JP2012255156A - 生物学的に活性な化合物の結合のための部分を有するポリアルキレングリコール - Google Patents
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Abstract
【解決手段】ポリアルキレングリコールポリマ−末端と特定の結合体を含む化合物を単独で、又は、抗ウィルス剤と組み合わせて用いて、多発性硬化症または易感染性ウイルス感染症の治療用の薬物としての使用及び慢性C型肝炎などのウィルス感染を治療する。
【選択図】なし
Description
HO-CH2CH2O-(CH2CH2O)n-CH2CH2-OH
-CH2CH2O-(CH2CH2O)n-CH2CH2-
al., J. Org. Chem., 60:331-336 (1995)。
coli細菌で作製され、糖付加はされていない。
AIDS Research and Human Retroviruses 8(2):191-197を参照されたい。それらの抗ウィルス活性のために、インターフェロン、特にアルファインターフェロンは、C型肝炎ウィルス(HCV)関連疾患の治療において治療薬として大きな注目を集めてきた。Hoofnagle
et M., in: Viral Hepatitis 1981 International Symposium, 1982, Philadelphia,
Franklin Institute Press; Hoofnagle et a1., 1986, New Eng. J. Med.
315:1575-1578; Thomson, 25 1987, Lancet 1:539-541 Kiyosawa et al., 1983, in:
Zuckerman, ed., Viral Hepatitis and Liver Disease, Allen K. Liss, New York pp.
895-897; Hoofnagle et al., 1985, Sem. Liv. Dis., 1985, 9:259-263を参照されたい。インターフェロン-ポリマ結合体は、例えば米国特許第4,766,106号、米国特許第4,917,888号、ヨーロッパ特許出願第0 236 987号、ヨーロッパ特許出願第0 510 356号、及び国際出願公報WO 95/13090に解説されている。
Liss, New York,
1988, pp. 537542を参照されたい。このように、米国で毎年輸血を受けるほぼ300万人のうちで、約15万人に急性C型肝炎が発症するであろう。C型肝炎に罹患する患者の多くは潜在性又は軽度の疾患を有することになるが、ほぼ50%が、変動性血清トランスアミナーゼの異常や、肝臓生検での炎症性病変を特徴とする慢性疾患状態に進行するであろう。このグループの最高約20%には、肝硬変が発症することになると推定されている。Koretz et al.,
1985, Gastroenterology 88:1251-1254を参照されたい。
本願発明は新規ポリアルキレングリコール化合物、これら化合物の結合体、およびその使用に関連する。
XおよびYは独立にO、S、CO、CO2、COS、SO、SO2、CONR'、SO2NR'、またはNR'であって、
QはC3乃至C8飽和もしくは不飽和環状アルキルまたは環状ヘテロアルキル(融合2環式および架橋2環式環構造を含む)、または置換もしくは非置換アルカリルであって、前記アルカリルのアルキルがC1乃至C20の置換もしくは非置換アルキルもしくはヘテロアルカリル基であって、当該置換基がハロゲン、ヒドロキシル、カルボニル、カルボキシラート、エステル、ホルミル、アシル、チオカルボニル、チオエステル、チオアセタート、チオホルマート、アルコキシル、ホスホリル、ホスホナート、ホスフィナート、アミノ、アミド、アミジン、イミン、シアノ、ニトロ、アジド、スルフヒドリル、スルファート、スルホンアミド、スルホニル、ヘテロシクリル、アラルキル、芳香族基、ヘテロ芳香族基、イミノ、スルファモイル、スルホナート、シリル、エーテル、およびアルキルチオからなるグループから選択される、化学基であって、
R’、Z、およびZ’はそれぞれ独立に、水素、直鎖または分岐鎖、飽和または不飽和C1乃至C20アルキルまたはヘテロアルキル基、C3乃至C8飽和もしくは不飽和環状アルキルもしくは環状へテロアルキル、置換もしくは非置換アリールもしくはヘテロアリール基または、または置換もしくは非置換アルカリルであって、前記アルカリルのアルキルがC1乃至C20の置換もしくは非置換アルキルもしくはヘテロアルカリル基であって、当該置換基がハロゲン、ヒドロキシル、カルボニル、カルボキシラート、エステル、ホルミル、アシル、チオカルボニル、チオエステル、チオアセタート、チオホルマート、アルコキシル、ホスホリル、ホスホナート、ホスフィナート、アミノ、アミド、アミジン、イミン、シアノ、ニトロ、アジド、スルフヒドリル、スルファート、スルホナート、スルファモイル、スルホンアミド、スルホニル、ヘテロシクリル、アラルキル、芳香族基、ヘテロ芳香族基、イミノ、スルファモイル、スルホナート、シリル、エーテルおよびアルキルチオからなるグループから選択される、化学基であって、
Rは化学式Iの化合物と、生物学的に活性な化合物またはその前駆体との間に結合を形成するのに好適な化学基であって、
mは0または1であって、
各nは独立に0または1乃至5の整数であって、
pは1、2、または3である、
化学式に従った構造を有する活性化されたポリアルキレングリコールポリマーに関連する。
QはC3乃至C8の飽和もしくは不飽和環状アルキルもしくは環状へテロアルキル、置換もしくは非置換アリールもしくはヘテロアリール基、または置換もしくは非置換アルカリルであって、前記アルカリルのアルキルがC1乃至C20の置換もしくは非置換アルキルもしくはヘテロアルカリル基であってある。
化学式に従った構造を有するポリアルキレングリコールポリマーに関連する。置換基が存在する場合には、前記置換基はハロゲン、ヒドロキシル、カルボニル、カルボキシラート、エステル、ホルミル、アシル、チオカルボニル、チオエステル、チオアセタート、チオホルマート、アルコキシル、ホスホリル、ホスホナート、ホスフィナート、アミノ、アミド、アミジン、イミン、シアノ、ニトロ、アジド、スルフヒドリル、スルファート、スルホンアミド、スルホニル、ヘテロシクリル、アラルキル、芳香族基、ヘテロ芳香族基、イミノ、スルファモイル、スルホナート、シリル、エーテル、またはアルキルチオであってよい。ヘテロシクリルおよびカルボシクリル基には、融合2環式および架橋2環式環構造が含まれる。
XはO、S、CO、CO2、COS、SO、SO2、CONR'、SO2NR'、またはNR'であって、
R’は水素、直鎖もしくは分岐鎖、飽和または不飽和C1乃至C20アルキルもしくはヘテロアルキル基、C3乃至C8飽和もしくは不飽和環状アルキルもしくは環状へテロアルキル、または置換もしくは非置換アルカリルであって、前記アルカリルのアルキルがC1乃至C20の置換もしくは非置換アルキルもしくはヘテロアルカリル基であって、当該置換基がハロゲン、ヒドロキシル、カルボニル、カルボキシラート、エステル、ホルミル、アシル、チオカルボニル、チオエステル、チオアセタート、チオホルマート、アルコキシル、ホスホリル、ホスホナート、ホスフィナート、アミノ、アミド、アミジン、イミン、シアノ、ニトロ、アジド、スルフヒドリル、スルファート、スルホナート、スルファモイル、スルホンアミド、スルホニル、ヘテロシクリル、アラルキル、芳香族基、ヘテロ芳香族基、イミノ、スルファモイル、スルホナート、シリル、エーテルおよびアルキルチオからなるグループから選択される、化学基であって、
ZおよびZ’は独立に水素、直鎖もしくは分岐鎖、飽和または不飽和C1乃至C20アルキルもしくはヘテロアルキル基、C3乃至C8飽和もしくは不飽和環状アルキルもしくは環状へテロアルキル、置換もしくは非置換アリールもしくはヘテロアリール基、または置換もしくは非置換アルカリルであって、前記アルカリルのアルキルがC1乃至C20の置換もしくは非置換アルキルもしくはヘテロアルカリル基であって、当該置換基がハロゲン、ヒドロキシル、カルボニル、カルボキシラート、エステル、ホルミル、アシル、チオカルボニル、チオエステル、チオアセタート、チオホルマート、アルコキシル、ホスホリル、ホスホナート、ホスフィナート、アミノ、アミド、アミジン、イミン、シアノ、ニトロ、アジド、スルフヒドリル、スルファート、スルホナート、スルファモイル、スルホンアミド、スルホニル、ヘテロシクリル、アラルキル、芳香族基、ヘテロ芳香族基、イミノ、スルファモイル、スルホナート、シリル、エーテルおよびアルキルチオからなるグループから選択される、化学基であって、このときZまたはZ’の少なくとも1つは水素ではなく、
Rは化学式Xの化合物と、生物学的に活性な化合物またはその前駆体との間に結合を形成するのに好適な化学基であって、
各nは独立に0または1乃至5の整数であって、
pは1、2、または3である、
ポリアルキレングリコールポリマーである、化学式に従った構造を有する活性化されたポリアルキレングリコールポリマーに関係する。
nは0または1乃至5の整数であって、XとZ含有炭素の間に0乃至5個のメチレンが存在する。
XおよびYは独立にO、S、CO、CO2、COS、SO、SO2、CONR'、SO2NR'、またはNR'であって、
QはC3乃至C8飽和もしくは不飽和環状アルキルもしくは環状へテロアルキル、置換もしくは非置換アリールもしくはヘテロアリール基、または置換もしくは非置換アルカリルであって、前記アルカリルのアルキルがC1乃至C20の置換もしくは非置換アルキルもしくはヘテロアルカリル基であって、当該置換基がハロゲン、ヒドロキシル、カルボニル、カルボキシラート、エステル、ホルミル、アシル、チオカルボニル、チオエステル、チオアセタート、チオホルマート、アルコキシル、ホスホリル、ホスホナート、ホスフィナート、アミノ、アミド、アミジン、イミン、シアノ、ニトロ、アジド、スルフヒドリル、スルファート、スルホナート、スルファモイル、スルホンアミド、スルホニル、ヘテロシクリル、アラルキル、芳香族基、ヘテロ芳香族基、イミノ、スルファモイル、スルホナート、シリル、エーテルおよびアルキルチオからなるグループから選択され、
R’および各Zは独立に上述の定義の通りであって、
mは0または1であって、
各Wは独立に水素またはC1乃至C7アルキルであって、
各nは独立に0または1乃至5の整数であって、
R’’は化学式IIIの化合物と、生物学的に活性な化合物またはその前駆体との間に結合を形成するのに好適な化学基である、化学式にしたがった構造を有してよい。複素環式および炭素環式基には融合2環式および架橋2環式環構造が含まれる。
各Wは独立に水素またはC1乃至C7アルキルであって、
R’’’は化学式IVの化合物と、生物学的に活性な化合物またはその前駆体との間に結合を形成するのに好適な化学基である、化学式に従った構造を有する。
nおよびZは定義の通りである、
化学式に従った構造を有する。
化学式にしたがった構造を有する。
化学式にしたがった構造を有する活性化されたポリアルキレングリコール化合物に関係する。
XおよびYは独立にO、S、CO、CO2、COS、SO、SO2、CONR'、SO2NR'、またはNR'であって、
QはC3乃至C8飽和もしくは不飽和環状アルキルもしくは環状へテロアルキル、置換もしくは非置換アリールもしくはヘテロアリール基、または置換もしくは非置換アルカリルであって、前記アルカリルのアルキルがC1乃至C20の置換もしくは非置換アルキルもしくはヘテロアルカリル基であって、当該置換基がハロゲン、ヒドロキシル、カルボニル、カルボキシラート、エステル、ホルミル、アシル、チオカルボニル、チオエステル、チオアセタート、チオホルマート、アルコキシル、ホスホリル、ホスホナート、ホスフィナート、アミノ、アミド、アミジン、イミン、シアノ、ニトロ、アジド、スルフヒドリル、スルファート、スルホナート、スルファモイル、スルホンアミド、スルホニル、ヘテロシクリル、アラルキル、芳香族基、ヘテロ芳香族基、イミノ、スルファモイル、スルホナート、シリル、エーテルおよびアルキルチオからなるグループから選択される、化学基であって、
各R’、Z、およびZ’は独立に水素、直鎖もしくは分岐鎖、飽和または不飽和C1乃至C20アルキルもしくはヘテロアルキル基、C3乃至C8飽和もしくは不飽和環状アルキルもしくは環状へテロアルキル、置換もしくは非置換アリールもしくはヘテロアリール基、または置換もしくは非置換アルカリルであって、前記アルカリルのアルキルがC1乃至C20の置換もしくは非置換アルキルもしくはヘテロアルカリル基であって、当該置換基がハロゲン、ヒドロキシル、カルボニル、カルボキシラート、エステル、ホルミル、アシル、チオカルボニル、チオエステル、チオアセタート、チオホルマート、アルコキシル、ホスホリル、ホスホナート、ホスフィナート、アミノ、アミド、アミジン、イミン、シアノ、ニトロ、アジド、スルフヒドリル、スルファート、スルホナート、スルファモイル、スルホンアミド、スルホニル、ヘテロシクリル、アラルキル、芳香族基、ヘテロ芳香族基、イミノ、スルファモイル、スルホナート、シリル、エーテルおよびアルキルチオからなるグループから選択される、化学基であって、
R*は連結基であって、
Bは生物学的に活性な化合物またはその前駆体であって、
mは0または1であって、
各nは独立に0または1乃至5の整数であって、
pは1、2、または3である、
化学式に従った構造を有する組成物を提供する。
XおよびYは独立にO、S、CO、CO2、COS、SO、SO2、CONR'、SO2NR'、またはNR'であって、
QはC3乃至C8飽和もしくは不飽和環状アルキルもしくは環状へテロアルキル(融合2環式および架橋2環式環構造を含む)、置換もしくは非置換アリールもしくはヘテロアリール基(融合2環式および架橋2環式環構造を含む)、または置換もしくは非置換アルカリルであって、前記アルカリルのアルキルがC1乃至C20の置換もしくは非置換アルキルもしくはヘテロアルカリル基であって、当該置換基がハロゲン、ヒドロキシル、カルボニル、カルボキシラート、エステル、ホルミル、アシル、チオカルボニル、チオエステル、チオアセタート、チオホルマート、アルコキシル、ホスホリル、ホスホナート、ホスフィナート、アミノ、アミド、アミジン、イミン、シアノ、ニトロ、アジド、スルフヒドリル、スルファート、スルホナート、スルファモイル、スルホンアミド、スルホニル、ヘテロシクリル、アラルキル、芳香族基、ヘテロ芳香族基、イミノ、スルファモイル、スルホナート、シリル、エーテルおよびアルキルチオからなるグループから選択される、化学基であって、
各R’、 およびZは独立に水素、直鎖もしくは分岐鎖、飽和または不飽和C1乃至C20アルキルもしくはヘテロアルキル基、C3乃至C8飽和もしくは不飽和環状アルキルもしくは環状へテロアルキル、置換もしくは非置換アリールもしくはヘテロアリール基、または置換もしくは非置換アルカリルであって、前記アルカリルのアルキルがC1乃至C20の置換もしくは非置換アルキルもしくはヘテロアルカリル基であって、当該置換基がハロゲン、ヒドロキシル、カルボニル、カルボキシラート、エステル、ホルミル、アシル、チオカルボニル、チオエステル、チオアセタート、チオホルマート、アルコキシル、ホスホリル、ホスホナート、ホスフィナート、アミノ、アミド、アミジン、イミン、シアノ、ニトロ、アジド、スルフヒドリル、スルファート、スルホナート、スルファモイル、スルホンアミド、スルホニル、ヘテロシクリル、アラルキル、芳香族基、ヘテロ芳香族基、イミノ、スルファモイル、スルホナート、シリル、エーテルおよびアルキルチオからなるグループから選択される、化学基であって、
R*はRと生物学的に活性な化合物またはその前駆体との反応によって形成された連結基であって、
BはRとの共役後の生物学的に活性な化合物またはその前駆体であって、
mは0または1であって、
各nは独立に0または1乃至5の整数である、
化学式に従った構造を有する組成物に関係する。
化学式の構造を有するポリエチレングリコールである。この実施態様では、Eはメチルであってよい。
化学式の構造を有するポリエチレングリコールである。ここで、よりさらなる実施態様では、Eは別の生物学的に活性なBへの結合を形成してよい。代替的には、EはBではない生物学的に活性な化合物との結合を形成してもよい。Eはまた、前記の生物学的に活性な化合物Bともう1つの結合を形成してもよい。
化学式にしたがった構造を有してよい。
R’’’は化学式IVの化合物と、生物学的に活性な化合物またはその前駆体との間に結合を形成するのに好適な化学基である、
化学式にしたがった構造を有する。
化学式に従った構造を有する組成物に関係する。
化学式の構造を有するポリエチレングリコールである。この実施例ではEはメチルであってよい。
化学式の構造を有するポリエチレングリコールである。ここで、Eはカルボン酸、エステル、アルデヒド、アルデヒド水和物、アセタール、ヒドロキシ、保護されたヒドロキシ、カルボナート、アルケニル、アクリラート、メタクリラート、アクリルアミド、置換もしくは非置換チオール、ハロゲン、置換もしくは非置換アミン、保護されたアミン、ヒドラジド、保護されたヒドラジド、スクシンイミジル、イソシアナート、イソチオシアナート、ジチオピリジン、ビニルピリジン、ヨードアセトアミド、エポキシド、ヒドロキシスクシンイミジル、アゾール、マレイミド、スルホン、アリル、ビニルスルホン、トレシル、スルホ-N-スクシンイミジル、ジオン、メシル、トシル、およびグリオキサールからなるグループから選択されてよい。さらに、Eは、化学式IIIであって、
