JP2012062308A

JP2012062308A - ４−イソプロピルフェニルグルシトール化合物を有効成分として含有することを特徴とする糖尿病の予防又は治療剤

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Publication number: JP2012062308A
Application number: JP2011176509A
Authority: JP
Inventors: Hiroyuki Kakinuma; 浩行柿沼; Yohei Kobashi; 陽平小橋; Tomomichi Naganami; 具通長南; Takahiro Oi; 隆宏大井; Fumiyasu Shiozawa; 史康塩澤; Yuki Iwata; 由紀岩田; Kenichi Kawabe; 憲一川部
Original assignee: Taisho Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Taisho Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 2010-08-20
Filing date: 2011-08-12
Publication date: 2012-03-29
Anticipated expiration: 2031-08-12
Also published as: JP5817317B2

Abstract

【課題】体内残留性の傾向がなく、ＳＧＬＴ１（ナトリウム依存性グルコ−ス共輸送体１）活性を阻害し、小腸でのグルコース等の吸収を抑制することで、耐糖能異常若しくは糖尿病における食後高血糖を抑制する、新しいタイプの糖尿病の予防又は治療剤を見出すこと。
【解決手段】下記式（Ｉ）で表される４−イソプロピルフェニルグルシトール化合物又はその製薬学的に許容される塩を有効成分として含有することを特徴とする糖尿病の予防又は治療剤。

式中、Ｒ^１は水素原子等を示し、Ｒ^２はメチル基等を示し、Ｒ^３はアミノ基で置換されたＣ_１−４アルキル基等を示し、Ｒ^４は水素原子等を示す。
【選択図】なし

Description

本発明は、特異的に小腸でのグルコ−ス及びガラクトースの吸収に関わるナトリウム依存性グルコ−ス共輸送体１（以下、適宜に「ＳＧＬＴ１」と略記する。）の阻害活性を有する４−イソプロピルフェニルグルシトール化合物に関する。

血糖値はメタボリックシンドロームのバイオマーカーの一つとなっており、空腹時血糖が１２６ｍｇ／ｄＬ以上を示すと糖尿病と診断される。また、空腹時血糖が正常であっても、食後２時間血糖値が１４０〜２００ｍｇ／ｄＬの場合には、耐糖能異常（又は食後高血糖）と診断される。近年の疫学的研究によれば、耐糖能異常が心血管障害のリスクを高めると報告されている(非特許文献１及び２参照)。さらに、運動療法や薬物治療を施すことで耐糖能異常から２型糖尿病への移行を抑制し、高血圧の発症も有意に抑制することが報告されている(非特許文献３参照)。

以上のことから、食後高血糖を抑制することが糖尿病やメタボリックシンドロームの発症抑制に重要であると考えられ、食後高血糖をコントロールする薬剤の需要が高まりつつある。

従来、食後高血糖改善薬としては、糖類の加水分解酵素を阻害し、小腸からの糖の吸収を遅延させるα−グルコシダ−ゼ阻害剤が汎用されてきたが、新しい作用機序を有する食後高血糖改善薬の開発も行われている。

哺乳動物の小腸上皮には高い頻度でナトリウム依存性グルコ−ス共輸送体１（ＳＧＬＴ１）が発現している。このＳＧＬＴ１は小腸において、ナトリウムに依存し、グルコ−ス及びガラクト−スの能動輸送を司ることが知られている。そこで、食事由来のグルコ−ス吸収を抑制し、食後高血糖の予防又は治療を行うという、ＳＧＬＴ１活性を阻害するピラゾ−ル誘導体が報告されている（特許文献１〜６参照）。また、ＳＧＬＴ１に加え、腎臓に発現するＳＧＬＴ２活性を同時に阻害するＣ−フェニルグルシトール誘導体についての報告もある（特許文献７参照）。

国際公開第ＷＯ２００２／０９８８９３号パンフレット国際公開第ＷＯ２００４／０１４９３２号パンフレット国際公開第ＷＯ２００４／０１８４９１号パンフレット国際公開第ＷＯ２００４／０１９９５８号パンフレット国際公開第ＷＯ２００５／１２１１６１号パンフレット国際公開第ＷＯ２００４／０５０１２２号パンフレット国際公開第ＷＯ２００７／１３６１１６号パンフレット

Pan XR, et al. Diabetes Care, 第20巻, 537頁, 1997年 M Tominaga, et al. Diabetes Care, 第22巻, 920頁, 1999年 J.−L. Chiasson, et al. Lancent, 第359巻, 2072頁, 2002年

本発明の目的は、ＳＧＬＴ１活性を阻害し、消化管からのグルコ−ス吸収抑制作用を有する新しいタイプの糖尿病治療薬として期待される４−イソプロピルフェニルグルシトール化合物を提供することである。

本発明者らはＣ−フェニルグルシトール化合物のベンゼン環上の置換基として、イソプロピル基やメチル基を導入した。さらに、ベンゼン環から伸びる置換基の末端にアミノ基を有する置換ブテニル基を導入した。これら置換基の導入によって、ＳＧＬＴ１活性を阻害し、腎臓等の主要臓器に残留しない４−イソプロピルフェニルグルシトール化合物を見出すに至った。

以下に、本発明の４−イソプロピルフェニルグルシトール化合物（以下、「本発明化合物」という）の態様を述べる。

（１）下記式（Ｉ）で表される４−イソプロピルフェニルグルシトール化合物又はその製薬学的に許容される塩を有効成分として含有することを特徴とする糖尿病の予防又は治療剤：

式中、
Ｒ^１は水素原子、又はＣ_１−４アルキル基であり、
Ｒ^２は水素原子、又はメチル基であり、
Ｒ^３は“アミノ基若しくはジＣ_１−４アルキルアミノ基で置換されたＣ_１−４アルキル基”、又はピペリジル基であり、
Ｒ^４は水素原子であり、
又はＲ^３とＲ^４は隣接する窒素原子と共にピペリジノ基若しくはピペラジニル基を形成し、それらはＣ_１−４アルキル基若しくはジメチルアミノ基で置換されていてもよい。

（２）下記群から選択される４−イソプロピルフェニルグルシトール化合物又はその製薬学的に許容される塩を有効成分として含有することを特徴とする糖尿病の予防又は治療剤。

（３）下記群から選択される４−イソプロピルフェニルグルシトール化合物又はその製薬学的に許容される塩を有効成分として含有することを特徴とする糖尿病の予防又は治療剤。

本発明により、ＳＧＬＴ１活性を阻害する４−イソプロピルフェニルグルシトール化合物を提供することが可能となった。

エタノール溶媒和物の粉末Ｘ線回折パターンを示す。エタノール溶媒和物の赤外吸収スペクトル（ＫＢｒ法）を示す。エタノール溶媒和物の示差熱分析／熱質量測定カーブを示す。Ａ形結晶の粉末Ｘ線回折パターンを示す。Ａ形結晶の示差熱分析／熱質量測定カーブを示す。

本発明において使用する用語を以下に定義する。

「Ｃ_1-４アルキル基」とは、炭素原子を１−４個有する直鎖状又は分枝状のアルキル基を意味する。例えば、メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、イソプロピル基、ｎ−ブチル基、イソブチル基、ｔｅｒｔ−ブチル等が挙げられる。

「ジＣ_1-４アルキルアミノ基」とは、同一の又は異なる２つのＣ_1-４アルキル基で置換されたアミノ基を意味する。例えば、ジメチルアミノ基やジエチルアミノ基等が挙げられる。

また、「製薬学的に許容される塩」とは、アルカリ金属類、アルカリ土類金属類、アンモニウム、アルキルアンモニウムなどとの塩、鉱酸又は有機酸との塩であり、例えば、ナトリウム塩、カリウム塩、カルシウム塩、アンモニウム塩、アルミニウム塩、トリエチルアンモニウム塩、ぎ酸塩、酢酸塩、プロピオン酸塩、酪酸塩、ヘキサン酸塩、オクタン酸塩、トリフルオロ酢酸塩、マレイン酸塩、酒石酸塩、クエン酸塩、ステアリン酸塩、コハク酸塩、エチルコハク酸塩、ラクトビオン酸塩、グルコン酸塩、グルクロン酸、グルコヘプトン酸塩、グルタール酸塩、ピメリン酸塩、スベリン酸塩、アゼライン酸塩、セバシン酸塩、１，９−ノナンジカルボン酸塩、ドデカン二酸塩、トリデカン二酸塩、テトラデカン二酸塩、ペンタデカン二酸塩、ヘキサデカン二酸塩、ヘプタデカン二酸塩、安息香酸塩、２−ヒドロキシ安息香酸塩、メタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、エタンジスルホン酸塩、２−ヒドロキシエタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、１，５−ナフタレンジスルホン酸塩、ラウリル硫酸塩、乳酸塩、馬尿酸塩、フマル酸塩、マロン酸塩、トランスケイ皮酸塩、リンゴ酸塩、アスパラギン酸塩、グルタミン酸塩、アジピン酸塩、システインとの塩、Ｎ−アセチルシステインとの塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、リン酸塩、硫酸塩、よう化水素酸塩、ニコチン酸塩、シュウ酸塩、ピクリン酸塩、チオシアン酸塩、ウンデカン酸塩、アクリル酸ポリマーとの塩、カルボキシビニルポリマーとの塩を挙げることができる。

「水和物」とは、本発明化合物又はその塩の製薬学的に許容される水和物である。本発明化合物又はその塩は、大気にさらされ、あるいは製造過程で、水分を吸収し、吸着水がつく場合や、水和物となる場合がある。本発明における水和物には、そのような水和物も含まれる。

本発明化合物は、ＳＧＬＴ１を阻害し、小腸からの糖の吸収を抑制して、ＩＧＴを改善することができる。

よって、本発明化合物は、ＳＧＬＴ１阻害剤、あるいは、糖尿病、糖尿病関連疾患及び糖尿病合併症の予防又は治療剤の有効成分として用いることができる。

ここで、「糖尿病」には、１型糖尿病、２型糖尿病の他、特定の原因によるその他の型の糖尿病が含まれる。

ここで、「糖尿病関連疾患」とは、高インスリン血症、糖代謝異常、高脂質血症、高コレステロール血症、高トリグリセリド血症、脂質代謝異常、高血圧、うっ血性心不全、浮腫、高尿酸血症、痛風などが挙げられる。

ここで、「糖尿病合併症」は、急性合併症及び慢性合併症に分類される。

「急性合併症」には、高血糖（ケトアシドーシスなど）、感染症（皮膚、軟部組織、胆道系、呼吸系、***など）などが挙げられる。

「慢性合併症」には、細小血管症（腎症、網膜症）、動脈硬化症（アテローム性動脈硬化症、心筋梗塞、脳梗塞、下肢動脈閉塞など）、神経障害（感覚神経、運動神経、自律神経など）、足壊疽などが挙げられる。

主要な合併症は、糖尿病網膜症、糖尿病腎症、糖尿病神経障害である。

本発明化合物は、医薬として、全身的又は局所的に、経口投与又は非経口投与することができる。
非経口投与としては、静脈内投与、経鼻投与、経皮投与、皮下投与、筋肉内投与、舌下投与があげられる。

本発明化合物を医薬として提供する場合、固形剤、液剤等の種々の態様の製剤形態を適宜に採択することができる。その際、製薬学的に許容される担体を配合することも可能である。そのような担体の例としては、一般的な賦形剤、増量剤、結合剤、崩壊剤、被覆剤、糖衣剤、ｐＨ調整剤、溶解剤又は水性若しくは非水性溶媒などが挙げられる。本発明の化合物とこれらの担体から、錠剤、丸剤、カプセル剤、顆粒剤、粉剤、散剤、液剤、乳剤、懸濁剤、注射剤等であり、いずれも慣用の製剤技術（例えば、第１５改正日本薬局方に規定する方法等）によって製造することができる。これらの投与剤型は、患者の症状、年齢、体重、及び治療の目的に応じて適宜選択することができる。
これらの製剤は、本発明の化合物を含有する組成物に薬理学的に許容されるキャリヤー、すなわち、賦形剤（例えば、結晶セルロース、デンプン、乳糖、マンニトール）、結合剤（例えば、ヒドロキシプロピルセルロース、ポリビニルピロリドン）、滑沢剤（例えば、ステアリン酸マグネシウム、タルク）、崩壊剤（例えば、カルボキシメチルセルロースカルシウム）、その他薬理学的に許容される各種添加剤を配合し、製造することができる。

本発明化合物の投与量は、疾患、症状、体重、年齢、性別、投与経路等により異なってくるが、例えば、成人の糖尿病患者に経口投与する場合、通常１回量として０．００１ｍｇ〜１０００ｍｇ、好ましくは０．０１ｍｇ〜２００ｍｇであり、０．１〜１０ｍｇ／ｋｇ体重がより好ましい。この量を１日１回から数回に分けて投与することができる。

以下に、類似構造化合物に対する本発明化合物の優位性を示す。

後掲する表２に本願類似化合物の糖負荷後の血糖低下作用と腎臓内濃度を示した。化合物４、１０、１１及び３３は１ｍｇ／ｋｇ経口投与後の糖負荷試験において、強い血糖低下作用を示した。一方で、１ｍｇ／ｋｇ経口投与した７日後、化合物は***されず腎臓に残留する傾向が見られた。標的臓器はＳＧＬＴ１が多く分布する小腸である。従って、標的臓器以外に化合物が長く残留することで、予期せぬ副作用が発現する場合がある。例えば、分子内に3級アミンの様な親水性基と芳香環の様な疎水性基をもつ化合物は、陽イオン性薬物と呼ばれる。これらは、リン脂質と疎水結合し、ライソゾーム内に取り込まれ全身の器官に蓄積されることがある。薬物によって、蓄積が見られる器官は異なり、クロロキンでは網膜障害、パーヘキシリンでは肺や小脳に変化が見られる（日薬理誌 Folia Pharmacol. Jpn. 113, 19-30, 1999）。

このようなことから、化合物が薬効を示した後に体内から速やかに***されることが望ましい。

次に、本発明化合物の糖負荷後の血糖低下作用と腎臓内濃度を後掲の表３に示した。実施例１−２、５−２、６−２、１３−２、１５−２は上記類似化合物と同様に強い血糖降下作用を有した。しかし、意外にも化合物を３ｍｇ／ｋｇの用量で３日間連続投与したにも関わらず、２日後に腎臓に残留しないという特徴を示した。このことは表２に示した類似化合物に比べて、本願化合物が医薬品として実用性に関連する重要な性質であると考える。

また、下記の実施例化合物は連投による毒性懸念も低いことが期待できる。

したがって、本発明の好ましい態様は、以下に示す実施例化合物である。

以下に、本発明化合物（Ｉ）の製造方法を例を挙げて詳細に説明するが、例示されたものに特に限定されない。

製造法１
本発明化合物（Ｉ）は以下の方法で合成することができる。

ただし、Ｘはアセチル基またはＣ_１−４アルキル基を示し、Ｒ^５はＲ^３もしくはアミノ基がｔｅｒｔ−ブチルカーボネート（Ｂｏｃ）で保護されたＲ^３を示し、その他の記号は前記と同義である。

（１）工程１（Ｈｅｃｋ反応）
化合物（ＩＩ）とオレフィンカルボン酸（ＩＩＩ）をパラジウム触媒とホスフィンリガンド、及び適当な塩基の存在下、Ｈｅｃｋ反応を行うことにより化合物（ＩＶ）を得ることができる。このとき用いるパラジウム触媒としては、酢酸パラジウム、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム、ジベンジリデンアセトンパラジウム、ビス（トリフェニルホスフィン）パラジウムクロリド、ビス（トリシクロヘキシルホスフィン）パラジウムクロリド、パラジウム活性炭等が挙げられる。ホスフィンリガンドとしてはトリフェニルホスフィンやトリ−ｏ−トリルホスフィン等が挙げられる。また、塩基にはトリエチルアミン、Ｎ−エチル−Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルアミン、炭酸カリウム、炭酸カルシウム、炭酸セシウム、カリウムｔ−ブトキシド等が用いられる。反応に用いられる溶媒としては、アセトニトリル、トルエン、テトラヒドロフラン等が挙げられる。反応温度は０℃から還流温度であるが、マイクロウェ−ブを用いることもある。

（２）工程２（アミド基への変換）
化合物（ＩＶ）をアミン（Ｒ^５Ｒ^４ＮＨ）と脱水縮合し、化合物（Ｖ）を得ることができる。この反応に使用する溶媒としては、クロロホルム、ジクロロメタン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド等が挙げられ、脱水縮合剤としては、Ｎ，Ｎ´−ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）、Ｎ−エチル−Ｎ´−３−ジメチルアミノプロピルカルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ−ＨＣｌ）、１、１´−カルボニルジイミダゾ−ル（ＣＤＩ）、ＥＤＣ−ＨＣｌ／１−ヒドロキシベンゾトリアゾ−ル一水和物（ＨＯＢｔ・Ｈ_２Ｏ）等が挙げられる。ここでの反応温度は０℃〜６０℃である。

（３）工程３（脱保護）
化合物（Ｖ）中のＢｏｃ基を酸性条件下除去し、アセチル（Ａｃ）基を塩基性条件下除去することで化合物（Ｉ）を得ることができる。Ｂｏｃ基には、ジクロロメタン、クロロホルム、ジオキサン等の溶媒中、または無溶媒で塩酸またはトリフルオロ酢酸を作用させる。アセチル基には、ナトリウムメトキシド、水酸化ナトリウム、水酸化リチウム、炭酸カリウム、炭酸セシウム、トリエチルアミン等の塩基を用いることができる。溶媒としては、メタノール、エタノール、含水メタノール等が挙げられる。ここでの反応温度は０℃〜６０℃である。

製造法２
本発明化合物（Ｉ）は以下に示す別ルートによって合成することもできる。ただし、記号は前記と同義である。

（４）工程４（Ｈｅｃｋ反応）
化合物（ＩＩ）とオレフィンカルボン酸（ＶＩ）を用いて製造法１の工程１に記載したＨｅｃｋ反応を行うことにより、化合物（ＶＩＩ）を得ることができる。

（５）工程５（アミド基への変換）
化合物（ＶＩＩ）とアミン（ＶＩＩＩ）を用いて製造法１の工程２に記載した脱水縮合反応を行うことにより、化合物（Ｖ）を得ることができる。

