JP2013164294A - Polysaccharide derivative and optical isomer separation filler containing the same - Google Patents

Abstract

PROBLEM TO BE SOLVED: To provide an optical isomer separation filler.SOLUTION: In an optical isomer separation agent in which a polysaccharide derivative is carried by a carrier, the polysaccharide derivative is configured by substituting at least a part of hydrogen atoms of polysaccharide hydroxy group or amino group with a substituent group represented by a formula (I) or (II), -(C=O)(N-H)C6R1R2R3R4R5 (I) or -(C=O)(N-H)C6H3R6R7 (II), in which polysaccharide is amylose or cellulose and the carrier is silica gel.

Description

本発明は、多糖誘導体及びそれを含有する光学異性体分離用充填剤に関する。   The present invention relates to a polysaccharide derivative and a filler for separating optical isomers containing the same.

従来から、クロマトグラフィーによる光学分割は、分析化学、有機化学、医学、薬学など多方面で非常に注目されており、多くのキラル固定相が世界中で報告されている。特に光学活性高分子であるセルロースやアミロースを化学的に修飾したエステル誘導体やカルバメート誘導体等は、キラル固定相として高い光学分割能を有し、これを用いたクロマトグラフィー用充填剤が広く知られている。これらの多糖誘導体を用いたクロマトグラフィー用充填剤は、カラムへの充填率を高め、ハンドリングを容易にし、機械的強度を高める等の目的から、シリカゲル等の担体に担持させた状態で使用されている。   Conventionally, chromatographic optical resolution has received much attention from various fields such as analytical chemistry, organic chemistry, medicine, and pharmacy, and many chiral stationary phases have been reported all over the world. In particular, ester derivatives and carbamate derivatives chemically modified from optically active polymers such as cellulose and amylose have high optical resolution as chiral stationary phases, and chromatographic packings using them are widely known. Yes. The chromatographic packing material using these polysaccharide derivatives is used in a state where it is supported on a carrier such as silica gel for the purpose of increasing the packing rate to the column, facilitating handling, and increasing mechanical strength. Yes.

例えば、特許文献１には、フェニルカルバメートの芳香族環の水素の一部がハロゲン（フッ素または塩素）で置換された置換基により、セルロースの水酸基が修飾されてなるセルロース誘導体が記載されており、これをシリカゲルに吸着させた分離剤が記載されている。
一方、特許文献２は、フェニルカルバメートの芳香族環の水素の一部が、フッ素、アルキル基、またはアルコキシ基で置換された置換基により、セルロースまたはアミロースの水酸基が修飾されたセルロース誘導体及びアミロース誘導体を開示している。そして、これらの多糖誘導体をシリカ等の担体に担持させたクロマトグラフィー用の充填剤が記載されている。このような技術ではさらなる光学異性体分離能が求められている。 For example, Patent Document 1 describes a cellulose derivative in which a hydroxyl group of cellulose is modified with a substituent in which a part of hydrogen of an aromatic ring of phenylcarbamate is substituted with halogen (fluorine or chlorine). A separating agent in which this is adsorbed on silica gel is described.
On the other hand, Patent Document 2 discloses a cellulose derivative and an amylose derivative in which a hydroxyl group of cellulose or amylose is modified by a substituent in which a part of hydrogen of an aromatic ring of phenylcarbamate is substituted with fluorine, an alkyl group, or an alkoxy group. Is disclosed. Further, a chromatographic filler in which these polysaccharide derivatives are supported on a carrier such as silica is described. Such techniques require further optical isomer resolution.

特公平４−４２３７１号公報Japanese Patent Publication No. 4-42371 特開２００５−３１５６６８号公報JP 2005-315668 A

本発明は、光学分離能に優れた光学異性体分離用充填剤及びそれに用いられる多糖誘導体を提供することを課題とする。   An object of the present invention is to provide a filler for separating optical isomers excellent in optical resolution and a polysaccharide derivative used therefor.

本発明は上記実情に鑑みてなされたものであり、本発明者は鋭意研究の結果、多糖の水酸基またはアミノ基に、２種以上のハロゲンで芳香族環上の水素が置換された特定のフェニルカルバモイル基を導入した多糖誘導体を作製し、これを含有する光学異性体用分離剤を作製した結果、この分離剤がより高い光学分離能を奏することを見出した。すなわち、本発明の要旨は以下の通りである。   The present invention has been made in view of the above circumstances, and as a result of diligent research, the present inventor has developed a specific phenyl in which hydrogen on an aromatic ring is substituted with a hydroxyl group or amino group of a polysaccharide with two or more halogens. As a result of producing a polysaccharide derivative into which a carbamoyl group was introduced and producing an optical isomer separating agent containing the same, it was found that the separating agent exhibits higher optical resolution. That is, the gist of the present invention is as follows.

＜１＞ 多糖の水酸基またはアミノ基の水素原子の少なくとも一部が下記式（Ｉ）で表される置換基で置換されてなる、多糖誘導体。

［式中、Ｒ₁〜Ｒ₅のうち、２以上のＲが、独立してフッ素、塩素、臭素及びヨウ素からなるハロゲン原子の群から選ばれるハロゲン原子であり、式（Ｉ）において、ハロゲン原子は２種以上存在し、ハロゲン原子ではないＲは、水素、炭素数１〜１２のアルキル基、炭素数１〜１２のアルコキシ基、シアノ基、炭素数１〜８のアシル基、炭素数１〜８のアシルオキシ基、ヒドロキシ基、炭素数１〜１２のアルコキシカルボニル基、炭素数１〜１５のアラルキル基、ニトロ基、アミノ基及び炭素数が合計で１〜８のアルキルアミノ基よりなる群から選択される原子又は基である。］
＜２＞ 前記式（Ｉ）が、下記式（ＩＩ）で表される置換基である、＜１＞に記載の多糖誘導体。

［式中、Ｒ₆及びＲ₇は、それぞれ独立して、フッ素、塩素、臭素及びヨウ素からなるハロゲン原子の群から選ばれるハロゲン原子であり、Ｒ₆とＲ₇は同一のハロゲン原子ではない。］
＜３＞ 前記式（ＩＩ）において、Ｒ₆がフッ素であり、Ｒ₇が塩素であり、Ｒ₆及びＲ₇で置換されていない芳香族環上の水素は無置換である、＜２＞に記載の多糖誘導体。
＜４＞ 前記式（Ｉ）または（ＩＩ）で表される置換基が、３−クロロ−５−フルオロフェニルカルバモイル基である、＜１＞〜＜３＞のいずれかに記載の多糖誘導体。
＜５＞ 前記多糖がアミロース又はセルロースである、＜１＞〜＜４＞のいずれかに記載の多糖誘導体。
＜６＞ ＜１＞〜＜５＞のいずれかに記載の多糖誘導体が担体に担持されてなる、光学異性体用分離剤。
＜７＞ 前記担体がシリカゲルである、＜６＞に記載の光学異性体用分離剤。 <1> A polysaccharide derivative obtained by substituting at least a part of a hydrogen atom of a hydroxyl group or amino group of a polysaccharide with a substituent represented by the following formula (I).

[In the formula, two or more of R _{1 to} R ₅ are independently halogen atoms selected from the group of halogen atoms consisting of fluorine, chlorine, bromine and iodine. Are not halogen atoms and R is hydrogen, an alkyl group having 1 to 12 carbon atoms, an alkoxy group having 1 to 12 carbon atoms, a cyano group, an acyl group having 1 to 8 carbon atoms, or 1 to carbon atoms. Selected from the group consisting of 8 acyloxy groups, hydroxy groups, alkoxycarbonyl groups having 1 to 12 carbon atoms, aralkyl groups having 1 to 15 carbon atoms, nitro groups, amino groups, and alkylamino groups having 1 to 8 carbon atoms in total Atom or group. ]
<2> The polysaccharide derivative according to <1>, wherein the formula (I) is a substituent represented by the following formula (II).