各X、Y、Z、m、およびnは独立に定義されたとおりであって、
各Wは独立に水素またはC1乃至C7アルキルであって、
R’’は化学式IIIの化合物と、生物学的に活性な化合物またはその前駆体との間に結合を形成するのに好適な化学基である、
化学式にしたがった構造を有してよい。
各Wは独立に水素またはC1乃至C7アルキルであって、
R’’’は化学式IVの化合物と、生物学的に活性な化合物またはその前駆体との間に結合を形成するのに好適な化学基である、
化学式にしたがった構造を有してよい。
化学式に従った構造を有する組成物に関する。
化学式に従った構造を有する。
化学式に従った構造を有する。ある実施態様では、式XVIIIのR*はメチレン基であって、Bはアミノ基を有する生物学的に活性な分子であり、ここでのメチレン基はBのアミノ基との結合を形成する。
化学式にしたがった構造を有する。
独立に0または1乃至5の整数であって、Zは水素、直鎖もしくは分岐鎖、飽和または不飽和C1乃至C20アルキルもしくはヘテロアルキル基である。
化学式に従った組成物に関する。
化学式に従った組成物に関する。
XはO、S、CO、CO2、COS、SO、SO2、CONR'、SO2NR'、またはNR'であって、
R’は水素、直鎖もしくは分岐鎖、飽和または不飽和C1乃至C20アルキルもしくはヘテロアルキル基、C3乃至C8飽和もしくは不飽和環状アルキルもしくは環状へテロアルキル、置換もしくは非置換アリールもしくはヘテロアリール基、または置換もしくは非置換アルカリルであって、前記アルカリルのアルキルがC1乃至C20の置換もしくは非置換アルキルもしくはヘテロアルカリル基であって、当該置換基がハロゲン、ヒドロキシル、カルボニル、カルボキシラート、エステル、ホルミル、アシル、チオカルボニル、チオエステル、チオアセタート、チオホルマート、アルコキシル、ホスホリル、ホスホナート、ホスフィナート、アミノ、アミド、アミジン、イミン、シアノ、ニトロ、アジド、スルフヒドリル、スルファート、スルホナート、スルファモイル、スルホンアミド、スルホニル、ヘテロシクリル、アラルキル、芳香族基、ヘテロ芳香族基、イミノ、スルファモイル、スルホナート、シリル、エーテルおよびアルキルチオからなるグループから選択される、化学基であって、
各ZおよびZ’は独立に水素、直鎖もしくは分岐鎖、飽和または不飽和C1乃至C20アルキルもしくはヘテロアルキル基、C3乃至C8飽和もしくは不飽和環状アルキルもしくは環状へテロアルキル、置換もしくは非置換アリールもしくはヘテロアリール基、または置換もしくは非置換アルカリルであって、前記アルカリルのアルキルがC1乃至C20飽和または不飽和アルキルまたはヘテロアルカリル基であって、当該置換基がハロゲン、ヒドロキシル、カルボニル、カルボキシラート、エステル、ホルミル、アシル、チオカルボニル、チオエステル、チオアセタート、チオホルマート、アルコキシル、ホスホリル、ホスホナート、ホスフィナート、アミノ、アミド、アミジン、イミン、シアノ、ニトロ、アジド、スルフヒドリル、スルファート、スルホナート、スルファモイル、スルホンアミド、スルホニル、ヘテロシクリル、アラルキル、芳香族基、ヘテロ芳香族基、イミノ、スルファモイル、スルホナート、シリル、エーテルおよびアルキルチオからなるグループから選択される、化学基であって、ZおよびZ’の少なくとも1つは水素ではなく、
R*は架橋基であって、
Bは生物学的に活性な分子であって、
各nは0または1乃至5の整数であって、
pは1、2、または3である、
化学式に従った構造を有する組成物に関係する。
XはO、S、CO、CO2、COS、SO、SO2、CONR'、SO2NR'、またはNR'であって、nは0または1乃至5の整数である、
化学式にしたがった構造を有する組成物に関係する。
Zは直鎖もしくは分岐鎖、飽和または不飽和C1乃至C20アルキルもしくはヘテロアルキル基、C3乃至C8飽和もしくは不飽和環状アルキルもしくは環状へテロアルキル、置換もしくは非置換アリールもしくはヘテロアリール基、または置換もしくは非置換アルカリルであって、前記アルカリルのアルキルがC1乃至C20の置換もしくは非置換アルキルもしくはヘテロアルカリル基であって、当該置換基がハロゲン、ヒドロキシル、カルボニル、カルボキシラート、エステル、ホルミル、アシル、チオカルボニル、チオエステル、チオアセタート、チオホルマート、アルコキシル、ホスホリル、ホスホナート、ホスフィナート、アミノ、アミド、アミジン、イミン、シアノ、ニトロ、アジド、スルフヒドリル、スルファート、スルホナート、スルファモイル、スルホンアミド、スルホニル、ヘテロシクリル、アラルキル、芳香族基、ヘテロ芳香族基、イミノ、スルファモイル、スルホナート、シリル、エーテルおよびアルキルチオからなるグループから選択される、化学基であって、
R*はRと生物学的に活性な化合物またはその前駆体との反応によって形成される架橋基であって、BはRとの共役後の生物学的に活性な化合物またはその前駆体である。
化学式を有するポリエチレングリコールである。
化学式に従った構造を有するポリエチレングリコールである。この実施態様では、EはB以外の生物学的に活性な化合物またはその前駆体に結合してもよい。他の実施態様では、Eは生物学的に活性な化合物であるBとさらなる結合を形成してもよい。
各XおよびYは独立にO、S、CO、CO2、COS、SO、SO2、CONR'、SO2NR'、またはNR'であって、
QはC3乃至C8飽和もしくは不飽和環状アルキルもしくは環状へテロアルキル(融合2環式および架橋2環式環構造を含む)、置換もしくは非置換アリールもしくはヘテロアリール基、または置換もしくは非置換アルカリルであって、前記アルカリルのアルキルがC1乃至C20の置換もしくは非置換アルキルもしくはヘテロアルカリル基であって、当該置換基がハロゲン、ヒドロキシル、カルボニル、カルボキシラート、エステル、ホルミル、アシル、チオカルボニル、チオエステル、チオアセタート、チオホルマート、アルコキシル、ホスホリル、ホスホナート、ホスフィナート、アミノ、アミド、アミジン、イミン、シアノ、ニトロ、アジド、スルフヒドリル、スルファート、スルホナート、スルファモイル、スルホンアミド、スルホニル、ヘテロシクリル、アラルキル、芳香族基、ヘテロ芳香族基、イミノ、スルファモイル、スルホナート、シリル、エーテルおよびアルキルチオからなるグループから選択される、化学基であって、
R’および各Zは独立に上述の定義の通りであって、
mは0または1であって、
各nは独立に0または1乃至5の整数であって、
R’’は化学式IIIの化合物と、生物学的に活性な化合物またはその前駆体との間に結合を形成するのに好適な化学基であって、
各Wは独立に水素またはC1乃至C7アルキルである、
化学式に従った構造を有する。
各Wは独立に水素またはC1乃至C7アルキルであって、
R’’’は化学式IVの化合物と、生物学的に活性な化合物またはその前駆体との間に結合を形成するのに好適な化学基である、
化学式にしたがった構造を有する。
化学式に従った組成物に関係する。各XおよびYは独立にO、S、CO、CO2、COS、SO、SO2、CONR'、SO2NR'、またはNR'であって、各R’およびZは独立に水素、直鎖もしくは分岐鎖、飽和または不飽和C1乃至C20アルキルもしくはヘテロアルキル基であって、各Wは独立に水素またはC1乃至C7アルキルである。
XはO、S、CO、CO2、COS、SO、SO2、CONR'、SO2NR'、またはNR'であって、aは4乃至10000の整数であって、各nは独立に0または1乃至5の整数である、
化学式にしたがった組成物に関係する。
化学式に従った構造を有する。
化学式に従った構造を有する。
化学式に従った構造を有する。
化学式に従った構造を有する。
化学式に従った構造を有する。
化学式に従った構造を有する。
化学式に従った構造を有する。
化学式に従った構造を有する。R*はRと生物学的に活性な化合物Bまたはその前駆体上の反応基との反応によって形成される架橋基であって、R**はR’’と生物学的に活性な化合物B’またはその前駆体上の反応基との反応によって形成される架橋基であって、BおよびB’は独立に生物学的に活性な化合物またはその前駆体である。一部の実施態様では、BおよびB’は同種の生物学的に活性な化合物である。他の実施態様では、BおよびB’は異なる生物学的に活性な化合物である。さらに他の実施態様では、BおよびB’は同一の生物学的に活性な化合物である。さらなる実施態様では、R*およびR**は同一である。他の実施態様では、R*およびR**は異なる。
化学式に従った構造を有する。
XおよびYは独立にO、S、CO、CO2、COS、SO、SO2、CONR'、SO2NR'、またはNR'であって、
QはC3乃至C8飽和もしくは不飽和環状アルキルもしくは環状へテロアルキル(融合2環式および架橋2環式環構造を含む)、置換もしくは非置換アリールもしくはヘテロアリール基、または置換もしくは非置換アルカリルであって、前記アルカリルのアルキルがC1乃至C20の置換もしくは非置換アルキルもしくはヘテロアルカリル基であって、当該置換基がハロゲン、ヒドロキシル、カルボニル、カルボキシラート、エステル、ホルミル、アシル、チオカルボニル、チオエステル、チオアセタート、チオホルマート、アルコキシル、ホスホリル、ホスホナート、ホスフィナート、アミノ、アミド、アミジン、イミン、シアノ、ニトロ、アジド、スルフヒドリル、スルファート、スルホナート、スルファモイル、スルホンアミド、スルホニル、ヘテロシクリル、アラルキル、芳香族基、ヘテロ芳香族基、イミノ、スルファモイル、スルホナート、シリル、エーテルおよびアルキルチオからなるグループから選択される、化学基であって、
各R’、ZおよびZ’は独立に水素、直鎖もしくは分岐鎖、飽和または不飽和C1乃至C20アルキルもしくはヘテロアルキル基、C3乃至C8飽和もしくは不飽和環状アルキルもしくは環状へテロアルキル、置換もしくは非置換アリールもしくはヘテロアリール基、または置換もしくは非置換アルカリルであって、前記アルカリルのアルキルがC1乃至C20の置換もしくは非置換アルキルもしくはヘテロアルカリル基であって、当該置換基がハロゲン、ヒドロキシル、カルボニル、カルボキシラート、エステル、ホルミル、アシル、チオカルボニル、チオエステル、チオアセタート、チオホルマート、アルコキシル、ホスホリル、ホスホナート、ホスフィナート、アミノ、アミド、アミジン、イミン、シアノ、ニトロ、アジド、スルフヒドリル、スルファート、スルホナート、スルファモイル、スルホンアミド、スルホニル、ヘテロシクリル、アラルキル、芳香族基、ヘテロ芳香族基、イミノ、スルファモイル、スルホナート、シリル、エーテルおよびアルキルチオからなるグループから選択される、化学基であって、
R*は架橋基であって、
Bは生物学的に活性な化合物もしくはその前駆体であって
mは0もしくは1であって、
各nは0もしくは1乃至5の整数であって、
pは1、2、もしくは3である、
化学式に従った構造を有する組成物を有効な量投与するステップを含む、方法に関係する。
化学式に従った構造を有する組成物を有効な量投与するステップによって治療する方法に関係する。
R*はRと生物学的に活性な化合物またはその前駆体との反応によって形成される架橋基であって、BはRとの共役後の生物学的に活性な化合物またはその前駆体である。
化学式に従った構造を有する組成物を有効量投与するステップによる方法に関係する。
R*はRと生物学的に活性な化合物またはその前駆体との反応によって形成される架橋基であって、BはRとの共役後の生物学的に活性な化合物またはその前駆体である。
化学式に従った構造を有する組成物を有効量投与するステップによる方法に関係する。
化学式に従った構造を有する組成物を有効量投与するステップによる方法に関係する。
化学式に従った構造を有する組成物を有効量投与するステップによる方法に関連する。
XおよびYは独立にO、S、CO、CO2、COS、SO、SO2、CONR'、SO2NR'、またはNR'であって、
R’は水素、直鎖もしくは分岐鎖、飽和または不飽和C1乃至C20アルキルもしくはヘテロアルキル基、C3乃至C8飽和もしくは不飽和環状アルキルもしくは環状へテロアルキル、置換もしくは非置換アリールもしくはヘテロアリール基、または置換もしくは非置換アルカリルであって、前記アルカリルのアルキルがC1乃至C20の置換もしくは非置換アルキルもしくはヘテロアルカリル基であって、当該置換基がハロゲン、ヒドロキシル、カルボニル、カルボキシラート、エステル、ホルミル、アシル、チオカルボニル、チオエステル、チオアセタート、チオホルマート、アルコキシル、ホスホリル、ホスホナート、ホスフィナート、アミノ、アミド、アミジン、イミン、シアノ、ニトロ、アジド、スルフヒドリル、スルファート、スルホナート、スルファモイル、スルホンアミド、スルホニル、ヘテロシクリル、アラルキル、芳香族基、ヘテロ芳香族基、イミノ、スルファモイル、スルホナート、シリル、エーテルおよびアルキルチオからなるグループから選択される、化学基であって、
各ZおよびZ’は独立に水素、直鎖もしくは分岐鎖、飽和または不飽和C1乃至C20アルキルもしくはヘテロアルキル基、C3乃至C8飽和もしくは不飽和環状アルキルもしくは環状へテロアルキル、置換もしくは非置換アリールもしくはヘテロアリール基、または置換もしくは非置換アルカリルであって、前記アルカリルのアルキルがC1乃至C20の置換もしくは非置換アルキルもしくはヘテロアルカリル基であって、当該置換基がハロゲン、ヒドロキシル、カルボニル、カルボキシラート、エステル、ホルミル、アシル、チオカルボニル、チオエステル、チオアセタート、チオホルマート、アルコキシル、ホスホリル、ホスホナート、ホスフィナート、アミノ、アミド、アミジン、イミン、シアノ、ニトロ、アジド、スルフヒドリル、スルファート、スルホナート、スルファモイル、スルホンアミド、スルホニル、ヘテロシクリル、アラルキル、芳香族基、ヘテロ芳香族基、イミノ、スルファモイル、スルホナート、シリル、エーテルおよびアルキルチオからなるグループから選択され、ZまたはZ’の少なくとも1つが水素ではない、化学基であって、
R*は架橋基であって、
Bは生物学的に活性な化合物であって
mは0もしくは1であって、
各nは0もしくは1乃至5の整数であって、
pは1、2、もしくは3である、
化学式に従った構造を有する組成物を有効な量投与するステップを含む、方法に関係する。
化学式に従った構造を有する組成物を有効量投与するステップを含む、方法に関係する。
化学式に従った構造を有する組成物を有効量投与するステップによる方法に関係する。
化学式に従った構造を有する組成物を有効量投与するステップによる方法に関係する。
本発明は、多種の疾患及び異常の治療において有用な化合物及び方法に関する。以下に詳述するように、このような疾患及び異常には、限定はしないが、肝炎感染などのウィルス感染症や、多発性硬化症などの自己免疫疾患を含め、インターフェロン療法による治療に感受性のあるものが特に含まれる。
19:1177 (1983)を参照されたい)、
ヒドラジド(例えばAndresz et al. Makromol. Chem. 179:301 (1978)を参照されたい)、スクシンイミジルプロピオネート及びスクシンイミジルブタノエート(Olson et al. in Poly (ethylene glycol) Chemistry & Biological
Applications, pp 170-181, Harris & Zaplipsky Eds., ACS, Washington, DC,
1997を参照されたい;さらに米国特許第5,672,662号も参照されたい)、 スクシンイミジルスクシネート(例えばAbuchowski et al. Cancer Biochem. Biophys.
7:175 (1984) and Joppich et ai. Macrolol.
Chem. 180:1381(1979)を参照されたい、スクシンイミジルエステル(例えば米国特許第4,670,417号を参照されたい)、ベンゾトリアゾールカルボネート(例えば米国特許第5
5,650,234号を参照されたい)、グリシジルエーテル(例えばPitha et al. Eur. J.
Biochem. 94:11(1979), Elling et al., Biotech. Appl.
Biochem. 13:354 (1991)を参照されたい、オキシカルボニルイミダゾール(例えばBeauchamp,
et al., Anal. Biochem. 131:25 (1983). Tondelli et al. J. Controlled Release 1:251
(1985)を参照されたい)、p-ニトロフェニルカルボネート(例えばVeronese, et al., Appl.
Biochem. Biotech., 11:141 (1985); 及びSartore et al., Appl. Biochem. Biotech..
27:45 10 (1991)を参照されたい)、アルデヒド(例えばHarris et al. J.
