JP2008545659A - オリゴヌクレオチドを標識する化合物及び方法 - Google Patents
オリゴヌクレオチドを標識する化合物及び方法 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2008545659A JP2008545659A JP2008512555A JP2008512555A JP2008545659A JP 2008545659 A JP2008545659 A JP 2008545659A JP 2008512555 A JP2008512555 A JP 2008512555A JP 2008512555 A JP2008512555 A JP 2008512555A JP 2008545659 A JP2008545659 A JP 2008545659A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- group
- composition
- compound
- oligonucleotide
- pair
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 0 *c(c(*)c12)c(*)c(*)c1c([N+]([O-])=O)c(*)c(*)c2N Chemical compound *c(c(*)c12)c(*)c(*)c1c([N+]([O-])=O)c(*)c(*)c2N 0.000 description 3
- IMTFIITVIYDUHW-UHFFFAOYSA-N Cc(cc(c1c2cccc1)N)c2[N+]([O-])=O Chemical compound Cc(cc(c1c2cccc1)N)c2[N+]([O-])=O IMTFIITVIYDUHW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BVPJPRYNQHAOPQ-UHFFFAOYSA-N Nc(c1ccccc11)ccc1[N+]([O-])=O Chemical compound Nc(c1ccccc11)ccc1[N+]([O-])=O BVPJPRYNQHAOPQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H21/00—Compounds containing two or more mononucleotide units having separate phosphate or polyphosphate groups linked by saccharide radicals of nucleoside groups, e.g. nucleic acids
- C07H21/04—Compounds containing two or more mononucleotide units having separate phosphate or polyphosphate groups linked by saccharide radicals of nucleoside groups, e.g. nucleic acids with deoxyribosyl as saccharide radical
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C245/00—Compounds containing chains of at least two nitrogen atoms with at least one nitrogen-to-nitrogen multiple bond
- C07C245/02—Azo compounds, i.e. compounds having the free valencies of —N=N— groups attached to different atoms, e.g. diazohydroxides
- C07C245/06—Azo compounds, i.e. compounds having the free valencies of —N=N— groups attached to different atoms, e.g. diazohydroxides with nitrogen atoms of azo groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings
- C07C245/10—Azo compounds, i.e. compounds having the free valencies of —N=N— groups attached to different atoms, e.g. diazohydroxides with nitrogen atoms of azo groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings with nitrogen atoms of azo groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings being part of condensed ring systems
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
- C12Q1/6813—Hybridisation assays
- C12Q1/6816—Hybridisation assays characterised by the detection means
- C12Q1/6818—Hybridisation assays characterised by the detection means involving interaction of two or more labels, e.g. resonant energy transfer
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
Abstract
Description
本願は、2005年5月20日に出願された米国特許出願第60/683,278号の優先権の恩典を主張するものであり、この出願は本明細書に参照として組入れられている。
本発明は、オリゴヌクレオチドを標識する化合物及び方法に関する。本発明は、少なくとも1種の明らかにされた化合物を含むキットも提供する。
オリゴヌクレオチドは、消光物質、フルオロフォア(fluorophore)、ビオチンなどのレポーター部分により、修飾又は標識されることが多い。これらの標識されたオリゴヌクレオチドは、結合及びその他の生物学的現象、DNA構造、高分子の会合、並びにタンパク質及びDNA複合体のサイズ及び移動度に関する情報を提供することができる。
本発明は、固形支持体にカップリングされたオキソ置換された反応体と、オキシム形成求核置換基を有するレポーター部分を反応し、レポーター部分と反応体の間にオキシム結合を形成する工程を含む、オリゴヌクレオチドへレポーター部分を連結する方法を提供する。レポーター部分は、消光物質、フルオロフォア、ビオチン、ジゴキシゲニン、ペプチド及びタンパク質を含むが、これらに限定されるものではない。本発明は、少なくとも2種の異なるレポーター部分で標識されたオリゴヌクレオチドも提供する。
Yは、オキシム結合を形成するためにオキソ基と反応することが可能である求核物質(nucleophile)含有基、例えばアミノオキシ又はヒドラジンなどである。加えて、R1/R2対、R3/R4対、R4/R5対及びR5/R6対は組み合わさって、5又は6個の環員を有する環構造を形成することができる。これらの環構造は、水素、ヘテロ原子置換のアルキル、ハロゲン、アルケニル、アルコキシ、アルコキシ-アルキル、ヒドロキシル、トリフルオロメチル、シアノ、ニトロ、アシル、アシルオキシ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、カルボキシル、カルボアルコキシル、カルボキシアミド、メルカプト、スルファモイル、フェニル、及びナフチルで置換することができる。
本発明は、抗原、ステロイド、ビタミン、薬物、ハプテン、代謝産物、毒素、環境汚染物質、アミノ酸、タンパク質、炭水化物、固形支持体、リンカー、及び脂質からなる群より選択される化合物に連結された消光物質を含む組成物を提供し、ここで消光物質は、オキシム結合を介し化合物へ結合される。本発明は更に、標識されたオリゴヌクレオチド及び固形支持体を含む組成物を提供する。本発明は、少なくとも1種の本発明の組成物を含むキットも提供する。
本発明は、オリゴヌクレオチドの合成時にレポーター部分でオリゴヌクレオチドを標識する新規方法を提供する。本方法は、いくつかの異なるレポーター部分の単独のオリゴヌクレオチドへの付着を可能にする。
本発明の目的に関して、用語「レポーター部分」は、低濃度の化合物の直接的又は間接的のいずれかの検出を可能にする置換基を意味する。好適なレポーター部分は、(1)例えば、比色分析、蛍光又はルミネセンスにより、検出可能なシグナルを発生する酵素、例としてホースラディッシュペルオキシダーゼ、アルカリホスファターゼ、β-ガラクトシダーゼ又はグルコース-6-リン酸デヒドロゲナーゼ;(2)蛍光化合物、ルミネセンス化合物又は色素化合物などの、発色団;(3)電子顕微鏡によるか、又は伝導度、アンペロメトリー、ボルタンメトリー、もしくはインピーダンス測定などによるそれらの電気特性を通じ検出することができる電子密度を伴う基;並びに、(4)屈折率、表面プラズマ共鳴もしくは接触角の変動などの光学的方法、又は原子間力分光法、もしくはトンネル効果などの物理的方法を用い、検出することができる基を含むが、これらに限定されるものではない。その他の好適なレポーター部分は、ビオチン、ジゴキシゲニン、ペプチド、タンパク質、抗体、糖タンパク質、及び糖を含むが、これらに限定されるものではない。
