.0
1,3−ブチレングリコール 6.5
キサンタンガム 1.2
アルカリゲネスレタースB−16ポリマー 0.1
エタノール 12.0
フェノキシエタノール 0.5
リン酸L−アスコルビルマグネシウム 3.0
グリセリンモノ2−エチルヘキシルエーテル 1.0
モノオレイン酸ポリグリセリル 0.05
ショ糖ステアリン酸エステル 0.05
クエン酸 0.05
クエン酸ナトリウム 0.1
コラーゲン 1.0
N−アセチル−L−ヒドロキシプロリン 1.0
水溶性コラーゲン液 1.0
加水分解コラーゲン(魚由来) 1.0
加水分解酵母エキス溶液 0.05
酵母エキス 0.05
ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油 0.2
天然ビタミンE 0.03
アスタキサンチン液 0.1
大豆リン脂質 0.4
ツボクサエキス 0.01
水溶性ツボクサエキス 0.03
精製水 残量
Example 10: Preparation of cosmetic liquid A cosmetic liquid is prepared by a conventional method according to the following formulation. The following numerical value means the mass% with respect to the total mass of prescription.
<Composition> (mass%)
Oryzanol 0.01
Dipotassium glycyrrhizinate 1.0
Dipropylene glycol 5.0
Trimethylglycine 1.0
Methyl paraoxybenzoate 0.1
Sodium pyrosulfite 0.05
Glycerin 5.0
1,3-butylene glycol 6.5
Xanthan gum 1.2
Alkaline Genes Letters B-16 Polymer 0.1
Ethanol 12.0
Phenoxyethanol 0.5
L-ascorbyl magnesium phosphate 3.0
Glycerin mono 2-ethylhexyl ether 1.0
Polyglyceryl monooleate 0.05
Sucrose stearate 0.05
Citric acid 0.05
Sodium citrate 0.1
Collagen 1.0
N-acetyl-L-hydroxyproline 1.0
Water-soluble collagen solution 1.0
Hydrolyzed collagen (derived from fish) 1.0
Hydrolyzed yeast extract solution 0.05
Yeast extract 0.05
Polyoxyethylene hydrogenated castor oil 0.2
Natural vitamin E 0.03
Astaxanthin solution 0.1
Soy phospholipid 0.4
Camellia extract 0.01
Water-soluble camellia extract 0.03
Purified water remaining
実施例11:クリームの調製
以下の処方に従って、常法によりクリームを調製する。以下の数値は処方の全質量に対する質量%を意味する。
<組成> (質量%)
オリザノール 0.01
アルブチン 1.0
グリチルリチン酸ジカリウム 1.0
1,2−ペンタンジール 1.0
ジプロピレングリコール 5.0
ポリエチレングリコール6000 1.0
ヒアルロン酸ナトリウム 0.5
トリメチルグリシン 0.5
グリセリン 1.0
1,3−ブチレングリコール 5.0
キサンタンガム 0.15
アクリル酸・メタクリル酸アルキル共重合体 0.05
スクワラン 0.5
シア脂 1.0
サラシミツロウ 0.5
ベヘニルアルコール 0.5
親油型モノステアリン酸グリセリル 1.0
イソステアリン酸ポリオキシエチレングリセリル 0.5
メチルポリシロキサン 2.0
アクリル酸ナトリウム・アクロイルジメチルタウリン酸ナトリウム共重合体 0.05
コラーゲン 1.0
N−アセチル−L−ヒドロキシプロリン 1.0
水溶性コラーゲン液 1.0
加水分解コラーゲン(魚由来) 1.0
加水分解酵母エキス溶液 0.05
酵母エキス 0.05
ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油 0.2
天然ビタミンE 0.02
アスタキサンチン液 0.1
大豆リン脂質 0.5
ツボクサエキス 0.01
精製水 残量
Example 11: Preparation of cream A cream is prepared by a conventional method according to the following formulation. The following numerical value means the mass% with respect to the total mass of prescription.