Polym. Sci.. Chem. Ed. 22:341 (1984), 米国特許第 5,824,784, 米国特許第 5,252,714を参照されたい)、マレイミド(例えばGoodson et al. Bio/Technology 8:343 (1990), Romani et al. in
Chemistry of Peptides and Proteins 2:29 (1984);及びKogan,
Synthetic Comm. 22:2417 (1992)を参照されたい)、オルトピリジル-ジスルフィド(例えばWoghiren, et al. Bioconj. Chem. 4:314 (1993)を参照されたい)、アクリロイル(例えば Sawhney 15 et al., Macromolecules, 26:581 (1993)を参照されたい)、ビニルスルホン(例えば米国特許第 5,900,461号を参照されたい)、がある。加えて、本発明のポリマの2つの分子をアミノ酸リジンに連結して、二置換リジンを形成することができ、次にこの二置換リジンをN-ヒドロキシスクシンイミドでさらに活性化して、活性N-スクシンイミジル部分を形成することもできる(例えば米国特許第5,932,462号を参照されたい)。
Pergamon Press, Inc., USA, 1996) 及びメルク・インデックス(Thirteenth Edition, Merck & Co., Inc., USA, 2001)を参照されたい。
38(1):582-3 (1997)を参照されたい);アルコールをリン酸基と反応させると形成されるリン酸エステル結合;アルデヒド及びアルコールの反応生成物であるアセタール結合;ギ酸及びアルコールの反応生成物であるオルトエステル結合;PGC末端などのアミン基と、ペプチドのカルボキシル基との間で形成されるペプチド結合;及びポリマ末端などのホスホールアミジト基とオリゴヌクレオチドの5'側ヒドロキシル基との間で形成されるオリゴヌクレオチド結合、がある。
式II:
E-(O-CH2CH2)a-
アミン、保護されたアミン、ヒドラジド、保護されたヒドラジド、 スクシンイミジル、イソシアネート、イソチオシアネート、ジチオピリジン、ビニルピリジン、ヨードアセトアミド、エポキシド、ヒドロキシスクシンイミジル、アゾール、マレイミド、スルホン、アリル、ビニルスルホン、トレシル、スルホ-N-スクシンイミジル、ジオン、メシル、トシル、又はグリオキサールであってよい。R"及びR"'は、Rとの反応が起きないように適合性でなければならないことを理解されたい。
又はmPEGである)。
R*は、上述したように、Rの、生物活性化合物B上の対応する反応基との反応から形成される連結部分である。例えば、R*は、例えばカルボン酸、エステル、アルデヒド、アルデヒド水和物、アセタール、ヒドロキシ、保護されたヒドロキシ、カルボネート、アルケニル、アクリレート、メタクリレート、アクリルアミド、置換もしくは非置換のチオール、ハロゲン、置換もしくは非置換のアミン、保護されたアミン、ヒドラジド、保護されたヒドラジド、スクシンイミジル、イソシアネート、イソチオシアネート、ジチオピリジン、ビニルピリジン、ヨードアセトアミド、エポキシド、ヒドロキシスクシンイミジル、アゾール、マレイミド、スルホン、アリル、ビニルスルホン、トレシル、スルホ-N-スクシンイミジル、ジオン、メシル、トシル、又はグリオキサール官能基部分の、生物活性化合物又はその前駆体との反応から形成される。
及び生物活性分子(B)から形成され、式XV:
又はC1乃至C20アルキル又はヘテロアルキル基である。
イソシアネート、イソチオシアネート、ジチオピリジン、ビニルピリジン、ヨードアセトアミド、エポキシド、ヒドロキシスクシンイミジル、アゾール、マレイミド、スルホン、アリル、ビニルスルホン、トレシル、スルホ-N-スクシンイミジル、ジオン、メシル、トシル、及びグリオキサール部分から選択される。
スルホン、アリル、ビニルスルホン、トレシル、スルホ-N-スクシンイミジル、
ジオン、メシル、トシル、及びグリオキサール部分から選択される。
アミン、保護されたアミン、ヒドラジド、保護されたヒドラジド、スクシンイミジル、イソシアネート、イソチオシアネート、ジチオピリジン、ビニルピリジン、ヨードアセトアミド、エポキシド、ヒドロキシスクシンイミジル、アゾール、マレイミド、スルホン、アリル、ビニルスルホン、トレシル、スルホ-N-スクシンイミジル、ジオン、メシル、トシル、及びグリオキサール部分から選択される。
スルホン、アリル、ビニルスルホン、トレシル、スルホ-N-スクシンイミジル、ジオン、メシル、トシル、及びグリオキサール部分から選択され、Rと同じでも、又は異なっていてもよい。
IFN-ベータ」、「PEG IFN-β」「PEG化 IFN-ベータ」、又は「PEG化
IFN-β」)の投与は、優れた治療上の利益を提供しながらも、従来より実施されてきたインターフェロンアルファ又はベータ治療計画に通常伴う望ましくない副作用を実質的に低減又は完全に消失させるものである。
インターフェロン-1a」、「ベータ-インターフェロン1a」、「ベータ-インターフェロン-1a」、「ベータ IFN
1a」、「ベータ IFN-1a」、「ベータ-IFN 1a」、「ベータ-IFN-1a」、「βインターフェロン1a」、「β インターフェロン-1a」、「β-インターフェロン1a」、「β-インターフェロン-1a」、「βIFN
1a」、「βIFN-1a」、「β-IFN 1a」、「β-IFN-1a」、「インターフェロン ベータ 1a」、「インターフェロン ベータ-1a」、「インターフェロン-ベータ 1a」、「インターフェロン-ベータ-1a」、「インターフェロンβ 1a」、「インターフェロンβ-1a」、「インターフェロン-β 1a」、「インターフェロン-β-1a」「IFN ベータ1a」、「IFN ベータ-1a」、「IFN-ベータ1a」、「IFN- ベータ-1a」、「IFNβ 1a」、「IFN β-1a」、「IFN-β1a」、「IFN-β-1a」は、天然型(野生型)アミノ酸配列を有する組換え又は合成により作製されたインターフェロンベータを言うために、ここで交換可能に用いられている。
(1993) 及び Pepinsky, et al., J.
Pharmacology and Experimental Therapeutics, 297:1059-1066 (2001)を参照されたい。
ISIS-14803、がある。
N. Engl. J. Med.334:77-81 (1996);Enomoto et al., J. Clin. Invest. 96:224-30
(1995)を観察されたい。 HCV-1b感染患者の応答率は40%未満である。米国特許第 6,030,785号を参照されたい。同様な低い応答率はHCV-1a感染患者でも観察されている。上書;Hoofnagel et al., Intervirology 37:87-100
(1994)を参照されたい。しかしながら、HCV-2感染患者の応答率はほぼ80%である。米国特許第 6,030,785号;Fried et al., Semin. Liver Dis. 15:82-91
(1995)を参照されたい。実際、HCV遺伝子型1bのNS5Aタンパク質の独立した領域のアミノ酸配列が、インターフェロンに対する感受性と相関していることが判明している。引用をもってここに援用する米国特許第 6,030,785号を参照されたい。さらにEnomoto et al. 1996;
Enomoto et al. 1995も参照されたい。この領域は、インターフェロン感受性決定領域(ISDR)と同定されている。上書を参照されたい。
86:1609-1614を参照されたい。
処置前基線測定値と、処置終了時の力価を比較することにより、HCV RNA データを解析してよい。4週目までにHCV RNAが減少していれば、化合物の抗ウィルス活性の証拠となる。Kleter et al., 1993, Antimicrob. Agents Chemother. 37(3):595-97; Orito et
al., 1995, J. Medical Virology, 46:109-115を参照されたい。少なくとも二桁の変化 (>2 log)が、抗ウィルス活性の証拠と解釈される。
J. Med. 321:1501-1506を参照されたい。ALT は、肝細胞が破壊されたときに放出される酵素であり、HCV感染の症状である。インターフェロンは酵素2',5'オリゴアデニル酸シンターゼ (2'5'OAS)の合成を引き起こすが、これがひいてはウィルスmRNAの分解につながる。Houglum, 1983, Clinical
Pharmacology 2:20-28を参照されたい。2'5'OASの血清レベルの上昇は、ALT レベルの低下と一致する。
実施例1: 活性化ポリアルキレングリコールの合成
A)アルコールのアルキル化
活性化ポリアルキレングリコールは、遊離末端水酸官能基を有するポリアルキレングリコールをアルキル化することにより、合成される。一般的反応をスキームI:
ダルトン(Da)のポリエチレングリコール (PEG) 又はモノメトキシポリエチレングリコール(mPEG)である。
0.1 mmol、スンビオ社)をNaH (12 mg, 0.5 mmol)のTHF (35 mL)溶液で処理した。次に、50等量の3-ブロモ-2-メチルプロペン(3.34
g, 5 mmol)及び触媒量のKI をこの混合液に加えた。その結果得られた混合液を還流するまで16時間、加熱した。水(1 mL)をその後加え、溶媒を真空下で取り除いた。その残渣に CH2Cl2
(25 mL)を加え、 有機層を分離し、無水Na2SO4上で乾燥させ、体積をほぼ2 mLまで減少させた。このCH2Cl2 溶液をエーテル(150 mL)に滴下で加えた。その結果得られた白色の沈殿物を採集すると、1.9 g の化合物1が得られた。 1HNMR
(CDC13, 400 MHz)は、δ4.98
(s, 1H), 4.91 (s, 1H), 1.74 (s, 3H)を示した。
(20 mL)及びCH2Cl2
(2 mL)溶液にBH3 のTHF (1.0 M, 3.5 mL)溶液を加えた。この混合液を氷槽で1時間、攪拌した。この混合液にNaOH をゆっくりと加え(2.0 M, 2.5 mL)、次に 30% H2O2 (0.8 mL)を加えた。この反応液を室温まで温め、16時間、攪拌した。上記の実験手法に従って(CH2Cl2、エーテルから沈殿させたもの)、1.8
g の 2 を白色の固体として生成させた。1HNMR (CDCl3、 400 MHz)はδ1.80 (m, 1H), 0.84 (d, 3H)を示した。
(2 mL)を加えた後、当該混合液を室温で1時間、攪拌した。上記の実験手法に従って3 (mPEG-O-2メチルプロピオンアルデヒド、120 mg)を白色の固体として生成させた。1HNMR (CDCl3、400 MHz)はδ9.75 (s, 1H), 2.69 (m, 1H), 1.16 (d, 3H)を示した。
(P-OH)と反応させてエーテル(H)を生成させる。次にこの化合物を、第一アルコール(I)へのヒドロ硼素化、続く酸化を通じてアルデヒド(J)に転化させる。これらの化合物において、nはゼロ乃至5までの整数であり、dはゼロ又は1乃至4までの整数であり、そしてZは直鎖もしくは分枝鎖、飽和もしくは不飽和C1乃至C20アルキル又はヘテロアルキル基であってよい。さらにZは、C3 乃至C7 飽和もしくは不飽和
環状アルキル又は環状ヘテロアルキル、置換もしくは非置換のアリール又はヘテロアリール基または置換もしくは非置換アルカリルであって、前記アルカリルのアルキルがC1乃至C20の置換もしくは非置換アルキルもしくはヘテロアルカリル基であってもよい。置換化合物の場合、前記置換基は、ハロゲン、ヒドロキシル、カルボニル、カルボキシレート、エステル、ホルミル、アシル、チオカルボニル、チオエステル、チオアセテート、チオホルメート、アルコキシル、ホスホリル、ホスホネート、ホスフィネート、アミノ、アミド、アミジン、イミン、シアノ、ニトロ、アジド、スルフヒドリル、スルフェート、スルホネート、スルファモイル、スルホンアミド、スルホニル、ヘテロシクリル、アラルキル、芳香族部分、ヘテロ芳香族部分、イミノ、シリル、エーテル、又はアルキルチオであってよい。
(mPEG)である。
g, 30 mmol)を加えた。この反応混合液を還流するまで16時間、加熱した。この混合液に10% クエン酸(2.5 mL)を加え、溶媒を真空下で取り除いた。残渣を酢酸エチル(3 x 15 mL)で抽出し、配合された有機層を飽和NaCl (10 mL)で洗浄し、乾燥させ、濃縮して化合物4 (3.3 g, 93 %)を生成させた。1HNMR (CDC13, 400 MHz)はδ7.29 (m, 2H), 6.92 (m, 2H), 5.14 (s, 1H), 5.01 (s, 1H), 4.56 (s, 2H), 4.46 (s, 2H), 1.85 (s, 3H)を示した。
400 MHz)はδ7.31 (m, 2H), 6.94 (m, 2H), 5.16 (s, 1H), 5.01 (s, 1H), 5.03 (s, 2H), 4.59 (s, 2H), 4.44 (s, 2H), 3.67 (s, 3H), 1.85 (s, 3H)を示した。この油分(2.4 g, 9.4 mmol)をTHF (20 mL)に溶解させ、LiBr
(2.0 g, 23.0mmol)を加えた。この反応混合液を還流するまで1時間加熱した後、室温まで冷ました。水(2.5 mL)をこの混合液に加え、溶媒を真空下で取り除いた。残渣を酢酸エチル(3 x
15 mL)で抽出し、配合された有機層を飽和NaCl (10
mL)で洗浄し、無水Na2SO4で乾燥させ、濃縮して所望の臭化物5(2.3 g, 96%)を淡い黄色の油分として生成させた。1HNMR (CDCl3,
400 MHz)はδ7.29 (m, 2H), 6.88 (m, 2H), 5.11 (s, 1H), 4.98 (s, 1H), 4.53 (s, 2H), 4.44 (s, 2H), 1.83 (s, 3H)を示した。
g, 22.8 mmol)を触媒量のKIと一緒にこの混合液に加えた。その結果得られた混合液を還流するまで16時間、加熱した。水(1.0 mL)をこの混合液に加え、溶媒を真空下で取り除いた。残渣にCH2Cl2(25 mL)を加え、有機層を分離し、無水Na2SO4で乾燥させ、体積をほぼ2 mLまで減少させた。エーテル溶液 (150 mL)に滴下で加えて得られた白色の沈殿物を採集して、 6 (1.5 g)を白色の粉末として得た。1HNMR (CDC13,
400 MHz)はδ7.21 (d, 2H), 6.90 (d, 2H), 5.01 (s, 1H), 4.99 (s, 1H), 4.54 (s, 2H), 4.43 (s, 2H), 1.84 (s, 3H)を示した。
(10 mL)及びCH2Cl2
(2 mL溶液に、BH3/THF (1.0 M, 3.5 mL)を加え、その反応液を1時間、攪拌した。 2.0 M のNaOH 溶液2.5 mL)をゆっくり加えた後、30% H2O2 (0.8 mL)を加えた。その反応混合液を室温まで戻し、16時間、攪拌した。上記の実験手法(CH2Cl2、エーテルから沈殿させたもの)に従って7 (350 mg)を白色の固体として生成させた。1HNMR (CDCl3,
400 MHz)はδ7.21 (d, 2H), 6.84 (d, 2H), 4.54 (s, 2H), 2.90 (m, 2H), 1.96 (d, 3H)を示した。
mg)を加えた。1HNMR (CDCl3, 400 MHz) はδ9.76 (s, 1H), 7.21 (d, 2H), 6.78 (d, 2H), 4.44 (s, 2H), 4.14 (m, 2H), 2.85(m, 1H), 1.21 (d, 3H)を示した。この混合液に飽和NaHCO3 (0.5 mL)及びNa2S2O3 (0.5
mL)を加え、攪拌を室温で1時間、継続した。上記の実験手法に従い(CH2Cl2溶液、エーテルから沈殿させたもの)、 8(92 mg)を白色の固体として生成させた。
(9)をスキームV:
30 mmol)を加えた。この反応混合液を還流するまで16時間、加熱した。この混合液に10% クエン酸(2.5 mL)を加え、溶媒を真空下で取り除いた。残渣を酢酸エチル(3 x 15 mL)で抽出し、配合した有機層を飽和NaCl (10 mL)で洗浄し、乾燥させ、濃縮して化合物10 (3.2 g, 90 %)を生成させた。1HNMR (CDCl3,
400 MHz)はδ7.26 (m, 1H), 6.94 (m, 2H), 6.86 (m, 1H), 5.11 (s, 1H), 5.01 (s, 1H), 4.61 (s, 1H), 4.44 (s, 2H), 1.82 (s, 3H)を示した。
15.7 mmol)及びTEA (2.8 mL, 20
mmol)を化合物10 (2.0 g, 11.2 mmol)の0℃のCH2Cl2
(25 mL) 溶液に0℃で加え、この反応液を冷蔵庫内に16時間、置いた。通常の作業で、淡い黄色の油分(2.5 g, 87%)が生成された。1HNMR (CDCl3, 400 MHz)はδ7.31 (m, 1H), 7.05 (m, 2H), 6.91 (m, 1H), 5.16 (s, 1H), 5.04 (s, 1H), 4.59 (s, 1H), 4.46 (s, 2H), 3.71 (s, 3H), 1.84 (s, 3H)を示した。この油分(2.4 g, 9.4 mmol)をTHF (20 mL)に溶解させ、LiBr (2.0
g, 23.0 mmol)を加えた。この反応混合液を還流するまで1時間、加熱した後、室温まで冷ました。この混合液に水(2.5 mL)を加え、溶媒を真空下で取り除いた。残渣を酢酸エチル (3 x 15 mL)で抽出し、配合した有機層を飽和NaCl(10 mL)で洗浄し、無水Na2SO4で乾燥させ、濃縮して所望の臭化物11 (2.2 g, 92 %)を淡い黄色の油分として生成させた。1HNMR (CDCl3,
400 MHz)はδ7.29 (m, 1H), 6.98 (m, 2H), 6.85 (m, 1H), 5.14 (s, 2H), 4.98 (s, 2H), 4.50 (s, 2H), 4.44 (s, 2H), 1.82 (d, 3H)を示した。
400 MHz) はδ7.19 (m, 1H), 6.88 (m, 2H), 6.75 (m, 1H), 4.44 (s, 2H), 4.10 (m, 2H), 1.82 (d, 3H)を示した。
(7.5 mL)及び CH2Cl2
(2.5 mL)溶液に、BH3/THF (1.0 M, 3.5 mL)を加え、この反応液を1時間、攪拌した。2.0 Mの NaOH 溶液 (3 ml)をゆっくり加えた後、30% H2O2 (0.85 mL)を加えた。この反応混合液を室温まで戻し、16時間、攪拌した。上記の実験手法に従って(CH2Cl2, エーテルから沈殿させたもの)
13 (450 mg)を白色の固体として生成させた。
1HNMR (CDCl3,
400 MHz)はδ7.15 (m, 1H), 6.84 (m, 2H), 6.69 (m, 1H), 4.50 (s, 2H), 2.90 (m, 2H), 1.95 (d, 3H)を示した。
400 MHz)はδ9.74 (s, 1H), 7.17 (m, 1H), 6.86 (m, 2H), 6.74 (m, 1H), 4.48 (s, 2H),4.15 (m, 2H), 2.78(m, 1H), 1.22 (d, 3H)を示した。この混合液に飽和NaHCO3 (0.5 mL)及びNa2S2O3 (0.5
mL)を加え、 攪拌を室温で1時間、続けた。上記の実験手法に従って(CH2Cl2
溶液、エーテルから沈殿させたもの)、9 (142 mg)を白色の固体として生成させた。
遊離末端水酸官能基を有するポリアルキレングリコールと芳香族アルコールとの間のミツノブ反応により、活性化ポリアルキレングリコールが合成される。この反応スキームをスキームVIに概観する。
mL, アルドリッチ)に溶解させた。攪拌しながらTEA (2.2
mL, 16 mmol, アルドリッチ)をゆっくり加えた。ピリジン-三酸化硫黄(SO3-PY)錯体(2.5 g,
16 mmol, アルドリッチ) をジメチルスルホキシド (9 mL, アルドリッチ)中に完全に溶解させ、この溶液を前記アルコールによくかきまぜながら滴下で加えた。1時間、室温で攪拌した後、この反応液をCH2Cl2で希釈し、その後氷温の水で洗浄した。有機層をNa2SO4で乾燥させ、濾過し、乾燥するまで濃縮した。ヘキサン-酢酸エチル(5:1, その後 2:1)を溶出剤として用いたシリカゲル・クロマトグラフィで精製すると、488 mg (49%)の4-ヒドロキシフェニルアセトアルデヒド(15)が生成された。