用語「固形支持体」は、オリゴヌクレオチド合成に適合可能である支持体のいずれかを意味する。例えば、ガラス、細孔性ガラス(CPG)、高分子材料、ポリスチレンビーズ、コーティングガラスなどが適している。
本方法は、複数のレポーター部分が、単独のオリゴヌクレオチドへ導入されることを可能にする。これらのレポーター部分は、同じ又は異なって良い。単独のオリゴヌクレオチド上の異なるレポーター部分の使用は、単独のオリゴヌクレオチドを使用して複数のシグナルを検出することを可能にする。検出は、同時又は逐次であってよい。
本発明の目的に関する用語「連結基」とは、例えば、ホスホロアミダイトのケトン基など、試薬の「相補的官能性」と反応し、この試薬へ式(I)のアゾ消光化合物を接続する結合を形成することが可能である化学基を意味する。様々な色素を様々な化合物と複合する多くの様式を明らかにしている、R. 35 Haugland「Molecular Probes Handbook of Fluorescent Probes and Research Chemicals」(1992)Molecular Probes, Inc.を参照することとし、これは本明細書に参照として組入れられている。
他のアミノオキシ置換されたレポーター部分の例は、図15に示されている。
6-カルボキシフルオレセイン(6-FAM) 520nm
テトラクロロフルオレセイン(TET) 536nm
ヘキサクロロフルオレセイン(HEX) 556nm
Cy3 570nm
テトラメチルローダミン(TAMRA) 580nm
Cy3.5 596nm
カルボキシ-x-ローダミン(ROX) 605nm
Texas Red 610nm
Cy5 667nm
Cy5.5 694nm
アミノオキシ活性化された(1-ニトロ-4-ナフチルアゾ)-N,N-ジエタノールアニリン消光物質(6)の合成
エタノール中の濃アンモニア溶液2mL中の(5) 10mgの溶液を、55℃で一晩インキュベーションした。溶媒を減圧下で除去し、(6)を提供し、これは更に精製することなく使用した。
ケトンホスホロアミダイト(16)の合成
N-Fmoc-3-アミノプロピルソルケタール(10):3-アミノプロピルソルケタール(9)を、Misiuraらの手順(Misiura, K., Durrant, I., Evans, M.R., Gait, M.J. (1990) Nucleic Acids Research, v. 18, No. 15, pp. 4345-4354、これは本明細書に参照として組入れられている。)に従い、市販のソルケタール(7)から出発し合成した。(9)を、真空蒸留することなく、粗のまま次工程で使用した。粗生成物(9) (12.85g;68mmol)を、無水CH3CN (100mL)に攪拌しながら溶解した。NaHCO3 (4.2g;50mmol)を、引き続きFmoc-OSu (16.9g;50mmol)を添加した。反応混合物を、室温で一晩攪拌した。溶媒を蒸発させ、油状残渣を、EtOAc (500mL)と5%NaHCO3 (150mL)の間で分配した。有機相を分離し、5%NaHCO3 (2x150mL)、ブライン(150mL)で洗浄し、無水Na2SO4上で乾燥した。生成物(10)を、シリカゲルカラム(5x20cm)上で、EtOAc:CH2Cl2:石油エーテル(PE)(15:15:70)で負荷し、EtOAc: CH2Cl2:PE(1:1:2)で溶離するフラッシュクロマトグラフィーにより単離した。単離された生成物(10)は、EtOAc:CH2Cl2:PE(1:1:1)中のTLCによりRf 0.4を有した。収量:油状物20.95g。1H NMR (CDCl3) δ 1.35 (s, 3H), 1.45 (s, 3H), 1.81 (m, 2H), 3.34 (q, 2H), 3.47-3.60 (m, 4H), 3.75 (dd, 1H), 4.07 (dd, 1H), 4.22-4.32 (m, 2H), 4.42 (d, 2H), 5.29 (br.t, 1H), 7.33 (dt, 2H), 7.42 (t, 2H), 7.62 (d, 2H), 7.78 (d, 2H)。
(1-ニトロ-4-ナフチルアゾ)-N,N-ジエタノールアニリン消光物質を伴うアミノオキシ複合したCPG支持体の合成(20a及び20b)
ケトン置換された細孔性ガラス(CPG)支持体の合成:スペーサーC3 CPG (2g;44μmol/g)を、50mLのペプチド合成反応装置中に入れ、ジクロロメタン中の3%ジクロロ酢酸で数回にわけて(30mL)処理することにより(全ての色が支持体から洗浄除去されるまで)脱トリチル化した。その後これを、アルゴン大気下で、CH3CN (5x50mL;最後の2回は無水CH3CNで)及び「アクチベーター」(30mL;無水CH3CN中の0.45M 5-エチルチオ-1H-テトラゾール)で洗浄した。次に、CPG(18)を、適当なホスホロアミダイトの溶液(公開された手順に従い合成されたホスホロアミダイト(17a):Dey, S. Shepard, T., Org Lett, v.3, pp. 3983-3986 (2001))、これは本明細書に参照として組入れられている;「アクチベーター」10mLと混合した無水CH3CN 10mL中(250μmol))により、Ar掃流下で室温で30分間処理した。これらの試薬を、真空吸引により除去し、新鮮な部分と交換した。このカップリング反応を繰り返し;改質されたCPGを濾過し、CH3CN (5x30mL)で洗浄した。この固形支持体を、THF/Py/H2O中の0.1M I2で処理し(3x30mL;各処理は5分間)、CH3CN (5x30mL)で洗浄した。未反応のヒドロキシルを、Ac2O:MeIm:Py(10:10:80)で処理することにより(3x30mL;各処理5分間)、キャップ形成した。誘導体化されたCPG(19a)を、CH3CN (5x30mL)、CH2Cl2 (3x30mL)で洗浄し、真空で一晩乾燥した。DMT-負荷は通常、30μmol/gを上回った。
アミノ-オキシ消光物質誘導体の消光効率
本実施例は、フルオレセイン及び実施例1〜3において調製されたアゾ消光物質の両方を含有するオリゴヌクレオチドのシグナル対ノイズ比(S:N)を明らかにしている。蛍光-消光されたプローブは、分子生物学の様々な適用において使用される。所定のフルオロフォア及び消光物質が一緒に十分機能するかどうかを評価するひとつの方法は、シグナル対ノイズ比(S:N)の測定により、ここで相対蛍光は、未変性の構成(バックグラウンド蛍光又は「ノイズ」)において測定され、フルオロフォア及び消光物質が分離された場合に測定された蛍光(「シグナル」)と比較される。
定量的リアルタイムPCRアッセイでの蛍光プローブにおけるアミノオキシ-消光物質の使用
蛍光-消光されたプローブを使用し、標的核酸配列を検出することができる。通常、このような検出は、ポリメラーゼ連鎖反応(PCR)などの、増幅工程に連続される。本実施例は、アミノオキシ消光物質で修飾された蛍光プローブの使用は、関連する適用であるリアルタイムPCRアッセイにおいて機能することを明らかにしている。
フォワードプライマー:HP48 For
AGAAGGTCATCATCTGCCATCG 配列番号:5
リバースプライマー:HP48 Rev
TCCAGACTTTGGCTGTTCGGAT 配列番号:6
HP48 For HP48プローブ
AGAAGGTCATCATCTGCCATCGGGGCACCCGGTCCCCCTCCCCCAGCGACCCTGATTATGGCCTCCCTCCCCTAGCAGGACACTCTCTCTCATGGACTGATGAAAAACAACTCAAGGAACAAAATATTATCCGAACAGCCAAAGTCTGGA
HP48 Rev
配列番号:7
dU塩基連結を介したCPG複合体として合成時に付着されたアミノオキシ(1-ニトロ-4-ナフチルアゾ)-N,N-ジエタノールアニリン消光物質(6)(IBAOdU)を取込んでいるプローブ配列番号:2に関する増幅追跡は、図7に示した。この結果は、3つ組反応の良好なクラスター化を示し、標的核酸の異なる投入濃度間で明確に区別された。
オリゴヌクレオチドの3'-末端への直接連結によりCPG複合体として合成時に付着された市販のEclipse消光物質(Eclipse)を取込んでいるプローブ配列番号:4に関する増幅追跡は、図9に示した。この結果は、3つ組反応の良好なクラスター化を示し、標的核酸の異なる投入濃度間で明確に区別された。
定量的リアルタイムPCRアッセイにおける蛍光プローブ機能での内部アミノオキシ-dU消光物質の使用
消光基は、通常、合成を容易にするために、プローブ配列の末端に配置される。新規アミノオキシ消光物質は、塩基修飾されたアミノオキシ消光物質-dU部分としての消光物質の内部取込みを可能にする。本実施例は、内部アミノオキシ-消光物質で修飾された蛍光プローブが、リアルタイムPCRアッセイにおいて、標準の末端-消光されたプローブよりも、より良く機能することを明らかにする。
Enolase For Enolaseプローブ
AACTCTGAAGTCATCCTGCCAGTCCCGGCGTTCAATGTCATCAATGGCGGTTCTCATGCTGGCAACAAGCTGGCCATGCAGGAGTTCATGATCCTCCCAGTCGGTGCAGCAAACTTCAGGGAAGCCATGCGCATTGGAGCAGAGGTTTACCACAACCTGAAG
Enolase Rev
配列番号:10
吸収スペクトル
