JP2008100948A - Nerve cell differentiation enhancer containing hydrogen sulfide and/or hydrogen sulfide salt and its method - Google Patents
Nerve cell differentiation enhancer containing hydrogen sulfide and/or hydrogen sulfide salt and its method Download PDFInfo
- Publication number
- JP2008100948A JP2008100948A JP2006285195A JP2006285195A JP2008100948A JP 2008100948 A JP2008100948 A JP 2008100948A JP 2006285195 A JP2006285195 A JP 2006285195A JP 2006285195 A JP2006285195 A JP 2006285195A JP 2008100948 A JP2008100948 A JP 2008100948A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- hydrogen sulfide
- cell differentiation
- cell
- salt
- nerve
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Images
Landscapes
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
Description
本発明は、神経細胞用の細胞分化促進剤およびその方法に関する。より詳細には、硫化水素および／または硫化水素塩を含有する神経細胞分化促進剤およびその細胞分化促進方法に関する。 The present invention relates to a cell differentiation promoting agent for nerve cells and a method thereof. More specifically, the present invention relates to a nerve cell differentiation promoting agent containing hydrogen sulfide and / or hydrogen sulfide salt and a method for promoting cell differentiation thereof.
硫化水素（Ｈ２Ｓ）は一般的に有毒ガスとして知られ、Ｈ２Ｓに関するほとんどの研究がその毒性作用に集中し(Reiffenstein RJら, Annu. Rev. Pharmacol. Toxicol., vol. 32, pp.109-134 (1992))、その生理学的機能については注目されていなかった。しかしながら、Ｈ２Ｓが、ラット、ヒトおよびウシの脳内で合成されることが報告され（Goodwin LRら, J. Anal. Toxicol., vol. 13, pp. 105-109(1989)；Warenycia MWら, Neurotoxicology, vol. 10, pp. 191-200 (1989)；Savage JCおよびGould DH, J. Chromatogr., vol. 526, pp. 540-545 (1990)）、Ｈ２Ｓが神経伝達物質としての働きを初め生理機能を有し得ることが示唆されている。 Hydrogen sulfide (H 2 S) is generally known as a toxic gas, and most research on H 2 S concentrates on its toxic effects (Reiffenstein RJ et al., Annu. Rev. Pharmacol. Toxicol., Vol. 32, pp .109-134 (1992)), its physiological function was not noted. However, H 2 S has been reported to be synthesized in rat, human and bovine brain (Goodwin LR et al., J. Anal. Toxicol., Vol. 13, pp. 105-109 (1989); Warenycia MW Neurotoxicology, vol. 10, pp. 191-200 (1989); Savage JC and Gould DH, J. Chromatogr., Vol. 526, pp. 540-545 (1990)), H 2 S as a neurotransmitter It has been suggested that it may have physiological functions such as
内因性の硫化水素（Ｈ２Ｓ）は、シスタチオニンβ−シンターゼ（ＣＢＳ）およびシスタチオニンγ−リアーゼ（ＣＳＥ）を含めたピリドキサル−５'−リン酸依存性酵素によってシステインから形成し得る（Stipanuk MHおよびBeck PW, Biochem. J., vol. 206, pp. 267-277 (1982)；Griffith OW, Methods in enzymology, vol. 143, pp. 366-376 (1987)；Erickson PFら, Biochem. J., vol. 269, pp. 335-340 (1990)；Swaroop Mら, J. Biol. Chem., vol. 267, pp. 11455-11461 (1992)）。ＣＢＳおよびＣＳＥの双方は、肝臓および腎臓におけるそれらの活性について研究されている（Stipanuk MHおよびBeck PW, Biochem. J., vol. 206, pp. 267-277 (1982)；Erickson PFら, Biochem. J., vol. 269, pp. 335-340 (1990)；Swaroop Mら, J. Biol. Chem., vol. 267, pp. 11455-11461 (1992)）。 Endogenous hydrogen sulfide (H 2 S) can be formed from cysteine by pyridoxal-5′-phosphate dependent enzymes including cystathionine β-synthase (CBS) and cystathionine γ-lyase (CSE) (Stipanuk MH and Beck PW, Biochem. J., vol. 206, pp. 267-277 (1982); Griffith OW, Methods in enzymology, vol. 143, pp. 366-376 (1987); Erickson PF et al., Biochem. J., vol. 269, pp. 335-340 (1990); Swaroop M et al., J. Biol. Chem., vol. 267, pp. 11455-11461 (1992)). Both CBS and CSE have been studied for their activity in the liver and kidney (Stipanuk MH and Beck PW, Biochem. J., vol. 206, pp. 267-277 (1982); Erickson PF et al., Biochem. J., vol. 269, pp. 335-340 (1990); Swaroop M et al., J. Biol. Chem., Vol. 267, pp. 11455-11461 (1992)).
