JP2009126853A - Therapeutic agent - Google Patents

Abstract

<P>PROBLEM TO BE SOLVED: To provide a therapeutic agent containing kuzu (Pueraria lobata) flower-treated material as an active ingredient, although it is known to have various activities such as a body fat-reducing effect, an antidiabetic effect, an anti-obesity effect, a blood stream-improving effect, etc., it is also effective to various diseases other than the above with specific marked effects. <P>SOLUTION: This therapeutic agent containing the kuzu flower-treated material as the active ingredient is useful as an anti-allergy agent, a preventing or improving agent of hyperuricemia, an anti-osteoporosis agent, a rheumatism-treating agent, an anti-depressant/anti-stress agent, an adiponectin production enhancer and a cholesterol-reducing agent. <P>COPYRIGHT: (C)2009,JPO&INPIT

Description

本発明は、葛花の処理物を有効成分とする各種疾病に有用な治療剤に関する。   The present invention relates to a therapeutic agent useful for various diseases comprising a processed product of Kuzuka as an active ingredient.

葛花の処理物には、体脂肪低減効果（特許文献１）、抗糖尿病効果（特許文献２）、抗肥満効果（特許文献３）、血流改善効果（特許文献４）などの種々の活性があることが知られている。
しかしながら、葛花の処理物が、下記で説明する本発明で適用される種々の疾病に、とりわけ顕著な効果でもって有効であるとの見地はない。
特開２００７−２８９００１号公報 特開２００６−２９０８７６号公報 特開２００７−１３７８６１号公報 特開２００６−２４９０７１号公報 Various processed activities such as body fat reduction effect (Patent Document 1), anti-diabetic effect (Patent Document 2), anti-obesity effect (Patent Document 3), blood flow improvement effect (Patent Document 4), etc. It is known that there is.
However, there is no viewpoint that the processed product of Kuzuka is effective with various effects applied to the present invention described below, particularly with remarkable effects.
JP 2007-289001 A JP 2006-290876 A JP 2007-137861 A JP 2006-249071 A

本発明の目的は、下記で説明する本発明で適用される種々の疾病に、とりわけ顕著な効果でもって有効である各種治療剤を提供することにある。   An object of the present invention is to provide various therapeutic agents that are effective with a particularly remarkable effect on various diseases applied in the present invention described below.

請求項１に記載の発明は、葛花処理物を有効成分とすることを特徴とする抗アレルギー剤である。
請求項２に記載の発明は、葛花処理物を有効成分とすることを特徴とする高尿酸血症の予防または改善剤である。
請求項３に記載の発明は、葛花処理物を有効成分とすることを特徴とする抗骨粗鬆症剤である。
請求項４に記載の発明は、葛花処理物を有効成分とすることを特徴とするリウマチ治療剤である。
請求項５に記載の発明は、葛花処理物を有効成分とすることを特徴とする抗鬱・抗ストレス剤である。
請求項６に記載の発明は、葛花処理物を有効成分とすることを特徴とするアディポネクチン産生促進剤である。
請求項７に記載の発明は、葛花処理物を有効成分とすることを特徴とするコレステロール低下剤である。 The invention according to claim 1 is an antiallergic agent characterized by comprising a processed kuzuka product as an active ingredient.
The invention according to claim 2 is a preventive or ameliorating agent for hyperuricemia, characterized by using a processed kuzuka product as an active ingredient.
The invention according to claim 3 is an anti-osteoporosis agent characterized by comprising a processed kuzuka product as an active ingredient.
The invention according to claim 4 is a therapeutic agent for rheumatism characterized in that the processed kuzuka product is used as an active ingredient.
The invention according to claim 5 is an anti-depressant / anti-stress agent characterized by comprising a processed kuzu flower product as an active ingredient.
The invention according to claim 6 is an adiponectin production promoter characterized by comprising a processed kuzuka product as an active ingredient.
The invention according to claim 7 is a cholesterol-lowering agent characterized by comprising a processed kuzuka product as an active ingredient.

本発明によれば、下記で説明する本発明で適用される種々の疾病に、とりわけ顕著な効果でもって有効である各種治療剤が提供される。   According to the present invention, there are provided various therapeutic agents that are particularly effective for various diseases applied in the present invention described below with remarkable effects.

以下、本発明をさらに詳しく説明する。   Hereinafter, the present invention will be described in more detail.

本発明で用いられる葛花処理物とは、マメ科植物に属する葛植物の花部の処理物であれば、特に制限されない。葛花には、蕾から全開した花までの段階で採集した花が含まれる。蕾を用いることが好ましい。本明細書において、「葛花処理物」は、葛花に乾燥処理、粉砕処理、および抽出処理のうちの少なくとも１種の処理を行って得られるものをいう。葛花処理物には、葛花の乾燥物、葛花破砕物、葛花の乾燥粉砕物（葛花粉末）、および葛花抽出物が含まれる。葛花抽出物には、葛花、葛花破砕物、葛花乾燥物または葛花粉末から抽出処理を行って得られる抽出物が含まれる。葛花抽出物の形状は問わず、液状、ペースト状、粉状であってもよい。   The processed kuzu flower used in the present invention is not particularly limited as long as it is a processed product of the flower part of the kuzu plant belonging to the leguminous plant. Kuzuka includes flowers collected from the stage to the fully opened flower. It is preferable to use soot. In the present specification, the “kuzuka processed product” refers to a product obtained by performing at least one of a drying process, a pulverizing process, and an extracting process on kuzuka. The processed kuzuka product includes a dried katsuka product, a kuzu flower crushed product, a dried katsuhana product (kuzuka powder), and a kuzu flower extract. The kuzu flower extract includes an extract obtained by performing an extraction process from kuzu flower, kuzu flower crushed material, kuzu flower dried product or kuzu flower powder. The shape of the kuzu flower extract is not limited and may be liquid, paste, or powder.

本発明で用いられる葛花処理物は、イソフラボン類などのフラボノイドの他に、サポニン、トリプトファン配糖体などを含有し、好ましくは、イソフラボン類およびサポニンを含有し得る。これらの成分の含有量は特に制限されない。好ましくは、葛花処理物中のイソフラボン類が乾燥質量換算で３質量％以上、より好ましくは５質量％〜９０質量％である。サポニンは、好ましくは１質量％以上、より好ましくは２質量％〜５０質量％である。このようなイソフラボン類およびサポニンを高含有する葛花処理物として、葛花抽出物が好適に用いられる。本発明における葛花処理物における各効果は、葛花中に含まれるイソフラボン類以外の成分も関与していることが考えられ、例えば、同量のイソフラボン類またはサポニンを含有する大豆抽出物などに比べて優れている。   The processed Kuzuka product used in the present invention contains saponins, tryptophan glycosides and the like in addition to flavonoids such as isoflavones, and preferably can contain isoflavones and saponins. The content of these components is not particularly limited. Preferably, the isoflavones in the processed kuzuhana product are 3% by mass or more, more preferably 5% by mass to 90% by mass in terms of dry mass. The saponin is preferably 1% by mass or more, more preferably 2% by mass to 50% by mass. As such a kuzu flower processed product containing a high content of isoflavones and saponins, a kuzu flower extract is preferably used. Each effect in the processed kuzuhana product of the present invention is considered to involve components other than isoflavones contained in kuzuka, for example, a soybean extract containing the same amount of isoflavones or saponin. It is superior compared.

以下、上記葛花処理物である、葛花の乾燥物、葛花粉末および葛花抽出物の調製方法について説明する。   Hereinafter, the preparation method of the dried katsuka, kuzuka powder and kuzuka extract, which are the kuzuka processed products, will be described.

葛花の乾燥物は、葛花、好ましくは蕾の段階の葛花を、日干し、熱風乾燥などの方法により乾燥したものである。好ましくは、水分含有量が１０質量％またはそれ以下となるまで行われ得る。   The dried product of Kuzuka is a dried Kuzuka, preferably Kuzuka in the cocoon stage, dried by a method such as sun drying or hot air drying. Preferably, it can be carried out until the water content is 10% by mass or less.

