JP2011081211A - Microscope system - Google Patents

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Tetsuya Shirota
哲也 城田
Takashi Yoneyama
貴 米山
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Olympus Corp
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Abstract

<P>PROBLEM TO BE SOLVED: To provide a microscope system capable of improving focusing accuracy and also accelerating processing speed of acquiring an image of an observation body. <P>SOLUTION: The microscope system includes: an automatic focusing control means 21 adjusting a focusing position of an objective lens 12, by using an image picked up by a second imaging means 20 that images an area on this side of an area imaged by a first imaging means 15, in such an area at an imaging position of the first imaging means; and a conveyance and focusing position adjusting timing control means 23 controlling, according to a distance between a divided area in the observation body imaged by the first imaging means and a divided area in the observation body imaged by the second imaging means and moving speed of a placing means 11 in a horizontal direction, so that timing to convey the divided area in the observation body imaged by the second imaging means to the imaging position of the first imaging means may be substantially the same as timing to position an image forming position of the image in the divided area in the observation body imaged by the second imaging means on an imaging surface of the first imaging means. <P>COPYRIGHT: (C)2011,JPO&INPIT

Description

本発明は、観察体の位置を移動させながら、一つの観察体に対し複数領域に分割した顕微鏡画像を撮像し、撮像した個々の顕微鏡画像を合成することで、高解像度及び広画角な画像を形成する顕微鏡システムに関する。   The present invention captures a microscope image divided into a plurality of regions for one observation body while moving the position of the observation body, and combines the captured individual microscope images to obtain a high-resolution and wide-angle image. The present invention relates to a microscope system that forms

例えば、細胞や組織診といった病理診断においては、診断箇所の見落としを防止するために観察体の全体像を把握したいという要請がある。また、情報処理技術の発達により、このような病理診断においても画像の電子情報化が促進されており、ビデオカメラ等を介して取り組む顕微鏡観察像についても旧来の銀塩フィルム並の高い解像度を得たいという要請がある。   For example, in pathological diagnosis such as cell and histological diagnosis, there is a demand for grasping the entire image of the observation body in order to prevent oversight of the diagnosis part. In addition, the development of information processing technology has promoted electronic computerization of images even in such pathological diagnosis, and the same high resolution as conventional silver halide films can be obtained for microscopic observation images that are tackled through a video camera or the like. There is a request to want.

これらの要望を実現するために、予め観察体の撮像対象領域を小区画に分割し、分割した夫々の小区画の領域を高解像度に撮像し、得られた小区画の領域毎の顕微鏡画像を繋ぎ合わせることにより、観察体の画像を再構築するいわゆるバーチャル顕微鏡システムがある。このような顕微鏡システムを用いれば、実際に観察体が存在しない環境でも観察体の顕微鏡観察を行うことができる。   In order to realize these demands, the imaging target area of the observation object is divided into small sections in advance, each divided small section area is imaged with high resolution, and the obtained microscopic image for each small section area is obtained. There is a so-called virtual microscope system that reconstructs an image of an observation object by connecting them together. By using such a microscope system, the observation object can be observed with a microscope even in an environment where the observation object does not actually exist.

ところで、この種の顕微鏡システムにおいて、撮像対象領域全体に焦点が合った鮮明な画像を得るためには、例えば、画素が1次元配列されたライン状の撮像素子を撮像手段として用いるとともに、撮像対象領域をライン状の小区画の領域に分割し、分割したライン状の領域毎に撮像位置に搬送して、焦点位置を合わせる必要がある。そこで、近年、画素が1次元配列された撮像素子を用いた顕微鏡システムが提案されている。   By the way, in this type of microscope system, in order to obtain a clear image focused on the entire imaging target region, for example, a linear imaging element in which pixels are arranged one-dimensionally is used as an imaging unit, and an imaging target is used. It is necessary to divide the area into line-shaped sub-areas, and transport the divided line-shaped areas to the imaging position to adjust the focal position. Therefore, in recent years, a microscope system using an image sensor in which pixels are arranged one-dimensionally has been proposed.

しかし、画素が1次元配列された撮像素子を、撮像対象とするライン状の小区画の領域毎に撮像位置に搬送し、搬送を停止後、焦点位置を合わせるのでは、処理が煩雑化し時間がかかる。   However, if the imaging device in which the pixels are arranged one-dimensionally is transported to the imaging position for each area of the line-shaped small section to be imaged, and the transportation is stopped, then the focus position is adjusted. Take it.

しかるに、観察体としての試料を撮像手段及び搬送手段を介して走査中に焦点位置を自動的に調整するようにした顕微鏡システムが例えば、次の特許文献1,2に提案されている。   However, for example, the following Patent Documents 1 and 2 propose a microscope system in which a focal position is automatically adjusted during scanning of a sample as an observation body via an imaging unit and a conveyance unit.

特表2007−525689号公報Special Table 2007-525689 特開2006−189510号公報JP 2006-189510 A

特許文献1に記載の顕微鏡システムは、ステージが水平方向に移動し、対物レンズが高さ方向に移動している間、ライン状のスキャンカメラが間断なく撮像して、1ライン分の撮像対象領域に対し複数の高さ位置の画像データを取得し、取得した複数の画像データ中でコントラスト値が最大となる高さ位置を最適の焦点位置として対物レンズを調整するように構成されている。   In the microscope system described in Patent Document 1, while the stage moves in the horizontal direction and the objective lens moves in the height direction, the line-shaped scan camera captures images without interruption, and an imaging target area for one line. On the other hand, image data at a plurality of height positions is acquired, and the objective lens is adjusted with the height position at which the contrast value is maximized among the plurality of acquired image data as the optimum focus position.

また、特許文献2に記載の顕微鏡システムは、ラインセンサが1ライン分の撮像対象領域が撮像位置に位置するように、ステージをX方向に移動させた後、ラインセンサをZ方向に移動させながら、複数個のライン状の画像を撮像し、それら複数個のライン状の画像を用いて合焦点を計算し、計算した合焦点と移動前の合焦点との比較を介して合焦位置を調整するように構成されている。   In the microscope system described in Patent Document 2, the line sensor is moved in the X direction so that the imaging target region for one line is located at the imaging position, and then the line sensor is moved in the Z direction. Taking a plurality of line-shaped images, calculating the focal point using the plurality of line-shaped images, and adjusting the focal point position by comparing the calculated focal point with the focal point before moving. Is configured to do.

しかし、特許文献1に記載の顕微鏡システムでは、最適な合焦位置を検出するために、1ライン分の撮像対象領域を撮像位置に移動させた状態において、当該撮像対象領域に対して対物レンズが最適な焦点位置に位置しない状態の画像を対物レンズの移動量に応じて複数撮像することになるので、その分、合焦位置の調整時間が遅くなる。   However, in the microscope system described in Patent Document 1, in order to detect an optimum in-focus position, the objective lens is moved with respect to the imaging target area in a state where the imaging target area for one line is moved to the imaging position. Since a plurality of images that are not positioned at the optimum focal position are picked up according to the amount of movement of the objective lens, the adjustment time of the in-focus position is delayed accordingly.

また、特許文献2に記載の顕微鏡システムも、1ライン分の撮像対象領域を撮像位置に移動させた状態において、当該撮像対象領域に対してZ方向に移動しながら撮像した複数個のライン状の画像を用いて合焦点を計算し、計算した合焦点と移動前の合焦点との比較を介して合焦位置を調整するので、その分、合焦位置の調整時間が遅くなる。   Further, the microscope system described in Patent Document 2 also has a plurality of line-shaped images captured while moving in the Z direction with respect to the imaging target area in a state where the imaging target area for one line is moved to the imaging position. Since the in-focus position is calculated using the image and the in-focus position is adjusted through comparison between the calculated in-focus position and the in-focus position before the movement, the adjustment time of the in-focus position is correspondingly delayed.

しかも、特許文献1,2のいずれの顕微鏡システムも、1ライン分の撮像対象領域を撮像位置に移動させた後に、当該撮像対象領域に対して焦点位置の調整を行うようにしているため、搬送手段による搬送を停止させずに合焦動作を行ってはいるものの、当該撮像対象となっているライン状の領域を撮像位置に搬送後に、合焦処理の調整時間分、画像の取得処理が遅くなってしまう。   In addition, in any of the microscope systems disclosed in Patent Documents 1 and 2, since the imaging target area for one line is moved to the imaging position, the focal position is adjusted with respect to the imaging target area. Although the focusing operation is performed without stopping the conveyance by the means, the image acquisition process is delayed by the adjustment time of the focusing process after the line-shaped area to be imaged is conveyed to the imaging position. turn into.

本発明は、このような従来の問題点に鑑みてなされたものであり、合焦精度を向上させ、且つ、観察体の画像の取得処理の速度を向上させることが可能な顕微鏡システムを提供することを目的としている。   The present invention has been made in view of such conventional problems, and provides a microscope system capable of improving the focusing accuracy and improving the speed of the process of acquiring the image of the observation body. The purpose is that.

上記目的を達成するため、本発明による顕微鏡システムは、観察体を載置する載置手段と、前記載置手段に載置された観察体と対峙する対物レンズと、前記対物レンズを経由した観察体からの光を観察体の像として結像する結像光学系と、観察体の像が分割領域ごとに撮像位置に位置するように、前記載置手段を水平方向に駆動する水平方向駆動手段と、撮像位置に位置する観察体における分割領域の像を撮像する第一の撮像手段と、前記第一の撮像手段により撮像された複数の画像を合成して観察体の拡大画像を作成する画像処理手段とを有するバーチャル顕微鏡システムであって、前記載置手段と前記対物レンズのうちの少なくとも一方を垂直方向に駆動する垂直方向駆動手段と、前記結像光学系を経由した光を、前記第一の撮像手段に向かう第一の光路と、該第一の撮像手段とは異なる方向に向かう第二の光路とに分岐する光路分岐手段と、前記第二の光路を経由した所定の位置に配置され、前記第一の撮像手段が撮像する時点において該第一の撮像手段が撮像する分割領域よりも前記水平方向駆動手段による駆動方向の手前に位置する分割領域の像を、撮像する第二の撮像手段と、前記第二の撮像手段が撮像した観察体における分割領域の画像を用いて、当該分割領域における観察体の画像の合焦度を検出し、検出した合焦度に応じて、観察体における当該分割領域の像の結像位置を前記第一の撮像手段の撮像面に位置させるために必要な前記載置手段と前記対物レンズとの垂直方向の相対位置を算出するとともに、該算出した相対位置に該載置手段及び該対物レンズが位置するように垂直方向駆動手段を作動させて、当該分割領域についての該載置手段及び該対物レンズの合焦位置を調整する自動合焦制御手段と、前記第一の撮像手段が撮像する観察体における分割領域と該第一の撮像手段が撮像する時点において前記第二の撮像手段が2つの撮像領域で撮像する観察体における分割領域との距離と、前記水平方向駆動手段を介して駆動される前記載置手段の水平方向への移動速度とに応じて、前記第二の撮像手段の2つの撮像領域で撮像された観察体における分割領域を前記水平方向駆動手段を介して前記第一の撮像手段の撮像位置に搬送するタイミングと、前記第二の撮像手段の2つの撮像領域で撮像された観察体における分割領域の像の結像位置を前記自動合焦制御手段を介して前記第一の撮像手段の撮像面に位置させるタイミングとが略一致するように制御する搬送・合焦位置調整タイミング制御手段とを備えることを特徴としている。   In order to achieve the above object, a microscope system according to the present invention includes a placing means for placing an observation body, an objective lens facing the observation body placed on the placement means, and an observation via the objective lens. An imaging optical system that forms light from the body as an image of the observation body, and a horizontal driving means that drives the placement means in the horizontal direction so that the image of the observation body is positioned at the imaging position for each divided region And an image for creating an enlarged image of the observation object by combining the first image pickup means for picking up an image of the divided region in the observation object located at the image pickup position and a plurality of images picked up by the first image pickup means A virtual microscope system having a processing means, wherein a vertical direction driving means for driving at least one of the placement means and the objective lens in a vertical direction, and light passing through the imaging optical system One imaging means An optical path branching unit that branches into the first optical path and a second optical path that is directed in a direction different from the first imaging unit, and is disposed at a predetermined position via the second optical path, A second imaging unit that captures an image of a divided region positioned in front of the driving direction of the horizontal direction driving unit with respect to the divided region captured by the first imaging unit at a time point when the first imaging unit captures the image; Using the image of the divided area in the observation object imaged by the second imaging means, the degree of focus of the image of the observation object in the division area is detected, and the division area in the observation object is detected according to the detected degree of focus. And calculating the relative position in the vertical direction between the mounting means and the objective lens necessary for positioning the imaging position of the image on the imaging surface of the first imaging means, and calculating the relative position to the calculated relative position. The mounting means and the objective lens The vertical driving means is actuated so as to adjust the focusing position of the mounting means and the objective lens for the divided area, and the observation body imaged by the first imaging means When the first imaging means captures an image and the second imaging means is driven via the horizontal driving means and the distance between the second imaging means and the divided area of the observation body imaged in the two imaging areas. Depending on the moving speed of the placing means in the horizontal direction, the first imaging is performed via the horizontal direction driving means on the divided area in the observation body imaged in the two imaging areas of the second imaging means. The timing of conveying to the imaging position of the means and the imaging position of the image of the divided area in the observation body imaged in the two imaging areas of the second imaging means via the automatic focusing control means Imaging by imaging means A conveyance / focusing position adjustment timing control means for controlling so as to substantially match the timing of positioning on the surface is provided.

