JP2013083633A - 蛍光粒子を用いたサイロキシン免疫アッセイ - Google Patents
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Abstract
【解決手段】サイロキシン又はその誘導体とアルブミンとの結合体が固定化されており、
固定化された結合体におけるアルブミンに対する、サイロキシン又はその誘導体の分子数比が、8以上12以下である、サイロキシン免疫測定用の基板。
【選択図】なし
Description
好ましくは、工程(2)において、表面プラズモン蛍光測定または落射蛍光測定により蛍光を測定する。
本発明は、サイロキシン又はその誘導体とアルブミンとの結合体が固定化されており、固定化された結合体におけるアルブミンに対する、サイロキシン又はその誘導体の分子数比が、8以上12以下である、サイロキシン免疫測定用基板、並びに上記基板にサイロキシンを含む被検試料及び抗サイロキシン抗体標識蛍光粒子を接触させる工程、及び(2)基板に結合した抗サイロキシン抗体標識蛍光粒子に基づく蛍光を測定する工程を含む、被検試料中のサイロキシンを測定する方法に関する。
本発明で用いるアルブミンの種類は特に限定されないが、例えば、動物(ウシ、ヒトなど)に由来するアルブミン、好ましくは動物(ウシ、ヒトなど)に由来する血清アルブミン、特に好ましくは牛血清アルブミン(本発明では、BSAと略記する場合がある)を使用することができる。
本発明は、アルブミンに対する、サイロキシン又はその誘導体の分子数比が、8以上12以下である、サイロキシン又はその誘導体とアルブミンとの結合体が固定化されているサイロキシン免疫測定用の基板である。本発明の結合体におけるアルブミンに対する、サイロキシン又はその誘導体の分子数比は8以上12以下であり、好ましくは9以上12以下であり、より好ましくは9以上11以下であり、最も好ましくは9以上10以下である。
ミノプロピル)カルボジイミド塩酸塩(WSC)とN-ヒドロキシスクシンイミド(NHS)などを用いて活性化し、アルブミンのアミノ基と結合させることにより、サイロキシン又はその誘導体とアルブミンとの結合体を調製することができる。
本発明では、上記したサイロキシン又はその誘導体/アルブミン比が8以上12以下であるサイロキシン又はその誘導体とアルブミンとの結合体を、基板に固定化することによって、サイロキシン免疫測定用基板を提供する。基板の種類としては、後述する蛍光分析を行うことができるものであれば特に限定されず任意の素材の基板を使用することができる。サイロキシン又はその誘導体とアルブミンとの結合体は、緩衝液に溶解させて、基板上に点着して、一定時間放置した後、上清を吸引し、乾燥させるなどの方法で基板に結合させることが可能である。
本発明で用いる蛍光粒子としては、免疫反応に通常用いられ得る蛍光で着色された粒子を使用することができ、例えば、蛍光ポリスチレンビーズなどの蛍光高分子粒子、蛍光ガラスビーズ等の蛍光ガラス粒子を用いることができる。蛍光粒子の材質の具体例としては、スチレン、メタクリル酸、グリシジル(メタ)アクリレート、ブタジエン、塩化ビニル、酢酸ビニルアクリレート、メチルメタクリレート、エチルメタクリレート、フェニルメタクリレート、ブチルメタクリレートなどのモノマーを用いた高分子または、2つ以上のモノマーを用いた共重合体などの合成高分子粉末があり、これらを均一に懸濁させたラテックスが好ましい。また、その他の有機高分子粉末や無機物質粉末、微生物、血球や細胞膜片、リポソームなどが挙げられる。
本発明に用いられる蛍光粒子の平均粒径は、市販の粒度分布計等で計測することができる。粒度分布の測定法としては、光学顕微鏡法、共焦点レーザー顕微鏡法、電子顕微鏡法、原子間力顕微鏡法、静的光散乱法、レーザー回折法、動的光散乱法、遠心沈降法、電気パルス計測法、クロマトグラフィー法、超音波減衰法等が知られており、それぞれの原理に対応した装置が市販されている。