葛花粉末は、上記葛花の乾燥物を粉砕して得られる。粉末化は、当業者が通常用いる方法、例えば、ボールミルやハンマーミル、ローラーミルなどを用いて行われる。   The kuzu flower powder is obtained by pulverizing the dried kuzu flower. The powderization is performed by a method usually used by those skilled in the art, for example, a ball mill, a hammer mill, a roller mill, or the like.

葛花粉末はまた、採取した葛花を、マスコロイダー、スライサー、コミトロールなどを用いて破砕して葛花破砕物を得、この葛花破砕物を乾燥することによっても得られる。   The kuzu flower powder can also be obtained by crushing the collected kuzu flowers using a mascolloider, slicer, comitolol, etc. to obtain a kuzu flower crushed material, and drying the kuzu flower crushed material.

葛花抽出物は、例えば、葛花採集物、葛花破砕物、葛花の乾燥物あるいは葛花粉末（以下、単に抽出原料ということがある）に溶媒を添加して、必要に応じて加温して抽出を行い、遠心分離または濾過により抽出液を回収することによって得られる。   For example, the Kuzuka extract can be added as necessary by adding a solvent to the Kuzuka collection, Kuzuka crushed material, dried Katsuka or Kuzuka powder (hereinafter sometimes referred to simply as “raw material”). Extraction is performed by heating, and the extract is collected by centrifugation or filtration.

上記抽出に用いる溶媒としては、水、有機溶媒、含水有機溶媒などが挙げられ、最も好ましくはエタノールである。   Examples of the solvent used for the extraction include water, an organic solvent, a water-containing organic solvent, and most preferably ethanol.

抽出温度は、使用する溶媒の沸点以下の温度であれば特に制限はない。抽出温度は、用いる溶媒によっても異なるが、有効成分の分解などを考慮して、一般に、４℃〜１３０℃である。好ましくは５０℃〜１３０℃、より好ましくは７０℃〜１００℃である。加温して抽出する場合は、例えば、加熱還流などの加温抽出法、超臨界抽出法などが採用され得る。加温する場合、加圧して行ってもよい。   The extraction temperature is not particularly limited as long as it is a temperature below the boiling point of the solvent used. The extraction temperature varies depending on the solvent to be used, but is generally 4 ° C to 130 ° C in consideration of decomposition of active ingredients. Preferably they are 50 to 130 degreeC, More preferably, it is 70 to 100 degreeC. When extracting by heating, for example, a heating extraction method such as heating under reflux, a supercritical extraction method, or the like can be employed. When heating, pressurization may be performed.

抽出時間は、抽出原料から十分に可溶性成分が抽出される時間であればよく、抽出温度などに応じて適宜設定すればよい。好ましくは３０分〜４８時間である。例えば、抽出温度が５０℃未満の場合は、６時間〜４８時間抽出され得、５０℃以上の場合は、３０分〜２４時間抽出され得る。   The extraction time may be a time for sufficiently extracting soluble components from the extraction raw material, and may be set as appropriate according to the extraction temperature and the like. Preferably, it is 30 minutes to 48 hours. For example, when the extraction temperature is less than 50 ° C., it can be extracted for 6 hours to 48 hours, and when it is 50 ° C. or more, it can be extracted for 30 minutes to 24 hours.

また、得られた抽出液は、必要に応じて、減圧濃縮や凍結乾燥等の当業者が用いる方法により濃縮され、液状、ペースト状、あるいは粉末とすることにより、葛花抽出物が得られる。なお、粉末状の葛花抽出物を抽出エキス末ということがある。   Moreover, the obtained extract is concentrated by a method used by those skilled in the art, such as vacuum concentration or freeze-drying, as necessary, and a kuzuhana extract is obtained by forming a liquid, a paste, or a powder. In addition, a powdery kuzu flower extract may be called an extract powder.

あるいは、この抽出物を合成吸着剤（ダイアイオンＨＰ２０やセファビースＳＰ８２５、アンバーライトＸＡＤ４、ＭＣＩｇｅｌＣＨＰ２０Ｐ等）やデキストラン樹脂（セファデックスＬＨ−２０など）を用いてさらに精製し、フラボノイドやサポニンなどの濃度が高い葛花抽出物を得ることができる。   Alternatively, this extract is further purified using a synthetic adsorbent (Diaion HP20, Sephabies SP825, Amberlite XAD4, MCIgelCHP20P, etc.) or dextran resin (Sephadex LH-20, etc.), and the concentration of flavonoids, saponins, etc. is high. Kuzuhana extract can be obtained.

葛花処理物の摂取量は、成人１日１〜数回、１回量約１〜５００ｍｇ、好ましくは３〜３００ｍｇ程度投与するのがよい。   As for the intake of the processed kuzuhana product, it is recommended to administer about 1 to 500 mg, preferably about 3 to 300 mg, once a day for an adult.

また本発明では、プロアントシアニジンを併用するのも好ましい形態である。プロアントシアニジンとは、フラバン−３−オールおよび／またはフラバン−３，４−ジオールを構成単位とする重合度が２以上、好ましくは２〜１０量体、さらに好ましくは２〜４量体の縮重合体からなる化合物群、誘導体およびそれらの立体異性体を指称する。プロアントシアニジンのうち、フラバン−３−オールおよび／またはフラバン−３，４−ジオールを構成単位とする重合度が２〜４の縮重合体をＯＰＣ（オリゴメリックプロアントシアニジン；ｏｌｉｇｏｍｅｒｉｃ ｐｒｏａｎｔｈｏｃｙａｎｉｄｉｎ）という。ＯＰＣは強力な抗酸化物質であり、植物の葉、樹皮、果物の皮もしくは種子の部分に豊富に含有されている。具体的には、ブドウ、松の樹皮、ピーナッツの薄皮、イチョウ、ニセアカシアの果実、コケモモ、ブルーベリー、イチゴ、アボガド、大麦、小麦、大豆、黒大豆、カカオなどに含まれている。また、西アフリカのコーラナッツ、ペルーのラタニアの根にもＯＰＣが含まれていることが知られている。ＯＰＣはヒトの体内では生成することができない物質である。   In the present invention, it is also a preferred form to use proanthocyanidins in combination. Proanthocyanidins have a degree of polymerization of flavan-3-ol and / or flavan-3,4-diol as a structural unit of 2 or more, preferably 2 to 10-mer, more preferably 2 to 4-mer. A compound group consisting of a coalescence, a derivative and a stereoisomer thereof are designated. Among the proanthocyanidins, a polycondensation polymer having a polymerization degree of 2 to 4 having flavan-3-ol and / or flavan-3,4-diol as a structural unit is referred to as OPC (oligomeric proanthocyanidin). OPC is a powerful antioxidant and is abundant in plant leaves, bark, fruit peel or seed parts. Specifically, it is contained in grapes, pine bark, peanut skin, ginkgo, false acacia fruit, cowberry, blueberry, strawberry, avocado, barley, wheat, soybean, black soybean, cacao and the like. It is also known that OPC is contained in the roots of cola nuts in West Africa and Latania in Peru. OPC is a substance that cannot be produced in the human body.

本発明の有効成分として用いられるプロアントシアニジンについては、原料の由来あるいは原料の利用部分、製造法、精製法は何ら制限されないが、上記の樹皮、果実もしくは種子の粉砕物、またはこれらの抽出物のような食品原料を使用することができる。特に松樹皮、さらに好ましくはＯＰＣが豊富に含まれているフランス海岸松樹皮の抽出物を用いることが好ましい。フランス海岸松樹皮はプロアントシアニジンの原料として好ましく用いられる。   With regard to proanthocyanidins used as the active ingredient of the present invention, the origin of the raw material or the utilization part of the raw material, the production method, and the purification method are not limited at all, but the bark, fruit or seed pulverized product, or the extract of these extracts Such food ingredients can be used. In particular, it is preferable to use an extract of pine bark, more preferably French coast pine bark rich in OPC. French coastal pine bark is preferably used as a raw material for proanthocyanidins.

