JP2009046403A - Phenylpyrrole derivative and rage inhibitor - Google Patents

Abstract

<P>PROBLEM TO BE SOLVED: To provide a RAGE inhibitor as an agent for the treatment of diabetic complications. <P>SOLUTION: The RAGE inhibitor contains an active component expressed by formula (in the formula, R<SP>1</SP>and R<SP>2</SP>are each a carboxyl group or an amide group: CONR<SP>4</SP>R<SP>5</SP>; R<SP>4</SP>and R<SP>5</SP>are each a hydrogen atom or an alkyl group; and R<SP>3</SP>is an alkylimidazole or its derivative). <P>COPYRIGHT: (C)2009,JPO&INPIT

Description

本発明は、後期糖化反応生成物：ＡＧＥとそのレセプターとしてのＲＡＧＥとの相互作用を阻害する新規フェニルピロール誘導体と、これを有効成分として用いた血管障害性の糖尿病合併症の各種疾患や、動脈硬化疾患等の治療剤として
有用なＲＡＧＥ阻害剤に関するものである。 The present invention relates to a late glycation reaction product: a novel phenylpyrrole derivative that inhibits the interaction between AGE and RAGE as its receptor, and various diseases of vascular disorder diabetic complications using this as an active ingredient, arteries The present invention relates to a RAGE inhibitor useful as a therapeutic agent for sclerosis diseases and the like.

生活習慣の欧米化等に伴い、糖尿病患者数は増加の一途を辿り、日本国内の推定罹患人（２００５年）は予備軍を含め約１６００万人と推定されている。これに伴い、糖尿病合併症患者数もさらに増加すると予想される。糖尿病の三大合併症とされる網膜症、腎症、神経症の罹患率は、それぞれ約８０％、約４０％、約７０％である。世界的には、とくにアジアで、糖尿病合併症の未曾有の増加が推定されている。 The number of diabetic patients continues to increase as the lifestyles become westernized, and the estimated number of people affected in Japan (2005) is estimated to be about 16 million including the reserve army. Along with this, the number of diabetic complications is expected to increase further. The prevalence of retinopathy, nephropathy, and neurosis, which are the three major complications of diabetes, is about 80%, about 40%, and about 70%, respectively. Worldwide, an unprecedented increase in diabetic complications is estimated, particularly in Asia.

糖尿病患者の平均寿命は、男性、女性とも一般人口よりは１０年以上短く、死因のトップは血管死である。糖尿病では死に至る以前にも、後天性失明の最多原因である糖尿病網膜症、透析原因のトップにランクされる糖尿病腎症等の血管合併症により生活の質(quality of life, QOL)が著しく損なわれる。逆に、糖尿病を発症しても、血管合併症の発症・憎悪を阻止できれば、患者の生命予後・ＱＯＬは著しく改善される。超高齢化社会の到来に向けて、糖尿病患者のＱＯＬを高め、社会人ならびに家庭人としての活力を保たせる手段を開発することは、医薬研究従事者に強く求められている課題である。   The average life expectancy of diabetic patients is 10 years or more shorter than the general population for both men and women, and vascular death is the top cause of death. Prior to death in diabetes, quality of life (QOL) is significantly impaired due to vascular complications such as diabetic retinopathy, the most common cause of acquired blindness, and diabetic nephropathy, the top cause of dialysis. It is. Conversely, even if diabetes develops, if the onset / hate of vascular complications can be prevented, the patient's life prognosis / QOL is significantly improved. Toward the advent of a super-aging society, it is an issue that is strongly demanded by pharmaceutical research workers to develop means for increasing the QOL of diabetic patients and maintaining their vitality as a member of society and family.

糖尿病自体がそうであるように糖尿病血管症も多因子病であるが、本発明者らはグルコースとタンパク質の非酵素的な反応により形成・蓄積される糖化蛋白(advanced glycation endproducts, AGE) が糖尿病血管症の主要環境因子であり、血管細胞表面に発現する糖化蛋白受容体（receptor for AGE,RAGE ）がそれに応答する細胞側の主要因子であることを、血管細胞培養系を用いたin vitroおよびＲＡＧＥトランスジェニックマウスを用いた個体レベルの研究により明らかにしてきた。   Diabetes angiopathy is a multifactorial disease, as is diabetes itself, but we have developed glycated proteins (advanced glycation endproducts, AGEs) that are formed and accumulated by non-enzymatic reactions between glucose and protein. It is a major environmental factor for angiopathy, and the glycated protein receptor (receptor for AGE, RAGE) expressed on the surface of vascular cells is a major factor on the cell side that responds to it. This has been clarified by individual-level studies using RAGE transgenic mice.

ＲＡＧＥは、１９９２年にＡＧＥ結合蛋白質として分離したimmunoglobulin superfamilyに属する膜貫通型受容体であることが報告され（非特許文献１）、その後、糖尿病血管合併症のみならず、免疫系の調節（非特許文献２）、アルツハイマー病の発症（非特許文献３）、がん増殖転移（非特許文献４）にも関与することが報告されている。   RAGE was reported to be a transmembrane receptor belonging to the immunoglobulin superfamily isolated as an AGE-binding protein in 1992 (Non-patent Document 1). Thereafter, not only diabetic vascular complications but also regulation of the immune system (non- Patent document 2), the onset of Alzheimer's disease (non-patent document 3), and cancer growth / metastasis (non-patent document 4) are also reported to be involved.

しかしながら、ＡＧＥ−ＲＡＧＥ系シグナル伝達経路についてはいまだに多くが不明である。   However, much remains unknown about the AGE-RAGE signaling pathway.

このような背景において本発明者らはこれまでに細小血管を構成する内皮細胞−周皮細胞間の相互作用とそれを担う因子の実体を明らかにし、血管恒常性の維持とその破綻の仕組みに関する検証を進め、上記のとおりの個体レベルでのＡＧＥ−ＲＡＧＥ相互作用の解明とこの相互作用の阻害について詳細な検証を行ってきた。すなわちまず血管細胞のin vitro培養系を用いてＡＧＥがＲＡＧＥを介して血管細胞に糖尿病血管合併症に特徴的な細胞変化を引き起こすことを示した。そして、これらin vitroの成果に基づき、血管細胞でＲＡＧＥを過剰発現するトランスジェニックマウスを作製して病態の解析を行い、ＲＡＧＥ過剰発現が腎症などの糖尿病血管合併症の発症・憎悪を引き起こすことを示すとともに、ＲＡＧＥ阻害による糖尿病血管合併症の予防・治療が有効であることを示した。   In such a background, the present inventors have clarified the interaction between endothelial cells and pericytes constituting the small blood vessels and the factors responsible for them, and relate to the maintenance of vascular homeostasis and the mechanism of the failure. The verification has been advanced, and the AGE-RAGE interaction at the individual level as described above has been elucidated and detailed verification has been performed on the inhibition of this interaction. That is, first, using an in vitro culture system of vascular cells, it was shown that AGE causes cell changes characteristic of diabetic vascular complications to vascular cells via RAGE. Based on these in vitro results, transgenic mice that overexpress RAGE in vascular cells are prepared and pathological conditions are analyzed, and overexpression of RAGE causes the onset and aversion of diabetic vascular complications such as nephropathy. It was also shown that prevention and treatment of diabetic vascular complications by RAGE inhibition is effective.