本実施例は、アゾ消光物質(6)を含むようにその5'末端が修飾されたオリゴヌクレオチドの吸収スペクトルを示している。オリゴヌクレオチドは、最後の添加サイクルが、分子(6)で実行される、標準自動ホスホロアミダイトヌクレオチド合成法を用いて作製した。オリゴヌクレオチドの組成は、以下に示している。
配列番号:15 (アゾ消光物質)-CAGAGTACCTGA
図13に示したように、吸収スペクトルは、広幅であり、420〜620nmの範囲に広がり、ピーク吸収は531nmであった。この吸収範囲は、分子生物学適用において通常使用される多種多様なフルオロフォアの蛍光放出と重なっている。FRETベースの消光機構に関して、このスペクトルは、フルオレセインのスペクトル範囲において色素に最大消光能を提供するように、位置付けられている。
アミノオキシ基は、アルコール(21)とN-ヒドロキシフタルイミドの間のMitsunobu反応、それに続くフタルイミド加水分解を介し、レポーター部分に導入される(図4のスキーム4)。
この方法は、塩基性条件に対し安定しているフルオロフォア、消光物質、ビオチン、ペプチド及び他のレポーター部分の誘導体化に使用することができる。
アルキルアミノ官能性を有する一部のペプチド、タンパク質、レポーター部分のような、塩基で不安定な分子の場合、アミノオキシ基は、対応するNHSエステル(28)との反応、それに続く酸に不安定なMMT基の除去により導入される(図5のスキーム5)。
フルオレセインアミノオキシ誘導体(33)の合成
本実施例は、下記式の化合物の化学合成を明らかにしている:
Claims (59)
- レポーター部分をオリゴヌクレオチドへ連結する方法であり、オキシム形成求核置換基を有するレポーター部分を、固形支持体にカップリングされたオキソ置換された反応体と反応し、レポーター部分と反応体の間にオキシム結合を形成する工程を含む、方法。
- レポーター部分が、消光物質、フルオロフォア、ビオチン、ジゴキシゲニン、ペプチド、タンパク質、抗体、糖タンパク質及び糖からなる群より選択される、請求項1記載の方法。
- オキシム形成求核物質が、アミノオキシである、請求項3記載の方法。
- オキシム形成求核物質が、ヒドラジンである、請求項3記載の方法。
- 1個よりも多いレポーター部分が、標識されたオリゴヌクレオチドに連結され、及びここでレポーター部分は、同じ又は異なる、請求項1記載の方法。
- レポーター部分が、化合物34、化合物35、化合物36及び化合物37からなる群より選択される、請求項1記載の方法。
- オキシム結合を介してオリゴヌクレオチドの異なるヌクレオチドへ連結された少なくとも2個の異なるレポーター部分を含む、標識されたオリゴヌクレオチドを含有する組成物。
- レポーター部分が、消光物質、フルオロフォア、ビオチン、ジゴキシゲニン、ペプチド、タンパク質、抗体、糖タンパク質及び糖からなる群より独立して選択される、請求項9記載の組成物。
- レポーター部分のひとつが、化合物34、化合物35、化合物36及び化合物37からなる群より選択される、請求項9記載の組成物。
- オリゴヌクレオチドが、その3'末端で固形支持体へ連結されている、請求項12記載の組成物。
- レポーター部分が、オリゴヌクレオチドの3'末端に連結される、請求項12記載の組成物。
- レポーター部分が、オリゴヌクレオチドの5'末端に連結される、請求項12記載の組成物。
- レポーター部分が、内部ヌクレオチドへ連結される、請求項12記載の組成物。
- オキシム結合を介してオリゴヌクレオチドのヌクレオチドへ連結されたフルオロフォアを更に含む、請求項12記載の組成物。
- オキシム形成求核物質が、アミノオキシである、請求項19記載の化合物。
- オキシム形成求核物質が、ヒドラジンである、請求項19記載の化合物。
- 電子求引基が、ハロゲン、NO2、SO3RS、SO2N(RN)2、CN、CNS、ケト、及びアルコキシ基からなる群より独立して選択され;ここで、RN及びRSは、分枝した又は分枝していない、飽和又は不飽和で、及び置換又は非置換であるC1-C10アルキル基、並びに置換又は非置換のアリール基からなる群より独立して選択される、請求項19記載の化合物。
- R1-6の少なくともひとつは、電子求引基である、請求項19記載の化合物。
- R1-6の少なくともひとつは、アルキル基である、請求項19記載の化合物。
- アルキル基は、1〜10個の炭素原子を有する、請求項24記載の化合物。
- R1-6の少なくともひとつが、アリール基である、請求項19記載の化合物。
- R1-6の少なくともひとつが、ヘテロアリール基である、請求項19記載の化合物。
- R1-6の少なくともひとつが、水素である、請求項19記載の化合物。
- R1及びR2対、R3及びR4対、R4及びR5対、又はR5及びR6対の少なくともひとつが組み合わさって、5又は6個の環員を有する環を形成する、請求項19記載の化合物。
- 環が、6個の環員を有する、請求項29記載の化合物。
- R7が、アリール基である、請求項19記載の化合物。
- アリール基が、フェニル、ナフチル、キシリル、トリル、ピリジル、及びアニリニルからなる群より選択される、請求項31記載の化合物。
- アリール基が、アニリニル基である、請求項32記載の化合物。
- オキシム結合を介して固形支持体に連結されたレポーター部分を含む、組成物。
- 核酸塩基が、アデニン、グアニン、シトシン、ウラシル及びチミンからなる群より選択される、請求項39記載の組成物。
- 核酸塩基が、ウラシルである、請求項40記載の組成物。
- 抗原、ステロイド、ビタミン、薬物、ハプテン、代謝産物、毒素、環境汚染物質、アミノ酸、タンパク質、炭水化物、固形支持体、リンカー、及び脂質からなる群より選択される化合物に連結された消光物質を含有する、組成物であり、ここで消光物質が、オキシム結合を介して化合物へ結合されている、組成物。
- 組成物が、更にフルオロフォアを含む、請求項42記載の組成物。
- 化合物が、フルオロフォアの蛍光を約90%又はそれよりも多く消光する、請求項45記載の組成物。
- 化合物が、フルオロフォアの蛍光を約95%又はそれよりも多く消光する、請求項45記載の組成物。
- フルオロフォアが、フルオレセインである、請求項45記載の組成物。
- オリゴヌクレオチドのハイブリダイゼーションを検出する方法であり:
a)第一のオリゴヌクレオチドを、第二のオリゴヌクレオチドと共にインキュベーションし、第二のオリゴヌクレオチドは、オキシム結合を介してヌクレオチドに連結された請求項19記載の消光化合物を含有し、ここで2種のオリゴヌクレオチドの少なくとも一方は、請求項19記載の消光化合物により消光することができる蛍光を伴うフルオロフォアを含み、ここで第一及び第二のヌクレオチドのハイブリダイゼーションは、フルオロフォアと請求項19記載の消光化合物の空間的関係を変更し、蛍光の変化を生じる工程;並びに
b)インキュベーションされたヌクレオチドの蛍光を測定する工程を含む方法。 - フルオロフォア及び消光化合物が両方とも、第二のオリゴヌクレオチドへ連結される、請求項49記載の方法。
- ハイブリダイズされた構造からフルオロフォア及び消光化合物のひとつを放出する工程を更に含む、請求項49記載の方法。
- 請求項9記載の組成物を含む、キット。
- 前記組成物の使用説明書を更に含む、請求項52記載のキット。
- 請求項12記載の組成物を含む、キット。
- 前記組成物の使用説明書を更に含む、請求項54記載のキット。
- 請求項42記載の組成物を含む、キット。
- 前記組成物の使用説明書を更に含む、請求項56記載のキット。
- 請求項45記載の組成物を含む、キット。
- 前記組成物の使用説明書を更に含む、請求項58記載のキット。
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US68327805P | 2005-05-20 | 2005-05-20 | |
PCT/US2006/019552 WO2006127507A2 (en) | 2005-05-20 | 2006-05-22 | Compounds and methods for labeling oligonucleotides |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2008545659A true JP2008545659A (ja) | 2008-12-18 |
Family
ID=37452651
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2008512555A Pending JP2008545659A (ja) | 2005-05-20 | 2006-05-22 | オリゴヌクレオチドを標識する化合物及び方法 |
Country Status (6)
Country | Link |
---|---|
US (6) | US7476735B2 (ja) |
EP (1) | EP1907560B1 (ja) |
JP (1) | JP2008545659A (ja) |
AU (1) | AU2006251637B2 (ja) |
CA (1) | CA2601554A1 (ja) |
WO (1) | WO2006127507A2 (ja) |
Families Citing this family (33)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US7019129B1 (en) * | 2000-05-09 | 2006-03-28 | Biosearch Technologies, Inc. | Dark quenchers for donor-acceptor energy transfer |
EP2281798A1 (en) * | 2002-09-20 | 2011-02-09 | Integrated Dna Technologies, Inc. | Anthraquinone quencher dyes, their methods of preparation and use |
