JP2014526342A - Dermal filler composition comprising an antioxidant - Google Patents

Dermal filler composition comprising an antioxidant Download PDF

Info

Publication number
JP2014526342A
JP2014526342A JP2014530798A JP2014530798A JP2014526342A JP 2014526342 A JP2014526342 A JP 2014526342A JP 2014530798 A JP2014530798 A JP 2014530798A JP 2014530798 A JP2014530798 A JP 2014530798A JP 2014526342 A JP2014526342 A JP 2014526342A
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
composition
hyaluronic acid
skin
additive
gel
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
JP2014530798A
Other languages
Japanese (ja)
Other versions
JP2014526342A5 (en
JP6125509B2 (en
Inventor
ガブリエル・エヌ・ンジカン
シャオジエ・ユ
フティアン・リウ
スミット・パリワル
ニコラス・ジェイ・マネシス
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Sumit Paliwal
Allergan Inc
Original Assignee
Sumit Paliwal
Allergan Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from PCT/US2012/052125 external-priority patent/WO2013028904A2/en
Application filed by Sumit Paliwal, Allergan Inc filed Critical Sumit Paliwal
Publication of JP2014526342A publication Critical patent/JP2014526342A/en
Publication of JP2014526342A5 publication Critical patent/JP2014526342A5/ja
Application granted granted Critical
Publication of JP6125509B2 publication Critical patent/JP6125509B2/en
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
    • A61L27/14—Macromolecular materials
    • A61L27/20—Polysaccharides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/54—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic compound
    • A61K47/545—Heterocyclic compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
    • A61K8/67—Vitamins
    • A61K8/676—Ascorbic acid, i.e. vitamin C
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/72—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic macromolecular compounds
    • A61K8/73—Polysaccharides
    • A61K8/735—Mucopolysaccharides, e.g. hyaluronic acid; Derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
    • A61L27/50—Materials characterised by their function or physical properties, e.g. injectable or lubricating compositions, shape-memory materials, surface modified materials
    • A61L27/505—Stabilizers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
    • A61L27/50—Materials characterised by their function or physical properties, e.g. injectable or lubricating compositions, shape-memory materials, surface modified materials
    • A61L27/54—Biologically active materials, e.g. therapeutic substances
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A61Q19/08—Anti-ageing preparations
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
    • C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
    • C08B37/006—Heteroglycans, i.e. polysaccharides having more than one sugar residue in the main chain in either alternating or less regular sequence; Gellans; Succinoglycans; Arabinogalactans; Tragacanth or gum tragacanth or traganth from Astragalus; Gum Karaya from Sterculia urens; Gum Ghatti from Anogeissus latifolia; Derivatives thereof
    • C08B37/0063—Glycosaminoglycans or mucopolysaccharides, e.g. keratan sulfate; Derivatives thereof, e.g. fucoidan
    • C08B37/0072—Hyaluronic acid, i.e. HA or hyaluronan; Derivatives thereof, e.g. crosslinked hyaluronic acid (hylan) or hyaluronates
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08J—WORKING-UP; GENERAL PROCESSES OF COMPOUNDING; AFTER-TREATMENT NOT COVERED BY SUBCLASSES C08B, C08C, C08F, C08G or C08H
    • C08J3/00—Processes of treating or compounding macromolecular substances
    • C08J3/24—Crosslinking, e.g. vulcanising, of macromolecules
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08L—COMPOSITIONS OF MACROMOLECULAR COMPOUNDS
    • C08L5/00—Compositions of polysaccharides or of their derivatives not provided for in groups C08L1/00 or C08L3/00
    • C08L5/08—Chitin; Chondroitin sulfate; Hyaluronic acid; Derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
    • A61K2800/80—Process related aspects concerning the preparation of the cosmetic composition or the storage or application thereof
    • A61K2800/91—Injection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L2300/00—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices
    • A61L2300/40—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices characterised by a specific therapeutic activity or mode of action
    • A61L2300/402—Anaestetics, analgesics, e.g. lidocaine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L2300/00—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices
    • A61L2300/40—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices characterised by a specific therapeutic activity or mode of action
    • A61L2300/428—Vitamins, e.g. tocopherol, riboflavin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L2400/00—Materials characterised by their function or physical properties
    • A61L2400/06—Flowable or injectable implant compositions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L2430/00—Materials or treatment for tissue regeneration
    • A61L2430/34—Materials or treatment for tissue regeneration for soft tissue reconstruction
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08J—WORKING-UP; GENERAL PROCESSES OF COMPOUNDING; AFTER-TREATMENT NOT COVERED BY SUBCLASSES C08B, C08C, C08F, C08G or C08H
    • C08J2305/00—Characterised by the use of polysaccharides or of their derivatives not provided for in groups C08J2301/00 or C08J2303/00
    • C08J2305/08—Chitin; Chondroitin sulfate; Hyaluronic acid; Derivatives thereof
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08J—WORKING-UP; GENERAL PROCESSES OF COMPOUNDING; AFTER-TREATMENT NOT COVERED BY SUBCLASSES C08B, C08C, C08F, C08G or C08H
    • C08J3/00—Processes of treating or compounding macromolecular substances
    • C08J3/02—Making solutions, dispersions, lattices or gels by other methods than by solution, emulsion or suspension polymerisation techniques
    • C08J3/03—Making solutions, dispersions, lattices or gels by other methods than by solution, emulsion or suspension polymerisation techniques in aqueous media
    • C08J3/075—Macromolecular gels

Abstract

本発明は、顔面における細線の修正のために特に有利である、高度に注入可能な、長期持続性ヒアルロン酸ベースのヒドロゲル皮膚充填剤組成物を提供する。The present invention provides a highly injectable, long-lasting hyaluronic acid-based hydrogel skin filler composition that is particularly advantageous for the correction of fine lines in the face.

Description

関連出願
本出願は、２０１１年９月１４日に出願された米国仮特許出願第６１／５３４，７８０号に対する優先権およびその便益を主張し、また２０１１年６月３日に出願された米国仮特許出願第６１／４９３，３０９号に対する優先権およびその便益を主張する２０１２年６月１日に出願された米国特許出願第１３／４８６，７５４号の一部継続である、２０１２年８月２３日に出願された米国特許出願第１３／５９３，３１３号の一部継続であり、これらの出願の各々の開示全体は、この具体的な参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。 RELATED APPLICATION This application claims priority and benefit to US Provisional Patent Application No. 61 / 534,780, filed September 14, 2011, and is filed with US Provisional Application, filed June 3, 2011. August 23, 2012, which is a continuation of US patent application Ser. No. 13 / 486,754, filed Jun. 1, 2012 claiming priority and benefit to patent application 61 / 493,309. The entire disclosure of each of these applications is hereby incorporated in its entirety by this specific reference, which is a continuation of US patent application Ser. No. 13 / 593,313 filed on a date.

本発明は、一般に、皮膚充填剤組成物に関し、より具体的には、皮膚における細線の治療に有効である注入可能な皮膚充填剤組成物に関する。   The present invention relates generally to dermal filler compositions, and more specifically to injectable dermal filler compositions that are effective in treating fine lines in the skin.

皮膚の老化は進行性の現象であり、経時的に生じ、アルコール消費、喫煙、および日光露出等の生活要因の影響を受け得る。顔面皮膚の老化は、萎縮、たるみ、および肥厚を特徴とし得る。萎縮は、皮膚組織の厚みの激減に相当する。皮下組織のたるみは、余分な皮膚および眼瞼下垂につながり、頬および瞼の垂れ下がった外観につながる。肥厚は、顔面下部および首の膨張による過剰な重量の増加を指す。これらの変化は、典型的には、乾燥、弾力性の喪失、およびザラザラした質感に関連する。   Skin aging is a progressive phenomenon that occurs over time and can be affected by lifestyle factors such as alcohol consumption, smoking, and sun exposure. Facial skin aging can be characterized by atrophy, sagging, and thickening. Atrophy corresponds to a drastic decrease in the thickness of skin tissue. The sagging of the subcutaneous tissue leads to excess skin and drooping of the eyelids, leading to a sagging appearance of the cheeks and eyelids. Thickening refers to excessive weight gain due to lower facial and neck swelling. These changes are typically associated with dryness, loss of elasticity, and rough texture.

ヒアルロナンとしても知られるヒアルロン酸（ＨＡ）は、結合組織、上皮組織、および神経組織においてヒトの体全体に広く分布される非硫酸化グリコサミノグリカンである。ヒアルロン酸（Ｈｙａｌｕｒｉｎｉｃ ａｃｉｄ）は、皮膚の様々な層に豊富であり、そこで、それは、例えば、良好な水和作用を確保し、細胞外マトリックスの組織化を支援し、充填剤物質として働き、かつ組織修復機構に関与するといった複数の機能を有する。しかしながら、年齢と共に、皮膚内に存在するヒアルロン酸、コラーゲン、エラスチン、および他のマトリックス重合体の量は減少する。例として、紫外線（たとえば太陽からの）への繰り返しの露出は、皮膚細胞のヒアルロナン産生の減少、ならびにその分解速度の増加の両方を引き起こす。この物質の喪失は、例えば、しわ、くぼみ、水分の喪失、および老化の出現に寄与する他の望ましくない状態等の様々な皮膚状態をもたらす。   Hyaluronic acid (HA), also known as hyaluronan, is a non-sulfated glycosaminoglycan that is widely distributed throughout the human body in connective, epithelial, and neural tissues. Hyaluronic acid is abundant in various layers of the skin, where it, for example, ensures good hydration, assists in the organization of the extracellular matrix, acts as a filler material, and It has multiple functions such as being involved in tissue repair mechanisms. However, with age, the amount of hyaluronic acid, collagen, elastin, and other matrix polymers present in the skin decreases. As an example, repeated exposure to ultraviolet light (eg from the sun) causes both a decrease in hyaluronan production of skin cells as well as an increase in its degradation rate. This loss of material results in a variety of skin conditions such as wrinkles, dimples, loss of moisture, and other undesirable conditions that contribute to the appearance of aging.

注入可能な皮膚充填剤は、老化する皮膚を治療することにおいて成功裏に使用されてきた。充填剤は、これらの皮膚状態を治療するために、失われた内因性マトリックス重合体を置換し得るか、または既存のマトリックス重合体の機能を強化／促進し得る。ヒアルロン酸は、ヒトの体全体で天然に見出される物質であるので、ヒアルロン酸ベースの皮膚充填剤は、次第に評判となってきている。これらの充填剤は、一般に、忍容性に優れ、非永続的で、多種多様の皮膚状態に対するかなりリスクの低い治療である。   Injectable skin fillers have been used successfully in treating aging skin. Fillers can replace lost endogenous matrix polymers or enhance / promote the function of existing matrix polymers to treat these skin conditions. Since hyaluronic acid is a substance found naturally throughout the human body, hyaluronic acid-based skin fillers are becoming increasingly popular. These fillers are generally well tolerated, non-permanent, and a fairly low risk treatment for a wide variety of skin conditions.

チンダル現象は、ヒアルロン酸（ＨＡ）ベースの皮膚充填剤を投与された一部の患者において生じる有害事象である。チンダル現象は、皮膚充填剤が注入された皮膚部位における青色の変色の出現によって特徴付けられ、それは半透明な表皮から透けて見える可視的なヒアルロン酸を表す。臨床報告は、充填剤投与技法および皮膚特性がこの有害事象の徴候に影響を及ぼし得ることを示唆している。高い剛性および弾力性を有する充填剤は、その物質が中層および深層真皮領域に注入されるため、顔面変色の恐れなしに、鼻唇溝、頬、および顎等の顔面上の領域を修正するために成功裏に使用される。しかしながら、これらの充填物質を使用して、表層の、細線じわ、例えば、涙の通り道、眉間の線、目尻の線、笑い線、または額を修正するとき、または誤って真皮の上層領域において過度に表層に適用するとき、皮膚の青みがかった変色がしばしば観察される。チンダル現象の結果と考えられている、この現象は、適用部位の半永続的な変色を残し、時には、充填物質を分解するためのヒアルロニダーゼの投与後のみに消失する。結果的に、チンダル現象は、表層の細線じわに対して治療された患者においてより一般的である。ゲルが皮膚内に残る限り、典型的には数ヶ月間にわたる、チンダル現象の長期的な徴候は、患者の間での主要な懸念の原因である。   The Tyndall phenomenon is an adverse event that occurs in some patients who have been administered hyaluronic acid (HA) based skin filler. The Tyndall phenomenon is characterized by the appearance of a blue discoloration at the skin site where the skin filler has been injected, which represents visible hyaluronic acid visible through the translucent epidermis. Clinical reports suggest that filler dosing techniques and skin characteristics can affect the signs of this adverse event. Highly rigid and elastic fillers are used to modify areas on the face such as the nasal lip, cheeks, and jaws without risk of facial discoloration because the material is injected into the middle and deep dermis areas Used successfully. However, when using these fillers to correct superficial fine lines, e.g., tear passages, eyebrow lines, corner lines, laugh lines, or forehead, or accidentally in the upper dermis area When applied to the surface too much, a bluish discoloration of the skin is often observed. This phenomenon, believed to be the result of the Tyndall phenomenon, leaves a semi-permanent discoloration at the site of application and sometimes disappears only after administration of hyaluronidase to break down the packing material. Consequently, the Tyndall phenomenon is more common in patients treated for superficial fine lines. As long as the gel remains in the skin, long-term signs of the Tyndall phenomenon, typically for months, are the main cause of concern among patients.

ＨＡベースの皮膚充填剤ゲルは、涙の通り道、額、目尻、眉間の線等の周辺の「細線」のしわを治療するために特異的に製剤化されてきた。市販されているＨＡ「細線」ゲルにはＪｕｖｅｄｅｒｍ Ｒｅｆｉｎｅ（Ｇ’約６７Ｐａ；Ｇ”／Ｇ’約０．５９、ＨＡ濃度１８ｍｇ／ｍＬ）、Ｂｅｌｏｔｅｒｏ Ｓｏｆｔ（Ｇ’約２８Ｐａ；Ｇ”／Ｇ’約１．１、ＨＡ濃度２０ｍｇ／ｍＬ）、Ｅｍｅｒｖｅｌ Ｔｏｕｃｈ（Ｇ’約５６Ｐａ；Ｇ”／Ｇ’約０．６４、ＨＡ濃度２０ｍｇ／ｍＬ）、Ｓｔｙｌａｇｅ Ｓ（Ｇ’約１９２ Ｐａ；Ｇ”／Ｇ’約０．２０、ＨＡ濃度１６ｍｇ／ｍＬ）、Ｔｅｏｓｙａｌ Ｆｉｒｓｔ Ｌｉｎｅｓ（Ｇ’ ５９Ｐａ；Ｇ”／Ｇ’約０．５３、ＨＡ濃度２０ｍｇ／ｍＬ）、Ｒｅｓｔｙｌａｎｅ Ｔｏｕｃｈ（Ｇ’約４８９Ｐａ；Ｇ”／Ｇ’約０．２４、ＨＡ濃度１８ｍｇ／ｍＬ）が含まれる。これらのゲルは、例えば、少量の架橋剤によりＨＡ直鎖を軽く架橋結合することによって、および／またはこれらのゲルの最終ＨＡ濃度を低減することによって、低い弾性係数を有するように製剤化されるが、市販されている「細線」ゲルのほとんどは、一部の患者において、特に表層に、例えば、約１ｍｍ未満の深さで注入されるときとき、依然としてチンダル現象を示す。   HA-based skin filler gels have been specifically formulated to treat peripheral “thin line” wrinkles such as tear passages, forehead, corners of eyes, and lines between eyebrows. Commercially available HA “thin wire” gels include Juvederum Refine (G ′ about 67 Pa; G ″ / G ′ about 0.59, HA concentration 18 mg / mL), Beltero Soft (G ′ about 28 Pa; G ″ / G ′ about 1.1, HA concentration 20 mg / mL), Emervel Touch (G ′ about 56 Pa; G ″ / G ′ about 0.64, HA concentration 20 mg / mL), Style S (G ′ about 192 Pa; G ″ / G ′ About 0.20, HA concentration 16 mg / mL), Teosy First Lines (G ′ 59 Pa; G ″ / G ′ about 0.53, HA concentration 20 mg / mL), Restylane Touch (G ′ about 489 Pa; G ″ / G ′ About 0.24, HA concentration 18 mg / mL). These gels are formulated to have a low modulus of elasticity, for example, by lightly cross-linking HA linear chains with a small amount of cross-linking agent and / or by reducing the final HA concentration of these gels. However, most of the commercially available “thin wire” gels still show a Tyndall phenomenon in some patients, especially when injected into the surface, for example, at a depth of less than about 1 mm.

コラーゲンベースのゲルは、表層のしわの治療において用いることができ、チンダル現象を引き起こさないように思われる。コラーゲンベースのゲルは、それらが皮膚内で比較的不十分な持続期間を有し、また個人において事前検査を必要とするため、あまり好まれない。Ｒａｄｉｅｓｓｅ（登録商標）（カルシウムヒドロキシアパタイト）は、主要な成分がヒアルロン酸でなく合成カルシウムヒドロキシアパタイトである、皮下の注入可能な埋没物である。ヒアルロン酸ベースの皮膚充填剤とは異なり、カルシウムヒドロキシアパタイトは、透明でなく、故にチンダル現象の合併症を回避する。しかしながら、過度に表層に配置されると、この充填剤は、皮膚の直下で白色の物質として見られ得る。さらに、ヒアルロン酸ベースの充填剤と比較して、Ｒａｄｉｅｓｓｅ（登録商標）は、注入のためにより大きい針を必要とし、典型的に、目の領域における使用には推奨されない。   Collagen-based gels can be used in the treatment of superficial wrinkles and do not appear to cause the Tyndall phenomenon. Collagen-based gels are less preferred because they have a relatively poor duration in the skin and require prior examination in the individual. Radisese® (calcium hydroxyapatite) is a subcutaneously injectable implant whose primary component is synthetic calcium hydroxyapatite rather than hyaluronic acid. Unlike hyaluronic acid-based skin fillers, calcium hydroxyapatite is not transparent and thus avoids the complications of the Tyndall phenomenon. However, if placed too much on the surface, the filler can be seen as a white substance directly under the skin. In addition, compared to hyaluronic acid based fillers, Radises® requires a larger needle for injection and is typically not recommended for use in the eye area.

表層に注入されるときであってもチンダル現象に起因する青みがかった変色を示さない、注入可能なヒアルロン酸ベースの皮膚充填を提供することが望ましいであろう。   It would be desirable to provide an injectable hyaluronic acid-based skin filling that does not exhibit a bluish discoloration due to the Tyndall phenomenon even when injected into the surface layer.

本発明は、いかなる青みがかった皮膚の変色も生み出すことのない、または少なくとも有意なもしくは顕著な青みがかった変色のない、真皮上層内に投与され得る、ＨＡベースの皮膚充填剤を調製するための組成物および製剤方法を記載する。さらに、本発明の本明細書に記載される充填剤ゲルの多くは、現在市販されるゲルよりも体内で有意により長く持続することが見出されている。本発明のいくつかの態様において、「チンダル形成」することなく、ボリュームおよびふくよかさを追加し、細線じわの出現を低減する、皮膚の外観を向上させるのに有用な光透過性の皮膚充填剤が提供される。本組成物は、多くの従来の光透過性の皮膚充填剤に関連する否定的な青色の変色を引き起こすことなく、皮膚の細線に、薄い皮膚の領域で、かつかなり表層であっても、導入することができる。   The present invention is a composition for preparing an HA-based skin filler that does not produce any bluish skin discoloration, or at least has no significant or noticeable bluish discoloration and can be administered in the upper dermis. And formulation methods are described. Moreover, many of the filler gels described herein of the present invention have been found to last significantly longer in the body than currently marketed gels. In some embodiments of the present invention, light transmissive skin filling useful for improving skin appearance, adding volume and plumpness, reducing the appearance of fine lines without “tyndal formation” An agent is provided. The composition is incorporated into thin skin lines, even in thin skin areas, and even at the surface, without causing the negative blue discoloration associated with many conventional light permeable skin fillers. can do.

より具体的には、本発明の一態様において、生体適合性重合体、例えば、架橋結合されたヒアルロン酸成分およびヒアルロン酸成分と組み合わされた添加剤を一般に含む、長期持続性の治療的皮膚充填剤組成物が提供される。   More specifically, in one embodiment of the present invention, a long-lasting therapeutic skin filling generally comprising a biocompatible polymer, eg, a cross-linked hyaluronic acid component and an additive combined with a hyaluronic acid component An agent composition is provided.

一実施形態において、重合体は、多糖類、例えば、ヒアルロン酸である。ヒアルロン酸は、架橋成分を含み、また非架橋成分をさらに含んでもよい。添加剤は、ビタミン、例えば、ビタミンＣ、例えば、ビタミンＣの安定化型、またはビタミンＣ誘導体、例えば、Ｌ−アスコルビン酸２−グルコシド（ＡＡ２Ｇ）、リン酸アスコルビル３‐アミノプロピル（ａｓｃｏｂｙｌ ３−ａｍｉｎｏｐｒｏｐｙｌ ｐｈｏｓｐｈａｔｅ）（Ｖｉｔａｇｅｎ）、またはリン酸アスコルビルナトリウム（ＡＡ２Ｐ）を含んでもよい。   In one embodiment, the polymer is a polysaccharide, such as hyaluronic acid. Hyaluronic acid includes a crosslinking component and may further include a non-crosslinking component. Additives include vitamins such as vitamin C, eg, stabilized forms of vitamin C, or vitamin C derivatives such as L-ascorbic acid 2-glucoside (AA2G), ascorbyl 3-aminopropyl phosphate. phosphate (Vitagen), or sodium ascorbyl phosphate (AA2P).

本発明の一態様において、添加剤は、好適な反応プロセス、例えば、エーテル化、アミド化、またはエステル化によって重合体に共有結合されるビタミン誘導体である。   In one aspect of the invention, the additive is a vitamin derivative that is covalently bonded to the polymer by a suitable reaction process, such as etherification, amidation, or esterification.

本発明の幅広い態様において、皮膚充填剤組成物が提供され、その組成物は、架橋成分と架橋結合されたヒアルロン酸成分、および架橋成分以外の添加剤を含む。ヒアルロン酸成分は、添加剤に化学的に結合されてもよい。さらに、組成物は、患者の皮膚領域中に投与されるとき、添加剤を含まないことを除いて実質的に同一である組成物と比べて、低減されたチンダル現象を示す。組成物は、他の添加剤、例えば、リドカイン等の麻酔剤をさらに含んでもよい。一実施形態において、添加剤は、ビタミンＣ誘導体、例えば、ＡＡ２Ｇである。別の実施形態において、添加剤は、Ｖｉｔａｇｅｎである。   In a broad aspect of the present invention, a dermal filler composition is provided, the composition comprising a hyaluronic acid component crosslinked with a crosslinking component, and an additive other than the crosslinking component. The hyaluronic acid component may be chemically bonded to the additive. Furthermore, the composition exhibits a reduced Tyndall phenomenon when administered into the skin area of a patient, compared to a composition that is substantially identical except that it does not contain additives. The composition may further comprise other additives, for example, an anesthetic such as lidocaine. In one embodiment, the additive is a vitamin C derivative, such as AA2G. In another embodiment, the additive is Vitagen.

一実施形態において、ヒアルロン酸成分は、約３モル％〜約４０モル、例えば、約３モル％〜約１０モル％である結合度で、添加剤に化学的に結合される。   In one embodiment, the hyaluronic acid component is chemically bound to the additive with a degree of binding that is about 3 mol% to about 40 mol, such as about 3 mol% to about 10 mol%.

組成物は、実質的に光透過性であってもよい。組成物は、一般に、約４０Ｐａ〜約１００Ｐａ、例えば、約１００Ｐａ以下〜例えば、約４０Ｐａ以上のＧ’値を有する。   The composition may be substantially light transmissive. The composition generally has a G 'value of about 40 Pa to about 100 Pa, such as about 100 Pa or less to about 40 Pa or more.

本発明の別の態様において、患者の皮膚における細線を治療する方法が提供される。一実施形態において、本方法は、患者の皮膚中に、ヒアルロン酸成分と、ヒアルロン酸を架橋結合する架橋成分と、架橋成分以外の添加剤との混合物を含む、組成物を導入するステップを含み、その組成物は、実質的に光透過性であり、またその組成物は、添加剤を含まないことを除いて実質的に同一である組成物と比べて、低減されたチンダル現象を示す。   In another aspect of the invention, a method of treating fine lines in a patient's skin is provided. In one embodiment, the method comprises introducing into the patient's skin a composition comprising a mixture of a hyaluronic acid component, a crosslinking component that crosslinks hyaluronic acid, and an additive other than the crosslinking component. The composition is substantially light transmissive and exhibits a reduced Tyndall phenomenon compared to a composition that is substantially identical except that it does not contain additives.

本発明の別の態様において、顔面の審美的外観を改善する方法が提供され、本方法は、一般に、患者の皮膚領域に、チンダル現象を何ら示さないか、または有意でないチンダル現象を示す、実質的に光透過性の皮膚充填剤組成物を投与するステップを含む。組成物は、ヒアルロン酸を提供するステップと、架橋剤をビタミンＣ誘導体と反応させるステップと、反応させられた架橋剤およびビタミンＣ誘導体をヒアルロン酸に添加して、共有結合されたビタミンＣを含む架橋結合されたヒアルロン酸組成物を形成するステップと、架橋結合されたヒアルロン酸組成物を均一化および中和して、注入可能な皮膚充填剤組成物を得るステップによって作製されてもよい。いくつかの実施形態において、ビタミンＣ誘導体は、ＡＡ２Ｇである。他の実施形態において、ビタミンＣ誘導体は、Ｖｉｔａｇｅｎである。   In another aspect of the present invention, a method is provided for improving the aesthetic appearance of a face, which generally does not exhibit any Tyndall phenomenon or insignificant Tyndall phenomenon in a patient's skin area. Administering a translucent skin filler composition. The composition includes providing hyaluronic acid, reacting a crosslinker with the vitamin C derivative, adding the reacted crosslinker and vitamin C derivative to the hyaluronic acid, and covalently binding vitamin C. It may be made by forming a cross-linked hyaluronic acid composition and homogenizing and neutralizing the cross-linked hyaluronic acid composition to obtain an injectable dermal filler composition. In some embodiments, the vitamin C derivative is AA2G. In other embodiments, the vitamin C derivative is Vitagen.

本発明のなおも別の態様において、患者の薄い皮膚領域における細線の出現を低減する方法が提供され、本方法は、一般に、患者に、約１ｍｍを超えない深さで、皮膚充填剤組成物であって、ビタミンＣまたはビタミンＣ誘導体を含む、実質的に光透過性のヒアルロン酸ベースの皮膚充填剤組成物を投与することを含む。いくつかの実施形態において、組成物は、約０．８ｍｍ以下、約０．６ｍｍ以下、または約０．４ｍｍ以下の深さの深さで注入される。   In yet another aspect of the invention, a method is provided for reducing the appearance of fine lines in a thin skin area of a patient, the method generally providing the patient with a skin filler composition at a depth not exceeding about 1 mm. Administering a substantially light transmissive hyaluronic acid based skin filler composition comprising vitamin C or a vitamin C derivative. In some embodiments, the composition is injected at a depth of about 0.8 mm or less, about 0.6 mm or less, or about 0.4 mm or less.

本発明のなおも別の態様において、実質的に光透過性であり、一般に、架橋成分と架橋結合されたヒアルロン酸成分、およびヒアルロン酸成分に共有結合されたビタミンＣ誘導体を含む、皮膚充填剤組成物が提供される。例となる実施形態において、組成物および約４０Ｐａ〜約１００ＰａのＧ’値を有する。さらに、組成物は、約１８ｍｇ／ｇ〜約３０ｍｇ／ｇのヒアルロン酸濃度を有してもよい。これらの組成物は、皮膚における、例えば、非常に薄い皮膚、例えば、約１ｍｍ以下の厚さを有する皮膚においてさえも細線または表層の溝を治療する際に特に有用かつ有効であり得る。いくつかの実施形態において、本発明の組成物は、皮膚中に導入された後、少なくとも３ヶ月、少なくとも６ヶ月、または最大１年持続する。   In yet another aspect of the present invention, a skin filler comprising a hyaluronic acid component that is substantially light transmissive and generally crosslinked with a crosslinking component, and a vitamin C derivative covalently bonded to the hyaluronic acid component A composition is provided. In an exemplary embodiment, the composition has a G 'value of about 40 Pa to about 100 Pa. Further, the composition may have a hyaluronic acid concentration of about 18 mg / g to about 30 mg / g. These compositions can be particularly useful and effective in treating fine lines or superficial grooves in skin, for example, even very thin skin, for example, skin having a thickness of about 1 mm or less. In some embodiments, the composition of the present invention lasts at least 3 months, at least 6 months, or up to 1 year after being introduced into the skin.

本発明のこれらのおよび他の態様および利点は、次の図面および詳細な説明を参照してより容易に理解され、評価され得る。   These and other aspects and advantages of the present invention may be more readily understood and appreciated with reference to the following drawings and detailed description.

Ｌ‐アスコルビン酸２‐グルコシド（ＡＡ２Ｇ）の構造の表示である。2 is a representation of the structure of L-ascorbic acid 2-glucoside (AA2G). リン酸アスコルビル３‐アミノプロピル（Ｖｉｔａｇｅｎ）の構造の表示である。1 is a representation of the structure of ascorbyl phosphate 3-aminopropyl (Vitagen). リン酸アスコルビルナトリウム（ＡＡ２Ｐ）の構造の表示である。It is an indication of the structure of sodium ascorbyl phosphate (AA2P). １，４‐ブタンジオールジグリシジルエーテル（ＢＤＤＥ）の構造の表示である。1 is a representation of the structure of 1,4-butanediol diglycidyl ether (BDDE). ペンタエリスリトールグリシダールエーテル（Ｓｔａｒ‐ＰＥＧエポキシド）の構造の表示である。1 is a representation of the structure of pentaerythritol glycidal ether (Star-PEG epoxide). ペンタエリスリトール（３‐アミノプロピル）エーテル（Ｓｔａｒ‐ＰＥＧアミン）の構造の表示である。1 is a representation of the structure of pentaerythritol (3-aminopropyl) ether (Star-PEG amine). 本発明に従う様々な皮膚充填剤組成物についての結合度およびＧ’値を示す表である。2 is a table showing the degree of binding and G 'values for various skin filler compositions according to the present invention. 本発明に従うＨＡ‐ＡＡ２Ｇ（ＢＤＤＥ）皮膚充填剤組成物についての結合度、ＨＡ濃度、およびＧ’値を示す表である。2 is a table showing the degree of binding, HA concentration, and G ′ value for the HA-AA2G (BDDE) dermal filler composition according to the present invention. ４つの異なるα−グルコシダーゼ濃度についての、分単位の時間の単位での、ＡＡ２ＧのＰＢＳ溶液からのＡｓＡの観察された放出パーセントのグラフ表示である。FIG. 5 is a graphical representation of the observed percent release of AsA from a solution of AA2G in PBS in units of minutes for four different α-glucosidase concentrations. 本発明に従う結合された皮膚充填剤からの遊離ＡｓＡの放出プロファイル（持続放出）（モル％でのＡＡ２Ｇ変換対反応時間）の表示を示す。FIG. 2 shows a representation of the release profile (sustained release) of free AsA (AA2G conversion vs. reaction time in mol%) from bound dermal filler according to the invention. 本発明に従う様々な皮膚充填剤についての追加の放出データを示す。Figure 3 shows additional release data for various skin fillers according to the present invention. 本発明に従う様々な皮膚充填剤についての追加の放出データを示す。Figure 3 shows additional release data for various skin fillers according to the present invention. 本発明のＨＡベースの皮膚充填剤ゲルおよび細線適用のためのいくつかの市販されているゲルの表層注入後の皮膚の画像を示す。Figure 3 shows an image of the skin after surface injection of the HA-based dermal filler gel of the present invention and several commercially available gels for fine wire application. 本発明のＨＡベースの皮膚充填剤ゲルおよび細線適用のためのいくつかの市販されているゲルの可視的なチンダルスコアを示す。Figure 2 shows the visual Tyndall score of the HA-based skin filler gel of the present invention and several commercially available gels for fine wire application. 本発明のＨＡベースの皮膚充填剤ゲルおよび細線適用のためのいくつかの市販されているゲルの、皮膚から送達される青色光の％を示す。FIG. 5 shows the percent of blue light delivered from the skin of the HA-based skin filler gel of the present invention and several commercially available gels for thin wire applications. 本発明のＨＡベースの皮膚充填剤ゲルおよび細線適用のためのいくつかの市販されているゲルの１週間の埋没後に残っているゲルの全体的な％を示す。Figure 2 shows the overall% of gel remaining after 1 week of embedment of the HA-based skin filler gel of the present invention and several commercially available gels for fine wire application. 埋没された本発明のＨＡベースの皮膚充填剤ゲルおよび細線適用のためのいくつかの市販されているゲルの０週目、１２週目、２４週目、および４０週目に残っているゲルの全体的な％を示す。Of the HA-based dermal filler gel of the present invention and some of the commercially available gels for fine wire application remaining in the 0, 12, 24 and 40 weeks Shows overall%.

本発明の一態様において、皮膚充填剤組成物が提供され、それらの組成物は、一般に、生体適合性重合体、例えば、架橋結合されたヒアルロン酸等の多糖類、およびその重合体に共有結合されたビタミンＣ誘導体を含む。組成物は、皮膚の新規コラーゲン新生ならびに他の治療的または美容的便益のためのビタミンＣの持続放出を提供する。例えば、皮内で、皮膚中に導入されたときに、組成物は、体内の内因性酵素と反応し、経時的に、生理活性ビタミンＣが酵素切断を介して生体内で生成される。ビタミンＣが数週間または数ヶ月の期間にわたり組成物から放出されるにつれて、その付帯する便益が体にとって利用可能になる。   In one aspect of the invention, dermal filler compositions are provided, which are generally covalently bonded to a biocompatible polymer, for example, a polysaccharide such as cross-linked hyaluronic acid, and the polymer. Containing vitamin C derivatives. The composition provides a sustained release of vitamin C for new collagenization of the skin as well as other therapeutic or cosmetic benefits. For example, when introduced intradermally into the skin, the composition reacts with endogenous enzymes in the body, and over time, bioactive vitamin C is generated in vivo via enzymatic cleavage. As vitamin C is released from the composition over a period of weeks or months, its associated benefits become available to the body.

重合体は、タンパク質、ペプチドおよびポリペプチド、ポリリジン、コラーゲン、プロコラーゲン、エラスチン、ならびにラミニンからなる重合体の群から選択され得る。   The polymer may be selected from the group of polymers consisting of proteins, peptides and polypeptides, polylysine, collagen, procollagen, elastin, and laminin.

重合体は、ヒドロキシル、アミン、およびカルボキシル官能基を有する合成重合体、ポリ（ビニルアルコール）、ポリエチレングリコール、ポリビニルアミン、ポリアリルアミン、デアセチル化ポリアクリルアミド、ポリアクリル酸、およびポリメタクリル酸からなる重合体の群から選択され得る。重合体は、 樹状（ｄｅｎｔｒｉｃ）ポリオールおよび樹状ポリアミンを含む、樹状または分枝状重合体重合体からなる重合体の群から選択され得る。重合体は、ヒドロキシル、アミン、およびカルボキシル官能基を有する固体表面からなる重合体の群から選択され得る。   The polymer is a polymer comprising a synthetic polymer having hydroxyl, amine, and carboxyl functional groups, poly (vinyl alcohol), polyethylene glycol, polyvinylamine, polyallylamine, deacetylated polyacrylamide, polyacrylic acid, and polymethacrylic acid Can be selected from the group of The polymer may be selected from the group of polymers consisting of dendritic or branched polymer polymers, including dendritic polyols and dendritic polyamines. The polymer may be selected from the group of polymers consisting of solid surfaces having hydroxyl, amine, and carboxyl functional groups.

重合体は、例えば、デンプンならびにその誘導体、デキストランならびにその誘導体、セルロースならびにその誘導体、キチンおよびキトサンおよびアルギン酸塩ならびにその誘導体を含む多糖類の群から選択される多糖類であってもよい。   The polymer may be, for example, a polysaccharide selected from the group of polysaccharides including starch and derivatives thereof, dextran and derivatives thereof, cellulose and derivatives thereof, chitin and chitosan and alginates and derivatives thereof.

本発明の１つの例となる実施形態において、重合体はグリコサミノグリカンである。本明細書に開示されるヒドロゲル組成物は、２つ以上の異なるグリコサミノグリカン重合体をさらに含み得る。本明細書中で使用されるとき、用語「グリコサミノグリカン」は、「ＧＡＧ」および「ムコ多糖」と同義であり、反復二糖単位からなる長い非分岐多糖類を指す。復単位は、ヘキソサミン（窒素含有六炭糖）に結合されたヘキソース（六炭糖）またはヘキスロン酸およびその薬学的に許容される塩からなる。ＧＡＧファミリーのメンバーは、例えば、グルクロン酸、イズロン酸、ガラクトース、ガラクトサミン、グルコサミン等、それらが含有するヘキソサミン、ヘキソース、もしくはヘキスロン酸単位の型において異なり、グリコシド結合の幾何においてもまた異なり得る。いずれのグリコサミノグリカン重合体も、そのグリコサミノグリカン重合体が皮膚の状態を改善するという条件で、本明細書に開示されるヒドロゲル組成物において有用である。グリコサミノグリカンの非限定的な例として、コンドロイチン硫酸塩、デルマタン硫酸塩、ケラタン硫酸塩、ヒアルロナンが挙げられる。グリコサミノグリカンの許容される塩の非限定的な例として、ナトリウム塩、カリウム塩、マグネシウム塩、カルシウム塩、およびそれらの組み合わせが挙げられる。本明細書に開示されるヒドロゲル組成物および方法において有用なグリコサミノグリカンおよびそれらの結果として生じる重合体は、例えば、Ｐｉｒｏｎ ａｎｄ Ｔｈｏｌｉｎ，Ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ Ｃｒｏｓｓｌｉｎｋｉｎｇ，Ｈｙｄｒｏｇｅｌ Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ，Ｒｅｓｕｌｔｉｎｇ Ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ（ｓ）ａｎｄ Ｈｙｄｒｏｇｅｌ（ｓ），ｕｓｅｓ Ｔｈｅｒｅｏｆ、米国特許公開第２００３／０１４８９９５号、Ｌｅｂｒｅｔｏｎ，Ｃｒｏｓｓ−Ｌｉｎｋｉｎｇ ｏｆ Ｌｏｗ ａｎｄ Ｈｉｇｈ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｗｅｉｇｈｔ Ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ ｏｆ Ｉｎｊｅｃｔａｂｌｅ Ｍｏｎｏｐｈａｓｅ Ｈｙｄｒｏｇｅｌｓ、Ｌｅｂｒｅｔｏｎ，Ｖｉｓｃｏｅｌａｓｔｉｃ Ｓｏｌｕｔｉｏｎｓ Ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ Ｓｏｄｉｕｍ Ｈｙａｌｕｒｏｎａｔｅ ａｎｄ Ｈｙｄｒｏｘｙｐｒｏｐｙｌ Ｍｅｔｈｙｌ Ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ，Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ ａｎｄ Ｕｓｅｓ、米国特許公開第２００８／００８９９１８号、Ｌｅｂｒｅｔｏｎ，Ｈｙａｌｕｒｏｎｉｃ Ａｃｉｄ−Ｂａｓｅｄ Ｇｅｌｓ Ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ Ｌｉｄｏｃａｉｎｅ、米国特許公開第２０１０／００２８４３８号、およびＰｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ ａｎｄ Ｈｙｄｒｏｇｅｌｓ ｔｈｕｓ Ｏｂｔａｉｎｅｄ、米国特許公開第２００６／０１９４７５８号、およびＤｉ Ｎａｐｏｌｉ，Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ ａｎｄ Ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ Ｉｎｔｒａｄｅｒｍａｌ Ｓｏｆｔ Ｔｉｓｓｕｅ Ａｕｇｍｅｎｔａｔｉｏｎ、国際特許公開第２００４／０７３７５９号に記載され、それらの各々は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。本明細書に開示されるヒドロゲル組成物および方法において有用なＧＡＧは、例えば、ヒアルロナンベースの皮膚充填剤、ＪＵＶＥＤＥＲＭ（登録商標）、ＪＵＶＥＤＥＲＭ（登録商標）３０、ＪＵＶＥＤＥＲＭ（登録商標）Ｕｌｔｒａ、ＪＵＶＥＤＥＲＭ（登録商標）Ｕｌｔｒａ Ｐｌｕｓ、ＪＵＶＥＤＥＲＭ（登録商標）Ｕｌｔｒａ ＸＣ、およびＪＵＶＥＤＥＲＭ（登録商標）Ｕｌｔｒａ Ｐｌｕｓ ＸＣ（Ａｌｌｅｒｇａｎ Ｉｎｃ，Ｉｒｖｉｎｅ，Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ）等、商業的に入手可能である。表１は代表的なＧＡＧを列挙する。   In one exemplary embodiment of the invention, the polymer is a glycosaminoglycan. The hydrogel compositions disclosed herein can further comprise two or more different glycosaminoglycan polymers. As used herein, the term “glycosaminoglycan” is synonymous with “GAG” and “mucopolysaccharide” and refers to a long unbranched polysaccharide consisting of repeating disaccharide units. The recurring unit consists of hexose (hexose) or hexuronic acid and pharmaceutically acceptable salts thereof linked to hexosamine (nitrogen containing hexose). The members of the GAG family differ in the type of hexosamine, hexose, or hexuronic acid units they contain, for example glucuronic acid, iduronic acid, galactose, galactosamine, glucosamine, etc., and can also differ in glycosidic bond geometry. Any glycosaminoglycan polymer is useful in the hydrogel compositions disclosed herein, provided that the glycosaminoglycan polymer improves skin conditions. Non-limiting examples of glycosaminoglycans include chondroitin sulfate, dermatan sulfate, keratan sulfate, and hyaluronan. Non-limiting examples of acceptable salts of glycosaminoglycans include sodium salts, potassium salts, magnesium salts, calcium salts, and combinations thereof. Glycosaminoglycans and their resulting polymers useful in the hydrogel compositions and methods disclosed herein can be found, for example, in Piron and Tholin, Polysaccharidic Crosslinking, Hydrogel Preparation, Testing Polysaccharides (s) and Hydrogels ), Uses Thereof, U.S. Patent Publication No. 2003/0148995, Lebreton, Cross-Linking of Low and High Molecular Weights Preparation of Injectable Monophetology. elastic Solutions Containing Sodium Hyaluronate and Hydroxypropyl Methyl Cellulose, Preparation and Uses, U.S. Patent Publication No. 2008/0089918, Lebreton, Hyaluronic Acid-Based Gels Including Lidocaine, U.S. Patent Publication No. 2010/0028438, and Polysaccharides and Hydrogels thus Obtained, USA Patent Publication No. 2006/0194758, and Di Napoli, Composition and Method for International Soft Tissue Augmentation tion, are described in International Patent Publication No. 2004/073759, each of which are incorporated by reference in their entirety herein. GAGs useful in the hydrogel compositions and methods disclosed herein include, for example, hyaluronan-based skin fillers, JUVEDERM®, JUVEDER® 30, JUVEDER® Ultra, JUVEDERM® (Trademark) Ultra Plus, JUVEDER (TM) Ultra XC, and JUVEDER (TM) Ultra Plus XC (Allergan Inc, Irvine, California) are commercially available. Table 1 lists representative GAGs.