そしてまた、発明者らは、血管細胞を初めとする各種ヒト細胞が細胞保護作用を有する内在性可溶型ＲＡＧＥ蛋白（endogenous secretory RAGE, esRAGE)を産生・分泌していることを明らかにし、個人間でのｅｓＲＡＧＥ産生の差が合併症罹患感受性／抵抗性の個人差の要因のひとつである可能性を提唱した（非特許文献５）。実際にｅｓＲＡＧＥの定量法を開発し、血中ｅｓＲＡＧＥ量の低下が糖尿病網膜症、糖尿病腎症、動脈硬化に結びつく可能性を見出した（非特許文献６）。   The inventors have also clarified that various human cells including vascular cells produce and secrete endogenous soluble RAGE protein (endogenous secretory RAGE, esRAGE) having a cytoprotective action. It was proposed that the difference in esRAGE production among the individuals may be one of the factors of individual differences in susceptibility / resistance to complications (Non-patent Document 5). A quantification method for esRAGE was actually developed, and it was found that a decrease in the blood esRAGE amount could lead to diabetic retinopathy, diabetic nephropathy, and arteriosclerosis (Non-patent Document 6).

そして、これらの知見に基づいて、可溶型ＲＡＧＥタンパク並びにＡＧＥ−ＲＡＧＥ拮抗剤についての発明を提示してもいる（特許文献１−２）。   And based on these knowledge, the invention about soluble type RAGE protein and an AGE-RAGE antagonist is also proposed (patent documents 1-2).

だが、ＡＧＥ−ＲＡＧＥ相互作用を阻害するのに有効な、合成可能な、より低分子物質としてその取扱いや処方も容易な、薬剤を開発することはこれまでのところ進展していない。このことは、糖尿病合併症等の各種疾患への対応として急務であって、大きな課題として残されている。
J.Biol.Chem., ２６７，１４９９８−１５００４，１９９２ Cell ９７，８８９−９０１，１９９９ Nat.Med.６，６４３−６５１，２０００ Nature ４０５，３５４−３６０，２０００ J.Pharmacol.Sci ９７（３），３０５−３１１（２００５） Biochem.J.３７０（３），１０９７−１１０９（２００３） 特開２００３−１２５７８６号公報 特開２００３−２３０３８２号公報 However, there has been no progress so far in developing drugs that are effective to inhibit AGE-RAGE interactions and that can be easily handled and formulated as lower molecular weight substances that can be synthesized. This is an urgent need to deal with various diseases such as diabetic complications, and remains a major issue.
J. Biol. Chem., 267, 14998-15004, 1992 Cell 97, 889-901, 1999 Nat.Med. 6,643-651,2000 Nature 405,354-360,2000 J. Pharmacol. Sci 97 (3), 305-311 (2005) Biochem. J. 370 (3), 1097-1109 (2003) JP 2003-125786 A JP 2003-230382 A

本発明は、以上のとおりの背景から、発明者らによるこれまでの検討を踏まえて、糖尿病合併症としての各種の疾患や、動脈硬化、悪性腫瘍、神経変成疾患、炎症性疾患等の血管障害による疾患の処方剤として有用な、合成可能で、より低分子物質としてその取扱いや処方も容易な、ＡＧＥ−ＲＡＧＥ相互作用を阻害することのできる新しい化合物と、これを有効成分とする新規なＲＡＧＥ阻害剤を提供することを課題としている。   From the background as described above, the present invention is based on the examination by the inventors so far, various diseases as diabetic complications, vascular disorders such as arteriosclerosis, malignant tumor, neurodegenerative disease, inflammatory disease, etc. A novel compound capable of inhibiting the AGE-RAGE interaction, which can be synthesized as a low molecular weight substance and can be easily handled and formulated, and a novel RAGE containing the same as an active ingredient The problem is to provide an inhibitor.

本発明は、上記の課題を解決するものとして以下の特徴を有している。   The present invention has the following features to solve the above problems.

第１： 次式   1: The following formula

（式中のＲ^１およびＲ^２は、各々、カルボキシル基またはアミド基：ＣＯＮＲ^４Ｒ^５のいずれかであって、Ｒ^４およびＲ^５は、各々、水素原子またはアルキル基を示し、Ｒ^３は、次式（１）（２）；

(In the formula, R ¹ and R ² are each a carboxyl group or an amide group: CONR ⁴ R ⁵ , wherein R ⁴ and R ⁵ each represent a hydrogen atom or an alkyl group, and R ³ is And the following formulas (1) and (2);

のいずれかで示され、Ｒ^３が式（１）で示される場合には、前記Ｒ^１およびＲ^２はいずれもカルボキシル基を示す。）
で表されるフェニルピロール誘導体。

In the case where R ³ is represented by formula (1), both R ¹ and R ² represent a carboxyl group. )
A phenylpyrrole derivative represented by:

第２：上記のフェニルピロール誘導体のうちの少くとも１種を有効成分として含有するＲＡＧＥ阻害剤。   Second: RAGE inhibitor containing at least one of the above phenylpyrrole derivatives as an active ingredient.

第３：糖尿病合併症、悪性腫瘍、動脈硬化疾患、神経変成疾患または炎症性疾患の治療剤である上記いずれかのＲＡＧＥ阻害剤。   Third: Any of the above RAGE inhibitors, which is a therapeutic agent for diabetic complications, malignant tumors, arteriosclerotic diseases, neurodegenerative diseases or inflammatory diseases.

上記のとおりの本発明によれば、糖尿病合併症としての各種の疾患や、動脈硬化、悪性腫瘍、神経変成疾患、炎症性疾患等の血管障害による疾患の処方剤として有用な、合成可能で、より低分子物質としてその取扱いや処方も容易な、ＡＧＥ−ＲＡＧＥ相互作用を阻害することのできる新規な化合物とこれを有効成分とする新規ＲＡＧＥ阻害剤が提供される。   According to the present invention as described above, various diseases as diabetic complications, arteriosclerosis, malignant tumor, neurodegenerative disease, useful as a prescription for diseases caused by vascular disorders such as inflammatory diseases, can be synthesized, Provided are a novel compound capable of inhibiting the AGE-RAGE interaction and a novel RAGE inhibitor comprising this as an active ingredient, which can be easily handled and formulated as a low molecular weight substance.

本発明は上記のとおりの特徴をもつものであるが、以下にその実施の形態について説明する。   The present invention has the features as described above, and an embodiment thereof will be described below.