mmol) 及び4-ヒドロキシフェニルアセトアルデヒド(15)(39 mg, 0.29 mmol)をトルエンと一緒に4回共沸させた後、無水CH2Cl2
(2 mL, アルドリッチ)中に取り込んだ。この溶液にトリフェニルホスフィン(PPh3; 66 mg, 0.25 mmol, アルドリッチ)を加えた後、ジイソプロピルアゾジカルボキシレート (DIAD; 49μL, 0.25 mmol, アルドリッチ)を攪拌しながら加えた。室温で3日間攪拌した後、この反応混合液を、よく攪拌した後のジエチルエーテルに滴下で加えた。その結果得られた沈殿物を濾過で単離し、ジエチルエーテルで3回、洗浄した。粗物質をCH2Cl2 で採取し、水で洗浄した。有機層をNa2SO4で乾燥させ、濾過し、乾燥するまで濃縮した。その物質を最少のCH2Cl2で採取した後、攪拌済みのジエチルエーテルに滴下で加えることで沈殿させた。この物質を濾過で採集し、ジエチルエーテルで3回洗浄し、乾燥させて63 mg 62%)のmPEG-O-p-フェニルアセトアルデヒド (16) を生成させた。
(Heterocycles, 2000,53,777-784)の合成と同様な合成法で調製した。3-(4-ヒドロキシフェニル)-1-プロパノール(1.0 g, 6.6 mmol, アルドリッチ)をジメチルスルホキシド (8 mL, アルドリッチ)に溶解させた。TEA (2.0 mL, 14 mmol, アルドリッチ)を攪拌しながらゆっくり加えた。ピリジン-三酸化硫黄
(SO3・py)錯体(2.3 g, 15 mmol, アルドリッチ)をジメチルスルホキシド(9 mL,アルドリッチ)に完全に溶解させ、この溶液を滴下で前記アルコールによく攪拌しながら加えた。1時間、室温で攪拌した後、この反応液をCH2Cl2で希釈し、氷温の水で洗浄した。有機層をNa2SO4で乾燥させ、濾過し、乾燥するまで濃縮した。ヘキサン-酢酸エチルを溶出剤(5:1,次に2:1)として用いたシリカゲル・クロマトグラフィによる精製で745 mg (75%)の4-ヒドロキシフェニルプロピオンアルデヒドが得られた。
mmol)及び4-ヒドロキシフェニルプロピオンアルデヒド (40
mg, 0.27 mmol)をトルエンと一緒に4回、共沸させた後、無水CH2Cl2
(2 mL, アルドリッチ)で採取した。この溶液にトリフェニルホスフィン(66 mg, 0.25 mmol, アルドリッチ)を加えた後、ジイソプロピルアゾジカルボキシレート (49μL, 0.25 mmol, アルドリッチ)を攪拌しながら加えた。室温で3日間攪拌した後、この反応混合液を滴下で、よく攪拌済みのジエチルエーテルに加えた。その結果得られた沈殿物を濾過で単離し、ジエチルエーテルで3回、洗浄した。その粗物質をCH2Cl2で採取し、水で洗浄した。その有機層をNa2SO4で乾燥させ、濾過し、乾燥するまで濃縮した。その物質を最少の CH2Cl2で採取し、次に攪拌済みのジエチルエーテルに滴下で加えることで沈殿させた。この物質を濾過で採集し、ジエチルエーテルで3回、洗浄し、乾燥させて60 mg (60%)のmPEG-O-p-フェニルプロピオンアルデヒド(17)を生成させた。
(Heterocycles, 2000, 53,
777-784)の合成法と同様な合成法で調製した。3-ヒドロキシフェネチルアルコール (1.0 g, 7.5 mmol, アルドリッチ)をジメチルスルホキシド (8 mL, アルドリッチ)に溶解させた。TEA (2.0 mL, 14 mmol, アルドリッチ)を攪拌しながらゆっくり加えた。ピリジン-三酸化硫黄
(SO3.py)錯体(2.4 g, 15 mmol, アルドリッチ)をジメチルスルホキシド (8
mL, アルドリッチ)に完全に溶解させ、この溶液を滴下で前記アルコールによく攪拌しながら加えた。室温で1時間、攪拌した後、反応に氷温の水を加えて反応を停止させ、次にCH2Cl2で抽出した。その有機層をNa2SO4で乾燥させ、濾過し、乾燥するまで濃縮した。ヘキサン-酢酸エチルを溶出剤(3:1, 次に1:1)として用いたシリカゲル・クロマトグラフィで精製すると、225 mg(22%)の3-ヒドロキシフェニルアセトアルデヒドが生成された。
mmol)及び3-ヒドロキシフェニルアセトアルデヒド (117
mg, 0.86 mmol)をトルエンと一緒に4回、共沸させた後、無水 CH2Cl2
(5 mL, アルドリッチ)で採取した。この溶液にトリフェニルホスフィン(200 mg, 0.76 mmol, アルドリッチ)を加えた後、ジイソプロピルアゾジカルボキシレート (147μL, 0.75 mmol, アルドリッチ)を攪拌しながら加えた。室温で3日間、攪拌した後、この反応混合液を滴下で、よく攪拌済みのジエチルエーテルに加えた。その結果得られた沈殿物を濾過で単離し、ジエチルエーテルで3回、洗浄し、乾燥させて284 mg(93%)の
mPEG-O-m-フェニルアセトアルデヒド(18)を生成させた。
及びXIII:
PEGアミンをハロゲン化アルキルと反応させてPEG-アミドを作製する。PEG-アミド-ビシクロオクタン-NHS結合体の作製の一例をスキームXIVに示す。
PEG化合物をヘテロ環の環上又は非環上窒素と反応させて、反応性PEG種を形成する。代表的な反応を、アミノピロリジンの場合のスキームXVII及び多種のピペラジンの場合のXVIIIで示す。
本発明に基づくペプチド結合体は、タンパク質を活性化PGC分子と反応させることにより、調製することができる。例えば、インターフェロン(IFN)を、還元剤(例えばシアノ水素化硼素ナトリウム)の存在下で還元的アルキル化反応を通じてPEG-アルデヒドと反応させると、アミン結合を通じて結合したPEG-タンパク質結合体を生じさせることができる。例えばヨーロッパ特許0154316 B1を参照されたい。
mPEG-O-p-フェニルプロピオンアルデヒド、及び20 kDa mPEG-O-m-フェニルアセトアルデヒド。PEG化したタンパク質をそれぞれの反応混合液から均質になるまで精製し、一連の特徴付け検査を行って修飾されたタンパク質の種類、純度、及び力価を確認した。
kDa mPEG-O-m-メチルフェニル-O-2-メチルプロピオンアルデヒド、及び20 kDa mPEG-O-p-フェニルアセトアルデヒドで修飾されたヒトIFN-β-1 a の調製及び特徴付けの詳細な解説は以下の通りである。
ヒトIFN-β-1aをそのN末端で、20 kDa mPEG-O-2メチルプロピオンアルデヒドでPEG化した。PEGをIFN-β-1aの骨格に導入するために用いられた還元的アルキル化の化学反応の生成物の結果、分解に対して大変安定なアミン結合が形成された。このPEG化IFN-β-1aに、SDS-PAGEによる分析、サイズ排除クロマトグラフィ(SEC)、ペプチド・マッピング、及びin vitro抗ウィルス検定での活性評価を含め、広汎な特徴付けを行った。SDS-PAGE及びSECで測定したときの生成物の純度は90%を越えた。PEG化試料中に凝集体の証拠はなかった。生成物中の未修飾IFN-β-1aの残余レベルは、定量限界未満だったが、生成物の約1%だったようである。抗ウィルス活性検定でのPEG化IFN-β-1aの特異的活性は、非修飾IFN-β-1に比較してほぼ2分の1に減少していた(20 kDa mPEG-O-2-メチルプロピオンアルデヒド修飾IFN-β-1の場合、EC50=32pg/mLに対し、非修飾IFN-β-1aの場合、EC50
= 14pg/mL )。このPEG化IFN-β-1aのバルクを、広汎な特徴付けが済んでいるAVONEX(R)(マサチューセッツ州ケンブリッジ、バイオジェン社)に用いられた処方と同様に、14mg/mLのヒト血清アルブミン(HSA)を含有するリン酸緩衝生理食塩水(PBS)、pH7.3、中に30μg/mLで調合した。当該物質を、−70℃で保存された凍結した液体として提供した。
10 mLの調合されていない AVONEX(R)(IFN-β-la バルク中間物、ヒトでの使用について全ての検査を通過したバルク薬物の臨床用バッチ、100mMのリン酸ナトリウム中250μg/mL
、pH 7.2、200 mM NaCl)を12 mL の 165 mM MES pH 5.0 及び50μlの5 N HClで希釈した。この試料を300μLのSP-セファロースFFカラム(ファルマシア社)に入れた。このカラムを3×300μLの5 mM リン酸ナトリウム pH 5.5, 75 mM NaClで洗浄し、当該タンパク質を5 mM リン酸ナトリウム pH 5.5, 600 mM NaClで溶出させた。溶出画分をそれらの吸光度について280
nm で分析し、IFN-β-1aの試料中の濃度を、1.51の吸光係数を用いて1 mg/mLの溶液で推定した。ピークの画分をプールして3.66 mg/mLのIFN-β-1a 濃縮液を得、次にこれを水で1.2 mg/mLまで希釈した。
mLのSP-セファロースFFカラムで以下の通りに精製した:0.6 mL の反応混合液を2.4 mL 20 mM MES pH 5.0で希釈し、SP セファロース・カラムに入れた。このカラムをリン酸ナトリウムpH 5.5, 75
mM NaCl で洗浄した後、PEG化IFN-β-1aをこのカラムから25 mM MES pH 6.4, 400 mM NaClで溶出させた。PEG化したIFN-β-1aをさらにスーパーロース6 HR 10/30 FPLCサイジング・カラムで5 mM リン酸ナトリウム pH 5.5, 150 mM NaClを移動相として精製した。このサイジング・カラム(25
mL)を20 mL/h で移動させ、0.5 mL の画分を採集した。溶出画分をタンパク質含有量について280 nmでの吸光度で分析し、プールし、このプールのタンパク質濃度を判定した。PEG部分は280nmでの吸光度に寄与しないため、PEG化したIFN-β-1a 濃度は、IFN等量で報告されている。プールのうちの数試料を分析用に取り出し、残りを30μg/mL に、HSA含有調合緩衝液で希釈し、0.2mL/バイアルにアリクォートし、-70℃で保存した。
20 kDa mPEG-O-2-メチルプロピオンアルデヒド修飾IFN-β-1aのUV スペクトル(240-340
nm)を、予め調合されたHSAバルク試料を用いて得た。このPEG化試料は278-279nmで最大の吸光度を示し、249-250nmで最小の吸光度を示し、非修飾IFN-β-1aバルク中間体で観察されたものと一致した。このPEG化生成物のタンパク質濃度を前記スペクトルから、ε280 0.1%=1.51の吸光係数を用いて推定した。このPEG化バルクのタンパク質濃度は0.23 mg/mLだった。320nmでの吸光がないことで証左されるように、試料に濁りはなかった。
4μgの 非修飾及び20 kDa mPEG-O-2-メチルプロピオンアルデヒド修飾IFN-β-1aにSDS-PAGEを還元条件下で10-20%勾配ゲルで行った。ゲルをクーマシー・ブリリアント・ブルーR250で染色し、図1(レーンA、分子量マーカ(上から下に;それぞれ100 kDa、68 kDa、45 kDa、27 kDa、及び18 kDa);レーンB、非修飾IFN-β-1a;レーンC, 20 kDa mPEG-O-2メチルプロピオンアルデヒド修飾IFN-β-1a。20 kDa
mPEG-O-2 メチルプロピオンアルデヒド修飾IFN-β-1aをSDS-PAGE分析したところ、見かけの質量が55kDaの一本の大きなバンドが現れ、単一のPEGによる修飾と矛盾しなかった。他のPEG群の存在に負うそれより高い質量の形成は検出されなかった。精製されたPEG化した生成物のうちで、非修飾IFN-β-1aが検出された;しかしながら、その量は定量限界未満だった。非修飾IFN-β-1aの調製物中のレベルは、総タンパク質の僅かに約1%であると推定される。
非修飾及び20 kDa mPEG-O-2メチルプロピオンアルデヒド修飾IFN-β-1aに、SECを分析用スーパーロース6 HR10/30 FPLC サイジング・カラムで、PBS pH 7.2 を移動相として用いて行った。このカラムを20 mL/hで移動させ、溶出物を280nmでの吸光度について、図2に示すように観察した。パネルA:分子量標準(670 kDa, チログロブリン;158 kDa, ガンマグロブリン;44 kDa, オブアルブミン;17 kDa, ミオグロビン;1.3 kDa, ビタミンB12), パネル B: 20 kDa mPEG-O-2メチルプロピオンアルデヒド修飾 IFN-β-1a; パネル C: 非修飾IFN-β-1a。20 kDa mPEG-O-2-メチルプロピオンアルデヒド修飾 IFN-β-1aは一本の明確なピークとして溶出し、見かけの分子量はほぼ200 kDaで、PEGの大きな流体力学的体積と一致した。凝集体の証拠は観察されなかった。調製物中に非修飾 IFN-β-1a が検出されたが、定量限界未満だった。ピークのサイズに基づくと、この非修飾IFN-β-1aは、生成物の1%以下を占め、SDS-PAGEを用いて観察されたものと一致した。
PEG化反応の特異性をペプチド・マッピングで評価した。非修飾及び20
kDa mPEG-O-2-メチルプロピオンアルデヒド修飾IFN-β-1aを、アクロモバクター(Achromobacter)由来のエンドプロティナーゼLys-C (ワコー・バイオプロダクツ社)で消化し、その結果得られた切断産物を逆相HPLC
でVydac C4 カラムにより、0.1%
TFAに溶かした0乃至70%アセトニトリルまでの30分勾配を用いて分画した。このカラム溶出物を、214nmでの吸光度について観察した。
ヒトIFN-β-1aをN末端で20 kDa mPEG-O-メチルフェニル-O-2-メチルプロピオンアルデヒドによりPEG化した。PEGをIFN-β-1aの骨格に導入するために用いられた還元的アルキル化化学反応の生成物の結果、分解に対して大変安定なアミン結合が形成される。このPEG化したIFN-β-1aに、SDS-PAGEによる分析、SEC、ペプチド・マッピング、及びin vitro抗ウィルス検定での活性評価を含め、広汎な特徴付けを行った。SDS-PAGE及びSECで測定したときの生成物の純度は95%を越えた。PEG化したIFN-β-1a試料中に凝集体の証拠はなかった。生成物中の非修飾IFN-β-1aの残余レベルは、定量限界未満だったが、生成物の約1%だったようである。抗ウィルス活性検定でのPEG化IFN-β-1aの特異的活性は、非修飾IFN-β-1aに比較してほぼ2分の1に減少していた(20 kDa mPEG-O-m-メチルフェニル-O-2-メチルプロピオンアルデヒド修飾IFN-β-1aの場合、EC50=31pg/mLに対し、非修飾IFN-β-1aの場合、EC50
= 14pg/mL )。このPEG化IFN-β-1aのバルクを、広汎な特徴付けが済んでいるAVONEX(R)に用いられた処方と同様に、15mg/mLのHSAを含有するPBS、pH7.2、中に30μg/mLに調合した。当該物質を、−70℃で保存された凍結した液体として提供した。
80 mL の調合されていないAVONEX(R)(IFN-β-1aバルク中間体、ヒトでの使用に関するすべての検査を通過したバルク薬物の臨床用バッチ、100 mMリン酸ナトリウムpH 7.2, 200 mM NaClで254μg/mL)を96 mL の165 mM MES pH 5.0, 及び400μL の5 N HClで希釈した。試料を1.2
ml, SP-セファロース FF カラム(ファルマシア社)に入れた。このカラムを6.5 mL の5 mM リン酸ナトリウム pH 5.5, 75 mM NaClで洗浄し、当該タンパク質を5 mM リン酸ナトリウム pH 5.5, 600 mM NaClで溶出させた。溶出画分をそれらの280nmでの吸光度について分析し、IFN-β-1aの試料中での濃度を1mg/mLの溶液について1.51の吸光係数を用いて推定した。ピーク画分をプールしてIFN-β-1aの濃度を4.4 mg/mLにした。SP-セファロース溶出液プールから取った4.4 mg/mL IFN-β-1aの2.36
mL に、0.5 M リン酸ナトリウム pH 6.0 を50 mMまで加え、シアノ水素化硼素ナトリウム(アルドリッチ)を5 mMまで加え、20 kDa mPEG-O-m-メチルフェニル-O-2-メチルプロピオンアルデヒドを10 mg/mLまで加えた。この試料を室温で21時間、暗室にてインキュベートした。PEG化したIFN-β-1aをこの反応混合液から8.0
mL SP-セファロースFF カラムで以下の通りに精製した:9.44
mlの反応混合液を37.7 mLの20 mM MES pH
5.0で希釈し、SP-セファロース・カラムに入れた。このカラムをリン酸ナトリウムpH 5.5, 75 mM NaClで洗浄した後、PEG化したIFN-β-1aをこのカラムから25
mM MES pH 6.4, 400 mM NaClで溶出させた。そのPEG化したIFN-β-1aをさらにスーパーロース6
HR 10/30 FPLCサイジング・カラムで5 mM リン酸ナトリウム pH 5.5, 150 mM NaCl を移動相として用いて精製した。このサイジング・カラム(25 mL)を24 mL/h で移動させ、0.25 mlの画分を採集した。この溶出画分をタンパク質含有量についてSDS-PAGEで分析し、プールし、このプールのタンパク質濃度を判定した。PEG化したIFN-β-1a濃度は、PEGの280nmでの吸光度への寄与度を1mg/mLのPEG化IFN-β-1a溶液について2の吸光係数を用いて調節した後で、IFN等量で、報告されている。プールの試料を分析用に取り出し、残りを30μg/mLまでHSA含有調合緩衝液で希釈し、0.25 mL/バイアルにアリクォートし、−70℃で保存した。
20 kDa mPEG-O-m-メチルフェニル-O-2-メチルプロピオンアルデヒド修飾 IFN-β-1aのUVスペクトル(240-340nm)を予め調合されたHSAバルク試料を用いて得た。 このPEG化した試料は、278-279 nmで吸光度の最大を示し、そして249-250nmで吸光度の最小を示し、非修飾 IFN-β-1aバルク中間体について観察されたものと一致した。 PEG化した生成物のタンパク質濃度を、このスペクトルから、ε280 0.1%= 2.0の吸光係数を用いて推定した。PEG化バルクのタンパク質濃度は0.42 mg/mLだった。320nmでの吸光がないことに証左されるように、試料中に濁りはなかった。
2.1μgの20
kDa mPEG-O-m-メチルフェニル-O-2-メチルプロピオンアルデヒド修飾IFN-β-1aに、SDS-PAGEを還元条件下で、4-20%勾配ゲルを用いて行った。このゲルをクーマシー・ブリリアント・ブルーR250で染色した。20 kDa mPEG-O-m-メチルフェニル-O-2-メチルプロピオンアルデヒド修飾IFN-β-1aのSDS-PAGE分析では、見かけの質量が55kDaの一本の大きなバンドが現れ、単一のPEGによる修飾と矛盾しなかった。精製されたPEG化生成物のうちに、非修飾 IFN-β-1aが検出されたが、その量は定量限界未満だった。調製物中の非修飾 IFN-β-1a のレベルは総タンパク質の僅かに約1%であると推定される。
20 kDa mPEG-O-m-メチルフェニル-O-2-メチルプロピオンアルデヒド修飾IFN-β-1aにSECを分析用スーパーロース6 HR10/30 FPLCサイジング・カラムで PBS pH 7.0を移動相として用いて行った。このカラムを24 mL/h で移動させ、溶出物を280nmでの吸光度について観察した。PEG化したIFN-β-1aは、一本の鮮明なピークとして溶出し、凝集体の証拠はなかった(図3)。
PEG化反応の特異性をペプチド・マッピングにより評価した。13.3μgの非修飾及び20 kDa mPEG-O-m-メチルフェニル O-2-メチルプロピオンアルデヒド修飾 IFN-β-1aを、アクロモバクター由来の20% (w/w) のエンドプロティナーゼ Lys-C (ワコー・バイオプロダクツ社)の、5 mM DTT, 1 mM EDTA、pH 7.6、を含有するPBS溶液で、室温で30時間(最終体積=100μL)かけて消化した。その後4μLの1 M DTT 及び 100μLの8 M 尿素を加え、試料を1時間、室温でインキュベートした。このペプチドを逆相HPLCで、Vydac C18カラム(214TP51)により、 0-63% アセトニトリルの0.1 % TFA溶液という70 分勾配、次に63-80% アセトニトリルの0.1 % TFA溶液という10分勾配で分離した。カラム溶出物を214nmでの吸光度について観察した。
IFN-β-1aの調製及び特徴付け
