JP2012026728A - Analyzer - Google Patents
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Abstract
Description
本発明は、蛍光検出機構および撹拌機構を備えた分析装置に関し、特に核酸検査に用いる分析装置である。 The present invention relates to an analyzer provided with a fluorescence detection mechanism and a stirring mechanism, and particularly to an analyzer used for nucleic acid testing.
従来、遺伝子検査や生化学検査分野では、核酸やタンパク質などの極微量試料を解析するために、蛍光を利用した定量分析を応用することが極めて多い。これは蛍光強度が非常に高感度に検出可能であるためである。分析装置の自動化をさらに進めるために、従来手作業であった工程を自動化することが重要となってきた。 Conventionally, in the field of genetic testing and biochemical testing, quantitative analysis using fluorescence is very often applied in order to analyze trace samples such as nucleic acids and proteins. This is because the fluorescence intensity can be detected with very high sensitivity. In order to further advance the automation of analyzers, it has become important to automate processes that have been manual operations.
試料や試薬の撹拌は解析結果に大きく影響するため、撹拌機構の性能評価を行うことは極めて重要である。生化学分析における反応溶液の撹拌方法としては、接触撹拌と非接触撹拌に区別できる。 Since the stirring of samples and reagents greatly affects the analysis results, it is extremely important to evaluate the performance of the stirring mechanism. As a stirring method of the reaction solution in the biochemical analysis, a distinction can be made between contact stirring and non-contact stirring.
接触撹拌の場合、撹拌棒を用いる方法とシリンジ機構等を用いた吸引吐出による方法が主である。また、非接触撹拌の場合、反応容器を固定し反応液に超音波を当てることによる撹拌方法と、反応容器と共に反応溶液を激しく動かす機構を用いた撹拌方法がある。 In the case of contact stirring, there are mainly a method using a stirring bar and a method using suction and discharge using a syringe mechanism or the like. In the case of non-contact stirring, there are a stirring method by fixing the reaction vessel and applying ultrasonic waves to the reaction solution, and a stirring method using a mechanism that moves the reaction solution vigorously with the reaction vessel.
その撹拌状態を判定する手法として、撹拌判定用の試薬を用いて液体試料と撹拌を行い、判定の手法として分光光度計や撹拌装置を搭載した分析装置(特許文献1)を用いて吸光度を測定していた。 As a method for determining the agitation state, the liquid sample is agitated using a reagent for agitation determination, and the absorbance is measured using an analysis device (Patent Document 1) equipped with a spectrophotometer or a stirrer as a determination method. Was.
また、従来の手作業による遺伝子検査では、微量溶液に対応した反応容器で、キャリーオーバーのリスクが低い撹拌方法として、ボルテックス撹拌と遠心機を組合せることによる非接触撹拌を行い、激しい撹拌によって活性を失い易い酵素を含む反応液の場合、前記ボルテックスミキサーを用いた撹拌方法は実施せずに、反応容器の底を手でたたいて撹拌するタッピング操作を行っており、前記タッピングした反応容器の撹拌状態を確認するには、分光光度計を必要としていた。 In addition, in conventional manual genetic testing, a non-contact stirrer that combines a vortex stirrer and a centrifuge is used as a stirring method with a reaction vessel that can handle a small amount of solution and has a low risk of carryover. In the case of a reaction solution containing an enzyme that easily loses water, a tapping operation is performed in which the stirring is performed by tapping the bottom of the reaction vessel by hand without performing the stirring method using the vortex mixer. In order to confirm the stirring state, a spectrophotometer was required.
特開2005−37299号公報(特許文献2)には、数十plの体積の有する混合液滴の均一度を吸光度及び蛍光強度の対称性を算出し判定する手法が開示されている。この手法では、液滴蛍光画像を取得後に液滴の中心を決定し、中心に対して左右の対称度を算出して液滴の均一度を評価している。 Japanese Patent Laying-Open No. 2005-37299 (Patent Document 2) discloses a method for determining the uniformity of a mixed droplet having a volume of several tens of pl by calculating the symmetry of absorbance and fluorescence intensity. In this method, the center of the droplet is determined after acquiring the droplet fluorescence image, and the degree of uniformity of the droplet is evaluated by calculating the degree of symmetry to the left and right of the center.
公知技術の吸光度法により撹拌機構の性能評価を装置内部で自動化するためには、吸光度測定のための色素溶液と光度計を搭載させなくてはならず、装置全体が複雑化しコストが増大してしまう。 In order to automate the performance evaluation of the stirring mechanism inside the device using the absorbance method of the known technology, it is necessary to install a dye solution and a photometer for absorbance measurement, which increases the complexity and cost of the entire device. End up.
また、特許文献2では、蛍光強度そのもので比較を行っていないため、撹拌されず不均一であっても取り出す部位によって、液滴の均一度が高い結果を取得してしまう。
Further, in
本発明の分析装置は、励起光を照射する光源と、蛍光強度を測定する測定部と、容器内の液体を攪拌する攪拌機構と、蛍光強度を測定する際に容器を架設する容器架設部と、を備え、攪拌後に測定部で測定した蛍光強度を基に攪拌不良かどうかを判断している。 The analyzer of the present invention includes a light source that emits excitation light, a measurement unit that measures fluorescence intensity, a stirring mechanism that stirs the liquid in the container, and a container erection unit that lays the container when measuring fluorescence intensity. , And whether or not the stirring is poor is determined based on the fluorescence intensity measured by the measurement unit after stirring.
