JP2012521402A - アジュバント添加した髄膜炎菌h因子結合タンパク質 - Google Patents
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Abstract
Description
本発明の組成物は、少なくとも1つの髄膜炎菌H因子結合タンパク質(fHBP)を含む。組成物が2つの異なるfHBPを含む場合、これらは、参考文献8に開示されるように、好ましくは異なるバリアントである。異なるfHBPは、完全には交差反応性でなく、髄膜炎菌に対する株の適用範囲のより広いスペクトルを提供する異なる免疫応答を生じる。
(a)(i)配列番号1と少なくともa%の配列同一性を有し、かつ/または(ii)配列番号1からの少なくともx個隣接するアミノ酸のフラグメントからなるアミノ酸配列を含む第1アミノ酸配列を含む第1ポリペプチド;
(b)(i)配列番号2と少なくともb%の配列同一性を有し、かつ/または(ii)配列番号2からの少なくともy個隣接するアミノ酸のフラグメントからなるアミノ酸配列を含む第2アミノ酸配列を含む第2ポリペプチド;
(c)(i)配列番号3と少なくともc%の配列同一性を有し、かつ/または(ii)配列番号3からの少なくともz個隣接するアミノ酸のフラグメントからなるアミノ酸配列を含む第3アミノ酸配列を含む第3ポリペプチド。
本発明の組成物は、ヒドロキシリン酸アルミニウムアジュバントを含む。ヒドロキシリン酸塩は、厳密なAlPO4からはヒドロキシル基の存在により区別できるが、このようなアジュバントは、簡便のためにしばしば「リン酸アルミニウム」とよばれる[13]。例えば、3164cm−1(例えば200℃に加熱時)でのIRスペクトルのバンドは、構造上のヒドロキシルの存在を示す。ヒドロキシリン酸アルミニウムアジュバントは、少量の硫酸塩も含有することがあり(すなわち、アルミニウムヒドロキシホスフェートサルフェート)、ナトリウムおよび/または塩化物イオンも含むことがある[14]。アジュバントは、沈殿により得ることができる。
上記のように、本発明は、髄膜炎菌fHBP抗原をヒドロキシリン酸アルミニウムアジュバントに吸着させるための方法を提供する。fHBP抗原(複数可)とヒドロキシリン酸アルミニウムと任意の緩衝剤との混合は、すべての成分を別々に組み合わせることによるか、または2つの成分を予め混合し、次いで予備混合物を第3成分と混合することによる任意の適切な順序で行うことができる。
ヒドロキシリン酸アルミニウムアジュバントを用いる代わりに、本発明は、「IC31」のような免疫賦活性オリゴヌクレオチドとポリカチオンポリマーとの粒子状複合体を用いることができる。上記の定義は、これに従って補正することができる。例えば、本発明は、髄膜炎菌fHBP抗原、および免疫賦活性オリゴヌクレオチドとポリカチオンポリマーとの粒子状複合体を含む免疫原性組成物を提供する。本発明は、または、2つの異なる髄膜炎菌fHBP抗原、および免疫賦活性オリゴヌクレオチドとポリカチオンポリマーとの粒子状複合体を含む免疫原性組成物も提供する。
fHBP抗原(複数可)に加えて、本発明の組成物は、髄膜炎菌またはその他の病原体、例えば肺炎球菌のようなその他の細菌からのさらなる抗原を含むことができる。
髄膜炎菌fHBPポリペプチド抗原(複数可)を含むことに加えて、組成物は、1または複数のさらなる髄膜炎菌ポリペプチド抗原(複数可)を含んでよい。よって、組成物は、287、NadA、NspA、HmbR、NhhA、Appおよび/またはOmp85からなる群より選択されるポリペプチド抗原を含んでよい。これらの抗原は、精製ポリペプチド、例えば組換えポリペプチドとして有用に存在する。抗原は、好ましくは、対象に投与した後に、殺菌性抗髄膜炎菌抗体を惹起する。組成物がPorA抗原を含む場合、いくつかの実施形態において、1つだけの髄膜炎菌PorA血清サブタイプが含まれる。いくつかの実施形態において、髄膜炎菌PorA外膜タンパク質は、組成物に含まれない。
