JP2010252746A - Bacterium analyzer - Google Patents

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Takahiro Hatano
孝裕 羽田野
Junichi Kodate
淳一 小舘
Norio Sato
昇男 佐藤
Tomoshi Shigematsu
智志 重松
Mamoru Nakanishi
衛 中西
Hitoshi Ishii
仁 石井
Katsuyuki Machida
克之 町田
Shinichi Yoshida
眞一 吉田
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Kyushu University NUC
NTT Advanced Technology Corp
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Kyushu University NUC
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Abstract

<P>PROBLEM TO BE SOLVED: To provide a bacterium analyzer which can more simply and quickly analyze bacteria. <P>SOLUTION: A bacterium-inducing mechanism A102a, a bacterium-inducing mechanism B102b give stimulation sources having directionality for expressing taxes in bacteria of measurement target, to a liquid received in a bacterium-inducing route A101a, a bacterium-inducing route B101b. The bacterium-inducing mechanism A102a, the bacterium-inducing mechanism B102b give stimulation sources for expressing taxes in different bacteria, respectively, to the liquids received in the bacterium-inducing route A101a and the bacterium-inducing route B101b. A detecting portion A103a, a detection portion B103b detect fine particles moving along the bacterium-inducing route A101a, the bacterium-inducing route B101b. Results (data) detected with the detecting portion A103a, the detection portion B103b are collected and analyzed with an analysis-displaying portion 106, and the results are displayed. <P>COPYRIGHT: (C)2011,JPO&amp;INPIT

Description

本発明は、細菌の有無を検出するなど細菌の分析を行う細菌分析装置に関するものである。   The present invention relates to a bacteria analyzer for analyzing bacteria such as detecting the presence or absence of bacteria.

近年、細菌による感染症が多数報告されている。この中には、死に至る場合もあり、対策と対策の重要性が認識されている。例えば、レジオネラ（レジオネラ属菌）は、クーラーの冷却塔水、噴水や雑用水中に生存し、エアロゾルが生じた際に人に吸引され、人に肺炎などのレジオネラ症を発症させることが知られている（非特許文献１参照）。   In recent years, many bacterial infections have been reported. Some of them are fatal, and the importance of countermeasures and countermeasures is recognized. For example, Legionella (Legionella spp.) Is known to survive in cooler cooling tower water, fountains and miscellaneous water, and is inhaled by people when aerosol is generated, causing legionellosis such as pneumonia in people. (See Non-Patent Document 1).

近年、多くの温泉付き旅館・ホテルでは、慢性的な温泉の元湯量不足を解消するために、循環ろ過式浴槽を用い、一度使用した浴槽水を循環ろ過して再度浴槽水として使用している。このような環境では、アメーバが、浴槽などの表面に形成されるバイオフィルムに付着して生息している。このアメーバに寄生してレジオネラ属菌は増殖するため、上述したような環境で増殖したレジオネラが、レジオネラ症の感染源となる。   In recent years, many inns and hotels with hot springs use a circulating filtration bathtub to circulate and filter the bath water once used to relieve the lack of chronic hot spring water. . In such an environment, an amoeba is attached to a biofilm formed on the surface of a bathtub or the like and inhabits. Since Legionella spp. Grows infesting this amoeba, Legionella proliferated in the environment as described above becomes a source of infection of Legionellosis.

西暦２０００年から２００２年にかけて、石岡市、浜松市、日向市、東郷町などで温泉利用客がレジオネラに集団感染して社会問題となった。現在、温泉・公衆浴場を営業している業者には、少なくとも年に１回のレジオネラの菌数測定検査が義務づけられている。非特許文献２に、全国各地の温泉水に含まれるレジオネラの検査結果が報告されている。この報告の中で用いられているレジオネラ属菌の測定は、次のとおりである。   From 2000 to 2002 AD, hot spring customers became infected with Legionella in Ishioka City, Hamamatsu City, Hyuga City, Togo Town, etc. and became a social problem. Currently, contractors operating hot springs and public baths are obliged to perform Legionella bacteria count testing at least once a year. Non-patent document 2 reports the test results of Legionella contained in hot spring waters throughout the country. The measurement of Legionella genus used in this report is as follows.

試料２００ｍｌを、６０００ｒｐｍ・３０分間の遠心分離により１ｍリットルに濃縮する。次いで、濃縮した試料に、等量の０．２ＭのＨＣｌ−ＫＣｌ溶液（ｐＨ２．２）を用いて酸処理（１５分間）を行う。この後、ＷＹＯα寒天培地およびＧＶＰＣα寒天培地に各々０．１ｍｌずつ滴下し、培地全体にコンラージ棒で塗抹し、これらを３７℃で７日間培養する。この培養の後、寒天培地の上でレジオネラ属菌を疑う集落を釣菌し、これを、血液寒天培地とＢＣＹＥα寒天培地の２分割平板培地に塗抹し、純培養と同時にシステイン要求性試験を行う。グラム陰性の長桿菌で血液寒天培地には発育せず、ＢＣＹＥα寒天培地に発育した菌株を、レジオネラ属菌とする。また、ラテックス凝集反応、免疫血清凝集反応、およびＤＮＡ−ＤＮＡハイブリダイゼーションにより、菌種の同定を行う。   A 200 ml sample is concentrated to 1 ml by centrifugation at 6000 rpm for 30 minutes. The concentrated sample is then acid treated (15 minutes) with an equal volume of 0.2 M HCl-KCl solution (pH 2.2). Thereafter, 0.1 ml each is dropped on the WYOα agar medium and the GVPCα agar medium, smeared with a congeal rod over the whole medium, and these are cultured at 37 ° C. for 7 days. After this culture, a colony suspected to be Legionella is caught on the agar medium, and this is smeared on a two-part plate medium of blood agar medium and BCYEα agar medium, and a cysteine requirement test is performed simultaneously with the pure culture. . A strain that is a gram-negative gallbladder and does not grow on a blood agar medium but grows on a BCYEα agar medium is referred to as Legionella spp. In addition, bacterial species are identified by latex agglutination, immune serum agglutination, and DNA-DNA hybridization.

また、特許文献１には、迅速な細菌の濃縮を行うため、電気泳動と走化性の両方を利用する技術が示されている。この技術では、多孔質膜を電極で挟んで電荷を付与することで、多孔質膜に電位および走化性をもたらす化学物質の濃度勾配を形成し、細菌を移動させている。   Patent Document 1 discloses a technique that uses both electrophoresis and chemotaxis to rapidly concentrate bacteria. In this technique, a charge is applied by sandwiching a porous membrane between electrodes, thereby forming a concentration gradient of a chemical substance that brings potential and chemotaxis to the porous membrane, thereby moving bacteria.

特開２０００−２６２８６５号公報JP 2000-262865 A

「新版 レジオネラ症防止指針」、財団法人 ビル管理教育センター、５刷、ｐｐ．３−１７，平成１５年５月。"New Legionellosis Prevention Guidelines", Building Management Education Center, 5th edition, pp. 3-17, May 2003. 古畑 勝則 他、「温泉水からのレジオネラ属菌の分離状況」、感染症学雑誌、第７８巻、第８号、ｐｐ．７１０−７１６、２００４年。Furuhata Katsunori et al., “Segregation of Legionella spp. From hot spring water”, Journal of Infectious Diseases, Vol. 710-716, 2004. 佐藤 昇男 他、「３次元ＭＥＭＳ構造封止のためのＳＴＰ技術とその応用」、ＮＴＴジャーナル、２００７年７月号、ｐｐ．１５−１８。Nobuo Sato et al., “STP technology for 3D MEMS structure sealing and its application”, NTT Journal, July 2007, pp. 15-18.

