JP2010261920A - Diagnostic agent for type-two diabetes - Google Patents

Abstract

<P>PROBLEM TO BE SOLVED: To provide a diagnostic agent and diagnostic kit for diagnosing type-two diabetes, and a method and kit for screening a substance having a prophylactic agent and a therapeutic agent for type-two diabetes. <P>SOLUTION: The diagnostic agent for type-two diabetes uses as an index an expression level, of at least one or more kinds of genes to be chosen from among predetermined genes. This diagnostic agent confirms a diagnosis of type-two diabetes, by using as the index the expression level of the predetermined genes in leukocytes collected from blood of a subject in a fasting state. The predetermined genes provided, further, improve the diagnostic accuracy of type-two diabetes of the subject by substituting for genes available for a conventional diagnosis of type-two diabetes or adding thereto as an analysis object. <P>COPYRIGHT: (C)2011,JPO&INPIT

Description

本発明は、2型糖尿病の診断を行うための診断剤、2型糖尿病の診断用キット、並びに２型糖尿病の予防薬及び／又は治療薬を有する物質のスクリーニング方法、及び該スクリーニングで使用するキットに関する。   The present invention relates to a diagnostic agent for diagnosing type 2 diabetes, a diagnostic kit for type 2 diabetes, a method for screening a substance having a prophylactic and / or therapeutic agent for type 2 diabetes, and a kit used in the screening About.

糖尿病の患者数は、世界規模で増加の一途をたどっており、2010年には２億人を越えると予想されている。糖尿病はその病因に基づいて大きく1型と2型とに分類されるが、糖尿病の患者のほとんどが２型糖尿病の患者によって占められており、その克服は人類の大きな課題の一つといえる。   The number of diabetic patients is increasing on a global scale and is expected to exceed 200 million in 2010. Diabetes is roughly classified into type 1 and type 2 based on its etiology, but most patients with diabetes are occupied by patients with type 2 diabetes, and overcoming this is one of the major challenges of humanity.

１型糖尿病は、膵臓ランゲルハンス島が炎症を起こしてβ細胞によるインスリン分泌能が著しく低下するもので、インスリンを補充しなくては生存できないインスリン依存型の病像を呈する。２型糖尿病は、それ以外の原因でインスリンの作用不足が現れて高家等になるもので、肥満、過食、運動不足、ストレス等の環境因子の関与が大きく、中年以降の比較的高齢の肥満者に発症しやすい。２型糖尿病では、一般的にはインスリン非依存型の病像を呈し、食事療法と運動療法が治療の基本となる。食事療法、運動療法の次の段階として薬物療法が行われ、それでも治療が困難な場合にはインスリン療法が行われる。   Type 1 diabetes is caused by inflammation of the pancreatic islets of Langerhans and significantly reduces the ability of β-cells to secrete insulin, and exhibits an insulin-dependent pathology that cannot survive without supplementation with insulin. Type 2 diabetes is caused by a lack of insulin action due to other causes and becomes a high family, etc., and is largely related to environmental factors such as obesity, overeating, lack of exercise, and stress. It is easy to develop in obese people. In type 2 diabetes, an insulin-independent disease state is generally exhibited, and diet therapy and exercise therapy are the basis of treatment. Drug therapy is performed as the next stage of diet therapy and exercise therapy, and insulin therapy is performed when treatment is still difficult.

糖尿病の初発時期には、多飲、多尿、夜尿等の症状が見られるが、これらの初発症状を自覚する患者は少なく、患者の多くは、合併症に伴う症状が現れるまで自覚できないため、糖尿病がいつの間にか発症していて、それを発見したときには合併症が出現しており、治療が極めて困難になる場合が多い。したがって、糖尿病の克服には、早期発見・早期治療が極めて重要であるが、１型糖尿病に比べて２型糖尿病の発症過程は未だ不明な点が多いため、早期発見・早期治療が困難となる場合がある。   Symptoms such as polydipsia, polyuria, and nocturnal urine are observed at the initial stage of diabetes, but few patients are aware of these initial symptoms, and many patients cannot be aware until symptoms associated with complications appear Diabetes is onset for some time, and when it is discovered, complications appear and are often very difficult to treat. Therefore, early detection and early treatment are extremely important for overcoming diabetes, but the onset process of type 2 diabetes is still unclear compared to type 1 diabetes, making early detection and early treatment difficult. There is a case.

被験者に対して２型糖尿病を判定する、又は将来２型糖尿病として判定される可能性があると診断することを目的とした、被験者における特定の遺伝子の発現を確認する方法が知られている。この方法では、被験者における１種類以上の遺伝子の発現レベルを測定し、被験者における発現レベルと健常人における当該遺伝子の発現レベル（統計的に正常とされる発現レベルを含む）との比較を行い、その発現レベルの差を根拠として判定が行なわれる。また、被験者における複数の遺伝子の発現レベルを測定し、それらの発現レベルのパターンを根拠として判定が行われる場合もある。このような方法は、遺伝子の先天的な異常（遺伝子型）を解析するSNPs解析等と本質的に異なるものであって、遺伝因子及び環境因子を加味した被験者の現状を把握できる点で有利である。   There is known a method for confirming expression of a specific gene in a subject for the purpose of diagnosing that the subject has type 2 diabetes or may be judged as type 2 diabetes in the future. In this method, the expression level of one or more genes in a subject is measured, and the expression level in the subject is compared with the expression level of the gene in a healthy person (including an expression level that is statistically normal), The determination is made based on the difference in the expression level. In addition, the expression levels of a plurality of genes in a subject may be measured, and determination may be made based on the pattern of these expression levels. Such a method is essentially different from the SNPs analysis that analyzes inborn abnormalities (genotypes) of genes, and is advantageous in that it can grasp the current state of subjects taking into account genetic factors and environmental factors. is there.

本発明者らは、上記の判定をサンプリングが容易な組織を利用して行うことを可能にすべく、被験者の血液から採取した白血球におけるいくつかの特定の遺伝子の発現レベルを指標として２型糖尿病の診断を行うことを特徴とする２型糖尿病の診断方法を開発した（特許文献１、特許文献２、特許文献３）。
再公表特許W02004／040301公報 特開2005−253434号公報 特開2007−082458号公報 In order to make it possible to make the above determination using a tissue that can be sampled easily, the present inventors have used type 2 diabetes as an index for the expression levels of some specific genes in leukocytes collected from the blood of a subject. A diagnosis method for type 2 diabetes mellitus characterized by performing the above diagnosis has been developed (Patent Document 1, Patent Document 2, and Patent Document 3).
Republished Patent W02004 / 040301 JP-A-2005-253434 JP 2007-082458 A

本発明は、特許文献１、特許文献２、特許文献３で開示された２型糖尿病の診断に有用な遺伝子に代わり、あるいは加えて、２型糖尿病の診断に有用な、更なる遺伝子を提供することを目的とする。   The present invention provides an additional gene useful for diagnosis of type 2 diabetes instead of or in addition to the gene useful for diagnosis of type 2 diabetes disclosed in Patent Document 1, Patent Document 2, and Patent Document 3. For the purpose.

本発明者らは、２型糖尿病発症モデル動物の白血球における各種の遺伝子発現解析を通じて、２型糖尿病の発症と優位に関連している遺伝子を見出し、下記の各発明を完成した。   The present inventors have found genes that are predominantly associated with the onset of type 2 diabetes through various gene expression analyzes in leukocytes of type 2 diabetes onset model animals, and have completed the following inventions.

（a）下記（１）〜（３９）から選ばれるGenBankアクセッション番号で特定されるヒト遺伝子、又は下記（４０）〜（４７）から選ばれるGenBankアクセッション番号で特定されるラット遺伝子に対応するヒト遺伝子の少なくとも1種類以上の塩基配列にストリンジェントな条件下でハイブリダイズする核酸及び／又は該遺伝子のいずれかにコードされるヒトタンパク質と結合する特異抗体若しくはその断片からなる、2型糖尿病診断剤。   (A) It corresponds to a human gene identified by a GenBank accession number selected from the following (1) to (39) or a rat gene identified by a GenBank accession number selected from the following (40) to (47) Diagnosis of type 2 diabetes comprising a nucleic acid that hybridizes under stringent conditions to at least one nucleotide sequence of a human gene and / or a specific antibody or fragment thereof that binds to a human protein encoded by any of the genes Agent.

（１）AK_311856 （上皮発現脂肪酸結合タンパク質5型）
（２）NM_024722 （アシル補酵素A結合領域保存タンパク質4型）
（３）NM_012434 （溶質輸送体ファミリー17型）
（４）NM_003258 （チミジンキナーゼ1型）
（５）NM_015932 （染色体13番翻訳領域類似タンパク質）
（６）NM_012068 （転写活性化因子5型）
（７）NM_024901 （DENN/MADD領域タンパク質2D）
（８）NM_004851 （Napsin Aアスパラギン酸ぺプチダ−ゼ）
（９）NM_017327 （グアニンヌクレオチド結合タンパク質アルファ0型）
（１０）NM_016410 （クロマチン修飾タンパク質5型）
（１１）NM_001300 （Kruppel様転写因子6型）
（１２）NM_006208 （エクトヌクレオチドピロフォスファターゼ/フォスフォジエステラーゼ1型）
（１３）NM_001398 （ペルオキシソーム発現エノイル補酵素A加水酵素1）
（１４）NM_013446 （Mkrn1類似タンパク質）
（１５）NM_000063 （補体成分2型）
（１６）NM_000371 （トランスサイレチン類似タンパク質）
（１７）NM_006000 （チューブリンアルファ1型）
（１８）NM_016641 （膜相互作用タンパク質RGS16）
（１９）NM_001752 （カタラーゼ）
（２０）NM_017790 （Gタンパク質シグナル3型制御タンパク質）
（２１）NM_021149 （コアクトシン様タンパク質1型）
（２２）NM_0010149 （T細胞活性化リンカータンパク質）
（２３）NM_001015052 （N-メチルプリン型DNAグリコシラーゼ）
（２４）NM_002073 （グアニンヌクレオチド結合タンパク質アルファz型サブユニット）
（２５）NM_004657 （血清欠乏反応タンパク質）
（２６）NM_006763 （B細胞転座遺伝子2型、非増殖性）
（２７）NM_000442 （血小板及び内皮細胞接着分子）
（２８）NM_002957 （レチノイドX受容体）
（２９）NM_001617 （アデューシン2型）
（３０）NM_000576 （インターロイキン1型β）
（３１）NM_002965 （S100カルシウム結合タンパク質A9）
（３２）NM_003356 （脱共役タンパク質3型）
（３３）NM_00101588 （TSC22領域ファミリー3型）
（３４）NM_001004431 （メテオリン及びグリア細胞分化制御様タンパク質）
（３５）NM_002026 （フィブロネクチン1型）
（３６）NM_001063 （トランスフェリン）
（３７）NM_001928 （補体成分D）
（３８）NM_001079846 （CREB結合タンパク質）
（３９）NM_001031812 （カゼインキナーゼ1型γ3型）
（４０）NM_172033 （プレクストリン相同領域保存ファミリーBタンパク質1型）
（４１）XM_238467 （推定ISG12(b)タンパク質）
（４２）AA944679 （転写部位）
（４３）AW916109 （転写部位）
（４４）NM_020103 （Ly6-C抗原）
（４５）XM_342474 （RIKEN cDNA A930018P22類似タンパク質）
（４６）BG666719 （cDNAクローンDRABTH12型）
（４７）NM_001004202 （ケモカインリガンド6型）
（ｂ）前記（１）〜（３９）から選ばれるGenBankアクセッション番号で特定されるヒト遺伝子、又は下記（４０）〜（４７）から選ばれるGenBankアクセッション番号で特定されるラット遺伝子に対応するヒト遺伝子及び／又は該遺伝子のいずれかにコードされるタンパク質の発現量を測定するための、請求項1に記載の2型糖尿病診断剤。 (1) AK_311856 (Epithelial fatty acid binding protein type 5)
(2) NM_024722 (Acyl coenzyme A binding domain conserved protein type 4)
(3) NM_012434 (solute transporter family type 17)
(4) NM_003258 (Thymidine kinase type 1)
(5) NM_015932 (Chromosome 13 translation region-like protein)
(6) NM_012068 (Transcriptional activator type 5)
(7) NM_024901 (DENN / MADD region protein 2D)
(8) NM_004851 (Napsin A aspartate peptidase)
(9) NM_017327 (Guanine nucleotide binding protein alpha 0 type)
(10) NM_016410 (chromatin modified protein type 5)
(11) NM_001300 (Kruppel-like transcription factor type 6)
(12) NM_006208 (Ectonucleotide pyrophosphatase / phosphodiesterase type 1)
(13) NM_001398 (Peroxisome-expressed enoyl coenzyme A hydrolase 1)
(14) NM_013446 (Mkrn1-like protein)
(15) NM_000063 (Complement component type 2)
(16) NM_000371 (transthyretin-like protein)
(17) NM_006000 (Tubulin alpha type 1)
(18) NM_016641 (membrane interacting protein RGS16)
(19) NM_001752 (catalase)
(20) NM_017790 (G protein signal type 3 regulatory protein)
(21) NM_021149 (coactocin-like protein type 1)
(22) NM_0010149 (T cell activation linker protein)
(23) NM_001015052 (N-methylpurine type DNA glycosylase)
(24) NM_002073 (Guanine nucleotide binding protein alpha z-type subunit)
(25) NM_004657 (serum deficiency reaction protein)
(26) NM_006763 (B cell translocation gene type 2, nonproliferative)
(27) NM_000442 (platelet and endothelial cell adhesion molecule)
(28) NM_002957 (Retinoid X receptor)
(29) NM_001617 (Adducin type 2)
(30) NM_000576 (Interleukin type 1 β)
(31) NM_002965 (S100 calcium binding protein A9)
(32) NM_003356 (Uncoupled protein type 3)
(33) NM_00101588 (TSC22 region family type 3)
(34) NM_001004431 (Meteolin and glial differentiation control-like protein)
(35) NM_002026 (Fibronectin type 1)
(36) NM_001063 (transferrin)
(37) NM_001928 (Complement component D)
(38) NM_001079846 (CREB binding protein)
(39) NM_001031812 (casein kinase type 1 γ3 type)
(40) NM_172033 (Plextrin homologous region conserving family B protein type 1)
(41) XM_238467 (Presumed ISG12 (b) protein)
(42) AA944679 (Transcription site)
(43) AW916109 (transcription site)
(44) NM_020103 (Ly6-C antigen)
(45) XM_342474 (RIKEN cDNA A930018P22-like protein)
(46) BG666719 (cDNA clone DRABTH12 type)
(47) NM_001004202 (Chemokine ligand type 6)
(B) Corresponds to a human gene identified by a GenBank accession number selected from the above (1) to (39), or a rat gene identified by a GenBank accession number selected from the following (40) to (47) 2. The diagnostic agent for type 2 diabetes according to claim 1, for measuring the expression level of a human gene and / or a protein encoded by any one of the genes.

（ｃ）核酸又は特異抗体が固相担体に結合されている、（a）又は（ｂ）に記載の2型糖尿病診断剤。 (C) The diagnostic agent for type 2 diabetes according to (a) or (b), wherein a nucleic acid or a specific antibody is bound to a solid phase carrier.

（ｄ）下記（１）〜（３９）から選ばれるGenBankアクセッション番号で特定されるヒト遺伝子、又は下記（４０）〜（４７）から選ばれるGenBankアクセッション番号で特定されるラット遺伝子に対応するヒト遺伝子の塩基配列にストリンジェントな条件下でハイブリダイズする核酸及び／又は該遺伝子のいずれかにコードされるヒトタンパク質と結合する特異抗体若しくはその断片を含む、2型糖尿病診断用キット。 (D) Corresponds to a human gene identified by a GenBank accession number selected from the following (1) to (39), or a rat gene identified by a GenBank accession number selected from the following (40) to (47) A kit for diagnosing type 2 diabetes comprising a nucleic acid that hybridizes to a nucleotide sequence of a human gene under stringent conditions and / or a specific antibody or fragment thereof that binds to a human protein encoded by any of the genes.

