JP2014181208A - Skin irritation-alleviating agent - Google Patents

Abstract

PROBLEM TO BE SOLVED: To provide a skin irritation-alleviating agent capable of effectively alleviating irritation to the hair, skin, mucous membrane and the like by an irritating substance, and a low irritation composition containing the same.SOLUTION: An irritation-alleviating agent contains, as an active ingredient, at least one or more selected from the group consisting of biosurfactants, particularly mannosyl erythritol lipid (MEL), mannosyl mannitol lipid (MML), triacyl derivatives of mannosyl erythritol lipid (MEL) and triacyl derivatives of mannosyl mannitol lipid (MML).

Description

本発明は、界面活性剤等の皮膚への化学的刺激を与える刺激性物質による刺激を緩和する皮膚刺激緩和剤に関する。   The present invention relates to a skin irritation relieving agent that relieves irritation caused by an irritating substance that imparts chemical irritation to the skin such as a surfactant.

スキンケア製品等には界面活性剤が含まれ化粧品組成物として重要な役割を果たしている。界面活性剤は、角層に浸透し、角質細胞のケラチンに吸収され、そして細胞間脂質と混和する。更に、界面活性剤は、脂肪酸、脂肪酸グリセリド、コレステリルエステル等の皮膚脂質を除去することで、皮膚に損傷を与えることが知られている。近年、アレルギー患者や敏感肌の人が増加し、化粧品等で刺激を感じる人が多くなってきており、より低刺激の製品が求められ、例えば特許文献１で開示されるように杜仲抽出物を基材とした低刺激性界面活性剤を用いた製品の開発が進められているが、未だ十分ではない。そこで、界面活性剤等の機能に影響を与えることなく、刺激性物質に対する刺激緩和機能を有する皮膚を保護する製剤の開発が熱望されてきた。   Skin care products and the like contain a surfactant and play an important role as a cosmetic composition. The surfactant penetrates the stratum corneum, is absorbed by the keratinous cell keratin, and mixes with the intercellular lipids. Furthermore, surfactants are known to damage skin by removing skin lipids such as fatty acids, fatty acid glycerides, and cholesteryl esters. In recent years, the number of allergic patients and people with sensitive skin has increased, and the number of people who feel irritation with cosmetics and the like has increased. Thus, a product with lower irritation is required. For example, as disclosed in Patent Document 1, a Tochu extract is used. Development of products using low-irritant surfactants as base materials is underway, but it is still not sufficient. Therefore, development of a preparation that protects the skin having a function of mitigating irritation to an irritating substance without affecting the function of a surfactant or the like has been eagerly desired.

特開２００１−３０２４３７号公報JP 2001-302437 A

本発明は、かかる従来技術の課題を背景になされたものである。すなわち、本発明の目的は、界面活性剤等の刺激性物質に対して優れた緩和作用を有し、皮膚を保護する製剤と、該製剤を、刺激性物質を皮膚に適用する前および/または適用した後に適用する皮膚を保護する方法の提供をすることにある。   The present invention has been made against the background of such prior art problems. That is, an object of the present invention is to provide a preparation that has an excellent relaxing action on irritating substances such as surfactants and protects the skin, and the preparation before applying the irritating substance to the skin and / or The object is to provide a method for protecting the applied skin after application.

本発明者らは鋭意検討した結果、以下に示す手段により、上記課題を解決できることを見出し、本発明に到達した。
すなわち、本発明は、以下の構成からなる。
１．皮膚に対して化学的刺激を与える刺激性物質による刺激を緩和する刺激緩和剤であって、少なくとも１つのバイオサーファクタントを含有してなることを特徴とする刺激緩和剤。
２．皮膚に対して化学的刺激を与える刺激性物質による刺激を緩和する刺激緩和剤であって、１に記載のバイオサーファクタントが糖脂質型バイオサーファクタントであることを特徴とする刺激緩和剤。
３．上記糖脂質型バイオサーファクタントが、マンノシルエリスリトールリピッド（ＭＥＬ）、マンノシルマンニトールリピッド（ＭＭＬ）、マンノシルエリスリトールリピッド（ＭＥＬ）のトリアシル体およびマンノシルマンニトールリピッド（ＭＭＬ）のトリアシル体からなる群より選択された少なくとも１種であることを特徴とする２に記載の刺激緩和剤。
４．前記刺激性物質が、界面活性剤であることを特徴とする１〜３に記載の刺激緩和剤。
５．前記刺激性物質が、アニオン性、カチオン性、ノニオン性、又は両性界面活性剤であることを特徴とする４に記載の刺激緩和剤。
６．１〜５のいずれかに記載の刺激緩和剤を刺激性物質に添加することを特徴とする、刺激性物質の刺激性低下方法。
７．１〜５いずれかに記載の刺激緩和剤を含有することを特徴とする低刺激性組成物。 As a result of intensive studies, the present inventors have found that the above problems can be solved by the following means, and have reached the present invention.
That is, this invention consists of the following structures.
1. An irritation relieving agent for alleviating irritation caused by an irritating substance that chemically irritates the skin, comprising at least one biosurfactant.
2. A stimulation alleviating agent for alleviating irritation caused by an irritating substance that chemically irritates the skin, wherein the biosurfactant according to 1 is a glycolipid type biosurfactant.
3. The glycolipid type biosurfactant is at least 1 selected from the group consisting of mannosyl erythritol lipid (MEL), mannosyl mannitol lipid (MML), manacyl erythritol lipid (MEL) triacyl, and mannosyl mannitol lipid (MML) triacyl. 2. The irritation reducing agent according to 2, which is a seed.
4). The stimulant mitigating agent according to 1 to 3, wherein the stimulating substance is a surfactant.
5. 5. The stimulant mitigating agent according to 4, wherein the stimulating substance is an anionic, cationic, nonionic or amphoteric surfactant.
6. A method for reducing irritation of an irritant substance, comprising adding the stimulant mitigating agent according to any one of items 1 to 5 to the irritant substance.
7.1 A hypoallergenic composition comprising the irritation reducing agent according to any one of 1 to 5.

本発明により、界面活性剤等の化学的刺激に対する優れた刺激緩和剤を提供するとともに、それを含有してなる低刺激性の組成物をも提供することができる。   According to the present invention, it is possible to provide an excellent irritation reducing agent for chemical stimulation such as a surfactant and a low irritation composition containing the same.

バイオサーファクタントが界面活性剤等による皮膚への化学的刺激を緩和するメカニズムとして、次のようなメカニズムを考えられる。すなわち、界面活性剤等は皮膚に接触すると、皮膚の角質層に存在する脂質二重膜を破壊し、表皮角質細胞や真皮層に直接的に刺激を与えるため、皮膚に損傷を与えることになる。しかし、（１）バイオサーファクタントが皮膚角質層と類似の脂質二分子膜構造（ラメラ構造）を単独で容易に（自発的に）形成する性質を有しており、角質層でバリアを形成するため、界面活性剤等が角質層に浸透できず、皮膚への刺激が緩和される。（２）バイオサーファクタントがミセルもしくはベシクルを形成する性質を有しており、バイオサーファクタントと界面活性剤等を混合すると、界面活性剤等がミセルもしくはベシクルの中に取り込まれ、さらにバイオサーファクタントの方が角質層への浸透性が高いため、角質層ですばやくバリアを形成できる。これら２つの効果の組み合わせにより、優れた皮膚刺激緩和効果を有すると考えられる。   The following mechanism can be considered as a mechanism by which biosurfactant relieves chemical irritation to the skin caused by a surfactant or the like. That is, when a surfactant or the like comes into contact with the skin, it destroys the lipid bilayer existing in the stratum corneum of the skin and directly stimulates the keratinocytes and dermis layers of the skin, thereby damaging the skin. . However, (1) the biosurfactant has the property of easily (spontaneously) forming a lipid bilayer structure (lamellar structure) similar to the skin stratum corneum, and forms a barrier in the stratum corneum. , Surfactant and the like cannot penetrate into the stratum corneum, and the irritation to the skin is alleviated. (2) Biosurfactants have the property of forming micelles or vesicles. When biosurfactants and surfactants are mixed, surfactants are incorporated into micelles or vesicles. Since the permeability to the stratum corneum is high, a barrier can be quickly formed in the stratum corneum. The combination of these two effects is considered to have an excellent skin irritation mitigating effect.

「バイオサーファクタント」とは生物によって生み出される界面活性能力や乳化能力を有する物質の総称であり、優れた界面活性や、高い生分解性を示すばかりでなく、様々な生理作用を有していることから合成界面活性剤とは異なる挙動・機能を発現する可能性がある。バイオサーファクタントとしては、微生物が生産する界面活性物質が代表的なものとして挙げられる。現在、上述した微生物が生産する界面活性物質としては、糖型、アシルペプタイド型、リン脂質型、脂肪酸型及び高分子化合物型の５つに大別されている。   “Biosurfactant” is a general term for substances having surface-active ability and emulsifying ability produced by living organisms, and not only exhibits excellent surface activity and high biodegradability, but also has various physiological functions. Therefore, there is a possibility of developing different behaviors and functions from synthetic surfactants. A typical example of a biosurfactant is a surfactant produced by a microorganism. At present, the above-mentioned surfactants produced by microorganisms are roughly classified into five types: sugar type, acyl peptide type, phospholipid type, fatty acid type, and polymer compound type.