（６）工程６（脱保護）
上記で得られた化合物（Ｖ）を製造法１の工程３に記載した脱保護反応によって化合物（Ｉ）へ導くことができる。

製造法３
中間体（ＩＩ）の製造法
本発明化合物（Ｉ）の製造に必要な中間体（ＩＩ）の製造法を以下に示す。

ただし、Ｘ^１はベンジル基又はＣ_１−４アルキル基を示し、Ｘ^２はトリメチルシリル基又はＣ_１−４アルキル基を示し、その他の記号は前記と同義である。

（７）工程７（カップリング）
化合物（ＩＸ）にｎ−ブチルリチウム、ｓｅｃ−ブチルリチウム、ｔｅｒｔ−ブチルリチウム等の有機金属試薬を用いてアリ−ルリチウム試薬を調製することができる。これに、グルコノラクトン（Ｘ）を加えることで化合物（ＸＩ）を得ることができる。このとき反応に用いられる溶媒としては、テトラヒドロフラン、ジエチルエ−テル、トルエン等が挙げられる。反応温度は−８０℃から室温であり、好ましくは−７８℃〜−２５℃である。

（８）工程８（酸加水分解及びメチルエーテル化）
化合物（ＸＩ）中のシリル基を酸性条件下メタノール中で除去すると共に、糖の１位をメチルエーテル化し化合物（ＸＩＩ）を得ることができる。このとき用いる酸としては、塩酸、硫酸、メタンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸一水和物、ピリジニウムｐ−トルエンスルホン酸等を用いることができる。反応温度は用いる酸によって異なるが、０℃〜１００℃、好ましくは２５℃〜８０℃である。

（９）工程９（アセチル化）
化合物（ＸＩＩ）中の水酸基をアセチル基で保護することにより、化合物（ＸＩＩＩ）を得ることができる。化合物（ＸＩＩ）と、無水酢酸、またはアセチルクロリド等を溶媒中、適当な塩基存在下反応させ化合物（ＸＩＩＩ）を得ることができる。反応に用いる溶媒としては、クロロホルム、ジクロロメタン、ジオキサン、酢酸エチル、テトラヒドロフラン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド等である。塩基としてはトリエチルアミン、コリジン、ピリジン等を用いることができる。反応の触媒として４−ジメチルアミノピリジンを用いることもできる。また、ここでの反応温度は０℃〜室温である。

（１０）工程１０（還元）
化合物（ＸＩＩＩ）とＥｔ_３ＳｉＨ、ｉ−Ｐｒ_３ＳｉＨ、ｔ−ＢｕＭｅ_２ＳｉＨ又はＰｈ_２ＳｉＨＣｌを、ルイス酸の存在下で反応させ、化合物（ＸＩＶ）を得ることができる。この反応に使用するルイス酸としては、ＢＦ_３・ＯＥｔ_２、ＣＦ_３ＣＯＯＨ、ＩｎＣｌ_３、ＴｉＣｌ_４、ＴＭＳＯＴｆ、ｐ−トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸等が挙げられ、溶媒としては、クロロホルム、ジクロロメタン、トルエン、テトラヒドロフラン、アセトニトリル又はそれらの混合溶媒が挙げられ、好ましい溶媒はアセトニトリル／クロロホルム、アセトニトリル／ジクロロメタン、アセトニトリル／テトラヒドロフラン、アセトニトリル／テトラヒドロフラン／トルエン等のアセトニトリルと他の溶媒との混合溶媒である。ここでの反応温度は−６０℃〜２５℃、好ましくは−３０℃〜２５℃である。

（１１）工程１１（脱保護）
化合物（ＸＩＶ）中のＸ^１がベンジル基の場合は、パラジウム活性炭、水酸化パラジウム、又は白金−パラジウム活性炭等の触媒を用いて水素雰囲気下にて接触水素添加することにより、脱ベンジル化を行うことができる。中でもパラジウム活性炭、水酸化パラジウムが触媒として好ましい。この反応に使用する溶媒としては、メタノ−ル、エタノ−ル、イソプロパノ−ル、酢酸エチル、酢酸、およびこれらの混合溶媒が挙げられる。反応温度は室温から還流温度であるが、室温が好ましい。

（１２）工程１２（臭素化）
化合物（ＸＩＶ）、または上記工程１１で得られた化合物と、臭素、Ｎ−ブロモスクシンイミド、臭化水素等を溶液中反応させて、化合物（ＸＶ）を得ることができる。反応に用いる溶媒としては、クロロホルム、ジクロロメタン、酢酸、メタノール、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド等である。ここでの反応温度は０℃〜室温である。

（１３）工程１３（脱保護）
化合物（ＸＶ）中のアセチル基を塩基性条件下除去することで化合物（ＸＶＩ）を得ることができる。塩基としては、ナトリウムメトキシド、水酸化ナトリウム、水酸化リチウム、炭酸カリウム、炭酸セシウム、トリエチルアミン等の塩基を用いることができる。溶媒としては、メタノール、エタノール、含水メタノール等を用いることができる。ここでの反応温度は０℃〜６０℃である。

（１４）工程１４（シリル化）
化合物（ＸＶＩ）中の水酸基をトリメチルシリル基等のシリル基で保護することにより、化合物（ＸＶＩＩ）を得ることができる。化合物（ＸＶＩ）と、トリメチルシリルクロリド、トリエチルシリルクロリド、ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルクロリド等を溶媒中、適当な塩基存在下反応させ化合物（ＸＶＩＩ）を得ることができる。反応に用いる溶媒としては、クロロホルム、ジクロロメタン、ジオキサン、酢酸エチル、テトラヒドロフラン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド等が挙げられる。塩基としてはトリエチルアミン、コリジン、ピリジン等を用いることができる。また、ここでの反応温度は０℃〜室温である。

（１５）工程１５（カップリング）
化合物（ＸＶＩＩ）にｎ−ブチルリチウム、ｓｅｃ−ブチルリチウム、ｔｅｒｔ−ブチルリチウム等の有機金属試薬を用いてアリ−ルリチウム試薬を調製することができる。これに、アルデヒド（ＸＶＩＩＩ）を加えることで化合物（ＸＩＸ）を得ることができる。このとき反応に用いられる溶媒としては、テトラヒドロフラン、ジエチルエ−テル、トルエン等が挙げられる。反応温度は−８０℃から室温であり、好ましくは−７８℃〜−２５℃である。

（１６）工程１６（酸加水分解）
上記で得られた化合物（ＸＩＸ）を製造法３の工程８に記載した酸加水分解反応によって化合物（ＸＸ）へ導くことができる。

（１７）工程１７（アセチル化）
上記で得られた化合物（ＸＸ）を製造法３の工程９に記載したアセチル化反応によって化合物（ＸＸＩ）へ導くことができる。

（１８）工程１８（還元）
上記で得られた化合物（ＸＸＩ）を製造法３の工程１０に記載した還元反応によって中間体（ＩＩ）へ導くことができる。

製造法４
中間体（ＩＩ）の製造法
中間体（ＩＩ）は以下に示す別ルートによって合成することもできる。ここでは、工程１９から２１までワンポットで行い工程数を短縮することができる。

ただし、記号は前記と同義である。

（１９）工程１９（カップリング）
化合物（ＸＸＩＩ）にｎ−ブチルリチウム、ｓｅｃ−ブチルリチウム、ｔｅｒｔ−ブチルリチウム等の有機金属試薬を用いてアリ−ルリチウム試薬を調製することができる。これに、グルコノラクトン（Ｘ）を加えることで化合物（ＸＸＩＩＩ）を得ることができる。このとき反応に用いられる溶媒としては、テトラヒドロフラン、ジエチルエ−テル、トルエン等が挙げられる。反応温度は−８０℃から室温であり、好ましくは−７８℃〜−２５℃である。

（２０）工程２０（シリル化）
上記工程１９に引き続いて、化合物（ＸＸＩＩＩ）の１位水酸基をトリメチルシリル基等のシリル基で保護することができる。工程１９の反応液に、トリメチルシリルクロリドを反応させ化合物（ＸＸＩＶ）を得ることができる。反応に用いる溶媒および反応温度は、工程１９と同じである。

（２１）工程２１（カップリング）
上記工程２０に引き続いて、生成した化合物（ＸＸＩＶ）にｎ−ブチルリチウム、ｓｅｃ−ブチルリチウム、ｔｅｒｔ−ブチルリチウム等の有機金属試薬を用いてアリ−ルリチウム試薬を調製することができる。これに、アルデヒド（ＸＶＩＩＩ）を加えることで化合物（ＸＸＶ）を得ることができる。このとき反応に用いられる溶媒および反応温度は、工程１９と同じである。

（２２）工程２２（酸加水分解）
上記で得られた化合物（ＸＸＶ）を製造法３の工程８に記載した酸加水分解反応によって化合物（ＸＸＶＩ）へ導くことができる。

（２３）工程２３（アセチル化）
上記で得られた化合物（ＸＸＶＩ）を製造法３の工程９に記載したアセチル化反応によって化合物（ＸＸＶＩＩ）へ導くことができる。

（２４）工程２４（還元）
上記で得られた化合物（ＸＸＶＩＩ）を製造法３の工程１０に記載した還元反応によって化合物（ＸＸＶＩＩＩ）へ導くことができる。

（２５）工程２５（アセチル化またはアルキル化）
化合物（ＸＸＶＩＩＩ）の水酸基を、アセチル基で保護するまたはメチル化等のアルキル化を行うことで、中間体（ＩＩ）を製造することができる。化合物（ＸＸＶＩＩＩ）と、無水酢酸、またはアセチルクロリド等を溶媒中、適当な塩基存在下反応させ中間体（ＩＩ）を得ることができる。反応に用いる溶媒としては、クロロホルム、ジクロロメタン、ジオキサン、酢酸エチル、テトラヒドロフラン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド等である。塩基としてはトリエチルアミン、コリジン、ピリジン等が挙げられる。触媒として４−ジメチルアミノピリジン等を用いることもできる。また、ここでの反応温度は０℃〜室温である。一方、化合物（ＸＸＶＩＩＩ）と、ヨウ化メチル、ヨウ化エチル、ヨウ化イロプロピル等を溶媒中、適当な塩基存在下反応させ中間体（ＩＩ）を得ることができる。反応に用いる溶媒としては、クロロホルム、ジクロロメタン、テトラヒドロフラン、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、アセトン等である。塩基としては炭酸カリウム、炭酸セシウム等を用いることができる。

以下に、参考例、実施例及び試験例を挙げ、本発明をより詳細に説明する。

参考例１中間体（Ａ）の製造

（１）参考例１−１化合物（Ａ１）

３−イソプロピルフェノール（２５ｇ，０．１８４ｍｏｌ）の酢酸（２００ｍＬ）溶液にヨウ素酸カリウム（７．８８ｇ，０．０３６８ｍｏｌ）の水懸濁液（７５ｍＬ）とヨウ素（１８．７ｇ，０．０７３６ｍｏｌ）を加え、この反応溶液を室温で２０時間攪拌した。ジエチルエーテル（４００ｍＬ）と水（３００ｍＬ）を加えた後に、有機層を分離した。その有機層を水、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄した後、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。乾燥剤を濾別後、溶媒を減圧下留去し得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(ヘキサン：酢酸エチル＝９５：５)にて精製し、無色油状の化合物（Ａ１）（２７．６ｇ，５７％）を得た。
¹H NMR (200 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.16 - 1.25 (m, 6 H) 2.64 - 2.98 (m, 1 H) 5.21 (s, 1 H) 6.57 (dd, J=8.13, 2.20 Hz, 1 H) 6.88 (d, J=2.20 Hz, 1 H) 7.54 (d, J=8.13 Hz, 1 H).
（２）参考例１−２化合物（Ａ２）

化合物（Ａ１）（２６．５ｇ，０．１０１ｍｏｌ）と炭酸カリウム（２０．９ｇ，０．１５２ｍｏｌ）のアセトニトリル懸濁液に臭化ベンジル（１４．４ｍＬ，０．１２１ｍｏｌ）を加え室温で２時間攪拌した。メタノール（１．０ｍＬ）を加え３０分攪拌した。不溶物をろ過し、ろ液を濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(ヘキサン：酢酸エチル＝９５：５)にて精製し、無色油状の化合物（Ａ２）（３０．２ｇ，８５％）を得た。
¹H NMR (200 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.21 (d, J=7.03 Hz, 6 H) 2.84 (sept, J=7.03 Hz, 1 H) 5.14 (s, 2 H) 6.62 (dd, J=8.35, 2.20 Hz, 1 H) 6.74 (d, J=2.20 Hz, 1 H) 7.23 - 7.58 (m, 5 H) 7.68 (d, J=8.35 Hz, 1 H).
（３）参考例１−３化合物（Ａ３）

化合物（Ａ２）（３０．２ｇ，８５．７ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（４５０ｍＬ）溶液に窒素雰囲気下、−７８℃にて２．６Ｍｎ−ブチルリチウムへキサン溶液（３３ｍＬ，８５．７ｍｍｏｌ）を滴下し、同温にて１５分間攪拌した。次いで２，３，４，６−テトラ−Ｏ−トリメチルシリル−Ｄ−グルコノ−１，５−ラクトン（４０ｇ，８５．７ｍｍoｌ）のＴＨＦ（２３０ｍL）溶液を１５分かけて滴下し、同温にて２０分間攪拌した。反応液に飽和塩化アンモニウム水溶液（１５０ｍＬ）と水（１００ｍＬ）を加えた。この混合物を室温まで温めた後に、酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。乾燥剤を濾別後、溶媒を減圧下留去した。

得られた残渣をメタンスルホン酸（２．９ｇ）を含むメタノール（８４０ｍＬ）溶液に溶解し、室温で１４．５時間攪拌した。トリエチルアミン（２．５ｍＬ）で中和し、反応混合物を濃縮した。

得られた残渣（４６．４ｇ）をピリジン（１２５ｍＬ）に溶解し、４℃に冷却した。この溶液に無水酢酸（７５ｍＬ）と４−ジメチルアミノピリジン（１０２ｍｇ，０．８３５ｍｍｏｌ）を加え、室温で１９時間攪拌した。氷水（５００ｍＬ）を加え、混合物を酢酸エチル（５００ｍＬ）で２回抽出した。合わせた有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。乾燥剤を濾別後、溶媒を減圧下留去し粗化合物（５３ｇ）を得た。

この粗化合物のクロロホルム（２５０ｍＬ）とアセトニトリル（２５０ｍＬ）溶液に、窒素雰囲気下４℃にてＥｔ₃ＳｉＨ（１３．７ｍＬ，８５．７ｍｍｏｌ）とＢＦ₃・Ｅｔ₂Ｏ（１０．９ｍＬ，８５．７ｍｍｏｌ）を加え、同温で１．５時間攪拌した。反応液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、クロロホルムで抽出後、有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。乾燥剤を濾別後、溶媒を減圧下留去し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝５：１→２：１）にて精製し、淡黄色のアモルファスとして化合物（Ａ３）（１９．１ｇ，４０％；４工程）を得た。
¹H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.21 (d, J=6.99 Hz, 6 H) 1.78 (s, 3 H) 2.01 (s, 6 H) 2.05 (s, 3 H) 2.86 (sept, J=6.99 Hz, 1 H) 3.80 (ddd, J=9.95, 4.59, 2.25 Hz, 1 H) 4.06 - 4.13 (m, 1 H) 4.19 - 4.27 (m, 1 H) 4.96 (d, J=9.95 Hz, 1 H) 5.10 (s, 2 H) 5.16 - 5.25 (m, 1 H) 5.33 (t, J=9.17 Hz, 1 H) 5.40 - 5.49 (m, 1 H) 6.79 (d, J=1.40 Hz, 1 H) 6.85 (dd, J=7.93, 1.40 Hz, 1 H) 7.26 - 7.52 (m, 6 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 579[M+Na]⁺.
（４）参考例１−４化合物（Ａ４）

化合物（Ａ３）（１９．１ｇ，３４．３ｍｍｏｌ）のメタノール（２００ｍＬ）溶液に１０％パラジウム活性炭（１．８ｇ）を加え、水素雰囲気下、室温にて２時間攪拌した。反応液をセライト濾過後、溶媒を減圧下留去し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝２：１→１：１）にて精製し、無色アモルファスとして化合物（Ａ４）（１２．３ｇ，７７％）を得た。
¹H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.20 (d, J=6.89 Hz, 6 H) 1.83 (s, 3 H) 2.01 (s, 3 H) 2.06 (s, 3 H) 2.12 (s, 3 H) 2.82 (sept, J=6.89 Hz, 1 H) 3.87 (ddd, J=9.60, 3.85, 2.25 Hz, 1 H) 4.14 - 4.21 (m, 1 H) 4.27 - 4.36 (m, 1 H) 4.59 (d, J=9.33 Hz, 1 H) 5.23 - 5.39 (m, 3 H) 6.70 (dd, J=7.93, 1.71 Hz, 1 H) 6.77 (d, J=1.71 Hz, 1 H) 6.80 (s, 1 H) 6.91 (d, J=7.93 Hz, 1 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 489[M+Na]⁺.
MS ESI/APCI Dual nega : 501[M+Cl]⁻.
（５）参考例１−５化合物（Ａ５）

化合物（Ａ４）（１２．３ｇ，２６．３ｍｏｌ）の酢酸（１２０ｍＬ）溶液に、臭素（４．２ｇ，２６．３ｍｍｏｌ）を室温にて滴下した。反応混合液を１．５時間攪拌し、氷水（１５０ｍＬ）を加えた。この混合物を酢酸エチルで２回抽出し、合わせた有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、１０％チオ硫酸ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。乾燥剤を濾別後、溶媒を減圧下留去した。得られた残渣を２−プロパノール（２０ｍＬ）に溶解し、ヘキサン（５０ｍＬ）を滴下した。混合物を４℃で１時間攪拌し、析出した沈殿をろ過して無色粉末の化合物（Ａ５）（９．８ｇ，６８％）を得た。
¹H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.12 - 1.26 (m, 6 H) 1.89 (s, 3 H) 2.01 (s, 3 H) 2.07 (s, 3 H) 2.13 (s, 3 H) 3.22 (sept, J=6.74 Hz, 1 H) 3.87 (ddd, J=9.48, 3.73, 2.18 Hz, 1 H) 4.14 - 4.22 (m, 1 H) 4.28 - 4.36 (m, 1 H) 4.53 (d, J=9.33 Hz, 1 H) 5.16 - 5.39 (m, 3 H) 6.82 (s, 1 H) 7.14 (s, 1 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 567[M+Na]⁺, 569[M+2+Na]⁺.
MS ESI/APCI Dual nega : 579[M+Cl]⁻, 581[M+2+Cl]⁻.
（６）参考例１−６化合物（Ａ６）