本発明によれば、他の装置を用いることなく、自装置内で攪拌性能を判定することができる。 According to the present invention, the stirring performance can be determined within the own apparatus without using another apparatus.
本発明の一実施形態の核酸検査装置(遺伝子検査装置ともいう)は、図2に示すように、液体を分注可能な分注機構13,反応容器を搬送する搬送機構14,試薬分注された反応容器を撹拌する攪拌機構11,蛍光色素溶液の蛍光強度を測定可能な蛍光検出機構12を備える。また、核酸検査装置は、さらに、図3に示すように、制御部21,データ処理装置25を備える。但し、データ処理装置25は、核酸検査装置に外付けしてもよい、つまり、データ処理装置25を核酸検査装置とは別に設けてもよい。好ましくは、攪拌中の温度変化が検査結果に影響する場合は、攪拌機構11の周囲に温度制御機構(不図示)を備えている。
As shown in FIG. 2, a nucleic acid test apparatus (also referred to as a genetic test apparatus) according to an embodiment of the present invention includes a
具体的な動作について説明する。分注機構13より目標容量の試薬を反応容器7に分注する。次いで、分注された反応容器7を搬送機構14にて撹拌機構11へ搬送し、反応容器設置部52が回転駆動体51の回転中心とは異なる撹拌機構11にて、高速回転と遅速回転または回転停止を繰返し実施する(図7)。次いで、撹拌した反応容器7を搬送機構14で蛍光検出機構12に搬送し、蛍光検出機構12から得られる蛍光強度を算出する。この一連の動作を同一条件で複数回繰返して行い、得られた各回のデータから、平均値,標準偏差を求め、次いで標準偏差からプロコトルの最大のバラツキ3SD(standard Deviation)を算出し、平均値から3SD減算した値を算出する。最後に、得られた平均値から3SD減算した値を撹拌機構の性能評価結果とする。以上の過程は、次のように表される。
A specific operation will be described. A target volume of reagent is dispensed into the
次いで、算出した撹拌機構11の性能評価結果を予め設定した基準値と比較し、基準値以下である場合は撹拌不良であると判定しオペレータに通知する。
Next, the calculated performance evaluation result of the
撹拌機構11の撹拌性能評価としてFlxを用いることが好ましいが、撹拌性能評価としてprecisionのみを求めて性能を判定してもよい。
Although it is preferable to use Flx as the stirring performance evaluation of the
分注の繰返し回数(k)は多いほど好ましいが、撹拌機構11の性能評価として統計的に妥当な回数であればよい。
The larger the number of repetitions of dispensing (k), the better. However, it may be a statistically reasonable number for evaluating the performance of the
攪拌機構11は、図7に示すように、全体を支える保持具53,容器架設台54,容器架設台54を回転させる回転駆動体51を備えている。
As shown in FIG. 7, the
撹拌機構11は、反応容器を架設可能な穴(反応容器設置部)52が空いている。複数穴の空いた反応プレートを設置可能であることが好ましいが、図7に示すように、少なくとも一つ空いていれば連続撹拌することで撹拌機構の性能評価が可能であればよい。
The
撹拌機構11は、撹拌動作により反応容器7の垂直軸が傾かず、回転駆動体51により一定速度で回転させることが可能で、好ましくは速度,回転方向が可変であればよい。
The
蛍光検出機構12は、図8に示すように、反応容器7の架設部を有する反応ディスク30,該反応ディスク30を保持する保持具33,保持具33を介して反応ディスク30を回転させる回転駆動体35,反応ディスク30を覆うケーシング36、および反応容器7からの蛍光を検出する光学ユニット34を備えている。反応ディスク30には、反応容器7の温度制御を行うヒータ31と温度センサ32が設けられている。
As shown in FIG. 8, the
蛍光検出機構12による蛍光強度測定は、撹拌機構11により撹拌された反応容器を必要数量だけ蛍光検出機構12に架設後に測定する。より好ましくは、温度変化が検査結果に影響する場合は、蛍光検出機構12内に反応容器内の反応液を温度制御可能な機構(不図示)を備えることが望ましい。なお、蛍光強度測定は、少なくとも一つの反応容器の蛍光強度を測定可能であれば、架設と蛍光強度測定を反応容器の必要数量だけ繰返し行えればよく、撹拌後の反応容器を測定するタイミングによって本発明を限定するものではない。
The fluorescence intensity measurement by the
蛍光試薬は、一連の規定容量だけ前記蛍光色素溶液を含んだ溶液である。また、蛍光試薬は、蛍光検出機構の測定間差を補正するために、内部標準として利用可能な異なる蛍光色素溶液を含んでいることが好ましい。さらに、蛍光強度測定により、蛍光検出機構の校正が可能となることが好ましい。なお、蛍光試薬の蛍光色素溶液は、蛍光検出機構により検出可能なものであればよい。 A fluorescent reagent is a solution containing the fluorescent dye solution in a series of defined volumes. In addition, the fluorescent reagent preferably contains different fluorescent dye solutions that can be used as an internal standard in order to correct the difference between measurements of the fluorescence detection mechanism. Furthermore, it is preferable that the fluorescence detection mechanism can be calibrated by measuring the fluorescence intensity. The fluorescent dye solution of the fluorescent reagent only needs to be detectable by the fluorescence detection mechanism.