（１）AK_311856 （上皮発現脂肪酸結合タンパク質5型）
（２）NM_024722 （アシル補酵素A結合領域保存タンパク質4型）
（３）NM_012434 （溶質輸送体ファミリー17型）
（４）NM_003258 （チミジンキナーゼ1型）
（５）NM_015932 （染色体13番翻訳領域類似タンパク質）
（６）NM_012068 （転写活性化因子5型）
（７）NM_024901 （DENN/MADD領域タンパク質2D）
（８）NM_004851 （Napsin Aアスパラギン酸ぺプチダ−ゼ）
（９）NM_017327 （グアニンヌクレオチド結合タンパク質アルファ0型）
（１０）NM_016410 （クロマチン修飾タンパク質5型）
（１１）NM_001300 （Kruppel様転写因子6型）
（１２）NM_006208 （エクトヌクレオチドピロフォスファターゼ/フォスフォジエステラーゼ1型）
（１３）NM_001398 （ペルオキシソーム発現エノイル補酵素A加水酵素1）
（１４）NM_013446 （Mkrn1類似タンパク質）
（１５）NM_000063 （補体成分2型）
（１６）NM_000371 （トランスサイレチン類似タンパク質）
（１７）NM_006000 （チューブリンアルファ1型）
（１８）NM_016641 （膜相互作用タンパク質RGS16）
（１９）NM_001752 （カタラーゼ）
（２０）NM_017790 （Gタンパク質シグナル3型制御タンパク質）
（２１）NM_021149 （コアクトシン様タンパク質1型）
（２２）NM_0010149 （T細胞活性化リンカータンパク質）
（２３）NM_001015052 （N-メチルプリン型DNAグリコシラーゼ）
（２４）NM_002073 （グアニンヌクレオチド結合タンパク質アルファz型サブユニット）
（２５）NM_004657 （血清欠乏反応タンパク質）
（２６）NM_006763 （B細胞転座遺伝子2型、非増殖性）
（２７）NM_000442 （血小板及び内皮細胞接着分子）
（２８）NM_002957 （レチノイドX受容体）
（２９）NM_001617 （アデューシン2型）
（３０）NM_000576 （インターロイキン1型β）
（３１）NM_002965 （S100カルシウム結合タンパク質A9）
（３２）NM_003356 （脱共役タンパク質3型）
（３３）NM_00101588 （TSC22領域ファミリー3型）
（３４）NM_001004431 （メテオリン及びグリア細胞分化制御様タンパク質）
（３５）NM_002026 （フィブロネクチン1型）
（３６）NM_001063 （トランスフェリン）
（３７）NM_001928 （補体成分D）
（３８）NM_001079846 （CREB結合タンパク質）
（３９）NM_001031812 （カゼインキナーゼ1型γ3型）
（４０）NM_172033 （プレクストリン相同領域保存ファミリーBタンパク質1型）
（４１）XM_238467 （推定ISG12(b)タンパク質）
（４２）AA944679 （転写部位）
（４３）AW916109 （転写部位）
（４４）NM_020103 （Ly6-C抗原）
（４５）XM_342474 （RIKEN cDNA A930018P22類似タンパク質）
（４６）BG666719 （cDNAクローンDRABTH12型）
（４７）NM_001004202 （ケモカインリガンド6型）
（e）核酸又は特異抗体が固相担体に結合されている、（ｄ）に記載のキット。 (1) AK_311856 (Epithelial fatty acid binding protein type 5)
(2) NM_024722 (Acyl coenzyme A binding domain conserved protein type 4)
(3) NM_012434 (solute transporter family type 17)
(4) NM_003258 (Thymidine kinase type 1)
(5) NM_015932 (Chromosome 13 translation region-like protein)
(6) NM_012068 (Transcriptional activator type 5)
(7) NM_024901 (DENN / MADD region protein 2D)
(8) NM_004851 (Napsin A aspartate peptidase)
(9) NM_017327 (Guanine nucleotide binding protein alpha 0 type)
(10) NM_016410 (chromatin modified protein type 5)
(11) NM_001300 (Kruppel-like transcription factor type 6)
(12) NM_006208 (Ectonucleotide pyrophosphatase / phosphodiesterase type 1)
(13) NM_001398 (Peroxisome-expressed enoyl coenzyme A hydrolase 1)
(14) NM_013446 (Mkrn1-like protein)
(15) NM_000063 (Complement component type 2)
(16) NM_000371 (transthyretin-like protein)
(17) NM_006000 (Tubulin alpha type 1)
(18) NM_016641 (membrane interacting protein RGS16)
(19) NM_001752 (catalase)
(20) NM_017790 (G protein signal type 3 regulatory protein)
(21) NM_021149 (coactocin-like protein type 1)
(22) NM_0010149 (T cell activation linker protein)
(23) NM_001015052 (N-methylpurine type DNA glycosylase)
(24) NM_002073 (Guanine nucleotide binding protein alpha z-type subunit)
(25) NM_004657 (serum deficiency reaction protein)
(26) NM_006763 (B cell translocation gene type 2, nonproliferative)
(27) NM_000442 (platelet and endothelial cell adhesion molecule)
(28) NM_002957 (Retinoid X receptor)
(29) NM_001617 (Adducin type 2)
(30) NM_000576 (Interleukin type 1 β)
(31) NM_002965 (S100 calcium binding protein A9)
(32) NM_003356 (Uncoupled protein type 3)
(33) NM_00101588 (TSC22 region family type 3)
(34) NM_001004431 (Meteolin and glial differentiation control-like protein)
(35) NM_002026 (Fibronectin type 1)
(36) NM_001063 (transferrin)
(37) NM_001928 (Complement component D)
(38) NM_001079846 (CREB binding protein)
(39) NM_001031812 (casein kinase type 1 γ3 type)
(40) NM_172033 (Plextrin homologous region conserving family B protein type 1)
(41) XM_238467 (Presumed ISG12 (b) protein)
(42) AA944679 (Transcription site)
(43) AW916109 (transcription site)
(44) NM_020103 (Ly6-C antigen)
(45) XM_342474 (RIKEN cDNA A930018P22-like protein)
(46) BG666719 (cDNA clone DRABTH12 type)
(47) NM_001004202 (Chemokine ligand type 6)
(E) The kit according to (d), wherein the nucleic acid or specific antibody is bound to a solid phase carrier.

（ｆ）非ヒト動物に候補物質を投与する工程（a）、及び該動物の白血球における下記（１）〜（３９）から選ばれるGenBankアクセッション番号で特定されるヒト遺伝子に対応する当該非ヒト動物遺伝子、又は下記（４０）〜（４７）から選ばれるGenBankアクセッション番号で特定されるラット遺伝子に対応する非ヒト動物遺伝子及び／又は該遺伝子のいずれかにコードされる非ヒト動物タンパク質の発現量を測定する工程を含む、2型糖尿病の予防薬及び／又は治療薬のスクリーニング法。 (F) a non-human animal corresponding to a human gene identified by the step (a) of administering a candidate substance to a non-human animal, and a GenBank accession number selected from the following (1) to (39) in the leukocytes of the animal: Expression of a non-human animal gene corresponding to an animal gene or a rat gene specified by a GenBank accession number selected from the following (40) to (47) and / or a non-human animal protein encoded by any of the genes A method for screening a preventive and / or therapeutic agent for type 2 diabetes, comprising a step of measuring the amount.

（１）AK_311856 （上皮発現脂肪酸結合タンパク質5型）
（２）NM_024722 （アシル補酵素A結合領域保存タンパク質4型）
（３）NM_012434 （溶質輸送体ファミリー17型）
（４）NM_003258 （チミジンキナーゼ1型）
（５）NM_015932 （染色体13番翻訳領域類似タンパク質）
（６）NM_012068 （転写活性化因子5型）
（７）NM_024901 （DENN/MADD領域タンパク質2D）
（８）NM_004851 （Napsin Aアスパラギン酸ぺプチダ−ゼ）
（９）NM_017327 （グアニンヌクレオチド結合タンパク質アルファ0型）
（１０）NM_016410 （クロマチン修飾タンパク質5型）
（１１）NM_001300 （Kruppel様転写因子6型）
（１２）NM_006208 （エクトヌクレオチドピロフォスファターゼ/フォスフォジエステラーゼ1型）
（１３）NM_001398 （ペルオキシソーム発現エノイル補酵素A加水酵素1）
（１４）NM_013446 （Mkrn1類似タンパク質）
（１５）NM_000063 （補体成分2型）
（１６）NM_000371 （トランスサイレチン類似タンパク質）
（１７）NM_006000 （チューブリンアルファ1型）
（１８）NM_016641 （膜相互作用タンパク質RGS16）
（１９）NM_001752 （カタラーゼ）
（２０）NM_017790 （Gタンパク質シグナル3型制御タンパク質）
（２１）NM_021149 （コアクトシン様タンパク質1型）
（２２）NM_0010149 （T細胞活性化リンカータンパク質）
（２３）NM_001015052 （N-メチルプリン型DNAグリコシラーゼ）
（２４）NM_002073 （グアニンヌクレオチド結合タンパク質アルファz型サブユニット）
（２５）NM_004657 （血清欠乏反応タンパク質）
（２６）NM_006763 （B細胞転座遺伝子2型、非増殖性）
（２７）NM_000442 （血小板及び内皮細胞接着分子）
（２８）NM_002957 （レチノイドX受容体）
（２９）NM_001617 （アデューシン2型）
（３０）NM_000576 （インターロイキン1型β）
（３１）NM_002965 （S100カルシウム結合タンパク質A9）
（３２）NM_003356 （脱共役タンパク質3型）
（３３）NM_00101588 （TSC22領域ファミリー3型）
（３４）NM_001004431 （メテオリン及びグリア細胞分化制御様タンパク質）
（３５）NM_002026 （フィブロネクチン1型）
（３６）NM_001063 （トランスフェリン）
（３７）NM_001928 （補体成分D）
（３８）NM_001079846 （CREB結合タンパク質）
（３９）NM_001031812 （カゼインキナーゼ1型γ3型）
（４０）NM_172033 （プレクストリン相同領域保存ファミリーBタンパク質1型）
（４１）XM_238467 （推定ISG12(b)タンパク質）
（４２）AA944679 （転写部位）
（４３）AW916109 （転写部位）
（４４）NM_020103 （Ly6-C抗原）
（４５）XM_342474 （RIKEN cDNA A930018P22類似タンパク質）
（４６）BG666719 （cDNAクローンDRABTH12型）
（４７）NM_001004202 （ケモカインリガンド6型）
（ｇ）非ヒト動物が2型糖尿病モデル非ヒト動物である、（ｆ）に記載のスクリーニング方法。 (1) AK_311856 (Epithelial fatty acid binding protein type 5)
(2) NM_024722 (Acyl coenzyme A binding domain conserved protein type 4)
(3) NM_012434 (solute transporter family type 17)
(4) NM_003258 (Thymidine kinase type 1)
(5) NM_015932 (Chromosome 13 translation region-like protein)
(6) NM_012068 (Transcriptional activator type 5)
(7) NM_024901 (DENN / MADD region protein 2D)
(8) NM_004851 (Napsin A aspartate peptidase)
(9) NM_017327 (Guanine nucleotide binding protein alpha 0 type)
(10) NM_016410 (chromatin modified protein type 5)
(11) NM_001300 (Kruppel-like transcription factor type 6)
(12) NM_006208 (Ectonucleotide pyrophosphatase / phosphodiesterase type 1)
(13) NM_001398 (Peroxisome-expressed enoyl coenzyme A hydrolase 1)
(14) NM_013446 (Mkrn1-like protein)
(15) NM_000063 (Complement component type 2)
(16) NM_000371 (transthyretin-like protein)
(17) NM_006000 (Tubulin alpha type 1)
(18) NM_016641 (membrane interacting protein RGS16)
(19) NM_001752 (catalase)
(20) NM_017790 (G protein signal type 3 regulatory protein)
(21) NM_021149 (coactocin-like protein type 1)
(22) NM_0010149 (T cell activation linker protein)
(23) NM_001015052 (N-methylpurine type DNA glycosylase)
(24) NM_002073 (Guanine nucleotide binding protein alpha z-type subunit)
(25) NM_004657 (serum deficiency reaction protein)
(26) NM_006763 (B cell translocation gene type 2, nonproliferative)
(27) NM_000442 (platelet and endothelial cell adhesion molecule)
(28) NM_002957 (Retinoid X receptor)
(29) NM_001617 (Adducin type 2)
(30) NM_000576 (Interleukin type 1 β)
(31) NM_002965 (S100 calcium binding protein A9)
(32) NM_003356 (Uncoupled protein type 3)
(33) NM_00101588 (TSC22 region family type 3)
(34) NM_001004431 (Meteolin and glial differentiation control-like protein)
(35) NM_002026 (Fibronectin type 1)
(36) NM_001063 (transferrin)
(37) NM_001928 (Complement component D)
(38) NM_001079846 (CREB binding protein)
(39) NM_001031812 (casein kinase type 1 γ3 type)
(40) NM_172033 (Plextrin homologous region conserving family B protein type 1)
(41) XM_238467 (Presumed ISG12 (b) protein)
(42) AA944679 (Transcription site)
(43) AW916109 (transcription site)
(44) NM_020103 (Ly6-C antigen)
(45) XM_342474 (RIKEN cDNA A930018P22-like protein)
(46) BG666719 (cDNA clone DRABTH12 type)
(47) NM_001004202 (Chemokine ligand type 6)
(G) The screening method according to (f), wherein the non-human animal is a type 2 diabetes model non-human animal.

（ｈ）前記（１）〜（３９）から選ばれるGenBankアクセッション番号で特定されるヒト遺伝子に対応する非ヒト遺伝子、又は前記（４０）〜（４７）から選ばれるGenBankアクセッション番号で特定されるラット遺伝子に対応する非ヒト遺伝子の塩基配列にストリンジェントな条件下でハイブリダイズする核酸及び／又は該遺伝子のいずれかにコードされる非ヒト動物タンパク質と結合する特異抗体若しくはその断片を含む、（ｆ）に記載のスクリーニング用キット。 (H) a non-human gene corresponding to a human gene identified by a GenBank accession number selected from (1) to (39), or a GenBank accession number selected from (40) to (47) A nucleic acid that hybridizes under stringent conditions to a nucleotide sequence of a non-human gene corresponding to a rat gene and / or a specific antibody or fragment thereof that binds to a non-human animal protein encoded by any of the genes, The screening kit according to (f).

（i）核酸又は特異抗体が固相担体に結合されている、（ｈ）に記載のキット。 (I) The kit according to (h), wherein a nucleic acid or a specific antibody is bound to a solid phase carrier.

本発明によって提供される2型糖尿病診断剤は、既に報告されている2型糖尿病の診断に利用可能な遺伝子に代わる、あるいはこれらにさらに加わる新たな2型糖尿病関連遺伝子を解析対象とすることにより、被験者に対して2型糖尿病又は将来2型糖尿病となり得るとの判定の確度を、より高めることができる。   The diagnostic agent for type 2 diabetes provided by the present invention is an alternative to a gene that can be used for the diagnosis of type 2 diabetes that has already been reported, or a new type 2 diabetes-related gene that is added to these. The accuracy of the determination that the subject can have type 2 diabetes or type 2 diabetes in the future can be further increased.

本発明は、2型糖尿病の診断に利用可能な、下記（１）〜（３９）から選ばれるGenBankアクセッション番号で特定されるヒト遺伝子、又は下記（４０）〜（４７）から選ばれるGenBankアクセッション番号で特定されるラット遺伝子に対応するヒト遺伝子の少なくとも1種類以上の塩基配列にストリンジェントな条件下でハイブリダイズする核酸及び／又は該遺伝子のいずれかにコードされるヒトタンパク質と結合する特異抗体若しくはその断片からなる、2型糖尿病診断剤に関する。   The present invention relates to a human gene identified by a GenBank accession number selected from the following (1) to (39) that can be used for diagnosis of type 2 diabetes, or a GenBank accession selected from the following (40) to (47): Specificity that binds to a nucleic acid that hybridizes under stringent conditions to at least one or more types of base sequences of a human gene corresponding to the rat gene specified by the session number and / or a human protein encoded by any of the genes The present invention relates to a diagnostic agent for type 2 diabetes, comprising an antibody or a fragment thereof.

（１）AK_311856 （上皮発現脂肪酸結合タンパク質5型）
（２）NM_024722 （アシル補酵素A結合領域保存タンパク質4型）
（３）NM_012434 （溶質輸送体ファミリー17型）
（４）NM_003258 （チミジンキナーゼ1型）
（５）NM_015932 （染色体13番翻訳領域類似タンパク質）
（６）NM_012068 （転写活性化因子5型）
（７）NM_024901 （DENN/MADD領域タンパク質2D）
（８）NM_004851 （Napsin Aアスパラギン酸ぺプチダ−ゼ）
（９）NM_017327 （グアニンヌクレオチド結合タンパク質アルファ0型）
（１０）NM_016410 （クロマチン修飾タンパク質5型）
（１１）NM_001300 （Kruppel様転写因子6型）
（１２）NM_006208 （エクトヌクレオチドピロフォスファターゼ/フォスフォジエステラーゼ1型）
（１３）NM_001398 （ペルオキシソーム発現エノイル補酵素A加水酵素1）
（１４）NM_013446 （Mkrn1類似タンパク質）
（１５）NM_000063 （補体成分2型）
（１６）NM_000371 （トランスサイレチン類似タンパク質）
（１７）NM_006000 （チューブリンアルファ1型）
（１８）NM_016641 （膜相互作用タンパク質RGS16）
（１９）NM_001752 （カタラーゼ）
（２０）NM_017790 （Gタンパク質シグナル3型制御タンパク質）
（２１）NM_021149 （コアクトシン様タンパク質1型）
（２２）NM_0010149 （T細胞活性化リンカータンパク質）
（２３）NM_001015052 （N-メチルプリン型DNAグリコシラーゼ）
（２４）NM_002073 （グアニンヌクレオチド結合タンパク質アルファz型サブユニット）
（２５）NM_004657 （血清欠乏反応タンパク質）
（２６）NM_006763 （B細胞転座遺伝子2型、非増殖性）
（２７）NM_000442 （血小板及び内皮細胞接着分子）
（２８）NM_002957 （レチノイドX受容体）
（２９）NM_001617 （アデューシン2型）
（３０）NM_000576 （インターロイキン1型β）
（３１）NM_002965 （S100カルシウム結合タンパク質A9）
（３２）NM_003356 （脱共役タンパク質3型）
（３３）NM_00101588 （TSC22領域ファミリー3型）
（３４）NM_001004431 （メテオリン及びグリア細胞分化制御様タンパク質）
（３５）NM_002026 （フィブロネクチン1型）
（３６）NM_001063 （トランスフェリン）
（３７）NM_001928 （補体成分D）
（３８）NM_001079846 （CREB結合タンパク質）
（３９）NM_001031812 （カゼインキナーゼ1型γ3型）
（４０）NM_172033 （プレクストリン相同領域保存ファミリーBタンパク質1型）
（４１）XM_238467 （推定ISG12(b)タンパク質）
（４２）AA944679 （転写部位）
（４３）AW916109 （転写部位）
（４４）NM_020103 （Ly6-C抗原）
（４５）XM_342474 （RIKEN cDNA A930018P22類似タンパク質）
（４６）BG666719 （cDNAクローンDRABTH12型）
（４７）NM_001004202 （ケモカインリガンド6型）
本発明における2型糖尿病の診断とは、被験者が既に2型糖尿病を発症していると判定すること、被験者が将来において2型糖尿病を発症する可能性がある（一般的に2型糖尿病の予備軍と称されている状態にある）と判定することの、いずれも意味するものである。この診断は、前記（１）〜（４７）の遺伝子の発現量、具体的には当該遺伝子からのmRNAの発現量又は当該何れかの遺伝子にコードされるタンパク質の発現量を、特に被験者から採取された白血球を対象にして測定し、健常人の白血球における当該遺伝子の発現量と比較したときの発現量の亢進又は低下を確認することによって行われる。 (1) AK_311856 (Epithelial fatty acid binding protein type 5)
(2) NM_024722 (Acyl coenzyme A binding domain conserved protein type 4)
(3) NM_012434 (solute transporter family type 17)
(4) NM_003258 (Thymidine kinase type 1)
(5) NM_015932 (Chromosome 13 translation region-like protein)
(6) NM_012068 (Transcriptional activator type 5)
(7) NM_024901 (DENN / MADD region protein 2D)
(8) NM_004851 (Napsin A aspartate peptidase)
(9) NM_017327 (Guanine nucleotide binding protein alpha 0 type)
(10) NM_016410 (chromatin modified protein type 5)
(11) NM_001300 (Kruppel-like transcription factor type 6)
(12) NM_006208 (Ectonucleotide pyrophosphatase / phosphodiesterase type 1)
(13) NM_001398 (Peroxisome-expressed enoyl coenzyme A hydrolase 1)
(14) NM_013446 (Mkrn1-like protein)
(15) NM_000063 (Complement component type 2)
(16) NM_000371 (transthyretin-like protein)
(17) NM_006000 (Tubulin alpha type 1)
(18) NM_016641 (membrane interacting protein RGS16)
(19) NM_001752 (catalase)
(20) NM_017790 (G protein signal type 3 regulatory protein)
(21) NM_021149 (coactocin-like protein type 1)
(22) NM_0010149 (T cell activation linker protein)
(23) NM_001015052 (N-methylpurine type DNA glycosylase)
(24) NM_002073 (Guanine nucleotide binding protein alpha z-type subunit)
(25) NM_004657 (serum deficiency reaction protein)
(26) NM_006763 (B cell translocation gene type 2, nonproliferative)
(27) NM_000442 (platelet and endothelial cell adhesion molecule)
(28) NM_002957 (Retinoid X receptor)
(29) NM_001617 (Adducin type 2)
(30) NM_000576 (Interleukin type 1 β)
(31) NM_002965 (S100 calcium binding protein A9)
(32) NM_003356 (Uncoupled protein type 3)
(33) NM_00101588 (TSC22 region family type 3)
(34) NM_001004431 (Meteolin and glial differentiation control-like protein)
(35) NM_002026 (Fibronectin type 1)
(36) NM_001063 (transferrin)
(37) NM_001928 (Complement component D)
(38) NM_001079846 (CREB binding protein)
(39) NM_001031812 (casein kinase type 1 γ3 type)
(40) NM_172033 (Plextrin homologous region conserving family B protein type 1)
(41) XM_238467 (Presumed ISG12 (b) protein)
(42) AA944679 (Transcription site)
(43) AW916109 (transcription site)
(44) NM_020103 (Ly6-C antigen)
(45) XM_342474 (RIKEN cDNA A930018P22-like protein)
(46) BG666719 (cDNA clone DRABTH12 type)
(47) NM_001004202 (Chemokine ligand type 6)
The diagnosis of type 2 diabetes in the present invention refers to determining that the subject has already developed type 2 diabetes, and the subject may develop type 2 diabetes in the future (generally a preliminary preparation for type 2 diabetes). It means that it is in the state called the military). In this diagnosis, the expression level of the genes (1) to (47), specifically, the expression level of mRNA from the gene or the expression level of the protein encoded by any of the genes is collected from the subject. The measurement is performed on the obtained leukocytes, and the increase or decrease in the expression level when compared with the expression level of the gene in the leukocytes of a healthy person is confirmed.

後の実施例で述べるように、前記（１）〜（４７）の遺伝子は、２型糖尿病モデル非ヒト動物であるOLETF（Otsuka Long-Evans Tokushima Fatty）ラット、を用いた発明者らの実験によって、6週齢（2型糖尿病発症前）の白血球と肝臓、白血球と脂肪組織、白血球と骨格筋のいずれかの組み合わせの両組織において、コントロールラット、LETO（Long-Evans Tokushima）ラット、に対して1.5倍以上の発現変動を示すことが確認された遺伝子に対応するヒト遺伝子である。前記（１）〜（４７）の遺伝子は、絶食負荷をかけたOLETFラットにおいて絶食負荷をかけたLETOラットに比べて、上記の発現変動が確認されたラット遺伝子に対応するヒト遺伝子である。   As will be described later in Examples, the genes of the above (1) to (47) are obtained by experiments conducted by the inventors using an OLETF (Otsuka Long-Evans Tokushima Fatty) rat, which is a type 2 diabetes model non-human animal. , 6 weeks old (before the onset of type 2 diabetes) leukocytes and liver, leukocytes and adipose tissue, leukocytes and skeletal muscle in both tissues, control rats, LETO (Long-Evans Tokushima) rats, It is a human gene corresponding to a gene that has been confirmed to exhibit an expression fluctuation of 1.5 times or more. The genes (1) to (47) are human genes corresponding to the rat genes in which the above-mentioned expression variation was confirmed in OLET rats subjected to a fasting load as compared to LETO rats subjected to a fasting load.

従って、被験者から採取された血液に含まれる白血球における前記（１）〜（３９）から選ばれるGenBankアクセッション番号で特定されるヒト遺伝子、又は前期（４０）〜（４７）から選ばれるGenBankアクセッション番号で特定されるラット遺伝子に対応するヒト遺伝子の少なくとも一つの遺伝子の発現量（mRNAの発現量及び／又は該遺伝子の何れかにコードされるヒトタンパク質の発現量）を測定し、これを健常人の白血球における当該遺伝子の発現量と比較して、その発現量が一定値異常に亢進或いは低下していることを確認することによって、当該被験者が2型糖尿病を発症しているかどうか、あるいはその被験者が未だ2型糖尿病を発症していない場合でも、将来的に2型糖尿病を発症する可能性があるかどうかを判定することができる。また被験者が既に糖尿病と疑われる初期症状、例えば多飲、多尿、夜尿等の症状を既に示している場合には、本発明によって提供される情報と併せて、2型糖尿病であるとの判定を適切に下すことが可能となる。なお、健常者における前記（１）〜（３９）から選ばれるGenBankアクセッション番号で特定されるヒト遺伝子、又は下記（４０）〜（４７）から選ばれるGenBankアクセッション番号で特定されるラット遺伝子に対応するヒト遺伝子の発現量は、複数の健常者（健常者群）について測定し、その値の分布から正常範囲を設定しておくことが望ましい。特に、健常者群は、複数の健常者を任意に選別して構成することができるが、被験者と同年齢又は同世代である健常者から構成することが好ましい。   Therefore, the human gene identified by the GenBank accession number selected from the above (1) to (39) in the leukocytes contained in the blood collected from the subject, or the GenBank accession selected from the previous period (40) to (47) Measure the expression level of at least one of the human genes corresponding to the rat gene identified by the number (mRNA expression level and / or the expression level of the human protein encoded by any of these genes) Whether or not the subject has developed type 2 diabetes by confirming that the expression level is abnormally increased or decreased by a certain level compared to the expression level of the gene in human leukocytes, or Even if the subject has not yet developed type 2 diabetes, it can be determined whether there is a possibility of developing type 2 diabetes in the future. In addition, if the subject has already shown symptoms such as diabetes, polyuria, nocturnal urinary symptoms already suspected of being diabetic, the information provided by the present invention is combined with type 2 diabetes. Judgment can be made appropriately. In addition, the human gene specified by the GenBank accession number selected from the above (1) to (39) in the healthy person, or the rat gene specified by the GenBank accession number selected from the following (40) to (47) The expression level of the corresponding human gene is preferably measured for a plurality of healthy subjects (a group of healthy subjects), and a normal range is preferably set based on the distribution of the values. In particular, the group of healthy persons can be configured by arbitrarily selecting a plurality of healthy persons, but is preferably composed of healthy persons of the same age or generation as the subject.

一般に、mRNAの発現量の測定は、公知の遺伝子解析技術、例えば、ハイブリダイゼーション技術（ノーザンハイブリダイゼーション法、ドットプロット法、DNAマイクロアレイ法等）、遺伝子増幅技術（RT-PCR等）等により、行うことができる。従って本発明の2型糖尿病診断剤である核酸は、前記（１）〜（３９）から選ばれるGenBankアクセッション番号で特定されるヒト遺伝子、又は下記（４０）〜（４７）から選ばれるGenBankアクセッション番号で特定されるラット遺伝子に対応するヒト遺伝子の塩基配列とストリンジェントな条件下でハイブリダイズする限り、上記の遺伝子解析技術で利用可能な如何なる形態にあってもよい。例えば、本発明における核酸は、プローブ核酸又はプライマー核酸でもあり得る。   In general, the expression level of mRNA is measured by a known gene analysis technique such as a hybridization technique (Northern hybridization method, dot plot method, DNA microarray method, etc.), gene amplification technique (RT-PCR, etc.), etc. be able to. Therefore, the nucleic acid that is a diagnostic agent for type 2 diabetes of the present invention is a human gene identified by a GenBank accession number selected from the above (1) to (39), or a GenBank accession selected from the following (40) to (47): As long as it hybridizes under stringent conditions with the base sequence of the human gene corresponding to the rat gene specified by the session number, it may be in any form that can be used in the above gene analysis technique. For example, the nucleic acid in the present invention may be a probe nucleic acid or a primer nucleic acid.

本発明の2型糖尿病診断剤である核酸にはDNA及びRNAの両者が含まれる。本発明における核酸は、好ましくはオリゴヌクレオチド又はポリヌクレオチドである。オリゴヌクレオチドの塩基長は通常15〜100塩基、好ましくは18〜40塩基であり、ポリヌクレオチドの塩基長は通常200〜3000塩基、好ましくは500〜1000塩基である。また、本発明における核酸を構成するヌクレオチドは、デオキシリボヌクレオチド及びリボヌクレオチド、あるいは非天然型ヌクレオチドのいずれであってもよい。   The nucleic acid that is the diagnostic agent for type 2 diabetes of the present invention includes both DNA and RNA. The nucleic acid in the present invention is preferably an oligonucleotide or a polynucleotide. The base length of the oligonucleotide is usually 15 to 100 bases, preferably 18 to 40 bases, and the base length of the polynucleotide is usually 200 to 3000 bases, preferably 500 to 1000 bases. In addition, nucleotides constituting the nucleic acid in the present invention may be deoxyribonucleotides and ribonucleotides, or non-natural nucleotides.

前記（１）〜（３９）から選ばれるGenBankアクセッション番号で特定されるヒト遺伝子、又は下記（４０）〜（４７）から選ばれるGenBankアクセッション番号で特定されるラット遺伝子に対応するヒト遺伝子の塩基配列にストリンジェントな条件下でハイブリダイズする核酸の塩基配列は、前記（１）〜（３９）から選ばれるGenBankアクセッション番号で特定されるヒト遺伝子、又は下記（４０）〜（４７）から選ばれるGenBankアクセッション番号で特定されるラット遺伝子に対応するヒト遺伝子の各塩基配列に基づいて設計することができる。例えば、前記（１）〜（３９）から選ばれるGenBankアクセッション番号で特定されるヒト遺伝子、又は下記（４０）〜（４７）から選ばれるGenBankアクセッション番号で特定されるラット遺伝子に対応するヒト遺伝子の内、タンパク質をコードする遺伝子については、CDSを含む領域を選択し、当該領域にストリンジェントな条件化でハイブリダイズするように、オリゴヌクレオチド又はポリヌクレオチドの塩基配列を設計すればよい。また、CDS領域の5’末端側又は3’末端側の領域に、あるいは、CDS領域からその5’末端側又は3’末端側の領域にストリンジェントな条件化でハイブリダイズするように塩基配列を設計することもできる。   A human gene identified by a GenBank accession number selected from the above (1) to (39), or a human gene corresponding to a rat gene identified by a GenBank accession number selected from the following (40) to (47): The nucleotide sequence of the nucleic acid that hybridizes to the nucleotide sequence under stringent conditions is the human gene specified by the GenBank accession number selected from the above (1) to (39), or the following (40) to (47) It can be designed based on each nucleotide sequence of the human gene corresponding to the rat gene identified by the selected GenBank accession number. For example, a human gene identified by a GenBank accession number selected from the above (1) to (39) or a human gene corresponding to a rat gene identified by a GenBank accession number selected from the following (40) to (47) Among genes, for a gene encoding a protein, an oligonucleotide or polynucleotide base sequence may be designed so as to select a region containing CDS and hybridize to the region under stringent conditions. In addition, the nucleotide sequence is hybridized under stringent conditions to the 5 'end side or 3' end side region of the CDS region or from the CDS region to the 5 'end side or 3' end side region. It can also be designed.

オリゴヌクレオチド又はポリヌクレオチドをプライマーとして利用する場合には、本発明における核酸の5’末端側に制限酵素認識配列やタグ等を付加することができる。また、プローブとして利用する場合には、蛍光色素、ラジオアイソトープ等の標識を付加することができる。   When an oligonucleotide or polynucleotide is used as a primer, a restriction enzyme recognition sequence, a tag or the like can be added to the 5 'end of the nucleic acid in the present invention. Moreover, when using as a probe, labels, such as a fluorescent dye and a radioisotope, can be added.

本発明の2型糖尿病診断剤の好ましい形態は、前記核酸が固相担体上に結合（固相化）されている形態である。具体的には、前記（１）〜（３９）から選ばれるGenBankアクセッション番号で特定されるヒト遺伝子、又は下記（４０）〜（４７）から選ばれるGenBankアクセッション番号で特定されるラット遺伝子に対応するヒト遺伝子の塩基配列にストリンジェントな条件下でハイブリダイズする核酸を含むDNAチップ又はDNAマイクロアレイの形態が好ましい。DNAチップ又はDNAマイクロアレイは、遺伝子発現変動を確認する方法として、検出しようとする複数種の遺伝子の塩基配列を有する核酸を適当なキャリアに固相化して使用する技術である。本発明の2型糖尿病診断剤も、例えば「DNAマイクロアレイ実践マニュアル」（林崎良英監修、2000年、羊土社発行）に記載された方法によって、（１）〜（４７）の遺伝子の塩基配列にストリンジェントな条件化でハイブリダイズする核酸をDNAチップ、あるいはDNAマイクロアレイの形態に加工し、使用することができる。   A preferred form of the diagnostic agent for type 2 diabetes of the present invention is a form in which the nucleic acid is bound (solid phase) on a solid phase carrier. Specifically, a human gene identified by a GenBank accession number selected from the above (1) to (39), or a rat gene identified by a GenBank accession number selected from the following (40) to (47) The form of a DNA chip or DNA microarray containing nucleic acids that hybridize under stringent conditions to the base sequence of the corresponding human gene is preferred. The DNA chip or DNA microarray is a technique for solidifying a nucleic acid having a plurality of types of gene base sequences to be detected on an appropriate carrier as a method for confirming gene expression fluctuation. The diagnostic agent for type 2 diabetes of the present invention can also be obtained by using the method described in “DNA Microarray Practice Manual” (supervised by Yoshihide Hayashizaki, published by Yodosha Co., Ltd.) in (1) to (47). Nucleic acids that hybridize under stringent conditions can be processed into a DNA chip or DNA microarray form and used.

なお、本発明にいうストリンジェントな条件下とは、前記核酸が前記（１）〜（３９）から選ばれるGenBankアクセッション番号で特定されるヒト遺伝子、又は下記（４０）〜（４７）から選ばれるGenBankアクセッション番号で特定されるラット遺伝子に対応するヒト遺伝子の塩基配列に特異的にハイブリダイズし、前記（１）〜（３９）から選ばれるGenBankアクセッション番号で特定されるヒト遺伝子、又は下記（４０）〜（４７）から選ばれるGenBankアクセッション番号で特定されるラット遺伝子に対応するヒト遺伝子以外の塩基配列にはクロスハイブリしない程度であればよく、その条件は、利用する遺伝子解析技術、例えば、ノーザンハイブリダイゼーション法、ドットブロット法、DNAマイクロアレイ法等によって適宜変更することが望ましい。しかしながら、その様な条件は、個々の解析技術に応じて当業者の通常の能力の範囲内で設定することが可能である。例えば、メンブレンを用いたサザンハイブリダイゼーションでは、0.1%[w/v] SDSを含む0.5×SSC溶液（1×SSCは0.15M NaCl、0.015M クエン酸ナトリウム）を用いて50℃でハイブリダイズさせた核酸を含むメンブレンを洗浄すると言う条件などを挙げることができる。   The stringent condition referred to in the present invention means that the nucleic acid is a human gene identified by a GenBank accession number selected from the above (1) to (39), or selected from the following (40) to (47): A human gene that specifically hybridizes to a nucleotide sequence of a human gene corresponding to a rat gene specified by a GenBank accession number, and that is specified by a GenBank accession number selected from (1) to (39) above, or It is sufficient that the base sequence other than the human gene corresponding to the rat gene identified by the GenBank accession number selected from the following (40) to (47) is not cross-hybridized, and the condition is the gene analysis technique to be used For example, it is desirable to change appropriately by Northern hybridization method, dot blot method, DNA microarray method, etc. Yes. However, such conditions can be set within the normal capabilities of those skilled in the art depending on the particular analysis technique. For example, in Southern hybridization using a membrane, hybridization was performed at 50 ° C. using a 0.5 × SSC solution containing 0.1% [w / v] SDS (1 × SSC was 0.15M NaCl, 0.015M sodium citrate). A condition that the membrane containing the nucleic acid is washed can be exemplified.

本発明の2型糖尿病診断剤を利用したmRNAの発現量の測定法として、RT-PCRを利用してもよい。具体的には、白血球から抽出した全RNAを基に合成したcDNAを鋳型とし、設計されたプライマーセットを用いてPCRを行い、PCR増幅断片を定量することによって、前記（a）〜（ｃ）のタンパク質をコードするmRNAの発現量を測定することができる。この際、PCRは、PCR増幅断片生成量が初期鋳型cDNAを反映するような条件（例えば、PCR増幅断片が指数対数的に増加するPCRサイクル数）で行うことが望ましい。   RT-PCR may be used as a method for measuring the expression level of mRNA using the diagnostic agent for type 2 diabetes of the present invention. Specifically, the cDNA synthesized based on the total RNA extracted from leukocytes is used as a template, PCR is performed using the designed primer set, and the PCR-amplified fragments are quantified, whereby the above (a) to (c) The expression level of mRNA encoding the protein can be measured. At this time, it is desirable to perform PCR under conditions such that the amount of PCR amplified fragments generated reflects the initial template cDNA (for example, the number of PCR cycles in which PCR amplified fragments increase exponentially).

PCR増幅断片の定量方法は特に限定されるものではなく、例えばラジオアイソトープ（RI）を用いた定量方法、蛍光色素を用いた定量方法その他の一般的な方法を利用すればよい。RIを用いた定量方法としては、例えば、（i）反応役にRI標識したヌクレオチド（例えば³²P標識されたdCTP等）を基質として加えておき、PCR増幅断片に取り込ませてPCR増幅断片をRI標識し、PCR増幅断片を電気泳動等で分離した後、放射活性を測定してPCR増幅断片を定量する方法、（ii）RI標識したプライマーを用いることによりPCR増幅断片をRI標識し、PCR増幅断片を電気泳動等で分離した後、放射活性を測定してPCR増幅断片を定量する方法、（iii）PCR増幅断片を電気泳動した後、メンブランにブロッティングし、RI標識したプローブをハイブリダイズさせ、放射活性を測定してPCR増幅断片を定量する方法等が挙げられる。放射活性は、例えば、液体シンチレーションカウンター、X線フィルム、イメージングプレート等を用いて測定することができる。 The PCR amplification fragment quantification method is not particularly limited, and for example, a quantification method using a radioisotope (RI), a quantification method using a fluorescent dye, or other general methods may be used. As a quantification method using RI, for example, (i) a RI-labeled nucleotide (for example, ³² P-labeled dCTP) is added as a substrate to the reaction role, and the PCR-amplified fragment is incorporated into a PCR-amplified fragment. After labeling and separating PCR amplified fragments by electrophoresis etc., radioactivity is measured and the PCR amplified fragments are quantified. (Ii) PCR amplified fragments are RI labeled by using RI labeled primers, and PCR amplification After separating the fragments by electrophoresis or the like, the method of quantifying the PCR amplified fragments by measuring radioactivity, (iii) after electrophoresis of the PCR amplified fragments, blotting on the membrane, hybridizing the RI-labeled probe, Examples include a method of quantifying a PCR amplified fragment by measuring radioactivity. Radioactivity can be measured using, for example, a liquid scintillation counter, an X-ray film, an imaging plate, or the like.

蛍光色素を用いた定量方法としては、（i）二本鎖DNAにインターカレーとする蛍光色素（例えば、エチジウムブロマイド（EtBr）、SYBR GreenI、PicoGreen等）を用いてPCR増幅断片を染色し、励起光の照射によって発せられる蛍光強度を測定してPCR増幅断片を定量する方法、（ii）蛍光色素で標識したプライマーを用いることによりPCR増幅断片を蛍光色素で標識し、PCR増幅断片を電気泳動等で分離した後、蛍光強度を測定してPCR増幅断片を定量する方法等が挙げられる。蛍光強度は、例えば、CCDカメラ、蛍光スキャナー、分光蛍光光度計等を用いて測定することができる。   Quantification methods using fluorescent dyes include: (i) Staining PCR amplification fragments using fluorescent dyes (eg, ethidium bromide (EtBr), SYBR GreenI, PicoGreen, etc.) that intercalate with double-stranded DNA, and excitation Method of quantifying PCR amplified fragments by measuring fluorescence intensity emitted by light irradiation, (ii) Labeling PCR amplified fragments with fluorescent dyes using primers labeled with fluorescent dyes, electrophoresis of PCR amplified fragments, etc. And a method of quantifying the PCR amplified fragment by measuring the fluorescence intensity. The fluorescence intensity can be measured using, for example, a CCD camera, a fluorescence scanner, a spectrofluorometer, or the like.

RT-PCRを利用する場合には、例えばABI PRISM 7700 (Applied Biosystems社)等の市販の装置を利用して、遺伝子増幅過程をリアルタイムでモニタリングすることにより、PCR増幅断片のより定量的な解析を行うことができる。   When using RT-PCR, for example, using a commercially available device such as ABI PRISM 7700 (Applied Biosystems), the gene amplification process can be monitored in real time for more quantitative analysis of PCR-amplified fragments. It can be carried out.

前記（１）〜（３９）から選ばれるGenBankアクセッション番号で特定されるヒト遺伝子、又は下記（４０）〜（４７）から選ばれるGenBankアクセッション番号で特定されるラット遺伝子に対応するヒト遺伝子の発現量の測定値は、発現レベルが大きく変動しない遺伝子（例えば、β−アクチン遺伝子、GAPDH遺伝子等のハウスキーピング遺伝子）の発現量の測定値に基づいて補正することが好ましい。   A human gene identified by a GenBank accession number selected from the above (1) to (39), or a human gene corresponding to a rat gene identified by a GenBank accession number selected from the following (40) to (47): The measurement value of the expression level is preferably corrected based on the measurement value of the expression level of a gene whose expression level does not vary greatly (for example, a housekeeping gene such as β-actin gene, GAPDH gene, etc.).

一般に、タンパク質の発現量の測定は、公知の免疫学的タンパク質解析技術、例えば、タンパク質に結合する抗体又はその断片を利用したウエスタンブロッッティング法、免疫沈降法、ELIZA等を利用して行うことができる。従って本発明の２型糖尿病診断剤である抗体若しくはその断片は、前記（１）〜（３９）から選ばれるGenBankアクセッション番号で特定されるヒト遺伝子、又は前記（４０）〜（４７）から選ばれるGenBankアクセッション番号で特定されるラット遺伝子に対応するヒト遺伝子の何れかにコードされるタンパク質と特異的に結合することができる限り、上記の免疫学的タンパク質解析技術で利用可能ないかなる形態にあってもよい。例えば、本発明における抗体若しくはその断片は、ポリクローナル抗体でも、モノクローナル抗体でもよく、前記タンパク質の結合能を有する断片であってもよい。断片としては、例えば、Fab断片、F(ab)’2断片、単鎖抗体（scFv）等が挙げられる。   In general, protein expression levels should be measured using known immunological protein analysis techniques, such as Western blotting, immunoprecipitation, ELIZA, etc. using antibodies that bind to proteins or fragments thereof. Can do. Therefore, the antibody or fragment thereof which is the diagnostic agent for type 2 diabetes of the present invention is selected from the human gene identified by the GenBank accession number selected from the above (1) to (39), or from the above (40) to (47) As long as it can specifically bind to a protein encoded by any of the human genes corresponding to the rat gene identified by the GenBank accession number, it can be in any form that can be used in the above immunological protein analysis techniques. There may be. For example, the antibody or fragment thereof in the present invention may be a polyclonal antibody, a monoclonal antibody, or a fragment having the protein binding ability. Examples of the fragment include Fab fragment, F (ab) '2 fragment, single chain antibody (scFv) and the like.

本発明にいう「特異抗体」または「特異的に結合する」とは、本発明で使用する抗体又はその断片が、前記（１）〜（３９）から選ばれるGenBankアクセッション番号で特定されるヒト遺伝子、又は前期（４０）〜（４７）から選ばれるGenBankアクセッション番号で特定されるラット遺伝子に対応するヒト遺伝子の何れかにコードされるタンパク質には結合するが、白血球に含まれる他のタンパク質には結合しないことを意味する。その様な抗体の調製に必要とされる免疫学的方法、例えば前記（１）〜（３９）から選ばれるGenBankアクセッション番号で特定されるヒト遺伝子、又は前記（４０）〜（４７）から選ばれるGenBankアクセッション番号で特定されるラット遺伝子に対応するヒト遺伝子の何れかにコードされるタンパク質を抗体の作成に用いられる動物に投与すること、血清から抗体を直接回収すること、抗体産生細胞を回収してハイブリドーマを作成すること、抗体を精製すること、抗体をラベル化したり固相化したりすること、さらに抗体を用いて目的タンパク質を検出したり定量したりすること等は、全て当業者にとって通常行い得る方法を採用して行えばよい。   The term “specific antibody” or “specifically binds” as used in the present invention means that the antibody or fragment thereof used in the present invention is identified by the GenBank accession number selected from the above (1) to (39) Other proteins contained in leukocytes that bind to a gene or a protein encoded by the human gene corresponding to the rat gene specified by the GenBank accession number selected from the previous period (40) to (47) Means not to be combined. Immunological methods required for the preparation of such antibodies, for example, human genes identified by GenBank accession numbers selected from (1) to (39) above, or selected from (40) to (47) above Administering a protein encoded by one of the human genes corresponding to the rat gene identified by the GenBank accession number to the animal used for the production of the antibody, recovering the antibody directly from the serum, Recovery and preparation of hybridomas, purification of antibodies, labeling and solidification of antibodies, and detection and quantification of target proteins using antibodies are all for those skilled in the art. A method that can be normally performed may be adopted.

