JP2009523807A - リンパ機能を高める方法 - Google Patents
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Abstract
【選択図】図5
Description
本出願は、2006年1月18日出願の米国特許出願第60/760,328号の優先権を主張し、該出願は参考としてその全内容が本明細書に組み込まれる。
リンパ管系は、細胞外間隙からタンパク質に富むリンパ液を排出させる薄壁毛細管の緻密なネットワークから構成される。その主な役割としては、組織液恒常性の維持と、求心性免疫応答の媒介が挙げられる〔Oliver他 (2002) Genes Dev. 16:773-83 ; Witte他 (2001) Microsc. Res. Tech. 55:122-45〕。既知のリンパ管の機能の1つは、正常組織と炎症組織からの組織液の排出である〔Kunstfeld他 (2004) Blood 104:1048-57〕。
本発明者らは、マウス皮膚における急性及び慢性UVB照射がリンパ管の著しい拡大を引き起こすことを報告する。驚くべきことに、そのような拡大したリンパ管は、生体内リンパ管造影法により検出すると、機能的に損傷されており且つ高透過性である。血管内皮増殖因子(VEGF)-Aの発現レベルはUVB照射した表皮で増加したが、既知のリンパ管形成因子VEGF-C又は-Dの発現レベルは増加しなかった。トランスジェニックマウスの表皮におけるVEGF-Aの標的過剰発現は、急性UVB照射後にリンパ管の拡大と漏洩の増加を引き起こし、その一方でVEGF-Aシグナル伝達の全身的遮蔽は、UVBにより誘導されるリンパ管異常と光損傷を大幅に防止した。総合すると、それらの知見は、リンパ管がUVBにより誘導される皮膚光損傷の標的であること、そしてVEGF-Aがリンパ管機能の障害を媒介し、それによって皮膚に対するUVB照射の悪影響の一因となることを指摘する。
更に別の態様では、本開示は、リンパ機能を促進することにより、例えば顔、胸、首、手又は体の他の部分における、UVBで誘発される皮膚損傷を減らす方法を特徴とする。
一態様では、該モジュレーターはVEGF-C/D/VEGFR(例えばVEGFR-3)アゴニストである。VEGF-C/D/VEGFRアゴニストは、被検体におけるVEGF-C/D/VEGFR活性を直接又は間接的に増加させる物質である。
本発明の1又は複数の態様の詳細は、添付図面及び下記説明に与えられる。本発明の別の特徴、目的及び利点は、下記記載及び添付図面並びに特許請求の範囲から明白であろう。
皮膚への紫外線B波(UVB)照射は、紅斑、細胞外マトリックス分子の分解及び皮膚の皺を誘発する。リンパ管は正常な皮膚において体液平衡を維持するのに重要な役割を果たす。マウス皮膚の急性UVB照射と慢性UVB照射の両方がリンパ管の顕著な拡大を引き起こすことを発見した。驚くべきことに、それらの拡大したリンパ管は、リンパ管造影法により検出すると、機能的に損傷を受けており且つ高浸透性であった。UVB照射した表皮において血管内皮増殖因子(VEGF)-Aの発現レベルは増強されたが、VEGF-C又は-Dのそれは増強されなかった。トランスジェニックマウスの表皮におけるVEGF-Aの標的過剰発現は、急性UVB照射後のリンパ管の著しい拡大と、驚くべきことにリンパ管の漏出も引き起こし、その一方でVEGF-Aシグナル伝達の全身的遮蔽が、リンパ管異常を大幅に防止し、且つUVBにより誘発される光損傷も防止した。総合すると、それらの知見は、リンパ管がUVBにより誘発される皮膚光損傷を防止するための新規標的であることを示し、そしてリンパ機能の促進、例えばVEGF-Cのようなリンパ管形成因子による促進が、皮膚に対するVEGF-Aにより一部媒介されるUVB照射の損傷を軽減しうることも示唆する。従って、本出願は、VEGF-A又はVEGFR(例えばVEGFR-2)のレベル又は活性を減少させることにより、被検体の例えば皮膚における、皮膚損傷(例えばUVBにより誘発される)を治療する(例えば減少させる、軽減する、又は予防する)方法を特徴とする。
UV指数(米国環境保護庁により発表される)は、指定された日における太陽の紫外線の強度を示す。それには4つのカテゴリーがある―中程度(UV指数3未満)、高度(UV指数が3〜6)、非常に高度(UV指数が6〜10)及び極度(UV指数が10より高い)。中度UV指数は、ヒトの皮膚を日焼けさせるのに1時間以上要するだろうことを意味し;極度レベルは、15分未満を要するだろうことを意味する。該指数はしばしば天気情報に含められる。臨床的には、UVB暴露は最小紅斑量(MED)として測定される。1MEDは、敏感な皮膚に日焼けを生じさせるのに必要なUVBの量である。中度〜重度の急性UVB誘発皮膚損傷、例えば日焼けは、3〜8 MEDにて起こり得る。