しかしながら、上述した細菌の分析方法では、培養をするなど結果が判明するまでの多くの時間を必要としている。また、複雑で特殊な手順を踏む必要があり、細菌の検出に多数の器材および装置を必要としている。また、電気泳動と走化性を利用した技術では、迅速性を実現可能としているが、細菌を移動させる機構の他に、溶液を撹拌する機械や、微細領域に電界をかけて電気泳動を使用することにより生じる発熱を抑える冷却機構が別途に必要となる。このため、装置の小型化および測定手順の簡易性を実現することが容易ではない。このように、現状では、例えば、温泉・公衆浴場などで簡便にレジオネラの検出（測定）を行うことができず、測定の回数を増やして安全性を高めることの障害となっている。   However, the above-described method for analyzing bacteria requires a lot of time until the results become clear, such as culturing. In addition, complicated and special procedures are required, and a large number of equipment and devices are required for detection of bacteria. In addition, the technology using electrophoresis and chemotaxis makes it possible to achieve speediness, but in addition to the mechanism that moves bacteria, it uses a machine that stirs solutions and electrophoresis by applying an electric field to a fine region. A cooling mechanism that suppresses the heat generated by the operation is required separately. For this reason, it is not easy to realize downsizing of the apparatus and simplicity of the measurement procedure. Thus, at present, for example, legionella cannot be easily detected (measured) at a hot spring or a public bath, which is an obstacle to increasing the number of times of measurement and improving safety.

本発明は、以上のような問題点を解消するためになされたものであり、より簡便かつ迅速に細菌の分析ができるようにすることを目的とする。   The present invention has been made to solve the above-described problems, and an object thereof is to make it possible to analyze bacteria more simply and quickly.

本発明に係る細菌分析装置は、測定対象の細菌を含んだ液体が収容されて並列に接続された複数の細菌誘導路と、これらの細菌誘導路に収容された液体の各々に、細菌に走性を発現させる方向性のある刺激源を与える細菌誘導手段と、各々の細菌誘導路を移動する微粒子を検出する複数の検出手段とを備え、細菌誘導手段は、各々の細菌誘導路に収容されている液体に対し、各々異なる刺激源を与える。   The bacteria analyzer according to the present invention is configured to run bacteria on each of a plurality of bacteria guide paths in which a liquid containing bacteria to be measured is stored and connected in parallel, and each of the liquids stored in these bacteria guide paths. Provided with a bacterial guidance means for providing a directional stimulation source for expressing sex and a plurality of detection means for detecting fine particles moving in each bacterial guidance path, wherein the bacterial guidance means is accommodated in each bacterial guidance path. A different stimulus source is given to each liquid.

上記細菌分析装置において、細菌誘導手段は、方向性のある刺激源として、化学物質，電位，磁場，光，および重力の少なくとも１つを細菌誘導路に収容された液体に与えるものであればよい。   In the above bacteria analyzer, the bacteria induction means may be any means that provides at least one of a chemical substance, a potential, a magnetic field, light, and gravity as a directional stimulation source to the liquid contained in the bacteria induction path. .

上記細菌分析装置において、細菌誘導路の一端に接続され、液体が注入される注入部を備えるようにしてもよい。また、各々の細菌誘導路の他端に接続された複数の細菌誘導部を備え、検出手段は、細菌誘導部に移動した微粒子を検出するようにしてもよい。   The above bacteria analyzer may include an injection part connected to one end of the bacteria guiding path and into which a liquid is injected. In addition, a plurality of bacteria guiding units connected to the other end of each bacteria guiding path may be provided, and the detection means may detect fine particles that have moved to the bacteria guiding unit.

上記細菌分析装置において、細菌誘導路は、溝であり、また、溝は、側部が覆われている管であればよい。   In the bacteria analyzer, the bacteria guiding path is a groove, and the groove may be a tube whose side is covered.

以上説明したように、本発明によれば、並列に接続された複数の細菌誘導路に収容された液体の各々に、細菌に走性を発現させる方向性のある刺激源を与え、各々の細菌誘導路を移動する微粒子を検出するようにしたので、より簡便かつ迅速に細菌の分析ができるようになるという優れた効果が得られる。   As described above, according to the present invention, each of the liquids accommodated in the plurality of bacteria guide paths connected in parallel is provided with a directional stimulus source that causes the bacteria to exhibit chemotaxis, and each of the bacteria Since the fine particles moving along the guide path are detected, an excellent effect that bacteria can be analyzed more easily and quickly can be obtained.

本発明の実施の形態１における細菌分析装置の構成を示す構成図である。It is a block diagram which shows the structure of the bacteria analyzer in Embodiment 1 of this invention. 本発明の実施の形態１における他の細菌分析装置の構成を示す構成図である。It is a block diagram which shows the structure of the other bacteria analyzer in Embodiment 1 of this invention. 本発明の実施の形態１における他の細菌分析装置の構成を示す構成図である。It is a block diagram which shows the structure of the other bacteria analyzer in Embodiment 1 of this invention. 本発明の実施の形態２における細菌分析装置の構成を示す構成図である。It is a block diagram which shows the structure of the bacteria analyzer in Embodiment 2 of this invention. 本発明の実施の形態２における他の細菌分析装置の構成を示す構成図である。It is a block diagram which shows the structure of the other bacteria analyzer in Embodiment 2 of this invention.

以下、本発明の実施の形態について図を参照して説明する。   Hereinafter, embodiments of the present invention will be described with reference to the drawings.

［実施の形態１］
始めに、本発明の実施の形態１について説明する。図１は、本発明の実施の形態１における細菌分析装置の構成を示す構成図である。図１では、装置の概略的な平面図を示している。 [Embodiment 1]
First, the first embodiment of the present invention will be described. FIG. 1 is a configuration diagram showing the configuration of the bacteria analysis apparatus according to Embodiment 1 of the present invention. FIG. 1 shows a schematic plan view of the apparatus.

この細菌分析装置は、細菌誘導路Ａ１０１ａ，細菌誘導路Ｂ１０１ｂ，細菌誘導機構Ａ１０２ａ，細菌誘導機構Ｂ１０２ｂ，検出部Ａ１０３ａ，検出部Ｂ１０３ｂを備える。細菌誘導路Ａ１０１ａおよび細菌誘導路Ｂ１０１ｂは、一端側を起点としこれより分岐して並列に接続されている。なお、細菌誘導路Ａ１０１ａ，細菌誘導路Ｂ１０１ｂは、例えば、径が数μｍの微細流路である。   This bacteria analyzer includes a bacteria guide path A101a, a bacteria guide path B101b, a bacteria guide mechanism A102a, a bacteria guide mechanism B102b, a detection unit A103a, and a detection unit B103b. The bacteria guide path A101a and the bacteria guide path B101b start from one end side and branch from this to be connected in parallel. The bacteria guiding path A101a and the bacteria guiding path B101b are, for example, fine channels having a diameter of several μm.