本実施形態の核酸検査装置は、特定の遺伝子を増幅して特異的に検出可能であればよく遺伝子検査法に限定されない。より具体的には、PCR法,NASBA法,LAMP法等が挙げられるが、本発明は、特定の遺伝子を増幅検出可能であれば他の手法でもよい。 The nucleic acid test apparatus of the present embodiment is not limited to the genetic test method as long as a specific gene can be amplified and specifically detected. More specifically, PCR method, NASBA method, LAMP method and the like can be mentioned, but the present invention may be other methods as long as a specific gene can be amplified and detected.
図9に示す、本発明の反応液47には、生化学検査,遺伝子検査等、従来の一般的に用いられる試薬であればいかなる試薬でもよく、より具体的にはNASBA試薬,LAMP試薬,PCR試薬が挙げられるが、試薬の種類に限定されない。また、本発明は反応液の蒸発を防ぐためのミネラルオイルが添加されていても効果的な撹拌が可能である。
The
図1に示すように、容器設置部1には、試薬容器ラック5,試料容器ラック3,反応容器ラック6、および分注チップラック8が設けられている。
As shown in FIG. 1, the
本発明の分注機構13は、核酸検査に用いる反応液を分析に必要な精度で分注可能であればよく、50μl以下の分注が可能で、より好ましくは、10μlの分注が可能であればよい。
The
搬送機構14は、反応容器ラック6上の反応容器7を、攪拌機構11および蛍光検出機構12へ設置する。動作を具体的に説明すると、反応容器7を容器保持機構19で掴み上方へ持ち上げ搬送し、反応容器7を下降させることによって、攪拌機構11および蛍光検出機構12の容器架設部へ設置することができる。なお、容器保持機構19の上下動は、搬送機構14に設けられた、アップダウンレール17で行う。また、容器保持機構19のXY方向への移動(2次元移動)は、搬送機構14に設けられた、センターレール15およびサイドレール16で行う。
The
上記の蛍光色素溶液としては、例えば、蛍光色素溶液FAM溶液原液5,000nM溶液にリン酸緩衝液を添加し、希釈した蛍光色素溶液が挙げられる。蛍光色素溶液の代わりに量子ドット(Qdot)溶液を用いることで、量子ドットの利点である長時間の励起光照射でも退色による影響がなく、さらには励起スペクトルが広範囲におよぶため、単一励起波長により発光波長の異なる量子ドットを用いて同時に複数の発光を得ることが可能である。さらには、励起波長の異なるLEDを有する光学系に対し、反応液の種類を複数用いることなく撹拌評価が可能である。 Examples of the fluorescent dye solution include a fluorescent dye solution diluted by adding a phosphate buffer to a 5,000 nM fluorescent dye solution FAM solution stock solution. By using a quantum dot (Qdot) solution instead of a fluorescent dye solution, there is no influence of fading even with long-term excitation light irradiation, which is an advantage of quantum dots, and furthermore, the excitation spectrum extends over a wide range, so a single excitation wavelength Thus, it is possible to obtain a plurality of light emission simultaneously using quantum dots having different emission wavelengths. Furthermore, agitation evaluation can be performed on an optical system having LEDs having different excitation wavelengths without using a plurality of types of reaction solutions.
上記の蛍光強度の測定とは、用いる蛍光色素に適切な励起波長を照射し、発生する蛍光を検出することを意味する。 The measurement of the fluorescence intensity mentioned above means that the fluorescent dye used is irradiated with an appropriate excitation wavelength and the generated fluorescence is detected.
また、本実施形態の核酸検査装置は、制御部21と、データ処理装置25を備えている。制御部21は、各機構の制御,温度制御,開口部開閉制御,サンプル導入および廃棄機構の制御,蛍光検出器からのデータ取得,データ解析が可能であればよい。
The nucleic acid test apparatus according to the present embodiment includes a
データ処理装置25は、演算処理を行うデータ処理部22と、データの記憶機能を備える記憶装置24と、撹拌機構の性能評価結果を表示するモニター23とを備えている。
The data processing device 25 includes a
本発明の一実施例について説明する。 An embodiment of the present invention will be described.
表1に、攪拌機構11および蛍光検出機構12の一例を示す。また、表2に、実験器具および試薬の一例を示す。
Table 1 shows an example of the
本実施例の攪拌性能を求める手順について図4を用いて説明する。 The procedure for obtaining the stirring performance of this example will be described with reference to FIG.