Figure 2014526342
Figure 2014526342

本発明の態様は、一部において、コンドロイチン硫酸塩重合体を含むヒドロゲル組成物を提供する。本明細書中で使用されるとき、用語「コンドロイチン硫酸塩重合体」は、Ｄ‐グルクロン酸（ＧｌｃＡ）およびＮ‐アセチル‐Ｄ‐ガラクトサミン（ＧａｌＮＡｃ）の２つの交互に現れる単糖類の二糖類を含む様々な長さの非分岐鎖硫酸化重合体およびその薬学的に許容される塩を指す。コンドロイチン硫酸塩重合体は、エピマー化されてＬ‐イズロン酸（ＩｄｏＡ）になるＤ‐グルクロン酸残基をもまた含み得、その場合、結果として生じる二糖は、デルマタン硫酸塩と称される。コンドロイチン硫酸塩重合体は、１００個超の個々の糖の鎖を有することができ、それらの各々は、様々な位置および量で硫酸化され得る。コンドロイチン硫酸塩重合体は、軟骨の重要な構造成分であり、圧縮に対するその抵抗性の大部分を提供する。いずれのコンドロイチン硫酸塩重合体も、そのコンドロイチン硫酸塩重合体が皮膚の状態を改善するという条件で、本明細書に開示される組成物において有用である。コンドロイチン硫酸塩の薬学的に許容される塩の非限定的な例として、コンドロイチン硫酸ナトリウム、コンドロイチン硫酸カリウム、コンドロイチン硫酸マグネシウム、コンドロイチン硫酸カルシウム、およびそれらの組み合わせが挙げられる。 Aspects of the invention provide, in part, a hydrogel composition comprising a chondroitin sulfate polymer. As used herein, the term “chondroitin sulfate polymer” refers to two alternating monosaccharide disaccharides, D-glucuronic acid (GlcA) and N-acetyl-D-galactosamine (GalNAc). Refers to various lengths of unbranched sulfated polymers and pharmaceutically acceptable salts thereof. The chondroitin sulfate polymer can also contain D-glucuronic acid residues that are epimerized to L-iduronic acid (IdoA), in which case the resulting disaccharide is referred to as dermatan sulfate. Chondroitin sulfate polymers can have more than 100 individual sugar chains, each of which can be sulfated in various positions and amounts. Chondroitin sulfate polymer is an important structural component of cartilage and provides most of its resistance to compression. Any chondroitin sulfate polymer is useful in the compositions disclosed herein, provided that the chondroitin sulfate polymer improves the skin condition. Non-limiting examples of pharmaceutically acceptable salts of chondroitin sulfate include sodium chondroitin sulfate, potassium chondroitin sulfate, magnesium chondroitin sulfate, calcium chondroitin sulfate, and combinations thereof.

本明細書の態様は、一部において、ケラタン硫酸塩重合体を含むヒドロゲル組成物を提供する。本明細書中で使用されるとき、用語「ケラタン硫酸塩重合体」は、二糖単位であって、β‐Ｄ‐ガラクトースおよびＮ‐アセチル‐Ｄ‐ガラクトサミン（ＧａｌＮＡｃ）をそれ自体含む、二糖単位を含む様々な長さの重合体およびその薬学的に許容される塩を指す。ケラタン硫酸塩の反復領域内の二糖類は、フコシル化することができ、Ｎ‐アセチルノイラミン酸は、その鎖の末端をキャップする。いずれのケラタン硫酸塩重合体も、そのケラタン硫酸塩重合体が皮膚状態を改善するという条件で、本明細書に開示される組成物中で有用である。ケラタン硫酸塩の薬学的に許容される塩の非限定的な例として、ケラタン硫酸塩ナトリウム、ケラタン硫酸塩カリウム、ケラタン硫酸塩マグネシウム、ケラタン硫酸塩カルシウム、およびそれらの組み合わせが挙げられる。   Aspects herein provide, in part, a hydrogel composition comprising a keratan sulfate polymer. As used herein, the term “keratan sulfate polymer” is a disaccharide unit that includes β-D-galactose and N-acetyl-D-galactosamine (GalNAc) itself. Refers to polymers of various lengths containing units and pharmaceutically acceptable salts thereof. Disaccharides within the repeat region of keratan sulfate can be fucosylated and N-acetylneuraminic acid caps the end of the chain. Any keratan sulfate polymer is useful in the compositions disclosed herein, provided that the keratan sulfate polymer improves the skin condition. Non-limiting examples of pharmaceutically acceptable salts of keratan sulfate include keratan sulfate sodium, keratan sulfate potassium, keratan sulfate magnesium, keratan sulfate calcium, and combinations thereof.

本明細書の態様は、一部において、ヒアルロナン重合体を含むヒドロゲル組成物を提供する。本明細書中で使用されるとき、用語「ヒアルロン酸重合体」は、「ＨＡ重合体」、「ヒアルロン酸重合体」、および「ヒアルロン酸塩重合体」と同義であり、二糖単位であって、交互に現れるβ‐１，４およびβ‐１，３グリコシド結合により共に結合されるＤ‐グルクロン酸およびＤ‐Ｎ‐アセチルグルコサミン単量体をそれ自体含む、二糖単位を含む陰イオン性非硫酸化グリコサミノグリカン重合体およびその薬学的に許容される塩を指す。ヒアルロナン重合体は、動物および非動物源から精製され得る。ヒアルロナンの重合体は、約５，０００ダルトン〜約２０，０００，０００ダルトンの範囲のサイズであり得る。いずれのヒアルロナン重合体も、そのヒアルロナンが皮膚状態を改善するという条件で、本明細書に開示される組成物中で有用である。ヒアルロナンの薬学的に許容される塩の非限定的な例として、ヒアルロナンナトリウム、ヒアルロナンカリウム、ヒアルロナンマグネシウム、ヒアルロナンカルシウム、およびそれらの組み合わせが挙げられる。   Embodiments herein provide, in part, a hydrogel composition that includes a hyaluronan polymer. As used herein, the term “hyaluronic acid polymer” is synonymous with “HA polymer”, “hyaluronic acid polymer”, and “hyaluronic acid polymer” and is a disaccharide unit. Anionic containing a disaccharide unit, which itself contains D-glucuronic acid and DN-acetylglucosamine monomers joined together by alternating β-1,4 and β-1,3 glycosidic bonds It refers to non-sulfated glycosaminoglycan polymers and pharmaceutically acceptable salts thereof. Hyaluronan polymers can be purified from animal and non-animal sources. The polymer of hyaluronan can be in the size range of about 5,000 daltons to about 20,000,000 daltons. Any hyaluronan polymer is useful in the compositions disclosed herein, provided that the hyaluronan improves skin condition. Non-limiting examples of pharmaceutically acceptable salts of hyaluronan include hyaluronan sodium, hyaluronan potassium, hyaluronan magnesium, hyaluronan calcium, and combinations thereof.

本明細書の態様は、一部において、架橋結合されたグリコサミノグリカン重合体を含むヒドロゲル組成物を提供する。本明細書中で使用されるとき、用語「架橋結合された」は、個々の重合体分子または単量体鎖を結合して、ゲル等の、より安定な構造にする分子間結合を指す。よって、架橋結合されたグリコサミノグリカン重合体は、少なくとも１つの個々の重合体分子を別の重合体分子に結合する少なくとも１つの分子間結合を有する。グリコサミノグリカン重合体の架橋結合は、ヒドロゲルの形成を典型的にもたらす。かかるヒドロゲルは高い粘性を有し、細い針に通して押し出すために有意な力を要する。本明細書に開示されるグリコサミノグリカン重合体は、非限定的に、多機能なＰＥＧベースの架橋剤、ジビニルスルホン、ジグリシジルエーテル、およびビス‐エポキシド、ビスカルボジイミドを含むジアルデヒドおよびジスルフィド架橋剤を用いて架橋結合され得る。たヒアルロナン架橋剤の非限定的な例として、ペンタエリスリトールテトラグリシジルエーテル（ＰＥＴＧＥ）等の多機能ＰＥＧベースの架橋剤、ジビニルスルホン（ＤＶＳ）、１，４‐ブタンジオールジグリシジルエーテル（ＢＤＤＥ）、１，２‐ビス（２，３‐エポキシプロポキシ）エチレン（ＥＧＤＧＥ）、１，２，７，８‐ジエポキシオクタン（ＤＥＯ）、（フェニレンビス‐（エチル）‐カルボジイミドおよび１，６ヘキサメチレンビス（エチルカルボジイミド）、アジピン酸ジヒドラジド（ＡＤＨ）、ビス（スルホスクシンイミジル）スベリン酸塩（ＢＳ）、ヘキサメチレンジアミン（ＨＭＤＡ）、１‐（２，３‐エポキシプロピル）‐２，３‐エポキシシクロヘキサン、リジン、リジンメチルエステル、またはそれらの組み合わせが挙げられる。他の有用な架橋剤は、２０１０年１０月２２日に出願されたＳｔｒｏｕｍｐｏｕｌｉｓ ａｎｄ Ｔｅｚｅｌ，Ｔｕｎａｂｌｙ Ｃｒｏｓｓｌｉｎｋｅｄ Ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓ、米国特許出願第１２／９１０，４６６号に開示され、それは参照によりその全体が組み込まれる。グリコサミノグリカン重合体を架橋結合する方法の非限定的な例は、例えば、に記載され、本明細書に開示の組成物および方法において有用なグリコサミノグリカン重合体の非限定的な例は、例えば、Ｐｉｒｏｎ ａｎｄ Ｔｈｏｌｉｎ，Ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ Ｃｒｏｓｓｌｉｎｋｉｎｇ，Ｈｙｄｒｏｇｅｌ Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ，Ｒｅｓｕｌｔｉｎｇ Ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ（ｓ）ａｎｄ Ｈｙｄｒｏｇｅｌ（ｓ），ｕｓｅｓ Ｔｈｅｒｅｏｆ，米国特許公開第２００３／０１４８９９５号、Ｌｅｂｒｅｔｏｎ，Ｃｒｏｓｓ‐Ｌｉｎｋｉｎｇ ｏｆ Ｌｏｗ ａｎｄ Ｈｉｇｈ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｗｅｉｇｈｔ Ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ ｏｆ Ｉｎｊｅｃｔａｂｌｅ Ｍｏｎｏｐｈａｓｅ Ｈｙｄｒｏｇｅｌｓ、Ｌｅｂｒｅｔｏｎ，Ｖｉｓｃｏｅｌａｓｔｉｃ Ｓｏｌｕｔｉｏｎｓ Ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ Ｓｏｄｉｕｍ Ｈｙａｌｕｒｏｎａｔｅ ａｎｄ Ｈｙｄｒｏｘｙｐｒｏｐｙｌ Ｍｅｔｈｙｌ Ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ，Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ ａｎｄ Ｕｓｅｓ，米国特許公開第２００８／００８９９１８号、Ｌｅｂｒｅｔｏｎ，Ｈｙａｌｕｒｏｎｉｃ Ａｃｉｄ‐Ｂａｓｅｄ Ｇｅｌｓ Ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ Ｌｉｄｏｃａｉｎｅ，米国特許公開第２０１０／００２８４３８号、およびＰｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ ａｎｄ Ｈｙｄｒｏｇｅｌｓ ｔｈｕｓ Ｏｂｔａｉｎｅｄ，米国特許公開第２００６／０１９４７５８号、およびＤｉ Ｎａｐｏｌｉ，Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ ａｎｄ Ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ Ｉｎｔｒａｄｅｒｍａｌ Ｓｏｆｔ Ｔｉｓｓｕｅ Ａｕｇｍｅｎｔａｔｉｏｎ，国際公開第２００４／０７３７５９号に記載され、それらの各々は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。   Aspects herein provide, in part, a hydrogel composition comprising a cross-linked glycosaminoglycan polymer. As used herein, the term “crosslinked” refers to an intermolecular bond that joins individual polymer molecules or monomer chains into a more stable structure, such as a gel. Thus, a cross-linked glycosaminoglycan polymer has at least one intermolecular bond that binds at least one individual polymer molecule to another polymer molecule. Cross-linking of glycosaminoglycan polymers typically results in the formation of a hydrogel. Such hydrogels are highly viscous and require significant force to push through a fine needle. The glycosaminoglycan polymers disclosed herein include, but are not limited to, multifunctional PEG-based crosslinkers, divinyl sulfones, diglycidyl ethers, and dialdehyde and disulfide bridges including bis-epoxides, biscarbodiimides. It can be cross-linked using an agent. Non-limiting examples of hyaluronan crosslinking agents include multifunctional PEG-based crosslinking agents such as pentaerythritol tetraglycidyl ether (PETGE), divinyl sulfone (DVS), 1,4-butanediol diglycidyl ether (BDDE), 1 , 2-bis (2,3-epoxypropoxy) ethylene (EGDGE), 1,2,7,8-diepoxyoctane (DEO), (phenylenebis- (ethyl) -carbodiimide and 1,6 hexamethylenebis (ethyl Carbodiimide), adipic acid dihydrazide (ADH), bis (sulfosuccinimidyl) suberate (BS), hexamethylenediamine (HMDA), 1- (2,3-epoxypropyl) -2,3-epoxycyclohexane, Lysine, lysine methyl ester, or combinations thereof Other useful cross-linking agents are disclosed in Stroumpoulis and Tezel, Tunable Crosslinked Polysaccharide Compositions, US patent application Ser. No. 12 / 910,466, filed Oct. 22, 2010, which is incorporated herein by reference. Non-limiting examples of methods for cross-linking glycosaminoglycan polymers are described, for example, in, and examples of glycosaminoglycan polymers useful in the compositions and methods disclosed herein. Non-limiting examples include, for example, Piron and Tholin, Polysaccharidic Crosslinking, Hydrogen Preparation, Resulting Polysaccharides (s) an d Hydrogel (s), uses Thereof, U.S. Patent Publication No. 2003/0148995, Lebreton, Cross-Linking of Low and High Molecular Weight Polysaccharides Preparation of Injectable Monophase Hydrogels, Lebreton, Viscoelastic Solutions Containing Sodium Hyaluronate and Hydroxypropyl Methyl Cellulose, Preparation and Uses, US Patent Publication No. 2008/0089918, Lebreton, Hyaluronic Acid-Based Gels I. Clading Lidocaine, U.S. Patent Publication No. 2010/0028438, and Polysaccharides and Hydrogens tus Obtained, U.S. Pat. Each of which is incorporated herein by reference in its entirety.

本明細書の態様は、一部において、ある程度の架橋結合を有する架橋結合されたグリコサミノグリカン重合体を含むヒドロゲル組成物を提供する。本明細書中で使用されるとき、用語「架橋結合程度」は、架橋剤に結合された、例えば、ヒアルロナンの二糖単量体単位等のグリコサミノグリカン重合体単量体単位の割合を指す。架橋結合程度は、架橋剤対グリコサミノグリカンの重量パーセント比として表される。本発明のある特定の有利な実施形態における架橋結合程度は、約３％〜約１２％、例えば、約５％〜約１０％である。   Embodiments herein provide hydrogel compositions that include, in part, a cross-linked glycosaminoglycan polymer that has some degree of cross-linking. As used herein, the term “degree of cross-linking” refers to the proportion of glycosaminoglycan polymer monomer units, eg, disaccharide monomer units of hyaluronan, bound to a cross-linking agent. Point to. The degree of crosslinking is expressed as a weight percent ratio of crosslinker to glycosaminoglycan. In certain advantageous embodiments of the invention, the degree of cross-linking is from about 3% to about 12%, such as from about 5% to about 10%.

ある実施形態において、ヒドロゲル組成物は、架橋結合されたグリコサミノグリカン重合体、例えば、架橋結合されたヒアルロン酸を含み、その架橋結合されたグリコサミノグリカン重合体は、例えば、約１８ｍｇ／ｇ〜約３０ｍｇ／ｇの濃度で組成物中に存在する。いくつかの実施形態において、組成物は、約２４ｍｇ／ｇまたは約２５ｍｇ／ｇの総ヒアルロン酸濃度を有する。   In certain embodiments, the hydrogel composition comprises a cross-linked glycosaminoglycan polymer, eg, cross-linked hyaluronic acid, and the cross-linked glycosaminoglycan polymer is, eg, about 18 mg / present in the composition at a concentration of g to about 30 mg / g. In some embodiments, the composition has a total hyaluronic acid concentration of about 24 mg / g or about 25 mg / g.

本明細書の態様は、一部において、低分子量のヒアルロナン重合体、高分子量のヒアルロナン重合体、または低および高分子量両方のヒアルロナン重合体を含むヒドロゲル組成物を提供する。本明細書中で使用されるとき、「ヒアルロナン」について言及するとき、用語「高分子量」は、１，０００，０００ダルトン以上の平均分子量を有するヒアルロナン重合体を指す。高分子量ヒアルロナン重合体の非限定的な例として、ヒアルロナン重合体約１，５００，０００ダルトン、約２，０００，０００ダルトン、約２，５００，０００ダルトン、約３，０００，０００ダルトン、約３，５００，０００ダルトン、約４，０００，０００ダルトン、約４，５００，０００ダルトン、および約５，０００，０００ダルトンが挙げられる。本明細書中で使用されるとき、「ヒアルロナン」について言及するとき、用語「低分子量」は、１，０００，０００ダルトン未満の平均分子量を有するヒアルロナン重合体を指す。低分子量ヒアルロナン重合体の非限定的な例として、約２００，０００ダルトン、約３００，０００ダルトン、約４００，０００ダルトン、約５００，０００ダルトン、約６００，０００ダルトン、約７００，０００ダルトン、約８００，０００ダルトンの、および約９００，０００ダルトンのヒアルロナン重合体が挙げられる。   Embodiments herein provide, in part, a hydrogel composition comprising a low molecular weight hyaluronan polymer, a high molecular weight hyaluronan polymer, or both low and high molecular weight hyaluronan polymers. As used herein, when referring to “hyaluronan”, the term “high molecular weight” refers to a hyaluronan polymer having an average molecular weight of 1,000,000 daltons or greater. Non-limiting examples of high molecular weight hyaluronan polymers include hyaluronan polymers of about 1,500,000 daltons, about 2,000,000 daltons, about 2,500,000 daltons, about 3,000,000 daltons, about 3 , 500,000 daltons, about 4,000,000 daltons, about 4,500,000 daltons, and about 5,000,000 daltons. As used herein, when referring to “hyaluronan”, the term “low molecular weight” refers to a hyaluronan polymer having an average molecular weight of less than 1,000,000 daltons. Non-limiting examples of low molecular weight hyaluronan polymers include about 200,000 daltons, about 300,000 daltons, about 400,000 daltons, about 500,000 daltons, about 600,000 daltons, about 700,000 daltons, about Examples include hyaluronan polymers of 800,000 daltons and about 900,000 daltons.

ある実施形態において、組成物は、低分子量の架橋結合されたヒアルロナン重合体を含む。この実施形態の態様において、組成物は、例えば、約１００，０００ダルトン、約２００，０００ダルトン、約３００，０００ダルトン、約４００，０００ダルトン、約５００，０００ダルトン、約６００，０００ダルトン、約７００，０００ダルトン、約８００，０００ダルトン、または約９００，０００ダルトンの平均分子量を有する架橋結合されたヒアルロナン重合体を含む。この実施形態のなおも他の態様において、組成物は、例えば、最大１００，０００ダルトン、最大２００，０００ダルトン、最大３００，０００ダルトン、最大４００，０００ダルトン、最大５００，０００ダルトン、最大６００，０００ダルトン、最大７００，０００ダルトン、最大８００，０００ダルトン、最大９００，０００ダルトン、または最大９５０，０００ダルトンの平均分子量を有する架橋結合されたヒアルロナン重合体を含む。この実施形態のさらに他の態様において、組成物は、例えば、約１００，０００ダルトン〜約５００，０００ダルトン、約２００，０００ダルトン〜約５００，０００ダルトン、約３００，０００ダルトン〜約５００，０００ダルトン、約４００，０００ダルトン〜約５００，０００ダルトン、約５００，０００ダルトン〜約９５０，０００ダルトン、約６００，０００ダルトン〜約９５０，０００ダルトン、約７００，０００ダルトン〜約９５０，０００ダルトン、約８００，０００ダルトン〜約９５０，０００ダルトン、約３００，０００ダルトン〜約６００，０００ダルトン、約３００，０００ダルトン〜約７００，０００ダルトン、約３００，０００ダルトン〜約８００，０００ダルトン、または約４００，０００ダルトン〜約７００，０００ダルトンの平均分子量を有する架橋結合されたヒアルロナン重合体を含む。   In certain embodiments, the composition comprises a low molecular weight cross-linked hyaluronan polymer. In aspects of this embodiment, the composition comprises, for example, about 100,000 daltons, about 200,000 daltons, about 300,000 daltons, about 400,000 daltons, about 500,000 daltons, about 600,000 daltons, about A crosslinked hyaluronan polymer having an average molecular weight of 700,000 daltons, about 800,000 daltons, or about 900,000 daltons. In still other aspects of this embodiment, the composition comprises, for example, up to 100,000 daltons, up to 200,000 daltons, up to 300,000 daltons, up to 400,000 daltons, up to 500,000 daltons, up to 600, Cross-linked hyaluronan polymers having an average molecular weight of 000 daltons, up to 700,000 daltons, up to 800,000 daltons, up to 900,000 daltons, or up to 950,000 daltons. In yet another aspect of this embodiment, the composition can be, for example, from about 100,000 daltons to about 500,000 daltons, from about 200,000 daltons to about 500,000 daltons, from about 300,000 daltons to about 500,000. Daltons, about 400,000 Daltons to about 500,000 Daltons, about 500,000 Daltons to about 950,000 Daltons, about 600,000 Daltons to about 950,000 Daltons, about 700,000 Daltons to about 950,000 Daltons, About 800,000 daltons to about 950,000 daltons, about 300,000 daltons to about 600,000 daltons, about 300,000 daltons to about 700,000 daltons, about 300,000 daltons to about 800,000 daltons, or about 400,000 Dalton to about 70 , Comprise crosslinked hyaluronan polymers having an average molecular weight of 000 daltons.

別の実施形態において、組成物は、高分子量の架橋結合されたヒアルロナン重合体を含む。この実施形態の態様において、組成物は、例えば、約１，０００，０００ダルトン、約１，５００，０００ダルトン、約２，０００，０００ダルトン、約２，５００，０００ダルトン、約３，０００，０００ダルトン、約３，５００，０００ダルトン、約４，０００，０００ダルトン、約４，５００，０００ダルトン、または約５，０００，０００ダルトンの平均分子量を有する架橋結合されたヒアルロナン重合体を含む。この実施形態のさらに他の態様において、組成物は、例えば、少なくとも１，０００，０００ダルトン、少なくとも１，５００，０００ダルトン、少なくとも２，０００，０００ダルトン、少なくとも２，５００，０００ダルトン、少なくとも３，０００，０００ダルトン、少なくとも３，５００，０００ダルトン、少なくとも４，０００，０００ダルトン、少なくとも４，５００，０００ダルトン、または少なくとも５，０００，０００ダルトンの平均分子量を有する架橋結合されたヒアルロナン重合体を含む。この実施形態の依然として他の態様において、組成物は、例えば、約１，０００，０００ダルトン〜約５，０００，０００ダルトン、約１，５００，０００ダルトン〜約５，０００，０００ダルトン、約２，０００，０００ダルトン〜約５，０００，０００ダルトン、約２，５００，０００ダルトン〜約５，０００，０００ダルトン、約２，０００，０００ダルトン〜約３，０００，０００ダルトン、約２，５００，０００ダルトン〜約３，０００，０００ダルトンの平均分子量を有する架橋結合されたヒアルロナン重合体を含む。   In another embodiment, the composition comprises a high molecular weight cross-linked hyaluronan polymer. In aspects of this embodiment, the composition comprises, for example, about 1,000,000 daltons, about 1,500,000 daltons, about 2,000,000 daltons, about 2,500,000 daltons, about 3,000,000 A crosslinked hyaluronan polymer having an average molecular weight of about 000 daltons, about 3,500,000 daltons, about 4,000,000 daltons, about 4,500,000 daltons, or about 5,000,000 daltons. In yet another aspect of this embodiment, the composition comprises, for example, at least 1,000,000 daltons, at least 1,500,000 daltons, at least 2,000,000 daltons, at least 2,500,000 daltons, at least 3 Crosslinked hyaluronan polymer having an average molecular weight of 1,000,000 daltons, at least 3,500,000 daltons, at least 4,000,000 daltons, at least 4,500,000 daltons, or at least 5,000,000 daltons including. In still other aspects of this embodiment, the composition can be, for example, from about 1,000,000 daltons to about 5,000,000 daltons, from about 1,500,000 daltons to about 5,000,000 daltons, about 2 1,000,000 Daltons to about 5,000,000 Daltons, about 2,500,000 Daltons to about 5,000,000 Daltons, about 2,000,000 Daltons to about 3,000,000 Daltons, about 2,500 A cross-linked hyaluronan polymer having an average molecular weight of from 3,000 Daltons to about 3,000,000 Daltons.

なおも別の実施形態において、組成物は、架橋結合されたヒアルロナン重合体を含み、その架橋結合されたヒアルロナン重合体は、様々な比率の高分子量ヒアルロナン重合体および低分子量ヒアルロナン重合体の両方の組み合わせを含む。この実施形態の態様において、組成物は、架橋結合されたヒアルロナン重合体を含み、その架橋結合されたヒアルロナン重合体は、約２０：１、約１５：１、約１０：１、約５：１、約１：１、約１：５、約１：１０、約１：１５、または約１：２０の比率の高分子量ヒアルロナン重合体および低分子量ヒアルロナン重合体の両方の組み合わせを含む。   In yet another embodiment, the composition comprises a crosslinked hyaluronan polymer, wherein the crosslinked hyaluronan polymer is a combination of both a high molecular weight hyaluronan polymer and a low molecular weight hyaluronan polymer. Includes combinations. In aspects of this embodiment, the composition comprises a crosslinked hyaluronan polymer, wherein the crosslinked hyaluronan polymer is about 20: 1, about 15: 1, about 10: 1, about 5: 1. About 1: 1, about 1: 5, about 1:10, about 1:15, or about 1:20 ratio of both high and low molecular weight hyaluronan polymers.

本明細書の態様は、一部において、架橋結合されていないグリコサミノグリカン重合体を含むヒドロゲル組成物を提供する。本明細書中で使用されるとき、用語「架橋結合されていない（非架橋結合）」は、個々のグリコサミノグリカン重合体分子または単量体鎖を結合する分子間結合の欠如を指す。よって、非架橋結合グリコサミノグリカン重合体は、分子間結合によりいかなる他のグリコサミノグリカン重合体にも結合されていない。この実施形態の態様において、組成物は、非架橋結合コンドロイチン硫酸塩重合体、非架橋結合デルマタン硫酸塩重合体、非架橋結合ケラタン硫酸塩重合体、非架橋結合ヘパラン重合体、非架橋結合ヘパラン硫酸塩重合体、または非架橋結合ヒアルロナン重合体を含む。非架橋結合グリコサミノグリカン重合体は、水溶性であり、概して、天然では流体のままである。よって、非架橋結合グリコサミノグリカン重合体は、多くの場合、細い針に通した組成物の押し出しプロセスを促進するための潤滑剤としてグリコサミノグリカン重合体ベースのヒドロゲル組成物と混合される。   Aspects herein provide, in part, a hydrogel composition comprising a glycosaminoglycan polymer that is not cross-linked. As used herein, the term “non-crosslinked (non-crosslinked)” refers to the lack of intermolecular linkages that bind individual glycosaminoglycan polymer molecules or monomer chains. Thus, the non-crosslinked glycosaminoglycan polymer is not bound to any other glycosaminoglycan polymer by intermolecular bonds. In aspects of this embodiment, the composition comprises a non-crosslinked chondroitin sulfate polymer, a non-crosslinked dermatan sulfate polymer, a non-crosslinked keratan sulfate polymer, a non-crosslinked heparan polymer, a non-crosslinked heparan sulfate polymer. Salt polymers, or non-crosslinked hyaluronan polymers. Non-crosslinked glycosaminoglycan polymers are water soluble and generally remain fluid in nature. Thus, non-crosslinked glycosaminoglycan polymers are often mixed with glycosaminoglycan polymer-based hydrogel compositions as a lubricant to facilitate the extrusion process of the composition through fine needles. .

ある実施形態において、組成物は、非架橋結合グリコサミノグリカンを含み、その非架橋結合グリコサミノグリカンは、例えば、約２ｍｇ／ｇ、約３ｍｇ／ｇ、約４ｍｇ／ｇ、約５ｍｇ／ｇ、約６ｍｇ／ｇ、約７ｍｇ／ｇ、約８ｍｇ／ｇ、約９ｍｇ／ｇ、約１０ｍｇ／ｇ、約１１ｍｇ／ｇ、約１２ｍｇ／ｇ、約１３ｍｇ／ｇ、約１３．５ｍｇ／ｇ、約１４ｍｇ／ｇ、約１５ｍｇ／ｇ、約１６ｍｇ／ｇ、約１７ｍｇ／ｇ、約１８ｍｇ／ｇ、約１９ｍｇ／ｇ、約２０ｍｇ／ｇ、約４０ｍｇ／ｇ、または約６０ｍｇ／ｇの濃度で存在する。この実施形態の他の態様において、組成物は、非架橋結合グリコサミノグリカンを含み、その非架橋結合グリコサミノグリカンは、例えば、少なくとも１ｍｇ／ｇ、少なくとも２ｍｇ／ｇ、少なくとも３ｍｇ／ｇ、少なくとも４ｍｇ／ｇ、少なくとも５ｍｇ／ｇ、少なくとも１０ｍｇ／ｇ、少なくとも１５ｍｇ／ｇ、少なくとも２０ｍｇ／ｇ、少なくとも２５ｍｇ／ｇ、少なくとも３５ｍｇ／ｇ、または少なくとも４０ｍｇ／ｇの濃度で存在する。この実施形態のなおも他の態様において、組成物は、非架橋結合グリコサミノグリカンを含み、その非架橋結合グリコサミノグリカンは、例えば、最大１ｍｇ／ｇ、最大２ｍｇ／ｇ、最大３ｍｇ／ｇ、最大４ｍｇ／ｇ、最大５ｍｇ／ｇ、最大１０ｍｇ／ｇ、最大１５ｍｇ／ｇ、最大２０ｍｇ／ｇ、または最大２５ｍｇ／ｇの濃度で存在する。この実施形態の依然として他の態様において、組成物は、非架橋結合グリコサミノグリカンを含み、その非架橋結合グリコサミノグリカンは、例えば、約１ｍｇ／ｇ〜約６０ｍｇ／ｇ、約１０ｍｇ／ｇ〜約４０ｍｇ／ｇ、約７．５ｍｇ／ｇ〜約１９．５ｍｇ／ｇ、約８．５ｍｇ／ｇ〜約１８．５ｍｇ／ｇ、約９．５ｍｇ／ｇ〜約１７．５ｍｇ／ｇ、約１０．５ｍｇ／ｇ〜約１６．５ｍｇ／ｇ、約１１．５ｍｇ／ｇ〜約１５．５ｍｇ／ｇ、または約１２．５ｍｇ／ｇ〜約１４．５ｍｇ／ｇの濃度で存在する。   In certain embodiments, the composition comprises non-crosslinked glycosaminoglycan, which is, for example, about 2 mg / g, about 3 mg / g, about 4 mg / g, about 5 mg / g. About 6 mg / g, about 7 mg / g, about 8 mg / g, about 9 mg / g, about 10 mg / g, about 11 mg / g, about 12 mg / g, about 13 mg / g, about 13.5 mg / g, about 14 mg / G, about 15 mg / g, about 16 mg / g, about 17 mg / g, about 18 mg / g, about 19 mg / g, about 20 mg / g, about 40 mg / g, or about 60 mg / g. In other aspects of this embodiment, the composition comprises non-crosslinked glycosaminoglycans, such as at least 1 mg / g, at least 2 mg / g, at least 3 mg / g, It is present at a concentration of at least 4 mg / g, at least 5 mg / g, at least 10 mg / g, at least 15 mg / g, at least 20 mg / g, at least 25 mg / g, at least 35 mg / g, or at least 40 mg / g. In still other aspects of this embodiment, the composition comprises non-crosslinked glycosaminoglycans, for example, up to 1 mg / g, up to 2 mg / g, up to 3 mg / g. g, up to 4 mg / g, up to 5 mg / g, up to 10 mg / g, up to 15 mg / g, up to 20 mg / g, or up to 25 mg / g. In still other aspects of this embodiment, the composition comprises non-crosslinked glycosaminoglycans, such as from about 1 mg / g to about 60 mg / g, about 10 mg / g. To about 40 mg / g, about 7.5 mg / g to about 19.5 mg / g, about 8.5 mg / g to about 18.5 mg / g, about 9.5 mg / g to about 17.5 mg / g, about 10 Present in a concentration of from about 5 mg / g to about 16.5 mg / g, from about 11.5 mg / g to about 15.5 mg / g, or from about 12.5 mg / g to about 14.5 mg / g.

本明細書の態様は、一部において、架橋結合グリコサミノグリカン重合体を本質的に含まないヒドロゲル組成物を提供する。本明細書中で使用されるとき、用語「本質的に含まない」（または「本質的に〜からなる」）は、微量な架橋結合マトリックス重合体しか検出され得ない組成物を指す。この実施形態の一態様において、組成物は、架橋結合コンドロイチン硫酸塩重合体を本質的に含まないコンドロイチン硫酸塩、架橋結合デルマタン硫酸塩重合体を本質的に含まないデルマタン硫酸塩、架橋結合ケラタン硫酸塩重合体を本質的に含まないケラタン硫酸塩、架橋結合ヘパラン重合体を本質的に含まないヘパラン、架橋結合ヘパラン硫酸塩重合体を本質的に含まないヘパラン硫酸塩、または架橋結合ヒアルロナン重合体を本質的に含まないヒアルロナン硫酸塩を含む。   Embodiments herein provide hydrogel compositions that are essentially free of cross-linked glycosaminoglycan polymers. As used herein, the term “essentially free” (or “consisting essentially of”) refers to a composition in which only trace amounts of a cross-linked matrix polymer can be detected. In one aspect of this embodiment, the composition comprises chondroitin sulfate essentially free of cross-linked chondroitin sulfate polymer, dermatan sulfate essentially free of cross-linked dermatan sulfate polymer, cross-linked keratan sulfate. Keratan sulfate essentially free of salt polymer, heparan essentially free of cross-linked heparan polymer, heparan sulfate essentially free of cross-linked heparan sulfate polymer, or cross-linked hyaluronan polymer Contains essentially free hyaluronan sulfate.

本明細書の態様は、一部において、架橋結合グリコサミノグリカン重合体を完全に含まないヒドロゲル組成物を提供する。本明細書中で使用されるとき、用語「完全に含まない」は、使用されている装置またはプロセスの検出範囲内で架橋結合グリコサミノグリカン重合体が検出され得ない、またはその存在が確認され得ない組成物を指す。この実施形態の一態様において、組成物は、架橋結合コンドロイチン硫酸塩重合体を完全に含まないコンドロイチン硫酸塩、架橋結合デルマタン硫酸塩重合体を完全に含まないデルマタン硫酸塩、架橋結合ケラタン硫酸塩重合体を完全に含まないケラタン硫酸塩、架橋結合ヘパラン重合体を完全に含まないヘパラン、架橋結合ヘパラン硫酸塩重合体を完全に含まないヘパラン硫酸塩、または架橋結合ヒアルロナン重合体を完全に含まないヒアルロナン硫酸塩を含む。   Aspects herein provide, in part, hydrogel compositions that are completely free of cross-linked glycosaminoglycan polymers. As used herein, the term “completely free” means that a cross-linked glycosaminoglycan polymer cannot be detected or is present within the detection range of the equipment or process being used. Refers to a composition that cannot be done. In one aspect of this embodiment, the composition comprises chondroitin sulfate that is completely free of cross-linked chondroitin sulfate polymer, dermatan sulfate that is completely free of cross-linked dermatan sulfate polymer, cross-linked keratan sulfate weight. Keratan sulfate completely free of coal, heparan completely free of cross-linked heparan polymer, heparan sulfate completely free of cross-linked heparan sulfate polymer, or hyaluronan completely free of cross-linked hyaluronan polymer Contains sulfate.

本明細書の態様は、一部において、ある比率の架橋結合グリコサミノグリカン重合体および非架橋結合グリコサミノグリカン重合体を含むヒドロゲル組成物を提供する。架橋結合および非架橋結合グリコサミノグリカン重合体のこの比率は、ゲル：流体比としてもまた知られる。いずれのゲル：流体比も、かかる割合が本明細書に開示されるように皮膚状態を改善する本明細書に開示される組成物を作製するという条件で、本明細書に開示される組成物の作製において有用である。本発明の組成物中のゲル：流体比の非限定的な例として、１００：０、９８：２、９０：１０、７５：２５、７０：３０、６０：４０、５０：５０、４０：６０、３０：７０、２５：７５、１０：９０、２：９８、および０：１００が挙げられる。   Aspects herein provide, in part, a hydrogel composition comprising a proportion of cross-linked glycosaminoglycan polymer and non-cross-linked glycosaminoglycan polymer. This ratio of cross-linked and non-cross-linked glycosaminoglycan polymers is also known as the gel: fluid ratio. Any gel: fluid ratio is a composition disclosed herein, provided that such a ratio produces a composition disclosed herein that improves skin condition as disclosed herein. It is useful in the production of Non-limiting examples of gel: fluid ratios in the compositions of the present invention include 100: 0, 98: 2, 90:10, 75:25, 70:30, 60:40, 50:50, 40:60. 30:70, 25:75, 10:90, 2:98, and 0: 100.

この実施形態の態様において、組成物は、架橋結合グリコサミノグリカン重合体および非架橋結合グリコサミノグリカン重合体を含み、そのゲル：流体比は、例えば、約０：１００、約１：９９、約２：９８、約３：９７、約４：９６、約５：９５、約６：９４、約７：９３、約８：９２、約９：９１、または約１０：９０である。この実施形態の他の態様において、組成物は、架橋結合グリコサミノグリカン重合体および非架橋結合グリコサミノグリカン重合体を含み、そのゲル：流体比は、例えば、最大１：９９、最大２：９８、最大３：９７、最大４：９６、最大５：９５、最大６：９４、最大７：９３、最大８：９２、最大９：９１、または最大１０：９０である。この実施形態のさらに他の態様において、組成物は、架橋結合グリコサミノグリカン重合体および非架橋結合グリコサミノグリカン重合体を含み、そのゲル：流体比は、例えば、約０：１００〜約３：９７、約０：１００〜約５：９５、または約０：１００〜約１０：９０である。   In aspects of this embodiment, the composition comprises a crosslinked glycosaminoglycan polymer and a non-crosslinked glycosaminoglycan polymer, the gel: fluid ratio of, for example, about 0: 100, about 1:99. About 2:98, about 3:97, about 4:96, about 5:95, about 6:94, about 7:93, about 8:92, about 9:91, or about 10:90. In other aspects of this embodiment, the composition comprises a crosslinked glycosaminoglycan polymer and a non-crosslinked glycosaminoglycan polymer, the gel: fluid ratio of, for example, up to 1:99, up to 2 : 98, maximum 3:97, maximum 4:96, maximum 5:95, maximum 6:94, maximum 7:93, maximum 8:92, maximum 9:91, or maximum 10:90. In yet another aspect of this embodiment, the composition comprises a crosslinked glycosaminoglycan polymer and a non-crosslinked glycosaminoglycan polymer, the gel: fluid ratio of, for example, about 0: 100 to about 3:97, about 0: 100 to about 5:95, or about 0: 100 to about 10:90.

この実施形態の他の態様において、組成物は、架橋結合グリコサミノグリカン重合体および非架橋結合グリコサミノグリカン重合体を含み、そのゲル：流体比は、例えば、約１５：８５、約２０：８０、約２５：７５、約３０：７０、約３５：６５、約４０：６０、約４５：５５、約５０：５０、約５５：４５、約６０：４０、約６５：３５、約７０：３０、約７５：２５、約８０：２０、約８５：１５、約９０：１０、約９５：５、約９８：２、または約１００：０である。この実施形態のさらに他の態様において、組成物は、架橋結合グリコサミノグリカン重合体および非架橋結合グリコサミノグリカン重合体を含み、そのゲル：流体比は、例えば、最大１５：８５、最大２０：８０、最大２５：７５、最大３０：７０、最大３５：６５、最大４０：６０、最大４５：５５、最大５０：５０、最大５５：４５、最大６０：４０、最大６５：３５、最大７０：３０、最大７５：２５、最大８０：２０、最大８５：１５、最大９０：１０、最大９５：５、最大９８：２、または最大１００：０である。この実施形態のさらに他の態様において、組成物は、架橋結合グリコサミノグリカン重合体および非架橋結合グリコサミノグリカン重合体を含み、そのゲル：流体比は、例えば、約１０：９０〜約７０：３０、約１５：８５〜約７０：３０、約１０：９０〜約５５：４５、約８０：２０〜約９５：５、約９０：１０〜約１００：０、約７５：２５〜約１００：０、または約６０：４０〜約１００：０である。   In another aspect of this embodiment, the composition comprises a crosslinked glycosaminoglycan polymer and a non-crosslinked glycosaminoglycan polymer, the gel: fluid ratio of, for example, about 15:85, about 20 : 80, about 25:75, about 30:70, about 35:65, about 40:60, about 45:55, about 50:50, about 55:45, about 60:40, about 65:35, about 70 : 30, about 75:25, about 80:20, about 85:15, about 90:10, about 95: 5, about 98: 2, or about 100: 0. In yet another aspect of this embodiment, the composition comprises a crosslinked glycosaminoglycan polymer and a non-crosslinked glycosaminoglycan polymer, the gel: fluid ratio of, for example, a maximum of 15:85, a maximum 20:80, Max 25:75, Max 30:70, Max 35:65, Max 40:60, Max 45:55, Max 50:50, Max 55:45, Max 60:40, Max 65:35, Max 70:30, maximum 75:25, maximum 80:20, maximum 85:15, maximum 90:10, maximum 95: 5, maximum 98: 2, or maximum 100: 0. In yet another aspect of this embodiment, the composition comprises a crosslinked glycosaminoglycan polymer and a non-crosslinked glycosaminoglycan polymer, the gel: fluid ratio of, for example, about 10:90 to about 70:30, about 15:85 to about 70:30, about 10:90 to about 55:45, about 80:20 to about 95: 5, about 90:10 to about 100: 0, about 75:25 to about 100: 0, or about 60:40 to about 100: 0.

本明細書に開示されるヒドロゲル組成物は、その組成物が個人に投与されるとき有益な効果を提供する別の薬剤または薬剤の組み合わせをさらに含み得る。かかる有益な薬剤は、非限定的に、酸化防止剤、かゆみ止め、抗セルライト剤、抗傷跡剤、抗炎症剤、麻酔剤、抗刺激物剤、血管収縮薬、血管拡張薬、止血剤もしくは抗線溶剤のような抗出血剤、角質溶解剤、テンション剤、抗ざそう剤、色素沈着剤、抗色素沈着剤、または保湿剤を含む。   The hydrogel compositions disclosed herein may further comprise another agent or combination of agents that provides a beneficial effect when the composition is administered to an individual. Such beneficial agents include, but are not limited to, antioxidants, anti-itch agents, anti-cellulite agents, anti-scarring agents, anti-inflammatory agents, anesthetics, anti-irritant agents, vasoconstrictors, vasodilators, hemostatic agents or anti-anti-inflammatory agents. Contains anti-bleeding agents such as fibrinolytic agents, keratolytic agents, tension agents, anti-acne agents, pigmentation agents, anti-pigmentation agents, or humectants.

本明細書の目的のために、別途定めのない限り、製剤中の「％」は重量対重量（すなわち、重量／重量）割合として定義される。   For purposes herein, unless otherwise specified, “%” in a formulation is defined as a weight to weight (ie, weight / weight) ratio.