また、本発明による顕微鏡システムは、観察体を載置する載置手段と、前記載置手段に載置された観察体と対峙する対物レンズと、前記対物レンズを経由した観察体からの光を観察体の像として結像する結像光学系と、観察体の像が分割領域ごとに撮像位置に位置するように、前記載置手段を水平方向に駆動する水平方向駆動手段と、撮像位置に位置する観察体における分割領域の像を撮像する第一の撮像手段と、前記第一の撮像手段により撮像された複数の画像を合成して観察体の拡大画像を作成する画像処理手段を有するバーチャル顕微鏡システムであって、前記載置手段と前記対物レンズのうちの少なくとも一方を垂直方向に駆動する垂直方向駆動手段と、前記結像光学系を経由した光を、前記第一の撮像手段に向かう第一の光路と、該第一の撮像手段とは異なる方向に向かう第二の光路とに分岐する光路分岐手段と、前記第二の光路を第三の光路と第四の光路に分岐するとともに、前記結像光学系の結像点が前記第一の撮像手段の撮像面に位置するときに、該結像光学系の結像点に共役な2つの結像点が、該第三の光路と該第四の光路とに垂直に交差する所定の位置から等距離離れた前方位置及び後方位置に夫々位置するように、該第三の光路と該第四の光路とに光路長差をつけた光路差光学系と、前記第三の光路と前記第四の光路とに跨って垂直に交差する所定の位置に夫々配置され、該第三の光路と該第四の光路を夫々経由した、観察体における同一の分割領域であって、前記第一の撮像手段が撮像する時点において該第一の撮像手段が撮像する分割領域よりも前記水平方向駆動手段が駆動する水平方向に対して手前に位置する分割領域の像を、夫々撮像する2つの撮像領域を有する第二の撮像手段と、前記第二の撮像手段が2つの撮像領域で撮像した観察体における同一の分割領域の画像を用いて、当該分割領域における観察体の画像の合焦度を検出し、検出した合焦度に応じて、観察体における当該分割領域の像の結像位置を前記第一の撮像手段の撮像面に位置させるために必要な前記載置手段と前記対物レンズとの垂直方向の相対位置を算出するとともに、該算出した相対位置に該載置手段及び該対物レンズが位置するように垂直方向駆動手段を作動させて、前記第一の撮像手段の撮像位置に位置する観察体における当該分割領域についての該載置手段及び該対物レンズの合焦位置を調整する自動合焦制御手段と、前記第一の撮像手段が撮像する観察体における分割領域と該第一の撮像手段が撮像する時点において前記第二の撮像手段が撮像する観察体における分割領域との距離と、前記水平方向駆動手段を介して駆動される前記載置手段の水平方向への移動速度と、前記自動合焦制御手段による合焦位置の調整時間とに応じて、前記第二の撮像手段で撮像された観察体における分割領域を前記水平方向駆動手段を介して前記第一の撮像手段の撮像位置に搬送するタイミングと、前記第二の撮像手段で撮像された観察体における分割領域の像の結像位置を前記自動合焦制御手段を介して前記第一の撮像手段の撮像面に位置させるタイミングとが略一致するように制御する搬送・合焦位置調整タイミング制御手段とを備えることを特徴としている。   In addition, the microscope system according to the present invention includes a placing means for placing the observation body, an objective lens facing the observation body placed on the placement means, and light from the observation body via the objective lens. An imaging optical system that forms an image of the observation body, a horizontal direction drive means that drives the placement means in the horizontal direction so that the image of the observation body is located at the imaging position for each divided region, and an imaging position A first imaging unit that captures an image of a divided region in a positioned observation body, and a virtual image processing unit that combines a plurality of images captured by the first imaging unit to create an enlarged image of the observation body A microscope system, wherein a vertical direction driving unit that drives at least one of the placement unit and the objective lens in a vertical direction, and light that has passed through the imaging optical system is directed to the first imaging unit. The first optical path, An optical path branching unit that branches into a second optical path that is directed in a different direction from the first imaging unit, and the second optical path is branched into a third optical path and a fourth optical path, and the imaging optical system includes: When the imaging point is located on the imaging surface of the first imaging means, two imaging points conjugate to the imaging point of the imaging optical system are the third optical path and the fourth optical path. An optical path difference optical system in which an optical path length difference is provided between the third optical path and the fourth optical path so as to be respectively located at a front position and a rear position that are equidistant from a predetermined position that intersects perpendicularly to The same divided region in the observation body, which is arranged at a predetermined position that crosses the third optical path and the fourth optical path vertically and passes through the third optical path and the fourth optical path, respectively. And at the time when the first image pickup means picks up the water more than the divided area picked up by the first image pickup means. A second imaging unit having two imaging regions for capturing an image of a divided region positioned in front of the horizontal direction driven by the direction driving unit, and the second imaging unit capturing images in the two imaging regions. Using the image of the same divided area in the observed object, the degree of focus of the image of the observer in the divided area is detected, and the image of the image of the divided area in the observer is formed according to the detected degree of focus The relative position in the vertical direction between the above-mentioned mounting means and the objective lens necessary for positioning the position on the imaging surface of the first imaging means is calculated, and the mounting means and the mounting means are positioned at the calculated relative position. The vertical driving means is operated so that the objective lens is positioned, and the focusing means of the mounting means and the objective lens in the divided area in the observation body located at the imaging position of the first imaging means is adjusted. Automatic focusing system A distance between the control unit and the divided region in the observation body imaged by the first imaging unit and the divided region in the observation body imaged by the second imaging unit at the time when the first imaging unit images, The second image pickup means picks up an image according to the horizontal movement speed of the placement means driven through the horizontal drive means and the adjustment time of the focus position by the automatic focus control means. The divided region in the observed object is transported to the imaging position of the first imaging unit via the horizontal direction driving unit, and the image of the divided region in the observed object imaged by the second imaging unit is formed. And a conveyance / focus position adjustment timing control means for controlling the position so that the position of the position on the image pickup surface of the first image pickup means substantially matches with the automatic focus control means.

また、本発明の顕微鏡システムにおいては、前記光路分岐手段は、入射光を透過光と反射光とに分ける光学面を有し、前記第二の撮像手段が撮像対象とする観察体における分割領域が、前記第一の撮像手段が撮像する時点において該第一の撮像手段が撮像対象とする観察体における分割領域よりも前記水平方向駆動手段が駆動する水平方向に対して手前に位置するように、前記光学面が傾斜しているのが好ましい。   In the microscope system of the present invention, the optical path branching unit has an optical surface that divides incident light into transmitted light and reflected light, and the divided region in the observation object to be imaged by the second imaging unit is The first imaging means is positioned closer to the horizontal direction driven by the horizontal direction driving means than the divided area in the observation object to be imaged by the first imaging means at the time of imaging. The optical surface is preferably inclined.

また、本発明の顕微鏡システムにおいては、前記第二の撮像手段の2つの撮像領域は、前記第一の撮像手段が撮像する時点において該第一の撮像手段が撮像する観察体の像における分割領域よりも前記水平方向駆動手段が駆動する水平方向に対して手前に位置する分割領域の像を、夫々撮像するように、前記第三の光路及び前記第四の光路の夫々の中心軸からずれた位置に夫々配置されているのが好ましい。   In the microscope system of the present invention, the two imaging regions of the second imaging unit are divided regions in the image of the observation body imaged by the first imaging unit at the time when the first imaging unit images. Rather than the respective central axes of the third optical path and the fourth optical path so as to capture the images of the divided regions positioned in front of the horizontal direction driven by the horizontal direction driving means. It is preferable to arrange each at the position.

また、本発明の顕微鏡システムにおいては、前記第一の撮像手段が撮像する観察体における分割領域と該第一の撮像手段が撮像する時点において前記第二の撮像手段が撮像する観察体における分割領域との距離をD(mm)、前記自動合焦制御手段による前記第一の撮像手段の撮像位置に位置する観察体における分割領域に対する合焦位置の調整時間をTf(sec)、前記水平方向駆動手段を介して駆動される前記載置手段の水平方向への移動速度をSh(mm/sec)としたとき、次の条件式を満足するのが好ましい。
Sh(mm/sec)×Tf(sec)≦D(mm)
In the microscope system of the present invention, the divided area in the observation body imaged by the first imaging means and the divided area in the observation body imaged by the second imaging means at the time when the first imaging means takes an image. And D (mm), and the automatic focusing control means Tf (sec), the adjustment time of the focusing position with respect to the divided area in the observation body located at the imaging position of the first imaging means, and the horizontal driving When the moving speed in the horizontal direction of the placing means driven through the means is Sh (mm / sec), the following conditional expression is preferably satisfied.
Sh (mm / sec) × Tf (sec) ≦ D (mm)

また、本発明の顕微鏡システムにおいては、前記自動合焦調整手段による前記載置手段及び前記対物レンズの垂直方向への移動量の演算時間をTv(sec)、該自動合焦調整手段により調整した前記垂直方向駆動手段を介して駆動する前記載置手段及び前記対物レンズの垂直方向の移動速度をSv(mm/sec)、前記水平方向駆動手段を介して駆動される前記載置手段の水平方向への移動速度をSh(mm/sec)、前記第一の撮像手段が撮像する観察体における分割領域と該第一の撮像手段が撮像する時点において前記第二の撮像手段が撮像する観察体における分割領域との距離をD(mm)、前記載置手段及び前記対物レンズの垂直方向への移動量D2(mm)としたとき、次の条件式を満足するのが好ましい。
(Tv(sec)+D2(mm)/Sv(mm/sec))≦D(mm)/Sh(mm/sec)
In the microscope system of the present invention, the calculation time of the moving amount in the vertical direction of the placement unit and the objective lens by the automatic focusing adjustment unit is adjusted by Tv (sec) by the automatic focusing adjustment unit. Sv (mm / sec) is a moving speed in the vertical direction of the mounting unit and the objective lens that is driven through the vertical driving unit, and the horizontal direction of the mounting unit that is driven through the horizontal driving unit. Sh (mm / sec), the divided area in the observation object imaged by the first imaging means, and the observation object imaged by the second imaging means at the time of imaging by the first imaging means When the distance from the divided region is D (mm) and the moving amount D2 (mm) in the vertical direction of the placing means and the objective lens is preferably satisfied by the following conditional expression.
(Tv (sec) + D2 (mm) / Sv (mm / sec)) ≦ D (mm) / Sh (mm / sec)

また、本発明の顕微鏡システムにおいては、さらに、前記第一の撮像手段での露光量に応じて、前記水平方向駆動手段を介して駆動する前記載置手段の水平方向への移動速度を調整する水平方向移動速度調整手段を有するのが好ましい。   Further, in the microscope system of the present invention, the moving speed in the horizontal direction of the placement unit driven through the horizontal direction driving unit is further adjusted according to the exposure amount of the first imaging unit. It is preferable to have a horizontal direction moving speed adjusting means.

また、本発明の顕微鏡システムにおいては、前記第一の撮像手段が、ラインセンサカメラであるのが好ましい。   In the microscope system of the present invention, it is preferable that the first imaging unit is a line sensor camera.

また、本発明の顕微鏡システムにおいては、前記第一の撮像手段が、TDIカメラであるのが好ましい。   In the microscope system of the present invention, it is preferable that the first imaging unit is a TDI camera.

また、本発明の顕微鏡システムにおいては、前記垂直方向駆動手段が、ピエゾ素子であるのが好ましい。   In the microscope system of the present invention, it is preferable that the vertical driving means is a piezo element.

本発明によれば、合焦精度を向上させ、且つ、観察体の画像の取得処理の速度を向上させることが可能な顕微鏡システムが得られる。   ADVANTAGE OF THE INVENTION According to this invention, the microscope system which can improve a focusing precision and can improve the speed of the acquisition process of the image of an observation body is obtained.

本発明の実施例1にかかる顕微鏡システムの全体の概略構成を示す説明図である。It is explanatory drawing which shows schematic structure of the whole microscope system concerning Example 1 of this invention. 実施例1の顕微鏡システムにおける光路分岐手段18、光路差光学系19、第二の撮像手段20a,20bの一配置構成例を示す説明図である。It is explanatory drawing which shows one arrangement structural example of the optical path branching means 18, the optical path difference optical system 19, and the 2nd imaging means 20a, 20b in the microscope system of Example 1. 実施例1の顕微鏡システムにおいて、撮像対象範囲内を走査する第一の撮像手段15による一回の撮像領域と走査方向の一例を示す説明図である。In the microscope system of Example 1, it is explanatory drawing which shows an example of one imaging area and the scanning direction by the 1st imaging means 15 which scans the inside of an imaging object range. 実施例1の顕微鏡システムの第一の撮像手段15と第二の撮像手段20の2つの撮像領域20a,20bとにおける、同一時点で撮像対象とする分割領域の違いを概念的に示す図3の部分拡大説明図であり、(a)は時刻t1における第一の撮像手段15、第二の撮像手段20の2つの撮像領域20a,20bの夫々が撮像対象とする分割領域を示す図、(b)は時刻t2における第一の撮像手段15、第二の撮像手段20の2つの撮像領域20a,20bの夫々が撮像対象とする分割領域を示す図である。FIG. 3 conceptually shows the difference between the divided areas to be imaged at the same time point in the two imaging areas 20a and 20b of the first imaging means 15 and the second imaging means 20 of the microscope system of the first embodiment. It is a partial enlarged explanatory view, (a) is a diagram showing a divided area to be imaged by each of the two imaging areas 20a, 20b of the first imaging means 15 and the second imaging means 20 at time t1, (b) ) Is a diagram showing a divided area to be imaged by each of the two imaging areas 20a and 20b of the first imaging means 15 and the second imaging means 20 at time t2. 実施例1の顕微鏡システムにおける観察体の分割領域の像を撮像する第二の撮像手段20の2つの撮像領域20a,20bでの前ピント位置と後ピント位置のコントラスト値の特性を夫々示すグラフである。FIG. 6 is a graph showing the contrast value characteristics of the front focus position and the rear focus position in the two imaging regions 20a and 20b of the second imaging unit 20 that captures an image of the divided region of the observation object in the microscope system of Example 1. FIG. is there. 図5に示す後ピント位置のコントラスト値から前ピント位置のコントラスト値の差分特性を示すグラフである。6 is a graph showing a difference characteristic between a contrast value at a rear focus position and a contrast value at a front focus position shown in FIG. 5. 図6に示すコントラスト値の差分特性を部分的に拡大して示す説明図である。It is explanatory drawing which expands and shows partially the difference characteristic of the contrast value shown in FIG. 実施例1の顕微鏡システムにおける第一の撮像手段15が撮像する観察体における分割領域と第一の撮像手段15が撮像する時点において第二の撮像手段20が2つの撮像領域20a,20bで撮像する観察体における分割領域との距離を概念的に示す説明図である。In the microscope system according to the first embodiment, the second imaging unit 20 captures images in the two imaging regions 20a and 20b at the time when the first imaging unit 15 captures the divided region in the observation body that the first imaging unit 15 captures. It is explanatory drawing which shows notionally the distance with the division area in an observation body. 実施例1の顕微鏡システムにおける観察体の撮像処理手順を示すフローチャートである。6 is a flowchart illustrating an imaging process procedure of an observation object in the microscope system according to the first embodiment. 実施例1の顕微鏡システムにおける光路分岐手段18、光路差光学系19、第二の撮像手段20の2つの撮像領域20a,20bの他の配置構成例を示す説明図である。6 is an explanatory diagram illustrating another arrangement configuration example of two imaging regions 20a and 20b of the optical path branching unit 18, the optical path difference optical system 19, and the second imaging unit 20 in the microscope system of Embodiment 1. FIG.