[Wherein R ₆ and R ₇ are each independently a halogen atom selected from the group of halogen atoms consisting of fluorine, chlorine, bromine and iodine, and R ₆ and R ₇ are not the same halogen atom. ]
<3> In the above formula (II), R ₆ is fluorine, R ₇ is chlorine, and hydrogen on the aromatic ring not substituted with R ₆ and R ₇ is unsubstituted, <2> The polysaccharide derivatives described.
<4> The polysaccharide derivative according to any one of <1> to <3>, wherein the substituent represented by the formula (I) or (II) is a 3-chloro-5-fluorophenylcarbamoyl group.
<5> The polysaccharide derivative according to any one of <1> to <4>, wherein the polysaccharide is amylose or cellulose.
<6> A separating agent for optical isomers, wherein the polysaccharide derivative according to any one of <1> to <5> is supported on a carrier.
<7> The optical isomer separating agent according to <6>, wherein the carrier is silica gel.

本発明の多糖誘導体は、多糖の水酸基またはアミノ基の水素原子の少なくとも一部が下記式（Ｉ）で表される置換基で置換されたものである。

［式中、Ｒ₁〜Ｒ₅のうち、２以上のＲが、独立してフッ素、塩素、臭素及びヨウ素からなるハロゲン原子の群から選ばれるハロゲン原子であり、式（Ｉ）において、ハロゲン原子は２種以上存在し、ハロゲン原子ではないＲは、水素、炭素数１〜１２のアルキル基、炭
素数１〜１２のアルコキシ基、シアノ基、炭素数１〜８のアシル基、炭素数１〜８のアシルオキシ基、ヒドロキシ基、炭素数１〜１２のアルコキシカルボニル基、炭素数１〜１５のアラルキル基、ニトロ基、アミノ基及び炭素数が合計で１〜８のアルキルアミノ基よりなる群から選択される原子又は基である。］ In the polysaccharide derivative of the present invention, at least part of the hydrogen atom of the hydroxyl group or amino group of the polysaccharide is substituted with a substituent represented by the following formula (I).

[In the formula, two or more of R _{1 to} R ₅ are independently halogen atoms selected from the group of halogen atoms consisting of fluorine, chlorine, bromine and iodine. Are not halogen atoms and R is hydrogen, an alkyl group having 1 to 12 carbon atoms, an alkoxy group having 1 to 12 carbon atoms, a cyano group, an acyl group having 1 to 8 carbon atoms, or 1 to carbon atoms. Selected from the group consisting of 8 acyloxy groups, hydroxy groups, alkoxycarbonyl groups having 1 to 12 carbon atoms, aralkyl groups having 1 to 15 carbon atoms, nitro groups, amino groups, and alkylamino groups having 1 to 8 carbon atoms in total Atom or group. ]

前記多糖は、水酸基又はアミノ基を有する多糖であれば特に限定されない。このような多糖としては、例えばβ−１，４−グルカン（セルロース）、α−１，４−グルカン（アミロース、アミロペクチン）、α−１，６−グルカン（デキストラン）、β−１，６−グルカン（プスツラン）、β−１，３−グルカン（カードラン、シゾフィラン）、α−１，３−グルカン、β−１，２−グルカン（Ｃｒｏｗｎ Ｇａｌｌ多糖）、β−１，４−ガラクタン、β−１，４−マンナン、α−１，６−マンナン、β−１，２−フラクタン（イヌリン）、β−２，６−フラクタン（レバン）、β−１，４−キシラン、β−１，３−キシラン、β−１，４−キトサン、β−１，４−Ｎ−アセチルキトサン（キチン）、プルラン、アガロース、アルギン酸、α−シクロデキストリン、β−シクロデキストリン、γ−シクロデキストリン、ニゲラン、及びアミロースを含有する澱粉等が挙げられる。   The polysaccharide is not particularly limited as long as it is a polysaccharide having a hydroxyl group or an amino group. Examples of such polysaccharides include β-1,4-glucan (cellulose), α-1,4-glucan (amylose, amylopectin), α-1,6-glucan (dextran), and β-1,6-glucan. (Pustulan), β-1,3-glucan (curdlan, schizophyllan), α-1,3-glucan, β-1,2-glucan (Crown Gall polysaccharide), β-1,4-galactan, β-1 , 4-mannan, α-1,6-mannan, β-1,2-fructan (inulin), β-2,6-fructan (levan), β-1,4-xylan, β-1,3-xylan , Β-1,4-chitosan, β-1,4-N-acetylchitosan (chitin), pullulan, agarose, alginic acid, α-cyclodextrin, β-cyclodextrin, γ-cyclodextrin, nigeran, and And starch containing amylose.

この中で、好ましくは、高純度の多糖を容易に得ることのできるセルロース、アミロース、β−１，４−キトサン、キチン、β−１，４−マンナン、β−１，４−キシラン、イヌリン、カードラン、プルラン、α−シクロデキストリン、β−シクロデキストリン、γ−シクロデキストリン、ニゲランなどであり、さらに好ましくは、セルロース、アミロース、プルラン、ニゲランである。   Among these, preferably, cellulose, amylose, β-1,4-chitosan, chitin, β-1,4-mannan, β-1,4-xylan, inulin, from which high-purity polysaccharide can be easily obtained. Curdlan, pullulan, α-cyclodextrin, β-cyclodextrin, γ-cyclodextrin, nigeran and the like, more preferably cellulose, amylose, pullulan and nigeran.

多糖の数平均重合度（１分子中に含まれるピラノース又はフラノース環の平均数）は、好ましくは５以上、より好ましくは１０以上であり、特に上限はないが、１０００以下であることが取り扱いの容易さの点で好ましく、より好ましくは５〜１０００、更に好ましくは１０〜１０００、特に好ましくは１０〜５００である。   The number average degree of polymerization of the polysaccharide (the average number of pyranose or furanose rings contained in one molecule) is preferably 5 or more, more preferably 10 or more, and there is no particular upper limit. It is preferable at the point of ease, More preferably, it is 5-1000, More preferably, it is 10-1000, Most preferably, it is 10-500.

本発明の多糖誘導体は、上記のようにその多糖の水酸基またはアミノ基の水素原子の少なくとも一部が上記式（Ｉ）で表される置換基で置換されたものである。
上記式（Ｉ）で表される置換基は、その芳香族環上の水素が、少なくとも２種以上のハロゲン原子で置換されている。このような置換基で多糖の水酸基またはアミノ基の水素原子を置換された多糖誘導体を光学異性体用分離剤の原料として用いると、光学分割能が向上する。
上記式（Ｉ）で表される置換基において、芳香族環上の置換される水素の位置は、２か所であることが好ましく、その位置は、３位及び４位、３位及び５位、２位及び３位、２位及び4位、２位及び５位であることが好ましく、そのハロゲンの組み合わせは、塩素及
びフッ素、臭素及びフッ素、臭素及び塩素、塩素及びヨウ素、臭素及びヨウ素、フッ素及びヨウ素を好ましく例示できる。
また、その際、ハロゲンで置換されていない芳香族環上の水素は無置換であることが好ましい。 The polysaccharide derivative of the present invention is one in which at least a part of the hydroxyl group or amino group hydrogen atom of the polysaccharide is substituted with the substituent represented by the above formula (I) as described above.
In the substituent represented by the above formula (I), hydrogen on the aromatic ring is substituted with at least two halogen atoms. When a polysaccharide derivative in which a hydroxyl group of a polysaccharide or a hydrogen atom of an amino group is substituted with such a substituent is used as a raw material for a separating agent for optical isomers, the optical resolution is improved.
In the substituent represented by the above formula (I), the position of the hydrogen to be substituted on the aromatic ring is preferably 2 positions, and the positions are 3-position, 4-position, 3-position and 5-position. The 2-position and 3-position, 2-position and 4-position, 2-position and 5-position are preferred, and the halogen combination is chlorine and fluorine, bromine and fluorine, bromine and chlorine, chlorine and iodine, bromine and iodine, Preferred examples include fluorine and iodine.
At that time, it is preferable that hydrogen on the aromatic ring not substituted with halogen is unsubstituted.

