JP2011027421A - 分析チップおよび検体の分析方法 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】遠心力を用いて検体および試薬を送液する分析チップであって、検体中の測定阻害物質を除去するためのプレカラムを反応室上流に有し、特定の試薬を試薬流路を介してプレカラムを通すことなく反応室に送液する、分析チップ。
【選択図】図2
Description
[1]回転による遠心力を用いて検体および試薬を送液し、免疫学的測定を行うための分析チップであって、抗原または抗体が結合した担体を収容可能な反応室と検体中の測定阻害物質を除去するための担体を収容するプレカラムを反応室上流に有し、プレカラムと反応室との間に試薬が流入する試薬流路が接続している、分析チップ。
[2]前記試薬流路の少なくとも一部が、回転軸側から外周方向に延伸して、プレカラムと反応室との間に接続していることを特徴とする、[1]に記載の分析チップ。
[3]前記試薬流路が、対向する主面間を連通していることを特徴とする、[1]または[2]のいずれかに記載の分析チップ。
[4]前記分析チップが、プレカラムの外周側に、第1の回転速度による回転中にプレカラムを通過した検体を保持する第1の保持槽を有し、第1の保持槽と反応室とが連通していることを特徴とする、[1]から[3]のいずれかに記載の分析チップ。
[5]第1の保持槽の重力方向に位置し、第1の回転速度よりも低速の第2の回転速度による回転もしくは回転停止時に第1の保持槽から重力の作用により移送された検体を保持する第2の保持槽をさらに有し、第1の保持槽が重力方向に延伸する流路Aにより第2の保持槽と接続し、第2の保持槽が反応室と連通している、[4]に記載の分析チップ。
[6]前記試薬流路が、前記第2の保持槽または流路Aに接続していることを特徴とする、[5]に記載の分析チップ。
[7]前記流路Aと前記第1の保持槽との接続部は、少なくともその一部が前記分析チップの前記第1の回転速度による回転時の前記第1の保持槽内の「検体の液面を含む平面」よりも、回転の内周側に位置する、[5]または[6]に記載の分析チップ。
[8]前記流路Aの少なくとも一部が、前記分析チップの前記第1の回転速度による回転時の前記第1の保持槽内の「検体の液面を含む平面」よりも、回転の内周側に延伸する、[5]から[7]のいずれか一項に記載の分析チップ。
[9]前記流路Aが、前記第2の回転速度による回転時または回転停止時の第1の保持槽内の「検体の液面を含む平面」よりも下方に位置する、[5]から[8]のいずれか一項に記載の分析チップ。
[10]前記流路Aが、流路途中で回転の外周側に屈曲している、[5]から[9]のいずれか一項に記載の分析チップ。
[11]前記第1の保持槽が、その内壁の少なくとも一部に疎水的な壁面を有しており、前記流路Aが、その内壁の少なくとも一部に親水的な壁面を有している、[5]から[10]のいずれか一項に記載の分析チップ。
[12]前記免疫学的測定が酵素免疫測定であって、測定阻害物質が内因性酵素活性物質であることを特徴とする、[1]から[11]のいずれか一項に記載の分析チップ。
[13]前記試薬が前記試薬流路接続部から反応室へ送液される際の動力の少なくとも一部が重力を利用することを特徴とする、[1]から[12]のいずれか一項に記載の分析チップ。
[14][1]から[13]のいずれか一項に記載の分析チップを用いる、検体の分析方法。
[15]前記分析チップに検体を導入した後、分析チップを回転装置に装着し、第1回転速度により回転させた後、第1回転速度よりも低速の第2回転速度による回転もしくは回転停止する工程を含む、[14]に記載の検体の分析方法。
[16]前記分析チップに検体を導入した後、分析チップを回転装置に装着し、第1回転速度による回転で検体にプレカラムを通過させることで検体中の測定阻害物質を除去し、かつプレカラムを通過した検体を第1の保持槽で保持し、第1回転速度よりも低速の第2回転速度による回転もしくは回転停止する工程で検体を第2の保持槽に重力の作用により移送し、第2回転速度よりも高速の第3の回転速度による回転で検体を反応室に送液し、抗原抗体反応を行う工程を含む、[14]に記載の検体の分析方法。
[17]前記第1の回転速度より、前記第3の回転速度が低いことを特徴とする、[16]に記載の検体の分析方法。
さらに好ましくは、本発明の分析チップはプレカラムが反応室よりも内周側に位置する構造をとる。回転軸に対してプレカラムが反応室より内側に位置する構造は、省スペースであるとともに、同じ回転数のときに負荷する遠心力が内径側のプレカラムより外径側の反応室のほうが大きいため、プレカラムを通過した試料がより確実に反応室へ送液されるのでより好ましい。
(1)標識した抗体により標的物質を直接認識して検出する直接法。
(2)標的とする物質を抗体により認識し、標的物質と結合した抗体を、標識した抗体により認識し検出する間接法。
(3)抗体と酵素で標識した一定量の標的物質を加えた試料を反応させて検出する競合法、もしくは、未標識抗体と標識抗体を競合的に標的物質に結合させて検出する競合法。
(4)標的とする物質を固相化した抗体により捕捉し、さらに別の抗体により検出するサンドイッチ法。