ヒトIFN-β-1aをN末端で20 kDa mPEG-O-p-フェニルアセトアルデヒドによりPEG化した。PEGをIFN-β-1aの骨格に導入するために用いられた還元的アルキル化化学反応の生成物の結果、分解に対して大変安定なアミン結合が形成される。このPEG化したIFN-β-1aに、SDS-PAGEによる分析、SEC、ペプチド・マッピング、及びin vitro抗ウィルス検定での活性評価を含め、広汎な特徴付けを行った。SDS-PAGE及びSECで測定したときの生成物の純度は95%を越えた。PEG化したこのIFN-β-1a試料中に凝集体の証拠はなかった。生成物中の非修飾IFN-β-1aの残余レベルは、定量限界未満だったが、生成物の約1%だったようである。安定性検査では、20 kDa mPEG-O-p-フェニルアセトアルデヒド修飾 IFN-β-1aの凝集又は分解は、37℃で最長7日間インキュベートした後のTris緩衝液 pH 7.4では明らかにならなかった。抗ウィルス活性検定でのPEG化IFN-β-1aの特異的活性は、非修飾IFN-β-1に比較してほぼ2分の1に減少していた(20 kDa mPEG-O-p-フェニルアセトアルデヒド修飾IFN-β-1の場合、EC50=31pg/mLに対し、非修飾IFN-β-1aの場合、EC50
= 14pg/mL )。このPEG化IFN-β-1aのバルクを、広汎な特徴付けが済んでいるAVONEX(R)に用いられた処方と同様に、14mg/mLのHSAを含有するPBS、pH7.3、中に30μg/mLで調合した。当該物質を、−70℃で保存された凍結した液体として提供した。
20 mL の調合されていないAVONEX(R) (IFN-β-1aバルク中間体、ヒトでの使用に関するすべての検査を通過したバルク薬物の臨床用バッチ、100
mMリン酸ナトリウムpH 7.2, 200 mM NaCl中250μg/mL)を24 mL の165 mM
MES pH 5.0, 100μL の 5 N HCl, 及び24 mL の水で希釈した。この試料を600μL SP-セファロース FF カラム(ファルマシア社)に入れた。このカラムを2×900μLの 5 mM リン酸ナトリウム pH 5.5, 75 mM NaClで洗浄し、当該タンパク質を5 mM リン酸ナトリウム pH 5.5, 600 mM NaClで溶出させた。溶出画分を280nmでのそれらの吸光度について分析し、試料中のIFN-β-1aの濃度を、1mg/mL溶液について1.51の吸光係数を用いて推定した。ピーク画分をプールしてIFN-β-1aの濃度を 2.3
mg/mLとした。SP-セファロース溶出プールから取った1.2
mL のIFN-β-1aに、0.5 M リン酸ナトリウム pH 6.0 を50mMまで加え、シアノ水素化硼素ナトリウム(アルドリッチ)を5 mMまで加え、そして20 kDa mPEG-O-p-フェニルアセトアルデヒドを10 mg/mLまで加えた。この試料を室温で18時間、暗室でインキュベートした。PEG化IFN-β-1aを、この反応混合液から0.75 mL SP-セファロースFFカラムで、以下の通りに精製した:1.5 mL の反応混合液を7.5 mL の20 mM MES pH 5.0、7.5 mL 水、及び5μL 5N N HClで希釈して、SPセファロース・カラムに入れた。このカラムをリン酸ナトリウム pH 5.5, 75
mM NaClで洗浄した後、PEG化 IFN-β-1aをこのカラムから20 MM MES pH 6.0, 600 mM NaClで溶出させた。このPEG化 IFN-β-1aを、さらに、スーパーロース6 HR 10/30 FPLC サイジング・カラムで、5 mM リン酸ナトリウム pH 5.5, 150 mM NaClを移動相として用いて精製した。このサイジング・カラム(25 mL)を20 mL/hで移動させ、0.5 mL 画分を採集した。該溶出画分を、タンパク質含有量について280nmでの吸光度で分析し、プールし、このプールのタンパク質濃度を判定した。PEG化したIFN-β-1aの濃度は、IFN等量で、280nmでの吸光度への当該PEGの寄与度(20 kDa mPEG-O-p-フェニルアセトアルデヒドは、1 mg/mL の溶液で0.5の280nmでの吸光係数を有する)を1mg/mLのPEG化IFN-β-1a溶液について2の吸光係数を用いて調節した後で、報告されている。プールの試料を分析用に取り出し、残りを30μg/mLまでHSA含有調合緩衝液で希釈し、0.25 mL/バイアルにアリクォートし、−70℃で保存した。
20 kDa mPEG-O-p-フェニルアセトアルデヒド修飾
IFN-β-1aのUVスペクトル(240-340nm)を予め調合されたHSAバルク試料を用いて得た。 このPEG化した試料は、278-279 nm で吸光度の最大を示し、そして249-250nmで吸光度の最小を示したことから、非修飾 IFN-β-1aバルク中間体について観察されたものと一致した。 PEG化した生成物のタンパク質濃度を、このスペクトルから、ε280 0.1%= 2.0の吸光係数を用いて推定した。PEG化バルクのタンパク質濃度は0.10 mg/mLだった。320nmでの吸光がないことに証左されるように、試料中に濁りはなかった。
2.5μgの非修飾及び20 kDa mPEG-O-p-フェニルアセトアルデヒド修飾IFN-β-1aに、SDS-PAGEを還元条件下で、10-20%勾配ゲルを用いて行った。このゲルをクーマシー・ブリリアント・ブルーR250で染色し、図4に示す。
(レーン A: 20 kDa mPEG-O-p-フェニルアセトアルデヒド修飾
IFN-β-1a;レーンB: 非修飾 IFN-β-1a;レーンC: 分子量マーカ(上から下までそれぞれ;100 kDa, 68 kDa, 45 kDa, 27 kDa, 及び18kDa)20 kDa mPEG-O-p-フェニルアセトアルデヒド修飾IFN-β-1aのSDS-PAGE分析では、見かけの質量が55kDaの一本の大きなバンドが現れ、単一のPEGによる修飾と矛盾しなかった。付加的なPEG群の存在の結果生じるようなより高い質量の形成物は検出されなかった。精製されたPEG化生成物のうちに、非修飾 IFN-β-1aが検出されたが、その量は定量限界未満だった。調製物中の非修飾 IFN-β-1a のレベルは総タンパク質の僅かに約1%であると推定される。
20 kDa mPEG-O-p-フェニルアセトアルデヒド修飾IFN-β-1aにSECを分析用スーパーロース6
HR10/30 FPLCサイジング・カラムで PBS pH 7.2を移動相として用いて行った。このカラムを20 mL/h で移動させ、溶出物を280nmでの吸光度について、図5に示すように観察した。パネル A: 分子量標準(670 kDa, チログロブリン;158 kDa, ガンマグロブリン;44 kDa, オブアルブミン;17 kDa, ミオグロビン;1.3 kDa, ビタミン B12); パネル B: 20 kDa
mPEG-O-p-フェニルアセトアルデヒド修飾IFN-β-1a。 PEG化したIFN-β-1aは、一本の鮮明なピークとして溶出し、見かけの分子量はほぼ200kDaで、PEGの流体力学的な体積の大きさと一致した。凝集体の証拠は観察されなかった。調製物中に非修飾IFN-β-1aが検出されたが、定量限界未満だった。ピークの大きさに基づくと、当該の非修飾 IFN-β-1aは生成物の1%以下であり、SDS-PAGEを用いて観察されたものと一致した。
PEG化反応の特異性をペプチド・マッピングにより評価した。非修飾及び20 kDa mPEG-O-p-フェニルアセトアルデヒド修飾 IFN-β-1aを、アクロモバクター由来のエンドプロティナーゼ Lys-C (ワコー・バイオプロダクツ社)で消化し、その切断生成物を逆相HPLCで、Vydac C4カラムにより、 0-70% アセトニトリルの0.1 % TFA溶液という30 分勾配を用いて分画した。カラム溶出物を214nmでの吸光度について観察した。
20 kDa mPEG-O-p-フェニルアセトアルデヒド修飾
IFN-β-1aの安定性を検査するために、試料を0.1μg/mL に100 mM Tris-HCl 緩衝液、pH 7.4で希釈した後、37℃で最長7日間、インキュベートした。20μLの試料(2μg)を0日目、2日目、5日目、及び7日目に取り出し、SDS-PAGEにより、還元条件下で、図6に示すように分析した:レーン A: 分子量マーカ(上から下の順に;それぞれ100 kDa, 68 kDa, 45
kDa, 27 kDa, 18 kDa, 及び15 kDa);レーン B, C, D, 及びE: それぞれ0日目、2日目、5日目、及び7日目に取り出されたmPEG-O-p-フェニルアセトアルデヒド修飾 IFN-β-1a。PEG化IFN-β-1aの凝集又は分解の証拠は、7日目の後の37℃でも観察されなかった。
PEG化IFN-β-1a試料の特異的抗ウィルス活性を、脳心筋炎(EMC)ウィルスに暴露してあるヒト肺癌細胞(A549細胞)で、代謝性染料2,3-ビス[2-メトキシ-4-ニトロ-5-スルホ-フェニル]-2H-テトラゾリウム5-カルボキシアニリド(MTT; M-5655, ミズーリ州セントルイス、シグマ社)を、ウィルスへの暴露後に残る代謝活性細胞の測定手段として用いて検査した。簡単に説明すると、A549 細胞を、ウィルス暴露に先立って、非修飾もしくはPEG化IFN-β-1a(66.7 pg/mL で開始し、0.8 pg/mLまで1.5分の1に連続希釈)で24時間、予備処理した。その後、この細胞を2日間、EMCウィルスに、IFNの非存在下で細胞が完全に致死するような希釈度で暴露した。次にプレートをMTTで展開させた。MTTのストック溶液を 5 mg/mLのPBS溶液になるように調製し、無菌濾過し、50μLのこの溶液を細胞培地に希釈した(1ウェル当たり100μL)。室温で30乃至60分間インキュベートした後、MTT/培地溶液を廃棄し、細胞を100μLのPBSで洗浄し、最後に、代謝性染料を100μL、1.2 N HCl のイソプロパノール溶液で可溶化した。生存細胞(染料の存在で判定したときの)を450nmでの吸光で定量した。吸光度をIFN-β-1aの濃度に対する表にしてデータを解析し、 IFN-β-1aの活性を、細胞の50%が死滅した濃度、即ち50%細胞変性効果(EC50)か、又は50%最大OD450、として定義した。 この検定を非修飾 IFN-β-1aについては8回、そして多種のPEG化IFN-β-1a 試料については3乃至4回、行った。各検定について、各タンパク質濃度に関して複式のデータ点を得た。細胞生存率、対、非修飾もしくはPEG化IFN-β-1aの濃度を表した表を図7A及び7Bに示す。図7Aにおいて、記号は以下の通りである:非修飾 IFN-β-1a(○)、20 kDa
mPEG-O-2-メチルプロピオンアルデヒド修飾 IFN-β-1a
(□)、20 kDa mPEG-O-p-メチルフェニル-O-2-メチルプロピオンアルデヒド修飾 IFN-β-1a(△)、及び20
kDa mPEG-O-m-メチルフェニル-O-2-メチルプロピオンアルデヒド修飾IFN-β-1a(◇)。図7Bにおいて、記号は以下の通りである:非修飾IFN-β-1a(○)、20 kDa
mPEG-O-p-フェニルアセトアルデヒド修飾IFN-β-1a(□)、20 kDa mPEG-O-p-フェニルプロピオンアルデヒド修飾IFN-β-1a(△)、及び20 kDa
mPEG-O-m-フェニルアセトアルデヒド修飾IFN-β-1a(◇)。
kDa mPEG-O-p-メチルフェニル-O-2-メチルプロピオンアルデヒド、20 kDa mPEG-O-m-メチルフェニル-O-2-メチルプロピオンアルデヒド、20 kDa mPEG-O-p-フェニルアセトアルデヒド、20 kDa
mPEG-O-p-フェニルプロピオンアルデヒド、及び20 kDa mPEG-O-m-フェニルアセトアルデヒドで修飾されたIFN-β-1aの EC50値(最大ウィルス防御の半分の濃度)を表4に示す。すべてのPEG化IFN-β-1aは、基本的に、上述した20 kDa mPEG-O-2メチルプロピオンアルデヒド修飾IFN-β-1a、20 kDa mPEG-O-m-メチルフェニル-O-2-メチルプロピオンアルデヒド修飾 IFN-β-1a、及び20 kDa mPEG-O-p-フェニルアセトアルデヒド修飾IFN-β-1aに関して解説された通りに修飾され、そして均質になるように精製された。
カニューレ挿管したメスのルイス・ラットに、80μg/kg の非修飾IFN-β-1a又は24μg/kg の以下のPEG化IFN-β-1a;20 kDa mPEG-O-2-メチルプロピオンアルデヒド修飾 IFN-β-1a、20 kDa
mPEG-O-p-メチルフェニル-O-2-メチルプロピオンアルデヒド修飾IFN-β-1a、20 kDa
mPEG-O-p-フェニルアセトアルデヒド修飾IFN-β-1a、20 kDa mPEG-O-p-フェニルプロピオンアルデヒド修飾 IFN-β-1a、20 kDa mPEG-O-m-フェニルアセトアルデヒド修飾IFN-β-1a、及び20 kDa
mPEG-O-m-メチルフェニル-O-2-メチルプロピオンアルデヒド修飾IFN-β-1aを静脈内注射した。非修飾及びPEG化タンパク質の両方を担体としての14-15 mg/mL HSAの存在下で調合した。非修飾タンパク質の場合、血液(0.2 mL)を様々な時点;即ち、投与直前、及び投与後0.083、0.25、0.5、1.25、3、及び5時間後の時点で、カヌーレから採取した。PEG化タンパク質の場合、血液(0.2 mL)をカヌーレから投与直前、及び投与後0.083、0.25、0.5、1.25、3、24、48、及び72時間の時点で採取した。全血を血清分離試験管(ベクトン・ディッキンソン社、No. 365956)に採取し、室温で60分間、インキュベートして、凝固させた。凝固した血液を10分間、4℃で遠心分離して血清を取り除き、検定時まで−70℃で保存した。
(ラットに投与された同じ型のIFN-β-1aの66.7, 44.4, 29.6, 19.8, 13.2, 8.8, 5.9, 3.9, 2.6, 1.7, 1.2, 及び0.8 pg/mL)及び 三種類の血清試料の希釈液を各プレートで検定した。A549 細胞を、希釈済みの血清試料で24時間かけて予備処理した後に脳心筋炎(EMC)ウィルスに暴露した。 ウィルスと一緒に2日間、インキュベートした後、生存細胞をMTT溶液(5mg/mLのリン酸緩衝液溶液にして)で1時間、染色した後、リン酸緩衝液で洗浄し、1.2 N HCl のイソプロパノール溶液で可溶化した。次にこのウェルを450nmで読み取った。非修飾もしくはPEG化IFN-β-1aの標準曲線を各プレートについて作製し、各検査試料中の非修飾もしくはPEG化IFN-β-1aの量を判定するために用いた。次に薬物動態パラメータをWinNonLin バージョン3.0もしくは3.3 ソフトウェアによる非区画分析を用いて計算した。
単回及び反復的用量比較研究を非修飾及びPEG化IFN-β-1aで行って、非ヒト霊長類におけるそれらの相対的安定性及び活性を判定する。これらの研究では、PEG化IFN-β-1a結合体の薬物動態及び薬理を、非修飾IFN-β-1aのそれと比較し、妥当な推論をヒトに拡張することができる。
研究1(反復的用量)
これは、非修飾及びPEG化IFN-β-1aの比較薬物動態及び薬理を評価するための並行群反復的用量研究である。健康な霊長類(例えばアカゲザル)をこの研究に用いる。投薬前に、すべての動物について、検査物質投与から前の14日以内の2回、研究室担当獣医による疾病の兆候に関する評価を受ける。評価の1回は、初回の検査品目投与から前の24時間以内でなければならない。健康な動物のみに検査品目を投与する。評価には、全身の身体検査や、基線臨床病理及び、IFN-β-1aに対する基線抗体レベルを調べるための投薬前血液採取が含まれる。検査品目投与前の24時間以内にすべての動物の体重を計り、体温を記録する。12匹の対象を参加させ、3匹ずつの群に指定して、1×106U/kg の非修飾、もしくは、PEG化された、しかし他の点では同一のIFN-β-1aを投与する。投与は皮下(SC)又は静脈内(IV)経路を介する。6匹のオスの動物には、検査品目をIV経路で(1回の処理当たり3匹)投与し、別の6匹のオスの動物には検査品目をSC 経路(1回の処理当たり3匹)で投与する。すべての動物は、IFN-β処理を初めて受けるものでなくてはならない。各動物には、2回投薬し、これらの投薬は4週間の間隔を置く。用量体積は1.0 mL/kgである。各注射後0、0.083、0.25、0.5、1、1.5、2、4、6、8、12、24、48、72、及び96時間目に薬物動態検査用に血液採取する。IFN誘導性生物学的応答マーカである血清ネオプテリンの測定のための血液試料は、研究薬物の投与後0、24、48、72、96、168、336、及び504時間目に採取される。本研究期間中の評価には、投薬後30分及び1時間で行われる、毒性の兆候を調べる臨床観察が含まれる。毎日のケージを介した観察を行って、全体的な外観、毒性の兆候、不調、及び行動変化を記録する。体重及び体温を一定の間隔で、投薬後21日間にわたって記録する。
これは、非修飾及びPEG化IFN-β-1aの比較的薬物動態及び薬理を評価するための並行群単回用量研究である。健康な霊長類(例えばアカゲザル)をこの研究に用いる。投薬前に、すべての動物について、検査物質投与から前の14日以内の2回、研究室担当獣医による疾病の兆候に関する評価を受ける。評価の1回は、初回の検査品目投与から前の24時間以内でなければならない。健康な動物のみに検査品目を投与する。評価には、全身の身体検査や、基線臨床病理及び、IFN-β-1aに対する基線抗体レベルを調べるための投薬前血液採取が含まれる。検査品目投与前の24時間以内にすべての動物の体重を計り、体温を記録する。12匹の対象を参加させ、4匹の動物(1群当たり2匹がオスで2匹がメス)から成る5つの群の1つに指定して、1×106U/kg の非修飾もしくはPEG化IFN-β-1aを筋肉内(IM)、あるいは、2×105U/kg、1×106U/kg、又は5×106U/kgのPEG化IFN-β-1aを静脈内(IV)投与する。すべての動物は、IFN-β処理を初めて受けるものでなくてはならない。用量体積は1.0 mL/kgである。研究薬物投与後、薬物動態検査用に0、0.5、1、2、4、6、8、12、24、36、48、及び96時間目、そして7、14、21、及び28日目に血液採取する。IFN誘導性生物学的応答マーカである2'-5'-オリゴアデニル酸シンターゼ(2'-5'-OAS)の測定のための血液試料は、研究薬物の投与後0、12、24、48、72、96時間目、そして 7、14、21、及び28日目に採取される。本研究期間中の評価には、投薬後30分及び1時間で行われる、毒性の兆候を調べる臨床観察が含まれる。毎日のケージを介した観察を行って、全体的な外観、毒性の兆候、不調、及び行動変化を記録する。体重及び体温を一定の間隔で、投薬後28日間にわたって記録する。
血清中のIFN-β-1aのレベルを、細胞変性効果(CPE)バイオアッセイを用いて定量する。このCPE検定では、IFN媒介性抗ウィルス活性のレベルが測定される。試料中の抗ウィルス活性のレベルは、血液採取された時点で試料に含まれた活性IFNの分子数を反映する。このアプローチは、IFN-βの薬物動態を評価するための標準的方法である。このCPE検定は、脳心筋炎(EMC)ウィルスを原因とする細胞毒性からヒト肺癌細胞(メリーランド州ロックビル、ATCC、A549, #CCL-185)を防御するIFN-βの能力を検出するものである。細胞を血清試料と一緒に15乃至20時間予備インキュベートして、抗ウィルス応答を担うIFN誘導性タンパク質の誘導及び合成を起こさせる。次にEMCウィルスを添加し、さらに30時間インキュベートしてから、細胞毒性の評価を、クリスタル・バイオレット染料を用いて行う。内部IFN-β標準やPEG化IFN-β-1a-内部標準を、試料と一緒に各検定プレート上で同時に検査する。この標準を天然ヒト線維芽細胞IFN基準標準(インターフェロン、ヒト線維芽細胞に関するWHO第二国際標準、 Gb-23-902 -53)に対して較正する。各検定プレートには、さらに、いずれのIFN-βもEMCも含有しない細胞成長コントロール・ウェルと、細胞とEMCを含有するがIFN-βを含有しないウィルス・コントロール・ウェルとが含まれる。標準及び試料を含有するコントロール・プレートも、試料が細胞成長に及ぼす何らかの効果を判定するために調製する。これらのプレートは、ウィルスを添加せずに染色される。試料及び標準は、二枚の重複検定プレート上で複式で検査され、試料毎に4つのデータ点を生じさせる。4つの重複点の幾何学的平均濃度を記録する。この検定における検出限界は10 U/mLである。ネオプテリンの血清濃度を臨床薬理単位で、市販の検定法を用いて判定する。2'-5'-OAS の血清濃度は、契約研究機関で、バリデート済みの市販の検定法を用いて判定される。