本発明では、サイロキシン結合物質を蛍光粒子に結合させてサイロキシンの標識に使用することができる。サイロキシン結合物質としては、抗サイロキシン抗体を好ましく使用することができる。蛍光粒子に結合させる抗サイロキシン抗体としては、サイロキシンに対して特異性を有する抗体を使用すればよい。抗サイロキシン抗体は、例えば、サイロキシンによって免疫された動物の血清から調製する抗血清、抗血清から精製された免疫グロブリン画分、サイロキシンによって免疫された動物の脾臓細胞を用いる細胞融合によって得られるモノクローナル抗体、あるいは、それらの断片[例えば、F(ab’)2、Fab、Fab’、又はFv]などを用いることができる。これらの抗体の調製は、常法により行なうことができる。さらに、その抗体がキメラ抗体などの場合のように、修飾を加えられたものでもよいし、また市販の抗体でも、動物血清や培養上清から公知の方法により調製した抗体でも使用可能である。
本発明の測定方法は、サイロキシンの存在の有無の検出やサイロキシンの量の測定(すなわち、定量)などを含む、最も広い概念として解釈される。本発明の測定方法の具体的な実施態様としては競合法が挙げられる。
本発明における蛍光の検出方法としては、特に限定されないが、例えば、蛍光強度を検出することができる機器、具体的には、マイクロプレートリーダー、又は表面プラズモン励起による蛍光検出(SPF)を行うためのバイオセンサーなどを用いて蛍光強度を検出することができる。表面プラズモン励起による蛍光検出法(SPF法)は、落射励起による蛍光検出法(以下、「落射蛍光法」という。)よりも高感度に測定することができる。
本発明における表面プラズモン励起による蛍光検出(SPF)での被検物質の定量方法の一例としては、数分〜数時間後に抗原抗体反応が終了した後、前記免疫複合体の形成の度合いを蛍光強度として検出することにより、蛍光強度と被検物質の濃度の関係から、被検物質の濃度を定量することができる。また、以下の方法により被検物質を定量することができる。具体的には、各濃度既知の被検物質を含む試料を準備し、蛍光を検出する部位を流下させつつ、蛍光検出部位からの蛍光信号を異なる複数の時刻で測定する。この複数の測定結果から、各被検物質濃度において、蛍光量の時間変化(傾き)を求める。この時間変化をY軸、被検物質濃度をX軸としてプロットし、最小二乗法等の適宜ふさわしいフィッティング方法を用いて、蛍光量の時間変化に対する被検物質濃度の検量線を取得する。光信号システムとしては、被検物質ごとに別途測定した検量線に基づき、目的とする被検試料の被検物質量を特定することができる。
1.サイロキシン−牛血清アルブミン(T4−BSA)結合体−1の粉末の調製
1−1.T4誘導体の合成
Thyroxine(サイロキシン:T4、Sigma社製、)を準備し、米国特許公報第4040907号に記載の合成法に従って、T4誘導体1を合成した。得られたT4誘導体1の270mgをジメチルホルムアミド(DMF:和光純薬社製)に添加し、室温で攪拌しながら溶解した。その後、WSC(同仁化学社製)285mg、NHS(和光純薬社製)174mgを加え、室温で2時間攪拌し、T4誘導体2を合成した。
次に、下記スキーム2に示すように、1−1.で得られたT4誘導体2と、牛血清アルブミン(BSA)との結合体(T4−BSA)を調製した。
透析膜チューブ(品名:SnakeSkin Pleated Dialysis Tubing, 10,000 MWCO, 22 mm×35フィート乾燥直径;プロダクト#:68100;Thermo Scientific社製)を用いて、1−2.で得られたT4−BSA結合体−1溶液の透析を行った。
5Lビーカーに0.1質量%トリフルオロ酢酸(TFA、和光純薬社製)を含有するイオン交換水(H2O)及びアセトニトリル(AR)(1:1)の混合溶媒5Lを準備した。テックジャム社製リール式pH試験紙(カタログ番号:商品コードNO:KN3138095)を用いて混合溶媒のpHを測定したところ1であった。透析膜チューブに密封したT4−BSA結合体−1の溶液を、この混合溶媒に投入し、室温でゆっくりと攪拌した。
2日間、透析を行った後、透析チューブ内の水溶液を回収した。回収した水溶液を、500mLのナス型フラスコへ注いで、液体窒素を用いて凍結乾燥を行い、本発明のT4とアルブミンとの結合体として、T4−BSA結合体−1の白色固体約400mgを得た。
1−1.におけるT4−BSA結合体−1の調製において、T4とBSAの質量を変更すること以外は全て同じ調製方法を用いて、T4−BSA結合体−2〜8の粉末の調製を行った。
BSA一分子当たりに結合しているT4分子の数を、T4/BSA比として測定した。
