JP2014024757A - New compound - Google Patents

Abstract

PROBLEM TO BE SOLVED: To provide a new compound having excellent antioxidant action, final saccharified product-production suppressing action and collagenase-production suppressing action, and a composition with the compound being an active ingredient.SOLUTION: Four kinds of new compounds comprise a new compound represented by the formula (1) and a composition contains the compound.

Description

本発明は、抗酸化作用、最終糖化産物生成抑制作用およびコラゲナーゼ産生抑制作用を有する新規化合物に関する。   The present invention relates to a novel compound having an antioxidant action, a final glycation product production inhibitory action and a collagenase production inhibitory action.

アムラは、学名をフィランサス エンブリカ（Ｐｈｙｌｌａｎｔｈｕｓ ｅｍｂｌｉｃａ）、別名をエンブリカ オフィシナリス（Ｅｍｂｌｉｃａ ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ）、英名をエンブリック ミロバラン（Ｅｍｂｌｉｃ ｍｙｒｏｂａｌａｎ）、インディアン グースベリー（Ｉｎｄｉａｎ ｇｏｏｓｅｂｅｒｒｙ）、そして和名をコミカソウ、ユカンまたはアンマロク等と呼ばれている、トウダイグサ科エンブリカ属の落葉中低木亜高木である。   Amla has the scientific name Phyllanthus emblica, the other name is Emblica officinalis, the English name is Embric myrobalan, the Indian gooseberry and It is a deciduous middle shrub sub-takagi of the Euphorbiaceae Emblica genus.

このアムラは、インドなどで薬草として用いられており、その果実が滋養強壮に用いられており、また便秘、排尿障害、頭痛、不安、嘔吐、灼熱感などにも良いとされ、さらに記憶力や知性を向上させるとも言われている。このアムラの果実についてはまた、血清コレステロール低下作用、抗ウイルス作用、染色体異常防護作用、肝庇護作用、血糖低下作用、免疫調節作用、抗酸化作用（活性酸素消去作用）、抗菌作用、抗炎症作用、ヒアルロニダーゼ阻害作用、コラゲナーゼ阻害作用、チロシナーゼ阻害作用、メラニン生成抑制作用、エラスターゼ阻害作用、メイラード反応抑制作用などを有することも知られている。   This amla is used as a medicinal herb in India and its fruits are used for nourishment, and it is also said to be good for constipation, dysuria, headache, anxiety, vomiting, burning, etc. It is said to improve. This Amla fruit also has serum cholesterol lowering action, antiviral action, chromosomal abnormality protection action, liver protection action, hypoglycemic action, immunoregulatory action, antioxidant action (reactive oxygen scavenging action), antibacterial action, anti-inflammatory action. It is also known to have hyaluronidase inhibitory action, collagenase inhibitory action, tyrosinase inhibitory action, melanin production inhibitory action, elastase inhibitory action, Maillard reaction inhibitory action, and the like.

そこで、アムラの抽出物を用いることによって、上記のような種々の作用を有する組成物、飲食品、医薬品などが数多く提案されている（特許文献１〜１３および非特許文献１）。   Thus, many compositions, foods and drinks, pharmaceuticals, and the like having various actions as described above have been proposed by using an extract of Amla (Patent Documents 1 to 13 and Non-Patent Document 1).

特許文献１には、アムラの抽出物を配合することを特徴とするエラスターゼ活性阻害剤およびメイラード反応抑制剤が記載されている。この文献には、アムラの抽出物が、エラスチンを分解するエラスターゼ酵素を阻害する効果、および真皮マトリックスを構成するたんぱく質と糖の化学結合による異常な架橋反応（メイラード反応）を抑制する効果を有することが記載されている。   Patent Document 1 describes an elastase activity inhibitor and a Maillard reaction inhibitor characterized by containing an extract of Amla. In this document, the extract of Amla has the effect of inhibiting the elastase enzyme that degrades elastin, and the effect of suppressing the abnormal cross-linking reaction (Maillard reaction) due to the chemical bond between the protein and sugar constituting the dermal matrix. Is described.

特許文献２および３には、アンマロクの抽出物を含有することを特徴とする皮膚外用剤が記載されている。特許文献２には、アンマロク（アムラ）の抽出物が、活性酸素消去作用、ヒアルロニダーゼ阻害、コラゲナーゼ阻害およびチロシナーゼ阻害作用を有することが記載されている。また特許文献３には、アンマロク（アムラ）由来成分が高いメラニン生成抑制作用を有することが記載されている。   Patent Documents 2 and 3 describe an external preparation for skin characterized by containing an extract of ammarok. Patent Document 2 describes that an extract of Ammarok (Amra) has an active oxygen scavenging action, hyaluronidase inhibition, collagenase inhibition, and tyrosinase inhibition action. Patent Document 3 describes that the component derived from Ammarok (Amra) has a high melanin production inhibitory action.

特許文献４〜１０には、アムラーの果実、果汁又はそれらの抽出物を含有することを特徴とする、それぞれ最終糖化産物生成阻害組成物、トロンビン惹起血小板凝集抑制組成物、血流改善用組成物、組織因子阻害組成物、むくみ予防用組成物、冷え性改善用組成物、肩こり改善用組成物が記載されている。また、特許文献１１には、アムラーの酵素処理物を含有することを特徴とするアディポネクチン産生増強組成物が記載されている。   Patent Documents 4 to 10 each contain Amler fruit, fruit juice, or an extract thereof, and are each a final glycation product production inhibiting composition, a thrombin-induced platelet aggregation inhibiting composition, and a blood flow improving composition. , Tissue factor inhibitory compositions, swelling prevention compositions, coldness improving compositions, and shoulder stiffness improving compositions are described. Patent Document 11 describes an adiponectin production enhancing composition characterized by containing an Amler enzyme-treated product.

非特許文献１には、アムラ果実抽出物が、抗酸化作用、最終糖化生成物産生抑制効果、血液流動性改善効果、冷え性改善効果（体温回復効果）を有することが記載されている。また、これまでに解明されてきたアムラの機能性には、免疫機能促進、コレステロール調節、動脈硬化抑制、脳・心筋梗塞抑制、頭皮改善、脱毛抑制、老化防止などが報告されていることも記載されている（非特許文献１第２４頁第６〜９行）。   Non-Patent Document 1 describes that Amla fruit extract has an antioxidant effect, a final glycation product production inhibitory effect, a blood fluidity improving effect, and a cooling property improving effect (body temperature recovery effect). In addition, Amla's functionality that has been elucidated so far has been reported to include immune function promotion, cholesterol regulation, arteriosclerosis inhibition, brain / myocardial infarction inhibition, scalp improvement, hair loss inhibition, aging prevention, etc. (Non-Patent Document 1, page 24, lines 6-9).

特許文献１１〜１２には、アムラー抽出物から分離精製されたエラエオカルプシン、ケブラグ酸、ゲラニインおよびコリラギンから成る群から選択される少なくとも１つを含有する、それぞれ血液凝固抑制組成物および血液循環改善用組成物が記載されている。   Patent Documents 11 to 12 each contain at least one selected from the group consisting of elaeocalpsin, keblagic acid, geraniin, and corilagin separated and purified from Amler extract, and a blood coagulation inhibiting composition and blood circulation, respectively. An improving composition is described.

