JP2009536344A - 磁場を用いた試料中の標的分子の検出 - Google Patents
磁場を用いた試料中の標的分子の検出 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2009536344A JP2009536344A JP2009508593A JP2009508593A JP2009536344A JP 2009536344 A JP2009536344 A JP 2009536344A JP 2009508593 A JP2009508593 A JP 2009508593A JP 2009508593 A JP2009508593 A JP 2009508593A JP 2009536344 A JP2009536344 A JP 2009536344A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- binding molecule
- binding
- target
- magnetic
- molecule
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 230000005291 magnetic effect Effects 0.000 title claims abstract description 45
- 238000001514 detection method Methods 0.000 title claims description 28
- 238000009739 binding Methods 0.000 claims abstract description 204
- 230000027455 binding Effects 0.000 claims abstract description 203
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 97
- 239000006249 magnetic particle Substances 0.000 claims abstract description 63
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims abstract description 36
- BQJCRHHNABKAKU-KBQPJGBKSA-N morphine Chemical compound O([C@H]1[C@H](C=C[C@H]23)O)C4=C5[C@@]12CCN(C)[C@@H]3CC5=CC=C4O BQJCRHHNABKAKU-KBQPJGBKSA-N 0.000 claims description 36
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 34
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 34
- 229960005181 morphine Drugs 0.000 claims description 31
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims description 22
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 20
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 20
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical group [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- 239000010931 gold Substances 0.000 claims description 15
- 229910052737 gold Inorganic materials 0.000 claims description 15
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims description 14
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims description 14
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims description 14
- 101710120037 Toxin CcdB Proteins 0.000 claims description 11
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 claims description 10
- 239000012530 fluid Substances 0.000 claims description 8
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 7
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 claims description 7
- 125000006850 spacer group Chemical group 0.000 claims description 6
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 5
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 5
- PIICEJLVQHRZGT-UHFFFAOYSA-N Ethylenediamine Chemical compound NCCN PIICEJLVQHRZGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- ZPUCINDJVBIVPJ-LJISPDSOSA-N ***e Chemical compound O([C@H]1C[C@@H]2CC[C@@H](N2C)[C@H]1C(=O)OC)C(=O)C1=CC=CC=C1 ZPUCINDJVBIVPJ-LJISPDSOSA-N 0.000 claims description 4
- 125000005263 alkylenediamine group Chemical group 0.000 claims description 3
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims description 3
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims description 3
- 230000005855 radiation Effects 0.000 claims description 3
- 210000003296 saliva Anatomy 0.000 claims description 3
- 210000004243 sweat Anatomy 0.000 claims description 3
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 claims description 3
- KWTSXDURSIMDCE-QMMMGPOBSA-N (S)-amphetamine Chemical compound C[C@H](N)CC1=CC=CC=C1 KWTSXDURSIMDCE-QMMMGPOBSA-N 0.000 claims description 2
- 102000015731 Peptide Hormones Human genes 0.000 claims description 2
- 108010038988 Peptide Hormones Proteins 0.000 claims description 2
- 229940025084 amphetamine Drugs 0.000 claims description 2
- 229960003920 ***e Drugs 0.000 claims description 2
- 230000005292 diamagnetic effect Effects 0.000 claims description 2