実施例1
図1は本発明の実施例1にかかる顕微鏡システムの全体の概略構成を示す説明図である。
実施例1の顕微鏡システムは、載置手段11と、対物レンズ12と、結像光学系13と、水平方向駆動手段14と、第一の撮像手段15と、画像処理手段16と、垂直方向駆動手段17と、光路分岐手段18と、光路差光学系19と、第二の撮像手段20と、自動合焦制御手段21と、合焦位置情報記憶手段22と、搬送・合焦位置調整タイミング制御手段23を備えている。図1中、1は顕微鏡本体、2はパーソナルコンピュータの中央演算処理装置を備えて構成された顕微鏡本体と接続するホストシステムである。
Example 1
FIG. 1 is an explanatory diagram showing an overall schematic configuration of a microscope system according to Embodiment 1 of the present invention.
The microscope system according to the first embodiment includes a mounting unit 11, an objective lens 12, an imaging optical system 13, a horizontal driving unit 14, a first imaging unit 15, an image processing unit 16, and a vertical driving. Means 17, optical path branching means 18, optical path difference optical system 19, second imaging means 20, automatic focusing control means 21, focusing position information storage means 22, and conveyance / focusing position adjustment timing control Means 23 are provided. In FIG. 1, 1 is a microscope main body, and 2 is a host system that is connected to a microscope main body configured to include a central processing unit of a personal computer.

載置手段11は、スライドガラス標本等の観察体50を載置することが可能な面を有し、水平方向駆動手段14の駆動により水平方向(XY方向)に移動可能なステージで構成されている。
対物レンズ12は、載置手段11に載置された観察体50と対峙するようにして、顕微鏡本体1に対して垂直方向(Z方向)に移動可能なステージ1aに取り付けられている。また、対物レンズ12における鏡筒部のステージ1a側は、ピエゾ素子を備えた、ピエゾ素子部17b1として構成されている。
結像光学系13は、対物レンズ12を経由した観察体50からの光を観察体の像として結像する。
The placement means 11 has a surface on which an observation body 50 such as a slide glass specimen can be placed, and is configured by a stage that can move in the horizontal direction (XY direction) by driving of the horizontal direction drive means 14. Yes.
The objective lens 12 is attached to a stage 1 a that can move in the vertical direction (Z direction) with respect to the microscope main body 1 so as to face the observation body 50 placed on the placement means 11. Further, the stage 1a side of the lens barrel portion in the objective lens 12 is configured as a piezo element portion 17b1 including a piezo element.
The imaging optical system 13 forms the light from the observation body 50 via the objective lens 12 as an image of the observation body.

水平方向駆動手段14は、ステッピングモータ14aと、XY方向駆動制御手段14bとで構成されている。ステッピングモータ14aは、その回転により、載置手段11を水平方向(XY方向)に駆動する。XY方向駆動制御手段14bは、観察体50の像が分割領域ごとに撮像位置に位置するように、ステッピングモータ14aの駆動量及び駆動方向を制御する。また、XY方向駆動制御手段14bは、後述する水平方向移動速度調整手段24からのステッピングモータ14aの駆動速度の指示に基づき、ステッピングモータ14aの駆動速度も制御する。
第一の撮像手段15は、ラインセンサカメラで構成され、撮像位置に位置する観察体50におけるライン状の分割領域の像を撮像する。図1においては、ラインセンサは、紙面に対して垂直な方向(Y方向)に荷電結合素子が直線状に配列されている。なお、第一の撮像手段15は、TDIカメラで構成してもよい。
画像処理手段16は、ホストシステム2の内部に設けられ、第一の撮像手段15により撮像された複数の画像を貼り合わせて観察体の拡大画像を作成する。
The horizontal direction drive unit 14 includes a stepping motor 14a and an XY direction drive control unit 14b. The stepping motor 14a drives the mounting means 11 in the horizontal direction (XY direction) by its rotation. The XY direction drive control means 14b controls the drive amount and drive direction of the stepping motor 14a so that the image of the observation body 50 is positioned at the imaging position for each divided region. The XY direction drive control means 14b also controls the driving speed of the stepping motor 14a based on an instruction of the driving speed of the stepping motor 14a from the horizontal direction moving speed adjusting means 24 described later.
The first image pickup means 15 is composed of a line sensor camera and picks up an image of a line-shaped divided region in the observation body 50 located at the image pickup position. In FIG. 1, in the line sensor, charge coupled devices are linearly arranged in a direction perpendicular to the paper surface (Y direction). The first imaging unit 15 may be configured with a TDI camera.
The image processing unit 16 is provided in the host system 2 and creates an enlarged image of the observation body by pasting together a plurality of images captured by the first imaging unit 15.

垂直方向駆動手段17は、ステッピングモータ17a1とZ方向駆動制御部17a2とで構成された垂直方向粗動手段17aと、ピエゾ素子部17b1とピエゾ素子駆動制御部17b2とで構成された垂直方向微動手段17bを有している。
ステッピングモータ17a1は、その回転により、対物レンズ12を取り付けたステージ1aを垂直方向(Z方向)に駆動する。Z方向駆動制御部17a2は、対物レンズ12が、おおよその合焦位置に位置するように、ステッピングモータ17a1の駆動量及び駆動方向を制御する。
ピエゾ素子部17b1は、電圧を与えることにより、対物レンズ12を垂直方向(Z方向)に駆動する。ピエゾ駆動制御部17b2は、対物レンズ12が正確な合焦位置に位置するように、ピエゾ素子部17b1の駆動量及び駆動方向を制御する。
なお、図1の例では、垂直方向駆動手段17は、対物レンズ12を垂直方向に駆動するように構成されているが、垂直方向駆動手段17は、載置手段11と対物レンズ12のうちの少なくとも一方を垂直方向(Z方向)に駆動する構成であればよく、例えば、ステッピングモータ17a1やピエゾ素子部17b1を、載置手段11を垂直方向(Z方向)に駆動するように設けた構成でもよい。あるいは、垂直方向駆動手段17は、載置手段11と対物レンズ12の両方を垂直方向(Z方向)に駆動ように、ピングモータ17a1やピエゾ素子部17b1を設けて構成してもよい。
なお、図1の例では、垂直方向駆動手段17は、駆動部材として、ステッピングモータとピエゾ素子とを用いて構成されているが、ピエゾ素子のみを用いて構成してもよい。
The vertical direction drive means 17 includes a vertical direction coarse movement means 17a constituted by a stepping motor 17a1 and a Z direction drive control section 17a2, and a vertical direction fine movement means constituted by a piezo element section 17b1 and a piezo element drive control section 17b2. 17b.
The stepping motor 17a1 drives the stage 1a to which the objective lens 12 is attached in the vertical direction (Z direction) by its rotation. The Z direction drive control unit 17a2 controls the drive amount and drive direction of the stepping motor 17a1 so that the objective lens 12 is positioned at an approximate focus position.
The piezo element unit 17b1 drives the objective lens 12 in the vertical direction (Z direction) by applying a voltage. The piezo drive control unit 17b2 controls the drive amount and drive direction of the piezo element unit 17b1 so that the objective lens 12 is positioned at an accurate in-focus position.
In the example of FIG. 1, the vertical direction driving unit 17 is configured to drive the objective lens 12 in the vertical direction, but the vertical direction driving unit 17 includes the placement unit 11 and the objective lens 12. Any structure may be used as long as at least one of them is driven in the vertical direction (Z direction). For example, the stepping motor 17a1 and the piezo element unit 17b1 may be configured to drive the mounting unit 11 in the vertical direction (Z direction). Good. Alternatively, the vertical driving unit 17 may be configured by providing a ping motor 17a1 and a piezo element unit 17b1 so as to drive both the mounting unit 11 and the objective lens 12 in the vertical direction (Z direction).
In the example of FIG. 1, the vertical driving unit 17 is configured using a stepping motor and a piezoelectric element as driving members, but may be configured using only a piezoelectric element.

光路分岐手段18は、例えば、ハーフミラーやビームスプリッタなどの入射光を透過光と反射光とに分ける光学面18aを有する光学部材で構成されている。そして、光路分岐手段18は、図2に示すように、光学面18aを介して、結像光学系13を経由した光を第一の撮像手段15に向かう第一の光路W1と、第一の撮像手段15とは異なる方向に向かう第二の光路W2とに分岐する。また、光学面18aは、第二の撮像手段20が撮像対象とする観察体50における分割領域が、第一の撮像手段15が撮像する時点において第一の撮像手段15が撮像対象とする観察体50における分割領域よりも水平方向駆動手段14が駆動する水平方向に対して手前に位置するように、傾斜角度がつけられている。図1の例では、光学面18aは、結像光学系13と第一の撮像手段15との間の光軸に対し45°からα°ずれた角度で傾斜している。   The optical path branching means 18 is composed of an optical member having an optical surface 18a that divides incident light into transmitted light and reflected light, such as a half mirror and a beam splitter. Then, as shown in FIG. 2, the optical path branching unit 18 includes a first optical path W1 that directs the light that has passed through the imaging optical system 13 to the first imaging unit 15 via the optical surface 18a, and the first optical path 18a. The light branches to a second optical path W2 that is directed in a different direction from the imaging means 15. In addition, the optical surface 18a is an observation object that the first imaging unit 15 captures when the first imaging unit 15 captures an image of the divided region in the observation body 50 that the second imaging unit 20 captures. The inclination angle is set so as to be positioned in front of the horizontal direction driven by the horizontal driving means 14 with respect to the divided area 50. In the example of FIG. 1, the optical surface 18 a is inclined at an angle shifted by α ° from 45 ° with respect to the optical axis between the imaging optical system 13 and the first imaging means 15.

光路差光学系19は、ハーフミラー19aとミラー19bを有して構成され、第二の光路W2を、第三の光路W3と第四の光路W4とに分岐する。また、図2に示すように、結像光学系13の結像点P1が第一の撮像手段15の撮像面に位置するときに、結像光学系13の結像点P1に共役な2つの結像点P2,P3が、第三の光路W3と第四の光路W4とに垂直に交差する所定の位置Mから等距離L離れた前方位置及び後方位置に夫々位置するように、第三の光路W3と第四の光路W4とに光路長差をつけている。   The optical path difference optical system 19 includes a half mirror 19a and a mirror 19b, and branches the second optical path W2 into a third optical path W3 and a fourth optical path W4. Further, as shown in FIG. 2, when the imaging point P1 of the imaging optical system 13 is positioned on the imaging surface of the first imaging means 15, two conjugate points to the imaging point P1 of the imaging optical system 13 are obtained. The third and third positions are such that the imaging points P2 and P3 are positioned at a front position and a rear position that are equidistant from the predetermined position M perpendicularly intersecting the third optical path W3 and the fourth optical path W4, respectively. An optical path length difference is given to the optical path W3 and the fourth optical path W4.

第二の撮像手段20は、ラインセンサカメラで構成されており、2つの撮像領域20a,20bを有している。なお、第二の撮像手段20は、2つのラインセンサカメラに撮像領域20a,20bを備えた構成でもよいし、あるいは、1つのラインセンサカメラに2つの撮像領域20a,20bを備えた構成でもよい。
2つの撮像領域20a、20bは、第三の光路W3と第四の光路W4とに跨って垂直に交差する所定の位置に夫々配置されている(なお、図1、図2においては、ラインセンサは、紙面に対して垂直な方向(Y方向)に荷電結合素子が直線状に配列されている)。そして、第三の光路W3と第四の光路W4を夫々経由した、観察体50における同一の分割領域であって、第一の撮像手段15が撮像する時点において第一の撮像手段15が撮像する分割領域よりも水平方向駆動手段14が駆動する水平方向(XY方向)に対して手前に位置する分割領域の像を、夫々撮像する。
The second imaging means 20 is composed of a line sensor camera, and has two imaging areas 20a and 20b. The second imaging unit 20 may have a configuration in which the imaging areas 20a and 20b are provided in two line sensor cameras, or a configuration in which the imaging area 20a and 20b is provided in one line sensor camera. .
The two imaging regions 20a and 20b are respectively arranged at predetermined positions that intersect perpendicularly across the third optical path W3 and the fourth optical path W4 (in FIG. 1 and FIG. 2, in the line sensor). (Charge coupling elements are arranged in a straight line in a direction perpendicular to the paper surface (Y direction)). And it is the same divided area in the observation body 50 which respectively passed through the 3rd optical path W3 and the 4th optical path W4, Comprising: When the 1st imaging means 15 images, the 1st imaging means 15 images Images of the divided areas positioned in front of the horizontal direction (XY direction) driven by the horizontal direction driving means 14 are taken from the divided areas, respectively.

この点について、図3及び図4を用いて詳しく説明する。
図3は実施例1の顕微鏡システムにおいて、撮像対象範囲内を走査する第一の撮像手段15による一回の撮像領域と走査方向の一例を示す説明図、図4は実施例1の顕微鏡システムの第一の撮像手段15と第二の撮像手段20の2つの撮像領域20a,20bとにおける、同一時点で撮像対象とする分割領域の違いを概念的に示す図3の部分拡大説明図であり、(a)は時刻t1における第一の撮像手段15、第二の撮像手段20の2つの撮像領域20a,20bの夫々が撮像対象とする分割領域を示す図、(b)は時刻t2における第一の撮像手段15、第二の撮像手段20の2つの撮像領域20a,20bの夫々が撮像対象とする分割領域を示す図である。
This point will be described in detail with reference to FIGS.
FIG. 3 is an explanatory diagram illustrating an example of one imaging region and a scanning direction of the first imaging unit 15 that scans within the imaging target range in the microscope system of the first embodiment, and FIG. 4 illustrates the microscope system of the first embodiment. FIG. 4 is a partially enlarged explanatory view of FIG. 3 conceptually showing a difference between divided areas to be imaged at the same time point in the two imaging areas 20a and 20b of the first imaging means 15 and the second imaging means 20. (a) is the figure which shows the divided area which each of two imaging area 20a, 20b of the 1st imaging means 15 and the 2nd imaging means 20 in time t1 makes an imaging object, (b) is the 1st in time t2. It is a figure which shows the division area which each of two imaging area 20a, 20b of the imaging means 15 of this and the 2nd imaging means 20 makes into an imaging target.