本発明のＲＡＧＥ阻害剤は、前記の式で表わされる化合物を有効活性成分として含有するものである。これらの化合物には、有効なＲＡＧＥ阻害活性を有する限りは製剤上、あるいは薬効上の観点から、さらに許容される各種の官能基を有していてもよい。   The RAGE inhibitor of the present invention contains a compound represented by the above formula as an active ingredient. As long as these compounds have effective RAGE inhibitory activity, they may have various functional groups that are further acceptable from the viewpoint of formulation or medicinal properties.

上記有効成分化合物のうちの、カルボキシル基は、塩等を形成していてもよい。   Of the active ingredient compounds, the carboxyl group may form a salt or the like.

また、本発明の有効成分としての新規フェニルピロール誘導体については、Ｒ^１、Ｒ^２がアミド基を示し、Ｒ^４、Ｒ^５の少なくとも一方がアルキル基の場合には、メチル基エチル基等の炭素数1〜４の低級アルキル基とすることが考慮される。 As for the novel phenyl pyrrole derivative as an active ingredient of the present invention, R ^1, R ² represents an amide group, when at least one of R ^4, R ⁵ is an alkyl group, carbon atoms such as a methyl group an ethyl group It is considered that the lower alkyl group has a number of 1 to 4.

本発明のフェニルピロール誘導体は、その合成が容易であって、常法の各種の反応手段によって適宜に合成が可能とされる。   The phenylpyrrole derivative of the present invention is easy to synthesize, and can be appropriately synthesized by various conventional reaction means.

本発明のＲＡＧＥ阻害剤は、医薬品としての組成物として各種の配合組成を有していてもよい。好ましくは、経口投与、局所投与、または非経口投与等の使用に適した製剤調製物の形態で投与され、目的に応じていずれの投与形態（吸入法、あるいは直腸投与も包含される）によってもよい。また、本発明の活性成分化合物は、従来公知の利尿剤合併症用剤、動脈硬化症用剤、抗高脂血症剤、抗腫瘍剤（抗がん剤）、腫瘍移転阻害剤、血栓形成阻害剤、アルツハイマー治療剤、関節破壊治療剤、消炎剤及び／又は免疫抑制剤と配合して使用することもでき、それらは、有利な働きを持つものであれば制限なく使用でき、たとえば当該分野で知られたものの中から選択することができる。   The RAGE inhibitor of the present invention may have various compounding compositions as a pharmaceutical composition. Preferably, it is administered in the form of a pharmaceutical preparation suitable for use such as oral administration, topical administration, or parenteral administration, and depending on the purpose, any dosage form (including inhalation or rectal administration) is used. Good. Further, the active ingredient compound of the present invention is a known diuretic complication agent, arteriosclerosis agent, antihyperlipidemic agent, antitumor agent (anticancer agent), tumor transfer inhibitor, thrombus formation. It can also be used in combination with inhibitors, Alzheimer's therapeutic agents, joint destruction therapeutic agents, anti-inflammatory agents and / or immunosuppressive agents, and they can be used without limitation as long as they have an advantageous function. You can choose from those known in.

非経口的な投与形態としては、局所、経皮、静脈内、筋肉内、皮下、皮内もしくは腹腔内投与を包含し得るが、患部への直接投与も可能であり、またある場合には好適でもある。好ましくはヒトを含む哺乳動物に経口的に、あるいは非経口的（例、細胞内、組織内、静脈内、筋肉内、皮下、皮内、腹腔内、胸腔内、脊髄腔内、点滴法、注腸、経直腸、点耳、点眼や点鼻、歯、皮膚や粘膜への塗布など）に投与することができる。具体的な製剤調製物の形態としては、溶液製剤、分散製剤、半固形製剤、粉粒体製剤、成型製剤、浸出製剤などが挙げられ、たとえば、錠剤、被覆錠剤、糖衣を施した剤、丸剤、トローチ剤、硬カプセル剤、軟カプセル剤、マイクロカプセル剤、埋込剤、粉末剤、散剤、顆粒剤、細粒剤、注射剤、液剤、エリキシル剤、エマルジョン剤、灌注剤、シロップ剤、水剤、乳剤、懸濁剤、リニメント剤、ローション剤、エアゾール剤、スプレー剤、吸入剤、噴霧剤、軟膏製剤、硬膏製剤、貼付剤、パスタ剤、パップ剤、クリーム剤、油剤、坐剤（たとえば、直腸坐剤）、チンキ剤、皮膚用水剤、点眼剤、点鼻剤、点耳剤、塗布剤、輸液剤、注射用液剤などのための粉末剤、凍結乾燥製剤、ゲル調製品等が挙げられる。医薬用の組成物は通常の方法に従って製剤化することができる。たとえば、適宜必要に応じて、生理学的に認められる担体、医薬として許容される担体、アジュバント剤、賦形剤、補形剤、希釈剤、香味剤、香料、甘味料、ベヒクル、防腐剤、安定化剤、結合剤、ｐＨ調節剤、緩衝剤、界面活性剤、基剤、溶剤、充填剤、増量剤、溶解補助剤、可溶化剤、等張化剤、乳化剤、懸濁化剤、分散剤、増粘剤、ゲル化剤、硬化剤、吸収剤、粘着剤、弾性剤、可塑剤、崩壊剤、噴射剤、保存剤、抗酸化剤、遮光剤、保湿剤、緩和剤、帯電防止剤、無痛化剤などを単独もしくは組合わせて用い、それとともに本発明の有効成分化合物等を混和することによって、一般に認められた製剤実施に要求される単位用量形態にして製造することができる。非経口的使用に適した製剤としては、有効成分化合物と、水もしくはそれ以外の薬学的に許容し得る媒体との無菌性溶液、または懸濁液剤など、たとえば注射剤等が挙げられる。一般的には、水、食塩水、デキストロース水溶液、その他関連した糖の溶液、エタノール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコールなどのグリコール類が好ましい注射剤用液体担体として挙げられる。注射剤を調製する際は、蒸留水、リンゲル液、生理食塩液のような担体、適当な分散化剤または湿化剤及び懸濁化剤などを使用して当該分野で知られた方法で、溶液、懸濁液、エマルジョンのごとき注射しうる形に調製する。   Parenteral dosage forms can include topical, transdermal, intravenous, intramuscular, subcutaneous, intradermal or intraperitoneal administration, but can also be administered directly to the affected area and is preferred in some cases. But there is. Preferably, orally or parenterally to mammals including humans (eg, intracellular, tissue, intravenous, intramuscular, subcutaneous, intradermal, intraperitoneal, intrathoracic, intrathecal, instillation, injection Administration to the intestines, rectum, ear drops, eye drops, nose, teeth, skin and mucous membranes, etc.). Specific preparation forms include solution preparations, dispersion preparations, semi-solid preparations, granular preparations, molded preparations, leachable preparations, etc., for example, tablets, coated tablets, sugar-coated preparations, Agents, troches, hard capsules, soft capsules, microcapsules, implants, powders, powders, granules, fine granules, injections, solutions, elixirs, emulsions, irrigation agents, syrups, Water solution, emulsion, suspension, liniment, lotion, aerosol, spray, inhalant, spray, ointment, plaster, patch, pasta, poultice, cream, oil, suppository ( For example, rectal suppositories), tinctures, skin preparations, eye drops, nasal drops, ear drops, coatings, infusions, liquids for injection, freeze-dried preparations, gel preparations, etc. Can be mentioned. The pharmaceutical composition can be formulated according to a usual method. For example, as needed, physiologically acceptable carriers, pharmaceutically acceptable carriers, adjuvants, excipients, excipients, excipients, flavoring agents, fragrances, sweeteners, vehicles, preservatives, stable Agent, binder, pH adjuster, buffer, surfactant, base, solvent, filler, extender, solubilizer, solubilizer, isotonic agent, emulsifier, suspending agent, dispersant , Thickeners, gelling agents, curing agents, absorbents, adhesives, elastic agents, plasticizers, disintegrating agents, propellants, preservatives, antioxidants, sunscreen agents, moisturizers, relaxation agents, antistatic agents, By using a soothing agent alone or in combination with the active ingredient compound of the present invention and the like, it can be produced into a unit dosage form required for the practice of a generally accepted formulation. The preparation suitable for parenteral use includes a sterile solution or suspension of the active ingredient compound and water or other pharmaceutically acceptable medium, such as an injection. In general, water, saline, dextrose aqueous solution, other related sugar solutions, and glycols such as ethanol, propylene glycol, and polyethylene glycol are preferable liquid carriers for injections. When preparing an injection, the solution is prepared by a method known in the art using a carrier such as distilled water, Ringer's solution, physiological saline, an appropriate dispersing agent or wetting agent and suspending agent. Injectable forms such as suspensions and emulsions.