ある物質がVEGF-Aシグナル伝達、例えばVEGF-AもしくはVEGFR遺伝子発現、活性又はレベルをモジュレートできるかどうかを評価する方法は多数存在する。一態様では、VEGF-A又はVEGFR(例えばVEGFR-2)遺伝子プロモーターからの発現を、例えば永久に又は一時的に、増加又は減少させることのできる試験物質の能力は、例えば汎用レポーター(例えばLacZ又はGEP又はルシフェラーゼ)転写アッセイにより評価される。例えば、ゲノムがVEGF-A又はVEGFR(例えばVEGFR-2)プロモーターに作用可能に連結されたレポーター遺伝子を含んで成る細胞又はトランスジェニック動物を、試験物質と接触せしめることができ、ここでレポーター活性を増加又は減少させる試験物質の能力が、急性UVB皮膚損傷をモジュレートする能力の指標である。別の態様では、VEGF-A又はVEGFR(例えばVEGFR-2)遺伝子発現、或いはVEGF-A又はVEGFR(例えばVEGFR-2)活性又はレベルをモジュレートする試験物質の能力が、トランスジェニック動物、例えば本明細書に記載のトランスジェニック動物において評価される。
様々な物質をVEGF(例えばVEGF-A,-C又は-D)又はVEGFR(例えばVEGFR-2又は-3)モジュレーターとして皮膚損傷を治療又は予防するために使用できる。該物質は、被検体に投与することができる任意の種類の化合物(例えば抗体、タンパク質、ペプチド、糖タンパク質、糖ペプチド、糖脂質、多糖、オリゴ糖、核酸、生物有機分子、ペプチド模倣物、薬理物質及びそれらの代謝産物、転写及び翻訳調節配列、天然産物及び抽出物等)であることができる。一態様では、VEGF/VEGFRモジュレーターは生体物質、例えば5〜300 kDaの分子量を有するタンパク質である。
本明細書に記載の物質は、全身投与又は限局投与、例えば局所投与することができる。本明細書に記載の物質の局所投与が好ましい投与経路である。局所投与用には、本発明の組成物は細胞、外植片又は被検体と適合する溶媒を含有し得る。そのような局所用医薬組成物は、多数の形態、例えば溶液、クリーム、軟膏、ゲル、ローション、シャンプー、石鹸又はエーロゾルの形で存在することができる。多種多様な担体材料を本発明組成物に使用でき、例えば、アルコール、アロエベラゲル、アラントイン、グリセリン、ビタミンA及びE油、鉱油並びにポリエチレングリコールを使用できる。別の添加剤、例えば保存剤、香料、日焼け止め、又は他の化粧成分を、該組成物中に含めることができる。
本明細書に記載の物質(例えばVEGF抗体又はVEGFもしくはVEGFRをモジュレートする物質)はキットにおいて提供することができる。キットは、(a)本発明物質、例えば物質を含む組成物、及び(b)資料を含んで成る。資料は、本明細書に記載の方法及び/又は本明細書に記載の方法のためのVEGFもしくはVEGFRの使用に関する、説明、教材、販売又は他の材料であることができる。例えば、資料は急性UVB皮膚損傷、例えば日焼けに関する。
UVB照射処置計画
雌無毛マウスSkh1マウス(8週齢)を、記載の通りに〔Kochevar他(1993) J. Invest. Dermatol. 100:186-93〕、4個の等間隔に置かれた蛍光ランプ(Southern New England Ultraviolet, Bradford, CN)の壁を使って、UVB放射線に暴露した。マウス(グループ当たりn=7)を偽照射するか、又は40 mJ/cm2の開始線量でそして4.5 MEDの最大線量まで0.5 MED(0.5最小紅斑量;MED)の増分で徐々に増加するUVB放射線に、10週間に渡り週3回、暴露した。UVBの全累積線量は5.46 J/cm2であった。急性日焼け反応は全く観察されなかった。追加の実験では、8週齢の雌Skh1マウス、K14プロモーターの調節下にマウスVEGF164の皮膚特異的過剰発現を有するFVBトランスジェニックマウス〔Detmar他(1998)J. Invest. Dermatol. 111:1-6〕又は野生型FVBマウス(グループ当たりn=5)を、40 mJ/cm2(0.5 MED)又は80 mJ/cm2(1MED)の1回線量のUVB放射線で照射した。加えて、野生型マウス(n=5/グループ)を、50μgの抗マウスVEGF中和抗体(R&D Systems, Minneapolis, MN)又は50μgの対照IgGで、記載の通りに(Hirakawa他(2005)Blood 105:2392-9)54 mJ/cm2のUVB照射への暴露の24時間前に、腹腔内注射により処置した。全ての動物実験はMassachusettus General Hospital Subcommittee on Research Animal Careにより承認された。