なお、多糖の水酸基またはアミノ基の水素原子の少なくとも一部とは、多糖が、上記のような少なくとも２位及び３位に水酸基またはアミノ基を有するものであれば、２位のみ、３位のみ、または２位及び３位の両方の水酸基またはアミノ基が置換されていることをいう。２位及び３位以外にも例えば６位に水酸基を有する多糖であれば、６位のみが式（Ｉ）で表される置換基で置換されていてもよい。式（Ｉ）で表される置換基で水酸基またはアミノ基の水素原子を置換する方法については後述する。   The hydroxyl group or amino group hydrogen atom of the polysaccharide means at least a 2-position only and a 3-position only if the polysaccharide has a hydroxyl group or an amino group at least at the 2-position and 3-position as described above. Or that both hydroxyl groups and amino groups at the 2-position and 3-position are substituted. In addition to the 2nd and 3rd positions, for example, if the polysaccharide has a hydroxyl group at the 6th position, only the 6th position may be substituted with a substituent represented by the formula (I). A method for substituting the hydrogen atom of the hydroxyl group or amino group with the substituent represented by formula (I) will be described later.

前記式（Ｉ）で表される置換基は、下記式（ＩＩ）で表される置換基であることがより好ましい。

［式中、Ｒ₆及びＲ₇は、それぞれ独立して、フッ素、塩素、臭素及びヨウ素からなるハロゲン原子の群から選ばれるハロゲン原子であり、Ｒ₆とＲ₇は同一のハロゲン原子ではない。］ The substituent represented by the formula (I) is more preferably a substituent represented by the following formula (II).

[Wherein R ₆ and R ₇ are each independently a halogen atom selected from the group of halogen atoms consisting of fluorine, chlorine, bromine and iodine, and R ₆ and R ₇ are not the same halogen atom. ]

前記式（Ｉ）または（ＩＩ）で表される置換基により、多糖の水酸基またはアミノ基の水素原子を置換する方法については、以下のようなものが挙げられる。
芳香族環上の水素が上記式（Ｉ）のＲ₁〜Ｒ₅で置換されたフェニルイソシアネート化合物を、塩化リチウムを溶解させたＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミド、Ｎ-メチル−２−ピロ
リドン及び１，３−ジメチル−２−イミダゾリジノンで例示されるアミド系溶媒に溶解させ、この溶液に多糖を加え、適当な温度及び時間（２０〜１００℃、１〜２４時間）で反応を起こさせることで、フェニルイソシアネート化合物のイソシアネート基と多糖の水酸基またはアミノ基とを反応させる。
上記アミド系溶媒の他にも、例えばピリジンを用いることもできる。 Examples of the method for substituting the hydrogen atom of the polysaccharide hydroxyl group or amino group with the substituent represented by the formula (I) or (II) include the following.
A phenyl isocyanate compound in which hydrogen on the aromatic ring is substituted with R _{1 to} R ₅ of the above formula (I) is mixed with N, N-dimethylacetamide, N-methyl-2-pyrrolidone and 1, It is dissolved in an amide solvent exemplified by 3-dimethyl-2-imidazolidinone, a polysaccharide is added to this solution, and a reaction is caused at an appropriate temperature and time (20 to 100 ° C., 1 to 24 hours). The isocyanate group of the phenyl isocyanate compound is reacted with the hydroxyl group or amino group of the polysaccharide.
In addition to the amide solvent, for example, pyridine can also be used.

上記フェニルイソシアネート化合物は、例えば以下の（１）または（２）のような方法で得ることができる。   The phenyl isocyanate compound can be obtained, for example, by the following method (1) or (2).

（１）芳香族環上の水素が上記（Ｉ）で表される置換基で置換された安息香酸を原料として用い、これをアセトンに溶解させ、低温（０〜５℃）でトリエチルアミンとクロロギ酸エチルを加え、その後アジ化ナトリウムを加えてさらに撹拌することでアジ化物を得る。その後、溶媒を減圧留去によって除去し、トルエンに溶解させて再び減圧留去させることによって、目的とするイソシアネート化合物を得ることができる。 (1) Using benzoic acid in which hydrogen on the aromatic ring is substituted with the substituent represented by (I) above as a raw material, this is dissolved in acetone, and triethylamine and chloroformic acid at low temperature (0 to 5 ° C.) Add azide, then add sodium azide and stir further to obtain the azide. Then, the target isocyanate compound can be obtained by removing the solvent by distillation under reduced pressure, dissolving it in toluene, and distilling it again under reduced pressure.

（２）トリホスゲンをジクロロメタンのような適当な溶媒に仕込み、芳香族環上の水素が上記（Ｉ）で表される置換基で置換されたアニリン誘導体と、ピリジン及びジクロロメタンのような溶媒とを、低温０〜１０℃で滴下する。これらの滴下後に還流を行い、ピリジンを滴下し、これにさらにトルエンを加える。これを濃縮後さらにトルエンを加えて冷却することで、ピリジン塩酸塩を晶析させ、ろ別する。ろ液を濃縮し蒸留精製することで目的のイソシアネート化合物を析出させて得ることができる。 (2) Triphosgene is charged into a suitable solvent such as dichloromethane, an aniline derivative in which hydrogen on the aromatic ring is substituted with the substituent represented by (I) above, and a solvent such as pyridine and dichloromethane, Add dropwise at a low temperature of 0-10 ° C. Reflux is performed after these dripping, pyridine is dripped, and toluene is further added to this. After concentration, toluene is further added and cooled to crystallize pyridine hydrochloride, followed by filtration. The filtrate can be concentrated and purified by distillation to precipitate the desired isocyanate compound.

本発明の多糖誘導体において、上記式（Ｉ）または（ＩＩ）で表される置換基で置換されていない水酸基またはアミノ基は、上記式（Ｉ）または（ＩＩ）で表される基以外の基で置換されていてもよい。
そのような置換基としては、フェニルカルバモイル基、ジクロロフェニルカルバモイル基、ジメチルフェニルカルバモイル基が好ましく例示でき、より具体的には、３，５−ジクロロフェニルカルバモイル基及び３，５−ジメチルフェニルカルバモイル基が好ましく例示できる。
このような置換基を多糖の水酸基またはアミノ基に導入するには、上記式（Ｉ）または（ＩＩ）で表される置換基を導入する方法と同じ方法を用いることができる。すなわち、上記カルバモイル基を形成するために用いるイソシアネート化合物のイソシアネートと多糖の水酸基またはアミノ基とを反応させることで、式（Ｉ）または（ＩＩ）で表される置換基以外の置換基を導入することができる。 In the polysaccharide derivative of the present invention, the hydroxyl group or amino group not substituted with the substituent represented by the formula (I) or (II) is a group other than the group represented by the formula (I) or (II). May be substituted.
As such a substituent, a phenylcarbamoyl group, a dichlorophenylcarbamoyl group, and a dimethylphenylcarbamoyl group can be preferably exemplified, and more specifically, a 3,5-dichlorophenylcarbamoyl group and a 3,5-dimethylphenylcarbamoyl group are preferably exemplified. it can.
In order to introduce such a substituent into the hydroxyl group or amino group of the polysaccharide, the same method as the method for introducing the substituent represented by the above formula (I) or (II) can be used. That is, a substituent other than the substituent represented by the formula (I) or (II) is introduced by reacting the isocyanate of the isocyanate compound used to form the carbamoyl group with the hydroxyl group or amino group of the polysaccharide. be able to.