<Composition> (mass%)
Oryzanol 0.01
Arbutin 1.0
Dipotassium glycyrrhizinate 1.0
1,2-pentanezil 1.0
Dipropylene glycol 5.0
Polyethylene glycol 6000 1.0
Sodium hyaluronate 0.5
Trimethylglycine 0.5
Glycerin 1.0
1,3-butylene glycol 5.0
Xanthan gum 0.15
Acrylic acid / alkyl methacrylate copolymer 0.05
Squalane 0.5
Shea fat 1.0
White beeswax 0.5
Behenyl alcohol 0.5
Lipophilic glyceryl monostearate 1.0
Polyoxyethylene glyceryl isostearate 0.5
Methylpolysiloxane 2.0
Sodium acrylate / acroyldimethylsodium taurate copolymer 0.05
Collagen 1.0
N-acetyl-L-hydroxyproline 1.0
Water-soluble collagen solution 1.0
Hydrolyzed collagen (derived from fish) 1.0
Hydrolyzed yeast extract solution 0.05
Yeast extract 0.05
Polyoxyethylene hydrogenated castor oil 0.2
Natural vitamin E 0.02
Astaxanthin solution 0.1
Soy phospholipid 0.5
Camellia extract 0.01
Purified water remaining
実施例12:パック化粧料の調製
以下の処方に従って、常法によりパック化粧料を調製する。以下の数値は処方の全質量に対する質量%を意味する。
<組成> (質量%)
オリザノール 0.01
アルブチン 1.0
グリチルリチン酸ジカリウム 1.0
1,2−ペンタンジオール 1.0
ジプロピレングリコール 5.0
1,3−ブチレングリコール 5.0
ヒドロキシエチルセルロース 0.15
キサンタンガム 0.1
グリセリン 1.0
エタノール 3.0
クエン酸 0.12
水酸化ナトリウム 0.05
コラーゲン 1.0
N−アセチル−L−ヒドロキシプロリン 1.0
水溶性コラーゲン液 1.0
加水分解コラーゲン(魚由来) 1.0
加水分解酵母エキス溶液 0.05
ボタンエキス 0.05
リン酸L−アスコルビルマグネシウム 1.0
ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油 0.2
天然ビタミンE 0.02
アスタキサンチン液 0.1
大豆リン脂質 0.5
ツボクサエキス 0.01
水溶性ツボクサエキス 0.05
不織布 1シート
Example 12: Preparation of a pack cosmetic A pack cosmetic is prepared by a conventional method according to the following formulation. The following numerical value means the mass% with respect to the total mass of prescription.
<Composition> (mass%)
Oryzanol 0.01
Arbutin 1.0
Dipotassium glycyrrhizinate 1.0
1,2-pentanediol 1.0
Dipropylene glycol 5.0
1,3-butylene glycol 5.0
Hydroxyethyl cellulose 0.15
Xanthan gum 0.1
Glycerin 1.0
Ethanol 3.0
Citric acid 0.12
Sodium hydroxide 0.05
Collagen 1.0
N-acetyl-L-hydroxyproline 1.0
Water-soluble collagen solution 1.0
Hydrolyzed collagen (derived from fish) 1.0
Hydrolyzed yeast extract solution 0.05
Button extract 0.05
L-ascorbyl magnesium phosphate 1.0
Polyoxyethylene hydrogenated castor oil 0.2
Natural vitamin E 0.02
Astaxanthin solution 0.1
Soy phospholipid 0.5
Camellia extract 0.01
Water-soluble camellia extract 0.05
Non-woven fabric 1 sheet
実施例13:油中水型日焼け止め化粧料の調製
以下の処方に従って、常法により油中水型日焼け止め化粧料を調製する。以下の数値は処方の全質量に対する質量%を意味する。
<組成> (質量%)
オリザノール 0.01
シクロペンタシロキサン 40.0
ジメチコン 8.0
エタノール 3.0
PEG−9ポリジメチルシロキシエチルジメチコン 5.0
ポリメチルシルセスキオキサン 4.0
ブチレングリコール 3.0
(アクリル酸ブチル/ジメタクリル酸グリコール)クロスポリマー 1.0
セスキオレイン酸ソルビタン 0.25
マイカ 0.5
フェノキシエタノール 0.3
クエン酸ナトリウム 0.1
グリチルリチン酸ジカリウム 0.1
ツボクサエキス 0.1
酸化チタン 8.0
t−ブトキシベンゾイルメタン 2.5
水酸化アルミニウム 2.4
イソステアリン酸 1.5
精製水 残量
Example 13: Preparation of water-in-oil type sunscreen cosmetics A water-in-oil type sunscreen cosmetic is prepared by a conventional method according to the following formulation. The following numerical value means the mass% with respect to the total mass of prescription.