RstripTMソフトウェア(ユタ州ソルトレーク・シティ、MicroMath社)を用いてデータを薬物動態モデルに合わせる。幾何学的平均濃度を対時間で各群について表にする。検定結果は希釈度で表現されるため、幾何学的平均は、数学的手段よりも適していると考えられる。血清IFNレベルを基線値に合わせて調節し、検出不能な血清濃度は、検出下限値の半分である5U/mLに設定する。IV輸注データの場合、2つの区画IV輸注モデルを各対象毎に検出可能な血清濃度に合わせ、SCデータは2つの区画注射モデルに合わせる。
(i)観察されるピーク濃度、Cmax(U/mL);
(ii)0時間目から48時間目までの曲線下の面積、台数公式を用いたAUC (U × h/mL);
(iii)消失半減期(h);
及び、IV輸注データ(IVを用いた場合)から:
(iv)分布半減期(h);
(v)クリアランス(mL/h/kg)
(vi)見かけの分布容積、Vd(mL/kg)
ヒト静脈内皮細胞(セル・システムズ社、Cat. # 2V0-P75)及びヒト皮膚微小血管内皮細胞(セル・システムズ社、Cat. # 2M1-C25)を、CS-C 培地キット(セル・システムズ社、Cat. # 4Z0-500)と一緒に培地に維持する。実験から24時間前に、細胞をトリプシン処理し、検定培地、90% M199 及び10% ウシ胎児血清 (FBS)に再懸濁させ、所望の細胞密度に調節する。次に細胞をゼラチンで被覆した24もしくは96ウェル・プレートに、それぞれ12,500細胞/ウェル又は 2,000 細胞/ウェルで塗る。一晩のインキュベーション後、検定培地を、20ng/mLのヒト組換え塩基性線維芽細胞成長因子(bFGF)(ベクトン・ディッキンソン社、Cat. # 40060)及び多様な濃度の非修飾もしくは本発明のPEG化IFN-β-1aを含有する新鮮な培地と取り替えるか、又は、陽性コントロール(抗bFGF抗体と同様、エンドスタチンを陽性コントロールとして用いることができる)を添加する。最終体積を24ウェル・プレートでは 0.5 mL に、又は96ウェル・プレートでは0.2 mL に調節する。72時間後、細胞を、コールター計数用にトリプシン処理するか、CyQuant蛍光値読み取り用に凍結させるか、又は、[3H]-チミジンで標識する。このin
vitro 検定では、本発明のPEG化ヒトIFN-β-1a分子を、in vivoでの抗血管形成効果の指標であろう内皮細胞増殖に対する効果について検査する。O'Reilly, et al., Cell 88: 277-285 (1997)を参照されたい。
無胸腺ヌードホモ接合型(nu/nu)マウスで、非修飾IFN-β-1a及び20 kDa mPEG-O-2-メチルプロピオンアルデヒド修飾 IFN-β-1aを、SK-MEL-1ヒト悪性黒色腫腫瘍の周辺に進入する放射状血管の形成阻害能について検査した。SK-MEL-1細胞を培養で80% コンフルエントになるまで成長させた後、2×106個の細胞を、3週齢の無胸腺ヌードホモ接合型(nu/nu)NCRマウス(ニューヨーク州ジャーマンタウン、タコニック社)の中腋窩線の脇腹に皮内接種した(0日目に0.1mL容量)。24時間後(1日目)に、それぞれ3匹のマウスの群に以下の皮下用量の賦形剤コントロール、非修飾IFN-β-1a、又は20 kDa
mPEG-O-2-メチルプロピオンアルデヒド修飾IFN-β-1aを投与した。:
(賦形剤コントロール)を、1日目のみに1回
B群: 1 MU (5μg)の非修飾IFN-β-1aを含有する0.1 mL の45.6
mg/mL ヒト血清アルブミン を1日目から9日目まで毎日
C群: 1 MU単位(10μg)の20 kDa mPEG-O-2-メチルプロピオンアルデヒド修飾IFN-β-1aを含有する0.1 mL の45.6 mg/mL ヒト血清アルブミンを1日目のみに1回
D群: 0.1 mL の45.6 mg/mL ヒト血清アルブミン(賦形剤コントロール)を1日目から9日目まで毎日。
Science 230:1375 (1985);Folkman
et al.; J. Exp. Med.133: 275 (1971)のマウス背側気嚢法抗血管形成モデル、及び、スプラーグ・ドーリー系(チャールズ・リバー、日本)の成体オスラットで、500ngのbFGF(ウシ、R&Dリサーチ・システムズ社)を、酢酸エチレンビニルコポリマのペレットに含浸させて各角膜に移植することにより、角膜の血管形成を誘導したGimbrone, Jr. et al., J. Natl. Cancer Inst. 52:413 (1974)のラット角膜微小ポケット検定、がある。加えて、Lindner and
Borden; Int. J. Cancer 71:456 (1997)が解説したように、MCF-7乳癌もしくはNIH-OVCAR-3卵巣癌細胞を移植後のNIH-Swiss もしくは無胸腺ヌード(nu/nu)マウスで血管形成を誘導するモデルが存在する。(限定はしないが)SK-MEL-1ヒト悪性黒色腫細胞を含む多の腫瘍細胞系を用いて、上で解説したように血管形成を誘導してもよい。多種の用量を、多種の投薬頻度で、そして多種の期間にわたって、非修飾及び本発明のPEG化IFN-β-1aタンパク質の両方について検査することができる。
この腫瘍株は、1951年にC57BL/6マウスの肺癌として自然発生したものである。
腫瘍断片をB6D2F1 マウスの腋窩領域に皮下移植する。検査物質(即ち本発明のPEG化インターフェロン)を、腫瘍移植後複数の日に、多様な用量で皮下(SC)もしくは腹腔内(IP)投与する。測定されるパラメータは中央生存時間である。結果はコントロール生存時間のパーセンテージで表される。
増殖:C57BL/6 マウス。
検査:B6D2F1 マウス。
体重:マウスは3gの体重範囲内であり、オスの場合の最小体重は18
g、そしてメスの場合は17 gである。
性別:1つの実験のすべての検査動物及びコントロール動物で性別を同じにする。
出自: 可能であれば、1つの実験の動物すべての出自を同じにする。
1つの検査群当たり10匹の動物。
腫瘍の移動
増殖:
断片:SCドナー腫瘍の2-4mm断片を調製する。
時間:13−15日
部位: 鼠径部の穿孔により、腋窩領域に断片をSC移植する。
断片:SCドナー腫瘍の2-4mm断片を調製する。
時間:13−15日目
部位: 鼠径部の穿孔により、腋窩領域に断片をSC移植する。
検査スケジュール
0日目: 腫瘍を移植する。細菌培養を行う。奇数実験毎に陽性コントロール化合物を検査する。材料を調製する。毎日死亡を記録する。
1日目: 培養物をチェックする。汚染していれば実験を廃棄する。動物を無作為化する。指示通りに処理する(1日目及び翌日以降)。
2日目: 培養物を再チェックする。汚染していれば実験を廃棄する。
5日目: 2日目と、最初の検査物質毒性評価日の体重を計る
14日目: コントロール早期死亡日。
48日目: コントロール・ノー・テイク(原語:no-take)日。
60日目: 実験を終了し、評価する。肺の腫瘍を調べる。
奇数実験毎に陽性コントロール化合物(NSC 26271; シトキサン(Cytoxan)を100m/kg/一回の注射の用量)をスケジュールし、その養生法を1日目のみの腹腔内とする。陽性コントロール用の検査/コントロール下限は140%である。許容可能な非処理コントロール中央生存期間は19乃至35.6 日である。
測定されるパラメータは中央生存時間である。1日目及び5日目の平均動物体重を計算し、全検査群の検査/コントロール比を計算する。準備日及び最終評価日の平均動物体重を計算する。検査/コントロール比は、5日目の生存率が65%を越える全検査群について計算される。検査/コントロール比値が86%未満であることは、毒性を示す。過剰な体重変化の違い(検査マイナスコントロール)を毒性評価に用いてもよい。
最初の検査/コントロール比が140%以上であることが、中程度の活性を実証するために必要であると考えられる。150%以上の検査/コントロール比値を再現可能であることが、有意な活性と考えられる。
非修飾及び本発明のPEG化ヒトIFN-β-1aの抗増殖及び抗腫瘍効果を検査するために多様なin vivoモデルが利用できる。 Bailon et al., Bioconjugate Chemistry 12:195 (2001)が解説したモデルでは、無胸腺ヌードマウス(ハーラン社)に、2ラ106個のヒト腎A498、ヒト腎ACHN、又はヒト腎G402細胞を後方脇腹に皮下移植し、 3-6 週間、腫瘍を成長させる。次に非修飾もしくはPEG化ヒトIFN-β-1aを多様な用量、多様な投薬頻度、そして多様な期間、投与し、腫瘍体積を測定し、処理間で比較する。Lindner and Borden, J. Interferon Cytokine Res 17: 681 (1997)が解説した別のモデルでは、無胸腺ヌード(nu/nu)の、卵巣摘出されたメスBALB/c マウスに2ラ106個のMCF-7 (エストラジオールを添加)、MDA-MB-231、MDA-MB-468、又はBT-20 ヒト乳癌細胞、NIH-OVCAR-3ヒト卵巣癌細胞、HT-29ヒト結腸癌細胞、又はSK-MEL-1もしくはFEMXヒト悪性黒色腫細胞を、腋窩に最も近い乳腺の上の真皮に移植し、腫瘍の大きさが、時間の関数として評価された。次に非修飾もしくはPEG化ヒトIFN-β-1aを多様な用量、多様な投薬頻度、そして多様な期間、投与し、腫瘍体積を測定し、処理間で比較する。PEG化ヒトIFN-β-1aの抗増殖及び抗腫瘍効果を検査するための他のモデルには、(限定はしないが)Qin et al., Molecular Therapy 4: 356 (2001)により解説された限局性及び転移性肺癌モデル、及び Tada et al., J Clinical Investigation 108: 83 (2001)により解説されたヒト結腸直腸癌の肝臓転移のヌードマウス異種移植モデル、がある。
Clinical Investigation 108: 83 (2001)により解説された結腸直腸癌の肝臓転移の同系マウスモデル、がある。
非修飾及びPEG化マウスIFN-βの、ヒトB型肝炎ウィルス(HBV)レベルに対する効果を、HBVトランスジェニックSCIDマウスで検査するin vivoマウスモデルを利用することができる。Larkin et al.,
Nature Medicine 5:907 (1999)。このモデルでは、ヒトHBVゲノムの頭から尾までの二量体を持つトランスジェニック SCIDマウスが、検出可能なレベルのHBV複製型及び前ゲノムRNAを肝臓内に、そしてHBVウィルスを血清中に有する。このトランスジェニックマウスの肝細胞は、HBsAg、HBcAg、及びHbxAgタンパク質についても陽性であり、ウィルスの複製を示す。非修飾及びPEG化マウスIFN-βをこのモデルで比較するプロトコルの一例を下に挙げる:
Nature Medicine 7:927 (2001)。このモデルでは、正常なヒト肝細胞を、プラスミノーゲン・アクチベータ導入遺伝子(Alb-uPA)を持つSCIDマウスに移植し、このマウスに、異なる遺伝子型のHCVに感染したヒトを由来とする血清を接種する。移植ヒト肝細胞は該ウィルスに感染し、該ウィルスが複製する。当該血清中のHCV RNA レベルを、PCRで定量したり、該肝細胞中の陽性及び陰性(複製型)RNAのレベルを定量することができる。トランスジェニックHBV SCID マウスで、非修飾及びPEGかマウスIFN-βについて上述したものと同様な(しかし限定はしないが)適した研究プロトコルを行って、このモデルにおける非修飾及びPEG化ヒトIFN-β-1aの効験を評価する、即ち、処理が、HCV力価、肝臓組織構造、血清ALTレベル、及びHCV複製型の移植ヒト間組織中の存在に及ぼす影響を判定する。当業者に公知の他の適した組織学的、組織化学的、又は生化学的検査を、血清及び組織試料に対して行ってもよい。
Claims (7)
- 化学式Iに従った構造を有する活性化されたポリアルキレングリコールポリマーであって、
(化学式I)
当該化学式において、Pはポリアルキレングリコールポリマーであって、
XおよびYはそれぞれ、O、S、CO、CO2、COS、SO、SO2、CONR'、SO2NR'、またはNR'であって、
QはC3乃至C8飽和もしくは不飽和環状アルキル、環状ヘテロアルキル、融合2環式アルキル、架橋2環式アルキル、融合2環式ヘテロアルキル、または架橋2環式ヘテロアルキル、置換または非置換アリールもしくはヘテロアリール基、または置換または非置換アルカリルであって、前記アルカリルのアルキルがC1乃至C20の置換もしくは非置換アルキルもしくはヘテロアルカリル基であって、当該置換基がハロゲン、ヒドロキシル、カルボニル、カルボキシラート、エステル、ホルミル、アシル、チオカルボニル、チオエステル、チオアセタート、チオホルマート、アルコキシル、ホスホリル、ホスホナート、ホスフィナート、アミノ、アミド、アミジン、イミン、シアノ、ニトロ、アジド、スルフヒドリル、スルファート、スルホンアミド、スルホニル、ヘテロシクリル、アラルキル、芳香族基、ヘテロ芳香族基、イミノ、スルファモイル、スルホナート、シリル、エーテル、およびアルキルチオからなるグループから選択される、化学基であって、
各R’、Z、およびZ’はそれぞれ、水素、直鎖または分岐鎖、飽和または不飽和C1乃至C20アルキルまたはヘテロアルキル基、C3乃至C8飽和もしくは不飽和環状アルキルもしくは環状へテロアルキル、置換もしくは非置換アリールもしくはヘテロアリール基、または置換もしくは非置換アルカリルであって、前記アルカリルのアルキルがC1乃至C20飽和または不飽和アルキルまたはヘテロアルカリル基であって、当該置換基がハロゲン、ヒドロキシル、カルボニル、カルボキシラート、エステル、ホルミル、アシル、チオカルボニル、チオエステル、チオアセタート、チオホルマート、アルコキシル、ホスホリル、ホスホナート、ホスフィナート、アミノ、アミド、アミジン、イミン、シアノ、ニトロ、アジド、スルフヒドリル、スルファート、スルホナート、スルファモイル、スルホンアミド、スルホニル、ヘテロシクリル、アラルキル、芳香族基、ヘテロ芳香族基、イミノ、スルファモイル、スルホナート、シリル、エーテルおよびアルキルチオからなるグループから選択される、化学基であって、
Rはアルデヒド、アルデヒド水和物、アセタール、カルボナート、アルケニル、アクリラート、メタアクリラート、アクリルアミド、ハロゲン、スクシンイミジル、イソシアナート、イソチオシアナート、ジチオピリジン、ビニルピリジン、ヨードアセトアミド、エポキシド、ヒドロキシスクシンイミジル、アゾール、マレイミド、スルホン、アリル、ビニルスルホン、トレシル、スルホ-N-スクシンイミジル、ジオン、メシル、トシル、およびグリオキサールからなるグループから選択される、化学式Iの化合物と生物学的に活性な化合物またはその前駆体の間に結合を形成するのに好適な化学基であって、
mは0または1であって、
各nはそれぞれ、0または1乃至5の整数であって、
pは1、2、または3である、
化学式に従った構造を有する活性化されたポリアルキレングリコールポリマー。 - 請求項1に記載の活性化されたポリアルキレングリコールポリマーであって、当該ポリアルキレングリコールポリマーにおいて、Pは、化学式IIであって、
(化学式II)
当該化学式において、Eは水素または直鎖もしくは分岐鎖C1乃至C20アルキル基であって、aは4乃至10,000の整数である、化学式の構造を有するポリエチレングリコールである、活性化されたポリアルキレングリコールポリマー。 - 化学式XIVに従った構造を有する化合物を含む組成物であって、
(化学式XIV)
当該化学式において、Pはポリアルキレングリコールポリマーであって、
XおよびYはO、S、CO、CO2、COS、SO、SO2、CONR'、SO2NR'、またはNR'であって、
QはC3乃至C8飽和もしくは不飽和環状アルキルもしくは環状へテロアルキル、置換もしくは非置換アリールもしくはヘテロアリール基、または置換もしくは非置換アルカリルであって、前記アルカリルのアルキルがC1乃至C20飽和または不飽和アルキルまたはヘテロアルカリル基であって、前記置換基がハロゲン、ヒドロキシル、カルボニル、カルボキシラート、エステル、ホルミル、アシル、チオカルボニル、チオエステル、チオアセタート、チオホルマート、アルコキシル、ホスホリル、ホスホナート、ホスフィナート、アミノ、アミド、アミジン、イミン、シアノ、ニトロ、アジド、スルフヒドリル、スルファート、スルホナート、スルファモイル、スルホンアミド、スルホニル、ヘテロシクリル、アラルキル、芳香族基、ヘテロ芳香族基、イミノ、スルファモイル、スルホナート、シリル、エーテルおよびアルキルチオからなるグループから選択される、化学基であって、
各R’、Z、およびZ’はそれぞれ水素、直鎖もしくは分岐鎖、飽和または不飽和C1乃至C20アルキルもしくはヘテロアルキル基、C3乃至C8飽和もしくは不飽和環状アルキルもしくは環状へテロアルキル、置換もしくは非置換アリールもしくはヘテロアリール基、または置換もしくは非置換アルカリルであって、前記アルカリルのアルキルがC1乃至C20飽和または不飽和アルキルまたはヘテロアルカリル基であって、当該置換基がハロゲン、ヒドロキシル、カルボニル、カルボキシラート、エステル、ホルミル、アシル、チオカルボニル、チオエステル、チオアセタート、チオホルマート、アルコキシル、ホスホリル、ホスホナート、ホスフィナート、アミノ、アミド、アミジン、イミン、シアノ、ニトロ、アジド、スルフヒドリル、スルファート、スルホナート、スルファモイル、スルホンアミド、スルホニル、ヘテロシクリル、アラルキル、芳香族基、ヘテロ芳香族基、イミノ、スルファモイル、スルホナート、シリル、エーテルおよびアルキルチオからなるグループから選択される、化学基であって、
R*は架橋基であって、
Bは生物学的に活性な化合物またはその前駆体であって、
mは0または1であって、
各nはそれぞれ、0、または1乃至5の整数であって、
pは1、2、または3である、
化学式に従った構造を有する、組成物。 - 請求項3に記載の組成物であって、当該組成物において、R*はカルボン酸、エステル、アルデヒド、アルデヒド水和物、アセタール、ヒドロキシ、保護されたヒドロキシ、カルボナート、アルケニル、アクリラート、メタクリラート、アクリルアミド、置換もしくは非置換チオール、ハロゲン、置換もしくは非置換アミン、保護されたアミン、ヒドラジド、保護されたヒドラジド、スクシンイミジル、イソシアナート、イソチオシアナート、ジチオピリジン、ビニルピリジン、ヨードアセトアミド、エポキシド、ヒドロキシスクシンイミジル、アゾール、マレイミド、スルホン、アリル、ビニルスルホン、トレシル、スルホ-N-スクシンイミジル、ジオン、メシル、トシル、およびグリオキサールからなるグループから選択される化学基と生物学的に活性な化合物またはその前駆体との反応によって形成される、組成物。
- 請求項3に記載の組成物であって、当該組成物において、Pは化学式IIであって、
(化学式II)
当該化学式においてEは水素、直鎖もしくは分岐鎖C1乃至C20アルキル基または検出可能なラベルであって、aは4乃至10000の整数である、
化学式の構造を有するポリエチレングリコールである、組成物。 - 多発性硬化症または易感染性ウイルス感染症の治療用の薬物の製造における化学式XIVの化合物の使用であって、前記化学式XIVが
(化学式XIV)
で表され、
前記化学式において、Pはポリアルキレングリコールポリマーであって、
XおよびYはそれぞれ、O、S、CO、CO2、COS、SO、SO2、CONR'、SO2NR'、またはNR'であって、
QはC3乃至C8飽和もしくは不飽和環状アルキル、環状ヘテロアルキル、融合2環式アルキル、架橋2環式アルキル、融合2環式ヘテロアルキル、または架橋2環式ヘテロアルキル、置換または非置換アリールもしくはヘテロアリール基、または置換または非置換アルカリルであって、前記アルカリルのアルキルがC1乃至C20の置換もしくは非置換アルキルもしくはヘテロアルカリル基であって、当該置換基がハロゲン、ヒドロキシル、カルボニル、カルボキシラート、エステル、ホルミル、アシル、チオカルボニル、チオエステル、チオアセタート、チオホルマート、アルコキシル、ホスホリル、ホスホナート、ホスフィナート、アミノ、アミド、アミジン、イミン、シアノ、ニトロ、アジド、スルフヒドリル、スルファート、スルホンアミド、スルホニル、ヘテロシクリル、アラルキル、芳香族基、ヘテロ芳香族基、イミノ、スルファモイル、スルホナート、シリル、エーテル、およびアルキルチオからなるグループから選択される、化学基であって、