化合物（Ａ５）（１２．２ｇ，２２．３ｍｏｌ）のメタノール（１２０ｍＬ）溶液に、トリエチルアミン（２４ｍＬ）と水（２４ｍＬ）を加えた。反応混合物を室温で１５時間、さらに５０℃で１０時間攪拌し、溶媒を減圧下留去した。得られた残渣をＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１０６ｍＬ）に溶解し、窒素雰囲気下４℃にてトリエチルアミン（１８．６ｍＬ）とクロロトリメチルシラン（１４．３ｍＬ）を加えた。反応混合物を４℃にて１時間攪拌し、氷水（１５０ｍＬ）を加えた。この混合物をトルエンで３回抽出し、合わせた有機層を水、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。乾燥剤を濾別後、溶媒を減圧下留去し、油状の化合物（Ａ６）（１７．４ｇ）を得た。これを精製せずに次の反応に用いた。
¹H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm -0.28 (s, 9 H) 0.08 (s, 9 H) 0.19 (s, 9 H) 0.20 (s, 9 H) 0.29 (s, 9 H) 1.16 (d, J=6.84 Hz, 3 H) 1.21 (d, J=6.84 Hz, 3 H) 3.17 - 3.37 (m, 1 H) 3.41 - 3.56 (m, 3 H) 3.62 - 3.72 (m, 1 H) 3.76 - 3.86 (m, 1 H) 4.46 (d, J=8.24 Hz, 1 H) 6.64 (s, 1 H) 7.47 (s, 1 H).
（７）参考例１−７化合物（Ａ７）

化合物（Ａ６）（１３．４ｇ，１５．９ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１４０ｍＬ）溶液に窒素雰囲気下、−７８℃にて２．６Ｍｎ−ブチルリチウムへキサン溶液（７．７ｍＬ，２０．０ｍｍｏｌ）を１０分かけて滴下し、同温にて５分間攪拌した。次いで４−ブロモ−２−メチルベンズアルデヒド（３．２ｇ，１５．９ｍｍoｌ）のＴＨＦ（２４ｍL）溶液を１５分かけて滴下し、同温にて４５分間攪拌した。反応液に飽和塩化アンモニウム水溶液（１００ｍＬ）と水（１００ｍＬ）を加えた。この混合物を室温まで温めた後に、酢酸エチルで２回抽出した。合わせた有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。乾燥剤を濾別後、溶媒を減圧下留去した。

得られた残渣をメタンスルホン酸（０．９ｇ）を含むメタノール（２００ｍＬ）溶液に溶解し、室温で０．５時間攪拌した。トリエチルアミンで中和し、反応混合物を濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール＝１０：１→８：１）で精製し、無色アモルファスの化合物（Ａ７）（５．７５ｇ，７３％）を得た。
¹H NMR (600 MHz, METHANOL-d₄) δ ppm 1.01 and 1.04 (each d, J=6.88 Hz, 3 H) 1.18 and 1.19 (each d, J=6.88 Hz, 3 H) 2.24 and 2.26 (each s, 3 H) 2.95 - 3.07 (m, 1 H) 3.35 - 3.69 (m, 5 H) 3.78 - 3.87 (m, 1 H) 4.37 - 4.50 (m, 1 H) 5.59 (s, 1 H) 6.80 (s, 1 H) 6.98 - 7.10 (m, 2 H) 7.24 - 7.30 (m, 1 H) 7.33 (s, 1 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 479[M-OH]⁺, 481[M+2-OH]⁺．
（８）参考例１−８中間体（Ａ）

化合物（Ａ７）（５．７ｇ，１１．５ｍｍｏｌ）をピリジン（３４ｍＬ）に溶解した。この溶液に無水酢酸（１７ｍＬ）と４−ジメチルアミノピリジン（１０ｍｇ）を加え、室温で０．５時間攪拌した。氷水（５００ｍＬ）を加え、混合物を酢酸エチル（５００ｍＬ）で２回抽出した。合わせた有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。乾燥剤を濾別後、溶媒を減圧下留去し粗化合物（８．５ｇ）を得た。

この粗化合物（８．５ｇ）のクロロホルム（８０ｍＬ）とアセトニトリル（８０ｍＬ）溶液に、窒素雰囲気下４℃にてＥｔ₃ＳｉＨ（２．７ｍＬ，１７．０ｍｍｏｌ）とＢＦ₃・Ｅｔ₂Ｏ（２．２ｍＬ，１７．０ｍｍｏｌ）を加えた。反応液を室温まで温めた後に、同温で０．５時間攪拌した。反応液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、クロロホルムで抽出後、有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。乾燥剤を濾別後、溶媒を減圧下留去した。得られた残渣をヘキサン：酢酸エチル＝４：１混合液から結晶化し、析出した沈殿をろ過して無色粉末の中間体（Ａ）（５．３ｇ，６８％）を得た。
¹H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.12 (d, J=6.68 Hz, 3 H) 1.14 (d, J=6.68 Hz, 3 H) 1.76 (s, 3 H) 1.99 (s, 3 H) 2.03 (s, 3 H) 2.06 (s, 3 H) 2.27 (s, 3 H) 2.37 (s, 3 H) 2.93 (sept, J=6.68 Hz, 1 H) 3.76 (ddd, J=9.87, 4.51, 2.25 Hz, 1 H) 3.87 (s, 2 H) 4.06 (dd, J=12.51, 2.25 Hz, 1 H) 4.27 (dd, J=12.51, 4.51 Hz, 1 H) 4.49 (d, J=9.64 Hz, 1 H) 5.10 - 5.33 (m, 3 H) 6.59 (d, J=8.39 Hz, 1 H) 6.97 (s, 1 H) 7.00 (s, 1 H) 7.20 (dd, J=8.39, 2.49 Hz, 1 H) 7.34 (d, J=2.49 Hz, 1 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 713[M+Na]⁺, 715[M+2+Na]⁺．
また、中間体（Ａ）は参考例１−９、１０、１１に記載の方法でも合成することができる。
（９）参考例１−９化合物（Ａ８）

３−イソプロピルフェノール（１６０ｇ，１．１８ｍｏｌ）の酢酸（１．６Ｌ）溶液に、氷冷で内温１９℃を超えないように臭素（４６９ｇ，２．９４ｍｏｌ）の酢酸（３２０ｍＬ）溶液を３２分かけて滴下し、室温で１時間攪拌した。トルエン（１．６Ｌ）を加えた後に氷冷し、内温２０℃を超えないように１０％亜硫酸ナトリウム水溶液（１．０Ｌ）を滴下して有機層を分離した。その有機層を１０％亜硫酸ナトリウム水溶液（１．０Ｌ）、１０％塩化ナトリウム水溶液（１．０Ｌ）で２回洗浄した後、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。乾燥剤を濾別後、溶媒を減圧下留去し、淡黄色油状化合物（Ａ８）（３４２ｇ，９９％）を得た。
¹H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.21 (d, J=6.84 Hz, 6 H) 3.25 (sept, J=6.84 Hz, 1 H) 5.40 (s, 1 H) 6.96 (s, 1 H) 7.61 (s, 1 H).
（１０）参考例１−１０化合物（Ａ９）

化合物（Ａ８）（５１２ｇ，１．７４ｍｏｌ）のクロロホルム（１．７４Ｌ）溶液に、Ｎ、Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（３６４ｍＬ，２．０９ｍｏｌ）を加えて氷冷した。クロロメチルメチルエーテル（１５９ｍＬ，２．０９ｍｏｌ）を６０分かけて滴下し、室温で１時間攪拌した。反応液を氷冷し、１Ｍ水酸化ナトリウム水溶液（１．５Ｌ）を滴下して有機層を分離した。その有機層を１Ｍ水酸化ナトリウム水溶液（１．５Ｌ）、水（１．５Ｌ）で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。乾燥剤を濾別後、溶媒を減圧下留去した。得られた残渣を減圧蒸留（０．９３〜１．５ｈｐａ，１２２℃〜１３７℃）にて精製し、淡黄色油状化合物（Ａ９）（５４８ｇ，９６％）を得た。
¹H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.22 (d, J=6.84 Hz, 6 H) 3.28 (sept, J=6.84 Hz, 1 H) 3.52 (s, 3 H) 5.23 (s, 2 H) 7.06 (s, 1 H) 7.69 (s, 1 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 339[M+H]⁺, 341[M+2+H]⁺.

（１１）参考例１−１１中間体（Ａ）
化合物（Ａ９）（２１０ｇ，０．６２１ｍｏｌ）のＴＨＦ（３．１Ｌ）溶液に、アルゴン雰囲気下−８６〜−７４℃にて２．７６Ｍｎ−ブチルリチウムへキサン溶液（２３６ｍＬ，０．６５２ｍｏｌ）を２０分かけて滴下し、同温にて３５分間攪拌した。次いで２，３，４，６−テトラ−Ｏ−トリメチルシリル−Ｄ−グルコノ−１，５−ラクトン（３０５ｇ，０．６５２ｍｏｌ）のＴＨＦ（８９０ｍＬ）溶液を同温にて３８分かけて滴下し、同温にて５０分間攪拌した。さらにトリメチルクロロシラン（８２．８ｍＬ，０．６５２ｍｍｏｌ）を４分かけて滴下し、同温にて３時間撹拌した。次いで２．７６Ｍｎ−ブチルリチウムへキサン溶液（３２６ｍＬ，０．９０１ｍｏｌ）を２３分かけて滴下し、同温にて４０分間攪拌した。最後に４−ブロモ−２−メチルベンズアルデヒド（１３６ｇ，０．６８３ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（８９０ｍL）溶液を４３分かけて滴下し、同温にて３５分間撹拌した。反応液に水（３．１Ｌ）を加えて室温まで温めた。トルエン（３．１Ｌ）を加えて有機層を分離し、溶媒を減圧下留去した。

得られた残渣（６３３ｇ）をメタノール（３．１Ｌ）に溶解し、メタンスルホン酸（４．０３ｍＬ，０．０６２１ｍｏｌ）を加えて１時間加熱還流を行った。反応液を室温まで冷却後、トリエチルアミン（１７．３ｍＬ，０．１２４ｍｏｌ）で中和し、反応混合物を濃縮した。濃縮物（４１３ｇ）をトルエン（１．１Ｌ）に溶解し、水（１．６５Ｌ）で３回洗浄した。その有機層に１Ｍ水酸化ナトリウム水溶液（０．５５Ｌ）とトルエン（０．５５Ｌ）を加えて抽出操作を行い、水層を分離した。その水層をトルエン（１．６５Ｌ）で洗浄した。水層に２Ｍ塩酸（０．４３Ｌ）とトルエン（１．１Ｌ）を加えて抽出し、有機層を分離した。その有機層を１０％塩化ナトリウム水溶液（１．１Ｌ）で洗浄し、溶媒を減圧下留去した。

得られた残渣（２７３ｇ）をＴＨＦ（１．０１Ｌ）に溶解し、Ｎ、Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（７７６ｍＬ，４．５３ｍｏｌ）、無水酢酸（３８１ｍＬ，４．０３ｍｏｌ）と４−ジメチルアミノピリジン（６１５ｍｇ，５．０４ｍｍｏｌ）を加え、室温で２１時間攪拌した。反応液を氷冷して水（１．０Ｌ）とトルエン（１．０Ｌ）を加え、有機層を分離した。その有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（１．０Ｌ）で洗浄し、溶媒を減圧下留去した。
得られた残渣（３９０ｇ）をアセトニトリル（３．８５Ｌ）に溶解し、水（９．０７ｍＬ，０．５０４ｍｏｌ）、ｔ−ＢｕＭｅ_２ＳｉＨ（３３４ｍＬ，２．０２ｍｍｏｌ）を加え、氷冷後ＴＭＳＯＴｆ（３９２ｍＬ，２．１７ｍｍｏｌ）を３０分かけて滴下した。同温で１時間撹拌後、無水酢酸（９５．２ｍＬ，１．０１ｍｏｌ）を１０分かけて滴下し、さらに同温で１５分間撹拌した。反応液にトルエン（３．８５Ｌ）と３％炭酸水素ナトリウム水溶液（１．９２Ｌ）を加え、有機層を分離した。その有機層を３％炭酸水素ナトリウム水溶液（１．９２Ｌ）、１０％塩化ナトリウム水溶液（１．９２Ｌ）で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。乾燥剤を濾別後、溶媒を減圧下留去し得られた残渣を２−プロパノール（１．４２Ｌ）から結晶化し、析出した沈殿をろ過して無色粉末の中間体（Ａ）（２０１ｇ，４７％；４工程）を得た。

参考例２中間体（Ｂ）の製造

（１）参考例２−１化合物（Ｂ１）

化合物（Ａ１）（２７．４ｇ，０．１０４ｍｏｌ）と炭酸カリウム（２１．７ｇ，０．１５６ｍｏｌ）のアセトニトリル懸濁液（２００ｍＬ）にヨウ化メチル（９．８ｍＬ，０．１５６ｍｏｌ）を加え４０℃で２．５時間攪拌した。ヨウ化メチル（３．５ｍＬ，０．０５２ｍｏｌ）を更に加え、同温で１時間攪拌した。不溶物をろ過し、ろ液を酢酸エチルで希釈した。有機層を水、１０％チオ硫酸ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。乾燥剤を濾別後、溶媒を減圧下留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(ヘキサン→ヘキサン：酢酸エチル＝９５：５)にて精製し、淡黄色油状の化合物（Ｂ１）（２４．５ｇ，８５％）を得た。
¹H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.24 (d, J=6.84 Hz, 6 H) 2.87 (sept, J=6.84 Hz, 1 H) 3.88 (s, 3 H) 6.58 - 6.65 (m, 1 H) 6.70 (d, J=1.87 Hz, 1 H) 7.65 (d, J=8.08 Hz, 1 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 277[M+H]⁺.
（２）参考例２−２化合物（Ｂ２）

化合物（Ｂ１）（２４．５ｇ，８８．６ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１００ｍＬ）溶液に窒素雰囲気下、−７８℃にて２．６Ｍｎ−ブチルリチウムへキサン溶液（３４ｍＬ，８８．６ｍｍｏｌ）を滴下し、同温にて５分間攪拌した。次いで２，３，４，６−テトラ−Ｏ−トリメチルシリル−Ｄ−グルコノ−１，５−ラクトン（３７．６ｇ，８０．５ｍｍoｌ）のＴＨＦ（６０ｍL）溶液を２５分かけて滴下し、同温にて１０分間攪拌した。反応液に氷と水を加え、混合物を室温まで温めた後に、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。乾燥剤を濾別後、溶媒を減圧下留去した。

得られた残渣をメタンスルホン酸（１．５５ｇ，１６．１ｍｍｏｌ）を含むメタノール（３８０ｍＬ）溶液に溶解し、室温で２時間攪拌した。トリエチルアミン（１１．２ｍＬ，８０．５ｍｍｏｌ）で中和し、反応混合物を濃縮した。

得られた残渣（３０．２ｇ）をピリジン（１００ｍＬ）に溶解し、無水酢酸（１００ｍＬ）を加え、室温で１４時間攪拌した。氷水（４００ｍＬ）を加え、混合物を酢酸エチル（２００ｍＬ）で２回抽出した。合わせた有機層を１Ｍ塩酸、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。乾燥剤を濾別後、溶媒を減圧下留去し得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン→ヘキサン：酢酸エチル＝６：４）にて精製し、淡黄色油状の化合物（Ｂ２）（３２．８ｇ，８０％；３工程）を得た。
¹H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.23 (d, J=6.92 Hz, 6 H) 1.84 (s, 3 H) 1.97 (s, 3 H) 2.06 (s, 3 H) 2.10 (s, 3 H) 2.87 (sept, J=6.92 Hz, 1 H) 3.32 (s, 3 H) 3.87 (s, 3 H) 4.04 (ddd, J=10.18, 4.74, 2.41 Hz, 1 H) 4.17 - 4.23 (m, 1 H) 4.28 - 4.36 (m, 1 H) 5.25 (dd, J=10.18, 9.40 Hz, 1 H) 5.36 (d, J=10.18 Hz, 1 H) 5.60 (dd, J=10.18, 9.40 Hz, 1 H) 6.74 (d, J=1.55 Hz, 1 H) 6.79 (dd, J=8.08, 1.55 Hz, 1 H) 7.26 - 7.33 (m, 1 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 533[M+Na]⁺.
（３）参考例２−３化合物（Ｂ３）

化合物（Ｂ２）（３２．８ｇ，６４．０ｍｍｏｌ）のクロロホルム（１５０ｍＬ）とアセトニトリル（１５０ｍＬ）溶液に、窒素雰囲気下４℃にてＥｔ₃ＳｉＨ（２１ｍＬ，１２８ｍｍｏｌ）とＢＦ₃・Ｅｔ₂Ｏ（４９ｍＬ，３８５ｍｍｏｌ）を加え、同温で１時間攪拌した。反応液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、クロロホルムで抽出後、有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。乾燥剤を濾別後、溶媒を減圧下留去し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝２：１）にて精製し、淡黄色ガム状の化合物（Ｂ３）（２２．９ｇ，７４％）を得た。
¹H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.22 (d, J=6.99 Hz, 6 H) 1.77 (s, 3 H) 2.01 (s, 3 H) 2.05 (s, 3 H) 2.07 (s, 3 H) 2.87 (sept, J=6.96 Hz, 1 H) 3.80 - 3.87 (m, 1 H) 3.84 (s, 3 H) 4.09 - 4.16 (m, 1 H) 4.22 - 4.29 (m, 1 H) 4.88 - 4.95 (m, 1 H) 5.18 - 5.27 (m, 1 H) 5.32 - 5.38 (m, 2 H) 6.71 (d, J=1.55 Hz, 1 H) 6.83 (dd, J=7.93, 1.55 Hz, 1 H) 7.23 - 7.30 (m, 1 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 503[M+H]⁺.
MS ESI/APCI Dual nega : 515[M+Cl]⁻.
（４）参考例２−４化合物（Ｂ４）

化合物（Ａ４）の代わりに化合物（Ｂ３）を用いて、参考例１−５と同様の方法で淡黄色アモルファスの化合物（Ｂ４）（２５．５ｇ，９６％）を得た。
¹H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.20 (d, J=6.84 Hz, 3 H) 1.23 (d, J=6.84 Hz, 3 H) 1.80 (s, 3 H) 2.01 (s, 3 H) 2.05 (s, 3 H) 2.09 (s, 3 H) 3.31 (sept, J=6.84 Hz, 1 H) 3.77 - 3.82 (m, 1 H) 3.83 (s, 3 H) 4.10 - 4.17 (m, 1 H) 4.22 - 4.30 (m, 1 H) 4.83 (d, J=9.48 Hz, 1 H) 5.17 - 5.38 (m, 3 H) 6.75 (s, 1 H) 7.49 (s, 1 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 581[M+Na]⁺, 583[M+2+Na]⁺.
（５）参考例２−５化合物（Ｂ５）