<Composition> (mass%)
Oryzanol 0.01
Cyclopentasiloxane 40.0
Dimethicone 8.0
Ethanol 3.0
PEG-9 polydimethylsiloxyethyl dimethicone 5.0
Polymethylsilsesquioxane 4.0
Butylene glycol 3.0
(Butyl acrylate / dimethacrylate glycol) cross polymer 1.0
Sorbitan sesquioleate 0.25
Mica 0.5
Phenoxyethanol 0.3
Sodium citrate 0.1
Dipotassium glycyrrhizinate 0.1
Camellia extract 0.1
Titanium oxide 8.0
t-Butoxybenzoylmethane 2.5
Aluminum hydroxide 2.4
Isostearic acid 1.5
Purified water remaining
実施例14:水中油型日焼け止め化粧料の調製
以下の処方に従って、常法により水中油型日焼け止め化粧料を調製する。以下の数値は処方の全質量に対する質量%を意味する。
<組成> (質量%)
オリザノール 0.01
シクロペンタシロキサン 1.0
エタノール 10.0
イソノナン酸イソドデシル 8.0
メトキシ桂皮酸エチルヘキシル 6.0
1,3−ブチレングリコール 3.0
(アクリル酸ヒドロキシエチル/アクリロイルジメチルNa)コポリマー 1.0
(アクリル酸ブチル/ジメタクリル酸グリコール)クロスコポリマー 0.5
マイカ 0.5
ジポリヒドロキシステアリン酸PEG−30 0.5
フェノキシエタノール 0.3
キサンタンガム 0.05
グリチルリチン酸ジカリウム 0.1
ツボクサエキス 0.1
酸化チタン 5.0
t−ブトキシジベンゾイルメタン 2.5
水酸化アルミニウム 1.0
イソステアリン酸 0.5
精製水 残量
Example 14: Preparation of oil-in-water sunscreen cosmetics An oil-in-water sunscreen cosmetic is prepared by a conventional method according to the following formulation. The following numerical value means the mass% with respect to the total mass of prescription.
<Composition> (mass%)
Oryzanol 0.01
Cyclopentasiloxane 1.0
Ethanol 10.0
Isododecyl isononanoate 8.0
Ethylhexyl methoxycinnamate 6.0
1,3-butylene glycol 3.0
(Hydroxyethyl acrylate / acryloyldimethyl Na) copolymer 1.0
(Butyl acrylate / dimethacrylate glycol) cross copolymer 0.5
Mica 0.5
Dipolyhydroxystearic acid PEG-30 0.5
Phenoxyethanol 0.3
Xanthan gum 0.05
Dipotassium glycyrrhizinate 0.1
Camellia extract 0.1
Titanium oxide 5.0
t-Butoxydibenzoylmethane 2.5
Aluminum hydroxide 1.0
Isostearic acid 0.5
Purified water remaining
Claims (4)
Cosmetics containing the melanosome protein degradation promoter of Claim 3.
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---|---|---|---|
JP2013137382A JP2015010070A (en) | 2013-06-28 | 2013-06-28 | Melanin decomposition accelerator and melanosome protein decomposition accelerator |
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JP2013137382A JP2015010070A (en) | 2013-06-28 | 2013-06-28 | Melanin decomposition accelerator and melanosome protein decomposition accelerator |
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