マウス(n=7/グループ)をアベルチン(0.4 g/kg, Sigma)により麻酔し、そしてリンパ管を可視化するために、10μlのハミルトン注射器を使って、耳介辺縁の内面の所に0.9%NaCl中1%エヴァンス青色素溶液1μlを皮内注射した。マウス耳を色素注射の1分、3分及び5分後に撮影した。
マウスの全背中皮膚から、最終UVB照射(n=7/グループ)の2日後に、TRIZOL試薬(登録商標、Invitrogen, Carsbad, CA)を使って全細胞RNAを単離し、続いてRQI RNアーゼ不含有DNアーゼ(Promega, Madison, WI)で処理した。全皮膚を、Tissue Lyser(Qiagen GmbH, ドイツ)を使ってホモジナイズした。VEGF-A, -C及び-D mRNAの発現レベルを、記載の通りに〔Hong他(2004)Nat. Genet. 36:683-5〕、ABI PRISM(登録商標)7000配列検出装置(Applied Biosystems, Foster City, CA)を使った定量的実時間RT-PCR法により調べた。マウスVEGF-A, -C及び-Dのためのプライマーとプローブは既に記載されている〔Kunstfeld他(2004)Blood 104:1048-57〕。各反応は、内部標準としてグリセルアルデヒド−3−リン酸デヒドロゲナーゼ(GAPDH)プライマー〔正プライマー:5’-TCACTGGCATGGCCTTCC-3’(配列番号1)、逆プライマー:5’-GGCGGGCACGTCAGATCCA-3’(配列番号2)〕、及びプローブ〔5’-JOE-TTCCTACCCCCAATGTGTCCGTCG-TAMRA-3’(配列番号3)〕を使って多重化した。
免疫蛍光分析法は、マウスLYVE-1〔Banerji他(1999)J. Cell Biol. 144:789-801〕、マウスCD31(BD Biosciences, Pharmingen, San Diego, CA)に対するポリクローナル抗体、及びALEXA FLUOR(登録商標)488又はAKEXA FLUOR(登録商標)594(Molecular Probes, Eugene, OR)で標識された対応する第二抗体を使って、マウス組織の6μmクリオスタット切片に対して実施した〔Kajiya他(2005)EMBO J. 24:2885-95〕。切片をNikon E-600顕微鏡(Nikon, Melville, NY)により検査し、そしてSPOTTMデジタルカメラ(Diagnostic Instruments, Sterling Heights, MI)により画像を取り込んだ。形態学的分析は、記載の通りに〔Hirakawa他(2005)Blood 105:2392-9〕IPLABTMソフトウエア(Scanalytics, Fairfax, VA)を使って実施した。各切片の3つの異なる領域を調査し、そして1平方マイクロメートル当たりの管の数、平均管サイズ、及びリンパ管により占有される相対組織面積を、表皮−真皮接点から200μm距離以内の領域にある皮膚において測定した。対応のないStudent t−検定を使って、微小管密度及びサイズの相違を分析した。加えて、汎用ヘマトキシリン−エオシン染色を以前に記載された通りに実施した〔Prophet, Arrington & Sobin (1992) Laboratory Methods in Histotechnology〕。
リンパ管構造に対するUVB照射の影響を調べるために、本発明者らはまず、10週間の期間に渡り、5.46 J/cm2の累積線量でSkh1無毛マウス〔Kligman (1996) Clin. Dermatol. 14:183-95〕の慢性UVB照射を実施した。慢性UVB照射は、以前に報告された通り〔Yano他(2002)J. Invest. Dermatol. 118:800-5〕顕著なシワ形成を引き起こしたが、一方で偽照射したマウスではそのような変化は検出されなかった。組織学的検査は、慢性UVB損傷の典型的徴候、例えば表皮増生、炎症細胞浸潤、及び浮腫形成を示した(図1A及びB)。全血管(panvascular)マーカーCD31及びリンパ特異的ヒアルロナン受容体LYVE-1についての二重免疫蛍光染色は、以前の実験〔Yano他(2005)Br. J. Dermatol. 152:115-21〕と一致して、CD31+/LYVE-1−血管の中程度の拡大を示した(図1C及びD)。驚くべきことに、LYVE-1陽性皮膚リンパ管はサイズが著しく増加し、不規則な形状と時折管壁の不完全な内皮細胞内壁を有し、一方で偽照射マウスでは正常なリンパ管だけが観察された(図1C及びD)。コンピューター支援形態学的分析は、リンパ管により占有される平均皮膚面積(偽照射マウスに対して2.5倍増加;P<0.01)及び皮膚リンパ管の平均サイズ(2.1倍増加;P<0.01)が、偽照射マウスに比較して、UVB照射皮膚において有意に増加した(図1E及びF)。対照的に、リンパ管の密度は両グループとも同等であった(図1G)。