本発明のキットは、上記に説明した診断方法に利用するための、前記（１）〜（３９）から選ばれるGenBankアクセッション番号で特定されるヒト遺伝子、又は前記（４０）〜（４７）から選ばれるGenBankアクセッション番号で特定されるラット遺伝子に対応するヒト遺伝子から選ばれる少なくとも１種類以上の遺伝子の塩基配列にストリンジェントな条件下でハイブリダイズする核酸及び／又は該遺伝子のいずれかにコードされるタンパク質と結合する特異的抗体若しくはその断片を含むキットである。本発明の２型糖尿病診断用キットは、前記（１）〜（３９）から選ばれるGenBankアクセッション番号で特定されるヒト遺伝子、又は前記（４０）〜（４７）から選ばれるGenBankアクセッション番号で特定されるラット遺伝子に対応するヒト遺伝子から選ばれる少なくとも１種類以上の遺伝子の塩基配列にストリンジェントな条件下でハイブリダイズする核酸、あるいは前記（１）〜（３９）から選ばれるGenBankアクセッション番号で特定されるヒト遺伝子、又は前記（４０）〜（４７）から選ばれるGenBankアクセッション番号で特定されるラット遺伝子に対応するヒト遺伝子の何れかにコードされるタンパク質と特異的に結合する抗体若しくはその断片を含む限り、いかなる形態であってもよく、任意の試薬、器具等を含むことができる。本発明の２型糖尿病診断用キットが、前記（１）〜（３９）から選ばれるGenBankアクセッション番号で特定されるヒト遺伝子、又は前記（４０）〜（４７）から選ばれるGenBankアクセッション番号で特定されるラット遺伝子に対応するヒト遺伝子から選ばれる少なくとも１種類以上の遺伝子の塩基配列にストリンジェントな条件下でハイブリダイズする核酸を含む場合には、例えば、PCRに必要な試薬（例えば水、緩衝剤、塩化マグネシウム、dNTPミックス、Taqポリメラーゼ等）、PCR増幅断片の定量に必要な試薬（例えばRI、蛍光色素等）、DNAマイクロアレイ、DNAチップ等の作成のための担体や核酸を固相化するための反応試薬等を含むことができる。また、本発明の２型糖尿病診断用キットが、前記（１）〜（３９）から選ばれるGenBankアクセッション番号で特定されるヒト遺伝子、又は前記（４０）〜（４７）から選ばれるGenBankアクセッション番号で特定されるラット遺伝子に対応するヒト遺伝子の何れかにコードされるタンパク質と特異的に結合する抗体若しくはその断片を含む場合には、上記抗体又はその断片を固相化するための固相担体（例えば、イムノプレート、ラテックス粒子等）、抗γ−グロブリン抗体（二次抗体）、抗体（二次抗体を含む）又はその断片の標識（例えば、酵素、蛍光物質等）、各種試薬（例えば、酵素基質、緩衝液、希釈液等）等の１種類又は２種類以上を含むことが出来る。   The kit of the present invention is a human gene identified by a GenBank accession number selected from the above (1) to (39) or the above (40) to (47) for use in the diagnostic method described above. Nucleic acid that hybridizes under stringent conditions to at least one base sequence of at least one gene selected from human genes corresponding to the rat gene identified by the selected GenBank accession number and / or encoded in any of the genes A kit containing a specific antibody or fragment thereof that binds to the protein to be expressed. The kit for diagnosing type 2 diabetes of the present invention is a human gene identified by a GenBank accession number selected from (1) to (39) or a GenBank accession number selected from (40) to (47). A nucleic acid that hybridizes under stringent conditions to the base sequence of at least one gene selected from human genes corresponding to the identified rat gene, or a GenBank accession number selected from (1) to (39) above An antibody that specifically binds to a protein encoded by any one of the human gene identified by the above, or the human gene corresponding to the rat gene identified by the GenBank accession number selected from the above (40) to (47), or As long as the fragment is included, it may be in any form and can include any reagent, instrument, and the like. The kit for diagnosing type 2 diabetes of the present invention is a human gene identified by a GenBank accession number selected from the above (1) to (39), or a GenBank accession number selected from the above (40) to (47) When a nucleic acid that hybridizes under stringent conditions to the base sequence of at least one gene selected from human genes corresponding to the specified rat gene, for example, a reagent necessary for PCR (for example, water, Buffers, magnesium chloride, dNTP mix, Taq polymerase, etc.), reagents necessary for quantification of PCR amplified fragments (eg, RI, fluorescent dye), DNA microarrays, carriers and nucleic acids for creating DNA chips etc. Reaction reagents and the like can be included. The kit for diagnosing type 2 diabetes of the present invention is a human gene identified by a GenBank accession number selected from the above (1) to (39), or a GenBank accession selected from the above (40) to (47) A solid phase for immobilizing the antibody or fragment thereof when it comprises an antibody or fragment thereof that specifically binds to a protein encoded by any of the human genes corresponding to the rat gene identified by the number Carriers (for example, immunoplates, latex particles, etc.), anti-γ-globulin antibodies (secondary antibodies), antibodies (including secondary antibodies) or fragments thereof (for example, enzymes, fluorescent substances, etc.), various reagents (for example, , Enzyme substrate, buffer solution, diluent, etc.).

本発明の２型糖尿病予防薬及び／又は治療薬をスクリーニングする方法は、２型糖尿病モデル非ヒト動物に候補物質を投与した後、前記動物の血液から採取した白血球における前記（１）〜（３９）から選ばれるGenBankアクセッション番号で特定されるヒト遺伝子に対応する当該非ヒト動物遺伝子、又は前記（４０）〜（４７）から選ばれるGenBankアクセッション番号で特定されるラット遺伝子に対応する非ヒト動物遺伝子及び／又は当該遺伝子のいずれかにコードされる非ヒト動物タンパク質の発現レベルを健常動物のそれに近づける或いは戻す効果を指標として、前記候補物質が２型糖尿病予防薬及び／又は治療薬となり得るか同かを判定することを指標とする。なお、本発明にいう２型糖尿病予防薬とは、２型糖尿病の発症を予防する又は予防すると期待される物質を意味し、また２型糖尿病治療薬とは、２型糖尿病を治療する又は治療すると期待される物質を意味する。   The method of screening for a type 2 diabetes preventive and / or therapeutic agent of the present invention comprises the steps (1) to (39) of leukocytes collected from blood of the animal after administering a candidate substance to a type 2 diabetes model non-human animal. The non-human animal gene corresponding to the human gene identified by the GenBank accession number selected from the above, or the non-human corresponding to the rat gene identified by the GenBank accession number selected from the above (40) to (47) The candidate substance can be a prophylactic and / or therapeutic drug for type 2 diabetes, using as an index the effect of bringing the expression level of the animal gene and / or the non-human animal protein encoded by any of the genes close to or returning to that of a healthy animal It is an index to determine whether or not they are the same. The type 2 diabetes preventive agent referred to in the present invention means a substance that is expected to prevent or prevent the onset of type 2 diabetes, and the type 2 diabetes therapeutic agent treats or treats type 2 diabetes. Then it means the expected substance.

既に２型糖尿病を発症している週齢或いは発症前の週齢の２型糖尿病モデル非ヒト動物の白血球における前記（１）〜（３９）から選ばれるGenBankアクセッション番号で特定されるヒト遺伝子に対応する当該非ヒト動物遺伝子、又は前記（４０）〜（４７）から選ばれるGenBankアクセッション番号で特定されるラット遺伝子に対応する非ヒト動物遺伝子の発現レベルは、健常非ヒト動物の発現レベルから変動しているので、２型糖尿病モデル動物の白血球における前記（１）〜（３９）から選ばれるGenBankアクセッション番号で特定されるヒト遺伝子に対応する当該非ヒト動物遺伝子、又は前記（４０）〜（４７）から選ばれるGenBankアクセッション番号で特定されるラット遺伝子に対応する非ヒト動物遺伝子の発現レベルを健常動物のそれに近づける或いは戻す効果を有する物質を選択することによって、２型糖尿病の予防薬、又は治療薬をスクリーニングすることができる。すなわち、候補物質を投与した後の前記（１）〜（３９）から選ばれるGenBankアクセッション番号で特定されるヒト遺伝子に対応する当該非ヒト動物遺伝子、又は前記（４０）〜（４７）から選ばれるGenBankアクセッション番号で特定されるラット遺伝子に対応する非ヒト動物遺伝子の発現レベルが、正常発現レベルに戻ったか否か、又は正常発現レベルに近づいたか否かを指標として、またモデル非ヒト動物の週齢等を考慮して、候補物質の２型糖尿病予防効果あるいは治療効果を判定し、この結果に基づいて候補物質の評価を行う。なお、前記（１）〜（３９）から選ばれるGenBankアクセッション番号で特定されるヒト遺伝子に対応する当該非ヒト動物遺伝子、又は前記（４０）〜（４７）から選ばれるGenBankアクセッション番号で特定されるラット遺伝子に対応する非ヒト動物遺伝子の正常発現レベルは、複数の健常動物の発現レベルを測定し、その値の分布から決定することが好ましい。   A human gene identified by a GenBank accession number selected from the above (1) to (39) in leukocytes of a non-human animal of type 2 diabetes model who has already developed type 2 diabetes or is a week before onset The expression level of the corresponding non-human animal gene or the non-human animal gene corresponding to the rat gene specified by the GenBank accession number selected from (40) to (47) is determined from the expression level of a healthy non-human animal. Since it fluctuates, the non-human animal gene corresponding to the human gene specified by the GenBank accession number selected from the above (1) to (39) in the leukocytes of type 2 diabetes model animals, or (40) to The expression level of the non-human animal gene corresponding to the rat gene identified by the GenBank accession number selected from (47) is brought close to that of a healthy animal By selecting a substance having an effect of preventing or returning, a preventive or therapeutic agent for type 2 diabetes can be screened. That is, the non-human animal gene corresponding to the human gene specified by the GenBank accession number selected from (1) to (39) after administration of the candidate substance, or selected from (40) to (47) The model non-human animal is used as an indicator whether or not the expression level of the non-human animal gene corresponding to the rat gene identified by the GenBank accession number is restored to or close to the normal expression level. The candidate substance is evaluated for its type 2 diabetes preventive effect or therapeutic effect, and the candidate substance is evaluated based on this result. In addition, the non-human animal gene corresponding to the human gene specified by the GenBank accession number selected from the above (1) to (39), or the GenBank accession number selected from the above (40) to (47) The normal expression level of the non-human animal gene corresponding to the rat gene to be determined is preferably determined from the distribution of values obtained by measuring the expression levels of a plurality of healthy animals.

本発明のスクリーニング方法においては、２型糖尿病モデル非ヒト動物としては、白血球における前記（１）〜（３９）から選ばれるGenBankアクセッション番号で特定されるヒト遺伝子に対応する当該非ヒト動物遺伝子、又は前記（４０）〜（４７）から選ばれるGenBankアクセッション番号で特定されるラット遺伝子に対応する非ヒト動物遺伝子の発現レベルが健常動物のそれと比較して変動している動物（例えば、ラット、マウス、モルモット、ウサギ等）を使用すればよいが、前記OLETFラット、又はKK-Ayマウス、KK Ta/Jclマウスの使用が特に好ましい。前記（１）〜（３９）から選ばれるGenBankアクセッション番号で特定されるヒト遺伝子に対応する当該非ヒト動物遺伝子、又は前記（４０）〜（４７）から選ばれるGenBankアクセッション番号で特定されるラット遺伝子に対応する非ヒト動物遺伝子の発現変動を誘導する候補物質を選択するためには、前記（１）〜（３９）から選ばれるGenBankアクセッション番号で特定されるヒト遺伝子に対応する当該非ヒト動物遺伝子、又は前記（４０）〜（４７）から選ばれるGenBankアクセッション番号で特定されるラット遺伝子に対応する非ヒト動物遺伝子のいずれかを導入して、白血球における前記（１）〜（３９）から選ばれるGenBankアクセッション番号で特定されるヒト遺伝子に対応する当該非ヒト動物遺伝子、又は前記（４０）〜（４７）から選ばれるGenBankアクセッション番号で特定されるラット遺伝子に対応する非ヒト動物遺伝子の何れかの遺伝子の発現を人為的に変動させたトランスジェニック動物を使用してもよい。   In the screening method of the present invention, as the type 2 diabetes model non-human animal, the non-human animal gene corresponding to the human gene identified by the GenBank accession number selected from (1) to (39) in leukocytes, Or an animal in which the expression level of the non-human animal gene corresponding to the rat gene specified by the GenBank accession number selected from the above (40) to (47) is changed compared to that of a healthy animal (for example, rat, Mouse, guinea pig, rabbit, etc.) may be used, and the use of the OLETF rat, KK-Ay mouse, or KK Ta / Jcl mouse is particularly preferred. The non-human animal gene corresponding to the human gene identified by the GenBank accession number selected from (1) to (39) or the GenBank accession number selected from (40) to (47) In order to select a candidate substance that induces expression fluctuation of a non-human animal gene corresponding to a rat gene, the non-human animal gene corresponding to the human gene identified by the GenBank accession number selected from (1) to (39) above is selected. Either a human animal gene or a non-human animal gene corresponding to a rat gene identified by a GenBank accession number selected from the above (40) to (47) is introduced, and the above (1) to (39) in leukocytes The non-human animal gene corresponding to the human gene specified by the GenBank accession number selected from the above, or selected from the above (40) to (47) Or using transgenic animals artificially varying the expression of any gene of non-human animal gene corresponding to the rat gene identified by the GenBank accession number that.

本発明の２型糖尿病予防薬及び／又は治療薬をスクリーニング用キットは、検体における前記（１）〜（３９）から選ばれるGenBankアクセッション番号で特定されるヒト遺伝子に対応する当該非ヒト動物遺伝子、又は前記（４０）〜（４７）から選ばれるGenBankアクセッション番号で特定されるラット遺伝子に対応する非ヒト動物遺伝子の発現レベルを測定するための試薬として、前記（１）〜（３９）から選ばれるGenBankアクセッション番号で特定されるヒト遺伝子に対応する当該非ヒト遺伝子、又は前記（４０）〜（４７）から選ばれるGenBankアクセッション番号で特定されるラット遺伝子に対応する非ヒト動物遺伝子の塩基配列にストリンジェントな条件下でハイブリダイズする核酸、及び／又は前記（１）〜（３９）から選ばれるGenBankアクセッション番号で特定されるヒト遺伝子に対応する当該非ヒト遺伝子、又は前記（４０）〜（４７）から選ばれるGenBankアクセッション番号で特定されるラット遺伝子に対応する非ヒト動物遺伝子の何れかの遺伝子にコードされるタンパク質に特異的に結合する抗体若しくはその断片を含むことを特徴とする。   The non-human animal gene corresponding to the human gene identified by the GenBank accession number selected from the above (1) to (39) in a specimen is a kit for screening a type 2 diabetes preventive and / or therapeutic agent of the present invention Or (1) to (39) as reagents for measuring the expression level of a non-human animal gene corresponding to the rat gene specified by the GenBank accession number selected from the above (40) to (47) The non-human gene corresponding to the human gene identified by the selected GenBank accession number, or the non-human animal gene corresponding to the rat gene identified by the GenBank accession number selected from the above (40) to (47) A nucleic acid that hybridizes to the base sequence under stringent conditions, and / or a GenBank sequence selected from the above (1) to (39) Any of the non-human gene corresponding to the human gene identified by the session number or the non-human animal gene corresponding to the rat gene identified by the GenBank accession number selected from the above (40) to (47) It comprises an antibody or a fragment thereof that specifically binds to the protein encoded by

本発明のスクリーニング用キットを利用すれば、非ヒト動物の血液から採取した白血球における前記（１）〜（３９）から選ばれるGenBankアクセッション番号で特定されるヒト遺伝子に対応する当該非ヒト遺伝子、又は前記（４０）〜（４７）から選ばれるGenBankアクセッション番号で特定されるラット遺伝子に対応する非ヒト動物遺伝子の発現レベルを測定することにより、２型糖尿病の予防薬及び／又は治療薬をスクリーニングすることができる。   If the screening kit of the present invention is used, the non-human gene corresponding to the human gene identified by the GenBank accession number selected from the above (1) to (39) in leukocytes collected from the blood of a non-human animal, Alternatively, a prophylactic and / or therapeutic drug for type 2 diabetes can be obtained by measuring the expression level of a non-human animal gene corresponding to the rat gene identified by the GenBank accession number selected from the above (40) to (47) Can be screened.