プロアントシアニジンは、公知の方法［例えば、特許文献１に記載の方法あるいは松の樹皮からの抽出法；アール・ダブル・ヘミングウェイ（Ｒ．Ｗ．Ｈｅｍｉｎｇｗａｙ）ら、フィトケミストリー（Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ），１９８３年，第２２巻、ｐ．２７５−２８１］あるいはそれに準じた方法を採用することによって上記各種植物体から容易に得ることができる。   Proanthocyanidins can be obtained by a known method [for example, the method described in Patent Document 1 or an extraction method from pine bark; RW Hemingway et al., Physochemistry, 1983, Volume 22, p. 275-281] or a method based thereon can be easily obtained from the above-mentioned various plants.

以下、ＯＰＣを豊富に含む松樹皮の抽出物を例に挙げて、プロアントシアニジンの調製方法を説明する。   Hereinafter, a method for preparing proanthocyanidins will be described by taking an extract of pine bark rich in OPC as an example.

松樹皮抽出物は、松樹皮を水または有機溶媒で抽出して得られる。水を用いる場合には、温水または熱水が用いられる。抽出に用いる有機溶媒としては、食品あるいは薬剤製造に許容される有機溶媒が用いられ、例えば、メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノール、ブタン、アセトン、ヘキサン、シクロヘキサン、プロピレングリコール、含水エタノール、含水プロピレングリコール、エチルメチルケトン、グリセリン、酢酸メチル、酢酸エチル、ジエチルエーテル、ジクロロメタン、食用油脂、１，１，１，２−テトラフルオロエタン、１，２−トリクロロエテンなどが挙げられる。これらの水および有機溶媒は単独で用いてもよいし、組み合わせて用いてもよい。特に、熱水、含水エタノール、含水プロピレングリコールが好適に用いられる。   The pine bark extract is obtained by extracting pine bark with water or an organic solvent. When water is used, warm water or hot water is used. As the organic solvent used for extraction, an organic solvent that is acceptable for food or pharmaceutical production is used, for example, methanol, ethanol, propanol, butanol, butane, acetone, hexane, cyclohexane, propylene glycol, hydrous ethanol, hydrous propylene glycol, Examples include ethyl methyl ketone, glycerin, methyl acetate, ethyl acetate, diethyl ether, dichloromethane, edible fats and oils, 1,1,1,2-tetrafluoroethane, 1,2-trichloroethene and the like. These water and organic solvent may be used alone or in combination. In particular, hot water, hydrous ethanol, and hydrous propylene glycol are preferably used.

松樹皮からプロアントシアニジンを抽出する方法は、特に限定されないが、例えば、加温抽出法、超臨界流体抽出法などが用いられる。   A method for extracting proanthocyanidins from pine bark is not particularly limited, and for example, a warm extraction method, a supercritical fluid extraction method, or the like is used.

超臨界流体抽出法は、物質の気液の臨界点（臨界温度、臨界圧力）を超えた状態の流体である超臨界流体を用いて抽出を行う方法である。超臨界流体としては、二酸化炭素、エチレン、プロパン、亜酸化窒素（笑気ガス）などが用いられ、とりわけ二酸化炭素が好適に用いられる。   The supercritical fluid extraction method is a method of performing extraction using a supercritical fluid that is a fluid that exceeds the critical point (critical temperature, critical pressure) of a gas-liquid substance. As the supercritical fluid, carbon dioxide, ethylene, propane, nitrous oxide (laughing gas) or the like is used, and carbon dioxide is particularly preferably used.

超臨界流体抽出法は、目的成分を超臨界流体によって抽出する抽出工程および目的成分と超臨界流体とを分離する分離工程からなる。分離工程は、圧力変化による抽出分離、温度変化による抽出分離、または吸着剤、吸収剤を用いた抽出分離のいずれを行ってもよい。   The supercritical fluid extraction method includes an extraction step of extracting a target component with a supercritical fluid and a separation step of separating the target component and the supercritical fluid. In the separation step, any one of extraction separation by pressure change, extraction separation by temperature change, or extraction separation using an adsorbent and an absorbent may be performed.

また、エントレーナー添加法による超臨界流体抽出を行ってもよい。この方法は、超臨界流体に、例えば、エタノール、プロパノール、ｎ−ヘキサン、アセトン、トルエンなどを２〜２０％程度添加し、得られた抽出流体で超臨界流体抽出を行うことによって、ＯＰＣなどの被抽出物の抽出流体に対する溶解度を飛躍的に上昇させる、あるいは分離の選択性を増強させる方法であり、効率的に松樹皮抽出物を得る方法である。   Moreover, you may perform supercritical fluid extraction by the entrainer addition method. In this method, for example, about 2 to 20% of ethanol, propanol, n-hexane, acetone, toluene, or the like is added to the supercritical fluid, and supercritical fluid extraction is performed with the obtained extraction fluid, so that OPC or the like is performed. This is a method for dramatically increasing the solubility of the extract in the extraction fluid, or for enhancing the separation selectivity, and for efficiently obtaining a pine bark extract.

松樹皮からの抽出は、上記の方法以外に、液体二酸化炭素回分法、液体二酸化炭素還流法、超臨界二酸化炭素還流法などにより行ってもよい。   Extraction from pine bark may be performed by a liquid carbon dioxide batch method, a liquid carbon dioxide reflux method, a supercritical carbon dioxide reflux method, or the like, in addition to the above method.

以上のようにして得られたプロアントシアニジンは、液状もしくは半固形状の形態で得られるが、このものから抽出溶媒を減圧留去、スプレードライ、凍結乾燥等の公知の方法によって除去すれば、そのままプロアントシアニジン含有濃縮物や乾燥物として使用することができる。さらに精製するには、カラムクロマトグラフィー、向流分配法等の公知の精製手段を採用して、目的を達成することができる。   The proanthocyanidins obtained as described above can be obtained in a liquid or semi-solid form. If the extraction solvent is removed from this product by a known method such as distillation under reduced pressure, spray drying, freeze drying, or the like, it remains as it is. It can be used as a proanthocyanidin-containing concentrate or dried product. For further purification, a known purification means such as column chromatography or countercurrent distribution method can be employed to achieve the object.

プロアントシアニジンは、水によく溶解し、生体への吸収性が高い。酸性、中性、アルカリ性のいずれの条件においても安定性が高く、その機能を維持した状態で飲食品に配合することが容易である。また、摂取開始後短期間で効果が期待でき、少量の摂取でも十分な効果を得られるため、飲食品としての摂取許容量および摂取形態に制限のある幼児や老人等への食事素材として、利用価値が高い。   Proanthocyanidins dissolve well in water and have high absorbability to living bodies. It is highly stable in any of acidic, neutral and alkaline conditions, and can be easily blended with food and drink while maintaining its function. In addition, the effect can be expected in a short period after the start of ingestion, and a sufficient effect can be obtained even with a small amount of ingestion, so it can be used as a food material for infants and the elderly who have limited intake allowance and intake form as food and drink High value.

プロアントシアニジンの投与量は、その種類、その剤型、また患者の年令、体重、適応症状などによって異なるが、例えば、成人１日１〜数回、１回量約１〜５００ｍｇ、好ましくは３〜３００ｍｇ程度投与するのがよい。   The dose of proanthocyanidins varies depending on the type, dosage form, age, weight, indication, etc. of the patient, but for example, adults once to several times a day, about 1 to 500 mg, preferably 3 times a day. It is better to administer ~ 300mg.

本発明の治療剤は、錠剤、ピル、カプセル、顆粒、粉末、散剤、液剤等の固形または溶液の形態（以下、製剤ともいう）に公知の方法により適宜調製することができる。即ち、本発明に有用な固形製剤または液状製剤は、葛花処理物、必要に応じてプロアントシアニジンと添加剤とを混合し、従来充分に確立された公知の製剤製法を用いることにより製造される。添加剤としては、例えば賦形剤、ｐＨ調整剤、清涼化剤、懸濁化剤、希釈剤、消泡剤、粘稠剤、溶解補助剤、崩壊剤、結合剤、滑沢剤、抗酸化剤、コーティング剤、着色剤、矯味矯臭剤、界面活性剤、可塑剤または香料などが挙げられる。   The therapeutic agent of the present invention can be appropriately prepared by a known method in the form of a solid or solution (hereinafter, also referred to as a preparation) such as a tablet, pill, capsule, granule, powder, powder, or liquid. That is, the solid preparation or liquid preparation useful in the present invention is produced by mixing a processed product of Kuzuka, if necessary, a proanthocyanidin and an additive, and using a well-known conventional preparation method. . Examples of additives include excipients, pH adjusting agents, cooling agents, suspending agents, diluents, antifoaming agents, thickeners, solubilizers, disintegrating agents, binders, lubricants, antioxidants. Agents, coating agents, coloring agents, flavoring agents, surfactants, plasticizers or fragrances.