測定は、MALDI−TOF−MS(以下、MSと表示する)測定により行った。マトリックスとしてシナピン酸(シグマアルドリッチ社製)を用いた。0.1質量%TFAを含む水及びアセトニトリルの(1:1)の混合液に、シナピン酸を10mg/mLの濃度で溶解してマトリックス溶液を調製した。このマトリックス溶液とT4−BSA水溶液(精製水)とを、1:1(各5μL)で混合し、マイクロチューブ中でピペットを用いて十分混合した。その後、MSの基盤プレート上に、混合液を5μL滴下し、室温で自然乾燥させ、MS測定を行った。測定モードは、liner mode、positive modeで行い、質量検出の分子量として60,000〜100,000で測定した。得られた、T4−BSA結合体−1〜8のBSAに対するT4の標識率をT4/BSA比として表1に示した。
1.で調製した結合体1から結合体8を使用して、T4の免疫測定を以下の通り行った。
1.で調製した結合体1〜8それぞれ150μgを、50mM濃度のクエン酸緩衝液1mL(pH 5.2, 150 mM NaCl)に添加して溶解させ、クエン酸緩衝液の溶液を得た。BSAに対するT4の標識率が高くなると、クエン酸緩衝液への溶解性が低下し、信頼性のある溶液が調整できなくなる。T4/BSA比が16である結合体8はクエン酸緩衝液への溶解性が大きく劣ることがわかり、以降の評価に使用することができなかった。
抗T4抗体で標識した蛍光粒子(粒径260nm)を、以下の通り調製した。
固形分濃度が2質量%の蛍光ラテックス粒子水溶液(Invitrogen社製品)250μLに、50mMのMES(2−モルホリノエタノスルホン酸、同仁化学研究所社製)緩衝液(pH6.0)を250μL加え、5mg/mLの抗T4モノクローナル抗体(自社株品)を100μL添加し、室温で15分間攪拌した。その後、10mg/mLのWSC水溶液を5μL加え、室温で2時間撹拌した。2mol/LのGlycine(和光純薬社製)水溶液を25μL添加し、30分間撹拌した後、遠心分離(15,000rpm、4℃、15分)にて、蛍光ラテックス粒子を沈降させた。上清液を取り除き、PBS(Phosphate Buffered Saline リン酸緩衝生理食塩水;和光純薬社製)溶液(pH7.4)を500μL加え、超音波洗浄機により蛍光ラテックス粒子を再分散させた。さらに遠心分離(15,000rpm、4℃、15分)を行い、上清液を除いた後、1質量%BSAを含むPBS (pH7.4)溶液500μLを加え、蛍光ラテックス粒子を再分散させることで、抗T4抗体結合蛍光ラテックス粒子の1質量%溶液を得た。
ポリメチルメタクリレート(PMMA)の基体(三菱レイヨン(株)社製、アクリペットVH)を準備し、蒸着法により、厚さ50nmの金膜を片面に蒸着し7mmの幅に裁断して、同じ基板を7枚作製した。この基板の金蒸着面上に、1.で調製したT4−BSA結合体1〜7のクエン酸緩衝液による溶液を点着して乾燥させ、T4−BSA結合体を固定化した基板1〜7を作製した。
このように調製した基板1〜7をセンサチップの流路に取り付ける前に、Tween20(ポリオキシエチレン(20)ソルビタンモノラウラート、和光純薬社製)を0.05質量%の濃度で含むPBS溶液(pH7.4))を予め調製し、この溶液300μLを用いて3回繰り返し洗浄した。洗浄終了後、金蒸着膜上のT4−BSA結合体の未吸着部分のブロッキングを行うため、1質量%カゼイン(Thermo Scientific社製)を含むPBS溶液(pH7.4)を300μL添加し、1時間、室温で静置した。上記の洗浄用溶液で洗浄後、安定化剤としてImmunoassay Stabilizer(ABI社製)300μLを添加し、室温で30分間放置し、溶液を除去して乾燥機を用いて水分を完全に取り除いた。
特開2010−190880号公報の第2の実施形態の構成となるように、作製した7種類の基板を流路に封入し、流路型センサチップを作製した。
1.3μg/dLのサイロキシンを血清中に含む被検試料と、作製した抗サイロキシン抗体標識蛍光粒子を予め混合し、27℃、30℃、33℃の各温度条件で点着を行い、センサチップの測定エリア上を流速10μL/minとなるようにポンプ吸引を行いながら流下させた。フロー時間10分での蛍光量をシグナル値として取得し、30℃のシグナル値で規格化し、温度に対してプロットする。その3点から最小二乗法により得られる直線の傾きをシグナル変化率(%/℃)と定義する。T4標識率(T4/BSA)に対するそれぞれの%/℃の値を表2に示した。また、横軸にT4/BSA比、縦軸にシグナル変化率(%/℃)とした結果を図1に示した。