また、細菌誘導路Ａ１０１ａおよび細菌誘導路Ｂ１０１ｂの一端に接続される注入部１０４を備える。また、細菌誘導路Ａ１０１ａおよび細菌誘導路Ｂ１０１ｂの各々の他端に接続される細菌誘導部１０５ａおよび細菌誘導部１０５ｂを備える。細菌誘導路Ａ１０１ａおよび細菌誘導路Ｂ１０１ｂは、測定対象の細菌を含んだ液体が収容される。   Moreover, the injection part 104 connected to the end of bacteria guidance path A101a and bacteria guidance path B101b is provided. Moreover, it has the bacteria guidance part 105a and the bacteria guidance part 105b connected to each other end of each of bacteria guidance path A101a and bacteria guidance path B101b. The bacteria guide path A101a and the bacteria guide path B101b contain a liquid containing bacteria to be measured.

例えば、測定対象の細菌を含んだ液体は、注入部１０４に注入され、細菌誘導路Ａ１０１ａおよび細菌誘導路Ｂ１０１ｂに分岐されて導入される。また、注入部１０４に注入された測定対象の液体は、細菌誘導路Ａ１０１ａおよび細菌誘導路Ｂ１０１ｂを介して細菌誘導部１０５ａおよび細菌誘導部１０５ｂに導入される。   For example, a liquid containing bacteria to be measured is injected into the injection unit 104 and branched into the bacteria guiding path A101a and the bacteria guiding path B101b. In addition, the liquid to be measured injected into the injection unit 104 is introduced into the bacteria guidance unit 105a and the bacteria guidance unit 105b via the bacteria guidance channel A101a and the bacteria guidance channel B101b.

例えば、注入部１０４から細菌誘導路Ａ１０１ａおよび細菌誘導部１０５ａにかけて、測定対象の液体が全体に収容された状態となり、また、細菌誘導路Ｂ１０１ｂおよび細菌誘導部１０５ｂにかけて測定対象の液体が全体に収容された状態となるまで、注入部１０４に測定対象の液体を注入すればよい。また、注入部１０４に対する測定対象の液体の注入は、例えば、スポイトもしくはマイクロポンプなどにより行えばよい。ここで、重要なことは、分析を行うときには、注入された液体の流が、細菌誘導路Ａ１０１ａおよび細菌誘導路Ｂ１０１ｂに発生しない状態とすることである。   For example, the liquid to be measured is contained in the whole from the injection part 104 to the bacteria guidance path A101a and the bacteria guidance part 105a, and the liquid to be measured is contained in the whole from the bacteria guidance path B101b and the bacteria guidance part 105b. The liquid to be measured may be injected into the injection unit 104 until the state is reached. Moreover, the injection of the liquid to be measured into the injection unit 104 may be performed by, for example, a dropper or a micro pump. Here, what is important is that when the analysis is performed, the flow of the injected liquid is not generated in the bacteria guide path A101a and the bacteria guide path B101b.

細菌誘導機構Ａ１０２ａ，細菌誘導機構Ｂ１０２ｂは、上述したようにすることで細菌誘導路Ａ１０１ａおよび細菌誘導路Ｂ１０１ｂに収容された液体に対し、測定対象の細菌に走性を発現させる方向性のある刺激源を与える。また、細菌誘導機構Ａ１０２ａ，細菌誘導機構Ｂ１０２ｂは、各々異なる細菌に走性を発現させる刺激源を、細菌誘導路Ａ１０１ａおよび細菌誘導路Ｂ１０１ｂに収容された液体に与える。なお、刺激源としては、化学物質，電位，磁場，光，および重力などがある。また、検出部Ａ１０３ａ，検出部Ｂ１０３ｂは、細菌誘導路Ａ１０１ａおよび細菌誘導路Ｂ１０１ｂを移動する微粒子を検出する。検出部Ａ１０３ａ，検出部Ｂ１０３ｂが検出した結果（データ）は、解析・表示部１０６により収集されて解析され、この結果が表示される。   The bacteria induction mechanism A102a and the bacteria induction mechanism B102b are directed to cause the bacteria to be measured to express chemotaxis with respect to the liquid contained in the bacteria induction path A101a and the bacteria induction path B101b as described above. Give the source. In addition, the bacteria induction mechanism A102a and the bacteria induction mechanism B102b give a stimulus source that causes different bacteria to express chemotaxis to the liquids contained in the bacteria induction path A101a and the bacteria induction path B101b. Note that the stimulus source includes a chemical substance, a potential, a magnetic field, light, and gravity. Moreover, the detection part A103a and the detection part B103b detect the microparticles | fine-particles which move the bacteria guidance path A101a and the bacteria guidance path B101b. The results (data) detected by the detection unit A 103a and the detection unit B 103b are collected and analyzed by the analysis / display unit 106, and the results are displayed.

細菌誘導機構Ａ１０２ａ，細菌誘導機構Ｂ１０２ｂの各々より上述したような刺激源が与えられると、各々の刺激源の対象となる細菌が走性を発現し、細菌誘導路Ａ１０１ａおよび細菌誘導路Ｂ１０１ｂ移動するようになる。よく知られているように、細菌は、鞭毛などによる運動機能を備えており、また、化学物質，電位，磁場，光，および重力などの特定の刺激により発現する走性を備えている。これに対し、細菌誘導路Ａ１０１ａおよび細菌誘導路Ｂ１０１ｂに収容されている液体中の細菌以外の微細な異物などは、上記刺激源が与えられても移動をすることがない。   When a stimulus source as described above is given from each of the bacteria induction mechanism A102a and the bacteria induction mechanism B102b, the bacteria that are the targets of each stimulus source develop chemotaxis, and the bacteria induction path A101a and the bacteria induction path B101b move. It becomes like this. As is well known, bacteria have a motor function such as flagella, and also have a chemotaxis expressed by specific stimuli such as chemical substances, electric potentials, magnetic fields, light, and gravity. On the other hand, fine foreign substances other than bacteria in the liquid accommodated in the bacteria guide path A101a and the bacteria guide path B101b do not move even when the stimulus source is given.

また、対象とならない刺激では走性を発現しない他の細菌も、移動をすることはないものと考えられる。このため、細菌誘導機構Ａ１０２ａにより与えられた刺激源により走性を発現する細菌と、細菌誘導機構Ｂ１０２ｂにより与えられた刺激源により走性を発現する細菌とは、異なるものと考えることができる。   In addition, it is considered that other bacteria that do not express chemotaxis by non-target stimuli do not migrate. For this reason, it can be considered that the bacteria that express the chemotaxis by the stimulus source given by the bacteria induction mechanism A102a and the bacteria that express the chemotaxis by the stimulus source given by the bacteria induction mechanism B102b.