本明細書の態様は、一部において、麻酔剤を任意に含み得る、本明細書に開示されるヒドロゲル組成物を提供する。麻酔剤は、好ましくは局所麻酔剤、すなわち、例えば、アミノアミド局所麻酔薬およびアミノエステル局所麻酔薬等の、可逆的な局所麻酔および痛覚の喪失を引き起こす麻酔剤である。本明細書に開示される組成物中に含まれる麻酔剤の量は、その組成物の投与に際して個人が経験する痛みをやわらげるのに有効な量である。よって、本明細書に開示される組成物中に含まれる麻酔剤の量は、その組成物総量のうちの約０．１重量％〜約５重量％である。麻酔剤の非限定的な例として、リドカイン、アムブカイン（ａｍｂｕｃａｉｎｅ）、アモラノン、アミロカイン（ａｍｙｌｏｃａｉｎｅ）、ベノキシネート、ベンゾカイン、ベトキシカイン（ｂｅｔｏｘｙｃａｉｎｅ）、ビフェナミン、ブピバカイン、ブタカイン、ブタンベン、ブタニリカイン、ブテタミン、ブトキシカイン（ｂｕｔｏｘｙｃａｉｎｅ）、カルチカイン、クロロプロカイン、コカエチレン、コカイン、シクロメチカイン、ジブカイン、ジメチソキン（ｄｉｍｅｔｈｙｓｏｑｕｉｎ）、ジメトカイン（ｄｉｍｅｔｈｏｃａｉｎｅ）、ジペロドン、ジシクロニン（ｄｙｃｙｃｌｏｎｉｎｅ）、エクゴニジン（ｅｃｇｏｎｉｄｉｎｅ）、エクゴニン、塩化エチル、エチドカイン、ベータ‐ユーカイン、ユープロシン（ｅｕｐｒｏｃｉｎ）、フェナルコミン（ｆｅｎａｌｃｏｍｉｎｅ）、フォルモカイン（ｆｏｒｍｏｃａｉｎｅ）、ヘキシルカイン、ヒドロキシテトラカイン、イソブチルｐ‐アミノ安息香酸、ロイシノカイン（ｌｅｕｃｉｎｏｃａｉｎｅ）メシレート、レボキサドロール（ｌｅｖｏｘａｄｒｏｌ）、リドカイン、メピバカイン、メプリルカイン、メタブトキシカイン、塩化メチル、ミルテカイン（ｍｙｒｔｅｃａｉｎｅ）、ネパイン、オクタカイン（ｏｃｔａｃａｉｎｅ）、オルトカイン、オキセサゼイン、パレトキシカイン（ｐａｒｅｔｈｏｘｙｃａｉｎｅ）、フェナカイン、フェノール、ピペロカイン、ピリドカイン（ｐｉｒｉｄｏｃａｉｎｅ）、ポリドカノール、プラモキシン、プリロカイン、プロカイン、プロパノカイン（ｐｒｏｐａｎｏｃａｉｎｅ）、プロパラカイン、プロピポカイン（ｐｒｏｐｉｐｏｃａｉｎｅ）、プロポキシカイン、スードコカイン（ｐｓｕｅｄｏｃｏｃａｉｎｅ）、ピロカイン（ｐｙｒｒｏｃａｉｎｅ）、ロピバカイン、サリチルアルコール、テトラカイン、トリカイン、トリメカイン、ゾラミン、それらの組み合わせ、およびそれらの塩が挙げられる。アミノエステル局所麻酔薬の非限定的な例として、プロカイン、クロロプロカイン、コカイン、シクロメチカイン、シメトカイン（ｃｉｍｅｔｈｏｃａｉｎｅ）（ラロカイン（ｌａｒｏｃａｉｎｅ））、プロポキシカイン、プロカイン（ノボカイン）、プロパラカイン、テトラカイン（アメソカイン）を含む。アミノアミド局所麻酔薬の非限定的な例として、アルチカイン、ブピバカイン、シンコカイン（ジブカイン）、エチドカイン、レボブピバカイン、リドカイン（リグノカイン）、メピバカイン、ピペロカイン、プリロカイン、ロピバカイン、およびトリメカインが挙げられる。本明細書に開示される組成物は、単一の麻酔剤または複数の麻酔剤を含み得る。組み合わせ局所麻酔薬の非限定的な例には、リドカイン／プリロカイン（ＥＭＬＡ）がある。   Aspects herein provide, in part, hydrogel compositions disclosed herein that can optionally include an anesthetic. The anesthetic is preferably a local anesthetic, ie, an anesthetic that causes reversible local anesthesia and loss of pain, such as, for example, aminoamide local anesthetics and aminoester local anesthetics. The amount of anesthetic agent included in the compositions disclosed herein is an amount effective to reduce the pain experienced by an individual upon administration of the composition. Thus, the amount of anesthetic contained in the compositions disclosed herein is from about 0.1% to about 5% by weight of the total composition. Non-limiting examples of anesthetics include lidocaine, ambucaine, amoranone, amylocaine, benoxinate, benzocaine, betoxycaine, biphenamine, bupivacaine, butamine, butamine, b , Calcicaine, Chloroprocaine, Cocaethylene, Cocaine, Cyclomethicaine, Dibucaine, Dimethothoquine, Dimethocaine, Diperodon, Dicyclonin, Ethgonidine, Ecgonidine (Euproc n), phenalcomine, formocaine, formocaine, hexylcaine, hydroxytetracaine, isobutyl p-aminobenzoic acid, leucinocaine mesylate, levoxadrol, lidocaine, mepricaine, mepricaine, mepricaine Methyl, myrtecaine, nepain, octacaine, orthocaine, oxesasein, parethoxycaine, phenacaine, phenol, piperocaine, pirocaine, pirocaine, prodocaine, pirocaine e), proparacaine, Puropipokain (propipocaine), propoxy Cain, Sudokokain (psuedo***e), pyrrocaine (pyrrocaine), ropivacaine, salicyl alcohol, tetracaine, tolycaine, trimecaine, zolamine, combinations thereof, and salts thereof. Non-limiting examples of aminoester local anesthetics include procaine, chloroprocaine, ***e, cyclomethicaine, cimethocaine (larocaine), propoxycaine, procaine (novocaine), proparacaine, tetracaine (amesocaine) including. Non-limiting examples of aminoamide local anesthetics include articaine, bupivacaine, cinchocaine (dibucaine), etidocaine, levobupivacaine, lidocaine (lignocaine), mepivacaine, piperocaine, prilocaine, ropivacaine, and trimecaine. The compositions disclosed herein can include a single anesthetic or multiple anesthetics. A non-limiting example of a combined local anesthetic is lidocaine / prilocaine (EMLA).

したがって、ある実施形態において、本明細書に開示される組成物は、麻酔剤およびその塩を含む。この実施形態の態様において、本明細書に開示される組成物は、アミノアミド局所麻酔薬およびその塩またはアミノエステル局所麻酔薬およびその塩を含む。この実施形態の他の態様において、本明細書に開示される組成物は、プロカイン、クロロプロカイン、コカイン、シクロメチカイン、シメトカイン、プロポキシカイン、プロカイン、プロパラカイン、テトラカイン、もしくはそれらの塩、またはそれらの組み合わせを含む。この実施形態のさらに他の態様において、本明細書に開示される組成物は、アルチカイン、ブピバカイン、シンコカイン、エチドカイン、レボブピバカイン、リドカイン、メピバカイン、ピペロカイン、プリロカイン、ロピバカイン、トリメカイン、もしくはそれらの塩、またはそれらの組み合わせを含む。この実施形態のさらに他の態様において、本明細書に開示される組成物は、リドカイン／プリロカインの組み合わせを含む。   Accordingly, in certain embodiments, the compositions disclosed herein include anesthetic agents and salts thereof. In aspects of this embodiment, the compositions disclosed herein comprise an aminoamide local anesthetic and its salt or an aminoester local anesthetic and its salt. In other aspects of this embodiment, the compositions disclosed herein comprise procaine, chloroprocaine, ***e, cyclomethicaine, simethokine, propoxycaine, procaine, proparacaine, tetracaine, or a salt thereof, or Including a combination of In yet another aspect of this embodiment, the composition disclosed herein comprises articaine, bupivacaine, cin***e, etidocaine, levobupivacaine, lidocaine, mepivacaine, piperocaine, prilocaine, ropivacaine, trimecamine, or a salt thereof, Or a combination thereof. In yet another aspect of this embodiment, the compositions disclosed herein comprise a lidocaine / prilocaine combination.

この実施形態の他の態様において、本明細書に開示される組成物は、例えば、その全組成物の約０．１重量％、約０．２重量％、約０．３重量％、約０．４重量％、約０．５重量％、約０．６重量％、約０．７重量％、約０．８重量％、約０．９重量％、約１．０重量％、約２．０重量％、約３．０重量％、約４．０重量％、約５．０重量％、約６．０重量％、約７．０重量％、約８．０重量％、約９．０重量％、または約１０重量％の量の麻酔剤を含む。さらに他の態様において、本明細書に開示される組成物は、例えば、その全組成物の少なくとも０．１重量％、少なくとも０．２重量％、少なくとも０．３重量％、少なくとも０．４重量％、少なくとも０．５重量％、少なくとも０．６重量％、少なくとも０．７重量％、少なくとも０．８重量％、少なくとも０．９重量％、少なくとも１．０重量％、少なくとも２．０重量％、少なくとも３．０重量％、少なくとも４．０重量％、少なくとも５．０重量％、少なくとも６．０重量％、少なくとも７．０重量％、少なくとも８．０重量％、少なくとも９．０重量％、または少なくとも１０重量％の量の麻酔剤を含む。さらに他の態様において、本明細書に開示される組成物は、例えば、その全組成物の最大０．１重量％、最大０．２重量％、最大０．３重量％、最大０．４重量％、最大０．５重量％、最大０．６重量％、最大０．７重量％、最大０．８重量％、最大０．９重量％、最大１．０重量％、最大２．０重量％、最大３．０重量％、最大４．０重量％、最大５．０重量％、最大６．０重量％、最大７．０重量％、最大８．０重量％、最大９．０重量％、または最大１０重量％の量の麻酔剤を含む。さらなる態様において、本明細書に開示される組成物は、例えば、その全組成物の約０．１重量％〜約０．５重量％、約０．１重量％〜約１．０重量％、約０．１重量％〜約２．０重量％、約０．１重量％〜約３．０重量％、約０．１重量％〜約４．０重量％、約０．１重量％〜約５．０重量％、約０．２重量％〜約０．９重量％、約０．２重量％〜約１．０重量％、約０．２重量％〜約２．０重量％、約０．５重量％〜約１．０重量％、または約０．５重量％〜約２．０重量％の量の麻酔剤を含む。   In other aspects of this embodiment, the composition disclosed herein can be, for example, about 0.1%, about 0.2%, about 0.3%, about 0% by weight of the total composition. .4 wt%, about 0.5 wt%, about 0.6 wt%, about 0.7 wt%, about 0.8 wt%, about 0.9 wt%, about 1.0 wt%, about 2. 0 wt%, about 3.0 wt%, about 4.0 wt%, about 5.0 wt%, about 6.0 wt%, about 7.0 wt%, about 8.0 wt%, about 9.0 Containing an anesthetic in an amount of about 10% by weight, or about 10% by weight. In yet other embodiments, the compositions disclosed herein are, for example, at least 0.1%, at least 0.2%, at least 0.3%, at least 0.4% by weight of the total composition. %, At least 0.5%, at least 0.6%, at least 0.7%, at least 0.8%, at least 0.9%, at least 1.0%, at least 2.0% At least 3.0 wt%, at least 4.0 wt%, at least 5.0 wt%, at least 6.0 wt%, at least 7.0 wt%, at least 8.0 wt%, at least 9.0 wt%, Or an anesthetic in an amount of at least 10% by weight. In still other embodiments, the compositions disclosed herein can be, for example, up to 0.1%, up to 0.2%, up to 0.3%, up to 0.4% by weight of the total composition. %, Up to 0.5%, up to 0.6%, up to 0.7%, up to 0.8%, up to 0.9%, up to 1.0%, up to 2.0% Up to 3.0 wt%, up to 4.0 wt%, up to 5.0 wt%, up to 6.0 wt%, up to 7.0 wt%, up to 8.0 wt%, up to 9.0 wt%, Or contains an anesthetic in an amount up to 10% by weight. In further embodiments, the compositions disclosed herein are, for example, from about 0.1% to about 0.5%, from about 0.1% to about 1.0% by weight of the total composition, About 0.1 wt% to about 2.0 wt%, about 0.1 wt% to about 3.0 wt%, about 0.1 wt% to about 4.0 wt%, about 0.1 wt% to about 5.0%, about 0.2% to about 0.9%, about 0.2% to about 1.0%, about 0.2% to about 2.0%, about 0% An anesthetic in an amount of from 5 wt% to about 1.0 wt%, or from about 0.5 wt% to about 2.0 wt%.

別の実施形態において、本明細書に開示される組成物は、麻酔剤を含まない。   In another embodiment, the compositions disclosed herein do not include an anesthetic agent.

本発明の一態様において、重合体、例えば、グリコサミノグリカン重合体、例えば、ヒアルロン酸重合体、例えば、少なくとも一部分が架橋結合されるヒアルロン酸と、その重合体と組み合わされた添加剤または有益な薬剤とを含む、注入可能な皮膚充填剤が提供される。   In one aspect of the invention, a polymer, eg, a glycosaminoglycan polymer, eg, a hyaluronic acid polymer, eg, hyaluronic acid that is at least partially cross-linked, and an additive or beneficial combination with that polymer An injectable dermal filler is provided comprising a suitable agent.

重合体と組み合わされた有益な薬剤は、ビタミン、例えば、ビタミンＣを含み得る。ビタミンＣの好適な型の非限定的な例として、アスコルビン酸、ならびにアスコルビン酸のナトリウム、カリウム、およびカルシウム塩、長鎖脂肪酸を有するアスコルビン酸の脂肪溶解性エステル（パルミチン酸アスコルビルまたはステアリン酸アスコルビル）、リン酸アスコルビルマグネシウム（ＭＡＰ）、リン酸アスコルビルナトリウム（ＳＡＰ）、およびアスコルビン酸２‐グルコシド（ＡＡ２Ｇ（登録商標））、リン酸アスコルビルナトリウム（ＡＡ２Ｐ）、硫酸アスコルビル二ナトリウム、およびリン酸アスコルビル３‐アミノプロピル（ａｓｃｏｂｙｌ ３−ａｍｉｎｏｐｒｏｐｙｌ ｐｈｏｓｐｈａｔｅ）（Ｖｉｔａｇｅｎ）が挙げられる。   Beneficial agents in combination with the polymer may include vitamins such as vitamin C. Non-limiting examples of suitable types of vitamin C include ascorbic acid, and ascorbic acid sodium, potassium, and calcium salts, fat-soluble esters of ascorbic acid with long chain fatty acids (ascorbyl palmitate or ascorbyl stearate) , Magnesium ascorbyl phosphate (MAP), sodium ascorbyl phosphate (SAP), and ascorbic acid 2-glucoside (AA2G®), sodium ascorbyl phosphate (AA2P), disodium ascorbyl sulfate, and ascorbyl phosphate 3- Aminopropyl (ascopropyl 3-aminopropyl phosphate) (Vitagen).

ある特に有利な実施形態において、有益な薬剤は、重合体に共有結合される。例えば、有益な薬剤は、重合体に共有結合され、組成物中に、その組成物総量のうちの約０．０４重量％〜約５．０重量％、例えば、その組成物総量のうちの約０．１重量％〜約４．０重量％、例えば、その組成物総量のうちの約０．２重量％〜約２．０重量％の量で存在する、ビタミンＣ、またはビタミンＣ誘導体であってもよい。一実施形態において、本明細書に開示される組成物中に含まれるビタミンＣの量は、その組成物総量のうちの約０．３重量％〜約１．２重量％である。   In certain particularly advantageous embodiments, the beneficial agent is covalently attached to the polymer. For example, the beneficial agent is covalently bound to the polymer and is included in the composition in an amount of about 0.04% to about 5.0% by weight of the total composition, for example, about the total amount of the composition. Vitamin C or a vitamin C derivative present in an amount of 0.1% to about 4.0% by weight, for example, about 0.2% to about 2.0% by weight of the total composition. May be. In one embodiment, the amount of vitamin C included in the compositions disclosed herein is from about 0.3% to about 1.2% by weight of the total composition.

好ましくは、重合体に共有結合されるビタミンＣは、アスコルビン酸、Ｌ‐アスコルビン酸、Ｌ‐アスコルビン酸２‐硫酸塩（ＡＡ‐２Ｓ）およびＬ‐アスコルビン酸２‐リン酸塩（ＡＡ‐２Ｐ）、アスコルビン酸２‐Ｏ‐グルコシド（ＡＡ‐２Ｇ）、６‐Ｏ‐アシル‐２‐Ｏ‐アルファ‐Ｄ‐グルコピラノシル‐Ｌ‐アスコルビン酸（６‐Ａｃｙｌ‐ＡＡ‐２Ｇ）、（リン酸アスコルビル３‐アミノプロピル（ａｓｃｏｂｙｌ ３−ａｍｉｎｏｐｒｏｐｙｌ ｐｈｏｓｐｈａｔｅ）、パルミチン酸アスコルビル）、それらの誘導体および組み合わせのうちの少なくとも１つを含む。本明細書に開示される組成物は、単一のビタミンＣ剤または複数のビタミンＣ剤を含み得る。   Preferably, the vitamin C covalently bound to the polymer is ascorbic acid, L-ascorbic acid, L-ascorbic acid 2-sulfate (AA-2S) and L-ascorbic acid 2-phosphate (AA-2P) Ascorbic acid 2-O-glucoside (AA-2G), 6-O-acyl-2-O-alpha-D-glucopyranosyl-L-ascorbic acid (6-Acyl-AA-2G), (ascorbyl phosphate 3- At least one of aminopropyl (ascopropyl 3-aminopropyl phosphate), ascorbyl palmitate), derivatives and combinations thereof. The compositions disclosed herein can include a single vitamin C agent or multiple vitamin C agents.

本発明の別の実施形態において、ヒアルロン酸がＢＤＤＥと架橋結合された、皮膚充填剤が提供される。この実施形態において、結合度は、約３モル％〜約１０モル％、約３モル％〜約１５モル％、約３モル％〜約４０モル％であり得る。   In another embodiment of the invention, a dermal filler is provided wherein hyaluronic acid is cross-linked with BDDE. In this embodiment, the degree of binding can be from about 3 mol% to about 10 mol%, from about 3 mol% to about 15 mol%, from about 3 mol% to about 40 mol%.

いくつかの実施形態において、皮膚充填剤は、持続的な生物学的利用能を有する。例えば、ヒトの皮膚に導入されたときに、少なくとも約１ヶ月〜最大約２０ヶ月、またはそれを超える間にわたって、アスコルビン酸または他のビタミンをヒトに放出するために有効である、皮膚充填剤が提供される。   In some embodiments, the skin filler has sustained bioavailability. For example, a skin filler that is effective to release ascorbic acid or other vitamins to humans for at least about 1 month up to about 20 months or more when introduced into human skin. Provided.

本明細書の態様は、一部において、複素弾性係数、弾性係数、粘性係数、および／またはタンジェントδを示す、本明細書に開示されるヒドロゲル組成物を提供する。本明細書に開示される組成物は、その組成物が、力（ストレス、変形）を適用されたときに、弾性成分（例えば、架橋結合されたグリコサミノグリカン重合体等の、固体様）および粘性成分（例えば、架橋結合されていないグリコサミノグリカン重合体、または担体相等の液体様）を有するという点で粘弾性である。この特性を説明した流体力学的属性は、変形に対する組成物全体の抵抗性を定義する、複素弾性係数（Ｇ＊）である。複素弾性係数は、実数および虚数部分を有する複素数である、Ｇ＊＝Ｇ’＋ｉＧ’’である。Ｇ＊の絶対値は、Ａｂｓ（Ｇ＊）＝Ｓｑｒｔ（Ｇ’２＋Ｇ’’２）である。複素弾性係数は、弾性係数（Ｇ’）および粘性係数（Ｇ’’）の合計として定義され得る。Ｆａｌｃｏｎｅ，ｅｔ ａｌ．，Ｔｅｍｐｏｒａｒｙ Ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ Ｄｅｒｍａｌ Ｆｉｌｌｅｒｓ：Ａ Ｍｏｄｅｌ ｆｏｒ Ｐｅｒｓｉｓｔｅｎｃｅ Ｂａｓｅｄ ｏｎ Ｐｈｙｓｉｃａｌ Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，Ｄｅｒｍａｔｏｌ Ｓｕｒｇ．３５（８）： １２３８−１２４３（２００９）、Ｔｅｚｅｌ，上記，２００８、Ｋａｂｌｉｋ，上記，２００９、Ｂｅａｓｌｅｙ，上記，２００９、それらの各々は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。 Aspects herein provide, in part, hydrogel compositions disclosed herein that exhibit a complex elastic modulus, elastic modulus, viscosity coefficient, and / or tangent δ. The compositions disclosed herein are elastic components (eg, solid-like, such as cross-linked glycosaminoglycan polymers) when the composition is subjected to forces (stress, deformation). And is viscoelastic in that it has a viscous component (eg, a liquid-like, non-crosslinked glycosaminoglycan polymer or carrier phase). The hydrodynamic attribute that explains this property is the complex elastic modulus (G * ) that defines the overall resistance of the composition to deformation. The complex elastic modulus is G * = G ′ + iG ″, which is a complex number having real and imaginary parts. The absolute value of G * is Abs (G * ) = Sqrt (G ′ 2 + G ″ 2 ). The complex elastic modulus can be defined as the sum of the elastic modulus (G ′) and the viscosity coefficient (G ″). Falcon, et al. , Temporary Polysaccharide Dermal Fillers: A Model for Persistence Based on Physical Properties, Dermatol Surg. 35 (8): 1238-1243 (2009), Tezel, supra, 2008, Kablik, supra, 2009, Beasley, supra, 2009, each of which is incorporated herein by reference in its entirety.

弾性係数、または弾性の係数は、力をかけられたときに、ヒドロゲル物質が変形に抵抗する能力、または逆に言えば、非恒久的に変形される物体の性質を指す。弾性係数は、組成物の硬度を特徴付け、それはその組成物の運動からのエネルギーの貯蔵を示すので、貯蔵弾性係数としても知られる。弾性係数は、弾性と強度との間の相互作用を説明し（Ｇ’＝圧力／歪み）、よって、組成物の硬さまたは軟らかさの定量的測定を提供する。物体の弾性係数は、弾性変形領域における物体の圧力対歪み曲線の傾き：λ＝圧力／歪みとして定義され、ここでλは、弾性係数（単位：パスカル）であり、圧力は、（変形を引き起こす力）／（力がかけられた領域）であり、歪みは、その物体の元の状態に対してその圧力により引き起こされた変化率である。その力がかけられる速さに依存するが、より硬い組成物は、より高い弾性係数を有し、かつ、より硬い組成物は、例えば、注入等の、ある一定の距離、その物質を変形するためにより大きな力を要するであろう。圧力を（方向も含めて）どのように測定するか規定すれば、多くの型の弾性係数が定義される。３つの主要な弾性係数は、引張弾性係数、せん断弾性係数、および体積弾性係数である。   Elastic modulus, or modulus of elasticity, refers to the ability of a hydrogel material to resist deformation when applied, or conversely, the property of an object that is deformed non-permanently. The elastic modulus characterizes the hardness of a composition and is also known as the storage elastic modulus because it indicates the storage of energy from the movement of the composition. The modulus of elasticity describes the interaction between elasticity and strength (G '= pressure / strain) and thus provides a quantitative measure of the hardness or softness of the composition. The elastic modulus of an object is defined as the slope of the pressure-strain curve of the object in the elastic deformation region: λ = pressure / strain, where λ is the elastic modulus (unit: Pascal) and the pressure causes (deformation Force) / (area where the force is applied), and strain is the rate of change caused by the pressure relative to the original state of the object. Depending on the speed at which the force is applied, a harder composition will have a higher modulus of elasticity and a harder composition will deform the material for a certain distance, eg, injection. It will take more power. Defining how the pressure is measured (including direction) defines many types of elastic modulus. The three main elastic moduli are tensile modulus, shear modulus, and bulk modulus.

粘性係数は、粘性損失として失われるエネルギーを示すので、損失弾性係数としてもまた知られる。タンジェントδは、粘性係数と弾性係数との比率である。タンジェントδ＝Ｇ’’／Ｇ’。Ｆａｌｃｏｎｅ，上記，２００９。本明細書に開示されるタンジェントδ値については、タンジェントδは、周波数１Ｈｚでの動的弾性係数から得られる。より低いタンジェントδは、より硬い、より固い、またはより弾性の組成物に相当する。   Viscosity coefficient is also known as loss modulus because it indicates energy lost as viscous loss. The tangent δ is the ratio between the viscosity coefficient and the elastic coefficient. Tangent δ = G ″ / G ′. Falcon, supra, 2009. For the tangent δ values disclosed herein, the tangent δ is obtained from the dynamic elastic modulus at a frequency of 1 Hz. A lower tangent δ corresponds to a harder, harder or more elastic composition.

別の実施形態において、本明細書に開示されるヒドロゲル組成物は、ある弾性係数を示す。この実施形態の態様において、ヒドロゲル組成物は、例えば、約２５Ｐａ、約５０Ｐａ、約７５Ｐａ、約１００Ｐａ、約１２５Ｐａ、約１５０Ｐａ、約１７５Ｐａ、約２００Ｐａ、約２５０Ｐａ、約３００Ｐａ、約３５０Ｐａ、約４００Ｐａ、約４５０Ｐａ、約５００Ｐａ、約５５０Ｐａ、約６００Ｐａ、約６５０Ｐａ、約７００Ｐａ、約７５０Ｐａ、約８００Ｐａ、約８５０Ｐａ、約９００Ｐａ、約９５０Ｐａ、約１，０００Ｐａ、約１，２００Ｐａ、約１，３００Ｐａ、約１，４００Ｐａ、約１，５００Ｐａ、約１，６００Ｐａ、約１，７００Ｐａ、約１，８００Ｐａ、約１，９００Ｐａ、約２，０００Ｐａ、約２，１００Ｐａ、約２，２００Ｐａ、約２，３００Ｐａ、約２，４００Ｐａ、または約２，５００Ｐａの弾性係数を示す。この実施形態の他の態様において、ヒドロゲル組成物は、例えば、少なくとも２５Ｐａ、少なくとも５０Ｐａ、少なくとも７５Ｐａ、少なくとも１００Ｐａ、少なくとも１２５Ｐａ、少なくとも１５０Ｐａ、少なくとも１７５Ｐａ、少なくとも２００Ｐａ、少なくとも２５０Ｐａ、少なくとも３００Ｐａ、少なくとも３５０Ｐａ、少なくとも４００Ｐａ、少なくとも４５０Ｐａ、少なくとも５００Ｐａ、少なくとも５５０Ｐａ、少なくとも６００Ｐａ、少なくとも６５０Ｐａ、少なくとも７００Ｐａ、少なくとも７５０Ｐａ、少なくとも８００Ｐａ、少なくとも８５０Ｐａ、少なくとも９００Ｐａ、少なくとも９５０Ｐａ、少なくとも１，０００Ｐａ、少なくとも１，２００Ｐａ、少なくとも１，３００Ｐａ、少なくとも１，４００Ｐａ、少なくとも１，５００Ｐａ、少なくとも１，６００Ｐａ、少なくとも１，７００Ｐａ、少なくとも１，８００Ｐａ、少なくとも１，９００Ｐａ、少なくとも２，０００Ｐａ、少なくとも２，１００Ｐａ、少なくとも２，２００Ｐａ、少なくとも２，３００Ｐａ、少なくとも２，４００Ｐａ、または少なくとも２，５００Ｐａの弾性係数を示す。この実施形態のさらに他の態様において、ヒドロゲル組成物は、例えば、最大２５Ｐａ、最大５０Ｐａ、最大７５Ｐａ、最大１００Ｐａ、最大１２５Ｐａ、最大１５０Ｐａ、最大１７５Ｐａ、最大２００Ｐａ、最大２５０Ｐａ、最大３００Ｐａ、最大３５０Ｐａ、最大４００Ｐａ、最大４５０Ｐａ、最大５００Ｐａ、最大５５０Ｐａ、最大６００Ｐａ、最大６５０Ｐａ、最大７００Ｐａ、最大７５０Ｐａ、最大８００Ｐａ、最大８５０Ｐａ、最大９００Ｐａ、最大９５０Ｐａ、最大１，０００Ｐａ、最大１，２００Ｐａ、最大１，３００Ｐａ、最大１，４００Ｐａ、最大１，５００Ｐａ、または最大１，６００Ｐａの弾性係数を示す。この実施形態のさらに他の態様において、ヒドロゲル組成物は、例えば、約２５Ｐａ〜約１５０Ｐａ、約２５Ｐａ〜約３００Ｐａ、約２５Ｐａ〜約５００Ｐａ、約２５Ｐａ〜約８００Ｐａ、約１２５Ｐａ〜約３００Ｐａ、約１２５Ｐａ〜約５００Ｐａ、約１２５Ｐａ〜約８００Ｐａ、約５００Ｐａ〜約１，６００Ｐａ、約６００Ｐａ〜約１，６００Ｐａ、約７００Ｐａ〜約１，６００Ｐａ、約８００Ｐａ〜約１，６００Ｐａ、約９００Ｐａ〜約１，６００Ｐａ、約１，０００Ｐａ〜約１，６００Ｐａ、約１，１００Ｐａ〜約１，６００Ｐａ、約１，２００Ｐａ〜約１，６００Ｐａ、約５００Ｐａ〜約２，５００Ｐａ、約１，０００Ｐａ〜約２，５００Ｐａ、約１，５００Ｐａ〜約２，５００Ｐａ、約２，０００Ｐａ〜約２，５００Ｐａ、約１，３００Ｐａ〜約１，６００Ｐａ、約１，４００Ｐａ〜約１，７００Ｐａ、約１，５００Ｐａ〜約１，８００Ｐａ、約１，６００Ｐａ〜約１，９００Ｐａ、約１，７００Ｐａ〜約２，０００Ｐａ、約１，８００Ｐａ〜約２，１００Ｐａ、約１，９００Ｐａ〜約２，２００Ｐａ、約２，０００Ｐａ〜約２，３００Ｐａ、約２，１００Ｐａ〜約２，４００Ｐａ、または約２，２００Ｐａ〜約２，５００Ｐａの弾性係数を示す。   In another embodiment, the hydrogel composition disclosed herein exhibits a certain elastic modulus. In aspects of this embodiment, the hydrogel composition can be, for example, about 25 Pa, about 50 Pa, about 75 Pa, about 100 Pa, about 125 Pa, about 150 Pa, about 175 Pa, about 200 Pa, about 250 Pa, about 300 Pa, about 350 Pa, about 400 Pa, About 450 Pa, about 500 Pa, about 550 Pa, about 600 Pa, about 650 Pa, about 700 Pa, about 750 Pa, about 800 Pa, about 850 Pa, about 900 Pa, about 950 Pa, about 1,000 Pa, about 1,200 Pa, about 1,300 Pa, about 1 400 Pa, about 1,500 Pa, about 1,600 Pa, about 1,700 Pa, about 1,800 Pa, about 1,900 Pa, about 2,000 Pa, about 2,100 Pa, about 2,200 Pa, about 2,300 Pa, about 2 , 400 Pa, or about 2,500 Pa. In other aspects of this embodiment, the hydrogel composition comprises, for example, at least 25 Pa, at least 50 Pa, at least 75 Pa, at least 100 Pa, at least 125 Pa, at least 150 Pa, at least 175 Pa, at least 200 Pa, at least 250 Pa, at least 300 Pa, at least 350 Pa, at least 400 Pa, at least 450 Pa, at least 500 Pa, at least 550 Pa, at least 600 Pa, at least 650 Pa, at least 700 Pa, at least 750 Pa, at least 800 Pa, at least 850 Pa, at least 900 Pa, at least 950 Pa, at least 1,000 Pa, at least 1,200 Pa, at least 1,300 Pa, At least 1,400 Pa, small At least 1,500 Pa, at least 1,600 Pa, at least 1,700 Pa, at least 1,800 Pa, at least 1,900 Pa, at least 2,000 Pa, at least 2,100 Pa, at least 2,200 Pa, at least 2,300 Pa, at least 2,400 Pa Or an elastic modulus of at least 2,500 Pa. In yet another aspect of this embodiment, the hydrogel composition can be, for example, up to 25 Pa, up to 50 Pa, up to 75 Pa, up to 100 Pa, up to 125 Pa, up to 150 Pa, up to 175 Pa, up to 200 Pa, up to 250 Pa, up to 300 Pa, up to 350 Pa, Max 400Pa, Max 450Pa, Max 500Pa, Max 550Pa, Max 600Pa, Max 650Pa, Max 700Pa, Max 750Pa, Max 800Pa, Max 850Pa, Max 900Pa, Max 950Pa, Max 1,000Pa, Max 1,200Pa, Max 1,300Pa , Maximum elastic modulus of 1,400 Pa, maximum 1,500 Pa, or maximum 1,600 Pa. In yet another aspect of this embodiment, the hydrogel composition is, for example, from about 25 Pa to about 150 Pa, from about 25 Pa to about 300 Pa, from about 25 Pa to about 500 Pa, from about 25 Pa to about 800 Pa, from about 125 Pa to about 300 Pa, from about 125 Pa About 500 Pa, about 125 Pa to about 800 Pa, about 500 Pa to about 1,600 Pa, about 600 Pa to about 1,600 Pa, about 700 Pa to about 1,600 Pa, about 800 Pa to about 1,600 Pa, about 900 Pa to about 1,600 Pa, about 1,000 Pa to about 1,600 Pa, about 1,100 Pa to about 1,600 Pa, about 1,200 Pa to about 1,600 Pa, about 500 Pa to about 2,500 Pa, about 1,000 Pa to about 2,500 Pa, about 1, 500 Pa to about 2,500 Pa, about 2,000 Pa to about 2,500 Pa, about 1 300 Pa to about 1,600 Pa, about 1,400 Pa to about 1,700 Pa, about 1,500 Pa to about 1,800 Pa, about 1,600 Pa to about 1,900 Pa, about 1,700 Pa to about 2,000 Pa, about 1, Elastic modulus of 800 Pa to about 2,100 Pa, about 1,900 Pa to about 2,200 Pa, about 2,000 Pa to about 2,300 Pa, about 2,100 Pa to about 2,400 Pa, or about 2,200 Pa to about 2,500 Pa Indicates.

別の実施形態において、本明細書に開示されるヒドロゲル組成物は、ある粘性係数を示す。この実施形態の態様において、ヒドロゲル組成物は、例えば、約１０Ｐａ、約２０Ｐａ、約３０Ｐａ、約４０Ｐａ、約５０Ｐａ、約６０Ｐａ、約７０Ｐａ、約８０Ｐａ、約９０Ｐａ、約１００Ｐａ、約１５０Ｐａ、約２００Ｐａ、約２５０Ｐａ、約３００Ｐａ、約３５０Ｐａ、約４００Ｐａ、約４５０Ｐａ、約５００Ｐａ、約５５０Ｐａ、約６００Ｐａ、約６５０Ｐａ、または約７００Ｐａの粘性係数を示す。この実施形態の他の態様において、ヒドロゲル組成物は、例えば、最大１０Ｐａ、最大２０Ｐａ、最大３０Ｐａ、最大４０Ｐａ、最大５０Ｐａ、最大６０Ｐａ、最大７０Ｐａ、最大８０Ｐａ、最大９０Ｐａ、最大１００Ｐａ、最大１５０Ｐａ、最大２００Ｐａ、最大２５０Ｐａ、最大３００Ｐａ、最大３５０Ｐａ、最大４００Ｐａ、最大４５０Ｐａ、最大５００Ｐａ、最大５５０Ｐａ、最大６００Ｐａ、最大６５０Ｐａ、または最大７００Ｐａの粘性係数を示す。この実施形態のさらに他の態様において、ヒドロゲル組成物は、例えば、約１０Ｐａ〜約３０Ｐａ、約１０Ｐａ〜約５０Ｐａ、約１０Ｐａ〜約１００Ｐａ、約１０Ｐａ〜約１５０Ｐａ、約７０Ｐａ〜約１００Ｐａ、約５０Ｐａ〜約３５０Ｐａ、約１５０Ｐａ〜約４５０Ｐａ、約２５０Ｐａ〜約５５０Ｐａ、約３５０Ｐａ〜約７００Ｐａ、約５０Ｐａ〜約１５０Ｐａ、約１００Ｐａ〜約２００Ｐａ、約１５０Ｐａ〜約２５０Ｐａ、約２００Ｐａ〜約３００Ｐａ、約２５０Ｐａ〜約３５０Ｐａ、約３００Ｐａ〜約４００Ｐａ、約３５０Ｐａ〜約４５０Ｐａ、約４００Ｐａ〜約５００Ｐａ、約４５０Ｐａ〜約５５０Ｐａ、約５００Ｐａ〜約６００Ｐａ、約５５０Ｐａ〜約６５０Ｐａ、または約６００Ｐａ〜約７００Ｐａの粘性係数を示す。   In another embodiment, the hydrogel composition disclosed herein exhibits a certain viscosity coefficient. In aspects of this embodiment, the hydrogel composition has, for example, about 10 Pa, about 20 Pa, about 30 Pa, about 40 Pa, about 50 Pa, about 60 Pa, about 70 Pa, about 80 Pa, about 90 Pa, about 100 Pa, about 150 Pa, about 200 Pa, It exhibits a viscosity coefficient of about 250 Pa, about 300 Pa, about 350 Pa, about 400 Pa, about 450 Pa, about 500 Pa, about 550 Pa, about 600 Pa, about 650 Pa, or about 700 Pa. In other aspects of this embodiment, the hydrogel composition may be, for example, up to 10 Pa, up to 20 Pa, up to 30 Pa, up to 40 Pa, up to 50 Pa, up to 60 Pa, up to 70 Pa, up to 80 Pa, up to 90 Pa, up to 100 Pa, up to 150 Pa, up to A viscosity coefficient of 200 Pa, maximum 250 Pa, maximum 300 Pa, maximum 350 Pa, maximum 400 Pa, maximum 450 Pa, maximum 500 Pa, maximum 550 Pa, maximum 600 Pa, maximum 650 Pa, or maximum 700 Pa is shown. In yet another aspect of this embodiment, the hydrogel composition can be, for example, from about 10 Pa to about 30 Pa, from about 10 Pa to about 50 Pa, from about 10 Pa to about 100 Pa, from about 10 Pa to about 150 Pa, from about 70 Pa to about 100 Pa, from about 50 Pa to About 350 Pa, about 150 Pa to about 450 Pa, about 250 Pa to about 550 Pa, about 350 Pa to about 700 Pa, about 50 Pa to about 150 Pa, about 100 Pa to about 200 Pa, about 150 Pa to about 250 Pa, about 200 Pa to about 300 Pa, about 250 Pa to about 350 Pa About 300 Pa to about 400 Pa, about 350 Pa to about 450 Pa, about 400 Pa to about 500 Pa, about 450 Pa to about 550 Pa, about 500 Pa to about 600 Pa, about 550 Pa to about 650 Pa, or about 600 Pa to about 700 Pa.

別の実施形態において、本明細書に開示されるヒドロゲル組成物は、あるタンジェントδを示す。この実施形態の態様において、ヒドロゲル組成物は、例えば、約０．１、約０．２、約０．３、約０．４、約０．５、約０．６、約０．７、約０．８、約０．９、約１．０、約１．１、約１．２、約１．３、約１．４、約１．５、約１．６、約１．７、約１．８、約１．９、約２．０、約２．１、約２．２、約２．３、約２．４、または約２．５のタンジェントδを示す。この実施形態の他の態様において、ヒドロゲル組成物は、例えば、最大０．１、最大０．２、最大０．３、最大０．４、最大０．５、最大０．６、最大０．７、最大０．８、最大０．９、最大１．０、最大１．１、最大１．２、最大１．３、最大１．４、最大１．５、最大１．６、最大１．７、最大１．８、最大１．９、最大２．０、最大２．１、最大２．２、最大２．３、最大２．４、または最大２．５のタンジェントδを示す。この実施形態のさらに他の態様において、ヒドロゲル組成物は、例えば、約０．１〜約０．３、約０．３〜約０．５、約０．５〜約０．８、約１．１〜約１．４、約１．４〜約１．７、約０．３〜約０．６、約０．１〜約０．５、約０．５〜約０．９、約０．１〜約０．６、約０．１〜約１．０、約０．５〜約１．５、約１．０〜約２．０または約１．５〜約２．５のタンジェントδを示す。   In another embodiment, the hydrogel composition disclosed herein exhibits a tangent δ. In aspects of this embodiment, the hydrogel composition can be, for example, about 0.1, about 0.2, about 0.3, about 0.4, about 0.5, about 0.6, about 0.7, about 0.8, about 0.9, about 1.0, about 1.1, about 1.2, about 1.3, about 1.4, about 1.5, about 1.6, about 1.7, about A tangent δ of 1.8, about 1.9, about 2.0, about 2.1, about 2.2, about 2.3, about 2.4, or about 2.5 is shown. In other aspects of this embodiment, the hydrogel composition can be, for example, up to 0.1, up to 0.2, up to 0.3, up to 0.4, up to 0.5, up to 0.6, up to 0.7. , Max 0.8, max 0.9, max 1.0, max 1.1, max 1.2, max 1.3, max 1.4, max 1.5, max 1.6, max 1.7 , Maximum 1.8, maximum 1.9, maximum 2.0, maximum 2.1, maximum 2.2, maximum 2.3, maximum 2.4, or maximum 2.5. In yet another aspect of this embodiment, the hydrogel composition can be, for example, about 0.1 to about 0.3, about 0.3 to about 0.5, about 0.5 to about 0.8, about 1. 1 to about 1.4, about 1.4 to about 1.7, about 0.3 to about 0.6, about 0.1 to about 0.5, about 0.5 to about 0.9, about 0.00. A tangent δ of 1 to about 0.6, about 0.1 to about 1.0, about 0.5 to about 1.5, about 1.0 to about 2.0, or about 1.5 to about 2.5. Show.

本明細書の態様は、一部において、透明性および／または半透明性を有する本明細書に開示されるヒドロゲル組成物を提供する。光透過性は、可視光が物質を通り抜けることを可能にする物理的特性であり、一方、半透明性（半透明または半透明度とも呼ばれる）は、光が拡散して通り抜けることを可能にするのみである。反対の特性は、不透明性である。透明な物質は、澄んでいるが、一方、半透明な物質は、はっきりとは透けて見え得ない。本明細書に開示されるヒドロゲルは、好ましくは光透過性であるか、または少なくとも半透明である。   Aspects herein provide, in part, hydrogel compositions disclosed herein that are transparent and / or translucent. Translucency is a physical property that allows visible light to pass through a material, while translucency (also called translucency or translucency) only allows light to diffuse through. It is. The opposite property is opacity. Transparent materials are clear, while translucent materials cannot be clearly seen through. The hydrogels disclosed herein are preferably light transmissive or at least translucent.

ある実施形態において、本明細書に開示されるヒドロゲル組成物は、光学的に半透明である。この実施形態の態様において、ヒドロゲル組成物は、例えば、光の約７５％、光の約８０％、光の約８５％、光の約９０％、光の約９５％、または光の約１００％を拡散して伝導する。この実施形態の他の態様において、ヒドロゲル組成物は、例えば、光の少なくとも７５％、光の少なくとも８０％、光の少なくとも８５％、光の少なくとも９０％、または光の少なくとも９５％を拡散して伝導する。この実施形態のなおも他の態様において、ヒドロゲル組成物は、例えば、光の約７５％〜約１００％、光の約８０％〜約１００％、光の約８５％〜約１００％、光の約９０％〜約１００％、または光の約９５％〜約１００％を拡散して伝導する。ある実施形態において、本明細書に開示されるヒドロゲル組成物は、光透過性であり、可視光の１００％を伝導する。   In certain embodiments, the hydrogel compositions disclosed herein are optically translucent. In aspects of this embodiment, the hydrogel composition comprises, for example, about 75% of light, about 80% of light, about 85% of light, about 90% of light, about 95% of light, or about 100% of light. To diffuse and conduct. In other aspects of this embodiment, the hydrogel composition diffuses, for example, at least 75% of light, at least 80% of light, at least 85% of light, at least 90% of light, or at least 95% of light. Conduct. In still other aspects of this embodiment, the hydrogel composition comprises, for example, about 75% to about 100% of light, about 80% to about 100% of light, about 85% to about 100% of light, About 90% to about 100%, or about 95% to about 100% of the light is diffused and conducted. In certain embodiments, the hydrogel compositions disclosed herein are light transmissive and conduct 100% of visible light.