例えば、図3に示すように、観察体50における観察対象50bを含む領域(撮像対象領域)50aに対し、太字で示す矩形領域を、第一の撮像手段15、第二の撮像手段20の2つの撮像領域20a,20bが撮像対象とする分割領域とし、矢印方向に複数回に分けて走査する場合を想定する。その場合、図4(a)に示すように、第二の撮像手段20の2つの撮像領域20a,20bが、観察体50の撮像対象領域50aにおける座標(x1,y1〜yk)の領域mnを撮像対象とする分割領域とするときには、第一の撮像手段15は、撮像対象領域50aにおける座標(x1,y1〜yk)の領域mnよりも手前(図4では左側)の領域mn-1を撮像対象とする分割領域とする。また、図4(a)の状態から時間が経過して、図4(b)に示すように、第二の撮像手段20の2つの撮像領域20a,20bが、観察体50の撮像対象領域50aにおける座標(x2,y1〜yk)の領域mn+1を撮像対象とする分割領域とするときには、第一の撮像手段15は、撮像対象領域50aにおける座標(x2,y1〜yk)の領域mn+1よりも手前(図4では左側)の座標(x1,y1〜yk)の領域mnを撮像対象とする分割領域とする。 For example, as shown in FIG. 3, a rectangular area shown in bold is a 2nd area of the first imaging unit 15 and the second imaging unit 20 with respect to a region (imaging target region) 50 a including the observation target 50 b in the observation body 50. Assume that one imaging region 20a, 20b is a divided region to be imaged, and scanning is performed a plurality of times in the direction of the arrow. In this case, as shown in FIG. 4A, the two imaging regions 20a and 20b of the second imaging means 20 are regions m n of coordinates (x1, y1 to yk) in the imaging target region 50a of the observation body 50. when the divided region imaged for the first imaging unit 15, the region of the coordinates (x1, y1~yk) in the imaging target region 50a short of the region m n of (in FIG. 4 left) m n- 1 is a divided region to be imaged. In addition, as time passes from the state of FIG. 4A, the two imaging regions 20a and 20b of the second imaging means 20 become the imaging target region 50a of the observation body 50 as shown in FIG. 4B. When the area m n + 1 of the coordinates (x2, y1 to yk) in FIG. 4 is set as the divided area to be imaged, the first imaging unit 15 uses the area m of the coordinates (x2, y1 to yk) in the imaging object area 50a. A region m n having coordinates (x1, y1 to yk) before n + 1 (left side in FIG. 4) is set as a divided region to be imaged.

自動合焦制御手段21は、合焦演算部21aと、ホストシステム2に内蔵された垂直方向駆動制御部21bとで構成されている。
合焦演算部21aは、第二の撮像手段20が2つの撮像領域20a,20bで撮像した観察体50における同一の分割領域の画像を用いて、当該分割領域における観察体50の画像の合焦度を検出し、検出した合焦度に応じて、観察体50における当該分割領域の像の結像位置を第一の撮像手段15の撮像面に位置させるために必要な載置手段11と対物レンズ12との垂直方向(Z方向)の相対位置(ここでは、対物レンズ12のZ方向の座標位置)を算出する。
垂直方向駆動制御部21bは、合焦演算部21aが算出した、載置手段11と対物レンズ12との垂直方向(Z方向)の相対位置(ここでは、対物レンズ12のZ方向の座標位置)に載置手段11及び対物レンズ12が位置するように垂直方向駆動手段17を作動させて、第一の撮像手段15の撮像位置に位置する観察体50における当該分割領域についての載置手段11及び対物レンズ12の合焦位置を調整する。
The automatic focusing control unit 21 includes a focusing calculation unit 21 a and a vertical direction drive control unit 21 b built in the host system 2.
The focus calculation unit 21a uses the images of the same divided area in the observation body 50 captured by the second imaging unit 20 in the two imaging areas 20a and 20b, and focuses the image of the observation body 50 in the division area. The placement means 11 and the objective necessary for detecting the degree and positioning the image formation position of the image of the divided region on the observation body 50 on the imaging surface of the first imaging means 15 according to the detected degree of focus. A relative position in the vertical direction (Z direction) with respect to the lens 12 (here, the coordinate position of the objective lens 12 in the Z direction) is calculated.
The vertical direction drive control unit 21b calculates the relative position in the vertical direction (Z direction) between the mounting unit 11 and the objective lens 12 (here, the coordinate position of the objective lens 12 in the Z direction) calculated by the focusing calculation unit 21a. The vertical driving unit 17 is operated so that the mounting unit 11 and the objective lens 12 are positioned on the first imaging unit 15, and the mounting unit 11 and the mounting unit 11 for the divided region in the observation body 50 located at the imaging position of the first imaging unit 15. The focus position of the objective lens 12 is adjusted.

この点について、図5〜図7を用いて詳しく説明する。
図5は実施例1の顕微鏡システムにおける観察体の分割領域の像を撮像する第二の撮像手段20の2つの20a,20bでの前ピント位置と後ピント位置のコントラスト値の特性を夫々示すグラフ、図6は図5に示す後ピント位置のコントラスト値から前ピント位置のコントラスト値の差分特性を示すグラフ、図7は図6に示すコントラスト値の差分特性を部分的に拡大して示す説明図である。
図5では第二の撮像手段20の撮像領域20aで撮像された画像のコントラスト値をA、第二の撮像手段20の撮像領域20bで撮像された画像のコントラスト値をBで示してある。また、図5中、F0は合焦位置である。
図6に示すように、合焦位置F0では、これらのコントラスト値の差A−Bがゼロになる。
また、図7に示すように、合焦位置F0近傍では、合焦位置F0からのZ方向へのずれの度合いに比例して変位信号が直線状に変化する。このため、第二の撮像手段20が2つの撮像領域20a,20bで撮像した時点での載置手段11及び対物レンズ12のZ座標がわかれば、第二の撮像手段20が2つの撮像領域20a,20bで撮像対象とする分割領域に対する載置手段11及び対物レンズ12の合焦位置でのZ座標が求まることになる。
This point will be described in detail with reference to FIGS.
FIG. 5 is a graph showing the contrast value characteristics of the front focus position and the rear focus position of the two imaging units 20a and 20b of the second imaging unit 20 that captures an image of the divided region of the observation object in the microscope system of the first embodiment. FIG. 6 is a graph showing the difference characteristic between the contrast value at the rear focus position and the contrast value at the front focus position shown in FIG. 5, and FIG. 7 is an explanatory diagram partially showing the difference characteristic between the contrast values shown in FIG. It is.
In FIG. 5, A represents the contrast value of the image captured in the imaging area 20 a of the second imaging unit 20, and B represents the contrast value of the image captured in the imaging area 20 b of the second imaging unit 20. In FIG. 5, F 0 is a focus position.
As shown in FIG. 6, at the in-focus position F 0 , the difference A−B between these contrast values becomes zero.
Further, as shown in FIG. 7, the focus position F 0 vicinity displacement signal proportional to the degree of displacement in the Z direction from the focus position F 0 is changed linearly. For this reason, if the Z coordinate of the mounting means 11 and the objective lens 12 at the time when the second image pickup means 20 picks up images in the two image pickup areas 20a and 20b is known, the second image pickup means 20 has two image pickup areas 20a. 20b, the Z coordinate at the in-focus position of the mounting means 11 and the objective lens 12 for the divided area to be imaged is obtained.

自動合焦制御手段21では、まず、合焦演算部21aが、第二の撮像手段20が2つの撮像領域20a,20bで撮像した観察体50における同一の分割領域の画像から、夫々の画像のコントラスト値An,Bnを検出する。次いで、合焦演算部21aが、検出したコントラスト値An,Bnの差分An−Bnを変位信号Vnとして算出する。
次いで、合焦演算部21aは、算出したAn−Bnの差分に基づき、合焦位置F0からのZ方向へのずれ量Z_nを検出する。次いで、検出した合焦位置からのZ方向のずれ量Z_nを、現時点での対物レンズのZ座標に対して減算(前ピント位置の場合)又は加算(後ピント位置の場合)する。これにより、撮像対象とする分割領域に対する対物レンズ12の合焦位置F0でのZ座標が求まる。
例えば、図7において、変位信号VBが検出されたときには、対物レンズ12が合焦位置F0からのずれ量Z_Bずれた、後ピント位置に位置することを示している。この場合は、現在のZ座標の位置にZ_B加算したZ座標の位置が合焦位置となる。また、変位信号VAが検出されたときには、対物レンズ12が合焦位置F0からのずれ量Z_Aずれた、前ピント位置に位置することを示している。この場合は、現在のZ座標の位置にZ_A減算したZ座標の位置が合焦位置となる。
In the automatic focusing control unit 21, first, the focusing calculation unit 21a calculates each image from the images of the same divided region in the observation body 50 captured by the second imaging unit 20 in the two imaging regions 20a and 20b. Contrast values A n and B n are detected. Then, the focusing operation portion 21a, the detected contrast value A n, calculates the difference A n -B n of B n as a displacement signal V n.
Next, the focus calculation unit 21a detects a shift amount Z_n in the Z direction from the focus position F 0 based on the calculated difference of An −B n . Next, the Z-direction deviation amount Z_n from the detected focus position is subtracted (in the case of the front focus position) or added (in the case of the rear focus position) with respect to the current Z coordinate of the objective lens. As a result, the Z coordinate at the in-focus position F 0 of the objective lens 12 with respect to the divided region to be imaged is obtained.
For example, in FIG. 7, when the displacement signal V B is detected, it indicates that the objective lens 12 is positioned at the rear focus position that is shifted by the shift amount Z_B from the in-focus position F 0 . In this case, the Z coordinate position obtained by adding Z_B to the current Z coordinate position is the in-focus position. Further, when the displacement signal V A is detected, it indicates that the objective lens 12 is positioned at the front focus position that is shifted by the shift amount Z_A from the focus position F 0 . In this case, the Z coordinate position obtained by subtracting Z_A from the current Z coordinate position is the in-focus position.

次いで、自動合焦制御手段21は、垂直方向駆動制御部21bが、算出したZ座標の位置に載置手段11及び対物レンズ12が位置するように、後述する顕微鏡コントローラ30に信号を送る。そして、顕微鏡コントローラ30にZ方向駆動制御部17a2、ピエゾ素子駆動制御部17b2を作動させ、ステッピングモータ17a1、ピエゾ素子部17b1をZ軸に沿って所定方向に所定量移動させることによって、第一の撮像手段15の撮像位置に位置する観察体50における当該分割領域についての載置手段11及び対物レンズ12の合焦位置を調整する。   Subsequently, the automatic focusing control unit 21 sends a signal to the microscope controller 30 described later so that the mounting unit 11 and the objective lens 12 are positioned at the calculated Z coordinate position by the vertical drive control unit 21b. Then, the microscope controller 30 operates the Z direction drive control unit 17a2 and the piezo element drive control unit 17b2 to move the stepping motor 17a1 and the piezo element unit 17b1 by a predetermined amount in a predetermined direction along the Z axis, thereby The focus positions of the mounting means 11 and the objective lens 12 for the divided area in the observation body 50 located at the imaging position of the imaging means 15 are adjusted.

なお、図1の例では、垂直方向駆動手段17は、対物レンズ12のみを垂直方向(Z方向)に駆動するように構成されているので、合焦演算部21aは、対物レンズ12のみの垂直方向(Z方向)の座標位置を算出し、垂直方向駆動制御部21bは、合焦演算部21aが算出した座標位置に対物レンズ12が位置するように垂直方向駆動手段17を作動させるように構成されている。   In the example of FIG. 1, the vertical direction driving means 17 is configured to drive only the objective lens 12 in the vertical direction (Z direction). The coordinate position in the direction (Z direction) is calculated, and the vertical direction drive control unit 21b is configured to operate the vertical direction drive unit 17 so that the objective lens 12 is positioned at the coordinate position calculated by the focus calculation unit 21a. Has been.

合焦位置情報記録手段22は、自動合焦制御手段21を介して調整した合焦位置における載置手段11及び対物レンズ12の垂直方向(Z方向)の座標を記録する。   The in-focus position information recording unit 22 records the coordinates in the vertical direction (Z direction) of the mounting unit 11 and the objective lens 12 at the in-focus position adjusted via the automatic in-focus control unit 21.

搬送・合焦位置調整タイミング制御手段23は、第一の撮像手段15が撮像する観察体における分割領域と第一の撮像手段15が撮像する時点において第二の撮像手段20が2つの撮像領域20a,20bで撮像する観察体50における分割領域との距離と、水平方向駆動手段14を介して駆動される載置手段11の水平方向(XY方向)への移動速度と、自動合焦制御手段21による合焦位置の調整時間とに応じて、第二の撮像手段20の2つの撮像領域20a,20bで撮像された観察体50における分割領域を、水平方向駆動手段14を介した載置手段11の水平方向(XY方向)への移動により第一の撮像手段15の撮像位置に搬送するタイミングと、第二の撮像手段20の2つの撮像領域20a,20bで撮像された当該分割領域の像の結像位置を自動合焦制御手段21を介して第一の撮像手段15の撮像面に位置させるタイミングとが略一致するように制御する。   The conveyance / focus position adjustment timing control means 23 is configured such that the second imaging means 20 has two imaging areas 20a when the first imaging means 15 captures the divided areas in the observation body imaged by the first imaging means 15. , 20b, the distance from the divided area in the observation body 50, the moving speed of the mounting means 11 driven via the horizontal driving means 14 in the horizontal direction (XY direction), and the automatic focusing control means 21. Depending on the adjustment time of the in-focus position, the divided area in the observation body 50 imaged in the two imaging areas 20a and 20b of the second imaging means 20 is placed on the placing means 11 via the horizontal direction driving means 14. Of the first imaging means 15 by the movement in the horizontal direction (XY direction) of the first imaging means 15 and the divided areas imaged in the two imaging areas 20a and 20b of the second imaging means 20 Controlled so that the timing to position on the imaging surface of the first imaging unit 15 through the automatic focus control unit 21 of the imaging position of the image substantially coincides.