従って、細菌誘導機構Ａ１０２ａより刺激源を与えた状態で、検出部Ａ１０３ａにより細菌誘導路Ａ１０１ａを移動する微粒子を検出すれば、これが、細菌誘導機構Ａ１０２ａからの刺激源で走性を発現する細菌であるものと判断（同定）することができる。また、細菌誘導機構Ｂ１０２ｂより刺激源を与えた状態で、検出部Ｂ１０３ｂにより細菌誘導路Ｂ１０１ｂを移動する微粒子を検出すれば、これが、細菌誘導機構Ｂ１０２ｂからの刺激源で走性を発現する細菌であるものと判断することができる。   Therefore, if the detection unit A103a detects a microparticle moving along the bacterial guidance path A101a in a state where a stimulus source is applied from the bacteria guidance mechanism A102a, this is a bacterium that expresses chemotaxis with the stimulus source from the bacteria guidance mechanism A102a. It can be judged (identified). In addition, when the detection unit B103b detects fine particles moving in the bacterial guidance path B101b with a stimulus source from the bacteria guidance mechanism B102b, this is a bacterium that exhibits chemotaxis as a stimulus source from the bacteria guidance mechanism B102b. It can be judged that there is.

ここで、検出部Ａ１０３ａ，検出部Ｂ１０３ｂは、例えば、よく知られたパーティクルカウンターなど、レーザ光を照射した状態で検出される散乱光の有無により、液体中を移動する微粒子を検出するものであればよい。また、いわゆるＣＣＤ型およびＣＭＯＳ型などのイメージセンサによる撮像で得られる画像データより、微粒子を検出し、また、検出した微粒子の個数を計数するものであってもよい。   Here, the detection unit A103a and the detection unit B103b are, for example, a well-known particle counter or the like that detects fine particles moving in the liquid based on the presence or absence of scattered light detected in the state of laser light irradiation. That's fine. Further, fine particles may be detected from image data obtained by imaging with a so-called CCD type or CMOS type image sensor, and the number of detected fine particles may be counted.

なお、解析・表示部１０６は、検出部Ａ１０３ａ，検出部Ｂ１０３ｂが移動する微粒子を検出すると、対象とする細菌が検出されたことを表示する。また、検出部Ａ１０３ａ，検出部Ｂ１０３ｂが検出した移動する微粒子の数を、対象とする細菌数として表示する。   The analysis / display unit 106 displays that target bacteria have been detected when the detection unit A 103a and the detection unit B 103b detect the moving particles. In addition, the number of moving fine particles detected by the detection unit A103a and the detection unit B103b is displayed as the target number of bacteria.

このように、本発明における細菌分析装置では、細菌誘導機構（細菌誘導手段）により、複数の刺激源の各々を、細菌誘導路Ａ１０１ａおよび細菌誘導路Ｂ１０１ｂに収容された液体に与えることが重要である。本実施の形態では、２つの細菌誘導機構により２つの刺激源を与える場合について説明している。１つの細菌誘導機構で複数の刺激源を与えるようにしてもよい。   As described above, in the bacteria analysis apparatus according to the present invention, it is important to give each of the plurality of stimulation sources to the liquid accommodated in the bacteria guidance path A101a and the bacteria guidance path B101b by the bacteria guidance mechanism (bacteria guidance means). is there. In the present embodiment, a case where two stimulation sources are given by two bacterial induction mechanisms is described. A plurality of stimulation sources may be provided by one bacterial guidance mechanism.

本発明では、細菌誘導路Ａ１０１ａおよび細菌誘導路Ｂ１０１ｂに収容された対象とする液体の各々に、分析対象の細菌に走性を発現させる刺激源を与え、細菌誘導路Ａ１０１ａおよび細菌誘導路Ｂ１０１ｂを移動する微粒子を、検出部Ａ１０３ａおよび検出部Ｂ１０３ｂで検出するようにしたところに特徴がある。また、各細菌誘導路に対して各々異なる刺激源を与えるところに特徴がある。従って、検出部Ａ１０３ａ，検出部Ｂ１０３ｂに流のない状態で対象の液体が収容できれば、注入部１０４および細菌誘導部１０５ａ，細菌誘導部１０５ｂは無くてもよい。   In the present invention, each of the target liquids contained in the bacteria guide path A101a and the bacteria guide path B101b is provided with a stimulus source that causes the bacteria to be analyzed to express chemotaxis, and the bacteria guide path A101a and the bacteria guide path B101b are provided. There is a feature in that the moving fine particles are detected by the detection unit A103a and the detection unit B103b. Further, the present invention is characterized in that a different stimulus source is given to each bacterial guide path. Therefore, as long as the target liquid can be stored without flowing in the detection unit A 103a and the detection unit B 103b, the injection unit 104, the bacteria guidance unit 105a, and the bacteria guidance unit 105b may be omitted.

上述した構成とした本発明によれば、非常に簡便で、また、迅速に細菌の分析ができるようになる。また、細菌誘導路Ａ１０１ａおよび細菌誘導路Ｂ１０１ｂと、複数の細菌誘導路を設けるようにしたので、各々個別に異なる細菌を同時に分析できるようになる。このため、複数の細菌の選別や、細菌数の個別の計数などが迅速に行えるようになる。   According to the present invention configured as described above, bacteria can be analyzed very easily and quickly. In addition, since the bacteria guiding path A101a and the bacteria guiding path B101b and a plurality of bacteria guiding paths are provided, different bacteria can be analyzed simultaneously. For this reason, it becomes possible to quickly select a plurality of bacteria and to individually count the number of bacteria.

なお、細菌誘導路Ａ１０１ａ，細菌誘導路Ｂ１０１ｂ，注入部１０４，細菌誘導部１０５ａ，および細菌誘導部１０５ｂは、基板１１０に形成された凹部および溝部より形成されたものである。また、細菌誘導路Ａ１０１ａ，細菌誘導路Ｂ１０１ｂは、基板１１０の上に形成された封止膜（不図示）により被覆され、全ての側部が覆われている管となっている。細菌誘導路Ａ１０１ａ，細菌誘導路Ｂ１０１ｂは、封止膜などに覆われて管状となっている必要はなく、上方が開放した溝の状態であってもよい。ただし、細菌誘導路Ａ１０１ａ，細菌誘導路Ｂ１０１ｂに収容される液体の気化を抑制するために、封止膜で覆われていた方がよい。   Note that the bacteria guiding path A 101 a, the bacteria guiding path B 101 b, the injection part 104, the bacteria guiding part 105 a, and the bacteria guiding part 105 b are formed by recesses and grooves formed in the substrate 110. In addition, the bacteria guide path A101a and the bacteria guide path B101b are covered with a sealing film (not shown) formed on the substrate 110, and are all tubes that are covered. The bacteria guide path A101a and the bacteria guide path B101b do not have to be tubular and covered with a sealing film or the like, and may be in a state of a groove having an open top. However, in order to suppress the vaporization of the liquid accommodated in the bacteria guide path A101a and the bacteria guide path B101b, it is better to be covered with a sealing film.

以下、細菌誘導機構について、より詳細に説明する。   Hereinafter, the bacteria induction mechanism will be described in more detail.