また、本発明の多糖誘導体において、多糖の水酸基またはアミノ基の水素原子は、上記カルバモイル基以外の基で置換されてもよい。そのような置換基としては、下記式（ＩＩＩ）や（ＩＶ）で表される置換基が挙げられる。
−ＣＯ−Ｒ （ＩＩＩ）
−Ｒ （ＩＶ）
上記式（ＩＩＩ）及び（ＩＶ）中、Ｒは、独立して、ヘテロ原子を含んでもよい脂肪族又は芳香族炭化水素基であり、置換基をさらに有していてもよい。前記脂肪族炭化水素基としては、炭素数が１〜３０の直鎖状又は分岐状の脂肪族炭化水素基が挙げられ、例えばメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、オクチル、ドデシル、オクタデシル、アダマンチル、及びノルボルニル等が挙げられる。また前記芳香族炭化水素基としては、炭素数が６〜３０の縮合環状を含む芳香族炭化水素基が挙げられ、例えばフェニル、インデニル、ナフチル、アンスリル、フェナンスリル、フルオレニル、ピレニル、ビフェニル、及びターフェニル等が挙げられる。 In the polysaccharide derivative of the present invention, the hydrogen atom of the polysaccharide or amino group of the polysaccharide may be substituted with a group other than the carbamoyl group. Examples of such a substituent include substituents represented by the following formulas (III) and (IV).
-CO-R (III)
-R (IV)
In the above formulas (III) and (IV), R is independently an aliphatic or aromatic hydrocarbon group that may contain a hetero atom, and may further have a substituent. Examples of the aliphatic hydrocarbon group include linear or branched aliphatic hydrocarbon groups having 1 to 30 carbon atoms, such as methyl, ethyl, propyl, isopropyl, butyl, tert-butyl, pentyl, octyl. , Dodecyl, octadecyl, adamantyl, norbornyl and the like. Examples of the aromatic hydrocarbon group include aromatic hydrocarbon groups containing a condensed ring having 6 to 30 carbon atoms, such as phenyl, indenyl, naphthyl, anthryl, phenanthryl, fluorenyl, pyrenyl, biphenyl, and terphenyl. Etc.

前記Ｒが有していてもよい置換基としては、例えば、炭素数１〜１２のヘテロ原子を含んでもよい炭化水素、シアノ、ハロゲン、ヒドロキシ、ニトロ、アミノ、及びジ（炭素数１〜８のアルキル）アミノ基（すなわち炭素数１〜８のアルキル基を置換基として有するアミノ基）からなる群から選ばれた一又は二以上の置換基が挙げられる。   Examples of the substituent that R may have include, for example, hydrocarbons, cyano, halogen, hydroxy, nitro, amino, and di (having 1 to 8 carbon atoms) which may contain a hetero atom having 1 to 12 carbon atoms. Alkyl) amino group (that is, one or two or more substituents selected from the group consisting of an alkyl group having 1 to 8 carbon atoms as a substituent).

前記式（ＩＩＩ）で表される置換基による置換では、例えばCellulose Vol.11, p.255-263, 2004に記載されているように、リン酸水素二ナトリウムや炭酸ナトリウム等の低分子塩の存在下における前記式（ＩＩＩ）に対応するカルボン酸エステルと前記多糖の水酸基とのエステル交換反応によって行うことができる。前記エステル交換反応におけるカルボン酸エステルの導入に有効な触媒としては、中性若しくは弱酸性、又は弱アルカリ性のリン酸水素塩、硫酸塩、クロライド、ブロマイド等や、アルカリ性の炭酸塩、炭酸水素塩、酢酸塩、リン酸塩等を用いることができる。特にリン酸水素二ナトリウム、炭酸ナトリウムの他、塩化アンモニウム（ＮＨ₄Ｃｌ）、塩化ナトリウム（ＮａＣｌ）、ナトリウム
シトレイト、リン酸カリウム（Ｋ₃ＰＯ₄）、酢酸マグネシウム、炭酸カリウム（Ｋ₂ＣＯ₃）、酢酸ナトリウム等が好ましく用いられる。 In the substitution with the substituent represented by the formula (III), for example, as described in Cellulose Vol.11, p.255-263, 2004, a low molecular salt such as disodium hydrogenphosphate or sodium carbonate is used. It can be carried out by a transesterification reaction between the carboxylic acid ester corresponding to the formula (III) and the hydroxyl group of the polysaccharide in the presence. As an effective catalyst for the introduction of carboxylic acid ester in the transesterification reaction, neutral, weakly acidic, or weakly alkaline hydrogen phosphate, sulfate, chloride, bromide, etc., alkaline carbonate, bicarbonate, Acetate, phosphate and the like can be used. In particular, disodium hydrogen phosphate and sodium carbonate, ammonium chloride (NH ₄ Cl), sodium chloride (NaCl), sodium citrate, potassium phosphate (K ₃ PO ₄ ), magnesium acetate, potassium carbonate (K ₂ CO ₃ ), Sodium acetate and the like are preferably used.

前記式（ＩＶ）で表される置換基による置換では、ジオキサン又はピリジン中で水酸化カリウムやカリウムｔ−ブトキシドを塩基として用い、対応するハロゲン化物と多糖の水酸基又はアミノ基とを適当な条件で反応させることによって行うことができる。   In substitution with the substituent represented by the formula (IV), potassium hydroxide or potassium t-butoxide is used as a base in dioxane or pyridine, and the corresponding halide and polysaccharide hydroxyl group or amino group are subjected to appropriate conditions. It can be performed by reacting.

なお、前記一般式（Ｉ）または（ＩＩ）で表される置換基により置換される多糖の水酸基またはアミノ基の位置については特に制限されるものではなく、多糖において前記式（Ｉ）または（ＩＩ）で表される置換基で置換されていない水酸基またはアミノ基が存在する場合には、その未置換の水酸基またはアミノ基は、前記式（ＩＩＩ）または（ＩＶ）で表される置換基で置換されてもよい。
なお、国際公開第２００８−０２９７８５号に示される技術を用い、多糖の水酸基またはアミノ基が式（Ｉ）または（ＩＩ）で表される置換基以外の置換基によっても置換がなされる場合には、所望の位置に所望の置換基を導入することができる。 In addition, the position of the hydroxyl group or amino group of the polysaccharide substituted by the substituent represented by the general formula (I) or (II) is not particularly limited, and in the polysaccharide, the formula (I) or (II In the case where there is a hydroxyl group or amino group that is not substituted with a substituent represented by formula (III), the unsubstituted hydroxyl group or amino group is substituted with a substituent represented by the formula (III) or (IV). May be.
In addition, when the technique shown in International Publication No. 2008-029785 is used and the hydroxyl group or amino group of the polysaccharide is substituted by a substituent other than the substituent represented by the formula (I) or (II), , A desired substituent can be introduced at a desired position.

上記のように、前記式（Ｉ）〜（ＩＶ）で表される置換基は、これらの置換基による光学分割能の効果が得られる範囲であれば、前記構成単位において該当する位置の水酸基又はアミノ基の全てにおいて置き換えられていなくてもよいが、前記式（Ｉ）または（ＩＩ）で表される置換基を含む置換基により、多糖の水酸基またはアミノ基の全てが置換されていることが好ましい。
前記一般式（Ｉ）又は（ＩＩ）で表される置換基の、本発明の多糖誘導体への導入率は、７０〜１００％が好ましく、８０〜１００％がより好ましく、１００％が特に好ましい
。 As described above, the substituent represented by the formulas (I) to (IV) is a hydroxyl group at a corresponding position in the structural unit or the like as long as the effect of the optical resolution by these substituents is obtained. Although not all amino groups may be substituted, the hydroxyl group or amino group of the polysaccharide may be substituted with a substituent containing a substituent represented by the formula (I) or (II). preferable.
The introduction rate of the substituent represented by the general formula (I) or (II) into the polysaccharide derivative of the present invention is preferably 70 to 100%, more preferably 80 to 100%, and particularly preferably 100%.

尚、前記導入率（％）は以下のように定義される。すなわち、本発明の多糖誘導体において、前記式で表される置換基を前記構成単位における水酸基又はアミノ基に置き換えたものとしたときの前記構成単位の水酸基又はアミノ基の総数に対する、本発明の多糖誘導体における前記式で表される置換基の総数の割合である。導入率は、置換基の種類及び結合位置の一方又は両方を識別できるＮＭＲや元素分析等の公知の分析方法を利用して求めることができ、また置換基の種類又は置換基の結合位置に応じて求めることができる。   The introduction rate (%) is defined as follows. That is, in the polysaccharide derivative of the present invention, the polysaccharide of the present invention relative to the total number of hydroxyl groups or amino groups of the structural unit when the substituent represented by the formula is replaced with a hydroxyl group or an amino group in the structural unit. It is the ratio of the total number of substituents represented by the above formula in the derivative. The introduction rate can be determined using a known analysis method such as NMR or elemental analysis that can identify one or both of the type of substituent and the bonding position, and depends on the type of substituent or the bonding position of the substituent. Can be obtained.

前記導入率は、例えば、本発明の多糖誘導体において、前記式で表される置換基を水酸基のみに置き換えた場合には、置換後の多糖の総水酸基数に対する前記一般式（Ｉ）〜（ＩＶ）で表される置換基の数の比率に１００を乗じた数値であり、前記式で表される置換基をアミノ基のみに置き換えた場合には、置換後の多糖の総アミノ基数に対する前記式（Ｉ）〜（ＩＶ）で表される置換基の数の比率に１００を乗じた数値であり、前記式で表される置換基を水酸基及びアミノ基に置き換えた場合には、置換後の多糖の総水酸基数と総アミノ基数の合計に対する前記式（Ｉ）〜（ＩＶ）で表される置換基の数の合計の比率に１００を乗じた数値である。   For example, in the polysaccharide derivative of the present invention, when the substituent represented by the above formula is replaced with only a hydroxyl group, the introduction rate is determined based on the formulas (I) to (IV ) Is a numerical value obtained by multiplying the ratio of the number of substituents represented by 100 by 100, and when the substituent represented by the above formula is replaced only with an amino group, the above formula with respect to the total number of amino groups of the polysaccharide after substitution It is a numerical value obtained by multiplying the ratio of the number of substituents represented by (I) to (IV) by 100, and when the substituent represented by the above formula is replaced with a hydroxyl group and an amino group, the substituted polysaccharide It is a numerical value obtained by multiplying 100 by the ratio of the total number of substituents represented by formulas (I) to (IV) to the total number of hydroxyl groups and the total number of amino groups.

本発明の光学異性体用分離剤は、本発明の多糖誘導体のみから構成されていてもよいし、シリカゲル等の担体と、この担体に担持される本発明の多糖誘導体とから構成されていてもよいし、またカラム管に一体的に収容される一体型の形態であってもよいし、カラム管に充填される粒子の形態であってもよい。本発明の光学異性体用分離剤は、本発明の多糖誘導体を用いる以外は、多糖誘導体を含有する公知の光学異性体用分離剤と同様に作製され得る。   The separating agent for optical isomers of the present invention may be composed only of the polysaccharide derivative of the present invention, or may be composed of a carrier such as silica gel and the polysaccharide derivative of the present invention supported on this carrier. Alternatively, it may be in the form of an integral unit accommodated in the column tube, or in the form of particles filled in the column tube. The separating agent for optical isomers of the present invention can be prepared in the same manner as the known separating agent for optical isomers containing a polysaccharide derivative, except that the polysaccharide derivative of the present invention is used.

より具体的には、本発明の多糖誘導体を担体に担持させるか、又は前記多糖誘導体自体を破砕、又は公知の方法により球状粒子化（例えば、特開平７−２８５８８９号公報）することにより光学異性体用分離剤を作製することができる。なお、ここでいう担持とは、担体上に前記多糖誘導体が固定化されていることである。担持する方法には公知の担持方法を適用することができ、前記多糖誘導体と担体との間の物理的な吸着、前記多糖誘導体と担体との間の化学結合、前記多糖誘導体同士の化学結合、前記多糖誘導体及び担体の一方又は両方と第三成分との化学結合、前記多糖誘導体への光照射、ラジカル反応等の方法を適用することができる（例えば、特開平６−９３００２号公報参照）。   More specifically, the polysaccharide derivative of the present invention is supported on a carrier, or the polysaccharide derivative itself is crushed or formed into spherical particles by a known method (for example, JP-A-7-285889). A body separating agent can be prepared. The term “supporting” used herein means that the polysaccharide derivative is immobilized on a carrier. A known loading method can be applied to the loading method, physical adsorption between the polysaccharide derivative and the carrier, chemical bonding between the polysaccharide derivative and the carrier, chemical bonding between the polysaccharide derivatives, Methods such as chemical bonding between one or both of the polysaccharide derivative and the carrier and the third component, light irradiation to the polysaccharide derivative, radical reaction, etc. can be applied (see, for example, JP-A-6-93002).

担体としては、多孔質有機担体及び多孔質無機担体が挙げられ、好ましくは多孔質無機担体である。多孔質担体の平均孔径は１ｎｍ〜１００μｍが好ましく、５ｎｍ〜５μｍがより好ましい。多孔質有機担体として適当なものは、ポリスチレン、ポリアクリルアミド、ポリアクリレート等からなる高分子物質であり、多孔質無機担体として適当なものは、シリカ、アルミナ、ジルコニア、マグネシア、ガラス、カオリン、酸化チタン、ケイ酸塩、ヒドロキシアパタイトなどである。また、上記多孔質無機担体の形態としては、粒子状の担体だけでなく、有機無機複合体のように網目状になった無機系担体や、特開２００５−１７２６８号公報又は特開２００６−１５０２１４号公報等に記載の、カラム管に保持され得る円柱状の一体型無機系担体も含まれる。   Examples of the carrier include a porous organic carrier and a porous inorganic carrier, and a porous inorganic carrier is preferable. The average pore diameter of the porous carrier is preferably 1 nm to 100 μm, more preferably 5 nm to 5 μm. Suitable as the porous organic carrier is a polymer material composed of polystyrene, polyacrylamide, polyacrylate, etc., and suitable as the porous inorganic carrier is silica, alumina, zirconia, magnesia, glass, kaolin, titanium oxide. Silicate, hydroxyapatite, and the like. Further, the form of the porous inorganic carrier is not limited to a particulate carrier, but is an inorganic carrier having a network shape such as an organic-inorganic composite, or JP-A-2005-17268 or JP-A-2006-150214. Also included is a columnar integrated inorganic carrier that can be held in a column tube, as described in Japanese Patent Publication No. Gazette.

特に好ましい担体はシリカゲルであり、シリカゲルの粒径は１μｍ〜１ｍｍ、好ましくは１μｍ〜３００μｍ、更に好ましくは１μｍ〜１００μｍである。また、担体は、前記多糖誘導体との親和性を良くしたり、担体自身の表面の特性を改質するための処理を施したものを用いても良い。表面処理の方法としてはアミノプロピルシランなどの有機シラン化合物によるシラン化処理やプラズマ重合による表面処理方法がある。担体上への前記多糖誘導体の担持量は、光学異性体用分離剤１００重量部に対して、１〜１００重量部が好
ましく、更に５〜６０重量部が好ましく、特に１０〜４０重量部が望ましい。 A particularly preferable carrier is silica gel, and the particle size of the silica gel is 1 μm to 1 mm, preferably 1 μm to 300 μm, more preferably 1 μm to 100 μm. In addition, a carrier that has been treated to improve the affinity with the polysaccharide derivative or to modify the surface properties of the carrier itself may be used. As the surface treatment method, there are a silanization treatment with an organic silane compound such as aminopropylsilane and a surface treatment method by plasma polymerization. The amount of the polysaccharide derivative supported on the carrier is preferably 1 to 100 parts by weight, more preferably 5 to 60 parts by weight, and particularly preferably 10 to 40 parts by weight with respect to 100 parts by weight of the separating agent for optical isomers. .

また前記多糖誘導体自体を破砕又は球状粒子化するとき、乳鉢等を用いることで得られた破砕状又は球状の多糖誘導体は、分級して粒度を揃えておくことが望ましい。   Further, when the polysaccharide derivative itself is crushed or formed into spherical particles, it is desirable that the crushed or spherical polysaccharide derivative obtained by using a mortar or the like is classified to have a uniform particle size.

本発明の光学異性体用分離剤は、ＨＰＬＣの光学異性体用分離剤として用いる場合には公知の方法（例えばスラリー充填法など）によりカラムに充填して用いることができる。本発明の多糖誘導体は、ＨＰＬＣ以外にもガスクロマトグラフィー用、電気泳動用、特にキャピラリーエレクトロクロマトグラフィー用（ＣＥＣ用）、ＣＺＥ（キャピラリーゾーン電気泳動）法、ＭＥＫＣ（ミセル動電クロマト）法のキャピラリーカラムの充填剤としても使用することができる。   When the separation agent for optical isomers of the present invention is used as a separation agent for optical isomers of HPLC, it can be used by filling a column by a known method (for example, slurry packing method). In addition to HPLC, the polysaccharide derivative of the present invention is used for capillary columns for gas chromatography, electrophoresis, particularly capillary electrochromatography (for CEC), CZE (capillary zone electrophoresis), and MEKC (micelle electrokinetic chromatography). It can also be used as a filler.

以下に、実施例をあげて、本発明について更に詳細に説明を加えるが、本発明の範囲がかかる実施例にのみ限定されないことはいうまでもない。   Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to examples, but it is needless to say that the scope of the present invention is not limited to such examples.

＜製造例１＞
（１）３−クロロ−５−フルオロフェニルイソシアネートの合成
冷却管付きの１Ｌ四つ口フラスコ反応装置に、窒素雰囲気下、トリホスゲン（１８．９ｇ，６３．７ｍｍｏｌ）、ジクロロメタン（２９５ ｇ）を仕込み、５℃に冷却した。３
−クロロ−５−フルオロアニリン（２５．０ｇ，１７１．８ｍｍｏｌ）、ピリジン（２２．８ｇ，２８８．２ｍｍｏｌ）、ジクロロメタン（１４８ｇ）の混合液を９℃以下で滴下した。滴下終了後、１.５時間還流、冷却した。ＮＭＲで原料消失を確認後、ピリジン（
７．３ ｇ，９２．３ ｍｍｏｌ）を１０℃以下で滴下した。１Ｌナスフラスコに反応液を移液し、トルエン（４５０ｇ）を添加した。反応液を濃縮した。さらにトルエン（４５０ｇ）を添加し、１０℃以下に冷却した。析出したピリジン塩酸塩をろ過した。ろ液を濃縮後、濃縮液を蒸留精製することにより、目的物（無色澄明液体）を取得した（沸点：７２℃／１０ｔｏｒｒ、収量１５g、収率５１％）。 <Production Example 1>
(1) Synthesis of 3-chloro-5-fluorophenyl isocyanate Triphosgene (18.9 g, 63.7 mmol) and dichloromethane (295 g) were charged in a 1 L four-necked flask reactor equipped with a cooling tube under a nitrogen atmosphere. Cooled to 5 ° C. 3
A mixed solution of -chloro-5-fluoroaniline (25.0 g, 171.8 mmol), pyridine (22.8 g, 288.2 mmol) and dichloromethane (148 g) was added dropwise at 9 ° C or lower. After completion of dropping, the mixture was refluxed and cooled for 1.5 hours. After confirming disappearance of the raw material by NMR, pyridine (
7.3 g, 92.3 mmol) was added dropwise at 10 ° C or lower. The reaction solution was transferred to a 1 L eggplant flask and toluene (450 g) was added. The reaction solution was concentrated. Furthermore, toluene (450 g) was added and cooled to 10 ° C. or lower. The precipitated pyridine hydrochloride was filtered. After concentration of the filtrate, the concentrate was purified by distillation to obtain the desired product (colorless clear liquid) (boiling point: 72 ° C./10 torr, yield 15 g, yield 51%).

＜実施例１：セルロース系充填剤の作成＞
（２）セルロース トリス（３−クロロ−５−フルオロフェニルカルバメート）の合成
窒素雰囲気下、セルロース（２．００ｇ）と３−クロロ−５−フルオロフェニルイソシアネート（９．２２ｇ,セルロース水酸基に対して１.４５当量）とを、乾燥ピリジン４９ｇ中で、ピリジン還流温度下、２４時間攪拌し、その後アセトニトリル１．２Ｌに注ぎ込んだ。析出した固体をろ取した。これをテヒドロフラン４７ｍＬに溶解し、アセトニトリル０．９４Ｌに注ぎ込んだ。析出した固体をろ取し、真空乾燥（６０℃）を行った。その結果、目的物６．４８ｇ（収率７８％）を得た。得られた白色固体について、有機元素分析装置を用いた炭素、水素及び窒素元素の分析結果を以下の表１に示す。なお、表中の％は重量％を示す。 <Example 1: Preparation of cellulosic filler>
(2) Synthesis of cellulose tris (3-chloro-5-fluorophenyl carbamate) Under nitrogen atmosphere, cellulose (2.00 g) and 3-chloro-5-fluorophenyl isocyanate (9.22 g, 1. 45 equivalents) was stirred in 49 g of dry pyridine at pyridine reflux temperature for 24 hours and then poured into 1.2 L of acetonitrile. The precipitated solid was collected by filtration. This was dissolved in 47 mL of tehydrofuran and poured into 0.94 L of acetonitrile. The precipitated solid was collected by filtration and vacuum dried (60 ° C.). As a result, 6.48 g (yield 78%) of the target product was obtained. Table 1 below shows the analysis results of carbon, hydrogen, and nitrogen using the organic element analyzer for the obtained white solid. In addition,% in a table | surface shows weight%.

（３）シリカゲルの表面処理
多孔質シリカゲル（粒径５μｍ）について、公知の方法により、３−アミノプロピルトリエトキシシランと反応させることにより、前記多孔質シリカゲルにアミノプロピルシラ
ン処理（ＡＰＳ処理）を施した。 (3) Surface treatment of silica gel By subjecting porous silica gel (particle size 5 μm) to 3-aminopropyltriethoxysilane by a known method, the porous silica gel is subjected to aminopropylsilane treatment (APS treatment). did.

（４）セルロース トリス（３−クロロ−５−フルオロフェニルカルバメート）のシリカゲル担持型充填剤の作製
上記で得たセルロース トリス（３−クロロ−５−フルオロフェニルカルバメート）
０．８ｇをテトラヒドロフラン６．４ｍＬに溶解させ、このポリマードープを均一に上記（３）のシリカゲル３．２ｇに塗布した。塗布後、テトラヒドロフランの減圧留去を行うことで、物理的吸着により、目的のセルロース トリス（３−クロロ−５−フルオロフェニルカルバメート）担持型充填剤を得た。 (4) Preparation of silica gel-supported filler of cellulose tris (3-chloro-5-fluorophenylcarbamate) Cellulose tris (3-chloro-5-fluorophenylcarbamate) obtained above
0.8 g was dissolved in 6.4 mL of tetrahydrofuran, and this polymer dope was uniformly applied to 3.2 g of the silica gel of (3) above. After coating, tetrahydrofuran was distilled off under reduced pressure to obtain the intended cellulose tris (3-chloro-5-fluorophenylcarbamate) -supporting filler by physical adsorption.

（５）作製した充填剤を充填したＨＰＬＣ用カラムの作製
上記（４）で作製したセルロース トリス（３−クロロ−５−フルオロフェニルカルバメート）担持型充填剤を、長さ２５ｃｍ、内径０．４６ｃｍのステンレス製カラムにスラリー充填法で充填し、ＨＰＬＣ用カラムを作製した。 (5) Production of HPLC column filled with produced packing material Cellulose tris (3-chloro-5-fluorophenylcarbamate) carrying type packing material produced in the above (4) is 25 cm in length and 0.46 cm in inner diameter. A stainless steel column was packed by a slurry packing method to prepare an HPLC column.

＜実施例２：アミロース系充填剤の作製＞
（６）アミロース トリス（３−クロロ−５−フルオロフェニルカルバメート）の合成
窒素雰囲気下、アミロース（２．００ｇ）に塩化リチウム（１．３１ｇ）とＮ，Ｎ−ジメチルアセトアミド（１７．４ｍＬ）を添加し、９０℃で加熱溶解した。溶解液を冷却後、ピリジン（８．０ｍＬ）、４−ジメチルアミノピリジン（０．９０ｇ）、３−クロロ−５−フルオロフェニルイソシアネート（９．７１ｇ，アミロース水酸基に対して１.５３
当量）を添加し、９０℃で２４時間攪拌した。その後ｎ−ヘキサン／２−プロパノール＝９０／１０（１．７Ｌ）に注ぎ込んだ。析出した固体をろ取した。これをテヒドロフラン３７ｍＬに溶解し、ｎ−ヘキサン／２−プロパノール＝９０／１０（０．７４Ｌ）に注ぎ込んだ。析出した固体をろ取し、真空乾燥(６０℃)を行った。その結果、目的物７．７４ｇ（収率９３％）を得た。得られた白色固体について、有機元素分析装置を用いた炭素、水素及び窒素元素の分析結果を以下の表２に示す。なお、表中の％は重量％を示す。 <Example 2: Preparation of amylose-based filler>
(6) Synthesis of amylose tris (3-chloro-5-fluorophenylcarbamate) Lithium chloride (1.31 g) and N, N-dimethylacetamide (17.4 mL) were added to amylose (2.00 g) under a nitrogen atmosphere. And dissolved by heating at 90 ° C. After cooling the solution, pyridine (8.0 mL), 4-dimethylaminopyridine (0.90 g), 3-chloro-5-fluorophenyl isocyanate (9.71 g, 1.53 with respect to the amylose hydroxyl group).
Equivalent) was added and stirred at 90 ° C. for 24 hours. Thereafter, it was poured into n-hexane / 2-propanol = 90/10 (1.7 L). The precipitated solid was collected by filtration. This was dissolved in 37 mL of thetahydrofuran and poured into n-hexane / 2-propanol = 90/10 (0.74 L). The precipitated solid was collected by filtration and vacuum dried (60 ° C.). As a result, 7.74 g (yield 93%) of the target product was obtained. Table 2 below shows the analysis results of carbon, hydrogen, and nitrogen using the organic element analyzer for the obtained white solid. In addition,% in a table | surface shows weight%.

（７）アミロース トリス（３−クロロ−５−フルオロフェニルカルバメート）のシリカゲル担持型充填剤の作製
上記で得たアミロース トリス（３−クロロ−５−フルオロフェニルカルバメート）
１．０ｇをテトラヒドロフラン ６ｍＬに溶解させ、このポリマードープを均一に上記（
３）のシリカゲル４ｇに塗布した。塗布後、テトラヒドロフランの減圧留去を行うことで、物理的吸着により、目的のアミロース トリス（３−クロロ−５−フルオロフェニルカルバメート）担持型充填剤を得た。 (7) Preparation of silica gel-supported filler of amylose tris (3-chloro-5-fluorophenylcarbamate) Amylose tris (3-chloro-5-fluorophenylcarbamate) obtained above
1.0 g is dissolved in 6 mL of tetrahydrofuran, and this polymer dope is uniformly added to the above (
It was applied to 4 g of silica gel 3). After coating, tetrahydrofuran was distilled off under reduced pressure to obtain the target amylose tris (3-chloro-5-fluorophenylcarbamate) -supporting filler by physical adsorption.

（８）作製した充填剤を充填したＨＰＬＣ用カラムの作製
上記（７）で作製したアミロース トリス（３−クロロ−５−フルオロフェニルカルバメート)担持型充填剤を、長さ２５ｃｍ、内径０．４６ｃｍのステンレス製カラムにスラ
リー充填法で充填し、ＨＰＬＣ用カラムを作製した。 (8) Production of HPLC column filled with produced packing material The amylose tris (3-chloro-5-fluorophenylcarbamate) -carrying type packing material produced in the above (7) has a length of 25 cm and an inner diameter of 0.46 cm. A stainless steel column was packed by a slurry packing method to prepare an HPLC column.

＜比較例１＞
実施例１において、セルロース誘導体の作製時に３−クロロ−５−フルオロフェニルイソシアネートの代わりに３，５−ジクロロフェニルイソシアネートを用いたこと以外は実
施例１と同様の材料、手順により、比較例１のＨＰＬＣ用カラムを作製した。 <Comparative Example 1>
The HPLC of Comparative Example 1 was carried out in the same manner as in Example 1, except that 3,5-dichlorophenyl isocyanate was used instead of 3-chloro-5-fluorophenyl isocyanate when preparing the cellulose derivative. A column was prepared.

＜比較例２＞
実施例１において、セルロース誘導体の作製時に３−クロロ−５−フルオロフェニルイソシアネートの代わりに３，５−ジフルオロフェニルイソシアネートを用いたこと以外は実施例１と同様の材料、手順により、比較例２のＨＰＬＣ用カラムを作製した。 <Comparative example 2>
In Example 1, except that 3,5-difluorophenyl isocyanate was used in place of 3-chloro-5-fluorophenyl isocyanate when producing the cellulose derivative, the same material and procedure as in Example 1 were used, and Comparative Example 2 was used. An HPLC column was prepared.

＜比較例３＞
実施例２において、アミロース誘導体の作製時に３−クロロ−５−フルオロフェニルイソシアネートの代わりに３，５−ジクロロフェニルイソシアネートを用いたこと以外は実施例２と同様の材料、手順により、比較例３のＨＰＬＣ用カラムを作製した。 <Comparative Example 3>
The HPLC of Comparative Example 3 was carried out in the same manner as in Example 2, except that 3,5-dichlorophenyl isocyanate was used instead of 3-chloro-5-fluorophenyl isocyanate in preparing the amylose derivative. A column was prepared.

＜比較例４＞
実施例２において、アミロース誘導体の作製時に３−クロロ−５−フルオロフェニルイソシアネートの代わりに３，５−ジフルオロフェニルイソシアネートを用いたこと以外は実施例１と同様の材料、手順により、比較例４のＨＰＬＣ用カラムを作製した。 <Comparative example 4>
In Example 2, the same materials and procedures as in Example 1 were used except that 3,5-difluorophenyl isocyanate was used in place of 3-chloro-5-fluorophenyl isocyanate when producing the amylose derivative. An HPLC column was prepared.

実施例１、比較例１及び２のＨＰＬＣ用カラムを用い、液体クロマトグラフィー法により、表３に示す化合物の不斉識別能力（分離係数α値）の評価を行った。なお、α値は以下で示すように、保持係数（k₁'）から算出した。ＨＰＬＣで用いた条件は表３に記載の
とおりであった。 Using the HPLC columns of Example 1 and Comparative Examples 1 and 2, the asymmetric discrimination ability (separation coefficient α value) of the compounds shown in Table 3 was evaluated by liquid chromatography. The α value was calculated from the retention coefficient (k ₁ ′) as shown below. The conditions used in the HPLC were as shown in Table 3.