皮膚リンパ管の機能に対する慢性UVB照射の影響を更に調べるために、エヴァンス青色素をマウス耳介辺縁に皮内注射した。色素注射の1分後と3分後に、偽照射マウスに比較して、慢性UVB照射マウスの皮膚において著しく拡張したリンパ管が視覚化された(図2A,B,D,E)。5分後、慢性UVB照射皮膚ではエヴァンス青色素がリンパ管から排出されたが、一方で偽照射マウスではそのような漏出は観察されなかった(図2C及びF)。これらの観察結果は、UVB照射後に拡大したリンパ管が脆弱で且つ機能的に損傷されていることを示す。
慢性UVB照射が、表皮角化細胞による既知のリンパ管形成因子VEGF-A〔Nagy他(2002)J. Exp. Med. 196:1497-506〕、VEGF-C又はVEGF-D〔Jussila他(2002)Physiol. Rev. 82:673-700〕のいずれかのアップレギュレーションを引き起こすかどうかを調べるために、本発明者らは耳皮膚の表皮から全RNAを単離し、次いでmRNA発現の定量的実時間TAQMANTM RT-PCR分析を行った。偽照射対照に比較して、UVB照射表皮においてVEGF-A mRNA発現の2.2倍アップレギュレーションが観察された(P<0.01;図3A)。対比して、VEGF-C及びVEGF-D mRNA発現レベルは両グループとも同等であった(図3B及びC)。表皮と真皮の両方を含む全皮膚溶解物から単離した全RNAを使って実験した時も同様な結果が得られた。
本発明者らは次に、急性UVB単回照射がリンパ管機能を損傷するのに十分であるかどうかを調べた。40 mJ/cm2の線量の単回UVB照射(0.5最小紅斑量;MED)の2日後、皮内エヴァンス青色素注射による皮膚リンパ管の可視化は、リンパ管が非照射皮膚におけるものと区別不可能であり、且つそれらは高透過性ではないことを示した(図4A〜F)。対照的に、80 mJ/cm2の線量のUVB照射(1 MED)は、皮膚リンパ管の拡大を誘導し(図4G〜H)、そして顕著な漏出が観察された(図4I)。皮膚切片の示差免疫蛍光分析は、80 mJ/cm2でのUVB照射後にLYVE-1+リンパ管の著しい拡大を示したが、CD31+/LYVE-1-血管は中程度の拡大しか見られなかった(図4L)。しかしながら、非照射皮膚と40 mJ/cm2のUVB線量で照射した皮膚では、そのような変化は全く観察されなかった(図4J,K)。
本発明者らは、VEGF-AのmRNA発現がUVB照射後に表皮角化細胞によりアップレギュレートされることを発見したので、次に表皮由来VEGF-Aがリンパ管のUVB誘発拡大及び漏出を直接促進し得るかどうかを調べた。従って、ケラチン14プロモーターの調節下でマウスVEGF164を過剰発現するトランスジェニックFVBマウス〔Detmar他(1998)J. Invest. Dermatol. 111:1-6〕とFVB野生型マウスを、40 mJ/cm2 の単回UVB照射に暴露するか又は偽照射した。UVB照射後2日目の耳切片の示差免疫蛍光は、偽照射した野生型マウスとUVB照射した野生型マウスにおいてCD31+/LYVE-1-血管及びLYVE-1+リンパ管の数とサイズが同等であることを示した(図5A及びC)。偽照射したVEGFトランスジェニックマウスは、野生型マウスに比較して、リンパ管サイズのわずかな増加を示した(図5B)。重要であるのは、VEGFトランスジェニックマウスのUVB照射後、耳の肥厚と浮腫形成の増加に伴って、リンパ管が著しく拡大した(図5D)。コンピューター介在形態学的分析は、野生型マウスに比較して、偽照射したVEGFトランスジェニックマウスにおいてリンパ管サイズの1.3倍増加(p<0.05)を示し、そして更にUVB照射後に有意な1.9倍拡大(p<0.01;図5E)を示した。リンパ管の密度は全てのグループにおいて同等であった(図5F)。
本発明者らは、次にVEGF-Aの全身性阻止がUVB誘発リンパ管拡大を防止するかどうかを調べた。野生型FVBマウスを、VEGF-Aに対する阻止抗体の又は同量の対照IgGの腹腔内注射の1日後に、54 mJ/cm2 のUVB単回照射に暴露した。UVB照射後2日目のCD31とLYVE-1についての二重免疫蛍光染色は、LYVE-1陽性リンパ管の顕著な拡大、並びに対照IgGで処置したマウスにおいてはCD31+/LYVE-1-血管の中程度の肥大を証明した(図6A及びC)。対比して、VEGF-A阻止抗体による全身処置は、リンパ管と血管の拡大を完全に防止した(図6B及びD)。
本発明の多数の態様を記載してきた。それにも係わらず、本発明の精神及び範囲から逸脱することなく、多数の変更を行えることが分かるだろう。従って、他の態様も添付の請求の範囲内に含まれる。