［実施例１］
まず、実施例１の細菌分析装置について説明する。図２は、実施例１における細菌分析装置の構成を示す構成図である。この細菌分析装置は、前述同様に、細菌誘導路Ａ１０１ａ，細菌誘導路Ｂ１０１ｂ，注入部１０４，細菌誘導部１０５ａ，および細菌誘導部１０５ｂを備える。また、実施例１の細菌分析装置は、細菌誘導機構Ａ２０２ａおよび細菌誘導機構Ｂ２０２ｂを備える。細菌誘導機構Ａ２０２ａは、電極２２１ａと電極２２２ａとにより、細菌誘導路Ａ１０１ａの一端側から他端側にかけて電位差Ａを生じさせる。また、細菌誘導機構Ｂ２０２ｂは、電極２２１ｂと電極２２２ｂとにより、細菌誘導路Ｂ１０１ｂの一端側から他端側にかけて電位差Ｂを生じさせる。 [Example 1]
First, the bacteria analyzer of Example 1 will be described. FIG. 2 is a configuration diagram illustrating a configuration of the bacteria analysis apparatus according to the first embodiment. As described above, this bacteria analyzer includes a bacteria guidance path A101a, a bacteria guidance path B101b, an injection unit 104, a bacteria guidance unit 105a, and a bacteria guidance unit 105b. Moreover, the bacteria analyzer of Example 1 includes a bacteria induction mechanism A202a and a bacteria induction mechanism B202b. The bacteria guidance mechanism A202a generates a potential difference A from one end side to the other end side of the bacteria guidance path A101a by the electrode 221a and the electrode 222a. In addition, the bacteria guidance mechanism B202b generates a potential difference B from one end side to the other end side of the bacteria guidance path B101b by the electrode 221b and the electrode 222b.

このように、実施例１では、細菌誘導機構Ａ２０２ａおよび細菌誘導機構Ｂ２０２ｂを用いることで、対象となる細菌に走性を発現させる方向性のある刺激源として、細菌誘導路Ａ１０１ａおよび細菌誘導路Ｂ１０１ｂの各々に収容された液体に、各々異なる複数の電位差を与えるようにしたものである。この場合、細菌の電気走性を利用することになる。なお、図２では、解析・表示部１０６を省略している。   Thus, in Example 1, by using the bacterial guidance mechanism A202a and the bacterial guidance mechanism B202b, the bacterial guidance path A101a and the bacterial guidance path B101b are used as directional stimulation sources that cause the target bacteria to express chemotaxis. A plurality of different potential differences are given to the liquids contained in each of the above. In this case, the electromotility of bacteria is used. In FIG. 2, the analysis / display unit 106 is omitted.

［実施例２］
次に、実施例２の細菌分析装置について説明する。図３は、実施例２における細菌分析装置の構成を示す構成図である。この細菌分析装置は、前述同様に、細菌誘導路Ａ１０１ａ，細菌誘導路Ｂ１０１ｂ，注入部１０４，細菌誘導部１０５ａ，および細菌誘導部１０５ｂを備える。また、実施例２の細菌分析装置は、まず、細菌誘導機構Ａ３０２ａが、対象とする細菌に対して走化性を発現させることができる化学物質を、刺激源として供給路３２１ａより細菌誘導路Ａ１０１ａに供給する。 [Example 2]
Next, the bacteria analyzer of Example 2 will be described. FIG. 3 is a configuration diagram illustrating the configuration of the bacteria analysis apparatus according to the second embodiment. As described above, this bacteria analyzer includes a bacteria guidance path A101a, a bacteria guidance path B101b, an injection unit 104, a bacteria guidance unit 105a, and a bacteria guidance unit 105b. In the bacterial analyzer of Example 2, first, the bacterial induction mechanism A302a uses a chemical substance capable of expressing chemotaxis to the target bacteria as a stimulus source from the supply path 321a. To supply.

また、細菌誘導機構Ｂ３０２ｂが、細菌誘導機構Ａ３０２ａとは異なる細菌に対して走化性を発現させることができる他の化学物質を、刺激源として供給路３２１ｂより細菌誘導路Ｂ１０１ｂに供給する。供給路３２１ａおよび供給路３２１ｂは、細菌誘導路Ａ１０１ａおよび細菌誘導路Ｂ１０１ｂの他端（細菌誘導部）側に接続する。なお、図３では、解析・表示部１０６を省略している。   Further, the bacterial induction mechanism B302b supplies another chemical substance capable of expressing chemotaxis to bacteria different from the bacterial induction mechanism A302a from the supply path 321b to the bacterial induction path B101b as a stimulus source. The supply path 321a and the supply path 321b are connected to the other end (bacteria guide section) side of the bacteria guide path A101a and the bacteria guide path B101b. In FIG. 3, the analysis / display unit 106 is omitted.

例えば、図示しない制御部により細菌誘導機構Ａ３０２ａの動作を制御し、化学物質Ａを細菌誘導路Ａ１０１ａに供給する。また、上記制御部により細菌誘導機構Ｂ３０２ｂの動作を制御し、化学物質Ｂを細菌誘導路Ｂ１０１ｂに供給する。化学物質Ａおよび化学物質Ｂは、分析対象とする細菌Ａおよび細菌Ｂが好む化学物質である。   For example, the control unit (not shown) controls the operation of the bacteria guidance mechanism A302a to supply the chemical substance A to the bacteria guidance path A101a. Further, the control unit controls the operation of the bacteria guidance mechanism B302b to supply the chemical substance B to the bacteria guidance path B101b. Chemical substance A and chemical substance B are chemical substances preferred by bacteria A and bacteria B to be analyzed.

このように、細菌が好む化学物質を供給することで、対象とする細菌は、細菌誘導路Ａ１０１ａおよび細菌誘導路Ｂ１０１ｂの中を、化学物質が供給されている側に移動する。この状態で、細菌誘導路Ａ１０１ａ，細菌誘導路Ｂ１０１ｂを移動する微粒子を検出部Ａ１０３ａ，検出部Ｂ１０３ｂで検出すれば、検出される微粒子は、与えられた化学物質を好む細菌であるものと同定できる。   In this way, by supplying the chemical substance preferred by the bacteria, the target bacteria move in the bacteria guide path A101a and the bacteria guide path B101b to the side where the chemical substance is supplied. In this state, if the detection part A103a and the detection part B103b detect the microparticles moving in the bacteria guide path A101a and the bacteria guide path B101b, the detected microparticles can be identified as bacteria that prefer a given chemical substance. .

なお、上述では、刺激源となる化学物質として、対象となる細菌が好むものを用いるようにしたが、これに限るものではない。対象となる細菌が嫌忌する化学物質を用いるようにしてもよい。この場合、細菌誘導路Ａ１０１ａ，細菌誘導路Ｂ１０１ｂの一端（注入部１０４）側に各々の化学物質を供給すればよい。これらの化学物質の供給により、対象となる各々の細菌は、細菌誘導路Ａ１０１ａ，細菌誘導路Ｂ１０１ｂの他端側に移動するようになる。   In the above description, the chemical substance that serves as the stimulus source is preferably used by the target bacteria, but is not limited thereto. You may make it use the chemical substance which the target bacteria dislike. In this case, each chemical substance may be supplied to one end (injection part 104) side of the bacteria guiding path A101a and the bacteria guiding path B101b. By supplying these chemical substances, each target bacterium moves to the other end side of the bacteria guide path A101a and the bacteria guide path B101b.