蛍光強度測定データ数(k;攪拌する反応容器の数)をオペレータの指示に基づき決定する(S101)。このステップについては、図5を用いて後述する。この後、オペレータによって、表2に示した必要量の試薬と、必要数の反応容器および分注チップが設置される。 The number of fluorescence intensity measurement data (k: the number of reaction vessels to be stirred) is determined based on the operator's instruction (S101). This step will be described later with reference to FIG. Thereafter, the necessary amount of reagents shown in Table 2 and the necessary number of reaction vessels and dispensing tips are installed by the operator.
オペレータからの指示に基づき、攪拌性能評価を開始する(S102)。 Based on the instruction from the operator, the stirring performance evaluation is started (S102).
分注機構13が必要量の試薬,試料,蛍光色素溶液を必要数の反応容器7へ分注する(S103)。このとき、必要に応じて表面に蒸発防止用のオイルを添加してもよい。
The
次に、図示しない閉栓機構により、反応容器7を閉栓する(S104)。
Next, the
その後、搬送機構14を用いて反応容器7を攪拌機構11へ搬送する(S105)。
Then, the
搬送後、攪拌機構11は、高速回転と遅速回転を繰返し、蛍光色素溶液と反応液(試薬および試料)とを混合する(S106)。
After the conveyance, the stirring
攪拌機構11が、攪拌性能の評価を行う(S107)。この評価の詳細については、図6を用いて後述する。
The stirring
最後に、攪拌性能の評価結果をオペレータへ通知する(S108)。 Finally, the evaluation result of the stirring performance is notified to the operator (S108).
上記のS101を、図5のフローチャートに沿って説明する。蛍光強度測定データのサンプル数(k)は、撹拌機構11の撹拌性能評価として統計的に妥当な回数が既定値として設定されているが、オペレータの目的に合わせて自由に選択することができる。
The above S101 will be described with reference to the flowchart of FIG. The number of samples (k) of the fluorescence intensity measurement data is set to a statistically valid number as a default value for the stirring performance evaluation of the
蛍光強度データサンプル数(k)を既定値から変更するかどうかをオペレータへ尋ねる(S200)。 The operator is asked whether to change the number of fluorescence intensity data samples (k) from the default value (S200).
既定値から変更しない場合、既定値が蛍光強度データサンプル数(k)とする(S201)。 When not changing from the default value, the default value is the fluorescence intensity data sample number (k) (S201).
既定値から変更する場合、蛍光強度データサンプル数のリストを表示する(S202)。 When changing from the default value, a list of fluorescence intensity data sample numbers is displayed (S202).
このリストからサンプル数が選択された場合(S203)、選択されたサンプル数が蛍光強度データサンプル数(k)となる(S204)。 When the number of samples is selected from this list (S203), the selected number of samples becomes the fluorescence intensity data sample number (k) (S204).
一方、オペレータから直接サンプル数が入力された場合(S205)、この入力されたサンプル数が蛍光強度データサンプル数(k)となる(S206)。 On the other hand, when the number of samples is directly input from the operator (S205), the input number of samples becomes the fluorescence intensity data sample number (k) (S206).
次に、攪拌性能の評価について図6を用いて説明する。 Next, evaluation of stirring performance will be described with reference to FIG.
撹拌機構11により撹拌した反応容器7を搬送機構14により、蛍光検出機構12の反応ディスク30へ蛍光強度データサンプル数(k)移設する(S300)。
The
蛍光検出機構12の反応ディスク30を回転させることにより、反応液47が保持された反応容器7が光学ユニット34上を通過する(S301)。
By rotating the
光学ユニット34は、光学ユニット34上を通過する反応容器7に励起光を照射し、発光される蛍光の強度を求める(S302)。
The
制御部21は、予め定めたサンプリング周期で、反応液47が発する蛍光強度を予め定めた回数(n)、採取する(S303)。
The
制御部21は、採取したサンプリングデータから蛍光強度が一番高いピーク値を算出する(S304)。
The
サンプル数がk個に達しない場合、測定が完了した反応容器7を搬送機構14にて搬出してから、廃棄し、S300へ戻る。一方、サンプル数がk個に達した場合、次のステップへ進む(S305)。
If the number of samples does not reach k, the
制御部21は、蛍光強度のピーク値を用いて、各反応容器のピーク値の平均値Ejを求める(S306)
The
撹拌性能の評価結果(Flx)が、基準値以上である場合、撹拌機構11の撹拌性能自動評価を終了する(S311)。
When the stirring performance evaluation result (Flx) is equal to or greater than the reference value, the stirring performance automatic evaluation of the
一方、撹拌性能の評価結果(Flx)が、基準値未満である場合、撹拌機構11の撹拌性能不良と判断し、エラー表示すると共に算出したデータを出力する(S312)。
On the other hand, if the evaluation result (Flx) of the stirring performance is less than the reference value, it is determined that the stirring performance of the
以上の手順で行った攪拌性能結果を、以下に示す。ここでは、Flxを求めるための蛍光強度データのサンプル数(k)は48、繰返し回数(n)は4回、コントロール溶液と撹拌なし溶液の反応容器はシングルチューブ、easyQプロコトル溶液の反応容器は8連チューブとした。 The stirring performance results obtained by the above procedure are shown below. Here, the number of samples (k) of fluorescence intensity data for obtaining Flx is 48, the number of repetitions (n) is 4, the reaction vessel for the control solution and the solution without stirring is a single tube, and the reaction vessel for the easyQ protocol solution is 8 A continuous tube was used.