上記賦形剤としては、例えば、Ｄ−ソルビトール、Ｄ−マンニトール或いはキシリトールなどの糖アルコール、ブドウ糖、白糖、乳糖或いは果糖などの糖類、結晶セルロース、カルメロースナトリウム、リン酸水素カルシウム、コムギデンプン、コメデンプン、トウモロコシデンプン、バレイショデンプン、デキストリン、βーシクロデキストリン、軽質無水ケイ酸、酸化チタン、またはメタケイ酸アルミン酸マグネシウムなどが挙げられる。   Examples of the excipient include sugar alcohols such as D-sorbitol, D-mannitol or xylitol, sugars such as glucose, sucrose, lactose or fructose, crystalline cellulose, carmellose sodium, calcium hydrogen phosphate, wheat starch, rice Examples thereof include starch, corn starch, potato starch, dextrin, β-cyclodextrin, light anhydrous silicic acid, titanium oxide, and magnesium aluminate metasilicate.

上記ｐＨ調整剤としては、例えばクエン酸、リンゴ酸、リン酸水素ナトリウムまたはリン酸二カリウムなどが挙げられる。
上記清涼化剤としては、例えばｌ−メントールまたはハッカ水などが挙げられる。
上記懸濁化剤としては、例えば、カオリン、カルメロースナトリウム、キサンタンガム、メチルセルロースまたはトラガントなどが挙げられる。
上記希釈剤としては、例えば精製水、エタノール、植物油または乳化剤等が挙げられる。
上記消泡剤としては、例えばジメチルポリシロキサンまたはシリコン消泡剤などが挙げられる。 Examples of the pH adjuster include citric acid, malic acid, sodium hydrogen phosphate, and dipotassium phosphate.
Examples of the refreshing agent include l-menthol or mint water.
Examples of the suspending agent include kaolin, carmellose sodium, xanthan gum, methylcellulose, and tragacanth.
Examples of the diluent include purified water, ethanol, vegetable oil, and emulsifier.
Examples of the antifoaming agent include dimethylpolysiloxane or silicon antifoaming agent.

上記粘稠剤としては、例えばキサンタンガム、トラガント、メチルセルロースまたはデキストリンなどが挙げられる。
上記溶解補助剤としては、例えばエタノール、ショ糖脂肪酸エステルまたはマクロゴールなどが挙げられる。
上記崩壊剤としては、例えば低置換度ヒドロキシプロピルセルロース、カルボキシメチルセルロースカルシウム、クロスカルメロースナトリウム、ヒドロキシプロピルスターチまたは部分アルファー化デンプンなどが挙げられる。 Examples of the thickener include xanthan gum, tragacanth, methylcellulose, and dextrin.
Examples of the solubilizer include ethanol, sucrose fatty acid ester, and macrogol.
Examples of the disintegrant include low-substituted hydroxypropylcellulose, carboxymethylcellulose calcium, croscarmellose sodium, hydroxypropyl starch, or partially pregelatinized starch.

上記結合剤としては、例えばメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポリビニールピロリドン、ゼラチン、アラビアゴム、エチルセルロース、ポリビニルアルコール、プルラン、アルファー化デンプン、カンテン、トラガント、アルギン酸ナトリウムまたはアルギン酸プロピレングリコールエステルなどが挙げられる。   Examples of the binder include methylcellulose, hydroxypropylcellulose, hydroxypropylmethylcellulose, polyvinylpyrrolidone, gelatin, gum arabic, ethylcellulose, polyvinyl alcohol, pullulan, pregelatinized starch, agar, tragacanth, sodium alginate, or propylene glycol alginate. Can be mentioned.

上記滑沢剤としては、例えばステアリン酸、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸ポリオキシル、セタノール、タルク、硬化油、ショ糖脂肪酸エステル、ジメチルポリシロキサン、ミツロウまたはサラシミツロウなどが挙げられる。
上記抗酸化剤としては、例えばアスコルビン酸、ジブチルヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）、没食子酸プロピル、ブチルヒドロキシアニソール（ＢＨＡ）、トコフェロール、アスコルビン酸またはクエン酸などが挙げられる。 Examples of the lubricant include stearic acid, magnesium stearate, calcium stearate, polyoxyl stearate, cetanol, talc, hydrogenated oil, sucrose fatty acid ester, dimethylpolysiloxane, beeswax and white beeswax.
Examples of the antioxidant include ascorbic acid, dibutylhydroxytoluene (BHT), propyl gallate, butylhydroxyanisole (BHA), tocopherol, ascorbic acid, and citric acid.

上記コーティング剤としては、例えば、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、メチルセルロース、エチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート、ヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテートサクシネート、カルボキシメチルエチルセルロース、酢酸フタル酸セルロース、ポリビニルアセタールジエチルアミノアセテート、アミノアルキルメタアクリレートコポリマー、ヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテートサクシネート、メタアクリル酸コポリマー、ポリビニルアセタートジエチルアミノアセテートまたはセラックなどが挙げられる。
上記着色剤としては、例えばウコン抽出液、リボフラビン、酸化チタンまたはカロチン液などが挙げられる。 Examples of the coating agent include hydroxypropylmethylcellulose, hydroxypropylcellulose, methylcellulose, ethylcellulose, hydroxypropylmethylcellulose phthalate, hydroxypropylmethylcellulose acetate succinate, carboxymethylethylcellulose, cellulose acetate phthalate, polyvinyl acetal diethylaminoacetate, aminoalkyl methacrylate. Copolymer, hydroxypropyl methylcellulose acetate succinate, methacrylic acid copolymer, polyvinyl acetate diethylaminoacetate or shellac.
Examples of the colorant include turmeric extract, riboflavin, titanium oxide, or carotene solution.

上記矯味矯臭剤としては、例えばクエン酸、アジピン酸、アスコルビン酸、果糖、Ｄ−ソルビトール、ブドウ糖、サッカリンナトリウム、単シロップ、白糖、ハチミツ、アマチャ、カンゾウ、クエン酸、アジピン酸、アスコルビン酸、オレンジ油、トウヒチンキ、ウイキョウ油、ハッカまたはメントールなどが挙げられる。
上記界面活性剤としては、例えば、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、モノステアリン酸グリセリン、モノステアリン酸ソルビタン、モノラウリン酸ソルビタン、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレン、ポリソルベート類、ラウリル硫酸ナトリウム、マクロゴール類またはショ糖脂肪酸エステルなどが挙げられる。
上記可塑剤としては、例えばクエン酸トリエチル、ポリエチレングリコール、トリアセチンまたはセタノールなどが挙げられる。
上記香料としては、例えば、動物性香料或いは植物性香料等の天然香料、または単離香料或いは純合成香料等の合成香料などが挙げられる。 Examples of the flavoring agents include citric acid, adipic acid, ascorbic acid, fructose, D-sorbitol, glucose, sodium saccharin, simple syrup, sucrose, honey, amacha, licorice, citric acid, adipic acid, ascorbic acid, orange oil, Spruce tincture, fennel oil, mint or menthol.
Examples of the surfactant include polyoxyethylene hydrogenated castor oil, glyceryl monostearate, sorbitan monostearate, sorbitan monolaurate, polyoxyethylene polyoxypropylene, polysorbates, sodium lauryl sulfate, macrogol or sucrose. Examples include fatty acid esters.
Examples of the plasticizer include triethyl citrate, polyethylene glycol, triacetin, and cetanol.
As said fragrance | flavor, synthetic fragrance | flavors, such as natural fragrance | flavors, such as an animal fragrance | flavor or a vegetable fragrance | flavor, or an isolated fragrance | flavor etc. are mentioned, for example.