髄膜炎菌fHBPポリペプチド抗原(複数可)を含むことに加えて、組成物は、1または複数の髄膜炎菌リポオリゴ糖(LOS)抗原(複数可)を含んでよい。髄膜炎菌LOSは、細菌の外膜の外側の単層で見出されるグルコサミンベースのリン脂質である。これは、リピドA部分とコアオリゴ糖領域とを含み、リピドA部分は、膜において疎水性アンカーとして作用する。オリゴ糖コア中の不均質性が、異なる髄膜炎菌株の間での構造的および抗原的多様性を生じ、これは、株を12のイムノタイプ(L1〜L12)に細分するために用いられている。本発明は、任意のイムノタイプ、例えばL1、L2、L3、L4、L5、L6、L7および/またはL8からのLOSを用いてよい。
髄膜炎菌fHBPポリペプチド抗原(複数可)を含むことに加えて、組成物は、1または複数の髄膜炎菌莢膜糖結合体を含んでよい。本発明の組成物は、髄膜炎菌血清群A、血清群C、血清群W135および血清群Yの1、2、3または4つ、例えばA+C、A+W135、A+Y、C+W135、C+Y、W135+Y、A+C+W135、A+C+Y、A+W135+Y、A+C+W135+Yなどからの莢膜糖の1または複数の結合体を含んでよい。結合体化血清群Cの莢膜糖を含む組成物は有用であり、そして血清群A、血清群C、血清群W135および血清群Yの4つ全てからの糖を含む組成物が理想的である。
本発明の組成物は、担体タンパク質と結合体化した肺炎球菌莢膜糖を含んでよい。
本発明の組成物は、さらなる病原体(複数可)からの抗原(複数可)を含むことができる。このような組合せの状況において、ヒドロキシリン酸アルミニウムアジュバントの使用と水酸化アルミニウムアジュバントの回避とが有利である。なぜなら、上記のように、追加の抗原(特に細菌莢膜糖)は、水酸化物塩に感受性であり得るからである。
−表面抗原HBsAgのようなB型肝炎ウイルスからの抗原。
−所望によりペルタクチンおよび/または凝集原2および3とも組み合わせた、Bordetella pertussisからの百日咳ホロ毒素(PT)および繊維状ヘマグルチニン(FHA)のようなB.pertussisからの抗原。
−ジフテリアトキソイドのようなジフテリア抗原。
−破傷風トキソイドのような破傷風抗原。
−Haemophilus influenzae B(Hib)からの、典型的には結合体化された糖抗原。
−不活化ポリオウイルス抗原(複数可)。
本発明は、(i)上記のようにヒドロキシリン酸アルミニウムアジュバントに吸着された少なくとも1つのfHBP抗原を含む第1成分と、(ii)非髄膜炎菌免疫原を含む第2成分とを含むキットも提供する。キットの成分は、混合して、複数の病原体に対して防御するために患者に投与するための免疫原組成物を得ることができる。
本発明は、患者に投与するための免疫原性組成物に関する。これらの組成物は、医薬的に許容可能であり、典型的には、適切な担体を含む。医薬的に許容される担体の詳細な考察は、参考文献105で入手可能である。
本発明は、本発明の組成物を哺乳類に投与するステップを含む、哺乳類における免疫応答を惹起するための方法も提供する。免疫応答は、好ましくは、髄膜炎菌に対して防御的であり、好ましくは抗体を含む。方法は、既に初回刺激(prime)された患者における追加免疫応答を惹起し得る。
本発明の実施は、そうでないと記載しない限り、当該技術の技量内の化学、生化学、分子生物学、免疫学および薬理学の従来の方法を用いる。このような技術は、文献に詳細に説明されている。例えば参考文献107〜113などを参照されたい。