注射用の水性液としては、例えば生理食塩液、ブドウ糖やその他の補助薬（たとえば、Ｄ−ソルビトール、Ｄ−マンニトール、塩化ナトリウムなど）を含む等張液などが挙げられ、薬理的に許容される適当な溶解補助剤、たとえばアルコール（たとえばエタノールなど）、ポリアルコール（たとえばプロピレングリコール、ポリエチレングリコールなど）、非イオン性界面活性剤などと併用してもよい。油性液としてはゴマ油、大豆油などが挙げられ、溶解補助剤として安息香酸ベンジル、ベンジルアルコールなどと併用してもよい。また、緩衝剤（たとえば、リン酸塩緩衝液、酢酸ナトリウム緩衝液など）又は浸透圧調節のための試薬、無痛化剤（たとえば、塩化ベンザルコニウム、塩酸プロカインなど）、安定剤（例えば、ヒト血清アルブミン、ポリエチレングリコールなど）、保存剤（たとえば、ベンジルアルコール、フェノールなど）、アスコルビン酸などの酸化防止剤、吸収促進剤などとと配合してもよい。調製された注射液は通常、適当なアンプルに充填される。   Examples of the aqueous solution for injection include isotonic solutions containing physiological saline, glucose and other adjuvants (for example, D-sorbitol, D-mannitol, sodium chloride, etc.), and are pharmacologically acceptable. A suitable solubilizing agent such as an alcohol (for example, ethanol), a polyalcohol (for example, propylene glycol, polyethylene glycol, etc.), a nonionic surfactant, or the like may be used in combination. Examples of the oily liquid include sesame oil and soybean oil. As a solubilizing agent, benzyl benzoate, benzyl alcohol and the like may be used in combination. In addition, a buffer (eg, phosphate buffer, sodium acetate buffer, etc.) or a reagent for adjusting osmotic pressure, a soothing agent (eg, benzalkonium chloride, procaine hydrochloride, etc.), a stabilizer (eg, human) Serum albumin, polyethylene glycol, etc.), preservatives (eg, benzyl alcohol, phenol, etc.), antioxidants such as ascorbic acid, absorption promoters, etc. The prepared injection solution is usually filled in a suitable ampoule.

非経口投与には、界面活性剤及びその他の薬学的に許容される助剤を加えるか、あるいは加えずに、水、エタノール又は油のような無菌の薬学的に許容される液体中の溶液あるいは懸濁液の形態に製剤化される。製剤に使用される油性ベヒクルあるいは溶剤としては、天然あるいは合成あるいは半合成のモノあるいはジあるいはトリグリセリド類、天然、半合成あるいは合成の油脂類あるいは脂肪酸類が挙げられ、たとえばピーナッツ油、トウモロコシ油、大豆油、ゴマ油などの植物油が挙げられる。たとえば、この注射剤は、通常本発明化合物を０．１〜１０重量％程度含有するように調製されることができる。局所的、例えば口腔、又は直腸的使用に適した製剤としては、例えば洗口剤、歯磨き剤、口腔噴霧剤、吸入剤、軟膏剤、歯科充填剤、歯科コーティング剤、歯科ペースト剤、坐剤等が挙げられる。洗口剤、その他歯科用剤としては、薬理的に許容される担体を用いて償用の方法により調製される。口腔噴霧剤、吸入剤としては、本発明化合物自体又は薬理的に許容される不活性担体とともにエアゾール又はネブライザー用の溶液に溶解させるあるいは、吸入用微粉末として歯などへ投与できる。軟膏剤は、通常使用される基剤、例えば、軟膏基剤（白色ワセリン、パラフィン、オリーブ油、マクロゴール４００、マクロゴール軟膏など）等を添加し、慣用の方法により調製される。   For parenteral administration, a solution in a sterile pharmaceutically acceptable liquid such as water, ethanol or oil, with or without the addition of surfactants and other pharmaceutically acceptable auxiliaries, or Formulated in the form of a suspension. The oily vehicle or solvent used in the formulation includes natural, synthetic or semi-synthetic mono-, di- or triglycerides, natural, semi-synthetic or synthetic fats or fatty acids, such as peanut oil, corn oil, large Examples include vegetable oils such as bean oil and sesame oil. For example, this injection can be prepared so that it usually contains about 0.1 to 10% by weight of the compound of the present invention. Preparations suitable for topical, eg oral, or rectal use include, for example, mouthwash, toothpaste, oral spray, inhalant, ointment, dental filler, dental coating, dental paste, suppository, etc. Is mentioned. The mouthwash and other dental agents are prepared by a compensation method using a pharmacologically acceptable carrier. As an oral spray and an inhalant, the compound of the present invention itself or a pharmacologically acceptable inert carrier can be dissolved in an aerosol or a nebulizer solution, or can be administered to teeth as a fine powder for inhalation. The ointment is prepared by a conventional method by adding a commonly used base such as an ointment base (white petrolatum, paraffin, olive oil, macrogol 400, macrogol ointment, etc.) and the like.