本発明の葛花処理物は、飲食品材料に配合してもよい。このような材料としては、例えば、パン、チューインガム、クッキー、チョコレート、シリアル等の固形食品、ジャム、アイスクリーム、ヨーグルト、ゼリー等のジャム状、クリーム状またはゲル状食品、ジュース、コーヒー、ココア、緑茶、ウーロン茶、紅茶等の飲料等が挙げられる。また、調味料、食品添加物等に配合することもできる。   You may mix | blend the kuzu flower processed material of this invention with food-drinks material. Examples of such materials include solid foods such as bread, chewing gum, cookies, chocolate and cereal, jams such as jam, ice cream, yogurt and jelly, cream or gel foods, juice, coffee, cocoa and green tea. And beverages such as oolong tea and black tea. Moreover, it can also mix | blend with a seasoning, a food additive, etc.

さらに本発明においては、例えば、ローヤルゼリー、プロポリス、ビタミン類（Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｋ、葉酸、パントテン酸、ビオチン、これらの誘導体等）、ミネラル（鉄、マグネシウム、カルシウム、亜鉛等）、セレン、レシチン、カロテノイド（リコピン、アスタキサンチン、ゼアキサンチン、ルテイン等）、サポニン（ギムネマ酸、大豆サポニン、人参サポニン等）、脂肪酸、タンパク質（コラーゲン、エラスチン等）、オリゴ糖（イソマルトオリゴ糖、環状オリゴ糖等）、リン脂質及びその誘導体（フォスファチジルコリン、スフィンゴミエリン、セラミド等）、含硫化合物（アリイン、セパエン、タウリン、グルタチオン、メチルスルホニルメタン等）、糖アルコール、リグナン類（セサミン等）、これらを含有する動植物抽出物、根菜類（ウコン、ショウガ等）、麦若葉末等のイネ科植物の緑葉、ケール等のアブラナ科植物の緑葉、サボテンの乾燥葉、ターミナリアベリリカ抽出物、サツマイモの茎葉をまるごと粉砕した素材、大豆から抽出したセラミド様成分含有物、チャンカピエドラのようなハーブ類、などを使用することもできる。中でも、麦若葉末等のイネ科植物の緑葉、ケール等のアブラナ科植物の緑葉、サボテンの乾燥葉、ターミナリアベリリカ抽出物、サツマイモの茎葉をまるごと粉砕した素材、大豆から抽出したセラミド様成分含有物、チャンカピエドラのようなハーブ類を併用した場合は、上記の葛花処理物とプロアントシアニジンとを併用した形態と同等の治療効果を奏する。   Furthermore, in the present invention, for example, royal jelly, propolis, vitamins (A, C, D, E, K, folic acid, pantothenic acid, biotin, derivatives thereof, etc.), minerals (iron, magnesium, calcium, zinc, etc.), Selenium, lecithin, carotenoids (lycopene, astaxanthin, zeaxanthin, lutein, etc.), saponins (gymnemic acid, soybean saponin, ginseng saponins, etc.), fatty acids, proteins (collagen, elastin, etc.), oligosaccharides (isomalto-oligosaccharides, cyclic oligosaccharides, etc.) ), Phospholipids and derivatives thereof (phosphatidylcholine, sphingomyelin, ceramide, etc.), sulfur-containing compounds (eg, alliin, sepaene, taurine, glutathione, methylsulfonylmethane), sugar alcohols, lignans (sesamin, etc.), Contains animal and plant extracts Root vegetables (turmeric, ginger, etc.), green leaves of gramineous plants such as wheat leaves, green leaves of cruciferous plants such as kale, dried cactus leaves, terminaria berylica extract, whole potato stems and leaves, soybean It is also possible to use a ceramide-like component-extracted material extracted from the above, herbs such as Chancapiedra, and the like. Among them, green leaves of gramineous plants such as young wheat leaves, green leaves of cruciferous plants such as kale, dried leaves of cactus, terminaria berylica extract, whole potato stems and leaves, ceramide-like components extracted from soybeans In the case of using herbs such as food and Chanca Piedra, the therapeutic effect equivalent to that of the combined use of the above-described processed kuzuka product and proanthocyanidins is obtained.

以下、本発明を実施例によりさらに説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。本発明で使用される葛花処理物は、抗アレルギー剤、高尿酸血症の予防または改善剤、抗骨粗鬆症剤、リウマチ治療剤、抗鬱・抗ストレス剤、アディポネクチン産生促進剤、コレステロール低下剤としてきわめて有用である。以下、上記各種薬効について実施例でもって説明する。   EXAMPLES Hereinafter, although an Example demonstrates this invention further, this invention is not limited to these. The processed Kuzuka used in the present invention is an antiallergic agent, a prophylactic or ameliorating agent for hyperuricemia, an anti-osteoporosis agent, a rheumatic agent, an antidepressant / antistress agent, an adiponectin production promoter, and a cholesterol lowering agent. Very useful. Hereinafter, the various medicinal effects will be described with examples.

実施例１（抗アレルギー剤としての有用性）
葛花破砕物の乾燥品に対し、２０倍量の熱水（８０℃）を加え、２時間攪拌し、熱水抽出物１を得た。該熱水抽出物１を減圧濃縮および凍結乾燥し、粉末を得た。 Example 1 (Usefulness as an antiallergic agent)
20 times the amount of hot water (80 ° C.) was added to the dried product of the crushed katsuhana and stirred for 2 hours to obtain a hot water extract 1. The hot water extract 1 was concentrated under reduced pressure and lyophilized to obtain a powder.

ＲＡＳＴ法による食物アレルゲン陽性の慢性じんま疹の患者２０名（２０〜２２歳の男性１０名及び女性１０名）に、１回の食事と共に前記粉末を３００ｍｇ、１カ月投与した。結果を以下の表１に示す。   Twenty patients (10 males and 10 females aged 20-22 years) with food allergen positive chronic urticaria by the RAST method were administered 300 mg of the powder together with one meal for 1 month. The results are shown in Table 1 below.

実施例２
ＲＡＳＴ法によるアトピー性皮膚炎患者２０名（２０〜２２歳の男性１０名及び女性１０名）に、１回の食事と共に実施例１の粉末を３００ｍｇ、１カ月投与した。結果を以下の表２に示す。 Example 2
Twenty patients with atopic dermatitis (10 males and 10 females 20 to 22 years old) by the RAST method were administered 300 mg of the powder of Example 1 together with one meal for one month. The results are shown in Table 2 below.

実施例３
松樹皮９００ｇに精製水７．２Ｌを加え、ブレンダー（Ｗａｒｉｎｇ Ｂｌｅｎｄｅｒ）で破砕した後、１００℃で１０分間加熱抽出した。次いで、直ちに濾過して濾液を得た。濾過後の残渣を精製水１．８Ｌで洗浄し、濾液と洗浄液とを合わせて９Ｌの松樹皮の熱水粗抽出液を得た。この抽出液１ｍＬを凍結乾燥したところ、乾燥重量は８ｍｇであった。 Example 3
To 900 g of pine bark, 7.2 L of purified water was added, crushed with a blender (Waring Blender), and then extracted by heating at 100 ° C. for 10 minutes. Then, it filtered immediately and obtained the filtrate. The residue after filtration was washed with 1.8 L of purified water, and the filtrate and the washing solution were combined to obtain 9 L of a crude hot water extract of pine bark. When 1 mL of this extract was freeze-dried, the dry weight was 8 mg.

