JP2011110046A - 新菌株アギタケおよびその栽培方法(AnovelPleurotuseryngiivar.ferulaestrainandmethodofproducingit) - Google Patents
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Abstract
【課題】新菌株アギタケ(Pleurotus Eryngii var. ferulae)(KACC93085P)、その子実体およびその栽培方法を提供する。
【解決手段】本発明に係る菌株は、既存のアギタケとは形および生理的特性が異なる新菌株であって、その肉質、味および香りが優れるうえ、商品性が高く、瓶栽培が可能である。
【選択図】図4
Description
第2様態として、本発明は、前記アギタケ(Pleurotus Eryngii var. ferulae)(寄託番号:KACC93085P)菌株から形成されたアギタケ子実体を提供する。
(1)単胞子の分離
本発明のために、農業会社法人(株)トルアチェ所有の菌株を使用し、落下法によってアギタケの傘をペトリ皿に載せ、24時間後に傘を除去し、しかる後に、ペトリ皿の上に落ちたキノコの胞子を滅菌水によって適正濃度で希釈してジャガイモ寒天培地に塗抹する。25℃で10日間培養した後、芽出した1次菌糸を楊枝によって分離する。それぞれの1次菌糸はさらにジャガイモ寒天培地に接種する。接種されたジャガイモ寒天培地は、25℃で14日間培養した後、それぞれの菌糸を一部分離して顕微鏡を通してクランプの有無を確認し、クランプが見えない菌糸のみを10%グリセロール溶液に入れて冷蔵保管しながら試験に使用した。
純粋分離されて冷蔵保管中にあるそれぞれのアギタケの単胞子(一核)菌糸をジャガイモ寒天培地に接種し、25℃で14日間培養した後、生育が良く且つ菌糸体量が多いものだけを選び出し、交配育種に使用した。選び出されたそれぞれの一核菌糸体、すなわちジャガイモ寒天培地で育った菌糸体を1cm円形のサイズに切って単胞子(一核)菌糸と単胞子(一核)菌糸をそれぞれ1つずつ新しいジャガイモ寒天培地に3cmの間隔で接種する。接種されたジャガイモ寒天培地を25℃の恒温器で21〜28日間培養した後、菌糸を分離して顕微鏡を通して観察することにより、クランプの形成された菌株を交配株として確認した後、クランプ形成菌株を選び出す。
鋸屑:米糠を8:2の割合で混合して水分を65%に調整し、850ccの茸栽培用瓶に580gずつ入れた後、2cmの棒で中央、上部および底部を穿孔して121℃で60分間滅菌を行った。滅菌の後、20℃に冷却した後、前記選び出された菌株を接種し、24℃の暗黒状態で30日間培養した。培養完了の後、菌掻き作業を行った後、14〜18℃、湿度80〜95%、照度100〜200luxで発茸および生育などの栽培試験を行った。
前記栽培試験で生育した子実体の傘の形、傘の色択、柄の太さ、柄の長さなどを調べることにより、最も優れたもののみを選び出す。この際、培養および栽培日数が短く、数量が多く、子実体の傘が雨傘形であり、肉質があまり堅くなく緻密なものを選び出す。
傘は、大きさが15〜100mm、できれば20〜50mmが好ましい。初めは半球形で、縁が内側に曲がっており、成熟すると半々球形、中高扁平形または扁平になる(。好ましくは)が半球形が好ましい。表面は平滑で、唐皮模様の染みがある。幼茸のときには褐灰色(5D2、brownish gray、Methuen Handbook of Color)を呈し、成熟すると灰黄色(5B3、grayish orange)を呈する。湿ったときには吸湿性であるが、乾燥すると乾変色現象が起こる。組織は柔らかくて弾力性のある肉質形であり、乳白色である。味は甘く、香りはサトウキビの香りに似ている。特に、噛むときにコリコリとした感触が非常に良い。
1)寒天培地上における特徴:
MCM寒天培地を用いて25℃で菌糸生長形態と菌叢を観察した。寒天培地のpHは6.0±0.2であり、90×15mmのペトリ皿を使用した。その結果、恒温器で12日間培養したMCM寒天培地における菌叢の色択は表面および底部共に白色を呈し、形は表面に気中菌糸が形成される浮上型であり、初期、中期培養の菌叢ではすべて同心円形であり、のちに直線形となる。