歯、皮膚への局所塗布用の薬品は、適切に殺菌した水または非水賦形剤の溶液または懸濁液に調剤することができる。添加剤としては、たとえば亜硫酸水素ナトリウムまたはエデト酸二ナトリウムとのような緩衝剤；酢酸または硝酸フェニル水銀、塩化ベンザルコニウムまたはクロロヘキシジンのような殺菌および抗真菌剤を含む防腐剤およびヒプロメルローズのような濃厚剤が挙げられる。坐剤は、当該分野において周知の担体、好ましくは非刺激性の適当な補形剤、たとえばポリエチレングリコール類、ラノリン、カカオ脂、脂肪酸トリグリライド等の、好ましくは常温では固体である腸管の温度では液体で直腸内で融解し薬物を放出するものなどを使用して、慣用の方法により調製されるが、通常本発明化合物を０．１〜９５重量％程度含有するように調製される。使用する賦形剤および濃度によって薬品は、賦形剤に懸濁させるかまたは溶解させることができる。局部麻酔剤、防腐剤および緩衝剤のような補助薬は、賦形剤に溶解可能である。経口的使用に適した製剤としては、たとえば錠剤、丸剤、カプセル剤、粉末剤、顆粒剤、トローチのような固形組成物や、液剤、シロップ剤、懸濁剤のような液状組成物等が挙げられる。製剤調製する際は、当該分野で知られた製剤補助剤などを用いる。錠剤及び丸剤はさらにエンデリックコーティングされて製剤されることもできる。調剤単位形態がカプセルである場合には、前記タイプの材料にさらに油脂のような液状担体を含有することができる。   Drugs for topical application to teeth, skin can be formulated into solutions or suspensions in appropriately sterilized water or non-aqueous excipients. Additives include buffering agents such as sodium bisulfite or disodium edetate; antiseptics including antibacterial and antifungal agents such as acetic acid or phenylmercuric nitrate, benzalkonium chloride or chlorohexidine and hypromelrose Thickeners. Suppositories are carriers well known in the art, preferably non-irritating suitable excipients such as polyethylene glycols, lanolin, cocoa butter, fatty acid triglycerides, etc., preferably at the temperature of the intestinal tract which is solid at room temperature. It is prepared by a conventional method using a liquid that melts in the rectum and releases a drug. Depending on the excipient and concentration used, the drug can be suspended or dissolved in the excipient. Adjuvants such as local anesthetics, preservatives and buffering agents can be dissolved in the vehicle. Examples of preparations suitable for oral use include solid compositions such as tablets, pills, capsules, powders, granules, and troches, and liquid compositions such as liquids, syrups, and suspensions. Can be mentioned. When preparing the formulation, formulation adjuvants known in the art are used. Tablets and pills can also be formulated with an enderic coating. When the dispensing unit form is a capsule, a liquid carrier such as fats and oils can be further contained in the above-mentioned type of material.

本発明の有効成分化合物は、その投与量を広範囲にわたって選択して投与できるが、その投与量及び投与回数などは、処置患者の性別、年齢、体重、一般的健康状態、食事、投与時間、投与方法、***速度、薬物の組み合わせ、患者のその時に治療を行なっている病状の程度に応じ、それらあるいはその他の要因を考慮して決められる。   The active ingredient compound of the present invention can be administered over a wide range of dosages, and the dosage and frequency of administration are determined by the sex, age, weight, general health condition, diet, administration time, administration of the treated patient. Depending on the method, excretion rate, combination of drugs, and the patient's current condition being treated, these or other factors are taken into account.

医薬品製造にあたっては、その添加剤等や調製法などは、たとえば日本薬局方解説書編
集委員会編、第十四改正 日本薬局方解説書、平成１３年６月２７日発行、株式会社廣川
書店：一番ヶ瀬 尚 他編 医薬品の開発１２巻（製剤素剤〔Ｉ〕）、平成２年１０月１
５日発行、株式会社廣川書店、同、医薬品の開発１２巻（製剤素材〔II〕）平成２年１０
月２８日発行、株式会社廣川書店などの記載を参考にしてそれらのうちから必要に応じて適宜選択して適用することができる。本発明の有効成分化合物は、ＡＧＥとＲＡＧＥとの間の相互作用を抑制あるいは阻害するといった生物学的活性をもつものであり、ＡＧＥとＲＡＧＥとの間の相互作用に起因する障害、異常及び／又は疾患の予防あるいは治療に有用である。また、ＡＧＥとＲＡＧＥとの間の相互作用が関与する腫瘍細胞などの移動、浸潤、遊走及び／又は転移の制御、たとえば抑制に有用であると期待される。該成分は、悪性腫瘍、すなわち、がんの移動、浸潤及び／又は転位の阻止及び／又は抑制するのに有用で、血管形成・新生阻害剤、抗腫瘍剤及び／又はがん転移抑制剤として期待できる。また、血液系細胞の、ＡＧＥが関与した障害、異常及び／又は疾患の予防あるいは治療にも有用で、糖尿病合併症治療・予防剤・動脈硬化剤治療・予防剤、血栓症治療・予防剤・消炎剤及び／又は免疫抑制剤としても期待できる。さらに、アルツハイマー治療剤、関節破壊治療剤などとしても期待できる。 In the manufacture of pharmaceuticals, the additives and preparation methods are described in, for example, the Japanese Pharmacopoeia Commentary Editorial Board, 14th revised Japanese Pharmacopoeia, June 27, 2001, Yodogawa Shoten Co., Ltd .: Ichibanase Nao et al. Development of Drugs, Volume 12 (Formulation Base [I]), October 1, 1990
Issued 5 days, Yodogawa Shoten Co., Ltd., Volume 12 of drug development (formulation material [II]) October 1990
It is possible to select and apply as necessary from among those described with reference to the description issued on May 28, Yodogawa Shoten Co., Ltd. The active ingredient compound of the present invention has a biological activity such as suppressing or inhibiting the interaction between AGE and RAGE, and is a disorder, abnormality and / or caused by the interaction between AGE and RAGE. Or it is useful for prevention or treatment of diseases. In addition, it is expected to be useful for the control, for example, suppression, of migration, invasion, migration and / or metastasis of tumor cells involved in the interaction between AGE and RAGE. The component is useful for preventing and / or suppressing malignant tumors, that is, cancer migration, invasion and / or metastasis, as an angiogenesis / neoplastic inhibitor, antitumor agent and / or cancer metastasis inhibitor. I can expect. It is also useful for the prevention or treatment of AGE-related disorders, abnormalities, and / or diseases of blood cells. Diabetes complication treatment / prevention agent / arteriosclerosis treatment / prevention agent, thrombosis treatment / prevention agent, It can also be expected as an anti-inflammatory agent and / or an immunosuppressant. Furthermore, it can be expected as a therapeutic agent for Alzheimer, a therapeutic agent for joint destruction, and the like.