特開２００３‐８１７４９号公報JP 2003-81749 A 特開２００３‐６３９２５号公報Japanese Patent Laid-Open No. 2003-63925 特開２００６‐２８０９０号公報JP 2006-28090 A 特開２００６‐６２９８９号公報JP 2006-62989 A 特開２００６‐３３５７０５号公報JP 2006-335705 A 特開２００６‐３３５７０８号公報JP 2006-335708 A 特開２００６‐３３５７０９号公報JP 2006-335709 A 特開２００６‐３３５７１１号公報JP 2006-335711 A 特開２００６‐３３５７１３号公報JP 2006-335713 A 特開２００６‐３３５７２１号公報JP 2006-335721 A 特開２００６‐３３５７０２号公報JP 2006-335702 A 特開２００６‐３３５７２８号公報JP 2006-335728 A 特開２００６‐３３５７３６号公報JP 2006-335736 A

長戸有希子他「機能性果実粉末「サンアムラ」の開発」、ジャパンフードサイエンス、５１（１）、２０１２Yukiko Nagato et al. “Development of functional fruit powder“ San Amla ””, Japan Food Science, 51 (1), 2012

本発明は、抗酸化作用、最終糖化産物生成抑制作用およびコラゲナーゼ産生抑制作用に優れた効果を奏することが期待できる新規化合物を提供することを課題とする。   An object of the present invention is to provide a novel compound that can be expected to exhibit excellent effects in an antioxidant action, a final glycation product production inhibitory action, and a collagenase production inhibitory action.

本発明者らは、上記課題を解決すべく鋭意研究を重ねた結果、アムラの抽出物が優れた抗酸化作用、最終糖化産物生成抑制作用およびコラゲナーゼ産生抑制作用を有することを見出し、更にアムラの抽出物について、上記作用を指標として分画、スクリーニングを続けた結果、アムラの抽出物に比較しても非常に優れた抗酸化作用、最終糖化産物生成抑制作用およびコラゲナーゼ産生抑制作用を有する新規化合物を見出し、本発明を完成するに至った。   As a result of intensive studies to solve the above-mentioned problems, the present inventors have found that the extract of Amla has an excellent antioxidant action, final glycation product production inhibitory action and collagenase production inhibitory action. As a result of continued fractionation and screening of the above extract using the above-mentioned action as an index, a novel compound having an extremely superior antioxidant action, final glycation product production inhibitory action and collagenase production inhibitory action even when compared to Amla extract As a result, the present invention has been completed.

即ち、本発明は、以下の式（１）：

で表されることを特徴とする新規化合物に関する。 That is, the present invention provides the following formula (1):

It is related with the novel compound characterized by these.

また、本発明は、以下の式（２）：

で表されることを特徴とする新規化合物に関する。 The present invention also provides the following formula (2):

It is related with the novel compound characterized by these.

更に、本発明は、以下の式（３）：

で表されることを特徴とする新規化合物に関する。 Furthermore, the present invention provides the following formula (3):

It is related with the novel compound characterized by these.

加えて、本発明は、以下の式（４）：

で表されることを特徴とする新規化合物に関する。 In addition, the present invention provides the following formula (4):

It is related with the novel compound characterized by these.

本発明の他の態様として、本発明は、以下の式（１）：

で表される新規化合物を含有することを特徴とする組成物に関する。 As another aspect of the present invention, the present invention provides the following formula (1):

It contains regarding the composition characterized by containing the novel compound represented by these.

本発明は、以下の式（２）：

で表される新規化合物を含有することを特徴とする組成物に関する。 The present invention provides the following formula (2):

It contains regarding the composition characterized by containing the novel compound represented by these.

本発明は、以下の式（３）：

で表される新規化合物を含有することを特徴とする組成物に関する。 The present invention provides the following formula (3):

It contains regarding the composition characterized by containing the novel compound represented by these.

本発明は、以下の式（４）：

で表される新規化合物を含有することを特徴とする組成物に関する。 The present invention provides the following formula (4):

It contains regarding the composition characterized by containing the novel compound represented by these.

本発明によれば、優れた抗酸化作用、最終糖化産物生成抑制作用およびコラゲナーゼ産生抑制作用を有する新規化合物、並びに上記新規化合物を有効成分とする組成物を提供することができる。   According to the present invention, it is possible to provide a novel compound having an excellent antioxidant effect, final glycation product production inhibitory activity and collagenase production inhibitory activity, and a composition comprising the novel compound as an active ingredient.

本発明の新規化合物は、アムラ生果から種子を除去したもの、即ち、アムラの果肉および果皮を抽出原料として、溶媒抽出して得られた抽出物を精製、単離することにより、製造することができる物質である。   The novel compound of the present invention is produced by purifying and isolating an extract obtained by removing a seed from a fresh Amla fruit, that is, using an Amla pulp and peel as a raw material for extraction. It is a substance that can

アムラの抽出物としては、例えば、アムラの果実から種子を除いた果肉および／または果皮を抽出原料として得られる抽出物、この抽出物の希釈液若しくは濃縮液、この抽出物の粗精製物若しくは精製物、そしてこの抽出物を乾燥して得られる乾燥物などといった形態のいずれもが含まれる。   As an extract of Amla, for example, an extract obtained by using pulp and / or peel obtained by removing seeds from Amla fruit, a diluted or concentrated solution of the extract, a crudely purified product or a purified product of the extract And a dried product obtained by drying this extract.

これらの抽出に用いるアムラの果実は、まず種子を取り除き、果肉および果皮の状態にする。用いられるアムラの果実は、生であっても乾燥品であってもよい。このアムラの果肉および果皮は、何れかを単独で用いてもよく、また両方を併せて用いてもよい。こうして得られたアムラの果肉および果皮は、抽出する前に破砕処理または裁断処理などを行うことによって抽出効率をより高めることができるため、このような処理を行うのが好ましい。   The Amla fruits used for these extractions are first stripped of seeds into flesh and skin. The Amla fruit used may be fresh or dried. Any of the Amla flesh and pericarp may be used alone, or both may be used in combination. The Amla pulp and peel obtained in this way are preferably subjected to such a treatment because the extraction efficiency can be further improved by performing a crushing treatment or a cutting treatment before extraction.

抽出方法は特に限定されず、例えば溶媒抽出方法または超臨界抽出方法などが挙げられる。溶媒抽出方法については、特に限定されるものではなく、例えば、アムラの果肉そして果皮の何れかまたは両方を、各種溶媒を用いて抽出することができる。抽出の際、抽出に用いる溶媒中にこれらのアムラの部分を浸漬し、その後に抽出処理を行ってもよい。この浸漬は、室温で行ってもよく、また必要に応じて加熱あるいは冷却を行ってもよい。またこの浸漬中に撹拌を行ってもよい。   The extraction method is not particularly limited, and examples thereof include a solvent extraction method and a supercritical extraction method. The solvent extraction method is not particularly limited, and for example, either or both of Amla flesh and pericarp can be extracted using various solvents. At the time of extraction, these Amla portions may be immersed in a solvent used for extraction, and then an extraction treatment may be performed. This immersion may be performed at room temperature, and may be heated or cooled as necessary. Moreover, you may stir during this immersion.

抽出に用いる溶媒としては、例えば、水（上水、精製水、イオン交換水など）、低級アルコール類（メタノール、エタノール、１−プロパノール、２−プロパノール、１−ブタノール、２−ブタノール等）、液状多価アルコール類（１，３−ブチレングリコール、プロピレングリコール、グリセリン等）、ケトン類（アセトン、メチルエチルケトン等）、アセトニトリル、エステル類（酢酸エチル、酢酸ブチル等）、炭化水素類（ヘキサン、ヘプタン、流動パラフィン等）、エーテル類（エチルエーテル、テトラヒドロフラン、プロピルエーテル等）などが挙げられる。好ましくは、水、低級アルコール等の極性溶媒であり、特に好ましくは、水、エタノールである。これらの溶媒は単独で用いてもよく、また２種以上を混合して用いてもよく、また２種以上を併用してもよい。   Examples of the solvent used for extraction include water (clean water, purified water, ion exchange water, etc.), lower alcohols (methanol, ethanol, 1-propanol, 2-propanol, 1-butanol, 2-butanol, etc.), liquid Polyhydric alcohols (1,3-butylene glycol, propylene glycol, glycerin, etc.), ketones (acetone, methyl ethyl ketone, etc.), acetonitrile, esters (ethyl acetate, butyl acetate, etc.), hydrocarbons (hexane, heptane, fluidized) Paraffin, etc.), ethers (ethyl ether, tetrahydrofuran, propyl ether, etc.). Preferred are polar solvents such as water and lower alcohols, and particularly preferred are water and ethanol. These solvents may be used alone, or two or more kinds may be mixed and used, or two or more kinds may be used in combination.