また、ＣＢＳは脳内で発現され、ＣＢＳ阻害薬ヒドロキシルアミンおよびアミノオキシアセテートは、Ｈ２Ｓの生成を抑制するが、ＣＢＳアクチベーターＳ−アデノシル−Ｌ−メチオニン（ＳＡＭ）はＨ２Ｓ生成を増強する。生理的濃度のＨ２Ｓは、特にＮＭＤＡ受容体の活性を増強し、海馬における長期増強（ＬＴＰ）を誘起する（Abe KおよびKimura H, J. Neurosci., vol. 16, pp. 1066-1071 (1996)）。ｃＡＭＰを媒介とした経路は、Ｈ２ＳによってＮＭＤＡ受容体の変調に関与し得る（Kimura H, Biochem. Biophys. Res. Commun., vol. 267, pp. 129-133 (2000)）。また、Ｈ２Ｓは、視床下部からのコルチコトロピン放出ホルモンの放出を調節できる（Russo CDら, J. Neuroendocrinol., vol. 12, pp. 225-233 (2000)）。これらの観察に基づいて、ＣＢＳが脳内のＨ２Ｓを生成でき、かつＨ２Ｓは神経調節物質として機能し得ることが提案された（Abe KおよびKimura H, J. Neurosci., vol. 16, pp. 1066-1071 (1996)）。 CBS is also expressed in the brain, and the CBS inhibitors hydroxylamine and aminooxyacetate suppress the production of H 2 S, whereas CBS activator S-adenosyl-L-methionine (SAM) inhibits H 2 S production. Strengthen. Physiological concentrations of H 2 S specifically enhance NMDA receptor activity and induce long-term potentiation (LTP) in the hippocampus (Abe K and Kimura H, J. Neurosci., Vol. 16, pp. 1066-1071 (1996)). The cAMP-mediated pathway may be involved in the modulation of NMDA receptors by H 2 S (Kimura H, Biochem. Biophys. Res. Commun., vol. 267, pp. 129-133 (2000)). H 2 S can also regulate the release of corticotropin releasing hormone from the hypothalamus (Russo CD et al., J. Neuroendocrinol., Vol. 12, pp. 225-233 (2000)). Based on these observations, it was proposed that CBS can generate H 2 S in the brain and that H 2 S can function as a neuromodulator (Abe K and Kimura H, J. Neurosci., Vol. 16, pp. 1066-1071 (1996)).
さらに、近年、脳を初めとする多くの細胞、組織あるいは臓器において合成酵素によって内因性に産生され多彩な生理活性を有することが知られている２種のガス、すなわち一酸化窒素（ＮＯ）および一酸化炭素（ＣＯ）との関連性について注目されている。 Furthermore, in recent years, two types of gases that are endogenously produced by synthetic enzymes and known to have various physiological activities in many cells, tissues or organs including the brain, namely nitric oxide (NO) and Attention has been focused on the relationship with carbon monoxide (CO).
しかしながら、毒性学的な側面から肝臓および腎臓、ならびに生理学的な側面から脳においてＨ２Ｓが注目されているが、神経細胞に対するＨ２Ｓの分化促進作用に関する報告は現在まで存在しない。
なお、本願発明では、溶液に溶かすことにより物理的にＨ２Ｓを発生させる硫化水素塩として硫化水素ナトリウムを用いた。
In the present invention, sodium hydrogen sulfide was used as a hydrogen sulfide salt that physically generates H 2 S by dissolving in a solution.
本発明は上記従来技術に鑑みて行われたものであり、本発明の目的は、効果的な神経細胞用の細胞分化促進剤およびその方法を提供することである。 The present invention has been made in view of the above prior art, and an object of the present invention is to provide an effective cell differentiation promoting agent for nerve cells and a method thereof.
本発明者らは、神経細胞用の細胞分化促進剤として好ましい薬剤を開発すべく研究を行い、新たな作用機序を見出すために鋭意研究した結果、硫化水素および硫化水素塩が、神経細胞の分化促進作用を有することを初めて見出し、本発明を完成した。 The present inventors have conducted research to develop a drug that is preferable as a cell differentiation promoting agent for nerve cells, and as a result of intensive research to find a new mechanism of action, hydrogen sulfide and hydrogen sulfide salts The inventors found for the first time that they have a differentiation promoting action and completed the present invention.
すなわち、本発明は、
（１） 硫化水素および／または硫化水素塩を有効成分として含有してなる神経細胞用の細胞分化促進剤。
（２） 該神経細胞が、Ｔタイプのカルシウムチャネルを発現する神経細胞である（１）記載の細胞分化促進剤。
（３） 該硫化水素塩が、硫化水素ナトリウム、硫化水素カリウム、硫化水素カルシウムおよび硫化水素アンモニウムよりなる群から選択される（１）または（２）に記載の細胞分化促進剤。
（４） 該硫化水素塩が、硫化水素ナトリウムである（３）記載の細胞分化促進剤。
（５） ＤＤＳ製剤化されている（１）〜（４）のいずれかに記載の細胞分化促進剤。
（６） 神経細胞と、硫化水素および／または硫化水素塩とを接触させて、該神経細胞の細胞分化を促進することを特徴とする神経細胞の細胞分化促進方法。
（７） 該神経細胞が、Ｔタイプのカルシウムチャネルを発現する神経細胞である（６）記載の細胞分化促進方法。
（８） 該硫化水素塩が、硫化水素ナトリウム、硫化水素カリウム、硫化水素カルシウムおよび硫化水素アンモニウムよりなる群から選択される（６）または（７）記載の細胞分化促進方法。
（９） 該硫化水素塩が、硫化水素ナトリウムである（８）記載の細胞分化促進方法を提供するものである。
That is, the present invention
(1) A cell differentiation promoting agent for nerve cells comprising hydrogen sulfide and / or hydrogen sulfide salt as an active ingredient.
(2) The cell differentiation promoting agent according to (1), wherein the nerve cell is a nerve cell expressing a T-type calcium channel.
(3) The cell differentiation promoter according to (1) or (2), wherein the hydrogen sulfide salt is selected from the group consisting of sodium hydrogen sulfide, potassium hydrogen sulfide, calcium hydrogen sulfide, and ammonium hydrogen sulfide.
(4) The cell differentiation promoting agent according to (3), wherein the hydrogen sulfide salt is sodium hydrogen sulfide.
(5) The cell differentiation promoting agent according to any one of (1) to (4), which is formulated as a DDS preparation.
(6) A method for promoting cell differentiation of a nerve cell, comprising bringing a nerve cell into contact with hydrogen sulfide and / or a hydrogen sulfide salt to promote cell differentiation of the nerve cell.
(7) The method for promoting cell differentiation according to (6), wherein the nerve cell is a nerve cell expressing a T-type calcium channel.