なお、自動合焦制御手段21による合焦位置の調整時間は、次のようにして求まる。
搬送・合焦位置調整タイミング制御手段23は、自動合焦制御手段21が算出した載置手段11及び対物レンズ12の垂直方向(Z方向)の座標と、その直前に合焦位置情報記録手段22に記録された載置手段11及び対物レンズ12の垂直方向(Z方向)の座標との相対的な位置関係から、載置手段11及び対物レンズ12の垂直方向(Z方向)への移動量を算出する。そして、算出した載置手段11及び対物レンズ12の垂直方向(Z方向)への移動量を、垂直方向駆動手段17を介して駆動する載置手段11及び対物レンズ12の垂直方向(Z方向)の移動速度で除算する。
The adjustment time of the focus position by the automatic focus control means 21 is obtained as follows.
The conveyance / focus position adjustment timing control means 23 includes the vertical position (Z direction) coordinates of the placement means 11 and the objective lens 12 calculated by the automatic focus control means 21 and the focus position information recording means 22 immediately before that. The amount of movement of the mounting means 11 and the objective lens 12 in the vertical direction (Z direction) is calculated from the relative positional relationship between the mounting means 11 and the objective lens 12 in the vertical direction (Z direction). calculate. Then, the calculated movement amount of the mounting means 11 and the objective lens 12 in the vertical direction (Z direction) is driven in the vertical direction (Z direction) of the mounting means 11 and the objective lens 12 driven via the vertical direction driving means 17. Divide by the moving speed of.

ここで、搬送・合焦位置調整タイミング制御手段23による搬送・合焦位置調整のタイミング制御について、図4及び図8を用いて詳しく説明する。
図8は実施例1の顕微鏡システムにおける第一の撮像手段15が撮像する観察体における分割領域と第一の撮像手段15が撮像する時点において第二の撮像手段20が2つの撮像領域20a,20bで撮像する観察体における分割領域との距離を概念的に示す説明図である。
例えば、図4における垂直方向(Z方向)の座標が(x2,y1〜yk)である領域mn+1を第一の撮像手段15で撮像するとき、搬送・合焦位置調整タイミング制御手段23は、搬送・合焦位置調整のタイミングを次のように制御する。
図4(a)に示す時刻t1において、第二の撮像手段20の2つの撮像領域20a,20bが撮像対象とする、水平方向(XY方向)の座標が(x1,y1〜yk)である領域mnに対し、自動合焦制御手段21が算出した載置手段11及び対物レンズ12の垂直方向(Z方向)の座標がz1であるとする。また、図4(b)に示す時刻t2において、第二の撮像手段20の2つの撮像領域20a,20bが撮像対象とする、水平方向(XY方向)の座標が(x2,y1〜yk)である領域mn+1に対し、自動合焦制御手段21が算出した載置手段11及び対物レンズ12の垂直方向(Z方向)の座標がz2であるとする。
Here, the conveyance / focus position adjustment timing control by the conveyance / focus position adjustment timing control means 23 will be described in detail with reference to FIGS.
FIG. 8 shows a divided area in the observation body imaged by the first imaging means 15 in the microscope system of the first embodiment and the second imaging means 20 at the time when the first imaging means 15 images two imaging areas 20a and 20b. It is explanatory drawing which shows notionally the distance with the division area in the observation body imaged in FIG.
For example, when the area m n + 1 whose coordinates in the vertical direction (Z direction) in FIG. 4 are (x2, y1 to yk) is imaged by the first imaging unit 15, the conveyance / focus position adjustment timing control unit 23. Controls the conveyance / focusing position adjustment timing as follows.
At time t1 shown in FIG. 4 (a), the two imaging areas 20a and 20b of the second imaging means 20 are the imaging targets, and the horizontal (XY direction) coordinates are (x1, y1 to yk). It is assumed that the coordinate in the vertical direction (Z direction) of the mounting unit 11 and the objective lens 12 calculated by the automatic focusing control unit 21 is mn with respect to mn. Further, at time t2 shown in FIG. 4B, the coordinates in the horizontal direction (XY direction), which are the imaging targets of the two imaging regions 20a and 20b of the second imaging unit 20, are (x2, y1 to yk). It is assumed that the vertical coordinate (Z direction) of the placement unit 11 and the objective lens 12 calculated by the automatic focusing control unit 21 is z2 for a certain area m n + 1 .

即ち、時刻t2において垂直方向(Z方向)の座標が(x2,y1〜yk)である領域mn+1を第一の撮像手段15で撮像する場合における載置手段11及び対物レンズ12の垂直方向(Z方向)の合焦位置はz2であるが、その直前の時刻1において座標が(x1,y1〜yk)である領域mnを第一の撮像手段15で撮像する場合には、載置手段11及び対物レンズ12の垂直方向(Z方向)の合焦位置はz1に調整されている。そこで、時刻t2において合焦位置z2に調整するために必要な載置手段11及び対物レンズ12の垂直方向への移動量は、z2−z1で求まる。 That is, when the first imaging unit 15 captures an area m n + 1 whose coordinates in the vertical direction (Z direction) are (x2, y1 to yk) at time t2, the mounting unit 11 and the objective lens 12 are perpendicular to each other. Although the focus position in the direction (Z-direction) is z2, in the case where the coordinate at time 1 of the immediately preceding (x1, y1~yk) imaging the region m n is in the first imaging unit 15, the mounting The focusing positions in the vertical direction (Z direction) of the placing means 11 and the objective lens 12 are adjusted to z1. Therefore, the amount of movement in the vertical direction of the mounting means 11 and the objective lens 12 necessary for adjusting to the in-focus position z2 at time t2 is obtained by z2-z1.

ここで、図4(b)に示す第一の撮像手段15が撮像する、観察体50における分割領域(即ち、水平方向(XY方向)の座標が(x1,y1〜yk)である領域)mnと、第一の撮像手段15が撮像する時点において第二の撮像手段20が2つの撮像領域20a,20bで撮像する、観察体50における分割領域(即ち、水平方向(XY方向)の座標が(x2,y1〜yk)である領域)mn+1との距離(|x2−x1|)がD(mm)、水平方向駆動手段14を介して駆動される載置手段11の水平方向(XY方向)への移動速度がSh(mm/sec)、載置手段11及び対物レンズ12の垂直方向(Z方向)への移動量z2−z1がD2(mm)、自動合焦調整手段21の合焦演算部21aによる載置手段11及び対物レンズ12の垂直方向(Z方向)への移動量の演算時間をTv(sec)、垂直方向駆動手段17を介して駆動する載置手段11及び対物レンズ12の垂直方向(Z方向)の移動速度をSv(mm/sec)とする。
このとき、搬送・合焦位置調整タイミング制御手段23は、載置手段11の水平方向(XY方向)への移動速度Sh(mm/sec)と載置手段11及び対物レンズ12の垂直方向(Z方向)の移動速度Sv(mm/sec)の少なくとも一方を、次の条件式(1)を満足するように調整する。
(Tv(sec)+D2(mm)/Sv(mm/sec))≦D(mm)/Sh(mm/sec) …(1)
これにより、第二の撮像手段20の2つの撮像領域20a,20bで撮像された観察体50における分割領域が、水平方向駆動手段14を介した載置手段11の水平方向(XY方向)への移動により第一の撮像手段15の撮像位置に搬送されるタイミングと、第二の撮像手段20の2つの撮像領域20a,20bで撮像された観察体50における分割領域の像の結像位置を自動合焦制御手段21を介して第一の撮像手段15の撮像面に位置させるタイミングとが略一致するように、搬送・合焦位置の調整タイミングが制御される。
Here, the divided area in the observation body 50 (that is, the area in which the coordinates in the horizontal direction (XY direction) are (x1, y1 to yk)) m, which is imaged by the first imaging means 15 shown in FIG. n, and when the first imaging unit 15 captures an image, the second imaging unit 20 captures images in the two imaging regions 20a and 20b, and the coordinates of the divided region (that is, the horizontal direction (XY direction)) in the observation body 50 are The distance (| x2-x1 |) to the region (x2, y1 to yk) m n + 1 is D (mm), and the horizontal direction of the mounting means 11 driven via the horizontal driving means 14 ( The movement speed in the XY direction) is Sh (mm / sec), the movement amount z2-z1 in the vertical direction (Z direction) of the mounting means 11 and the objective lens 12 is D2 (mm), and the automatic focusing adjustment means 21 Vertical direction of the mounting means 11 and the objective lens 12 by the focusing calculation unit 21a The calculation time of the movement amount in the (Z direction) is Tv (sec), and the moving speed in the vertical direction (Z direction) of the mounting means 11 and the objective lens 12 driven via the vertical direction driving means 17 is Sv (mm / sec).
At this time, the conveyance / focus position adjustment timing control unit 23 moves the mounting unit 11 in the horizontal direction (XY direction) Sh (mm / sec) and the mounting unit 11 and the objective lens 12 in the vertical direction (Z Direction) is adjusted so that the following conditional expression (1) is satisfied.
(Tv (sec) + D2 (mm) / Sv (mm / sec)) ≦ D (mm) / Sh (mm / sec) (1)
Thereby, the divided areas in the observation body 50 imaged in the two imaging areas 20a and 20b of the second imaging means 20 are arranged in the horizontal direction (XY direction) of the mounting means 11 via the horizontal direction driving means 14. The timing of the transfer to the imaging position of the first imaging means 15 by movement and the imaging position of the image of the divided area in the observation body 50 imaged in the two imaging areas 20a and 20b of the second imaging means 20 are automatically set. The conveyance / focus position adjustment timing is controlled so that the timing of positioning on the image pickup surface of the first image pickup means 15 substantially coincides with the focus control means 21.

なお、上記条件式(1)の左辺(Tv(sec)+D2(mm)/Sv(mm/sec))は、自動合焦調整手段21による第一の撮像手段15の撮像位置に位置する観察体50における分割領域に対する合焦位置の調整時間に相当する。ここで、この調整時間をTf(sec)とするとき、搬送・合焦位置調整タイミング制御手段23は、載置手段11の水平方向(XY方向)への移動速度Sh(mm/sec)と合焦位置の調整時間Tfの少なくとも一方を、次の条件式(2)を満足するように調整する。
Sh(mm/sec)×Tf(sec)≦D(mm) …(2)
Note that the left side (Tv (sec) + D2 (mm) / Sv (mm / sec)) of the conditional expression (1) is an observation body located at the imaging position of the first imaging unit 15 by the automatic focusing adjustment unit 21. This corresponds to the adjustment time of the in-focus position for the divided area at 50. Here, when this adjustment time is Tf (sec), the conveyance / focus position adjustment timing control means 23 matches the moving speed Sh (mm / sec) of the mounting means 11 in the horizontal direction (XY direction). At least one of the focal position adjustment times Tf is adjusted so as to satisfy the following conditional expression (2).
Sh (mm / sec) × Tf (sec) ≦ D (mm) (2)

また、実施例1の顕微鏡システムは、さらに、第一の撮像手段15での露光量に応じて、水平方向駆動手段14を介して駆動する載置手段11の水平方向(XY方向)への移動速度を調整する水平方向移動速度調整手段24をホストシステム2に備えている。
適切な露光状態の画像を撮像するためには、撮像対象の明るさに応じて、露光時間を変える必要がある。水平方向移動速度調整手段24は、第一の撮像手段15での露光量を検出する。そして、第一の撮像手段15での露光量が少ないときに、載置手段11の水平方向(XY方向)への移動速度が遅くなり、第一の撮像手段15での露光量が多いときに、載置手段11の水平方向(XY方向)への移動速度が速くなるように、光量に応じたステッピングモータ14aの駆動速度を検出する。そして、検出した駆動速度を、顕微鏡コントローラ30を経由して、XY方向駆動制御手段14bに送信する。
Further, in the microscope system according to the first embodiment, the placement unit 11 driven via the horizontal direction driving unit 14 is moved in the horizontal direction (XY direction) according to the exposure amount of the first imaging unit 15. The host system 2 is provided with horizontal moving speed adjusting means 24 for adjusting the speed.
In order to capture an image in an appropriate exposure state, it is necessary to change the exposure time according to the brightness of the imaging target. The horizontal movement speed adjustment unit 24 detects the exposure amount at the first imaging unit 15. And when the exposure amount in the 1st imaging means 15 is small, the moving speed to the horizontal direction (XY direction) of the mounting means 11 becomes slow, and when the exposure amount in the 1st imaging means 15 is large. Then, the driving speed of the stepping motor 14a corresponding to the amount of light is detected so that the moving speed of the mounting means 11 in the horizontal direction (XY direction) increases. Then, the detected drive speed is transmitted to the XY direction drive control means 14b via the microscope controller 30.

その他、図1の顕微鏡システムは、スライドローダー25、スライドローダー制御部26、マクロ撮像用CCDカメラ27、落射照明光学系28、透過照明光学系29、顕微鏡コントローラ30、画像記録部31、モニター32、操作部33を備えている。
スライドローダー25は、観察体50としてのスライドガラス標本を搬送して、載置手段11の載置面へセットする。
スライドローダー制御部26は、スライドローダー25の動作方向・速度を制御する。
マクロ撮像用CCDカメラ27は、載置手段11上のスライドガラス標本における標本面全体を撮像する。この標本面全体の画像は、観察体50における撮像対象領域50aを設定するために用いる。
落射照明光学系28は、例えば、落射照明用光源28aと、コレクタレンズ28bと、落射用フィルタユニット28cと、落射シャッタ28dと、落射視野絞り28eと、落射開口絞り28f、フィルタキューブ等に設けられたミラー面28gを備えている。
透過照明光学系29は、例えば、透過照明用光源29aと、コレクタレンズ29bと、透過用フィルタユニット29cと、透過視野絞り29dと、透過開口絞り29eと、コンデンサ光学素子ユニット29fと、トップレンズユニット29gを備えている。
1 includes a slide loader 25, a slide loader control unit 26, a macro imaging CCD camera 27, an epi-illumination optical system 28, a transmission illumination optical system 29, a microscope controller 30, an image recording unit 31, a monitor 32, An operation unit 33 is provided.
The slide loader 25 conveys the slide glass specimen as the observation body 50 and sets it on the placement surface of the placement means 11.
The slide loader control unit 26 controls the operation direction / speed of the slide loader 25.
The macro imaging CCD camera 27 images the entire specimen surface of the slide glass specimen on the mounting means 11. The image of the entire specimen surface is used to set the imaging target region 50a in the observation body 50.
The epi-illumination optical system 28 is provided in, for example, an epi-illumination light source 28a, a collector lens 28b, an epi-illumination filter unit 28c, an epi-illumination shutter 28d, an epi-illumination field stop 28e, an epi-illumination aperture stop 28f, a filter cube, and the like. The mirror surface 28g is provided.
The transmission illumination optical system 29 includes, for example, a transmission illumination light source 29a, a collector lens 29b, a transmission filter unit 29c, a transmission field stop 29d, a transmission aperture stop 29e, a condenser optical element unit 29f, and a top lens unit. 29g.