抽出溶媒として水を用いる場合は、上記浸漬中に酵素を加えてもよい。酵素を加えることによって、果肉および／または果皮の細胞組織を崩壊させることができ、そしてこれにより抽出効率をより高めることができる。加えることができる酵素として、細胞組織崩壊酵素を用いるのが好ましい。このような酵素として、例えば、ペクチナーゼ、セルラーゼ、ヘミセルラーゼ、α−アミラーゼ、フィターゼなどが挙げられる。これらの酵素は１種類のみを用いてもよく、また２種以上を混合して用いてもよい。   When water is used as the extraction solvent, an enzyme may be added during the immersion. By adding enzymes, the cell tissue of the pulp and / or peel can be disrupted, and this can further increase the extraction efficiency. As an enzyme that can be added, a cell tissue disrupting enzyme is preferably used. Examples of such an enzyme include pectinase, cellulase, hemicellulase, α-amylase, and phytase. These enzymes may be used alone or in combination of two or more.

本発明に好ましく用いられるアムラの抽出方法の一例として、抽出原料となるアムラの果肉および果皮を、上記抽出溶媒中に、０〜９５℃で３分〜２４時間浸漬および撹拌し、その後、ろ過または遠心分離する方法が挙げられる。ろ過または遠心分離により得られた沈殿物を用いて、再度抽出操作を行ってもよい。   As an example of a method for extracting Amla preferably used in the present invention, Amla pulp and peel as an extraction raw material are immersed and stirred in the extraction solvent at 0 to 95 ° C. for 3 minutes to 24 hours, and then filtered or filtered. The method of centrifuging is mentioned. Extraction operation may be performed again using a precipitate obtained by filtration or centrifugation.

上記アムラ抽出物の精製、単離には、イオン交換クロマトクロマトグラフィー、ゲル濾過クロマトグラフィー、分配クロマトグラフィーなどを用いることができる。溶出溶媒として、水、メタノール、エタノール、アセトン、アセトニトリル、およびそれらの混合物が挙げられる。上記方法によって、上記アムラ抽出物を分画して生成する画分を選択・合一した画分を、更に適宜の方法により分画し、選択・合一する操作を繰り返せば、所望のレベルにまで精製された上記化合物を得ることができる。   For the purification and isolation of the Amla extract, ion exchange chromatography, gel filtration chromatography, partition chromatography and the like can be used. Elution solvents include water, methanol, ethanol, acetone, acetonitrile, and mixtures thereof. The fraction obtained by fractionating the Amla extract by the above method is selected and coalesced, and the fraction is further fractionated by an appropriate method. The above-mentioned compound purified up to can be obtained.

こうして得られる本発明の新規化合物は、以下の式（１）：

で表される構造を有し、以下の式（２）：

で表される構造を有し、以下の式（３）：

で表される構造を有し、以下の式（４）：

で表される構造を有する。 The novel compound of the present invention thus obtained has the following formula (1):

Having the structure represented by the following formula (2):

The following formula (3):

And the following formula (4):

It has the structure represented by these.

本発明の上記４種の新規化合物は、無色無晶形粉末であり、そのまま利用することができ、その形状および性状は特に制限されず、例えば固形状、半固形状、ゲル状、液体状、粉末状、そして可溶系、乳化系、粉末分散系、液体分散系などが挙げられ、さらにアンプル剤、錠剤、カプセル剤、液剤、粉末剤、顆粒剤などの形状で用いることもできる。   The above four kinds of novel compounds of the present invention are colorless amorphous powders that can be used as they are, and their shapes and properties are not particularly limited. For example, solids, semisolids, gels, liquids, powders And soluble systems, emulsion systems, powder dispersion systems, liquid dispersion systems and the like, and can also be used in the form of ampoules, tablets, capsules, liquids, powders, granules and the like.

本発明はさらに、上記本発明の新規化合物を有効成分として含有する医薬品、医薬部外品、化粧品、食品などの経口組成物および外用剤も提供する。これらの経口組成物および外用剤の形態は特に制限されるものではなく、例えば各種の顆粒剤、錠剤、トローチ剤、ドロップ剤、カプセル剤、和菓子、洋菓子、氷菓、清涼飲料水、乳製品、大豆加工品、ペースト類、魚介類製品、燻製品、レトルト食品、調味料、油脂加工品、冷凍食品など一般的な飲食品、および化粧水、クリーム、乳液、制汗剤、シャンプー、ファンデーション、リップクリームなどの外用剤が挙げられる。   The present invention further provides oral compositions such as pharmaceuticals, quasi-drugs, cosmetics, and foods containing the novel compound of the present invention as an active ingredient and external preparations. The forms of these oral compositions and external preparations are not particularly limited. For example, various granules, tablets, troches, drops, capsules, Japanese confectionery, Western confectionery, ice confectionery, soft drinks, dairy products, soybeans Processed products, pastes, seafood products, salmon products, retort foods, seasonings, processed oils and fats, frozen foods, and other general food and drink products, as well as lotions, creams, emulsions, antiperspirants, shampoos, foundations, lip balms And other external preparations.

これらの経口組成物および外用剤への、本発明の新規化合物の配合量は、特に制限されるものではなく、配合する経口組成物および外用剤（製品）の種類、品質、そして期待する効果の程度に応じて、種々の配合量をとることができる。好ましい配合量としては、例えば飲食品の乾燥固形分に換算して０．１〜９０．０質量％、更に好ましくは、１．０〜１０．０質量％が挙げられる。   The compounding amount of the novel compound of the present invention in these oral compositions and external preparations is not particularly limited, and the type, quality, and expected effect of the oral composition and external preparation (product) to be blended are not particularly limited. Various blending amounts can be taken depending on the degree. As preferable compounding quantity, it is 0.1-90.0 mass% in conversion of the dry solid content of food-drinks, for example, More preferably, 1.0-10.0 mass% is mentioned.

本発明の組成物は、必須成分の本発明の新規化合物に加え、必要に応じて、医薬品、医薬部外品、化粧品、飲食品等の製剤に使用する際に一般的に使用される成分および／または添加剤を、本発明の効果を損なわない範囲で併用して製造することができる。   The composition of the present invention comprises, in addition to the essential components of the novel compound of the present invention, components that are generally used when used in preparations of pharmaceuticals, quasi drugs, cosmetics, foods and drinks, and the like. // Additives can be used in combination as long as the effects of the present invention are not impaired.

以下、実施例を挙げて本発明を更に詳細に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。   EXAMPLES Hereinafter, although an Example is given and this invention is demonstrated further in detail, this invention is not limited to these.