本実施形態とeasyQプロコトルを用いて撹拌によるそれぞれの反応液47を表3に、撹拌性能評価結果を表4に示す。
Table 3 shows the
上記表4において、まず(1)コントロールとして撹拌機構で撹拌したものと、(2)撹拌なしの2種類の溶液を蛍光検出機構にて蛍光強度の測定を行った結果から、(1)コントロールに対して(2)撹拌なしの平均値は約50%であり、撹拌の有無を認識可能であることが証明された。この結果を図9,図10を用いて以下に詳細を説明する。 In Table 4 above, first, from (1) the control with the stirring mechanism as the control and (2) the fluorescence intensity measurement of the two types of solutions without stirring, the fluorescence detection mechanism was used. On the other hand, (2) the average value without stirring was about 50%, and it was proved that the presence or absence of stirring was recognizable. The results will be described in detail below with reference to FIGS.
図9は、蛍光検出機構12の光学ユニット34の概略構成図である。光源である発光ダイオード37より放出された光は、第1レンズ38により平行光となり、励起用バンドパスフィルタ39により余分な波長域をカットした後、第2レンズ41で反応ディスクの試料ホルダに支持されている透明な反応容器7内の反応液47に底面から照射される。指定された回転速度で反応ディスク30が回転を始めると、第2レンズ41から照射された励起光を通過する際に反応容器7から蛍光を発光する。
FIG. 9 is a schematic configuration diagram of the
反応容器7から発せられる蛍光は、反応容器7の側面から第3レンズ42により平行光となり、蛍光用バンドパスフィルタ43により余分な波長域をカット後、第4レンズ44で蛍光検出素子45に照射される。蛍光を蛍光検出素子45によって検出することにより、反応液47の光学的特性を測定する機構を持つ。反応ディスク30の回転,発光ダイオード37の点灯および蛍光検出素子(蛍光検出器)45の制御,データ収集を制御部21で行い、判定結果をデータ処理装置25へ出力しモニター23に表示する。
Fluorescence emitted from the
図10は、撹拌機構11における撹拌前と撹拌後の反応液47の概略図である。蛍光発光の強度は、蛍光色素溶液と励起光源の距離に依存する(近距離ほど発光が強い)ことを利用する。反応液を分注後に反応液よりも比重の軽い蛍光色素溶液を分注する。
FIG. 10 is a schematic view of the
撹拌前において、反応液47上面の蛍光色素の濃度が高く、第3レンズ42で集光する蛍光検出の光軸上の濃度は低く、撹拌後、つまり撹拌性能が良好である場合は、反応液に対し均一に蛍光色素が分布するため、第3レンズ42で集光する蛍光検出の光軸上の濃度は高くなる。このように撹拌前後の蛍光色素溶液の分布の違いから蛍光強度が変化することが、表4から証明できた。
Before stirring, the concentration of the fluorescent dye on the upper surface of the
上記表4において、次に(1)(2)に加えて(3)easyQプロコトル(8連チューブによる撹拌)に従い撹拌したもの合計3種類の撹拌後の蛍光強度の測定を行った結果、easyQプロコトルの結果から3SD(Standard Deviation)の範囲で(3)easyQプロコトルは84.9%以上の蛍光強度を持つことが判明した。この結果より、本発明における撹拌機構の性能は、(1)コントロールの蛍光強度に対し、蛍光強度の平均値−3SDが84.9%以上であればよいことが証明された。 In Table 4 above, in addition to (1) and (2), (3) easyQ protocol (stirring with 8 tubes), a total of 3 types of fluorescence intensity after stirring were measured. As a result, easyQ protocol was measured. From the results, it was found that (3) easyQ protocol has a fluorescence intensity of 84.9% or more in the range of 3SD (Standard Deviation). From this result, it was proved that the performance of the stirring mechanism in the present invention should be (1) the average value of fluorescence intensity −3SD is 84.9% or more with respect to the fluorescence intensity of control.
本発明における反応液はNASBA試薬HIV2.0において測定を行ったが、本発明による遺伝子検査装置では、測定する反応液ごとに撹拌性能の基準値を予め設定を行い比較すればよく、反応液の種類によって本発明を限定するものではない。 The reaction solution in the present invention was measured with NASBA reagent HIV 2.0. However, in the genetic test apparatus according to the present invention, the reference value of the stirring performance may be set in advance for each reaction solution to be measured and compared. The present invention is not limited by the type.