- 229960004242 dronabinol Drugs 0.000 claims description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 2
- 230000005293 ferrimagnetic effect Effects 0.000 claims description 2
- 230000005294 ferromagnetic effect Effects 0.000 claims description 2
- 229960001252 methamphetamine Drugs 0.000 claims description 2
- MYWUZJCMWCOHBA-VIFPVBQESA-N methamphetamine Chemical compound CN[C@@H](C)CC1=CC=CC=C1 MYWUZJCMWCOHBA-VIFPVBQESA-N 0.000 claims description 2
- 230000005298 paramagnetic effect Effects 0.000 claims description 2
- CYQFCXCEBYINGO-UHFFFAOYSA-N THC Natural products C1=C(C)CCC2C(C)(C)OC3=CC(CCCCC)=CC(O)=C3C21 CYQFCXCEBYINGO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- -1 anabolic Chemical compound 0.000 claims 1
- 230000001195 anabolic effect Effects 0.000 claims 1
- CYQFCXCEBYINGO-IAGOWNOFSA-N delta1-THC Chemical compound C1=C(C)CC[C@H]2C(C)(C)OC3=CC(CCCCC)=CC(O)=C3[C@@H]21 CYQFCXCEBYINGO-IAGOWNOFSA-N 0.000 claims 1
- 230000009149 molecular binding Effects 0.000 claims 1
- 230000002452 interceptive effect Effects 0.000 abstract 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 27
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 27
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 19
- 239000011859 microparticle Substances 0.000 description 18
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 12
- 238000012875 competitive assay Methods 0.000 description 12
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 10
- 108090001008 Avidin Proteins 0.000 description 9
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 9
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 7
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 7
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 6
- 230000009471 action Effects 0.000 description 5
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 5
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 5
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 5
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 5
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 5
- 238000004020 luminiscence type Methods 0.000 description 5
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 5
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 5
- 125000001917 2,4-dinitrophenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(=C([H])C(=C1*)[N+]([O-])=O)[N+]([O-])=O 0.000 description 4
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 4
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 4
- HWYHZTIRURJOHG-UHFFFAOYSA-N luminol Chemical compound O=C1NNC(=O)C2=C1C(N)=CC=C2 HWYHZTIRURJOHG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000000463 material Substances 0.000 description 4
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 4
- 239000011534 wash buffer Substances 0.000 description 4
- 102000002260 Alkaline Phosphatase Human genes 0.000 description 3
- 108020004774 Alkaline Phosphatase Proteins 0.000 description 3
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 3
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 3
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 3
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 3
- 108010090804 Streptavidin Proteins 0.000 description 3
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 3
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 3
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 3
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 3
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 3
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 3
- 125000000896 monocarboxylic acid group Chemical group 0.000 description 3
- 230000000704 physical effect Effects 0.000 description 3
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 3
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 3
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 3