［実施の形態２］
次に、本発明の実施の形態２について説明する。図４は、本発明の実施の形態２における細菌分析装置の構成を示す構成図である。この細菌分析装置は、細菌誘導路Ａ１０１ａ，細菌誘導路Ｂ１０１ｂ，注入部１０４，細菌誘導部１０５ａ，および細菌誘導部１０５ｂを備える。これらは、前述した実施の形態１と同様である。本実施の形態では、細菌誘導部１０５ａに検出部Ａ１０３ａを備え、細菌誘導部１０５ｂに検出部Ｂ１０３ｂを備える。 [Embodiment 2]
Next, a second embodiment of the present invention will be described. FIG. 4 is a configuration diagram showing the configuration of the bacteria analysis apparatus according to the second embodiment of the present invention. This bacteria analyzer includes a bacteria guidance path A101a, a bacteria guidance path B101b, an injection unit 104, a bacteria guidance unit 105a, and a bacteria guidance unit 105b. These are the same as those in the first embodiment. In the present embodiment, the bacteria guidance unit 105a includes a detection unit A103a, and the bacteria guidance unit 105b includes a detection unit B103b.

また、本実施の形態では、細菌誘導機構４０２により、注入部１０４と細菌誘導部１０５ａとの間の細菌誘導路Ａ１０１ａに収容された液体、および、注入部１０４と細菌誘導部１０５ｂとの間の細菌誘導路Ｂ１０１ｂに収容された液体に対し、各々異なる刺激源を与える。本実施の形態では、細菌誘導機構４０２により、まず、注入部１０４に配置した電極４２１および細菌誘導部１０５ａに配置した電極４２２ａにより、これらの間の細菌誘導路Ａ１０１ａに電位差Ａを生じさせる。また、細菌誘導機構４０２により、注入部１０４に配置した電極４２１および細菌誘導部１０５ｂに配置した電極４２２ｂにより、これらの間の細菌誘導路Ｂ１０１ｂに電位差Ｂを生じさせる。   Moreover, in this Embodiment, the liquid accommodated in the bacteria guidance path A101a between the injection part 104 and the bacteria guidance part 105a by the bacteria guidance mechanism 402, and between the injection part 104 and the bacteria guidance part 105b. Different stimulation sources are given to the liquids contained in the bacteria guiding path B101b. In the present embodiment, first, a potential difference A is generated in the bacteria guiding path A101a between the electrodes 421 disposed in the injection section 104 and the electrodes 422a disposed in the bacteria guiding section 105a by the bacteria guiding mechanism 402. In addition, a potential difference B is generated in the bacteria guiding path B101b between the electrode 421 disposed in the injection unit 104 and the electrode 422b disposed in the bacteria guiding unit 105b by the bacteria guiding mechanism 402.

また、本実施の形態では、検出部Ａ１０３ａが、細菌誘導部１０５ａに移動した微子を検出し、検出部Ｂ１０３ｂが、細菌誘導部１０５ｂに移動した微粒子を検出する。上述したように、電極４２１および電極４２２ａにより電位差を生じさせれば、細菌に電気走性が発現し、細菌は細菌誘導部１０５ａに移動することになる。また、電極４２１および電極４２２ｂにより電位差を生じさせれば、細菌に電気走性が発現し、細菌は細菌誘導部１０５ｂに移動することになる。これに対し、細菌誘導路Ａ１０１ａ，細菌誘導路Ｂ１０１ｂに収容されている液体中の細菌以外の微細な異物などは、上述したように刺激源が与えられても、細菌誘導部１０５ａおよび細菌誘導部１０５ｂに移動することがない。また、上記刺激では走性を発現しない他の細菌も、移動をすることはないものと考えられる。   In this embodiment, detection part A103a detects the micron which moved to bacteria guidance part 105a, and detection part B103b detects the microparticles which moved to bacteria guidance part 105b. As described above, when a potential difference is generated by the electrode 421 and the electrode 422a, the electromotility is expressed in the bacteria, and the bacteria move to the bacteria induction unit 105a. In addition, if a potential difference is generated by the electrode 421 and the electrode 422b, electromotility is expressed in the bacteria, and the bacteria move to the bacteria induction unit 105b. On the other hand, even if fine foreign substances other than bacteria in the liquid accommodated in the bacteria guide path A101a and the bacteria guide path B101b are given a stimulus source as described above, the bacteria guide section 105a and the bacteria guide section There is no movement to 105b. In addition, other bacteria that do not express chemotaxis by the above stimulation are considered not to migrate.

従って、上述したように刺激源を与えた状態で、検出部Ａ１０３ａにより細菌誘導部１０５ａに存在している微粒子を検出し、検出部Ｂ１０３ｂにより細菌誘導部１０５ｂに存在している微粒子を検出すれば、これが細菌であるものと判断することができる。なお、図４では、解析・表示部を示していないが、本実施例の形態においても、検出部Ａ１０３ａおよび検出部Ｂ１０３ｂが検出した結果（データ）を、解析・表示部（不図示）により収集して解析し、この結果を表示する。   Therefore, when the stimulation source is applied as described above, the detection unit A103a detects the microparticles present in the bacteria guidance unit 105a, and the detection unit B103b detects the microparticles present in the bacteria guidance unit 105b. It can be determined that this is a bacterium. Although the analysis / display unit is not shown in FIG. 4, the results (data) detected by the detection unit A 103a and the detection unit B 103b are also collected by the analysis / display unit (not shown) in this embodiment. To analyze and display the result.

ところで、上述では、方向性のある刺激源として電位差を形成するようにしたが、これに限るものではなく、化学物質，磁場，光，および重力などを刺激源としてもよいことはいうまでもない。以下、化学物質を刺激源とした場合について、実施例３を用いて説明する。   In the above description, the potential difference is formed as a directional stimulus source. However, the present invention is not limited to this, and it is needless to say that a chemical substance, a magnetic field, light, and gravity may be used as the stimulus source. . Hereinafter, the case where a chemical substance is used as a stimulus source will be described using Example 3.

［実施例３］
以下、実施例３の細菌分析装置について説明する。図５は、実施例３における細菌分析装置の構成を示す構成図である。この細菌分析装置は、前述同様に、細菌誘導路Ａ１０１ａ，細菌誘導路Ｂ１０１ｂ，検出部Ａ１０３ａ，検出部Ｂ１０３ｂ，注入部１０４，および細菌誘導部１０５ａ，１０５ｂを備える。また、実施例３の細菌分析装置は、細菌誘導機構Ａ５０２ａが、対象とする細菌Ａに対して走化性を発現させることができる化学物質Ａを刺激源とし、供給路５２１ａより細菌誘導部１０５ａに供給する。また、細菌誘導機構Ｂ５０２ｂが、対象とする細菌Ｂに対して走化性を発現させることができる化学物質Ｂを刺激源とし、供給路５２１ｂより細菌誘導部１０５ｂに供給する。 [Example 3]
Hereinafter, the bacteria analyzer of Example 3 will be described. FIG. 5 is a configuration diagram illustrating the configuration of the bacteria analysis apparatus according to the third embodiment. As described above, this bacteria analyzer includes a bacteria guidance path A101a, a bacteria guidance path B101b, a detection unit A103a, a detection unit B103b, an injection unit 104, and bacteria guidance units 105a and 105b. Further, in the bacterial analyzer of Example 3, the bacterial induction mechanism A502a uses the chemical substance A capable of expressing chemotaxis with respect to the target bacteria A as a stimulus source, and the bacterial induction unit 105a from the supply path 521a. To supply. In addition, the bacterial guidance mechanism B502b supplies the chemical substance B capable of expressing chemotaxis with respect to the target bacteria B as a stimulation source and supplies the chemical guidance unit 105b from the supply path 521b.