顕微鏡コントローラ30は、ホストシステム2、XY方向駆動制御手段14b、Z方向駆動制御部17a2、ピエゾ素子駆動制御部17b2、スライドローダー制御部26、さらには図示省略した顕微鏡本体1に備わる位置センサ等と接続しており、ホストシステム2からの命令信号を受けて、各駆動制御部に対し駆動制御の作動指示を行うとともに、顕微鏡本体1からの位置情報等をホストシステム2に送信するように構成されている。
画像記録部31は、画像処理手段16が作成した合成画像を記録する。
The microscope controller 30 includes a host system 2, an XY direction drive control unit 14b, a Z direction drive control unit 17a2, a piezo element drive control unit 17b2, a slide loader control unit 26, a position sensor provided in the microscope body 1 (not shown), and the like. Connected, receives a command signal from the host system 2, and instructs each drive control unit to perform drive control operation, and transmits position information from the microscope body 1 to the host system 2. ing.
The image recording unit 31 records the composite image created by the image processing unit 16.

ホストシステム2は、制御プログラムの実行によって顕微鏡システム全体の動作制御を司るCPU(中央演算装置)と、このCPUが必要に応じてワークメモリとして使用するメインメモリと、各種のプログラムやデータを記憶しておく例えばハードディスク装置などの補助記憶装置とを有する、ごく標準的な構成のコンピュータである。
モニター32は、ホストシステム2に接続され、この顕微鏡システムの各構成要素との間で各種データの授受を管理するインタフェースユニットを備えて構成されている。
操作部33は、ホストシステム2に接続され、マウスやキーボード等といったユーザからの各種の指示を取得するための入力部を備えて構成されている。
The host system 2 stores a central processing unit (CPU) that controls the operation of the entire microscope system by executing a control program, a main memory that the CPU uses as a work memory as necessary, and various programs and data. For example, the computer has a very standard configuration having an auxiliary storage device such as a hard disk device.
The monitor 32 is connected to the host system 2 and includes an interface unit that manages exchange of various data with each component of the microscope system.
The operation unit 33 is connected to the host system 2 and includes an input unit for acquiring various instructions from the user such as a mouse and a keyboard.

次に、実施例1の顕微鏡システムの動作について、図9を用いて説明する。
図9は実施例1の顕微鏡システムにおける観察体の撮像処理手順を示すフローチャートである。
実施例1の撮像装置では、まず、スライドローダー25が搬送手段11へ観察体50を備えたスライドガラス標本を移動する(ステップS1)。次いで、水平方向駆動手段14が、搬送手段11に載置されたスライドガラス標本をマクロ画像撮像用CCDカメラ27の撮像位置へ搬送する(ステップS2)。次いで、マクロ画像撮像用CCDカメラ27が、スライドガラス標本における観察対象を含む領域50a全体のマクロ画像を撮像する(ステップS3)。次いで、実施例1の撮像装置は、ホストシステム2を介して、合焦位置情報記録手段22に、マクロ画像撮像時の合焦位置を初期値として記録させる(ステップS4)。次いで、実施例1の撮像装置は、ホストシステム2を介して、観察体50における撮像対象領域全域を設定する(ステップS5)。次いで、実施例1の撮像装置は、ホストシステム2を介して、撮像対象領域50aにおける分割撮像の開始領域mn(n:n=1)を設定する(ステップS6)。次いで、水平方向駆動手段14が、搬送手段11に載置されたスライドガラス標本における分割撮像の開始領域mnを第二の撮像手段20の2つの撮像領域20a,20bの撮像位置へ搬送する(ステップS7)。次いで、第二の撮像手段が、2つの撮像領域20a,20bで、領域mnを撮像する(ステップS8)。次いで、合焦演算部21aが、撮像された領域mnについての合焦座標を演算する(ステップS9)。
ここまでのステップS1〜S9は、搬送・合焦位置調整タイミング制御手段23による搬送・合焦位置の調整タイミング制御が作動する前段階のステップである。搬送・合焦位置調整タイミング制御手段23による搬送・合焦位置の調整タイミング制御は、以下の各ステップにおいて作動する。
Next, the operation of the microscope system according to the first embodiment will be described with reference to FIG.
FIG. 9 is a flowchart illustrating the imaging process procedure of the observation object in the microscope system of the first embodiment.
In the imaging apparatus according to the first embodiment, first, the slide loader 25 moves the slide glass specimen provided with the observation body 50 to the transport unit 11 (step S1). Next, the horizontal direction drive unit 14 transports the slide glass specimen placed on the transport unit 11 to the imaging position of the macro image capturing CCD camera 27 (step S2). Next, the macro image capturing CCD camera 27 captures a macro image of the entire region 50a including the observation target in the slide glass specimen (step S3). Next, the imaging apparatus according to the first embodiment causes the in-focus position information recording unit 22 to record the in-focus position at the time of capturing a macro image as an initial value via the host system 2 (step S4). Next, the imaging apparatus according to the first embodiment sets the entire imaging target region in the observation body 50 via the host system 2 (step S5). Next, the imaging apparatus according to the first embodiment sets a divided imaging start area m n (n: n = 1) in the imaging target area 50a via the host system 2 (step S6). Next, the horizontal driving means 14 conveys the divided imaging start area m n of the slide glass specimen placed on the conveying means 11 to the imaging positions of the two imaging areas 20 a and 20 b of the second imaging means 20 ( Step S7). Next, the second imaging unit images the area mn with the two imaging areas 20a and 20b (step S8). Next, the focus calculation unit 21a calculates focus coordinates for the imaged region mn (step S9).
Steps S <b> 1 to S <b> 9 thus far are steps before the operation of the conveyance / focus position adjustment timing control by the conveyance / focus position adjustment timing control means 23 is activated. The conveyance / focus position adjustment timing control by the conveyance / focus position adjustment timing control means 23 operates in the following steps.

水平方向駆動手段14が、領域mnを第一の撮像手段15の撮像位置に搬送する。このとき、次の領域mn+1が、第二の撮像手段の2つの撮像領域20a,20bの撮像位置に搬送される(ステップS10)。
次いで、第二の撮像手段20の2つの撮像領域20a,20bが領域mn+1を撮像し(ステップS11)、合焦演算部21aが、撮像された領域mn+1についての合焦座標を演算する(ステップS12)。
また、ステップS10〜S12に並行して、垂直方向駆動制御部21bが、合焦演算部21aが演算した領域mnについての合焦座標の位置に、合焦位置を調整する(ステップS13)。
次いで、第一の撮像手段15が、領域mnを撮像する(ステップS14)。
次いで、合焦位置情報記録手段22が、垂直方向駆動制御部21bにより調整された領域mnについての合焦位置を記録する(ステップS15)。
これらステップS10〜S15の処理を撮像対象領域全域が終了するまで繰り返す(ステップS16,S17)。
The horizontal driving unit 14 conveys the area mn to the imaging position of the first imaging unit 15. At this time, the next area m n + 1 is conveyed to the imaging positions of the two imaging areas 20a and 20b of the second imaging means (step S10).
Next, the two imaging regions 20a and 20b of the second imaging unit 20 capture the region m n + 1 (step S11), and the focusing calculation unit 21a performs the focusing coordinates for the captured region m n + 1. Is calculated (step S12).
In parallel with steps S10 to S12, the vertical direction drive control unit 21b adjusts the in-focus position to the position of the in-focus coordinates for the region mn calculated by the in-focus calculation unit 21a (step S13).
Next, the first imaging unit 15 images the area mn (step S14).
Next, the in-focus position information recording unit 22 records the in-focus position for the region mn adjusted by the vertical direction drive control unit 21b (step S15).
These processes in steps S10 to S15 are repeated until the entire imaging target region is completed (steps S16 and S17).

ここで、搬送・合焦位置調整タイミング制御手段23は、上述したステップS10〜S12の処理とステップS13の処理との処理のタイミングを次のように制御する。
即ち、搬送・合焦位置調整タイミング制御手段23は、例えば、自動合焦制御手段21が算出した分割領域mn+1についての載置手段11及び対物レンズ12の垂直方向(Z方向)の座標と、その直前に合焦位置情報記録手段22に記録された分割領域mnについての載置手段11及び対物レンズ12の垂直方向(Z方向)の座標との相対的な位置関係から、載置手段11及び対物レンズ12の垂直方向(Z方向)への移動量を算出する。そして、算出した載置手段11及び対物レンズ12の垂直方向(Z方向)への移動量と、垂直方向駆動手段17を介して駆動する載置手段11及び対物レンズ12の垂直方向(Z方向)の移動速度とから、自動合焦制御手段21による合焦位置の調整時間を求める。そして、第一の撮像手段15が撮像する観察体における分割領域mnと第一の撮像手段15が撮像する時点において第二の撮像手段20が2つの撮像領域20a,20bで撮像する観察体50における分割領域mn+1との距離と、水平方向駆動手段14を介して駆動される載置手段11の水平方向(XY方向)への移動速度と、自動合焦制御手段21による合焦位置の調整時間とに応じて、第二の撮像手段の2つの撮像領域20a,20bで撮像された観察体50における分割領域mnが、水平方向駆動手段14を介した載置手段11の水平方向(XY方向)への移動により第一の撮像手段15の撮像位置に搬送されるタイミングと、第二の撮像手段の2つの撮像領域20a,20bで撮像された当該分割領域mnの像の結像位置が自動合焦制御手段21を介して第一の撮像手段15の撮像面に位置させるタイミングとが略一致するようにして、搬送・合焦位置の調整タイミングを制御する。
Here, the conveyance / focus position adjustment timing control means 23 controls the processing timings of the above-described steps S10 to S12 and step S13 as follows.
That is, the conveyance / focus position adjustment timing control means 23 is, for example, the coordinates in the vertical direction (Z direction) of the placement means 11 and the objective lens 12 for the divided area m n + 1 calculated by the automatic focus control means 21. And the relative positional relationship between the placement unit 11 and the coordinates of the objective lens 12 in the vertical direction (Z direction) with respect to the divided area m n recorded in the in-focus position information recording unit 22 immediately before. The amount of movement of the means 11 and the objective lens 12 in the vertical direction (Z direction) is calculated. The calculated movement amount of the mounting means 11 and the objective lens 12 in the vertical direction (Z direction) and the vertical direction (Z direction) of the mounting means 11 and the objective lens 12 driven via the vertical direction driving means 17. The adjustment time of the in-focus position by the automatic in-focus control means 21 is obtained from the moving speed of. Then, the divided region m n in the observation body imaged by the first imaging unit 15 and the observation body 50 that the second imaging unit 20 images in the two imaging regions 20a and 20b at the time when the first imaging unit 15 images. the distance between the divided region m n + 1 in the moving speed and the in-focus position by the automatic focus control unit 21 in the horizontal direction (XY direction) of the mounting means 11 which is driven via a horizontal drive means 14 The divided area mn in the observation body 50 imaged in the two imaging areas 20a and 20b of the second imaging means in accordance with the adjustment time of the horizontal direction of the mounting means 11 via the horizontal direction driving means 14 The timing of transporting to the imaging position of the first imaging means 15 by movement in the (XY direction) and the result of the image of the divided area mn imaged in the two imaging areas 20a and 20b of the second imaging means. Automatic focus control of image position The adjustment timing of the conveyance / focusing position is controlled so that the timing of positioning on the imaging surface of the first imaging means 15 via the means 21 substantially coincides.

なお、第一の撮像手段15が撮像した夫々の分割領域の画像は、画像処理手段16が隣り合う座標の領域同士を合成する。これによって、観察体の拡大した合成画像が作成される。
また、画像記録部31は、画像処理手段16が作成した合成画像を記録する。
In addition, the image of each divided area imaged by the first imaging unit 15 combines the coordinate areas adjacent to each other by the image processing unit 16. Thus, a magnified composite image of the observation body is created.
The image recording unit 31 records the composite image created by the image processing unit 16.

実施例1の顕微鏡システムによれば、合成画像を作成するための撮像対象となる領域を分割して撮像する第一の撮像手段15が撮像する時点において、第一の撮像手段15が撮像する分割領域よりも水平方向駆動手段14が駆動する水平方向に対して手前に位置する分割領域の像を撮像することができるように、載置手段光路分岐手段18、光路差光学系19、第二の撮像手段20の2つの撮像領域20a,20bを備えたので、第一の撮像手段15の撮像位置に当該分割領域が水平方向駆動手段14を介して搬送されるよりも前の時刻において、合焦位置を検出するために当該分割領域を撮像することができる。
このため、第一の撮像手段15の撮像位置に当該分割領域を搬送するタイミングと、第二の撮像手段20の2つの撮像領域20a,20bで撮像した画像情報を用いて合焦位置を算出し、合焦位置を調整するタイミングとが略一致するように制御することが可能となり、第一の撮像手段15の撮像位置に当該分割領域を搬送した後、第一の撮像手段15が撮像するまでの間における、合焦位置の調整のための時間をカットして、撮像処理時間を大幅に短縮することが可能となる。
According to the microscope system of the first embodiment, the division that the first imaging unit 15 captures when the first imaging unit 15 that divides and captures the region to be captured for creating the composite image is captured. The placement means optical path branching means 18, the optical path difference optical system 19, the second optical path difference optical system 19, the second optical path branching means 18, and the second optical path difference optical system 19, so Since the two imaging areas 20a and 20b of the imaging means 20 are provided, the focusing area is focused at a time before the divided area is conveyed to the imaging position of the first imaging means 15 via the horizontal driving means 14. The segmented area can be imaged to detect the position.
For this reason, the in-focus position is calculated using the timing at which the divided area is conveyed to the imaging position of the first imaging unit 15 and the image information captured in the two imaging areas 20a and 20b of the second imaging unit 20. It is possible to control so that the timing for adjusting the in-focus position substantially coincides, and after the divided area is conveyed to the imaging position of the first imaging unit 15, until the first imaging unit 15 captures an image. It is possible to cut the time for adjusting the in-focus position during the period to greatly reduce the imaging processing time.