- 108091023037 Aptamer Proteins 0.000 description 2
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- 241000238366 Cephalopoda Species 0.000 description 2
- 108010062580 Concanavalin A Proteins 0.000 description 2
- SHIBSTMRCDJXLN-UHFFFAOYSA-N Digoxigenin Natural products C1CC(C2C(C3(C)CCC(O)CC3CC2)CC2O)(O)C2(C)C1C1=CC(=O)OC1 SHIBSTMRCDJXLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000005355 Hall effect Effects 0.000 description 2
- 108090001090 Lectins Proteins 0.000 description 2
- 102000004856 Lectins Human genes 0.000 description 2
- 238000001069 Raman spectroscopy Methods 0.000 description 2
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N Sodium azide Chemical compound [Na+].[N-]=[N+]=[N-] PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GSEJCLTVZPLZKY-UHFFFAOYSA-N Triethanolamine Chemical compound OCCN(CCO)CCO GSEJCLTVZPLZKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 2
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 2
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 2
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 description 2
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 2
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 2
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 2
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 2
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 2
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 2
- QONQRTHLHBTMGP-UHFFFAOYSA-N digitoxigenin Natural products CC12CCC(C3(CCC(O)CC3CC3)C)C3C11OC1CC2C1=CC(=O)OC1 QONQRTHLHBTMGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SHIBSTMRCDJXLN-KCZCNTNESA-N digoxigenin Chemical compound C1([C@@H]2[C@@]3([C@@](CC2)(O)[C@H]2[C@@H]([C@@]4(C)CC[C@H](O)C[C@H]4CC2)C[C@H]3O)C)=CC(=O)OC1 SHIBSTMRCDJXLN-KCZCNTNESA-N 0.000 description 2
- 239000013024 dilution buffer Substances 0.000 description 2
- 238000010291 electrical method Methods 0.000 description 2
- MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N fluorescein-5-isothiocyanate Chemical compound O1C(=O)C2=CC(N=C=S)=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 2
- 239000002523 lectin Substances 0.000 description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 108010087904 neutravidin Proteins 0.000 description 2
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 2
- 230000033116 oxidation-reduction process Effects 0.000 description 2
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 2
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 2
- 239000010453 quartz Substances 0.000 description 2
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 2
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N silicon dioxide Inorganic materials O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 2
- 239000012536 storage buffer Substances 0.000 description 2
- 238000010897 surface acoustic wave method Methods 0.000 description 2
- 238000002198 surface plasmon resonance spectroscopy Methods 0.000 description 2
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000012800 visualization Methods 0.000 description 2
- 108010032595 Antibody Binding Sites Proteins 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- 102000014914 Carrier Proteins Human genes 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- UIIMBOGNXHQVGW-DEQYMQKBSA-M Sodium bicarbonate-14C Chemical compound [Na+].O[14C]([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-DEQYMQKBSA-M 0.000 description 1
- 108010028230 Trp-Ser- His-Pro-Gln-Phe-Glu-Lys Proteins 0.000 description 1
- 239000000370 acceptor Substances 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 1
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 1
- 229940124325 anabolic agent Drugs 0.000 description 1
- 239000003263 anabolic agent Substances 0.000 description 1