以上のように、本実施形態によって、撹拌機構11の撹拌性能の評価を装置内部において自動で実施することができた。
As described above, according to this embodiment, the stirring performance of the
本発明の実態形態である蛍光色素溶液は比重の軽いリン酸緩衝液を用いたが、上記撹拌機構において撹拌前後の蛍光強度を判別できればよく、本発明は当該具体的な例に限定されるものではない。具体的には、蛍光色素溶液は比重の重い反応液に添加してしてもよく、その場合は撹拌前後の蛍光強度の関係が逆にあるため、撹拌後に算出される撹拌性能が予め設定される基準値以上である場合、撹拌不良と判断すればよい。 As the fluorescent dye solution which is the actual form of the present invention, a phosphate buffer solution having a light specific gravity was used. However, it is sufficient that the fluorescence intensity before and after stirring can be determined by the stirring mechanism, and the present invention is limited to the specific example. is not. Specifically, the fluorescent dye solution may be added to a reaction solution having a high specific gravity, and in this case, since the relationship between the fluorescence intensity before and after stirring is reversed, the stirring performance calculated after stirring is set in advance. If it is above the reference value, it may be determined that the stirring is poor.
また、本発明の実態形態である励起光照射と蛍光検出の関係は、反応容器7に対して底面照射−側面検出であるが、上記蛍光検出機構12において蛍光強度を測定できればよく、本発明は当該具体的な例に限定されるものではない。具体的には、底面照射−底面検出,側面照射−側面検出,上面照射−側面検出,上面照射−上面検出でも構わない。
Further, the relationship between excitation light irradiation and fluorescence detection, which is the actual form of the present invention, is bottom surface irradiation-side surface detection with respect to the
本発明によれば、蛍光強度が蛍光物質と励起光源の距離に正比例する特性を利用し、試薬添加後に上面付近に上昇する比重の軽い検体溶液に蛍光試薬を添加することにより、反応容器内における撹拌前後の蛍光色素溶液分布の違いによる、反応液中の蛍光色素溶液の濃度から、蛍光強度の強弱を用いて撹拌状態の比較を行うことを特徴とする。 According to the present invention, by utilizing the property that the fluorescence intensity is directly proportional to the distance between the fluorescent substance and the excitation light source, the fluorescent reagent is added to a light sample solution having a specific gravity that rises near the upper surface after the reagent is added. The stirring state is compared by using the intensity of the fluorescence intensity based on the concentration of the fluorescent dye solution in the reaction solution due to the difference in the distribution of the fluorescent dye solution before and after stirring.
また、本発明の撹拌性能判定方法は、試薬添加後に反応容器に保持された試薬を撹拌し、一定時間反応させた後、反応液の蛍光強度を測定する分析装置の撹拌判定方法であって、添加する試薬と撹拌判定用の蛍光試薬とを前記反応容器で撹拌した試薬の蛍光強度を測定する工程と、撹拌状態を予め設定した基準値と比較し、基準値以下の場合に撹拌不良と判断する判定工程を含むことを特徴とする。 The stirring performance determination method of the present invention is a stirring determination method for an analyzer that measures the fluorescence intensity of a reaction solution after stirring a reagent held in a reaction vessel after addition of the reagent and reacting for a predetermined time, The step of measuring the fluorescence intensity of the reagent stirred in the reaction vessel with the reagent to be added and the fluorescent reagent for stirring determination is compared with a preset reference value, and if the stirring state is below the reference value, it is determined that the stirring is poor. Including a determination step.
また、上記目的を達成するために、本発明は、当該撹拌機構と撹拌機構周囲に温度調節機構を備え、反応容器を架設する搬送機構,反応容器に試薬を添加する分注機構,反応を検出する検出器を備え、分注機構で反応容器に試薬と蛍光試薬溶液を添加後、搬送機構によって反応容器を撹拌機構に設置し、温度調節機構により所定の温度に維持した状態で前述の撹拌装置で撹拌する遺伝子検査装置内部で自動化することを特徴とする。 In order to achieve the above object, the present invention includes a stirring mechanism and a temperature control mechanism around the stirring mechanism, a transport mechanism for installing the reaction container, a dispensing mechanism for adding a reagent to the reaction container, and detecting a reaction. The above-mentioned stirring device is installed in a state in which the reaction container is installed in the stirring mechanism by the transport mechanism after the reagent and the fluorescent reagent solution are added to the reaction container by the dispensing mechanism, and is maintained at the predetermined temperature by the temperature control mechanism. It is characterized in that it is automated inside the genetic testing device that is stirred in.
本発明によれば、少なくとも試薬と撹拌判定用の蛍光試薬からなる反応容器において、撹拌後に蛍光強度を測定する工程と、撹拌状態を予め設定した基準値と比較する判定工程を備え、装置内部で自動化させることができる。また、最小限度の試薬と消耗品を装置に供するだけで撹拌機構の自動性能評価を装置内部で実施するため、撹拌機構の性能評価を極めて低コストで定量的、かつ簡便迅速に実施することができる。 According to the present invention, in a reaction container comprising at least a reagent and a fluorescent reagent for stirring determination, the method includes a step of measuring fluorescence intensity after stirring and a determination step of comparing the stirring state with a preset reference value. Can be automated. In addition, since the automatic performance evaluation of the stirring mechanism is performed inside the device only by supplying the minimum amount of reagents and consumables to the device, the performance evaluation of the stirring mechanism can be performed quantitatively, simply and quickly at an extremely low cost. it can.