異なる条件下での異なるアルミニウムアジュバントへのfHBPの吸着を研究した。単一fHBP(予測pI7.4)または2もしくは3のfHBPのハイブリッド混合物を含む種々のfHBP抗原を用いた。いくつかの実験は、追加の非fHBP髄膜炎菌抗原を含んだ。
アルミニウムベースのアジュバントを用いる代わりに、本発明は、IC31のような免疫賦活性オリゴヌクレオチドとポリカチオンポリマーとの粒子状複合体を用いることができる。
Claims (28)
- 少なくとも2つの異なる髄膜炎菌fHBP抗原を含む緩衝免疫原性組成物であって、前記髄膜炎菌fHBP抗原の両方は、ヒドロキシリン酸アルミニウムアジュバントに少なくとも85%吸着されている、組成物。
- (i)前記2つの異なるfHBP抗原のそれぞれが、5.0から7.0の間の等電点を有し、(ii)前記ヒドロキシリン酸アルミニウムアジュバントが、5.0から7.0の間のゼロ電荷点を有する、請求項1に記載の組成物。
- 前記緩衝組成物のpHが、5.0〜7.0の範囲である、請求項1または請求項2に記載の組成物。
- 2つの異なる髄膜炎菌fHBP抗原を含む免疫原性組成物であって、前記髄膜炎菌fHBP抗原の両方は、ヒドロキシリン酸アルミニウムアジュバントに吸着され、ここで、(i)前記髄膜炎菌fHBP抗原の両方は、5.0〜7.0の等電点を有し、(ii)前記ヒドロキシリン酸アルミニウムアジュバントは、5.0〜7.0のゼロ電荷点を有する、組成物。
- 2つの異なる髄膜炎菌fHBP抗原をヒドロキシリン酸アルミニウムアジュバントに吸着させて免疫原性組成物を得るための方法であって、(i)前記髄膜炎菌fHBP抗原の両方が、5.0から7.0の間の等電点を有し、(ii)前記ヒドロキシリン酸アルミニウムアジュバントが、5.0から7.0の間のゼロ電荷点を有し、(iii)前記fHBP抗原の両方の吸着が、5.0から7.0の間のpHで生じる、方法。
- 共にヒドロキシリン酸アルミニウムアジュバントに吸着された2つの異なる髄膜炎菌fHBP抗原を含む緩衝免疫原性組成物であって、(i)それぞれの髄膜炎菌fHBP抗原が、前記アジュバントのゼロ電荷点より高い等電点を有し、(ii)前記組成物が、前記アジュバントのゼロ電荷点の1.2pH単位以内のpHを有する、組成物。
- 2つの異なる髄膜炎菌fHBP抗原をヒドロキシリン酸アルミニウムアジュバントに吸着させるための方法であって、(i)前記髄膜炎菌fHBP抗原が共に前記アジュバントのゼロ電荷点よりも高い等電点を有し、(ii)それぞれの抗原の吸着が、前記アジュバントのゼロ電荷点の1.2pH単位以内の緩衝されたpHで生じる、方法。
- 2つの異なる髄膜炎菌fHBP抗原をヒドロキシリン酸アルミニウムアジュバントに吸着させるための方法であって、前記fHBP抗原の両方の吸着が、前記ヒドロキシリン酸アルミニウムのゼロ電荷点以下のpHで生じる、方法。
- pHを5.0〜7.0の範囲に維持する緩衝剤を含む、請求項4に記載の組成物。
- 前記髄膜炎菌fHBP抗原の両方が5.0から6.0の間の等電点を有する、前記請求項のいずれかに記載の方法または組成物。
- 前記ヒドロキシリン酸アルミニウムが、5.0から6.0の間の等電点を有する、請求項5に記載の方法または請求項4に記載の組成物。
- (i)前記髄膜炎菌fHBP抗原の両方が5.0から6.0の間の等電点を有し、(ii)前記ヒドロキシリン酸アルミニウムが、5.0から6.0の間の等電点を有する、前記請求項のいずれかに記載の方法または組成物。
- 前記免疫原性組成物が、pHを5.0〜7.0の範囲に維持する緩衝剤を含む、請求項12に記載の方法または組成物。
- 前記免疫原性組成物が、pHを5.0〜6.0の範囲に維持する緩衝剤を含む、請求項13に記載の方法または組成物。
- 前記pHを前記アジュバントのゼロ電荷点の1.2pH単位以内に維持する緩衝剤を含む、請求項6に記載の組成物。