本明細書に開示されるヒドロゲル組成物は、そのヒドロゲルを粉砕して粒子にすることによりさらにプロセスされ、任意に、例えば、水または食塩水等の、担体相と混合し、溶液、油、ローション、ゲル、軟膏、クリーム、スラリー、膏薬、またはペーストのような注入可能なまたは局所的物質を形成し得る。よって、開示されるヒドロゲル組成物は、単相性または多相性組成物であり得る。ヒドロゲルは、直径約１５μｍ〜約３０μｍ、約５０μｍ〜約７５μｍ、約１００μｍ〜約１５０μｍ、約２００μｍ〜約３００μｍ、約４５０μｍ〜約５５０μｍ、約６００μｍ〜約７００μｍ、約７５０μｍ〜約８５０μｍ、または約９００μｍ〜約１，０００μｍ等の、約１０μｍ〜約１０００μｍの粒子サイズに製粉され得る。   The hydrogel compositions disclosed herein are further processed by grinding the hydrogel into particles, optionally mixed with a carrier phase, such as water or saline, to provide a solution, oil, lotion. May form injectable or topical substances such as gels, ointments, creams, slurries, salves, or pastes. Thus, the disclosed hydrogel compositions can be monophasic or multiphasic compositions. The hydrogel has a diameter of about 15 μm to about 30 μm, about 50 μm to about 75 μm, about 100 μm to about 150 μm, about 200 μm to about 300 μm, about 450 μm to about 550 μm, about 600 μm to about 700 μm, about 750 μm to about 850 μm, or about 900 μm to It can be milled to a particle size of about 10 μm to about 1000 μm, such as about 1,000 μm.

本明細書の態様は、一部において、注入可能である本明細書に開示される組成物を提供する。本明細書中で使用されるとき、用語「注入可能な」は、細い針を備える注入装置を用いて個人の皮膚領域にその組成物を投与するために必要な特性を有する物質を指す。本明細書中で使用されるとき、用語「細い針」は、２７ゲージ以下の針を指す。本明細書に開示される組成物の注入可能性は、上記に議論されるようにヒドロゲル粒子をサイズ調整することにより達成され得る。   Aspects herein provide, in part, a composition disclosed herein that is injectable. As used herein, the term “injectable” refers to a substance having the properties necessary to administer the composition to an individual's skin area using an infusion device with a fine needle. As used herein, the term “thin needle” refers to a needle of 27 gauge or less. Injectability of the compositions disclosed herein can be achieved by sizing the hydrogel particles as discussed above.

この実施形態の態様において、本明細書に開示されるヒドロゲル組成物は、細い針に通して注入可能である。この実施形態の他の態様において、本明細書に開示されるヒドロゲル組成物は、例えば、約２７ゲージ、約３０ゲージ、または約３２ゲージの針に通して注入可能である。この実施形態のなおも他の態様において、本明細書に開示されるヒドロゲル組成物は、例えば、２２ゲージ以下、２７ゲージ以下、３０ゲージ以下、または３２ゲージ以下の針に通して注入可能である。この実施形態のなおも他の態様において、本明細書に開示されるヒドロゲル組成物は、例えば、約２２ゲージ〜約３５ゲージ、２２ゲージ〜約３４ゲージ、２２ゲージ〜約３３ゲージ、２２ゲージ〜約３２ゲージ、約２２ゲージ〜約２７ゲージ、または約２７ゲージ〜約３２ゲージの針に通して注入可能である。   In aspects of this embodiment, the hydrogel composition disclosed herein can be injected through a fine needle. In other aspects of this embodiment, the hydrogel compositions disclosed herein can be injected through, for example, a needle of about 27 gauge, about 30 gauge, or about 32 gauge. In still other aspects of this embodiment, the hydrogel compositions disclosed herein can be injected through a needle of, for example, 22 gauge or less, 27 gauge or less, 30 gauge or less, or 32 gauge or less. . In still other aspects of this embodiment, the hydrogel compositions disclosed herein can be, for example, from about 22 gauge to about 35 gauge, 22 gauge to about 34 gauge, 22 gauge to about 33 gauge, 22 gauge to Injection can be through a needle of about 32 gauge, about 22 gauge to about 27 gauge, or about 27 gauge to about 32 gauge.

この実施形態の態様において、本明細書に開示されるヒドロゲル組成物は、１００ｍｍ／分の速度で約６０Ｎ、約５５Ｎ、約５０Ｎ、約４５Ｎ、約４０Ｎ、約３５Ｎ、約３０Ｎ、約２５Ｎ、約２０Ｎ、または約１５Ｎの押出力で注入され得る。この実施形態の他の態様において、本明細書に開示されるヒドロゲル組成物は、約６０Ｎ以下、約５５Ｎ以下、約５０Ｎ以下、約４５Ｎ以下、約４０Ｎ以下、約３５Ｎ以下、約３０Ｎ以下、約２５Ｎ以下、約２０Ｎ以下、約１５Ｎ以下、約１０Ｎ以下、または約５Ｎ以下の押出力で２７ゲージの針に通して注入され得る。この実施形態のなおも他の態様において、本明細書に開示されるヒドロゲル組成物は、約６０Ｎ以下、約５５Ｎ以下、約５０Ｎ以下、約４５Ｎ以下、約４０Ｎ以下、約３５Ｎ以下、約３０Ｎ以下、約２５Ｎ以下、約２０Ｎ以下、約１５Ｎ以下、約１０Ｎ以下、または約５Ｎ以下の押出力で３０ゲージの針に通して注入され得る。この実施形態の依然として他の態様において、本明細書に開示されるヒドロゲル組成物は、約６０Ｎ以下、約５５Ｎ以下、約５０Ｎ以下、約４５Ｎ以下、約４０Ｎ以下、約３５Ｎ以下、約３０Ｎ以下、約２５Ｎ以下、約２０Ｎ以下、約１５Ｎ以下、約１０Ｎ以下、または約５Ｎ以下の押出力で３２ゲージの針に通して注入され得る。   In aspects of this embodiment, the hydrogel compositions disclosed herein can be about 60 N, about 55 N, about 50 N, about 45 N, about 40 N, about 35 N, about 30 N, about 25 N, about 25 N at a rate of 100 mm / min. It can be injected with a force of 20N or about 15N. In other aspects of this embodiment, the hydrogel compositions disclosed herein can be about 60 N or less, about 55 N or less, about 50 N or less, about 45 N or less, about 40 N or less, about 35 N or less, about 30 N or less, about It can be injected through a 27 gauge needle with a force of 25N or less, about 20N or less, about 15N or less, about 10N or less, or about 5N or less. In still other aspects of this embodiment, the hydrogel compositions disclosed herein can be about 60 N or less, about 55 N or less, about 50 N or less, about 45 N or less, about 40 N or less, about 35 N or less, about 30 N or less. , About 25 N or less, about 20 N or less, about 15 N or less, about 10 N or less, or about 5 N or less, and can be injected through a 30 gauge needle. In still other aspects of this embodiment, the hydrogel compositions disclosed herein can be about 60 N or less, about 55 N or less, about 50 N or less, about 45 N or less, about 40 N or less, about 35 N or less, about 30 N or less, It can be injected through a 32 gauge needle with a force of about 25 N or less, about 20 N or less, about 15 N or less, about 10 N or less, or about 5 N or less.

本明細書の態様は、一部において、粘着性を示す、本明細書に開示されるヒドロゲル組成物を提供する。粘着性は、粘着、粘着性吸引力、粘着力、または圧縮力とも称され、分子を合体させるよう働く、物質内の類似分子間の分子間引力により引き起こされる物質の物理的特性である。粘着性は、グラム重量（ｇｍｆ）単位で表される。粘着性は、他の要因の中でも、最初の遊離グリコサミノグリカン重合体の分子量比、グリコサミノグリカン重合体の架橋結合度、架橋結合後の残留遊離グリコサミノグリカン重合体の量、およびそのヒドロゲル組成物のｐＨにより影響を受ける。組成物は、投与部位に局在したまま残るように十分に粘着性であるべきである。さらに、ある特定の用途において、十分な粘着性は、組成物が機械的な負荷循環の場合において、その形、ひいては機能性を保持するために重要である。よって、一実施形態において、本明細書に開示されるヒドロゲル組成物は、水と同等の粘着性を示す。なおも別の実施形態において、本明細書に開示されるヒドロゲル組成物は、投与部位に局在したまま残るのに十分な粘着性を示す。依然として別の実施形態において、本明細書に開示されるヒドロゲル組成物は、その形を保持するのに十分な粘着性を示す。１つのさらなる実施形態において、本明細書に開示されるヒドロゲル組成物は、その形および機能性を保持するのに十分な粘着性を示す。   Aspects herein provide, in part, hydrogel compositions disclosed herein that exhibit tackiness. Stickiness, also referred to as sticking, sticky suction, sticking force, or compressive force, is a physical property of a substance caused by intermolecular attractive forces between similar molecules in the substance that serve to coalesce molecules. Tackiness is expressed in units of grams weight (gmf). Tackiness is, among other factors, the molecular weight ratio of the first free glycosaminoglycan polymer, the degree of crosslinking of the glycosaminoglycan polymer, the amount of residual free glycosaminoglycan polymer after crosslinking, and It is affected by the pH of the hydrogel composition. The composition should be sufficiently tacky to remain localized at the site of administration. Furthermore, in certain applications, sufficient tack is important to maintain the shape and thus functionality in the case of mechanical load cycling. Thus, in one embodiment, the hydrogel composition disclosed herein exhibits a tackiness equivalent to water. In yet another embodiment, the hydrogel compositions disclosed herein exhibit sufficient tack to remain localized at the site of administration. In still another embodiment, the hydrogel composition disclosed herein exhibits sufficient tack to retain its shape. In one further embodiment, the hydrogel composition disclosed herein exhibits sufficient tack to retain its shape and functionality.

本明細書の態様は、一部において、生理学的に許容される容量オスモル濃度を示す、本明細書に開示されるヒドロゲル組成物を提供する。本明細書中で使用されるとき、用語「容量オスモル濃度」は、溶液中で浸透圧的に活性な溶質の濃度を指す。本明細書中で使用されるとき、用語「生理学的に許容される容量オスモル濃度」は、生体の正常な機能に従う、またはそれに特徴的な容量オスモル濃度を指す。よって、本明細書に開示されるヒドロゲル組成物の投与は、哺乳類に投与されたとき、長期のまたは恒久的な有害な効果を実質的に有しない容量オスモル濃度を示す。容量オスモル濃度は、溶媒リットル当たりの浸透圧的に活性な溶質のオスモルを用いて表される（Ｏｓｍｏｌ／ＬまたはＯｓｍ／Ｌ）。容量オスモル濃度は、溶質のモルではなく、浸透圧的に活性な溶質粒子のモルを測定するので、モル濃度とは区別される。いくつかの化合物は、溶液中で解離し得るが、一方で、他の化合物は、解離し得ないので、その区別が生じる。溶液の容量オスモル濃度は、以下の式から計算され得る：Ｏｓｍｏｌ／Ｌ＝Σψｉηｉ Ｃｉ、式中、ψは、その溶液の非理想特性の程度を表す浸透係数であり、ηは、分子が解離した、粒子（例えば、イオン）の数であり、Ｃは、その溶質のモル濃度であり、ｉは、特定の溶質の同一性を表す標識である。本明細書に開示されるヒドロゲル組成物の容量オスモル濃度は、溶液を測定する従来の方法を用いて測定され得る。 Aspects herein provide, in part, hydrogel compositions disclosed herein that exhibit a physiologically acceptable osmolarity. As used herein, the term “osmolarity” refers to the concentration of an osmotically active solute in solution. As used herein, the term “physiologically acceptable osmolarity” refers to an osmolarity that follows or is characteristic of the normal functioning of the organism. Thus, administration of the hydrogel compositions disclosed herein exhibits an osmolarity that has substantially no long-term or permanent deleterious effects when administered to a mammal. Osmolarity is expressed using osmoles of osmotically active solute per liter of solvent (Osmol / L or Osm / L). Osmolarity is distinct from molarity because it measures the moles of solute particles that are osmotically active, not the moles of solute. Some compounds can dissociate in solution, while other compounds cannot dissociate, so a distinction arises. The osmolarity of the solution can be calculated from the following equation: Osmol / L = Σψ i η i C i , where ψ is the penetration coefficient representing the degree of non-ideal properties of the solution, and η is The number of particles (eg, ions) dissociated from the molecule, C is the molar concentration of the solute, and i is a label that represents the identity of the particular solute. The osmolarity of the hydrogel compositions disclosed herein can be measured using conventional methods of measuring solutions.

１つの実施形態において、本明細書に開示されるヒドロゲル組成物は、生理学的に許容される容量オスモル濃度を示す。本明細書中で使用されるとき、用語「重量オスモル濃度」は、体内の溶媒キロ当たりの浸透圧的に活性な溶質の濃度を指す。本明細書中で使用されるとき、用語「生理学的に許容される重量オスモル濃度」は、生体の正常な機能に従う、またはそれに特徴的な重量オスモル濃度を指す。よって、本明細書に開示されるヒドロゲル組成物の投与は、哺乳類に投与されたとき、長期のまたは恒久的な有害な効果を実質的に有しない重量オスモル濃度を示す。重量オスモル濃度は、溶媒キログラム当たりの浸透圧的に活性な溶質のオスモルを用いて表され（ｏｓｍｏｌ／ｋｇまたはＯｓｍ／ｋｇ）、その溶液中に存在する全ての溶質のモル濃度の合計に等しい。溶液の重量オスモル濃度は、浸透圧計を用いて測定され得る。最新の研究室で最も一般的に使用される器具は、氷点降下浸透圧計である。この器具は、重量オスモル濃度が増加している溶液中で起こる氷点変化（氷点降下浸透圧計）、または重量オスモル濃度が増加している溶液中で起こる蒸気圧変化（蒸気圧降下浸透圧計）を測定する。   In one embodiment, the hydrogel compositions disclosed herein exhibit a physiologically acceptable osmolarity. As used herein, the term “osmolality” refers to the concentration of osmotically active solutes per kilogram of solvent in the body. As used herein, the term “physiologically acceptable osmolality” refers to osmolality according to or characteristic of the normal functioning of the organism. Thus, administration of the hydrogel compositions disclosed herein exhibits an osmolality that has substantially no long-term or permanent deleterious effects when administered to a mammal. Osmolality is expressed using osmoles of osmotically active solute per kilogram of solvent (osmol / kg or Osm / kg) and is equal to the sum of the molar concentrations of all solutes present in the solution. The osmolality of the solution can be measured using an osmometer. The most commonly used instrument in modern laboratories is the freezing point osmometer. This instrument measures the freezing point change (freezing point osmometer) that occurs in a solution with increasing osmolality or the changing vapor pressure (vapor pressure drop osmometer) that occurs in a solution with increasing osmolality To do.

この実施形態の態様において、ヒドロゲル組成物は、例えば、約１００ｍＯｓｍ／Ｌ、約１５０ｍＯｓｍ／Ｌ、約２００ｍＯｓｍ／Ｌ、約２５０ｍＯｓｍ／Ｌ、約３００ｍＯｓｍ／Ｌ、約３５０ｍＯｓｍ／Ｌ、約４００ｍＯｓｍ／Ｌ、約４５０ｍＯｓｍ／Ｌ、または約５００ｍＯｓｍ／Ｌの容量オスモル濃度を示す。この実施形態の他の態様において、ヒドロゲル組成物は、例えば、少なくとも１００ｍＯｓｍ／Ｌ、少なくとも１５０ｍＯｓｍ／Ｌ、少なくとも２００ｍＯｓｍ／Ｌ、少なくとも２５０ｍＯｓｍ／Ｌ、少なくとも３００ｍＯｓｍ／Ｌ、少なくとも３５０ｍＯｓｍ／Ｌ、少なくとも４００ｍＯｓｍ／Ｌ、少なくとも４５０ｍＯｓｍ／Ｌ、または少なくとも５００ｍＯｓｍ／Ｌの容量オスモル濃度を示す。この実施形態のなおも他の態様において、ヒドロゲル組成物は、例えば、最大１００ｍＯｓｍ／Ｌ、最大１５０ｍＯｓｍ／Ｌ、最大２００ｍＯｓｍ／Ｌ、最大２５０ｍＯｓｍ／Ｌ、最大３００ｍＯｓｍ／Ｌ、最大３５０ｍＯｓｍ／Ｌ、最大４００ｍＯｓｍ／Ｌ、最大４５０ｍＯｓｍ／Ｌ、または最大５００ｍＯｓｍ／Ｌの容量オスモル濃度を示す。この実施形態の依然として他の態様において、ヒドロゲル組成物は、例えば、約１００ｍＯｓｍ／Ｌ〜約５００ｍＯｓｍ／Ｌ、約２００ｍＯｓｍ／Ｌ〜約５００ｍＯｓｍ／Ｌ、約２００ｍＯｓｍ／Ｌ〜約４００ｍＯｓｍ／Ｌ、約３００ｍＯｓｍ／Ｌ〜約４００ｍＯｓｍ／Ｌ、約２７０ｍＯｓｍ／Ｌ〜約３９０ｍＯｓｍ／Ｌ、約２２５ｍＯｓｍ／Ｌ〜約３５０ｍＯｓｍ／Ｌ、約２５０ｍＯｓｍ／Ｌ〜約３２５ｍＯｓｍ／Ｌ、約２７５ｍＯｓｍ／Ｌ〜約３００ｍＯｓｍ／Ｌ、または約２８５ｍＯｓｍ／Ｌ〜約２９０ｍＯｓｍ／Ｌの容量オスモル濃度を示す。   In aspects of this embodiment, the hydrogel composition includes, for example, about 100 mOsm / L, about 150 mOsm / L, about 200 mOsm / L, about 250 mOsm / L, about 300 mOsm / L, about 350 mOsm / L, about 400 mOsm / L, about Osmolarity of 450 mOsm / L or about 500 mOsm / L is indicated. In other aspects of this embodiment, the hydrogel composition comprises, for example, at least 100 mOsm / L, at least 150 mOsm / L, at least 200 mOsm / L, at least 250 mOsm / L, at least 300 mOsm / L, at least 350 mOsm / L, at least 400 mOsm / L. An osmolarity of at least 450 mOsm / L, or at least 500 mOsm / L. In still other aspects of this embodiment, the hydrogel composition may be, for example, up to 100 mOsm / L, up to 150 mOsm / L, up to 200 mOsm / L, up to 250 mOsm / L, up to 300 mOsm / L, up to 350 mOsm / L, up to 400 mOsm. Osmolality of / L, up to 450 mOsm / L, or up to 500 mOsm / L. In still other aspects of this embodiment, the hydrogel composition comprises, for example, about 100 mOsm / L to about 500 mOsm / L, about 200 mOsm / L to about 500 mOsm / L, about 200 mOsm / L to about 400 mOsm / L, about 300 mOsm / L. L to about 400 mOsm / L, about 270 mOsm / L to about 390 mOsm / L, about 225 mOsm / L to about 350 mOsm / L, about 250 mOsm / L to about 325 mOsm / L, about 275 mOsm / L to about 300 mOsm / L, or about 285 mOsm / L Osmolality from / L to about 290 mOsm / L.

本明細書の態様は、一部において、実質的な安定性を示す、本明細書に開示されるヒドロゲル組成物を提供する。本明細書中で使用されるとき、本明細書に開示されるヒドロゲル組成物について言及するとき、用語「安定性」または「安定な」は、個人への投与前の貯蔵中にいかなる実質的なまたは顕著な程度まで低下し、分解し、または壊れる傾向もない組成物を指す。本明細書中で使用されるとき、用語「実質的な熱安定性」、「実質的に熱安定な」、「オートクレーブ安定な」、または「蒸気滅菌安定な」は、本明細書に開示される熱処理にかけられたときに実質的に安定である、本明細書に開示されるヒドロゲル組成物を指す。   Aspects herein provide, in part, hydrogel compositions disclosed herein that exhibit substantial stability. As used herein, when referring to the hydrogel compositions disclosed herein, the term “stability” or “stable” is used to describe any substantial amount during storage prior to administration to an individual. Or refers to a composition that does not tend to degrade, degrade, or break to a significant degree. As used herein, the terms “substantially heat stable”, “substantially heat stable”, “autoclave stable”, or “steam sterilization stable” are disclosed herein. Refers to a hydrogel composition disclosed herein that is substantially stable when subjected to a heat treatment.

本明細書に開示されるヒドロゲル組成物の安定性は、例えば、常圧でのまたは圧力下での（例えば、オートクレーブ）蒸気滅菌等の、熱処理に、ヒドロゲル組成物をかけることにより決定され得る。好ましくは、その熱処理は、約１分〜約１０分間にわたって少なくとも約１００℃の温度で行われる。本明細書に開示されるヒドロゲル組成物の実質的な安定性は、１）滅菌後の本明細書に開示されるヒドロゲル組成物の押出力の変化（ΔＦ）を決定することにより評価することができ、ここで（特定の添加剤を伴うヒドロゲル組成物の押出力）−（添加剤の添加を伴わないヒドロゲル組成物の押出力）により計算されるとき、２Ｎ未満の押出力の変化は、実質的に安定なヒドロゲル組成物の表示であり、および／または２）滅菌後の本明細書に開示されるヒドロゲル組成物の流体力学的特性の変化を決定することにより評価することができ、ここで（添加剤を伴うゲル製剤のタンジェントδ １Ｈｚ）−（添加剤を伴わないゲル製剤のタンジェントδ １Ｈｚ）により計算されるとき、０．１未満のタンジェントδ １Ｈｚの変化は実質的に安定なヒドロゲル組成物の表示である。よって、本明細書に開示される実質的に安定なヒドロゲル組成物は、以下の特徴：均一性、押出力、粘着性、ヒアルロナン濃度、薬剤（単数または複数）濃度、容量オスモル濃度、ｐＨ、または熱処理前のヒドロゲルに所望される他の流体力学的特徴のうちの１つ以上を滅菌後に保持する。   The stability of the hydrogel compositions disclosed herein can be determined by subjecting the hydrogel composition to a heat treatment, such as, for example, steam sterilization at normal pressure or under pressure (eg, autoclave). Preferably, the heat treatment is performed at a temperature of at least about 100 ° C. for about 1 minute to about 10 minutes. The substantial stability of the hydrogel compositions disclosed herein can be evaluated by 1) determining the change in push force (ΔF) of the hydrogel compositions disclosed herein after sterilization. Where, when calculated by (push out of hydrogel composition with specific additive)-(pull out of hydrogel composition without addition of additive) And / or 2) can be evaluated by determining the change in hydrodynamic properties of the hydrogel composition disclosed herein after sterilization, wherein: Change in tangent δ 1 Hz of less than 0.1 is substantially stable when calculated by (tangent δ 1 Hz of gel formulation with additive) − (tangent δ 1 Hz of gel formulation without additive) It is a display of the hydrogel composition. Thus, the substantially stable hydrogel compositions disclosed herein have the following characteristics: uniformity, force, adhesiveness, hyaluronan concentration, drug (s) concentration, osmolarity, pH, or One or more of the other hydrodynamic characteristics desired for the hydrogel prior to heat treatment are retained after sterilization.

１つの実施形態において、グリコサミノグリカン重合体および本明細書に開示される少なくとも１つの薬剤を含むヒドロゲル組成物は、本明細書に開示される所望のヒドロゲル特性を維持する熱処理を用いてプロセスされる。この実施形態の態様において、グリコサミノグリカン重合体および本明細書に開示される少なくとも１つの薬剤を含むヒドロゲル組成物は、例えば、約１００℃、約１０５℃、約１１０℃、約１１５℃、約１２０℃、約１２５℃、または約１３０℃の熱処理を用いてプロセスされる。この実施形態の他の態様において、グリコサミノグリカン重合体および本明細書に開示される少なくとも１つの薬剤を含むヒドロゲル組成物は、例えば、少なくとも１００℃、少なくとも１０５℃、少なくとも１１０℃、少なくとも１１５℃、少なくとも１２０℃、少なくとも１２５℃、または少なくとも１３０℃の熱処理を用いてプロセスされる。この実施形態のさらに他の態様において、グリコサミノグリカン重合体および本明細書に開示される少なくとも１つの薬剤を含むヒドロゲル組成物は、例えば、約１００℃〜約１２０℃、約１００℃〜約１２５℃、約１００℃〜約１３０℃、約１００℃〜約１３５℃、約１１０℃〜約１２０℃、約１１０℃〜約１２５℃、約１１０℃〜約１３０℃、約１１０℃〜約１３５℃、約１２０℃〜約１２５℃、約１２０℃〜約１３０℃、約１２０℃〜約１３５℃、約１２５℃〜約１３０℃、または約１２５℃〜約１３５℃の熱処理を用いてプロセスされる。   In one embodiment, a hydrogel composition comprising a glycosaminoglycan polymer and at least one agent disclosed herein is processed using a heat treatment that maintains the desired hydrogel properties disclosed herein. Is done. In aspects of this embodiment, a hydrogel composition comprising a glycosaminoglycan polymer and at least one agent disclosed herein can be, for example, about 100 ° C, about 105 ° C, about 110 ° C, about 115 ° C, Processed using heat treatment at about 120 ° C, about 125 ° C, or about 130 ° C. In another aspect of this embodiment, the hydrogel composition comprising a glycosaminoglycan polymer and at least one agent disclosed herein is, for example, at least 100 ° C., at least 105 ° C., at least 110 ° C., at least 115 Processed using a heat treatment of at least 120 ° C, at least 125 ° C, or at least 130 ° C. In yet another aspect of this embodiment, the hydrogel composition comprising a glycosaminoglycan polymer and at least one agent disclosed herein is, for example, from about 100 ° C to about 120 ° C, from about 100 ° C to about 100 ° C. 125 ° C, about 100 ° C to about 130 ° C, about 100 ° C to about 135 ° C, about 110 ° C to about 120 ° C, about 110 ° C to about 125 ° C, about 110 ° C to about 130 ° C, about 110 ° C to about 135 ° C About 120 ° C to about 125 ° C, about 120 ° C to about 130 ° C, about 120 ° C to about 135 ° C, about 125 ° C to about 130 ° C, or about 125 ° C to about 135 ° C.

本明細書に開示されるヒドロゲル組成物の長期安定性は、ヒドロゲル組成物を、例えば、約４５℃環境での約６０日間の保存等の熱処理に供することにより決定され得る。本明細書に開示されるヒドロゲル組成物の長期安定性は、１）４５℃熱処理後のヒドロゲル組成物の透明度および色を評価することにより評価することができ、ここで、透明なおよび無色のヒドロゲル組成物は、実質的に安定なヒドロゲル組成物の表示であり、２）４５℃熱処理後の本明細書に開示されるヒドロゲル組成物の押出力の変化（ΔＦ）を決定することにより評価することができ、ここで、（４５℃熱処理前の特定の添加剤を伴うヒドロゲル組成物の押出力）−（４５℃熱処理後の特定の添加剤を伴うヒドロゲル組成物の押出力）により計算されるとき、２Ｎ未満の押出力の変化は、実質的に安定なヒドロゲル組成物の表示であり、および／または３）滅菌後の本明細書に開示されるヒドロゲル組成物の流体力学的特性の変化を決定することにより評価することができ、ここで、（４５℃熱処理前の特定の添加剤を伴うゲル形成のタンジェントδ １Ｈｚ）−（４５℃熱処理後の特定の添加剤を伴うゲル形成のタンジェントδ １Ｈｚ）により計算されるとき、０．１未満のタンジェントδ １Ｈｚの変化は、実質的に安定なヒドロゲル組成物の表示である。よって、本明細書に開示されるヒドロゲル組成物の長期安定性は、４５℃熱処理後の以下の特徴：透明度（透明性および半透明性）、均一性、および粘着性のうちの１つ以上の保持により評価される。   The long-term stability of the hydrogel compositions disclosed herein can be determined by subjecting the hydrogel composition to a heat treatment, such as storage for about 60 days in an environment of about 45 ° C. The long-term stability of the hydrogel composition disclosed herein can be evaluated by 1) evaluating the transparency and color of the hydrogel composition after heat treatment at 45 ° C., where the transparent and colorless hydrogel The composition is a representation of a substantially stable hydrogel composition, and 2) is evaluated by determining the change in push force (ΔF) of the hydrogel composition disclosed herein after 45 ° C. heat treatment. Where (push-out of hydrogel composition with specific additive before 45 ° C. heat treatment) − (push-out of hydrogel composition with specific additive after 45 ° C. heat treatment) A change in pushing force of less than 2N is an indication of a substantially stable hydrogel composition and / or 3) determines a change in hydrodynamic properties of the hydrogel composition disclosed herein after sterilization. Where (tangent of gel formation with specific additive before 45 ° C. heat treatment δ 1 Hz) − (tangent of gel formation with specific additive after 45 ° C. heat treatment δ 1 Hz A change in tangent δ 1 Hz of less than 0.1 is an indication of a substantially stable hydrogel composition. Thus, the long-term stability of the hydrogel composition disclosed herein is one or more of the following characteristics after heat treatment at 45 ° C .: transparency (transparency and translucency), uniformity, and tackiness Evaluated by retention.

この実施形態の態様において、ヒドロゲル組成物は、例えば、約３ヶ月、約６ヶ月、約９ヶ月、約１２ヶ月、約１５ヶ月、約１８ヶ月、約２１ヶ月、約２４ヶ月、約２７ヶ月、約３０ヶ月、約３３ヶ月、または約３６ヶ月間、室温で実質的に安定である。この実施形態の他の態様において、ヒドロゲル組成物は、例えば、少なくとも３ヶ月、少なくとも６ヶ月、少なくとも９ヶ月、少なくとも１２ヶ月、少なくとも１５ヶ月、少なくとも１８ヶ月、少なくとも２１ヶ月、少なくとも２４ヶ月、少なくとも２７ヶ月、少なくとも３０ヶ月、少なくとも３３ヶ月、または少なくとも３６ヶ月間、室温で実質的に安定である。この実施形態の他の態様において、ヒドロゲル組成物は、例えば、約３ヶ月〜約１２ヶ月、約３ヶ月〜約１８ヶ月、約３ヶ月〜約２４ヶ月、約３ヶ月〜約３０ヶ月、約３ヶ月〜約３６ヶ月、約６ヶ月〜約１２ヶ月、約６ヶ月〜約１８ヶ月、約６ヶ月〜約２４ヶ月、約６ヶ月〜約３０ヶ月、約６ヶ月〜約３６ヶ月、約９ヶ月〜約１２ヶ月、約９ヶ月〜約１８ヶ月、約９ヶ月〜約２４ヶ月、約９ヶ月〜約３０ヶ月、約９ヶ月〜約３６ヶ月、約１２ヶ月〜約１８ヶ月、約１２ヶ月〜約２４ヶ月、約１２ヶ月〜約３０ヶ月、約１２ヶ月〜約３６ヶ月、約１８ヶ月〜約２４ヶ月、約１８ヶ月〜約３０ヶ月、または約１８ヶ月〜約３６ヶ月間、室温で実質的に安定である。   In aspects of this embodiment, the hydrogel composition can be, for example, about 3 months, about 6 months, about 9 months, about 12 months, about 15 months, about 18 months, about 21 months, about 24 months, about 27 months, It is substantially stable at room temperature for about 30 months, about 33 months, or about 36 months. In other aspects of this embodiment, the hydrogel composition can be, for example, at least 3 months, at least 6 months, at least 9 months, at least 12 months, at least 15 months, at least 18 months, at least 21 months, at least 24 months, at least 27 months. It is substantially stable at room temperature for months, at least 30 months, at least 33 months, or at least 36 months. In other aspects of this embodiment, the hydrogel composition can be, for example, about 3 months to about 12 months, about 3 months to about 18 months, about 3 months to about 24 months, about 3 months to about 30 months, about 3 months. Months to about 36 months, about 6 months to about 12 months, about 6 months to about 18 months, about 6 months to about 24 months, about 6 months to about 30 months, about 6 months to about 36 months, about 9 months to About 12 months, about 9 months to about 18 months, about 9 months to about 24 months, about 9 months to about 30 months, about 9 months to about 36 months, about 12 months to about 18 months, about 12 months to about 24 Substantially stable at room temperature for about 12 months to about 30 months, about 12 months to about 36 months, about 18 months to about 24 months, about 18 months to about 30 months, or about 18 months to about 36 months It is.

本組成物は、非限定的に、緩衝液、防腐剤、等張化剤、塩、抗酸化物質、重量オスモル濃度調整剤、乳化剤、湿潤剤等を含む、非限定的に、他の薬学的に許容される成分を任意に含み得る。   The composition includes, but is not limited to, other pharmaceuticals, including but not limited to buffers, preservatives, isotonic agents, salts, antioxidants, osmolality adjusting agents, emulsifiers, wetting agents, and the like. Ingredients that are acceptable can be optionally included.

薬学的に許容される緩衝液は、結果として生じる調製物が薬学的に許容されるものであることを条件として、本明細書に開示されるヒドロゲル組成物を調製するために使用され得る緩衝液である。薬学的に許容される緩衝液の非限定的な例として、酢酸塩緩衝液、ホウ酸塩緩衝液、クエン酸塩緩衝液、中性緩衝食塩水、リン酸塩緩衝液、およびリン酸塩緩衝食塩水が挙げられる。薬学的に許容される緩衝液のいずれの濃度も、治療上有効量の活性成分がこの有効な濃度の緩衝液を用いて回収されるという条件で、本明細書に開示される薬学的組成物の製剤化において有用であり得る。生理学的に許容される緩衝液の濃度の非限定的な例は、約０．１ｍＭ〜約９００ｍＭの範囲内で生じる。薬学的に許容される緩衝液のｐＨは、結果として生じる調製物が薬学的に許容されるという条件で、調整され得る。必要に応じ、酸または塩基が薬学的組成物のｐＨを調整するために使用され得ることが理解される。いずれの緩衝されたｐＨレベルも、治療上有効量のマトリックス重合体活性成分がこの有効なｐＨレベルを用いて回収されるという条件で、薬学的組成物の製剤化において有用であり得る。生理学的に許容されるｐＨの非限定的な例は、約ｐＨ５．０〜約ｐＨ８．５の範囲内で生じる。例えば、本明細書に開示されるヒドロゲル組成物のｐＨは、約５．０〜約８．０、または約６．５〜約７．５、約７．０〜約７．４、もしくは約７．１〜約７．３であり得る。   Pharmaceutically acceptable buffers are buffers that can be used to prepare the hydrogel compositions disclosed herein, provided that the resulting preparation is pharmaceutically acceptable. It is. Non-limiting examples of pharmaceutically acceptable buffers include acetate buffer, borate buffer, citrate buffer, neutral buffered saline, phosphate buffer, and phosphate buffer Saline may be mentioned. The pharmaceutical compositions disclosed herein can be used at any concentration of the pharmaceutically acceptable buffer, provided that a therapeutically effective amount of the active ingredient is recovered using this effective concentration of buffer. May be useful in the formulation of Non-limiting examples of physiologically acceptable buffer concentrations occur within the range of about 0.1 mM to about 900 mM. The pH of the pharmaceutically acceptable buffer can be adjusted provided that the resulting preparation is pharmaceutically acceptable. It will be appreciated that acids or bases can be used to adjust the pH of the pharmaceutical composition, if desired. Any buffered pH level can be useful in formulating pharmaceutical compositions, provided that a therapeutically effective amount of the matrix polymer active ingredient is recovered using this effective pH level. Non-limiting examples of physiologically acceptable pH occur within the range of about pH 5.0 to about pH 8.5. For example, the pH of the hydrogel compositions disclosed herein can be from about 5.0 to about 8.0, or from about 6.5 to about 7.5, from about 7.0 to about 7.4, or from about 7 .1 to about 7.3.

薬学的に許容される防腐剤は、非限定的に、メタ重亜硫酸ナトリウム、チオ硫酸ナトリウム、アセチルシステイン、ブチル化ヒドロキシアニソール、およびブチル化ヒドロキシトルエンを含む。薬学的に許容される防腐剤は、非限定的に、塩化ベンザルコニウム、クロロブタノール、チメロサール、酢酸フェニル水銀、硝酸フェニル水銀、例えば、ＰＵＲＩＴＥ（登録商標）（Ａｌｌｅｒｇａｎ，Ｉｎｃ．Ｉｒｖｉｎｅ，ＣＡ）等の安定化オキシクロロ組成物、ならびに例えば、ＤＴＰＡまたはＤＴＰＡ‐ビスアミド、ＤＴＰＡカルシウム、およびＣａＮａＤＴＰＡ‐ビスアミド等のキレート剤を含む。   Pharmaceutically acceptable preservatives include, but are not limited to, sodium metabisulfite, sodium thiosulfate, acetylcysteine, butylated hydroxyanisole, and butylated hydroxytoluene. Pharmaceutically acceptable preservatives include, but are not limited to, benzalkonium chloride, chlorobutanol, thimerosal, phenylmercuric acetate, phenylmercuric nitrate, such as PURITE® (Allergan, Inc. Irvine, CA), etc. And chelators such as, for example, DTPA or DTPA-bisamide, DTPA calcium, and CaNaDTPA-bisamide.

本明細書に開示されるヒドロゲル組成物において有用な薬学的に許容される等張化剤は、非限定的に、例えば、塩化ナトリウムおよび塩化カリウム等の塩、ならびにグリセリンを含む。組成物は、塩として提供されてもよく、塩酸、硫酸、酢酸、乳酸、酒石酸、リンゴ酸、コハク酸等を含むが、これらに限定されない、多くの酸と共に形成され得る。塩は、その対応する遊離塩基形よりも水性または他のプロトン溶媒中で可溶性である傾向がある。これらのおよび薬理学分野において既知の他の物質が本明細書に開示される薬学的成物中に含まれ得ることが理解される。薬理学的に許容される成分の他の非限定的な例は、Ａｎｓｅｌ，上記，（１９９９）、Ｇｅｎｎａｒｏ，上記，（２０００）、Ｈａｒｄｍａｎ，上記，（２００１）、およびＲｏｗｅ，上記，（２００３）に見出すことができ、それらの各々は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。   Pharmaceutically acceptable tonicity agents useful in the hydrogel compositions disclosed herein include, but are not limited to, for example, salts such as sodium chloride and potassium chloride, and glycerin. The composition may be provided as a salt and can be formed with many acids, including but not limited to hydrochloric acid, sulfuric acid, acetic acid, lactic acid, tartaric acid, malic acid, succinic acid, and the like. Salts tend to be more soluble in aqueous or other protic solvents than their corresponding free base forms. It is understood that these and other substances known in the pharmacology field can be included in the pharmaceutical compositions disclosed herein. Other non-limiting examples of pharmacologically acceptable ingredients include Ansel, supra, (1999), Gennaro, supra, (2000), Hardman, supra, (2001), and Rowe, supra, (2003). Each of which is incorporated herein by reference in its entirety.

本明細書の態様は、一部において、本明細書に開示されるヒドロゲル組成物を投与することによって個人の軟組織状態を治療する方法を提供する。本明細書中で使用されるとき、用語「治療する」は、軟組織の欠点、欠損、疾患、および／または障害を特徴とする軟組織状態の美容的または臨床的症状を個人において低下させることもしくは消去すること、または軟組織の欠点、欠損、疾患、および／もしくは障害を特徴とする状態の美容的もしくは臨床的症状の開始を個人において遅らせることもしくは妨げることを指す。例えば、用語「治療する」は、軟組織の欠損、疾患、および／または障害を特徴とする状態の症状を例えば、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、または少なくとも１００％低減することを意味し得る。軟組織の欠損、疾患、および／または障害を特徴とする状態の治療における本明細書に開示されるヒドロゲル組成物の有効性は、その状態に関連する１つ以上の美容的、臨床的症状、および／または生理学的指標を観察することにより決定され得る。軟組織の欠損、疾患、および／または障害における改善は、同時療法の必要性が低減されたことによってもまた示され得る。当業者であれば、特定の軟組織の欠損、疾患、および／または障害に関連する適切な症状または指標を認識し、また、ある個人が本明細書に開示される化合物または組成物での治療の候補であるかどうかを決定する方法を認識するであろう。   Aspects herein provide, in part, a method of treating an individual's soft tissue condition by administering a hydrogel composition disclosed herein. As used herein, the term “treat” reduces or eliminates a cosmetic or clinical symptom of a soft tissue condition characterized by soft tissue defects, defects, diseases, and / or disorders in an individual. Or delaying or preventing the onset of cosmetic or clinical symptoms in a condition characterized by soft tissue defects, defects, diseases, and / or disorders. For example, the term “treat” refers to a symptom of a condition characterized by a soft tissue defect, disease, and / or disorder, for example, at least 20%, at least 30%, at least 40%, at least 50%, at least 60%, at least It can mean a reduction of 70%, at least 80%, at least 90%, or at least 100%. The effectiveness of the hydrogel compositions disclosed herein in the treatment of conditions characterized by soft tissue defects, diseases and / or disorders is one or more cosmetic, clinical symptoms associated with the condition, and It can be determined by observing physiological indicators. Improvements in soft tissue defects, diseases, and / or disorders can also be shown by reduced need for concurrent therapy. Those skilled in the art will recognize appropriate symptoms or indicators associated with specific soft tissue defects, diseases, and / or disorders, and certain individuals may be treated with the compounds or compositions disclosed herein. You will recognize how to determine if it is a candidate.

本発明に従うヒドロゲル組成物は、個人に投与される。個人は、典型的に、いずれの年齢、性別、または人種のヒトでもある。典型的に、軟組織状態を治療するための従来の処置の候補であるいずれの個人も本明細書に開示される方法の候補である。老化皮膚の徴候を有する対象は成人であるが、早期老化または治療に好適な他の皮膚状態（例えば、傷跡）を有する対象もまた、本明細書に開示されるヒドロゲル組成物で治療され得る。さらに、本開示のヒドロゲル組成物および方法は、現在の軟組織移植技術では技術的に不可能であり得る、または審美的に許容され得ない、体の部分または領域の少しの／中程度の拡張、形の変化、または輪郭の変化を求める個人に適用し得る。手術前評価は、その処置に関連する全ての危険性および利点を開示する徹底的なインフォームドコンセントに加えて、ルーチンの履歴および身体検査を典型的に含む。   The hydrogel composition according to the present invention is administered to an individual. An individual is typically a human of any age, gender, or race. Typically, any individual who is a candidate for conventional treatment for treating a soft tissue condition is a candidate for the methods disclosed herein. While subjects with signs of aging skin are adults, subjects with premature aging or other skin conditions suitable for treatment (eg, scars) can also be treated with the hydrogel compositions disclosed herein. In addition, the hydrogel compositions and methods of the present disclosure provide for slight / moderate expansion of body parts or regions that may be technically impossible or aesthetically unacceptable with current soft tissue implantation techniques, It can be applied to individuals who seek shape changes or contour changes. Preoperative assessments typically include routine history and physical examination, in addition to exhaustive informed consent that discloses all the risks and benefits associated with the procedure.

本明細書に開示されるヒドロゲル組成物および方法は、軟組織状態の治療において有用である。軟組織状態は、非限定的に、軟組織の欠点、欠損、疾患、および／または障害を含む。軟組織状態の非限定的な例は、例えば、胸の増大、胸の再構築、***固定、小***症、胸部発育不全、ポーランド症候群、カプセルの収縮および／または破裂等の移植合併症に起因する欠陥等の、胸の欠点、欠損、疾患、および／または障害、例えば、顔面の増大、顔面の再構築、メソセラピー、パリー‐ロンバーグ症候群、深在性エリテマトーデス、皮膚の穴、傷跡、こけた頬、薄い唇、鼻の欠点もしくは欠損、後眼窩の欠点もしくは欠損、眉間の線、鼻唇の線、口周囲の線、および／もしくはほうれい線等の顔のひだ、線、および／もしくはしわ、および／または顔面の他の輪郭の欠陥もしくは欠点等の、顔の欠点、欠損、疾患、または障害、首の欠点、欠損、疾患、または障害、皮膚の欠点、欠損、疾患、および／または障害、例えば、上腕、前腕、手、肩、背中、腹部を含む胴、臀部、腿、ふくらはぎを含む下腿、足底皮下脂肪を含む足、眼、生殖器、または他の体の部分、領域、もしくは範囲の増大または再構築等の、他の軟組織の欠点、欠損、疾患、および／または障害、またはこれらの体の部分、領域、もしくは範囲に影響する疾患または障害、失禁、大便失禁、他の形態の失調、および胃食道逆流疾患（ＧＥＲＤ）を含む。本明細書中で使用されるとき、用語「メソセラピー」は、上皮、真皮上皮の接合部、および／または真皮に小さな多数の液滴として投与される薬剤の上皮内、皮内、および／または皮下注入を含む、皮膚の非外科的美容処置技術を指す。   The hydrogel compositions and methods disclosed herein are useful in the treatment of soft tissue conditions. Soft tissue conditions include, but are not limited to, soft tissue defects, defects, diseases, and / or disorders. Non-limiting examples of soft tissue conditions result from transplant complications such as breast enlargement, breast remodeling, breast fixation, small breast disease, breast development failure, Polish syndrome, capsule contraction and / or rupture Chest defects, defects, diseases and / or disorders, such as defects, such as facial enlargement, facial reconstruction, mesotherapy, Parry-Lomberg syndrome, deep lupus erythematosus, skin holes, scars, burnt cheeks, Facial folds, lines, and / or wrinkles such as thin lips, nose defects or defects, retroorbital defects or defects, eyebrow line, nose lip line, perioral line, and / or fistula line, and Facial defects, defects, diseases or disorders, neck defects, defects, diseases or disorders, skin defects, defects, diseases and / or disorders, such as defects or defects in other contours of the face, eg An increase in upper arm, forearm, hand, shoulder, back, torso including abdomen, buttocks, thighs, lower thigh including calf, foot including plantar subcutaneous fat, eyes, genitals, or other body parts, regions or areas or Other soft tissue defects, defects, diseases, and / or disorders, such as reconstruction, or diseases or disorders that affect these body parts, regions, or ranges, incontinence, fecal incontinence, other forms of ataxia, and Includes gastroesophageal reflux disease (GERD). As used herein, the term “mesotherapy” refers to the epithelium, the junction of the dermal epithelium, and / or the intraepithelial, intradermal, and / or subcutaneous of a drug administered as a large number of small droplets to the dermis. Refers to non-surgical cosmetic treatment techniques for the skin, including injection.