保持係数（ｋ₁’）
ｋ₁’＝［（対掌体の保持時間）−（デッドタイム）］／デッドタイム）
（デッドタイムは、Ｔｒｉ−ｔｅｒｔ−ｂｕｔｙｌｂｅｚｅｎｅの溶出時間をデッドタイムとした。）
分離係数（α）
α＝（より強く保持される対掌体の保持係数）／（より弱く保持される対掌体の保持係数） Retention factor (k ₁ ')
k ₁ '= [(holding time of enantiomer) − (dead time)] / dead time)
(The dead time was defined as the elution time of Tri-tert-butylbezene.)
Separation factor (α)
α = (retention coefficient of the enantiomer held stronger) / (retention coefficient of the enantiomer held weaker)

なお、表３中、各略称は以下のものを示す。ｔ−SO：トランス−スチルベンオキサイド、ＴＦＡＥ:２，２，２−トリフルオロ−１−（９−アントリル）エタノール、ＮＥＯＨ:１−（１−ナフタレン）エタノール、ＣｏＡＣ：コバルト（ＩＩＩ）アセチルアセトネート、Ｂｉｎａｐｈ：１，１’−ビ−２−ナフトール   In Table 3, each abbreviation indicates the following. t-SO: trans-stilbene oxide, TFAE: 2,2,2-trifluoro-1- (9-anthryl) ethanol, NEOH: 1- (1-naphthalene) ethanol, CoAC: cobalt (III) acetylacetonate, Binaph: 1,1'-bi-2-naphthol

実施例２、比較例３及び４のＨＰＬＣ用カラムを用い、液体クロマトグラフィー法により、表４に示す化合物の不斉識別能力（分離係数α値）の評価を行った。α値は上記で示した式に従い算出した。ＨＰＬＣで用いた条件は表４に記載のとおりであった。表４で示すＴＲ−Ｂａｓｅはトレガー塩基を示す。

Using the HPLC columns of Example 2 and Comparative Examples 3 and 4, the asymmetric discrimination ability (separation coefficient α value) of the compounds shown in Table 4 was evaluated by liquid chromatography. The α value was calculated according to the formula shown above. The conditions used in the HPLC were as shown in Table 4. TR-Base shown in Table 4 represents a Tregger base.

表３および４で示す通り、本発明の多糖誘導体（２種以上のハロゲン原子で芳香族環上の水素が置換されたフェニルカルバモイル基で置換された多糖誘導体）を用いた光学異性体用分離剤を用いた場合には、１種のみのハロゲン原子で芳香族環上の水素が置換されたフェニルカルバモイル基で置換された多糖誘導体を用いた光学異性体用分離剤を用いた場合に比べ、良好な光学分割能を示すことが明らかとなった。   As shown in Tables 3 and 4, optical isomer separating agent using the polysaccharide derivative of the present invention (polysaccharide derivative substituted with a phenylcarbamoyl group in which hydrogen on the aromatic ring is substituted with two or more halogen atoms) Is better than using a separating agent for optical isomers using a polysaccharide derivative substituted with a phenylcarbamoyl group in which hydrogen on the aromatic ring is substituted with only one type of halogen atom. It became clear that it showed a good optical resolution.

本発明の光学異性体用分離剤に用いたときに、既存の光学異性体用分離剤と同程度かそれ以上の実用性を有しており、さらには光学分割対象のラセミ体によっては既存の光学異性体用分離剤よりも高い光学分割能を示す。したがって、本発明の多糖誘導体及び光学異性体用分離剤は、既存の光学異性体用分離剤では分離が不十分であった光学異性体の分離の可能性を有しており、例えばそのような光学異性体が用いられる新薬の開発に利用することができる。   When used in the separation agent for optical isomers of the present invention, it has practicality equivalent to or higher than that of separation agents for existing optical isomers. It shows higher optical resolution than the optical isomer separating agent. Therefore, the polysaccharide derivative and the optical isomer separating agent of the present invention have the possibility of separating optical isomers that were insufficiently separated by existing optical isomer separating agents. It can be used to develop new drugs that use optical isomers.

Claims (7)

多糖の水酸基またはアミノ基の水素原子の少なくとも一部が下記式（Ｉ）で表される置換基で置換されてなる、多糖誘導体。

［式中、Ｒ₁〜Ｒ₅のうち、２以上のＲが、独立してフッ素、塩素、臭素及びヨウ素からなるハロゲン原子の群から選ばれるハロゲン原子であり、式（Ｉ）において、ハロゲン原子は２種以上存在し、ハロゲン原子ではないＲは、水素、炭素数１〜１２のアルキル基、炭素数１〜１２のアルコキシ基、シアノ基、炭素数１〜８のアシル基、炭素数１〜８のアシルオキシ基、ヒドロキシ基、炭素数１〜１２のアルコキシカルボニル基、炭素数１〜１５のアラルキル基、ニトロ基、アミノ基及び炭素数が合計で１〜８のアルキルアミノ基よりなる群から選択される原子又は基である。］ A polysaccharide derivative, wherein at least a part of hydrogen atoms of a hydroxyl group or amino group of a polysaccharide is substituted with a substituent represented by the following formula (I).

[In the formula, two or more of R _{1 to} R ₅ are independently halogen atoms selected from the group of halogen atoms consisting of fluorine, chlorine, bromine and iodine. Are not halogen atoms and R is hydrogen, an alkyl group having 1 to 12 carbon atoms, an alkoxy group having 1 to 12 carbon atoms, a cyano group, an acyl group having 1 to 8 carbon atoms, or 1 to carbon atoms. Selected from the group consisting of 8 acyloxy groups, hydroxy groups, alkoxycarbonyl groups having 1 to 12 carbon atoms, aralkyl groups having 1 to 15 carbon atoms, nitro groups, amino groups, and alkylamino groups having 1 to 8 carbon atoms in total Atom or group. ] 前記式（Ｉ）が、下記式（ＩＩ）で表される置換基である、請求項１に記載の多糖誘導体。

［式中、Ｒ₆及びＲ₇は、それぞれ独立して、フッ素、塩素、臭素及びヨウ素からなるハロゲン原子の群から選ばれるハロゲン原子であり、Ｒ₆とＲ₇は同一のハロゲン原子ではない。］ The polysaccharide derivative according to claim 1, wherein the formula (I) is a substituent represented by the following formula (II).

[Wherein R ₆ and R ₇ are each independently a halogen atom selected from the group of halogen atoms consisting of fluorine, chlorine, bromine and iodine, and R ₆ and R ₇ are not the same halogen atom. ] 前記式（ＩＩ）において、Ｒ₆がフッ素であり、Ｒ₇が塩素であり、Ｒ₆及びＲ₇で置換されていない芳香族環上の水素は無置換である、請求項２に記載の多糖誘導体。 The polysaccharide according to claim 2, wherein in the formula (II), R ₆ is fluorine, R ₇ is chlorine, and hydrogen on the aromatic ring not substituted with R ₆ and R ₇ is unsubstituted. Derivative. 前記式（Ｉ）または（ＩＩ）で表される置換基が、３−クロロ−５−フルオロフェニルカルバモイル基である、請求項１〜３のいずれか一項に記載の多糖誘導体。   The polysaccharide derivative according to any one of claims 1 to 3, wherein the substituent represented by the formula (I) or (II) is a 3-chloro-5-fluorophenylcarbamoyl group. 前記多糖がアミロース又はセルロースである、請求項１〜４のいずれか一項に記載の多糖誘導体。   The polysaccharide derivative according to any one of claims 1 to 4, wherein the polysaccharide is amylose or cellulose. 請求項１〜５のいずれか一項に記載の多糖誘導体が担体に担持されてなる、光学異性体用分離剤。   A separating agent for optical isomers, wherein the polysaccharide derivative according to any one of claims 1 to 5 is supported on a carrier. 前記担体がシリカゲルである、請求項６に記載の光学異性体用分離剤。   The separating agent for optical isomers according to claim 6, wherein the carrier is silica gel.