上記粗抽出液１Ｌ（粉末乾燥重量８ｇ）を２５℃まで放冷し、塩化ナトリウムを１００％飽和濃度となるまで添加してよく攪拌した後、４℃で２４時間静置した。静置後、この溶液を濾過し、９１０ｍＬの濾液を得た。この濾液を以下に示す工程によりさらに精製した。まず、水で膨潤させた芳香族系合成樹脂（ダイアイオンＨＰ−２０：三菱化学株式会社製）を１００ｍＬ充填した３０×３００ｍｍのカラムに上記濾液を通液し、さらに１Ｌの精製水で洗浄した。次いで、カラムから１５％（Ｖ／Ｖ）のエタノール−水混合溶媒で溶出し、２００ｍＬの松樹皮の熱水抽出精製物を得た（以下、松樹皮の熱水抽出物２とする）。得られた精製物を凍結乾燥して粉末化した。本操作を繰り返して、９Ｌの松樹皮の熱水抽出液から松樹皮の熱水抽出物２の乾燥粉末７．５１ｇを得た。   1 L of the above crude extract (powder dry weight 8 g) was allowed to cool to 25 ° C., sodium chloride was added to 100% saturation concentration and stirred well, and then allowed to stand at 4 ° C. for 24 hours. After standing, this solution was filtered to obtain 910 mL of filtrate. This filtrate was further purified by the steps shown below. First, the filtrate was passed through a 30 × 300 mm column packed with 100 mL of an aromatic synthetic resin swollen with water (Diaion HP-20: manufactured by Mitsubishi Chemical Corporation), and further washed with 1 L of purified water. . Next, the column was eluted with a 15% (V / V) ethanol-water mixed solvent to obtain 200 mL of pine bark hot water extract and purified product (hereinafter referred to as pine bark hot water extract 2). The obtained purified product was freeze-dried and powdered. This operation was repeated to obtain 7.51 g of a dry powder of pine bark hot water extract 2 from 9 L of pine bark hot water extract.

上記乾燥粉末中のプロアントシアニジンおよびＯＰＣの含有量を、特開２００５−２３０３２号公報に記載の方法により測定した結果、プロアントシアニジンは、上記乾燥粉末中に４０重量％含有されていた。また、ＯＰＣは、２〜４量体として、上記乾燥粉末中に２０重量％含有されていた。   As a result of measuring the content of proanthocyanidins and OPC in the dry powder by the method described in JP-A-2005-23032, 40% by weight of proanthocyanidins was contained in the dry powder. Further, OPC was contained as a 2 to 4 mer in 20% by weight in the dry powder.

実施例２において、実施例１の粉末を３００ｍｇ、および、実施例３の乾燥粉末を３００ｍｇ、１カ月投与した。それ以外は実施例２と同様である。その結果を以下の表３に示す。   In Example 2, 300 mg of the powder of Example 1 and 300 mg of the dry powder of Example 3 were administered for 1 month. The rest is the same as in the second embodiment. The results are shown in Table 3 below.

実施例４（高尿酸血症の改善効果）
実験方法
供試動物はWistar系ラット雌（８週令、体重約180g）を１群６匹で用いた。
試験飼料に0.75％の濃度でアデニンを加えてラットに給与し、腎臓からの尿中への尿酸***阻害を起こさせて高尿酸血症のモデル動物とした。
対照群は、上記の0.75％アデニン飼料のみ、薬剤投与群は、０．７５％アデニンと実施例１の熱水抽出物１由来の粉末含有飼料とした。飼料は自由摂取としたが、薬剤投与群の試験飼料中の上記熱水抽出物１の乾燥粉末の濃度を、摂取量が１ｍｇ／ｋｇ体重となるように調整した。試験開始日及び24日目に血中の尿酸値を測定した。
その結果、対照群の試験開始日の血中尿酸濃度は、０．５７ｍｇ／ｍｌであり、２４日目が２．３３ｍｇ／ｍｌであったのに対し、薬剤投与群の２４日目の血中尿酸濃度は０．７２ｍｇ／ｍｌであった。
この結果から明らかなように、対照群では血中尿酸濃度が大幅に増加するのに対し、薬剤投与群ではいずれもその濃度は増加しなかった。したがって、葛花処理物を有効成分として含有する薬剤は、高尿酸血症の予防または改善剤として有用であることが示された。 Example 4 (improvement effect of hyperuricemia)
Experimental Method As test animals, Wistar rats (8 weeks old, body weight of about 180 g) were used in groups of 6 animals.
Adenine was added to the test feed at a concentration of 0.75% and fed to rats to cause inhibition of uric acid excretion into the urine from the kidney, thereby giving a model animal of hyperuricemia.
The control group was the above 0.75% adenine feed alone, and the drug administration group was 0.75% adenine and a powder-containing feed derived from the hot water extract 1 of Example 1. Although the feed was freely consumed, the concentration of the dry powder of the hot water extract 1 in the test diet of the drug administration group was adjusted so that the intake amount was 1 mg / kg body weight. The uric acid level in the blood was measured on the test start day and 24th day.
As a result, the blood uric acid concentration on the test start day of the control group was 0.57 mg / ml, and it was 2.33 mg / ml on the 24th day, whereas the blood uric acid concentration on the 24th day of the drug administration group was The uric acid concentration was 0.72 mg / ml.
As is clear from this result, the blood uric acid concentration in the control group was significantly increased, whereas in the drug administration group, the concentration was not increased. Therefore, it has been shown that a drug containing the processed Kuzuka product as an active ingredient is useful as an agent for preventing or improving hyperuricemia.

実施例５
実施例４において、薬剤投与群の試験飼料中に、さらに実施例３の乾燥粉末を添加し、該乾燥粉末の濃度を、摂取量が１ｍｇ／ｋｇ体重となるように調整したこと以外は、実施例４を繰り返した。その結果、薬剤投与群の２４日目の血中尿酸濃度は０．６２ｍｇ／ｍｌであった。 Example 5
In Example 4, except that the dry powder of Example 3 was further added to the test feed of the drug administration group, and the concentration of the dry powder was adjusted so that the intake amount was 1 mg / kg body weight. Example 4 was repeated. As a result, the blood uric acid concentration on the 24th day of the drug administration group was 0.62 mg / ml.

実施例６（抗骨粗鬆症効果）
骨粗鬆症改善効果試験
ＳＤ系ラット（２２週齢）メスの卵巣を外科的に取り除き、骨粗鬆症のモデルラットを作成した。卵巣摘出ラットを７匹ずつ６群に分け、３５日間の試験期間中、１日置きに（計１７回）、前記熱水抽出物１の粉末の摂取量が１ｍｇ／ｋｇとなるように、生理食塩水溶解した液体を２ｍｌ経口投与した。飼料はオリエンタル酵母株式会社のマウス・ラット・ハムスター用固形飼料ＣＲＦ−１を用い、給餌および給水方法は自由摂取とした。試験期間中、各群間で、餌の摂取量に差は認められなかった。試験開始後３５日目にラットの体重を測定した後、大腿骨を取り出した。大腿骨は、接着組織および筋肉を取り除いて分析に使用した。大腿骨の体積を測定した後、エタノールで３回洗浄し、次にアセトンで３回洗浄したのち、一晩乾燥し、その後、重量を測定して大腿骨の乾燥重量を求めた。体積および乾燥重量から、骨密度（乾燥重量ｇ／体積ｍｍ³ ）を測定した。なお対照実験として、前記熱水抽出物１の粉末を含まない生理食塩水をラットに投与したこと以外は、上記実験を繰り返した例（比較例）も併せて、その結果を表４に示す。 Example 6 (Anti-osteoporosis effect)
Osteoporosis Improvement Effect Test SD rat (22 weeks old) Female ovaries were surgically removed to create osteoporosis model rats. The ovariectomized rats were divided into 6 groups of 7 animals, and the physiological intake of the hot water extract 1 was 1 mg / kg every other day (total 17 times) during the 35-day test period. 2 ml of saline-dissolved liquid was orally administered. The feed was the solid feed CRF-1 for mice, rats and hamsters from Oriental Yeast Co., Ltd. There was no difference in food intake between groups during the study period. On the 35th day after the start of the test, the weight of the rat was measured, and then the femur was removed. The femur was used for analysis with the adhesive tissue and muscle removed. After measuring the volume of the femur, it was washed three times with ethanol, then washed three times with acetone, dried overnight, and then weighed to determine the dry weight of the femur. From the volume and dry weight, the bone density (dry weight g / volume mm ³ ) was measured. As a control experiment, Table 4 shows the results together with an example in which the above experiment was repeated (comparative example) except that physiological saline containing no powder of the hot water extract 1 was administered to rats.

実施例１と比較例とを対比したところ、実施例１はp＜0.05の危険率で有意差が認められた。   When Example 1 was compared with the comparative example, a significant difference was found in Example 1 with a risk factor of p <0.05.