US7439341B2 (en) * | 2003-11-14 | 2008-10-21 | Integrated Dna Technologies, Inc. | Fluorescence quenching azo dyes, their methods of preparation and use |
WO2006127507A2 (en) | 2005-05-20 | 2006-11-30 | Integrated Dna Technologies, Inc. | Compounds and methods for labeling oligonucleotides |
GB0601302D0 (en) * | 2006-01-23 | 2006-03-01 | Semikhodskii Andrei | Diagnostic methods and apparatus |
WO2007106907A2 (en) * | 2006-03-15 | 2007-09-20 | Integrated Dna Technologies, Inc. | Nucleic acid monomers with 2'-chemical moieties |
ES2393758T3 (es) | 2006-03-15 | 2012-12-27 | Micronics, Inc. | Ensayos integrados de ácidos nucleicos |
EP2147009A4 (en) * | 2007-05-18 | 2014-01-08 | Dharmacon Inc | NOVEL CHROMOPHORE SILYL PROTECTION GROUPS AND THEIR USE IN THE CHEMICAL SYNTHESIS OF OLIGONUCLEOTIDES |
ATE505562T1 (de) * | 2007-09-28 | 2011-04-15 | 3M Innovative Properties Co | Doppel-oligonukleotid- nukleinsäurenachweisverfahren |
EP2085434A1 (en) * | 2008-01-11 | 2009-08-05 | Universita' Degli Studi di Firenze | Disperse dyes soluble in water |
PT2757091T (pt) | 2008-04-01 | 2017-07-24 | Biosearch Tech Inc | Sondas de fluoróforo e supressor de fluorescência de ácido nucleico estabilizadas |
US9155471B2 (en) | 2009-05-27 | 2015-10-13 | Lumicell, Inc'. | Methods and systems for spatially identifying abnormal cells |
JP5791634B2 (ja) | 2010-01-29 | 2015-10-07 | マイクロニクス, インコーポレイテッド | サンプル−回答型のマイクロ流体カートリッジ |
US9506057B2 (en) | 2010-03-26 | 2016-11-29 | Integrated Dna Technologies, Inc. | Modifications for antisense compounds |
AU2011230496B2 (en) * | 2010-03-26 | 2015-09-17 | Integrated Dna Technologies, Inc. | Methods for enhancing nucleic acid hybridization |
CA2809457C (en) | 2010-09-07 | 2019-07-30 | Integrated Dna Technologies, Inc. | Modifications for antisense compounds |
US9314304B2 (en) | 2010-12-08 | 2016-04-19 | Lumicell, Inc. | Methods and system for image guided cell ablation with microscopic resolution |
EP2751567B1 (en) * | 2011-09-01 | 2019-05-08 | University of Iowa Research Foundation | Oligonucleotide-based probes for detection of bacterial nucleases |
CN104703971B (zh) * | 2012-08-02 | 2018-08-21 | 株式会社百奥尼 | 新型偶氮化合物及其利用、以及其制造方法 |
WO2014030066A2 (en) | 2012-08-22 | 2014-02-27 | Bernitz Mats Nilsson | Methods for identifying nucleic acid sequences |
JP6935167B2 (ja) | 2012-12-21 | 2021-09-15 | ペルキネルマー ヘルス サイエンシーズ, インコーポレイテッド | マイクロ流体使用のための低弾性フィルム |
US20150346097A1 (en) | 2012-12-21 | 2015-12-03 | Micronics, Inc. | Portable fluorescence detection system and microassay cartridge |
JP6498125B2 (ja) | 2012-12-21 | 2019-04-10 | マイクロニクス, インコーポレイテッド | 流体回路および関連する製造方法 |
EP2959000B1 (en) * | 2013-02-25 | 2018-08-15 | Integrated DNA Technologies Inc. | Naphthyl-azo modifications for antisense compounds |
CA2906056A1 (en) | 2013-03-14 | 2014-09-25 | Lumicell, Inc. | Medical imaging device and methods of use |
AU2014262710B2 (en) | 2013-05-07 | 2019-09-12 | Perkinelmer Health Sciences, Inc. | Methods for preparation of nucleic acid-containing samples using clay minerals and alkaline solutions |
US10386377B2 (en) | 2013-05-07 | 2019-08-20 | Micronics, Inc. | Microfluidic devices and methods for performing serum separation and blood cross-matching |
WO2014182847A1 (en) | 2013-05-07 | 2014-11-13 | Micronics, Inc. | Device for preparation and analysis of nucleic acids |
WO2015120406A1 (en) | 2014-02-07 | 2015-08-13 | University Of Iowa Research Foundation | Oligonucleotide-based probes and methods for detection of microbes |
US9957393B2 (en) | 2015-03-30 | 2018-05-01 | Enzo Biochem, Inc. | Monoazo dyes with cyclic amine as fluorescence quenchers |
BR112017022117A2 (pt) * | 2015-04-15 | 2018-07-10 | Biosearch Technologies, Inc. | “sondas duplas supressoras” |
EP4139456A4 (en) | 2020-04-22 | 2024-05-22 | Harvard College | ISOTHERMAL METHODS, COMPOSITIONS, KITS AND SYSTEMS FOR THE DETECTION OF NUCLEIC ACIDS |
WO2023086970A2 (en) | 2021-11-12 | 2023-05-19 | Arna Genomics Us Incorporated | Methods and compositions for analyzing nucleic acids and nucleases in a body fluid as indicators of disease |
Family Cites Families (105)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US2264303A (en) | 1940-03-27 | 1941-12-02 | Eastman Kodak Co | Azo compounds and material colored therewith |