- 238000002820 assay format Methods 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 108091008324 binding proteins Proteins 0.000 description 1
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 description 1
- 238000007413 biotinylation Methods 0.000 description 1
- 230000006287 biotinylation Effects 0.000 description 1
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 description 1
- 150000001718 carbodiimides Chemical class 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 230000003196 chaotropic effect Effects 0.000 description 1
- 230000009137 competitive binding Effects 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 1
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 1
- 230000009260 cross reactivity Effects 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 239000003599 detergent Substances 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 238000012631 diagnostic technique Methods 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 1
- 230000005684 electric field Effects 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 1
- 230000013595 glycosylation Effects 0.000 description 1
- 238000006206 glycosylation reaction Methods 0.000 description 1
- 231100000640 hair analysis Toxicity 0.000 description 1
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 1
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 239000003999 initiator Substances 0.000 description 1
- 238000007689 inspection Methods 0.000 description 1
- 230000002427 irreversible effect Effects 0.000 description 1
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 description 1
- 230000005389 magnetism Effects 0.000 description 1
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 1
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 1
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- 238000010188 recombinant method Methods 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 239000013076 target substance Substances 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
- G01N33/54313—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals the carrier being characterised by its particulate form
- G01N33/54326—Magnetic particles
- G01N33/54333—Modification of conditions of immunological binding reaction, e.g. use of more than one type of particle, use of chemical agents to improve binding, choice of incubation time or application of magnetic field during binding reaction
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N27/00—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means
- G01N27/72—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means by investigating magnetic variables
- G01N27/74—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means by investigating magnetic variables of fluids
- G01N27/745—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means by investigating magnetic variables of fluids for detecting magnetic beads used in biochemical assays
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2446/00—Magnetic particle immunoreagent carriers
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Hematology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Electrochemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Investigating Or Analyzing Materials By The Use Of Magnetic Means (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Investigating Or Analysing Materials By The Use Of Chemical Reactions (AREA)
Abstract
Description
a)前記試料及び磁性粒子に付着する第1結合分子を、同時又はそれぞれ異なる時期に、固体支持体に付着する第2結合分子と接触させる手順であって、前記第1結合分子は前記第2結合分子と結合する能力を有し、前記標的はこの結合を妨害する能力を有する手順;及び、前記磁性粒子が前記固体支持体付近へ移動するように磁力を印加する手順;並びに
b)前記第1結合分子の前記第2結合分子への結合によって前記固体支持体と結合する磁性粒子数を検出する手順;
を有する。
(strep-tagII)(登録商標)/ストレプ-タクチン(strep-tactin)(登録商標)対がある。
A. 抗モルヒネ抗体(Ab)に付着する磁性粒子(MP)の調製