実施例７
実施例６において、前記熱水抽出物１の粉末に加え、実施例３の乾燥粉末の摂取量が１ｍｇ／ｋｇとなるように、生理食塩水溶解した液体を２ｍｌ経口投与した。それ以外は、実施例６を繰り返した。その結果、骨密度は１．０７６（ｍｇ／ｍｍ³ ）であった。 Example 7
In Example 6, in addition to the hot water extract 1 powder, 2 ml of a saline-dissolved liquid was orally administered so that the dry powder intake of Example 3 was 1 mg / kg. Otherwise, Example 6 was repeated. As a result, the bone density was 1.076 (mg / mm ³ ).

実施例８（抗リウマチ効果）
ヒト慢性リウマチ患者の滑膜から樹立された繊維芽細胞株であるＤＳＥＫ細胞を１０％ＦＢＳ（バイオウイタッカー社製）を含むＩｓｃｏｖ−ＭＥＭ培地（ＩＭＤＭ：ギブコＢＲＬ社製）にて、５％ＣＯ_２存在下、３７℃で細胞が培養器に飽和になるまで培養し、トリプシン−ＥＤＴＡ溶液（バイオウイタッカー社製）で細胞を３×１０^４細胞／ｍｌとなるように上記培地に懸濁し、９６ウェルマイクロタイタープレート（ＦＡＬＣＯＮ社製）の各ウェルに２００μｌずつ分注した。培養５〜７日後、ほぼ細胞が８０％飽和になった時で培地を交換し、前記熱水抽出物１の粉末濃度が５００μｇ／ｍｌの濃度である２００μｌの上記培地を加えた。
２４時間、７２時間経過時に１０μｌのプレミックスＷＳＴ−１（宝酒造社製、ＭＫ４００）を加えて３７℃で３．５時間反応させ、４５０ｎｍにおける吸光度（Ａ_４５０）から６５０ｎｍにおける吸光度（Ａ_６５０）を差し引いた値を細胞増殖度とした。その結果、２４時間後の細胞増殖度は０．８０、７２時間後は０．３５であり、抗リウマチ活性が認められた。なお、前記熱水抽出物１の粉末を加えない対照区では、２４時間、７２時間経過時の細胞増殖度が３．９０であった。 Example 8 (anti-rheumatic effect)
DSEK cells, a fibroblast cell line established from the synovium of a patient with chronic rheumatoid arthritis, were treated with 5% CO in Iscov-MEM medium (IMDM: Gibco BRL) containing 10% FBS (manufactured by BioWitacker). _{In the} presence of ₂ cells, the cells are cultured at 37 ° C. until saturation in the incubator, and the cells are suspended in the above medium with a trypsin-EDTA solution (manufactured by BioWitacker) to 3 × 10 ⁴ cells / ml 200 μl was dispensed into each well of a 96-well microtiter plate (manufactured by FALCON). After 5 to 7 days of culture, when the cells were almost 80% saturated, the medium was changed, and 200 μl of the above medium with a powder concentration of the hot water extract 1 of 500 μg / ml was added.
After 24 hours and 72 hours, 10 μl of premix WST-1 (Takara Shuzo Co., Ltd., MK400) was added and reacted at 37 ° C. for 3.5 hours, and the absorbance at 450 nm (A ₄₅₀ ) to absorbance at 650 nm (A ₆₅₀ ) The subtracted value was defined as the degree of cell proliferation. As a result, the cell proliferation degree after 24 hours was 0.80, and after 72 hours, it was 0.35, and antirheumatic activity was recognized. In the control group to which the powder of hot water extract 1 was not added, the cell proliferation degree after 24 hours and 72 hours was 3.90.

実施例９
実施例８において、培地を交換する際に、前記熱水抽出物１の粉末濃度が５００μｇ／ｍｌの濃度である１００μｌの上記培地と、実施例３の乾燥粉末の濃度が５００μｇ／ｍｌの濃度である１００μｌの上記培地とを混合し、合計２００μｌの交換培地としたこと以外は、実施例８を繰り返した。その結果、２４時間後の細胞増殖度は０．７０、７２時間後は０．３０であり、抗リウマチ活性が認められた。 Example 9
In Example 8, when exchanging the medium, 100 μl of the medium in which the powder concentration of the hot water extract 1 is 500 μg / ml and the concentration of the dry powder in Example 3 is 500 μg / ml. Example 8 was repeated except that 100 μl of the above medium was mixed to make a total of 200 μl of replacement medium. As a result, the cell proliferation degree after 24 hours was 0.70, and after 72 hours, it was 0.30, and antirheumatic activity was observed.

実施例１０（抗鬱・抗ストレス効果）
上記熱水抽出物１の粉末の治療効果を調べた。
マウス強制水泳試験による精神安定作用の評価
本発明の治療剤の評価は、１９７７年にPorsoltにより開発されたマウス強制水泳試験を採用した。本試験は鬱病の動物モデル実験として最も多用される方法のひとつである。本試験では、マウスをある限られたスペースの中で強制的に泳がせて「無動状態」を惹起させる。この無動状態は、ストレスを負荷された動物が水からの逃避を放棄した一種の「絶望状態」を反映するものと考えられ、ヒトにおける鬱状態、ストレス状態と関連づけられている。事実、抗鬱薬は特異的にこの状況下における無動状態の持続時間を短縮させることがわかっており、この短縮作用は臨床力価との間に有意な相関を有することが認められている。 Example 10 (Antidepressant / Anti-stress effect)
The therapeutic effect of the powder of hot water extract 1 was examined.
Evaluation of tranquilizing effect by forced mouse swimming test The therapeutic agent of the present invention was evaluated by the forced mouse swimming test developed by Porsolt in 1977. This is one of the most frequently used animal model experiments for depression. In this test, the mouse is forced to swim in a limited space to cause “immobility”. This immobility state is thought to reflect a kind of “despair state” in which stressed animals abandon their escape from water, and is associated with depression and stress in humans. In fact, antidepressants have been found to specifically reduce the duration of immobility in this situation, and this shortening has been found to have a significant correlation with clinical titer.

本試験方法は次のとおりである。
２５℃の水を深さ１５ｃｍまで入れたプラスチック円筒中でマウスを強制水泳させる。５分間の強制水泳後、３０℃の乾燥機中で１５分間乾燥し、ホームケージに戻す。翌日マウスに試験試料を腹腔内投与して、その１時間後に再び５分間の強制水泳を課し、現れた無動状態の持続時間をストップウォッチを用いて測定する。マウスが水に浮かんで静止している状態を無動状態と判定する。無動状態持続時間については有意差検定を行い、統計学的に有意差を検定する。実験には雄のｄｄYマウスを使用し、１群６匹とする。なお、試験は全て午後１時から午後６時の間に行う。また、ポジティブコントロールとして抗鬱薬であるイミプラミンを用いた試験も行う。 The test method is as follows.
Mice are forced to swim in a plastic cylinder containing 25 ° C. water to a depth of 15 cm. After forced swimming for 5 minutes, dry in a dryer at 30 ° C. for 15 minutes and return to the home cage. On the next day, the test sample is intraperitoneally administered to the mouse, one hour later, forced swimming for 5 minutes is imposed again, and the duration of the immobility that appears is measured using a stopwatch. A state in which the mouse floats on the water and is stationary is determined as an immobile state. For the duration of stationary state, a significant difference test is performed, and a statistically significant difference is tested. For the experiment, male ddY mice are used, and there are 6 mice per group. All tests are conducted between 1pm and 6pm. A test using imipramine, an antidepressant, as a positive control will also be conducted.

その結果、熱水抽出物１の粉末を３０ｍｇ／ｋｇ投与したマウスの無動状態持続時間は、１７４．８±６．７秒であった。コントロール（生理食塩水のみ）は２２０．０±２．２秒であった。ポジティブコントロール（３０ｍｇ／ｋｇ投与）のマウスの無動状態持続時間は、１７６．５±４．０秒であった。本実施例およびポジティブコントロールの無動状態持続時間は、危険率１％で有意差を有する。なお、熱水抽出物１の粉末を２〜３倍量使用しても、同様の結果を得た。   As a result, the duration of immobility in mice administered with 30 mg / kg of hot water extract 1 powder was 174.8 ± 6.7 seconds. The control (saline only) was 220.0 ± 2.2 seconds. The duration of immobility in positive control mice (30 mg / kg dose) was 176.5 ± 4.0 seconds. The duration of immobility in this example and the positive control is significantly different at a risk rate of 1%. In addition, even if it used 2 to 3 times amount of powder of the hot water extract 1, the same result was obtained.