US3407189A (en) | 1956-07-25 | 1968-10-22 | Sandoz Ltd | Water-insoluble monoazo dyestuffs |
US3218309A (en) * | 1961-08-14 | 1965-11-16 | Parke Davis & Co | Azo compounds |
GB1394368A (en) | 1972-12-14 | 1975-05-14 | Ici Ltd | Disperse azo dyestuffs |
US3970617A (en) | 1974-03-07 | 1976-07-20 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Navy-blue nitrophenylazonaphthylamino dyes |
GB1533121A (en) | 1975-08-04 | 1978-11-22 | Ici Ltd | Disperse nitro disazo dyestuffs |
DE2546535A1 (de) | 1975-10-17 | 1977-04-28 | Bayer Ag | Azofarbstoffe |
US4358535A (en) | 1980-12-08 | 1982-11-09 | Board Of Regents Of The University Of Washington | Specific DNA probes in diagnostic microbiology |
US4439356A (en) | 1981-03-03 | 1984-03-27 | Syva Company | Unsymmetrical fluorescein derivatives |
US4711955A (en) | 1981-04-17 | 1987-12-08 | Yale University | Modified nucleotides and methods of preparing and using same |
CA1180647A (en) | 1981-07-17 | 1985-01-08 | Cavit Akin | Light-emitting polynucleotide hybridization diagnostic method |
CA1190838A (en) | 1981-07-17 | 1985-07-23 | Cavit Akin | Homogeneous nucleic acid hybridization diagnostics by non-radiative energy transfer |
CA1185177A (en) | 1981-07-17 | 1985-04-09 | Larry E. Morrison | Non-radiative energy transfer immunochemical technique |
CA1223222A (en) | 1984-02-22 | 1987-06-23 | Nanibhushan Dattagupta | Immobilized nucleic acid-containing probes |
US4683194A (en) | 1984-05-29 | 1987-07-28 | Cetus Corporation | Method for detection of polymorphic restriction sites and nucleic acid sequences |
US4820630A (en) | 1984-11-23 | 1989-04-11 | Digene Diagnostics, Incorporated | Assay for nucleic acid sequences, particularly genetic lesions, using interactive labels |
US4883750A (en) | 1984-12-13 | 1989-11-28 | Applied Biosystems, Inc. | Detection of specific sequences in nucleic acids |
US4683202A (en) | 1985-03-28 | 1987-07-28 | Cetus Corporation | Process for amplifying nucleic acid sequences |
US4683195A (en) | 1986-01-30 | 1987-07-28 | Cetus Corporation | Process for amplifying, detecting, and/or-cloning nucleic acid sequences |
DE3526565A1 (de) | 1985-07-25 | 1987-02-05 | Boehringer Mannheim Gmbh | Resorufin-derivate, verfahren zu deren herstellung sowie deren verwendung in fluoreszenzimmunoassays |
US5011769A (en) | 1985-12-05 | 1991-04-30 | Meiogenics U.S. Limited Partnership | Methods for detecting nucleic acid sequences |
US4868105A (en) | 1985-12-11 | 1989-09-19 | Chiron Corporation | Solution phase nucleic acid sandwich assay |
US4996143A (en) | 1985-12-23 | 1991-02-26 | Syngene, Inc. | Fluorescent stokes shift probes for polynucleotide hybridization |
US4868103A (en) | 1986-02-19 | 1989-09-19 | Enzo Biochem, Inc. | Analyte detection by means of energy transfer |
GB8612087D0 (en) | 1986-05-19 | 1986-06-25 | Ici Plc | Hybridisation probes |
US4889818A (en) | 1986-08-22 | 1989-12-26 | Cetus Corporation | Purified thermostable enzyme |
JP2527340B2 (ja) | 1986-12-15 | 1996-08-21 | アプライド バイオシステムズ インコーポレイテッド | ロ―ダミン染料の5−及び6−スクシニミジルカルボキシレ―ト異性体 |
US6270961B1 (en) | 1987-04-01 | 2001-08-07 | Hyseq, Inc. | Methods and apparatus for DNA sequencing and DNA identification |
US5202231A (en) | 1987-04-01 | 1993-04-13 | Drmanac Radoje T | Method of sequencing of genomes by hybridization of oligonucleotide probes |
US5525464A (en) | 1987-04-01 | 1996-06-11 | Hyseq, Inc. | Method of sequencing by hybridization of oligonucleotide probes |
US5585481A (en) | 1987-09-21 | 1996-12-17 | Gen-Probe Incorporated | Linking reagents for nucleotide probes |
US4914210A (en) | 1987-10-02 | 1990-04-03 | Cetus Corporation | Oligonucleotide functionalizing reagents |
US5124246A (en) | 1987-10-15 | 1992-06-23 | Chiron Corporation | Nucleic acid multimers and amplified nucleic acid hybridization assays using same |
CA1323293C (en) | 1987-12-11 | 1993-10-19 | Keith C. Backman | Assay using template-dependent nucleic acid probe reorganization |
DE68911648T2 (de) | 1988-03-24 | 1994-06-23 | Univ Iowa Res Found | Katalytische hybridisierungs-systeme zum nachweis von nukleinsäuresequenzen, die auf deren aktivität als kofaktoren in katalytischen reaktionen basieren in denen eine komplementäre, markierte nukleinsäureprobe gespalten wird. |
EP0436547B1 (en) | 1988-05-10 | 1994-11-30 | E.I. Du Pont De Nemours And Company | Process for rapid nucleic acid detection |
AU629845B2 (en) | 1988-08-30 | 1992-10-15 | Abbott Laboratories | Detection and amplification of target nucleic acid sequences |
US5849482A (en) | 1988-09-28 | 1998-12-15 | Epoch Pharmaceuticals, Inc. | Crosslinking oligonucleotides |
US5824796A (en) | 1988-09-28 | 1998-10-20 | Epoch Pharmaceuticals, Inc. | Cross-linking oligonucleotides |
US5118801A (en) | 1988-09-30 | 1992-06-02 | The Public Health Research Institute | Nucleic acid process containing improved molecular switch |
US5272259A (en) | 1988-12-23 | 1993-12-21 | Bayer Aktiengesellschaft | Stilbene dyestuffs and light-polarizing films or sheets containing stilbene |
WO1990014353A1 (en) | 1989-05-18 | 1990-11-29 | Microprobe Corporation | Crosslinking oligonucleotides |
DE3916595A1 (de) | 1989-05-22 | 1990-11-29 | Boehringer Mannheim Gmbh | Verfahren zur nichtradioaktiven messung der nucleinsaeuresynthese in eukaryontischen zellen |
US5108892A (en) | 1989-08-03 | 1992-04-28 | Promega Corporation | Method of using a taq dna polymerase without 5'-3'-exonuclease activity |
US5451463A (en) | 1989-08-28 | 1995-09-19 | Clontech Laboratories, Inc. | Non-nucleoside 1,3-diol reagents for labeling synthetic oligonucleotides |
US5366860A (en) | 1989-09-29 | 1994-11-22 | Applied Biosystems, Inc. | Spectrally resolvable rhodamine dyes for nucleic acid sequence determination |
US5188934A (en) | 1989-11-14 | 1993-02-23 | Applied Biosystems, Inc. | 4,7-dichlorofluorescein dyes as molecular probes |
ES2089038T3 (es) | 1990-01-26 | 1996-10-01 | Abbott Lab | Procedimiento mejorado para amplificar acidos nucleicos blanco aplicable para la reaccion en cadena de polimerasa y ligasa. |
US5214136A (en) * | 1990-02-20 | 1993-05-25 | Gilead Sciences, Inc. | Anthraquinone-derivatives oligonucleotides |
ATE167523T1 (de) | 1990-05-11 | 1998-07-15 | Microprobe Corp | Teststreifen zum eintauchen für nukleinsäure- hybridisierungsassays und verfahren zur kovalenten immobilisierung von oligonucleotiden |
US5210015A (en) | 1990-08-06 | 1993-05-11 | Hoffman-La Roche Inc. | Homogeneous assay system using the nuclease activity of a nucleic acid polymerase |
US5512667A (en) | 1990-08-28 | 1996-04-30 | Reed; Michael W. | Trifunctional intermediates for preparing 3'-tailed oligonucleotides |
DE69132843T2 (de) | 1990-12-06 | 2002-09-12 | Affymetrix Inc N D Ges D Staat | Identifizierung von Nukleinsäuren in Proben |
EP0528512A1 (en) | 1991-08-20 | 1993-02-24 | Pioneer Electronic Corporation | Recording medium |
JP3509859B2 (ja) | 1991-11-07 | 2004-03-22 | ナノトロニクス,インコーポレイテッド | 供与体−供与体エネルギー転移系を創製するための発色団および蛍光団でコンジュゲート化されたポリヌクレオチドのハイブリダイゼーション |
TW393513B (en) | 1991-11-26 | 2000-06-11 | Isis Pharmaceuticals Inc | Enhanced triple-helix and double-helix formation with oligomers containing modified pyrimidines |
US5502177A (en) | 1993-09-17 | 1996-03-26 | Gilead Sciences, Inc. | Pyrimidine derivatives for labeled binding partners |
US5538848A (en) | 1994-11-16 | 1996-07-23 | Applied Biosystems Division, Perkin-Elmer Corp. | Method for detecting nucleic acid amplification using self-quenching fluorescence probe |
US5556752A (en) | 1994-10-24 | 1996-09-17 | Affymetrix, Inc. | Surface-bound, unimolecular, double-stranded DNA |
DE19509038A1 (de) * | 1995-03-14 | 1996-09-19 | Boehringer Mannheim Gmbh | C-Nukleosid-Derivate und deren Verwendung in der Detektion von Nukleinsäuren |
US5801155A (en) | 1995-04-03 | 1998-09-01 | Epoch Pharmaceuticals, Inc. | Covalently linked oligonucleotide minor grove binder conjugates |
US6312894B1 (en) | 1995-04-03 | 2001-11-06 | Epoch Pharmaceuticals, Inc. | Hybridization and mismatch discrimination using oligonucleotides conjugated to minor groove binders |
AU693023B2 (en) * | 1995-05-05 | 1998-06-18 | Applied Biosystems, Llc | Methods and reagents for combined PCR amplification and hybridization probing assay |
US6531589B1 (en) | 1995-06-01 | 2003-03-11 | Hybridon, Inc. | Base protecting groups and synthons for oligonucleotide synthesis |
WO1996040662A2 (en) * | 1995-06-07 | 1996-12-19 | Cellpro, Incorporated | Aminooxy-containing linker compounds and their application in conjugates |
US6147205A (en) | 1995-12-15 | 2000-11-14 | Affymetrix, Inc. | Photocleavable protecting groups and methods for their use |
GB9602265D0 (en) | 1996-02-05 | 1996-04-03 | Amersham Int Plc | Benzophenoxazine dyes |
JP3898228B2 (ja) | 1996-04-12 | 2007-03-28 | ザ パブリック ヘルス リサーチ インスティチュート オブ ザ シティー オブ ニューヨーク インク | 検出プローブ、キット及びアッセイ |
US6582921B2 (en) * | 1996-07-29 | 2003-06-24 | Nanosphere, Inc. | Nanoparticles having oligonucleotides attached thereto and uses thereof |
US6576752B1 (en) * | 1997-02-14 | 2003-06-10 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Aminooxy functionalized oligomers |
US6117973A (en) * | 1997-02-24 | 2000-09-12 | Georgia Tech Research Corp. | PNA monomers with electron donor or acceptor |
US5846726A (en) | 1997-05-13 | 1998-12-08 | Becton, Dickinson And Company | Detection of nucleic acids by fluorescence quenching |
US6465175B2 (en) | 1997-09-04 | 2002-10-15 | Bayer Corporation | Oligonucleotide probes bearing quenchable fluorescent labels, and methods of use thereof |
DE69829760T3 (de) * | 1997-09-12 | 2016-04-14 | Exiqon A/S | Bi- und tri-zyklische - nukleosid, nukleotid und oligonukleotid-analoga |
US6485901B1 (en) | 1997-10-27 | 2002-11-26 | Boston Probes, Inc. | Methods, kits and compositions pertaining to linear beacons |
US6028183A (en) | 1997-11-07 | 2000-02-22 | Gilead Sciences, Inc. | Pyrimidine derivatives and oligonucleotides containing same |
US6007992A (en) | 1997-11-10 | 1999-12-28 | Gilead Sciences, Inc. | Pyrimidine derivatives for labeled binding partners |
AU758463B2 (en) | 1998-02-04 | 2003-03-20 | Applied Biosystems, Llc | Determination of a genotype of an amplification product at multiple allelic sites |
DE19811618C1 (de) * | 1998-03-17 | 2000-08-31 | Andreas Jenne | Ribozym codierende DNA und ein Oligonucleotidsubstrat enthaltende Zusammensetzung und Verfahren zur Messung von Transkriptionsraten |
US5952202A (en) | 1998-03-26 | 1999-09-14 | The Perkin Elmer Corporation | Methods using exogenous, internal controls and analogue blocks during nucleic acid amplification |
US6127121A (en) * | 1998-04-03 | 2000-10-03 | Epoch Pharmaceuticals, Inc. | Oligonucleotides containing pyrazolo[3,4-D]pyrimidines for hybridization and mismatch discrimination |
US6117986A (en) | 1998-06-10 | 2000-09-12 | Intergen Company, L.P. | Pyrimidines linked to a quencher |
ATE277065T1 (de) | 1999-01-05 | 2004-10-15 | Bio Merieux | Funktionalisierte verbindung, gegebenenfalls markierte polynukleotide und verfahren zur detektion einer ziel-nukleinsäure |
US6255476B1 (en) * | 1999-02-22 | 2001-07-03 | Pe Corporation (Ny) | Methods and compositions for synthesis of labelled oligonucleotides and analogs on solid-supports |
AU751168B2 (en) | 1999-04-23 | 2002-08-08 | Molecular Probes, Inc. | Xanthene dyes and their application as luminescence quenching compounds |
US6531591B1 (en) * | 1999-07-07 | 2003-03-11 | Exiqon A/S | Synthesis of stable quinone and photoreactive ketone phosphoramidite reagents for solid phase synthesis of photoreactive-oligomer conjugates |
US6339147B1 (en) | 1999-07-29 | 2002-01-15 | Epoch Biosciences, Inc. | Attachment of oligonucleotides to solid supports through Schiff base type linkages for capture and detection of nucleic acids |
US6114518A (en) | 1999-09-30 | 2000-09-05 | Becton, Dickinson And Company | Synthesis and use of labelled phosphoramidite compositions |
US6727356B1 (en) | 1999-12-08 | 2004-04-27 | Epoch Pharmaceuticals, Inc. | Fluorescent quenching detection reagents and methods |
US20040081959A9 (en) * | 1999-12-08 | 2004-04-29 | Epoch Biosciences, Inc. | Fluorescent quenching detection reagents and methods |
JP2004501869A (ja) | 2000-03-22 | 2004-01-22 | ソルリンク・インコーポレイテッド | ヒドラジンベース及びカルボニルベースの二官能性架橋剤 |
US6686461B1 (en) | 2000-03-22 | 2004-02-03 | Solulink Bioscience, Inc. | Triphosphate oligonucleotide modification reagents and uses thereof |
US6465644B1 (en) | 2000-05-02 | 2002-10-15 | Applera Corporation | Sulfonated [8,9] benzophenoxazine dyes and the use of their labelled conjugates |
US7019129B1 (en) * | 2000-05-09 | 2006-03-28 | Biosearch Technologies, Inc. | Dark quenchers for donor-acceptor energy transfer |
US6323337B1 (en) | 2000-05-12 | 2001-11-27 | Molecular Probes, Inc. | Quenching oligonucleotides |
US6448407B1 (en) | 2000-11-01 | 2002-09-10 | Pe Corporation (Ny) | Atropisomers of asymmetric xanthene fluorescent dyes and methods of DNA sequencing and fragment analysis |