（実施例１）
（１）化合物の精製・単離
アムラ生果から種子を除去して果肉および果皮の状態とし、これを破砕して抽出原料とした。抽出原料２．５ｋｇに水を１０Ｌ加え、８０℃にて２時間撹拌後、ガラスフィルター（Ｇ１）を用いて吸引ろ過し、液状の抽出物を得た。更に、残渣に水を１０Ｌ加え、同様に操作して液状の抽出物を得て、先の抽出物と混合して５０℃で減圧下にて濃縮し、更に、凍結乾燥機で乾燥してアムラ果肉および果皮抽出物１５０ｇを得た。 Example 1
(1) Purification and isolation of compounds The seeds were removed from Amura fruit to obtain pulp and peel, which were crushed and used as raw materials for extraction. 10 L of water was added to 2.5 kg of the extraction raw material, stirred at 80 ° C. for 2 hours, and then suction filtered using a glass filter (G1) to obtain a liquid extract. Further, 10 L of water was added to the residue, and a liquid extract was obtained by the same operation, mixed with the previous extract, concentrated under reduced pressure at 50 ° C., further dried with a freeze dryer and Amla. 150 g of pulp and peel extract were obtained.

（ＥＯＡ−１６）
上記アムラ果肉および果皮抽出物１５０ｇを、ダイアイオンＨＰ−２０（三菱化学製）カラムクロマトグラフィーに供し、０〜１００％のメタノールで溶出した。そのうち２０％メタノール画分２．４２ｇをＴｏｙｏｐｅａｒｌ ＨＷ−４０Ｃ（ＴＯＳＯＨ製）カラムクロマトグラフィーに供し、５０％エタノールで溶出した。得られた画分のうち３４．７ｍｇをＭＣＩ ｇｅｌ ＣＨＰ−２０Ｐ（三菱化学製）カラムクロマトグラフィーに供し、２０％のメタノールで溶出し、以下の式（１）：

で表される新規化合物ＥＯＡ−１６（ｍｕｃｉｃ ａｃｉｄ ２−Ｏ−ｄｉｇａｌｌａｔｅ）を３．１ｍｇ得た。上記化合物の物性値は後述の通りである。 (EOA-16)
150 g of the above Amla pulp and pericarp extract were subjected to column chromatography on Diaion HP-20 (manufactured by Mitsubishi Chemical) and eluted with 0-100% methanol. Among them, 2.42 g of the 20% methanol fraction was subjected to Toyopearl HW-40C (manufactured by TOSOH) column chromatography and eluted with 50% ethanol. 34.7 mg of the obtained fraction was subjected to MCI gel CHP-20P (Mitsubishi Chemical) column chromatography and eluted with 20% methanol to obtain the following formula (1):

3.1 mg of a novel compound EOA-16 (mucic acid 2-O-digitate) represented by the formula: The physical property values of the above compounds are as described below.

（ＥＯＡ−１７）
上記アムラ果肉および果皮抽出物１５０ｇを、ダイアイオンＨＰ−２０（三菱化学製）カラムクロマトグラフィーに供し、０〜１００％のメタノールで溶出した。そのうち２０％メタノール画分２．４２ｇをＴｏｙｏｐｅａｒｌ ＨＷ−４０Ｃ（ＴＯＳＯＨ製）カラムクロマトグラフィーに供し、５０％エタノールで溶出した。得られた画分のうち３４．７ｍｇをＭＣＩ ｇｅｌ ＣＨＰ−２０Ｐ（三菱化学製）カラムクロマトグラフィーに供し、３０％のメタノールで溶出し、以下の式（２）：

で表される新規化合物ＥＯＡ−１７（ｍｕｃｉｃ ａｃｉｄ １，４−ｌａｃｔｏｎｅ ５−Ｏ−ｄｉｇａｌｌａｔｅ）を３．６ｍｇ得た。上記化合物の物性値は後述の通りである。 (EOA-17)
150 g of the above Amla pulp and pericarp extract were subjected to column chromatography on Diaion HP-20 (manufactured by Mitsubishi Chemical) and eluted with 0-100% methanol. Among them, 2.42 g of the 20% methanol fraction was subjected to Toyopearl HW-40C (manufactured by TOSOH) column chromatography and eluted with 50% ethanol. 34.7 mg of the obtained fraction was subjected to MCI gel CHP-20P (Mitsubishi Chemical) column chromatography and eluted with 30% methanol to obtain the following formula (2):

3.6 mg of a novel compound EOA-17 (mucic acid 1,4-lactone 5-O-digitate) represented by the formula: The physical property values of the above compounds are as described below.

（ＥＯＡ−３２）
上記アムラ果肉および果皮抽出物１５０ｇを、ダイアイオンＨＰ−２０（三菱化学製）カラムクロマトグラフィーに供し、０〜１００％のメタノールで溶出した。そのうち４０％メタノール溶出部７．６ｇをＴｏｙｏｐｅａｒｌ ＨＷ−４０Ｃ（ＴＯＳＯＨ製）カラムクロマトグラフィーに供し、５０％エタノールで溶出した。得られた画分のうち５６３．３ｍｇをＭＣＩ ｇｅｌ ＣＨＰ−２０Ｐ（三菱化学製）カラムクロマトグラフィーに供し、０〜１００％のメタノールで溶出し、３０％メタノール溶出部９１．３ｍｇを得た。この画分をさらにＯＤＳカラム（オクタデシルシリル基で表面が修飾された化学結合型多孔性球状シリカゲル）を用いた分取高速液体クロマトグラフィーに付し、１０％アセトニトリルにて溶出し、以下の式（３）：

で表される新規化合物ＥＯＡ−３２（１−Ｏ−ｄｉｇａｌｌｏｙｌ，６−Ｏ−ｇａｌｌｏｙｌ−β−Ｄ−ｇｌｕｃｏｓｅ）を２．２ｍｇ得た。上記化合物の物性値は後述の通りである。 (EOA-32)
150 g of the above Amla pulp and pericarp extract were subjected to column chromatography on Diaion HP-20 (manufactured by Mitsubishi Chemical) and eluted with 0-100% methanol. Among them, 7.6 g of 40% methanol elution part was subjected to Toyopearl HW-40C (manufactured by TOSOH) column chromatography and eluted with 50% ethanol. 563.3 mg of the obtained fraction was subjected to MCI gel CHP-20P (Mitsubishi Chemical) column chromatography and eluted with 0 to 100% methanol to obtain 91.3 mg of 30% methanol eluate. This fraction was further subjected to preparative high-performance liquid chromatography using an ODS column (chemically bonded porous spherical silica gel whose surface was modified with octadecylsilyl groups), and eluted with 10% acetonitrile. The following formula ( 3):

2.2 mg of novel compound EOA-32 represented by the formula (1-O-digitalloyl, 6-O-galloyl-β-D-glucose) was obtained. The physical property values of the above compounds are as described below.

（ＥＯＡ−３３）
上記アムラ果肉および果皮抽出物１５０ｇを、ダイアイオンＨＰ−２０（三菱化学製）カラムクロマトグラフィーに供し、０〜１００％のメタノールで溶出した。そのうち４０％メタノール溶出部７．６ｇをＴｏｙｏｐｅａｒｌ ＨＷ−４０Ｃ（ＴＯＳＯＨ製）カラムクロマトグラフィーに供し、５０％エタノールで溶出した。得られた画分のうち５６３．３ｍｇをＭＣＩ ｇｅｌ ＣＨＰ-２０Ｐ（三菱化学製）カラムクロマトグラフィーに供し、０〜１００％のメタノールで溶出し、３０％メタノール溶出部９１．３ｍｇを得た。この画分をさらにＯＤＳカラム（オクタデシルシリル基で表面が修飾された化学結合型多孔性球状シリカゲル）を用いた分取高速液体クロマトグラフィーに付し、１２％アセトニトリルにて溶出し、以下の式（４）：

で表される新規化合物ＥＯＡ−３３（１−Ｏ−ｇａｌｌｏｙｌ，６−Ｏ−ｄｉｇａｌｌｏｙｌ−β−Ｄ−ｇｌｕｃｏｓｅ）を２．５ｍｇ得た。上記化合物の物性値は後述の通りである。 (EOA-33)
150 g of the above Amla pulp and pericarp extract were subjected to column chromatography on Diaion HP-20 (manufactured by Mitsubishi Chemical) and eluted with 0-100% methanol. Among them, 7.6 g of 40% methanol elution part was subjected to Toyopearl HW-40C (manufactured by TOSOH) column chromatography and eluted with 50% ethanol. Of the obtained fraction, 563.3 mg was subjected to MCI gel CHP-20P (Mitsubishi Chemical) column chromatography and eluted with 0 to 100% methanol to obtain 91.3 mg of a 30% methanol elution part. This fraction was further subjected to preparative high performance liquid chromatography using an ODS column (chemically bonded porous spherical silica gel whose surface was modified with octadecylsilyl group), and eluted with 12% acetonitrile. The following formula ( 4):

2.5 mg of novel compound EOA-33 (1-O-galloyl, 6-O-digitalloyl-β-D-glucose) represented by The physical property values of the above compounds are as described below.