すべての引用した特許、出願、及び参考文献は参考として本明細書中に組み込まれる。
Claims (18)
- UVBにより誘発される皮膚損傷を低減させる方法であって、皮膚におけるVEGF-Aの活性又はレベルを減少させることを含んで成る方法。
- 皮膚におけるリンパ管形成因子の活性又はレベルを増加させることを更に含んで成る、請求項1記載の方法。
- 前記リンパ管形成因子がVEGF-C又はVEGF-Dである、請求項2記載の方法。
- 浮腫を減らす方法であって、VEGF-Aの活性又はレベルを減少させることを含んで成る方法。
- 皮膚におけるリンパ管形成因子の活性又はレベルを増加させることを更に含んで成る、請求項4記載の方法。
- 前記リンパ管形成因子がVEGF-C又はVEGF-Dである、請求項5記載の方法。
- VEGF-A活性の阻害剤をスクリーニングする方法であって、
VEGF-Aを結合しそしてVEGF-Aに応答することができる膜貫通受容体を細胞に提供し;
試験化合物の存在下で、前記細胞とVEGF-A又はその断片を含んで成るポリペプチドとを接触せしめ;そして
前記細胞への前記ポリペプチドの結合を評価する
ことを含んで成り、ここで前記細胞への前記ポリペプチドの結合を阻害する試験化合物がVEGF-A活性の阻害剤である方法。 - 前記膜貫通受容体がVEGF-2のVEGF-A結合部分を含んで成る、請求項7記載の方法。
- 前記試験化合物が天然産物又は抽出物である、請求項7記載の方法。
- VEGF-A活性の阻害剤についてのスクリーニング方法であって、
VEGF-Aに結合することができる膜貫通受容体の部分を含んで成る第一ポリペプチドを提供し;
前記ポリペプチドを、試験化合物の存在下で、VEGF-A又はその断片を含んで成る第二ポリペプチドと接触せしめ;そして
前記第二ポリペプチドへの前記第一ポリペプチドの結合を評価する
ことを含んで成り、ここで前記第二ポリペプチドへの前記第一ポリペプチドの結合を阻害する試験化合物が、VEGF-A活性の阻害剤である方法。 - 前記膜貫通受容体がVEGFR-2のVEGF-A結合性部分を含んで成る、請求項10記載の方法。
- 前記試験化合物が天然産物又は抽出物である、請求項10記載の方法。
- VEGF-A発現の阻害剤についてのスクリーニング方法であって、
(a) VEGF-Aプロモーター領域を有する細胞を提供し;
(b) 該細胞をUVB照射に暴露し;
(c) (b)の前、最中又は後に、前記細胞を試験化合物と接触せしめ;そして
(d) 前記プロモーター領域により指令される発現を測定する
ことを含んで成り、ここで発現を減少させる試験化合物が、VEGF-A発現の阻害剤である方法。 - 前記膜貫通受容体がVEGFR-2のVEGF-A結合部分を含んで成る、請求項13記載の方法。
- 前記試験化合物が天然産物又は抽出物である、請求項13記載の方法。
- VEGF-Aの発現、活性又はレベルを減少させる剤の使用であって、慢性又は急性UVBにより誘発される皮膚損傷を減少させる医薬の調製のための使用。
- 前記医薬がリンパ管形成因子の発現、活性又はレベルを増加させる剤を更に含んで成る、請求項16の使用。
- 前記リンパ管形成因子がVEGF-C,VEGF-D又はVEGFR-3である、請求項17の使用。
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US20080260861A1 (en) * | 2004-04-07 | 2008-10-23 | The General Hospital Corporation | Modulating Lymphatic Function |
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US8580755B2 (en) * | 2008-02-19 | 2013-11-12 | University Of Rochester | Methods and compositions for treating inflammatory conditions |
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Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2005097187A2 (en) * | 2004-04-01 | 2005-10-20 | The General Hospital Corporation | Methods of preventing uvb-induced skin damage |
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---|---|---|---|---|