CA2441279A1 (en) * | 2001-03-16 | 2002-09-26 | Qtl Biosystems, Llc | Fluorescent polymer superquenching-based bioassays |
US20030082547A1 (en) * | 2001-08-27 | 2003-05-01 | Ewing Gregory J. | Non-fluorescent quencher compounds and biomolecular assays |
EP2281798A1 (en) | 2002-09-20 | 2011-02-09 | Integrated Dna Technologies, Inc. | Anthraquinone quencher dyes, their methods of preparation and use |
US20040180343A1 (en) * | 2003-03-12 | 2004-09-16 | Weber Georg F. | Compositions and methods for detecting nucleic acids |
ATE408023T1 (de) * | 2003-06-17 | 2008-09-15 | Medical Res Council | Verfahren zum testen der lkb1- phosphorylierungsaktivität |
US7439341B2 (en) * | 2003-11-14 | 2008-10-21 | Integrated Dna Technologies, Inc. | Fluorescence quenching azo dyes, their methods of preparation and use |
WO2006127507A2 (en) * | 2005-05-20 | 2006-11-30 | Integrated Dna Technologies, Inc. | Compounds and methods for labeling oligonucleotides |
WO2007106907A2 (en) * | 2006-03-15 | 2007-09-20 | Integrated Dna Technologies, Inc. | Nucleic acid monomers with 2'-chemical moieties |
AU2011230496B2 (en) | 2010-03-26 | 2015-09-17 | Integrated Dna Technologies, Inc. | Methods for enhancing nucleic acid hybridization |
-
2006
- 2006-05-22 WO PCT/US2006/019552 patent/WO2006127507A2/en active Application Filing
- 2006-05-22 US US11/438,606 patent/US7476735B2/en active Active
- 2006-05-22 AU AU2006251637A patent/AU2006251637B2/en not_active Ceased
- 2006-05-22 JP JP2008512555A patent/JP2008545659A/ja active Pending
- 2006-05-22 EP EP06770717A patent/EP1907560B1/en not_active Not-in-force
- 2006-05-22 CA CA002601554A patent/CA2601554A1/en not_active Abandoned
-
2009
- 2009-01-12 US US12/352,125 patent/US7605243B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2009-08-04 US US12/535,220 patent/US7645872B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2009-11-23 US US12/623,811 patent/US7803936B2/en active Active
-
2010
- 2010-08-10 US US12/853,741 patent/US8030460B2/en not_active Expired - Fee Related
-
2011
- 2011-09-02 US US13/224,571 patent/US8258276B2/en active Active
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
EP1907560B1 (en) | 2013-01-23 |
EP1907560A4 (en) | 2011-04-13 |
US20090299041A1 (en) | 2009-12-03 |
US7605243B2 (en) | 2009-10-20 |
US7803936B2 (en) | 2010-09-28 |
EP1907560A2 (en) | 2008-04-09 |
WO2006127507A2 (en) | 2006-11-30 |
US20110319606A1 (en) | 2011-12-29 |
US7476735B2 (en) | 2009-01-13 |
US8030460B2 (en) | 2011-10-04 |
US7645872B2 (en) | 2010-01-12 |
US20090118482A1 (en) | 2009-05-07 |
CA2601554A1 (en) | 2006-11-30 |
WO2006127507A3 (en) | 2007-04-05 |
US8258276B2 (en) | 2012-09-04 |
US20100076181A1 (en) | 2010-03-25 |
US20060263816A1 (en) | 2006-11-23 |
US20100298554A1 (en) | 2010-11-25 |
AU2006251637B2 (en) | 2012-06-14 |
AU2006251637A1 (en) | 2006-11-30 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP2008545659A (ja) | オリゴヌクレオチドを標識する化合物及び方法 | |
US8084588B2 (en) | Fluorescence quenching azo dyes, their methods of preparation and use | |
JP4694201B2 (ja) | アントラキノン消光色素、それらの製造方法及び使用 | |
CN107922454B (zh) | 双猝灭剂探针 | |
US20030143591A1 (en) | Nucleic acid probes and methods to detect and/or quantify nucleic acid analytes | |
EP3124622B1 (en) | Fluorescent labeled single-stranded nucleic acid and use thereof | |
EP2397464B1 (en) | Synthesis of novel azo-dyes and their use in oligonucleotide synthesis | |
US8530634B2 (en) | Method of oligonucleotide labeling using cycloaddition reaction | |
CN116075597A (zh) | 在生物测定中使用的能量转移染料缀合物 | |
RU2795062C2 (ru) | Новые комбинации гасителя и репортерного красителя | |
US20230304932A1 (en) | Compositions, systems and methods for biological analysis involving energy transfer dye conjugates and analytes comprising the same | |
EP3277832B1 (en) | Monoazo dyes with cyclic amine as fluorescence quenchers |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A521 | Written amendment |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821 Effective date: 20080820 |
|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20090522 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20120618 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20120914 |
|
A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20120924 |
|
A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20130422 |