例えば、レジオネラ属菌を分析対象とする場合、供給路５２１ａより細菌誘導部１０５ａに化学物質Ａとして鉄イオン（鉄イオンを含む溶液）を供給する。これにより、レジオネラ属菌は、細菌誘導路Ａ１０１ａを通って細菌誘導部１０５Ａに移動する。この状態で、細菌誘導部１０５ａに移動した（存在する）微粒子を検出部Ａ１０３ａで検出すれば、検出される微粒子は、鉄イオンを好むレジオネラ属菌であるものと同定できる。   For example, when Legionella spp. Are analyzed, iron ions (solution containing iron ions) are supplied as the chemical substance A from the supply path 521a to the bacteria induction unit 105a. Thereby, Legionella genus bacteria move to bacteria guidance part 105A through bacteria guidance way A101a. In this state, if the detection unit A103a detects the microparticles that have moved (present) to the bacteria guidance unit 105a, the detected microparticles can be identified as Legionella bacteria that prefer iron ions.

一方、供給路５２１ｂより細菌誘導部１０５ｂに、レジオネラ属菌の中の特定のレジオネラが好む化学物質Ｂを供給する。これにより、特定のレジオネラは、細菌誘導路Ｂ１０１ｂを通って細菌誘導部１０５ｂに移動する。この状態で、細菌誘導部１０５ｂに移動した（存在する）微粒子を検出部Ｂ１０３ｂで検出すれば、検出される微粒子は、特定のレジオネラであるものと同定できる。なお、図５では、解析・表示部を示していないが、本実施例においても、検出部Ａ１０３ａ，検出部Ｂ１０３ｂが検出した結果（データ）を、解析・表示部（不図示）により収集して解析し、この結果を表示する。   On the other hand, the chemical substance B preferred by a specific Legionella in Legionella is supplied from the supply path 521b to the bacteria guidance unit 105b. Thereby, a specific Legionella moves to the bacteria guidance part 105b through the bacteria guidance path B101b. In this state, if the detection unit B103b detects the fine particles that have moved (present) to the bacteria guidance unit 105b, the detected fine particles can be identified as a specific Legionella. In FIG. 5, the analysis / display unit is not shown, but also in this embodiment, the results (data) detected by the detection unit A 103a and the detection unit B 103b are collected by the analysis / display unit (not shown). Analyze and display this result.

ところで、細菌誘導路Ａ１０１ａおよび細菌誘導路Ｂ１０１ｂは、細菌が通過できる程度の径（幅）にしておくとよい。例えば、細菌の数倍程度の数μｍ〜数十μｍ程度としておけばよい。このような微細流路としておくことで、例えば、刺激源として化学物質を用いる場合、少量であっても濃度を非常に高くすることができ、細菌誘導路Ａ１０１ａおよび細菌誘導路Ｂ１０１ｂにおける化学物質の濃度勾配による細菌の走化性をより顕著に発現させることができるようになる。   By the way, the bacteria guide path A101a and the bacteria guide path B101b are preferably set to have a diameter (width) that allows bacteria to pass through. For example, it may be set to about several μm to several tens of μm, which is several times that of bacteria. By using such a fine flow path, for example, when a chemical substance is used as a stimulus source, the concentration can be very high even with a small amount, and the chemical substance in the bacterial guide path A101a and the bacterial guide path B101b Bacterial chemotaxis due to the concentration gradient can be more significantly expressed.

また、化学物質を用いる場合、これを細菌誘導路Ａ１０１ａおよび細菌誘導路Ｂ１０１ｂ内へ導入するために、化学物質の溶液などを滴下するために、注入部１０４と同様の構造を細菌誘導路Ａ１０１ａおよび細菌誘導路Ｂ１０１ｂに接続する誘導機構として形成してもよい。また、化学物質の溶液などを収容した容器を、マイクロバルブなどの制御弁を備える微小な配管を介して細菌誘導路Ａ１０１ａおよび細菌誘導路Ｂ１０１ｂに接続してもよい。   In addition, when a chemical substance is used, in order to introduce a chemical substance solution or the like in order to introduce the chemical substance into the bacteria guide path A101a and the bacteria guide path B101b, the structure similar to the injection unit 104 is configured with the bacteria guide path A101a and You may form as a guidance mechanism connected to bacteria guidance way B101b. In addition, a container containing a chemical solution or the like may be connected to the bacteria guide path A101a and the bacteria guide path B101b through a minute pipe having a control valve such as a microvalve.

また、細菌誘導部１０５ａ，細菌誘導部１０５ｂは、所望とする液体や溶液を供給可能とする範囲内でより小さい寸法に形成した方がよい。例えば、溶液をスポイトなどで滴下して供給する場合、平面寸法（径）は、数十μｍ〜百μｍ程度とすればよい。このようにすることで、例えば、刺激源としての化学物質を細菌誘導部１０５ａ，細菌誘導部１０５ｂに導入する場合、少量であっても濃度を非常に高くすることができ、細菌誘導路Ａ１０１ａおよび細菌誘導路Ｂ１０１ｂに対する化学物質の濃度勾配による細菌の走化性をより顕著に発現させることができるようになる。   Moreover, it is better to form the bacteria guidance | induction part 105a and the bacteria guidance | induction part 105b in a smaller dimension within the range which can supply the desired liquid and solution. For example, when the solution is dropped and supplied with a dropper or the like, the planar dimension (diameter) may be about several tens μm to one hundred μm. In this way, for example, when a chemical substance as a stimulus source is introduced into the bacterial induction unit 105a and the bacterial induction unit 105b, the concentration can be very high even in a small amount, and the bacterial induction path A101a and Bacterial chemotaxis due to the concentration gradient of the chemical substance with respect to the bacterial guide path B101b can be expressed more significantly.

なお、上述では、細菌誘導路Ａ１０１ａおよび細菌誘導路Ｂ１０１ｂを設けるようにしたが、これに限るものではない。３つ以上の細菌誘導路を並列に接続して設けるようにしてもよい。この場合においても、各々の細菌誘導路において、細菌誘導機構および検出部を設ければよい。   In the above description, the bacteria guide path A101a and the bacteria guide path B101b are provided. However, the present invention is not limited to this. Three or more bacteria guiding paths may be connected in parallel. Even in this case, a bacteria guidance mechanism and a detection unit may be provided in each bacteria guidance path.

次に、細菌誘導路Ａ１０１ａ，細菌誘導路Ｂ１０１ｂ，注入部１０４，細菌誘導部１０５ａ，および細菌誘導部１０５ｂなどの構造体の製造について説明する。まず、基板１１０として例えばシリコン基板もしくはガラス基板を用いればよい。また、細菌誘導路Ａ１０１ａ，細菌誘導路Ｂ１０１ｂ，注入部１０４，および細菌誘導部１０５ａ，細菌誘導部１０５ｂは、上述した基板を、公知のフォトリソグラフィ技術およびエッチング技術により加工することで形成すればよい。また、樹脂基板を用いる場合、細菌誘導路は、よく知られたナノインプリント技術により形成してもよい。   Next, the manufacture of structures such as the bacteria guidance path A101a, the bacteria guidance path B101b, the injection part 104, the bacteria guidance part 105a, and the bacteria guidance part 105b will be described. First, for example, a silicon substrate or a glass substrate may be used as the substrate 110. Further, the bacteria guide path A101a, the bacteria guide path B101b, the injection section 104, the bacteria guide section 105a, and the bacteria guide section 105b may be formed by processing the above-described substrate by a known photolithography technique and etching technique. . Moreover, when using a resin substrate, the bacteria guiding path may be formed by a well-known nanoimprint technique.