本発明のスクリーニング用キットは、上記オリゴヌクレオチド又はポリヌクレオチド、あるいは、上記抗体又はその断片を含む限り、いかなる形態であってもよく、本発明の２型糖尿病の診断用キットにおいて例示した各種試薬、器具等の他、モデル動物等を含むことができる。   The screening kit of the present invention may be in any form as long as it contains the above-mentioned oligonucleotide or polynucleotide, or the above-mentioned antibody or fragment thereof, and various reagents exemplified in the diagnostic kit for type 2 diabetes of the present invention, In addition to instruments, model animals and the like can be included.

少なくとも1種類以上に加え、さらに表１に示される遺伝子群の何れかの発現変動を合わせて測定し、その結果も合わせて考慮することで、２型糖尿病の診断の確度をより高めることができる。この表１に示した遺伝子群に加え、又は代えて、特許文献１及び特許文献２及び特許文献３に開示された２型糖尿病の発症と関連している遺伝子群を対象候補とし、それらの中から任意に選択される遺伝子の発現量も併せて測定して、判定材料とすることで、より２型糖尿病の診断の確度を高めることも可能である。   In addition to at least one or more types, it is possible to further increase the accuracy of diagnosis of type 2 diabetes by measuring the expression variation of any of the gene groups shown in Table 1 and considering the results together. . In addition to or instead of the gene groups shown in Table 1, gene groups associated with the onset of type 2 diabetes disclosed in Patent Document 1, Patent Document 2 and Patent Document 3 are targeted candidates. It is also possible to increase the accuracy of diagnosis of type 2 diabetes by measuring the expression level of a gene arbitrarily selected from the above and using it as a determination material.

なお、被験者から白血球を採取する方法は、臨床的に行われている任意の方法を採用すればよく、特定の方法には限定されない。例えば、血液中の赤血球を選択的に溶解させた後、遠心分離することによって白血球を採取してもよい。また本発明にいう白血球には、好中球、好酸球、好塩基球、リンパ球及び単球のいずれもが含まれ、検体として用いる白血球は、これらのうちの1種類であってもよいし、２種類以上の混合物であってもよい。   The method for collecting white blood cells from the subject is not limited to a specific method, and any clinically performed method may be employed. For example, white blood cells may be collected by selectively lysing red blood cells in blood and then centrifuging. Further, the leukocytes referred to in the present invention include all of neutrophils, eosinophils, basophils, lymphocytes and monocytes, and the leukocytes used as a specimen may be one of these. And two or more types of mixtures may be sufficient.

また、前記（１）〜（３９）から選ばれるGenBankアクセッション番号で特定されるヒト遺伝子に対応する当該非ヒト遺伝子、又は前記（４０）〜（４７）から選ばれるGenBankアクセッション番号で特定されるラット遺伝子に対応する非ヒト動物遺伝子の塩基配列には、データベースに登録されている塩基配列のほかに、いわゆる１塩基多型（SNPs）によってその一部が異なる塩基配列もあり得、また各タンパク質には種々のアイソフォーム等が存在する場合もある。その様な塩基配列が相違する遺伝子であっても、前記（１）〜（３９）から選ばれるGenBankアクセッション番号で特定されるヒト遺伝子、又は前記（４０）〜（４７）から選ばれるGenBankアクセッション番号で特定されるラット遺伝子に対応する遺伝子又はそれらのアイソフォームである限り、その様な遺伝子も、本発明の確認対象として含まれる。   Further, the non-human gene corresponding to the human gene specified by the GenBank accession number selected from the above (1) to (39), or the GenBank accession number selected from the above (40) to (47). In addition to the nucleotide sequences registered in the database, the nucleotide sequences of non-human animal genes corresponding to rat genes may include nucleotide sequences that differ in part due to so-called single nucleotide polymorphisms (SNPs). A protein may have various isoforms. Even for such genes having different base sequences, the human gene identified by the GenBank accession number selected from the above (1) to (39) or the GenBank accession selected from the above (40) to (47) As long as it is a gene corresponding to the rat gene specified by the session number or an isoform thereof, such a gene is also included as a confirmation target of the present invention.

２型糖尿病モデルラットとして、大塚製薬（株）徳島研究所で系統維持されている雄性のOLETF(Otsuka-Long-Evans-Tokushima-Fatty)ラットを使用し、対照群のラットとして、同研究所で系統維持されているLETO(Long-Evans-Tokushima-Otsuka)ラットを使用した。OLETFラットは、2型糖尿病（インスリン非依存型糖尿病）に類似した症状を示す自然発症糖尿病モデル動物であり（Kawano K.ら、Diabetes Res Clin Pract, 1994. 24 Suppl p.S317-20）、LETOラットは、糖尿病を発症しないコントロール動物である。OLETF及びLETOラットは、４週齢で大塚製薬（株）徳島研究所より供与された。ラットは、人工照明による明暗環境下（明期7:00〜21:00、暗期21:00〜7:00）、一定温度（22℃±0.5℃）、詩相対湿度（58%）の動物実験室内で飼育し、固形飼料及び水を自由に摂取させた。動物実験は北海道大学動物実験委員会の規定に沿って行った。   As a type 2 diabetes model rat, male OLETF (Otsuka-Long-Evans-Tokushima-Fatty) rats maintained by Otsuka Pharmaceutical Co., Ltd.'s Tokushima Laboratories were used. The strain-maintained LETO (Long-Evans-Tokushima-Otsuka) rat was used. The OLETF rat is a spontaneous diabetes model animal that exhibits symptoms similar to type 2 diabetes (non-insulin-dependent diabetes) (Kawano K. et al., Diabetes Res Clin Pract, 1994. 24 Suppl p.S317-20), LETO Rats are control animals that do not develop diabetes. OLETF and LETO rats were provided by Totsushima Research Institute, Otsuka Pharmaceutical Co., Ltd. at 4 weeks of age. Rats are animals under artificial lighting (light period 7: 00-21: 00, dark period 21: 00-7: 00), constant temperature (22 ℃ ± 0.5 ℃), poetry relative humidity (58%) They were raised in the laboratory and allowed to freely take solid feed and water. Animal experiments were conducted in accordance with the regulations of the Hokkaido University Animal Experiment Committee.

5〜31週齢にわたり、各週齢のOLETF及びLETOラットの血糖値を腹腔内糖負荷試験（Intraperitoneal Glucose Tolerance Test, IPGTT）により測定した（n=6）。12時間絶食後、1g/kg Bwのグルコース生理食塩水溶液を腹腔内投与した。投与1時間後に尾静脈より採取した血液を氷上に30分間静置し、9000rpmで2分間、4℃で遠心分離して血清を得た。生理食塩水で3倍に希釈した血清20uLをサンプルとし、グルコースB-テストワコー（和光純薬）を用いて、グルコースオキシダーゼ法により血糖値を測定した。   From 5 to 31 weeks of age, the blood glucose level of each week-old OLETF and LETO rat was measured by an intraperitoneal glucose tolerance test (Intraperitoneal Glucose Tolerance Test, IPGTT) (n = 6). After fasting for 12 hours, 1 g / kg Bw glucose saline solution was intraperitoneally administered. One hour after administration, blood collected from the tail vein was allowed to stand on ice for 30 minutes and centrifuged at 9000 rpm for 2 minutes at 4 ° C. to obtain serum. Blood glucose level was measured by glucose oxidase method using 20 μL of serum diluted 3 times with physiological saline as a sample and using glucose B-Test Wako (Wako Pure Chemical Industries, Ltd.).

発症モニタリングの結果から、6週齢OLETFラットを発症前モデルとして用いた。12時間以上の絶食を行ったラットから、全血、肝臓、脂肪組織、骨格筋をサンプリングした（n=4）。   From the results of onset monitoring, 6-week-old OLETF rats were used as a pre-onset model. Whole blood, liver, adipose tissue, and skeletal muscle were sampled from rats that had been fasted for 12 hours or longer (n = 4).

6週齢のラットからTotal RNAを抽出した。血液は頚動脈から、脂肪組織は精巣上体部分から、骨格筋は右の後肢から採取した。白血球のTotal RNAはPAXgene Blood RNA kitのプロトコル(PreAnalytiX, Hombrechtikon, Switzerland)に従って抽出した。肝臓、脂肪、骨格筋のTotal RNAはTRIzol regent(Invitrogen, Carlsbad, CA, U.S.A.)を用いた方法と、RNeasy Mini Kitのプロトコル(QIAGEN, Hilden, Germany)に従って抽出した。そしてRNase-free DNase Digest Setのプロトコル(QIAGEN, Hilden, Germany)に従ってゲノムDNAを除去した。個体間の違いをなくすために、各4匹のラットのtotal RNA 5μgを混合した。混合したtotal RNAの純度をAgilent 2100 Bioanalyzer(Agilent, Foster City, CA)により確認した。   Total RNA was extracted from 6-week-old rats. Blood was collected from the carotid artery, adipose tissue from the epididymis, and skeletal muscle from the right hind limb. Total RNA of leukocytes was extracted according to the protocol of PAXgene Blood RNA kit (PreAnalytiX, Hombrechtikon, Switzerland). Total RNA of liver, fat, and skeletal muscle was extracted according to the method using TRIzol regent (Invitrogen, Carlsbad, CA, U.S.A.) and the protocol of RNeasy Mini Kit (QIAGEN, Hilden, Germany). Genomic DNA was removed according to the RNase-free DNase Digest Set protocol (QIAGEN, Hilden, Germany). In order to eliminate differences between individuals, 5 μg of total RNA from 4 rats each was mixed. The purity of the mixed total RNA was confirmed by Agilent 2100 Bioanalyzer (Agilent, Foster City, CA).

混合したRNAサンプル500ngをAgilent Low RNA Input Fluorescent Linear Amplification Kitのプロトコル(Product No. 5184-3568, Agilent Technologies, Palo Alto, CA, U.S.A.)に従ってCy3（またはCy5）にてラベル化した。Cy3（またはCy5）の取り込み効率を算出した後、1ugのCy3ラベル化LETO由来cRNAとCy5ラベル化OLETF由来cRNAを混合し、Hybridizationプロトコル(Product No. 5184-3568, Agilent Technologies, Palo Alto, CA, U.S.A.)に従ってAgilent Rat Oligo Microarrays(G4130A)にハイブリダイゼーションさせた。スライドの洗浄操作が終わった後にAgilent Microarray scanner(G2565AA)にてスライドを読み込ませた（パラメーターは全てデフォルト値）。これらの実験はcRNAの蛍光プローブを入れ替えて実験を行うdye swap法にて行った。データはAgilent Feature Extraction software(Version A.6.1.1)（パラメーターは全てデフォルト値）、を用いて入手した。   500 ng of the mixed RNA sample was labeled with Cy3 (or Cy5) according to the protocol of Agilent Low RNA Input Fluorescent Linear Amplification Kit (Product No. 5184-3568, Agilent Technologies, Palo Alto, CA, U.S.A.). After calculating the incorporation efficiency of Cy3 (or Cy5), 1 ug of Cy3-labeled LETO-derived cRNA and Cy5-labeled OLTF-derived cRNA were mixed, and the Hybridization protocol (Product No. 5184-3568, Agilent Technologies, Palo Alto, CA, USA) and hybridized to Agilent Rat Oligo Microarrays (G4130A). After the slide washing operation, the slide was read with an Agilent Microarray scanner (G2565AA) (all parameters are default values). These experiments were performed by the dye swap method in which cRNA fluorescent probes were replaced. Data was obtained using Agilent Feature Extraction software (Version A.6.1.1) (all parameters are default values).

４種類の組織（白血球、肝臓、脂肪、筋肉）ごとに1組のdye swapデータがある合計８サンプルの解析を行った。マイクロアレイ発現データをGeneSpring GX 7.3 Expression Analysis Software(Agilent Technologies)にインポートした。インポートしたデータは、Data transformation: dye swap、Per spot: divide by control channel、Per Chip: normalization to 50^th percentileの３種類のノーマライゼーションを適用させた。以下の３つの基準（全てのチップにおいてraw値とcontrol値が100以上を満たす遺伝子、各組織でのチップにおいて2 chip中2 chipともPresent又はMarginalのフラグ値を持つ遺伝子、そして各組織でのチップにおいてraw値とcontrol値のpercent differenceが51%以下である遺伝子）に従って遺伝子にフィルターをかけ、全てを満たす遺伝子を抽出した。データ解析にはこれらの遺伝子の中でLETOと比べてOLETFで1.5倍以上、（又は0.67倍以下）発現変動した遺伝子群に着目した。その結果、白血球では300遺伝子、肝臓では503遺伝子、脂肪組織では1432遺伝子、骨格筋では314遺伝子が選択された。 A total of 8 samples with one set of dye swap data were analyzed for each of the four types of tissues (white blood cells, liver, fat, muscle). Microarray expression data was imported into GeneSpring GX 7.3 Expression Analysis Software (Agilent Technologies). Three types of normalization were applied to the imported data: Data transformation: dye swap, Per spot: divide by control channel, and Per Chip: normalization to 50 ^th percentile. The following three criteria (genes with raw values and control values of 100 or more in all chips, genes with present or marginal flag values for 2 chips out of 2 chips in each tissue chip, and chips in each tissue) The gene was filtered according to the gene whose percent difference between the raw value and the control value was 51% or less), and genes that satisfy all were extracted. In the data analysis, attention was focused on a group of genes whose expression was changed 1.5 times or more (or 0.67 times or less) in OLETF compared with LETO. As a result, 300 genes were selected for leukocytes, 503 genes for liver, 1432 genes for adipose tissue, and 314 genes for skeletal muscle.

糖尿病関連組織での遺伝子発現の違いを明らかにするために、クラスタリング解析を行った。肝臓、脂肪組織、骨格筋の少なくとも１つの組織で1.5倍以上発現変動している2025遺伝子を解析対象とした。クラスタリングのアルゴリズムとしてaverage linkageを、各サンプル間での遺伝子発現パターンの類似性を測る方法としてPearson correlationを使用した。そしてdistance値に従って４つのサブクラスターに分類した[図1]。   Clustering analysis was performed to clarify the difference in gene expression in diabetes-related tissues. The 2025 gene whose expression was changed 1.5 times or more in at least one tissue of liver, adipose tissue, and skeletal muscle was analyzed. Average linkage was used as a clustering algorithm, and Pearson correlation was used as a method for measuring the similarity of gene expression patterns between samples. They were classified into 4 sub-clusters according to the distance value [Fig. 1].