磁性粒子回収装置(MPC)では、MPsは、100μlの磁性粒子溶液(アデムテック(Ademtech)社製、200nmのタンパク質GでコーティングされたMPs、製造番号0433)から回収されて、100μlのPBS+0.65%のTween20(商標)内で溶解された。10μlの単クローン性のマウスの抗体(1mg/mlの原液)を加えた後、混合物は室温で1時間混合され、それに続いて100μlのPBS+0.65%のTween20(商標)内のMPCを用いて2回洗浄して100μlのトリエタノールアミン(0.2M,pH8)で1回洗浄された。MPsは1mlトリエタノールアミン(0.2M,pH8)中のDMP(20mM)で溶解し、その溶液は室温で30分間混合された。架橋反応は、50μlのトリス(1M、pH7.5、最終濃度50mM)を加え、室温で15分間混合を続けることによって止まった。MPsは、100μlのトリス(50mM、pH7.5)と共にMPCを1回用い、そしてMPC中の貯蔵緩衝剤を1回用いて分離及び洗浄し、最終的に100μlの貯蔵緩衝材中で溶解させた。
金のディスクが、コーティング緩衝材(15mMの炭酸ナトリウム、35mMの炭酸水素ナトリウム、0.05%のアジ化ナトリウム、pH〜9.6)中のBSA又はBSA-OPI(3μg/ml)によってエッチング及びコーティングされた。コーティングされたディスクは洗浄緩衝材(PBS中の0.05%Tween20(商標))によって3回洗浄された。希釈緩衝材には一連のモルヒネ希釈溶液が反応管内で調製された。事前に混合したMP溶液(緩衝材中で0.1%w/v=1mg/mlのMP)が管内の各希釈溶液に加えられた。50μlのこれらの各溶液はウエルに入れられ、かつMPsは30秒間の磁力の印加(6-24fN)によって作動し、又は30分間沈降可能となる。従って、未結合MPsが30秒間の磁力印加によって除去され、かつ100μlの抗マウスIgG-HRP(希釈緩衝材中で原液を1/3000に希釈)が各ウエルに加えられた。その後室温で60分間培養された。ディスクはウエル毎に200μlの洗浄緩衝材で4回洗浄され、洗浄緩衝材を含むウエルから白のマイクロタイタープレートへ移送された。洗浄緩衝材は除去された。100μlのAB混合物(ECL;A+Bは1:1で混合された)が加えられ、室温で5分間培養された。発光が読み取られた。
A. 金表面へのAbのコーティング
本発明の方法に係る代替実施例では、最初にAbを金表面上に設ける必要がある。図3に図示されているように、これは、表面上にタンパク質G(pG)が設けられるときに最も良く機能する。ここで金表面をコーティングするのに50μg/mlのタンパク質Gが用いられた。続いて様々な量のAbで表面を洗浄して培養した。その後、モルヒネ-HRPで表面を培養して、洗浄した。それに続いて、結合モルヒネの量がルミノール/発光を用いて決定された。得られた信号は表面上で機能するAbの量を反映する。図3に示された暗いグレーの棒は、タンパク質Gが取り除かれたときに、金表面上に直接結合(物理吸着)するAbを表す。白の棒は、非選択結合のチェックを行うためのBSA(Abもタンパク質Gも含まない)でコーティングされた金表面を表す。
競合アッセイ法は、上述したようにMPsと表面を用いてウエルプレート内で行われた。その結果は図5に示されている。
Claims (30)
- 標的を含んでいる疑いのある試料中での前記標的の検出方法であって:
a)前記試料及び磁性粒子に付着する第1結合分子を、同時又はそれぞれ異なる時期に、固体支持体に付着する第2結合分子と接触させる手順であって、前記第1結合分子は前記第2結合分子と結合する能力を有し、前記標的はこの結合を妨害する能力を有する手順;及び、前記磁性粒子が前記固体支持体付近へ移動するように磁力を印加する手順;並びに
b)前記第1結合分子の前記第2結合分子への結合によって前記固体支持体と結合する磁性粒子数を検出する手順;
を有する方法。 - 前記第1結合分子が前記の試料中での標的及び前記第2結合分子と選択的に結合する能力を有し、かつ
接触手順a)が、前記の第1結合分子との選択結合を行うため、前記第2結合分子と前記標的との競合を可能にする手順を有する、
請求項1に記載の方法。 - 前記第2結合分子が前記標的と同一であるか、又は標的ホモログである、請求項2に記載の方法。
- 前記第2結合分子が前記の試料中での標的及び前記第1結合分子と選択的に結合する能力を有し、かつ
接触手順a)が、前記の第2結合分子との選択結合を行うため、前記第1結合分子と前記標的との競合を可能にする手順を有する、
請求項1に記載の方法。 - 前記第1結合分子が前記標的と同一であるか、又は標的ホモログである、請求項4に記載の方法。
- 前記標的が、小さな分子、薬、タンパク質、酵素、ホルモン、ペプチド、及び核酸からなる群から選ばれる、請求項1から5までのいずれか一項に記載の方法。
- 前記標的がたとえば常習性の薬のような薬である、請求項1から6までのいずれか一項に記載の方法。
- 前記常習性の薬が、モルヒネ、コカイン、THC、アナボリック、又はアンフェタミン/メタアンフェタミン基の薬である、請求項7に記載の方法。
- 前記磁力は、前記第2結合分子への結合中、前記磁気ラベルに付着する前記標的と前記第1結合分子との間での移動度の差異の効果を緩和又は除去するように印加される、請求項1から8までのいずれか一項に記載の方法。
- 前記磁力は、電磁石、空心コイル、又は永久磁石によって印加される、請求項9に記載の方法。
- 検出手順b)の前に、手順a)の間に前記第2結合分子と結合していない第1結合分子を除去する手順をさらに有する、請求項1から10までのいずれか一項に記載の方法。
- 前記第2結合分子と結合していない前記第1結合分子が磁力の印加によって除去される、請求項11に記載の方法。
- 前記第1結合分子が、スペーサ分子、タンパク質、又は強結合対を介して前記磁性粒子に付着する、請求項1から12までのいずれか一項に記載の方法。
- 前記スペーサ分子がアルキレンジアミン又はエチレンジアミンである、請求項11に記載の方法。
- 前記固体支持体が、たとえば磁気センサ素子のようなセンサ素子の表面である、請求項1から14までのいずれか一項に記載の方法。
- 前記センサ素子の表面が金の表面である、請求項15に記載の方法。
- 前記金の表面は、前記第2結合分子が結合するタンパク質でコーティングされる、請求項16に記載の方法。
- 前記タンパク質がタンパク質A又はタンパク質Gで、かつ
前記第2結合分子は、タンパク質A又はタンパク質Gによって結合されることのできる抗体である、
請求項17に記載の方法。 - 磁性粒子の数は、手順b)において磁気センサ素子によって決定される、請求項1から18までのいずれか一項に記載の方法。
- 前記磁性粒子の数は、
前記第1結合分子との選択的結合の可能な第3結合分子を、前記磁性粒子に付着する前記第1結合分子と結合可能にし、かつ
前記第1結合分子と結合する前記第3結合分子を検出することによって、
決定される、
請求項1から18までのいずれか一項に記載の方法。 - 前記第3結合分子が結合可能な前記第1結合分子は、前記第2結合分子との結合に関与しない前記第1結合分子である、請求項20に記載の方法。
- 前記検出が、前記第3結合分子と結合する検出可能なラベルを介して行われる、請求項20又は21に記載の方法。
- 前記検出は、
検出可能なラベルと結合し、かつ前記第3結合分子に対して選択的に結合できる薬剤が、前記第1結合分子と結合する前記第3結合分子との結合を可能にさせ、かつ
前記検出可能なラベルを検出する、
ことによって行われる、請求項20又は21に記載の方法。 - 前記検出可能なラベルは、蛍光ラベル、比色ラベル、化学発光ラベル、酵素ラベル(たとえばホースラディッシュペルオキシダーゼ)、放射線ラベル、静電ラベル、及び供与体/受容体ラベルであるからなる群から選ばれる、請求項22又は23に記載の方法。
- 前記試料が、尿試料、血液試料、汗、眼の流体、口の流体(唾液)、又は髪からなる、又は尿試料、血液試料、汗、眼の流体、口の流体(唾液)、又は髪から得られる、請求項1から24までのいずれか一項に記載の方法。
- 第1結合分子に付着する磁性粒子へ磁力を印加することで、前記粒子を、第1結合分子が付着する固体支持体へ近づけるための磁石の使用であって、
前記第1結合分子は前記第2結合分子への結合が可能で、かつ
前記結合を妨害することのできる標的分子が存在する、
磁石の使用。 - 請求項1から25までのいずれか一項に記載の方法において、前記磁力を印加することで、前記磁性粒子を前記固体支持体へ近づけるための磁石の使用。
- 前記磁石が電磁石、空心コイル、又は永久磁石である、請求項26又は27に記載の使用。
- 前記磁性粒子は、磁性、反磁性、常磁性、超常磁性、フェリ磁性、又は強磁性粒子からなる群から選ばれる、上記請求項のいずれ一項に記載の方法又は使用。
- 前記磁性粒子は、約10nmから約10μm、約50nmから約1μm、約100nmから約500nm、約300nm、又は約300nmの大きさを有する、上記請求項のいずれ一項に記載の方法又は使用。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