（ＥＯＡ−１６：ｍｕｃｉｃ ａｃｉｄ ２−Ｏ−ｄｉｇａｌｌａｔｅ）
無色無晶形粉末；^１Ｈ ＮＭＲ(６００ＭＨｚ，Ａｃｅｔｏｎｅ−ｄ_６＋Ｄ_２Ｏ） ＜ｍｅｔａ体＞ δ ７．５５(１Ｈ， ｂｒ ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ)， ７．４６(１Ｈ， ｂｒ ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ)，７．２３(２Ｈ，ｓ)，５．５４(１Ｈ，ｂｒ ｓ)， ４．４７(１Ｈ，ｂｒ ｓ)， ４．３４(１Ｈ， ｂｒ ｄ，Ｊ＝１０．２Ｈｚ)， ４．０４(１Ｈ， ｂｒ ｄ，Ｊ＝１０．２Ｈｚ) ＜ｐａｒａ体＞ δ ７．２６(１Ｈ，ｓ)， ７．２２(１Ｈ，ｓ)，５．５４(１／２Ｈ，ｂｒ ｓ)， ４．４９(１／２Ｈ， ｂｒ ｓ)， ４．３７(１／２Ｈ，ｂｒ ｄ，Ｊ＝１０．２Ｈｚ)，４．０６(１／２Ｈ， ｂｒ ｄ，Ｊ＝１０．２Ｈｚ) (EOA-16: mucic acid 2-O-digitate)
Colorless amorphous powder; ¹ H NMR (600 MHz, Acetone-d ₆ + D ₂ O) <meta body> δ 7.55 (1 H, br d, J = 1.8 Hz), 7.46 (1 H, br d, J = 1.8 Hz), 7.23 (2H, s), 5.54 (1 H, br s), 4.47 (1 H, br s), 4.34 (1 H, br d, J = 10.2 Hz) 4.04 (1H, br d, J = 10.2 Hz) <para body> δ 7.26 (1H, s), 7.22 (1H, s), 5.54 (1 / 2H, br s) 4.49 (1/2 H, br s), 4.37 (1/2 H, br d, J = 10.2 Hz), 4.06 (1/2 H, br d, J = 10.2 Hz)

（ＥＯＡ−１７：ｍｕｃｉｃ ａｃｉｄ １，４−ｌａｃｔｏｎｅ ５−Ｏ−ｄｉｇａｌｌａｔｅ）
無色無晶形粉末；^１Ｈ ＮＭＲ(６００ＭＨｚ，Ａｃｅｔｏｎｅ−ｄ_６＋Ｄ_２Ｏ） ＜ｍｅｔａ体＞ δ ７．４７(１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ)，７．３４(１Ｈ，ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ)，７．２２(２Ｈ，ｓ)，５．４６(１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ)，４．７２(１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝２．４，８．７Ｈｚ)，４．５２(１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ)，４．３２(１Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．７Ｈｚ) ＜ｐａｒａ体＞ δ ７．２２(１Ｈ，ｓ)，７．１８(１Ｈ，ｓ)，５．４５(１／２Ｈ，ｄ，Ｊ＝３．０Ｈｚ)，４．７４(１／２Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝３．０，８．４Ｈｚ)，４．５５(１／２Ｈ，ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ)，４．３４(１／２Ｈ，ｔ，Ｊ＝８．４Ｈｚ) (EOA-17: mucic acid 1,4-lactone 5-O-digitate)
Colorless amorphous powder; ¹ H NMR (600 MHz, Acetone-d ₆ + D ₂ O) <meta isomer> δ 7.47 (1H, d, J = 1.8 Hz), 7.34 (1H, d, J = 1) .8 Hz), 7.22 (2H, s), 5.46 (1 H, d, J = 2.4 Hz), 4.72 (1 H, dd, J = 2.4, 8.7 Hz), 4.52 (1H, d, J = 8.7 Hz), 4.32 (1H, d, J = 8.7 Hz) <para body> δ 7.22 (1H, s), 7.18 (1H, s), 5 .45 (1 / 2H, d, J = 3.0 Hz), 4.74 (1 / 2H, dd, J = 3.0, 8.4 Hz), 4.55 (1 / 2H, d, J = 8) .4 Hz), 4.34 (1/2 H, t, J = 8.4 Hz)

（ＥＯＡ−３２：１−Ｏ−ｄｉｇａｌｌｏｙｌ，６−Ｏ−ｇａｌｌｏｙｌ-β-Ｄ-ｇｌｕｃｏｓｅ）
無色無晶形粉末；^１Ｈ ＮＭＲ（６００ＭＨｚ，Ａｃｅｔｏｎｅ−ｄ_６＋Ｄ_２Ｏ）＜ｍｅｔａ体＞ δ ７．４７(１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ)，７．３６(１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ)，７．２２(２Ｈ，ｓ)，７．０７(２Ｈ，ｓ)，５．６８(１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ)，４．５４(１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１．８，１２．０Ｈｚ)，４．３０(１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝５．４，１２．０Ｈｚ)，３．７９(１Ｈ， ｄｄｄ，Ｊ＝１．８，５．４，１０．２Ｈｚ)，３．６３−３．５２３(３Ｈ，ｍ) ＜ｐａｒａ体＞ δ ７．２１(１Ｈ，ｓ)，７．１９(１Ｈ，ｓ)，７．０９(１Ｈ，ｓ)，５．７０(１／２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ)，４．５５(１／２Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１．８，１２．０Ｈｚ)，４．３２(１／２Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝５．４，１２．０Ｈｚ)，３．８０(１／２Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝１．８，５．４，１０．２Ｈｚ)，３．６３−３．５２３(３／２Ｈ，ｍ) (EOA-32: 1-O-digaloyl, 6-O-galloyl-β-D-glucose)
Colorless amorphous powder; ¹ H NMR (600 MHz, Acetone-d ₆ + D ₂ O) <meta isomer> δ 7.47 (1H, d, J = 2.4 Hz), 7.36 (1 H, d, J = 2) .4 Hz), 7.22 (2H, s), 7.07 (2H, s), 5.68 (1 H, d, J = 7.8 Hz), 4.54 (1 H, dd, J = 1.8) , 12.0 Hz), 4.30 (1H, dd, J = 5.4, 12.0 Hz), 3.79 (1H, ddd, J = 1.8, 5.4, 10.2 Hz), 3. 63-3.523 (3H, m) <para body> δ 7.21 (1H, s), 7.19 (1H, s), 7.09 (1H, s), 5.70 (1 / 2H, d, J = 7.8 Hz), 4.55 (1/2 H, dd, J = 1.8, 12.0 Hz), 4.32 (1/2 H, dd, J = 5.4, 12.0 Hz) , 3.80 (1 / 2H, ddd, J 1.8,5.4,10.2Hz), 3.63-3.523 (3 / 2H, m)

（ＥＯＡ−３３：１−Ｏ−ｇａｌｌｏｙｌ，６−Ｏ−ｄｉｇａｌｌｏｙｌ-β-Ｄ−ｇｌｕｃｏｓｅ）
無色無晶形粉末；^１Ｈ ＮＭＲ(６００ＭＨｚ，Ａｃｅｔｏｎｅ−ｄ_６＋Ｄ_２Ｏ） ＜ｍｅｔａ体＞ δ ７．４４(１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ)，７．２９(１Ｈ，ｄ，Ｊ＝２．４Ｈｚ)，７．２３(２Ｈ，ｓ)，７．１１(２Ｈ，ｓ)，５．６５(１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ)，４．５６(１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１．８，１２．０Ｈｚ)，４．３７(１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝５．４，１２．０Ｈｚ)，３．７９(１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝１．８，５．４，９．６Ｈｚ)，３．６３−３．５２３(３Ｈ，ｍ) ＜ｐａｒａ体＞ δ ７．２２(１Ｈ，ｓ)，７．１５(１Ｈ，ｓ)，７．１２(１Ｈ，ｓ)，５．６６(１／２Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．８Ｈｚ)，４．５９(１／２Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１．８，１２．０Ｈｚ)，４．３６(１／２Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝５．４，１２．０Ｈｚ)，３．８１(１／２Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝１．８，５．４，９．６Ｈｚ)，３．６３−３．５２３(３／２Ｈ，ｍ) (EOA-33: 1-O-galloyl, 6-O-digalloyl-β-D-glucose)
Colorless amorphous powder; ¹ H NMR (600 MHz, Acetone-d ₆ + D ₂ O) <meta isomer> δ 7.44 (1H, d, J = 2.4 Hz), 7.29 (1H, d, J = 2) .4 Hz), 7.23 (2H, s), 7.11 (2H, s), 5.65 (1H, d, J = 7.8 Hz), 4.56 (1H, dd, J = 1.8) , 12.0 Hz), 4.37 (1H, dd, J = 5.4, 12.0 Hz), 3.79 (1H, ddd, J = 1.8, 5.4, 9.6 Hz), 3. 63-3.523 (3H, m) <para body> δ 7.22 (1H, s), 7.15 (1H, s), 7.12 (1H, s), 5.66 (1 / 2H, d, J = 7.8 Hz), 4.59 (1/2 H, dd, J = 1.8, 12.0 Hz), 4.36 (1/2 H, dd, J = 5.4, 12.0 Hz) , 3.81 (1 / 2H, ddd, J = 1 .8, 5.4, 9.6 Hz), 3.63-3.523 (3 / 2H, m)

（２）性能評価
上記のようにして得られた４種の新規化合物について、抗酸化試験、最終糖化産物生成抑制試験およびコラゲナーゼ産生抑制活性試験を行うことによって評価し、その結果を後述の表１〜３に示す。試験方法は以下の通りとした。 (2) Performance Evaluation The four novel compounds obtained as described above were evaluated by conducting an antioxidant test, a final glycation product production inhibition test and a collagenase production inhibition activity test, and the results are shown in Table 1 described later. Shown in ~ 3. The test method was as follows.

（ａ）抗酸化試験
［ＯＲＡＣ(Ｏｘｙｇｅｎ Ｒａｄｉｃａｌ Ａｂｓｏｒｂａｎｃｅ Ｃａｐａｃｉｔｙ：活性酸素吸収能力）法］
９６穴マイクロプレートの各ｗｅｌｌに、１９．７ｎＭのβ‐フィコエリスリン溶液１７０μＬ、および、Ｔｒｏｌｏｘ（６‐ｈｙｄｒｏｘｙ‐２，５，７，８‐ｔｅｔｒａｍｅｔｙｌｃｈｒｏｍａｎ‐２‐ｃａｒｂｏｘｙｌｉｃ ａｃｉｄ）の標準溶液、または試料溶液１０μＬずつを添加した。また、ブランクには、７５ｍｍｏｌ／Ｌのリン酸カリウム緩衝液（ｐＨ７．０）１０μＬを添加した。その後、３００ｍＭのＡＡＰＨ（２，２’‐ａｚｏｂｉｓ(２‐ａｍｉｄｉｎｏｐｒｏｐａｎｅ)ｄｉｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）溶液２０ｕＬを添加し、直ちに、蛍光強度（励起波長５４０ｎｍ、蛍光波長５６５ｎｍ）を測定した。その後、２分間隔で７０分間測定を行い、蛍光強度の経時変化曲線のＡＵＣ（Ａｒｅａ ｕｎｄｅｒ ｔｈｅ ｃｕｒｖｅ；曲線下面積）を算出した。ブランクの値を差し引いた後（＝ｎｅｔＡＵＣ）、Ｔｒｏｌｏｘの標準溶液のｎｅｔＡＵＣ_{Ｔｒｏｌｏｘ}から回帰直線を作成し、ｎｅｔＡＵＣ_{Ｓａｍｐｌｅ}をＴｒｏｌｏｘ当量（μｍｏｌ ＴＥ／ｇ）に換算にした。その結果を表１に示す。 (A) Antioxidation test [ORAC (Oxygen Radical Absorbance Capacity) method]
In each well of a 96-well microplate, 19.7 nM β-phycoerythrin solution 170 μL, and Trolox (6-hydroxy-2,5,7,8-tetramethylchloro-2-carboxylic acid) standard solution or sample 10 μL of the solution was added. In addition, 10 μL of 75 mmol / L potassium phosphate buffer (pH 7.0) was added to the blank. Thereafter, 20 uL of 300 mM AAPH (2,2′-azobis (2-amidinopropane) dihydrochloride) solution was added, and the fluorescence intensity (excitation wavelength 540 nm, fluorescence wavelength 565 nm) was measured immediately. Thereafter, measurement was carried out for 70 minutes at intervals of 2 minutes, and the AUC (Area under the curve) of the time course curve of fluorescence intensity was calculated. After subtracting the blank value (= netAUC), a regression line was created from netAUC _{Trolox of Trolox} standard solution, and netAUC _Sample was converted to Trolox equivalent (μmol TE / g). The results are shown in Table 1.

表１の結果から明らかなように、本発明の新規化合物ＥＯＡ−１６、ＥＯＡ−１７、ＥＯＡ−３２およびＥＯＡ−３３はすべて、アムラ抽出物に比べて、明らかに強い抗酸化性を有していることがわかる。   As is clear from the results in Table 1, the novel compounds EOA-16, EOA-17, EOA-32 and EOA-33 of the present invention all have clearly stronger antioxidant properties than the Amla extract. I understand that.

（ｂ）最終糖化産物生成抑制試験
６７ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ７．２）に牛血清アルブミン（ＳＩＧＭＡ）１ｍｇ／ｍＬおよびグルコース２０ｍｇ／ｍＬを溶解し、反応溶液を調製した。この反応溶液２．７ｍＬに試験溶液０．３ｍＬ（終濃度１０μｇ／ｍＬ）を加え、６０℃下で４８時間、ヒートブロックで加熱した。対照は反応溶液に何も加えないものとした。そして、最終糖化産物の蛍光強度（励起波長３５５ｎｍ、蛍光波長４６０ｎｍ）を測定した。
最終糖化産物生成阻害率は下記の式に基づいて計算した。
最終糖化産物生成阻害率（％）
＝［(対照の蛍光強度)−(試験サンプルの蛍光強度)］／（対照の蛍光強度）×１００
その結果を表２に示す。 (B) Final glycation product production inhibition test Bovine serum albumin (SIGMA) 1 mg / mL and glucose 20 mg / mL were dissolved in 67 mM phosphate buffer (pH 7.2) to prepare a reaction solution. To 2.7 mL of this reaction solution, 0.3 mL of the test solution (final concentration: 10 μg / mL) was added, and heated with a heat block at 60 ° C. for 48 hours. The control was nothing added to the reaction solution. Then, the fluorescence intensity (excitation wavelength: 355 nm, fluorescence wavelength: 460 nm) of the final glycation product was measured.
The final glycation product production inhibition rate was calculated based on the following formula.
Final glycation product production inhibition rate (%)
= [(Fluorescence intensity of control) − (fluorescence intensity of test sample)] / (fluorescence intensity of control) × 100
The results are shown in Table 2.