各サブクラスターの中で、各組織で発現亢進、又は発現低下のパターンが顕著に現れているところに着目し、分泌タンパク質をコードする遺伝子の存在をIPA (Ingenuity Pathway Analysis)を用いて抽出した。そしてこれらの遺伝子と白血球で発現変動した300遺伝子との間に関連性があるかどうかについて調べた。特に、糖尿病関連組織から分泌されるタンパク質が、白血球で検出された遺伝子のmRNAの量を増減させるような報告のみを抽出した。その結果2組の遺伝子が検出された[表2、図2]。
In each sub-cluster, focusing on the fact that the pattern of increased or decreased expression appears remarkably in each tissue, the presence of the gene encoding the secreted protein was extracted using IPA (Ingenuity Pathway Analysis). We investigated whether these genes and 300 genes whose expression was changed in leukocytes were related. In particular, we extracted only reports in which proteins secreted from diabetes-related tissues increase or decrease the amount of gene mRNA detected in leukocytes. As a result, two sets of genes were detected [Table 2, Fig. 2].

各組織で1.5倍以上発現変動した遺伝子集団を対象として、白血球と肝臓、白血球と脂肪組織、白血球と骨格筋で共通して発現量の変動が確認された遺伝子を選出した。その結果、白血球と肝臓では25遺伝子、白血球と脂肪組織では41遺伝子、白血球と骨格筋では14遺伝子、合計57遺伝子が白血球と糖尿病関連組織で同時に発現変動する遺伝子であることが確認された。
Targeting gene populations whose expression was changed 1.5 times or more in each tissue, genes whose expression level was confirmed to be common in leukocytes and liver, leukocytes and adipose tissue, leukocytes and skeletal muscle were selected. As a result, it was confirmed that 25 genes in leukocytes and liver, 41 genes in leukocytes and adipose tissue, 14 genes in leukocyte and skeletal muscle, and 57 genes in total, which are expressed and varied simultaneously in leukocytes and diabetes-related tissues.

００５３，００５４に含まれる合計59遺伝子の中から、遺伝子にアノテーションが当てられている遺伝子、すなわち遺伝子機能がマウスで調べられている遺伝子もしくは核酸配列、塩基配列にコードされているアミノ酸配列の相同性から機能が予測されている遺伝子を選び出し、２型糖尿病発症前遺伝子診断に適応できる可能性を持つ遺伝子として、47遺伝子[表3から表７]を選択した。




Of the total 59 genes included in 0053 and 0054, the genes that are annotated, that is, the genes whose nucleic acid sequences have been examined in mice, the nucleic acid sequences, or the homology of the amino acid sequences encoded by the nucleotide sequences 47 genes [Table 3 to Table 7] were selected as genes having a possibility of being adapted to genetic diagnosis before onset of type 2 diabetes.

表3から表7は、一体の表としてみなす。
Tables 3 through 7 are considered as one table.

肝臓、脂肪組織、骨格筋の少なくとも１つの組織で1.5倍以上発現変動している2025遺伝子を対象としたクラスタリング解析を行った結果を示す。クラスタリングのアルゴリズムとしてはaverage linkageを、各サンプル間での遺伝子発現パターンの類似性を測る方法としてPearson correlationを使用し、distance値に従って４つのサブクラスターに分類した。The result of having performed the clustering analysis for the 2025 gene whose expression fluctuation is 1.5 times or more in at least one tissue of liver, adipose tissue, and skeletal muscle is shown. Average linkage was used as a clustering algorithm, Pearson correlation was used as a method for measuring the similarity of gene expression patterns between samples, and classified into four subclusters according to distance values. 分泌タンパク質をコードする遺伝子の存在をIPA (Ingenuity Pathway Analysis)を用いて抽出し、これらの遺伝子と白血球で発現変動した300遺伝子との間に関連性があるかどうかについて調べ、糖尿病関連組織から分泌されるタンパク質が白血球で検出された遺伝子のmRNAの量を増減させるような報告のみを抽出した結果として検出された、2組の遺伝子（ＶＥＧＦＡとＣＲＥＢＢＰ、及びＭＩＦとＣＫ１）を示す。The presence of genes encoding secreted proteins is extracted using IPA (Ingenuity Pathway Analysis), and whether these genes and 300 genes whose expression changes in leukocytes is related is examined and secreted from diabetes-related tissues. 2 sets of genes (VEGFA and CREBBP, and MIF and CK1) detected as a result of extracting only reports that increase or decrease the amount of mRNA of genes detected in leukocytes.

Claims (9)