腸尿病合併症、老化に付随した各種疾患、アルツハイマー病、動脈硬化症、生体内タンパク質のグリケーション化に起因した疾患あるいは病気の発症及び／又は進展、及び腫瘍の浸潤又は拡散などの病的な状態あるいは症状の予防及び／又は治療に有用である。そして、糖尿病、糖尿病合併症、糖尿性腎症、糖尿性網膜症、糖尿性血管症、糖尿性細小血管症、腎糸球硬化症、高脂質アテローム性動脈硬化症、神経細胞毒性、ダウン症候群、頭部外傷に伴う痴呆、筋萎縮性側索硬化症、多発性硬化症、アミロイドーシス、自己免疫疾患、炎症、腫瘍癌、男性***不全症、創傷治療、歯周病、ニューロパーシ及び神経の変性症などの予防及び／又は治療に使用することが期待できる。本発明の有効成分化合物は、（１）血管内皮細胞増殖制御の破綻を阻害あるいは抑制する作用、（２）プロスタサイクリン産生能の低下を抑制する作用、（３）血管周皮細胞喪失あるいは減少の阻止あるいは抑制作用、（４）血管新生の阻害あるいは抑制作用、（５）血栓形成の阻害あるいは抑制作用、（６）オートサイクリン血管内皮増殖因子の誘導の阻止あるいは抑制作用、（７）微小血管内皮細胞の増殖の阻害あるいは抑制作用、（８）微小血管内皮細胞による管腔形成に対する阻害あるいは抑制作用、（９）プラスミノーゲンアクチベーターインヒビター１の亢進の阻害あるいは抑制作用、（１０）細胞外マトリックス蛋白産生の亢進を阻害あるいは抑制する作用、（１１）血管透過性の亢進の阻害あるいは抑制作用などの作用を期待できる。   Enterouria complications, various diseases associated with aging, Alzheimer's disease, arteriosclerosis, onset and / or progression of diseases or diseases caused by glycation of in vivo proteins, and pathological conditions such as tumor invasion or spread It is useful for the prevention and / or treatment of various conditions or symptoms. And diabetes, diabetic complications, diabetic nephropathy, diabetic retinopathy, diabetic angiopathy, diabetic microangiopathy, glomerulosclerosis, high lipid atherosclerosis, neurocytotoxicity, Down syndrome, Dementia associated with head trauma, amyotrophic lateral sclerosis, multiple sclerosis, amyloidosis, autoimmune disease, inflammation, tumor cancer, male erectile dysfunction, wound treatment, periodontal disease, neuropathy and neurodegeneration It can be expected to be used for prevention and / or treatment of such as. The active ingredient compound of the present invention comprises (1) an action that inhibits or suppresses the failure of vascular endothelial cell growth control, (2) an action that suppresses a decrease in prostacyclin production ability, and (3) a loss or reduction of vascular pericytes. Inhibiting or inhibiting action, (4) Inhibiting or inhibiting angiogenesis, (5) Inhibiting or inhibiting thrombus formation, (6) Inhibiting or inhibiting autocyclin vascular endothelial growth factor induction, (7) Microvascular endothelium Inhibition or suppression of cell proliferation, (8) Inhibition or suppression of lumen formation by microvascular endothelial cells, (9) Inhibition or suppression of enhancement of plasminogen activator inhibitor 1, (10) Extracellular matrix Inhibiting or suppressing the enhancement of protein production, (11) Inhibiting or suppressing the enhancement of vascular permeability It can be.

そこで以下に試験実施例を示し、さらに詳しく説明する。もちろん以下の例によって本
発明が限定されることはない。 Therefore, test examples are shown below and will be described in more detail. Of course, the present invention is not limited to the following examples.

以下の実施例においては、次のフェニルピロール誘導体が用いられている。   In the following examples, the following phenylpyrrole derivatives are used.

＜化合物（Ａ）の同定＞
ＬＣ−ＭＳによって、分子量４３６であって、質量分析から得られる精密質量と質量の同位体パターンからＣ２３Ｈ２４Ｎ４Ｏ５と確認された（図１）。

<Identification of Compound (A)>
By LC-MS, the molecular weight was 436, and it was confirmed as C23H24N4O5 from the accurate mass and mass isotope pattern obtained from mass spectrometry (FIG. 1).

また、ＮＭＲ，ＭＳの分析により以下のとおりその構造が同定された。   Moreover, the structure was identified as follows by the analysis of NMR and MS.

ＤＭＳＯ溶液を調製し、^１Ｈ−１Ｄ，ＣＯＳＹ，^１３Ｃ−ＨＭＱＣ，^１５Ｎ−ＨＭＱＣ，
^１３Ｃ−１Ｄ−ＤＥＰＴ−ＨＭＱＣを測定した。ケミカルシフト及びＨＭＱＣによる直接結合の存在、ＤＥＰＴによる^１３Ｃスピン多重度の解析結果から図２に示すような原子団の存在が示された。また^１３Ｃ−ＨＭＢＣ，^１５Ｎ−ＨＭＢＣ，^１Ｈ−ＮＯＥＳＹの測定結果より図２の矢印で示す相関が観測された。相関の密度から、原子団をＧ１−Ｇ４に分けた。 A DMSO solution is prepared, and ¹ H-1D, COSY, ¹³ C-HMQC, ¹⁵ N-HMQC,
¹³ C-1D-DEPT-HMQC was measured. The presence of atomic groups as shown in FIG. 2 was shown from the chemical shift and the presence of direct bonds due to HMQC, and the analysis results of ¹³ C spin multiplicity by DEPT. Moreover, the correlation shown by the arrow of FIG. 2 was observed from the measurement result of ¹³ C-HMBC, ¹⁵ N-HMBC, and ¹ H-NOESY. From the correlation density, the atomic group was divided into G1-G4.

Ｇ１については、ケミカルシフトより芳香環と、そこに結合したカルボニル炭素の存在が示された。共鳴線数が少ないことから対称性が高い構造であり、Ｈｉは強度がＨｆの１．６倍でＨｆに対しＨｉがメタ位を占めるるような構造であることが示唆される。またＣｇはＨｆ，Ｈｉのオルト位を占めると示唆される。   As for G1, the chemical shift indicated the presence of an aromatic ring and a carbonyl carbon bonded thereto. Since the number of resonance lines is small, it is a highly symmetric structure, and it is suggested that Hi has a strength 1.6 times that of Hf and that Hi occupies the meta position relative to Hf. It is also suggested that Cg occupies the ortho position of Hf and Hi.

Ｇ２は、密なＨＭＢＣ相関により環状構造であること、またケミカルシフトより芳香環であることが示唆される。環内の炭素原子は４個であり、^１５Ｎ−ＨＭＢＣ相関より、環内に窒素原子が含まれることが示されことから５員環ピロール構造の存在が示唆され、また非等価なメチル基が２つ存在し、それらからのＨＭＢＣ，ＮＯＥ相関を考慮すると、図３のような構造であると考えられる。 It is suggested that G2 is a cyclic structure by a close HMBC correlation, and that it is an aromatic ring from a chemical shift. The number of carbon atoms in the ring is 4, and the ¹⁵ N-HMBC correlation indicates that a nitrogen atom is contained in the ring, suggesting the existence of a 5-membered ring pyrrole structure, and the non-equivalent methyl group There are two, and considering the HMBC and NOE correlations from them, it is considered that the structure is as shown in FIG.

Ｇ３についてはケミカルシフト、ＨＭＢＣ相関からアミド基とそこに結合した２重結合の存在が示唆される。   For G3, the chemical shift and HMBC correlation suggest the presence of an amide group and a double bond bonded thereto.

Ｇ４については、ＣＯＳＹ，ＨＭＢＣ，ＤＥＰＴより３種のメチレンが連続して存在しており、そのうち１種はケミカルシフトより窒素に結合していると示唆される。また、そのメチレン及び隣接するメチレンは残る１種の倍の強度を示すことから、Ｒ−Ｎ−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＣＨ_２−ＣＨ_２−Ｎ−Ｒのような対称性の高い構造である。しかし、他のプロトンピーク数・強度から、Ｒの部分まで対称であるとは考えられず、ｍａｓｓとも矛盾が生じるため、上式が環化したピペリジン構造（図３）であると示唆される。 As for G4, three types of methylene are present continuously from COSY, HMBC, and DEPT, and one of them is suggested to be bonded to nitrogen by chemical shift. In addition, since the methylene and the adjacent methylene exhibit the remaining one kind of strength, they have high symmetry such as R—N—CH ₂ —CH ₂ —CH ₂ —CH ₂ —CH ₂ —N—R. Structure. However, it is not considered to be symmetrical from the other proton peak number / intensity to the R portion, and there is a contradiction with mass, suggesting that the above formula is a cyclized piperidine structure (FIG. 3).

上記で推定した各部分構造を、それらの間で観測されるＨＭＢＣ相関、ＮＯＥ相関及びｍａｓｓに矛盾しないよう連結すると、前記化合物（Ａ）の構造となる。
＜化合物（Ｂ）の同定＞
ＬＣ−ＭＳによって、分子量３９６であって、質量分析から得られる精密質量と質量の同位体パターンからＣ２０Ｈ２０Ｎ４Ｏ５と確認された（図４）。 When the partial structures estimated above are linked so as not to contradict the HMBC correlation, NOE correlation and mass observed between them, the structure of the compound (A) is obtained.
<Identification of Compound (B)>
By LC-MS, the molecular weight was 396, and it was confirmed as C20H20N4O5 from the accurate mass and mass isotope pattern obtained from mass spectrometry (FIG. 4).

また、ＮＭＲ，ＭＳの分析により以下のとおりその構造が同定された。   Moreover, the structure was identified as follows by the analysis of NMR and MS.

ＤＭＳＯ溶液を調製し、^１Ｈ−１Ｄ，ＣＯＳＹ，^１３Ｃ−ＨＭＱＣ，^１５Ｎ−ＨＭＱＣ，^１３Ｃ−１Ｄ−ＤＥＰＴ−ＨＭＱＣを測定した。ケミカルシフト及びＨＭＱＣによる直接結合の存在、ＤＥＰＴによる^１３Ｃスピン多重度の解析結果から図５に示すような原子団の存在が示された。また^１３Ｃ−ＨＭＢＣ，^１５Ｎ−ＨＭＢＣ，^１Ｈ−ＮＯＥＳＹの測定結果より図５の矢印で示す相関が観測された。相関の密度から、原子団をＧ１−Ｇ４に分けた。 A DMSO solution was prepared, and ¹ H-1D, COSY, ¹³ C-HMQC, ¹⁵ N-HMQC, ¹³ C-1D-DEPT-HMQC were measured. The presence of the atomic group as shown in FIG. 5 was shown from the analysis result of the chemical shift and the direct bond by HMQC and the analysis result of ¹³ C spin multiplicity by DEPT. Moreover, the correlation shown by the arrow of FIG. 5 was observed from the measurement result of ¹³ C-HMBC, ¹⁵ N-HMBC, and ¹ H-NOESY. From the correlation density, the atomic group was divided into G1-G4.

Ｇ１については、ＤＥＰＴ，ＨＭＢＣ相関及びケミカルシフトよりＮ原子に直接結合した２つのメチル基の存在が示唆された。また、ＨＭＢＣ，ＮＯＥ相関よりＧ１はカルボニル炭素を介してＧ２と結合していることが示唆された。   For G1, the presence of two methyl groups directly bonded to the N atom was suggested from the DEPT, HMBC correlation and chemical shift. Moreover, it was suggested from the HMBC and NOE correlation that G1 was couple | bonded with G2 via carbonyl carbon.

Ｇ２については、ケミカルシフト及びＨＭＢＣ相関より芳香環と、そこに結合した２つのカルボニル炭素の存在が示唆された。この芳香環上には３つの非等価なプロトンが存在し、それらからのＨＭＢＣ，ＮＯＥ相関よりＨｎ，ＨｇはＧ１をつなぐカルボニル炭素Ｃａのオルト位を、同時にＨｇ，Ｈｆはもう１つのカルボニル炭素Ｃｂのオルト位を占めることが示唆された。また、^１Ｈ−１Ｄよりカルボン酸の存在が示された為、Ｃｂはカルボン酸のカルボニル炭素であると考えられる。 For G2, the chemical shift and HMBC correlation suggested the presence of an aromatic ring and two carbonyl carbons bound thereto. There are three non-equivalent protons on this aromatic ring, and from the HMBC and NOE correlations from them, Hn and Hg are ortho positions of the carbonyl carbon Ca connecting G1, and at the same time Hg and Hf are another carbonyl carbon Cb. It is suggested that it occupies the ortho position. Moreover, since ¹ H-1D showed the presence of carboxylic acid, Cb is considered to be the carbonyl carbon of carboxylic acid.

Ｇ３は、密なＨＭＢＣ相関により環状構造であること、またケミカルシフトより芳香環であることが示唆される。環内の炭素原子は４個であり、^１５Ｎ−ＨＭＢＣ相関より、環内に窒素原子が含まれることが示されことから５員環ピロール構造の存在が示唆され、また非等価なメチル基が２つ存在し、それらからのＨＭＢＣ，ＮＯＥ相関を考慮すると、図６のような構造であると考えられる。 It is suggested that G3 is a cyclic structure by a dense HMBC correlation, and that it is an aromatic ring from a chemical shift. The number of carbon atoms in the ring is 4, and the ¹⁵ N-HMBC correlation indicates that a nitrogen atom is contained in the ring, suggesting the existence of a 5-membered ring pyrrole structure, and the non-equivalent methyl group There are two, and considering the HMBC and NOE correlations from them, it can be considered that the structure is as shown in FIG.

Ｇ４についてはケミカルシフト、ＨＭＢＣ相関から２つのアミド基とそこに結合した２重結合の存在が示唆される。また、ケミカルシフト、^１Ｈ−１Ｄにおけるアミドプロトンのピーク強度及びｍａｓｓより、一方のアミド窒素は２つのカルボニル炭素と結合しており、Ｇ４は環状構造を有すると考えられる。 For G4, the chemical shift and HMBC correlation suggest the presence of two amide groups and a double bond bonded thereto. From the chemical shift, peak intensity of amide proton in ¹ H-1D, and mass, one amide nitrogen is bonded to two carbonyl carbons, and G4 is considered to have a cyclic structure.