EP06113698 | 2006-05-09 | ||
EP06113698.2 | 2006-05-09 | ||
PCT/IB2007/051578 WO2007132373A1 (en) | 2006-05-09 | 2007-04-27 | Detection of target molecules in a sample by using a magnetic field |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2009536344A true JP2009536344A (ja) | 2009-10-08 |
JP5200003B2 JP5200003B2 (ja) | 2013-05-15 |
Family
ID=38445621
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2009508593A Active JP5200003B2 (ja) | 2006-05-09 | 2007-04-27 | 磁場を用いた試料中の標的分子の検出 |
Country Status (8)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US10488408B2 (ja) |
EP (1) | EP2027468B1 (ja) |
JP (1) | JP5200003B2 (ja) |
CN (1) | CN101438163B (ja) |
AT (1) | ATE514086T1 (ja) |
BR (1) | BRPI0711346A8 (ja) |
RU (1) | RU2444736C2 (ja) |
WO (1) | WO2007132373A1 (ja) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2014521060A (ja) * | 2011-06-28 | 2014-08-25 | コーニンクレッカ フィリップス エヌ ヴェ | 体液の検査用手段 |
Families Citing this family (13)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP5759377B2 (ja) | 2008-09-25 | 2015-08-05 | コーニンクレッカ フィリップス エヌ ヴェ | 検出システム及び方法 |
RU2530716C2 (ru) | 2008-12-22 | 2014-10-10 | Конинклейке Филипс Электроникс Н.В. | Анализ тропонина i с применением магнитных меток |
CA2773321A1 (en) * | 2009-09-19 | 2011-03-24 | Surgimed Biosciences, Inc. | Method and apparatus for automated cell transfer therapy and hair transplantation |
GB201110272D0 (en) | 2011-06-17 | 2011-08-03 | Isis Innovation | Metod of detection by mass spectrometry |
PT2800970T (pt) | 2012-01-04 | 2016-12-27 | Magnomics S A | Dispositivo monolítico combinando cmos com sensores magnetorresistivos |
CN104603611B (zh) * | 2012-09-04 | 2019-04-05 | 皇家飞利浦有限公司 | 传感器设备和采样方法 |
WO2014037880A1 (en) | 2012-09-04 | 2014-03-13 | Koninklijke Philips N.V. | A sensor device and a method of sampling |
US10895571B2 (en) * | 2013-06-06 | 2021-01-19 | Siemens Healthineers Nederland B.V. | Reagents, methods and devices to prevent aggregation in particle based tests for the detection of multimeric target molecules |
JP2017531804A (ja) * | 2014-10-20 | 2017-10-26 | ゴードン アトウッド,クリストファー | 蛍光部分および磁性部分を含む構築物を用いた試料の分析 |
US10261076B2 (en) * | 2015-10-02 | 2019-04-16 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | Method for detecting small molecule analytes using magnetoresistant sensors |
EP3394597B1 (en) * | 2015-12-24 | 2023-11-22 | Siemens Healthineers Nederland B.V. | Optical detection of a substance in fluid |
CA3051475A1 (en) * | 2017-01-26 | 2018-08-02 | Vital Biosciences, Inc. | Magnetic particle-based immunoassay and methods of using the same |
WO2023057823A1 (en) * | 2021-10-10 | 2023-04-13 | Alipour Elias | Detecting an antigen of a virus using electrochemical analysis |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH01221665A (ja) * | 1987-06-15 | 1989-09-05 | Orgenics Ltd | 単一エピトープ分折物検出のための競合固体相イムノアッセイ法、及びそのためのキット |
Family Cites Families (25)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5445971A (en) * | 1992-03-20 | 1995-08-29 | Abbott Laboratories | Magnetically assisted binding assays using magnetically labeled binding members |
US5635364A (en) * | 1992-03-27 | 1997-06-03 | Abbott Laboratories | Assay verification control for an automated analytical system |
AU3972993A (en) | 1992-04-01 | 1993-11-08 | Regents Of The University Of California, The | Non-instrumented enzyme immunoassay: general method utilizing kinetic binding effects |
WO1996007101A1 (en) | 1994-08-31 | 1996-03-07 | First Medical, Inc. | Quantitative assays employing magnetizable particles for rate enhancement |
US5660990A (en) | 1995-08-18 | 1997-08-26 | Immunivest Corporation | Surface immobilization of magnetically collected materials |
JP2000510582A (ja) * | 1996-04-25 | 2000-08-15 | ゼニコン・サイエンシーズ・コーポレーション | 微粒子標識を使用した分析物アッセイ |