また、実施例1の顕微鏡システムによれば、第二の撮像手段20の2つの撮像領域20a,20bで撮像することによって、自動合焦制御手段21を介して合焦位置が調整された分割領域を第一の撮像手段15が撮像するので、合焦精度の高い画像が得られる。   In addition, according to the microscope system of the first embodiment, the divided region in which the in-focus position is adjusted via the automatic in-focus control unit 21 by imaging in the two imaging regions 20 a and 20 b of the second imaging unit 20. Since the first image pickup means 15 takes an image, an image with high focusing accuracy is obtained.

また、実施例1の顕微鏡システムによれば、自動合焦制御手段21が、第二の撮像手段20が2つの撮像領域20a,20bで撮像した観察体50における同一の分割領域の画像を用いて、当該分割領域における観察体の画像の合焦度を検出し、検出した合焦度に応じて、観察体50における当該分割領域の像の結像位置を第一の撮像手段15の撮像面に位置させるために必要な載置手段11及び対物レンズ12の垂直方向の相対位置(合焦位置)を算出し、算出した相対位置に載置手段11及び対物レンズ12が位置するように垂直方向駆動手段17を作動させて、第一の撮像手段15の撮像位置に位置する観察体における当該分領域についての載置手段11及び対物レンズ12の合焦位置を調整するとともに、合焦位置情報記録手段22が、自動合焦制御手段21を介して調整した合焦位置における載置手段11及び対物レンズ12の垂直方向の座標を記録し、さらに、搬送・合焦位置調整タイミング制御手段23が、自動合焦制御手段21が算出した載置手段11及び対物レンズ12の垂直方向の座標と、その直前に合焦位置情報記録手段22に記録された載置手段11及び対物レンズ12の垂直方向の座標との相対的な位置関係から載置手段11及び対物レンズ12の垂直方向への移動量を算出することによって、自動合焦制御手段21による当該分割領域の像の結像位置が第一の撮像手段15の撮像面に位置するようにしたので、当該分割領域に対しては、第二の撮像手段20の2つの撮像領域20a,20bによる合焦位置の検出のための撮像、自動合焦制御手段21による垂直方向駆動手段17を介して駆動する載置手段11及び対物レンズ12の合焦位置への垂直方向(Z方向)の移動が1回で済み、合焦位置の調整のために要する処理を効率化することができる。   Further, according to the microscope system of the first embodiment, the automatic focusing control unit 21 uses the image of the same divided region in the observation body 50 captured by the second imaging unit 20 in the two imaging regions 20a and 20b. The degree of focus of the image of the observation body in the divided area is detected, and the image formation position of the image of the division area in the observation body 50 is set on the imaging surface of the first imaging unit 15 according to the detected degree of focus. A vertical relative position (focusing position) of the mounting means 11 and the objective lens 12 necessary for positioning is calculated, and the vertical driving is performed so that the mounting means 11 and the objective lens 12 are positioned at the calculated relative position. The means 17 is operated to adjust the focus positions of the mounting means 11 and the objective lens 12 for the corresponding area in the observation body located at the imaging position of the first imaging means 15, and the focus position information recording means. 22 The vertical coordinates of the mounting means 11 and the objective lens 12 at the in-focus position adjusted via the automatic in-focus control means 21 are recorded, and the conveyance / in-focus position adjustment timing control means 23 further performs automatic in-focus. The vertical coordinates of the mounting means 11 and the objective lens 12 calculated by the control means 21 and the vertical coordinates of the mounting means 11 and the objective lens 12 recorded in the in-focus position information recording means 22 immediately before that are calculated. By calculating the amount of movement of the mounting unit 11 and the objective lens 12 in the vertical direction from the relative positional relationship, the image formation position of the image of the divided area by the automatic focusing control unit 21 is the first imaging unit 15. Therefore, with respect to the divided area, imaging for detecting the in-focus position by the two imaging areas 20a and 20b of the second imaging means 20 and automatic focusing control means 21 are provided. Thus, the mounting means 11 and the objective lens 12 driven via the vertical direction driving means 17 need only be moved once in the vertical direction (Z direction) to the in-focus position, and processing required for adjusting the in-focus position is performed. Efficiency can be improved.

しかも、実施例1の顕微鏡システムによれば、搬送・合焦位置調整タイミング制御手段23が、第一の撮像手段15が撮像する観察体50における分割領域と第一の撮像手段15が撮像する時点において第二の撮像手段20が2つの撮像領域20a,20bで撮像する観察体50における分割領域との距離と、水平方向駆動手段14を介して駆動される載置手段11の水平方向(XY方向)への移動速度と、自動合焦制御手段21による合焦位置の調整時間とに応じて、第二の撮像手段20の2つの撮像領域20a,20bで撮像された観察体50における分割領域を水平方向駆動手段14を介して第一の撮像手段15の撮像位置に搬送するタイミングと、第二の撮像手段20の2つの撮像領域20a,20bで撮像された観察体50における分割領域の像の結像位置を自動合焦制御手段21を介して第一の撮像手段15の撮像面に位置させるタイミングとが略一致するように制御するので、第一の撮像手段15の撮像位置に当該分割領域を搬送した後、第一の撮像手段15が撮像するまでの間において、合焦位置の調整のための時間をカットでき、撮像処理時間を大幅に短縮することができる。   In addition, according to the microscope system of the first embodiment, the conveyance / focus position adjustment timing control unit 23 captures the divided areas in the observation body 50 captured by the first imaging unit 15 and the first imaging unit 15 captures images. The distance between the second imaging means 20 and the divided areas in the observation body 50 imaged in the two imaging areas 20a and 20b and the horizontal direction (XY direction) of the mounting means 11 driven via the horizontal driving means 14 ) And the divided region in the observation body 50 imaged in the two imaging regions 20a and 20b of the second imaging unit 20 according to the focusing position adjustment time by the automatic focusing control unit 21. In the observation object 50 imaged in the two imaging areas 20a and 20b of the second imaging means 20 and the timing of transporting to the imaging position of the first imaging means 15 via the horizontal driving means 14 Since the image formation position of the image of the divided area is controlled so as to be substantially coincident with the timing of positioning the image position of the image on the imaging surface of the first imaging unit 15 via the automatic focusing control unit 21, the imaging of the first imaging unit 15 The time for adjusting the in-focus position can be cut after the divided area is conveyed to the position and before the first image pickup means 15 picks up the image, and the image pickup processing time can be greatly shortened.

このように、実施例1の顕微鏡システムによれば、合焦精度を向上させ、且つ、観察体の画像の取得処理の速度を向上させることができる。   As described above, according to the microscope system of the first embodiment, it is possible to improve the focusing accuracy and to increase the speed of the process of acquiring the image of the observation body.

なお、実施例1の顕微鏡システムでは、第二の撮像手段20の2つの撮像領域20a,20bが撮像対象とする観察体50における分割領域が、第一の撮像手段15が撮像する時点において第一の撮像手段15が撮像対象とする観察体50における分割領域よりも水平方向駆動手段14が駆動する水平方向に対して手前に位置するように、光学面18aを、結像光学系13と第一の撮像手段15との間の光軸に対し45°からα°ずれた角度で傾斜させているが、例えば、図10に示すように、光学面18aを、結像光学系13と第一の撮像手段15との間の光軸に対し45°の角度で傾斜させるとともに、第二の撮像手段20の2つの撮像領域20a,20bを、第一の撮像手段15が撮像する時点において第一の撮像手段15が撮像する観察体50の像における分割領域よりも水平方向駆動手段14が駆動する水平方向に対して手前に位置する分割領域の像を、夫々撮像するように、第三の光路W3及び第四の光路W4の夫々の中心軸からずれた位置に夫々配置してもよい。
このようにしても、図1の例と同様、第一の撮像手段15の撮像位置に当該分割領域が水平方向駆動手段14を介して搬送されるよりも前の時刻において、合焦位置を検出するために当該分割領域を撮像することができる。
In the microscope system according to the first embodiment, the first imaging unit 15 captures the divided areas in the observation body 50 that the two imaging regions 20a and 20b of the second imaging unit 20 are imaging targets. The optical surface 18a and the imaging optical system 13 are arranged so that the imaging unit 15 is positioned in front of the horizontal direction driven by the horizontal direction driving unit 14 with respect to the divided region of the observation body 50 to be imaged. The optical surface 18a is inclined with respect to the image forming optical system 13 and the first optical axis 18a, for example, as shown in FIG. While tilting at an angle of 45 ° with respect to the optical axis between the imaging unit 15 and the first imaging unit 15 at the time when the first imaging unit 15 images the two imaging areas 20a and 20b of the second imaging unit 20, View taken by the imaging means 15 The third optical path W3 and the fourth optical path W4 are respectively imaged so as to capture the images of the divided areas positioned in front of the horizontal direction driven by the horizontal driving means 14 relative to the divided areas in the image of the body 50. You may arrange | position in the position which shifted | deviated from each center axis | shaft, respectively.
Even in this case, as in the example of FIG. 1, the in-focus position is detected at a time before the divided area is conveyed to the imaging position of the first imaging unit 15 via the horizontal driving unit 14. In order to do so, the divided area can be imaged.

本発明の顕微鏡システムは、バーチャルスライドを用いて病理診断を行う医療、医学の分野に有用である。   The microscope system of the present invention is useful in the medical and medical fields in which pathological diagnosis is performed using a virtual slide.

1 顕微鏡本体
1a ステージ
2 ホストシステム
11 載置手段
12 対物レンズ
13 結像光学系
14 水平方向駆動手段
14a ステッピングモータ
14b XY方向駆動制御手段
15 第一の撮像手段
16 画像処理手段
17 垂直方向駆動手段
17a 垂直方向粗動手段
17a1 ステッピングモータ
17a2 Z方向駆動制御部
17b 垂直方向微動手段
17b1 ピエゾ素子部
17b2 ピエゾ素子駆動制御部
18 光路分岐手段
18a 光学面
19 光路差光学系
19a ハーフミラー
19b ミラー
20 第二の撮像手段
20a,20b 撮像領域
21 自動合焦制御手段
21a 合焦演算部
21b 垂直方向駆動制御部
22 合焦位置情報記録手段
23 搬送・合焦位置調整タイミング制御手段
24 水平方向移動速度調整手段
25 スライドローダー
26 スライドローダー制御部
27 マクロ撮像用CCDカメラ
28 落射照明光学系
29 透過照明光学系
30 顕微鏡コントローラ
31 画像記録部
32 モニター
33 操作部
50 観察体
50a 撮像対象領域
50b 観察対象
DESCRIPTION OF SYMBOLS 1 Microscope main body 1a Stage 2 Host system 11 Mounting means 12 Objective lens 13 Imaging optical system 14 Horizontal direction drive means 14a Stepping motor 14b XY direction drive control means 15 First imaging means 16 Image processing means 17 Vertical direction drive means 17a Vertical coarse movement means 17a1 Stepping motor 17a2 Z direction drive control section 17b Vertical fine movement means 17b1 Piezo element section 17b2 Piezo element drive control section 18 Optical path branching means 18a Optical surface 19 Optical path difference optical system 19a Half mirror 19b Mirror 20 Second Imaging means 20a, 20b Imaging area 21 Automatic focus control means 21a Focus calculation section 21b Vertical direction drive control section 22 Focus position information recording means 23 Transport / focus position adjustment timing control means 24 Horizontal direction moving speed adjustment means 25 Slide Loader 26 slide Leader control unit 27 for macro image acquisition CCD camera 28 epi-illumination optical system 29 transmitting illumination optical system 30 microscope controller 31 the image recording unit 32 monitors 33 operation unit 50 specimen 50a imaging target region 50b observation target

Claims (10)