上記で推定した各部分構造を、それらの間で観測されるＨＭＢＣ相関、ＮＯＥ相関及びｍａｓｓに矛盾しないよう連結すると、前記化合物（Ｂ）の構造となる。
＜ＳＰＲ アッセイ＞
前記化合物（Ａ）と（Ｂ）についてＳＰＲアッセイを行った。このアッセイでは、化合物（Ａ）（Ｂ）とRAGEリガンド結合ドメインとの結合をSPR（表面プラズモン共鳴）
センサーであるビアコア(BIAcore2000)を用いて直接検出した。 When the partial structures estimated above are linked so as not to contradict the HMBC correlation, NOE correlation and mass observed between them, the structure of the compound (B) is obtained.
<SPR assay>
An SPR assay was performed on the compounds (A) and (B). In this assay, the binding between the compounds (A) and (B) and the RAGE ligand binding domain is determined by SPR (surface plasmon resonance).
The sensor was directly detected using Biacore 2000 as a sensor.

RAGEリガンド結合ドメインに化合物が結合すると、チップ上の質量増加により表面プラズモン共鳴が変化しRU値の上昇として検出される。   When a compound binds to the RAGE ligand binding domain, surface plasmon resonance changes due to an increase in mass on the chip and is detected as an increase in RU value.

RAGEリガンド結合ドメインはCM５センサーチップ表面のカルボキシメチルデキストランにアミンカップリング法によって5000RU固定した。ランニング緩衝液は10mM HEPES(pH 7.4), 0.15M NaCl, 3mM Na-EDTA, 0.005% Tween20を使用し、25°C、流速20microL/minで化合物をセンサーチップ表面に流した。ＳＰＲアッセイの結果を図７に示した。   The RAGE ligand binding domain was fixed to 5000 RU by carboxymethyldextran on the surface of the CM5 sensor chip by an amine coupling method. The running buffer was 10 mM HEPES (pH 7.4), 0.15 M NaCl, 3 mM Na-EDTA, 0.005% Tween 20, and the compound was allowed to flow on the surface of the sensor chip at 25 ° C. and a flow rate of 20 microL / min. The result of the SPR assay is shown in FIG.

いずれの場合もＲＡＧＥとの結合活性を示した。これら化合物は、いずれも細胞毒性もないことが明らかにされている。
＜Ｌｕｃｉｆｅｒａｓｅ アッセイ＞
その結果を図８に示した。 In any case, the binding activity to RAGE was shown. None of these compounds has been shown to be cytotoxic.
<Luciferase assay>
The results are shown in FIG.

膜型RAGEを強発現し、転写因子NF-kappaBで活性化されるプロモーター下流にホタルルシフェラーゼ遺伝子をレポーターとしてもつラットＣ６グリオーマ細胞にAGEと化合物を作用させた後、ルシフェラーゼ活性を測定した。non,無添加対照；BSA,非糖化ウシ血清アルブミン；AGE,グリセルアルデヒド由来AGE;Z-Lys, 陽性対象（Z-Lysをグリセルアルデヒドで糖化した低分子AGE標品）。縦軸、無添加対照を１とした相対値。AGEとAGE+Z-Lysはp<0.01、AGEとAGE+A(200)および AGEとAGE+B(200)はp<0.05で有意差があることがわかる。   The luciferase activity was measured after allowing AGE and a compound to act on rat C6 glioma cells that strongly express membrane RAGE and have a firefly luciferase gene as a reporter downstream of a promoter activated by the transcription factor NF-kappaB. non, additive-free control; BSA, non-glycated bovine serum albumin; AGE, glyceraldehyde-derived AGE; Z-Lys, positive subject (Z-Lys glycated with glyceraldehyde). Relative value with 1 on the vertical axis and no addition control. It can be seen that AGE and AGE + Z-Lys are significantly different at p <0.01, AGE and AGE + A (200) and AGE and AGE + B (200) at p <0.05.

化合物（Ａ）のＭＳ測定結果（上）と、［Ｃ２３Ｈ２４Ｎ４Ｏ５＋Ｈ］^＋の質量パターン（下）とを示した図である。It is the figure which showed the MS measurement result (top) of a compound (A), and the mass pattern (bottom) of [C23H24N4O5 + H] ^< +>. 化合物（Ａ）について原子団の存在を示した図である。It is a figure showing existence of an atomic group about compound (A). 化合物（Ａ）についてのフラグメント構造を示した図である。It is the figure which showed the fragment structure about a compound (A). 化合物（Ｂ）のＭＳ測定結果（上）と、［Ｃ２０Ｈ２０Ｎ４Ｏ５＋Ｈ］^＋の質量パターン（下）とを示した図である。It is the figure which showed the MS measurement result (top) of a compound (B), and the mass pattern (bottom) of [C20H20N4O5 + H] ⁺ . 化合物（Ｂ）についての原子団の存在を示した図である。It is the figure which showed presence of the atomic group about a compound (B). 化合物（Ｂ）についてのフラグメント構造を示した図である。It is the figure which showed the fragment structure about a compound (B). ＳＰＲ アッセイの結果を示した図である。It is the figure which showed the result of the SPR assay. Ｌｕｃｉｆｅｒａｓｅ アッセイの結果を示した図である。It is the figure which showed the result of Luciferase assay.

Claims (3)

次式

（式中のＲ^１およびＲ^２は、各々、カルボキシル基またはアミド基：ＣＯＮＲ^４Ｒ^５のいずれかであって、Ｒ^４およびＲ^５は、各々、水素原子またはアルキル基を示し、Ｒ^３は、次式（１）（２）；

のいずれかで示され、Ｒ^３が式（１）で示される場合には、前記Ｒ^１およびＲ^２はいずれもカルボキシル基を示す。）
で表されるフェニルピロール誘導体。 Next formula

(In the formula, R ¹ and R ² are each a carboxyl group or an amide group: CONR ⁴ R ⁵ , wherein R ⁴ and R ⁵ each represent a hydrogen atom or an alkyl group, and R ³ is And the following formulas (1) and (2);

In the case where R ³ is represented by formula (1), both R ¹ and R ² represent a carboxyl group. )
A phenylpyrrole derivative represented by: 請求項１に記載のフェニルピロール誘導体のうちの少くとも１種を有効成分として含有することを特徴とするＲＡＧＥ阻害剤。   A RAGE inhibitor comprising at least one of the phenylpyrrole derivatives according to claim 1 as an active ingredient. 糖尿病合併症、悪性腫瘍、動脈硬化疾患、神経変成疾患または炎症性疾患の治療剤であることを特徴とする請求項２のＲＡＧＥ阻害剤。   The RAGE inhibitor according to claim 2, which is a therapeutic agent for diabetic complications, malignant tumors, arteriosclerotic diseases, neurodegenerative diseases or inflammatory diseases.

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