(8) The method for promoting cell differentiation according to (6) or (7), wherein the hydrogen sulfide salt is selected from the group consisting of sodium hydrogen sulfide, potassium hydrogen sulfide, calcium hydrogen sulfide, and ammonium hydrogen sulfide.
(9) The method for promoting cell differentiation according to (8), wherein the hydrogen sulfide salt is sodium hydrogen sulfide.
本発明により、新規な作用機序を有し、かつ優れた神経細胞の分化促進作用を有する細胞分化促進剤ならびにその分化促進方法が提供される。 According to the present invention, there are provided a cell differentiation promoting agent having a novel mechanism of action and having an excellent nerve cell differentiation promoting action, and a method for promoting the differentiation.
硫化水素および硫化水素塩は、天然に存在するか、または化学反応もしくは微生物（硫酸還元細菌）反応等により人工的に合成されてもよい。硫化水素塩として、例えば、硫化水素ナトリウム（ＮａＨＳ）、硫化水素カリウム（ＫＨＳ）、硫化水素カルシウム（Ｃａ（ＨＳ）２）、硫化水素アンモニウム（ＮＨ４ＨＳ）のごときＨＳ−イオンのアルカリ金属塩、アルカリ土類金属塩、アンモニウム塩が挙げられ、好ましくは、硫化水素ナトリウムである。 Hydrogen sulfide and hydrogen sulfide salts may exist in nature, or may be artificially synthesized by chemical reaction or microbial (sulfate-reducing bacteria) reaction. Examples of hydrogen sulfide salts include alkali metal salts of HS - ions such as sodium hydrogen sulfide (NaHS), potassium hydrogen sulfide (KHS), calcium hydrogen sulfide (Ca (HS) 2 ), ammonium hydrogen sulfide (NH 4 HS), Examples include alkaline earth metal salts and ammonium salts, preferably sodium hydrogen sulfide.
神経細胞とは、情報の伝達と処理を担う神経系の形態的および機能的単位をいう。神経細胞の形態学的特徴として、神経細胞体、樹状突起、軸索等が挙げられ、神経細胞の興奮活動性は、細胞上でイオンを透過させる役割を有するタンパク質である種々のイオンチャネル群（例えば、Ｔ−、Ｌ−またはＮ−タイプのカルシウムチャネル、カリウムチャネル、ナトリウムチャネル等）により調節されている。 Nerve cells refer to the morphological and functional units of the nervous system that are responsible for the transmission and processing of information. The morphological features of nerve cells include nerve cell bodies, dendrites, axons, etc. The excitability of nerve cells is a group of various ion channels that are proteins that have the role of permeating ions on the cells. (Eg, T-, L-, or N-type calcium channels, potassium channels, sodium channels, etc.).
Ｔ−タイプのカルシウムチャネルを発現する神経細胞系の例として、ＴＴ、ＩＭＲ−３２およびＹ７９のごときヒト細胞系、Ｃ−セル ６−２３、ＧＨ３のごときラット細胞系、ならびにＭＡｂ−７Ｂ、Ｎ１Ｅ−１１５、ＮＧ１０８−１５、ＮＤ７−２３およびＡＴ−１のごときマウス細胞系が挙げられる。 Examples of neural cell lines expressing T-type calcium channels include human cell lines such as TT, IMR-32 and Y79, rat cell lines such as C-cell 6-23, GH3, and MAb-7B, N1E- Mouse cell lines such as 115, NG108-15, ND7-23 and AT-1.
神経細胞の「分化」とは、個々の神経細胞が神経回路を形成するために特殊化した細胞になることをいい、特に、神経回路を形成するための神経細胞の神経突起伸長等の形態学的変化ならびに電気生理学的変化を意味する。 “Differentiation” of a neuron means that each individual neuron becomes a specialized cell to form a neural circuit, and in particular, morphology such as neurite outgrowth of the neuron to form a neural circuit. Meaning as well as electrophysiological changes.
神経細胞の分化促進のために用いる場合、本発明の細胞分化促進剤を、そのままあるいは適当な溶媒（例えば、水）に希釈する等の各種処理を施して、ヒトおよび動物について、ｉｎ ｖｉｖｏまたはｉｎ ｖｉｔｒｏにて使用することができ、医薬品、医薬部外品等に配合して使用することもできる。 When used for promoting the differentiation of nerve cells, the cell differentiation promoting agent of the present invention is subjected to various treatments such as dilution as it is or in an appropriate solvent (for example, water) to give humans and animals in vivo or in vivo. It can be used in vitro, and can also be used by blending with pharmaceuticals, quasi drugs and the like.
硫化水素（Ｈ２Ｓ）相当量とは、硫化水素塩をモル量に換算し、そのモル量に対応する硫化水素の質量をいう。 The hydrogen sulfide (H 2 S) equivalent amount refers to the mass of hydrogen sulfide corresponding to the molar amount obtained by converting the hydrogen sulfide salt into a molar amount.
本発明の細胞分化促進剤のヒトまたは動物への投与方法としては、脳および脊髄への直接投与や経口投与、静脈内投与以外に、経粘膜投与、経皮投与、筋肉内投与、皮下投与、直腸内投与、脊髄腔内投与等が適宜選択でき、その投与方法に応じて、種々の製剤として用いることができる。
以下に、各製剤について記載するが、本発明において用いられる剤型はこれらに限定されるものではなく、医薬製剤分野において通常用いられる各種製剤として用いることができる。
Examples of the method of administering the cell differentiation promoter of the present invention to humans or animals include direct administration to the brain and spinal cord, oral administration, intravenous administration, transmucosal administration, transdermal administration, intramuscular administration, subcutaneous administration, Rectal administration, intraspinal administration, and the like can be selected as appropriate, and can be used as various preparations depending on the administration method.