観察体を載置する載置手段と、前記載置手段に載置された観察体と対峙する対物レンズと、前記対物レンズを経由した観察体からの光を観察体の像として結像する結像光学系と、観察体の像が分割領域ごとに撮像位置に位置するように、前記載置手段を水平方向に駆動する水平方向駆動手段と、撮像位置に位置する観察体における分割領域の像を撮像する第一の撮像手段と、前記第一の撮像手段により撮像された複数の画像を合成して観察体の拡大画像を作成する画像処理手段とを有するバーチャル顕微鏡システムであって、
前記載置手段と前記対物レンズのうちの少なくとも一方を垂直方向に駆動する垂直方向駆動手段と、
前記結像光学系を経由した光を、前記第一の撮像手段に向かう第一の光路と、該第一の撮像手段とは異なる方向に向かう第二の光路とに分岐する光路分岐手段と、
前記第二の光路を経由した所定の位置に配置され、前記第一の撮像手段が撮像する時点において該第一の撮像手段が撮像する分割領域よりも前記水平方向駆動手段による駆動方向の手前に位置する分割領域の像を、撮像する第二の撮像手段と、
前記第二の撮像手段が撮像した観察体における分割領域の画像を用いて、当該分割領域における観察体の画像の合焦度を検出し、検出した合焦度に応じて、観察体における当該分割領域の像の結像位置を前記第一の撮像手段の撮像面に位置させるために必要な前記載置手段前記対物レンズの垂直方向の相対位置を算出するとともに、該算出した相対位置に該載置手段及び該対物レンズが位置するように垂直方向駆動手段を作動させて、当該分割領域についての該載置手段及び該対物レンズの合焦位置を調整する自動合焦制御手段と、
前記第一の撮像手段が撮像する観察体における分割領域と該第一の撮像手段が撮像する時点において前記第二の撮像手段が撮像する観察体における分割領域との距離と、前記水平方向駆動手段を介して駆動される前記載置手段の水平方向への移動速度とに応じて、前記第二の撮像手段で撮像された観察体における分割領域を前記水平方向駆動手段を介して前記第一の撮像手段の撮像位置に搬送るタイミング前記第二の撮像手段で撮像された観察体における分割領域の像の結像位置を前記自動合焦制御手段を介して前記第一の撮像手段の撮像面に位置させるタイミングとが略一致するように制御する搬送・合焦位置調整タイミング制御手段とを備えることを特徴とする顕微鏡システム。
A mounting means for mounting the observation body, an objective lens facing the observation body placed on the mounting means, and light from the observation body via the objective lens is formed as an image of the observation body. An image optical system, horizontal driving means for driving the placement means in the horizontal direction so that the image of the observation object is located at each imaging area, and an image of the division area in the observation object located at the imaging position the a virtual microscope system that have a image processing means for creating a first imaging means for imaging an enlarged image of the composite to the specimen a plurality of images captured by the first imaging means,
Vertical driving means for driving at least one of the placing means and the objective lens in a vertical direction;
An optical path branching unit that splits the light that has passed through the imaging optical system into a first optical path toward the first imaging unit and a second optical path in a direction different from the first imaging unit;
It is disposed at a predetermined position via the second optical path, and is in front of the driving direction by the horizontal driving means before the divided area imaged by the first imaging means at the time when the first imaging means takes an image. A second image pickup means for picking up an image of the divided region positioned;
Using the image of the divided area in the observation object imaged by the second imaging means, the degree of focus of the image of the observation object in the division area is detected, and the division in the observation object is performed according to the detected degree of focus. The relative position in the vertical direction between the mounting means and the objective lens necessary for positioning the image formation position of the image of the region on the imaging surface of the first imaging means is calculated, and the calculated relative position is the placing location means and said objective lens is actuated in the vertical direction driving means so as to be positioned, and an automatic focus control means for adjusting the focus position of the placing location means and the objective lens for the divided regions,
The distance between the divided area in the observation body imaged by the first imaging means and the divided area in the observation body imaged by the second imaging means at the time when the first imaging means takes an image, and the horizontal direction driving means According to the moving speed in the horizontal direction of the placing means driven through the first imaging means, the divided area in the observation body imaged by the second imaging means is sent through the first driving means through the horizontal driving means . and when to transport the imaging position of the imaging means, of the first image pickup means through said automatic focus control unit the imaging position of the image of the divided region in the specimen captured by the second imaging means A microscope system comprising: a conveyance / focusing position adjustment timing control unit configured to control the timing of positioning on an imaging surface so as to substantially coincide with each other .
観察体を載置する載置手段と、前記載置手段に載置された観察体と対峙する対物レンズと、前記対物レンズを経由した観察体からの光を観察体の像として結像する結像光学系と、観察体の像が分割領域ごとに撮像位置に位置するように、前記載置手段を水平方向に駆動する水平方向駆動手段と、撮像位置に位置する観察体における分割領域の像を撮像する第一の撮像手段と、前記第一の撮像手段により撮像された複数の画像を合成して観察体の拡大画像を作成する画像処理手段を有するバーチャル顕微鏡システムであって、
前記載置手段と前記対物レンズのうちの少なくとも一方を垂直方向に駆動する垂直方向駆動手段と、
前記結像光学系を経由した光を、前記第一の撮像手段に向かう第一の光路と、該第一の撮像手段とは異なる方向に向かう第二の光路とに分岐する光路分岐手段と、
前記第二の光路を第三の光路と第四の光路に分岐するとともに、前記結像光学系の結像点が前記第一の撮像手段の撮像面に位置するときに、該結像光学系の結像点に共役な2つの結像点が、該第三の光路と該第四の光路とに垂直に交差する所定の位置から等距離離れた前方位置及び後方位置に夫々位置するように、該第三の光路と該第四の光路とに光路長差をつけた光路差光学系と、
前記第三の光路と前記第四の光路とに跨って垂直に交差する所定の位置に夫々配置され、該第三の光路と該第四の光路を夫々経由した、観察体における同一の分割領域であって、前記第一の撮像手段が撮像する時点において該第一の撮像手段が撮像する分割領域よりも前記水平方向駆動手段が駆動する水平方向に対して手前に位置する分割領域の像を、夫々撮像する2つの撮像領域を有する第二の撮像手段と、
前記第二の撮像手段が2つの撮像領域で撮像した観察体における同一の分割領域の画像を用いて、当該分割領域における観察体の画像の合焦度を検出し、検出した合焦度に応じて、観察体における当該分割領域の像の結像位置を前記第一の撮像手段の撮像面に位置させるために必要な前記載置手段前記対物レンズの垂直方向の相対位置を算出するとともに、該算出した相対位置に該載置手段及び該対物レンズが位置するように垂直方向駆動手段を作動させて、前記第一の撮像手段の撮像位置に位置する観察体における当該分割領域についての該載置手段及び該対物レンズの合焦位置を調整する自動合焦制御手段と、
前記第一の撮像手段が撮像する観察体における分割領域と該第一の撮像手段が撮像する時点において前記第二の撮像手段が2つの撮像領域で撮像する観察体における分割領域との距離と、前記水平方向駆動手段を介して駆動される前記載置手段の水平方向への移動速度と、前記自動合焦制御手段による合焦位置の調整時間とに応じて、前記第二の撮像手段の2つの撮像領域で撮像された観察体における分割領域を前記水平方向駆動手段を介して前記第一の撮像手段の撮像位置に搬送するタイミングと、前記第二の撮像手段の2つの撮像領域で撮像された観察体における分割領域の像の結像位置を前記自動合焦制御手段を介して前記第一の撮像手段の撮像面に位置させるタイミングとが略一致するように制御する搬送・合焦位置調整タイミング制御手段とを備えることを特徴とする顕微鏡システム。
A mounting means for mounting the observation body, an objective lens facing the observation body placed on the mounting means, and light from the observation body via the objective lens is formed as an image of the observation body. An image optical system, horizontal driving means for driving the placement means in the horizontal direction so that the image of the observation object is located at each imaging area, and an image of the division area in the observation object located at the imaging position the a virtual microscope system that Yusuke a first imaging means for capturing an image processing means for generating a magnified image of the specimen by combining a plurality of images captured by the first imaging means,
Vertical driving means for driving at least one of the placing means and the objective lens in a vertical direction;
An optical path branching unit that splits the light that has passed through the imaging optical system into a first optical path toward the first imaging unit and a second optical path in a direction different from the first imaging unit;
When the second optical path is branched into a third optical path and a fourth optical path, and the imaging point of the imaging optical system is located on the imaging surface of the first imaging means, the imaging optical system Two imaging points conjugate to the imaging point are positioned at a front position and a rear position that are equidistant from a predetermined position perpendicularly intersecting the third optical path and the fourth optical path, respectively. An optical path difference optical system having an optical path length difference between the third optical path and the fourth optical path;
The same divided region in the observation body, which is arranged at a predetermined position that crosses the third optical path and the fourth optical path vertically and passes through the third optical path and the fourth optical path, respectively. An image of the divided region positioned in front of the horizontal direction driven by the horizontal direction driving unit with respect to the divided region captured by the first imaging unit at the time when the first imaging unit captures an image. A second imaging means having two imaging areas for imaging each;
Using the image of the same divided area in the observation object imaged by the second imaging means in the two imaging areas, the degree of focus of the image of the observation object in the divided area is detected, and the detected degree of focus is determined. Te, the imaging position of the image of the divided region in the specimen to calculate the vertical relative position between the objective lens and said placing means before necessary to position the imaging surface of the first imaging means , the placing location means and the objective lens to the relative the calculated position actuates the vertical drive means so as to be positioned, for the divided regions in the specimen located at the imaging position of the first imaging means Automatic focusing control means for adjusting the focusing position of the mounting means and the objective lens;
A distance between a divided region in the observation body imaged by the first imaging unit and a divided region in the observation body imaged by the second imaging unit in two imaging regions at the time when the first imaging unit images ; Depending on the moving speed in the horizontal direction of the mounting means driven by the horizontal driving means and the adjustment time of the focusing position by the automatic focusing control means, 2 of the second imaging means . The divided area of the observation body imaged in one imaging area is conveyed to the imaging position of the first imaging means via the horizontal direction driving means, and is imaged in the two imaging areas of the second imaging means. transport and focus position and timing of Ru is located on the imaging plane is controlled to substantially match the image forming position of said automatic focus control means and the first imaging means through the image of the divided region in the specimen was Adjustment timing Microscope system characterized by comprising a control means.
前記光路分岐手段は、入射光を透過光と反射光とに分ける光学面を有し、
前記第二の撮像手段が撮像対象とする観察体における分割領域が、前記第一の撮像手段が撮像する時点において該第一の撮像手段が撮像対象とする観察体における分割領域よりも前記水平方向駆動手段が駆動する水平方向に対して手前に位置するように、前記光学面が傾斜していることを特徴とする請求項1又は2に記載の顕微鏡システム。
The optical path branching unit has an optical surface that divides incident light into transmitted light and reflected light,
The divided region in the observation object to be imaged by the second imaging means is in the horizontal direction more than the divided region in the observation object to be imaged by the first imaging means when the first imaging means takes an image. The microscope system according to claim 1 or 2 , wherein the optical surface is inclined so as to be positioned in front of a horizontal direction in which the driving unit is driven.
前記第二の撮像手段の2つの撮像領域は、前記第一の撮像手段が撮像する時点において該第一の撮像手段が撮像する観察体の像における分割領域よりも前記水平方向駆動手段が駆動する水平方向に対して手前に位置する分割領域の像を、夫々撮像するように、前記第三の光路及び前記第四の光路の夫々の中心軸からずれた位置に夫々配置されていることを特徴とする請求項2に記載の顕微鏡システム。 The two image pickup areas of the second image pickup means are driven by the horizontal driving means than the divided areas in the image of the observation object picked up by the first image pickup means when the first image pickup means picks up images. It is respectively arranged at a position shifted from the central axis of each of the third optical path and the fourth optical path so as to capture the images of the divided areas positioned in front of the horizontal direction. The microscope system according to claim 2. 前記第一の撮像手段が撮像する観察体における分割領域と該第一の撮像手段が撮像する時点において前記第二の撮像手段が撮像する観察体における分割領域との距離をD(mm)、前記自動合焦制御手段による前記第一の撮像手段の撮像位置に位置する観察体における分割領域に対する合焦位置の調整時間をTf(sec)、前記水平方向駆動手段を介して駆動される前記載置手段の水平方向への移動速度をSh(mm/sec)としたとき、次の条件式を満足することを特徴とする請求項1〜のいずれかに記載の顕微鏡システム。
Sh(mm/sec)×Tf(sec)≦D(mm)
D (mm) represents the distance between the divided area in the observation object imaged by the first imaging means and the divided area in the observation object imaged by the second imaging means at the time when the first imaging means images. The above-described device driven by the horizontal direction driving unit is Tf (sec), the adjustment time of the focusing position with respect to the divided region in the observation body located at the imaging position of the first imaging unit by the automatic focusing control unit. when the moving speed of the horizontal section was Sh (mm / sec), the microscope system according to any one of claims 1 to 4, characterized by satisfying the following condition.
Sh (mm / sec) × Tf (sec) ≦ D (mm)
前記自動合焦調整手段による前記載置手段及び前記対物レンズの垂直方向への移動量の演算時間をTv(sec)、該自動合焦調整手段により調整した前記垂直方向駆動手段を介して駆動する前記載置手段及び前記対物レンズの垂直方向の移動速度をSv(mm/sec)、前記水平方向駆動手段を介して駆動される前記載置手段の水平方向への移動速度をSh(mm/sec)、前記第一の撮像手段が撮像する観察体における分割領域と該第一の撮像手段が撮像する時点において前記第二の撮像手段が撮像する観察体における分割領域との距離をD(mm)、前記載置手段及び前記対物レンズの垂直方向への移動量D2(mm)としたとき、次の条件式を満足することを特徴とする請求項1〜のいずれかに記載の顕微鏡システム。
(Tv(sec)+D2(mm)/Sv(mm/sec))≦D(mm)/Sh(mm/sec)
The above-mentioned placing means by the automatic focusing adjustment means and the calculation time of the amount of movement of the objective lens in the vertical direction are Tv (sec), and driven by the vertical driving means adjusted by the automatic focusing adjustment means. The moving speed in the vertical direction of the mounting means and the objective lens is Sv (mm / sec), and the moving speed in the horizontal direction of the mounting means driven through the horizontal driving means is Sh (mm / sec). ), The distance between the divided area in the observation body imaged by the first imaging means and the divided area in the observation body imaged by the second imaging means at the time when the first imaging means takes an image D (mm) , when the amount of movement D2 (mm) in the vertical direction of the placement means and the objective lens, the microscope system according to any one of claims 1 to 4, characterized by satisfying the following condition.
(Tv (sec) + D2 (mm) / Sv (mm / sec)) ≦ D (mm) / Sh (mm / sec)
さらに、前記第一の撮像手段での露光量に応じて、前記水平方向駆動手段を介して駆動する前記載置手段の水平方向への移動速度を調整する水平方向移動速度調整手段を有することを特徴とする請求項1〜のいずれかに記載の顕微鏡システム。 Furthermore, it has a horizontal direction moving speed adjusting means for adjusting the moving speed in the horizontal direction of the above-mentioned placing means driven through the horizontal direction driving means according to the exposure amount in the first imaging means. The microscope system according to any one of claims 1 to 6 , characterized in that 前記第一の撮像手段が、ラインセンサカメラであることを特徴とする請求項1〜のいずれかに記載の顕微鏡システム。 The microscope system according to any one of claims 1 to 7, wherein the first imaging means, which is a line sensor camera. 前記第一の撮像手段が、TDIカメラであることを特徴とする請求項1〜のいずれかに記載の顕微鏡システム。 The first imaging means, the microscope system according to any one of claims 1 to 7, characterized in that a TDI camera. 前記垂直方向駆動手段が、ピエゾ素子であることを特徴とする請求項1〜のいずれかに記載の顕微鏡システム。 The microscope system according to any one of claims 1 to 9, wherein the vertical direction driving means, which is a piezoelectric element.
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