本明細書に開示される方法のいずれかで使用されるヒドロゲル組成物の量は、所望される変化および／または改善、所望される軟組織状態の症状の低下および／または消去、個人および／または医師により所望される臨床的および／または美容的効果、ならびに治療される体の部分または領域に基づいて典型的に決定されるであろう。組成物投与の有効性は、以下の臨床的および／または美容的測定：軟組織の形の変化および／または改善、軟組織の大きさの変化および／または改善、軟組織の輪郭の変化および／または改善、組織機能の変化および／または改善、組織内殖の支持および／または新規コラーゲン沈着、組成物の移植維持、患者の満足および／または生活の質の改善、ならびに埋没可能な外来物質の使用の減少のうちの１つ以上により表され得る。   The amount of hydrogel composition used in any of the methods disclosed herein may vary as desired and / or ameliorate, reduce and / or eliminate symptoms of the desired soft tissue condition, individuals and / or physicians. Will typically be determined based on the desired clinical and / or cosmetic effect and the body part or region to be treated. The effectiveness of the composition administration may include the following clinical and / or cosmetic measurements: changes and / or improvements in soft tissue shape, changes and / or improvements in soft tissue size, changes and / or improvements in soft tissue contours, Change and / or improvement of tissue function, support of tissue ingrowth and / or new collagen deposition, maintenance of transplantation of the composition, improvement of patient satisfaction and / or quality of life, and reduction of use of implantable foreign substances It can be represented by one or more of them.

顔面の軟組織の治療におけるその組成物および方法の有効性は、以下の臨床的および／または美容的測定：唇、頬、もしくは眼領域の大きさ、形、および／または輪郭の増大のような顔面の造作の大きさ、形、および／または輪郭の増大、唇、頬、もしくは眼領域の形の大きさ、形、および／または輪郭の変化のような顔面の造作の大きさ、形、および／または輪郭の変化、皮膚のしわ、ひだ、もしくは線の減少または消去、皮膚のしわ、ひだ、または線に対する抵抗性、皮膚の水分補給、皮膚の弾力性の増加、皮膚の粗さの低下または消去、皮膚緊縮性の増加および／または改善、ストレッチマークの減少または消去、皮膚の色調、つや、明るさ、および／もしくは輝きの増加ならびに／または改善、皮膚の色の増加および／または改善、皮膚の青白さの低下または消去、組成物の移植維持、副作用の減少、患者の満足および／または生活の質の改善のうちの１つ以上により表され得る。   The effectiveness of the composition and method in the treatment of facial soft tissue may include the following clinical and / or cosmetic measurements: facial, such as increased size, shape, and / or contour of the lips, cheeks, or eye area Facial feature size, shape, and / or increase in facial feature size, shape, and / or contour change, lip, cheek, or eye region shape size, shape, and / or contour change Or changes in contours, reduction or elimination of skin wrinkles, folds or lines, resistance to skin wrinkles, folds or lines, skin hydration, increased skin elasticity, reduction or elimination of skin roughness Increased and / or improved skin stringency, decreased or eliminated stretch marks, increased and / or improved skin tone, gloss, brightness, and / or shine, increased and / or improved skin color, Reduction or deletion of the paleness of the peel, transplant maintenance of the composition, reduction of side effects may be represented by one or more of the improvement in the quality of patient satisfaction and / or life.

なおも別の例として、尿失禁処置について、括約筋支持のための組成物および方法の有効性は、以下の臨床的測定：失禁頻度の減少、移植維持、患者の満足および／または生活の質の改善、ならびに埋没可能な外来性充填剤の使用の減少のうちの１つ以上により表され得る。   As yet another example, for the treatment of urinary incontinence, the effectiveness of the compositions and methods for sphincter support is measured by the following clinical measures: reduced incontinence frequency, transplant maintenance, patient satisfaction and / or quality of life It can be represented by one or more of improvements, as well as a decrease in the use of implantable exogenous fillers.

この実施形態の態様において、投与されるヒドロゲル組成物の量は、例えば、約０．０１ｇ、約０．０５ｇ、約０．１ｇ、約０．５ｇ、約１ｇ、約５ｇ、約１０ｇ、約２０ｇ、約３０ｇ、約４０ｇ、約５０ｇ、約６０ｇ、約７０ｇ、約８０ｇ、約９０ｇ、約１００ｇ、約１５０ｇ、または約２００ｇである。この実施形態の他の態様において、投与されるヒドロゲル組成物の量は、例えば、約０．０１ｇ〜約０．１ｇ、約０．１ｇ〜約１ｇ、約１ｇ〜約１０ｇ、約１０ｇ〜約１００ｇ、または約５０ｇ〜約２００ｇである。この実施形態のなおも他の態様において、投与されるヒドロゲル組成物の量は、例えば、約０．０１ｍＬ、約０．０５ｍＬ、約０．１ｍＬ、約０．５ｍＬ、約１ｍＬ、約５ｍＬ、約１０ｍＬ、約２０ｍＬ、約３０ｍＬ、約４０ｍＬ、約５０ｍＬ、約６０ｍＬ、約７０ｍＬ、約８０ｍＬ、約９０ｍＬ、約１００ｍＬ、約１５０ｍＬ、または約２００ｍＬである。この実施形態の他の態様において、投与されるヒドロゲル組成物の量は、例えば、約０．０１ｍＬ〜約０．１ｍＬ、約０．１ｍＬ〜約１ｍＬ、約１ｍＬ〜約１０ｍＬ、約１０ｍＬ〜約１００ｍＬ、または約５０ｍＬ〜約２００ｍＬである。   In aspects of this embodiment, the amount of hydrogel composition administered is, for example, about 0.01 g, about 0.05 g, about 0.1 g, about 0.5 g, about 1 g, about 5 g, about 10 g, about 20 g. , About 30 g, about 40 g, about 50 g, about 60 g, about 70 g, about 80 g, about 90 g, about 100 g, about 150 g, or about 200 g. In other aspects of this embodiment, the amount of hydrogel composition administered is, for example, from about 0.01 g to about 0.1 g, from about 0.1 g to about 1 g, from about 1 g to about 10 g, from about 10 g to about 100 g. Or about 50 g to about 200 g. In still other aspects of this embodiment, the amount of hydrogel composition administered is, for example, about 0.01 mL, about 0.05 mL, about 0.1 mL, about 0.5 mL, about 1 mL, about 5 mL, about 10 mL, about 20 mL, about 30 mL, about 40 mL, about 50 mL, about 60 mL, about 70 mL, about 80 mL, about 90 mL, about 100 mL, about 150 mL, or about 200 mL. In other aspects of this embodiment, the amount of hydrogel composition administered is, for example, from about 0.01 mL to about 0.1 mL, from about 0.1 mL to about 1 mL, from about 1 mL to about 10 mL, from about 10 mL to about 100 mL. Or about 50 mL to about 200 mL.

治療期間は、個人および／または医師により所望される美容的および／または臨床的効果、ならびに治療される体の部分または領域に基づいて典型的に決定されるであろう。この実施形態の態様において、本明細書に開示されるヒドロゲル組成物の投与は、例えば、約６ヶ月、約７ヶ月、約８ヶ月、約９ヶ月、約１０ヶ月、約１１ヶ月、約１２ヶ月、約１３ヶ月、約１４ヶ月、約１５ヶ月、約１８ヶ月、または約２４ヶ月間、軟組織状態を治療し得る。この実施形態の他の態様において、本明細書に開示されるヒドロゲル組成物の投与は、例えば、少なくとも６ヶ月、少なくとも７ヶ月、少なくとも８ヶ月、少なくとも９ヶ月、少なくとも１０ヶ月、少なくとも１１ヶ月、少なくとも１２ヶ月、少なくとも１３ヶ月、少なくとも１４ヶ月、少なくとも１５ヶ月、少なくとも１８ヶ月、または少なくとも２４ヶ月間、軟組織状態を治療し得る。この実施形態のさらなる態様において、本明細書に開示されるヒドロゲル組成物の投与は、例えば、約６ヶ月〜約１２ヶ月、約６ヶ月〜約１５ヶ月、約６ヶ月〜約１８ヶ月、約６ヶ月〜約２１ヶ月、約６ヶ月〜約２４ヶ月、約９ヶ月〜約１２ヶ月、約９ヶ月〜約１５ヶ月、約９ヶ月〜約１８ヶ月、約９ヶ月〜約２１ヶ月、約６ヶ月〜約２４ヶ月、約１２ヶ月〜約１５ヶ月、約１２ヶ月〜約１８ヶ月、約１２ヶ月〜約２１ヶ月、約１２ヶ月〜約２４ヶ月、約１５ヶ月〜約１８ヶ月、約１５ヶ月〜約２１ヶ月、約１５ヶ月〜約２４ヶ月、約１８ヶ月〜約２１ヶ月、約１８ヶ月〜約２４ヶ月、または約２１ヶ月〜約２４ヶ月間、軟組織状態を治療し得る。   The duration of treatment will typically be determined based on the cosmetic and / or clinical effects desired by the individual and / or physician and the body part or region to be treated. In aspects of this embodiment, administration of the hydrogel composition disclosed herein can be, for example, about 6 months, about 7 months, about 8 months, about 9 months, about 10 months, about 11 months, about 12 months. The soft tissue condition may be treated for about 13 months, about 14 months, about 15 months, about 18 months, or about 24 months. In other aspects of this embodiment, administration of the hydrogel compositions disclosed herein can be, for example, at least 6 months, at least 7 months, at least 8 months, at least 9 months, at least 10 months, at least 11 months, at least The soft tissue condition may be treated for 12 months, at least 13 months, at least 14 months, at least 15 months, at least 18 months, or at least 24 months. In a further aspect of this embodiment, administration of the hydrogel composition disclosed herein can be, for example, from about 6 months to about 12 months, from about 6 months to about 15 months, from about 6 months to about 18 months, about 6 months. Months to about 21 months, about 6 months to about 24 months, about 9 months to about 12 months, about 9 months to about 15 months, about 9 months to about 18 months, about 9 months to about 21 months, about 6 months to about About 24 months, about 12 months to about 15 months, about 12 months to about 18 months, about 12 months to about 21 months, about 12 months to about 24 months, about 15 months to about 18 months, about 15 months to about 21 The soft tissue condition may be treated for about 15 months to about 24 months, about 18 months to about 21 months, about 18 months to about 24 months, or about 21 months to about 24 months.

本明細書の態様は、一部分において、本明細書に開示されるヒドロゲル組成物の投与を提供する。本明細書中で使用されるとき、用語「投与」は、臨床的に、治療的に、または実験的に有益な結果をもたらす可能性のある、本明細書に開示される組成物を個人に提供するいずれの送達機構をも意味する。個人に組成物を投与するために使用される実際の送達機構は、非限定的に、皮膚状態の型、皮膚状態の位置、皮膚状態の原因、皮膚状態の重篤さ、所望される軽減の程度、所望される軽減の期間、使用される特定の組成物、使用される特定の組成物の***速度、使用される特定の組成物の薬力学、使用される特定の組成物中に含まれる他の化合物の性質、特定の投与経路、例えば、年齢、体重、一般的な健康等の、個人の特定の特徴、履歴、および危険因子、またはそれらの組み合わせを含む要因を考慮に入れることにより当業者に決定され得る。この実施形態の一態様において、本明細書に開示される組成物は、注入により個人の皮膚領域に投与される。   The aspects herein provide, in part, for administration of the hydrogel compositions disclosed herein. As used herein, the term “administration” refers to an individual with a composition disclosed herein that may produce clinically, therapeutically, or experimentally beneficial results. Any delivery mechanism provided is meant. The actual delivery mechanism used to administer the composition to the individual includes, but is not limited to, the type of skin condition, location of skin condition, cause of skin condition, severity of skin condition, desired mitigation Included in the degree, the desired duration of relief, the particular composition used, the excretion rate of the particular composition used, the pharmacodynamics of the particular composition used, the particular composition used This may be done by taking into account factors including the characteristics of other compounds, specific routes of administration, such as individual characteristics, history, and risk factors, or combinations thereof, such as age, weight, general health, etc. It can be decided by the trader. In one aspect of this embodiment, the compositions disclosed herein are administered to an individual's skin area by injection.

個々の患者へのヒドロゲル組成物の投与経路は、個人および／または医師により所望される美容的および／または臨床的効果、ならびに治療される体の部分または領域に基づいて典型的に決定されるであろう。本明細書に開示される組成物は、非限定的に、針を伴うシリンジ、ピストル（例えば、油空圧ピストル）、カテーテル、局所的なもの、または直接的な外科的埋没によるものを含む当業者に既知のいずれの手段によっても投与され得る。本明細書に開示されるヒドロゲル組成物は、例えば、皮膚領域もしくは皮下組織領域等の、皮膚領域に投与され得る。例えば、本明細書に開示されるヒドロゲル組成物は、約０．２６ｍｍ〜約０．４ｍｍの直径および約４ｍｍ〜約１４ｍｍに及ぶ長さの針を利用して注入され得る。代替的に、その針は２１〜３２Ｇであり、かつ約４ｍｍ〜約７０ｍｍの長さを有し得る。好ましくは、針は、使い捨ての針である。針は、シリンジ、カテーテル、および／またはピストルと結合され得る。   The route of administration of the hydrogel composition to an individual patient will typically be determined based on the cosmetic and / or clinical effects desired by the individual and / or physician and the body part or region to be treated. I will. The compositions disclosed herein include, but are not limited to, syringes with needles, pistols (eg, hydraulic / pneumatic pistols), catheters, local ones, or those by direct surgical implantation. Administration can be by any means known to those skilled in the art. The hydrogel compositions disclosed herein can be administered to a skin region, such as, for example, a skin region or a subcutaneous tissue region. For example, the hydrogel compositions disclosed herein can be injected utilizing a needle having a diameter of about 0.26 mm to about 0.4 mm and a length ranging from about 4 mm to about 14 mm. Alternatively, the needle is 21-32G and may have a length of about 4 mm to about 70 mm. Preferably, the needle is a disposable needle. The needle can be coupled with a syringe, catheter, and / or pistol.

加えて、本明細書に開示される組成物は、一回または複数回にわたり、投与され得る。最終的に、使用されるタイミングは、良質医療の基準に従うであろう。例えば、本明細書に開示されるヒドロゲル組成物は、１回、または数日間もしくは数週間空けたセッションでいくつかのセッションにわたり投与され得る。例えば、個人は、１、２、３、４、５、６、もしくは７日毎、または１、２、３、もしくは４週間毎に本明細書に開示されるヒドロゲル組成物を投与され得る。個人への本明細書に開示されるヒドロゲル組成物の投与は、毎月または隔月の頻度であるか、または３、６、９、または１２ヶ月毎に投与され得る。   In addition, the compositions disclosed herein can be administered one or more times. Eventually, the timing used will follow good quality medical standards. For example, the hydrogel compositions disclosed herein can be administered over a number of sessions, once or in sessions that are separated by days or weeks. For example, an individual can be administered the hydrogel composition disclosed herein every 1, 2, 3, 4, 5, 6, or 7 days, or every 1, 2, 3, or 4 weeks. Administration of the hydrogel compositions disclosed herein to an individual can be on a monthly or bi-monthly basis, or can be administered every 3, 6, 9, or 12 months.

本明細書の態様は、一部分において、皮膚領域を提供する。本明細書中で使用されるとき、用語「皮膚領域」は、上皮皮膚接合部、ならびに表層真皮（乳頭状領域）および深層真皮（網状領域）を含む真皮を含む、皮膚の領域を指す。皮膚は、３つの主要な層である、防水性を提供し、かつ感染に対するバリアとして働く上皮、皮膚の付属物のための場所として働く真皮、および皮下組織（皮下脂肪層）から成る。上皮は、血管を含有せず、真皮からの拡散により養われる。上皮を作り上げる細胞の主な型は、ケラチノサイト、メラノサイト、ランゲルハンス細胞、およびメルケル細胞である。   Aspects herein provide, in part, a skin area. As used herein, the term “skin area” refers to the area of the skin, including the epithelial skin junction and the dermis including the superficial dermis (papillary area) and the deep dermis (reticular area). The skin consists of three main layers: the epithelium that provides waterproofness and acts as a barrier to infection, the dermis that serves as a place for skin appendages, and the subcutaneous tissue (subcutaneous fat layer). The epithelium contains no blood vessels and is nourished by diffusion from the dermis. The main types of cells that make up the epithelium are keratinocytes, melanocytes, Langerhans cells, and Merkel cells.

真皮は、結合組織からなる上皮の下の皮膚層であり、圧力および歪みから体を保護する。真皮は、基部膜により上皮にしっかりと結合される。それはまた、触覚および温覚を与える、多くの機械受容器／神経末端を抱えもする。それは、毛包、汗腺、皮脂腺、アポクリン汗腺、リンパ管、および血管を含有する。真皮中の血管は、栄養を提供し、かつその細胞自体からのおよび上皮の基底細胞層からの除去物を廃棄する。真皮は、構造的に２つの領域：乳頭状領域と呼ばれる上皮に近い表面領域、および網状領域として知られる深くより厚い領域に分けられる。   The dermis is the underlying skin layer of connective tissue that protects the body from pressure and strain. The dermis is firmly attached to the epithelium by the base membrane. It also carries many mechanoreceptors / nerve endings that provide tactile and thermal sensations. It contains hair follicles, sweat glands, sebaceous glands, apocrine sweat glands, lymphatic vessels, and blood vessels. The blood vessels in the dermis provide nutrients and discard removal from the cells themselves and from the epithelial basal cell layer. The dermis is structurally divided into two regions: a surface region near the epithelium called the papillary region, and a deeper and thicker region known as the reticular region.

乳頭状領域は、ゆるい乳輪状結合組織からなる。それは、上皮に向かって伸びる乳頭突起と呼ばれるその指のような突起部にちなんで名付けられる。乳頭突起は、上皮と互いに組み合わさる「でこぼこの」表面を真皮に提供し、その２つの皮膚層間結合を増強する。網状領域は、乳頭状領域中に深く存在し、かつ通常はるかにより厚い。それは、密集した不規則な結合組織からなり、それ全体を織りなすコラーゲン性の、弾力性の、および網状の繊維の密集からその名前が付けられている。これらのタンパク質繊維は、真皮の強度、拡張性、および弾力性の特性を提供する。髪の毛の根元、皮脂腺、汗腺、受容体、爪、および血管もまた、網状領域内に位置する。入れ墨のインクは、真皮中に保持される。妊娠による妊娠線もまた、真皮中に位置する。   The papillary region consists of loose areola-like connective tissue. It is named after its finger-like protrusion called the papillary process that extends towards the epithelium. The papillary process provides the dermis with a “bumpy” surface that combines with the epithelium and enhances the bond between the two skin layers. The reticular region is deep within the papillary region and is usually much thicker. It is named for the denseness of collagenous, elastic, and reticulated fibers that consist of dense, irregular connective tissue and interweave it. These protein fibers provide the strength, expandability, and elasticity properties of the dermis. The roots of the hair, sebaceous glands, sweat glands, receptors, nails and blood vessels are also located in the reticular region. The tattoo ink is retained in the dermis. The pregnancy line due to pregnancy is also located in the dermis.

皮下組織は、真皮の下に存在する。その目的は、下にある骨および筋肉に皮膚の皮膚領域を結合すること、および皮膚領域に血管および神経を供給することである。それは、ゆるい結合組織およびエラスチンからなる。主な細胞型は、線維芽細胞、マクロファージ、および脂肪細胞である（皮下組織は、体脂肪のうちの５０％を含有する）。脂肪は、体の詰め物および断熱材として働く。   The subcutaneous tissue exists below the dermis. Its purpose is to join the skin area of the skin to the underlying bones and muscles and to supply blood vessels and nerves to the skin area. It consists of loose connective tissue and elastin. The main cell types are fibroblasts, macrophages, and adipocytes (subcutaneous tissue contains 50% of body fat). Fat acts as body stuffing and insulation.

この実施形態の一態様において、本明細書に開示されるヒドロゲル組成物は、皮膚領域または皮下組織領域への注入により個人の皮膚領域に投与される。この実施形態の態様において、本明細書に開示されるヒドロゲル組成物は、例えば、上皮皮膚接合領域、乳頭状領域、網状領域、またはそれらの組み合わせへの注入により個人の皮膚領域に投与される。   In one aspect of this embodiment, the hydrogel compositions disclosed herein are administered to an individual's skin area by injection into the skin area or subcutaneous tissue area. In aspects of this embodiment, the hydrogel compositions disclosed herein are administered to an individual's skin area, for example, by injection into an epithelial skin junction area, papillary area, reticular area, or a combination thereof.

有利なことに、本組成物のうちのいくつかは、例えば、患者の薄い皮膚領域における、細線の出現を低減することにおいて特に有用かつ有効である。例えば、患者に、約１ｍｍを超えない深さで、本明細書の他の箇所に記載される皮膚充填剤組成物を投与するステップを含む、細線治療のための方法が提供される。   Advantageously, some of the compositions are particularly useful and effective in reducing the appearance of fine lines, for example, in a patient's thin skin area. For example, a method for fine wire treatment is provided comprising administering to a patient a skin filler composition as described elsewhere herein at a depth not exceeding about 1 mm.

本明細書の他の態様は、一部において、本明細書に開示されるヒドロゲル組成物を、皮膚状態を患う個人に投与するステップを含む、皮膚状態を治療する方法を開示し、ここでその組成物の投与は、皮膚状態を改善し、それにより皮膚状態を治療する。この実施形態の一態様において、皮膚の脱水を治療する方法は、本明細書に開示されるヒドロゲル組成物を、皮膚の脱水を患う個人に投与するステップを含み、その組成物の投与は、皮膚に水分を補給し、それにより皮膚の脱水を治療する。この実施形態の別の態様において、皮膚の弾力性の不足を治療する方法は、本明細書に開示されるヒドロゲル組成物を、皮膚の弾力性の不足を患う個人に投与するステップを含み、その組成物の投与は皮膚の弾力性を増大させ、それにより皮膚の弾力性の不足を治療する。この実施形態のなおも別の態様において、皮膚の粗さを治療する方法は、本明細書に開示されるヒドロゲル組成物を、皮膚の粗さを患う個人に投与するステップを含み、その組成物の投与は、皮膚の粗さを低下させ、それにより皮膚の粗さを治療する。この実施形態のさらに別の態様において、皮膚の緊縮性の不足を治療する方法は、本明細書に開示されるヒドロゲル組成物を、皮膚の緊縮性の不足を患う個人に投与するステップを含み、その組成物の投与は、皮膚をよりぴんと張らせ、それにより皮膚の緊縮性の不足を治療する。   Another aspect of the present specification discloses, in part, a method of treating a skin condition, comprising administering a hydrogel composition disclosed herein to an individual suffering from the skin condition, wherein Administration of the composition improves the skin condition and thereby treats the skin condition. In one aspect of this embodiment, a method of treating skin dehydration includes administering a hydrogel composition disclosed herein to an individual suffering from skin dehydration, the administration of the composition comprising skin Hydrate the skin, thereby treating skin dehydration. In another aspect of this embodiment, a method of treating a lack of skin elasticity comprises administering a hydrogel composition disclosed herein to an individual suffering from a lack of skin elasticity, comprising: Administration of the composition increases skin elasticity, thereby treating the lack of skin elasticity. In yet another aspect of this embodiment, a method of treating skin roughness comprises administering the hydrogel composition disclosed herein to an individual suffering from skin roughness, the composition Administration reduces skin roughness, thereby treating skin roughness. In yet another aspect of this embodiment, a method of treating lack of skin stringency comprises the step of administering a hydrogel composition disclosed herein to an individual suffering from lack of skin stringency, Administration of the composition makes the skin more taut, thereby treating the lack of stringency of the skin.

この実施形態の１つのさらなる態様において、皮膚のストレッチマークを治療する方法は、本明細書に開示されるヒドロゲル組成物を、皮膚のストレッチマークを患う個人に投与するステップを含み、その組成物の投与は、皮膚のストレッチマークを減少させまたは消去し、それにより皮膚のストレッチマークを治療する。この実施形態の別の態様において、皮膚の青白さを治療する方法は、本明細書に開示されるヒドロゲル組成物を、皮膚の青白さを患う個人に投与するステップを含み、その組成物の投与は、皮膚の色調または輝きを増大させ、それにより皮膚の青白さを治療する。この実施形態の別の態様において、皮膚のしわを治療する方法は、本明細書に開示されるヒドロゲル組成物を、皮膚のしわを患う個人に投与するステップを含み、その組成物の投与は、皮膚のしわを減少させまたは消去し、それにより皮膚のしわを治療する。この実施形態のさらに別の態様において、皮膚のしわを治療する方法は、本明細書に開示されるヒドロゲル組成物を個人に投与するステップを含み、その組成物の投与は、皮膚のしわに対して皮膚を抵抗性にさせ、それにより皮膚のしわを治療する。   In one further aspect of this embodiment, a method of treating a skin stretch mark comprises administering a hydrogel composition disclosed herein to an individual suffering from a skin stretch mark, comprising: Administration reduces or eliminates the skin stretch marks, thereby treating the skin stretch marks. In another aspect of this embodiment, a method of treating skin paleness comprises administering the hydrogel composition disclosed herein to an individual suffering from skin paleness, administration of the composition Increases skin tone or brightness, thereby treating the paleness of the skin. In another aspect of this embodiment, a method of treating skin wrinkles comprises administering a hydrogel composition disclosed herein to an individual suffering from skin wrinkles, the administration of the composition comprising: Reduce or eliminate skin wrinkles, thereby treating skin wrinkles. In yet another aspect of this embodiment, a method of treating skin wrinkles comprises administering to the individual the hydrogel composition disclosed herein, wherein the administration of the composition is directed against skin wrinkles. Makes the skin resistant, thereby treating skin wrinkles.

いくつかの実施形態において、皮膚充填剤は、持続的な生物学的利用能を有する。例えば、（例えば、顔面のくぼみの軟組織の欠損の修正のためにヒトに皮内でまたは皮下で）ヒトの皮膚に導入されたときに、ヒトにアスコルビン酸（または他のビタミン）を少なくとも約１ヶ月〜最大約２０ヶ月間、またはそれを超えて放出する、皮膚充填剤が提供される。   In some embodiments, the skin filler has sustained bioavailability. For example, at least about 1 ascorbic acid (or other vitamin) is introduced into humans when introduced into human skin (eg, intradermally or subcutaneously in humans for correction of soft tissue defects in facial depressions). Skin fillers are provided that release from months to up to about 20 months or more.

例えば、充填剤の期間と調和したビタミンＣ有効性の維持を予測するために、結合度についての見積もりがなされる。この見積もりは、エーテル化によるＨＡへのＡＡ２Ｇ結合の形成に基づいた。その製剤は生理学的条件下で安定であるが、細胞膜に結合されたα‐グルコシダーゼによりアスコルビン酸（ＡｓＡ）の放出を開始する。α‐グルコシダーゼが細胞膜に結合しているという事実のために、ＡｓＡの放出は、充填剤／細胞境界面で起こる。ＨＡ‐ＡＡ２ＧからのＡｓＡのさらなる放出にＨＡ分解が付随し、ＡＡ２Ｇが線維芽細胞に使用可能になるであろう。ＡｓＡの放出はしたがって、ＡＡ２Ｇ結合度およびＨＡの期間による。およそ５モル％の結合度を有するゲルは、少なくとも最大１ヶ月間、例えば、３〜５ヶ月間、活性ビタミンＣを放出し得る。１０モル％の結合度を有するゲルは、最大６〜８ヶ月間、活性ビタミンＣを放出し得る。１５モル％の結合度を有するゲルは、最大約１０ヶ月間、活性ビタミンＣを放出し得る。３０モル％では、最大１年半である。   For example, an estimate for the degree of binding can be made to predict the maintenance of vitamin C effectiveness consistent with the filler period. This estimate was based on the formation of AA2G bonds to HA by etherification. The formulation is stable under physiological conditions, but initiates the release of ascorbic acid (AsA) by α-glucosidase bound to the cell membrane. Due to the fact that α-glucosidase is bound to the cell membrane, AsA release occurs at the filler / cell interface. Further release of AsA from HA-AA2G will be accompanied by HA degradation, making AA2G available to fibroblasts. AsA release is thus dependent on the degree of AA2G binding and the duration of HA. A gel having a degree of binding of approximately 5 mol% can release active vitamin C for at least a maximum of 1 month, eg, 3-5 months. A gel having a degree of binding of 10 mol% can release active vitamin C for up to 6-8 months. A gel having a degree of binding of 15 mol% can release active vitamin C for up to about 10 months. At 30 mol%, the maximum is one and a half years.

Figure 2014526342

＊ゲルのパラメータ：体積 ０．１ｃｃ、濃度 ２４ｍｇ／ｍＬに基づく。（０．１×２４×３％×１０００）／（３３８＊０．１）＝２．１３（ｍＭ）
＊＊仮定：
ＡｓＡは一定の速度で放出される。
ＡｓＡの有効な濃度は０．０５ｍＭであり、２日間超、有効性を維持する。２．１３＊２／（０．０５＊３０）＝２．８（ヶ月）
Figure 2014526342
* Gel parameters: based on volume 0.1 cc, concentration 24 mg / mL. (0.1 × 24 × 3% × 1000) / (338 * 0.1) = 2.13 (mM)
** Assumptions:
AsA is released at a constant rate.
The effective concentration of AsA is 0.05 mM and remains effective for more than 2 days. 2.13 * 2 / (0.05 * 30) = 2.8 (months)

本発明の１つの実施形態において、Ｓｔａｒ‐ＰＥＧエポキシドと架橋結合されたヒアルロン酸を含み、かつ約３モル％〜約４０モル％の結合度でそのヒアルロン酸に結合されたビタミンＣ誘導体（例えば、ＡＡ２Ｇ（アスコルビン酸２‐グルコシド）、Ｖｉｔａｇｅｎ（リン酸Ｌ‐アスコルビル３‐アミノプロピル）、およびＳＡＰ（リン酸アスコルビルナトリウム）のうちの１つ）を有する、皮膚充填剤が提供される。   In one embodiment of the invention, a vitamin C derivative comprising hyaluronic acid cross-linked with Star-PEG epoxide and bound to the hyaluronic acid with a degree of linkage of about 3 mol% to about 40 mol% (e.g., A skin filler is provided having AA2G (ascorbic acid 2-glucoside), Vitagen (one of L-ascorbyl phosphate 3-aminopropyl), and SAP (ascorbyl sodium phosphate).

この皮膚充填剤の作製方法は、４‐アームエポキシドによってキャップされたＡＡ２Ｇ（ＡＡ２Ｇ‐４アームエポキシド）、未反応の４‐アームエポキシド、および遊離ＡＡ２Ｇを含有する組成物を得るために好適な割合、反応温度、および反応時間で、ペンタエリスリトールグリシダールエーテル（Ｓｔａｒ‐ＰＥＧエポキシド）をアスコルビン酸２‐グルコシド（ＡＡ２Ｇ）と反応させることを含む。４アームエポキシドでキャップされたＡＡ２Ｇ（ＡＡ２Ｇ‐４アームエポキシド）は、エポキシル基によりヒアルロン酸に結合される。未反応の４アームエポキシドは、ヒアルロン酸を架橋結合するための架橋剤として、およびＡＡ２Ｇをさらに結合するための結合剤として働く。   This method of making the skin filler comprises a ratio suitable for obtaining a composition containing AA2G capped with 4-arm epoxide (AA2G-4 arm epoxide), unreacted 4-arm epoxide, and free AA2G; Reacting pentaerythritol glycidal ether (Star-PEG epoxide) with ascorbic acid 2-glucoside (AA2G) at reaction temperature and reaction time. AA2G capped with 4-arm epoxide (AA2G-4 arm epoxide) is linked to hyaluronic acid by an epoxide group. Unreacted 4-arm epoxide acts as a cross-linking agent for cross-linking hyaluronic acid and as a binding agent for further binding AA2G.

本発明の別の実施形態において、ＢＤＤＥと架橋結合されたヒアルロン酸を含み、かつ約３モル％〜約１０モル％の結合度でそのヒアルロン酸に結合されたビタミンＣ誘導体（例えば、ＡＡ２Ｇ（アスコルビン酸２‐グルコシド）、Ｖｉｔａｇｅｎ（リン酸Ｌ‐アスコルビル３‐アミノプロピル）、およびＳＡＰ（リン酸アスコルビルナトリウム）のうちの１つ）を有する皮膚充填剤が提供される。   In another embodiment of the present invention, a vitamin C derivative comprising hyaluronic acid crosslinked with BDDE and bound to the hyaluronic acid with a degree of linkage of about 3 mol% to about 10 mol% (eg, AA2G (ascorbine A dermal filler with acid 2-glucoside), Vitagen (L-ascorbyl phosphate 3-aminopropyl), and SAP (ascorbyl sodium phosphate)).

この皮膚充填剤の作製方法は、ＢＤＤＥによってキャップされたＡＡ２Ｇ（ＡＡ２Ｇ‐ＢＤＤＥ）、未反応のＢＤＤＥ、および遊離ＡＡ２Ｇを含有する組成物を得るために好適な割合、反応温度、および反応時間で、ＢＤＤＥをアスコルビン酸２‐グルコシド（ＡＡ２Ｇ）と反応させることを含む。ＢＤＤＥでキャップされたＡＡ２Ｇ（ＡＡ２Ｇ‐ＢＤＤＥ）は、エポキシル基によりヒアルロン酸に結合される。未反応のＢＤＤＥは、ヒアルロン酸を架橋結合するための架橋剤として、およびＡＡ２Ｇをさらに結合するための結合剤として働く。   This method of making the skin filler comprises a ratio, reaction temperature, and reaction time suitable for obtaining a composition containing BDDE-capped AA2G (AA2G-BDDE), unreacted BDDE, and free AA2G, Reacting BDDE with ascorbic acid 2-glucoside (AA2G). AA2G capped with BDDE (AA2G-BDDE) is bound to hyaluronic acid by an epoxide group. Unreacted BDDE serves as a cross-linking agent for cross-linking hyaluronic acid and as a binding agent for further binding AA2G.

図９は、ＡＡ２Ｇ‐ＰＢＳ溶液からのＡｓＡ放出に対するα‐グルコシダーゼ濃度の効果を示す表である。ＡＡ２ＧのＡｓＡへの変換は、α‐グリコシダーゼの濃度による。α‐グリコシダーゼ濃度がゲル１ｇ当たり６．３ユニットであるとき、ＡＡ２Ｇは１５分間でほとんど完全にＡｓＡに変換した。α‐グリコシダーゼ濃度がゲル１ｇ当たり４．７ユニットであるとき、ＡＡ２ＧをＡｓＡに完全に変換するのに３０分かかった。さらなるα‐グリコシダーゼ濃度喪失は、ＡＡ２ＧのＡｓＡへの変換を遅くした。   FIG. 9 is a table showing the effect of α-glucosidase concentration on AsA release from AA2G-PBS solutions. Conversion of AA2G to AsA depends on the concentration of α-glycosidase. When the α-glycosidase concentration was 6.3 units per gram of gel, AA2G was almost completely converted to AsA in 15 minutes. When the α-glycosidase concentration was 4.7 units per gram of gel, it took 30 minutes to completely convert AA2G to AsA. Further loss of α-glycosidase concentration slowed the conversion of AA2G to AsA.

図１０は、本発明に従う結合された皮膚充填剤からの遊離ＡｓＡの放出プロファイルの表示（持続性放出）（モル％でのＡＡ２Ｇ変換対反応時間）を示す。ＡＡ２Ｇは、ＡＡ２Ｇ／ＨＡ混合物中で、４０分でＡｓＡに完全に変換した。ＡＡ２Ｈ/ＨＡ結合物は、ＡｓＡへのＡＡ２Ｇ変換の時間依存性を示した。   FIG. 10 shows a representation of the release profile of free AsA (sustained release) (AA2G conversion vs. reaction time in mol%) from the bound dermal filler according to the invention. AA2G was completely converted to AsA in the AA2G / HA mixture in 40 minutes. The AA2H / HA conjugate showed a time dependence of AA2G conversion to AsA.

図１１Ａおよび１１Ｂは、本発明に従う様々な皮膚充填剤についての追加の放出データを示す。より具体的には、ＨＡ‐ＡＡ２Ｇゲル中のＡＡ２ＧのＡｓＡへの変換は、α‐グリコシダーゼ濃度に依存する。高いα‐グリコシダーゼ濃度は、ＡＡ２ＧのＡｓＡへの変換を速くした。所与のα‐グリコシダーゼ濃度について、様々な製剤が、ＡＡ２ＧのＡｓＡへのそれぞれ異なるプロファイルを示した。   FIGS. 11A and 11B show additional release data for various skin fillers according to the present invention. More specifically, the conversion of AA2G to AsA in the HA-AA2G gel depends on the α-glycosidase concentration. A high α-glycosidase concentration accelerated the conversion of AA2G to AsA. For a given α-glycosidase concentration, various formulations showed different profiles of AA2G to AsA.

本発明の一態様において、細線、例えば、皮膚における比較的表層の溝、例えば、限定されないが、眼の周辺の細線、涙の通り道の領域、額、目尻、眉間の線等の出現を治療することおよび消去することにおいて特に有効である、皮膚充填剤が提供される。   In one aspect of the present invention, the appearance of fine lines, for example, relatively superficial grooves in the skin, such as, but not limited to, fine lines around the eyes, areas of the tear path, forehead, corners of the eyes, eyebrows, etc., is treated. A skin filler is provided that is particularly effective in handling and erasing.

皮膚充填が注入された皮膚部位における青色の変色の出現（チンダル現象）は、一部の皮膚充填剤の患者によって経験される有意な有害事象である。チンダル現象は、表層の細線じわに対して治療された患者においてより一般的である。チンダル現象からもたらされるいずれの青色の変色もなく、比較的薄い皮膚の領域においてでさえ、細線およびしわを治療するために表層に注入され得る、長期持続性の半透明の充填剤を提供する、本発明の実施形態が開発されてきた。細線または表層のしわは、一般に、皮膚が最も薄い、つまり、皮膚が１ｍｍ未満の真皮厚さを有する、顔面の領域（額、外眼角、唇紅境界／口周囲の線）に典型的に見出される、皮膚におけるしわまたは溝であることが理解される。額上で、平均皮膚厚さは、正常な皮膚について約０．９５ｍｍおよびしわになった皮膚について約０．８１ｍｍである。外眼角周囲の真皮は、さらにより薄い（例えば、正常な皮膚について約０．６１ｍｍおよびしわになった皮膚について約０．４１ｍｍ）。３０または３２ゲージ針の平均外径（細線ゲル適用に典型的に使用される針）は、約０．３０および約０．２４ｍｍである。   The appearance of a blue discoloration (Tyndall phenomenon) at the skin site where the skin filling was injected is a significant adverse event experienced by some skin filler patients. The Tyndall phenomenon is more common in patients treated for superficial fine lines. Providing a long lasting translucent filler that can be injected into the surface layer to treat fine lines and wrinkles, even in relatively thin skin areas, without any blue discoloration resulting from the Tyndall phenomenon, Embodiments of the invention have been developed. Fine lines or superficial wrinkles are typically found in facial areas (forehead, outer eye corner, lip border / line around mouth) where skin is thinnest, ie, skin has a dermal thickness of less than 1 mm It is understood that they are wrinkles or grooves in the skin. On the forehead, the average skin thickness is about 0.95 mm for normal skin and about 0.81 mm for wrinkled skin. The dermis around the outer eye corner is even thinner (eg, about 0.61 mm for normal skin and about 0.41 mm for wrinkled skin). The average outer diameter of 30 or 32 gauge needles (needles typically used for fine gel application) is about 0.30 and about 0.24 mm.

本発明は、チンダル現象をもたらさない、本明細書の他の箇所に記載される皮膚充填剤組成物を提供する。例えば、本発明の組成物は、架橋成分と架橋結合されたヒアルロン酸成分と、架橋成分以外の添加剤とを含み、その組成物は、患者の皮膚領域中に投与されるとき、添加剤を含まないことを除いて実質的に同一である組成物と比べて、低減されたチンダル現象を示す。組成物は、実質的に光透過性であってもよい。   The present invention provides a dermal filler composition as described elsewhere herein that does not result in a Tyndall phenomenon. For example, the composition of the present invention includes a hyaluronic acid component cross-linked with a cross-linking component, and an additive other than the cross-linking component, and the composition contains the additive when administered into the skin area of a patient. It exhibits a reduced Tyndall phenomenon compared to a composition that is substantially identical except that it does not contain. The composition may be substantially light transmissive.

一実施形態において、添加剤は、ビタミンＣ誘導体、例えば、本明細書の他の箇所に記載される、ヒアルロン酸に化学的に結合され得るＡＡ２Ｇである。   In one embodiment, the additive is a vitamin C derivative, such as AA2G, which can be chemically conjugated to hyaluronic acid, as described elsewhere herein.

いくつかの実施形態において、架橋成分は、ＢＤＤＥであり、その結合度は、約３モル％〜約１０モル％、または最大１５モル％もしくはそれよりも大きい。いくつかの実施形態において、組成物は、注入されると患者に安楽を提供するのに好適な量の麻酔剤、例えば、リドカインをさらに含む。   In some embodiments, the cross-linking component is BDDE and the degree of binding is from about 3 mol% to about 10 mol%, or up to 15 mol% or more. In some embodiments, the composition further comprises an amount of anesthetic, eg, lidocaine, suitable to provide comfort to the patient when infused.

患者の皮膚における細線を治療する方法もまた提供される。本方法は、一般に、患者の皮膚に、本明細書に記載されるような組成物を導入するステップを含む。例えば、組成物は、ヒアルロン酸成分と、ヒアルロン酸を架橋結合する架橋成分と、架橋成分以外の添加剤との混合物を含み、その組成物は、実質的に光透過性であり、またその皮膚充填剤組成物は、添加剤を含まないことを除いて実質的に同一である組成物と比べて、低減されたチンダル現象を示す。   A method of treating fine lines in a patient's skin is also provided. The method generally includes introducing into the patient's skin a composition as described herein. For example, the composition includes a mixture of a hyaluronic acid component, a crosslinking component that crosslinks hyaluronic acid, and an additive other than the crosslinking component, the composition being substantially light transmissive and the skin The filler composition exhibits a reduced Tyndall phenomenon compared to a composition that is substantially identical except that it does not contain additives.

本発明のいくつかの実施形態において、組成物は、ＥＤＣ化学反応を用いてジアミンまたはマルチアミン架橋剤と架橋結合されたヒアルロン酸成分を含む。例えば、架橋剤は、ＨＭＤＡであってもよい。   In some embodiments of the present invention, the composition includes a hyaluronic acid component that is cross-linked with a diamine or multiamine crosslinker using EDC chemistry. For example, the cross-linking agent may be HMDA.

架橋剤がＨＭＤＡである、本発明のある特定の実施形態において、組成物は、最大約７０ＰａのＧ’、約０．６５〜約０．７５でのＧ”／Ｇ’、約２４Ｎ以下の押出力、および約２４ｍｇ／ｇ〜約２５ｍｇ／ｇの最終ＨＡ濃度を有する。   In certain embodiments of the invention in which the crosslinker is HMDA, the composition has a G ′ of up to about 70 Pa, a G ″ / G ′ of about 0.65 to about 0.75, a push of about 24 N or less. With an output and a final HA concentration of about 24 mg / g to about 25 mg / g.