1 容器設置部
2 試料容器
3 試料容器ラック
4 試薬容器
5 試薬容器ラック
6 反応容器ラック
7 反応容器
8 分注チップラック
9 分注チップ
10 定温器
11 撹拌機構
12 蛍光検出機構
13 分注機構
14 搬送機構
15 センターレール
16 サイドレール
17 アップダウンレール
18 シリンジ
19 容器保持機構
20 分析テーブル
21 制御部
22 データ処理部
23 モニター
24 記憶装置
25 データ処理装置
30 反応ディスク
31 ヒータ
32 温度センサ
33,53 保持具
34 光学ユニット
35 回転駆動体
36 ケーシング
37 発光ダイオード
38 第1レンズ
39 励起用バンドパスフィルタ
40 ハーフミラー
41 第2レンズ
42 第3レンズ
43 蛍光用バンドパスフィルタ
44 第4レンズ
45 蛍光検出器
46 励起光検出器
47 反応液
51 回転駆動体(ステッピングモータ)
52 反応容器設置部
54 容器架設台
55 蛍光検出素子
DESCRIPTION OF
52 Reaction
Claims (14)
攪拌後に測定部で測定した蛍光強度を基に攪拌不良かどうかを判断する制御部を備え、攪拌不良の場合、攪拌不良であることをオペレータへ通知することを特徴とする、分析装置。 A light source that emits excitation light, a stirring mechanism that stirs the liquid in the container, a measurement unit that measures the fluorescence intensity from the liquid in the container, a container erection unit that lays the container when measuring the fluorescence intensity, An analysis device comprising:
An analyzer comprising: a control unit that determines whether or not stirring is poor based on the fluorescence intensity measured by the measurement unit after stirring, and in the case of stirring failure, notifies the operator that stirring is defective.
容器内に蛍光色素溶液とこの蛍光色素溶液とは比重の異なる液体を投入して、攪拌前に蛍光色素溶液が位置する側から攪拌後に励起光を照射して、測定部で測定した蛍光強度が所定値以上の場合に攪拌不良であると判断することを特徴とする、分析装置。 The analyzer according to claim 1,
A fluorescent dye solution and a liquid having a specific gravity different from that of the fluorescent dye solution are placed in the container, and the excitation light is irradiated after stirring from the side where the fluorescent dye solution is located before stirring. An analyzer that determines that stirring is poor when the value is equal to or greater than a predetermined value.
容器内に蛍光色素溶液とこの蛍光色素溶液とは比重の異なる液体を投入して、攪拌前に蛍光色素溶液が位置する側とは反対側から攪拌後に励起光を照射して、測定部で測定した蛍光強度が所定値以下の場合に攪拌不良であると判断することを特徴とする、分析装置。 The analyzer according to claim 1,
Fluorescent dye solution and liquid with different specific gravity are put into the container and irradiated with excitation light from the side opposite to the side where the fluorescent dye solution is located before stirring and measured at the measurement unit An analyzer that judges that the stirring is poor when the fluorescence intensity is less than or equal to a predetermined value.
容器内に蛍光色素溶液とこの蛍光色素溶液とは比重の異なる液体を投入して、励起光を容器の側面から照射し、攪拌後に測定部で測定した蛍光強度が所定値以下の場合に攪拌不良であると判断することを特徴とする、分析装置。 The analyzer according to claim 1,
When a fluorescent dye solution and a liquid with different specific gravity are put into the container, excitation light is irradiated from the side of the container, and stirring is poor when the fluorescence intensity measured by the measurement unit after stirring is below a predetermined value. It is judged that it is, The analyzer characterized by the above-mentioned.
蛍光色素溶液を含む液体を複数の容器に投入後に、これらの容器を攪拌し、これらの容器を容器架設部に架設し、それぞれの容器の蛍光強度を求め、蛍光強度の平均値および標準偏差を求め、平均値および標準偏差から攪拌機構の攪拌性能を求め、攪拌性能をオペレータへ通知することを特徴とする、分析装置。 A light source that emits excitation light, a stirring mechanism that stirs the liquid in the container, a measurement unit that measures the fluorescence intensity from the liquid in the container, a container erection unit that lays the container when measuring the fluorescence intensity, An analysis device comprising:
After the liquid containing the fluorescent dye solution is put into a plurality of containers, these containers are stirred, these containers are installed on the container erection part, the fluorescence intensity of each container is obtained, and the average value and standard deviation of the fluorescence intensity are calculated. An analytical apparatus characterized by obtaining the stirring performance of the stirring mechanism from the average value and standard deviation, and notifying the operator of the stirring performance.
撹拌の性能を次式により求めることを特徴とする、分析装置。
Ei−3s
但し、Ei:蛍光強度データの平均、s:蛍光強度データの標準偏差 The analyzer according to claim 5, wherein
An analyzer characterized in that the stirring performance is obtained by the following equation.
Ei-3s
Where Ei: average of fluorescence intensity data, s: standard deviation of fluorescence intensity data
撹拌の性能を次式により求めることを特徴とする、分析装置。
Ei/s×100
但し、Ei:蛍光強度データの平均、s:蛍光強度データの標準偏差 The analyzer according to claim 5, wherein
An analyzer characterized in that the stirring performance is obtained by the following equation.
Ei / s × 100
Where Ei: average of fluorescence intensity data, s: standard deviation of fluorescence intensity data
少なくとも2以上の最大励起波長の異なる蛍光強度を測定することを特徴とする、分析装置。 The analyzer according to claim 5, wherein
An analyzer that measures fluorescence intensities having different maximum excitation wavelengths of at least two or more.
励起光の強度を測定する第2の測定部をさらに備え、
励起光の強度と、攪拌後の蛍光強度との比が、所定値以下の場合に攪拌不良であることをオペレータへ通知することを特徴とする、分析装置。 A light source that irradiates excitation light, a first measurement unit that measures fluorescence intensity, a stirring mechanism that stirs a liquid containing a fluorescent dye solution in a container, and a container erection unit that constructs a container when measuring fluorescence intensity And an analysis device comprising:
A second measuring unit for measuring the intensity of the excitation light;
An analyzer that notifies the operator that the stirring is poor when the ratio between the intensity of the excitation light and the fluorescence intensity after stirring is a predetermined value or less.
容器に液体を分注する分注機構を備えていることを特徴とする、分析装置。 The analyzer according to claim 1,
An analyzer comprising a dispensing mechanism for dispensing a liquid into a container.
容器を移動させる搬送機構を備えていることを特徴とする、分析装置。 The analyzer according to claim 1,
An analyzer comprising a transport mechanism for moving a container.
搬送機構は、容器を掴むアームを有することを特徴とする、分析装置。 The analyzer according to claim 11, wherein
The transport device has an arm for gripping a container.
容器架設部は、架設された容器を温度制御する、温度制御部を備えていることを特徴とする、分析装置。 The analyzer according to claim 1,
The container erection part is provided with a temperature control part that controls the temperature of the erected container.
攪拌機構は、容器を回転させる回転駆動体であることを特徴とする、分析装置。 The analyzer according to claim 1,
The analyzer is characterized in that the stirring mechanism is a rotary driving body that rotates the container.
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Cited By (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2019188004A1 (en) * | 2018-03-29 | 2019-10-03 | シスメックス株式会社 | Specimen measurement system and rack conveyance method |
WO2019188005A1 (en) * | 2018-03-29 | 2019-10-03 | シスメックス株式会社 | Specimen measurement system and rack conveyance method |
JP2020165853A (en) * | 2019-03-29 | 2020-10-08 | キヤノンメディカルシステムズ株式会社 | Automatic analyzer, cap, and method for measurement |
JP2021124455A (en) * | 2020-02-07 | 2021-08-30 | 東ソー株式会社 | Method for dissolving dry reagent |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2000275254A (en) * | 1999-03-24 | 2000-10-06 | Olympus Optical Co Ltd | Automatic analyzer |
JP2002214194A (en) * | 2001-01-19 | 2002-07-31 | Hitachi Ltd | Electrophoretic device |
JP2010078372A (en) * | 2008-09-24 | 2010-04-08 | Olympus Corp | Stirring device, stirring method and autoanalyzer |
-
2010
- 2010-07-20 JP JP2010162402A patent/JP5517807B2/en active Active
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2000275254A (en) * | 1999-03-24 | 2000-10-06 | Olympus Optical Co Ltd | Automatic analyzer |
JP2002214194A (en) * | 2001-01-19 | 2002-07-31 | Hitachi Ltd | Electrophoretic device |
JP2010078372A (en) * | 2008-09-24 | 2010-04-08 | Olympus Corp | Stirring device, stirring method and autoanalyzer |
Cited By (11)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2019188004A1 (en) * | 2018-03-29 | 2019-10-03 | シスメックス株式会社 | Specimen measurement system and rack conveyance method |
WO2019188005A1 (en) * | 2018-03-29 | 2019-10-03 | シスメックス株式会社 | Specimen measurement system and rack conveyance method |
JP2019174395A (en) * | 2018-03-29 | 2019-10-10 | シスメックス株式会社 | Specimen measurement system and rack conveyance method |
JP2019174396A (en) * | 2018-03-29 | 2019-10-10 | シスメックス株式会社 | Specimen measurement system and rack conveyance method |
JP7029334B2 (en) | 2018-03-29 | 2022-03-03 | シスメックス株式会社 | Specimen measurement system, rack transport method |
JP7117124B2 (en) | 2018-03-29 | 2022-08-12 | シスメックス株式会社 | Specimen measurement system, rack transportation method |
US11953511B2 (en) | 2018-03-29 | 2024-04-09 | Sysmex Corporation | Sample measurement system and method of transporting racks |
JP2020165853A (en) * | 2019-03-29 | 2020-10-08 | キヤノンメディカルシステムズ株式会社 | Automatic analyzer, cap, and method for measurement |
JP7451090B2 (en) | 2019-03-29 | 2024-03-18 | キヤノンメディカルシステムズ株式会社 | Automatic analyzer, cap, and measurement method |
JP2021124455A (en) * | 2020-02-07 | 2021-08-30 | 東ソー株式会社 | Method for dissolving dry reagent |
JP7432815B2 (en) | 2020-02-07 | 2024-02-19 | 東ソー株式会社 | How to dissolve dry reagents |
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Publication number | Publication date |
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