化合物（Ａ５）の代わりに化合物（Ｂ４）を用いて、参考例１−６と同様の方法で茶色油状の化合物（Ｂ５）（３０．３ｇ）を得た。これを精製せずに次の反応に用いた。
¹H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm -0.32 (s, 9 H) 0.09 (s, 9 H) 0.18 (s, 9 H) 0.20 (s, 9 H) 1.19 (d, J=6.84 Hz, 3 H) 1.23 (d, J=6.84 Hz, 3 H) 3.26 - 3.44 (m, 3 H) 3.52 - 3.58 (m, 2 H) 3.65 - 3.75 (m, 3 H) 3.76 - 3.83 (m, 1 H) 3.80 (s, 3 H) 4.60 (d, J=8.55 Hz, 1 H) 6.72 (s, 1 H) 7.51 (s, 1 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 701[M+Na]⁺, 703[M+2+Na]⁺.
（６）参考例２−６化合物（Ｂ６）

化合物（Ａ６）の代わりに化合物（Ｂ５）を用いて、参考例１−７と同様の方法で茶色アモルファスの化合物（Ｂ６）（１４．７ｇ，６０％）を得た。
¹H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.23 and 1.25 (each d, J=6.84 Hz, 6 H) 1.80 (s, 2 H) 2.27 and 2.29 (each s, 3 H) 2.30 - 2.58 (m, 2 H) 2.82 - 3.06 (m, 2 H) 3.34 and 3.35 (each s, 3 H) 3.38 - 3.86 (m, 6 H) 4.56 - 4.73 (m, 1 H) 5.53 (d, J=3.11 Hz, 1 H) 6.75 - 7.35 (m, 5 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 493[M-OH]⁺, 495[M+2-OH]⁺
（７）参考例２−７中間体（Ｂ）

化合物（Ａ７）の代わりに化合物（Ｂ６）を用いて、参考例１−８と同様の方法で無色アモルファスの中間体（Ｂ）（１４．２ｇ，８８％）を得た。
¹H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.11 (d, J=6.68 Hz, 3 H) 1.14 (d, J=6.68 Hz, 3 H) 1.75 (s, 3 H) 1.99 (s, 3 H) 2.04 (s, 3 H) 2.05 (s, 3 H) 2.28 (s, 3 H) 2.90 (sept, J=6.68 Hz, 1 H) 3.71 - 3.90 (m, 3 H) 3.86 (s, 3H) 3.85 - 3.87 (m, 1 H) 4.05 - 4.15 (m, 1 H) 4.19 - 4.28 (m, 1 H) 4.77 - 4.85 (m, 1 H) 5.11 - 5.23 (m, 1 H) 5.26 - 5.37 (m, 2 H) 6.54 (d, J=8.24 Hz, 1 H) 6.81 (s, 1 H) 6.96 (s, 1 H) 7.17 (dd, J=8.24, 2.64 Hz, 1 H) 7.32 (d, J=2.64 Hz, 1 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 685[M+Na]⁺, 687[M+2+Na]⁺．
参考例３中間体（Ｃ）の製造

４−ブロモ−２−メチルベンズアルデヒドの代わりに４−ブロモベンズアルデヒドを用いて、参考例１−７および参考例１−８と同様の方法で淡黄色アモルファスとして化合物（Ｃ）（２．２６ｇ）を得た。
¹H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.04 (d, J=6.84 Hz, 3 H) 1.09 (d, J=6.84 Hz, 3 H) 1.76 (s, 3 H) 2.01 (s, 3 H) 2.05 (s, 3 H) 2.06 (s, 3 H) 2.91 - 3.06 (m, 1 H) 3.80 - 3.88 (m, 4 H) 3.91 (d, J=5.13 Hz, 2 H) 4.06 - 4.18 (m, 1 H) 4.20 - 4.31 (m, 1 H) 4.82 - 4.93 (m, 1 H) 5.15 - 5.43 (m, 3 H) 6.77 (s, 1 H) 6.92 (d, J=8.55 Hz, 2 H) 7.11 (s, 1 H) 7.36 (d, J=8.55 Hz, 2 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 671[M+Na]⁺, 683[M+2+Na]⁺
参考例４中間体（Ｄ）の製造

（１）参考例４−１化合物（Ｄ１）

２，２−ジメチル−３−ブテノイックアシッド（J. Org. Chem., 第65巻, 8402頁，2000年）（５．４２ｇ，４７．５ｍｍｏｌ）のクロロホルム（２５０ｍＬ）溶液に窒素雰囲気下、塩化オキサリル（４．４３ｍＬ，４９．９ｍｍｏｌ）とＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３滴）を加え、室温で１．５時間攪拌した。その後反応液を氷冷し、トリエチルアミン（１９．９ｍＬ，１４３ｍｍｏｌ）とα−アミノイソブチリックアシッドメチルエステル塩酸塩（１０．９ｇ，７１．２ｍｍｏｌ）を加え、室温で１時間攪拌した。反応液に水を加え、クロロホルムで抽出後、有機層を３Ｍ塩酸、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。乾燥剤を濾別後、溶媒を減圧下留去し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン→ヘキサン：酢酸エチル＝４：１）にて精製し、無色粉末の化合物（Ｄ１）（９．３８ｇ，９３％）を得た。
¹H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.27 (s, 6 H) 1.51 (s, 6 H) 3.73 (s, 3 H) 5.17 - 5.32 (m, 2 H) 6.02 (dd, J=17.56, 10.57 Hz, 1 H) 6.25 (br. s., 1 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 214[M+H]⁺.
（２）参考例４−２中間体（Ｄ）

化合物（Ｄ１）（９．３８ｇ，４３．９ｍｍｏｌ）のメタノール（２０ｍＬ）溶液に４Ｍ水酸化ナトリウム水溶液（１６．５ｍＬ，６６．０ｍｍｏｌ）を加え、室温で１時間攪拌した。その後、反応混合物を濃縮した。得られた残渣を水に溶解し、３Ｍ塩酸を加えて中和した。この混合物を酢酸エチルで抽出し、合わせた有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。乾燥剤を濾別後、溶媒を減圧下留去し、無色粉末の中間体（Ｄ）（８．１９ｇ，９４％）を得た。
¹H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.29 (s, 6 H) 1.54 (s, 6 H) 5.16 - 5.36 (m, 2 H) 6.01 (dd, J=17.49, 10.65 Hz, 1 H) 6.14 (s, 1 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 200[M+H]⁺, 222[M+Na]⁺.
MS ESI/APCI Dual nega : 198[M-H]⁻.
参考例５中間体（Ｅ）の製造

アルゴン雰囲気下、中間体（Ａ）（５．０ｇ，７．２３ｍｍｏｌ）、中間体（Ｄ）（２．５９ｇ，１３．０ｍｍｏｌ）、酢酸パラジウム（ＩＩ）（３２８ｍｇ，１．４５ｍｍｏｌ）、トリ-ｏ-トリルホスフィン（８８０ｍｇ，２．８９ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（３．０ｍＬ，９．００ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（２４ｍＬ）懸濁液を、マイクロウェーブ照射下１２０℃で２０分間攪拌した。反応液をセライトろ過し、酢酸エチルで洗浄した。ろ液を減圧下濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝１：１→酢酸エチル）にて精製し、淡黄色粉末の中間体（Ｅ）（４．５９ｇ，７８％）を得た。
¹H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.16, 1.18 (each d J=6.84 Hz, 3 H) 1.40 (s, 6 H) 1.54 - 1.58 (m, 6 H) 1.76 (s, 3 H) 1.99 (s, 3 H) 2.03 (s, 3 H) 2.05 (s, 3 H) 2.28 (s, 3 H) 2.36 (s, 3 H) 2.98 - 3.10 (m, 1 H) 3.71 - 3.79 (m, 1 H) 3.94 (s, 2 H) 4.01 - 4.08 (m, 1 H) 4.24 (dd, J=12.43, 4.51 Hz, 1 H) 4.47 (d, J=9.17 Hz, 1 H) 5.07 - 5.32 (m, 3 H) 6.31 (d, J=16.32 Hz, 1 H) 6.35 (s, 1 H) 6.55 (d, J=16.32 Hz, 1 H) 6.77 (d, J=7.62 Hz, 1 H) 6.92 (s, 1 H) 6.99 (s, 1 H) 7.12 - 7.18 (m, 1 H) 7.26 (s, 1 H) .
MS ESI/APCI Dual posi : 810[M+H]⁺, 832[M+Na]⁺ .
MS ESI/APCI Dual nega : 808[M−H]⁻.
参考例６中間体（Ｆ）の製造

アルゴン雰囲気下、中間体（Ｂ）（２．０ｇ，３．０ｍｍｏｌ）、中間体（Ｄ）（１．０８ｇ，５．４ｍｍｏｌ）、酢酸パラジウム（ＩＩ）（１３６ｍｇ，０．６ｍｍｏｌ）、トリ-ｏ-トリルホスフィン（３７０ｍｇ，１．２ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（１．２６ｍＬ，９．０ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（１０ｍＬ）懸濁液を、マイクロウェーブ照射下１２０℃で２０分間攪拌した。反応液をセライトろ過し、酢酸エチルで洗浄した。ろ液を減圧下濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝１：１→酢酸エチル）にて精製し、淡黄色粉末の中間体（Ｆ）（２．０３ｇ，８７％）を得た。
¹H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.14, 1.17 (each d, J=6.99 Hz, 3 H) 1.38 (s, 6 H) 1.55 (s, 6 H) 1.76 (s, 3 H) 1.98 (s, 3 H) 2.04 (s, 6 H) 2.30 (s, 3 H) 2.94 - 3.03 (m, 1 H) 3.76 - 3.83 (m, 1 H) 3.84 - 3.95 (m, 4 H) 4.06 - 4.15 (m, 1 H) 4.16 - 4.25 (m, 1 H) 4.81 (d, J=9.79 Hz, 1 H) 5.12 - 5.20 (m, 1 H) 5.23 - 5.35 (m, 2 H) 6.29 (s, 1H) 6.31 (d, J=16.32 Hz, 1 H) 6.52 (d, J=16.32 Hz, 1 H) 6.67 (d, J=8.08 Hz, 1 H) 6.81 (s, 1 H) 6.94 (s, 1 H) 7.06 - 7.14 (m, 1 H) 7.24 (s, 1 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 782[M+H]⁺, 804[M+Na]⁺ .
MS ESI/APCI Dual nega : 780[M-H]⁻.
参考例７中間体（Ｇ）の製造

中間体（Ａ）の代わりに中間体（Ｃ）を用いて参考例５と同様の方法で淡黄色アモルファスの中間体（Ｇ）（８５４ｍｇ，６０％）を得た。
¹H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.08 (d, J=6.84 Hz, 3 H) 1.12 (d, J=6.84 Hz, 3 H) 1.38 (s, 6 H) 1.53 (s, 6 H) 1.77 (s, 3 H) 2.00 (s, 3 H) 2.05 (s, 6 H) 3.06 (sept, J=6.84 Hz, 1 H) 3.78 - 3.83 (m, 1 H) 3.84 (s, 3 H) 3.97 (s, 2 H) 4.07 - 4.18 (m, 1 H) 4.17 - 4.27 (m, 1 H) 4.87 (dd, J=6.76, 2.88 Hz, 1 H) 5.16 - 5.25 (m, 1 H) 5.27 - 5.40 (m, 2 H) 6.18 - 6.33 (m, 2 H) 6.54 (d, J=16.48 Hz, 1 H) 6.77 (s, 1 H) 7.03 (d, J=8.08 Hz, 2 H) 7.10 (s, 1 H) 7.29 (d, J=8.08 Hz, 2 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 768[M+H]⁺, 790[M+Na]⁺.
MS ESI/APCI Dual nega : 766[M-H]⁻.
参考例８中間体（Ｈ）の製造

アルゴン雰囲気下、中間体（Ａ）（２１６ｇ，０．３１２ｍｏｌ）、２，２−ジメチル−３−ブテノイックアシッド（５３．４ｇ，０．４６７ｍｏｌ）、酢酸パラジウム（ＩＩ）（３．５０ｇ，１５．６ｍｍｏｌ）、トリ-ｏ-トリルホスフィン（９．４８ｇ，３１．２ｍｍｏｌ）、トリエチルアミン（８６．９ｍＬ，０．６２３ｍｏｌ）のアセトニトリル（６２３ｍＬ）懸濁液を、３時間加熱還流した。反応液を室温まで冷却した後にクロロホルム（３００ｍＬ）とメタノール（１００ｍＬ）を加えて希釈し、セライトろ過した。ろ液を減圧下濃縮し、得られた残渣を酢酸エチル（１．３２Ｌ）に溶解させた。１Ｍ塩酸（０．９６Ｌ）、１０％塩化ナトリウム水溶液（１．２Ｌ）で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。乾燥剤を濾別後、ろ液にさらに酢酸エチル（１．２Ｌ）を追加して、イソプロピルアミン（２８．２ｍＬ，０．３２７ｍｏｌ）を加え、室温から０℃にかけて１時間撹拌した。析出した沈殿をろ過して中間体（Ｈ）のイソプロピルアミン塩を得た。この塩を酢酸エチル（１．２Ｌ）、１Ｍ塩酸（５００ｍＬ）に溶解させて３０分間撹拌し、有機層を分離した。その有機層を１０％塩化ナトリウム水溶液（５００ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。乾燥剤を濾別後、溶媒を減圧下留去して無色のアモルファスとして中間体（Ｈ）（２０７ｇ，８８％）を得た。
¹H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.13 (d, J=6.80 Hz, 3 H) 1.14 (d, J=6.80 Hz, 3 H) 1.43 (s, 6 H) 1.76 (s, 3 H) 1.99 (s, 3 H) 2.03 (s, 3 H) 2.05 (s, 3 H) 2.28 (s, 3 H) 2.37 (s, 3 H) 2.98 (sept, J=6.80 Hz, 1 H) 3.70 - 3.80 (m, 1 H) 3.91 (s, 2 H) 4.05 (dd, J=12.43, 2.18 Hz, 1 H) 4.28 (dd, J=12.43, 4.35 Hz, 1 H) 4.43 - 4.50 (m, 1 H) 5.11 - 5.20 (m, 1 H) 5.22 - 5.33 (m, 2 H) 6.33 - 6.49 (m, 2 H) 6.68 (d, J=7.93 Hz, 1 H) 6.96 (s, 1 H) 6.99 (s, 1 H) 7.06 - 7.14 (m, 1 H) 7.23 (d, J=1.40 Hz, 1 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 747[M+Na]⁺.
参考例９中間体（Ｉ）の製造

２−アミノイソ酪酸（１５０ｇ，１．４５ｍｏｌ）を水（２．２Ｌ）に溶解し、炭酸ナトリウム（４６５ｇ，４．３９ｍｏｌ）を加えた。反応液を氷冷し、クロロギ酸ベンジル（２２７ｍＬ，１．６０ｍｏｌ）の１，４−ジオキサン（０．６３Ｌ）溶液を内温が１０℃を超えないように４５分かけて滴下した。室温で一晩撹拌後、反応液に水（３．５Ｌ）とトルエン（１．０Ｌ）を加え、水層を分離した。その水層にｐＨ＝１になるまで濃塩酸（７００ｍＬ）を滴下した。酢酸エチル（１．０Ｌ）を加えて１時間撹拌し、有機層を分離した。その有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥して乾燥剤を濾別後、溶媒を減圧下留去した。

得られた残渣（３３８ｇ）をクロロホルム（１．７Ｌ）に溶解し、氷冷下Ｎ，Ｎ’−カルボニルジイミダゾール（２５３ｇ，１．５６ｍｏｌ）を内温が２０℃を超えないように少量ずつ加えた。室温で３０分間撹拌後、再度氷冷して１，２−ジアミノ−２−メチルプロパン（１３８ｇ，１．５６ｍｏｌ）を２５分かけて滴下した。室温で１晩撹拌後、１０％炭酸カリウム水溶液（１．７Ｌ）を加え、有機層を分離した。その有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥して乾燥剤を濾別後、溶媒を減圧下留去した。

得られた残渣（４１７ｇ）をＴＨＦ（２．０Ｌ）に溶解し、Ｂｏｃ_２Ｏ（３５５ｇ，１．６３ｍｏｌ）を加えて、室温で１．５時間撹拌した。その後反応液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（１．０Ｌ）を加え、有機層を分離した。その有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥して乾燥剤を濾別後、溶媒を減圧下留去した。

得られた残渣（５４９ｇ）をメタノール（２．７５Ｌ）に溶解し、１０％水酸化パラジウム（２７．５ｇ）を加え、水素雰囲気下室温にて４．５時間攪拌した。反応液をセライト濾過後、溶媒を減圧下留去し、得られた残渣をヘプタン：酢酸エチル＝２／１混合液（１．７５Ｌ）から結晶化し、析出した沈殿をろ過して無色粉末の中間体（Ｉ）（１９３ｇ，５３％；４工程）を得た。
¹H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.27 (s, 6 H) 1.37 (s, 6 H) 1.43 (s, 9 H) 1.53 (br. s, 2 H) 3.39 (d, J=6.53 Hz, 2 H) 4.78 (br. s, 1 H) 8.04 (br. s, 1 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 274[M+H]⁺, 296[M+Na]⁺.
MS ESI/APCI Dual nega : 308[M+Cl]⁻.
実施例１−１

中間体（Ｅ）（２００ｍｇ，０．２５ｍｍｏｌ）、１−ヒドロキシベンゾトリアゾ−ル１水和物（ＨＯＢｔ・Ｈ_２Ｏ）（５７ｍｇ，０．３７ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルエチレンジアミン（６５ｍｇ，０．７４ｍｍｏｌ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３．０ｍＬ）溶液にＮ−エチル−Ｎ’−３−ジメチルアミノプロピルカルボジイミド塩酸塩（ＥＤＣ−ＨＣｌ）（７１ｍｇ，０．３７ｍｍｏｌ）を加え、室温で８時間攪拌した。反応液を水（５０ｍＬ）にあけ、酢酸エチル（５０ｍＬ）で抽出した。有機層を飽和食塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。乾燥剤を濾別後、溶媒を減圧下留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム→クロロホルム：メタノール＝９：１）で精製し、無色アモルファスの化合物（１−１）（１３２ｍｇ，６１％）を得た。
¹H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.13, 1.15 (each d, J=6.92Hz, each 3 H) 1.38 (s, 6 H) 1.53 (s, 6 H) 1.77 (s, 3 H) 1.99 (s, 3 H) 2.03 (s, 3 H) 2.05 (s, 3 H) 2.23 (s, 6 H) 2.31 (s, 3 H) 2.37 (s, 3 H) 2.41 (t, J=5.67 Hz, 2 H) 2.90 - 3.03 (m, 1 H) 3.25 - 3.34 (m, 2 H) 3.71 - 3.80 (m, 1 H) 3.92 (s, 2 H) 4.05 (dd, J=12.59, 2.18 Hz, 1 H) 4.23 - 4.32 (m, 1 H) 4.44 - 4.52 (m, 1 H) 5.11 - 5.20 (m, 1 H) 5.22 - 5.33 (m, 2 H) 6.33 (d, J=16.63 Hz, 1 H) 6.41 (br. s., 1 H) 6.51 (d, J=16.63 Hz, 1 H) 6.68 (d, J=7.77 Hz, 1 H) 6.77 (br. s., 1 H) 7.00 (s, 2 H) 7.12 (d, J=7.77 Hz, 1 H) 7.26 (s, 1 H)．
MS ESI/APCI Dual posi : 880[M+H]⁺, 902[M+Na]⁺.
MS ESI/APCI Dual nega : 914[M+Cl]⁻.
実施例１−２