添加剤がＨＡ−ＡＡ２Ｇ結合物またはＨＡ−Ｖｉｔａｇｅｎ結合物である、本発明のある特定の実施形態において、結合度は、約３モル％〜約１０モル％、または最大約１５モル％、または最大約４０モル％である。これらの組成物は、少なくとも約３０Ｐａ、より好ましくは少なくとも約４０Ｐａ〜約１００ＰａのＧ’、約０．３０〜約０．５０のＧ”／Ｇ’、約２７Ｎ以下の押出力、および約２４ｍｇ／ｇ〜約２５ｍｇ／ｇの最終ＨＡ濃度を有してもよい。   In certain embodiments of the invention in which the additive is an HA-AA2G conjugate or an HA-Vitagen conjugate, the degree of binding is from about 3 mol% to about 10 mol%, or up to about 15 mol%, or up to About 40 mol%. These compositions have a G ′ of at least about 30 Pa, more preferably at least about 40 Pa to about 100 Pa, a G ″ / G ′ of about 0.30 to about 0.50, a force of about 27 N or less, and about 24 mg / It may have a final HA concentration of g to about 25 mg / g.

本開示の目的のために、本明細書で使用される「結合度」は、結合物、例えば、ヒアルロン酸の反復単位（例えば、ＨＡ二量体）に対するＡＡ２Ｇの、モル割合として定義される。故に、１０モル％の結合度は、１００個のＨＡ反復単位につき１０個の結合したＡＡ２Ｇを意味する。結合度は、下の実施例２に例示される方法、または当業者に既知の他の方法を用いて計算することができる。   For the purposes of this disclosure, “degree of binding” as used herein is defined as the molar ratio of AA2G to conjugate, eg, repeating units of hyaluronic acid (eg, HA dimer). Thus, a degree of coupling of 10 mol% means 10 bound AA2G per 100 HA repeating units. The degree of binding can be calculated using the method illustrated in Example 2 below, or other methods known to those skilled in the art.

実施例１：架橋剤としてＢＤＤＥを用いた、架橋結合されたＨＡゲルへのＡＡ２Ｐ結合
４００．６ｍｇの低分子量ヒアルロン酸（ＬＭＷ ＨＡ）を、シリンジ中の１８０２ｍｇの１重量％ＮａＯＨ中で約３０分間水和した。８００．７ｍｇのＡＡ２Ｇ、続いて７１３．７ｍｇのＢＤＤＥ、および１４１６．８ｍｇの１０％ＮａＯＨをバイアル中に入れた。上記溶液（ｐＨ１２超）を５０℃の水浴中で約２０分間反応させ、その後水和ＨＡに添加した。その添加後、その混合物を、２つのシリンジ間を往復させることにより約２０回混合した。その混合ペーストをバイアル中に入れ、５０℃の水浴中に約２．５時間入れた。２２３．５ｍｇの１２Ｍ ＨＣｌを９．０５ｇのＰＢＳ（ｐＨ７．４）に添加した。約２．５時間後、ＨＡ‐ＡＡ２Ｇゲルが形成された。そのゲルを切断して断片にし、ＨＣｌ‐ＰＢＳ溶液をそれに添加した。そのゲルを中和させ、環状振騰器上で一晩膨潤させた。そのゲルを、約６０μｍスクリーンを通してサイズ調整し、２つのシリンジ間を往復させることにより約２０回混合した。そのゲルを１５，０００ＭＷＣＯ ＲＣ透析バッグ中に入れ、ＰＢＳ緩衝液（ｐＨ７．４）中で透析した。透析を、ＰＢＳ緩衝液を頻繁に交換しながら約１８５時間続けた。透析後、そのゲルをシリンジ中に入れ、４℃の冷蔵庫内で貯蔵した。 Example 1: AA2P binding to cross-linked HA gel using BDDE as cross-linker 400.6 mg of low molecular weight hyaluronic acid (LMW HA) was added in 1802 mg of 1 wt% NaOH in a syringe for about 30 minutes. Hydrated. 800.7 mg AA2G followed by 713.7 mg BDDE and 1416.8 mg 10% NaOH were placed in a vial. The solution (above pH 12) was allowed to react in a 50 ° C. water bath for about 20 minutes and then added to the hydrated HA. After the addition, the mixture was mixed approximately 20 times by reciprocating between the two syringes. The mixed paste was placed in a vial and placed in a 50 ° C. water bath for about 2.5 hours. 223.5 mg of 12M HCl was added to 9.05 g of PBS (pH 7.4). After about 2.5 hours, an HA-AA2G gel was formed. The gel was cut into pieces and HCl-PBS solution was added to it. The gel was neutralized and allowed to swell overnight on an annular shaker. The gel was sized through an approximately 60 μm screen and mixed approximately 20 times by reciprocating between the two syringes. The gel was placed in a 15,000 MWCO RC dialysis bag and dialyzed in PBS buffer (pH 7.4). Dialysis was continued for about 185 hours with frequent changes of PBS buffer. After dialysis, the gel was placed in a syringe and stored in a refrigerator at 4 ° C.

実施例２：ＡＡ２Ｇ結合の決定
実施例１に記載されるゲルの重量を透析直前、および透析後に書き留めた。そのゲルが透析後に約１ｇ／ｍＬであったと想定した。透析を、１ＬのＰＢＳ中で８時間超につき、顕著なＡＡ２Ｇが出てこなくなった点で止めた。そのＡＡ２Ｇを、ＵＶ／Ｖｉｓ分光光度計（Ｎａｎｏｄｒｏｐ ２０００Ｃ、ＴｈｅｒｍｏＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を用いて２６０ｎｍで測定した。ＡＡ２Ｇの較正曲線を、２％ＨＡ中の異なる濃度のＡＡ２Ｇを用いて計算した（２６０ｎｍでの吸収＝１．４８３８［ＡＡ２Ｇ（ｍＭ）］）。 Example 2: Determination of AA2G binding The weight of the gel described in Example 1 was noted immediately before and after dialysis. It was assumed that the gel was about 1 g / mL after dialysis. Dialysis was stopped at the point where no significant AA2G came out in more than 8 hours in 1 L PBS. The AA2G was measured at 260 nm using a UV / Vis spectrophotometer (Nanodrop 2000C, Thermo Scientific). The calibration curve for AA2G was calculated using different concentrations of AA2G in 2% HA (absorption at 260 nm = 1.4838 [AA2G (mM)]).

透析後のＨＡの重量：ＨＡの出発重量×（透析前の実際の重量／理論的重量）   Weight of HA after dialysis: starting weight of HA × (actual weight before dialysis / theoretical weight)

透析後のＡＡ２Ｇのｍｍｏｌ：式（２６０ｎｍでの吸収＝１．４８３８［ＡＡ２Ｇ（ｍＭ）］）中に透析後の２６０ｎｍでの吸収を入れた。   Ammonia of AA2G after dialysis: absorption at 260 nm after dialysis was put into the formula (absorption at 260 nm = 1.4838 [AA2G (mM)])

ＡＡ２Ｇでの結合：（ＡＡ２Ｇ（ｍｍｏｌ）／ＨＡ（ｍｍｏｌ））×１００％
実施例１に記載されるゲル中のＡＡ２Ｇ結合度は、１４．７モル％である。 Binding at AA2G: (AA2G (mmol) / HA (mmol)) × 100%
The degree of AA2G binding in the gel described in Example 1 is 14.7 mol%.

実施例３：ゲルの流体力学的特性の決定
振動平行プレートレオメータ（Ａｎｔｏｎ Ｐａａｒ，Ｐｈｙｓｉｃａ ＭＣＲ ３０１）を、実施例１で得られたゲルの特性を測定するために使用した。使用されたプレートの直径は２５ｍｍであった。そのプレート間のギャップを１ｍｍに設定した。各測定について、一定の歪みでの周波数掃引を最初に、その後、固定周波数での歪み掃引を行った。Ｇ’（貯蔵弾性係数）を１％の歪みでの歪み掃引曲線から得た。そのゲルについてのその値は、１４５０Ｐａである。 Example 3: Determination of the hydrodynamic properties of the gel An oscillating parallel plate rheometer (Anton Paar, Physica MCR 301) was used to measure the properties of the gel obtained in Example 1. The diameter of the plate used was 25 mm. The gap between the plates was set to 1 mm. For each measurement, a frequency sweep at a constant strain was first performed, followed by a strain sweep at a fixed frequency. G ′ (storage modulus) was obtained from a strain sweep curve at 1% strain. Its value for the gel is 1450 Pa.

実施例４：可変性の結合度およびゲル流体力学的特性を有する、架橋剤としてＢＤＤＥを用いた、架橋結合されたＨＡゲルへのＡＡ２Ｇ結合
本手順は、実施例１に記載されるものと類似した。結合度は、架橋剤対ＨＡおよびＡＡ２Ｇモル比を調整することにより修正される。ゲル特性を、実施例３に記載されるように測定した。詳細は、以下の通りである： Example 4: AA2G binding to cross-linked HA gel using BDDE as cross-linker with variable degree of binding and gel hydrodynamic properties This procedure is similar to that described in Example 1 did. The degree of binding is modified by adjusting the crosslinker to HA and AA2G molar ratio. Gel properties were measured as described in Example 3. The details are as follows:

４００．８ｍｇのＬＭＷ ＨＡを、シリンジ中の１７５２．１ｍｇの１％ＮａＯＨ中で約３０分間水和した。８００．３ｍｇのＡＡ２Ｇ、続いて３５４．１ｍｇのＢＤＤＥ、および１４０２．０ｍｇの１０％ＮａＯＨをバイアル中に入れた。上記溶液（ｐＨ１２超）を５０℃の水浴中で約２０分間反応させ、その後水和ＨＡに添加した。その添加後、その混合物を、２つのシリンジ間を往復させることにより約２０回混合した。その混合ペーストをバイアル中に入れ、５０℃の水浴中に約２．５時間入れた。１４０．９ｍｇの１２Ｍ ＨＣｌを９．００５３ｇのＰＢＳ（ｐＨ７．４）に添加した。約２．５時間後、ＨＡ‐ＡＡ２Ｇゲルが形成された。そのゲルを切断して断片にし、ＨＣｌ‐ＰＢＳ溶液をそれに添加した。そのゲルを中和させ、環状振騰器上で一晩膨潤させた。そのゲルを、約６０μｍスクリーンを通してサイズ調整し、２つのシリンジ間を往復させることにより約２０回混合した。そのゲルを１５，０００ＭＷＣＯ ＲＣ透析バッグ中に入れ、ＰＢＳ緩衝液（ｐＨ７．４）中で透析した。透析を、ＰＢＳ緩衝液を頻繁に交換しながら約１６４．５時間続けた。透析後、そのゲルをシリンジ中に入れ、４℃の冷蔵庫内で貯蔵した。結合度は１３％である。ゲル貯蔵弾性係数（Ｇ’）は、８０３Ｐａである。   400.8 mg LMW HA was hydrated in 1752.1 mg 1% NaOH in a syringe for about 30 minutes. 800.3 mg AA2G followed by 354.1 mg BDDE and 1402.0 mg 10% NaOH were placed in a vial. The solution (above pH 12) was allowed to react in a 50 ° C. water bath for about 20 minutes and then added to the hydrated HA. After the addition, the mixture was mixed approximately 20 times by reciprocating between the two syringes. The mixed paste was placed in a vial and placed in a 50 ° C. water bath for about 2.5 hours. 140.9 mg of 12M HCl was added to 9.0053 g of PBS (pH 7.4). After about 2.5 hours, an HA-AA2G gel was formed. The gel was cut into pieces and HCl-PBS solution was added to it. The gel was neutralized and allowed to swell overnight on an annular shaker. The gel was sized through an approximately 60 μm screen and mixed approximately 20 times by reciprocating between the two syringes. The gel was placed in a 15,000 MWCO RC dialysis bag and dialyzed in PBS buffer (pH 7.4). Dialysis was continued for approximately 164.5 hours with frequent changes of PBS buffer. After dialysis, the gel was placed in a syringe and stored in a refrigerator at 4 ° C. The degree of coupling is 13%. The gel storage elastic modulus (G ′) is 803 Pa.

実施例５：架橋剤としてＢＤＤＥを用いた、架橋結合されたＨＡゲルへのＡＡ２Ｇ結合。結合度は５．３％であり、Ｇ’は約３００Ｐａである。
４００．３ｍｇのＬＭＷ ＨＡを、シリンジ中の３００２．０ｍｇの１％ＮａＯＨ中で約３０分間水和した。８００．５ｍｇのＡＡ２Ｇ、続いて２６４．３ｍｇのＢＤＤＥ、および１１００．０ｍｇの１０％ＮａＯＨをバイアル中に入れた。上記溶液（ｐＨ１２超）を５０℃の水浴中で約２０分間反応させ、その後水和ＨＡに添加した。その添加後、その混合物を、２つのシリンジ間を往復させることにより約２０回混合した。その混合ペーストをバイアル中に入れ、５０℃の水浴中に約２．５時間入れた。１０４．２ｍｇの１２Ｍ ＨＣｌを８．５１２８ｇのＰＢＳ（ｐＨ７．４）に添加した。約２．５時間後、ＨＡ‐ＡＡ２Ｇゲルが形成され、ＨＣｌ‐ＰＢＳ溶液をそれに添加した。そのゲルを中和させ、環状振騰器上で週末にかけて（約５５時間）膨潤させた。そのゲルを、約６０μｍスクリーンを通してサイズ調整し、２つのシリンジ間を往復させることにより約２０回混合した。そのゲルを１５，０００ＭＷＣＯ ＲＣ透析バッグ中に入れ、ＰＢＳ緩衝液（ｐＨ７．４）中で透析した。透析を、ＰＢＳ緩衝液を頻繁に交換しながら約１１４時間続けた。透析後、そのゲルをシリンジ中に入れ、４℃の冷蔵庫内で貯蔵した。結合度およびゲル流体力学的特性を、実施例２および３に記載される手順で測定する。結合度は５．３％である。ゲル貯蔵弾性係数は約３００Ｐａである。 Example 5: AA2G binding to cross-linked HA gel using BDDE as cross-linking agent. The degree of bonding is 5.3% and G ′ is about 300 Pa.
400.3 mg LMW HA was hydrated in 3002.0 mg 1% NaOH in a syringe for about 30 minutes. 800.5 mg AA2G followed by 264.3 mg BDDE and 1100.0 mg 10% NaOH were placed in a vial. The solution (above pH 12) was allowed to react in a 50 ° C. water bath for about 20 minutes and then added to the hydrated HA. After the addition, the mixture was mixed approximately 20 times by reciprocating between the two syringes. The mixed paste was placed in a vial and placed in a 50 ° C. water bath for about 2.5 hours. 104.2 mg of 12M HCl was added to 8.5128 g of PBS (pH 7.4). After about 2.5 hours, an HA-AA2G gel was formed and HCl-PBS solution was added to it. The gel was neutralized and allowed to swell over the weekend (about 55 hours) on an annular shaker. The gel was sized through an approximately 60 μm screen and mixed approximately 20 times by reciprocating between the two syringes. The gel was placed in a 15,000 MWCO RC dialysis bag and dialyzed in PBS buffer (pH 7.4). Dialysis was continued for approximately 114 hours with frequent changes of PBS buffer. After dialysis, the gel was placed in a syringe and stored in a refrigerator at 4 ° C. The degree of binding and gel hydrodynamic properties are measured by the procedures described in Examples 2 and 3. The degree of binding is 5.3%. The gel storage modulus is about 300 Pa.

実施例６：架橋剤としてｓｔａｒ‐ＰＥＧエポキシドを用いた、架橋結合されたＨＡゲルへのＡＡ２Ｇ結合。結合度は２９．４％であり、Ｇ’は約２３５Ｐａである。
２００．４ｍｇのＬＭＷ ＨＡを、シリンジ中の２０００ｍｇの１％ＮａＯＨ中で約３０分間水和した。４００ｍｇのＡＡ２Ｇ、続いて３１２．７ｍｇのｓｔａｒ‐ＰＥＧエポキシド、および１０２６．５ｍｇの１０％ＮａＯＨをバイアル中に入れた。上記溶液を５０℃の水浴中で約２０分間反応させ、その後水和ＨＡに添加した。その添加後、その混合物を、２つのシリンジ間を往復させることにより約２０回混合した。その混合ペーストをバイアル中に入れ、５０℃の水浴中に約２．５時間入れた。１８７．４ｍｇの１２Ｍ ＨＣｌを３．０３４ｇのＰＢＳ（ｐＨ７．４）に添加した。約２．５時間後、ＨＡ‐ＡＡ２Ｇゲルが形成され、ＨＣｌ‐ＰＢＳ溶液をそれに添加した。そのゲルを中和させ、環状振騰器上で週末にかけて（約６８時間）膨潤させた。そのゲルを、約６０μｍスクリーンを通してサイズ調整し、２つのシリンジ間を往復させることにより約２０回混合した。そのゲルを１５，０００ＭＷＣＯ ＲＣ透析バッグ中に入れ、ＰＢＳ緩衝液（ｐＨ７．４）中で透析した。透析を、ＰＢＳ緩衝液を頻繁に交換しながら約９５時間続けた。透析後、そのゲルをシリンジ中に入れ、４℃の冷蔵庫内で貯蔵した。結合度およびゲル流体力学的特性を、実施例２および３に記載される手順で測定する。結合度は２９．４％である。ゲル貯蔵弾性係数は約２３５Ｐａである。 Example 6: AA2G binding to cross-linked HA gel using star-PEG epoxide as cross-linker. The degree of bonding is 29.4% and G ′ is about 235 Pa.
200.4 mg LMW HA was hydrated in 2000 mg 1% NaOH in a syringe for about 30 minutes. 400 mg AA2G followed by 312.7 mg star-PEG epoxide and 1026.5 mg 10% NaOH were placed in a vial. The solution was reacted in a 50 ° C. water bath for about 20 minutes and then added to the hydrated HA. After the addition, the mixture was mixed approximately 20 times by reciprocating between the two syringes. The mixed paste was placed in a vial and placed in a 50 ° C. water bath for about 2.5 hours. 187.4 mg of 12M HCl was added to 3.034 g of PBS (pH 7.4). After about 2.5 hours, an HA-AA2G gel was formed and HCl-PBS solution was added to it. The gel was neutralized and allowed to swell over the weekend (about 68 hours) on an annular shaker. The gel was sized through an approximately 60 μm screen and mixed approximately 20 times by reciprocating between the two syringes. The gel was placed in a 15,000 MWCO RC dialysis bag and dialyzed in PBS buffer (pH 7.4). Dialysis was continued for about 95 hours with frequent changes of PBS buffer. After dialysis, the gel was placed in a syringe and stored in a refrigerator at 4 ° C. The degree of binding and gel hydrodynamic properties are measured by the procedures described in Examples 2 and 3. The degree of binding is 29.4%. The gel storage modulus is about 235 Pa.

実施例７：架橋剤としてｓｔａｒ‐ＰＥＧエポキシドを用いた、架橋結合されたＨＡゲルへのＡＡ２Ｇ結合。結合度は２７．８％であり、Ｇ’は約３６３Ｐａである。
２００．３ｍｇのＬＭＷ ＨＡを、シリンジ中の２０００ｍｇの１％ＮａＯＨ中で約３０分間水和した。４００．２ｍｇのＡＡ２Ｇ、続いて３１３．４ｍｇのｓｔａｒ‐ＰＥＧエポキシド、および１０２２．６ｍｇの１０％ＮａＯＨをバイアル中に入れた。上記溶液を水和ＨＡに添加した。その添加後、その混合物を、２つのシリンジ間を往復させることにより約２０回混合した。その混合ペーストをバイアル中に入れ、５０℃の水浴中に約２．５時間入れた。１９６．５ｍｇの１２Ｍ ＨＣｌを３．０１６ｇのＰＢＳ（ｐＨ７．４）に添加した。約２．５時間後、ＨＡ‐ＡＡ２Ｇゲルが形成され、ＨＣｌ‐ＰＢＳ溶液をそれに添加した。そのゲルを中和させ、環状振騰器上で一晩（約２４時間）膨潤させた。そのゲルを、約６０μｍスクリーンを通してサイズ調整し、２つのシリンジ間を往復させることにより約２０回混合した。そのゲルを１５，０００ＭＷＣＯ ＲＣ透析バッグ中に入れ、ＰＢＳ緩衝液（ｐＨ７．４）中で透析した。透析を、ＰＢＳ緩衝液を頻繁に交換しながら約９８．５時間続けた。透析後、そのゲルをシリンジ中に入れ、４℃の冷蔵庫内で貯蔵した。結合度およびゲル流体力学的特性を、実施例２および３に記載される手順で測定する。結合度は２７．８％である。ゲル貯蔵弾性係数は約３６３Ｐａである。 Example 7: AA2G binding to cross-linked HA gel using star-PEG epoxide as cross-linker. The degree of bonding is 27.8% and G ′ is about 363 Pa.
200.3 mg LMW HA was hydrated in 2000 mg 1% NaOH in a syringe for about 30 minutes. 400.2 mg AA2G followed by 313.4 mg star-PEG epoxide and 1022.6 mg 10% NaOH were placed in a vial. The above solution was added to the hydrated HA. After the addition, the mixture was mixed approximately 20 times by reciprocating between the two syringes. The mixed paste was placed in a vial and placed in a 50 ° C. water bath for about 2.5 hours. 196.5 mg of 12M HCl was added to 3.016 g of PBS (pH 7.4). After about 2.5 hours, an HA-AA2G gel was formed and HCl-PBS solution was added to it. The gel was neutralized and swollen overnight (about 24 hours) on an annular shaker. The gel was sized through an approximately 60 μm screen and mixed approximately 20 times by reciprocating between the two syringes. The gel was placed in a 15,000 MWCO RC dialysis bag and dialyzed in PBS buffer (pH 7.4). Dialysis was continued for approximately 98.5 hours with frequent changes of PBS buffer. After dialysis, the gel was placed in a syringe and stored in a refrigerator at 4 ° C. The degree of binding and gel hydrodynamic properties are measured by the procedures described in Examples 2 and 3. The degree of coupling is 27.8%. The gel storage elastic modulus is about 363 Pa.

実施例８：架橋剤としてＢＤＤＥを用いた、架橋結合されたＨＭＷ ＨＡゲルへのＡＡ２Ｇ結合。結合度は１０モル％であり、Ｇ’は約２４０Ｐａである。
４００．３ｍｇのＨＭＷ ＨＡを、シリンジ中の２５０１．３ｍｇの４重量％ＮａＯＨ中で約３０分間水和した。１２００ｍｇのＡＡ２Ｇ、続いて３０４．７ｍｇのＢＤＤＥ、および１１７８．６ｍｇの１６重量％ＮａＯＨをバイアル中に入れた。上記溶液（ｐＨ１２超）を５０℃の水浴中で約２０分間反応させ、２０ｃｃのシリンジに移し、その後水和ＨＡに添加した。その添加後、その混合物を２つのシリンジ間を往復させることにより約２０回混合した。その混合ペーストを２０ｃｃバイアル中に入れ、５０℃の水浴中に約２．５時間入れた。約２．５時間後、ＨＡ‐ＡＡ２Ｇゲルが形成された。その後、２２６．６ｍｇの１２Ｍ ＨＣｌを８４９２．２ｍｇの１０倍ＰＢＳ（ｐＨ７．４）に添加して、ＨＣｌ‐ＰＢＳ溶液を得、そのＨＣｌ‐ＰＢＳ溶液を添加して、ゲルを中和させ、膨潤させた。そのゲルを環状振騰器上で４８時間にわたり中和させ、膨潤させた。そのゲルを、約６０μｍスクリーンを通してサイズ調整し、２つのシリンジ間を往復させることにより約２０回混合した。そのゲルを２０，０００ＭＷＣＯ ＣＥ透析バッグ中に入れ、ＰＢＳ緩衝液（ｐＨ７．４）中で透析した。透析を、ＰＢＳ緩衝液を頻繁に交換しながら約１１４時間続けた。透析後、そのゲルをシリンジ中に入れ、４℃の冷蔵庫内で貯蔵した。結合度およびゲル流体力学的特性を、実施例２および３に記載される手順で測定する。結合度は約１０モル％である。ゲル貯蔵弾性係数は約２４０Ｐａである。 Example 8: AA2G binding to cross-linked HMW HA gel using BDDE as cross-linking agent. The degree of bonding is 10 mol% and G ′ is about 240 Pa.
400.3 mg of HMW HA was hydrated in 2501.3 mg of 4 wt% NaOH in a syringe for about 30 minutes. 1200 mg AA2G followed by 304.7 mg BDDE, and 1178.6 mg 16 wt% NaOH were placed in a vial. The solution (above pH 12) was reacted in a 50 ° C. water bath for about 20 minutes, transferred to a 20 cc syringe, and then added to the hydrated HA. After the addition, the mixture was mixed approximately 20 times by reciprocating between the two syringes. The mixed paste was placed in a 20 cc vial and placed in a 50 ° C. water bath for about 2.5 hours. After about 2.5 hours, an HA-AA2G gel was formed. Then 226.6 mg of 12M HCl was added to 8492.2 mg of 10 × PBS (pH 7.4) to obtain an HCl-PBS solution, which was added to neutralize the gel and swell I let you. The gel was neutralized for 48 hours on an annular shaker and allowed to swell. The gel was sized through an approximately 60 μm screen and mixed approximately 20 times by reciprocating between the two syringes. The gel was placed in a 20,000 MWCO CE dialysis bag and dialyzed in PBS buffer (pH 7.4). Dialysis was continued for approximately 114 hours with frequent changes of PBS buffer. After dialysis, the gel was placed in a syringe and stored in a refrigerator at 4 ° C. The degree of binding and gel hydrodynamic properties are measured by the procedures described in Examples 2 and 3. The degree of binding is about 10 mol%. The gel storage modulus is about 240 Pa.

実施例９：架橋剤としてＢＤＤＥを用いた、架橋結合されたＬＭＷ ＨＡゲルへのＶｉｔａｇｅｎ結合。結合度は１５モル％であり、Ｇ’は約３６５Ｐａである。
３９８．２ｍｇのＬＭＷ ＨＡを、シリンジ中の１７５３．２４ｍｇの１重量％ＮａＯＨ中で約４０分間水和した。ＢＤＤＥ（３１１．７ｍｇ）を膨潤したＨＡに添加し、ＨＡをさらなる８０分間、膨潤させ続けた。膨潤したＨＡ／ＢＤＤＥ混合物を５０℃で２０分間予め反応させた。 Example 9: Vitagen binding to cross-linked LMW HA gel using BDDE as cross-linking agent. The degree of bonding is 15 mol%, and G ′ is about 365 Pa.
398.2 mg of LMW HA was hydrated in 1753.24 mg of 1 wt% NaOH in a syringe for about 40 minutes. BDDE (311.7 mg) was added to the swollen HA and the HA continued to swell for an additional 80 minutes. The swollen HA / BDDE mixture was pre-reacted at 50 ° C. for 20 minutes.

８０１．９ｍｇのＶｉｔａｇｅｎを１４５９．７ｍｇの１０重量％ＮａＯＨ中で別に溶解させ、ＢＤＤＥと予め反応させたＨＡと混合した。その混合物を５０℃でさらなる２．５時間、反応させ続けた。約２．５時間後、ＨＡ‐Ｖｉｔａｇｅｎゲルが形成された。次いで、１９５ｍｇの１２Ｍ ＨＣｌを９００４．０ｍｇの１０倍ＰＢＳ（ｐＨ７．４）に添加して、ＨＣｌ‐ＰＢＳ溶液を得、そのＨＣｌ‐ＰＢＳ溶液を添加して、ゲルを中和させ、膨潤させた。そのゲルを環状振騰器上で４８時間にわたり中和させ、膨潤させた。そのゲルを、約６０μｍスクリーンを通してサイズ調整し、２つのシリンジ間を往復させることにより約２０回混合した。そのゲルを２０，０００ＭＷＣＯ ＣＥ透析バッグ中に入れ、ＰＢＳ緩衝液（ｐＨ７．４）中で透析した。透析を、ＰＢＳ緩衝液を頻繁に交換しながら約１２０時間続けた。透析後、そのゲルをシリンジ中に入れ、４℃の冷蔵庫内で貯蔵した。ゲル流体力学的特性を、実施例３に記載される手順で測定した。結合度を、実施例２に記載されるＡＡ２Ｇ決定と類似の方法を用いて、約１５モル％と決定した。ゲル貯蔵弾性係数は約３６５Ｐａである。   801.9 mg of Vitagen was separately dissolved in 1459.7 mg of 10 wt% NaOH and mixed with HA pre-reacted with BDDE. The mixture was allowed to react at 50 ° C. for an additional 2.5 hours. After about 2.5 hours, an HA-Vitagen gel was formed. 195 mg of 12M HCl was then added to 9004.0 mg of 10 × PBS (pH 7.4) to give an HCl-PBS solution, which was added to neutralize and swell the gel. . The gel was neutralized for 48 hours on an annular shaker and allowed to swell. The gel was sized through an approximately 60 μm screen and mixed approximately 20 times by reciprocating between the two syringes. The gel was placed in a 20,000 MWCO CE dialysis bag and dialyzed in PBS buffer (pH 7.4). Dialysis was continued for about 120 hours with frequent changes of PBS buffer. After dialysis, the gel was placed in a syringe and stored in a refrigerator at 4 ° C. Gel hydrodynamic properties were measured according to the procedure described in Example 3. The degree of binding was determined to be about 15 mol% using a method similar to the AA2G determination described in Example 2. The gel storage modulus is about 365 Pa.

実施例１０：アミド化化学反応による直鎖状ＨＡへのＶｉｔａｇｅｎ結合
２００．３ｍｇのＨＭＷ ＨＡを６０ｃｃのシリンジ中の１０ｍＬの水中で水和した。５００ｍｇのＶｉｔａｇｅｎを０．５ｍＬの水中に溶解させ、溶液をｐＨ４．８まで中和した。１９７．７ｍｇのＥＤＣおよび１４９ｍｇのＮＨＳを６ｍＬの水中で別に溶解させた。上記溶液（溶液およびＥＤＣ／ＮＨＳ溶液）を、２３．５ｍＬの水を含有する別の６０ｃｃシリンジに添加する。その２つのシリンジを、２つのシリンジ間を往復させることにより２０回混合する。その混合物を１つのシリンジ中で貯蔵し、３７℃の浴中に４時間浸した。最後に、その溶液を、顕著なＶｉｔａｇｅｎが観察されなくなるまで、ＰＢＳ緩衝液（ｐＨ７．４）に対して透析した。結合度を、実施例３に記載される方法と類似の方法により決定した。結合度は約１０モル％である。 Example 10: Vitagen binding to linear HA by amidation chemistry 200.3 mg of HMW HA was hydrated in 10 mL of water in a 60 cc syringe. 500 mg of Vitagen was dissolved in 0.5 mL of water and the solution was neutralized to pH 4.8. 197.7 mg EDC and 149 mg NHS were dissolved separately in 6 mL water. The above solution (solution and EDC / NHS solution) is added to another 60 cc syringe containing 23.5 mL water. The two syringes are mixed 20 times by reciprocating between the two syringes. The mixture was stored in one syringe and immersed in a 37 ° C. bath for 4 hours. Finally, the solution was dialyzed against PBS buffer (pH 7.4) until no significant Vitagen was observed. The degree of binding was determined by a method similar to that described in Example 3. The degree of binding is about 10 mol%.

実施例１１：架橋結合されたＨＡゲルへのＡＡ２Ｐ結合
２００．４ｍｇのＬＭＷ ＨＡを、シリンジ中の１０００ｍｇのＭＥＳ ５．２緩衝液中で約３０分間水和する。２９２ｍｇのＡＡ２Ｐをバイアル中に入れ、続いて３００ｍｇのｓｔａｒ‐ＰＥＧアミンを添加する。上記溶液を室温で一晩反応させる。そのゲルをＰＢＳ緩衝液で水和し、ＰＢＳ緩衝液に対して透析して、未反応のＡＡ２Ｐを除去した。最終的なゲルを実施例２および３に記載されるように特徴付けて、結合度およびゲル流体力学的特性を決定した。結合度は約２０モル％である。貯蔵弾性係数（Ｇ’）は約５００Ｐａである。 Example 11: AA2P binding to cross-linked HA gel 200.4 mg LMW HA is hydrated in 1000 mg MES 5.2 buffer in a syringe for about 30 minutes. 292 mg of AA2P is placed in a vial followed by the addition of 300 mg of star-PEG amine. The solution is allowed to react overnight at room temperature. The gel was hydrated with PBS buffer and dialyzed against PBS buffer to remove unreacted AA2P. The final gel was characterized as described in Examples 2 and 3 to determine the degree of binding and gel hydrodynamic properties. The degree of binding is about 20 mol%. The storage elastic modulus (G ′) is about 500 Pa.

実施例１２
細線の出現を低減するための、ＡＡ２Ｇを有するＨＡ／ＢＤＤＥ皮膚充填剤製品の製剤化
上記実施例に記載されるゲルのいずれかに対して、透析後、好適な量の遊離ＨＡゲルをそのゲルに添加して、ゲルの粘着性および／または注入可能性の修正を改善し得る。例えば、均一な粘弾性ゲル（「遊離」ＨＡゲル）を得るために、遊離ＨＡ繊維をリン酸緩衝液中で膨潤させる。（例えば、約１ｗ／ｗ％〜約５ｗ／ｗ％の遊離ＨＡを有する組成物を得るために）この非架橋結合ゲルを、透析ステップ前に、実施例１で得られたＨＡ／ＢＤＤＥ架橋結合ゲルに添加する。結果として生じるゲルを次いで、処理済み滅菌シリンジ中に満たし、滅菌のために十分な温度および圧で少なくとも約１分間オートクレーブにかける。オートクレーブ後、最終的なＨＡ／ＡＡ２Ｇ製品を包装し、目尻または他の顔面領域における細線の出現を改善する表層注入のための皮膚充填剤として使用するために医師に配布する。 Example 12
Formulation of HA / BDDE skin filler product with AA2G to reduce the appearance of fine lines For any of the gels described in the above examples, after dialysis, a suitable amount of free HA gel is applied to the gel To improve gel stickiness and / or injectability modification. For example, free HA fibers are swollen in phosphate buffer to obtain a uniform viscoelastic gel (“free” HA gel). This non-cross-linked gel (eg, to obtain a composition having about 1 w / w% to about 5 w / w% free HA) was subjected to the HA / BDDE cross-linking obtained in Example 1 before the dialysis step. Add to gel. The resulting gel is then filled into a treated sterile syringe and autoclaved for at least about 1 minute at a temperature and pressure sufficient for sterilization. After autoclaving, the final HA / AA2G product is packaged and distributed to physicians for use as a skin filler for superficial injections that improve the appearance of fine lines in the corner of the eye or other facial areas.

実施例１３
リドカインを含むＨＡ‐ＡＡ２Ｇ皮膚充填剤の製剤化
実施例１２の手順に従うが、透析ステップ後、かつ遊離ＨＡゲル添加前に、リドカインクロル水和物（リドカインＨＣｌ）をその混合物に添加する。粉末形態の（リドカインＨＣｌ）を最初にＷＦＩ中で可溶化し、０．２μｍフィルターを通してろ過し得る。希釈ＮａＯＨ溶液を、わずかに塩基性のｐＨ（例えば、約７．５〜約８のｐＨ）に到達させるために、その粘着性ＨＡ／ＡＡ２Ｇゲルに添加する。そのリドカインＨＣｌ溶液を次いで、そのわずかに塩基性のゲルに添加して、最終的に所望される濃度、例えば、約０．３ｗ／ｗ％の濃度に到達させる。すると、ＨＡ／ＡＡ２Ｇ／リドカイン混合物の結果として生じるｐＨは、約７であり、ＨＡ濃度は、約２４ｍｇ／ｇである。適切なブレンダー機構を備えた標準の反応器中で、適切な均一性を得るために機械的混合を行う。 Example 13
Formulation of HA-AA2G Dermal Filler with Lidocaine Following the procedure of Example 12, but after the dialysis step and before the addition of the free HA gel, lidocaine chlorhydrate (lidocaine HCl) is added to the mixture. Powdered form (lidocaine HCl) can be first solubilized in WFI and filtered through a 0.2 μm filter. Diluted NaOH solution is added to the sticky HA / AA2G gel to reach a slightly basic pH (eg, a pH of about 7.5 to about 8). The lidocaine HCl solution is then added to the slightly basic gel to reach the final desired concentration, eg, a concentration of about 0.3 w / w%. The resulting pH of the HA / AA2G / lidocaine mixture is then about 7 and the HA concentration is about 24 mg / g. In a standard reactor equipped with a suitable blender mechanism, mechanical mixing is performed to obtain proper homogeneity.

実施例１４
ＨＡヒドロゲルへのカルボキシル官能基を含有する添加剤の結合
レチノイン酸（トレチノインとしても知られる）、アダパレンス（ａｄａｐａｌｅｎｃｅ）、およびアルファ‐リポ酸等の添加剤は、カルボキシル官能基（‐ＣＯＯＨ）を含有する。これらの添加剤は、ＥＤＣ化学反応を用いたエステル化によりＨＡヒドロゲルに結合される。本発明のある実施形態に従う結合についての実施例は、以下のように説明される： Example 14
Additives containing carboxyl functional groups to HA hydrogels Additives such as retinoic acid (also known as tretinoin), adapalence, and alpha-lipoic acid contain carboxyl functional groups (-COOH) . These additives are bound to the HA hydrogel by esterification using EDC chemistry. An example of binding according to an embodiment of the present invention is described as follows:

２００ｍｇのＨＭＷ ＨＡを６０ｃｃシリンジ中の１０ｍＬのＭＥＳ緩衝液（ｐＨ４．８）中で水和する。別のシリンジ中で、２００ｍｇのレチノイン酸を５ｍＬの水‐アセトン混合物（水／アセトン体積比１：３）中に溶解させる。上記２つのシリンジをシリンジ接続器により約２０回混合する。次いで、１９７．７ｍｇのＥＤＣおよび１４９ｍｇのＮＨＳを別のシリンジ中の６ｍＬの水中で別に溶解させる。ＥＤＣおよびＮＨＳを含有するシリンジを、ＨＡおよびレチノイン酸を含有するシリンジと接続し、２つのシリンジ間を往復させることにより反応物を少なくとも２０回混合する。その混合物を１つのシリンジ中で貯蔵し、３７℃の浴中に４時間浸す。そのゲルをイソプロパノールに対して透析して、未結合のレチノイン酸を除去し、次いで、無菌条件下でＰＢＳ緩衝液に対して透析する。そのゲルを滅菌シリンジ中に包装し、４℃で貯蔵する。   200 mg of HMW HA is hydrated in 10 mL of MES buffer (pH 4.8) in a 60 cc syringe. In a separate syringe, 200 mg retinoic acid is dissolved in 5 mL water-acetone mixture (water / acetone volume ratio 1: 3). The two syringes are mixed about 20 times with a syringe connector. Then 197.7 mg EDC and 149 mg NHS are dissolved separately in 6 mL water in a separate syringe. A syringe containing EDC and NHS is connected to a syringe containing HA and retinoic acid, and the reactants are mixed at least 20 times by reciprocating between the two syringes. The mixture is stored in one syringe and immersed in a 37 ° C. bath for 4 hours. The gel is dialyzed against isopropanol to remove unbound retinoic acid and then dialyzed against PBS buffer under aseptic conditions. The gel is packaged in a sterile syringe and stored at 4 ° C.

実施例１５
ＨＡヒドロゲルへのヒドロキシル官能基を含有する添加剤の結合
レチノール（トレチノインとしても知られる）、カタラーゼ、ジメチルアミノエタノール、およびｇ‐トコフェロール等の添加剤は、ヒドロキシル官能基（‐ＯＨ）を含有する。これらの添加剤は、ＥＤＣ化学反応を用いたエステル化によりＨＡヒドロゲルに結合される。結合についての典型的な実施例は、以下のように説明される： Example 15
Addition of Additives Containing Hydroxyl Functional Groups to HA Hydrogels Additives such as retinol (also known as tretinoin), catalase, dimethylaminoethanol, and g-tocopherol contain hydroxyl functional groups (—OH). These additives are bound to the HA hydrogel by esterification using EDC chemistry. An exemplary embodiment for binding is described as follows:

２００ｍｇのＨＭＷ ＨＡを６０ｃｃのシリンジ中の１０ｍＬの２‐（Ｎ‐モルホリノ）エタンスルホン酸（ＭＥＳ）緩衝液（ｐＨ４．８）中で水和する。別のシリンジ中で、２００ｍｇのレチノール酸を５ｍＬの水‐アセトン混合物（水／アセトン体積比１：３）中に溶解させる。上記２つのシリンジをシリンジ接続器により約２０回混合する。次いで、１９７．７ｍｇのＥＤＣおよび１４９ｍｇのＮＨＳを別のシリンジ中の６ｍＬの水中で別に溶解させる。ＥＤＣおよびＮＨＳを含有するシリンジをＨＡおよびレチノールを含有するシリンジに接続し、２つのシリンジ間を往復させることにより反応物を少なくとも２０回混合する。その混合物を１つのシリンジ中で貯蔵し、３７℃の浴中に４時間浸す。そのゲルをイソプロパノールに対して透析して、未結合のレチノールを除去し、次いで、無菌条件下でＰＢＳ緩衝液に対して透析する。そのゲルを滅菌シリンジ中に包装し、４℃で貯蔵する。   200 mg of HMW HA is hydrated in 10 mL of 2- (N-morpholino) ethanesulfonic acid (MES) buffer (pH 4.8) in a 60 cc syringe. In a separate syringe, 200 mg of retinoic acid is dissolved in 5 mL of water-acetone mixture (water / acetone volume ratio 1: 3). The two syringes are mixed about 20 times with a syringe connector. Then 197.7 mg EDC and 149 mg NHS are dissolved separately in 6 mL water in a separate syringe. Connect the syringe containing EDC and NHS to the syringe containing HA and retinol and mix the reactants at least 20 times by reciprocating between the two syringes. The mixture is stored in one syringe and immersed in a 37 ° C. bath for 4 hours. The gel is dialyzed against isopropanol to remove unbound retinol and then dialyzed against PBS buffer under aseptic conditions. The gel is packaged in a sterile syringe and stored at 4 ° C.

実施例１６
修飾後のＨＡヒドロゲルへのヒドロキシル官能基を含有する添加剤の結合
これは、２ステップのプロセスである。 Example 16
Binding of an additive containing hydroxyl functionality to the modified HA hydrogel This is a two step process.

ステップ１：架橋結合されたＨＡゲル、例えば、市販のＨＡベースの皮膚充填剤、例えば、ＪＵＶＥＤＥＲＭ（登録商標）、Ａｌｌｅｒｇａｎ、Ｉｒｖｉｎｅ ＣＡ、またはＲｅｓｔｙｌａｎｅ（登録商標）Ｍｅｄｉｃｉｓ ＡｅｓｔｈｅｔｉｃｓをＥＤＣ／ＮＨＳで処理して、ＨＡのカルボキシル基を活性化する。   Step 1: Treat a cross-linked HA gel, eg, a commercial HA-based skin filler, eg, JUVEDERM®, Allergan, Irvine CA, or Restylane® Medicis Aesthetics with EDC / NHS , Activates the carboxyl group of HA.

ステップ２：活性化されたＨＡヒドロゲルを、ヒドロキシル基を含有する添加剤で処理する。ヒドロキシル基を含有する添加剤は、レチノール、カタラーゼ、ジメチルアミノエタノール、およびｇ‐トコフェロールヒドロキシル官能基（‐ＯＨ）である。   Step 2: Treat the activated HA hydrogel with an additive containing hydroxyl groups. Additives containing hydroxyl groups are retinol, catalase, dimethylaminoethanol, and g-tocopherol hydroxyl functionality (—OH).