ジャガイモ寒天培地上で育った菌糸体を直径10mmのサイズに切った後、MCM寒天培地の正中央に接種し、温度別に培養した後、12日後に生長した菌糸体の直径を測定したところ、最適の温度は27℃付近であった。
菌糸生長に適した最適酸度を調べるために、グルコース−ペプトン−イーストエクストラクト液体培地25mLをpH4〜7にそれぞれ調節した後、25℃で12日間静置培養し、しかる後に、乾燥菌糸体の重量を測定したところ、菌糸生育最適酸度はpH5.5付近であった。
(1)ITS地域の塩基配列の決定
培養体からビードビーティング(bead beating)方法を用いてDNAを抽出し、内部転写されるITS(Internal transcribed spacer)をPCR(polymerase chain reaction)増幅するために、ITS1(TCCGTAGGTGAACCTGCGG;配列番号1)/ITS4(TCCTCCGCTTATTGATATGC;配列番号2)のプライマーセットをそれぞれ用いて増幅した後、精製によって(株)Macrogenにシーケンシングを依頼して塩基配列を決定した(配列番号3)。
塩基配列が決定された2つの遺伝子部分を修正して遺伝子銀行のBLASTサーチによって最も類似した菌株の塩基配列を得た後、さらに正確な遺伝的分析を試みた。
1.培地調製
培地材料は、鋸屑:米糠=8:2(容積比、40〜50g/850cc瓶が標準)で混合して使用した。攪拌混合することにより、最終培地含水率が68〜70%となるように調整した。
培地の充填量は850ccの空き瓶に480〜520g(内容量)となるように充填した。
3.殺菌
高圧殺菌は、培地内の温度が120℃に達してから60分間(有効殺菌時間)行い、殺菌釜の温度を標準とする場合には90分間(850ccの瓶)行う。
清潔な環境の下で培地温度が20℃以下となるまで冷却した。
5.接種
種菌の接種量は1瓶当り15cc程度を標準として接種した。
温度は18℃で25日間管理し、これに続いて23℃で8〜10日間培養熟成管理した。湿度は、前期培養は60〜70%、後期培養は70〜80%で管理し、二酸化炭素濃度は、3000ppm以下で管理した。照度は暗黒培養で管理し、培養期間は25〜30日間である。
(芽出し)出芽数を抑える目的で5〜15mm菌掻きを施した。
温度は14〜15℃で管理し、前期発茸は90〜95%の湿度で3〜5日間、後期発茸は70〜80%の湿度で3〜5日間管理した。二酸化炭素濃度は1000ppm以下で管理し、照度は昼にのみ電灯によって管理した。5〜8日間、逆立ち状態で管理した。後期発茸で1cm程度の幼茸の原基が形成されると、直ちに逆立ち状態から正立状態に変えて生育管理をした。
栽培瓶の入口の表面に形成された幼茸の大きさを同調化するために、温度は11〜12℃で管理して14℃以上には上がらないようにした。最初の3日間を11℃で管理した。湿度は70〜95%で管理して乾/湿の湿度交差を大きくした。(芽出し確認の)出芽を確認後、正立状態に戻して5〜8日間管理した。正立状態に戻った直後には、生育初期に低温管理によって除湿による湿度条件に注意して管理する。
茸の傘が丸やかな半球形の形状が残っている状態で菌掻き後15〜18日目に収穫した。
Claims (6)
- 新菌株アギタケ(Pleurotus eryngii var. ferulae)(寄託番号:KACC93085P)。
- 請求項1の菌株から形成されたアギタケ子実体。
- 前記子実体の傘の表面が唐皮模様の染みを持つことを特徴とする、請求項2に記載のアギタケ子実体。
- 培地製造段階、培地殺菌段階、種菌接種段階、培養段階、菌掻き段階、発茸段階および茸生育段階を含む、アギタケ栽培方法。
- 前記茸生育段階の生育適正温度は11〜14℃に維持することを特徴とする、請求項3に記載のアギタケ栽培方法。
- 前記子実体の組織が、長さ方向の繊維質で構成されていて細かな筋に分けられることを特徴とする、請求項2に記載のアギタケ子実体。
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