Hereinafter, each formulation is described, but the dosage form used in the present invention is not limited to these, and can be used as various formulations usually used in the pharmaceutical formulation field.
投与の用量は、治療されるべき特定の疾患、治療されるべき疾患の重篤度、特定の対象の年齢、体重、一般的身体状態、当業者によく知られるような対象が取り得る他の薬物療法に依存し、対象の血液中の化合物および／または代謝物の血中レベルまたは濃度、および／または治療されるべき特定の疾患に対する対象の応答を測定することに応じて広く変更できる。典型的には、神経細胞用の細胞分化促進剤として用いる場合には、経口投与量は、硫化水素塩として、３ｍｇ／ｋｇ〜３６０ｍｇ／ｋｇの範囲が好ましく、より好ましくは１０ｍｇ／ｋｇ〜１８０ｍｇ／ｋｇである。全身投与を行う場合、特に静脈内投与の場合には老若男女または体型等により変動があるが、有効血中濃度が、硫化水素塩として、３ｍｇ／ｍＬ〜３６０ｍｇ／ｍＬ、より好ましくは１０ｍｇ／ｍＬ〜１８０ｍｇ／ｍＬの範囲となるように投与される。 The dosage of administration depends on the particular disease to be treated, the severity of the disease to be treated, the age, weight, general physical condition of the particular subject, and other factors that the subject may take, as is well known to those skilled in the art Depending on the drug therapy, it can vary widely depending on measuring the blood level or concentration of compounds and / or metabolites in the subject's blood and / or the subject's response to the particular disease to be treated. Typically, when used as a cell differentiation promoter for nerve cells, the oral dose is preferably in the range of 3 mg / kg to 360 mg / kg, more preferably 10 mg / kg to 180 mg / kg as a hydrogen sulfide salt. kg. In the case of systemic administration, especially in intravenous administration, there are variations depending on age, sex or body type, but the effective blood concentration is 3 mg / mL to 360 mg / mL, more preferably 10 mg / mL as a hydrogen sulfide salt. Administered to be in the range of ~ 180 mg / mL.
経口投与を行う場合の剤型として、散剤、顆粒剤、カプセル剤、丸剤、錠剤、エリキシル剤、懸濁剤、乳剤およびシロップ剤等があり、適宜選択することができる。また、それら製剤について徐放化、安定化、易崩壊化、難崩壊化、腸溶性化、易吸収化等の修飾を施すことができる。また、口腔内局所投与を行う場合の剤型として、咀嚼剤、舌下剤、バッカル剤、トローチ剤、軟膏剤、貼布剤、液剤等があり、適宜選択することができる。また、それら製剤について徐放化、安定化、易崩壊化、難崩壊化、腸溶性化、易吸収化等の修飾を施すことができる。 The dosage forms for oral administration include powders, granules, capsules, pills, tablets, elixirs, suspensions, emulsions and syrups, which can be selected as appropriate. Moreover, modifications such as sustained release, stabilization, easy disintegration, poor disintegration, enteric solubility, easy absorption, etc. can be applied to these preparations. In addition, dosage forms for local oral administration include chewing agents, sublingual agents, buccal agents, lozenges, ointments, patch agents, liquid agents, and the like, which can be selected as appropriate. Moreover, modifications such as sustained release, stabilization, easy disintegration, poor disintegration, enteric solubility, easy absorption, etc. can be applied to these preparations.
上記の各剤型について、公知のドラッグデリバリーシステム（ＤＤＳ）の技術を採用することができる。本明細書でいうＤＤＳ製剤とは、徐放化製剤、局所適用製剤（トローチ、バッカル錠、舌下錠等）、薬物放出制御製剤、腸溶性製剤および胃溶性製剤等、投与経路、バイオアベイラビリティー、副作用等を勘案した上で、最適の製剤形態にした製剤をいう。 For each of the above dosage forms, a known drug delivery system (DDS) technique can be employed. As used herein, DDS preparations include sustained release preparations, topical preparations (troches, buccal tablets, sublingual tablets, etc.), drug release control preparations, enteric and gastric preparations, etc., administration route, bioavailability In addition, it refers to a preparation in an optimal preparation form in consideration of side effects and the like.
ＤＤＳの構成要素には基本的に薬物、薬物放出モジュール、被膜および治療プログラムから成り、各々の構成要素について、特に放出を停止させた時に速やかに血中濃度が低下する半減期の短い薬物が好ましく、投与部位の生体組織と反応しないおおいが好ましく、さらに、設定された期間において最良の薬物濃度を維持する治療プログラムを有するのが好ましい。薬物放出モジュールは基本的に薬物貯蔵庫、放出制御部、エネルギー源および放出孔または放出表面を有している。これら基本的構成要素は全て揃っている必要はなく、適宜追加あるいは削除等を行い、最良の形態を選択することができる。 The components of DDS basically consist of a drug, a drug release module, a coating, and a treatment program, and for each component, a drug with a short half-life in which the blood concentration decreases rapidly when release is stopped is preferred. It is preferable to have a sheath that does not react with the biological tissue at the administration site, and it is preferable to have a treatment program that maintains the best drug concentration for a set period of time. The drug release module basically comprises a drug reservoir, a release control, an energy source and a release hole or release surface. It is not necessary to have all these basic components, and the best mode can be selected by adding or deleting as appropriate.