Claims (7)
- サイロキシン又はその誘導体とアルブミンとの結合体が固定化されており、
固定化された結合体におけるアルブミンに対する、サイロキシン又はその誘導体の分子数比が、8以上12以下である、
サイロキシン免疫測定用の基板。 - アルブミンが牛血清アルブミンである、請求項1に記載のサイロキシン免疫測定用の基板。
- サイロキシン又はその誘導体とアルブミンとの結合体が固定化されており、
固定化された結合体におけるアルブミンに対する、サイロキシン又はその誘導体の分子数比が、8以上12以下である、サイロキシン免疫測定用の基板に、
(1)サイロキシンを含む被検試料及び抗サイロキシン抗体標識蛍光粒子を接触させる工程、及び
(2)基板に結合した抗サイロキシン抗体標識蛍光粒子に基づく蛍光を測定する工程、
を含む、被検試料中のサイロキシンを測定する方法。 - アルブミンが牛血清アルブミンである、請求項3に記載の方法。
- 工程(2)において、表面プラズモン励起による蛍光測定または落射励起による蛍光測定により蛍光を測定する、請求項3又は4に記載の方法。
- アルブミンに対する、サイロキシン又はその誘導体の分子数比が、8以上12以下であるサイロキシン又はその誘導体とアルブミンとの結合体。
- アルブミンが牛血清アルブミンである、請求項6に記載のサイロキシン又はその誘導体とアルブミンとの結合体。
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Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2016136130A (ja) * | 2015-01-15 | 2016-07-28 | 三洋化成工業株式会社 | 免疫測定用試薬及び免疫測定方法 |
WO2017150516A1 (ja) * | 2016-02-29 | 2017-09-08 | 富士フイルム株式会社 | 生体試料中の測定対象物質を定量するためのキット及び生体試料中の測定対象物質を定量する方法 |
Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS51106724A (ja) * | 1975-02-20 | 1976-09-21 | Syva Co | Horyoodochironinnomenekigakutekibunsekiho |
JPS58174851A (ja) * | 1982-04-08 | 1983-10-13 | Toyo Jozo Co Ltd | 多成分同時測定法 |
JPS62142275A (ja) * | 1985-03-18 | 1987-06-25 | イ−ストマン コダツク カンパニ− | 安定な螢光希土類元素標識された生理学的に反応性の種 |
JP2003270252A (ja) * | 1997-05-23 | 2003-09-25 | Gamera Bioscience Corp | ミクロ流体工学システムでの流動運動を駆動するために向心的加速を使用するための装置および方法 |
JP2010032283A (ja) * | 2008-07-28 | 2010-02-12 | Fujifilm Corp | 免疫学的測定方法 |
JP2010190880A (ja) * | 2008-04-18 | 2010-09-02 | Fujifilm Corp | 光信号検出方法、光信号検出装置、光信号検出用試料セルおよび光信号検出用キット |
Family Cites Families (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4040907A (en) | 1974-06-20 | 1977-08-09 | Syva Company | Iodothyronine enzyme conjugates |
US4111656A (en) | 1975-06-26 | 1978-09-05 | Mallinckrodt, Inc. | Radioimmunoassay methods for the determination of l-triiodothyronine and thyroxine |
IL51667A (en) * | 1977-03-16 | 1979-10-31 | Miles Yeda Ltd | Immunoassay for the determination of a hapten |
JPH0694709A (ja) | 1992-09-14 | 1994-04-08 | Sanyo Chem Ind Ltd | 遊離甲状腺ホルモン測定用試薬およびその測定方法 |
JPH07146293A (ja) | 1993-11-25 | 1995-06-06 | Toray Ind Inc | 免疫測定法 |
JP2000206115A (ja) | 1999-01-11 | 2000-07-28 | Eiken Chem Co Ltd | 抗体断片を用いた免疫凝集反応試薬 |
JP2008249361A (ja) | 2007-03-29 | 2008-10-16 | Fujifilm Corp | 表面プラズモンセンサーおよび免疫学的測定方法 |
-
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Patent Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS51106724A (ja) * | 1975-02-20 | 1976-09-21 | Syva Co | Horyoodochironinnomenekigakutekibunsekiho |
JPS58174851A (ja) * | 1982-04-08 | 1983-10-13 | Toyo Jozo Co Ltd | 多成分同時測定法 |
JPS62142275A (ja) * | 1985-03-18 | 1987-06-25 | イ−ストマン コダツク カンパニ− | 安定な螢光希土類元素標識された生理学的に反応性の種 |
JP2003270252A (ja) * | 1997-05-23 | 2003-09-25 | Gamera Bioscience Corp | ミクロ流体工学システムでの流動運動を駆動するために向心的加速を使用するための装置および方法 |
JP2010190880A (ja) * | 2008-04-18 | 2010-09-02 | Fujifilm Corp | 光信号検出方法、光信号検出装置、光信号検出用試料セルおよび光信号検出用キット |
JP2010032283A (ja) * | 2008-07-28 | 2010-02-12 | Fujifilm Corp | 免疫学的測定方法 |
Cited By (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2016136130A (ja) * | 2015-01-15 | 2016-07-28 | 三洋化成工業株式会社 | 免疫測定用試薬及び免疫測定方法 |
WO2017150516A1 (ja) * | 2016-02-29 | 2017-09-08 | 富士フイルム株式会社 | 生体試料中の測定対象物質を定量するためのキット及び生体試料中の測定対象物質を定量する方法 |
JPWO2017150516A1 (ja) * | 2016-02-29 | 2018-12-27 | 富士フイルム株式会社 | 生体試料中の測定対象物質を定量するためのキット及び生体試料中の測定対象物質を定量する方法 |
US10816469B2 (en) | 2016-02-29 | 2020-10-27 | Fujifilm Corporation | Kit for quantitatively determining substance to be measured in biological sample and method for quantitatively determining substance to be measured in biological sample |
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