また、封止膜は、細菌誘導路Ａ１０１ａ，細菌誘導路Ｂ１０１ｂの中空構造を維持した状態で形成することが重要である。例えば、公知のＳＴＰ（Spin-coating film Transfer and hot Pressing）法により、ベースフィルムに形成された樹脂膜を加圧・加熱することで、基板１１０の上に転写することで、封止膜が形成できる（非特許文献３参照）。この場合、まず、例えばフッ素樹脂などから構成されたシート状の基材を用意し、用意した基材の表面に樹脂溶液を塗布して塗布膜（樹脂膜）を形成する。   In addition, it is important that the sealing film is formed in a state in which the hollow structure of the bacteria guide path A101a and the bacteria guide path B101b is maintained. For example, the resin film formed on the base film is pressurized and heated by a known STP (Spin-coating Film Transfer and Hot Pressing) method, and transferred onto the substrate 110 to form a sealing film. Yes (see Non-Patent Document 3). In this case, first, a sheet-like base material made of, for example, a fluororesin is prepared, and a coating solution (resin film) is formed by applying a resin solution to the surface of the prepared base material.

次に、基材に形成された樹脂膜を、例えば２０Ｐａ程度に減圧された環境下で、温度１００℃・荷重１０ｋｇｆの条件で、基板１１０に熱圧着する。減圧環境下で貼り付けることで、基板１１０と樹脂膜とが当接して密着すべき領域に、気泡などが混入することが抑制できるようになる。この後、大気雰囲気中・室温（２０℃程度）の状態とし、基板１１０に貼り付けられている樹脂膜（封止膜）より、基材を剥離する。基材を剥離すれば、封止膜が、基板１１０の上に貼り付けられた状態が得られる。   Next, the resin film formed on the base material is thermocompression bonded to the substrate 110 under the conditions of a temperature of 100 ° C. and a load of 10 kgf in an environment where the pressure is reduced to about 20 Pa, for example. By sticking in a reduced pressure environment, it is possible to suppress bubbles and the like from being mixed in the region where the substrate 110 and the resin film are in contact with each other. Thereafter, the base material is peeled off from the resin film (sealing film) attached to the substrate 110 in an atmosphere and at room temperature (about 20 ° C.). If the base material is peeled off, a state in which the sealing film is attached onto the substrate 110 can be obtained.

この後、注入部１０４および細菌誘導部１０５の上部にあたる領域に開口部を形成すればよい。例えば、上述した樹脂として、感光性を有するポリイミドを用いて封止膜を転写した後、この封止膜をフォトリソグラフィ技術によりパターニングすることで、上述した開口部を形成すればよい。なお、封止膜は、上述したＳＴＰ法に限るものではなく、他の方法により形成してもよい。   Thereafter, an opening may be formed in a region corresponding to the upper part of the injection part 104 and the bacteria guidance part 105. For example, after the sealing film is transferred using polyimide having photosensitivity as the above-described resin, the above-described opening may be formed by patterning the sealing film by a photolithography technique. The sealing film is not limited to the STP method described above, and may be formed by other methods.

１０１ａ…細菌誘導路Ａ、１０１ｂ…細菌誘導路Ｂ、１０２ａ…細菌誘導機構Ａ、１０２ｂ…細菌誘導機構Ｂ、１０３ａ…検出部Ａ、１０３ｂ…検出部Ｂ、１０４…注入部、１０５ａ、１０５ｂ…細菌誘導部、１０６…解析・表示部、１１０…基板。   101a ... Bacterial guide path A, 101b ... Bacterial guide path B, 102a ... Bacterial guide mechanism A, 102b ... Bacterial guide mechanism B, 103a ... Detection part A, 103b ... Detection part B, 104 ... Injection part, 105a, 105b ... Bacteria Guide part 106 ... Analysis / display part 110 ... Substrate.

Claims (6)

測定対象の細菌を含んだ液体が収容されて並列に接続された複数の細菌誘導路と、
これらの細菌誘導路に収容された液体の各々に、前記細菌に走性を発現させる方向性のある刺激源を与える細菌誘導手段と、
各々の前記細菌誘導路を移動する微粒子を検出する複数の検出手段と
を少なくとも備え、
前記細菌誘導手段は、各々の前記細菌誘導路に収容されている液体に対し、各々異なる刺激源を与えることを特徴とする細菌分析装置。 A plurality of bacteria guiding paths containing a liquid containing bacteria to be measured and connected in parallel;
Bacterial guidance means for providing each of the liquids contained in these bacterial guidance paths with a directional stimulus source that causes the bacteria to develop chemotaxis,
A plurality of detection means for detecting fine particles moving in each of the bacterial guide paths,
The bacteria analyzing apparatus according to claim 1, wherein the bacteria guiding means gives different stimulation sources to the liquids stored in the bacteria guiding paths. 請求項１記載の細菌分析装置において、
前記細菌誘導手段は、前記方向性のある刺激源として、化学物質，電位，磁場，光，および重力の少なくとも１つを前記細菌誘導路に収容された液体に与えることを特徴とする細菌分析装置。 The bacteria analyzer according to claim 1, wherein
The bacteria inducing device, as the directional stimulation source, applies at least one of a chemical substance, an electric potential, a magnetic field, light, and gravity to a liquid contained in the bacteria induction path. . 請求項１または２記載の細菌分析装置において、
前記細菌誘導路の一端に接続され、前記液体が注入される注入部を備えることを特徴とする細菌分析装置。 The bacteria analyzer according to claim 1 or 2,
A bacteria analysis apparatus comprising an injection part connected to one end of the bacteria guide path and into which the liquid is injected. 請求項１〜３のいずれか１項に記載の細菌分析装置において、
各々の前記細菌誘導路の他端に接続された複数の細菌誘導部を備え、
前記検出手段は、前記細菌誘導部に移動した微粒子を検出する
ことを特徴とする細菌分析装置。 In the bacteria analysis device according to any one of claims 1 to 3,
Comprising a plurality of bacterial guidance sections connected to the other end of each of the bacterial guidance paths;
The said analysis means detects the microparticles | fine-particles which moved to the said bacteria guidance | induction part. The bacteria analyzer characterized by the above-mentioned. 請求項１〜４のいずれか１項に記載された細菌分析装置において、
前記細菌誘導路は、溝であることを特徴とする細菌分析装置。 In the bacteria analyzer described in any one of Claims 1-4,
The bacteria analysis apparatus, wherein the bacteria guiding path is a groove. 請求項５記載の細菌分析装置において、
前記溝は、側部が覆われている管であることを特徴とする細菌分析装置。 The bacteria analyzer according to claim 5,
The bacteria analysis apparatus, wherein the groove is a pipe whose side is covered.
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