ＤＤＳに使用できる材料としては、高分子、シクロデキストリン誘導体、レシチン等がある。高分子には不溶性高分子（シリコーン、エチレン・酢酸ビニル共重合体、エチレン・ビニルアルコール共重合体、エチルセルロース、セルロースアセテート等）、水溶性高分子およびヒドロキシルゲル形成高分子（ポリアクリルアミド、ポリヒドロキシエチルメタクリレート架橋体、ポリアクリル架橋体、ポリビニルアルコール、ポリエチレンオキシド、水溶性セルロース誘導体、架橋ポロキサマー、キチン、キトサン等）、徐溶解性高分子（エチルセルロース、メチルビニルエーテル・無水マレイン酸共重合体の部分エステル等）、胃溶性高分子（ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、カルメロースナトリウム、マクロゴール、ポリビニルピロリドン、メタアクリル酸ジメチルアミノエチル・メタアクリル酸メチルコポリマー等）、腸溶性高分子（ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート、酢酸フタルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテートサクシネート、カルボキシメチルエチルセルロース、アクリル酸系ポリマー等）、生分解性高分子（熱凝固または架橋アルブミン、架橋ゼラチン、コラーゲン、フィブリン、ポリシアノアクリレート、ポリグリコール酸、ポリ乳酸、ポリβヒドロキシ酢酸、ポリカプロラクトン等）があり、剤型によって適宜選択することができる。 Materials that can be used for DDS include polymers, cyclodextrin derivatives, lecithin and the like. Insoluble polymers (silicone, ethylene / vinyl acetate copolymer, ethylene / vinyl alcohol copolymer, ethyl cellulose, cellulose acetate, etc.), water-soluble polymers and hydroxyl gel-forming polymers (polyacrylamide, polyhydroxyethyl) Methacrylate cross-linked product, polyacrylic cross-linked product, polyvinyl alcohol, polyethylene oxide, water-soluble cellulose derivative, cross-linked poloxamer, chitin, chitosan, etc.), slow-dissolving polymer (ethyl cellulose, methyl vinyl ether / maleic anhydride copolymer partial ester, etc.) ), Gastric polymer (hydroxypropylmethylcellulose, hydroxypropylcellulose, carmellose sodium, macrogol, polyvinylpyrrolidone, dimethylaminoethyl methacrylate, acrylic acid Acid methyl copolymers), enteric polymers (hydroxypropylmethylcellulose phthalate, phthalcellulose acetate, hydroxypropylmethylcellulose acetate succinate, carboxymethylethylcellulose, acrylic polymers, etc.), biodegradable polymers (thermally coagulated or cross-linked albumin, Cross-linked gelatin, collagen, fibrin, polycyanoacrylate, polyglycolic acid, polylactic acid, polyβhydroxyacetic acid, polycaprolactone, etc.) and can be appropriately selected depending on the dosage form.
特に、シリコーン、エチレン・酢酸ビニル共重合体、エチレン−ビニルアルコール共重合体、メチルビニルエーテル・無水マレインサン共重合体の部分エステルは薬物の放出制御に使用でき、セルロースアセテートは浸透圧ポンプの材料として使用でき、エチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、メチルセルロースは徐放性製剤の膜素材として使用でき、ポリアクリル架橋体は口腔粘膜あるいは眼粘膜付着剤として使用できる。
また、製剤中にはその剤形（経口投与剤、注射剤、座剤等の公知の剤形）に応じて、溶剤、賦形剤、コーティング剤、基剤、結合剤、滑沢剤、崩壊剤、溶解補助剤、懸濁化剤、粘稠剤、乳化剤、安定剤、緩衝剤、等張化剤、無痛化剤、保存剤、矯味剤、芳香剤、着色剤等の添加剤を加えて製造することができる。
In particular, partial esters of silicone, ethylene / vinyl acetate copolymer, ethylene-vinyl alcohol copolymer, methyl vinyl ether / maleic anhydride male copolymer can be used for drug release control, and cellulose acetate is used as an osmotic pump material. Ethylcellulose, hydroxypropylmethylcellulose, hydroxypropylcellulose, and methylcellulose can be used as membrane materials for sustained-release preparations, and polyacrylic crosslinked products can be used as oral mucosa or ocular mucosa adhesives.
In addition, depending on the dosage form (known dosage forms such as orally administered drugs, injections, suppositories, etc.) in the formulation, solvents, excipients, coating agents, bases, binders, lubricants, disintegration Additives such as agents, solubilizers, suspending agents, thickeners, emulsifiers, stabilizers, buffering agents, tonicity agents, soothing agents, preservatives, flavoring agents, fragrances, coloring agents, etc. Can be manufactured.
これら各添加剤について、それぞれ具体例を挙げて例示するが、これらに特に限定されるものではない。
溶剤：精製水、注射用水、生理食塩水、ラッカセイ油、エタノール、グリセリン、
賦形剤：デンプン類、乳糖、ブドウ糖、白糖、結晶セルロース、硫酸カルシウム、炭酸カルシウム、タルク、酸化チタン、トレハロース、キシリトール、
コーティング剤：白糖、ゼラチン、酢酸フタル酸セルロースおよび上記記載した高分子、
基剤：ワセリン、植物油、マクロゴール、水中油型乳剤性基剤、油中水型乳剤性基剤、
結合剤：デンプンおよびその誘導体、セルロースおよびその誘導体、ゼラチン、アルギン酸ナトリウム、トラガント、アラビアゴム等の天然高分子化合物、ポリビニルピロリドン等の合成高分子化合物、デキストリン、ヒドロキシプロピルスターチ、
滑沢剤：ステアリン酸およびその塩類、タルク、ワックス類、コムギデンプン、マクロゴール、水素添加植物油、ショ糖脂肪酸エステル、ポリエチレングリコール、
崩壊剤：デンプンおよびその誘導体、寒天、ゼラチン末、炭酸水素ナトリウム、セルロースおよびその誘導体、カルメロースカルシウム、ヒドロキシプロピルスターチ、カルボキシメチルセルロースおよびその塩類ならびにその架橋体、低置換型ヒドロキシプロピルセルロース、
Each of these additives is exemplified with specific examples, but is not particularly limited thereto.
Solvent: Purified water, water for injection, physiological saline, peanut oil, ethanol, glycerin,
Excipients: Starch, lactose, glucose, sucrose, crystalline cellulose, calcium sulfate, calcium carbonate, talc, titanium oxide, trehalose, xylitol,
Coating agents: sucrose, gelatin, cellulose acetate phthalate and the polymers described above,
Base: Vaseline, vegetable oil, macrogol, oil-in-water emulsion base, water-in-oil emulsion base,
Binders: starch and derivatives thereof, cellulose and derivatives thereof, natural polymer compounds such as gelatin, sodium alginate, tragacanth and gum arabic, synthetic polymer compounds such as polyvinylpyrrolidone, dextrin, hydroxypropyl starch,
Lubricant: stearic acid and its salts, talc, waxes, wheat starch, macrogol, hydrogenated vegetable oil, sucrose fatty acid ester, polyethylene glycol,
Disintegrants: starch and derivatives thereof, agar, gelatin powder, sodium bicarbonate, cellulose and derivatives thereof, carmellose calcium, hydroxypropyl starch, carboxymethylcellulose and salts thereof and cross-linked products thereof, low-substituted hydroxypropylcellulose,
溶解補助剤：シクロデキストリン、エタノール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、
懸濁化剤：アラビアゴム、トラガント、アルギン酸ナトリウム、モノステアリン酸アルミニウム、クエン酸、各種界面活性剤、
粘稠剤：カルメロースナトリウム、ポリビニルピロリドン、メチルセルロース、ホドロキシプロピルメチルセルロース、ポリビニルアルコール、トラガント、アラビアゴム、アルギン酸ナトリウム、
乳化剤：アラビアゴム、コレステロール、トラガント、メチルセルロース、各種界面活性剤、レシチン、
安定剤：亜硫酸水素ナトリウム、アスコルビン酸、トコフェロール、キレート剤、不活性ガス、還元性物質、
緩衝剤：リン酸水素ナトリウム、酢酸ナトリウム、ホウ酸、
等張化剤：塩化ナトリウム、ブドウ糖、
無痛化剤：塩酸プロカイン、リドカイン、ベンジルアルコール、
保存剤：安息香酸およびその塩類、パラオキシ安息香酸エステル類、クロロブタノール、逆性石けん、ベンジルアルコール、フェノール、チロメサール、
矯味剤：白糖、サッカリン、カンゾウエキス、ソルビトール、キシリトール、グリセリン、
芳香剤：トウヒチンキ、ローズ油、
着色剤：水溶性食用色素、レーキ色素。
Solubilizer: cyclodextrin, ethanol, propylene glycol, polyethylene glycol,
Suspending agent: gum arabic, tragacanth, sodium alginate, aluminum monostearate, citric acid, various surfactants,
Thickener: Carmellose sodium, polyvinylpyrrolidone, methylcellulose, hydroxypropylmethylcellulose, polyvinyl alcohol, tragacanth, gum arabic, sodium alginate,
Emulsifier: Arabic gum, cholesterol, tragacanth, methylcellulose, various surfactants, lecithin,
Stabilizer: sodium bisulfite, ascorbic acid, tocopherol, chelating agent, inert gas, reducing substance,
Buffer: sodium hydrogen phosphate, sodium acetate, boric acid,
Tonicity agents: sodium chloride, glucose,
Soothing agents: Procaine hydrochloride, lidocaine, benzyl alcohol,
Preservatives: benzoic acid and its salts, paraoxybenzoic acid esters, chlorobutanol, reverse soap, benzyl alcohol, phenol, thimerosal,
Flavoring agents: sucrose, saccharin, licorice extract, sorbitol, xylitol, glycerin,
Air freshener: Spruce tincture, rose oil,
Colorant: Water-soluble food color, lake color.
上記したように、医薬品を徐放化製剤、腸溶性製剤または薬物放出制御製剤等のＤＤＳ製剤化することにより、薬物の有効血中濃度の持続化、バイオアベイラビリティーの向上等の効果が期待できる
製剤中には、上記以外の添加物として通常の組成物に使用されている成分を用いることができ、これらの成分の添加量は、本発明の効果を妨げない範囲で通常量とすることができる。
As described above, by making pharmaceutical products into DDS preparations such as sustained release preparations, enteric preparations or drug release control preparations, effects such as sustained effective drug concentration in the blood and improved bioavailability can be expected. In the preparation, components that are used in normal compositions can be used as additives other than those described above, and the amount of these components to be added should be a normal amount within a range that does not interfere with the effects of the present invention. it can.
つぎに、実施例を挙げて本発明をさらに詳しく説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。 Next, the present invention will be described in more detail with reference to examples, but the present invention is not limited thereto.
１．細胞培養
神経細胞は、グルコース ４.５ｇ／Ｌ、ペニシリン−ストレプトマイシン５０ 単位／ｍＬ、１０％ ＦＣＳ、アミノプテリン １μＭ、ヒポキサンチン ０.１ｍＭ、チミジン １６μＭを含むダルベッコ変法イーグル培地にて３７℃、５％ＣＯ２下培養した。
1. Cell culture neurons were cultured at 37 ° C. in Dulbecco's modified Eagle medium containing glucose 4.5 g / L, penicillin-
２．神経突起伸長を指標とした神経分化促進作用
上記条件で神経細胞ＮＧ１０８-１５を培養し、実験当日ＦＣＳ濃度を１％にした培地に交換した。培地交換３時間後にＮａＨＳあるいはジブチリルｃＡＭＰを添加し、その１６時間後にランダムに視野を選び視野ごとに全細胞数に対して細胞の直径より長い樹状突起を持つ細胞数の割合をもとめた。結果を図１および図２に示す。図２は、神経細胞の神経突起伸長を促すことが知られるジブチリルｃＡＭＰと同様に、ＮａＨＳ添加により、神経突起の伸長が用量依存的に促進されたことを示す。 ＊Ｐ＜０.０５、＊＊Ｐ＜０.０１（１％ＦＣＳ存在下のビヒクル（Ｈ２Ｏ）に対する）。
2. Nerve differentiation promoting action using neurite outgrowth as an index Neuron NG108-15 was cultured under the above conditions, and the medium was replaced with a medium having an FCS concentration of 1% on the day of the experiment. NaHS or dibutyryl cAMP was added 3 hours after the medium was changed, and 16 hours later, the field was randomly selected, and the ratio of the number of cells having dendrites longer than the cell diameter to the total number of cells was determined for each field. The results are shown in FIG. 1 and FIG. FIG. 2 shows that the addition of NaHS promoted neurite outgrowth in a dose-dependent manner, similar to dibutyryl cAMP known to promote neurite outgrowth of neurons. * P <0.05, ** P <0.01 (relative to vehicle (H 2 O) in the presence of 1% FCS).
３．電気生理学的手法（Whole-cell patch clamp法）を指標とした神経分化促進作用
ポリ−Ｌ−オルニチンコーティングした３５ｍｍ皿に細胞を １ dishあたり１００００個撒き、１〜３日培養した。培養後、培地を細胞外溶液 (９７ｍＭ Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン（ＮＭＤＧ）、１０ｍＭ ＢａＣｌ２、１０ｍＭ ＨＥＰＥＳ、４０ｍＭテトラエチルアンモニウム(ＴＥＡ)−Ｃｌ、５.６ｍＭグルコース(ｐＨ７.４))に交換し、下記の条件でランプパルスあるいはステップパルス刺激を行い、カルシウムチャネル電位を測定してＴタイプのカルシウムチャネルおよびＨＶＡ（Ｌ、Ｎ、Ｐ／Ｑ、Ｒ−タイプのカルシウムチャネル）の発現について検討した。なお、ランプおよびステップパルスの条件は、下記のとおり。
・ランプパルス：保持電位を−９０ｍＶとし、１０００ｍｓの三角波で−１２０から７０ｍＶで刺激した。
・ステップパルス：保持電位を−９０ｍＶとし、２００ｍｓの長さで電気刺激を与えた。結果を図３〜７に示す。それらは、電機生理学的指標からＮａＨＳが、神経突起伸長を促すことを示す。
3. Nerve differentiation promoting action using an electrophysiological technique (Whole-cell patch clamp method) as an index. Cells were plated on a 35 mm dish coated with poly-L-ornithine and cultured for 1 to 3 days. After culturing, the medium was replaced with extracellular solution (97 mM N-methyl -D- glucamine (NMDG), 10mM BaCl 2, 10mM HEPES, 40mM tetraethylammonium (TEA) -Cl, 5.6 mM glucose (pH 7.4)) Lamp pulse or step pulse stimulation was performed under the following conditions, and the calcium channel potential was measured to examine the expression of T-type calcium channels and HVA (L, N, P / Q, R-type calcium channels). The conditions for the ramp and step pulse are as follows.
-Ramp pulse: The holding potential was -90 mV, and stimulation was performed at -120 to 70 mV with a triangular wave of 1000 ms.
Step pulse: The holding potential was -90 mV, and electrical stimulation was applied for a length of 200 ms. The results are shown in FIGS. They show that NaHS promotes neurite outgrowth from electrophysiological indicators.
細胞分化促進剤の調製
１）錠剤
以下の処方に従い、常法により錠剤を調製した。
結晶セルロース １００ｍｇ
ＮａＨＳ １００ｍｇ
低置換度ヒドロキシプロピルセルロース １００ｍｇ
ヒドロキシプロピルメチルセルロース ２０ｍｇ
ステアリン酸マグネシウム ５ｍｇ
乳糖 適量
合計 ４００ｍｇ
Preparation of Cell Differentiation Promoter 1) Tablet According to the following formulation, a tablet was prepared by a conventional method.
Crystalline cellulose 100mg
NaHS 100mg
Low substituted hydroxypropylcellulose 100mg
Hydroxypropyl methylcellulose 20mg
Magnesium stearate 5mg
Lactose appropriate amount
400mg total
２）カプセル剤
以下の処方に従い、常法によりカプセル剤を調製した。
ＮａＨＳ １００ｍｇ
低置換度ヒドロキシプロピルセルロース １００ｍｇ
架橋型カルボキシメチルセルロースナトリウム １０ｍｇ
ステアリン酸マグネシウム ５ｍｇ
乳糖 ８５ｍｇ
合計 ３００ｍｇ
2) Capsule A capsule was prepared by a conventional method according to the following formulation.
NaHS 100mg
Low substituted hydroxypropylcellulose 100mg
Cross-linked sodium carboxymethylcellulose 10mg
Magnesium stearate 5mg
Lactose 85mg
300mg total
３）注射剤
以下の処方に従い、常法により注射剤を調製した。
ブドウ糖 １０ｍｇ
ＮａＨＳ １００ｍｇ
注射用精製水 適量
合計 １００ｍＬ
上記１）〜３）で得られた剤は、いずれも本発明の神経細胞用の細胞分化促進剤として使用できる。
3) Injection The injection was prepared by a conventional method according to the following formulation.
Glucose 10mg
NaHS 100mg
Purified water for injection
Total 100mL
Any of the agents obtained in the above 1) to 3) can be used as a cell differentiation promoting agent for nerve cells of the present invention.