下記（１）〜（３９）から選ばれるＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号で特定されるヒト遺伝子、又は下記（４０）〜（４７）から選ばれるＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号で特定されるマウス遺伝子に対応するヒト遺伝子の少なくとも１種類以上の塩基配列にストリンジェントな条件下でハイブリダイズする核酸及び／又は該遺伝子のいずれかにコードされるヒトタンパク質と結合する特異抗体若しくはその断片からなる、２型糖尿病診断剤。
（１）ＡＫ＿３１１８５６ （上皮発現脂肪酸結合タンパク質５型）
（２）ＮＭ＿０２４７２２ （アシル補酵素Ａ結合領域保存タンパク質４型）
（３）ＮＭ＿０１２４３４ （溶質輸送体ファミリー１７型）
（４）ＮＭ＿００３２５８ （チミジンキナーゼ１型）
（５）ＮＭ＿０１５９３２ （染色体１３番翻訳領域類似タンパク質）
（６）ＮＭ＿０１２０６８ （転写活性化因子５型）
（７）ＮＭ＿０２４９０１ （ＤＥＮＮ／ＭＡＤＤ領域タンパク質２Ｄ）
（８）ＮＭ＿００４８５１ （Ｎａｐｓｉｎ Ａアスパラギン酸ペプチダ−ゼ）
（９）ＮＭ＿０１７３２７ （グアニンヌクレオチド結合タンパク質アルファ０型）
（１０）ＮＭ＿０１６４１０ （クロマチン修飾タンパク質５型）
（１１）ＮＭ＿００１３００ （Ｋｒｕｐｐｅｌ様転写因子６型）
（１２）ＮＭ＿００６２０８ （エクトヌクレオチドピロフォスファターゼ／フォスフォジエステラーゼ１型）
（１３）ＮＭ＿００１３９８ （ペルオキシソーム発現エノイル補酵素Ａ加水酵素１）
（１４）ＮＭ＿０１３４４６ （Ｍｋｒｎ１類似タンパク質）
（１５）ＮＭ＿００００６３ （補体成分２型）
（１６）ＮＭ＿０００３７１ （トランスサイレチン類似タンパク質）
（１７）ＮＭ＿００６０００ （チューブリンアルファ１型）
（１８）ＮＭ＿０１６６４１ （膜相互作用タンパク質ＲＧＳ１６）
（１９）ＮＭ＿００１７５２ （カタラーゼ）
（２０）ＮＭ＿０１７７９０ （Ｇタンパク質シグナル３型制御タンパク質）
（２１）ＮＭ＿０２１１４９ （コアクトシン様タンパク質１型）
（２２）ＮＭ＿００１０１４９ （Ｔ細胞活性化リンカータンパク質）
（２３）ＮＭ＿００１０１５０５２ （Ｎ−メチルプリン型ＤＮＡグリコシラーゼ）
（２４）ＮＭ＿００２０７３ （グアニンヌクレオチド結合タンパク質アルファｚ型サブユニット）
（２５）ＮＭ＿００４６５７ （血清欠乏反応タンパク質）
（２６）ＮＭ＿００６７６３ （Ｂ細胞転座遺伝子２型、非増殖性）
（２７）ＮＭ＿０００４４２ （血小板及び内皮細胞接着分子）
（２８）ＮＭ＿００２９５７ （レチノイドＸ受容体）
（２９）ＮＭ＿００１６１７ （アデューシン２型）
（３０）ＮＭ＿０００５７６ （インターロイキン１型β）
（３１）ＮＭ＿００２９６５ （Ｓ１００カルシウム結合タンパク質Ａ９）
（３２）ＮＭ＿００３３５６ （脱共役タンパク質３型）
（３３）ＮＭ＿００１０１５８８ （ＴＳＣ２２領域ファミリー３型）
（３４）ＮＭ＿００１００４４３１ （メテオリン及びグリア細胞分化制御様タンパク質）
（３５）ＮＭ＿００２０２６ （フィブロネクチン１型）
（３６）ＮＭ＿００１０６３ （トランスフェリン）
（３７）ＮＭ＿００１９２８ （補体成分Ｄ）
（３８）ＮＭ＿００１０７９８４６ （ＣＲＥＢ結合タンパク質）
（３９）ＮＭ＿００１０３１８１２ （カゼインキナーゼ１型γ３型）
（４０）ＮＭ＿１７２０３３ （プレクストリン相同領域保存ファミリーＢタンパク質１型）
（４１）ＸＭ＿２３８４６７ （推定ＩＳＧ１２（ｂ）タンパク質）
（４２）ＡＡ９４４６７９ （転写部位）
（４３）ＡＷ９１６１０９ （転写部位）
（４４）ＮＭ＿０２０１０３ （Ｌｙ６−Ｃ抗原）
（４５）ＸＭ＿３４２４７４ （ＲＩＫＥＮ ｃＤＮＡ Ａ９３００１８Ｐ２２類似タンパク質）
（４６）ＢＧ６６６７１９ （ｃＤＮＡクローンＤＲＡＢＴＨ１２型）
（４７）ＮＭ＿００１００４２０２ （ケモカインリガンド６型）The human gene identified by the GenBank accession number selected from the following (1) to (39), or the human gene corresponding to the mouse gene identified by the GenBank accession number selected from the following (40) to (47) A diagnostic agent for type 2 diabetes comprising a nucleic acid that hybridizes to at least one kind of base sequence under stringent conditions and / or a specific antibody that binds to a human protein encoded by any of the genes or a fragment thereof.
(1) AK — 311856 (epithelial expressed fatty acid binding protein type 5)
(2) NM — 024722 (acyl coenzyme A binding region conserved protein type 4)
(3) NM_012434 (solute transporter family type 17)
(4) NM_003258 (Thymidine kinase type 1)
(5) NM_015932 (chromosome 13 translation region-like protein)
(6) NM_012068 (Transcriptional activator type 5)
(7) NM — 024901 (DENN / MADD region protein 2D)
(8) NM — 004851 (Napsin A aspartate peptidase)
(9) NM_0173327 (Guanine nucleotide binding protein alpha 0 type)
(10) NM — 016410 (chromatin modified protein type 5)
(11) NM_001300 (Kruppel-like transcription factor type 6)
(12) NM_006208 (Ectonucleotide pyrophosphatase / phosphodiesterase type 1)
(13) NM_001398 (Peroxisome-expressed enoyl coenzyme A hydrolase 1)
(14) NM — 013446 (Mkrn1-like protein)
(15) NM — 000063 (complement component type 2)
(16) NM_000371 (transthyretin-like protein)
(17) NM — 00600 (Tubulin alpha type 1)
(18) NM — 016641 (membrane interacting protein RGS16)
(19) NM_001752 (catalase)
(20) NM — 017790 (G protein signal type 3 regulatory protein)
(21) NM — 021149 (coactocin-like protein type 1)
(22) NM_0010149 (T cell activation linker protein)
(23) NM_001015052 (N-methylpurine type DNA glycosylase)
(24) NM_002073 (Guanine nucleotide binding protein alpha z-type subunit)
(25) NM_004657 (serum deficiency reaction protein)
(26) NM — 006763 (B cell translocation gene type 2, nonproliferative)
(27) NM_000442 (platelet and endothelial cell adhesion molecule)
(28) NM_002957 (Retinoid X receptor)
(29) NM_001617 (Adducin type 2)
(30) NM_000576 (Interleukin type 1 β)
(31) NM_002965 (S100 calcium binding protein A9)
(32) NM_003356 (Uncoupled protein type 3)
(33) NM_00101588 (TSC22 region family type 3)
(34) NM — 001004431 (Meteolin and glial differentiation control-like protein)
(35) NM_002026 (Fibronectin type 1)
(36) NM_001063 (transferrin)
(37) NM_001928 (complement component D)
(38) NM_001079846 (CREB binding protein)
(39) NM_001031812 (casein kinase type 1 γ3 type)
(40) NM — 172033 (Plextrin homologous region conserving family B protein type 1)
(41) XM — 238467 (Presumed ISG12 (b) protein)
(42) AA944679 (transcription site)
(43) AW916109 (transcription site)
(44) NM_020103 (Ly6-C antigen)
(45) XM — 342474 (RIKEN cDNA A930018P22-like protein)
(46) BG666719 (cDNA clone DRABTH12 type)
(47) NM_001004202 (chemokine ligand type 6) 前記（１）〜（３９）から選ばれるＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号で特定されるヒト遺伝子、又は下記（４０）〜（４７）から選ばれるＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号で特定されるマウス遺伝子に対応するヒト遺伝子の少なくとも１種類以上の塩基配列にストリンジェントな条件下でハイブリダイズする核酸及び／又は該遺伝子のいずれかにコードされるタンパク質の発現量を測定するための、請求項１に記載の２型糖尿病診断剤。  A human gene identified by a GenBank accession number selected from (1) to (39) above, or a human gene corresponding to a mouse gene identified by a GenBank accession number selected from (40) to (47) below: Diagnosis of type 2 diabetes according to claim 1, for measuring the expression level of a nucleic acid that hybridizes under stringent conditions to at least one kind of base sequence and / or a protein encoded by any of the genes Agent. 核酸又は特異抗体が固相担体に結合されている、請求項１又は２に記載の２型糖尿病診断剤。  The diagnostic agent for type 2 diabetes according to claim 1 or 2, wherein the nucleic acid or the specific antibody is bound to a solid phase carrier. 下記（１）〜（３９）から選ばれるＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号で特定されるヒト遺伝子、又は下記（４０）〜（４７）から選ばれるＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号で特定されるマウス遺伝子に対応するヒト遺伝子の少なくとも１種類以上の塩基配列にストリンジェントな条件下でハイブリダイズする核酸及び／又は該遺伝子のいずれかにコードされるヒトタンパク質と結合する特異抗体若しくはその断片を含む、２型糖尿病診断用キット。
（１）ＡＫ＿３１１８５６ （上皮発現脂肪酸結合タンパク質５型）
（２）ＮＭ＿０２４７２２ （アシル補酵素Ａ結合領域保存タンパク質４型）
（３）ＮＭ＿０１２４３４ （溶質輸送体ファミリー１７型）
（４）ＮＭ＿００３２５８ （チミジンキナーゼ１型）
（５）ＮＭ＿０１５９３２ （染色体１３番翻訳領域類似タンパク質）
（６）ＮＭ＿０１２０６８ （転写活性化因子５型）
（７）ＮＭ＿０２４９０１ （ＤＥＮＮ／ＭＡＤＤ領域タンパク質２Ｄ）
（８）ＮＭ＿００４８５１ （Ｎａｐｓｉｎ Ａアスパラギン酸ペプチダ−ゼ）
（９）ＮＭ＿０１７３２７ （グアニンヌクレオチド結合タンパク質アルファ０型）
（１０）ＮＭ＿０１６４１０ （クロマチン修飾タンパク質５型）
（１１）ＮＭ＿００１３００ （Ｋｒｕｐｐｅｌ様転写因子６型）
（１２）ＮＭ＿００６２０８ （エクトヌクレオチドピロフォスファターゼ／フォスフォジエステラーゼ１型）
（１３）ＮＭ＿００１３９８ （ペルオキシソーム発現エノイル補酵素Ａ加水酵素１）
（１４）ＮＭ＿０１３４４６ （Ｍｋｒｎ１類似タンパク質）
（１５）ＮＭ＿００００６３ （補体成分２型）
（１６）ＮＭ＿０００３７１ （トランスサイレチン類似タンパク質）
（１７）ＮＭ＿００６０００ （チューブリンアルファ１型）
（１８）ＮＭ＿０１６６４１ （膜相互作用タンパク質ＲＧＳ１６）
（１９）ＮＭ＿００１７５２ （カタラーゼ）
（２０）ＮＭ＿０１７７９０ （Ｇタンパク質シグナル３型制御タンパク質）
（２１）ＮＭ＿０２１１４９ （コアクトシン様タンパク質１型）
（２２）ＮＭ＿００１０１４９ （Ｔ細胞活性化リンカータンパク質）
（２３）ＮＭ＿００１０１５０５２ （Ｎ−メチルプリン型ＤＮＡグリコシラーゼ）
（２４）ＮＭ＿００２０７３ （グアニンヌクレオチド結合タンパク質アルファｚ型サブユニット）
（２５）ＮＭ＿００４６５７ （血清欠乏反応タンパク質）
（２６）ＮＭ＿００６７６３ （Ｂ細胞転座遺伝子２型、非増殖性）
（２７）ＮＭ＿０００４４２ （血小板及び内皮細胞接着分子）
（２８）ＮＭ＿００２９５７ （レチノイドＸ受容体）
（２９）ＮＭ＿００１６１７ （アデューシン２型）
（３０）ＮＭ＿０００５７６ （インターロイキン１型β）
（３１）ＮＭ＿００２９６５ （Ｓ１００カルシウム結合タンパク質Ａ９）
（３２）ＮＭ＿００３３５６ （脱共役タンパク質３型）
（３３）ＮＭ＿００１０１５８８ （ＴＳＣ２２領域ファミリー３型）
（３４）ＮＭ＿００１００４４３１ （メテオリン及びグリア細胞分化制御様タンパク質）
（３５）ＮＭ＿００２０２６ （フィブロネクチン１型）
（３６）ＮＭ＿００１０６３ （トランスフェリン）
（３７）ＮＭ＿００１９２８ （補体成分Ｄ）
（３８）ＮＭ＿００１０７９８４６ （ＣＲＥＢ結合タンパク質）
（３９）ＮＭ＿００１０３１８１２ （カゼインキナーゼ１型γ３型）
（４０）ＮＭ＿１７２０３３ （プレクストリン相同領域保存ファミリーＢタンパク質１型）
（４１）ＸＭ＿２３８４６７ （推定ＩＳＧ１２（ｂ）タンパク質）
（４２）ＡＡ９４４６７９ （転写部位）
（４３）ＡＷ９１６１０９ （転写部位）
（４４）ＮＭ＿０２０１０３ （Ｌｙ６−Ｃ抗原）
（４５）ＸＭ＿３４２４７４ （ＲＩＫＥＮ ｃＤＮＡ Ａ９３００１８Ｐ２２類似タンパク質）
（４６）ＢＧ６６６７１９ （ｃＤＮＡクローンＤＲＡＢＴＨ１２型）
（４７）ＮＭ＿００１００４２０２ （ケモカインリガンド６型）The human gene identified by the GenBank accession number selected from the following (1) to (39), or the human gene corresponding to the mouse gene identified by the GenBank accession number selected from the following (40) to (47) A kit for diagnosing type 2 diabetes comprising a nucleic acid that hybridizes under stringent conditions to at least one kind of base sequence and / or a specific antibody that binds to a human protein encoded by any of the genes or a fragment thereof.
(1) AK — 311856 (epithelial expressed fatty acid binding protein type 5)
(2) NM — 024722 (acyl coenzyme A binding region conserved protein type 4)
(3) NM_012434 (solute transporter family type 17)
(4) NM_003258 (Thymidine kinase type 1)
(5) NM_015932 (chromosome 13 translation region-like protein)
(6) NM_012068 (Transcriptional activator type 5)
(7) NM — 024901 (DENN / MADD region protein 2D)
(8) NM — 004851 (Napsin A aspartate peptidase)
(9) NM_0173327 (Guanine nucleotide binding protein alpha 0 type)
(10) NM — 016410 (chromatin modified protein type 5)
(11) NM_001300 (Kruppel-like transcription factor type 6)
(12) NM_006208 (Ectonucleotide pyrophosphatase / phosphodiesterase type 1)
(13) NM_001398 (Peroxisome-expressed enoyl coenzyme A hydrolase 1)
(14) NM — 013446 (Mkrn1-like protein)
(15) NM — 000063 (complement component type 2)
(16) NM_000371 (transthyretin-like protein)
(17) NM — 00600 (Tubulin alpha type 1)
(18) NM — 016641 (membrane interacting protein RGS16)
(19) NM_001752 (catalase)
(20) NM — 017790 (G protein signal type 3 regulatory protein)
(21) NM — 021149 (coactocin-like protein type 1)
(22) NM_0010149 (T cell activation linker protein)
(23) NM_001015052 (N-methylpurine type DNA glycosylase)
(24) NM_002073 (Guanine nucleotide binding protein alpha z-type subunit)
(25) NM_004657 (serum deficiency reaction protein)
(26) NM — 006763 (B cell translocation gene type 2, nonproliferative)
(27) NM_000442 (platelet and endothelial cell adhesion molecule)
(28) NM_002957 (Retinoid X receptor)
(29) NM_001617 (Adducin type 2)
(30) NM_000576 (Interleukin type 1 β)
(31) NM_002965 (S100 calcium binding protein A9)
(32) NM_003356 (Uncoupled protein type 3)
(33) NM_00101588 (TSC22 region family type 3)
(34) NM — 001004431 (Meteolin and glial differentiation control-like protein)
(35) NM_002026 (Fibronectin type 1)
(36) NM_001063 (transferrin)
(37) NM_001928 (complement component D)
(38) NM_001079846 (CREB binding protein)
(39) NM_001031812 (casein kinase type 1 γ3 type)
(40) NM — 172033 (Plextrin homologous region conserving family B protein type 1)
(41) XM — 238467 (Presumed ISG12 (b) protein)
(42) AA944679 (transcription site)
(43) AW916109 (transcription site)
(44) NM_020103 (Ly6-C antigen)
(45) XM — 342474 (RIKEN cDNA A930018P22-like protein)
(46) BG666719 (cDNA clone DRABTH12 type)
(47) NM_001004202 (chemokine ligand type 6) 核酸又は特異抗体が固相担体に結合されている、請求項４に記載のキット。  The kit according to claim 4, wherein the nucleic acid or the specific antibody is bound to a solid phase carrier. 非ヒト動物に候補物質を投与する工程（ａ）、及び該動物の白血球における下記（１）〜（３９）から選ばれるＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号で特定されるヒト遺伝子に対応する当該非ヒト動物遺伝子、又は下記（４０）〜（４７）から選ばれるＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号で特定されるマウス遺伝子に対応する非ヒト動物遺伝子及び／又は該遺伝子のいずれかにコードされる非ヒト動物タンパク質の発現量を測定する工程を含む、２型糖尿病の予防薬及び／又は治療薬のスクリーニング法。
（１）ＡＫ＿３１１８５６ （上皮発現脂肪酸結合タンパク質５型）
（２）ＮＭ＿０２４７２２ （アシル補酵素Ａ結合領域保存タンパク質４型）
（３）ＮＭ＿０１２４３４ （溶質輸送体ファミリー１７型）
（４）ＮＭ＿００３２５８ （チミジンキナーゼ１型）
（５）ＮＭ＿０１５９３２ （染色体１３番翻訳領域類似タンパク質）
（６）ＮＭ＿０１２０６８ （転写活性化因子５型）
（７）ＮＭ＿０２４９０１ （ＤＥＮＮ／ＭＡＤＤ領域タンパク質２Ｄ）
（８）ＮＭ＿００４８５１ （Ｎａｐｓｉｎ Ａアスパラギン酸ペプチダ−ゼ）
（９）ＮＭ＿０１７３２７ （グアニンヌクレオチド結合タンパク質アルファ０型）
（１０）ＮＭ＿０１６４１０ （クロマチン修飾タンパク質５型）
（１１）ＮＭ＿００１３００ （Ｋｒｕｐｐｅｌ様転写因子６型）
（１２）ＮＭ＿００６２０８ （エクトヌクレオチドピロフォスファターゼ／フォスフォジエステラーゼ１型）
（１３）ＮＭ＿００１３９８ （ペルオキシソーム発現エノイル補酵素Ａ加水酵素１）
（１４）ＮＭ＿０１３４４６ （Ｍｋｒｎ１類似タンパク質）
（１５）ＮＭ＿００００６３ （補体成分２型）
（１６）ＮＭ＿０００３７１ （トランスサイレチン類似タンパク質）
（１７）ＮＭ＿００６０００ （チューブリンアルファ１型）
（１８）ＮＭ＿０１６６４１ （膜相互作用タンパク質ＲＧＳ１６）
（１９）ＮＭ＿００１７５２ （カタラーゼ）
（２０）ＮＭ＿０１７７９０ （Ｇタンパク質シグナル３型制御タンパク質）
（２１）ＮＭ＿０２１１４９ （コアクトシン様タンパク質１型）
（２２）ＮＭ＿００１０１４９ （Ｔ細胞活性化リンカータンパク質）
（２３）ＮＭ＿００１０１５０５２ （Ｎ−メチルプリン型ＤＮＡグリコシラーゼ）
（２４）ＮＭ＿００２０７３ （グアニンヌクレオチド結合タンパク質アルファｚ型サブユニット）
（２５）ＮＭ＿００４６５７ （血清欠乏反応タンパク質）
（２６）ＮＭ＿００６７６３ （Ｂ細胞転座遺伝子２型、非増殖性）
（２７）ＮＭ＿０００４４２ （血小板及び内皮細胞接着分子）
（２８）ＮＭ＿００２９５７ （レチノイドＸ受容体）
（２９）ＮＭ＿００１６１７ （アデューシン２型）
（３０）ＮＭ＿０００５７６ （インターロイキン１型β）
（３１）ＮＭ＿００２９６５ （Ｓ１００カルシウム結合タンパク質Ａ９）
（３２）ＮＭ＿００３３５６ （脱共役タンパク質３型）
（３３）ＮＭ＿００１０１５８８ （ＴＳＣ２２領域ファミリー３型）
（３４）ＮＭ＿００１００４４３１ （メテオリン及びグリア細胞分化制御様タンパク質）
（３５）ＮＭ＿００２０２６ （フィブロネクチン１型）
（３６）ＮＭ＿００１０６３ （トランスフェリン）
（３７）ＮＭ＿００１９２８ （補体成分Ｄ）
（３８）ＮＭ＿００１０７９８４６ （ＣＲＥＢ結合タンパク質）
（３９）ＮＭ＿００１０３１８１２ （カゼインキナーゼ１型γ３型）
（４０）ＮＭ＿１７２０３３ （プレクストリン相同領域保存ファミリーＢタンパク質１型）
（４１）ＸＭ＿２３８４６７ （推定ＩＳＧ１２（ｂ）タンパク質）
（４２）ＡＡ９４４６７９ （転写部位）
（４３）ＡＷ９１６１０９ （転写部位）
（４４）ＮＭ＿０２０１０３ （Ｌｙ６−Ｃ抗原）
（４５）ＸＭ＿３４２４７４ （ＲＩＫＥＮ ｃＤＮＡ Ａ９３００１８Ｐ２２類似タンパク質）
（４６）ＢＧ６６６７１９ （ｃＤＮＡクローンＤＲＡＢＴＨ１２型）
（４７）ＮＭ＿００１００４２０２ （ケモカインリガンド６型）A step (a) of administering a candidate substance to a non-human animal, and the non-human animal gene corresponding to a human gene identified by a GenBank accession number selected from the following (1) to (39) in leukocytes of the animal: Alternatively, the expression level of a non-human animal gene corresponding to a mouse gene specified by a GenBank accession number selected from the following (40) to (47) and / or a non-human animal protein encoded by the gene is measured. A method for screening for a prophylactic and / or therapeutic drug for type 2 diabetes.
(1) AK — 311856 (epithelial expressed fatty acid binding protein type 5)
(2) NM — 024722 (acyl coenzyme A binding region conserved protein type 4)
(3) NM_012434 (solute transporter family type 17)
(4) NM_003258 (Thymidine kinase type 1)
(5) NM_015932 (chromosome 13 translation region-like protein)
(6) NM_012068 (Transcriptional activator type 5)
(7) NM — 024901 (DENN / MADD region protein 2D)
(8) NM — 004851 (Napsin A aspartate peptidase)
(9) NM_0173327 (Guanine nucleotide binding protein alpha 0 type)
(10) NM — 016410 (chromatin modified protein type 5)
(11) NM_001300 (Kruppel-like transcription factor type 6)
(12) NM_006208 (Ectonucleotide pyrophosphatase / phosphodiesterase type 1)
(13) NM_001398 (Peroxisome-expressed enoyl coenzyme A hydrolase 1)
(14) NM — 013446 (Mkrn1-like protein)
(15) NM — 000063 (complement component type 2)
(16) NM_000371 (transthyretin-like protein)
(17) NM — 00600 (Tubulin alpha type 1)
(18) NM — 016641 (membrane interacting protein RGS16)
(19) NM_001752 (catalase)
(20) NM — 017790 (G protein signal type 3 regulatory protein)
(21) NM — 021149 (coactocin-like protein type 1)
(22) NM_0010149 (T cell activation linker protein)
(23) NM_001015052 (N-methylpurine type DNA glycosylase)
(24) NM_002073 (Guanine nucleotide binding protein alpha z-type subunit)
(25) NM_004657 (serum deficiency reaction protein)
(26) NM — 006763 (B cell translocation gene type 2, nonproliferative)
(27) NM_000442 (platelet and endothelial cell adhesion molecule)
(28) NM_002957 (Retinoid X receptor)
(29) NM_001617 (Adducin type 2)
(30) NM_000576 (Interleukin type 1 β)
(31) NM_002965 (S100 calcium binding protein A9)
(32) NM_003356 (Uncoupled protein type 3)
(33) NM_00101588 (TSC22 region family type 3)
(34) NM — 001004431 (Meteolin and glial differentiation control-like protein)
(35) NM_002026 (Fibronectin type 1)
(36) NM_001063 (transferrin)
(37) NM_001928 (complement component D)
(38) NM_001079846 (CREB binding protein)
(39) NM_001031812 (casein kinase type 1 γ3 type)
(40) NM — 172033 (Plextrin homologous region conserving family B protein type 1)
(41) XM — 238467 (Presumed ISG12 (b) protein)
(42) AA944679 (transcription site)
(43) AW916109 (transcription site)
(44) NM_020103 (Ly6-C antigen)
(45) XM — 342474 (RIKEN cDNA A930018P22-like protein)
(46) BG666719 (cDNA clone DRABTH12 type)
(47) NM_001004202 (chemokine ligand type 6) 非ヒト動物が２型糖尿病モデル非ヒト動物である、請求項６に記載のスクリーニング方法。  The screening method according to claim 6, wherein the non-human animal is a type 2 diabetes model non-human animal. 前記（１）〜（３９）から選ばれるＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号で特定されるヒト遺伝子に対応する非ヒト遺伝子、又は前記（４０）〜（４７）から選ばれるＧｅｎＢａｎｋアクセッション番号で特定されるマウス遺伝子に対応する非ヒト遺伝子の塩基配列にストリンジェントな条件下でハイブリダイズする核酸及び／又は該遺伝子のいずれかにコードされる非ヒト動物タンパク質と結合する特異抗体若しくはその断片を含む、請求項６に記載のスクリーニング用キット。  A non-human gene corresponding to a human gene identified by a GenBank accession number selected from (1) to (39) or a mouse gene identified by a GenBank accession number selected from (40) to (47) A nucleic acid that hybridizes under stringent conditions to a nucleotide sequence of a non-human gene corresponding to the above and / or a specific antibody or fragment thereof that binds to a non-human animal protein encoded by any of the genes. A screening kit according to 1. 核酸又は特異抗体が固相担体に結合されている、請求項８に記載のキット。  The kit according to claim 8, wherein the nucleic acid or the specific antibody is bound to a solid phase carrier.