各R’、Z、およびZ’はそれぞれ、水素、直鎖または分岐鎖、飽和または不飽和C1乃至C20アルキルまたはヘテロアルキル基、C3乃至C8飽和もしくは不飽和環状アルキルもしくは環状へテロアルキル、置換もしくは非置換アリールもしくはヘテロアリール基、または置換もしくは非置換アルカリルであって、前記アルカリルのアルキルがC1乃至C20飽和または不飽和アルキルまたはヘテロアルカリル基であって、前記置換基がハロゲン、ヒドロキシル、カルボニル、カルボキシラート、エステル、ホルミル、アシル、チオカルボニル、チオエステル、チオアセタート、チオホルマート、アルコキシル、ホスホリル、ホスホナート、ホスフィナート、アミノ、アミド、アミジン、イミン、シアノ、ニトロ、アジド、スルフヒドリル、スルファート、スルホナート、スルファモイル、スルホンアミド、スルホニル、ヘテロシクリル、アラルキル、芳香族基、ヘテロ芳香族基、イミノ、シリル、エーテルおよびアルキルチオからなるグループから選択される、化学基であって、
R*は架橋部分であって、
Bは生物学的に活性な組成物またはその前駆体であって、
mは0または1であって、
各nはそれぞれ、0または1乃至5の整数であって、
pは1、2、または3である、
化学式XIVの化合物の使用。 - 請求項6に記載の使用であって、前記Bはインターフェロンβである、使用。
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Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2013136756A (ja) * | 2002-01-18 | 2013-07-11 | Biogen Idec Ma Inc | 生物学的に活性な化合物の結合のための部分を有するポリアルキレングリコール |
Families Citing this family (34)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20150246097A9 (en) * | 2002-01-18 | 2015-09-03 | Biogen Idec Ma Inc. | Polyalkylene Polymer Compounds and Uses Thereof |
RS20050202A (en) | 2002-09-09 | 2007-08-03 | Nektar Therapeuticals Al.Corporation, | Water-soluble polymer alkanals |
US8129330B2 (en) | 2002-09-30 | 2012-03-06 | Mountain View Pharmaceuticals, Inc. | Polymer conjugates with decreased antigenicity, methods of preparation and uses thereof |
PL396711A1 (pl) * | 2002-12-26 | 2011-12-19 | Mountain View Pharmaceuticals, Inc. | Koniugaty polimerów z cytokinami, chemokinami, czynnikami wzrostu, hormonami polipeptydowymi i ich antagonistami, kompozycja farmaceutyczna i sposób zapobiegania, diagnozowania lub leczenia |
RS20050502A (en) * | 2002-12-26 | 2007-08-03 | Mountain View Pharmaceuticals Inc., | Polymer conjugates of interferon- beta with enhanced biological potency |
US7432331B2 (en) | 2002-12-31 | 2008-10-07 | Nektar Therapeutics Al, Corporation | Hydrolytically stable maleimide-terminated polymers |
ATE410186T1 (de) | 2003-06-26 | 2008-10-15 | Control Delivery Sys Inc | In-situ gelierendes arzneimittelabgabesystem |
EP1635787B1 (en) | 2003-06-26 | 2011-12-14 | Control Delivery Systems, Inc. | Bioerodible sustained release drug delivery systems |
WO2005118537A2 (en) * | 2004-05-31 | 2005-12-15 | Ranbaxy Laboratories Limited | Arylpiperazine derivatives as adrenergic receptor antagonists |
AU2005318984B2 (en) | 2004-12-21 | 2011-12-01 | Nektar Therapeutics | Stabilized polymeric thiol reagents |
US20070004635A1 (en) * | 2005-06-02 | 2007-01-04 | Schering Corporation | Method of treating interferon non-responders using HCV protease inhibitor |
MX2008000291A (es) * | 2005-07-08 | 2008-04-04 | Elan Pharm Inc | Preparacion de conjugados polimericos de compuestos de aditivos terapeuticos, agricolas y alimentarios. |
KR20090024166A (ko) * | 2006-05-22 | 2009-03-06 | 엘란 파마슈티칼스, 인크. | 치료학적, 농업적 및 식품 첨가제 화합물의 폴리머 콘주게이트의 제조 |
US20100222546A1 (en) * | 2006-11-28 | 2010-09-02 | David Crich | Methods for the preparation of functionalized peptides, proteins and carbohydrates and their conjugates |
US20090016985A1 (en) * | 2007-07-11 | 2009-01-15 | Enzon Pharmaceuticals, Inc. | Polymeric drug delivery system containing a multi-substituted aromatic moiety |
WO2009009716A1 (en) * | 2007-07-11 | 2009-01-15 | Enzon Pharmaceuticals, Inc. | Polymeric drug delivery systems containing an aromatic allylic acid |
CL2008002399A1 (es) * | 2007-08-16 | 2009-01-02 | Pharmaessentia Corp | Conjugado sustancialmente puro que posee una porcion polimerica, una porcion proteica (interferon alfa 2b) y un ligante alifatico de 1 a 10 atomos de carbono, util en el tratamiento de las hepatitis b o c. |
US20110165121A1 (en) * | 2008-06-05 | 2011-07-07 | Hausman Diana F | Use of pegylated type iii interferons for the treatment of hepatitis c |
EP2313457B1 (en) * | 2008-07-31 | 2020-01-15 | PharmaEssentia Corp. | Peptide-polymer conjugates |
GB0823309D0 (en) * | 2008-12-19 | 2009-01-28 | Univ Bath | Functionalising reagents and their uses |
CN102428512A (zh) | 2009-06-02 | 2012-04-25 | 松下电器产业株式会社 | 下混装置、编码装置以及其方法 |
UA109646C2 (uk) * | 2009-12-10 | 2015-09-25 | Терапевтичне застосування кон'югатів білка з полімером | |
US20130225789A1 (en) * | 2012-02-29 | 2013-08-29 | Yi Sun | Polyethylene Glycol Having Hetero Multiple Functional Groups |
US8993614B2 (en) | 2012-03-15 | 2015-03-31 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Substituted pyrrolidine-2-carboxamides |
KR101475630B1 (ko) * | 2013-05-31 | 2014-12-22 | 동국대학교 산학협력단 | 포도근 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 포함하는 c형 간염의 예방 또는 치료용 조성물 |
US11759500B2 (en) * | 2014-07-24 | 2023-09-19 | Abion Inc. | PEGylated interferon-beta variant |
MX2017002140A (es) * | 2014-08-19 | 2017-08-21 | Biogen Ma Inc | Metodo de pegilacion. |
GB201419108D0 (en) | 2014-10-27 | 2014-12-10 | Glythera Ltd | Materials and methods relating to linkers for use in antibody drug conjugates |
DK3215193T3 (da) | 2014-11-06 | 2024-01-08 | Pharmaessentia Corp | Doseringsregime for pegyleret interferon |
ES2831079T3 (es) * | 2017-06-28 | 2021-06-07 | Construction Research & Technology Gmbh | Dispersante para partículas inorgánicas |
US11472894B2 (en) | 2018-07-23 | 2022-10-18 | Carnegie Mellon University | Enzyme-assisted ATRP procedures |
CN109232898A (zh) * | 2018-08-02 | 2019-01-18 | 张玲 | 一种具有抗凝血功能的聚酰亚胺新材料的制备方法 |
CN111534458B (zh) * | 2020-04-13 | 2022-01-14 | 浙江工业大学 | 无色杆菌tbc-1及其在降解1,3,6,8-四溴咔唑中的应用 |
CN113716982B (zh) * | 2021-08-24 | 2022-05-06 | 重庆云瑞肥业有限公司 | 一种食品垃圾回收用发酵制肥装置 |
Citations (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH10502401A (ja) * | 1994-06-24 | 1998-03-03 | エンゾン,インコーポレーテッド | 非抗原性アミン誘導ポリマーおよびポリマー複合体 |
WO2000023114A2 (en) * | 1998-10-16 | 2000-04-27 | Biogen, Inc. | Polymer conjugates of interferon beta- 1a and their uses |
JP2003518178A (ja) * | 1999-12-22 | 2003-06-03 | シアウォーター・コーポレイション | 水溶性ポリマーの立体的に妨害される誘導体 |
JP2013136756A (ja) * | 2002-01-18 | 2013-07-11 | Biogen Idec Ma Inc | 生物学的に活性な化合物の結合のための部分を有するポリアルキレングリコール |
Family Cites Families (77)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US3710795A (en) | 1970-09-29 | 1973-01-16 | Alza Corp | Drug-delivery device with stretched, rate-controlling membrane |
US4179337A (en) * | 1973-07-20 | 1979-12-18 | Davis Frank F | Non-immunogenic polypeptides |
US4002531A (en) * | 1976-01-22 | 1977-01-11 | Pierce Chemical Company | Modifying enzymes with polyethylene glycol and product produced thereby |
EP0082481B2 (en) | 1981-12-23 | 1990-09-12 | Schering Corporation | Stabilised alpha-interferon formulations and their preparation |
WO1985003934A1 (en) * | 1984-03-06 | 1985-09-12 | Takeda Chemical Industries, Ltd. | Chemically modified protein and process for its preparation |
GB8334102D0 (en) * | 1983-12-21 | 1984-02-01 | Searle & Co | Interferons with cysteine pattern |
EP0154316B1 (en) | 1984-03-06 | 1989-09-13 | Takeda Chemical Industries, Ltd. | Chemically modified lymphokine and production thereof |
DE3675588D1 (de) | 1985-06-19 | 1990-12-20 | Ajinomoto Kk | Haemoglobin, das an ein poly(alkenylenoxid) gebunden ist. |
US4766106A (en) | 1985-06-26 | 1988-08-23 | Cetus Corporation | Solubilization of proteins for pharmaceutical compositions using polymer conjugation |
US4917888A (en) | 1985-06-26 | 1990-04-17 | Cetus Corporation | Solubilization of immunotoxins for pharmaceutical compositions using polymer conjugation |
WO1987000056A1 (en) | 1985-06-26 | 1987-01-15 | Cetus Corporation | Solubilization of proteins for pharmaceutical compositions using polymer conjugation |
JP2514950B2 (ja) | 1986-03-10 | 1996-07-10 | エフ・ホフマン―ラ ロシユ アーゲー | 化学修飾蛋白質,その製造法および中間体 |
US4894226A (en) * | 1986-11-14 | 1990-01-16 | Cetus Corporation | Solubilization of proteins for pharmaceutical compositions using polyproline conjugation |
US5080891A (en) | 1987-08-03 | 1992-01-14 | Ddi Pharmaceuticals, Inc. | Conjugates of superoxide dismutase coupled to high molecular weight polyalkylene glycols |
US5135919A (en) | 1988-01-19 | 1992-08-04 | Children's Medical Center Corporation | Method and a pharmaceutical composition for the inhibition of angiogenesis |
US5116964A (en) * | 1989-02-23 | 1992-05-26 | Genentech, Inc. | Hybrid immunoglobulins |
US5286637A (en) * | 1989-08-07 | 1994-02-15 | Debiopharm, S.A. | Biologically active drug polymer derivatives and method for preparing same |
US5252714A (en) * | 1990-11-28 | 1993-10-12 | The University Of Alabama In Huntsville | Preparation and use of polyethylene glycol propionaldehyde |
US5595732A (en) | 1991-03-25 | 1997-01-21 | Hoffmann-La Roche Inc. | Polyethylene-protein conjugates |
US5281698A (en) | 1991-07-23 | 1994-01-25 | Cetus Oncology Corporation | Preparation of an activated polymer ester for protein conjugation |
AU3423293A (en) * | 1991-12-19 | 1993-07-19 | Baylor College Of Medicine | Pva or peg conjugates of peptides for epitope-specific immunosuppression |
ZA933926B (en) * | 1992-06-17 | 1994-01-03 | Amgen Inc | Polyoxymethylene-oxyethylene copolymers in conjuction with blomolecules |
US5382657A (en) * | 1992-08-26 | 1995-01-17 | Hoffmann-La Roche Inc. | Peg-interferon conjugates |
US5262564A (en) | 1992-10-30 | 1993-11-16 | Octamer, Inc. | Sulfinic acid adducts of organo nitroso compounds useful as retroviral inactivating agents anti-retroviral agents and anti-tumor agents |