化合物（１−１）（１２７ｍｇ，０．１４ｍｍｏｌ）のメタノール（２．０ｍＬ）溶液にナトリウムメトキシド（４．８８Ｍ / ＭｅＯＨ，１０μＬ）を加え、室温で１時間攪拌した。ドライアイスを少量加えて、反応液を中和し、溶媒を減圧下留去した。

得られた残渣をＮＨ型シリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール＝９：１→６：４）で精製し、無色アモルファスの化合物（１−２）（７７ｍｇ，８０％）を得た。
¹H NMR (600 MHz, METHANOL-d₄) δ ppm 1.10 (d, J=6.92 Hz, 6 H) 1.36 (s, 6 H) 1.45 (s, 6 H) 2.23 (s, 6 H) 2.31 (s, 3 H) 2.40 (t, J=6.88 Hz, 2 H) 2.87 - 2.96 (m, 1 H) 3.28 (t, J=6.88 Hz, 2 H) 3.34 - 3.41 (m, 2 H) 3.43 - 3.50 (m, 1 H) 3.51 - 3.57 (m, 1 H) 3.67 (dd, J=12.15, 2.52 Hz, 1 H) 3.84 (d, J=11.46 Hz, 1 H) 3.89 (s, 2 H) 4.47 (d, J=9.63 Hz, 1 H) 6.39 (d, J=16.05 Hz, 1 H) 6.50 (d, J=16.05 Hz, 1 H) 6.75 (d, J=8.25 Hz, 1 H) 6.80 (s, 1 H) 6.97 (s, 1 H) 7.11 (d, J=8.25 Hz, 1 H) 7.25 (s, 1 H) .
MS ESI/APCI Dual posi : 670[M+H]⁺.
MS ESI/APCI Dual nega : 668[M-H]⁻, 704[M+Cl]⁻.
Anal. Calcd for C₃₇H₅₅N₃O₈・1.4H₂O: C, 63.94; H，8.38； N，6.05. Found: C, 64.13; H, 8.39; N, 5.88.
実施例２−１

Ｎ，Ｎ−ジメチルエチレンジアミンの代わりにピペラジンを用いて実施例１−１と同様の方法で無色アモルファスの化合物（２−１）（１０３ｍｇ，４７％）を得た。
¹H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.14, 1.16 (each d, J=6.99 Hz, each 3 H) 1.38 (s, 6 H) 1.61 (s, 6 H) 1.71 (s, 3 H) 1.99 (s, 3 H) 2.05 (s, 3 H) 2.12 (s, 3 H) 2.27 (s, 3 H) 2.79 - 2.87 (m, 4 H) 2.87 - 2.99 (m, 1 H) 3.56 - 3.66 (m, 4 H) 3.75 - 3.94 (m, 3 H) 4.12 - 4.20 (m, 1 H) 4.25 - 4.34 (m, 1 H) 4.44 - 4.52 (m, 1 H) 5.23 - 5.32 (m, 3 H) 6.30 (d, J=16.32 Hz, 1 H) 6.48 (d, J=16.32 Hz, 1 H) 6.53 (s, 1 H) 6.68 (d, J=7.77 Hz, 1 H) 6.88 (s, 1 H) 6.97 (s, 1 H) 7.05 - 7.12 (m, 1 H) 7.22 (s, 1 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 836[M+H]⁺, 858[M+Na]⁺.
MS ESI/APCI Dual nega : 834[M-H]⁻, 870[M+Cl]⁻.
実施例２−２

化合物（１−１）の代わりに化合物（２−１）を用いて実施例１−２と同様の方法で無色アモルファスの化合物（２−２）（５２ｍｇ，６６％）を得た。
¹H NMR (600 MHz, METHANOL-d₄) δ ppm 1.10 (d, J=6.42 Hz, 6 H) 1.36 (s, 6 H) 1.44 (s, 6 H) 2.31 (s, 3 H) 2.70 (br. s, 4 H) 2.90 - 2.95 (m, 1 H) 3.36 - 3.39 (m, 2 H) 3.43 - 3.61 (m, 7 H) 3.65 - 3.69 (m, 1 H) 3.84 (d, J=11.92 Hz, 1 H) 3.88 (s, 2 H) 4.46 (d, J=9.63 Hz, 1 H) 6.38 (d, J=16.05 Hz, 1 H) 6.47 (d, J=16.05 Hz, 1 H) 6.76 (d, J=7.79 Hz, 1 H) 6.80 (s, 1 H) 6.95 (s, 1 H) 7.10 (d, J=7.79 Hz, 1 H) 7.22 (s, 1 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 668[M+H]⁺, 690[M+Na]⁺.
MS ESI/APCI Dual nega : 664[M-H]⁻, 702[M+Cl]⁻.
実施例３−１

Ｎ，Ｎ−ジメチルエチレンジアミンの代わりに１−メチルピペラジンを用いて実施例１−１と同様の方法で無色アモルファスの化合物（３−１）（１３５ｍｇ，６１％）を得た。
¹H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.13, 1.15 (each d, J=6.84 Hz, each 3 H) 1.37 (s, 6 H) 1.60 (s, 6 H) 1.77 (s, 3 H) 1.99 (s, 3 H) 2.03 (s, 3 H) 2.05 (s, 3 H) 2.27 (s, 3 H) 2.30 (s, 3 H) 2.33 - 2.41 (m, 7 H) 2.88 - 3.04 (m, 1 H) 3.60 - 3.70 (m, 4 H) 3.72 - 3.80 (m, 1 H) 3.92 (s, 2 H) 4.05 (dd, J=12.59, 2.33 Hz, 1 H) 4.27 (dd, J=12.59, 4.51 Hz, 1 H) 4.43 - 4.54 (m, 1 H) 5.10 - 5.20 (m, 1 H) 5.22 - 5.32 (m, 2 H) 6.31 (d, J=16.48 Hz, 1 H) 6.49 (d, J=16.48 Hz, 1 H) 6.68 (d, J=8.08 Hz, 1 H) 6.86 (s, 1 H) 7.00 (s, 2 H) 7.08 - 7.14 (m, 1 H) 7.24 (s, 1 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 892[M+H]⁺, 914[M+Na]⁺ _.
MS ESI/APCI Dual nega : 926[M+Cl]⁻.
実施例３−２

化合物（１−１）の代わりに化合物（３−１）を用いて実施例１−２と同様の方法で無色アモルファスの化合物（３−２）（７９ｍｇ，７９％）を得た。
¹H NMR (600 MHz, METHANOL-d₄) δ ppm 1.10 (d, J=6.88 Hz, 6 H) 1.37 (s, 6 H) 1.44 (s, 6 H) 2.16 (s, 3 H) 2.22 - 2.38 (m, 7 H) 2.87 - 2.96 (m, 1 H) 3.35 - 3.41 (m, 2 H) 3.42 - 3.51 (m, 2 H) 3.51 - 3.56 (m, 1 H) 3.56 - 3.71 (m, 5 H) 3.84 (d, J=12.38 Hz, 1 H) 3.88 (s, 2 H) 4.47 (d, J=9.63 Hz, 1 H) 6.38 (d, J=16.51 Hz, 1 H) 6.46 (d, J=16.51 Hz, 1 H) 6.75 (d, J=8.25 Hz, 1 H) 6.80 (s, 1 H) 6.97 (s, 1 H) 7.09 (d, J=8.25 Hz, 1 H) 7.22 (s, 1 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 682[M+H]⁺, 704[M+Na]⁺.
MS ESI/APCI Dual nega : 680[M-H]⁻, 716[M+Cl]⁻.
実施例４−１

Ｎ，Ｎ−ジメチルエチレンジアミンの代わりに１−エチルピペラジンを用いて実施例１−１と同様の方法で無色ガム状の化合物（４−１Ａ）（８７．９ｍｇ，３８％）と無色ガム状の化合物（４−１Ｂ）（４２．９ｍｇ，１９％）を得た。

化合物（４−１Ａ）
¹H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.07 (t, J=7.23 Hz, 3 H) 1.12 - 1.16 (m, 6 H) 1.37 (s, 6 H) 1.61 (s, 6 H) 1.77 (s, 3 H) 1.99 (s, 3 H) 2.03 (s, 3 H) 2.05 (s, 3 H) 2.30 (s, 3 H) 2.34 - 2.44 (m, 9 H) 2.90 - 3.05 (m, 1 H) 3.60 - 3.72 (m, 4 H) 3.72 - 3.80 (m, 1 H) 3.92 (s, 2 H) 4.05 (dd, J=12.36, 1.94 Hz, 1 H) 4.27 (dd, J=12.36, 4.43 Hz, 1 H) 4.48 (d, J=9.79 Hz, 1 H) 5.15 (t, J=9.79 Hz, 1 H) 5.22 - 5.31 (m, 2 H) 6.31 (d, J=16.2 Hz, 1 H) 6.49 (d, J=16.2 Hz, 1 H) 6.68 (d, J=8.08 Hz, 1 H) 6.86 - 6.93 (m, 1 H) 7.00 (s, 2 H) 7.11 (d, J=8.08 Hz, 1 H) 7.24 (s, 1 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 907[M+H]⁺, 929[M+Na]⁺.
MS ESI/APCI Dual nega : 941[M+Cl]⁻.

化合物（４−１Ｂ）
¹H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.03 - 1.19 (m, 9 H) 1.37 (s, 6 H) 1.62 (s, 6 H) 1.71 (s, 3 H) 1.99 (s, 3 H) 2.05 (s, 3 H) 2.12 (s, 3 H) 2.27 (s, 3 H) 2.33 - 2.46 (m, 6 H) 2.93 (sept, J=6.76 Hz, 1 H) 3.58 - 3.71 (m, 4 H) 3.73 - 3.91 (m, 3 H) 4.12 - 4.21 (m, 1 H) 4.24 - 4.34 (m, 1 H) 4.48 (d, J=9.17 Hz, 1 H) 5.21 - 5.34 (m, 3 H) 6.30 (d, J=16.1 Hz, 1 H) 6.48 (d, J=16.1 Hz, 1 H) 6.53 (s, 1 H) 6.68 (d, J=7.93 Hz, 1 H) 6.88 (s, 1 H) 6.99 (s, 1 H) 7.08 (d, J=7.93 Hz, 1 H) 7.22 (s, 1 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 865[M+H]⁺, 887[M+Na]⁺.
MS ESI/APCI Dual nega : 899[M+Cl]⁻.
実施例４−２

化合物（４−１Ａ）（８７．９ｍｇ，０．０９７３ｍｍｏｌ）と化合物（４−１Ｂ）（４２．９ｍｇ，０．０４８６ｍｍｏｌ）にトリエチルアミン／水／メタノール（１／１／５，５ｍＬ）を加えた。反応混合物を室温で１晩攪拌し、溶媒を減圧下留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム→クロロホルム：メタノール＝８：２）で精製し、無色アモルファスの化合物（４−２）（７９．２ｍｇ，７８％）を得た。
¹H NMR (600 MHz, METHANOL-d₄) δ ppm 0.98 (t, J=7.23 Hz, 3 H) 1.10 (d, J=6.88 Hz, 6 H) 1.36 (s, 6 H) 1.44 (s, 6 H) 2.23 - 2.42 (m, 9 H) 2.85 - 2.99 (m, 1 H) 3.35 - 3.41 (m, 2 H) 3.42 - 3.48 (m, 1 H) 3.50 - 3.56 (m, 1 H) 3.55 - 3.71 (m, 5 H) 3.81 - 3.90 (m, 3 H) 4.47 (d, J=9.63 Hz, 1 H) 6.39 (d, J=16.1 Hz, 1 H) 6.46 (d, J=16.1 Hz, 1 H) 6.71 - 6.77 (m, 1 H) 6.80 (s, 1 H) 6.98 (s, 1 H) 7.09 (d, J=7.79 Hz, 1 H) 7.22 (s, 1 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 696[M+H]⁺, 718[M+Na]⁺.
MS ESI/APCI Dual nega : 694[M-H]⁻.
Anal. Calcd for C₃₉H₅₇N₃O₈・1.2H₂O : C, 65.3; H, 8.34; N, 5.86. Found : C, 65.3; H, 8.36; N, 5.68.
実施例５−１

中間体（Ｅ）（２０５ｍｇ，０．２５３ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ・Ｈ_２Ｏ（６８ｍｇ，０．５０６ｍｍｏｌ）、４−ジメチルアミノピペリジン（６５ｍｇ，０．５０６ｍｍｏｌ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（２．０ｍＬ）溶液にＥＤＣ−ＨＣｌ（９７ｍｇ，０．５０６ｍｍｏｌ）を加え、７０℃で２時間攪拌した。反応液を水（５０ｍＬ）にあけ、酢酸エチル（５０ｍＬ）で抽出した。有機層を飽和食塩水（２０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。乾燥剤を濾別後、溶媒を減圧下留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム→クロロホルム：メタノール＝３：１）で精製し、無色アモルファスの化合物（５−１）（８０ｍｇ，３４％）を得た。
¹H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.13 (d, J=6.76 Hz, 3 H) 1.15 (d, J=6.76 Hz, 3 H) 1.30 - 1.49 (m, 2 H) 1.38 (s, 6 H) 1.61 (s, 6 H) 1.77 (s, 3 H) 1.84 (d, J=12.75 Hz, 2 H) 1.99 (s, 3 H) 2.03 (s, 3 H) 2.05 (s, 3 H) 2.27 (s, 6 H) 2.30 (s, 3 H) 2.37 (s, 3 H) 2.81 (t, J=12.28 Hz, 2 H) 2.97 (sept, J=6.76 Hz, 1 H) 3.76 (ddd, J=10.03, 4.66, 2.25 Hz, 1 H) 3.92 (s, 2 H) 4.05 (dd, J=12.43, 2.25 Hz, 1 H) 4.28 (dd, J=12.43, 4.66 Hz, 1 H) 4.33 - 4.53 (m, 3 H) 5.10 - 5.34 (m, 3 H) 6.31 (d, J=15.00 Hz, 1 H) 6.50 (d, J=15.00 Hz, 1 H) 6.68 (d, J=8.08 Hz, 1 H) 6.97 - 7.04 (m, 2 H) 7.11 (d, J=8.08 Hz, 1 H) 7.25 (s, 1 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 920[M+H]⁺．
MS ESI/APCI Dual nega : 954[M+Cl]⁻．
実施例５−２

化合物（１−１）の代わりに化合物（５−１）を用いて、実施例１−２と同様の方法で、無色アモルファスの化合物（５−２）（３３ｍｇ，５３％）を得た。
¹H NMR (600 MHz, METHANOL-d₄) δ ppm 1.08 (d, J=6.42 Hz, 6 H) 1.21 - 1.32 (m, 2 H) 1.35 (s, 6 H) 1.43 (s, 6 H) 1.73 (br. s., 2 H) 2.16 (s, 6 H) 2.28 (s, 3H) 2.28 - 2.37 (m, 1 H) 2.89 (sept, J=6.42 Hz, 1 H) 3.31 - 3.33 (m, 2 H) 3.44 (t, J=8.71 Hz, 1 H) 3.48 - 3.56 (m, 1 H) 3.66 (dd, J=11.92, 2.75 Hz, 1 H) 3.83 (d, J=11.92 Hz, 1 H) 3.86 (s, 2 H) 4.45 (d, J=9.63 Hz, 1 H) 6.35 - 6.41 (m, 1 H) 6.43 - 6.47 (m, 1 H) 6.72 (d, J=7.79 Hz, 1 H) 6.78 (s, 1 H) 6.96 (s, 1 H) 7.08 (d, J=7.79 Hz, 1 H) 7.21 (s, 1 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 710[M+H]⁺．
MS ESI/APCI Dual nega : 708[M-H]⁻．
Anal. Calcd for C₄₀H₅₉N₃O₈・1.5H₂O : C, 65.19 ; H, 8.50; N, 5.70. Found : C, 64.81; H, 8.46; N, 5.61.
実施例６−１

中間体（Ｅ）（６８０ｍｇ，０．７４６ｍｍｏｌ）のクロロホルム（５．０ｍＬ）溶液にＮ，Ｎ’−カルボニルジイミダゾール（１８２ｍｇ，１．１２ｍｍｏｌ）を加え、室温で１時間攪拌した。次いで、１，２−ジアミノ−２−メチルプロパン（７９ｍｇ，０．８９５ｍｍｏｌ）を加え、室温で１８時間攪拌した。反応液に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、クロロホルムで２回抽出した。合わせた有機層を、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。乾燥剤を濾別後、溶媒を減圧下留去した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム→クロロホルム：メタノール＝８５：１５）で精製し、無色アモルファスの化合物（６−１）（１４０ｍｇ，２１％）を得た。
¹H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.11 - 1.17 (m, 6 H) 1.11 (s, 6 H) 1.39 (s, 6 H) 1.53 (s, 6 H) 1.77 (s, 3 H) 1.99 (s, 3 H) 2.03 (s, 3 H) 2.05 (s, 3 H) 2.31 (s, 3 H) 2.37 (s, 3 H) 2.89 - 3.05 (m, 1 H) 3.14 (d, J=5.91 Hz, 2 H) 3.76 (ddd, J=9.71, 4.51, 2.10 Hz, 1 H) 3.93 (s, 2 H) 4.05 (dd, J=12.51, 2.10 Hz, 1 H) 4.27 (dd, J=12.51, 4.51 Hz, 1 H) 4.49 (d, J=7.46 Hz, 1 H) 5.11 - 5.20 (m, 1 H) 5.23 - 5.31 (m, 2 H) 6.26 (s, 1 H) 6.29 - 6.38 (m, 1 H) 6.48 - 6.57 (m, 1 H) 6.69 (d, J=7.93 Hz, 1 H) 6.97 - 7.03 (m, 3 H) 7.12 (d, J=7.93 Hz, 1 H) 7.25 (s, 1 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 880[M+H]⁺.
実施例６−２

化合物（１−１）の代わりに化合物（６−１）を用いて実施例１−２と同様の方法で無色アモルファスの化合物（６−２）（１０４ｍｇ，９８％）を得た。
¹H NMR (600 MHz, METHANOL-d₄) δ ppm 1.02 (s, 6 H) 1.05 - 1.10 (m, 6 H) 1.35 (s, 6 H) 1.44 (s, 6 H) 2.29 (s, 3 H) 2.85 - 2.93 (m, 1 H) 3.09 (s, 2 H) 3.34 - 3.39 (m, 2 H) 3.42 - 3.47 (m, 1 H) 3.52 (t, J=9.40 Hz, 1 H) 3.63 - 3.69 (m, 1 H) 3.80 - 3.85 (m, 1 H) 3.86 (s, 2 H) 4.46 (d, J=9.63 Hz, 1 H) 6.35 - 6.41 (m, 1 H) 6.44 - 6.51 (m, 1 H) 6.73 (d, J=7.79 Hz, 1 H) 6.78 (s, 1 H) 6.96 (s, 1 H) 7.06 - 7.10 (m, 1 H) 7.23 (s, 1 H)．
MS ESI/APCI Dual posi : 670[M+H]⁺, 692[M+Na]⁺.
MS ESI/APCI Dual nega : 668[M-H]^-, 704[M+Cl]⁻.

また、化合物（６−２）は、次の実施例６−３及び６−４に記載の方法でも合成することができる。
実施例６−３

中間体（Ｈ）（２０５ｇ，０．２７３ｍｏｌ）、中間体（Ｉ）（９７．０ｇ，０．３５５ｍｏｌ）、ＨＯＢｔ・Ｈ_２Ｏ（６２．７ｇ，０．４１０ｍｏｌ）、トリエチルアミン（１１４ｍＬ，０．８１９ｍｏｌ）のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１．９８Ｌ）溶液にＥＤＣ−ＨＣｌ（７８．５ｇ，０．４１０ｍｏｌ）を加え、室温で１１時間攪拌した。反応液にトルエン（１．０Ｌ）と１０％塩化ナトリウム水溶液（２．０Ｌ）を加え、有機層を分離した。水層をトルエン（１．０Ｌ）から抽出し、合わせた有機層を５％塩化ナトリウム水溶液（１．０Ｌ）で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。乾燥剤を濾別後、溶媒を減圧下留去した。得られた残渣を２−プロパノール（３００ｍＬ）に５０℃で溶解させ、ヘプタン（２．７Ｌ）を滴下した。混合溶液を氷冷で１時間攪拌し、析出した沈殿をろ過して無色粉末の化合物（６−３）（２２１ｇ，８３％）を得た。
¹H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.13 (d, J=6.88 Hz, 3 H) 1.14 (d, J=6.88 Hz, 3 H) 1.26 (s, 6 H) 1.39 (s, 6 H) 1.44 (s, 9 H) 1.55 (s, 6 H) 1.77 (s, 3 H) 1.99 (s, 3 H) 2.03 (s, 3 H) 2.05 (s, 3 H) 2.30 (s, 3 H) 2.37 (s, 3 H) 2.97 (sept, J=6.88 Hz, 1 H) 3.41 (d, J=5.60 Hz, 2 H) 3.72 - 3.80 (m, 1 H) 3.92 (s, 2 H) 4.05 (dd, J=12.43, 2.02 Hz, 1 H) 4.28 (dd, J=12.43, 4.51 Hz, 1 H) 4.45 - 4.52 (m, 1 H) 4.65 (s, 1 H) 5.11 - 5.19 (m, 1 H) 5.22 - 5.33 (m, 2 H) 6.29 - 6.39 (m, 1 H) 6.46 - 6.57 (m, 2 H) 6.69 (d, J=8.00 Hz, 1 H) 6.96 - 7.03 (m, 2 H) 7.11 (dd, J=8.00, 1.63 Hz, 1 H) 7.24 - 7.26 (m, 1 H) 7.59 (br. s, 1 H).
実施例６−４

化合物（６−３）（２２０ｇ，０．２２５ｍｏｌ）のクロロホルム（３．０Ｌ）溶液に、室温でトリフルオロ酢酸（２９７ｍＬ，３．８８ｍｏｌ）を１０分かけて滴下し、同温にて２０時間攪拌した。反応液をトルエン（３．０Ｌ）で希釈して濃縮した。濃縮物を酢酸エチル（３．０Ｌ）に溶解し、１０％炭酸ナトリウム水溶液（１．２Ｌ）、飽和食塩水（１．０Ｌ）で洗浄し、溶媒を減圧下留去した。

得られた残渣（２４０ｇ）をメタノール（１．５Ｌ）に溶解し、氷冷後トリエチルアミン（０．３Ｌ）、水（０．３Ｌ）を加えた。室温で１３時間撹拌後、更にメタノール（１．５Ｌ）、トリエチルアミン（０．３Ｌ）、水（０．３Ｌ）を加えて室温で２０時間撹拌した。反応混合物を濃縮し、メタノールで共沸した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（酢酸エチル：エタノール：水＝１５：２：１→１０：２：１）で精製し、無色アモルファスの化合物（６−２）（１２９ｇ，８６％；２工程）を得た。
実施例７−１

中間体（Ｅ）の代わりに中間体（Ｆ）を用いて実施例１−１と同様の方法で無色アモルファスの化合物（７−１）（１１２ｍｇ，７４％）を得た。
¹H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.12, 1.14 (each d, J=6.84 Hz, each 3 H) 1.37 (s, 6 H) 1.51 (s, 6 H) 1.76 (s, 3 H) 1.99 (s, 3 H) 2.04 (s, 3 H) 2.04 (s, 3 H) 2.23 (s, 6 H) 2.32 (s, 3 H) 2.41 (t, J=6.22 Hz, 2 H) 2.86 - 2.99 (m, 1 H) 3.25 - 3.33 (m, 2 H) 3.76 - 3.90 (m, 6 H) 4.07 - 4.15 (m, 1 H) 4.18 - 4.26 (m, 1 H) 4.76 - 4.85 (m, 1 H) 5.13 - 5.22 (m, 1 H) 5.26 - 5.36 (m, 2 H) 6.31 (d, J=16.48 Hz, 1 H) 6.37 (s, 1 H) 6.50 (d, J=16.48 Hz, 1 H) 6.61 - 6.67 (m, 1 H) 6.81 (s, 1 H) 6.99 (s, 1 H) 7.06 - 7.12 (m, 1 H) 7.24 (s, 1 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 852[M+H]⁺.
MS ESI/APCI Dual nega : 886[M+Cl]⁻.
実施例７−２

化合物（１−１）の代わりに化合物（７−１）を用いて実施例１−２と同様の方法で無色アモルファスの化合物（７−２）（６９ｍｇ，７８％）を得た。
¹H NMR (600 MHz, METHANOL-d₄) δ ppm 1.13, 1.15 (each d, J=6.84 Hz, each 3 H) 1.36 (s, 6 H) 1.45 (s, 6 H) 2.21 (s, 6 H) 2.32 (s, 3 H) 2.39 (t, J=6.88 Hz, 2 H) 2.93 - 3.02 (m, 1 H) 3.24 - 3.39 (m, 4 H) 3.42 - 3.48 (m, 1 H) 3.49 - 3.54 (m, 1 H) 3.58 - 3.65 (m, 1 H) 3.80 - 3.87 (m, 4 H) 3.91 (s, 2 H) 4.61 (d, J=9.63 Hz, 1 H) 6.39 (d, J=16.51 Hz, 1 H) 6.50 (d, J=16.51 Hz, 1 H) 6.73 (d, J=7.80 Hz, 1 H) 6.92 (s, 1 H) 7.08 (s, 1 H) 7.10 (d, J=7.80 Hz, 1 H) 7.25 (s, 1 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 684[M+H]⁺.
MS ESI/APCI Dual nega : 682[M-H]⁻, 718[M+Cl]⁻.
Anal. Calcd for C₃₈H₅₇N₃O₈・1.7H₂O: C, 63.88 ; H, 8.52 , N, 5.88. Found: C, 63.84; H, 8.41; N, 5.75.
実施例８−１

中間体（Ｅ）の代わりに中間体（Ｆ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルエチレンジアミンの代わりにＮ−ｔ−ブトキシカルボニルエチレンジアミンを用いて実施例１−１と同様の方法で無色アモルファスの化合物（８−１）（１４５ｍｇ，８９％）を得た。
MS ESI/APCI Dual posi : 924[M+H]⁺，946[M+Na]⁺.
MS ESI/APCI Dual nega : 958[M+Cl]⁻.
実施例８−２

化合物（８−１）のクロロホルム（３．０ｍｌ)溶液に、トリフルオロ酢酸（６００μＬ）を加えて室温で３時間攪拌した。反応液を減圧下濃縮後、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール＝９５：５→６０：４０）で精製して、無色アモルファスの化合物（８−２）（６８ｍｇ、５５％）を得た。
¹H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.14，1.16 (each d, J=6.37 Hz, each 3 H) 1.32 (br. s., 6 H) 1.42 (s, 6 H) 1.77 (s, 3 H) 1.98 (s, 3 H) 2.03 (s, 3 H) 2.04 (s, 3 H) 2.32 (s, 3 H) 2.90 - 3.02 (m, 1 H) 3.22 - 3.34 (m, 2 H) 3.48 - 3.57 (m, 2 H) 3.76 - 3.96 (m, 6 H) 4.07 - 4.14 (m, 1 H) 4.17 - 4.25 (m, 1 H) 4.79 - 4.87 (m, 1 H) 5.12 - 5.22 (m, 1 H) 5.24 - 5.36 (m, 2 H) 6.32 (s, 1 H) 6.40 (d, J=16.63 Hz, 1 H) 6.51 (d, J=16.63 Hz, 1 H) 6.65 (d, J=8.55 Hz, 1 H) 6.82 (s, 1 H) 6.96 (s, 1 H) 7.07 - 7.13 (m, 1 H) 7.28 - 7.31 (m, 1 H) 8.04 (br. s., 2 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 824[M+H]⁺, 846[M+Na]⁺.
MS ESI/APCI Dual nega : 858[M+Cl]⁻.
実施例８−３

化合物（１−１）の代わりに化合物（８−２）を用いて実施例１−２と同様の方法で無色アモルファスの化合物（８−３）（２２ｍｇ，４４％）を得た。
¹H NMR (600 MHz, METHANOL-d_４) δ ppm 1.13, 1.15 (each d, J=6.84 Hz, each 3 H) 1.36 (s, 6 H) 1.45 (s, 6 H) 2.32 (s, 3 H) 2.63 - 2.71 (m, 2 H) 2.94 - 3.03 (m, 1 H) 3.23 (t, J=5.96 Hz, 2 H) 3.28 - 3.39 (m, 4 H) 3.43 - 3.48 (m, 1 H) 3.48 - 3.54 (m, 1 H) 3.62 (dd, J=12.15, 5.73 Hz, 1 H) 3.79 - 3.88 (m, 2 H) 3.92 (s, 2 H) 4.61 (d, J=9.63 Hz, 1 H) 6.40 (d, J=16.51 Hz, 1 H) 6.50 (d, J=16.51 Hz, 1 H) 6.74 (d, J=7.79 Hz, 1 H) 6.92 (s, 1 H) 7.07 (s, 1 H) 7.11 (d, J=7.79 Hz, 1 H) 7.26 (s, 1 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 656[M+H]⁺.
MS ESI/APCI Dual nega : 654[M-H]⁻, 690[M+Cl]⁻.
実施例９−１

中間体（Ｅ）の代わりに中間体（Ｆ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルエチレンジアミンの代わりにピペラジンを用いて実施例１−１と同様の方法で無色アモルファスの化合物（９−１）（４２ｍｇ，３８％）を得た。
¹H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.12, 1.14 (each d, J=6.99 Hz, each 3 H) 1.37 (s, 6 H) 1.58 (s, 6 H) 1.76 (s, 3 H) 1.99 (s, 3 H) 2.04 (s, 3 H) 2.04 (s, 3 H) 2.32 (s, 3 H) 2.79 - 2.86 (m, 4 H) 2.88 - 2.99 (m, 1 H) 3.57 - 3.64 (m, 4 H) 3.76 - 3.95 (m, 6 H) 4.07 - 4.14 (m, 1 H) 4.18 - 4.26 (m, 1 H) 4.77 - 4.84 (m, 1 H) 5.13 - 5.22 (m, 1 H) 5.26 - 5.37 (m, 2 H) 6.29 (d, J=16.16 Hz, 1 H) 6.49 (d, J=16.16 Hz, 1 H) 6.64 (d, J=7.93 Hz, 1 H) 6.77 - 6.83 (m, 2 H) 6.99 (s, 1 H) 7.05 - 7.11 (m, 1 H) 7.22 (br. s., 1 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 850[M+H]⁺, 872[M+Na]⁺.
MS ESI/APCI Dual nega : 884[M+Cl]⁻.
実施例９−２

化合物（１−１）の代わりに化合物（９−１）を用いて実施例１−２と同様の方法で無色アモルファスの化合物（９−２）（２７ｍｇ，９４％）を得た。
¹H NMR (600 MHz, METHANOL-d_４) δ ppm 1.14, 1.16 (each d, J=6.42Hz, each 3 H) 1.36 (s, 6 H) 1.44 (s, 6 H) 2.32 (s, 3 H) 2.69 (br. s., 4 H) 2.95 - 3.03 (m, 1 H) 3.28 - 3.38 (m, 2 H) 3.42 - 3.52 (m, 2 H) 3.53 - 3.65 (m, 5 H) 3.80 - 3.84 (m, 1 H) 3.84 (s, 3 H) 3.92 (s, 2 H) 4.61 (d, J=9.17 Hz, 1 H) 6.39 (d, J=16.05 Hz, 1 H) 6.47 (d, J=16.05 Hz, 1 H) 6.74 (d, J=7.79 Hz, 1 H) 6.92 (s, 1 H) 7.06 (s, 1 H) 7.10 (d, J=7.79 Hz, 1 H) 7.22 (s, 1 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 682[M+H]⁺.
MS ESI/APCI Dual nega : 680[M-H]⁻, 716[M+Cl]⁻.
実施例１０−１

中間体（Ｅ）の代わりに中間体（Ｆ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルエチレンジアミンの代わりにＮ−メチルピペラジンを用いて実施例１−１と同様の方法で無色アモルファスの粗化合物（１０−１）（１００ｍｇ）を得た。この物をさらに精製することなく、次の反応に用いた。
¹H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.12 (d, J=8.5 Hz, 3 H) 1.15 (d, J=8.5 Hz, 3 H) 1.36 (s, 6 H) 1.56 (s, 6 H) 1.77 (s, 3 H) 1.99 (s, 3 H) 2.04 (s, 6 H) 2.30 (s, 3 H) 2.32 (s, 3 H) 2.38 - 2.50 (m, 4 H) 2.85 - 3.02 (m, 1 H) 3.61 - 3.74 (m, 4 H) 3.76 - 3.84 (m, 1 H) 3.81 - 3.96 (m, 1 H) 3.86 (s, 3 H) 4.07 - 4.15 (m, 1 H) 4.18 - 4.27 (m, 1 H) 4.75 - 4.88 (m, 1 H) 5.11 - 5.24 (m, 1 H) 5.26 - 5.37 (m, 2 H) 6.22 - 6.38 (m, 1 H) 6.43 - 6.54 (m, 1 H) 6.59 - 6.70 (m, 2 H) 6.81 (s, 1 H) 6.96 - 7.02 (m, 1 H) 7.04 - 7.12 (m, 1 H) 7.20 - 7.26 (m, 1 H)．
実施例１０−２

化合物（１−１）の代わりに化合物（１０−１）を用いて実施例１−２と同様の方法で無色アモルファスの化合物（１０−２）（８．０ｍｇ，９％；２工程）を得た。
¹H NMR (600 MHz, METHANOL-d_４) δ ppm 1.09 - 1.16 (m, 6 H) 1.35 (s, 6 H) 1.42 (s, 6 H) 2.12 - 2.16 (m, 3 H) 2.23 - 2.33 (br. s., 4 H) 2.30 (s, 3 H) 2.92 - 3.01 (m, 1 H) 3.28 (s, 2 H) 3.30 - 3.38 (m, 1 H) 3.41 - 3.51 (m, 2 H) 3.55 - 3.66 (m, 5 H) 3.78 - 3.86 (m, 4 H) 3.90 (s, 2 H) 4.59 (d, J=9.17 Hz, 1 H) 6.33 - 6.39 (m, 1 H) 6.42 - 6.47 (m, 1 H) 6.72 (d, J=7.79 Hz, 1 H) 6.90 (s, 1 H) 7.04 - 7.11 (m, 2 H) 7.19 - 7.24 (m, 1 H)．
MS ESI/APCI Dual posi : 696[M+H]⁺, 718[M+Na]⁺.
MS ESI/APCI Dual nega : 694[M-H]^-, 730[M+Cl]⁻.
実施例１１−１

中間体（Ｅ）の代わりに中間体（Ｆ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルエチレンジアミンの代わりに１−エチルピペラジンを用いて実施例１−１と同様の方法で淡黄色アモルファスの化合物（１１−１）（２００ｍｇ，８９％）を得た。
¹H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.07 (t, J=7.23 Hz, 3 H) 1.11 (d, J=6.84 Hz, 3 H) 1.14 (d, J=6.84 Hz, 3 H) 1.36 (s, 6 H) 1.59 (s, 6 H) 1.76 (s, 3 H) 1.99 (s, 3 H) 2.04 (s, 3 H) 2.04 (s, 3 H) 2.32 (s, 3 H) 2.36 - 2.44 (m, 6 H) 2.93 (sept, J=6.84 Hz, 1 H) 3.61 - 3.71 (m, 4 H) 3.77 - 3.84 (m, 1 H) 3.83 - 3.94 (m, 5 H) 4.05 - 4.16 (m, 1 H) 4.18 - 4.27 (m, 1 H) 4.76 - 4.86 (m, 1 H) 5.14 - 5.23 (m, 1 H) 5.25 - 5.37 (m, 2 H) 6.29 (d, J=16.1 Hz, 1 H) 6.48 (d, J=16.1 Hz, 1 H) 6.64 (d, J=7.62 Hz, 1 H) 6.77 - 6.86 (m, 2 H) 6.99 (s, 1 H) 7.08 (d, J=7.62 Hz, 1 H) 7.22 (s, 1 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 879[M+H]⁺, 901[M+Na]⁺.
MS ESI/APCI Dual nega : 913[M+Cl]⁻.
実施例１１−２

化合物（４−１Ａ）、化合物（４−１Ｂ）の代わりに化合物（１１−１）を用いて実施例４−２と同様の方法で無色アモルファスの化合物（１１−２）（１１８ｍｇ，７３％）を得た。
¹H NMR (600 MHz, METHANOL-d₄) δ ppm 0.97 (t, J=7.11 Hz, 3 H) 1.10 - 1.19 (m, 6 H) 1.37 (s, 6 H) 1.45 (s, 6 H) 2.26 - 2.42 (m, 9 H) 2.97 (sept, J=6.76 Hz, 1 H) 3.32 - 3.40 (m, 2 H) 3.43 - 3.48 (m, 1 H) 3.48 - 3.55 (m, 1 H) 3.55 - 3.72 (m, 5 H) 3.79 - 3.89 (m, 4 H) 3.91 (s, 2 H) 4.61 (d, J=9.17 Hz, 1 H) 6.39 (d, J=16.5 Hz, 1 H) 6.46 (d, J=16.5 Hz, 1 H) 6.73 (d, J=7.79 Hz, 1 H) 6.92 (s, 1 H) 7.04 - 7.14 (m, 2 H) 7.23 (s, 1 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 710[M+H]⁺, 732[M+Na]⁺.
MS ESI/APCI Dual nega : 744[M+Cl]⁻.
Anal. Calcd for C₄₀H₅₉N₃O₈・1.5H₂O : C, 65.2; H, 8.48; N, 5.70. Found : C, 65.1; H, 8.38; N, 5.64.
実施例１２−１

中間体（Ｅ）の代わりに中間体（Ｆ）を用いて実施例５−１と同様の方法で、無色アモルファスの化合物（１２−１）（５５ｍｇ、４０％）を得た。
¹H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.12, 1.14 (each d, J=6.92 Hz, each 3 H) 1.28 - 1.47 (m, 8 H) 1.60 (s, 6 H) 1.73 - 1.89 (m, 5 H) 1.99 (s, 3 H) 2.04 (s, 3 H) 2.04 (s, 3 H) 2.22 - 2.35 (m, 10 H) 2.73 - 2.99 (m, 3 H) 3.76 - 3.84 (m, 1 H) 3.84 - 3.90 (m, 5 H) 4.07 - 4.15 (m, 1 H) 4.18 - 4.26 (m, 1 H) 4.34 - 4.50 (m, 2 H) 4.75 - 4.86 (m, 1 H) 5.13 - 5.23 (m, 1 H) 5.26 - 5.39 (m, 2 H) 6.30 (d, J=16.48 Hz, 1 H) 6.48 (d, J=16.48 Hz, 1 H) 6.63 (d, J=8.39 Hz, 1 H) 6.81 (s, 1 H) 6.94 - 7.01 (m, 2 H) 7.04 - 7.11 (m, 1 H) 7.23 (s, 1 H).
MSESI/APCI Dual posi : 892[M+H]⁺, 914[M+Na]⁺.
実施例１２−２

化合物（１−１）の代わりに化合物（１２−１）を用いて実施例１−２と同様の方法で無色アモルファスの化合物（１２−２）（５５ｍｇ，８２％）を得た。
¹H NMR (600 MHz, METHANOL-d₄) δ ppm 1.13, 1.15 (each d, J=6.84 Hz, each 3 H) 1.24 - 1.33 (m, 2 H) 1.37 (s, 6 H) 1.44 (s, 6 H) 1.75 (br. s, 2 H) 2.17 (s, 6 H) 2.30 - 2.39 (m, 4 H) 2.93 - 3.01 (m, 1 H) 3.28 - 3.38 (m, 5 H) 3.43 - 3.47 (m, 1 H) 3.47 - 3.53 (m, 1 H) 3.62 (dd, J=12.15, 5.73 Hz, 1 H) 3.80 - 3.86 (m, 3 H) 3.91 (s, 2 H) 4.48 (br. s., 2 H) 4.61 (d, J=9.63 Hz, 1 H) 6.40 (d, J=16.05 Hz, 1 H) 6.47 (d, J=16.05 Hz, 1 H) 6.73 (d, J=7.79 Hz, 1 H) 6.92 (s, 1 H) 7.06 - 7.11 (m, 2 H) 7.23 (s, 1 H).
MSESI/APCI Dual posi : 724[M+H]⁺, 746[M+Na]⁺ .
MSESI/APCI Dual nega : 722[M-H]⁻, 758[M+Cl]⁻.
Anal. Calcd for C₄₁H₆₁N₃O₈・2.5H₂O: C, 64.04 ; H，8.65；N，5.46. Found: C, 64.01; H, 8.38；N，5.49．
実施例１３−１

中間体（Ｅ）の代わりに中間体（Ｆ）を用いて実施例６−１と同様の方法で無色アモルファスの化合物（１３−１）（１．９８ｇ，９９％）を得た。
¹H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.10 (s, 6 H) 1.12 (d, J=6.84 Hz, 3 H) 1.14 (d, J=6.84 Hz, 3 H) 1.36 (s, 6 H) 1.56 (s, 6 H) 1.77 (s, 3 H) 1.99 (s, 3 H) 2.04 (s, 6 H) 2.30 (s, 3 H) 2.85 - 3.02 (m, 1 H) 3.13 (d, J=5.91 Hz, 2 H) 3.76 - 3.84 (m, 1 H) 3.81 - 3.96 (m, 1 H) 3.86 (s, 3 H) 4.07 - 4.15 (m, 1 H) 4.18 - 4.27 (m, 1 H) 4.75 - 4.88 (m, 1 H) 5.11 - 5.24 (m, 1 H) 5.26 - 5.37 (m, 2 H) 6.22 - 6.38 (m, 1 H) 6.43 - 6.54 (m, 1 H) 6.59 - 6.70 (m, 1 H) 6.81 (s, 1 H) 6.96 - 7.02 (m, 2 H) 7.04 - 7.12 (m, 1 H) 7.20 - 7.26 (m, 1 H)．
実施例１３−２

化合物（１−１）の代わりに化合物（１３−１）を用いて実施例１−２と同様の方法で無色アモルファスの化合物（１２−２）（１．０ｇ，６５％）を得た。
¹H NMR (600 MHz, METHANOL-d₄) δ ppm 1.01 (s, 6 H) 1.09 - 1.15 (m, 6 H) 1.35 (s, 6 H) 1.43 (s, 6 H) 2.31 (s, 3 H) 2.91 - 3.00 (m, 1 H) 3.08 (s, 2 H) 3.27 - 3.36 (m, 5 H) 3.41 - 3.46 (m, 1 H) 3.47 - 3.52 (m, 1 H) 3.60 (dd, J=11.92, 5.96 Hz, 1 H) 3.80 - 3.84 (m, 4 H) 3.90 (s, 2 H) 4.59 (d, J=9.63 Hz, 1 H) 6.36 - 6.41 (m, 1 H) 6.45 - 6.50 (m, 1 H) 6.71 (d, J=7.79 Hz, 1 H) 6.90 (s, 1 H) 7.06 (s, 1 H) 7.07 - 7.10 (m, 1 H) 7.20 - 7.25 (m, 1 H)．
MS ESI/APCI Dual posi : 684[M+H]⁺.
MS ESI/APCI Dual nega : 682[M-H]^-, 718[M+Cl]⁻.
実施例１４−１

中間体（Ｅ）の代わりに中間体（Ｆ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルエチレンジアミンの代わりに４−アミノ−１−ｔ−ブトキシカルボニルピペリジンを用いて実施例１−１と同様の方法で淡黄色の油状化合物（１４−１）（２００ｍｇ，ｑｕａｎｔ．）を得た。
¹H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.11 (d, J=6.99 Hz, 3 H) 1.14 (d, J=6.99 Hz, 3 H) 1.25 - 1.33 (m, 2 H) 1.36 (s, 6 H) 1.45 (s, 9 H) 1.48 (s, 6 H) 1.77 (s, 3 H) 1.79 - 1.93 (m, 2 H) 1.99 (s, 3 H) 2.04 (s, 3 H) 2.04 (s, 3 H) 2.32 (s, 3 H) 2.90 - 2.98 (m, 3 H) 3.75 - 4.00 (m, 9 H) 4.07 - 4.15 (m, 1 H) 4.18 - 4.27 (m, 1 H) 4.79 - 4.86 (m, 1 H) 5.19 (d, J=10.10 Hz, 1 H) 5.26 - 5.35 (m, 2 H) 6.09 (s, 1 H) 6.26 (d, J=16.48 Hz, 1 H) 6.50 (d, J=16.48 Hz, 1 H) 6.65 (d, J=8.32 Hz, 1 H) 6.74 - 6.83 (m, 2 H) 6.99 (s, 1 H) 7.08 (dd, J=8.32, 2.72 Hz, 1 H) 7.22 (d, J=2.72 Hz, 1 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 965[M+H]⁺, 987[M+Na]⁺.
MS ESI/APCI Dual nega : 999[M+Cl]⁻.
実施例１４−２

化合物（１４−１）（１８５ｍｇ，０．１９２ｍｍｏｌ）のクロロホルム（２ｍＬ）溶液に、トリフルオロ酢酸（４５０μＬ）を加えた。反応混合物を室温で２時間攪拌し、溶媒を減圧下留去した。得られた残渣にトリエチルアミン／水／メタノール（１／１／５，４ｍＬ）を加え、反応混合物を室温で一晩攪拌した。溶媒を減圧下留去し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール＝１０：０→８：２）で精製し、無色アモルファスの化合物（１４−２）（１０３ｍｇ，７７％）を得た。
¹H NMR (600 MHz, METHANOL-d₄) δ ppm 1.14 (d, J=5.50 Hz, 3 H) 1.15 (d, J=5.50 Hz, 3 H) 1.27 - 1.35 (m, 2 H) 1.37 (s, 6 H) 1.45 (s, 6 H) 1.78 (d, J=11.46 Hz, 2 H) 2.33 (s, 3 H) 2.56 - 2.68 (m, 2 H) 2.95 - 3.03 (m, 3 H) 3.33 - 3.37 (m, 2 H) 3.43 - 3.48 (m, 1 H) 3.49 - 3.53 (m, 1 H) 3.57 - 3.66 (m, 1 H) 3.68 - 3.75 (m, 1 H) 3.81 - 3.84 (m, 1 H) 3.85 (s, 3 H) 3.92 (s, 2 H) 4.61 (d, J=9.17 Hz, 1 H) 6.34 - 6.43 (m, 1 H) 6.45 - 6.56 (m, 1 H) 6.74 (d, J=7.79 Hz, 1 H) 6.92 (s, 1 H) 7.04 - 7.16 (m, 2 H) 7.26 (s, 1 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 696[M+H]⁺, 718[M+Na]⁺.
実施例１５−１

中間体（Ｅ）の代わりに中間体（Ｇ）を用いて実施例１−１と同様の方法で無色アモルファスの化合物（１５−１）（１０３ｍｇ，９４％）を得た。
¹H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.05 (d, J=6.84 Hz, 3 H) 1.10 (d, J=6.84 Hz, 3 H) 1.38 (s, 6 H) 1.49 (s, 6 H) 1.77 (s, 3 H) 2.00 (s, 3 H) 2.05 (s, 3 H) 2.06 (s, 3 H) 2.46 (s, 6 H) 2.64 - 2.78 (m, 2 H) 3.04 (sept, J=6.84 Hz, 1 H) 3.38 - 3.49 (m, 2 H) 3.78 - 3.83 (m, 1 H) 3.85 (s, 3 H) 3.87 - 4.04 (m, 2 H) 4.08 - 4.18 (m, 1 H) 4.18 - 4.30 (m, 1 H) 4.87 (d, J=9.48 Hz, 1 H) 5.16 - 5.27 (m, 1 H) 5.28 - 5.44 (m, 2 H) 6.35 (s, 1 H) 6.40 - 6.57 (m, 2 H) 6.77 (s, 1 H) 7.01 (d, J=8.24 Hz, 2 H) 7.13 (s, 1 H) 7.32 (d, J=8.24 Hz, 2 H) 7.40 (s, 1 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 839[M+H]⁺.
MS ESI/APCI Dual nega : 873[M+Cl]⁻.
実施例１５−２

化合物（４−１Ａ）、化合物（４−１Ｂ）の代わりに化合物（１５−１）を用いて実施例４−２と同様の方法で無色アモルファスの化合物（１５−２）（６２．１ｍｇ，７５％）を得た。
¹H NMR (600 MHz, METHANOL-d₄) δ ppm 1.07 (d, J=6.76 Hz, 3 H) 1.09 (d, J=6.76 Hz, 3 H) 1.36 (s, 6 H) 1.44 (s, 6 H) 2.23 (s, 6 H) 2.41 (t, J=6.88 Hz, 2 H) 3.10 (sept, J=6.76 Hz, 1 H) 3.26 - 3.30 (m, 2 H) 3.35 - 3.45 (m, 2 H) 3.45 - 3.52 (m, 1 H) 3.54 - 3.60 (m, 1 H) 3.62 - 3.69 (m, 1 H) 3.79 - 3.89 (m, 4 H) 3.99 (s, 2 H) 4.65 (d, J=9.63 Hz, 1 H) 6.39 (d, J=16.51 Hz, 1 H) 6.52 (d, J=16.51 Hz, 1 H) 6.88 (s, 1 H) 7.07 (d, J=8.25 Hz, 2 H) 7.23 (s, 1 H) 7.31 (d, J=8.25 Hz, 2 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 670[M+H]⁺.
MS ESI/APCI Dual nega : 704[M+Cl]⁻.
Anal. Calcd for C₃₇H₅₅N₃O₈・1.0H₂O : C, 64.6; H, 8.36; N, 6.11. Found : C, 64.5; H, 8.31; N, 6.02.
実施例１５−３

無色アモルファスの化合物（１５−２）（純度９９．９％）２５ｍｇをエタノール０．０８ｍＬに室温にて溶解させた後、１日間室温で撹拌させ結晶を得た。本結晶を室温で減圧乾燥し、無色の結晶２７ｍｇ（回収率１００％）を得た。この結晶の粉末Ｘ線回折パターン、示差熱分析／熱質量測定（ＴＧ／ＤＴＡ）及び赤外吸収スペクトルを測定したところ、化合物（１５−２）のエタノール溶媒和物の結晶であった。得られた結晶は、粉末Ｘ線回折（Ｃｕ−Ｋα）において、２θ＝５．９度、１７．１度、１７．６度及び２１．５度にピークを有した。また、赤外線吸収スペクトルにおいて、特性吸収帯が３５３８ｃｍ^-1、３３５７ｃｍ^-1、２９６４ｃｍ^-1、１６７３ｃｍ^-1、１６３４ｃｍ^-1及び１５０５ｃｍ^-1にあった。そして、融点が１０８℃〜１１４℃であった。

該結晶の、粉末Ｘ線回折パターンを図１に、赤外吸収スペクトル（ＫＢｒ法）を図２に、示差熱分析／熱質量測定カーブを図３に示す。
実施例１５−４

また、上記結晶は以下の方法でも得ることができた。
無色アモルファスの化合物（１５−２）（純度９６．０％）５６ｇをエタノール１３５ｍＬに６６℃で溶解した後、撹拌しながらヘプタン１３５ｍＬを加えて冷却し、４５℃付近で、実施例１５−３で得られた化合物（１５−２）のエタノール溶媒和物の結晶を入れた後、１℃まで温度を下げた。析出した結晶をろ取した後に、４０℃で減圧乾燥し、無色の結晶４６ｇ（回収率８２％，純度９９．１％）を得た。この結晶の粉末Ｘ線回折パターン、示差熱分析／熱質量測定（ＴＧ／ＤＴＡ）及び赤外吸収スペクトルを測定したところ、化合物（１５−２）のエタノール溶媒和物の結晶であった。
¹H NMR (600 MHz, METHANOL- d₄) δ ppm 1.06 (d, J=5.04 Hz, 3 H) 1.07 (d, J=5.50 Hz, 3 H) 1.15 (t, J=6.88 Hz, 3 H) 1.34 (s, 6 H) 1.43 (s, 6 H) 2.20 (s, 6 H) 2.37 (t, J=6.88 Hz, 2 H) 3.08 (quin, J=6.88 Hz, 1 H) 3.26 (t, J=6.88 Hz, 2 H) 3.28-3.30 (m, 4 H) 3.34 - 3.38 (m, 2 H) 3.43 - 3.49 (m, 1 H) 3.55 (t, J=9.17 Hz, 1 H) 3.58 (q, J=6.88 Hz, 2 H) 3.62 - 3.66 (m, 1 H) 3.78 - 3.85 (m, 4 H) 3.96 (s, 2 H) 4.63 (d, J=9.62 Hz, 1 H) 6.37 (d, J=16.50 Hz, 1 H) 6.50 (d, J=16.50 Hz, 1 H) 6.86 (s, 1 H) 7.05 (d, J=7.80 Hz, 2 H) 7.22 (s, 1 H) 7.29 (d, J=7.79 Hz, 2 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 670[M+H]⁺.
MS ESI/APCI Dual nega : 704[M+Cl]^-.
Anal. Calcd for C₃₉H₆₁N₃O₉・0.6H₂O : C, 64.94; H, 8.61; N, 5.83. Found: C, 64.75; H, 8.46; N, 5.82.
実施例１５−５

また、以下の操作を行うことで、上記結晶とは別の結晶（Ａ型結晶）を得た。
無色アモルファスの化合物（１５−２）のエタノール溶媒和物０．１０ｇにリン酸塩緩衝液（ｐＨ６．８）６００μＬを加え、２５℃で２４時間懸濁した。遠心分離（３０００ｒｐｍ，２５℃，１０分）後、上清を取り除き、室温で乾燥した。この結晶の粉末Ｘ線回折パターン及び示差熱分析／熱質量測定（ＴＧ／ＤＴＡ）を測定したところ、Ａ形結晶であった。
得られた結晶は、粉末Ｘ線回折（Ｃｕ−Ｋα）において、２θ＝６．１度、１３．７度、１８．０度及び１８．７度にピークを有した。また、融点が１０７℃〜１１３℃であった。

該結晶の、粉末Ｘ線回折パターンを図４に、示差熱分析／熱質量測定カーブを図５に示す。
実施例１６−１

中間体（Ｅ）の代わりに中間体（Ｇ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルエチレンジアミンの代わりにピペラジンを用いて実施例１−１と同様の方法で無色アモルファスの化合物（１６−１）（９０ｍｇ，５５％）を得た。
¹H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.06 (d, J=6.6 Hz, 3 H) 1.11 (d, J=6.6 Hz, 3 H) 1.35 (s, 6 H) 1.77 (s, 6 H) 2.00 (s, 3 H) 2.04 (s, 3 H) 2.06 (s, 3 H) 2.25 (br. s., 2 H) 2.78 - 2.88 (m, 4 H) 2.96 - 3.12 (m, 1 H) 3.55 - 3.65 (m, 4 H) 3.78 - 3.88 (m, 1 H) 3.85 (s, 3 H) 3.88 - 4.04 (m, 2 H) 4.09 - 4.18 (m, 1 H) 4.20 - 4.30 (m, 1 H) 4.88 (d, J=9.48 Hz, 1 H) 5.15 - 5.27 (m, 1 H) 5.28 - 5.44 (m, 2 H) 6.22 - 6.33 (m, 1 H) 6.41 - 6.55 (m, 1 H) 6.72 - 6.85 (m, 2 H) 6.96 - 7.06 (m, 2 H) 7.14 (s, 1 H) 7.23 - 7.32 (m, 2 H)．
MS ESI/APCI Dual posi : 836[M+H]⁺.
実施例１６−２