- 前記アジュバントのゼロ電荷点の0.5pH単位以内のpHを有する、請求項4に記載の組成物。
- 前記pHを前記アジュバントのゼロ電荷点の0.5pH単位以内に維持する緩衝剤を含む、請求項16に記載の組成物。
- 前記2つの異なるfHBP抗原が、
(a)(i)配列番号1と少なくとも84%の配列同一性を有し、かつ/または(ii)配列番号1からの少なくとも20隣接アミノ酸のフラグメントからなるアミノ酸配列を含む第1ポリペプチド、
(b)(i)配列番号2と少なくとも84%の配列同一性を有し、かつ/または(ii)配列番号2からの少なくとも20隣接アミノ酸のフラグメントからなるアミノ酸配列を含む第2ポリペプチド、
(c)(i)配列番号3と少なくとも84%の配列同一性を有し、かつ/または(ii)配列番号3からの少なくとも20隣接アミノ酸のフラグメントからなるアミノ酸配列を含む第3ポリペプチド
から選択される(i)第1ポリペプチドおよび第2ポリペプチド、(ii)第1ポリペプチドおよび第3ポリペプチド、または(iii)第2ポリペプチドおよび第3ポリペプチドである、前記請求項のいずれかに記載の組成物または方法。 - 前記2つの異なるfHBP抗原が、
(a)配列番号4と少なくとも95%の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む第1ポリペプチド、
(b)配列番号6と少なくとも95%の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む第2ポリペプチド、
(c)配列番号5と少なくとも95%の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む第3ポリペプチド
から選択される(i)第1ポリペプチドおよび第2ポリペプチド、(ii)第2ポリペプチドおよび第3ポリペプチドである、請求項1から17のいずれか一項に記載の組成物または方法。 - 前記2つの異なるfHBP抗原が、(a)配列番号4と少なくとも95%の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む第1ポリペプチドと、(b)配列番号6と少なくとも95%の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む第2ポリペプチドである、請求項4に記載の組成物または請求項5に記載の方法または請求項4もしくは5に従属する場合の請求項9から14のいずれか一項に記載の方法もしくは組成物。
- 前記第1ポリペプチドが、配列番号23のアミノ酸配列を有するリポタンパク質であり、前記第2ポリペプチドが、配列番号25のアミノ酸配列を有するリポタンパク質である、請求項20に記載の組成物または方法。
- 水酸化アルミニウムアジュバントを含まない、前記請求項のいずれかに記載の組成物。
- 結合体化細菌莢膜糖を含む、請求項22に記載の組成物。
- 前記fHBPポリペプチドが、N末端システインにて脂質付加されており、前記脂質がパルミトイルを含む、前記請求項のいずれかに記載の組成物または方法。
- 前記ヒドロキシリン酸アルミニウムが、5.4から6.2の間のPZCを有する、前記請求項のいずれかに記載の組成物または方法。
- 前記ヒドロキシリン酸アルミニウムが、0.85から1.0の間のP/Alモル比を有する、前記請求項のいずれかに記載の組成物または方法。
- 前記ヒドロキシリン酸アルミニウムが、非晶質であり、直径10〜100nmの板を含む粒子状である、前記請求項のいずれかに記載の組成物または方法。
- Al+++濃度が、<2mg/mlである、前記請求項のいずれかに記載の組成物または方法。
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