表２の結果から明らかなように、本発明の新規化合物ＥＯＡ−１６、ＥＯＡ−１７、ＥＯＡ−３２およびＥＯＡ−３３はすべて、アムラ抽出物に比べて、明らかに強い最終糖化産物生成阻害活性を有していることがわかる。   As is clear from the results in Table 2, the novel compounds EOA-16, EOA-17, EOA-32 and EOA-33 of the present invention all have clearly stronger inhibitory activity on the formation of final glycation products than Amla extract. You can see that it has.

（ｃ）コラゲナーゼ産生抑制活性試験
０．５容量％ＦＢＳ（牛胎児血清）含有ＭＥＭ培地を用い、ヒト皮膚線維芽細胞（ＮＢ１ＲＧＢ、ＲＩＫＥＮ Ｃｅｌｌ Ｂａｎｋより購入）を１×１０^４ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌの密度で９６穴マイクロプレ−トに分注し、２４時間５％ＣＯ_２、３７℃の条件で培養後、試験試料を溶解させた０．５容量％ＦＢＳ含有ＭＥＭ培地を添加した（終濃度２０μｇ／ｍＬ）。２４時間培養後、上清を除去し、試験試料を含まない０．５容量％ＦＢＳ含有ＭＥＭ培地に交換した。さらに４８時間培養し、上清中に含まれるコラゲナーゼ群に属する酵素としてのＭＭＰ−１［Ｍａｔｒｉｘ ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ（マトリックスプロテアーゼ）−１］量を、市販の定量用キット（ＨＵＭＡＮ Ｐｒｏ−ＭＭＰ−１ Ｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ、Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ）を用いて定量した。その際、試料を添加しないで培養を続けた系を対照とした。対照におけるＭＭＰ−１産生に対する阻害率を算出し、結果を表３に示す。 (C) Collagenase production inhibitory activity test Using a MEM medium containing 0.5% FBS (fetal bovine serum), human skin fibroblasts (NB1RGB, purchased from RIKEN Cell Bank) at a density of 1 × 10 ⁴ cells / well. After dispensing into a 96-well microplate and culturing under conditions of 5% CO ₂ and 37 ° C. for 24 hours, a 0.5 volume% FBS-containing MEM medium in which the test sample was dissolved was added (final concentration 20 μg / mL). ). After culturing for 24 hours, the supernatant was removed and replaced with a 0.5 volume% FBS-containing MEM medium containing no test sample. After further culturing for 48 hours, the amount of MMP-1 [Matrix metalloproteinase (matrix protease) -1] as an enzyme belonging to the collagenase group contained in the supernatant was measured with a commercially available quantification kit (HUMAN Pro-MMP-1 Immunoassay, R & D Quantification using Systems). At that time, a system in which the culture was continued without adding the sample was used as a control. The inhibition rate against MMP-1 production in the control was calculated, and the results are shown in Table 3.

表３の結果から明らかなように、本発明の新規化合物ＥＯＡ−１６、ＥＯＡ−１７、ＥＯＡ−３２およびＥＯＡ−３３はすべて、アムラ抽出物に比べて、明らかに強いＭＭＰ−１産生抑制作用を有していることがわかる。   As is clear from the results in Table 3, the novel compounds EOA-16, EOA-17, EOA-32 and EOA-33 of the present invention all have a clearly stronger MMP-1 production inhibitory action than the Amla extract. You can see that it has.

（実施例２〜１１）
本発明の上記新規化合物を含有する組成物を作製した。 (Examples 2 to 11)
A composition containing the novel compound of the present invention was prepared.

（実施例２；粉末組成物の製造）
実施例１で得られた４種の新規化合物それぞれ１質量部に対して、デキストリン（マックス１０００、松谷化学工業株式会社製）９９質量部を混合機でよく混合して４種の粉末組成物１００質量部を製造した。 (Example 2: Production of powder composition)
100 parts by mass of dextrin (Max 1000, manufactured by Matsutani Chemical Industry Co., Ltd.) 99 parts by mass with 1 part by mass of each of the 4 types of new compounds obtained in Example 1, and 4 kinds of powder compositions 100 Mass parts were produced.

（実施例３；錠剤の製造）
実施例２で製造した４種の粉末組成物それぞれ８０質量部に対して、乳糖７０質量部およびステアリン酸マグネシウム０．７質量部を混合し、その混合物を単発式打錠機（菊水製作所製「堅型成型機 Ｎｏ６Ｂ−２」）にて打錠し、直径８ｍｍ、重量２００ｍｇの４種の錠剤（新規化合物１ｍｇ含有）を製造した。 (Example 3; Manufacture of tablets)
70 parts by mass of lactose and 0.7 parts by mass of magnesium stearate were mixed with 80 parts by mass of each of the four powder compositions produced in Example 2, and the mixture was mixed with a single-type tableting machine (manufactured by Kikusui Seisakusho " Tableting was performed with a solid molding machine No6B-2 "), and 4 types of tablets (containing 1 mg of a novel compound) having a diameter of 8 mm and a weight of 200 mg were produced.

（実施例４；キャンディー）
実施例２で製造した４種の粉末組成物それぞれ１質量部に対して、グラニュー糖２８質量部、水飴２１質量部、クエン酸０．５質量部、香料０．１質量部および色素０．１質量部を配合して４種のキャンディーを製造した。得られた４種のキャンディーはすべて、本発明の上記新規化合物がキャンディーの風味や色に影響を与えることはなく、味は良好であった。 (Example 4; Candy)
For each 4 parts of the powder composition prepared in Example 2, 28 parts by weight of granulated sugar, 21 parts by weight of starch syrup, 0.5 part by weight of citric acid, 0.1 part by weight of fragrance, and 0.1 parts of dye. Four types of candies were produced by blending parts by mass. All of the obtained four kinds of candies had good taste without the above-mentioned novel compound of the present invention affecting the flavor and color of the candies.

（実施例５；ジュース）
実施例２で製造した４種の粉末組成物それぞれ１質量部に対して、冷凍濃縮温州みかん果汁２５部、果糖ブドウ糖液糖１５部、クエン酸１部、Ｌ−アスコルビン酸０．１部、香料０．５部、色素０．２部および水２００部を配合して４種のジュースを製造した。得られた４種のジュースはすべて、本発明の上記新規化合物がみかんの風味や色に影響を与えることはなかった。 (Example 5; juice)
For each 4 parts of the four powder compositions prepared in Example 2, 25 parts of frozen concentrated Wenzhou orange juice, 15 parts of fructose glucose liquid sugar, 1 part of citric acid, 0.1 part of L-ascorbic acid, flavoring Four kinds of juices were prepared by blending 0.5 part, 0.2 part of pigment and 200 parts of water. In all of the four juices obtained, the above-mentioned novel compound of the present invention did not affect the flavor and color of mandarin oranges.

（実施例６；チューインガム）
実施例２で製造した４種の粉末組成物それぞれ１質量部に対して、チューインガムベース３００質量部、ショ糖８００質量部、水飴３００質量部、軟化剤６０質量部、香料１３質量部および色素１質量部を配合して４種のチューインガムを製造した。得られた４種のチューインガムはすべて、本発明の上記新規化合物がチューインガムの風味や色に影響を与えることはなく、味は良好であった。 (Example 6; chewing gum)
Chewing gum base 300 parts by weight, sucrose 800 parts by weight, starch syrup 300 parts by weight, softener 60 parts by weight, perfume 13 parts by weight and dye 1 with respect to 1 part by weight of each of the four powder compositions produced in Example 2 Four types of chewing gum were produced by blending parts by mass. In all of the four chewing gums obtained, the above-mentioned novel compound of the present invention did not affect the flavor and color of the chewing gum, and the taste was good.

（実施例７；チョコレート）
実施例２で製造した４種の粉末組成物それぞれ１質量部に対して、チョコレート２２０質量部、ショ糖７５質量部、カカオバター１００質量部および脂粉乳１００質量部を配合して４種のチョコレートを製造した。得られた４種のチョコレートはすべて、配合された上記新規化合物がチョコレートの風味や色に影響を与えることはなく、美味しいものであった。 (Example 7; chocolate)
Each of the four powder compositions produced in Example 2 is mixed with 220 parts by weight of chocolate, 75 parts by weight of sucrose, 100 parts by weight of cocoa butter, and 100 parts by weight of milk powder milk. Manufactured. All of the four kinds of chocolates obtained were delicious, with the blended novel compounds having no effect on the flavor and color of the chocolate.

（実施例８；化粧水）
実施例２で製造した４種の粉末組成物それぞれ１質量部に対して、ポリオキシエチレン（２０）ラウリルエーテル１０質量部、パラオキシ安息香酸メチル２質量部および適量の香料をエタノール１００質量部に溶解した溶液を、グリセリン１００質量部および１、３−ブチレングリコール１００質量部を精製水３８００質量部の水溶液に撹拌しながら加えて溶解後、精製水を加えて４種の化粧水を得た。 (Example 8: lotion)
For each 4 parts of the powder composition prepared in Example 2, 10 parts by weight of polyoxyethylene (20) lauryl ether, 2 parts by weight of methyl paraoxybenzoate and an appropriate amount of fragrance are dissolved in 100 parts by weight of ethanol. 100 parts by mass of glycerin and 100 parts by mass of 1,3-butylene glycol were added to an aqueous solution of 3800 parts by mass of purified water with stirring and dissolved, and then purified water was added to obtain 4 types of lotions.

（実施例９；乳液）
実施例２で製造した４種の粉末組成物それぞれ１質量部に対して、スクワラン２．５質量部、オリーブ油２．５質量部、ホホバ油２．５質量部、セチルアルコール０．７質量部、グリセリンモノステアレート１質量部、ポリオキシエチレン（２０）セチルエーテル１．５質量部およびポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノオレエート２質量部を７０℃に加熱溶解して混合し、別にジプロピレングリコール０．５質量部、グリセリン１質量部、パラオキシ安息香酸メチル０．１質量部を８０℃の精製水３６質量部に撹拌溶解した水溶液および適量の香料を撹拌しながら加えて乳化し、撹拌しながら冷却して橙赤色の４種の乳液を得た。 (Example 9; emulsion)
For each of the four powder compositions prepared in Example 2, 2.5 parts by weight squalane, 2.5 parts by weight olive oil, 2.5 parts by weight jojoba oil, 0.7 parts by weight cetyl alcohol, 1 part by mass of glycerin monostearate, 1.5 parts by mass of polyoxyethylene (20) cetyl ether and 2 parts by mass of polyoxyethylene (20) sorbitan monooleate are heated and dissolved at 70 ° C. and mixed separately. 0.5 parts by mass, 1 part by mass of glycerin, 0.1 part by mass of methyl parahydroxybenzoate were stirred and dissolved in 36 parts by mass of purified water at 80 ° C. Upon cooling, four orange-red emulsions were obtained.

（実施例１０；クリーム）
実施例２で製造した４種の粉末組成物それぞれ１質量部に対して、スクワラン１．１質量部、オリーブ油０．６質量部、ステアリン酸０．４質量部、ミツロウ０．４質量部、ミリスチン酸オクチルドデシル０．７質量部、ポリオキシエチレン（２０）セチルエーテル０．６質量部、ベヘニルアルコール０．３質量部およびグリセリンモノステアレート０．５質量部を７０℃に加熱溶解して混合し、別に１、３−ブチレングリコール１．７質量部、パラオキシ安息香酸メチル０．０４質量部およびパラオキシ安息香酸ブチル０．００６質量部を８０℃の精製水１３質量部に撹拌溶解した水溶液および適量の香料を撹拌しながら加えて乳化し、撹拌しながら冷却して橙赤色の４種のクリームを得た。 (Example 10; cream)
For each of the four powder compositions produced in Example 2, 1.1 parts by weight squalane, 0.6 parts by weight olive oil, 0.4 parts by weight stearic acid, 0.4 parts by weight beeswax, myristic 0.7 parts by mass of octyldodecyl acid, 0.6 parts by mass of polyoxyethylene (20) cetyl ether, 0.3 parts by mass of behenyl alcohol and 0.5 parts by mass of glycerin monostearate are heated and dissolved at 70 ° C. and mixed. Separately, 1.7 parts by mass of 1,3-butylene glycol, 0.04 parts by mass of methyl paraoxybenzoate and 0.006 parts by mass of butyl paraoxybenzoate were stirred and dissolved in 13 parts by mass of purified water at 80 ° C. and an appropriate amount of fragrance. Was added with stirring to emulsify, and the mixture was cooled with stirring to obtain four orange-red creams.

（実施例１１；制汗剤）
実施例２の粉末組成物１質量部、パラフィノールスルホン酸亜鉛２質量部およびプロピレングリコール３質量部を精製水７．４質量部に溶解した。別にジメチルポリシロキサン１３質量部、トリクロサン０．１質量部およびポリオキシエチレン硬化ヒマシ油０．５質量部を無水エチルアルコール７４質量部に溶解した溶液と混合・濾過し、４種の制汗剤を得た。 Example 11 Antiperspirant
1 part by mass of the powder composition of Example 2, 2 parts by mass of zinc paraffinol sulfonate, and 3 parts by mass of propylene glycol were dissolved in 7.4 parts by mass of purified water. Separately, 13 parts by mass of dimethylpolysiloxane, 0.1 parts by mass of triclosan and 0.5 parts by mass of polyoxyethylene hydrogenated castor oil were mixed and filtered with a solution of 74 parts by mass of anhydrous ethyl alcohol to obtain four types of antiperspirants. Obtained.

Claims (8)

以下の式（１）：

で表されることを特徴とする新規化合物。 The following formula (1):

A novel compound represented by the formula: 以下の式（２）：

で表されることを特徴とする新規化合物。 The following formula (2):

A novel compound represented by the formula: 以下の式（３）：

で表されることを特徴とする新規化合物。 The following formula (3):

A novel compound represented by the formula: 以下の式（４）：

で表されることを特徴とする新規化合物。 The following formula (4):

A novel compound represented by the formula: 以下の式（１）：

で表される新規化合物を含有することを特徴とする組成物。 The following formula (1):

The composition characterized by containing the novel compound represented by these. 以下の式（２）：

で表される新規化合物を含有することを特徴とする組成物。 The following formula (2):

The composition characterized by containing the novel compound represented by these. 以下の式（３）：

で表される新規化合物を含有することを特徴とする組成物。 The following formula (3):

The composition characterized by containing the novel compound represented by these. 以下の式（４）：

で表される新規化合物を含有することを特徴とする組成物。 The following formula (4):

The composition characterized by containing the novel compound represented by these.