Claims (9)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2006285195A JP2008100948A (en) | 2006-10-19 | 2006-10-19 | Nerve cell differentiation enhancer containing hydrogen sulfide and/or hydrogen sulfide salt and its method |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2006285195A JP2008100948A (en) | 2006-10-19 | 2006-10-19 | Nerve cell differentiation enhancer containing hydrogen sulfide and/or hydrogen sulfide salt and its method |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2008100948A true JP2008100948A (en) | 2008-05-01 |
Family
ID=39435561
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2006285195A Pending JP2008100948A (en) | 2006-10-19 | 2006-10-19 | Nerve cell differentiation enhancer containing hydrogen sulfide and/or hydrogen sulfide salt and its method |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2008100948A (en) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US8884225B2 (en) | 2011-10-28 | 2014-11-11 | Ebara Corporation | Sample observing device and sample observing method |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2006084369A1 (en) * | 2005-02-09 | 2006-08-17 | Neuromed Pharmaceuticals Ltd. | Diamine calcium channel blockers |
-
2006
- 2006-10-19 JP JP2006285195A patent/JP2008100948A/en active Pending
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2006084369A1 (en) * | 2005-02-09 | 2006-08-17 | Neuromed Pharmaceuticals Ltd. | Diamine calcium channel blockers |
Non-Patent Citations (4)
| Title |
|---|
| JPN6012030387; 長澤景太他: '内因性ガス状情報伝達物質Ｈ２Ｓは未分化ＮＧ１０８-１５細胞においてＴ型カルシウムチャネルの感受性を増大させる' 日本薬理学雑誌 Ｖｏｌ．１２８， Ｎｏ．２, 20060801, ｐ．１３Ｐ * |
| JPN6012030390; 長澤景太他: '内因性ガス状情報伝達物質Ｈ２ＳによるＴ型カルシウムチャネルの感受性増大と痛覚過敏の発現' Ｐａｉｎ Ｒｅｓ Ｖｏｌ．２１， Ｎｏ．２, 20060714, ｐ．７４ * |
| JPN6012030392; ＭＡＲＩＯＴ，Ｐ． ｅｔ ａｌ: 'Ｏｖｅｒｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ａｎ ａｌｐｈａ １Ｈ （Ｃａｖ３．２） Ｔ-ｔｙｐｅ ｃａｌｃｉｕｍ ｃｈａｎｎｅｌ ｄｕｒｉｎｇ ｎｅｕｒｏｅｎｄｏｃｒｉｎｅ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ' Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ Ｖｏｌ．２７７， Ｎｏ．１３, 2002, ｐ．１０８２４-１０８３３ * |
| JPN7012002236; 分子細胞生物学辞典 第１版, 19970310, ｐ．３３５ * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US8884225B2 (en) | 2011-10-28 | 2014-11-11 | Ebara Corporation | Sample observing device and sample observing method |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Dienel et al. | Glucose and lactate metabolism during brain activation | |
| Zangen et al. | Association between depressive behavior and absence of serotonin–dopamine interaction in the nucleus accumbens | |
| CN104662007B (en) | Cystathionine gamma lyase (CSE) inhibitor | |
| ES2590259T3 (en) | Compounds and procedures for the treatment of seizures and paroxysmal disorders | |
| Shay et al. | Alpha-lipoic acid as a dietary supplement: molecular mechanisms and therapeutic potential | |
| US8324278B2 (en) | Amino acid based compositions for the treatment of pathological conditions distinguished by insufficient mitochondrial function | |
| US20050107338A1 (en) | Nutritional supplement enhancing mitochondrial function | |
| ES2690061T3 (en) | Compositions to treat Parkinson's disease | |
| US20140241990A1 (en) | Methods of using adenosine a1 receptor activation for treating depression | |
| JP2003526622A5 (en) | ||
| JP2019524856A (en) | Nicotinamide riboside and pterostilbene composition and method of treating neurodegenerative disorders | |
| Trulson | Dietary tryptophan does not alter the function of brain serotonin neurons | |
| Rosenfeldt et al. | Coenzyme Q_ {10} improves the tolerance of the senescent myocardium to aerobic and ischemic stress: studies in rats and in human atrial tissue | |
| Nagy et al. | Kainate postconditioning restores LTP in ischemic hippocampal CA1: onset-dependent second pathophysiological stress | |
| CN105579575A (en) | Compositions and methods for treating metabolic disorders | |
| NO20092662L (en) | Extended release composition and process for producing the same | |
| Woods et al. | Exogenous tyrosine potentiates the methylphenidate-induced increase in extracellular dopamine in the nucleus accumbens: a microdialysis study | |
| AU2020203126A1 (en) | Pharmaceutical solution comprising dopamine for use in treating Parkinson's disease | |
| JP2008100948A (en) | Nerve cell differentiation enhancer containing hydrogen sulfide and/or hydrogen sulfide salt and its method | |
| US9439916B2 (en) | Composition for decelerating the aging in the organism and for extending the life time thereof and the use of said composition | |
| JP2007532673A (en) | Supplements containing water-soluble extracts of carotenoids, nicotinamide, zinc, scallop species and methods of using the same | |
| Shahidani et al. | Lesion of medial prefrontal cortex reduces morphine-induced extracellular dopamine level in the ventral tegmental area: a microdialysis study in rats | |
| Ndlovu et al. | Amelioration of L-Dopa-associated dyskinesias with triterpenoic acid in a Parkinsonian rat model | |
| JP2007112735A (en) | Analgesic composition | |
| EP1897549B1 (en) | Radical scavenger and active oxygen eliminating agent |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A621 | Written request for application examination |
Effective date: 20090908 Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 |
|
| A521 | Written amendment |
Effective date: 20090908 Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821 |
|
| A521 | Written amendment |
Effective date: 20091117 Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 |
|
| RD04 | Notification of resignation of power of attorney |
Effective date: 20110927 Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7424 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Effective date: 20120612 Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 |
|
| A521 | Written amendment |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20120808 |
|
| RD03 | Notification of appointment of power of attorney |
Effective date: 20120808 Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7423 |
|
| A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20130115 |