化合物（１−１）の代わりに化合物（１６−１）を用いて実施例１−２と同様の方法で無色アモルファスの化合物（１６−２）（５２ｍｇ，７０％）を得た。
¹H NMR (600 MHz, METHANOL-d₄) δ ppm 1.06 (d, J=6.80 Hz, 3 H) 1.07 (d, J=6.80 Hz, 3 H) 1.34 (s, 6 H) 1.42 (s, 6 H) 2.67 (br. s., 4 H) 3.04 - 3.12 (m, 1 H) 3.27 - 3.30 (m, 2 H) 3.33 - 3.38 (m, 2 H) 3.43 - 3.49 (m, 1 H) 3.50 - 3.61 (m, 3 H) 3.61 - 3.66 (m, 1 H) 3.80 (s, 3 H) 3.83 (d, J=11.92 Hz, 1 H) 3.92 - 4.00 (m, 2 H) 4.63 (d, J=9.63 Hz, 1 H) 6.33 - 6.39 (m, 1 H) 6.44 - 6.49 (m, 1 H) 6.86 (s, 1 H) 7.06 (d, J=8.25 Hz, 2 H) 7.21 (s, 1 H) 7.27 (d, J=8.25 Hz, 2 H)．
MS ESI/APCI Dual posi : 668[M+H]⁺, 690[M+Na]⁺.
MS ESI/APCI Dual nega : 666[M-H]⁻, 702[M+Cl]⁻.
実施例１７−１

中間体（Ｅ）の代わりに中間体（Ｇ）、Ｎ，Ｎ−ジメチルエチレンジアミンの代わりに１−メチルピペラジンを用いて実施例１−１と同様の方法で無色アモルファスの化合物（１７−１）（１８７ｍｇ，９５％）を得た。
¹H NMR (300 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 1.05 (d, J=6.84 Hz, 3 H) 1.10 (d, J=6.84 Hz, 3 H) 1.36 (s, 6 H) 1.59 (s, 6 H) 1.77 (s, 3 H) 2.00 (s, 3 H) 2.05 (s, 3 H) 2.06 (s, 3 H) 2.26 (s, 3 H) 2.32 - 2.40 (m, 4 H) 2.96 - 3.12 (m, 1 H) 3.59 - 3.71 (m, 4 H) 3.79 - 3.84 (m, 1 H) 3.85 (s, 3 H) 3.90 - 4.05 (m, 2 H) 4.10 - 4.16 (m, 1 H) 4.21 - 4.28 (m, 1 H) 4.87 (d, J=9.64 Hz, 1 H) 5.16 - 5.27 (m, 1 H) 5.29 - 5.44 (m, 2 H) 6.28 (d, J=16.4 Hz, 1 H) 6.49 (d, J=16.4 Hz, 1 H) 6.77 (s, 1 H) 6.83 (s, 1 H) 7.01 (d, J=8.08 Hz, 2 H) 7.13 (s, 1 H) 7.25 - 7.32 (m, 2 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 850[M+H]⁺.
MS ESI/APCI Dual nega : 884[M+Cl]⁻.
実施例１７−２

化合物（４−１Ａ）、化合物（４−１Ｂ）の代わりに化合物（１７−１）を用いて実施例４−２と同様の方法で無色アモルファスの化合物（１７−２）（１２７ｍｇ，８４％）を得た。
¹H NMR (600 MHz, METHANOL-d₄) δ ppm 1.05 (d, J=6.65 Hz, 3 H) 1.07 (d, J=6.65 Hz, 3 H) 1.36 (s, 6 H) 1.45 (s, 6 H) 2.14 (s, 3 H) 2.23 - 2.40 (m, 4 H) 3.06 - 3.16 (m, 1 H) 3.34 - 3.42 (m, 2 H) 3.46 - 3.52 (m, 1 H) 3.51 - 3.73 (m, 6 H) 3.79 - 3.91 (m, 4 H) 3.98 (s, 2 H) 4.65 (d, J=9.63 Hz, 1 H) 6.38 (d, J=16.1 Hz, 1 H) 6.48 (d, J=16.1 Hz, 1 H) 6.88 (s, 1 H) 7.08 (d, J=8.25 Hz, 2 H) 7.23 (s, 1 H) 7.29 (d, J=8.25 Hz, 2 H).
MS ESI/APCI Dual posi : 682[M+H]⁺, 704[M+Na]⁺.
MS ESI/APCI Dual nega : 716[M+Cl]⁻.
Anal. Calcd for C₃₈H₅₅N₃O₈・1.6H₂O : C, 64.2; H, 8.25; N, 5.91. Found : C, 64.3; H, 8.08; N, 5.89.

試験例１
（１）ヒトＳＧＬＴ１を安定に発現するＣＨＯ−Ｋ１細胞の作製
ヒトＳＧＬＴ１蛋白質を発現するプラスミドベクターを、リポフェクトアミン２０００（インビトロジェン社）を用いてＣＨＯ−Ｋ１細胞にトランスフェクションした。ＳＧＬＴ１発現細胞は、５００μｇ／ｍＬの濃度のジェネティシンの存在下で培養し耐性株を選択し、下記に示す系により糖取り込み能を指標に取得した。

（２）ヒトＳＧＬＴ２を安定に発現するＣＨＯ−Ｋ１細胞の作製
方法Ａ（ＷＯ２００７／１３６１１６に記載の方法）：ヒトＳＧＬＴ２カルボキシ末端の最終残基にＬｅｕＧｌｕＳｅｒＡｒｇＧｌｙＰｒｏＶａｌが付加された蛋白質を発現するプラスミドベクターを、リポフェクトアミン２０００（インビトロジェン社）を用いてＣＨＯ−Ｋ１細胞にトランスフェクションした。ＳＧＬＴ２発現細胞は、５００μｇ／ｍＬの濃度のハイグロマイシンＢの存在下で培養し耐性株を選択し、下記に示す系により糖取り込み能を指標に取得した。本安定発現細胞を用いて算出された結果を表１に方法Ａとして示した。

方法Ｂ：ヒトＳＧＬＴ２蛋白質を発現するプラスミドベクターを、リポフェクトアミンＬＴＸ（インビトロジェン社）を用いてＣＨＯ−Ｋ１細胞にトランスフェクションした。ＳＧＬＴ２発現細胞は、１０００μｇ／ｍＬの濃度のジェネティシンの存在下で培養し耐性株を選択し、下記に示す系により糖取り込み能を指標に取得した。本安定発現細胞を用いて算出された結果を表１に方法Ｂとして示した。

（３）安定発現細胞におけるナトリウム依存的糖取り込み阻害試験
上記で調製した安定発現細胞を用いて下記試験を行った。

前処理用緩衝液（１４０ｍＭ塩化コリン、２ｍＭＫＣｌ、１ｍＭＣａＣｌ_２、１ｍＭＭｇＣｌ_２、１０ｍＭＨＥＰＥＳ／５ｍＭＴｒｉｓ、ｐＨ７．４）を２００μＬをＳＧＬＴ１安定発現細胞に、または２ｍＬを各ＳＧＬＴ２安定発現細胞に加え、２０分間インキュベーションした。前処理用緩衝液を除去し、試験化合物を含む取り込み用緩衝液（［¹⁴Ｃ］メチル α−Ｄ−グルコピラノシドを含むメチル α−Ｄ−グルコピラノシド（１ｍＭ）、１４０ｍＭＮａＣｌ、２ｍＭＫＣｌ、１ｍＭＣａＣｌ_２、１ｍＭＭｇＣｌ_２、１０ｍＭＨＥＰＥＳ／５ｍＭＴｒｉｓ、ｐＨ７．４）７５μＬ（ＳＧＬＴ１の場合）、または２００μＬ（ＳＧＬＴ２の場合）を加え、３７℃にて３０分（ＳＧＬＴ１）または６０分（ＳＧＬＴ２）取り込み反応を行った。反応後細胞を洗浄用緩衝液（１０ｍＭメチル α−Ｄ−グルコピラノシド、１４０ｍＭ塩化コリン２ｍＭＫＣｌ、１ｍＭＣａＣｌ_２、１ｍＭＭｇＣｌ_２、１０ｍＭＨＥＰＥＳ／５ｍＭＴｒｉｓ、ｐＨ７．４）２００μＬ（ＳＧＬＴ１の場合）、または２ｍＬ（ＳＧＬＴ２の場合）で２回洗浄し、０．２５ＭＮａＯＨ溶液７５μＬ（ＳＧＬＴ１の場合）、または４００μＬ（ＳＧＬＴ２の場合）に溶かした。液体シンチレーター（パーキンエルマー社）を加えよく混和した後、β線測定装置を用いて放射活性を測定した。対照群として試験化合物を含まない取り込み用緩衝液を調製した。また基礎取り込み用としてＮａＣｌに代えて塩化コリンを含む取り込み用緩衝液を調製した。

ＩＣ₅₀値を求めるにあたり、適当な６濃度の試験化合物を用い、対照群の糖取り込み量（１００％）に対し、糖取り込み量が５０％阻害される試験化合物濃度（ＩＣ₅₀値）を算出した。試験結果を表１に示す。

表１より、本発明化合物は、強いＳＧＬＴ１阻害活性を有し、また、ＳＧＬＴ２阻害活性も弱いがある程度の活性を有することが示された。
以下に、類似構造化合物に対する本発明化合物の優位性を示す。

表２に本願類似化合物の糖負荷後の血糖低下作用と腎臓内濃度を示した。化合物４、１０、１１及び３３は１ｍｇ／ｋｇ経口投与後の糖負荷試験において、強い血糖低下作用を示した。一方で、１ｍｇ／ｋｇ経口投与した７日後、化合物は***されず腎臓に残留する傾向が見られた。標的臓器はＳＧＬＴ１が多く分布する小腸である。従って、標的臓器以外に化合物が長く残留することで、予期せぬ副作用が発現する場合がある。例えば、分子内に3級アミンの様な親水性基と芳香環の様な疎水性基をもつ化合物は、陽イオン性薬物と呼ばれる。これらは、リン脂質と疎水結合し、ライソゾーム内に取り込まれ全身の器官に蓄積されることがある。薬物によって、蓄積が見られる器官は異なり、クロロキンでは網膜障害、パーヘキシリンでは肺や小脳に変化が見られる。（日薬理誌 Folia Pharmacol. Jpn. 113, 19-30, 1999）

試験例２ストレプトゾトシン糖尿病モデルラットにおける血糖値上昇抑制作用確認試験
（１）糖尿病モデルラットの作製
７週齢のＳＤ／ＩＧＳラット（日本チャールスリバー株式会社，雄性）について約１６時間の絶食後、エーテル麻酔下でストレプトゾトシン（ＳＴＺ）５０ｍｇ／ｋｇを尾静脈内投与し、糖尿病モデルラットを作製した。同様にエーテル麻酔下、１．２５ｍｍｏｌ／Ｌクエン酸生理食塩液１ｍＬ／ｋｇを尾静脈内投与し、正常対照ラットを作製した。ＳＴＺまたは１．２５ｍｍｏｌ／Ｌクエン酸生理食塩液投与１週後（８週齢）、経口グルコース負荷試験に供した。

（２）経口グルコース負荷試験
ラットを約１６時間の絶食後、薬物投与群には、０．５％カルボキシメチルセルロースナトリウム（ＣＭＣ）水溶液に溶解した薬物（１ｍｇ／ｋｇ）を、対照群には０．５％ＣＭＣ水溶液のみ経口投与した。薬物投与５分後に、グルコース溶液（２ｇ／ｋｇ）を経口投与し、薬物投与前（０ｔｉｍｅ）、及び、経口投与０．２５、０．５、１、２時間後の計５点で採血した。

採血は、エーテル麻酔下でラット尾静脈よりヘパリンコート採血管を用いて行い、遠心分離後、血漿を分取した。血漿中グルコース濃度の定量は、グルコースＣIIテストワコー（和光純薬株式会社）を用いて測定した。血糖値上昇抑制作用強度は、各薬物投与群の０から1時間までの血糖値より台形法を用いて血糖値-時間曲線下面積（ＡＵＣ）を算出し、basalを差し引いた血糖増加面積（ΔＡＵＣ）として表記し、対照群のそれに対する降下の割合で表記した。

結果を表２及び表３に示す。

試験例３
（１）国際特許公開ＷＯ２００７／１３６１１６号パンフレット記載の化合物４、１０、１１、３３経口投与後１週間までの腎臓中濃度推移
７週齢のＳＤ／ＩＧＳラット（日本チャールスリバー株式会社、雄性、非絶食）に、０．５％ＣＭＣ水溶液にて調製した化合物４、１０、３３（各１ｍｇ／ｋｇ）、および化合物１１（０．３ｍｇ／ｋｇ）を経口投与した。薬物投与後２４、７２、１６８時間にエーテル麻酔下、後大静脈より全採血し、安楽死確認後に腎臓を摘出した。生理食塩液で組織表面を洗浄後、重量を測定し４倍量の精製水を加え氷冷下ホモジナイズした。ホモジネートに内標準物質を含むアセトニトリル／メタノール溶液を加えて除タンパクした後、上清をＬＣ−ＭＳ／ＭＳ（アプライドバイオシステムズAPI3000）に供した。ポジティブイオンモードのエレクトロスプレーイオン化法にて生成した薬物由来のイオンを選択反応モニタリングにて検出した。得られた抽出イオンクロマトグラムのピーク面積から内標準法にてホモジネート中薬物濃度を算出した。
ここで、化合物１０および３３の内部標準物質には、（１Ｓ）−１，５−アンヒドロ−１−［５−（４−エトキシベンジル）−２−メトキシ−４−メチルフェニル］−１−チオ−Ｄ−グルシトール，エチル−Ｄ_５を用い、化合物４および１１の内部標準物質には、化合物１１および化合物１１重水素標識体（トリスヒドロキシメチル−Ｄ_６；−Ｃ（ＣＤ_２ＯＨ）_３）をそれぞれ用いた。

実験結果を表２に示す。

（２）化合物１−２、５−２、６−２、１３−２、１５−２の３日間反復経口投与後の腎臓中濃度
７週齢のＳＤ／ＩＧＳラット（日本チャールスリバー株式会社、雄性、非絶食）に、０．５％ＣＭＣ水溶液にて調製した化合物１−２、５−２、６−２、１３−２、１５−２（３ｍｇ／ｋｇ）を１日１回３日間連続経口投与した。最終日の薬物投与後４８時間にイソフルラン麻酔下、後大静脈より全採血し、安楽死確認後に腎臓を摘出した。生理食塩液で組織表面を洗浄後、重量を測定し４倍量の精製水を加え氷冷下ホモジナイズした。ホモジネート中薬物濃度の測定は、上記に示した試験例３の（１）と同じ方法で、内部標準物質に上記の化合物１１を用い、ＬＣ−ＭＳ／ＭＳにより行った。

実験結果を表３に示す。

国際特許公開ＷＯ２００７／１３６１１６号パンフレットに開示の化合物４、１０、１１および３３の構造を、下記に示す。

国際特許公開ＷＯ２００７／１３６１１６号パンフレットに開示の化合物は１ｍｇ／ｋｇ経口投与後の糖負荷試験において、強い血糖低下作用を示した。しかし、１ｍｇ／ｋｇ経口投与した後、腎臓中から化合物の消失速度が緩慢で、７日後でも化合物は***されず腎臓に残留する傾向が見られた（表２）。

一方、本発明化合物は上記先行技術化合物と同様に強い血糖降下作用を有した。また、３ｍｇ／ｋｇの用量で３日間連続投与したにも関わらず、投与２日後に意外にも化合物は腎臓に残留しないという特徴を示した（表３）。

この相違の原因として、本発明化合物は、体内に吸収された場合に腎臓に残留されずにすみやかに***されたと考えられる。

したがって、本発明化合物は、体内残留性の傾向がなく、連続投与による副作用及び毒性が少ない医薬品として実用性に優れた性質を有すると考えられる。

本発明化合物の製剤例を以下に示す。
製剤例１
以下の成分を含有するカプセル剤を製造する。
成分式（Ｉ）で表される化合物 10mg
マンニトール 113mg
Ｌ−ＨＰＣ 15mg
ＨＰＣ−Ｌ 9mg
147mg
式（Ｉ）で表される化合物を３０メッシュのふるいに通す。他の添加剤を混合した後３０メッシュのふるいに通す。これらに精製水を添加し造粒した後、乾燥する。得られた乾燥顆粒をふるい（３０メッシュ）で篩過し１４７ｍｇを２号カプセルに充填する。

製剤例２
以下の成分を含有する錠剤を製造する。
成分式（Ｉ）で表される化合物 10mg
マンニトール 86mg
結晶セルロース 21mg
Ｌ−ＨＰＣ 14mg
ＨＰＣ−Ｌ 8mg
ステアリン酸マグネシウム 1mg
140mg
式（Ｉ）で表される化合物を３０メッシュのふるいに通す。他の添加剤を混合した後３０メッシュのふるいに通す。これらに精製水を添加し造粒した後、乾燥する。得られた乾燥顆粒をふるい（３０メッシュ）で篩過し混合する。混合品にステアリン酸マグネシウムを添加し、打錠用顆粒を得る。本打錠用顆粒を打錠し１４０ｍｇの錠剤を得る。

本発明により、小腸上皮に発現するＳＧＬＴ１（ナトリウム依存性グルコ−ス共輸送体１）活性を阻害し、消化管からのグルコ−ス吸収を抑制し、かつ体内貯留性の傾向がない、４−イソプロピルフェニルグルシトール化合物を有効成分として含有することを特徴とする糖尿病の予防又は治療剤を提供することが期待される。

Claims

下記式（Ｉ）で表される４−イソプロピルフェニルグルシトール化合物又はその製薬学的に許容される塩を有効成分として含有することを特徴とする糖尿病の予防又は治療剤：

式中、
Ｒ^１は水素原子、又はＣ_１−４アルキル基であり、
Ｒ^２は水素原子、又はメチル基であり、
Ｒ^３は“アミノ基若しくはジＣ_１−４アルキルアミノ基で置換されたＣ_１−４アルキル基”、又はピペリジル基であり、
Ｒ^４は水素原子であり、
又はＲ^３とＲ^４は隣接する窒素原子と共にピペリジノ基若しくはピペラジニル基を形成し、それらはＣ_１−４アルキル基若しくはジメチルアミノ基で置換されていてもよい。
下記群から選択される４−イソプロピルフェニルグルシトール化合物又はその製薬学的に許容される塩を有効成分として含有することを特徴とする糖尿病の予防又は治療剤。
下記群から選択される４−イソプロピルフェニルグルシトール化合物又はその製薬学的に許容される塩を有効成分として含有することを特徴とする糖尿病の予防又は治療剤。