架橋結合されたＨＡゲルへの添加剤の結合についての典型的な実施例は、以下の通りである：   A typical example for the binding of the additive to the cross-linked HA gel is as follows:

２ｍｇのＪｕｖｅｄｅｒｍゲルを２００ｍｇのＥＤＣおよび１５０ｍｇのＮＨＳと室温で混合する。次いで、３ｍＬのアセトン‐水混合物中の２００ｍｇのレチノールを添加する。上記混合物を３７℃で４時間反応させる。そのゲルをイソプロパノールに対して透析して、未結合のレチノールを除去し、次いで、無菌条件下でＰＢＳ緩衝液に対して透析する。そのゲルを滅菌シリンジ中に包装し、４℃で貯蔵する。   2 mg Juvederm gel is mixed with 200 mg EDC and 150 mg NHS at room temperature. Then 200 mg of retinol in 3 mL of acetone-water mixture is added. The mixture is reacted at 37 ° C. for 4 hours. The gel is dialyzed against isopropanol to remove unbound retinol and then dialyzed against PBS buffer under aseptic conditions. The gel is packaged in a sterile syringe and stored at 4 ° C.

実施例１７
ＨＡヒドロゲルへの成長因子、ペプチド、またはエラスチンの結合
官能アミン基を含有する、上皮成長因子（ＥＧＦ）、形質転換成長因子（ＴＧＦ）、およびペプチド等の添加剤をＨＡに結合させて、有益な皮膚充填剤を形成し得る。これらの添加物は、アミド化化学反応によりＨＡに結合される。結合についての典型的な実施例は、以下のように説明される： Example 17
Additives such as epidermal growth factor (EGF), transforming growth factor (TGF), and peptides, which contain functional amine groups for growth factors, peptides, or elastin to HA hydrogels , can be beneficially bound to HA. A skin filler may be formed. These additives are bound to HA by amidation chemistry. An exemplary embodiment for binding is described as follows:

２００．３ｍｇのＨＭＷ ＨＡを１０ｍＬのＭＥＳ緩衝水（ｐＨ５．４）中で水和する。１００ｍｇのＭＥＳ溶液中の２０ｍｇのＥＧＦを添加する。上記混合物に、１９７．７ｍｇのＥＤＣおよび１４９ｍｇを添加する。結果として生じる反応混合物を３７℃で４時間反応させる。反応完了後、そのゲルをイソプロパノールに対してさらに透析し、次いで、無菌条件下でＰＢＳ緩衝液に対して透析する。そのゲルを滅菌シリンジ中に包装し、４℃で貯蔵する。   200.3 mg of HMW HA is hydrated in 10 mL of MES buffered water (pH 5.4). Add 20 mg EGF in 100 mg MES solution. Add 197.7 mg EDC and 149 mg to the above mixture. The resulting reaction mixture is reacted at 37 ° C. for 4 hours. After the reaction is complete, the gel is further dialyzed against isopropanol and then dialyzed against PBS buffer under aseptic conditions. The gel is packaged in a sterile syringe and stored at 4 ° C.

本発明は、移植された脂肪組織の生存率を向上させる方法をさらに提供する。この方法は、一般に、組成物を、移植された脂肪組織に隣接する患者の皮膚中に導入するステップを含み得、その組成物は、本明細書の他の箇所に記載される組成物である。例えば、組成物は、ヒアルロン酸およびヒアルロン酸に共有結合されたビタミンＣ誘導体を含み得、その結合度は、約３モル％〜約４０モル％である。本発明の他の態様において、皮膚を治療するための方法は、皮膚中に、脂肪組織と、ヒアルロン酸と、ヒアルロン酸に結合されたビタミンＣとを含む組成物を導入することを含む。   The present invention further provides a method for improving the survival rate of transplanted adipose tissue. The method may generally include introducing the composition into the skin of the patient adjacent to the transplanted adipose tissue, the composition being a composition described elsewhere herein. . For example, the composition can include hyaluronic acid and a vitamin C derivative covalently bound to hyaluronic acid, the degree of binding being from about 3 mole% to about 40 mole%. In another aspect of the invention, a method for treating skin comprises introducing into the skin a composition comprising adipose tissue, hyaluronic acid, and vitamin C bound to hyaluronic acid.

実施例１８
ＨＡヒドロゲルへの成長因子、ペプチド、またはエラスチンの結合
ヒト脂肪組織由来幹細胞（ｈＡＳＣ）に対するビタミンＣおよびその誘導体の***促進効果を評価するために、ｈＡＳＣを、組織培養プラスチック上で、遊離型のビタミンＣ（アスコルビン酸）またはその誘導体（ＶｉｔａｇｅｎまたはＡＡ２Ｇ）を補充したまたは補充しない完全ＭｅｓｅｎＰｒｏ培地（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ，Ｃａｒｌｓｂａｄ，ＣＡ）中で４日間培養した。増殖を、ＭＴＴアッセイによって、製造業者（ＡＴＣＣ，Ｍａｎａｓｓａｓ，ＶＡ）によって記載されるように評価した。４日後、アスコルビン酸の０．２５、０．５、および１ｍＭの濃度が、それぞれ、アスコルビン酸を欠いた対照を６０％、８０％、および９６％上回って、増殖を向上させることが見出された（デヒドロゲナーゼ酵素による、黄色のテトラゾリウムＭＴＴの、紫色のホルマザンへの変換の量によって測定（紫色のホルマザンは、洗剤によって可溶化する）。ＡＡ２Ｇの同じ濃度の使用は、それぞれ、対照を７０％、６０％、および５０％を上回る増殖向上をもたらした。同様の結果がＶｉｔａｇｅｎにより得られ、それぞれ、対照を７０％、６０％、および３０％上回る増加を示した。要約すると、ビタミンＣならびにその誘導体ＡＡ２ＧおよびＶｉｔａｇｅｎは、成長因子含有培地の存在下で、細胞培養物中のｈＡＳＣ増殖を向上させる。 Example 18
To assess the mitogenic effect of vitamin C and its derivatives on human adipose tissue-derived stem cells (hASC) binding of growth factors, peptides, or elastin to HA hydrogels , hASC was isolated on tissue culture plastic on free vitamins. Cultured in complete MesenPro medium (Invitrogen, Carlsbad, Calif.) Supplemented with or without C (ascorbic acid) or its derivatives (Vitagen or AA2G) for 4 days. Proliferation was assessed by the MTT assay as described by the manufacturer (ATCC, Manassas, VA). After 4 days, 0.25, 0.5, and 1 mM concentrations of ascorbic acid were found to improve proliferation by over 60%, 80%, and 96%, respectively, over controls lacking ascorbic acid. (Determined by the amount of yellow tetrazolium MTT converted to purple formazan by the dehydrogenase enzyme (purple formazan is solubilized by the detergent). Use of the same concentration of AA2G results in 70% control, respectively. Similar results were obtained with Vitagen, showing an increase of 70%, 60%, and 30% over the controls, respectively.In summary, vitamin C and its derivatives AA2G and Vitagen improve hASC proliferation in cell culture in the presence of growth factor-containing media.

架橋結合されたビタミンＣを有する架橋結合されたＨＡゲル
低減されたチンダル現象および他の利点を示す本発明のある特定の実施形態に従う、架橋結合されたビタミンＣを有し、架橋剤として１，４−ブタンジオール（ｂｕｔａｅｄｉｏｌ）ジグリシジルエーテル（ＢＤＤＥ）を用いる、架橋結合されたＨＡベースのゲルの調製が、下の実施例１９および２０に記載される。実施例１９において、ビタミンＣ誘導体は、アスコルビン酸２−グルコシド（ＡＡ２Ｇ）であり、実施例２０において、ビタミンＣ誘導体は、リン酸アスコルビル３‐アミノプロピル（Ｖｉｔａｇｅｎ）である。これらのゲルは、最適な流体力学的特性、優れた注入可能性、および高いＨＡ濃度（２５ｍｇ／ｇ）を有する。いかなる特定の操作理論にも拘束されることを望むものではないが、本発明者らによって、ＡＡ２ＧまたはＶｉｔａｇｅｎのいずれかの存在下で、ＨＡをＢＤＤＥと架橋結合することにより、ゲルの特性が大幅に変化し、そのゲルが、ＢＤＤＥと架橋結合された市販のＨＡゲルと比べて、高い架橋結合密度、高いＨＡ濃度、低い粘度、および低い押出力を有することが発見されている。ＡＡ２ＧまたはＶｉｔａｇｅｎが架橋結合の間に存在するので、形成されたこのゲルは、ペンダント（ｐｅｎｄｅｎｔ）基として、かつＨＡ鎖を単独でまたはＢＤＤＥを介してのいずれかで橋渡しする架橋剤の両方として、ＨＡ鎖に連結されたこれらのアスコルビン酸誘導体を有する。ゲルの顕微鏡的構造は大幅に変化し、針が３０ゲージもの細さであっても、非常に低い押出力を有するゲルをもたらす。さらに、そのゲルは、約３モル％〜約１０モル％、または最大約１５モル％のＨＡに結合されたビタミンＣを有する。ゲルが注入されるとき、それらは、線維芽細胞またはホスホターゼ（ｐｈｏｓｐｈｏｔａｓｅ）から、α−グルコシダーゼ等の内因性酵素によって、活性ビタミンＣを放出する。活性ビタミンＣは、皮膚コラーゲン新生を誘発し得、ゲル分解を阻害するラジカルスカベンジャーとして作用し得る。 Cross-linked HA gel with cross-linked vitamin C has cross-linked vitamin C according to certain embodiments of the present invention showing reduced Tyndall phenomenon and other advantages, The preparation of cross-linked HA-based gels using 4-butanediol diglycidyl ether (BDDE) is described in Examples 19 and 20 below. In Example 19, the vitamin C derivative is ascorbic acid 2-glucoside (AA2G), and in Example 20, the vitamin C derivative is ascorbyl phosphate 3-aminopropyl (Vitagen). These gels have optimal hydrodynamic properties, excellent injectability, and high HA concentration (25 mg / g). While not wishing to be bound by any particular theory of operation, we have greatly improved gel properties by cross-linking HA with BDDE in the presence of either AA2G or Vitagen. It has been discovered that the gel has a high crosslink density, high HA concentration, low viscosity, and low thrust compared to a commercial HA gel cross-linked with BDDE. Since AA2G or Vitagen is present during cross-linking, the gel formed is both as a pendant group and as a cross-linking agent that bridges the HA chain either alone or via BDDE. Having these ascorbic acid derivatives linked to the HA chain. The microscopic structure of the gel varies greatly, resulting in a gel with very low thrust even if the needle is as fine as 30 gauge. In addition, the gel has about 3 mol% to about 10 mol%, or up to about 15 mol% of vitamin C bound to HA. When gels are injected, they release active vitamin C from fibroblasts or phosphatases by endogenous enzymes such as α-glucosidase. Active vitamin C can induce skin collagen neogenesis and can act as a radical scavenger that inhibits gel degradation.

実施例１９
低減されたチンダル現象を伴うＨＡ／ＡＡ２Ｇゲルの製剤化
シリンジ中の４００．１ｍｇのＬＭＷ ＨＡおよび４０２．３ｍｇのＡＡ２Ｇの混合物を、１７６４．０ｍｇの５重量％ＮａＯＨ溶液を添加した後に約６０分間水和した。別個のバイアル中に、８００．８ｍｇのＡＡ２Ｇ、続いて１４０１．１ｍｇの９．１重量％ＮａＯＨ溶液、および２５２．６ｍｇのＢＤＤＥを添加した。結果として生じた溶液（ｐＨ１２超）を５０℃の水浴中で約２０分間反応させ、その後それを水和ＨＡに移した。その添加後、その混合物を、２つのシリンジ間を往復させることにより約２０回混合した。そのペーストを次いでバイアル中に移し、その後それを５０℃の水浴中に約２．５時間配置した。架橋結合させた後、１９７．０ｍｇの１２Ｍ ＨＣｌおよび９．１８ｇの１０倍ＰＢＳ（ｐＨ７．４）を含有する溶液を添加して塩基を中和し、ゲルを環状振騰器上で７２時間膨潤させた。ゲルを、約６０μｍ細孔サイズのメッシュに押し通すことによってサイズ調整した。サイズ調整したゲルを、２つのシリンジ間を往復させることにより約２０回混合し、その後それを、ＭＷＣＯ約２０ｋＤａのセルロースエステル透析バッグ中に移し、ＰＢＳ緩衝液（ｐＨ７．４）に対して、緩衝液を毎日２回交換しながら５日間透析した。透析後、そのゲルを、１ｍＬ ＣＯＣシリンジ中に分注し、５０００ＲＰＭで５分間遠心分離して気泡を除去し、湿り蒸気で滅菌した。ゲルは、２５ｍｇ／ｇの最終ＨＡ濃度を有し、ＡＡ２Ｇモル％が実施例２に記載されるように計算して約１０モル％、Ｇ’が約８０Ｐａであった。他のゲルを同様の様態で作製し、このうちＧ’値が約６０Ｐａ〜約８０Ｐａであった。 Example 19
Formulation of HA / AA2G gel with reduced Tyndall phenomenon A mixture of 400.1 mg LMW HA and 402.3 mg AA2G in a syringe was added for about 60 minutes after adding 1764.0 mg of 5 wt% NaOH solution. It was summed up. In a separate vial, 800.8 mg AA2G was added followed by 1401.1 mg 9.1 wt% NaOH solution and 252.6 mg BDDE. The resulting solution (greater than pH 12) was reacted in a 50 ° C. water bath for about 20 minutes, after which it was transferred to hydrated HA. After the addition, the mixture was mixed approximately 20 times by reciprocating between the two syringes. The paste was then transferred into a vial after which it was placed in a 50 ° C. water bath for about 2.5 hours. After cross-linking, a solution containing 197.0 mg 12M HCl and 9.18 g 10 × PBS (pH 7.4) was added to neutralize the base, and the gel was swollen on an annular shaker for 72 hours I let you. The gel was sized by pushing it through a mesh of approximately 60 μm pore size. The sized gel is mixed approximately 20 times by reciprocating between two syringes, after which it is transferred into a cellulose ester dialysis bag with a MWCO of approximately 20 kDa and buffered against PBS buffer (pH 7.4). The solution was dialyzed for 5 days with two changes daily. After dialysis, the gel was dispensed into a 1 mL COC syringe and centrifuged at 5000 RPM for 5 minutes to remove bubbles and sterilized with wet steam. The gel had a final HA concentration of 25 mg / g, with AA 2 G mol% calculated as described in Example 2 was about 10 mol% and G ′ was about 80 Pa. Other gels were prepared in the same manner, and the G ′ value was about 60 Pa to about 80 Pa.

実施例１９Ａ
低減されたチンダル現象を伴う、リドカインを有するＨＡ／ＡＡ２Ｇの製剤化
実施例１９のゲルに、ある量のリドカインを添加して、０．３ｗｗ％リドカインを有するリドカインゲルを含むＨＡ／ＡＡ２Ｇを得た。リドカインの溶液を、リドカインＨＣｌをＰＢＳ緩衝液（ｐＨ約７．４）中に溶解させることによって調製した。リドカイン溶液のアリコートを、透析後であるが滅菌前に、実施例１９のゲルに添加した。ゲルを次いで完全に混合して、０．３ｗ／ｗ％リドカイン濃度を有する均一化された混合物を得た。 Example 19A
Formulation of HA / AA2G with lidocaine with reduced Tyndall phenomenon A certain amount of lidocaine was added to the gel of Example 19 to obtain HA / AA2G containing lidocaine gel with 0.3 wt% lidocaine. . A solution of lidocaine was prepared by dissolving lidocaine HCl in PBS buffer (pH about 7.4). An aliquot of lidocaine solution was added to the gel of Example 19 after dialysis but before sterilization. The gel was then thoroughly mixed to obtain a homogenized mixture having a 0.3 w / w% lidocaine concentration.

実施例２０
低減されたチンダル現象を伴うＨＡ／Ｖｉｔａｇｅｎゲルの製剤化
４０１．０ｍｇのＬＭＷ ＨＡを、シリンジ中の２３５５．０ｍｇの１重量％ＮａＯＨ溶液中で約４５分間水和した。３０３．８ｍｇ ＢＤＤＥを、水和されたＨＡに添加して、シリンジからシリンジにわたる混合によって１０回混合した。混合物を５０℃の水浴中で１５分間予め反応させた。８００．１ｍｇのＶｉｔａｇｅｎを、９５０．６ｍｇの１５重量％ＮａＯＨ中に別に溶解させ、続いて５１０．１ Ｍｉｌｌｉ−Ｑ水を添加した。Ｖｉｔａｇｅｎ溶液を、シリンジからシリンジにわたる混合を使用して３０回往復させて、予め加熱された水和ＨＡ／ＢＤＤＥ混合物と混合した。混合物を再び５０℃の水浴中に配置し、反応がさらに２時間進行し、その後、１４８．１ｍｇの１２Ｍ ＨＣｌおよび８５２３．１ｍｇの１０倍ＰＢＳ（ｐＨ７．４）を含有する溶液を、クロスに添加した。ＨＣｌ−ＰＢＳ溶液を添加して、ゲルを中和し、膨潤させた。そのゲルを環状振騰器上で４８時間にわたり、中和させ、膨潤させた。そのゲルを、約６０μｍスクリーンを通してサイズ調整し、２つのシリンジ間を往復させることにより約２０回混合した。そのゲルを２０，０００ＭＷＣＯ ＣＥ透析バッグ中に入れ、ＰＢＳ緩衝液（ｐＨ７．４）中で透析した。透析を、ＰＢＳ緩衝液を頻繁に交換しながら約１９７時間続けた。透析後、そのゲルを１ｍＬ ＣＯＣシリンジ中に移し、５０００ＲＰＭで５分間遠心分離し、湿り蒸気で滅菌した。ゲルの最終ＨＡ濃度は、２４ｍｇ／ｇであった。 Example 20
Formulation of HA / Vitagen gel with reduced Tyndall phenomenon 401.0 mg of LMW HA was hydrated in 2355.0 mg of 1 wt% NaOH solution in a syringe for about 45 minutes. 303.8 mg BDDE was added to the hydrated HA and mixed 10 times by mixing from syringe to syringe. The mixture was pre-reacted in a 50 ° C. water bath for 15 minutes. 800.1 mg of Vitagen was separately dissolved in 950.6 mg of 15 wt% NaOH followed by addition of 510.1 Milli-Q water. The Vitagen solution was mixed with the pre-heated hydrated HA / BDDE mixture by reciprocating 30 times using syringe to syringe mixing. The mixture was again placed in a 50 ° C. water bath and the reaction proceeded for an additional 2 hours, after which a solution containing 148.1 mg of 12M HCl and 8523.1 mg of 10 × PBS (pH 7.4) was added to the cloth. did. HCl-PBS solution was added to neutralize and swell the gel. The gel was neutralized and swollen for 48 hours on an annular shaker. The gel was sized through an approximately 60 μm screen and mixed approximately 20 times by reciprocating between the two syringes. The gel was placed in a 20,000 MWCO CE dialysis bag and dialyzed in PBS buffer (pH 7.4). Dialysis was continued for about 197 hours with frequent changes of PBS buffer. After dialysis, the gel was transferred into a 1 mL COC syringe, centrifuged at 5000 RPM for 5 minutes, and sterilized with wet steam. The final HA concentration of the gel was 24 mg / g.

１−エチル−３−［３−ジメチルアミノプロピル］カルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ）化学反応を介して架橋結合されたＨＡゲル
低減されたチンダル現象および他の利点を示す本発明のある特定の実施形態に従う、架橋結合されたＨＡベースのゲルの調製が、下の実施例２１および２２に記載される。実施例２１において、そのゲルは、ＥＤＣ化学反応を介して作製され 架橋剤は、ヘキサメチレンジアミン（ＨＭＤＡ）を用い、実施例２０においては、３−［３−（３−アミノプロポキシ）−２，２−ビス（３−アミノ−プロポキシメチル）−プロポキシ］−プロピルアミン（４アームのアミン−４ ＡＡ）である。架橋結合を、緩やかな条件下、例えば、室温で、および例えば、ｐＨ５．４で行う。反応条件を調節して、最適なゲル特性、優れた注入可能性、および高いＨＡ濃度（約２４ｍｇ／ｇ）を有する、高度に網状のゲルを調製することができる。本発明者らによって、カップリング剤である、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ）およびＮ−ヒドロキシコハク酸イミド（ＮＨＳ）またはスルホニル−ＮＨＳ（スルホ−ＮＨＳ）と組み合わせて、中程度の量のＨＭＤＡまたは４ ＡＡのいずれかを用いて、ＨＡを非常に低い水和または反応濃度で架橋結合することが有利であり得ることが発見されている。ゲルは、相互に離れた架橋結合点を有することになり、よって、高い減衰力を有する高度に架橋結合された物質となる。対照的に、かかる低い水和または反応濃度でのＨＡのＢＤＤＥとの架橋結合は、架橋剤が比較的非効率的であるので実行不可能であり得る。 According to certain embodiments of the present invention exhibit reduced Tyndall phenomenon and other advantages of cross-linked HA gel via 1-ethyl-3- [3-dimethylaminopropyl] carbodiimide hydrochloride (EDC) chemistry The preparation of cross-linked HA-based gels is described in Examples 21 and 22 below. In Example 21, the gel was made via EDC chemistry, the crosslinker was hexamethylenediamine (HMDA), and in Example 20, 3- [3- (3-aminopropoxy) -2, 2-bis (3-amino-propoxymethyl) -propoxy] -propylamine (4 arm amine-4 AA). Cross-linking is carried out under mild conditions, for example at room temperature and for example at pH 5.4. The reaction conditions can be adjusted to prepare highly reticulated gels with optimal gel properties, excellent injectability, and high HA concentration (about 24 mg / g). By the inventors, the coupling agents 1-ethyl-3- (3-dimethylaminopropyl) carbodiimide hydrochloride (EDC) and N-hydroxysuccinimide (NHS) or sulfonyl-NHS (sulfo-NHS) It has been discovered that it may be advantageous to cross-link HA with very low hydration or reaction concentrations using either moderate amounts of HMDA or 4 AA in combination. The gel will have cross-linking points that are distant from each other, thus becoming a highly cross-linked material with a high damping force. In contrast, cross-linking of HA with BDDE at such low hydration or reaction concentrations may not be feasible because the cross-linking agent is relatively inefficient.

実施例２１
低減されたチンダル現象を伴うＨＡ／ＨＭＤＡゲルの製剤化
２０．０ｇの１００ｍＭ ＭＥＳ緩衝液（ｐＨ５．２）を、１０００．０ｍｇのＬＭＷ ＨＡを含有するシリンジに添加した。ＨＭＤＡ溶液を、２６０．９ｍｇ ＨＭＤＡ．ＨＣｌを２０１０．５ｍｇの１００ｍＭ ＭＥＳ緩衝液（ｐＨ５．２）中に溶解させ、２μＬの１Ｍ ＮａＯＨを添加してｐＨを５．２にすることによって調製した。ＥＤＣ溶液を、２５４．２ｍｇのＥＤＣを１１８８．４ｍｇ １００ｍＭ ＭＥＳ緩衝液（ｐＨ５．２）中に溶解させることによって調製し、別個のバイアル中で、４４．３ｍｇのＮＨＳを、１３４１．８ｍｇの１００ｍＭ ＭＥＳ緩衝液（ｐＨ５．２）中に溶解させた。約１時間で、ＨＡが完全に水和すると、７９０μＬのＨＭＤＡ溶液を、水和したＨＡに添加した。混合物を、１０回のシリンジからシリンジにわたる混合によって均一化した。４９０μＬのＥＤＣおよび４９０μＬのＮＨＳ溶液を次いで、均一化されたペーストに添加し、シリンジからシリンジにわたる混合によって再び１０回混合した。混合物を次いでバイアルに移し、室温で５時間架橋結合させ、その後、１７．９ｍＬの１倍ＰＢＳ緩衝液（ｐＨ７．４）を添加した。ゲルをローラー上で３日間膨潤させ、その後、それを６０μｍ細孔サイズのメッシュに押し通した。サイズ調整したゲルを、ＭＷＣＯ ２０ｋＤａのセルロースエステル膜透析管類中に配置し、１倍ＰＢＳに対して、緩衝液を１日２回交換しながら４日間透析した。ゲルを、１ｍＬＣＯＣシリンジ中に分注し、５０００ＲＰＭで５分間遠心分離し、湿り蒸気で滅菌した。ゲルの最終ＨＡ濃度は、２５ｍｇ／ｇであった。 Example 21
Formulation of HA / HMDA gel with reduced Tyndall phenomenon 20.0 g of 100 mM MES buffer (pH 5.2) was added to a syringe containing 1000.0 mg of LMW HA. The HMDA solution was 260.9 mg HMDA. Prepared by dissolving HCl in 2010.5 mg of 100 mM MES buffer (pH 5.2) and adding 2 μL of 1 M NaOH to a pH of 5.2. An EDC solution was prepared by dissolving 254.2 mg EDC in 1188.4 mg 100 mM MES buffer (pH 5.2), and in a separate vial 44.3 mg NHS was 1341.8 mg 100 mM MES. Dissolved in buffer (pH 5.2). When the HA was fully hydrated in about 1 hour, 790 μL of HMDA solution was added to the hydrated HA. The mixture was homogenized by mixing 10 times from syringe to syringe. 490 μL EDC and 490 μL NHS solution were then added to the homogenized paste and mixed again 10 times by mixing from syringe to syringe. The mixture was then transferred to a vial and allowed to crosslink for 5 hours at room temperature, after which 17.9 mL of 1 × PBS buffer (pH 7.4) was added. The gel was allowed to swell on the roller for 3 days, after which it was pushed through a 60 μm pore size mesh. The sized gel was placed in MWCO 20 kDa cellulose ester membrane dialysis tubing and dialyzed against 1 × PBS for 4 days, changing the buffer twice a day. The gel was dispensed into a 1 mL COC syringe, centrifuged at 5000 RPM for 5 minutes, and sterilized with wet steam. The final HA concentration of the gel was 25 mg / g.

実施例２２
低減されたチンダル現象を伴うＨＡ／４ ＡＡゲルの製剤化
３２．５５ｇの１００ｍＭ ＭＥＳ緩衝液ｐＨ５．２を、１０００．４ｍｇのＬＭＷ ＨＡを含有するシリンジに添加した。４ ＡＡ溶液を、２５６．３ｍｇの４ ＡＡを１０３９．８ｍｇの１００ｍＭ ＭＥＳ緩衝液（ｐＨ５．２）中に溶解させ、３８０μＬの６Ｍ ＨＣｌを添加してｐＨを５．２にすることによって調製した。ＥＤＣ溶液を、２５１．２ｍｇのＥＤＣを１０１３．８ｍｇの１００ｍＭ ＭＥＳ緩衝液（ｐＨ５．２）中に溶解させることによって調製し、別個のバイアル中で、７４．７ｍｇのＮＨＳを、２０２０．０ｍｇの１００ｍＭ ＭＥＳ緩衝液（ｐＨ５．２）中に溶解させた。約１時間で、ＨＡが完全に水和すると、２６０μＬの４ ＡＡ溶液を、水和したＨＡに添加した。混合物を、１０回のシリンジからシリンジにわたる混合によって均一化した。２７７μＬのＥＤＣおよび２７３μＬのＮＨＳ溶液を次いで、均一化されたペーストに添加し、シリンジからシリンジにわたる混合によって再び１０回混合した。混合物を次いでバイアルに移し、室温で５時間架橋結合させ、その後、６．４ｍＬの１０倍ＰＢＳ緩衝液（ｐＨ７．４）を添加した。ゲルをローラー上で３日間膨潤させ、その後、それを６０μｍ細孔サイズのメッシュに押し通した。サイズ調整したゲルを、ＭＷＣＯ ２０ｋＤａのセルロースエステル膜透析管類中に配置し、１倍ＰＢＳに対して、緩衝液を１日２回交換しながら４日間透析した。ゲルを、１ｍＬ ＣＯＣシリンジ中に分注し、５０００ＲＰＭで５分間遠心分離し、湿り蒸気で滅菌した。ゲルは、２３ｍｇ／ｇの最終ＨＡ濃度を有した。 Example 22
Formulation of HA / 4 AA gel with reduced Tyndall phenomenon 32.55 g of 100 mM MES buffer pH 5.2 was added to a syringe containing 1000.4 mg of LMW HA. A 4 AA solution was prepared by dissolving 256.3 mg of 4 AA in 1039.8 mg of 100 mM MES buffer (pH 5.2) and adding 380 μL of 6M HCl to a pH of 5.2. An EDC solution was prepared by dissolving 251.2 mg EDC in 1013.8 mg 100 mM MES buffer (pH 5.2), and in a separate vial 74.7 mg NHS was 2020.0 mg 100 mM. Dissolved in MES buffer (pH 5.2). When the HA was fully hydrated in about 1 hour, 260 μL of 4 AA solution was added to the hydrated HA. The mixture was homogenized by mixing 10 times from syringe to syringe. 277 μL EDC and 273 μL NHS solution were then added to the homogenized paste and mixed again 10 times by mixing from syringe to syringe. The mixture was then transferred to a vial and allowed to crosslink for 5 hours at room temperature, after which 6.4 mL of 10 × PBS buffer (pH 7.4) was added. The gel was allowed to swell on the roller for 3 days, after which it was pushed through a 60 μm pore size mesh. The sized gel was placed in MWCO 20 kDa cellulose ester membrane dialysis tubing and dialyzed against 1 × PBS for 4 days, changing the buffer twice a day. The gel was dispensed into a 1 mL COC syringe, centrifuged at 5000 RPM for 5 minutes, and sterilized with wet steam. The gel had a final HA concentration of 23 mg / g.

実施例２３
実施例１９〜２２のゲルの流体力学的特性の決定。
振動平行プレートレオメータである、Ａｎｔｏｎ Ｐａａｒ Ｐｈｙｓｉｃａ ＭＣＲ ３０１を使用して、ゲルの流体力学的特性を測定した。２５ｍｍのプレート直径を１ｍｍのギャップ高さで使用した。測定を２５℃の一定の温度で行った。各測定は、２％の一定の歪みでの１〜１０Ｈｚの周波数掃引および周波数の対数的な増加、続いて５Ｈｚの一定の周波数での１〜３００％の歪み掃引と共に歪みの対数的な増加からなっていた。貯蔵弾性係数（Ｇ’）および粘性係数（Ｇ”）は、１％歪みでの歪み掃引から得た。

Figure 2014526342
Example 23
Determination of the hydrodynamic properties of the gels of Examples 19-22.
The hydrodynamic properties of the gel were measured using an Anton Paar Physica MCR 301, a vibrating parallel plate rheometer. A plate diameter of 25 mm was used with a gap height of 1 mm. Measurements were made at a constant temperature of 25 ° C. Each measurement is from a 1-10 Hz frequency sweep with a constant strain of 2% and a logarithmic increase in frequency, followed by a logarithmic increase in strain with a 1-300% strain sweep at a constant frequency of 5 Hz. It was. The storage modulus (G ′) and viscosity coefficient (G ″) were obtained from a strain sweep at 1% strain.
Figure 2014526342

実施例２４
実施例１９〜２２のゲルの押出力測定値
ゲルを３０ゲージ針に通して押し出すために必要とされる力を、Ｉｎｓｔｒｏｎ ５５６４およびＢｌｕｅｈｉｌｌ ２ソフトウェアを使用して測定した。ゲルを１ｍＬ ＣＯＣシリンジから、３０Ｇ1/2 ＴＳＫ針に通して押し出した。プランジャを１００ｍｍ／分の速度で１１．３５ｍｍにわたって押し、押出力を記録した。

Figure 2014526342
Example 24
Force measurements of the gels of Examples 19-22 The force required to push the gel through a 30 gauge needle was measured using Instron 5564 and Bluehill 2 software. The gel from 1 mL COC syringe, extruded through a 30G 1/2 TSK needle. The plunger was pushed over 11.35 mm at a speed of 100 mm / min and the pushing force was recorded.
Figure 2014526342

実施例２５
実施例１９〜２２のゲルの生体適合性試験
ゲルの５０μＬボーラス注入を、Ｓｐｒａｇｕｅ Ｄａｗｌｅｙラットの背面の皮内に埋め込んだ。埋没物を、１週目に除去し、ヘマトキシリン・エオシン（Ｈ＆Ｅ）染色、および単核性炎症細胞に対するマーカーであるＣＤ６８染色を用いる組織学によって分析した。ＣＤ６８の３つの２０倍画像を、染色の程度に基づいて０〜４でスコア化した。これらの値を次いで平均化して、試料スコアを得た。各ゲルから４つの試料を分析した。

Figure 2014526342
Example 25
Biocompatibility testing of the gels of Examples 19-22 A 50 μL bolus injection of the gel was implanted in the dorsal skin of Sprague Dawley rats. The implants were removed at week 1 and analyzed by histology using hematoxylin and eosin (H & E) staining and CD68 staining, a marker for mononuclear inflammatory cells. Three 20X images of CD68 were scored from 0-4 based on the degree of staining. These values were then averaged to obtain a sample score. Four samples from each gel were analyzed.
Figure 2014526342

実施例２６
実施例１９〜２２のゲル、ＩＳＯ １０９９３−５の細胞傷害性試験。
ゲルの体外細胞傷害性試験を、ＮＡＭＳＡによって、Ａｇａｒｏｓｅ Ｏｖｅｒｌａｙ Ｍｅｔｈｏｄ ｏｆ ＩＳＯ １０９９３−５：ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｏｆ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｄｅｖｉｃｅｓ−Ｐａｒｔ ５：Ｔｅｓｔｓ ｆｏｒ Ｉｎ Ｖｉｔｒｏ Ｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙに従って行った。三重のウェルに、フィルターディスク上に配置した０．１ｍＬの試験物品、ならびに０．９％ ＮａＣｌ溶液、陰性対照として１ｃｍ長の高密度ポリエチレン、および陽性対照としてラテックスの１×１ｃｍ２ 部分を投薬した。各々を、Ｌ９２９マウス線維芽細胞の単層を直接覆っているアガロース表面上に配置した。５％ＣＯ２中、３７℃で２４時間インキュベートした後、培養物を、いずれの異常な細胞形態および細胞溶解について巨視的におよび微視的に検査した。試験物品を、試料の近接における溶解域に基づいて０〜４でスコア化した。試験物品は、いかなる細胞溶解または傷害性も引き起こす証拠を示さなかったため、試料１、３、および４からの試験物質を０としてスコア化した。 Example 26
Cytotoxicity test of the gels of Examples 19-22, ISO 10993-5.
In vitro cytotoxicity tests of gels were performed by NAMSA according to Agarose Overlay Method of ISO 10993-5: biological Evaluation of Medical Devices-Part 5: Tests for In Vitrotox. Triplicate wells were dosed with 0.1 mL test article placed on a filter disk, and 0.9% NaCl solution, 1 cm long high density polyethylene as a negative control, and a 1 × 1 cm 2 portion of latex as a positive control. . Each was placed on an agarose surface directly covering a monolayer of L929 mouse fibroblasts. After incubation for 24 hours at 37 ° C. in 5% CO 2 , the cultures were examined macroscopically and microscopically for any abnormal cell morphology and cell lysis. The test article was scored from 0 to 4 based on the dissolution zone in the vicinity of the sample. Test articles from samples 1, 3, and 4 were scored as 0 because the test article showed no evidence of causing any cell lysis or injury.

チンダル現象の定量分析
目視観察をさらに支持し、ＨＡ充填剤の比較性能分析を行うために、チンダル現象の定量分析を行うことが必要であるとされた。そのようなものとして、皮膚充填剤に特異的なチンダル現象に対する定量的技法は、文献において何ら存在しない。しかしながら、光散乱および光と皮膚との相互作用についての既存の科学的理解に基づいて、（ａ）比色分析、および（ｂ）分光法に基づく２つの別々のアプローチを用いて、皮膚におけるチンダル現象を定量化した。これらの技法に基づいて、３つの別々の定量的パラメータ（下に概説される）を定義して、体内のチンダル現象を測定した。 Quantitative analysis of the Tyndall phenomenon In order to further support visual observation and to perform a comparative performance analysis of the HA filler, it was considered necessary to perform a quantitative analysis of the Tyndall phenomenon. As such, there is no quantitative technique in the literature for the Tyndall phenomenon specific to skin fillers. However, based on existing scientific understanding of light scattering and the interaction of light with skin, using two separate approaches based on (a) colorimetric analysis, and (b) spectroscopy, the tilde in skin The phenomenon was quantified. Based on these techniques, three separate quantitative parameters (outlined below) were defined to measure Tyndall phenomena in the body.

ａ）チンダル現象可視的スコア：スケールは、０．５の増分で、１〜５の範囲を有した。正常な皮膚色調を有し、かつ青色の変色のない注入部位に対して１のスコアを与えた。顕著な青色の変色（典型的にＲｅｓｔｙｌａｎｅまたはＪｕｖｅｄｅｒｍ Ｕｌｔｒａ Ｐｌｕｓに関連する）に対して５の最大スコアを与えた。スコア試験試料に対して盲検化される前に、３人の独立した観察者をスケールに対して訓練した。 a) Tyndall phenomenon visual score : scale had a range of 1-5 in 0.5 increments. A score of 1 was given for injection sites with normal skin tone and no blue discoloration. A maximum score of 5 was given for significant blue discoloration (typically associated with Restylane or Juvederm Ultra Plus). Three independent observers were trained on the scale before blinding to the score test sample.

ｂ）皮膚色の青色成分−「ｂ」：色彩色差計（ＣＭ２６００Ｄ、Ｋｏｎｉｃａ Ｍｉｎｏｌｔａ，ＮＪ）を使用して、様々な充填剤を注入された皮膚部位から送達される光の青色成分を定量化した。これは、Ｌ−ａ−ｂ色スケールの「ｂ」成分を使用することによって達成した。 b) Blue component of skin color— “b” : A color difference meter (CM2600D, Konica Minolta, NJ) was used to quantify the blue component of light delivered from the skin site infused with various fillers. . This was achieved by using the “b” component of the Lab color scale.

ｃ）皮膚から送達される「青色光％」：携帯用分光光度計（ＣＭ２６００Ｄ、Ｋｏｎｉｃａ Ｍｉｎｏｌｔａ，ＮＪ）を使用して、可視光総領域で皮膚から送達される青色光％を定量化した。これは、４００〜４９０ｎｍの可視光スペクトル下面積を積分し、それをスペクトル下総面積（４００〜７００ｎｍ）によって正規化することによって達成した。 c) "% Blue Light" Delivered from the Skin : A portable spectrophotometer (CM2600D, Konica Minolta, NJ) was used to quantify the% blue light delivered from the skin in the total visible light region. This was accomplished by integrating the area under the visible light spectrum from 400-490 nm and normalizing it by the total area under the spectrum (400-700 nm).

実施例２７
ゲルのチンダル評価
ゲルを、リニアスレッディング技法を使用して、２月齢の無毛ラットの大腿部中に、２７Ｇ1/2 ＴＳＫ針に通して皮内注入した。ゲルを、臨床的な細線手技を模倣するために表層に埋め込んだ。チンダルについての試験を、ゲル埋没の４８時間後に行った。チンダル試験を行う前に、ヘモグロビンの欠如に起因するチンダル現象の対比を改善するために、動物を安楽死させた。 Example 27
The Tyndall evaluation gel of gel, using the linear threading technique, in the thigh of the hairless rat of 2 months of age, were injected intradermally through a 27G 1/2 TSK needle. The gel was embedded in the surface layer to mimic clinical thin wire procedures. The test for Tyndall was performed 48 hours after gel embedding. Prior to performing the Tyndall test, animals were euthanized to improve the contrast of Tyndall phenomenon due to the lack of hemoglobin.

埋没の２日後の、実施例１９および２１からのゲルの画が、図１２に示される。市販のＪｕｖｅｄｅｒｍ ＲｅｆｉｎｅおよびＲｅｓｔｙｌａｎｅ Ｔｏｕｃｈについての画像もまた、比較のために示される。青みがかった線（チンダル現象）は、市販のゲルＪｕｖｅｄｅｒｍ ＲｅｆｉｎｅおよびＲｅｓｔｙｌａｎｅ Ｔｏｕｃｈの画像において明確に可視的である。実施例１９、１９Ａ（図示せず）、および２１からのゲルは、チンダル現象を何ら示さなかった。   The gel fractions from Examples 19 and 21 after 2 days of implantation are shown in FIG. Images for commercially available Juvederm Refine and Restylane Touch are also shown for comparison. The bluish line (Tyndall phenomenon) is clearly visible in the images of the commercially available gels Juvederm Refine and Restylane Touch. The gels from Examples 19, 19A (not shown) and 21 did not show any Tyndall phenomenon.

０．５の増分での１〜５の可視的スコアを使用して、注入部位をスコア化した。１のスコアを有した注入部位は、皮膚変色を何ら示さなかった一方で、５のスコアを有した注入部位は、重度の青色の皮膚変色を示した。分光分析もまた、比色計（ＣＭ２６００Ｄ、Ｋｏｎｉｃａ Ｍｉｎｏｌｔａ，ＮＪ）の補助により、注入部位に対して行った。皮膚色の青色成分「ｂ」、および皮膚から送達される青色光の％（４００〜７００ｎｍ）を、独立して測定した。図１３および１４は、可視的チンダルスコアおよび送達される青色光の％を示す。実施例１９および２１からのゲルは、チンダル現象を何ら示さず、より低い可視的チンダルスコアおよび青色光送達値の％を有した。チンダルスコアおよび送達された青色光値の％は、Ｊｕｖｅｄｅｒｍ ＲｅｆｉｎｅおよびＲｅｓｔｙｌａｎｅ Ｔｏｕｃｈについて、より高かった。Ｂｅｌｏｔｅｒｏ Ｓｏｆｔは、いかなるチンダルも示さず、値は、実施例１９および２１のそれらと同等であった。図１３および１４を参照されたい。   The injection site was scored using a visual score of 1-5 in 0.5 increments. The injection site with a score of 1 showed no skin discoloration, while the injection site with a score of 5 showed severe blue skin discoloration. Spectroscopic analysis was also performed on the injection site with the aid of a colorimeter (CM2600D, Konica Minolta, NJ). The skin color blue component “b” and the percentage of blue light delivered from the skin (400-700 nm) were independently measured. Figures 13 and 14 show the visual Tyndall score and the% of blue light delivered. The gels from Examples 19 and 21 did not show any Tyndall phenomenon and had a lower visible Tyndall score and% of blue light delivery value. Tyndall score and% of blue light value delivered were higher for Juvederm Refine and Restylane Touch. Beltero Soft did not show any tyndals and the values were equivalent to those of Examples 19 and 21. See FIGS. 13 and 14.

実施例２８
組織学によるゲルの体内持続期間評価
本発明のゲルおよび市販のゲルの５０μＬボーラス注入を、Ｓｐｒａｇｕｅ Ｄａｗｌｅｙラットの背面の皮内に埋め込んだ。埋没物を、１週目に除去し、ヘマトキシリン・エオシン（Ｈ＆Ｅ）染色を用いる組織学によって分析した。切片を厳密に注入部位において採取した。２つの切片を、各組織試料から切り取り、Ｈ＆Ｅ染色切片を、縫合スコープを用いて縫合した。試料を次いでグループ化し、次のようにスコア化した；残っている物質の量に応じて、なし（０％）、低（２５％）、中（５０％）、および高（１００％）。図１５を参照されたい。 Example 28
Evaluation of Gel Duration in the Body by Histology A 50 μL bolus injection of the gel of the present invention and a commercial gel was implanted in the dorsal skin of Sprague Dawley rats. The implants were removed at week 1 and analyzed by histology using hematoxylin and eosin (H & E) staining. Sections were taken strictly at the injection site. Two sections were cut from each tissue sample and H & E stained sections were sutured using a suture scope. Samples were then grouped and scored as follows: none (0%), low (25%), medium (50%), and high (100%) depending on the amount of material remaining. See FIG.

実施例２８Ａ
ＭＲＩによるゲルの体内持続期間評価
磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）研究を使用して、メスＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラットにおける皮内注入後４０週間の期間にわたる、本発明のゲルおよび市販のゲルの経時的な体積および表面積変化を評価した。ゲルを、１つの埋没当たり1５０μＬの目標体積で注入した。埋没物は、肩の若干後方の２つの対側部位、膝から若干吻側の２つの対側部位、ならびに頭部および尾の中間点の２つの対側部位に位置した。ＭＲＩ走査を、７ Ｔｅｓｌａ ７０／３０ Ｂｒｕｋｅｒ Ｂｉｏｓｐｅｃ ＭＲＩ走査器上で行った。画像を、埋没の当日（０週目）、および埋没の１２、２４、４０週後に収集した。ゲルの絶対体積対時間のプロットが、下の図１６に示される。高持続性のゲルは、４０週の埋没時点で高い絶対体積を有する。 Example 28A
In vivo duration assessment of gels by MRI Using the magnetic resonance imaging (MRI) study, volume over time of the gels of the invention and commercial gels over a period of 40 weeks after intradermal injection in female Sprague-Dawley rats And the surface area change was evaluated. The gel was injected at a target volume of 150 μL per burial. The implants were located in two contralateral sites slightly behind the shoulder, two contralateral sites slightly rostral to the knee, and two contralateral sites at the midpoint of the head and tail. MRI scans were performed on a 7 Tesla 70/30 Bruker Biospec MRI scanner. Images were collected on the day of implantation (week 0), and 12, 24, 40 weeks after implantation. A plot of the absolute volume of the gel versus time is shown in Figure 16 below. High persistence gels have a high absolute volume at 40 weeks of embedment.

実施例２９
目尻の線の治療において使用される本発明の組成物
４０歳の痩せた女性が、目尻の領域に小じわを呈し、皮膚充填剤治療を要求する。３０ゲージ針を使用して、医師は、本発明に従う０．６ｍＬのＨＡベースのゲル（実施例１９に記載されるもの等）を、リニアスレッディング技法を使用して彼女の眼の各々の下の細線中および涙の通り道領域において表層に導入する。ゲルは表層に導入されるが、青色の変色は何ら観察されず、患者は結果に満足する。 Example 29
A 40-year-old lean woman of the present invention used in the treatment of the eyelid lines exhibits fine lines in the area of the eyelids and requires skin filler treatment. Using a 30-gauge needle, the physician uses a 0.6 mL HA-based gel (such as that described in Example 19) according to the present invention under each of her eyes using linear threading techniques. It is introduced into the surface layer in the thin line and in the tear passage area. Although the gel is introduced into the surface layer, no blue discoloration is observed and the patient is satisfied with the results.

示されるように、本発明の組成物、例えば、実施例１９および２１の組成物は、ある特定のＨＡベースの市販のゲル、例えば、Ｊｕｖｅｄｅｒｍ Ｒｅｆｉｎｅ／Ｓｕｒｇｉｄｅｒｍ １８およびＢｅｌｏｔｅｒｏ Ｓｏｆｔと比べて、低減されたまたは有意でないチンダル現象、および体内で実質的により長い持続期間を有する。例えば、市販の「細線」製剤のＢｅｌｏｔｅｒｏ Ｓｏｆｔと比べて、本発明の実施例１９は、少なくともこの市販のゲルと同程度に好ましいチンダルスコア有しただけでなく、実質的により高い体内持続期間を有利に示した。   As shown, the compositions of the present invention, such as the compositions of Examples 19 and 21, were reduced compared to certain HA-based commercial gels, such as Juvederm Refine / Surgederm 18 and Beltero Soft. Or have a non-significant Tyndall phenomenon and a substantially longer duration in the body. For example, compared to the commercially available “thin wire” formulation of Beltero Soft, Example 19 of the present invention not only had at least as favorable a Tyndall score as this commercially available gel, but also had a substantially higher body duration. It was shown to.

実施例３０
細線の出現の改善のための本発明の注入可能な組成物
ビタミンＡ、ビタミンＢ、ビタミンＣ、ビタミンＤ、ビタミンＥ、およびその誘導体等の添加剤を、単独でおよび組み合わせて、多様な実質的に光透過性であり、注入可能なＨＡベースのゲルを作製するような様態で、架橋結合されたヒアルロン酸ゲルに結合させる。ＨＡ成分は、本明細書の他の箇所で定義されるように、例えば、少なくとも９０重量％であり、実質的に完全に低分子量のＨＡ、または約１００％低分子量のＨＡである。これらの添加剤は、任意の好適な手段を使用してＨＡヒドロゲルに結合される。結合されたゲルは、少なくとも約２０ｍｇ／ｇ、例えば、約２３、約２４ｍｇ／ｇ、約２５ｍｇ／ｇ、最大約３０ｍｇ／ｇのＨＡ濃度を有し、細いゲージ針に通す注入に好適な、注入可能なｐＨ中性の粘着性組成物を作製するように、サイズ調整され、プロセスされる。ゲルは、少なくとも約５０ＰＡ、約６０Ｐａ、約７０Ｐａ、約８０Ｐａ、最大約１００Ｐａかつ約１００Ｐａ以下のＧ’値を有する。ゲルは、包装され、オートクレーブ、ＵＶ光、または他の好適な手段を使用して滅菌される。 Example 30
The injectable composition of the present invention for improving the appearance of fine lines Additives such as vitamin A, vitamin B, vitamin C, vitamin D, vitamin E, and derivatives thereof, alone and in combination, have a variety of substantial To a cross-linked hyaluronic acid gel in such a manner as to produce an HA-based gel that is light transmissive and injectable. The HA component is, for example, at least 90% by weight and is substantially completely low molecular weight HA, or about 100% low molecular weight HA, as defined elsewhere herein. These additives are bound to the HA hydrogel using any suitable means. The bound gel has an HA concentration of at least about 20 mg / g, such as about 23, about 24 mg / g, about 25 mg / g, up to about 30 mg / g, suitable for injection through a fine gauge needle It is sized and processed to create a possible pH-neutral adhesive composition. The gel has a G ′ value of at least about 50 PA, about 60 Pa, about 70 Pa, about 80 Pa, up to about 100 Pa and up to about 100 Pa. The gel is packaged and sterilized using autoclaving, UV light, or other suitable means.

ゲルの各々は、患者のしわ、例えば、目尻の領域、鼻唇溝領域、涙の通り道領域、首領域、または皮膚充填から便益を受けるであろう任意の他の顔面領域における、表層注入、例えば、約１．０ｍｍを超えない深さでの皮膚中への注入に有用である。ゲルの表層導入にもかかわらず、チンダル現象に起因する変色は何ら観察されず、患者は結果に満足する。   Each of the gels is applied to the surface of the patient's wrinkles, e.g., the area of the corner of the eye, the nasal lip groove area, the tear passage area, the neck area, or any other facial area that would benefit from skin filling Useful for injection into the skin at a depth not exceeding about 1.0 mm. Despite the introduction of the surface of the gel, no discoloration due to the Tyndall phenomenon is observed and the patient is satisfied with the results.

最後に、本明細書の態様が様々な実施形態について示されているが、当業者は開示される特定の実施例が本明細書に開示される発明の原理の単に例示であることを容易に理解するであろうことが理解されるべきである。それゆえ、開示される発明は本明細書中に示される特定の方法、プロトコル、および／または試薬等に決して限定されないことが理解されるべきである。よって、本明細書の精神から離れることなく、当業者は多くのおよび様々な改変または変化を作出し得る、あるいは、開示される発明の代替の構成は本明細書中の教示に従ってなされ得る。詳細における変化は付属の請求項中に定義されるような本発明の精神から離れることなく、なされ得る。最後に、本明細書中で使用される用語は特定の実施形態を説明する目的のためのみであり、そして請求項によってのみ定義される本発明の範囲を限定するとは意図されない。さらに、上記説明中に含有される、または付属の図面中に示される全ての事柄は単に例示として、および限定ではないと解釈されるべきであることが意図される。したがって、本発明は示されるおよび説明されるとおりの正確なものに限定されない。   Finally, while aspects of this specification have been presented for various embodiments, those skilled in the art will readily appreciate that the specific examples disclosed are merely illustrative of the principles of the invention disclosed herein. It should be understood that it will be understood. Therefore, it is to be understood that the disclosed invention is in no way limited to the specific methods, protocols, and / or reagents set forth herein. Thus, without departing from the spirit of the specification, one of ordinary skill in the art may make many and various modifications or changes, or alternative configurations of the disclosed invention may be made in accordance with the teachings herein. Changes in detail may be made without departing from the spirit of the invention as defined in the appended claims. Finally, the terminology used herein is for the purpose of describing particular embodiments only and is not intended to limit the scope of the invention which is defined only by the claims. Moreover, it is intended that all matter contained in the above description or shown in the accompanying drawings shall be construed as merely illustrative and not limiting. Accordingly, the present invention is not limited to that precisely as shown and described.

本発明を実施するために本発明者に知られる最も良い様式を含む、本発明のある特定の実施形態が本明細書中に示される。当然ながら、これらの示される実施形態についての変形は上記説明を読めば当業者に明らかになるであろう。本発明者は、当業者がそのような変形を使用することを適切であると予想し、そして本発明者は本発明が本明細書中に具体的に示されるものとは異なって実施されることを意図する。したがって、本発明は適用可能な法により許可されるように、本明細書中に付属の請求項中に列挙される発明の全ての改変および均等物を含む。さらに、上記に示される要素の、それらの全ての可能な変形の、どんな組み合わせも、本明細書中に別段の定めなき限り、または別段のように文脈により明らかに矛盾しない限り、本発明に含まれる。   Certain specific embodiments of the present invention are presented herein, including the best mode known to the inventors for carrying out the invention. Of course, variations on these illustrated embodiments will become apparent to those of ordinary skill in the art upon reading the foregoing description. The inventor anticipates that it is appropriate for those skilled in the art to use such variations, and that the inventor performs the invention differently from what is specifically shown herein. I intend to. Accordingly, this invention includes all modifications and equivalents of the invention recited in the claims appended hereto as permitted by applicable law. Moreover, any combination of the above-described elements in all possible variations thereof is included in the invention unless otherwise defined herein or otherwise clearly contradicted by context. It is.

本明細書に開示される本発明の代替の要素または実施形態のグループ化は限定として解釈されるべきでない。各グループ構成要素は個々に、またはそのグループの他の構成要素もしくは本明細書中に見られる他の要素とのどんな組み合わせでも言及され、そして請求され得る。１グループの１つ以上の構成要素は利便性および／または特許性の理由のためにグループ中に含められ、またはグループから消去され得る。そのような包含または消去が起こるとき、本明細書は改変されたグループを含有し、したがって付属の請求項中で使用される全てのマーカッシュ形式のグループの記述を実現するとみなされる。   Groupings of alternative elements or embodiments of the invention disclosed herein are not to be construed as limitations. Each group member may be referred to and claimed individually or in any combination with other members of the group or other elements found herein. One or more members of a group may be included in or removed from the group for convenience and / or patentability reasons. When such inclusion or erasure occurs, this specification is deemed to contain a modified group and thus implement a description of all Markush-type groups used in the appended claims.

別段の定めなき限り、本明細書および請求項で使用される成分の量、分子量等の特性、反応条件等を表す全ての数字は用語「約」により全ての場合において修飾されると理解されるべきである。本明細書で使用されるとき、用語「約」は、そのように指定された項目、パラメータ、または用語が、示された項目、パラメータ、または用語の値の１０パーセント超および未満の範囲を包含することを意味する。したがって、逆の定めなき限り、本明細書および付属の請求項中に設定される数字パラメータは本発明により得られると考えられる所望の特性により変化し得る近似値である。何はともあれ、かつ請求項の範囲に対する均等物の原則の適用を限定する試みではなく、各数字パラメータは少なくとも報告される有意な桁の数字に照らして、かつ通常の端数処理技術を適用することにより解釈されるべきである。本発明の広い範囲を示す数字範囲およびパラメータは近似値であるにもかかわらず、特定の実施例中に示される数値は可能な限り正確に報告される。どの数値も、しかしながら、それらの各試験計測中に見られる標準偏差から必然的に生じるある特定の誤差を本質的に含有する。   Unless otherwise specified, all numbers representing the amounts of components, molecular weight and other properties, reaction conditions, etc. used in the specification and claims are understood to be modified in all cases by the term “about”. Should. As used herein, the term “about” includes an item, parameter, or term so designated that includes a range of greater than and less than 10 percent of the indicated item, parameter, or term value. It means to do. Thus, unless specified to the contrary, the numerical parameters set in this specification and the appended claims are approximations that may vary depending on the desired properties believed to be obtained by the present invention. Whatever the case, and not an attempt to limit the application of the principle of equivalents to the scope of the claims, each numeric parameter should be at least in light of the reported significant digits and apply normal rounding techniques. Should be interpreted. Although the numerical ranges and parameters representing the broad scope of the present invention are approximate, the numerical values shown in the specific examples are reported as accurately as possible. Any numerical value, however, inherently contains certain errors necessarily resulting from the standard deviation found in their respective testing measurements.

本発明を示す文脈中で（特に以下の請求項の文脈中で）使用される用語「ａ」、「ａｎ」、「ｔｈｅ」、および同様の指示物は、本明細書中に別段の定めなき限りまたは文脈により明らかに矛盾しない限り、単数および複数の両方を含むと解釈されるべきである。本明細書中の値の範囲の列挙はその範囲に入る各別々の値を個々に言及する省略法として働くと単に意図される。本明細書中に別段の定めなき限り、各個々の値は、それが本明細書中に個々に列挙されているかのように本明細書中に組み込まれる。本明細書中に示される全ての方法は、本明細書中に別段の定めなき限り、または文脈により明らかに矛盾しない限り、いかなる好適な順序でも行われ得る。本明細書中に提供されるいかなるおよび全ての実施例または例示的な言語（例えば、「等の」）の使用は単に本発明をよりよく例示することが意図され、そして別段のように請求される本発明の範囲についての限定を提示しない。本明細書中のどの言語も本発明の実施に本質的な非請求要素を示すと解釈されるべきでない。   The terms “a”, “an”, “the”, and similar designations used in the context of indicating the present invention (especially in the context of the following claims) are not specifically defined herein. It should be construed as including both the singular and the plural unless clearly contradicted by the limits or context. The recitation of a range of values herein is merely intended to serve as a shorthand for individually referring to each separate value falling within that range. Unless stated otherwise specifically in the specification, each individual value is incorporated herein as if it were individually listed herein. All methods presented herein can be performed in any suitable order unless otherwise indicated herein or otherwise clearly contradicted by context. The use of any and all examples or exemplary languages (eg, “such as”) provided herein are merely intended to better illustrate the invention and are claimed otherwise. No limitation on the scope of the invention is presented. No language in the specification should be construed as indicating any non-claimed element essential to the practice of the invention.

本明細書に開示される特定の実施形態は言語からなるまたは本質的に言語からなることを用いて請求項中でさらに限定され得る。請求項中で使用されるとき、出願時の請求項であろうと補正で追加されたものであろうと、接続用語「からなる」は請求項中で特定されない要素、ステップ、または成分を除外する。接続用語「本質的に〜からなる」は特定の物質またはステップ、ならびに基本的なおよび新規の特性（単数または複数）に実質的に影響しないものに請求項の範囲を限定する。そのように請求される本発明の実施形態は本明細書中に本質的にまたは明示的に示され、および可能にされる。   Particular embodiments disclosed herein may be further limited in the claims using language or consisting essentially of language. As used in the claims, the connection term “consisting of” excludes elements, steps or components not specified in the claims, whether as claimed at the time of filing or added by amendment. The connection term “consisting essentially of” limits the scope of the claims to that which does not substantially affect the particular substance or step, as well as the basic and novel characteristic (s). The embodiments of the invention so claimed are shown and enabled essentially or explicitly herein.

本明細書中に引用されるおよび特定される全ての特許、特許公報、および他の出版物は、例えば、本発明に関連して使用され得るそのような出版物中に示される組成物および方法を示すおよび開示する目的のために、それらの全体が引用により本明細書中に個々におよび明示的に組み込まれる。これらの出版物は本出願の出願日前のそれらの開示についてのみ提供される。この点におけるいずれも、本発明者が先発明によってまたは他の理由のためにそのような開示に先行する権利を与えられないことの承認として解釈されるべきでない。その日付についての全ての記述またはこれらの文書の内容についての表示は本出願人に入手可能な情報に基づき、そしてこれらの文書の日付または内容の正確さについての承認を構成しない。   All patents, patent publications, and other publications cited and identified herein are, for example, compositions and methods indicated in such publications that can be used in connection with the present invention. For the purposes of indicating and disclosing, are hereby incorporated by reference in their entirety and individually. These publications are provided solely for their disclosure prior to the filing date of the present application. Nothing in this regard should be construed as an admission that the inventors are not entitled to antedate such disclosure by virtue of prior invention or for any other reason. All statements about the dates or indications about the contents of these documents are based on information available to the applicant and do not constitute an approval for the accuracy of the dates or contents of these documents.

Claims (42)

皮膚充填剤組成物であって、
架橋成分と架橋結合されたヒアルロン酸成分と、
前記架橋成分以外の添加剤と、を含み、
前記組成物は、実質的に光透過性であり、
前記組成物は、患者の皮膚領域中に投与されるとき、前記添加剤を含まないことを除いて実質的に同一である組成物と比べて、低減されたチンダル現象を示す、組成物。 A skin filler composition comprising:
A hyaluronic acid component crosslinked with a crosslinking component;
An additive other than the crosslinking component,
The composition is substantially light transmissive;
A composition that exhibits a reduced Tyndall phenomenon when administered into a skin area of a patient as compared to a composition that is substantially identical except that it does not contain the additive. 前記添加剤は、ビタミンＣ誘導体である、請求項１に記載の組成物。   The composition of claim 1, wherein the additive is a vitamin C derivative. 前記添加剤は、ＡＡ２Ｇである、請求項１に記載の組成物。   The composition of claim 1, wherein the additive is AA2G. 前記添加剤は、Ｖｉｔａｇｅｎである、請求項１に記載の組成物。   The composition of claim 1, wherein the additive is Vitagen. 前記ヒアルロン酸成分は、前記添加剤に化学的に結合される、請求項１に記載の組成物。   The composition of claim 1, wherein the hyaluronic acid component is chemically bound to the additive. 前記ヒアルロン酸成分は、約３モル％〜約４０モル％である結合度で、前記添加剤に化学的に結合される、請求項１に記載の組成物。   The composition of claim 1, wherein the hyaluronic acid component is chemically bound to the additive with a degree of binding that is about 3 mol% to about 40 mol%. 前記ヒアルロン酸成分は、約３モル％〜約１０モル％である結合度で、前記添加剤に化学的に結合される、請求項１に記載の組成物。   The composition of claim 1, wherein the hyaluronic acid component is chemically bound to the additive with a degree of binding that is about 3 mol% to about 10 mol%. 前記架橋成分は、ＢＤＤＥである、請求項１に記載の組成物。   The composition of claim 1, wherein the crosslinking component is BDDE. 麻酔剤をさらに含む、請求項１に記載の組成物。   The composition of claim 1 further comprising an anesthetic. リドカインをさらに含む、請求項１に記載の組成物。   The composition of claim 1 further comprising lidocaine. 約４０Ｐａ〜約１００ＰａのＧ’値を有する、請求項１に記載の組成物。   The composition of claim 1 having a G 'value of about 40 Pa to about 100 Pa. 約１００Ｐａ以下のＧ’値を有する、請求項１に記載の組成物。   The composition of claim 1 having a G 'value of about 100 Pa or less. 約４０Ｐａ以上のＧ’値を有する、請求項１に記載の組成物。   The composition of claim 1 having a G 'value of about 40 Pa or greater. 患者の皮膚における細線を治療する方法であって、前記方法は、
患者の皮膚中に、ヒアルロン酸成分と、前記ヒアルロン酸を架橋結合する架橋成分と、前記架橋成分以外の添加剤との混合物を含む、組成物を導入することを含み、
前記組成物は、実質的に光透過性であり、
前記皮膚充填剤組成物は、前記添加剤を含まないことを除いて実質的に同一である組成物と比べて、低減されたチンダル現象を示す、方法。 A method of treating fine wires in a patient's skin, the method comprising:
Introducing into the patient's skin a composition comprising a mixture of a hyaluronic acid component, a crosslinking component that crosslinks the hyaluronic acid, and an additive other than the crosslinking component;
The composition is substantially light transmissive;
The method wherein the skin filler composition exhibits reduced Tyndall phenomenon compared to a composition that is substantially identical except that it does not contain the additive. 前記添加剤は、ビタミンＣ誘導体である、請求項１４に記載の方法。   The method of claim 14, wherein the additive is a vitamin C derivative. 前記添加剤は、ＡＡ２Ｇである、請求項１４に記載の方法。   The method of claim 14, wherein the additive is AA2G. 前記添加剤は、Ｖｉｔａｇｅｎである、請求項１４に記載の方法。   15. The method of claim 14, wherein the additive is Vitagen. 前記ヒアルロン酸成分は、前記添加剤に化学的に結合される、請求項１４に記載の方法。   The method of claim 14, wherein the hyaluronic acid component is chemically bound to the additive. 前記ヒアルロン酸成分は、約３モル％〜約１０モル％である結合度で、前記添加剤に化学的に結合される、請求項１４に記載の方法。   15. The method of claim 14, wherein the hyaluronic acid component is chemically bound to the additive with a degree of binding that is about 3 mol% to about 10 mol%. 前記ヒアルロン酸成分は、約３モル％〜約４０モル％である結合度で、前記添加剤に化学的に結合される、請求項１４に記載の方法。   The method of claim 14, wherein the hyaluronic acid component is chemically bound to the additive with a degree of binding that is about 3 mol% to about 40 mol%. 顔面の審美的外観を改善する方法であって、前記方法は、
患者の皮膚領域に、チンダル現象を何ら示さないか、または有意でないチンダル現象を示す、実質的に光透過性の皮膚充填剤皮膚充填剤組成物を投与するステップを含み、前記組成物は、
ヒアルロン酸を提供するステップと、
架橋剤をビタミンＣ誘導体と反応させるステップと、
前記反応させられた架橋剤およびビタミンＣ誘導体を、前記ヒアルロン酸に添加して、共有結合されたビタミンＣを含む架橋結合されたヒアルロン酸組成物を形成するステップと、
前記架橋結合されたヒアルロン酸組成物を均一化および中和して、注入可能な皮膚充填剤組成物を得るステップと、によって作製される、方法。 A method for improving the aesthetic appearance of a face, said method comprising:
Administering to the patient's skin area a substantially light transmissive skin filler skin filler composition that exhibits no or insignificant Tyndall phenomenon, said composition comprising:
Providing hyaluronic acid; and
Reacting a crosslinking agent with a vitamin C derivative;
Adding the reacted cross-linking agent and vitamin C derivative to the hyaluronic acid to form a cross-linked hyaluronic acid composition comprising covalently bonded vitamin C;
Homogenizing and neutralizing the cross-linked hyaluronic acid composition to obtain an injectable dermal filler composition. 前記添加剤は、ビタミンＣ誘導体である、請求項２１に記載の方法。   The method of claim 21, wherein the additive is a vitamin C derivative. 前記添加剤は、ＡＡ２Ｇである、請求項２１に記載の方法。   The method of claim 21, wherein the additive is AA2G. 前記添加剤は、Ｖｉｔａｇｅｎである、請求項２１に記載の組成物。   The composition of claim 21, wherein the additive is Vitagen. 前記ヒアルロン酸成分は、前記添加剤に化学的に結合される、請求項２１に記載の方法。   The method of claim 21, wherein the hyaluronic acid component is chemically bound to the additive. 前記ヒアルロン酸成分は、約３モル％〜約４０モル％である結合度で、前記添加剤に化学的に結合される、請求項２１に記載の方法。   The method of claim 21, wherein the hyaluronic acid component is chemically bound to the additive with a degree of binding that is about 3 mol% to about 40 mol%. 前記ヒアルロン酸成分は、約３モル％〜約１０モル％である結合度で、前記添加剤に化学的に結合される、請求項２１に記載の方法。   The method of claim 21, wherein the hyaluronic acid component is chemically bound to the additive with a degree of binding that is about 3 mol% to about 10 mol%. 患者の薄い皮膚領域における細線の出現を低減する方法であって、前記方法は、
前記患者に、約１ｍｍを超えない深さで、皮膚充填剤組成物であって、ビタミンＣまたはビタミンＣ誘導体を含む、実質的に光透過性のヒアルロン酸ベースの皮膚充填剤組成物を投与することを含む、方法。 A method of reducing the appearance of fine lines in a thin skin area of a patient, the method comprising:
The patient is administered a skin filler composition that is substantially light transmissive hyaluronic acid based skin filler composition comprising vitamin C or a vitamin C derivative at a depth not exceeding about 1 mm. Including the method. 前記組成物は、約０．８ｍｍを超えない深さで注入される、請求項２８に記載の方法。   30. The method of claim 28, wherein the composition is injected at a depth not exceeding about 0.8 mm. 前記組成物は、約０．６ｍｍを超えない深さで注入される、請求項２８に記載の方法。   30. The method of claim 28, wherein the composition is injected at a depth not exceeding about 0.6 mm. 前記組成物は、約０．４ｍｍを超えない深さで注入される、請求項２８に記載の方法。   30. The method of claim 28, wherein the composition is injected at a depth not exceeding about 0.4 mm. 皮膚充填剤組成物であって、
架橋成分と架橋結合されたヒアルロン酸成分と、
少なくとも約３モル％の結合度で、前記ヒアルロン酸成分に共有結合されたビタミンＣまたはビタミンＣ誘導体と、を含み、
前記組成物が、実質的に光透過性であり、約４０Ｐａ〜約１００ＰａのＧ’値を有する、組成物。 A skin filler composition comprising:
A hyaluronic acid component crosslinked with a crosslinking component;
Vitamin C or a vitamin C derivative covalently bound to the hyaluronic acid component with a degree of binding of at least about 3 mol%,
The composition is substantially light transmissive and has a G ′ value of about 40 Pa to about 100 Pa. 約１８ｍｇ／ｇ〜約３０ｍｇ／ｇのヒアルロン酸濃度を有する、請求項３２に記載の組成物。   33. The composition of claim 32, having a hyaluronic acid concentration of about 18 mg / g to about 30 mg / g. 約１２ｍｇ／ｇ〜約３０ｍｇ／ｇのヒアルロン酸濃度を有する、請求項３２に記載の組成物。   35. The composition of claim 32, having a hyaluronic acid concentration of about 12 mg / g to about 30 mg / g. 前記結合度は、約１０モル％である、請求項３２に記載の組成物。   33. The composition of claim 32, wherein the degree of binding is about 10 mol%. 前記ヒアルロン酸は、少なくとも９０％が低分子量ＨＡである、請求項３２に記載の組成物。   33. The composition of claim 32, wherein the hyaluronic acid is at least 90% low molecular weight HA. 前記ヒアルロン酸成分は、実質的に完全に低分子量ＨＡである、請求項３２に記載の組成物。   33. The composition of claim 32, wherein the hyaluronic acid component is substantially completely low molecular weight HA. 顔面における細線の出現を低減するための注入可能な組成物であって、前記組成物は、
１，４−ブタンジオールジグリシジルエーテル（ＢＤＤＥ）架橋結合低分子量ヒアルロン酸（ＨＡ）であって、約３００Ｋダルトン〜約９００Ｋダルトンの平均分子量を有する、ＨＡと、
前記ヒアルロン酸に共有結合されたビタミンＣ誘導体であって、結合度が、約１０モル％である、ビタミンＣ誘導体と、を含み、
前記組成物は、約６０Ｐａ〜約８０ＰａのＧ’値を有する、組成物。 An injectable composition for reducing the appearance of fine lines on the face, said composition comprising:
1,4-butanediol diglycidyl ether (BDDE) cross-linked low molecular weight hyaluronic acid (HA) having an average molecular weight of about 300 K Daltons to about 900 K Daltons;
A vitamin C derivative covalently bonded to the hyaluronic acid, the binding degree of which is about 10 mol%,
The composition has a G ′ value of about 60 Pa to about 80 Pa. 前記ＨＡは、約３００Ｋダルトン〜約５００Ｋダルトンの平均分子量を有する、請求項３８に記載の組成物。   40. The composition of claim 38, wherein the HA has an average molecular weight of about 300 K Daltons to about 500 K Daltons. 前記組成物は、約８０ＰａのＧ’値を有する、請求項３９に記載の組成物。   40. The composition of claim 39, wherein the composition has a G 'value of about 80 Pa. 光透過性である、請求項３８に記載の組成物。   40. The composition of claim 38, wherein the composition is light transmissive. 約２５ｍｇ／ｇのＨＡ濃度を有する、請求項３８に記載の組成物。   40. The composition of claim 38, having an HA concentration of about 25 mg / g.
JP2014530798A 2011-09-14 2012-09-13 Dermal filler composition comprising an antioxidant Active JP6125509B2 (en)

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201161534780P 2011-09-14 2011-09-14
US61/534,780 2011-09-14
USPCT/US2012/052125 2012-08-23
PCT/US2012/052125 WO2013028904A2 (en) 2011-08-25 2012-08-23 Dermal filler compositions including antioxidants
PCT/US2012/055211 WO2013040242A2 (en) 2011-09-14 2012-09-13 Dermal filler compositions for fine line treatment

Related Child Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP2017075224A Division JP2017140433A (en) 2011-09-14 2017-04-05 Dermal filler compositions containing antioxidants

Publications (3)

Publication Number Publication Date
JP2014526342A true JP2014526342A (en) 2014-10-06
JP2014526342A5 JP2014526342A5 (en) 2015-11-05
JP6125509B2 JP6125509B2 (en) 2017-05-10

Family

ID=47883970

Family Applications (4)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP2014530798A Active JP6125509B2 (en) 2011-09-14 2012-09-13 Dermal filler composition comprising an antioxidant
JP2017075224A Withdrawn JP2017140433A (en) 2011-09-14 2017-04-05 Dermal filler compositions containing antioxidants
JP2018219395A Withdrawn JP2019058692A (en) 2011-09-14 2018-11-22 Dermal filler compositions containing antioxidant
JP2021048584A Pending JP2021100603A (en) 2011-09-14 2021-03-23 Dermal filler compositions comprising antioxidant

Family Applications After (3)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP2017075224A Withdrawn JP2017140433A (en) 2011-09-14 2017-04-05 Dermal filler compositions containing antioxidants
JP2018219395A Withdrawn JP2019058692A (en) 2011-09-14 2018-11-22 Dermal filler compositions containing antioxidant
JP2021048584A Pending JP2021100603A (en) 2011-09-14 2021-03-23 Dermal filler compositions comprising antioxidant

Country Status (9)

Country Link
EP (1) EP2755630A2 (en)
JP (4) JP6125509B2 (en)
KR (4) KR102161861B1 (en)
CN (2) CN104105474B (en)
AU (1) AU2012308503B2 (en)
CA (1) CA2848833C (en)
HK (1) HK1198124A1 (en)
RU (1) RU2626513C2 (en)
WO (1) WO2013040242A2 (en)

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2021100603A (en) * 2011-09-14 2021-07-08 アラーガン、インコーポレイテッドＡｌｌｅｒｇａｎ，Ｉｎｃｏｒｐｏｒａｔｅｄ Dermal filler compositions comprising antioxidant
JP2021526934A (en) * 2018-06-15 2021-10-11 クロマ−ファーマ ゲゼルシャフト エム．ベー．ハー． Stabilized hyaluronic acid
JP2023508993A (en) * 2019-12-26 2023-03-06 アラーガン、インコーポレイテッド Crosslinked HA-collagen hydrogels as dermal fillers

Families Citing this family (25)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2861734B1 (en) 2003-04-10 2006-04-14 Corneal Ind CROSSLINKING OF LOW AND HIGH MOLECULAR MASS POLYSACCHARIDES; PREPARATION OF INJECTABLE SINGLE PHASE HYDROGELS; POLYSACCHARIDES AND HYDROGELS OBTAINED
EP2484387A1 (en) 2011-02-03 2012-08-08 Q-Med AB Hyaluronic acid composition
CA3038735C (en) 2011-06-03 2021-11-23 Allergan, Inc. Dermal filler compositions including antioxidants
US20130096081A1 (en) 2011-06-03 2013-04-18 Allergan, Inc. Dermal filler compositions
US9408797B2 (en) 2011-06-03 2016-08-09 Allergan, Inc. Dermal filler compositions for fine line treatment
US9393263B2 (en) 2011-06-03 2016-07-19 Allergan, Inc. Dermal filler compositions including antioxidants
CA2858366C (en) * 2011-12-08 2020-01-21 Allergan, Inc. Optically transparent dermal filler compositions comprising hyaluronic acid crosslinked with diamines or multiamines
US20140315828A1 (en) 2013-04-22 2014-10-23 Allergan, Inc. Cross-linked silk-hyaluronic acid compositions
CA2910325A1 (en) * 2013-04-25 2014-10-30 Aluron Biopharma Inc. Crosslinked hyaluronic acid compositions
WO2016128783A1 (en) * 2015-02-09 2016-08-18 Allergan Industrie Sas Compositions and methods for improving skin appearance
RU2715234C2 (en) * 2015-02-13 2020-02-26 Аллерган Эндюстри, Сас Implants for sculpting, augmenting or correcting facial features such as chin
EP3475312B1 (en) 2016-06-23 2020-05-27 Galderma S.A. Cyclodextrin-grafted cross-linked hyaluronic acid complexed with active drug substances and uses thereof
CA3033536A1 (en) 2016-08-24 2018-03-01 Allergan, Inc. Co-crosslinked hyaluronic acid-silk fibroin hydrogels for improving tissue graft viability and for soft tissue augmentation
WO2018231718A1 (en) * 2017-06-12 2018-12-20 Advanced Aesthetic Technologies, Inc. Dermal filler
US20230190997A1 (en) 2017-06-26 2023-06-22 Evolved By Nature, Inc. Silk-hyaluronic acid based tissue filers and methods of using the same
SG11201913229PA (en) * 2017-06-26 2020-01-30 Evolved By Nature Inc Silk-hyaluronic acid based tissue fillers and methods of using the same
WO2019018664A1 (en) * 2017-07-19 2019-01-24 Dentsply Sirona Inc. Water-soluble hydrogel-based dental composition and methods of making and using same
KR102532037B1 (en) * 2017-12-29 2023-05-12 마텍스 랩 에스.피.에이 Method for preparing a filler having a hyaluronic acid base
KR101967153B1 (en) 2018-04-04 2019-04-09 윤성준 The material composition of the filler improving wrinkles, atrophic scars and other skin deficits
IT201900006929A1 (en) * 2019-05-16 2020-11-16 Giuliani Spa KIT FOR AESTHETIC SKIN TREATMENT
CN110467689A (en) * 2019-09-09 2019-11-19 山东众山生物科技有限公司 A kind of derivatives of hyaluronic acids and preparation method thereof
CN110907370A (en) * 2019-12-04 2020-03-24 桂林理工大学 Universal ultra-sensitive chemical and biological colorimetric sensing method
CN111249172A (en) * 2020-01-15 2020-06-09 陈勇 Beauty injection gel and preparation method thereof
WO2023135135A1 (en) 2022-01-11 2023-07-20 Gpq S.R.L. New hyaluronic acid derivatives as innovative fillers
WO2024055132A1 (en) * 2022-09-12 2024-03-21 Universidad De Talca Method for the synthesis of a branched copolymer of hyaluronic acid and poly(lactic-co-glycolic) acid

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20110171286A1 (en) * 2010-01-13 2011-07-14 Allergan, Inc. Hyaluronic acid compositions for dermatological use
US20110171311A1 (en) * 2010-01-13 2011-07-14 Allergan Industrie, Sas Stable hydrogel compositions including additives
JP2014515307A (en) * 2011-06-03 2014-06-30 アラーガン、インコーポレイテッド Dermal filler composition comprising an antioxidant

Family Cites Families (29)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6174999B1 (en) * 1987-09-18 2001-01-16 Genzyme Corporation Water insoluble derivatives of polyanionic polysaccharides
KR100721752B1 (en) * 2000-01-24 2007-05-25 쿠라레 메디카루 가부시키가이샤 Water-swellable polymer gel and process for preparing the same
IT1317091B1 (en) * 2000-02-08 2003-05-26 S F I R Societa Fondaria Ind R CROSS-LINKED HYALURONIC ACID GEL WITH B-FUNCTIONAL L-AMINO ACIDS.
FR2811996B1 (en) 2000-07-19 2003-08-08 Corneal Ind CROSS-LINKING OF POLYSACCHARIDE (S), PREPARATION OF HYDROGEL (S); POLYSACCHARIDE (S) AND HYDROGEL (S) OBTAINED, THEIR USES
AU2003303820A1 (en) * 2003-01-31 2004-08-23 Biosphere S.P.A. Water soluble and biocompatible gels of hyaluronic acid cross-linked with bi-functional l-aminoacids or l-aminoesters
AU2003206922A1 (en) 2003-02-19 2004-09-09 Aventis Pharmaceuticals Holdings Inc. Composition and method for intradermal soft tissue augmentation
FR2861734B1 (en) 2003-04-10 2006-04-14 Corneal Ind CROSSLINKING OF LOW AND HIGH MOLECULAR MASS POLYSACCHARIDES; PREPARATION OF INJECTABLE SINGLE PHASE HYDROGELS; POLYSACCHARIDES AND HYDROGELS OBTAINED
US8124120B2 (en) * 2003-12-22 2012-02-28 Anika Therapeutics, Inc. Crosslinked hyaluronic acid compositions for tissue augmentation
JP5016926B2 (en) * 2003-12-30 2012-09-05 ジェンザイム・コーポレーション Adhesive gel derived from crosslinked hyaluronan and / or hylan, its preparation and use
FR2865737B1 (en) * 2004-02-03 2006-03-31 Anteis Sa BIOCOMPATIBLE RETICLE GEL
US20050281880A1 (en) * 2004-05-20 2005-12-22 Wei Wang Methods for making injectable polymer hydrogels
FR2873379B1 (en) * 2004-07-23 2008-05-16 Jerome Asius PROCESS FOR THE PREPARATION OF RETICULATED HYALURONIC ACID, RETICULATED HYALURONIC ACID WHICH CAN BE OBTAINED BY THIS METHOD, IMPLANT CONTAINING THE RETICULATED HYALURONIC ACID, AND USE THEREOF
FR2878444B1 (en) 2004-11-30 2008-04-25 Corneal Ind Soc Par Actions Si VISCOELASTIC SOLUTIONS COMPRISING SODIUM HYALURONATE AND HYDROXYPROPYLMETHYLCELLULOSE, PREPARATION AND USES
JP2009508991A (en) * 2005-09-15 2009-03-05 ユニバーシティ オブ ユタ リサーチ ファウンデーション Polymer composition and methods for making and using the same
CN101432311A (en) * 2006-02-28 2009-05-13 诺维信生物聚合物公司 Derivatives of hyaluronic acids
CN1837265A (en) * 2006-04-25 2006-09-27 江南大学 Process for composite modification of hyaluronic acid and carboxymethyl cellulose
CN100417666C (en) * 2006-09-07 2008-09-10 重庆大学 Lysine-chitosan resin and preparation method thereof
FR2908415B1 (en) * 2006-11-10 2009-01-23 Abr Dev Sarl RETICULATED HYALURONIC ACID AND PROCESS FOR PREPARING THE SAME
FR2909560B1 (en) * 2006-12-06 2012-12-28 Fabre Pierre Dermo Cosmetique HYALURONIC ACID GEL FOR INTRADERMAL INJECTION
FR2918377B1 (en) * 2007-07-05 2010-10-08 Estelle Piron CO-RETICLE GEL OF POLYSACCHARIDES
US8394782B2 (en) * 2007-11-30 2013-03-12 Allergan, Inc. Polysaccharide gel formulation having increased longevity
US20100279952A1 (en) * 2007-12-21 2010-11-04 Ninus Caram-Lelham Cross-linked hydrogel containing an active substance
KR20090110090A (en) * 2008-04-17 2009-10-21 엘지전자 주식회사 Synthesis method for indium selenide nanoparticles by ultrasonic waves and a compound semiconductor solar cell comprising the said
US8450475B2 (en) 2008-08-04 2013-05-28 Allergan, Inc. Hyaluronic acid-based gels including lidocaine
CN101961344A (en) * 2009-07-23 2011-02-02 山东省生物药物研究院 Drug composite and application thereof
IT1395392B1 (en) * 2009-08-27 2012-09-14 Fidia Farmaceutici VISCOELASTIC FROSTS LIKE NEW FILLERS
WO2011063394A2 (en) * 2009-11-23 2011-05-26 Olmstead Stephen F Compositions and methods comprising serratia peptidase for inhibition and treatment of biofilms related to certain conditions
US20110172180A1 (en) * 2010-01-13 2011-07-14 Allergan Industrie. Sas Heat stable hyaluronic acid compositions for dermatological use
CN104105474B (en) * 2011-09-14 2018-04-06 阿勒根公司 Dermal augmentation agent composition for microgroove treatment

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20110171286A1 (en) * 2010-01-13 2011-07-14 Allergan, Inc. Hyaluronic acid compositions for dermatological use
US20110171311A1 (en) * 2010-01-13 2011-07-14 Allergan Industrie, Sas Stable hydrogel compositions including additives
JP2014515307A (en) * 2011-06-03 2014-06-30 アラーガン、インコーポレイテッド Dermal filler composition comprising an antioxidant

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
PARK D J ET AL: "IN VITRO EVALUATION OF CONJUGATED HYALURONIC ACID WITH ASCORBIC ACID", JOURNAL OF BONE & JOINT SURGERY, BRITISH VOLUME, vol. 92, no. 115, JPN6016013966, 2010, GB, ISSN: 0003337810 *

Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2021100603A (en) * 2011-09-14 2021-07-08 アラーガン、インコーポレイテッドＡｌｌｅｒｇａｎ，Ｉｎｃｏｒｐｏｒａｔｅｄ Dermal filler compositions comprising antioxidant
JP2021526934A (en) * 2018-06-15 2021-10-11 クロマ−ファーマ ゲゼルシャフト エム．ベー．ハー． Stabilized hyaluronic acid
JP7374133B2 (en) 2018-06-15 2023-11-06 クロマ－ファーマ ゲゼルシャフト エム．ベー．ハー． stabilized hyaluronic acid
JP2023508993A (en) * 2019-12-26 2023-03-06 アラーガン、インコーポレイテッド Crosslinked HA-collagen hydrogels as dermal fillers
JP7467641B2 (en) 2019-12-26 2024-04-15 アラーガン、インコーポレイテッド Crosslinked HA-collagen hydrogels as dermal fillers

Also Published As

Publication number Publication date
WO2013040242A3 (en) 2014-03-13
EP2755630A2 (en) 2014-07-23
KR20210125119A (en) 2021-10-15
CN108379112A (en) 2018-08-10
KR20140096028A (en) 2014-08-04
CN104105474A (en) 2014-10-15
JP2019058692A (en) 2019-04-18
RU2014113663A (en) 2015-10-20
CA2848833C (en) 2017-04-04
KR20220013588A (en) 2022-02-04
KR102161861B1 (en) 2020-10-26
HK1198124A1 (en) 2015-03-13
AU2012308503A1 (en) 2014-04-03
JP2017140433A (en) 2017-08-17
CN104105474B (en) 2018-04-06
WO2013040242A2 (en) 2013-03-21
JP2021100603A (en) 2021-07-08
CA2848833A1 (en) 2013-03-21
KR20200116168A (en) 2020-10-08
AU2012308503B2 (en) 2015-08-13
JP6125509B2 (en) 2017-05-10
RU2626513C2 (en) 2017-07-28

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP6995946B2 (en) Dermal filler composition containing antioxidants
JP6125509B2 (en) Dermal filler composition comprising an antioxidant
US20200353124A1 (en) Dermal filler compositions for fine line treatment
AU2021221920B2 (en) Dermal filler compositions
US11083684B2 (en) Dermal filler compositions
US20220023186A1 (en) Dermal filler compositions
AU2015255254B2 (en) Dermal filler compositions for fine line treatment

Legal Events

Date Code Title Description
A521 Request for written amendment filed

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523

Effective date: 20150911

A621 Written request for application examination

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621

Effective date: 20150911

A131 Notification of reasons for refusal

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131

Effective date: 20160614

A601 Written request for extension of time

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601

Effective date: 20160801

A601 Written request for extension of time

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601

Effective date: 20161031

A521 Request for written amendment filed

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523

Effective date: 20161213

TRDD Decision of grant or rejection written
A01 Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model)

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01

Effective date: 20170307

A61 First payment of annual fees (during grant procedure)

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61

Effective date: 20170405

R150 Certificate of patent or registration of utility model

Ref document number: 6125509

Country of ref document: JP

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150

R250 Receipt of annual fees

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250

R250 Receipt of annual fees

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250

R250 Receipt of annual fees

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250

R250 Receipt of annual fees

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250