US8821A (en) * | 1852-03-23 | Machiheiiy toe | ||
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US4634665A (en) | 1980-02-25 | 1987-01-06 | The Trustees Of Columbia University In The City Of New York | Processes for inserting DNA into eucaryotic cells and for producing proteinaceous materials |
US5179017A (en) | 1980-02-25 | 1993-01-12 | The Trustees Of Columbia University In The City Of New York | Processes for inserting DNA into eucaryotic cells and for producing proteinaceous materials |
GB8607679D0 (en) | 1986-03-27 | 1986-04-30 | Winter G P | Recombinant dna product |
US4987071A (en) | 1986-12-03 | 1991-01-22 | University Patents, Inc. | RNA ribozyme polymerases, dephosphorylases, restriction endoribonucleases and methods |
US5116742A (en) | 1986-12-03 | 1992-05-26 | University Patents, Inc. | RNA ribozyme restriction endoribonucleases and methods |
JP3101690B2 (ja) | 1987-03-18 | 2000-10-23 | エス・ビィ・2・インコーポレイテッド | 変性抗体の、または変性抗体に関する改良 |
IL162181A (en) | 1988-12-28 | 2006-04-10 | Pdl Biopharma Inc | A method of producing humanized immunoglubulin, and polynucleotides encoding the same |
US5530101A (en) | 1988-12-28 | 1996-06-25 | Protein Design Labs, Inc. | Humanized immunoglobulins |
US5789650A (en) | 1990-08-29 | 1998-08-04 | Genpharm International, Inc. | Transgenic non-human animals for producing heterologous antibodies |
WO1992022653A1 (en) | 1991-06-14 | 1992-12-23 | Genentech, Inc. | Method for making humanized antibodies |
US6824777B1 (en) | 1992-10-09 | 2004-11-30 | Licentia Ltd. | Flt4 (VEGFR-3) as a target for tumor imaging and anti-tumor therapy |
EP0678122B1 (en) | 1993-01-12 | 1999-07-28 | Biogen, Inc. | Recombinant anti-vla4 antibody molecules |
US5827690A (en) | 1993-12-20 | 1998-10-27 | Genzyme Transgenics Corporatiion | Transgenic production of antibodies in milk |
GB9410533D0 (en) * | 1994-05-26 | 1994-07-13 | Lynxvale Ltd | In situ hybridisation and immuno-Chemical localisation of a growth factor |
EP0823941A4 (en) | 1995-04-28 | 2001-09-19 | Abgenix Inc | HUMAN ANTIBODIES DERIVED FROM IMMUNIZED XENO MOUSES |