US5298410A (en) * | 1993-02-25 | 1994-03-29 | Sterling Winthrop Inc. | Lyophilized formulation of polyethylene oxide modified proteins with increased shelf-life |
US5359030A (en) | 1993-05-10 | 1994-10-25 | Protein Delivery, Inc. | Conjugation-stabilized polypeptide compositions, therapeutic delivery and diagnostic formulations comprising same, and method of making and using the same |
US5681811A (en) * | 1993-05-10 | 1997-10-28 | Protein Delivery, Inc. | Conjugation-stabilized therapeutic agent compositions, delivery and diagnostic formulations comprising same, and method of making and using the same |
US5874075A (en) * | 1993-10-06 | 1999-02-23 | Amgen Inc. | Stable protein: phospholipid compositions and methods |
US5951974A (en) | 1993-11-10 | 1999-09-14 | Enzon, Inc. | Interferon polymer conjugates |
PT730470E (pt) | 1993-11-10 | 2002-08-30 | Enzon Inc | Conjugados melhorados de interferao-polimero |
US5446090A (en) | 1993-11-12 | 1995-08-29 | Shearwater Polymers, Inc. | Isolatable, water soluble, and hydrolytically stable active sulfones of poly(ethylene glycol) and related polymers for modification of surfaces and molecules |
US5639725A (en) | 1994-04-26 | 1997-06-17 | Children's Hospital Medical Center Corp. | Angiostatin protein |
US5650234A (en) | 1994-09-09 | 1997-07-22 | Surface Engineering Technologies, Division Of Innerdyne, Inc. | Electrophilic polyethylene oxides for the modification of polysaccharides, polypeptides (proteins) and surfaces |
US5824784A (en) | 1994-10-12 | 1998-10-20 | Amgen Inc. | N-terminally chemically modified protein compositions and methods |
US5738846A (en) * | 1994-11-10 | 1998-04-14 | Enzon, Inc. | Interferon polymer conjugates and process for preparing the same |
EP0796324A1 (en) * | 1994-12-07 | 1997-09-24 | Novo Nordisk A/S | Polypeptide with reduced allergenicity |
US5932462A (en) | 1995-01-10 | 1999-08-03 | Shearwater Polymers, Inc. | Multiarmed, monofunctional, polymer for coupling to molecules and surfaces |
US5672662A (en) | 1995-07-07 | 1997-09-30 | Shearwater Polymers, Inc. | Poly(ethylene glycol) and related polymers monosubstituted with propionic or butanoic acids and functional derivatives thereof for biotechnical applications |
SE9503380D0 (sv) * | 1995-09-29 | 1995-09-29 | Pharmacia Ab | Protein derivatives |
EP0856026A1 (en) * | 1995-10-19 | 1998-08-05 | Receptagen Corporation | Discrete-length polyethylene glycols |
US5702717A (en) * | 1995-10-25 | 1997-12-30 | Macromed, Inc. | Thermosensitive biodegradable polymers based on poly(ether-ester)block copolymers |
US5908621A (en) * | 1995-11-02 | 1999-06-01 | Schering Corporation | Polyethylene glycol modified interferon therapy |
US5747639A (en) * | 1996-03-06 | 1998-05-05 | Amgen Boulder Inc. | Use of hydrophobic interaction chromatography to purify polyethylene glycols |
JP2001508783A (ja) | 1997-01-29 | 2001-07-03 | ポリマスク・ファーマシューティカルズ・パブリック・リミテッド・カンパニー | Peg化法 |
IL131730A (en) | 1997-03-05 | 2004-06-20 | Univ Washington | Screening methods to identify factors that selectively inhibit hepatitis C virus replication |
US5990237A (en) * | 1997-05-21 | 1999-11-23 | Shearwater Polymers, Inc. | Poly(ethylene glycol) aldehyde hydrates and related polymers and applications in modifying amines |
US7642323B2 (en) * | 1997-11-06 | 2010-01-05 | Nektar Therapeutics | Heterobifunctional poly(ethylene glycol) derivatives and methods for their preparation |
US6448369B1 (en) * | 1997-11-06 | 2002-09-10 | Shearwater Corporation | Heterobifunctional poly(ethylene glycol) derivatives and methods for their preparation |
AU1825299A (en) * | 1997-12-17 | 1999-07-05 | Enzon, Inc. | Polymeric prodrugs of amino- and hydroxyl-containing bioactive agents |
US6180095B1 (en) * | 1997-12-17 | 2001-01-30 | Enzon, Inc. | Polymeric prodrugs of amino- and hydroxyl-containing bioactive agents |
US5985263A (en) | 1997-12-19 | 1999-11-16 | Enzon, Inc. | Substantially pure histidine-linked protein polymer conjugates |
US5981709A (en) | 1997-12-19 | 1999-11-09 | Enzon, Inc. | α-interferon-polymer-conjugates having enhanced biological activity and methods of preparing the same |
US5965119A (en) * | 1997-12-30 | 1999-10-12 | Enzon, Inc. | Trialkyl-lock-facilitated polymeric prodrugs of amino-containing bioactive agents |
DK1411075T3 (da) * | 1998-03-12 | 2008-10-27 | Nektar Therapeutics Al Corp | Fremgangsmåde til fremstilling af polymerkonjugater |
JP4574007B2 (ja) * | 1998-04-28 | 2010-11-04 | メルク・セローノ・ソシエテ・アノニム | ポリオール−ifn−ベータ複体 |
US6703381B1 (en) * | 1998-08-14 | 2004-03-09 | Nobex Corporation | Methods for delivery therapeutic compounds across the blood-brain barrier |
JP2003503367A (ja) * | 1999-06-11 | 2003-01-28 | シアウォーター・コーポレイション | キトサンとポリ(エチレングリコール)または関連ポリマーから得られるヒドロゲル |
HUP0302674A2 (hu) | 1999-08-27 | 2003-11-28 | Maxigen Aps. | Új, béta-interferon-szerű molekulák |
US7144574B2 (en) * | 1999-08-27 | 2006-12-05 | Maxygen Aps | Interferon β variants and conjugates |
US6531122B1 (en) * | 1999-08-27 | 2003-03-11 | Maxygen Aps | Interferon-β variants and conjugates |
US6413507B1 (en) * | 1999-12-23 | 2002-07-02 | Shearwater Corporation | Hydrolytically degradable carbamate derivatives of poly (ethylene glycol) |
ES2367891T3 (es) * | 2000-09-29 | 2011-11-10 | Schering Corporation | Interleucina-10 pegilada. |
US7053150B2 (en) * | 2000-12-18 | 2006-05-30 | Nektar Therapeutics Al, Corporation | Segmented polymers and their conjugates |
TW593427B (en) * | 2000-12-18 | 2004-06-21 | Nektar Therapeutics Al Corp | Synthesis of high molecular weight non-peptidic polymer derivatives |
BR0206852A (pt) * | 2001-02-01 | 2005-05-03 | Biogen Inc | Conjugados de polìmero de neublastina e métodos para uso dos mesmos |
BR0207576A (pt) | 2001-02-27 | 2004-04-27 | Maxygen Aps | Variante glicosilada de um polipeptìdeo de interferon beta precursor (ifnb), processos de aumentar a glicosilação in vivo de uma molécula de ifnb precursora, de produzir uma molécula de ifnb glicosilada, para preparar uma variante conjugada e de tratar um mamìfero com esclerose múltiplam composição farmacêutica, molécula de ifnb variante, sequência de nucleotìdeo, vetor de expressão, célula hospedeira de glicosilação conjugado, e, uso de um conjugado |
US7009033B2 (en) * | 2001-07-02 | 2006-03-07 | Polymer Source Inc. | Heterofunctional polyethylene glycol and polyethylene oxide, process for their manufacture |
MXPA04003597A (es) * | 2001-10-18 | 2004-07-30 | Nektar Therapeutics Al Corp | Conjugados polimericos de antagonistas opiaceos. |
RS53104A (en) * | 2001-11-20 | 2006-10-27 | Pharmacia Corporation | Chemically-modified human growth hormone conjugates |
US7041855B2 (en) * | 2001-12-11 | 2006-05-09 | Sun Bio, Inc. | Monofunctional polyethylene glycol aldehydes |
US6916962B2 (en) | 2001-12-11 | 2005-07-12 | Sun Bio, Inc. | Monofunctional polyethylene glycol aldehydes |
AU2002357806A1 (en) * | 2001-12-11 | 2003-06-23 | Sun Bio, Inc. | Novel monofunctional polyethylene glycol aldehydes |
US6956135B2 (en) * | 2001-12-11 | 2005-10-18 | Sun Bio, Inc. | Monofunctional polyethylene glycol aldehydes |
KR100488351B1 (ko) * | 2001-12-11 | 2005-05-11 | 선바이오(주) | 신규한 폴리에틸렌글리콜-프로피온알데히드 유도체 |
RS20050202A (en) | 2002-09-09 | 2007-08-03 | Nektar Therapeuticals Al.Corporation, | Water-soluble polymer alkanals |
RS20050502A (en) * | 2002-12-26 | 2007-08-03 | Mountain View Pharmaceuticals Inc., | Polymer conjugates of interferon- beta with enhanced biological potency |
US20110165122A1 (en) * | 2009-11-10 | 2011-07-07 | The Regents Of The University Of California | Method for targeted and sustained antiviral therapy |
-
2003
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2016
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-
2017
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-
2020
- 2020-02-06 CY CY20201100115T patent/CY1122841T1/el unknown
Patent Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH10502401A (ja) * | 1994-06-24 | 1998-03-03 | エンゾン,インコーポレーテッド | 非抗原性アミン誘導ポリマーおよびポリマー複合体 |
WO2000023114A2 (en) * | 1998-10-16 | 2000-04-27 | Biogen, Inc. | Polymer conjugates of interferon beta- 1a and their uses |
JP2002527491A (ja) * | 1998-10-16 | 2002-08-27 | バイオジェン インコーポレイテッド | インターフェロン−β−1aのポリマー結合体および使用 |
JP2003518178A (ja) * | 1999-12-22 | 2003-06-03 | シアウォーター・コーポレイション | 水溶性ポリマーの立体的に妨害される誘導体 |
JP2013136756A (ja) * | 2002-01-18 | 2013-07-11 | Biogen Idec Ma Inc | 生物学的に活性な化合物の結合のための部分を有するポリアルキレングリコール |
JP5275125B2 (ja) * | 2002-01-18 | 2013-08-28 | バイオゲン アイデック エムエー インク. | 生物学的に活性な化合物の結合のための部分を有するポリアルキレングリコール |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2013136756A (ja) * | 2002-01-18 | 2013-07-11 | Biogen Idec Ma Inc | 生物学的に活性な化合物の結合のための部分を有するポリアルキレングリコール |
JP2016014022A (ja) * | 2002-01-18 | 2016-01-28 | バイオゲン エムエー インコーポレイテッド | 生物学的に活性な化合物の結合のための部分を有するポリアルキレングリコール |
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AU2003210564A1 (en) | Polyalkylene glycol with moiety for conjugating biologically active compound | |
US20170049904A1 (en) | Polyalkylene polymer compounds and uses thereof |
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