US6586193B2 (en) | 1996-04-25 | 2003-07-01 | Genicon Sciences Corporation | Analyte assay using particulate labels |
FR2758884B1 (fr) * | 1997-01-30 | 1999-04-02 | Bio Merieux | Procede pour isoler, notamment detecter ou quantifier un analyte dans un milieu |
US5981297A (en) | 1997-02-05 | 1999-11-09 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Navy | Biosensor using magnetically-detected label |
DE19822123C2 (de) * | 1997-11-21 | 2003-02-06 | Meinhard Knoll | Verfahren und Vorrichtung zum Nachweis von Analyten |
ATE276745T1 (de) * | 1998-04-09 | 2004-10-15 | Amersham Health As | Verwendung von teilchenförmigen kontrastmitteln in der diagnostischen bilderzeugung zur untersuchung physiologischer parameter |
US6287765B1 (en) * | 1998-05-20 | 2001-09-11 | Molecular Machines, Inc. | Methods for detecting and identifying single molecules |
WO2001014591A1 (en) | 1999-08-21 | 2001-03-01 | Fox John S | High sensitivity biomolecule detection with magnetic particles |
US6897015B2 (en) * | 2000-03-07 | 2005-05-24 | Bioforce Nanosciences, Inc. | Device and method of use for detection and characterization of pathogens and biological materials |
RU2166751C1 (ru) * | 2000-03-09 | 2001-05-10 | Никитин Петр Иванович | Способ анализа смеси биологических и/или химических компонентов с использованием магнитных частиц и устройство для его осуществления |
CA2342023C (en) * | 2000-04-10 | 2007-07-03 | Randox Laboratories Ltd. | Paramagnetic particle detection |
GB0124341D0 (en) | 2001-10-10 | 2001-11-28 | Randox Lab Ltd | Assay |
US7432105B2 (en) * | 2002-08-27 | 2008-10-07 | Kimberly-Clark Worldwide, Inc. | Self-calibration system for a magnetic binding assay |
CN1210568C (zh) * | 2002-11-18 | 2005-07-13 | 中国农业科学院原子能利用研究所 | Bt晶体蛋白CrylAc放射免疫检测试剂盒及其制备方法和检测方法 |
GB2404022B (en) | 2004-06-14 | 2005-08-10 | Cozart Bioscience Ltd | Competitive assays for the detection of methamphetamine group drugs |
GB2404023B (en) * | 2004-07-02 | 2005-07-06 | Cozart Bioscience Ltd | Delta-9-tetrahydrocannabinol detection method |
US20060024769A1 (en) * | 2004-07-29 | 2006-02-02 | Saladax Biomedical Inc. | Taxol immunoassay |
US7611908B2 (en) * | 2005-05-02 | 2009-11-03 | Bioscale, Inc. | Method and apparatus for therapeutic drug monitoring using an acoustic device |
US7300631B2 (en) * | 2005-05-02 | 2007-11-27 | Bioscale, Inc. | Method and apparatus for detection of analyte using a flexural plate wave device and magnetic particles |
CN101198870A (zh) * | 2005-06-17 | 2008-06-11 | 皇家飞利浦电子股份有限公司 | 精密磁性生物传感器 |
-
2007
- 2007-04-27 WO PCT/IB2007/051578 patent/WO2007132373A1/en active Application Filing
- 2007-04-27 JP JP2009508593A patent/JP5200003B2/ja active Active
- 2007-04-27 CN CN200780016721XA patent/CN101438163B/zh active Active
- 2007-04-27 EP EP07735694A patent/EP2027468B1/en active Active
- 2007-04-27 RU RU2008148311/15A patent/RU2444736C2/ru active
- 2007-04-27 US US12/299,806 patent/US10488408B2/en active Active
- 2007-04-27 BR BRPI0711346A patent/BRPI0711346A8/pt not_active IP Right Cessation
- 2007-04-27 AT AT07735694T patent/ATE514086T1/de not_active IP Right Cessation
Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH01221665A (ja) * | 1987-06-15 | 1989-09-05 | Orgenics Ltd | 単一エピトープ分折物検出のための競合固体相イムノアッセイ法、及びそのためのキット |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2014521060A (ja) * | 2011-06-28 | 2014-08-25 | コーニンクレッカ フィリップス エヌ ヴェ | 体液の検査用手段 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
EP2027468B1 (en) | 2011-06-22 |
CN101438163B (zh) | 2013-05-29 |
BRPI0711346A8 (pt) | 2015-10-06 |
RU2008148311A (ru) | 2010-06-20 |
US10488408B2 (en) | 2019-11-26 |
JP5200003B2 (ja) | 2013-05-15 |
WO2007132373A1 (en) | 2007-11-22 |
EP2027468A1 (en) | 2009-02-25 |
ATE514086T1 (de) | 2011-07-15 |
CN101438163A (zh) | 2009-05-20 |
RU2444736C2 (ru) | 2012-03-10 |
BRPI0711346A2 (pt) | 2011-08-30 |