実施例１１
実施例１０において、熱水抽出物１の粉末を３０ｍｇ／ｋｇ投与したのに加え、実施例３の乾燥粉末を３０ｍｇ／ｋｇさらに投与したこと以外は、実施例１０を繰り返した。その結果、マウスの無動状態持続時間は、１６４．２±５．８秒であった。 Example 11
In Example 10, Example 10 was repeated except that 30 mg / kg of the hot water extract 1 powder was administered and 30 mg / kg of the dry powder of Example 3 was further administered. As a result, the duration of immobility in the mouse was 164.2 ± 5.8 seconds.

実施例１２
アディポネクチン産生上昇確認試験
正常ヒト前駆脂肪細胞を使用し、１．０×１０^４個となるように９６ウェルマイクロプレートに播種した。播種培地にはヒト前駆脂肪細胞基礎培地を用いた。２４時間後に分化誘導添加剤と熱水抽出物１の粉末を加えた増殖培地に交換し、さらに１週間培養した。その後、培養上清中に産生されたアディポネクチン量をＥＬＩＳＡ法により定量した。各試料の評価結果を、ブランク（試料未添加）のアディポネクチン量を１００とした場合の相対値にて下記に示す。なお、添加した熱水抽出物１の粉末濃度は、１０μｇ／ｍｌであった。 Example 12
Adiponectin production increase confirmation test Normal human preadipocytes were used and seeded in a 96-well microplate at 1.0 × 10 ⁴ cells. Human preadipocyte basal medium was used as the seeding medium. After 24 hours, the culture medium was replaced with a growth medium to which a differentiation-inducing additive and hot water extract 1 powder were added, and further cultured for 1 week. Thereafter, the amount of adiponectin produced in the culture supernatant was quantified by ELISA. The evaluation results of each sample are shown below as relative values when the amount of adiponectin in the blank (sample not added) is 100. The powder concentration of the added hot water extract 1 was 10 μg / ml.

上記試験結果：相対値＝３７６。この数値は、危険率１％で有意差を有する。   Test result: relative value = 376. This value has a significant difference at a risk rate of 1%.

実施例１３
実施例１２において、熱水抽出物１の粉末を１０μｇ／ｍｌ添加したのに加え、実施例３の乾燥粉末を１０μｇ／ｍｌさらに添加したこと以外は、実施例１２を繰り返した。その結果、相対値は３８８であった。
Example 13
In Example 12, Example 12 was repeated except that 10 μg / ml of the hot water extract 1 powder was added and 10 μg / ml of the dry powder of Example 3 was further added. As a result, the relative value was 388.

実施例１４（コレステロール低下作用）
体重２０ｇ前後のＩＣＲ系雄性マウス（１群５匹）に、高コレステロール−コール酸食餌（７１．９％標準餌、１５％ショ糖、２％食塩、１０％ココナッツオイル、０．６％コレステロール、０．２％コール酸、０．３％塩化コリン）を試験第１日目から第７日目まで給餌（自由摂取）した。試験第６日目と第７日目に、上記熱水抽出物１の粉末５ｍｇを蒸留水に溶解し、経口投与した。その後、２４時間の絶食を行い、試験第８日目にマウスから血液を採取し、血清を分離した。 Example 14 (cholesterol lowering action)
ICR male mice weighing about 20 g (5 per group) were given a high cholesterol-cholate diet (71.9% standard diet, 15% sucrose, 2% salt, 10% coconut oil, 0.6% cholesterol, 0.2% cholic acid, 0.3% choline chloride) was fed (free intake) from the first day to the seventh day of the test. On the 6th and 7th days of the test, 5 mg of the hot water extract 1 powder was dissolved in distilled water and orally administered. Thereafter, fasting was performed for 24 hours, and blood was collected from the mice on the 8th day of the test, and the serum was separated.

また、採取した血清の一部にヘパリンを添加し沈降させ、低比重リポタンパク（ＬＤＬ）としてヘパリン沈降リポタンパクを得た。血清中の総コレステロール値及びＬＤＬ中のコレステロール値を、シー・シー・アライン（Ｃ．Ｃ．Ａｌｌａｉｎ ｅｔ ａｌ．）らの報告（クリニカル ケミストリイ（Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ）、１９７４年、２０巻、４７０−４７５頁）に従って、測定した。   In addition, heparin was added to a portion of the collected serum and precipitated to obtain heparin-precipitated lipoprotein as low density lipoprotein (LDL). The total cholesterol level in serum and the cholesterol level in LDL were reported by C. C. Allain et al. (Clinical Chemistry, 1974, 20, 470-475). ) And measured.

血清中の総コレステロール値からＬＤＬコレステロール値を引いた値を、高比重リポタンパク（ＨＤＬ）コレステロール値として算出した。なお対照群は、上記熱水抽出物１の粉末を投与していない群である。   The value obtained by subtracting the LDL cholesterol value from the total cholesterol value in the serum was calculated as a high density lipoprotein (HDL) cholesterol value. The control group is a group not administered with the hot water extract 1 powder.

その結果を表５に示した。表５から明らかなように、血清中総コレステロールを低下させる明らかな作用が認められた。   The results are shown in Table 5. As is clear from Table 5, an obvious effect of lowering serum total cholesterol was observed.

実施例１５
実施例１４において、上記熱水抽出物１の粉末５ｍｇに加え、実施例３の熱水抽出物２の乾燥粉末５ｍｇをさらに投与したこと以外は、実施例１４を繰り返した。その結果、血清総コレステロールは約２４４ｍｇ／ｄｌ、ＬＤＬコレステロールは約１３２ｍｇ／ｄｌ、ＨＤＬコレステロールは約１１２ｍｇ／ｄｌであった。 Example 15
In Example 14, Example 14 was repeated except that in addition to 5 mg of the hot water extract 1 powder, 5 mg of the dry powder of the hot water extract 2 of Example 3 was further administered. As a result, serum total cholesterol was about 244 mg / dl, LDL cholesterol was about 132 mg / dl, and HDL cholesterol was about 112 mg / dl.

本発明の治療剤は、医薬、食品、飼料の形態として有用である。なお、上記各例において、実施例１の熱水抽出物１の調製の際に、熱水を用いずに５０容量％エタノール水溶液を用いて抽出物を調製した場合においても、上記と同様の結果を得た。   The therapeutic agent of the present invention is useful as a pharmaceutical, food or feed form. In each of the above examples, when the extract was prepared using 50% by volume ethanol aqueous solution without using hot water when the hot water extract 1 of Example 1 was prepared, the same result as above was obtained. Got.

Claims (7)

葛花処理物を有効成分とすることを特徴とする抗アレルギー剤。   An antiallergic agent characterized by comprising a kuzuhana treatment product as an active ingredient. 葛花処理物を有効成分とすることを特徴とする高尿酸血症の予防または改善剤。   A preventive or ameliorating agent for hyperuricemia, characterized by comprising a processed kuzuhana product as an active ingredient. 葛花処理物を有効成分とすることを特徴とする抗骨粗鬆症剤。   An anti-osteoporosis agent characterized by comprising a kuzuhana treatment product as an active ingredient. 葛花処理物を有効成分とすることを特徴とするリウマチ治療剤。   A therapeutic agent for rheumatism, characterized by comprising a kuzuhana treatment product as an active ingredient. 葛花処理物を有効成分とすることを特徴とする抗鬱・抗ストレス剤。   An antidepressant / anti-stress agent characterized by containing a kuzuhana treatment product as an active ingredient. 葛花処理物を有効成分とすることを特徴とするアディポネクチン産生促進剤。   An adiponectin production promoter characterized by comprising a kuzuhana treatment product as an active ingredient. 葛花処理物を有効成分とすることを特徴とするコレステロール低下剤。   A cholesterol-lowering agent characterized by comprising a processed kuzuhana product as an active ingredient.