本発明に用いられるバイオサーファクタントとしては、マンノシルエリスリトールリピッド（ＭＥＬ）、ＭＥＬ以外のマンノシルアルジトールリピッド（ＭＡＬ）としては、マンノシルマンニトールリピッド（ＭＭＬ）、マンノシルソルビトールリピッド（ＭＳＬ）、マンノシルアラビトールリピッド（ＭＡｒａＬ）、マンノシルリビトールリピッド（ＭＲＬ）などが挙げられ、なかでも、ＭＥＬが好ましい。   As biosurfactant used in the present invention, mannosyl erythritol lipid (MEL), and mannosyl alditol lipid (MAL) other than MEL include mannosyl mannitol lipid (MML), mannosyl sorbitol lipid (MSL), mannosyl arabitol lipid (MAraL). ), Mannosyl ribitol lipid (MRL), etc., among which MEL is preferable.

（ＭＥＬ)
ＭＥＬは、ウスチラゴ ヌーダ（Ｕｓｔｉｌａｇｏ ｎｕｄａ）とシゾネラ メラノグラマ（Ｓｈｉｚｏｎｅｌｌａ ｍｅｌａｎｏｇｒａｍｍａ）から発見された物質である。その後、イタコン酸生産の変異株であるキャンデダ（Ｃａｎｄｉｄａ）属酵母、キャンデダ アンタークチカ（Ｃａｎｄｉｄａ ａｎｔａｒｃｔｉｃａ）（現在はシュードザイマ アンタークチカ（Ｐｓｅｕｄｏｚｙｍａ ａｎｔａｒｃｔｉｃａ）、クルツマノマイセス（Ｋｕｒｔｚｍａｎｏｍｙｃｅｓ）属等の酵母らによっても生産されることが報告されている。 (MEL)
MEL is a substance discovered from Ustyago nuda and Shizonella melanogramma. Subsequently, Candida yeasts, mutants of itaconic acid production, Candida antarctica (now Pseudozyma antarctica), yeasts of the genus Kurtzumanomyces et al. It has been reported.

ＭＥＬの構造を一般式（１）に示す。一般式（１）中、置換基Ｒ１は、同一でも異なっていてもよい炭素数４〜２４の脂肪族アシル基である。ＭＥＬは、マンノースの４位及び６位のアセチル基の有無に基づいて、ＭＥＬ−Ａ、ＭＥＬ−Ｂ、ＭＥＬ−Ｃ及びＭＥＬ−Ｄの４種類に分類される。   The structure of MEL is shown in general formula (1). In the general formula (1), the substituent R1 is an aliphatic acyl group having 4 to 24 carbon atoms which may be the same or different. MEL is classified into four types, MEL-A, MEL-B, MEL-C, and MEL-D, based on the presence or absence of acetyl groups at the 4th and 6th positions of mannose.

具体的には、ＭＥＬ−Ａは、一般式（１）中、置換基Ｒ２およびＲ３がともにアセチル基である。ＭＥＬ−Ｂは、一般式（１）中、置換基Ｒ２はアセチル基であり、置換基Ｒ３は水素である。ＭＥＬ−Ｃは、一般式（１）中、置換基Ｒ２が水素であり、置換基Ｒ３はアセチル基である。ＭＥＬ−Ｄは、一般式（１）中、置換基Ｒ２及びＲ３がともに水素である。   Specifically, in MEL-A, in the general formula (1), the substituents R2 and R3 are both acetyl groups. In MEL-B, in the general formula (1), the substituent R2 is an acetyl group, and the substituent R3 is hydrogen. In MEL-C, in general formula (1), substituent R2 is hydrogen and substituent R3 is an acetyl group. In MEL-D, in the general formula (1), the substituents R2 and R3 are both hydrogen.

上記ＭＥＬ−Ａ〜ＭＥＬ−Ｄにおける置換基Ｒ１の炭素数は、ＭＥＬ生産培地に含有させる油脂類であるトリグリセリドを構成する脂肪酸の炭素数、および、使用するＭＥＬ生産菌の脂肪酸の資化の程度によって変化する。また、上記、トリグリセリドが不飽和脂肪酸残基を有する場合、ＭＥＬ生産菌が上記不飽和脂肪酸の二重結合部分まで資化しなければ、置換基Ｒ１として不飽和脂肪酸残基を含ませることも可能である。以上の説明から明らかなように、得られるＭＥＬは、通常、置換基Ｒ１の脂肪酸残基部分が異なる化合物の混合物の形態である。   The carbon number of the substituent R1 in the above MEL-A to MEL-D is the carbon number of the fatty acid constituting the triglyceride that is an oil or fat to be contained in the MEL production medium, and the degree of utilization of the fatty acid of the MEL-producing bacterium to be used It depends on. In addition, when the triglyceride has an unsaturated fatty acid residue, it is possible to include an unsaturated fatty acid residue as the substituent R1 unless the MEL-producing bacterium assimilates up to the double bond portion of the unsaturated fatty acid. is there. As apparent from the above description, the obtained MEL is usually in the form of a mixture of compounds having different fatty acid residue portions of the substituent R1.

本発明の組成物には一般式（２）または一般式（３）に示されている構造を有するマンノシルエリスリトールリピッドが含まれている。尚、一般式（２）中、置換基Ｒ１は同一でも異なっていてもよい炭素数４〜２４の脂肪族アシル基であり、置換基Ｒ２は同一でも異なっていてもよい水素またはアセチル基であり、置換基Ｒ３は水素または炭素数２〜２４の脂肪族アシル基である。また、一般式（３）中、置換基Ｒ１は同一でも異なっていてもよい炭素数４〜２４の脂肪族アシル基であり、置換基Ｒ２は同一でも異なっていてもよい水素またはアセチル基であり、置換基Ｒ３は水素または炭素数２〜２４の脂肪族アシル基である。   The composition of the present invention contains mannosyl erythritol lipid having the structure represented by the general formula (2) or the general formula (3). In the general formula (2), the substituent R1 is an aliphatic acyl group having 4 to 24 carbon atoms which may be the same or different, and the substituent R2 is a hydrogen or acetyl group which may be the same or different. The substituent R3 is hydrogen or an aliphatic acyl group having 2 to 24 carbon atoms. In the general formula (3), the substituent R1 is an aliphatic acyl group having 4 to 24 carbon atoms which may be the same or different, and the substituent R2 is a hydrogen or acetyl group which may be the same or different. The substituent R3 is hydrogen or an aliphatic acyl group having 2 to 24 carbon atoms.

一般式（２）及び一般式（３）における置換基Ｒ１は、同一でも異なっていてもよい炭素数４〜２４の脂肪族アシル基である。置換基Ｒ１の炭素数は上記範囲内であれば特に限定されないが、８個〜１４個であることがさらに好ましい。   The substituent R1 in the general formula (2) and the general formula (3) is an aliphatic acyl group having 4 to 24 carbon atoms which may be the same or different. The number of carbon atoms of the substituent R1 is not particularly limited as long as it is within the above range, but it is more preferably 8 to 14.

また、上記一般式（２）及び一般式（３）中の置換基Ｒ１は、飽和脂肪族アシル基であっても不飽和脂肪族アシル基であってもよく、特に限定されるものではない。不飽和結合を有している場合、例えば、複数の二重結合を有していても良い。炭素鎖は直鎖であっても分岐鎖状であってもよい。また、酸素原子含有炭化水素基の場合、含まれる酸素原子の数及び位置は特に限定されない。   Further, the substituent R1 in the general formulas (2) and (3) may be a saturated aliphatic acyl group or an unsaturated aliphatic acyl group, and is not particularly limited. When it has an unsaturated bond, you may have a some double bond, for example. The carbon chain may be linear or branched. In the case of an oxygen atom-containing hydrocarbon group, the number and position of oxygen atoms contained are not particularly limited.

ＭＥＬ以外のＭＡＬ（マンノシルアルジトールリピッド）の構造は一般式（４）に示す。エリスリトール以外の糖アルコール（アルジトール）としては、マンニトール、アラビトール、リビトール、ソルビトールが付加している（ｎ=４：マンニトール、ソルビトール、ｎ=３：アラビトール、リビトール）。一般式（４）に対応させれば、ＭＡＬはマンノースの２位、３位に炭素数２〜２０、好ましくは炭素数４〜１８、より好ましくは炭素数６〜１４の飽和又は不飽和の直鎖又は分枝を有するアルカノイル基を有する。   The structure of MAL (mannosyl alditol lipid) other than MEL is shown in general formula (4). Mannitol, arabitol, ribitol, and sorbitol are added as sugar alcohols (alditol) other than erythritol (n = 4: mannitol, sorbitol, n = 3: arabitol, ribitol). According to the general formula (4), MAL is a saturated or unsaturated straight chain having 2 to 20 carbon atoms, preferably 4 to 18 carbon atoms, more preferably 6 to 14 carbon atoms at the 2nd and 3rd positions of mannose. It has an alkanoyl group having a chain or a branch.

（式中、置換基Ｒ１は同一でも異なっていてもよい炭素数２〜２０、好ましくは炭素数４〜１８、より好ましくは炭素数６〜１４の飽和又は不飽和の直鎖又は分枝を有するアルカノイル基を有し、式中、置換基Ｒ２は同一でも異なっていてもよい水素またはアセチル基である。好ましくは、式中、置換基Ｒ２のどちらもアセチル基である化合物である。） (In the formula, the substituents R1 may be the same or different and each has a saturated or unsaturated straight or branched chain having 2 to 20 carbon atoms, preferably 4 to 18 carbon atoms, more preferably 6 to 14 carbon atoms. (In the formula, the substituent R2 is a hydrogen atom or an acetyl group, which may be the same or different, and is preferably a compound in which both of the substituents R2 are acetyl groups.)

（トリアシル体）
本発明に用いられるバイオサーファクタントは、ＭＥＬのトリアシル体及びＭＥＬ以外のＭＡＬ のトリアシル体でもよい。トリアシル体のバイオサーファクタントは、ＭＥＬやＭＥＬ以外のＭＡＬよりもさらに高い疎水性を有するバイオサーファクタントである。例えば、ＭＥＬ生産菌の培養液にも存在するし、大量に得る時は、酵素を用いてＭＥＬを種々の植物油と反応することによって製造することもできる。 (Triacyl derivative)
The biosurfactant used in the present invention may be MEL triacyl and MAL triacyl other than MEL. The triacyl biosurfactant is a biosurfactant having higher hydrophobicity than MEL or MAL other than MEL. For example, it also exists in the culture solution of MEL-producing bacteria, and when it is obtained in a large amount, it can be produced by reacting MEL with various vegetable oils using enzymes.

ＭＥＬのトリアシル体、すなわちトリアシルマンノシルエリスリトールリピッド（以下、トリアシルＭＥＬと称することがある。）は、一般式（２）または一般式（３）中、置換基Ｒ１およびＲ３がいずれも脂肪族アシル基であればトリアシルＭＥＬとなり、置換基Ｒ２は同一でも異なっていてもよい水素またはアセチル基である。トリアシルＭＥＬもＭＥＬと同様、マンノースの４位及び６位のアセチル基の有無に基づいて、トリアシルＭＥＬ−Ａ、トリアシルＭＥＬ−Ｂ、トリアシルＭＥＬ−Ｃ及びトリアシルＭＥＬ−Ｄの４種類に分類される。   The triacyl form of MEL, that is, triacyl mannosyl erythritol lipid (hereinafter sometimes referred to as triacyl MEL) is a group in which the substituents R1 and R3 are aliphatic acyl groups in the general formula (2) or the general formula (3). The triacyl MEL and the substituent R2 is hydrogen or acetyl group which may be the same or different. Similarly to MEL, triacyl MEL is classified into four types of triacyl MEL-A, triacyl MEL-B, triacyl MEL-C, and triacyl MEL-D based on the presence or absence of acetyl groups at the 4th and 6th positions of mannose.

トリアシルＭＥＬは、ジアシルＭＥＬとは異なった性質を示す。具体的には、高い疎水性を有することからエモリエント剤として従来のＭＥＬと比べても種々のオイル成分と馴染みやすい点で優れている。   Triacyl MEL exhibits different properties from diacyl MEL. Specifically, since it has high hydrophobicity, it is excellent as an emollient agent in that it can be easily adapted to various oil components as compared with conventional MEL.

本発明に好ましく用いられるバイオサーファクタントは、ＭＥＬ−Ａと、一般式（５）または一般式（６）にて示される構造を有するＭＥＬ−Ｂである。   Biosurfactants preferably used in the present invention are MEL-A and MEL-B having a structure represented by general formula (5) or general formula (6).

（一般式（５）及び一般式（６）中、置換基Ｒ１は同一でも異なっていてもよい炭素数４〜２４の脂肪族アシル基である） (In the general formulas (5) and (6), the substituent R1 is the same or different aliphatic acyl group having 4 to 24 carbon atoms)

なお、バイオサーファクタントは、単独で使用してもよいが、２種以上のバイオサーファクタントを併用することもできる。   In addition, although a biosurfactant may be used independently, 2 or more types of biosurfactants can also be used together.

（バイオサーファクタントの製造方法）
バイオサーファクタントの製造方法は特に制限されるものはないが、微生物を用いた発酵方法を任意に選択して行えば良い。例えばＭＥＬ (ＭＥＬ−Ａ、ＭＥＬ−Ｂ、ＭＥＬ−Ｃ)の培養生産は常法に従って、Ｐｓｅｕｄｏｚｙｍａ ａｎｔａｒｃｔｉｃａ（ＮＢＲＣ １０７３）により生産することができ、微生物としてはＰｓｅｕｄｏｚｙｍａ ａｎｔａｒｃｔｉｃａ、Ｐｓｅｕｄｏｚｙｍａ ｓｐ.等を用いることができる。いずれの微生物でも容易にＭＥＬ混合物が得られることは周知の事実である。ＭＥＬ混合物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーを用いて精製し、ＭＥＬ−Ａ、ＭＥＬ−Ｂ及びＭＥＬ−Ｃを単離することが出来る。また、ＭＥＬ−Ｂを生産する菌としては、Ｐｓｅｕｄｏｚｙｍａ ａｎｔａｒｃｔｉｃａ 、及びＰｓｅｕｄｏｚｙｍａ ｔｓｕｋｕｂａｅｎｓｉｓが知られており、その菌を用いてもよい。ＭＥＬ−Ｃを生産する菌としては、Ｐｓｅｕｄｏｚｙｍａ ｈｕｂｅｉｅｎｓｉｓ、Ｐｓｅｕｄｏｚｙｍａ ｇｒａｍｉｎｉｃｏｌａ等が知られており、その菌を用いてもよい。ＭＥＬを生産する能力を有する微生物としては特に限定するものではなく、目的に応じて適宜使用することができる。 (Biosurfactant production method)
The method for producing the biosurfactant is not particularly limited, and a fermentation method using microorganisms may be arbitrarily selected. For example, culture production of MEL (MEL-A, MEL-B, MEL-C) can be produced by Pseudozyma antartica (NBRC 1073) according to a conventional method, and Pseudozyma antartica, Pseudozyma sp. it can. It is a well-known fact that an MEL mixture can be easily obtained with any microorganism. The MEL mixture can be purified using silica gel column chromatography to isolate MEL-A, MEL-B and MEL-C. Moreover, as bacteria which produce MEL-B, Pseudozyma antarctica and Pseudozyma tsukubaensis are known, and these bacteria may be used. Known bacteria that produce MEL-C include Pseudozyma hubiensis, Pseudozyma gramicola, and the like. The microorganism having the ability to produce MEL is not particularly limited, and can be appropriately used depending on the purpose.

バイオサーファクタントを生産するときの発酵培地は、酵母エキス、ペプトン等のＮ源、グルコース、グリセロール、フルクトース等のＣ源、及び硝酸ナトリウム、リン酸水素二カリウム、硫酸マグネシウム７水塩等の無機塩類からなる一般的な組成の培地を用いることができ、これにオリーブ油、ダイズ油、ヒマワリ油、トウモロコシ油、キャノーラ油、ココナッツ油等の油脂類、並びに、流動パラフィン、テトラデカン等の炭化水素等の非水溶性基質の単独或いは２種以上を添加したものを使用することができる。   Fermentation medium for producing biosurfactant includes N sources such as yeast extract and peptone, C sources such as glucose, glycerol and fructose, and inorganic salts such as sodium nitrate, dipotassium hydrogen phosphate and magnesium sulfate heptahydrate. A medium having a general composition can be used, and oil and fats such as olive oil, soybean oil, sunflower oil, corn oil, canola oil and coconut oil, and water-insoluble such as hydrocarbons such as liquid paraffin and tetradecane can be used. Sexual substrates can be used alone or added with two or more.

ｐＨや温度等の発酵条件や培養時間等は任意に設定でき、発酵後の培養液をそのまま本発明のバイオサーファクタントとして使用することが可能である。また、発酵後の培養液を必要に応じて濾過、遠心分離、抽出、精製、滅菌等の任意の操作を適宜加えることも可能であり、得られたエキスを希釈、濃縮、乾燥することもできる。   Fermentation conditions such as pH and temperature, culture time, and the like can be arbitrarily set, and the culture solution after fermentation can be used as it is as the biosurfactant of the present invention. In addition, it is possible to appropriately add any operation such as filtration, centrifugation, extraction, purification, sterilization and the like to the culture solution after fermentation, and the obtained extract can be diluted, concentrated and dried. .

原料とする油脂類としては植物油脂が好ましい。植物油脂は特に限定されず、目的に応じて適宜選定することができる。例えば、大豆油、菜種油、コーン油、ピーナッツ油、綿実油、ベニバナ油、ゴマ油、オリーブ油、パーム油などが挙げられ、これらの中でも、大豆油、オリーブ油がバイオサーファクタント（特にＭＥＬ）の生産効率（生産量、生産速度、及び収率）を向上させることができる点で特に好ましい。これらは、１種を単独で、または２種以上を併用しても構わない。   As oils and fats used as raw materials, vegetable oils and fats are preferable. Vegetable fats and oils are not particularly limited, and can be appropriately selected according to the purpose. For example, soybean oil, rapeseed oil, corn oil, peanut oil, cottonseed oil, safflower oil, sesame oil, olive oil, palm oil, etc. Among them, soybean oil and olive oil are biosurfactants (especially MEL) production efficiency (production amount) , Production rate, and yield) are particularly preferable. These may be used alone or in combination of two or more.

無機窒素源としては特に制限はなく、目的に応じて適宜選定することができるが、例えば、硝酸アンモニウム、尿素、硝酸ナトリウム、塩化アンモニウム、硫安等が挙げられる。   There is no restriction | limiting in particular as an inorganic nitrogen source, Although it can select suitably according to the objective, For example, ammonium nitrate, urea, sodium nitrate, ammonium chloride, ammonium sulfate, etc. are mentioned.

バイオサーファクタントの回収、精製方法には特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。例えば、培養液を遠心分離して油分を回収し、酢酸エチル等の有機溶媒で抽出濃縮することにより回収することができる。   There are no particular limitations on the method for recovering and purifying the biosurfactant, and it can be appropriately selected according to the purpose. For example, it can be recovered by centrifuging the culture solution to recover the oil, and extracting and concentrating with an organic solvent such as ethyl acetate.

抽出溶媒としては、水、アルコール類（例えば、メタノール、無水エタノール、エタノールなどの低級アルコール、またはプロピレングリコール、１，３-ブチレングリコールなどの多価アルコール）、アセトンなどのケトン類、ジエチルエーテル、ジオキサン、アセトニトリル、酢酸エチルなどのエステル類、キシレン、ベンゼン、クロロホルムなどの有機溶媒を、単独であるいは２種類以上の混液を任意に組み合わせて使用することができ、また、各々の溶媒抽出物が組み合わされたものでも使用することができる。   Examples of the extraction solvent include water, alcohols (for example, lower alcohols such as methanol, absolute ethanol, and ethanol, or polyhydric alcohols such as propylene glycol and 1,3-butylene glycol), ketones such as acetone, diethyl ether, and dioxane. , Esters such as acetonitrile and ethyl acetate, and organic solvents such as xylene, benzene, and chloroform can be used alone or in any combination of two or more kinds, and each solvent extract is combined. Can also be used.

抽出方法は特に制限されるものはないが、通常、常温から常圧下での溶媒の沸点の範囲であればよく、抽出後は濾過またはイオン交換樹脂を用い、吸着・脱色・精製して溶液状、ペースト状、ゲル状、粉末状とすればよい。多くの場合は、そのままの状態で利用できるが、必要であれば、その効力に影響のない範囲でさらに脱臭、脱色などの精製処理を加えてもよい。脱臭・脱色等の精製処理手段としては、活性炭カラムなどを用いればよく、抽出物質により一般的に適用される通常の手段を任意に選択して行えばよい。必要に応じて、シリカゲルカラムを用いて精製することにより、純度の高いバイオサーファクタントを得ることができる。   There are no particular limitations on the extraction method, but usually it may be in the range of the boiling point of the solvent from room temperature to normal pressure. , Paste, gel, and powder. In many cases, it can be used as it is, but if necessary, further purification treatment such as deodorization and decolorization may be added as long as the effect is not affected. As a purification treatment means such as deodorization and decolorization, an activated carbon column or the like may be used, and a normal means generally applied depending on the extracted substance may be arbitrarily selected. If necessary, a high-purity biosurfactant can be obtained by purification using a silica gel column.

こうして得られる本発明の刺激緩和剤は、その形態は液体状、固体状、ゲル状、ペースト、スラリー、ミスト状等の目的に応じて種々の形態で用いることができる。但し、この形態に限定されることはない。   The stimulant-relieving agent of the present invention thus obtained can be used in various forms depending on the purpose such as liquid, solid, gel, paste, slurry, mist and the like. However, it is not limited to this form.

本発明の刺激緩和剤の配合量は特に制限はないが、例えば化粧品組成物、洗浄剤組成物または外用薬組成物等の製品中において、バイオサーファクタント含量が０．００１〜５０重量％であり、目的に応じて調節することができる。好ましくは、組成物中において０．０１〜３０重量％であり、より好ましくは０．０５〜２０重量%である。   The blending amount of the stimulant mitigating agent of the present invention is not particularly limited, but for example, in a product such as a cosmetic composition, a detergent composition or an external pharmaceutical composition, the biosurfactant content is 0.001 to 50% by weight, It can be adjusted according to the purpose. Preferably, it is 0.01 to 30% by weight in the composition, and more preferably 0.05 to 20% by weight.

本発明の刺激緩和剤は、界面活性剤のような刺激性物質の刺激性を緩和する効果に優れることから、アニオン、カチオン、ノニオンまたは両性の界面活性剤等の刺激性物質を配合する全ての組成物に適用することができ、例えば皮膚や粘膜等に接触する可能性のある用途に用いることで、低刺激性組成物として使用することができる。   Since the stimulant mitigating agent of the present invention is excellent in the effect of mitigating the irritation of an irritating substance such as a surfactant, all stimulants such as anionic, cationic, nonionic or amphoteric surfactants are blended. It can be applied to a composition, and can be used as a hypoallergenic composition by using it for applications that may come into contact with the skin, mucous membranes, and the like.

例えば、このような低刺激性組成物としては、洗浄剤組成物(衣料用、台所用、住居用、硬質表面用、食器用、身体用、頭髪用、食品用、工業用等)、化粧品組成物、コンタクトレンズ用剤（洗浄液、保存液等）および外用薬剤（点眼剤、眼軟膏、点鼻剤、点耳剤、座剤、湿布剤、口腔用剤、膣洗浄剤、皮膚用剤等）等の人に接触する組成物等に幅広く適用することができ、低刺激性組成物として使用することができる。
本発明の刺激緩和剤を含有する低刺激性組成物は、その形態は液体状、固体状、ゲル状、ペースト、スラリー、ミスト状、液晶、粉体、エアゾール等の目的に応じて種々の形態で用いることができる。但し、この形態に限定されることはない。 For example, such hypoallergenic compositions include detergent compositions (clothing, kitchen, residential, hard surface, tableware, body, hair, food, industrial, etc.), cosmetic compositions Products, contact lens preparations (cleaning solution, preservative solution, etc.) and external preparations (eye drops, eye ointments, nasal drops, ear drops, suppositories, poultices, oral preparations, vaginal cleaning agents, skin preparations, etc.) It can be widely applied to compositions that come into contact with humans and the like, and can be used as a hypoallergenic composition.
The hypoallergenic composition containing the stimulant-relieving agent of the present invention has various forms depending on the purpose such as liquid, solid, gel, paste, slurry, mist, liquid crystal, powder, aerosol, etc. Can be used. However, it is not limited to this form.

本発明に於ける化粧品とは、薬事法に言う医薬部外品および化粧品の総称であり、具体的には、医薬部外品としては口中清涼剤、腋臭防止剤、てんか粉類、養毛剤、除毛剤、染毛剤、パーマネントウェーブ用剤、浴用剤、薬用化粧品、薬用歯磨き類などを列挙することができ、化粧品としては、化粧石鹸、洗顔料（クリーム・ペースト状、液・ジェル状、顆粒・粉末状、エアゾール使用など）、シャンプー、リンスなどの清浄用化粧品；
染毛料、ヘアトリートメント剤（クリーム状、ミスト状、オイル状、ジェル状その他の形態の物および枝毛コート剤を含む）、ヘアセット剤（髪油、セットローション、カーラーローション、ポマード、チック、びんつけ油、ヘアスプレー、ヘアミスト、ヘアリキッド、ヘアフォーム、ヘアジェル、ウォーターグリース）などの頭髪用化粧品；
一般クリーム、乳液（クレンジングクリーム、コールドクリーム、バニシングクリーム、ハンドクリームなど）、ひげ剃り用クリーム（アフターシェービングクリーム、シェービングクリームなど）、化粧水（ハンドローション、一般化粧水など）、オーデコロン、ひげ剃り用ローション（アフターシェービングローション、シェービングローションなど）、化粧油、パックなどの基礎化粧品； Cosmetics in the present invention is a generic name for quasi-drugs and cosmetics as referred to in the Pharmaceutical Affairs Law. Specifically, quasi-drugs include mouth fresheners, odor control agents, tempered powders, hair nourishing agents, removal agents. Hair, hair dye, permanent wave agent, bath agent, medicated cosmetic, toothpaste, etc. can be listed. Cosmetics include cosmetic soap, facial cleanser (cream / paste, liquid / gel, granule)・ Powder, aerosol use, etc.), cosmetics for cleaning such as shampoo and rinse;
Hair dyes, hair treatments (including cream, mist, oil, gel and other forms and split hair coats), hair set (hair oil, set lotion, curler lotion, pomade, tics, bottles Cosmetics for hair, such as oiling, hair spray, hair mist, hair liquid, hair foam, hair gel, water grease);
General cream, emulsion (cleansing cream, cold cream, burnishing cream, hand cream, etc.), shaving cream (after shaving cream, shaving cream, etc.), lotion (hand lotion, general lotion, etc.), cologne, shaving Basic cosmetics such as lotions (after shaving lotions, shaving lotions, etc.), cosmetic oils, packs;

おしろい（クリームおしろい、固形おしろい、粉おしろい、タルカムパウダー、練りおしろい、ベビーパウダー、ボディパウダー、水おしろいなど）、パウダー、ファンデーション（クリーム状、液状、固形など）、ほお紅、まゆずみ、アイクリーム、アイシャドウマスカラなどのメークアップ化粧品；
一般香水、練り香水、粉末香水などの香水類； ゲルタイプ、液体タイプ、陶器タイプ等の芳香剤、消臭剤、脱臭剤；
日焼け・日焼け止めクリーム、日焼け・日焼け止めローション、日焼け・日焼け止めオイルなどの日焼け・日焼け止め化粧品；
爪クリーム、エナメル、エナメル除去液などの爪化粧品；
アイライナー化粧品；
口紅、リップクリームなどの***化粧品；
歯磨きなどの口腔化粧品；
バスソルト、バスオイル、バブルバスなどの浴用化粧品などを列挙することができる。 Oshiroi (Cream Occasion, Solid Opaque, Powder Ooiro, Talcum Powder, Kneading Oro, Baby Powder, Body Powder, Water Osoiro, etc.), Powder, Foundation (Cream, Liquid, Solid etc.), Blusher, Eyebrows, Eye Cream, Eye Makeup cosmetics such as shadow mascara;
Perfumes such as general perfume, kneaded perfume, powdered perfume; fragrance, deodorant, deodorant such as gel type, liquid type, ceramic type;
Sunscreen / sunscreen cosmetics such as sunscreen / sunscreen cream, sunscreen / sunscreen lotion, sunscreen / sunscreen oil;
Nail cosmetics such as nail cream, enamel, enamel remover;
Eyeliner cosmetics;
Lip cosmetics such as lipstick and lip balm;
Oral cosmetics such as toothpaste;
Listed are bath cosmetics such as bath salt, bath oil, and bubble bath.

また本発明の低刺激性組成物においては、本発明の目的が損なわれない限り、用途、目的に応じ各種の基材と併用することができる。
具体的には、アラビアゴム、トラガントゴム等の天然ゴム類、サポニン等のグルコシド類、メチルセルロース、カルボキシセルロース、ヒドロキシメチルセルロース等のセルロース誘導体、リグニンスルホン酸塩、セラック等の天然高分子、ポリアクリル酸塩、スチレン−アクリル酸共重合物の塩、ビニルナフタレン−マレイン酸共重合物の塩、β−ナフタレンスルホン酸ホルマリン縮合物のナトリウム塩、リン酸塩などの陰イオン性高分子やポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、ポリエチレングリコール等のノニオン性高分子等の分散剤； Moreover, in the hypoallergenic composition of this invention, unless the objective of this invention is impaired, it can use together with various base materials according to a use and the objective.
Specifically, natural rubbers such as gum arabic and tragacanth, glucosides such as saponin, cellulose derivatives such as methylcellulose, carboxycellulose, and hydroxymethylcellulose, natural polymers such as lignin sulfonate and shellac, polyacrylates, Styrene-acrylic acid copolymer salt, vinyl naphthalene-maleic acid copolymer salt, β-naphthalene sulfonic acid formalin condensate sodium salt, anionic polymer such as phosphate, polyvinyl alcohol, polyvinyl pyrrolidone, Dispersants such as nonionic polymers such as polyethylene glycol;

高級脂肪酸塩（石鹸）；疎水基部の炭素数８〜２０の高級脂肪酸またはそれらの塩、Ｎ−アシルアミノ酸型アニオン界面活性剤；アシル基としては、炭素数８〜２０のもので前記したようなものが挙げられ、構成アミノ酸としては、グルタミン酸やアスパラギン酸等の前記した酸性アミノ酸類、またはグリシン、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、メチオニン、システイン、トリプトファン、チロシン、フェニルアラニン、アスパラギン、グルタミン、セリン、トレオニン、オキシプロリン、β−アミノプロピオン酸、γ−アミノ酪酸、アントラニル酸、ｍ−アミノ安息香酸、ｐ−アミノ安息香酸、等のアミノ酸等；アルキルエーテルカルボン酸塩、アミドエーテルカルボン酸塩等、アルキル硫酸エステル塩（ＡＳ）、ポリオキシエチレンアルキルエーテル硫酸エステル塩（ＡＥＳ）、アルキルエーテル硫酸塩、高級脂肪酸エステルの硫酸塩、高級脂肪酸アルキロールアミドの硫酸塩、硫酸化油脂、ポリオキシエチレンスチレン化フェニルエーテル硫酸塩、アルファ−オレフィンスルホン酸塩（ＡＯＳ）、アルキルベンゼンスルホン酸塩、アルキルナフタレンスルホン酸塩、アルキルスルホン酸塩（ＳＡＳ）、ジアルキルスルホコハク酸塩、アルファースルホン化脂肪酸塩、アルカンスルホン酸塩、高級脂肪酸エステルのスルホン酸塩、アルファースルホン化脂肪酸塩、高級脂肪酸アミドのスルホン酸塩、Ｎ−アシル−Ｎ−アルキルタウリン塩、Ｎ−アシル−Ｎ−メチルタウリン塩、アルキルリン酸塩、アルキルエーテルリン酸塩、ポリオキシエチレンアルキルエーテルリン酸塩、ポリオキシエチレンアルキルフェニルエーテルリン酸塩、ナフタリンスルフォン酸塩ホルマリン縮合物などのアニオン性界面活性剤； Higher fatty acid salt (soap); higher fatty acid having 8 to 20 carbon atoms in hydrophobic group or salt thereof, N-acyl amino acid type anionic surfactant; acyl group having 8 to 20 carbon atoms as described above Constituent amino acids include acidic amino acids such as glutamic acid and aspartic acid, or glycine, alanine, valine, leucine, isoleucine, proline, methionine, cysteine, tryptophan, tyrosine, phenylalanine, asparagine, glutamine, serine Amino acids such as threonine, oxyproline, β-aminopropionic acid, γ-aminobutyric acid, anthranilic acid, m-aminobenzoic acid, p-aminobenzoic acid, etc .; alkyl ether carboxylates, amide ether carboxylates, etc. Alkyl sulfate ester salt (AS), poly Reoxyethylene alkyl ether sulfate (AES), alkyl ether sulfate, sulfate of higher fatty acid ester, sulfate of higher fatty acid alkylolamide, sulfated oil, polyoxyethylene styrenated phenyl ether sulfate, alpha-olefin Sulfonate (AOS), alkylbenzene sulfonate, alkyl naphthalene sulfonate, alkyl sulfonate (SAS), dialkyl sulfosuccinate, alpha-sulfonated fatty acid salt, alkane sulfonate, sulfonate of higher fatty acid ester, Alpha sulfonated fatty acid salt, sulfonate of higher fatty acid amide, N-acyl-N-alkyl taurine salt, N-acyl-N-methyl taurine salt, alkyl phosphate, alkyl ether phosphate, polyoxyethylene alkyl Terurin salts, polyoxyethylene alkyl phenyl ether phosphates, anionic surfactants such as naphthalene sulfonate formalin condensates;

アルキルベタイン類、アルキルアミドベタイン類、アルキルスルホベタイン類、イミダゾリニウムベタイン類、レシチン類などの両性界面活性剤；
ポリオキシエチレンアルキルエーテル（ＡＥ）、ポリオキシエチレンアルキルフェニルエーテル、ポリオキシエチレンポリスチリルフェニルエーテル、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレングリコール、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレンアルキルエーテル、ポリオキシアルキレン脂肪酸エステル、ポリオキシアルキレンソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシアルキレン脂肪酸アルカノールアミド、ポリオキシアルキレンアルキルグルコシド、ポリオキシアルキレン硬化ひまし油、ポリオキシアルキレンアルキルアミン、ポリオキシアルキレンアルキルフェニルエーテル、等の酸化エチレン縮合型、
多価アルコール脂肪酸部分エステル、ポリオキシエチレン多価アルコール脂肪酸部分エステル、ポリオキシエチレン脂肪酸エステル、（ポリ）グリセリン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレン硬化ひまし油、ポリオキシエチレンアルキルアミン、トリエタノールアミン脂肪酸部分エステル、アルキルポリグルコシド、プロピレングリコール脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、ショ等脂肪酸エステル等の多価アルコールエステル、などのノニオン性界面活性剤；脂肪酸アルカノールアミド、糖アミンアシル化物、トリエタノールアミン脂肪酸部分エステル、脂肪酸アルキロールアミド、アルキルアミンオキサイド、
等が挙げられる。 Amphoteric surfactants such as alkylbetaines, alkylamidobetaines, alkylsulfobetaines, imidazolinium betaines, lecithins;
Polyoxyethylene alkyl ether (AE), polyoxyethylene alkyl phenyl ether, polyoxyethylene polystyryl phenyl ether, polyoxyethylene polyoxypropylene glycol, polyoxyethylene polyoxypropylene alkyl ether, polyoxyalkylene fatty acid ester, polyoxyalkylene Sorbitan fatty acid ester, polyoxyalkylene fatty acid alkanolamide, polyoxyalkylene alkyl glucoside, polyoxyalkylene hydrogenated castor oil, polyoxyalkylene alkyl amine, polyoxyalkylene alkyl phenyl ether, and other ethylene oxide condensation types,
Polyhydric alcohol fatty acid partial ester, polyoxyethylene polyhydric alcohol fatty acid partial ester, polyoxyethylene fatty acid ester, (poly) glycerin fatty acid ester, polyoxyethylene hydrogenated castor oil, polyoxyethylene alkylamine, triethanolamine fatty acid partial ester, alkyl Nonionic surfactants such as polyglucoside, propylene glycol fatty acid ester, sorbitan fatty acid ester, polyhydric alcohol ester such as sho, fatty acid ester; fatty acid alkanolamide, sugar amine acylated product, triethanolamine fatty acid partial ester, fatty acid alkylolamide , Alkylamine oxide,
Etc.

第１〜第３級脂肪アミン塩、塩化アルキルアンモニウム塩、テトラアルキルアンモニウム塩、トリアルキルベンジルアンモニウム塩、アルキルピリジニウム塩、アルキルヒドロキシエチルイミダゾリニウム塩、ジアルキルモルフォリニウム塩、アルキルイソキノリウム塩、ベンゼトニウム塩、ベンザルコニウム塩などのカチオン性界面活性剤；
アルギン酸ナトリウム、デンプン誘導体、トラガントゴムなどの高分子界面活性剤；
レシチン、ラノリン、コレステロール、サポニンなどの天然界面活性剤；
アボガド油、アーモンド油、オリーブ油、カカオ油、ゴマ油、サフラワー油、大豆油、椿油、パーシック油、ひまし油、ミンク油、綿実油、モクロウ、ヤシ油、卵黄油、パーム油、パーム核油、合成トリグリセライド、ホホバ油等の油脂；
流動パラフィン、ワセリン、セレシン、マイクロクリスタリンワックス、イソパラフィン等の炭化水素；
ミツロウ、鯨ロウ、ラノリン、カルナバロウ、キャンデリラロウおよびその誘導体等のロウ； Primary to tertiary fatty amine salts, alkylammonium chloride salts, tetraalkylammonium salts, trialkylbenzylammonium salts, alkylpyridinium salts, alkylhydroxyethylimidazolinium salts, dialkylmorpholinium salts, alkylisoquinolium salts, Cationic surfactants such as benzethonium salts and benzalkonium salts;
Polymeric surfactants such as sodium alginate, starch derivatives, tragacanth gum;
Natural surfactants such as lecithin, lanolin, cholesterol, saponin;
Avocado oil, almond oil, olive oil, cacao oil, sesame oil, safflower oil, soybean oil, camellia oil, persic oil, castor oil, mink oil, cottonseed oil, owl, palm oil, egg yolk oil, palm oil, palm kernel oil, synthetic triglyceride, Fats and oils such as jojoba oil;
Hydrocarbons such as liquid paraffin, petrolatum, ceresin, microcrystalline wax, isoparaffin;
Waxes such as beeswax, whale wax, lanolin, carnauba wax, candelilla wax and derivatives thereof;

ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、イソステアリン酸、オレイン酸、ベヘニン酸、ウンデシレン酸、ラノリン脂肪酸、硬質ラノリン脂肪酸、軟質ラノリン脂肪酸等の高級脂肪酸；
ラウリルアルコール、セタノール、セトステアリルアルコール、ステアリルアルコール、オレイルアルコール、ベヘニルアルコール、ラノリンアルコール、水添ラノリンアルコール、へキシルデカノール、オクチルドデカノール等の高級アルコール；
ミリスチン酸イソプロピル、ステアリン酸ブチル等のその他のエステル油；
金属石鹸、ジメチルポリシロキサン、ポリエーテル変性シリコーン、アルコール変性シリコーン、メチルフェニルポリシロキサン、エポキシ変性シリコーン、フッ素変性シリコーン、アルキル変性シリコーン、アルコキシ変性シリコーン、アミノ変性シリコーン、揮発性シリコーン等のシリコーン類等の揮発性および不揮発性の油分；
グリセリン、ジグリセリン、ポリグリセリン、１，３−ブタンジオール、プロパンジオール、ポリエチレングリコールなどのポリオール類；
トリメチルグリシン、ソルビトール、ラフィノース、ピロリドンカルボン酸塩類、乳酸塩類、ヒアルロン酸塩類、セラミド類などの保湿剤； Higher fatty acids such as lauric acid, myristic acid, palmitic acid, stearic acid, isostearic acid, oleic acid, behenic acid, undecylenic acid, lanolin fatty acid, hard lanolin fatty acid, soft lanolin fatty acid;
Higher alcohols such as lauryl alcohol, cetanol, cetostearyl alcohol, stearyl alcohol, oleyl alcohol, behenyl alcohol, lanolin alcohol, hydrogenated lanolin alcohol, hexyldecanol, octyldodecanol;
Other ester oils such as isopropyl myristate and butyl stearate;
Metal soap, dimethylpolysiloxane, polyether-modified silicone, alcohol-modified silicone, methylphenylpolysiloxane, epoxy-modified silicone, fluorine-modified silicone, alkyl-modified silicone, alkoxy-modified silicone, amino-modified silicone, volatile silicone and other silicones Volatile and non-volatile oils;
Polyols such as glycerin, diglycerin, polyglycerin, 1,3-butanediol, propanediol, polyethylene glycol;
Moisturizers such as trimethylglycine, sorbitol, raffinose, pyrrolidone carboxylates, lactates, hyaluronates, ceramides;

ヒドロキシエチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロースヒドロキシプロピルトリメチルアンモニウムクロリドエーテル、メチルセルロース、エチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、メチルヒドロキシプロピルセルロース、可溶性デンプン、カルボキシメチルデンプン、メチルデンプン、
アルギン酸プロピレングリコールエステル、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、ポリビニルメチルエーテル、カルボキシビニルポリマー、ポリアクリル酸塩、グアーガム、ローカストビンガム、クインスシード、カラギーナン、ガラクタン、
アラビアガム、ペクチン、マンナン、デンプン、キサンタンガム、デキストラン、サクシノグルカン、カードラン、ヒアルロン酸、ゼラチン、カゼイン、アルブミン、コラーゲン、メトキシエチレン無水マレイン酸共重合体、両性メタクリル酸エステル共重合体、ポリ塩化ジメチルメチレンピペリジニウム、ポリアクリル酸エステル共重合体、ポリ酢酸ビニル、ニトロセルロース、シリコーンレジン等の水溶性および油溶性高分子；
カチオン化セルロース誘導体、カチオン性澱粉、カチオン化グアーガム誘導体、ジアリル第４級アンモニウム塩／アクリルアミド共重合体、４級化ポリビニルピロリドン誘導体、４級化ビニルピロリドン／ビニルイミダゾールポリマー、ポリグリコール／アミン縮合物、４級化コラーゲンポリペプチド、ポリエチレンイミン、カチオン性シリコーンポリマー、アジピン酸／ジメチルアミノヒドロキシプロピルジエチレントリアミンコポリマー、ポリアミノポリアミド、カチオン性キチン誘導体、４級化ポリマー等のカチオン性高分子； Hydroxyethylcellulose, carboxymethylcellulose, hydroxyethylcellulose hydroxypropyltrimethylammonium chloride ether, methylcellulose, ethylcellulose, hydroxypropylcellulose, methylhydroxypropylcellulose, soluble starch, carboxymethylstarch, methylstarch,
Propylene glycol alginate, polyvinyl alcohol, polyvinyl pyrrolidone, polyvinyl methyl ether, carboxyvinyl polymer, polyacrylate, guar gum, locust bin gum, quince seed, carrageenan, galactan,
Gum arabic, pectin, mannan, starch, xanthan gum, dextran, succinoglucan, curdlan, hyaluronic acid, gelatin, casein, albumin, collagen, methoxyethylene maleic anhydride copolymer, amphoteric methacrylate copolymer, polychlorinated Water-soluble and oil-soluble polymers such as dimethylmethylene piperidinium, polyacrylate copolymer, polyvinyl acetate, nitrocellulose, silicone resin;
Cationized cellulose derivative, cationic starch, cationized guar gum derivative, diallyl quaternary ammonium salt / acrylamide copolymer, quaternized polyvinylpyrrolidone derivative, quaternized vinylpyrrolidone / vinylimidazole polymer, polyglycol / amine condensate, Cationic polymers such as quaternized collagen polypeptide, polyethyleneimine, cationic silicone polymer, adipic acid / dimethylaminohydroxypropyldiethylenetriamine copolymer, polyaminopolyamide, cationic chitin derivative, quaternized polymer;

ポリエチレングリコール脂肪酸エステル、ポリオキシエチレン脂肪酸エステルメチルグリコシド、テトラデセンスルホン酸塩等の増粘、増泡成分；
エチレンジアミン四酢酸およびその塩類、ヒドロキシエチレンジアミン３酢酸およびその塩類、リン酸、アスコルビン酸、コハク酸、グルコン酸、ポリリン酸塩類、メタリン酸塩、ヒノキチール類などの金属イオン封鎖剤；
パラオキシ安息香酸エステル類、安息香酸およびその塩類、フェノキシエタノール、ヒノキチール等の防腐剤；
クエン酸、リンゴ酸、アジピン酸、グルタミン酸、アスパラギン酸等のｐＨ調整剤；
その他トリクロロルカルバニリド、サリチル酸、ジンクピリチオン、イソプロピルメチルフェノールなどのふけ・かゆみ防止剤；
ベンゾフェノン誘導体、パラアミノ安息香酸誘導体、パラメトキシ桂皮酸誘導体、サリチル酸誘導体その他の紫外線吸収剤；
アルブチン、コウジ酸、アスコルビン酸、ヒノキチールおよびその誘導体などの美白剤； Thickening and foam increasing components such as polyethylene glycol fatty acid ester, polyoxyethylene fatty acid ester methyl glycoside, tetradecene sulfonate;
Sequestering agents such as ethylenediaminetetraacetic acid and its salts, hydroxyethylenediaminetriacetic acid and its salts, phosphoric acid, ascorbic acid, succinic acid, gluconic acid, polyphosphates, metaphosphates, hinokitiles;
Preservatives such as paraoxybenzoates, benzoic acid and its salts, phenoxyethanol, hinokitile;
PH adjusters such as citric acid, malic acid, adipic acid, glutamic acid, aspartic acid;
Other anti-dandruff and itching agents such as trichlorocarbanilide, salicylic acid, zinc pyrithione, isopropylmethylphenol;
Benzophenone derivatives, paraaminobenzoic acid derivatives, paramethoxycinnamic acid derivatives, salicylic acid derivatives and other UV absorbers;
Whitening agents such as arbutin, kojic acid, ascorbic acid, hinokitile and its derivatives;

センブリエキス、セファランチン、ビタミンＥおよびその誘導体、ガンマーオリザノールなどの血行促進剤；
トウガラシチンキ、ショオウキョウチンキ、カンタリスチンキ、ニコチン酸ベンジルエステルなどの局所刺激剤；
各種ビタミンやアミノ酸などの栄養剤；
女性ホルモン剤；
毛根賦活剤；
グリチルレチン酸、グリチルリチン酸誘導体、アラントイン、アズレン、アミノカプロン酸、ヒドロコルチゾンなどの抗炎症剤；
酸化亜鉛、硫酸亜鉛、アラントインヒドロキシアルミニウム、塩化アルミニウム、スルホ石炭酸亜鉛、タンニン酸などの収斂剤；
メントール、カンフルなどの清涼剤；
抗ヒスタミン剤；
高分子シリコーン、環状シリコーン等のシリコーン系物質、トコフェロール類、ＢＨＡ、ＢＨＴ、没食子酸、ＮＤＧＡなどの酸化防止剤； Blood circulation promoters such as assembly extract, cephalanthin, vitamin E and its derivatives, gamma oryzanol;
Local stimulants such as pepper tincture, ginger tincture, cantharis tincture, nicotinic acid benzyl ester;
Nutrients such as various vitamins and amino acids;
Female hormone agent;
Hair root activator;
Anti-inflammatory agents such as glycyrrhetinic acid, glycyrrhizic acid derivatives, allantoin, azulene, aminocaproic acid, hydrocortisone;
Astringents such as zinc oxide, zinc sulfate, allantoin hydroxyaluminum, aluminum chloride, zinc sulfocolate, tannic acid;
Refreshing agents such as menthol and camphor;
Antihistamines;
Antioxidants such as silicone-based materials such as polymer silicone and cyclic silicone, tocopherols, BHA, BHT, gallic acid, NDGA;

精製水、その他、カキョクエキス、Ｎ−メチル−Ｌ−セリン、ホエイ、ニコチン酸アミド、ジイソプロピルアミンジクロロ酢酸、メバロン酸、γ−アミノ酪酸（γ−アミノ−β−ヒドロキシ酪酸を含む）、アルテアエキス、アロエエキス、アンズ核エキス、ウコンエキス、ウーロン茶エキス、海水乾燥物、加水分解コムギ末、加水分解シルク、カロットエキス、キューカンバエキス、ゲンチアナエキス、酵母エキス、米胚芽油、コンフリーエキス、サボンソウエキス、ジオウエキス、シコンエキス、シラカバエキス、セイヨウハッカエキス、センブリエキス、ビサボロ−ル、プロポリス、ヘチマエキス、ボダイジュエキス、ホップエキス、マロニエエキス、ムクロジエキス、メリッサエキス、ユーカリエキス、ユキノシタエキス、ローズマリーエキス、ローマカミツレエキス、ローヤルゼリーエキス、海草、米ヌカ、カンゾウ、チンピ、トウキ、モモノハの粉砕物、スフィンゴ脂質、グアイアズレン、ビタミンＣ等を含むことができる。 Purified water, others, oyster extract, N-methyl-L-serine, whey, nicotinamide, diisopropylamine dichloroacetic acid, mevalonic acid, γ-aminobutyric acid (including γ-amino-β-hydroxybutyric acid), altea extract, Aloe extract, apricot kernel extract, turmeric extract, oolong tea extract, dried seawater, hydrolyzed wheat powder, hydrolyzed silk, carrot extract, cucumber extract, gentian extract, yeast extract, rice germ oil, comfrey extract, savonso extract, Giant extract, lion extract, birch extract, Atlantic mint extract, assembly extract, bisabolol, propolis, loofah extract, bodaiju extract, hop extract, marronnier extract, muroji extract, melissa extract, eucalyptus extract, yukinoshita extract, rosemary Can kiss, Roman chamomile extract, royal jelly extract, seaweed, rice bran, licorice, citrus unshiu peel, angelica, pulverized Momonoha, sphingolipids, guaiazulene, may contain vitamin C, and the like.

以下に実施例を示して本発明を具体的に説明するが、本発明は実施例に限定されるものではない。   EXAMPLES The present invention will be specifically described below with reference to examples, but the present invention is not limited to the examples.

実施例１ ＭＥＬ−Ａの製造
種菌培養はPseudozyma antarctica NBRC 10736のコロニーを種培地(20ml/500ml坂口フラスコ)に1 loop植菌して実施した。30℃にて一晩培養した。得られた培養液を種菌とした。種培地組成は4% Glucose、0.3% NaNO₃、0.02% MgSO₄・7H₂O、0.02% KH₂PO₄、0.1% yeast extractであった。培養は上記種菌75mlを生産培地1.5L（５L-jar）に植菌し、30℃、300rpm（攪拌回転）、0.5L/min（Air）の条件で5L-jarを用いて培養した。生産培地組成は、5% オリーブ油、0.02% MgSO₄・7H₂O、0.02% KH₂PO₄、0.1% yeast extractであった。培養液250mlを遠心（6500rpm、30min）し、上清を取り除き、沈殿（菌体）を回収した。沈殿に、50mlの酢酸エチルを加え、十分攪拌後、遠心(8500rpm、30min)し、沈殿と上清に分け、上清をエバポーレーターで濃縮した。シリカゲルを用いて、クロロホルム：アセトン＝１：０、クロロホルム：アセトン＝９：１、クロロホルム：アセトン１：１、クロロホルム：アセトン＝３：７、クロロホルム：アセトン＝０：１で溶出しＭＥＬ−Ａ画分を得た。 Example 1 Production of MEL-A Inoculum culture was carried out by inoculating a seed culture (20 ml / 500 ml Sakaguchi flask) with 1 loop of a Pseudozyma antarctica NBRC 10736 colony. Cultured overnight at 30 ° C. The obtained culture broth was used as an inoculum. The composition of the seed medium was 4% Glucose, 0.3% NaNO ₃ , 0.02% MgSO ₄ .7H ₂ O, 0.02% KH ₂ PO ₄ , and 0.1% yeast extract. For the culture, 75 ml of the above inoculum was inoculated into 1.5 L (5 L-jar) of production medium, and cultured using 5 L-jar under the conditions of 30 ° C., 300 rpm (stirring rotation), 0.5 L / min (Air). The composition of the production medium was 5% olive oil, 0.02% MgSO ₄ .7H ₂ O, 0.02% KH ₂ PO ₄ , and 0.1% yeast extract. 250 ml of the culture solution was centrifuged (6500 rpm, 30 min), the supernatant was removed, and the precipitate (bacteria) was collected. 50 ml of ethyl acetate was added to the precipitate, and after sufficient stirring, the mixture was centrifuged (8500 rpm, 30 min), separated into a precipitate and a supernatant, and the supernatant was concentrated with an evaporator. Elution with chloroform: acetone = 1: 0, chloroform: acetone = 9: 1, chloroform: acetone 1: 1, chloroform: acetone = 3: 7, chloroform: acetone = 0: 1 using silica gel Got the minute.

実施例２ ＭＥＬ−Ｂの製造
0.2mlのPseudozyma tsukubaensisフローズンストックを20mlのYM培地/500ml容坂口フラスコに植菌し、26℃、180rpm、１晩培養させ、種種菌とした。0.2mlの種種菌を再度、20mlのYM種培地/500ml容坂口フラスコに植菌し、26℃、180rpm、１晩培養させ、種菌とした。20mlの種菌を2LのYM培地/５L Jarに植菌し、26℃ 300rpm（１／４VVM、0.5L air /min）で８日間培養した。培養液を7,900rpm 60min 4℃で遠心し、菌体（ＭＥＬ−Ｂを含む）と上清に分離した。菌体画分にそれぞれ80mlの酢酸エチルを加え、菌体が十分懸濁するように上下に攪拌した後、7,900rpm 30min 4℃で遠心した。得られた上清に等量の飽和食塩水を加え攪拌し酢酸エチル層を得た。酢酸エチル層に無水硫酸Ｎａを適量加え、３０分間精置させた後、エバポレートしＭＥＬ−Ｂ粗精製品を得た。得られたＭＥＬ−Ｂ粗精製品をシリカゲルカラムを用いて、ヘキサン：アセトン＝５：１、ヘキサン：アセトン＝１：１で溶出しＭＥＬ−Ｂ画分精製品を得た。 Example 2 Production of MEL-B
0.2 ml of Pseudozyma tsukubaensis frozen stock was inoculated into a 20 ml YM medium / 500 ml Sakaguchi flask and cultured overnight at 26 ° C., 180 rpm, and used as an inoculum. 0.2 ml of the inoculum was again inoculated into a 20 ml YM seed medium / 500 ml Sakaguchi flask and cultured overnight at 26 ° C. and 180 rpm to obtain an inoculum. 20 ml of inoculum was inoculated into 2 L of YM medium / 5 L Jar and cultured at 26 ° C., 300 rpm (1/4 VVM, 0.5 L air / min) for 8 days. The culture solution was centrifuged at 7,900 rpm for 60 minutes at 4 ° C. to separate the cells (including MEL-B) and the supernatant. 80 ml of ethyl acetate was added to each bacterial cell fraction, and the mixture was stirred up and down so that the bacterial cells were sufficiently suspended, and then centrifuged at 4,900 rpm for 30 minutes at 4 ° C. An equal amount of saturated saline was added to the obtained supernatant and stirred to obtain an ethyl acetate layer. An appropriate amount of anhydrous sodium sulfate was added to the ethyl acetate layer, and the mixture was allowed to settle for 30 minutes and then evaporated to obtain a crude MEL-B product. The obtained MEL-B crude purified product was eluted with hexane: acetone = 5: 1 and hexane: acetone = 1: 1 using a silica gel column to obtain a MEL-B fraction purified product.

実施例３ ＭＥＬ−Ｃの製造
0.2mlのPseudozyma hubeiensisフローズンストックを20mlのYM培地/500ml容坂口フラスコに植菌し、26℃、180rpm、１晩培養させ、種種菌とした。0.2mlの種種菌を再度、20mlのYM種培地/500ml容坂口フラスコに植菌し、26℃、180rpm、１晩培養させ、種菌とした。20mlの種菌を2LのYM培地/５L Jarに植菌し、26℃ 300rpm（１／４VVM、0.5L air /min）で８日間培養した。培養液を7,900rpm 60min 4℃で遠心し、菌体（ＭＥＬ−Ｃを含む）と上清に分離した。菌体画分にそれぞれ80mlの酢酸エチルを加え、菌体が十分懸濁するように上下に攪拌した後、7,900rpm 30min 4℃で遠心した。得られた上清に等量の飽和食塩水を加え攪拌し酢酸エチル層を得た。酢酸エチル層に無水硫酸Ｎａを適量加え、３０分間精置させた後、エバポレートしＭＥＬ−Ｃ粗精製品を得た。得られたＭＥＬ−Ｃ粗精製品をシリカゲルカラムを用いて、ヘキサン：酢酸エチル＝１：１、ヘキサン：酢酸エチル＝１：３、酢酸エチルで溶出しＭＥＬ−Ｃ画分精製品を得た。 Example 3 Production of MEL-C
0.2 ml of Pseudozyma hubeiensis frozen stock was inoculated into a 20 ml YM medium / 500 ml Sakaguchi flask and cultured overnight at 26 ° C., 180 rpm, and used as an inoculum. 0.2 ml of the inoculum was again inoculated into a 20 ml YM seed medium / 500 ml Sakaguchi flask and cultured overnight at 26 ° C. and 180 rpm to obtain an inoculum. 20 ml of inoculum was inoculated into 2 L of YM medium / 5 L Jar and cultured at 26 ° C., 300 rpm (1/4 VVM, 0.5 L air / min) for 8 days. The culture solution was centrifuged at 7,900 rpm for 60 min at 4 ° C. to separate the cells (including MEL-C) and the supernatant. 80 ml of ethyl acetate was added to each bacterial cell fraction, and the mixture was stirred up and down so that the bacterial cells were sufficiently suspended, and then centrifuged at 4,900 rpm for 30 minutes at 4 ° C. An equal amount of saturated saline was added to the obtained supernatant and stirred to obtain an ethyl acetate layer. An appropriate amount of anhydrous sodium sulfate was added to the ethyl acetate layer, and the mixture was allowed to settle for 30 minutes, and then evaporated to obtain a crude MEL-C product. The obtained MEL-C crude purified product was eluted with hexane: ethyl acetate = 1: 1, hexane: ethyl acetate = 1: 3, ethyl acetate using a silica gel column to obtain a MEL-C fraction purified product.

実施例４〜１２、比較例１ ＭＥＬの皮膚刺激性緩和効果
健常男子５名の前腕屈曲部皮膚に、5w/v %ラウリル硫酸ナトリウムを調製し、本溶液を刺激性溶媒とした。実施例として、刺激性溶媒に表１に示す配合濃度でＭＥＬ−Ａ、ＭＥＬ−ＢおよびＭＥＬ−Ｃを添加したものをそれぞれ調製した。比較例として、5w/v %ラウリル硫酸Ｎａのみの水溶液で試験を実施した。皮膚刺激性試験は、Ｆｉｎｎ Ｃｈａｍｂｅｒ ｏｎ ｓｃａｎｐｏｒ（Ｓｍａｒｔ ｐｒａｃｔｉｃｅ社製）に各溶液を20μl添加し、皮膚へのパッチテストとして3時間閉塞後に取り除き、1時間後に皮膚刺激性の有無を目視で評価した。判定結果は、下記評価点の平均で示す。 Examples 4-12, Comparative Example 1 MEL skin irritation mitigating effect 5 w / v% sodium lauryl sulfate was prepared on the skin of the forearm flexion of 5 healthy men, and this solution was used as an irritant solvent. Examples were prepared by adding MEL-A, MEL-B, and MEL-C to the stimulating solvent at the blending concentrations shown in Table 1, respectively. As a comparative example, the test was carried out with an aqueous solution containing only 5 w / v% Na lauryl sulfate. In the skin irritation test, 20 μl of each solution was added to Finn Chamber on scanner (manufactured by Smart practice), removed as a patch test to the skin after 3 hours of occlusion, and the presence of skin irritation was visually evaluated after 1 hour. A judgment result is shown by the average of the following evaluation points.

（判定基準と評価点数）
紅斑、浮腫、水泡 （４点）
紅斑、浮腫 （３点）
紅斑 （２点）
軽微な紅斑 （１点）
無紅斑、無浮腫 （０点） (Criteria and score)
Erythema, edema, blisters (4 points)
Erythema, edema (3 points)
Erythema (2 points)
Minor erythema (1 point)
No erythema, no edema (0 points)

本発明により、界面活性剤等の刺激に対する優れた刺激緩和剤を提供するとともに、それを含有してなる低刺激性の組成物をも提供でき、化粧品、医薬部外品等の化粧品組成物、外用薬組成物、洗浄剤組成物等の分野で可能となることからも、産業界に大きく寄与することが期待される。   According to the present invention, it is possible to provide an excellent anti-irritant agent for stimuli such as surfactants, and also to provide a hypoallergenic composition containing the same, and cosmetic compositions such as cosmetics and quasi-drugs, Since it becomes possible in the fields of external medicine composition, cleaning composition, etc., it is expected to greatly contribute to the industrial world.

Claims (7)

皮膚に対して化学的刺激を与える刺激性物質による刺激を緩和する刺激緩和剤であって、少なくとも１つのバイオサーファクタントを含有してなることを特徴とする刺激緩和剤。   An irritation relieving agent for alleviating irritation caused by an irritating substance that chemically irritates the skin, comprising at least one biosurfactant. 皮膚に対して化学的刺激を与える刺激性物質による刺激を緩和する刺激緩和剤であって、請求項１に記載のバイオサーファクタントが糖脂質型バイオサーファクタントであることを特徴とする刺激緩和剤。   An irritation relieving agent for alleviating irritation caused by an irritating substance that chemically irritates the skin, wherein the biosurfactant according to claim 1 is a glycolipid type biosurfactant. 上記糖脂質型バイオサーファクタントが、マンノシルエリスリトールリピッド（ＭＥＬ）、マンノシルマンニトールリピッド（ＭＭＬ）、マンノシルエリスリトールリピッド（ＭＥＬ）のトリアシル体およびマンノシルマンニトールリピッド（ＭＭＬ）のトリアシル体からなる群より選択された少なくとも１種であることを特徴とする請求項２に記載の刺激緩和剤。   The glycolipid type biosurfactant is at least 1 selected from the group consisting of mannosyl erythritol lipid (MEL), mannosyl mannitol lipid (MML), manacyl erythritol lipid (MEL) triacyl, and mannosyl mannitol lipid (MML) triacyl. The irritation reducing agent according to claim 2, which is a seed. 前記刺激性物質が、界面活性剤であることを特徴とする請求項１〜３に記載の刺激緩和剤。   The stimulant mitigating agent according to claim 1, wherein the stimulating substance is a surfactant. 前記刺激性物質が、アニオン性、カチオン性、ノニオン性、又は両性界面活性剤であることを特徴とする請求項４に記載の刺激緩和剤。   The stimulant mitigating agent according to claim 4, wherein the stimulating substance is an anionic, cationic, nonionic or amphoteric surfactant. 請求項１〜５のいずれかに記載の刺激緩和剤を刺激性物質に添加することを特徴とする、刺激性物質の刺激性低下方法。   A method for reducing irritation of an irritating substance, comprising adding the stimulant-releasing agent according to claim 1 to the irritating substance. 請求項１〜５いずれかに記載の刺激緩和剤を含有することを特徴とする低刺激性組成物。   A hypoallergenic composition comprising the irritation reducing agent according to any one of claims 1 to 5.