US6018098A (en) * | 1995-06-16 | 2000-01-25 | Thomas Jefferson University | In vivo and in vitro model of cutaneous photoaging |
US7423125B2 (en) * | 1995-08-01 | 2008-09-09 | Vegenics Limited | Antibodies to VEGF-C |
US6361946B1 (en) * | 1997-02-05 | 2002-03-26 | Licentia Ltd | Vascular endothelial growth factor C (VEGF-C) protein and gene, mutants thereof, and uses thereof |
DE19541844C1 (de) | 1995-11-09 | 1997-07-24 | Gsf Forschungszentrum Umwelt | Verfahren zur Herstellung von menschlichen Antikörpern und deren Verwendung |
US20030143204A1 (en) | 2001-07-27 | 2003-07-31 | Lewis David L. | Inhibition of RNA function by delivery of inhibitors to animal cells |
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FR2752734B1 (fr) | 1996-09-02 | 1998-11-06 | Cird Galderma | Utilisation de retinoides pour la preparation d'un medicament destine a traiter les affections liees a une surexpression de vegf |
US6337320B1 (en) * | 1996-10-11 | 2002-01-08 | Thione International, Inc. | Reparatives for ultraviolet radiation skin damage |
AU729420B2 (en) * | 1996-11-01 | 2001-02-01 | Eurogene Limited | Therapeutic use of growth factor, and delivery device, especially for the treatment of intimal hyperplasia |
ES2301183T3 (es) | 1996-12-03 | 2008-06-16 | Amgen Fremont Inc. | Anticuerpo completamente humano que se une al receptor del egfr. |
US6093740A (en) * | 1997-04-30 | 2000-07-25 | Eli Lilly And Company | Therapeutic treatment for skin disorders |
ATE307339T1 (de) * | 1998-12-11 | 2005-11-15 | Eisai Co Ltd | Verwendung des vaskularen endothelialen wachstumsfaktors (vegf) |
AU770332B2 (en) * | 1998-12-21 | 2004-02-19 | Vegenics Limited | Antibodies to truncated VEGF-D and uses thereof |
US6534261B1 (en) | 1999-01-12 | 2003-03-18 | Sangamo Biosciences, Inc. | Regulation of endogenous gene expression in cells using zinc finger proteins |
US6453242B1 (en) | 1999-01-12 | 2002-09-17 | Sangamo Biosciences, Inc. | Selection of sites for targeting by zinc finger proteins and methods of designing zinc finger proteins to bind to preselected sites |