US20090117670A1 (en) | 2009-05-07 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP5200003B2 (ja) | 磁場を用いた試料中の標的分子の検出 | |
JP5311445B2 (ja) | 高速かつ高感度バイオセンシング | |
Dittmer et al. | Sensitive and rapid immunoassay for parathyroid hormone using magnetic particle labels and magnetic actuation | |
CN106771219B (zh) | 多表位测定 | |
JP2005517899A (ja) | コロイド状磁気粒子を使用した分析物の検出方法 | |
US20080268481A1 (en) | Sensitive Magnetic Catch Assay By Building a Strong Binding Couple | |
JPH10513551A (ja) | 被検体の磁気緩和測定での検出のための方法及び化合物並びにそれらの使用 | |
JP2002509242A (ja) | 力識別検定 | |
JPH03502244A (ja) | 試験方法およびそのための試薬キツト | |
KR20130051647A (ko) | 자성 입자를 이용한 바이오 물질의 분석 방법 | |
JP2010506190A (ja) | 磁気及び/又は電気ラベル補助検出システム並びに方法 | |
JP7041491B2 (ja) | バイオアッセイのための検出剤及びそれを用いたシグナルの増幅方法 | |
US10571464B2 (en) | Detecting an analyte and determining the concentration of an analyte using magnetizable beads | |
WO2009083856A2 (en) | Concentrated unbound magnetic particle assay for biosensors | |
US20080309323A1 (en) | Method for biochemical analysis | |
JP2008268186A (ja) | 磁気センサーの感度向上材料及び方法 | |
EP2073016A1 (en) | Magnetic label based detection | |
EP1801594A1 (en) | Sensing device and method for determination of the amount of target molecule in an analyte | |
EP1867990A1 (en) | Sensitive assay through amplification of a label signal | |
Morozova et al. | Force differentiation in recognition of cross-reactive antigens by magnetic beads | |
JP2009128233A (ja) | 標的物質の検出方法 | |
KR20110130384A (ko) | 효소가 집적된 미세튜브를 이용한 정량분석법 | |
WO2009150595A1 (en) | Parathyroid hormone assay | |
JP2010002393A (ja) | 標的物質の検出方法 | |
JP5137880B2 (ja) | 結合性物質を固定化した乾燥粒子の製造方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20100426 |
|
A977 | Report on retrieval |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971007 Effective date: 20110831 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20110906 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20111206 |
|
A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20111213 |
|
A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20120515 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20120914 |
|
A911 | Transfer to examiner for re-examination before appeal (zenchi) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A911 Effective date: 20120924 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20121113 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20121126 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20130115 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20130208 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20160215 Year of fee payment: 3 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 5200003 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
S111 | Request for change of ownership or part of ownership |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313113 |
|
S531 | Written request for registration of change of domicile |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313531 |
|
S533 | Written request for registration of change of name |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313533 |
|
R350 | Written notification of registration of transfer |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R350 |
|
R360 | Written notification for declining of transfer of rights |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R360 |
|
R360 | Written notification for declining of transfer of rights |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R360 |
|
R371 | Transfer withdrawn |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R371 |
|
S111 | Request for change of ownership or part of ownership |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313113 |
|
R350 | Written notification of registration of transfer |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R350 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |