JP2014114250A

JP2014114250A - 山木瓜抽出物を含有するキサンチンオキシダーゼ阻害組成物

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Publication number: JP2014114250A
Application number: JP2012270212A
Authority: JP
Inventors: Shinpei Watabe; 晋平渡部; Hisayoshi Norimoto; 文哲範本; Hong-Xi Xu; 宏喜徐; Hong Sheng Tan; 紅勝譚; Hong Zhang; 洪張
Original assignee: Kracie Pharma Ltd
Current assignee: Kracie Pharma Ltd
Priority date: 2012-12-11
Filing date: 2012-12-11
Publication date: 2014-06-26

Abstract

【課題】ヒポキサンチンおよびキサンチンを経て尿酸を生ずる酵素であるキサンチンオキシダーゼの活性を阻害して、高尿酸血症のみならず、痛風及び高尿酸血症に付随する腎臓、心臓疾患やメタボリックシンドローム等の治療及び/又は予防に有効な薬剤の提供。
【解決手段】山木瓜の抽出物を含有することを特徴とする、キサンチンオキシダーゼ阻害組成物、ならびに高尿酸血症の治療及び/又は予防剤。有効成分は一般名norathyriolの化合物。
【選択図】なし

Description

本発明は、キサンチンオキシダーゼの活性を阻害し、血中尿酸濃度の増加を抑制し、痛風や高尿酸血症改善に有用な山木瓜抽出物を含有する組成物に関する。

近年わが国における高尿酸血症の頻度は、成人男性において２０〜２４％であると報告されている。また、高尿酸血症が引き起こすと言われている痛風の有病率は、男性において３０歳以降では１％を超えていると推定され、現在も増加傾向であると考えられる。

高尿酸血症とは、痛風の基礎疾患であり、血清尿酸値が７．０ｍｇ/ｄｌを超えるものと定義されている。また高尿酸血症は、痛風だけでなく、肥満、高血圧、高脂血症および糖尿病などに関連した生活習慣病として、またメタボリックシンドロームの一部分症としても重要視されている。

現在、高尿酸血症の治療薬の一つとして、キサンチンオキシダーゼ（ＸＯ）阻害による尿酸産生抑制を作用機序とするアロプリノールが挙げられる。しかし、アロプリノールには肝機能障害を起こす場合があるなどの副作用が知られており、より副作用がないキサンチンオキシダーゼ阻害組成物が要求されている。

そこで、人体に対する安全性の観点から天然物由来のキサンチンオキシダーゼ阻害組成物が開示されるようになってきた（特許文献１〜４、非特許文献１〜２）。しかし、いずれもアロプリノールと比較するとキサンチンオキシダーゼ阻害効果は十分満足できるものではなかった。

特開２０００−２９０１８８号公報特開２００３−２８６１６５号公報特開２００４−１２３７６１号公報特開２０１１−３７８２３号公報

ＮａｋａｏＫ，ＭｕｒａｔａＫ，ＩｔｏｈＫ，ｅｔａｌ．：Ａｎｔｉ−ｈｙｐｅｒｕｒｉｃｅｍｉａｅｆｆｅｃｔｓｏｆｅｘｔｒａｃｔｓｏｆｉｍｍａｔｕｒｅＣｉｔｒｕｓｕｎｓｈｉｕｆｒｕｉｔ．Ｊ．Ｔｒａｄ．Ｍｅｄ．，２８：１０−１５，２０１１．Ｌ．Ｄ．Ｋｏｎｇ，ＹＣａｉ，Ｗ．Ｗ．Ｈｕａｎｇ，ＣｈｒｉｓｔｏｐｈｅｒＨ．Ｋ．Ｃｈｅｎｇ，Ｒ．Ｘ．Ｔａｎ：ＩｎｈｉｂｉｔｉｏｎｏｆｘａｎｔｈｉｎｅｏｘｉｄａｓｅｂｙｓｏｍｅＣｈｉｎｅｓｅｍｅｄｉｃｉｎａｌｐｌａｎｔｓｕｓｅｄｔｏｔｒｅａｔｇｏｕｔ．Ｊ．Ｅｔｈｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，７３：１９９−２０７，２０００．ＨａｔｔｏｒｉＭ．，ＳｈｕＹ．，ＴｏｍｉｍｏｒｉＴ．，ＫｏｂａｓｈｉＫ．，ＮａｍｂａＴ．：ＡｂａｃｔｅｒｉａｌｃｌｅａｖａｇｅｏｆｔｈｅＣ−ｇｌｕｃｏｓｙｌｂｏｎｄｏｆｍａｎｇｉｆｅｒｉｎａｎｄｂｅｒｇｅｎｉｎ．Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２８：１２８９−１２９０，１９８９．

そこで本発明は、健康食品としても使用できる、安全性の高い天然物由来の成分を有効成分とし、しかも極めて優れたキサンチンオキシダーゼ活性阻害作用を有するキサンチンオキシダーゼ阻害組成物及び高尿酸血症治療剤／予防剤を提供することを目的とする。

本発明者らは、前記の課題を解決するために、Garcinia属の植物に対象を絞り研究を行った。その結果、山木瓜（Garcinia esculenta）の抽出物に顕著なキサンチンオキシダーゼ阻害活性を見出した。

山木瓜は、中国の雲南省西部、西北部に分布する特有の植物で、発見から３０年余りしか経っておらず、この植物に関する薬効や成分に関しては未知な部分が多く、キサンチンオキシダーゼ阻害作用は全く知られていなかったものである。

そして、更なる研究の結果、その有効成分として、キサンチンオキシダーゼ阻害活性の極めて強い化合物（norathyriol）の特定に至り、本発明を完成した。

すなわち、本発明は、以下に関する。
（１）山木瓜抽出物を含有する組成物。
（２）一般式（化１）：

で表される化合物（一般名：norathyriol）を含有する山木瓜抽出物。
（３）キサンチンオキシダーゼ阻害作用を有する上記（１）又は（２）に記載の山木瓜抽出物を含有する組成物。
（４）高尿酸血症治療に用いるための上記（１）〜（３）いずれかに記載の山木瓜抽出物を含有する組成物。
（５）上記（１）又は（２）に記載の組成物を含有するキサンチンオキシダーゼ阻害組成物。
（６）上記（５）に記載の組成物を含有する高尿酸血症治療剤及び/又は予防剤。

本発明の山木瓜の抽出物は、植物由来であることから安全性が高く、顕著なキサンチンオキシダーゼ阻害活性を有するため、痛風の予防のみならず、高尿酸血症に関わる腎疾患や心臓疾患、メタボリックシンドローム等の治療及び/又は予防に対して優れた効果が期待される。また、この有効成分を含む各種剤、飲食品及び医薬品を経済的に提供することができる。

以下、本発明について詳細に説明する。開示する条件は一例であり、これに限定されるものではない。

本発明において抽出に供する植物は、Garcinia属の植物の中でも山木瓜（Garcinia esculenta）が好適である。山木瓜は中国の雲南省西部、西北部に分布する特有の植物であるが、産地に限定されない。

本発明において抽出に供する植物の使用部位は、枝、花、花穂、果皮、果実、茎、葉、枝葉、幹、樹皮、根茎、根皮、根、種子又は全草等を用いることが出来る。

本発明における植物の抽出方法は、公知の方法でよく、例えば、水、メタノール、エタノール等のアルコール類又はこれらの混合溶媒のような抽出溶媒を用いて、常温抽出又は加熱抽出することにより製造できる。また、必要により、減圧又は加圧下で抽出してもよい。得られた抽出物は、そのまま使用することも可能であるが、通常、濃縮又は凍結乾燥で乾固したものを使用する。

なお、抽出物としては、これら各種の植物から溶媒を用いて直接抽出することで得られるものの他、圧搾処理を施した後に得られる圧搾液及び／又は残渣に溶媒を加えて抽出することで得られるものも、本発明における抽出物の定義の範囲に含まれる。

これらの抽出物は、公知の方法により液状、粉末状、固形状など、さまざまな態様で使用することが可能で、健康食品への適用も容易である。また、公知の手法などにより、単離・精製した化合物を用いることも出来る。単離・精製された化合物に適宜必要な公知の添加物などを加えることにより、医薬品や飲食品として利用することができる。

また、上記抽出処理液を各種クロマトグラフィーに供して、norathyriolを分離精製してもよい。なお、不適当な不純物を含有しない限り、norathyriolを含有する抽出物をそのまま使用してもかまわない。

（実施例１）〔山木瓜の抽出〕
山木瓜の枝の乾燥物４０００ｇに２０Ｌの８０％エタノールを加え、１００℃にて１時間加温還流で５回抽出し、濾過した抽出液を定法により凍結乾燥した。その乾燥物に５Ｌの酢酸エチルを加え５回抽出し、濾過した抽出液を定法により凍結乾燥した。その結果、５０ｇの乾燥物を得た。

（比較例１〜７）
比較例は、アロプリノール及び山木瓜以外のGarcinia植物６種の抽出物とした。なお、当該６種の植物についても公知の方法で抽出物を得た。
比較例１アロプロノール
比較例２怒江藤黄（Garcinia nujiangensis）
比較例３木竹子（Garcinia oblongifolia）
比較例４山竹子（Garcinia multiflora）
比較例５雲南山竹子（Garcinia cowa）
比較例６大叶藤黄（Garcinia xanthochymus）
比較例７雲南藤黄（Garcinia yunnanesis）

（試験例１）
上記実施例１及び比較例１〜６で得た抽出物のキサンチンオキシダーゼ阻害活性を測定した。

（キサンチンオキシダーゼ阻害活性の測定）
１．５ｍＬチューブにキサンチン（和光製薬工業）溶液を最終濃度０．１ｍＭになるように９００μＬ分注し、そこへＤＭＳＯに溶解した抽出物溶液を加え、３７℃で１５分間プレインキュベートした。その後、バターミルク由来キサンチンオキシダーゼ（オリエンタル酵母）溶液を１００μＬ添加し、３７℃で３分間インキュベートした。

その後速やかに、１Ｎ塩酸を１０％添加して反応を停止させ、９６ｗｅｌｌプレートへ溶液を移し２９５ｎｍにおける吸光度を測定した。そして、キサンチンオキシダーゼ阻害率を式１により算出した。ここで、バターミルク由来キサンチンオキシダーゼ（オリエンタル酵母）溶液の代わりに緩衝液のみを混合させたものをブランクとし、抽出物溶液を緩衝液としたものをコントロールとした。

キサンチンオキシダーゼ阻害率（％）＝（１−Ａ／Ｂ）×１００

Ａ＝（抽出物溶液（サンプル）の吸光度−ブランクの吸光度）
Ｂ＝（被検試料無添加の酵素反応後の吸光度−ブランクの吸光度）

各抽出物溶液について、濃度を段階的に変更して、各濃度における阻害率を測定し、その結果から内挿法により、キサンチンオキシダーゼ活性を５０％阻害する試料濃度ＩＣ_５０値を求めた（表１参照）。この数値が低いほど、抽出物溶液が低濃度でも阻害活性を示すことになる。

（試験結果）
表１に示すように７種類のGarcinia属植物の抽出物及びアロプリノールについてキサンチンオキシダーゼ阻害活性を測定した結果、山木瓜、怒江藤黄及び木竹子の植物抽出物に濃度依存的、かつ最高濃度１００μｇ／ｍＬにおいて５０％以上の阻害活性が認められた。この中においても特に山木瓜の抽出物に最も顕著な阻害活性が認められた（ＩＣ_５０値７．４ μｇ／ｍＬ）。
これは、単一化合物であるアロプリノールと比較すると弱い活性ではあるが、植物抽出物としては公知となっている他の植物抽出物よりも強い活性を示している。

（実施例２）山木瓜抽出物の精製
実施例１で得た山木瓜抽出物５０ｇを、溶出溶媒としてエタノールを用いてＭＣＩゲルによる分画を行い、６０％エタノール画分の乾燥物を１８ｇ得た。この乾燥物をさらに各種クロマトグラフィーにより分画、精製し、ＮＭＲ（、ＭＳスペクトル解析によりnorathyriolを同定した（非特許文献３）。

（試験例２）
表２に示すようにnorathyriol及びアロプリノールについてキサンチンオキシダーゼ阻害活性を測定した結果、norathyriolに濃度依存的、かつアロプリノールよりも強いキサンチンオキシダーゼ阻害活性が認められた（ＩＣ_５０値１．２４ μＭ）。

実施例１で使用した山木瓜の抽出物および実施例２で使用したnorathyriolは、以下のようにして、飲食品、化粧品又は医薬品に添加して、これらにキサンチンオキシダーゼ阻害作用、或いは高尿酸血症の予防又は治療作用を付与することができる。

本発明の剤を含有する飲食品としては特に限定されず、例えば、飲食物材料に混合して、チューインガム、チョコレート、キャンディー、ゼリー、ビスケット、クラッカーなどの菓子類；アイスクリーム、氷菓などの冷菓類；茶、清涼飲料、栄養ドリンク、美容ドリンクなどの飲料；うどん、中華麺、スパゲティー、即席麺などの麺類；蒲鉾、竹輪、はんぺんなどの練り製品；ドレッシング、マヨネーズ、ソースなどの調味料；マーガリン、バター、サラダ油などの油脂類；パン、ハム、スープ、レトルト食品、冷凍食品など、すべての一般的な飲食物に使用することができる。さらに、製剤化して、顆粒剤または錠剤タイプの医薬品や、特定保健用食品、栄養機能食品などの保健機能食品または健康食品、サプリメントとすることもできる。

さらに、本発明の剤を、化粧品又は医薬品として用いる場合は、その剤形は特に限定されない。例えば、スプレードライや凍結乾燥によって乾燥させた粉末とすることもできる。また、ハードカプセルやソフトカプセルといったカプセル剤、チュアブルタブレットに例示される錠剤、顆粒剤、液剤、散剤、注射剤、座薬、貼付剤などが挙げられる。製剤化においては、薬剤学的に許容される他の製剤素材、例えば、賦形剤、崩壊剤、滑沢剤、結合剤、酸化防止剤、着色剤、凝集防止剤、吸収促進剤、溶解補助剤、安定化剤などを適宜添加して調製することができる。

Claims

山木瓜抽出物を含有する組成物。
一般式（１）：

で表される化合物（一般名：norathyriol）を含有する山木瓜抽出物。
キサンチンオキシダーゼ阻害作用を有する請求項１又は２に記載の山木瓜抽出物を含有する組成物。
高尿酸血症治療に用いるための請求項１〜３いずれか１項に記載の山木瓜抽出物を含有する組成物。
請求項１又は２に記載の組成物を含有するキサンチンオキシダーゼ阻害組成物。
請求項５に記載の組成物を含有する高尿酸血症治療剤及び/又は予防剤。