ATE400289T1 (de) * | 1999-02-08 | 2008-07-15 | Human Genome Sciences Inc | Verwendung vom vaskulären endothelialen wachstumsfaktor 2 (vegf-2) |
WO2000058511A1 (en) * | 1999-03-26 | 2000-10-05 | Ludwig Institute For Cancer Research | Screening and therapy for lymphatic disorders involving the flt4 receptor tyrosine kinase (vegfr-3) |
US20020119921A1 (en) * | 1999-03-31 | 2002-08-29 | Michael Streit | Thrombospondin-2 and uses thereof |
US6867348B1 (en) * | 1999-12-16 | 2005-03-15 | Xenogen Corporation | Methods and compositions for screening for angiogenesis modulating compounds |
US20020102260A1 (en) * | 2000-03-02 | 2002-08-01 | Marc Achen | Methods for treating neoplastic disease characterized by vascular endothelial growth factor D expression, for screening for neoplastic disease or metastatic risk, and for maintaining vascularization of tissue |
CA2403397A1 (en) | 2000-03-16 | 2001-09-20 | Genetica, Inc. | Methods and compositions for rna interference |
US8288322B2 (en) | 2000-04-17 | 2012-10-16 | Dyax Corp. | Methods of constructing libraries comprising displayed and/or expressed members of a diverse family of peptides, polypeptides or proteins and the novel libraries |
US6511808B2 (en) | 2000-04-28 | 2003-01-28 | Sangamo Biosciences, Inc. | Methods for designing exogenous regulatory molecules |
EP1370306B1 (de) * | 2001-01-05 | 2005-10-19 | Jacqueline Yvonne Hausdorf | Durch korrosion abbaubare metallische medizinische implantate |
TWI233361B (en) | 2001-04-13 | 2005-06-01 | Gen Hospital Corp | Methods of preventing UVB-induced skin damage |
WO2003064621A2 (en) | 2002-02-01 | 2003-08-07 | Ambion, Inc. | HIGH POTENCY siRNAS FOR REDUCING THE EXPRESSION OF TARGET GENES |
CU23178A1 (es) * | 2002-04-15 | 2006-09-22 | Ct Ingenieria Genetica Biotech | INMUNOTERAPIA ACTIVA ANTIANGIOGéNICA |
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Non-Patent Citations (2)
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JPN5008023396; LIU,W. et al,: Cytokine Vol.32 No.5, 2005, p.206-212 * |
JPN6012022482; GOLDMAN,J. et al: Circulation Research Vol.96, No.11, 2005, p.1193-1199 * |
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