(5)標的とする物質を固相化した抗体により捕捉し、さらに別の抗体により標的とする物質を認識し、標的とする物質を認識した抗体を、標識した抗体により検出する三抗体サンドイッチ法。
次のようにして、図2に示す分析チップ(分析チップA)を作製した。
実施例1で作製した分析チップAを用いて、全血中に含まれるIL−8の測定を行った。
次のようにして、図3から図8に示す分析チップ(分析チップB)を作製した。
実施例3で作製した分析チップBを用いて、全血中に含まれるIL−8の測定を行った。
実施例3で作製した分析チップBを用いて、全血中に含まれるIL−8の高濃度範囲における測定を行った。
2 反応室
3 試薬流路
4−1 第1の保持槽
4−2 第2の保持槽
4−3 流路A
5 分離部
5−1 懸濁液保持槽
5―2 分離液保持槽
5−3 不溶性成分保持槽
6 多段送液部
7 試薬リザーバ(試薬リザーバユニット)
8 開口部
9 抗原もしくは抗体が結合した担体
10 検体
101 標識抗体
102 基質A
103 基質B
104 洗浄液A
105 洗浄液B
200 血液(全血)
201 血球成分
202 血漿成分(血清成分)
P1 第1の回転速度における回転中の、第1の保持槽内における検体の液面を含む平面
P2 第2の回転速度における回転中もしくは回転停止中の、第1の保持槽内における検体の液面を含む平面
Q 第1の保持槽と流路Aの接続点
X 主面X
Y 主面Xと対向する主面Y
Claims (17)
- 回転による遠心力を用いて検体および試薬を送液し、免疫学的測定を行うための分析チップであって、抗原または抗体が結合した担体を収容可能な反応室と検体中の測定阻害物質を除去するための担体を収容するプレカラムを反応室上流に有し、プレカラムと反応室との間に試薬が流入する試薬流路が接続している、分析チップ。
- 前記試薬流路の少なくとも一部が、回転軸側から外周方向に延伸して、プレカラムと反応室との間に接続していることを特徴とする、請求項1に記載の分析チップ。
- 前記試薬流路が、対向する主面間を連通していることを特徴とする、請求項1または2に記載の分析チップ。
- 前記分析チップが、プレカラムの外周側に、第1の回転速度による回転中にプレカラムを通過した検体を保持する第1の保持槽を有し、第1の保持槽と反応室とが連通していることを特徴とする、請求項1から3のいずれか一項に記載の分析チップ。
- 第1の保持槽の重力方向に位置し、第1の回転速度よりも低速の第2の回転速度による回転もしくは回転停止時に第1の保持槽から重力の作用により移送された検体を保持する第2の保持槽をさらに有し、第1の保持槽が重力方向に延伸する流路Aにより第2の保持槽と接続し、第2の保持槽が反応室と連通している、請求項4に記載の分析チップ。
- 前記試薬流路が、前記第2の保持槽または流路Aに接続していることを特徴とする、請求項5に記載の分析チップ。
- 前記流路Aと前記第1の保持槽との接続部は、少なくともその一部が前記分析チップの前記第1の回転速度による回転時の前記第1の保持槽内の「検体の液面を含む平面」よりも、回転の内周側に位置する、請求項5または6に記載の分析チップ。
- 前記流路Aの少なくとも一部が、前記分析チップの前記第1の回転速度による回転時の前記第1の保持槽内の「検体の液面を含む平面」よりも、回転の内周側に延伸する、請求項5から7のいずれか一項に記載の分析チップ。
- 前記流路Aが、前記第2の回転速度による回転時または回転停止時の第1の保持槽内の「検体の液面を含む平面」よりも下方に位置する、請求項5から8のいずれか一項に記載の分析チップ。
- 前記流路Aが、流路途中で回転の外周側に屈曲している、請求項5から9のいずれか一項に記載の分析チップ。
- 前記第1の保持槽が、その内壁の少なくとも一部に疎水的な壁面を有しており、前記流路Aが、その内壁の少なくとも一部に親水的な壁面を有している、請求項5から10のいずれか一項に記載の分析チップ。
- 前記免疫学的測定が酵素免疫測定であって、測定阻害物質が内因性酵素活性物質であることを特徴とする、請求項1から11のいずれか一項に記載の分析チップ。
- 前記試薬が前記試薬流路接続部から反応室へ送液される際の動力の少なくとも一部が重力を利用することを特徴とする、請求項1から12のいずれか一項に記載の分析チップ。
- 請求項1から13のいずれか一項に記載の分析チップを用いる、検体の分析方法。
- 前記分析チップに検体を導入した後、分析チップを回転装置に装着し、第1回転速度により回転させた後、第1回転速度よりも低速の第2回転速度による回転もしくは回転停止する工程を含む、請求項14に記載の検体の分析方法。
- 前記分析チップに検体を導入した後、分析チップを回転装置に装着し、第1回転速度による回転で検体にプレカラムを通過させることで検体中の測定阻害物質を除去し、かつプレカラムを通過した検体を第1の保持槽で保持し、第1回転速度よりも低速の第2回転速度による回転もしくは回転停止する工程で検体を第2の保持槽に重力の作用により移送し、第2回転速度よりも高速の第3の回転速度による回転で検体を反応室に送液し、抗原抗体反応を行う工程を含む、請求項14に記載の検体の分析方法。
- 前記第1の回転速度より、前記第3の回転速度が低いことを特徴とする、請求項16に記載の検体の分析方法。
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